Молекулярно-генетическая диагностика меланоцитарных поражений кожи с помощью реакции флуоресцентной in situ гибридизации тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.12, кандидат медицинских наук Сендерович, Анастасия Ильинична

• Сендерович, Анастасия Ильинична
• кандидат медицинских наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Сендерович, Анастасия Ильинична

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Проблемы при диагностике меланоцитарных новообразований человека

1.2. Генетическая гетерогенность меланомы.

1.3. Хромосомные аберрации при меланоме.

1.3. Роль гена р53 и его продукта в патогенезе меланомы.

1.5. Значение теломерного кризиса в патогенезе меланомы.

1.6. Дифференциальная диагностика между опухолями меланоцитарной и немеланоцитарной природы.

1.7. Генетическая диагностика меланоцитарных поражений человека.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

ГЛАВА 3. ДАННЫЕ СОБСТВЕННЫХ НАБЛЮДЕНИЙ.

3.1 Доброкачественные меланоцитарные новообразования.

3.2 Злокачественные меланоцитарные новообразования.

3.3. Меланоцитарные поражения, неясные в диагностическом плане.

3.4. Опухоли немеланоцитарной природы.

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Молекулярно-генетическая диагностика меланоцитарных поражений кожи с помощью реакции флуоресцентной in situ гибридизации»

Меланома кожи (МК) - одно из наиболее злокачественных новообразований человека. В современных эпидемиологических исследованиях четко выявлен стремительный рост заболеваемости МК; за 2002 год темп прироста заболеваемости увеличился с 3 до 7% [108]. Это самый« быстрый темп прироста, который был отмечен среди основных форм рака. Данная ситуация наблюдается в разных странах, в том числе в России, что позволяет рассматривать этот факт, как общую тенденцию в мире. В 2002г. приблизительно у 79 000 мужчин и 81 000 женщин по всему миру была констатирована меланома, из них 80% составляет население с белой кожей, проживающее в Северной Америке, Австралии, Новой Зеландии и Европе (преимущественно в северно-западной ее части). По данным мировой статистики, меланома по частоте заболеваемости занимает 16-е место среди мужчин и 15-е среди женщин и наиболее часто диагностируется в Австралии и Новой Зеландии (4-е место среди мужчин, 3-е - среди женщин), в Северной Америке (б-е место среди мужчин, 5-е - среди женщин) и Европе (16-е место среди мужчин, 8-е — среди женщин). В 2002 г. по всему миру от меланомы умерли около 22 000 мужчин и 19 000 женщин [108].

Одним из основных пусковых механизмов, лежащих в основе роста заболеваемости меланомой, считается произошедшее за последнее время по различным причинам увеличение суммарного времени воздействия ультрафиолетовой части спектра естественного солнечного света на кожу человека, не всегда подготовленную к этому генетически. Среди других факторов риска меланомы в настоящее время выделяют: фототип кожи I-II (склонность к солнечным ожогам кожи, рыжие волосы, голубые глаза, светлая кожа), общее число доброкачественных меланоцитарных невусов на коже индивидуума, присутствие лентиго и веснушек, наличие 3 атипичных меланоцитарных невусов и более, 3 эпизода тяжелых солнечных ожогов кожи в течение жизни и более, а также семейное накопление случаев меланомы у близких родственников [108].

Новые познания, в биологии опухоли приводят к разработке новых подходов к лечению меланомы: В настоящее время, проводятся крупные исследования по оценке возможностей генной* терапии, вакцинотерапии, антиангиогенной терапии, моноклональных антител. Это, в свою очередь, требует внедрения в повседневную практику современных методов* диагностики, меланомы кожи.

Один из них - метод флуоресцентной« in situ гибридизации (FISH), который в настоящее время является оптимальным методом визуализации нарушений генома. В основе FISH-метода лежит реакция гибридизации между искусственно созданным ДНК-зондом и комплементарной ему нуклеотидной последовательностью ядерной.ДНК.

Для»диагностики »меланоцитарных поражений кожи недавно предложено использовать новый' ДНК-зонд LSI RREB1/ LSI MYB/ LSI CCND1/ CEP6 (Abbott Molecular Inc, США), который с наибольшей чувствительностью- и специфичностью подчеркивает различия между доброкачественным, и злокачественным новообразованием. Гены, которые окрашены.флуорофором-в данномзонде играют важную роль в развитии меланомы.

Первый из них — RREB1 (Ras Responsive Element Binding Protein» 1) — расположен на коротком плече хромосомы 6. Белок RREB1 является транскрипционным фактором, который вовлечен' в RAS/RAF-опосредованную дифференцировку клеток.

Второй - это клеточный онкоген c-myb, расположенный на длинном плече хромосомы 6, является гомологом птичьего вирусного онкогена, вызывающего миелоидную лейкемию. Этот ген кодирует ядерный белок, вовлеченный в регуляцию транскрипции, и играет важную ролы в. пролиферации клеток.

И ген ССЫО!, расположенный на 11 хромосоме, кодирует циклин Э1, который в комплексе с циклинзависимыми киназами 4,6 (Сйк 4,6), регулирует переход из фазы 01 клеточного цикла в фазу 8.

Кроме генов при изготовлении флуоресцентного зонда флуорофором был окрашен альфа-сателлит ДНК, локализованный на центромере хромосомы, СЕР б (6р 11.1-я 11.1).

Для диагностики меланоцитарных поражений кожи Р18Н-метод используется впервые. С помощью него можно установить генетические повреждения, характерные для того или иного вида меланоцитарного новообразования. Это имеет большое значение, особенно при меланоцитарных поражениях, неясных в диагностическом плане и при проведении дифференциальной диагностики между меланомой и опухолями немеланоцитарной природы. Отработанная методика с успехом может применяться в качестве дополнения к основным подходам.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

Разработка уточняющего метода для первичной и дифференциальной диагностики меланоцитарных поражений кожи на молекулярно-генетическом уровне с помощью реакции флуоресцентной in situ гибридизации (FISH).

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

Для реализации поставленной цели были поставлены следующие задачи:

1. Дать качественную и количественную характеристику изменений в области генов RREB1 (6р25), MYB (6 q23), CCND1 ( llql3) с помощью реакции- флуоресцентной in situ гибридизации при доброкачественных меланоцитарных поражениях и меланоме кожи.

2. Оценить частоту и спектр генетических нарушений для тех случаев, которые изначально вызывали диагностические трудности у патоморфолога или классифицировались как диспластический невус, невус Шпиц, Рида, голубой невус.

3. Провести исследование изменений генов RREB1 (бр25), MYB (6q23), CCND1 (1 lql3) в опухолях кожи и мягких тканей немеланоцитарной природы для выявления возможности использовать особенности состояния этих генов для дифференциальной диагностики.

4. Сопоставить полученные данные в указанных группах с клиническим течением процесса и сформулировать возможные прогностические критерии.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

Работ по систематическому изучению меланоцитарных поражений кожи с помощью БШН-реакции на большом репрезентативном материале в литературе нет.

Показано, что при доброкачественных меланоцитарных поражениях кожи копийность генов ЛЯЕВ1, ССАЮ7 и МУВ меняется как в сторону увеличения, так и в сторону уменьшения. Однако диапазон этих изменений достаточно узок и никогда не достигает тех величин, которые характерны для злокачественных меланоцитарных опухолей кожи. Выявлена зависимость копийности генов от типа невуса. Во внутридермальном невусе генетических поломок наблюдается больше, чем в невусе с преимущественно эпидермальным компонентом. Кроме того, наблюдается прямая зависимость числа копий генов от глубины и уровня расположения невоидных клеток. По мере продвижения в дерму частота нарушений возрастает.

Систематизирован комплекс показателей, характерный для меланомы. Образец соответствует меланоме, если: среднее количество , копий гена ССЖ)7 на ядро >2,5; процент ядер с «ненормальным» количеством копий гена ЯЯЕВ1 (т.е. ядра с сигналами ЯЯЕВ1 более или менее 2) >63,0%; процент ядер с потерей копий гена МУВ относительно СЕРб >31,0%; среднее количество копий гена МУВ на ядро >2,5. Установлено, что генетические нарушения присутствуют как на ранней стадии формирования опухоли (фаза радиального роста), так и на более поздней (фаза вертикального роста). При этом степень выраженности этих нарушений не зависит от фазы развития опухоли. Помимо этого отмечено существование меланом с преобладающим типом нарушений: с ампли фикацией исследуемых генов, или с делецией. Также было установлено, что в наибольшей степени (в 65,0%) подвержен аберрациям ген 1№ЕВ1.

Показана определенная специфичность генетических аберраций для того или иного вида меланоцитарного поражения. Установлено, что нарушения в области гена ЯЯЕВ1 чаще всего встречаются при меланоме

65,0%), невусе Рида (28,6%) и диспластическом невусе (10,7%). Аберрации гена ССУШ7 с наибольшей частотой выявляются при диспластическом невусе (9,7%), изменение числа копий гена МУВ - при невусе Шпиц (20,0%).

Впервые изучен характер аберраций генов ЯЯЕВ1, ССИ01 и МУВ при опухолях немеланоцитарной природы. Показано, что данный тип нарушений не характерен для опухолей немеланоцитарной природы.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ

Разработана и внедрена методика, которая послужит для улучшения и уточнения диагноза. Данный метод позволит диагностировать меланому на ранних стадиях, что поможет дополнить прогностические критерии особенностями нарушения генов ККЕВ1, ССЖ)/ и МУВ. Также перспективным является использование указанных аберраций при дифференциальной диагностике между меланомой и опухолями немеланоцитарной природы.

Заключение диссертации по теме «Онкология», Сендерович, Анастасия Ильинична

выводы

1. Ген ЯЛЕВ! в наибольшей степени подвержен аберрациям при меланоме (в 65,0% случаев), невусе Рида (28,6%) и диспластическом невусе (10,7%). Копийность гена ЯЯЕВ1 влияния на' выживаемость пациента* не оказывает.

2. Поломки в области гена ССЫВ1 наиболее характерны для диспластического невуса (в 9,7% случаев). Длительная выживаемость пациента связана с увеличением числа копий ССИй1 (р<0,001).

3. При доброкачественных меланоцитарных новообразованиях чаще всего наблюдается нарушение копийности гена МУВ (71,7% поражения гена), однако этот параметр находится-ниже уровня значений, установленных для меланомы. В наибольшей степени ген МУВ подвержен, нарушениям при невусе Шпица (20,0%). В« результате ретроспективного анализа группы меланом установлено, что длительная выживаемость пациента связана^ с увеличением числа копий МУВ (р<0,001).

4. В группе доброкачественных меланоцитарных образований, значимых изменений, характерных для меланомы не обнаружено: Среднее количество гена ССИ01 на ядро < 2,5; среднее количество гена МУВ на ядро < 2,5; процент ядер с «ненормальным» количеством* гена ВЯЕВ1 < 63,0%; процент ядер с потерей гена МУВ относительно СЕРб < 31,0%. Установленные количественные нарушения? в геноме ниже пороговых величин.

5. В клетках простого голубого невуса установленные поломки генов ЯЯЕВ1, ССЖ>7 и МУВ ниже пороговых величин. В подгруппе клеточного голубого невуса, который иногда клинически протекает агрессивно, обнаружены генетические аберрации, характерные для меланомы.

6. В группе меланоцитарных поражений, неясных в диагностическом плане установлены генетические аберрации наиболее характерные для того или иного вида новообразования. Поломки в области генов RREB1 и CCND1 наиболее характерны для диспластического невуса, с невусом Шпиц чаще всего ассоциировано нарушение в области гена MYB, с невусом Рида - нарушение в области гена RREB1.

7. Среди злокачественных меланоцитарных поражений кожи суммарное нарушение копийности генов RREB1, CCND1 и MYB встречается в 92,5% случаев.

8. В опухолях немеланоцитарной природы в 80,0% случаев установленные количественные нарушения в геноме ниже пороговых величин. Среднее количество гена CCND1 на ядро < 2,5; среднее количество гена MYB на ядро < 2,5; процент ядер с «ненормальным» количеством гена RREB1 < 63,0%; процент ядер с потерей гена MYB относительно СЕР6 < 31,0%. Следовательно, оценку копийности генов RREB1, CCND1 и MYB с помощью реакции флуоресцентной in situ гибридизации можно использовать в качестве первичной дифференциальной диагностики между опухолями меланоцитарной и немеланоцитарной природы.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Сендерович, Анастасия Ильинична, 2010 год

1. Галил Оглы, Г.А. Дерматоонкология. / Г.А. Галил - Оглы, В.А. Молочкова, Ю.В. Сергеева. -М.: Медицина для всех, 2005. - 872 с.

2. Демидов, Л.В. Меланома кожи: стадирование, диагностика и лечение / J1.B. Демидов, Г.Ю. Харкевич // Русский Медицинский Журнал. 2003. -Т.11, №11 - С. 658-665.

3. Егоров, Е.Е. Роль теломеразы в канцерогенезе // Канцерогенез / Под ред. Д.Г. Заридзе. -М.Медицина, 2004. С. 179-191.

4. Копнин, Б.П. Опухолевые супрессоры и мутаторные гены // Канцерогенез / Под ред. Д.Г. Заридзе. М.:Медицина, 2004. - С. 125-156.

5. Лемехов, В.Г. Эпидемиология, факторы риска, скрининг меланомы кожи / В.Г. Лемехов // Практическая Онкология. 2001. -Т.4, №8 - С. 3-11.

6. Absence of р53 gene mutations in cutaneous melanoma / J. Lubbe et al. // J Invest Dermatol.- 1994. -Vol. 102, №5. -P. 819 821.

7. A cell cycle regulator potentially involved in genesis of many tumor types / A. Kamb et al. // Science. 1994. - Vol. 264, №5157. - P. 436 - 440.

8. Ackerman, A.B. A unifying concept of malignant melanoma: biologic aspects / A.B. Ackerman, K.M. David // Hum Pathol. 1986. - Vol. 17, №5. - P. 438 -440.

9. Agresti, A. An Introduction to Categorical Data Analysis. / A. Agresti Wiley, 2007.-P. 302.

10. Alterations of the CCND1 and HER 2/neu (ERBB2) proteins in esophageal and gastric cancers I L. Bizari et al. // Cancer Genet Cytogenet. — 2006. - Vol. 165, №1.-P. 41-50.

11. Alterations of the pl6INK4a/pl4ARF pathway in clear cell sarcoma / T. Takahira et al. // Cancer Sci. 2004. - Vol. 95, №8. - P. 651 - 655.

12. Altered expression and molecular abnormalities of cell cycle - regulatoryiproteins in rhabdomyosarcoma / Y. Takahashi et al. // Mod Pathol. 2004. - Vol. 17, №6.-P. 660-669.

13. Analysis of the pl6 gene, CDKN2, in* 17 Australian melanoma kindreds / E.A. Holland et al. // Oncogene. 1995. - Vol. 11, №11. - P. 2289 - 2294.

14. Atypical Spitz nevi/tumors: lack of consensus for diagnosis, discrimination from melanoma, and prediction'of outcome / R.L. Barnhill' et al. // Hum Pathol. -1999. Vol. 30, №5. - P. 513 - 520.

15. Bastian, B.C. Understanding the progression of melanocytic neoplasia4 using genomic analysis: from fields to cancer / B.C. Bastian // Oncogene. — 2003. Vol'. 22,№20.-P. 3081-3086.

16. Bauer, J: Distinguishing melanocytic nevi from melanoma by DNA copy number changes: comparative genomic hybridization as a research and diagnostic tool / J. Bauer, B.C. Bastian // Dermatol Ther. 2006. - Vol. 19, №1. - P. 40 - 49.

17. Benjamin, C.L. p53 and the pathogenesis of skin cancer. / C.L. Benjamin, H.N. Ananthaswamy // Toxicol Appl Pharmacol. 2007. - Vol. 224, №3. - P. 241 -248.

18. Benjamin, C.L., P53 protein and pathogenesis of melanoma and nonmelanoma skin cancer / C.L. Benjamin, V.O. Melnikova, H.N. Ananthaswamy // Adv Exp Med Biol. 2008. - № 624 - P. 265 - 282.

19. Box, N.F. The role of p53 in pigmentation, tanning and melanoma / N.F. Box, T. Terzian // Pigment Cell Melanoma Res. 2008. - Vol. 21, №5. - P. 525 - 533.

20. BRAF mutation and1 gene methylation frequencies of colorectal tumours with microsatellite instability increase markedly with patient age / B. Iacopetta et al. // Gut. 2006: - Vol". 55, №8. - P. 1213 - 1214.

21. Brocker, E.B. Nerve growth and expression of receptors for nerve growth factor in tumors of melanocyte origin / E.B. Brocker, H. Magiera, M. Herlyn // J Invest Dermatol. 1991. - Vol. 96, №5. - P. 662 - 665.

22. CCND1 and ZNF217 gene amplification is equally frequent in BRCA1 and BRCA2 associated and non BRCA breast cancer / P. Plevova et al. // Neoplasma. - 2010. - Vol. 57, №4. - P. 325 - 332.

23. Chromosomal gains and losses in primary cutaneous melanomas detected by comparative genomic hybridization / B.C. Bastian et al. // Cancer Res. 1998. -Vol. 58, №10. - P. 2170 - 2175.

24. Chromosomal gains and losses in uveal melanomas detected by comparative genomic hybridization / M.R. Speicher et al. // Cancer Res. 1994. - Vol. 54, №14.-P. 3817-3823.

25. Chromosomal localization of the hst oncogene and its co amplification with the int.2 oncogene in a human melanoma / J. Adelaide et al. // Oncogene. - 1988. -Vol. 2, №4.-P. 413-416.

26. Chromosome 10 allelic loss in malignant melanoma / K. Isshiki et al. // Genes Chromosomes Cancer. 1993. - Vol. 8, №3. - P. 178 - 184.

27. Chromosome 6p^ amplification and cancer progression / G.C. Santos et al. // J Clin Pathol. 2007. - Vol. 60, №1. - P. 1 - 7.

28. Clark, W.H. The biologic forms of malignant melanoma / W.H. Clark, D.E. Elder, M: Van Horn // Hum Pathol. 1986. - Vol. 17, №5. - P. 443 - 450.

29. Comparative genomic hybridization for molecular cytogenetic analysis of solid tumors / A. Kallioniemi et al. // Science. 1992. - Vol. 258, №5083. - P.818 -821.

30. Cortactin gene amplification and expression in breast cancer: a chromogenic in situ hybridisation and immunohistochemical study / K.J. Dedes et al. // Breast Cancer Res Treat. 2010. -Vol.124, №3. - P. 653-666.

31. Cowan, J.M. Cytogenetic analysis of melanocytes from premalignant nevi and melanomas / J.M.Cowan, R. Halaban, U. Francke // J Natl Cancer Inst. 1988'. -Vol. 80, №14. - P. 1159 - 1464.

32. Cutaneous clear cell sarcoma: a clinicopathologic, immunohistochemical, and molecular analysis of 12 cases emphasizing its distinction from dermal melanoma/ M. Hantschke et al. // Am J Surg Pathol. 2010. - Vol. 34, №3. - P. 216 - 222.

33. Cyclin D1 is a candidate oncogene in cutaneous melanoma / E.R. Sauter et al. // Cancer Res. 2002. - Vol. 62, №11. - P. 3200 - 3206.

34. Cytogenetics of 158 patients with regional or disseminated melanoma. Subset analysis of near diploid and simple karyotypes / F.H. Thompson et al. // Cancer Genet Cytogenet. - 1995. - Vol. 83, №2. - P. 93 - 104.

35. Deletion mapping of chromosome region 9p21 p22 surrounding the CDKN2 locus in melanoma / M. Ohta et al. // Int J Cancer. - 1996. - Voll 65, №6. - P. 762-767.

36. Determinants of BRAF mutations in primary melanomas / J.L. Maldonado et al. // J Natl Cancer Inst. 2003. - Vol. 95, №24. - P. 1878 - 1890.

37. Diagnosis of cutaneous melanocytic tumours by four colour fluorescence in situ hybridisation / A.L. Morey et al. // Pathology. - 2009. - Vol. 41, №4. - P. 383-387.

38. Differences in chromosomal aberrations between nodular and superficial spreading malignant melanoma detected by interphase cytogenetics / M. Poetsch et al. // Lab Invest. 1998. - Vol. 78, №7. - P. 883 - 888.

39. Direct visualization of the clonal progression of primary cutaneous melanoma: application of tissue microdissection and comparative genomic hybridization / R.N. Wiltshire et al. // Cancer Res. 1995. - Vol. 55, №18. - P. 3954 - 3957.

40. Distinct sets of genetic alterations in melanoma / J.A. Curtin et al. // N Engl J -Med. 2005. - Vol. 353, №20. - P. 2135 - 2147.

41. Distinguishing epithelioid blue nevus from blue nevus like cutaneous melanoma metastasis using fluorescence in situ hybridization / P. Pouryazdanparast et al. // Am J Surg Pathol. - 2009. - Vol. 33, №9. - P. 1396 -1400.

42. DNA damage signalling recruits RREB 1 to the p53 tumour suppressor promoter / H. Liu et al. // Biochem J. - 2009. - Vol. 422, №3. - P. 543 - 551.

43. Dracopoli, N.C. Loss of polymorphic restriction fragments in malignant melanoma: implications for tumor heterogeneity / N.C. Dracopoli, A.N. Houghton, L.J. Old // Proc Natl Acad Sci.U S A. 1985. - Vol. 82, №5. - P. 1470 - 1474.

44. Effect of cyclin D1 overexpression on drug sensitivity in a human fibrosarcoma cell line / D. Hochhauser et al. // J Natl Cancer Inst. 1996. - Vol. 88, №18.-P. 1269-1275.

45. Elder, D.E. Skin cancer. Melanoma and other specific nonmelanoma skin cancers / D.E. Elder // Cancer. 1995. - Vol. 75, №1. - P. 245 - 256.

46. Expression of cyclin D1 and Ki — 67 in squamous cell carcinoma of the penis / O. Papadopoulos et al. // Anticancer Res. 2007. - Vol. 27, №4. - P. 2167 -2174.

47. Expression of nma, a novel gene, inversely correlates with the metastatic potential of human melanoma cell lines and xenografts / W.G. Degen et al. // Int J Cancer. 1996. - Vol. 65, №4. - P. 460-465.

48. Expression of NM23 in human melanoma progression and metastasis / D.J. Easty et al. // Br J Cancer. 1996. - Vol. 74, №1. - P. 109 - 114.

49. Expression of the receptor for epidermal growth factor correlates with increased dosage of chromosome 7 in malignant melanoma / H. Koprowski et al. // Somat Cell Mol"Genet. 1985. - Vol. 11, №3. - P. 297 - 302.

50. Extra c myc oncogene copies in high risk cutaneous malignant melanoma and melanoma metastases / G.M. Kraehn et al. // Br J Cancer. - 2001. - Vol. 84, №1. -P. 72-79.

51. Farmer, E.R. Discordance in the histopathologic diagnosis of melanoma and melanocytic nevi between expert pathologists / E.R. Farmer, R.Gonin, M.P. Hanna // Hum Pathol. 1996. - Vol. 27, №6. - P. 528 -531.

52. Fluorescence in situ hybridization (FISH) as an ancillary diagnostic tool in the diagnosis of melanoma / P. Gerami et al. // Am J Surg Pathol. 2009. - Vol. 33, №8.-P. 1146-1156.

53. Fluorescence in situ hybridization as a tool for microstaging in malignant melanoma / M.D. Newman et al. H Mod Pathol. 2009. - Vol. 22, №8. - P: 989 -995.

54. Fluorescence in situ hybridization for distinguishing nevoid melanomas from mitotically active nevi / P. Gerami et al. // Am J Surg Pathol. 2009. - Vol. 33, №12.-P. 1783-1788.

55. Frequent homozygous deletion of cyclin — dependent kinase inhibitor 2 (MTS1, pi6) in superficial bladder cancer detected by fluorescence in situ hybridization / M. Balazs et al. // Genes Chromosomes Cancer. 1997. - Vol-. 19,№2.-P. 84-89.

56. Functional evidence of novel tumor suppressor genes for cutaneous malignant melanoma / C.N. Parris et al. // Cancer Res. 1999. - Vol. 59, №3. - P. 516 -520.

57. Gene amplifications characterize acral melanoma and permit the detection of occult tumor cells in the surrounding skin / B.C. Bastian et al. // Cancer Res. -2000.-Vol. 60, №7.-P. 1968-1973.

58. Genetic changes in neoplasms arising in congenital melanocytic nevi: differences between nodular proliferations and melanomas I B.C. Bastian et al. // Am J Pathol. 2002. - Vol. 161, №4. - P. 1163 - 1169.

59. Halpern, A.C. Genetic predisposition to skin cancer / A.C. Halpern, J.F. Altaian//CurrOpin Oncol.- 1999.-Vol. 11, №2.-P. 132-138.

60. Genetics, of melanoma / J.W. Fountain et al. // Cancer Surv. 1990. - Vol. 9, №4.-P. 645-671.,

61. Gonda, T.J. Estrogen and MYB in breast cancer: potential-for new« therapies / T.J. Gonda, P. Leo, R.G. Ramsay // Expert Opin Biol Ther. 2008. - Vol. 8, №6. -P. 713-717.

62. Harcombe, W.R. Compensatory evolution for a gene deletion is not limited to its immediate functional network / W.R. Harcombe, R. Springman, J.J. Bull // BMC Evol Biol. 2009. - Vol. 9, №106 - P. 1 - 11.

63. Hoang, M.P. Rhabdomyosarcoma arising in a congenital melanocytic nevus / M.P. Hoang, P. Sinkre, J. Albores-Saavedra // Am J Dermatopathol. 2002. - Vol. 24, №1.-P. 26-29.

64. Hocker, T. Ultraviolet radiation and melanoma: a systematic review and analysis of reported sequence variants I T. Hocker, H. Tsao // Hum Mutat. 2007. - Vol. 28, №6. - P. 578 - 588.

65. Homozygous loss of the pl5INK4B gene (and not the pl6INK4 gene) during tumor progression in a sporadic melanoma patient / J.M. Glendening et al. // Cancer Res. 1995.-Vol. 55, №23.-P. 5531 -5535.

66. Hussein, M.R. Genetic pathways to melanoma tumorigenesis / M.R. Hussein // J Clin Pathol. 2004. - Vol. 57, №8. - P. 797 - 801.

67. Identification and characterization of a novel melanoma tumor suppressor gene on human chromosome 6q21 / J.M. Fung et al. // Clin Cancer Res. 2009. - Vol. 15, №3.-P. 797-803.

68. Increased chromosome 20 copy number detected by fluorescence in situ hybridization (FISH) in malignant melanoma / J.H. Barks et al. // Genes Chromosomes Cancer. 1997. - Vol. 19, №4. - P. 278 - 285.

69. Intraparenchymal nevus cell aggregates in lymph nodes: a possible diagnostic pitfall with malignant melanoma and carcinoma / D.A. Biddle et al. // Am J Surg Pathol. 2003. - Vol. 27, №5. - P. 673 - 681.

70. Isolation and characterization of genes associated with chromosome — 6 mediated tumor suppression in human malignant melanoma / M.E. Ray et al. // Oncogene. 1996. - Vol. 12, №12. - P. 2527 - 2533.

71. Jackson, R. Malignant melanoma: a review of 75 malpractice cases / R. Jackson // Int J Dermatol. 1997. - Vol. 36, №7. - P. 497 - 498.

72. Loss of heterozygosity and homozygous deletions on 9p21 22 in melanoma / E.A. Holland et al. // Oncogene. - 1994. - Vol. 9, №5. - P. 1361 - 1365.

73. Loss of heterozygosity for 10q22 lOqter in malignant melanoma progression / R.A. Herbst et al. // Cancer Res. - 1994. - Vol. 54, №12. - P. 3111 - 3114.

74. Loss of heterozygosity for loci on the long arm of chromosome 6 in,human malignant melanoma / D. Millikin et al. // Cancer Res. 1991. - Vol. 51, №20. -P. 5449-5453.

75. Loss of the pl6INK4a and«pl5INK4b genes, as well as neighboring 9p21 markers, in sporadic melanoma / J.F. Flores et al. // Cancer Res. — 1996. Vol. 56, №21.-P. 5023-5032.

76. Malignant melanoma / A. Slominski et al. // Arch Pathol Lab Med. 2001. -Vol. 125, №10. - P. 1295 - 1306.

77. Melanoma in childhood: an EORTC MCG multicenter study on the clinico -pathological aspects / A. Spatz et al. // Int J Cancer. - 1996. - Vol. 68, №3. - P. 317-324.

78. Mertens, F. Isochromosomes in neoplasia / F. Mertens, B. Johansson, F. Mitelman // Genes Chromosomes Cancer. 1994. - Vol. 10, №4. - P. 221 - 230:

79. Molecular and immunohistochemical analyses of BCL2, KI 67, and cyclin Dl expression in synovial sarcoma / L. Krskova et al., // Cancer Genet Cytogenet. - 2009. - Vol. 193,№1.-P: 1-8.

80. Molecular classification of melanomas and nevi using gene expression microarray signatures and formalin fixed and paraffin - embedded tissue /S.S. Koh et al. // Mod Pathol. - 2009. - Vol. 22, №4. - P. 538 - 546.

81. Molecular cytogenetic analysis of Spitz nevi shows clear differences to melanoma / B.C. Bastian et al., // J Invest Dermatol. 1999. - Vol. 113, №6. - P. 1065- 1069.

82. Molecular pathology of malignant melanoma / A. Slominski et al. // Am J Clin Pathol. 1998. - Vol. 110, №6. - P. 788 - 794.

83. Morphological, biochemical, and molecular biological characterization of a rat rhabdomyosarcoma cell line during differentiation induction in vitro / C.D. Gerharz et al. // Environ Health Perspect. 1990. - № 88. - P. 187 - 191.

84. Mutation and expression of the p53 gene in human malignant melanoma / A.P. Albino et al. // Melanoma Res. 1994. - Vol. 4, №1. - P. 35 - 45.

85. Mutation and expression of TP53 in malignant melanomas / J. Weiss et al. // Recent Results Cancer Res. 1995. - № 139. - P. 137 - 154.

86. MYB oncogene amplification in hereditary BRCA1 breast cancer / P. Kauraniemi et al. // Cancer Res. 2000. - Vol. 60, №19. - P. 5323 - 5328.

87. Naylor, M.F., Involvement of the pl6INK4 (CDKN2) gene in familial melanoma / M.F. Naylor, M.A. Everett // Melanoma Res. 1996. - Vol. 6, №2. -P. 139-145.

88. Novel germline pi6 mutation in familial malignant melanoma in southern Sweden / A. Borg et al. // Cancer Res. 1996. - Vol. 56, №11.- P. 2497 - 2500.

89. Papp, T., Lack of p53 mutations and loss of heterozygosity in non cultured human melanocytic lesions / T. Papp, M. Jafari, D. Schiffmann // J Cancer Res Clin Oncol. - 1996. - Vol. 122, №9. - P. 541 - 548.

90. Parmiter, A.H. The cytogenetics of human malignant melanoma and premalignant lesions / A.H. Parmiter, P.C. Nowell // Cancer Treat Res. 1988. -№ 43 - P. 47-61.

91. Primary giant clear cell sarcoma (soft tissue malignant« melanoma) of the sternum / G. Rocco et al. // Ann Thorac Surg. 2009. - Vol. 87, №6. - P. 1927 -1928.

92. Prognostic significance of p53 over expression in thin melanomas / L.E. Sparrow et al. // Melanoma Res. - 1995. - Vol. 5, №6. - P. 387 - 392.

93. Prognostic implications of p53 overexpression in cutaneous melanoma from sun exposed and nonexposed sites / R. Essner et al. // Cancer. - 1998. - Vol. 82,№2.-P. 309-316.

94. Progressive increase in telomerase activity from benign melanocytic conditions to malignant melanoma / R.D. Ramirez et al. // Neoplasia. 1999. — Vol. 1, №1.- P. 42-49.

95. Quality assessment by expert opinion in melanoma pathology: experience of the pathology panel of the Dutch Melanoma Working Party / K.C. Veenhuizen et al. // J Pathol. 1997. - Vol. 182, №3. - P. 266 - 272.

96. Rates of pi 6 (MTS1) mutations in primary tumors with 9p loss / P. Cairns et al. // Science. 1994. - Vol. 265, №5170. -P. 415-417.

97. Relevance of vertical growth pattern in thin level II cutaneous superficial spreading melanomas / M. Lefevre et al. // Am J Surg Pathol. 2003. - Vol; 27, №6.-P. 717-724.

98. Robertson, G., A malignant melanoma tumor suppressor on human chromosome 11. / G. Robertson, A. Coleman, T.G. Lugo // Cancer Res. 1996. -Vol. 56, №19. - P. 4487 - 4492.

99. Robertson, G.P. Mechanisms of human melanoma cell; growth and» tumor suppression by chromosome 6 / G.P. Robertson, A.B. Coleman, T.G. Lugo // Cancer Res. 1996.- Vol. 56, №7. - P. 1635 - 1641.

100. Sarasin, A. Melanocytic Tumors / A. Sarasin // Pathology and Genetic of Skin Tumors /P.E. LeBoit, G. Burg, D. Weedon,. A. Sarasin (eds.).-Lyon: World Health Organization^ 2006.-P. 49-65.

101. Sauter, E.R. Molecular biology of human melanoma development and progression / E.R. Sauter, M. Herlyn // Mol Carcinog. 1998. - Vol. 23, №3. - P. 132-143.

102. Significant increase of colonic mutated crypts correlates with age in sporadic cancer and; diverticulosis cases, with higher frequency in the left than right -side colorectum / I. Okayasu et al. // Cancer Sci. - 2006. - Vol. 97, №5. - P. 362 -367. ;

103. Simple tandem repeat allelic deletions confirm the preferential loss of distal chromosome 6q in melanoma / G.J. Walker et al. // Int J Cancer. 1994. - Vol. 58, №2. - P. 203 - 206.

104. Sparrow, L.E. Differential expression of epidermal growth factor receptor in melanocytic tumours demonstrated by immunohistochemistry and mRNA in situ hybridization / L.E. Sparrow, P.J. Heenan // Australas J Dermatol. 1999. - Vol. 40, №1.-P. 19 -24.

105. Su, Y. A. Genetics of Cutaneous Malignant Melanoma / Y. A. Su; J.M. Trent // Cancer Control. 1995. - Vol. 2, №5 - P. 392 - 397.

106. The expression of C myb in human metastatic melanoma cell lines and specimens / M.J. Walker et al. // Anticancer Res. - 1998. - Vol. 18, №2. - P. 1129- 1135.

107. The pathogenesis of melanoma induced by ultraviolet radiation / B.A. Gilchrest et al. // N Engl J Med. 1999. - Vol. 340, №17. - P. 1341 - 1348.

108. Tissue array for Tp53, C myc, CCND1 gene over - expression in different tumors / G.Y. Liu et al. // World J Gastroenterol. - 2008. - Vol. 14, №47. - P. 7199-7207.

109. Troxel, D.B. Problem areas in pathology practice. Uncovered by a review of malpractice claims / D.B. Troxel, J.D. Sabella // Am J Surg Pathol. 1994. - Vol. 18, №8.-P. 821 -831.

110. Tumorigenicity in human melanoma cell lines controlled by introduction of human chromosome 6 / J.M. Trent et al. // Science. 1990. - Vol. 247, №4942. -P. 568-571.

111. Use of fluorescence in situ hybridization (FISH) to distinguish intranodal nevus from metastatic melanoma / S.R. Dalton et al. // Am J Surg Pathol. 2010. -Vol. 34, №2.-P. 231-237.