Молекулярно-генетическая и биохимическая характеристики наследственного гемохроматоза 1 типа у детей тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.02.07, кандидат биологических наук Аверьянова, Наталья Сергеевна

• Аверьянова, Наталья Сергеевна
• кандидат биологических наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Аверьянова, Наталья Сергеевна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ:.

1.1 Определение и классификация гемохроматозов.

1.2 Молекулярные механизмы обмена железа и их регуляция.

1.3 Клиническая характеристика НГХ 1 типа.

1.4 Биохимические показатели обмена железа в диагностике НГХ.

1.5 Молекулярно-генетическая характеристика НГХ 1 типа.

1.5.1 Спектр мутаций гена ЯЕЕ и их частоты.

Г.5.2 Клиническое значение мутаций С282У, НбЗО и 865С.

1.5.3.Исследование мутаций гена НРЕ у детей.

1.5.4 Причины ранней манифестации;НГХЛтипа.

1.5.5 Доклиническая диагностика НГХ 1типа.

ГЛАВА 2 . МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1 Материалы исследования.39 °

2.2 Методы исследования.л.40?

2.2.1 Методы определения показателей обмена железа.40.

2.2.2 Молекулярно-генетические методы.4,1;

2.2.3 Статистические методы.51'

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ОБСУЖДЕНИЕ.

ЗЛ Характеристика исследуемой выборки пациентов.

3.1 Л Группа пациентов с БППЖ.

3.1.2 Контрольная группа пациентов.

311.3 Группа пациентов с

3.2 Результаты молекулярно-генетических исследований мутаций С282У, Н63Б и Б65С в гене НРЕ.

3.2.1 Распределение частот генотипов по мутациям С282У, НбЗО и

Б65С гена в группах БППЖ, НЗ и контрольной!.

3:2.2 Распределение частот аллелей по мутациям: С282У, НбЗБ и Б65С гена НЕЕ в группах БППЖ, НЗ и контрольной.

3.3 Гематологические и биохимические показатели обмена железа у пациентов с разным генотипом по НЕЕ.

3.3.1 Группа БППЖ.

3.3.2 Группы контрольная и НЗ.

3.4 Клинические проявления СПЖ у детей с разным генотипом по НЕЕ.

3.4.1 Поражение гепатобилиарного тракта.

3.4.2 Заболевания желудочно-кишечного тракта.

3.4.3 Поражение сердечно-сосудистой системы.

3.4.4 Нарушение пигментация кожи.

3.5 Поиск мутации У250Х в гене Тг/2.

3.6 Поиск мутаций в генах НЕЕ, НК/, НАМР методом секвенирования.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Молекулярно-генетическая и биохимическая характеристики наследственного гемохроматоза 1 типа у детей»

Актуальность проблемы. Синдром перегрузки железом (СПЖ) в детском возрасте является угрожающим состоянием и приводит к поражению различных органов и систем. Известно, что СПЖ может иметь как первичный, так и вторичный характер. Среди причин первичной перегрузки железом большой удельный вес занимают наследственные нарушения обмена железа - наследственные гемохроматозы. Известно 5 типов наследственных гемохроматозов, обусловленных мутациями в разных генах: HFE, гепсидина (НАМР), гемоювелина (HJV), трансферринового рецептора 2 типа (TfR.2), ферропортина [114]. Наиболее распространенным является наследственный гемохроматоз 1 типа (НГХ 1 типа), обусловленный мутациями в гене HFE. Заболевание наследуется по аутосомно-рецессивному типу. Частота НГХ 1 типа в Европейской популяции составляет от 3 до 8 на 1000 населения, а частота гетерозиготного носительства достигает 10 % [118]. В России частота данного заболевания приближается к европейской [2, 3, 19, 20^ 111]. Избыточное накопление железа в-организме сопровождается развитием цирроза печени, сахарного диабета, кардиомиопатии, нарушением, выработки гормонов гипофизом и др. Риск развития гепатоцеллюлярной карциномы в 200 раз выше у больных с НГХ 1 типа, чем в среднем в популяции [5]. Накопление железа в органах и тканях при НГХ начинается с рождения и идет постепенно. Клиническая манифестация НГХ 1 типа чаще наступает после 40 лет, когда избыток железа достигает критического уровня и патологические изменения в организме приобретают необратимый характер [14]. Несмотря на этот общеизвестный факт, у пациентов детского возраста выявляют изменения биохимических параметров обмена железа, а в ряде случаев и неспецифические клинические симптомы [26]. Высказывается предположение; что гетерозиготное носительство мутаций, приводящих к НГХ 1 типа, может способствовать нарушению обмена железа при ряде сопутствующих соматических заболеваний [2,15, 119].

В литературе встречаются единичные работы, посвященные диагностике НГХ 1 типа у российских детей [1, 11, 12, 13]. До настоящего времени молекулярно-генетических исследований НГХ 1 типа у российских пациентов детского возраста практически не проводилось. Характер изменения биохимических показателей обмена железа у детей с мутациями в гене НЕЕ не изучался. Группы риска развития НГХ 1 типа среди российских детей не определены.

Таким образом, актуальным является разработка критериев дифференциальной диагностики первичного и вторичного СПЖ у детей на основе биохимических показателей обмена железа и молекулярно-генетических исследований. Выявление групп риска развития НГХ 1 типа и разработка алгоритма обследования детей с СПЖ позволит проводить раннюю диагностику НГХ 1 типа и профилактику тяжелого течения и неблагоприятного исхода заболевания.

Цель исследования.

Изучение молекулярно-генетических и биохимических особенностей проявления наследственного гемохроматоза 1 типа у детей с СПЖ.

Задачи исследования.

Для достижения указанной цели предполагалось решить следующие задачи:

1. Сформировать репрезентативную выборку пациентов с признаками СПЖ для проведения молекулярно-генетического анализа гена НЕЕ.

2. Получить данные о спектре мутаций гена НЕЕ и их частоте, а также проанализировать связь генотипа с биохимическими показателями обмена железа и клиническими особенностями у детей изучаемой выборки.

3. Провести полное секвенирование гена НЕЕ у детей с наиболее выраженными биохимическими и клиническими признаками СПЖ и отсутствием гомозиготного генотипа по частым мутациям гена НЕЕ с целью поиска редких мутаций изучаемого гена, а также полное секвенирование генов НЗУ и НАМР с целью исключения ювенильного гемохроматоза (типы

7 •

2А и 2В) у детей с ярко выраженной клинической картиной и исключенным НГХ 1 типа.

4. У всех детей с биохимической картиной перегрузки железом и в контрольной группе оценить частоту мутации У250Х гена трансферринового рецептора 2 Тг/2, вызывающей наследственный гемохроматоз 3 типа.

5. Разработать практические рекомендации по применению молекулярно-генетических исследований НГХ 1 типа у детей из групп риска и протокол молекулярно-генетического обследования на НГХ.

Научная новизна работы

Впервые определены частоты мутаций С282У, НбЗО и 865С гена НЕЕ в выборке российских детей с соматическими заболеваниями и биохимическими признаками СПЖ.

Впервые показано, что в группе детей с различными соматическими заболеваниями (преимущественно с поражением печени и ЖКТ), сопровождающимися биохимическими признаками СПЖ, частота мутациим НбЗБ достоверно более высокая, чем у детей контрольной группы.

Впервые проведено сопоставление биохимических и некоторых клинических признаков НГХ, 1 типа у детей с различными генотипами по мутациям в гене НЕЕ. Показана прямая зависимость средних значений биохимических показателей обмена железа от числа мутантных аллелей НбЗБ. Доказано, что превышение нормальных значений степени насыщения трансферрина железом (СНТЖ) может служить показанием для направления детей на молекулярно-генетическую диагностику НГХ1 типа.

Практическая значимость работы

Доказана необходимость молекулярно-генетической диагностики НГХ 1 типа у детей с признаками СПЖ и различными соматическими заболеваниями (преимущественно печени и ЖКТ). Это позволит, контролировать избыточное накопление железа в организме и • своевременно проводить специфическую профилактику осложнений, и тем самым повысить качество жизни пациентов.

Разработан протокол молекулярно-генетического обследования детей с СПЖ, который может использоваться при дифференциальной диагностике, медико-генетическом консультировании, в научно-образовательной деятельности.

Основные положения, выносимые на защиту

1. У пациентов детского возраста НГХ 1 типа, обусловленный мутациями в гене НЕЕ, может проявляться изменением биохимических показателей обмена железа, а в ряде случаев поражением печени, эндокринной системы, сердца, что является достаточными критериями для направления детей на молекулярно-генетическое обследование.

2. Гомозиготный генотип по мутации НбЗБ или компаунд-гетерозиготные генотипы НбЗО/С282У или Н63В/865С являются наиболее частой причиной НГХ 1 типа у детей исследованной выборки.

3. Значительное превышение доли детей с гетерозиготным генотипом по мутации НбЗБв выборке детей с БППЖ по сравнению с контрольной, группой свидетельствует об этиологической значимости данной мутации в развитии СПЖ у российских детей с соматическими заболеваниями.

4. Статистически достоверных различий в частоте мутантного аллеля С282У в выборке детей с СПЖ по сравнению с группой детей с нормальными показателями обмена железа и общепопуляционной частотой не обнаружено.

5. Определены частоты гетерозигот по мутации 865С гена НЕЕ в исследуемых выборках.

Внедрение результатов работы в клиническую практику Результаты работы внедрены в клиническую практику отделений НЦЗД РАМН, используются при медико-генетическом консультировании пациентов НЦЗД РАМН и в учебном процессе студентов кафедры медицинской генетики Первого МГМУ им. И.М. Сеченова.

Апробация и публикации. Материалы диссертации представлены на Съезде Генетиков и селекционеров, посвященном 200-летию со дня рождения Чарльза Дарвина и V съезде Вавиловского общества генетиков и селекционеров, 21-28 июня 2009 г., Москва (стендовый доклад); на VI Съезде Российского Общества Медицинских генетиков в рамках научной конференции «Молекулярные основы наследственной патологии», 14-18 мая 2010 г., Ростов-на-Дону (устный доклад); на научных конференциях лаборатории мембранологии с группой генетических исследований НЦЗД РАМН. По материалам диссертации опубликовано 13 печатных работ.

Структура и объём диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, результатов собственных исследований и обсуждения, заключения, выводов, практических рекомендаций, библиографического списка и приложений. Работа изложена на страницах машинописного текста, иллюстрирована 14 рисунками и 38 таблицами. Библиографический список литературы включает 157 источников, из них 118 зарубежных.

Заключение диссертации по теме «Генетика», Аверьянова, Наталья Сергеевна

100 выводы

1. НГХ 1 типа у детей с соматическими заболеваниями может, проявляться изменениями биохимических показателей обмена железа, из которых наиболее информативным и значимым для обоснования необходимости дальнейшего молекулярно-генетического обследования является степень насыщения трансферрина железом.

2. Основной причиной наследственного гемохроматоза 1 типа в исследуемой выборке российских детей является гомозиготный генотип по мутации НбЗБ и компаунд-гетерозиготные генотипы Н63Б/С282У и Н63Б/865С гена ЯРЕ.

3. В выборке детей с биохимическими признаками синдрома перегрузки железом частота гетерозигот НбЗБ достоверно выше по сравнению с контрольной группой, что может рассматриваться как указание на участие данного аллеля в развитии патологии обмена железа у детей с сопутствующими соматическими заболеваниями.

4. Частота гетерозигот С282У, оцененная на выборке детей с синдромом перегрузки железом, статистически не отличается от частоты, оцененной в группе детей с нормальными показателями обмена железа, а так же от общепопуляционной частоты.

5. В группе детей с БППЖ и контрольной группе частоты гетерозигот по мутации Б65С гена НЕЕ составили соответственно 3,2 % и 2,0%. Полученные оценки частот статистически не различались.

6. Разработан и внедрен в практику протокол молекулярно-генетического обследования детей на наследственные гемохроматозы.

Практические рекомендации

1. При выявлении синдрома перегрузки железом у детей с соматической патологией необходимо направлять этих пациентов на молекулярно-генетическое исследование с целью исключения НГХ 1 типа, а так же других типов наследственных гемохроматозов.

2. При диагностике мутантного генотипа по гену НРЕ у ребенка с соматической патологией внимание врачей должно быть обращено на контроль и коррекцию уровня железа.

3. Разработанный протокол молекулярно-генетического обследования может быть использован в отделениях крупных научно-практических центров и при медико-генетическом консультировании семей с гемохроматозом для оценки риска потомства, определения прогноза течения заболевания, скорости прогрессирования и выбора адекватных методов терапии.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Аверьянова, Наталья Сергеевна, 2010 год

1. Аскерова Т.А. Раннее выявление наследственного гемохроматоза. Педиатрия. №5, 2001, с. 98 100.

2. Баев А. А. Сравнение клинических и лабораторных показателей у гомо- и гетерозигот по мутациям в гене наследственного гемохроматоза (HFE) в разных группах больных: Автореф. дисс. на соискание уч. степени канд. мед. наук / А.А. Баев. Москва, 2006. - 30 с.

3. Болезни перегрузки железом (гемохроматозы). / Под ред. А.Г. Румянцева и Ю.Н. Токарева М.: ИД Медпрактика-М, 2004.328 с.

4. Володичева Е. М., Цыба H. Н., Щербинина С. П. Клинический анализ крови при наследственном гемохроматозе Гематология и трансфузиология №5 2003

5. Зборовский, С. С., Мисюрин, А. В., Щербинина, С. П. Первый опыт генетического тестирования наследственного гемохроматоза в России /ТГематол. и трансфузиол. -2001.- Т. 46. №3 - С. 64-65.

6. Зборовский С.С., Щербинина С. П., Левина A.A. Диагностика наследственного гемохроматоза у больных с антигенами HLA-A1 и HLA-A1 и В8 //Гематол. и трансфузиол. -2005. -Т.50.- № 1.- С. 39-41.

7. Красильникова, М. В., Сеттарова, Д. А., Левина, А. А., Сметанина, Н. С., Токарев, Ю: Н. Наследственный гемохроматоз у детей //Гематол. и трансфузиол. -1999. -Т.44.- № 2.- С. 24-27.

8. Козырева Н.В.,. Казакова Л.М., Шабалдин A.B. Обмен железа у детей -носителей мутации C282Y гена гемохроматоза HFE // Педиатрия : журнал-им. Г. Н. Сперанского / Союз педиатров России. 2008. - Том 87,N 4 . - С. 6971.

9. Краснопольская К.Д. Наследственные болезни обмена веществ. Справочное пособие для врачей М.: РОО «Центр социальной адаптации и реабилитации детей «Фохат». - 2005 г.- 243-247.

10. Лавров А. В Исследование генетических факторов, определяющих развитие наследственного гемохроматоза // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. 2003. - N 2 . - С. 92-98.

11. Лавров А. В., Баев А. А., Суркова И. К. и др. Анализ частот мутаций C282Y и H63D гена наследственного гемохроматоза (HFE) у госпитализированных больных // Медицинская генетика : Ежемесячный научно-практический журнал. 2004. - Том 3,N 8 . - С. 380-387.

12. Лавров A.B., Литвинова М.М., Бочков Н.П. Генетика и молекулярные механизмы патогенеза наследственного гемохроматоза. Ж. Молекулярная медицина, 2004, 1, стр. 10-20.

13. Михайлова C.B., Онопченко О.В., Суханов A.B., Максимов В.Н., Гаскина Т.К., Ромащенко А.Г., Воевода М. И. Гаплотипический анализ гена HFE в популяции русских и среди пациентов с мультифакторными заболеваниями //ВестникВОГиС.-2006.-Т. Ю.-№3.-504-513.

14. Морщакова Е. Ф., Павлов А. Д. Регуляция гомеостаза железа Гематология и трансфузиология №1 2003

15. Павлов Ч. С., Баев А. А., Лавров А. В. и др. Значение мутаций гена гемохроматоза в развитии синдрома перегрузки железом // Клинические перспективы гастроэнтерологии, гепатологии. , 2005. - N 3 . - С. 17-23.

16. Павлов Ч.С., Баев A.A., Лавров A.B., Маевская М.В. Особенности клинической картины у гетерозигот по мажорным мутациям генов наследственного гемохроматоза (НГХ)./Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. №1,2004. с. 15-17.

17. Павлов Ч.С., Лавров A.B., Баев A.A., Суркова И.К., Сухарева Г.В., Асанов А.Ю., Бочков Н. П. /Анализ частот мутаций C282Y и H63D гена наследственного гемохроматоза (HFE) у госпитальных больных. Медицинская генетика. Том 4, №8, 2004.С. 56-61.

18. Полякова С.И., Потапов A.C., Полякова O.A. Наследственный гемохроматоз у детей // Вопросы современной педиатрии. -2004, т. 3- № 5. -с. 118-121.

19. Полякова С.И., Баканов М. И., Потапов А. С. Ферритин: референсные значения у детей // Российский педиатрический журнал.- 2008.-№ 2.-С. 4-7.

20. Романова Е.А., Мигунова Е.В., Васильев С.А. и др. Случай наследственного гемохроматоза с преимущественным поражением суставов // Гематология и трансфузиология : Научно-практический журнал. , 2004. -N 6 . - С. 42-45.

21. Самоходская Л. М.,. Лавров, А. В Ефименко А. Ю. и др. Особенности генетики наследственного гемохроматоза в русской популяции // Медицинская генетика: ежемесячный научно-практический журнал. 2007. -Том 6.-N 1 . - С. 32-35:

22. Серов В.В. Патологическая анатомия. Курс лекций: учеб. пособие для? вузов / В.В. Серов, М.А. Пальцев. — М.: Медицина, 1998. 640 с.

23. Хусаинова P.M., Федорова С.А., Хуснутдинова Э.К. Скрининг Cys282Tyr и ИзбЗАзр-мутаций в гене HFE у народов Волго-Уральского региона и Республики Саха (Якутия) // Мед. генетика. 2003. №5. С. 207-211.

24. Хусаинова Р. И., Хуснутдинова И. Н., Хуснутдинова Э. К. .Анализ мутаций C282Y и H63D в гене гемохроматоза (HFE) в популяциях Средней Азии.// Медицинская генетика.- 2006.-Т.42.-№ 3. -421-426 .

25. Шарандак А. П., Кириченко JI. JL, Королев А. П. , Юнусов М. А. Специфическая кардиомиопатия у больных гемохроматозом // Кардиология : Научно-практический журнал. 2005. - Том 45,N 6 . - С. 96-100.

26. Щербинина С.П., Романова Е.А., Зборовский С.С. Молекулярно-генетическая диагностика наследственного гемохроматоза // Гематол. и трансфузиол. -2005. -Т.50.- № 1.- С. 23-27.

27. Щербинина С.П., Романова Е.А., Левина А.А., Мамукова Ю.И., Цибульская М.М. Диагностическое значение комплексного исследования показателей метаболизма железа в клинической практике // Гематология и трансфузиология.-Т.50.-№5.- 2005.-С.23 28.

28. Adams PC, Kertesz АЕ, McLaren СЕ, Barr R, Bamford A, Chakrabarti S. Population screening for hemochromatosisra comparison of unbound ironbinding capacity, transferrin saturation, and C282Y genotyping in 5,211 blood donors. Hepatology 2000;31:1160-4.

29. Agostinho M.F., Arruda V.R., Basseres D.S., Bordin S., Soares M C, Menezes R.C., Costa F.F., Saad S.T. Mutation analysis of the HFE gene in Brazilian populations/ZBlood Cells Mol. Dis. -1999. -Vol. 25. -P. 324-327.

30. Aguilar-Martinez P., Lok Chun Yu, Cunat Séverine, Cadet E., Robson K.,° Rochette J. Juvenile hemochromatosis caused by a novel combination of hemojuvelin G320V/R176C mutations in a 5-year old girl // Haematologica 2007;92:421-422

31. Alexander J. Kowdley K.V. HFE-associated hereditary hemochromatosis // Genet. In Med.- 2009.- V.ll.-№ 5.- P. 307-313.

32. Allen KJ, Nisselle AE, Collins VR, Williamson R, Delatycki MB. Asymptomatic individuals at genetic risk of hemochromatosis take appropriate steps to prevent disease related to iron overload//Liver Int. 2008 Mar;28(3):363-9.

33. Allen, KJ. Gurrin, L.C. Constantine, et al. Iron overload related disease in HFE hereditary hemochromatosis // N Engl J Med. 2008. - Vol. 358(3). - P. 221-230.

34. Andrews N.C. Disorders of Iron Metabolism. New England Journal of medicine 1999.-vol.341 N26-p.1986-1995.

35. Asberg A, Tretli S, Hveem K, Bjerve KS. Benefit of population-based screening for phenotypic hemochromatosis in young men // Scand J Gastroenterol .- 2002.- V.37.-№ 10.- P.1212-9.

36. Bacon BR, Powell LW, Adams PC, Rresina TF, Hoofiiagle JH. Molecular medicine and hemochromatosis: at the crossroads. Gastroenterology. 1999; 116:

37. Barton J.C., Acton R.T., Prasthofer E.F., Rivers C.A. Hemochromatosis in a Lithuanian with HFE C2S2Y homozygosity and C282Y allele frequencies in the Baltic Sea region//Eur. J. Haematol. -2001. -Vol. 67. -P. 263-264.

38. Barut G., Balci H., Bozdayi M., Hatemi I., Ozcelik D., Senturk H. Screening for iron overload in the Turkish population//Dig. Dis. -2003. -Vol. 21. -P. 279-285.

39. Beckman L.E., Saha N. Spitsyn V., Van Landeghem G., Beckman L. Ethnic differences in the HFE codon 282 (Cys/Tyr) polymorphism//Hum. Hered. -1997. -Vol. 47. -P. 263-267.

40. Beutler E Hemochromatosis: Genetics and Pathophysiology Annu. Rev. Med. 2006. 57:331-47

41. Beutler E., West C., Gelbart T. HLA-H and associated proteins in patients with hemochromatosis // Mol Med. 1997 June; 3(6): P. 397-402.

42. Beutler E: The HFE Cys282Tyr mutation as a necessary but not sufficient cause of clinical hereditary hemochromatosis. Blood 2003; 101: P. 3347- 3350.

43. Beutler E: The significance of the 187G (H63D) mutation in hemochromatosis. Am J Hum Genet 1997.-61:762.-P.2291-301.

44. Beutler, E. Penetrance of 845G~> A (C282Y) HFE hereditary haemochromatosis mutation in the USA / E. Beutler, V.J. Felitti, J.A. Koziol, N.J. Ho, T. Gelbart // Lancet. 2002. - Vol. 359(9302). - P. 211-218.

45. Brissot P et al. Current approach to the management of hemochromatosis. Hematology 2006; P. 36-41.

46. Brissot P., Moirand R., Jouanolle A.M., Guyader D., LeGall J.Y., Deugnier Y., David V. A genotypic study of 217 unrelated« probands diagnosed as «genetic hemochromatosis» on «classical» phenotypic criteria//J. Hepatol. -1999. -Vol. 30. -P. 588-593.

47. Britton, R.S. Pathophysiology of iron toxicity / R.S Britton, G.A. Ramm, J.K. Olynyk, R. Singh, R. O'Neill, B.R. Bacon // Adv Exp Med Biol. 1994. -Vol. 356.-P. 239-253.

48. Britton, R.S. Role of free radicals in liver diseases and hepatic fibrosis / R.S. Britton, B.R. Bacon // Hepatogastroenterology. 1994. - Vol. 41. - P. 343-348. .

49. Burt M.J., George P.M., Upton J.D., Collett JA, Frampton C.M., Chapman T.M., Walmsley T.A., Chapman B.A. The significance of haemochromatosis gene mutations in the general population: implications for screening // Gut. 1998.-V.43.-№ 6.-P. 830-836.

50. Cadet E., Robson K., Rochette J. Juvenile hemochromatosis caused by a novelcombination of hemojuvelin G320V/R176C mutations in a 5-year old girl, //haematologica/the hematology journal 2007; 92(03) P.421-22.

51. Cadet E.D., Capron M. Gallet, M-L Omanga-Lerker, H Boutignon, C Julier, K J H Robson, J Rochette Reverse cascade screening of newborns for hereditary haemochromatosis: a model for other late onset diseases? //J Med Genet 2005; 42:P. 390-395.

52. Camaschella C, Roetto A, De Gobbi M: Genetic haemochromatosis: genes and mutations associated with iron loading. Best Pract Res Clin Haematol 2002; 15: P. 261-276.

53. Camaschella C. Understanding iron homeostasis through genetic analysis of hemochromatosis and related disorders. Blood 2005; 106:P. 3710-3717.

54. Camaschella, C. The gene TFR2 is mutated in a new type of haemochromatosis mapping to 7q22 / C. Camaschella, A. Roetto, A. Cali, M. De Gobbi, G. Garozzo, M. Carella, N. Majorano, A. Totaro, P. Gasparini // Nature Genet.-2000.-Vol. 25.-P. 14-15

55. Castiella A., Zapata E., Juan M., Otazua P., Fernandez J., Zubiaurre L., Arriola J. Significance of H63D homozygosity in a Basque population withhemochromatosis // Journal of Gastroenterology and Hepatology.-2010.-V. 25.-№7.-P. 1295-1298.

56. Catherine Mura, Odile Raguenes, and Claude Fe'rec Blood, Vol 93, No 8 (April 15), 1999: P. 2502-2505

57. Chales G, Guggenbuhl P.When and how should we screen for hereditary hemochromatosis? //Joint Bone Spine. 2003 Aug;70(4):P. 263-70.

58. Chang J.G., Liu T.C., Lin S.F. Rapid diagnosis of the HLA-Hgene Cys 282 Tyr mutation in hemochromatosis by polymerase chainreaction -a very rare mutation in the Chinese population/ZBlood. -1997.-Vol. 89. -P. 3492-3493.

59. Cheng R, Barton JC, Morrison ED, Phatak PD, Krawitt EL, Gordon SC, Kowdley KV. Differences in hepatic phenotype between hemochromatosis patients with HFE C282Y homozygosity and other HFE genotypes // J Clin Gastroenterol. 2009.-V.43.-№ 6.-P. 569-73.

60. Conrad M.E., Umbreit J.H. Iron Absorption and Transport An Update.-Am.J.Hematol., 2000, 64, P.287-298

61. Crawford D.H., Jazwinska E.C., Cullen L.M, Powell L.W. Expression of HLA-linked hemochromatosis in subjects homozygous or heterozygous for the C282Ymutation//Gastroenterology.-1998.-Vol. 114.-P. 1003-1008.

62. Diego C, Murga MJ, Martinez-Castro P. Frequency of HFE H63D, S65C, and C282Y Mutations in Patients with Iron Overload and Controls from Toledo, Spain Genet Test. 2004 Fall;8(3):P. 263-7.

63. Diego C., Opazo S. Murga M., Martinez-Castro P. H63D homozygotes with hyperferritinaemia: is this genotype, the primary cause of iron overload? // European Journal of Haematology. 2007.- V. 78.- P. 66-71.

64. Drakesmith H, Sweetland E, Schimanski L et al: The hemochromatosisprotein HFE inhibits iron export from macrophages. Proc Natl Acad Sci USA 2002; 99: P.15602 -15607.

65. Drakesmith H., Townsend A. The structure and function of HFE // BioEssays-2000.- V. 22.- № 7.- P. 595-598.

66. Drakesmith, H. Resistance to hepcidin is conferred by hemochromatosis-associated mutations of ferroportin / H. Drakesmith, L.M. Schimanski, E. Ormerod etal.//Blood.-2005.-Vol. 106(3).-P. 1092-1097.

67. Eaton J.W. Molecular bases of cellular iron toxicity / J.W. Eaton, M. Qian. // Free Radical Biolog and Medicine. 2002. -Vol. 32(9). - P. 833-840.

68. Feder J.N. Gnirke A., Thomas W. et al. A novel MHC class I-like gene is mutated in patients with hereditary haemochromatosis // Nature Genet. 1996. — Vol. 13.-P. 399-408.

69. Fleming R., Sly W. Mechanism of iron accumulation in hereditary hemochromatosis. Annual Review of Physiology 2002 Vol. 64: P. 663-680

70. Migas, C.C. Holden, A. Waheed, R.S. Britton, S. Tomatsu, B.R. Bacon, W.S. Sly // Proc. Nat. Acad. Sei. 2000. - Vol. 97. - P. 2214-2219.

71. Frazer, D.M. Iron Imports. I. Intestinal iron absorption and its regulation;/ D.M. Frazer, G.J. Anderson // Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol: 2005. -Vol. 289.-P. G631-G635.

72. Gac G, Dupradeau FY, Mura G et al: Phenotypic expression of the C282Y/Q283P compound heterozygosity in HFE and molecular modeling of the Q283P mutation effect. Blood Cells Mol Dis 2003; 30: P. 231-237.

73. Gac G., Mura C, Ferec C. Complete scanning of the hereditary hemochromatosis gene (HFE) by use of denaturing HPLC//Clin. Chem. -2001. -Vol. 47. -P. 1633-1640.

74. Gac Le G., Ferec C. The molecular genetics of haemochromatosis //European Journal of Human Genetics . 2005.- 13. P;1172-1185.

75. Ganz T. Hepcidin and its role in regulating systemic, iron metabolism// Hematology. 2006; P. 29-35.

76. Hanson EH, Imperatore G, Burke W: HFE gene and hereditary hemochromatosis: a HuGE review. Human Genome Epidemiology. Am J Epidemiol 2001; 154: P.193- 206;

77. Hoppe C, Watson RM, Long CM, Lorey F, Robles L, Klitz W, Styles L, Vichinsky E. Prevalence of HFE mutations in. California newborns, Pediatr Hematol Oncol. 2006 Sep;23(6):P.507-16.

78. Human Gene Mutation Database of Cardiff University // http://www.hgmd.cf.ac.uk/docs/copyright.html

79. Jacobs E.M., Verbeek AL, Kreeftenberg 1IG, van Deursen GT, Marx JJ, Stalenhoef AF, Swinkels DW, de Vries RA. Changing aspects of HFE-relatedI113hereditary haemochromatosis and endeavours to early diagnosis // Neth. J Med.-2007.-V. 65.-№ 11.- P.419-24.

80. Kawabata, H. Molecular cloning of transferrin receptor 2: a new member of the transferrin receptor-like family / H. Kawabata, R. Yang, T. Hirama, P.T. Vuong, S. Kawano, A.F. Gombart, H.P. Koeffler // J. Biol. Chem. 1999. - Vol. 274.-P. 20826-20832.

81. King C, Barton D. Best practice guidelines for the molecular genetic diagnosis of Type 1 (HFE-related) hereditary haemochromatosis // BMC Med Genet.-2006.- V. 7.-81.

82. Lazarescu A, Snively BM, Adams PC. Phenotype variation in C282Y homozygotes for the hemochromatosis gene.Clin Gastroenterol Hepatol. 2005 Oct;3(10):P. 1043-6.

83. Lee PL, Barton JC. Hemochromatosis and severe iron overload associated with compound heterozygosity for TFR2 R455Q and two novel mutations TFR2 R396X and G792R.Acta Haematol. 2006; 115(1-2):1P. 02-5.

84. Leone P.E., Gimenez P., Collantes J.C., Paz-Y-Mino С Analysis of HFE gene mutations (C282Y, H63D, and S65C) in the Ecuadorian population//Ann. Hematol. -2005. -Vol. 84. -P. 103-105.

85. Litvinova, M.M. Biochemical signs of hemochromatosis in a cohort of Canadian and Russian patients under 30 years old with different HFE genotype / M.M. Litvinova // European Journal of Human Genetics. 2009. - Vol. 17 (2). -P. 63-64.

86. McKie A.T., Marciani P., Rolfs A. Et al. A Novel Duodenal Iron Regulated Transporter, JRFG-1, Implicated in the Basoleteral Transfer of Iron to the Circulation.-Mol.Cell., 2000, 5, 2, P.299-309

87. McKusick V.A. Hemochromatosis, HFE1 (235200), HFE2A (#602310), HFE2B (606464), HFEF3(604250), HFE4(606069) Neonatal (#231100) OMIM//URL:<http://www.ncbi.nlm.nih> gov/ent-rez/query.fcgi?db=OMIM (2005)

88. McLaren, C.E., McLachlan, G. Halliday J.et al. Powell Distribution of transferring saturation in an Australia population: relevance to the early diagnosis of hemochromatosis // Gastroenterology. 1998. - Vol. 114(3). - P. 543-549.

89. Merryweather-Clarke A.T., Pointon J.J., Shearman J.D., Rob-son K.J. Global prevalence of putative haemochromatosis mutations//J. Med. Genet. -1997. -Vol. 34. -P. 275-278.

90. Merryweather-Clarke AT, Pointon JJ, Jouanolle AM, Rochette J, Robson KJH. // Geography of HFE C282Y and H63D mutations. Genet Test 2000;4:P. 183-98.

91. Muin J. Khoury, M.D., Ph.D., Linda L. McCabe, Ph.D., and Edward R.B. McCabe, M.D., Ph.D. Population Screening in the Age of Genomic Medicine The New England Journal of Medicine 2003, 348:50-583

92. Mura C, Raguenes O, Ferec C. HFE mutations analysis in 711 hemochromatosis probands: evidence for S65C implication in mild form of hemochromatosis //Blood.-1999. V.93.- № 8.-2502-2505.

93. Bennoun, I. Devaux, C. Beaumont, B. Grandchamp, A. Kahn, S. Vaulont // PNAS. 2001. - Vol. 98(15). - P. 8780-8785.

94. Nicolas, G. Hepcidin, a new iron regulatory peptide / G. Nicolas, L. Viatte, M. Bennoun, C. Beaumont, A. Kahn, S. Vaulont // Blood Cells Mol Dis. 2002. -Vol. 29(3).-P. 327-335.

95. Niederau C, Strohmeyer G. Strategies for early diagnosis of haemochromatosis // Eur J Gastroenterol Hepatol.- 2002.- V. 14.-№ 3.-P.217-21.

96. Olynyk J.K., Trinder D., Ramm G.A., Britton R.S., Bacon B.R. Hereditary hemochromatosis in the post-HFE era // Hepatology. -2008.- V.48.-№ 3.- P. 9911001.

97. Ombiga J., Adams L.A., Tang K., Trinder D., Olynyk J.K. Screening for HFE and iron overload //Semin Liver Dis. 2005 Nov;25(4):402-10.

98. Omer Т., Jeanine J. Houwing-Duistermaat R. et al. A population-based study of the effect of the HFE C282Y and H63D mutations on iron metabolism // European Journal of Human Genetics (2003) 11, 225-231.

99. Perez-Aguilar F, Benlloch S, Berenguer M. Study of patients referred for elevated ferritin levels and/or transferrin saturation: significance of non-alcoholic fatty liver disease. Gastroenterol Hepatol. 2004 Nov;27(9): p. 508-14.

100. Pietrangelo A, Caleffi A, Henrion J, Ferrara F, Corradini E, Kulaksiz H, Stremmel W, Andreone P, Garuti C. Juvenile hemochromatosis associated with pathogenic mutations of adult hemochromatosis genes.//Gastroenterology 2005 Feb; 128(2):470-9.

101. Pietrangelo A. A. Pietrangelo, G. Casalgrandi, D. Quaglino, R Gualdi, D. Conte, Si Milani, G. Montosi, L. Cesarini, E. Ventura, G. Cairo // Gastroenterology. 1995. - Vol. 108. - P. 208-217.

102. Pietrangelo A. Hereditary hemochromatosis: a new look at an old disease. N Engl J Med 2004; 350:2383-2397.

103. Pietrapertosa, A., Vitucci A., Campanale D. et al. HFE gene mutations an Apulian population: Allele frequencies // European Journal of Epidemiology. -2003.-Vol. 18(7).-P. 685-690.

104. Pinto J. P Overexpression of HFE in HepG2 cells reveals differences in intracellular distribution and co-localization of wt- and mutated forms /Jorge P. Pinto, P. Ramos, de Sousa M. // Blood Cells, Molecules, and Diseases — 2007. -Vol. 39.-P. 75-81.

105. Pintoa J., Ramosa P., Sousaa M. Overexpression of HFE in HepG2 cells reveals differences in intracellular distribution and co-localization of wt- and mutated forms // Blood Cells, Molecules, and Diseases.-2007.-V. 39.- № 1.- P. 7581.

106. Roetto A., Totaro A., Piperno A., Piga A., Longo F., Gtozzo G., Call A., De Gobbi M., Gasparini P., Camaschella C New mutations inactivating transferrin receptor 2 in hemochromatosis type 3//Blood. -2001. -Vol. 97, №9. -P. 2555-2560.

107. Samarasena J, Winsor W, Lush R, Duggan P, Xie Y, Borgaonkar M. Individuals homozygous for the H63D mutation have significantly elevated iron indexes. Dig Dis Sci.-2006 .-;51(4).- P.803-7.

108. Sheldon, J.H. Haemochromatosis / J.H. Sheldon. London: Oxford Univ Pr,, 1935.-339 p.

109. Trinder D., Fox C., Vautier G., Olynyk J.K. Molecular pathogenesis of iron overload /Gut.- 2002.-51.-290-295.

110. Truksa J, Peng H, Lee P, Beutler E. Bone morphogenetic proteins 2, 4, and 9 stimulate murine hepcidin 1 expression independently of Hfe, transferrin receptor 2 (Tfr2), and IL-6. Proc Natl Acad Sci USA 2006; 103: 10289-10293.

111. Villiers, J.N.P. Spectrum of mutations in the HFE gene implicated in haemochromatosis and porphyria / J.N.P. de Villiers, R. Hillermann, L. Loubser, M.J. Kotze // Hum. Molec. Genet. 1999. - Vol. 8. - P. 1517-1522.

112. Waalen J, Nordestgaard BG, Beutler E: The penetrance of hereditary hemochromatosis. Best Pract Res Clin Haematol 2005; 18: 203- 220.

113. Zlocha J, Kovacs L, Pozgayova S, Kupcova V, Durinova S. Molecular genetic diagnostics and screening of hereditary hemochromatosis // Vnitr Lek. 2006.-V. 52.- №6.-602-8.