Молекулярные механизмы васкулогенной мимикрии при злокачественных заболеваниях тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.12, доктор биологических наук Вартанян, Амалия Арташевна

• Вартанян, Амалия Арташевна
• доктор биологических наук
• 2012

Оглавление диссертации доктор биологических наук Вартанян, Амалия Арташевна

Список сокращений

Глава 1. Введение

Глава 2. Обзор литературы

2.1. Ангиогенез в норме и в условиях опухолевого роста

2.1.1. Этапы формирования кровеносных сосудов

2.1.2. Созревание вновь сформированных кровеносных сетей

2.1.3. Особенности ангиогенеза при солидных опухолях

2.1.4. Антиангиогенная терапия

2.1.5. Альтернативные пути кровоснабжения опухоли

2.2. Васкулогенная мимикрия

2.2.1. Функциональная значимость васкулогенной мимикрии

2.2.2. Молекулярные детерминанты васкулогенной мимикрии

2.2.3.Сигнальные пути, вовлекаемые в васкулогенную мимикрию

2.2.4. Стволовая клетка опухоли и васкулогенная мимикрия

2.2.5.Клиническое значение васкулогенной мимикрии

2.3. Молекулярные механизмы развития меланомы

Глава 3. Материалы и методы исследования

3.1. Материалы

3.2. Методы исследования in vitro

3.3. Методы исследования in vivo.

Глава 4. Результаты исследований и их обсуждение.

4.1. Молекулярные детерминанты васкулогенной мимикрии

4.2.Сигнальные пути, вовлекаемые в васкулогенную мимикрию

4.3.Прогнорстическая значимость PAS-положительных структур при светлоклеточном раке почки

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Молекулярные механизмы васкулогенной мимикрии при злокачественных заболеваниях»

Актуальность темы:

Гипотеза о том, что рост солидных опухолей и возникновение метастазов зависит от образования новых сосудов, была предложена I. Ро1кшап более 30 лет назад [87, 88] и в настоящее время подтверждена последними открытиями в области молекулярных и клеточных процессов, касающихся регуляции пролиферации, миграции и взаимодействия клеток, формирующих сосуды. Для формирования сосудистой сети опухолевым клеткам (ОК) необходимо вновь приобрести способность, характерную для стадии эмбрионального развития - вырабатывать вещества, стимулирующие образование новых сосудов (проангиогенные субстанции) [344]. Учитывая, что во взрослом организме такой способностью обладают далеко не все клетки, возможно именно этот факт значительно увеличивает время до «клинически значимого» увеличения опухолевой массы.

Накопленные к настоящему времени данные говорят о том, что индукция ангиогенеза опухоли регулируется самими ОК. Опухоль секретирует растворимые активаторы ангиогенеза, которые являются сигналом начала процесса ветвления сосудов, в частности УЕОРА и его рецепторы [27, 36, 39, 169]. Тот факт, что специфический ингибитор пролиферации эндотелиальных клеток (ЭК) может вызвать регрессию опухоли и поддерживать ее в «дремлющем» состоянии, указывает на то, что клетки эндотелия обладают контролирующим воздействием на рост опухоли. Наряду с факторами роста в процессе ангиогенеза большое значение имеет и состав внеклеточного матрикса опухоли. Изучение микроокружения ОК дает возможность понять индивидуальные особенности опухоли, такие как зависимость ее размеров от локализации в том или ином органе, закономерности метастазирования и рецидивирования [95, 339].

Если для разных типов опухолей характерны большие различия в чувствительности к противоопухолевой терапии, эффективная антиангиогенная терапия имеет значительно более широкий спектр применения в качестве общего противоопухолевого воздействия и этот подход должен минимизировать некоторые проблемы, связанные с химиотерапией, например, лекарственная резистентность.

Химиотерапия, направленная на сосудистую систему, может основываться на биохимических различиях между ангиогенными и покоящимися кровеносными сосудами: ЭК опухоли отличаются по фенотипу от ЭК нормальной ткани, что создает предпосылки для поиска веществ, специфично блокирующих формирование опухолевых микрососудов [23, 158, 223,252].

Основными мишенями для антиангиогенной терапии могут служить экспрессируемые ОК молекулы, характерные для ангиогенеза. В связи с этим важное значение приобретает поиск и исследование всевозможных ингибиторов ангиогенеза (в том числе эндогенных), которые блокировали бы формирование новых кровеносных сосудов, индуцировали бы апоптоз в активированных ЭК вновь сформированных сосудов, снижали бы проницаемость сосудов, что привело бы, в конечном счете, к блокированию роста опухоли. Также показано, что использование антиангиогенной терапии приводит к «нормализации» кровотока внутри опухоли [112], что ассоциируется со снижением интерстициального давления и при сочетании с химиотерапией может повысить концентрацию противоопухолевых препаратов в ткани опухоли и оказаться более эффективным подходом к лечению солидных опухолей. Обладая сравнительно высокой селективностью действия на активированные кровеносные сосуды, встречающиеся у взрослых в основном в опухолевой ткани, антиангиогенная терапия опухоли не имеет ярко выраженной токсичности, что делает антиангиогенные препараты перспективными для использования в клинической онкологии.

Основной мишенью, одобренных для клинического исследования антиангиогенных препаратов, является блокирование активности VEGF рецептор-лигандной системы. В предклинических исследованиях in vitro и in vivo находятся более сотни различных ингибиторов ангиогенеза, и их количество продолжает расти. Но только несколько препаратов ингибиторов VEGF рецептор-лигандной системы (Авастин, Сунитиниб, Сорафениб и другие) показали эффективность в III фазе клинических испытаний и одобрены для клинического применения при колоректальном раке, светлоклеточном раке почки, гепатоцеллюлярной карциноме [230, 278, 346]. Как показывает практика, антиангиогенная терапия не всегда является эффективной, и что оказалось совершенно неожиданным, к антиангиогенной терапии может возникать резистентность[14, 108].

Более того, большинство опухолей практически не отвечают на эту терапию [97] и антиангиогенная терапия опухоли сегодня не находит столь широкого применения, как цитотоксическая химиотерапия. Гетерогенность васкулярных сосудов может быть одной из причин выживаемости опухолевых клеток: формирование сосудов в опухолях происходит на фоне неконтролируемой митогенной стимуляции и измененного внеклеточного матрикса. Это приводит к развитию неполноценных сосудов преимущественно капиллярного типа, имеющих нередко прерывистую базальную мембрану и нарушенную эндотелиальную выстилку. Эндотелий может замещаться опухолевыми клетками, а иногда и вовсе отсутствовать в сосудах опухоли [73, 40, 233, 312, 313].

Образование микроваскулярной сети агрессивными опухолевыми клетками получило название «васкулогенная мимикрия» (ВМ), тем самым подчеркивая образование таких каналов de novo, без участия ЭК, т.е. независимо от ангиогенеза [119, 196]. Образование таких структур является уникальной способностью клеток с высоко злокачественным клеточным фенотипом, менее агресивные ОК подобных структур не формируют. Тот факт, что наличие ВМ описывается практически во всех типах агрессивных опухолей - при меланоме, при раке молочной железы, простаты, яичника, почки, нейробластомы - говорит о том, что мы имеем дело с новой характеристикой агрессивной опухоли [70, 80, 60, 227]. Функциональное значение ВМ, несмотря на возрастающий интерес к этому феномену, остается невыясненным. Вероятно, образование такого рода каналов внутри опухоли может частично нейтрализовать отсутствие питания и предотвратить ранний некроз. Высокая статистическая корреляция между способностью опухоли к ВМ и частотой метастазирования опухоли подтверждает эту гипотезу [70, 227].

Интересным является тот факт, что ВМ представлена неодинаково в разных типах опухолей. Так, 60-62% кровоснабжения меланомы осуществляется через каналы ВМ; при саркоме мягких тканей - 35-37%; при раке почки - 30-32%, при раке яичника, раке молочной железы, раке простаты - 15-18%; при раке толстой кишки - 10-12% (наши неопубликованные данные). Следует отметить, что сосудистая система опухоли разительно отличается от сосудистого русла здоровой ткани. Сосуды в опухоли сильно расширены или еле заметны. Эти сосуды не всегда соединены друг с другом, плохо стабилизированы перицитами, что повышает риск кровотечения. Хаотичная структура также замедляет кровоток [130, 146]. На фоне крайнего несовершенства циркуляции крови в опухоли каналы ВМ в количестве 10-12% вряд ли что существенно изменят, однако 60-62% васкуляризации опухоли явно могут иметь существенный вклад в кровоснабжение опухоли.

Детальное исследование влияния широко используемых в клинике блокаторов ангиогенеза на модулирование васкулогенной мимикрии in vitro показало, что эти препараты не оказывают влияния на формирование васкулярной сети ОК [319]. По-видимому, нечувствительность многих типов опухоли к антиангиогенной терапии можно, по крайней мере, частично объяснить появлением в опухоли васкулярной сети, сформированной ОК. Присутствие сосудов, формированных ОК, предполагает потенциально новый путь распространения метастазов.

Анализ исследований последних десяти лет, посвященных изучению механизмов развития опухоли и ее васкуляризации, дает основание к выбору меланомы кожи как оптимальной модели для изучения ВМ. Меланома -опухоль, резистентная к химио- и радиотерапии, что подтверждает высоко агрессивный фенотип опухоли, а значит и возможность формирования каналов ВМ [26, 321]. Меланома также резистентна к антиангиогенной терапии [52, 62, 290], что указывает на существование альтернативной, не зависимой от эндотелия, системы циркуляции крови в опухоли. Таким образом, меланома может явиться той идеальной моделью, которая позволит выявить молекулярные детерминанты формирования каналов ВМ в опухоли.

Формирование васкулярной сети ОК - сложный биологический процесс, в котором задействованы несколько сигнальных путей. Не определен ее вклад в общую циркуляцию крови в опухоли. Бесспорным остается то, что наличие ВМ может иметь неоценимое значение для опухолей солидного строения, растущих массивными опухолевыми узлами с небольшим количеством васкулярной стромы. Изучение молекулярных механизмов становления ВМ позволит не только лучше понять взаимодействия между метастатическими клетками, их микроокружением и переключением опухоли в агрессивную стадию роста, но и предложит новый подход к диагностике, прогнозированию течения болезни и рациональному лечению злокачественных заболеваний.

Цель работы;

Целью данной работы явилось изучение молекулярных механизмов феномена васкулогенной мимикрии.

Задачи исследования.

1. Идентифицировать молекулярные детерминанты опухолевой клетки, позволяющие ей формировать васкулярные каналы в опухоли.

2. Изучить механизмы инициации формирования каналов васкулогенной мимикрии при меланоме.

3. Исследовать участие Са сигнального пути в формировании каналов васкулогенной мимикрии.

4. Исследовать статус васкулогенной мимикрии в васкуляризации меланомы в условиях блокирования ангиогенеза анти-Notch терапией.

5. Охарактеризовать васкулогенную мимикрию при светлоклеточном раке почки.

Научная новизна:

В работе впервые обсуждается роль васкулогенной мимикрии, как альтернативной системы кровоснабжения опухоли в условиях блокирования ангиогенеза анти-Notch терапией.

Впервые показано, что присутствие сети каналов васкулогенной мимикрии в светлоклеточном раке почки служит независимым прогностическим маркером агрессивной опухоли (Р=0.05, %2=7.813). Эта корреляция становится более выраженной, если сопровождается экспрессией ТФ (Р=0.035, х2=4.436).

Впервые показано, что васкулогенная мимикрия находится под контролем VEGF/VEGFRl/PKCa сигнального пути и не зависит от VEGFR2-тирозинкиназной активности.

Впервые на основе экспериментов in vitro и in vivo показано, что формирование каналов васкулогенной мимикрии зависит от Са2+ -чувствительной перестройки актинового цитоскелета, включая как изменение формы клетки, так и создание сайтов фокальной адгезии.

Впервые показано, что в формировании каналов васкулогенной мимикрии участвуют интегрины avp3 и av(35, которые обеспечивают межклеточную и клеточно-матриксную адгезию.

Впервые показано, что необходимым условием формирования каналов васкулогенной мимикрии является активация каспазы-3.

Впервые показано, что антиоксиданты снижают уровень экспрессии ангиогенных факторов, таких как VEGF, VEGFR1, VEGFR2, и ингибируют активность каспазы-3, тем самым блокируя формирование каналов васкулогенной мимикрии.

Научно-практическая значимость

Результаты данной работы вносят существенный вклад в развитие представлений об особенностях формирования вааскулярной сети каналов, выстланных ОК, в меланоме человека. Молекулярно-биологические мишени процесса васкулогенной мимикрии при меланоме, идентифицированные нами, могут быть использованы в различных научно-исследовательских институтах для создания лекарственных препаратов, направленных на ингибирование васкулогенной мимикрии.

Полученные нами результаты о прогностическом значении PAS-положительных структур при светлоклеточном раке почки в дополнение к применяемым диагностическим методам - гистологическому и биохимическому, могут служить основой для индивидуализации лечения больных раком почки в лечебных учреждениях РФ. Внедрение таких систем расширит возможность диагностики,„в том числе дифференциальной, а также позволит определить риск метастазирования опухоли и выбрать верную тактику терапии.

Выявленная нами в экспериментах in vivo компенсаторная роль васкулогенной мимикрии в кровоснабжении опухоли в условиях блокирования ангиогенеза анти-Notch терапией может служить основой для оптимизации антиангиогенной терапии опухоли.

Формы внедрения

Научные статьи, патенты

Заключение диссертации по теме «Онкология», Вартанян, Амалия Арташевна

выводы

1. Васкулогенная мимикрия при злокачественной меланоме находится под контролем VEGFA/VEGFR1 сигнального пути и не зависит от

VEGFR2 киназной активности. Васкулогенная мимикрия не может t быть активирована P1GF.

2. Присутствие сети каналов васкулогенной мимикрии в светлоклеточном раке почки служит независимым прогностическим маркером агрессивной опухоли (Р=0.05, х2=7.813). Эта корреляция становится более выраженной, если сопровождается экспрессией ТФ (Р=0.035, %2=4.436).

3. В процесс формирования сосудисто-подобных структур вовлекаются компоненты митохондриального пути индукции апоптоза. Показано, что необходимым условием формирования каналов васкулогенной мимикрии является активация каспазы-3.

4. Антиоксиданты блокируют формирование каналов васкулогенной мимикрии. При этом снижается уровень экспрессии VEGF, VEGFR1 и VEGFR2, а также ингибируется активация каспазы-3.

5. Формирование каналов васкулогенной мимикрии зависит от клеточно-матриксной адгезии, которая обеспечивается интегринами avP3 и av(35. В процессе формирования каналов васкулогенной мимикрии происходит Са2+-зависимая перестройка актинового цитоскелета.

6. В условиях антиангиогенной терапии посредством подавления сигнального пути Notch активируется альтернативный, независимый от эндотелия путь васкуляризации - васкулогенная мимикрия, что и позволяет опухоли выживать. При этом в опухоли значительно увеличивается экспрессия маркеров метастазирования ММР-2 и VEGFR1, что свидетельствует о прогрессии опухоли в более агрессивный фенотип.

7. При выборе терапевтического воздействия на опухоль необходимо учитывать возможность развития васкулогенной мимикрии.

Васкулогенная мимикрия является неблагоприятным прогностическим фактором и, видимо, может быть индуцирована самим терапевтическим воздействием. Для повышения эффективности лечения злокачественных новообразований необходимым становится комбинирование антиангиогенных препаратов с ингибиторами васкулогенной мимикрии.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Опухоли самых различных гистологических типов должны индуцировать ангиогенез для того, чтобы выжить, и используемые для этого ангиогенные пути по большей части не зависят от типа опухоли. В настоящее время эта гипотеза подтверждена последними открытиями в области молекулярных и клеточных процессов, касающихся регуляции пролиферации, миграции и взаимодействия клеток, участвующих в формировании сосудов. Если для разных типов солидных опухолей характерны большие различия в чувствительности к противоопухолевой терапии, эффективная антиангиогенная терапия должна иметь значительно более широкий спектр применения в качестве общего противоопухолевого воздействия и этот подход должен минимизировать некоторые проблемы, связанные с химиотерапией, например, лекарственную резистентность. Тот факт, что специфический ингибитор пролиферации ЭК может вызвать регрессию опухоли и поддерживать ее в «дремлющем» состоянии, указывает на то, что клетки эндотелия обладают контролирующим воздействием на рост опухоли. Любая опухоль - это, в основном, популяция собственно ОК и популяция клеток эндотелия. Рост каждой из этих популяций может быть заблокирован селективными ингибиторами. И комбинированная терапия, направленная на обе эти клеточные популяции, должна быть намного эффективнее, чем воздействие на каждую популяцию по-отдельности. Казалось бы, в этом правиле не должно быть исключений. Но в реальности, все оказалось иначе. Первые же клинические испытания препаратов, потенциально направленных на блокирование ангиогенеза, выявили, что не все опухоли отвечали на анти-УЕОР терапию, более того вторая линия антиангиогенной терапии не всегда оказывалась эффективной [14, 65, 73, 230, 338]. Успехи, достигнутые за последние годы в исследованиях сигнальных путей, вовлекаемых в кровоснабжение опухоли, частично объясняют наблюдаемую картину. Необычайная сложность организации внутриклеточных коммуникативных систем, существование сигнального каскада объясняет многообразие клеточных реакций на сходные по природе стимулы или различные ответы на один и тот же стимул. Вычленение отдельного компонента (например, УЕвР, нейтрализирующими антителами) или даже локального участка сигнальной цепи (например, низкомолекулярными ингибиторами тирозинкиназы УЕОРЯ2) не может контролировать работу всей системы в совокупности. Становится очевидным, что микроциркуляция крови в агрессивных опухолях - это очень сложный процесс. Более того, в формировании сосудистого русла могут принимать участие мозаичные сосуды, кооптация сосудов, а также каналы, формированные ОК - ВМ [59, 134, 282].

Впервые о ВМ заговорили в самом конце 1999 года [196]. За прошедшие годы накоплен экспериментальный материал, указывающий, что способностью формировать васкулярные каналы обладают практически все высоко агрессивные опухоли [70]. Предполагается, что формирование сети каналов внутри опухоли может поддерживать гомеостаз и предотвратить ранний некроз внутри опухоли. Высокая статистическая корреляция между способностью опухоли к ВМ и частотой метастазирования подтверждает эту гипотезу [70, 282].

Наше внимание привлек тот факт, что из множества клеток опухоли в васкулогенную мимикрию вовлекается только небольшая популяция клеток, высоко агрессивные ОК, слабоагрессивные ОК не формируют васкулярных каналов. И в каждой серии новых экспериментов мы пытались ответить на вопрос, какими характеристиками должна быть наделена высоко агрессивная ОК, чтобы формировать каналы ВМ. Какие сигнальные пути задействованы при этом? Как отмечалось в «Обзоре литературы» предполагаются два возможных' сценария происхождения агрессивных ОК, способных формировать васкулярные каналы. Опухоль для выживания и прогрессии может индуцировать дифференцировку СКО в эндотелий подобный фенотип, позволяющей ей формировать васкулярные каналы, необходимые для доставки питания и, возможно, метастазирования. Второй вариант предполагает, что высоко агрессивные OK, способные формировать каналы ВМ, - это те OK, которые в процессе дедифференцировки потеряли ткане-специфичные функции и превратились в полипотентные клетки, экспрессирующие и маркеры СКО, и ЭК. Мы остановимся подробно на втором варианте происхождения OK, способных участвовать в формировании каналов ВМ. Необходимость такого подхода продиктована исследованиями самых последних лет. Концепция СКО предполагает, что только некоторые клетки опухоли могут давать начало опухолевому клону. Концепция СКО также предполагает, что СКО могут быть выделены из общей популяции стволовых клеток на основе их фенотипа. Так Stewart и соавт. из асцита больных раком яичника выделили популяцию клеток CD133(+) - фенотип, характерный для СКО - которая давала начало опухолевому клону [295]. Этими же авторами была выделена из того же асцита популяция CD133(-) клеток, которые также были способны инициировать опухоль. Полученные Stewart и соавт. результаты указывали на то, что, в инициации опухолевого клона участвуют не только СКО, но и низкодифференцированные OK с высоким инвазивным потенциалом, которые в процессе дедифференцировки потеряли ткане-специфичные функции и превратились в полипотентные клетки. Этими же качествами должна обладать и OK, способная формировать каналы ВМ. Нам кажется более вероятным происхождение OK, способной формировать СПС, из низкодифференцированной клетки и следующая часть этого раздела будет посвящена анализу появления такой клетки в опухоли и выявлению возможных мишеней, на которые можно воздействовать, чтобы остановить процесс ВМ.

Агрессивная OK редко возникает de novo. Как правило, этому процессу предшествует предраковые изменения, из которых с той или иной степенью вероятности может развиться рак. Сегодня различают две стадии этого процесса: инициацию и становление злокачественного фенотипа. В результате инициации клетка претерпевает определенные изменения, которых, однако, недостаточно для превращения ее в опухолевую клетку. Изменения на этой стадии носят обратимый характер. Нарушение же контроля нормального клеточного роста, дифференцировки и пролиферации и приводят, в конечном счете, к злокачественной трансформации клетки. Такое может происходить в результате инактивации генов-супрессоров и активации онкогенов [106]. Хотя вероятность возникновения в одной клетке нескольких генетических изменений повышается при нарушениях, ведущих к генетической нестабильности, для развития злокачественных опухолей необходимы дополнительные генетические изменения в соматических клетках.

Неконтролируемая пролиферация является необходимым компонентом процесса канцерогенеза. Она может быть результатом генетических изменений в клетке, но может быть связана с другими физиологическими или патологическими процессами и предшествовать изменению в геноме. Репликация ДНК в пролиферирующих клетках делает их более чувствительными к воздействиям, вызывающим повреждение их генома: значительно возрастает вероятность спонтанных мутаций. От успеха репаративных процессов и полноценности системы контроля за состоянием собственного генома зависит дальнейшая судьба клетки. На этом этапе возможны несколько сценариев:

1. либо клетка, восстановив повреждения, продолжит репродуктивный цикл;

2. либо происходит необратимый (по крайней мере, длительный) арест ее деления

3. либо активируется программа клеточной гибели с ее закономерным финалом.

Остановка клеточного деления, репарация повреждений и, в случае ее незавершенности, гибель характерны для нормальных клеток, а также для трансформированных клеток высокой степени дифференцировки.

Однако по мере прогрессии опухоли в некоторых ОК генетически заложенная программа гибели может ломаться. Такая поломка может явиться следствием дефицита ключевых исполнительных механизмов программированной гибели клетки,

- гиперэкспрессии или гиперфункции факторов системы выживания,

- несогласованность сигнальных путей гибели/выживания.

Клетка с поломанной или утраченной программой гибели перестает адекватно реагировать на наличие в ней повреждений и приобретает фенотип множественной лекарственной устойчивости.

В такой ситуации при индукции нерепарабельных повреждений в зависимости от уровня, на котором сигнальный путь заблокирован, механизм самоуничтожения клетки либо вовсе не может быть включен, либо не может быть доведен до конца - до формирования апоптических телец.

Если включившийся механизм программированной гибели клетки вызвал процесс деградации хроматина, а завершение программированной гибели клетки в силу каких-то причин невозможно, то клетка обречена на гибель с проявлениями некротического морфотипа (некрозоподобная программированная гибель или регулируемый некроз).

Если же формирования сигнала программированной гибели клетки не происходит вовсе, либо этот сигнал формируется, но не вызывает активации эффекторного звена программированной гибели клетки - активации каспаз, то дальнейшая судьба клетки может иметь два варианта развития:

1. Первый связан с необратимым или, по крайней мере, длительным арестом делящейся клетки в одной из фаз клеточного цикла. Такой исход с точки зрения химиотерапии онкологических заболеваний можно считать благоприятным, поскольку ОК, сохраняя жизнеспособность настолько, насколько это ей позволяет сумма внутриклеточных повреждений, тем не менее, утрачивает свою репродуктивную функцию. В такой ситуации в клинике мы наблюдаем стабилизацию опухолевого процесса.

2. Второй вариант связан с полным игнорированием клеткой-мишенью повреждений, в том числе генетических, в результате чего она не подвергается интерфазной гибели, а продолжает цикл деления. Мутации, возникшие в таких клетках, в последующих поколениях проявятся дестабилизацией генома и клональным расщеплением клеточной популяции. Если в таких клетках осуществляется ассиметричный митоз, в результате которого дочерние клетки оказываются генетически неравноценными, то судьба их потомков неодинакова. Неравномерное распределение генетического материала приведет к появлению дочерней клетки с недостаточным содержанием ДНК (гиподиплоидная) и клетки гипердиплоидной. Первая является неполноценной, а при значительной потере генетического материала -нежизнеспособной. Зато вторая имеет полный набор ДНК и еще некоторый ее излишек, который может никак не влиять на ее жизнеспособность и пролиферацию, но служит верным признаком происхождения будущего клона клеток из клетки с подавленной функцией генетического самоконтроля и программированной гибели. Появление анеуплоидии является прогностически неблагоприятным признаком опухолевого процесса любой локализации и свидетельствует о химио- и радиорезистентности.

Поиск адекватного критерия полноценности аппарата программированной гибели клетки ведется более десяти лет с использованием экспериментальных опухолевых моделей - клеточные линии различного гистогенеза и степени дифференцировки, генетически модифицированные клональные линии, лабораторные животные с искусственно активированными или нокаутными генами. Исследуется эта проблема и на клинически полученном материале опухолевой ткани -биоптат, хирургически удаленная опухоль, периферическая кровь и костный мозг онкогематологических больных [110]. В большинстве случаев проводят иммуногистохимический анализ уровня экспрессии и наличия мутаций гена р53, уровень экспрессии про- и анти-апоптических белков Bcl-2, Bcl-XL, Вах, Bad, Bak, наличие мембранных рецепторов смерти CD95 и TNFR-1. До сих пор не идентифицирован значимый маркер, свидетельствующий о способности ОК ответить на апоптогенный сигнал.

Репрессия или ликвидация ОК собственных апоптогенных сигнальных путей приводит к приобретению способности не самоликвидироваться в ответ на субнекротические повреждения. Таким образом, клетка ценой разрушения аппарата контроля и поддержания генетической стабильности приобретает селективное качество к неограниченной пролиферации: в дальнейшем клетки с повреждениями в молекуле ДНК будут не способны к самоликвидации и послужат основой для формирования полиморфной опухолевой популяции. В результате будут постоянно возникать и отбираться все более и более автономные и агрессивные субклоны. Неограниченная пролиферация этого клона и даст начало злокачественной опухолевой прогрессии. У такой опухоли будет понижена потребность во внешних сигналах для инициации и поддержания клеточной пролиферации, т. е. опухоль приобретет свойства самодостаточности в пролиферативных сигналах. Многие типы ОК способны размножаться в среде с 1% и даже 0.1% сыворотки. Это в десятки и сотни раз меньше, чем необходимо для стимуляции размножения нормальных клеток. Пониженная потребность в растворимых ростовых факторах может достигаться изменениями в системах внутриклеточной сигнализации, которые либо вызывают секрецию необходимых факторов роста самими трансформированными клетками, либо резко увеличивают количество рецепторов для необходимых факторов роста, либо запускают каскад событий, аналогичных тому, который запускается связыванием ростового фактора со своим рецептором.

Другими важными приобретенными свойствами являются пониженная чувствительность ОК к антипролиферативным сигналам, отсутствие репликативного старения, способность стимулировать ангиогенез секрецией УЕвР и других проангиогенных факторов [110]. В последние годы все больше публикаций появляется о роли воспаления в опухолевом процессе. Так, 40% опухолей имеют в патогенезе хроническое воспаление [280]. На стадии острого воспаления - образование свободных радикалов кислорода -преобладает цитотоксическое их действие. Мутагенное действие, играющее решающую роль в инициации процесса малигнизации, наблюдается при хронических воспалениях. Механизм этого явления остается неясным.

Меняются также и взаимодействия клетка - клетка и клетка -внеклеточный матрикс, и как результат этих событий происходят изменения в цитоскелете [31, 107, 120, 215]. Они проявляются в нарушении формирования сайтов фокальной адгезии и ослаблению прикрепления клеток к внеклеточному матриксу, ремоделирования актинового цитоскелета, что приводит к изменениям активности псевдоподий и подвижности клеток [110]. Необходимо подчеркнуть, что именно эти нарушения вместе со способностью ОК секретировать ММР предопределяют способность к инвазии - проникновению в окружающие здоровые ткани и сопряженную с ней способность к метастазированию - образованию отдаленных опухолевых очагов [293, 335]. Метастатическая клетка должна обладать локомоторным фенотипом, стимулировать ангиогенез опухоли, который облегчит пути ее передвижения из опухоли в отдаленные участки [21, 123, 220, 237]. Для такой клетки также характерна независимость от кооперации с другими клетками и с внеклеточным матриксом [31]. Для формированаия метастаза клетка должна проникнуть в глубину окружающей ткани, в том числе в кровеносные или лимфатические сосуды, выжить после попадания в кровеносное русло, выйти из сосуда, остаться живой и создать опухолевый клон в несвойственном для данного типа клеток микроокружении. Не останавливаясь в деталях на последовательных событиях, приводящих к возникновению и росту метастаза, отметим только, что метастазирование не есть простая миграция ОК неизвестно куда, а своеобразный хоуминг.

Полученные в последние годы данные указывают на то, что, по-видимому, в основе метастазирования лежат механизмы, сходными с теми, которые обеспечивают процессы морфогенеза в развивающемся эмбрионе с той лишь разницей, что в процессе эмбриогенеза при углублении дифференцировки они определяют интегрирующий характер роста, а при прогрессирующей дедифференцировке ОК - ведут к дезинтегрирующему росту [111, 209]. Таким образом, формирующаяся опухоль последовательно проходит через несколько этапов, различных по морфологическим характеристикам и длительности развития. Это появление клеток с повышенной пролиферативной активностью, гиперплазия ткани, утрата клетками тканевой специфичности, нарушение их дифференцировки и превращению их в полипотентные клетки, способные к инвазии и формированию отдаленных метастазов. Становится очевидным, что, ОК в ходе прогрессирования претерпевают определенную дедифференцировку, утрачивая в первую очередь те дифференцировочные белки, отсутствие которых дает клеткам селективное преимущество для «самодостаточности пролиферации». Моноклональная по своей природе, в процессе малигнизации опухоль с репрессированной функцией программированной гибели клетки приобретает все больший клеточный полиморфизм.

Анализ микрочипов, позволяющий получить информацию об изменении экспрессии нескольких тысяч генов, показал, что высоко агрессивные клетки меланомы, способные формировать СПС, по сравнению с низкоагрессивными характеризуются высоким уровнем экспрессии нескольких тканеспецифичных генов [24, 159, 270]. К ним относятся гены эндотелиальных, фибробластных, гемопоэтических, эпителиальных, мышечных и стволовых клеток. Высокая экспрессия характерна также для белков VEGF рецептор-лигандной системы, VEGF, VEGFR1, VEGFR2, Tie 1, Tie-2, EphA2, VE-кадгерина и ММР-2, которые необходимы клеткам меланомы для приобретения эндотелий подобных характеристик. С другой стороны, наблюдается также и повышенная экспрессия компонентов Notch, Nodal и Wnt сигнальных путей, активация которых показана при дифференцировке, и впоследствии, в васкуляризации эмбриона. Становится очевидным, что высоко агрессивные клетки меланомы подвергаются генетической реверсии, приобретая некоторые свойства ЭК, позволяющие им формировать васкулярные каналы, и некоторые эмбрионально-подобные свойства, что дает им возможность имитировать васкуляризацию эмбриона [344]. Способность к частичной трансдифференцировке в сочетании с высоким инвазивным а, следовательно, метастатическим потенциалом ряда клеток позволяет им формировать сеть каналов внутри опухоли, которая может частично компенсировать недостаточно быстрое развитие в ней кровеносной микроциркуляторной сети и создать условия для выживания и пролиферации клеток, предотвращая некроз внутри опухоли. Следует отметить, что не все высоко агрессивные OK формируют васкулярные каналы. Одним из важных выводов нашей работы является обнаружение факта активации на начальных этапах формирования СПС каспазы-3. Известно, что процессинг про-каспазы-3 в активную каспазу-3 приводит к деградации хромосомной ДНК. Ферментативная активность каспазы-3 приводит также к реорганизации цитоскелета и преобразованию клетки в апоптотические тельца. Таким образом, центральной компонентой в механизме осуществления клеточной гибели является каспаза-3.

Свидетельство того, что каспаза-3 не только убийца, содержится в целом ряде публикаций последних лет [274, 296]. Было показано, что каспаза-3 расщепляет ингибитор CDK, который в норме препятствует переходу клетки из фазы Gl в фазу S клеточного цикла. Образующиеся при протеолизе фрагменты этого белка имеют антиапоптотическую функцию. Таким образом, регуляция клеточного цикла митогенами контролируется каспазой-3, которая в данном случае выполняет антиапоптотическую функцию.

Капаза-3 участвует также в процессинге цитокинов. Синтезируемый клеткой в виде неактивной проформы интерлейкин-16 переходит в активную конформацию в результате ограниченного протеолиза, осуществляемого каспазой-3 [296]. Этот цитокин осуществляет кооперацию лимфоцитов, и, следовательно, активная каспаза-3 необходима для реализации межклеточной сигнализации лимфоцитов.

Важные факты о неапоптотической функции каспазы-3 получены при изучении дифференцировки клеток [54, 74, 292, 342]. Полученные нами данные о необходимости активации каспазы-3 в процессе формирования СПС также указывают на неапоптическую функцию каспазы-3. Сегодня у нас больше вопросов, чем ответов на вопрос о роли активной каспазы-3 в формировании СПС клетками меланомы. Одно остается бесспорным -прикрепление ОК к Матригелю активирует в них дифференцировочные сигналы, необходимые для частичной их трансдифференцировки в эндотелий подобные клетки. С другой стороны полученные нами результаты являются еще одним подтверждением тому, что каспаза-3 не только важнейший исполнитель клеточной гибели, но и плейотропный фермент, необходимый не только для гибели, но и для нормальной жизнедеятельности клетки, а катализируемые каспазой-3 реакции - как необходимые для поддержания клеточного гомеостаза.

Другой важной идентифицированный нами детерминантой ОК, способной формировать каналы ВМ, является высокий уровень АФК в ОК. Это тот чувствительный индикатор, который сигнализирует о способности ОК формировать каналы ВМ: АО (ресвератрол, ЕОСО, КАС и тролокс) в наших экспериментах снижали уровень АФК и полностью нивелировали способность клеток меланомы формировать СПС. Особенностью АФК является их способность практически мгновенно реагировать с молекулами, контактирующими с ними. К таким молекулам относятся белки, мембранные липиды, углеводы, нуклеиновые кислоты. В этом случае АФК выступают в качестве основных медиаторов клеточного повреждения. АФК обладают не только цитотоксическими свойствами, но и могут выступать в качестве вторичных мессенджеров, участвуя в поддержании физико-химических свойств биологических мембран, регуляции состояния внутриклеточных редокс систем, активности протеинкиназ и регуляции пролиферации, дифференцировки и апоптоза, а также ангиогенеза [187, 200, 280]. В организме нет специфических рецепторов, взаимодействующих с активными формами кислорода, но существует большой класс достаточно специфических реакций, в регуляции которых они участвуют. Это позволило ряду исследователей выступить с утверждением о том, что АФК являются специфическими регуляторами многих внутриклеточных реакций. Регулирующее влияние окислительного стресса на процессы апоптоза, воспаления, пролиферативно-клеточные реакции в настоящее время связываются с регуляцией генетических факторов транскрипции, таких как ядерный фактор kB (NF-kB) и АР-1 [152, 175, 181, 334]. Так например, ингибирование электронного транспорта в митохондриях, приводит к увеличению в них АФК и сопровождается увеличением активности NF-kB, ядерного транскрипционного фактора. NF-kB становится транскрипционно активным после того, как происходит опосредованная АФК деградация IkB, белка, находящегося в комплексе с NF-kB, и ингибирующего активность NF-kB.

Как отмечалось ранее, АФК способны также инициировать ангиогенез опухоли [200]. Молекулярные механизмы индукции ангиогенеза АФК недостаточно изучены. Однако накоплен достаточно большой объем исследований, указывающий на значительное блокирование кровоснабжения опухоли АО [4, 28, 145, 164, 308]. Так, ресвератрол, антиоксидант красного вина, вводимый животным вместе с питьевой водой, блокировал формирование кровеносных сосудов в модели стимуляции ангиогенеза в роговице мыши. Авторы объясняют этот эффект ингибированием VEGF и bFGF-рецептор-лигандного ответа. Аналогичная картина наблюдалась и при действии ресвератрола, выделенного из других растений, например из корней Polygonum cuspidatum [161]. Ресвератрол предотвращал опухолевый рост карциномы Льюиса мыши, метастазирование в легкие и ангиогенез.

Чай, также как и вода, является одним из самых потребляемых жидкостей в мире. Эпидемиологические исследования показывают, что те люди, которые употребляют большое количество зеленого чая, имеют более низкий риск развития некоторых типов рака [102]. Как отмечалось ранее, EGCG является основным активным компонентом зеленого чая. Экспериментальные исследования показывают, что потребление зеленого чая мышами значительно снижало ангиогенез опухоли [164]. Эффект этот достигался снижением уровня VEGF, фосфорилированием VE-кадхерина, что переводило его в неактивную форму, инактивацией некоторых транскриптационных факторов, таких как АР-1, NF-kB [145, 175, 308]. Также EGCG блокировал синтез металлопротеиназ, необходимых для миграции ЭК и инвазии ОК [145, 152]. В наших экспериментах все четыре использованных АО снижали уровень экспрессии VEGF, VEGFR1, VEGFR2, а также уровень активной каспазы-3. Полученные нами данные согласуются с литературными данными о роли ресвератрола и EGCG в снижении экспрессии VEGF в ЭК [4, 10, 28] и указывают на то, что в ОК, участвующих в формировании СПС, активируются те же сигнальные пути, что и в ЭК в ответ на повышенный уровень АФК. Когда мы начинали свою работу о роли компонента ВМ в прогрессии злокачественных новообразованиях, идея разрушения каналов ВМ казалась нам практически не реализируемой: каналы ВМ формируют метастатические клетки с высоким инвазивным потенциалом. Такие клетки, как правило, резистентны к радио- и химиотерапии. Снижение плотности каналов ВМ в экспериментальной опухоли в ответ на ресвератрол - было действительно неожиданным успехом. Таким образом, АО оказались способны модулировать кровоснабжение опухоли, снижая как ангиогенез опухоли, так и разрушая каналы ВМ.

Мы показали также, что формирование каналов васкулогенной мимикрии зависит от Са2+-чувствительной перестройки актинового цитоскелета, включая как изменение формы клетки, так и создание адгезивных сайтов, необходимых для подвижности клетки, ее удлинения, связывания с внеклеточным матриксом, формирования стабильных контактов между клетками. Конечно же, роль каждого из перечисленных сигнальных путей требует дальнейшего изучения. Но тот факт, что 4

Са /интегриновый сигнальный путь контролирует ВМ, предполагает, что связывание внутриклеточного Са2+ может быть терапевтически значимым [149,214, 226].

Интересным оказался тот факт, что ВМ представлена неодинаково в разных типах опухолей. Так, в меланоме 60-62% кровоснабжения осуществляется через каналы ВМ; при саркоме мягких тканей - 35-40%; при раке почки - 30-35%, при раке яичника, раке молочной железы - 15-18%; при раке толстой кишки - 10-12% (наши неопубликованные данные). Следует отметить, что сосудистая система опухоли разительно отличается от сосудистого русла здоровой ткани: сосуды в опухоли сильно расширены или еле заметны, в отличие от нормальных сосудов [223]. Эти сосуды не всегда соединены друг с другом, плохо стабилизированы перицитами, что повышает риск кровотечения. Хаотичная структура также замедляет кровоток. На фоне крайнего несовершенства циркуляции крови в опухоли каналы ВМ в количестве 10-12% вряд ли что существенно изменят, однако 60-62% явно могут иметь существенное значение.

Пожалуй, самым важным выводом проделанной нами работы является экспериментальное подтверждение не раз высказанной гипотезы, что в условиях блокирования ангиогенеза опухоль прибегает к альтернативной, не зависящей от эндотелия васкуляризации [14, 73, 230, 346].

Современная антиангиогенная терапия направлена на снижение пролиферации ЭК или их апоптоз [242, 278]. Однако когда плотность кровеносных сосудов снижается в результате антиангиогенной терапии, в этих областях опухоли усиливается гипоксия, и как было показано недавно, гипоксия является тем необходимым звеном, который стимулирует формирование каналов ВМ для компенсации недостатка кислорода и питания [302]. Таким образом, антиангиогенная терапия непреднамеренно способствует активации процесса формирования ВМ. Недавно было высказано предположение, что первые кровеносные сосуды в метастазе формируются из ОК со случайным вкраплением ЭК [68], и первые кровеносные сосуды в метастазе мозаичные или это каналы ВМ. Классический ангиогенез появляется на более поздних стадиях роста опухоли. Поэтому опухоль, способная формировать каналы ВМ, имеет больше шансов выжить.

Полученные нами данные об участии сигнального пути Notch в ВМ при меланоме указывают на то, что при недостатке кровоснабжении в ответ на aHTH-Notch-TepanHio, в опухоли стимулируется формирование васкулярной сети ОК. Васкулярные каналы, сформированные ОК, становятся более разветвленными и увеличиваются в диаметре в условиях анти- Notch терапии. Весьма интересным оказался тот факт, что в тех областях опухоли, где наблюдалась высокая плотность каналов ВМ, отсутствовал некроз, что несомненно подтверждает функциональную активность каналов ВМ и их способность поддерживать рост опухоли. Наши результаты также подтверждают широко обсуждаемый в литературе феномен, что антиангиогенная терапия опухоли, хотя изначально и приводит к снижению размеров опухоли, но переводит опухоль в более агрессивную фазу роста, которая характеризуется увеличением инвазии и метастазирования [65]. Мы показали, что экспрессия ММР-2 и VEGFR1 - известных маркеров метастазирования - значительно повышалась в ксенографтах мыши в ответ на DAPT. С другой стороны, ММР-2 и VEGFR1 являются также медиаторами ВМ. Таким образом, блокирование сигнального пути Notch, который как известно, приводит к формированию функционально неактивных кровеносных сосудов, активирует формирование каналов ВМ и уже ВМ позволяет опухоли выжить, предоставляя питание и кислород в участки опухоли с выраженной гипоксией.

В настоящее время проводится II фаза клинических испытаний антиангиогенного действия ингибитора у-секретазы [188]. Скорей всего результаты будут не оптимистичными. Конечно же, после первой линии терапии будет отмечено снижение роста опухоли. Но более реалистичным кажется другой сценарий: в условиях анти-Notch терапии в опухоли будет активирована альтернативная, не зависящая от эндотелия система кровоснабжения опухоли - ВМ, что и даст опухоли шанс на выживание. Более того, опухоль после анти-Notch терапии будет характеризоваться более агрессивным фенотипом, и, как следствие, станет резистентной к химиотерапии. Для повышения эффективности лечения злокачественных новообразований необходимым становится комбинирование антиангиогенных препаратов с ингибиторами ВМ. В пользу такого нашего вывода говорят и недавно завершенные клинические испытания лечения рака молочной железы низкомолекулярным ингибитором тирозинкиназы -сунитинибом [117, 328]. Антиангиогенная терапия при раке молочной железы приводила к увеличению субпопуляции СКО, то есть опухоль переходила в более агрессивный фенотип. Еще одним аргументом в пользу комбинирования антиангиогенной и анти-ВМ терапий являются недавно опубликованные данные о том, что ЭК опухоли отличаются от ЭК здоровой ткани. Так анализ кариотипа опухолевых ЭК показал, что для ЭК опухоли характерна анеуплоидия. Выявлены также хромосомальные транслокации и даже потеря некоторых хромосом в ЭК опухоли [12, 128, 299]. Эти данные существенно меняют наши предтавления о геноме ЭК: до сих пор в основе васкуляризации опухоли лежала концепция о том, что ЭК - генетически стабильная клетка, в отличие от ОК, которая характеризуется нестабильностью генома.

В наших экспериментах мы тремя различными способами антиоксидантами, хелаторами Са и ингибитором РКС селективно ингибировали ВМ в экспериментальной модели меланомы. Во всех трех случаях ни объем, ни вес опухоли не менялся существенно на фоне достоверного уменьшения плотности каналов ВМ. Однако количество метастазов в легкие снижалось. Мы затрудняемся как-либо интерпретировать эти данные. Сегодня никто уже не сомневается, что именно наличие метастазов делает полное излечение от злокачественной опухоли крайне трудным. Идентификация маркеров, тесно связанных с метастатическим потенциалом каждой отдельной опухоли, необходима не только для рационального лечения больных раком, но и для индивидуализации лечения ("the right drug for right patient").

В заключение, мы приводим схему сигнальных путей, задействованных в становлении ВМ (Рис. 42). Красным цветом мы отметили собственные результаты.

Рис. 42. Гипотетическая модель сигнальных путей, вовлекаемых в ВМ

ВМ не принята сегодня всеми как дополнительная система кровоснабжения опухоли [60, 84, 89, 262, 285]. То есть сам факт наличия каналов, сформированных ОК, и ограниченных базальной мембраной в злокачественных опухолях не отрицается, но подвергается сомнению вклад такой сети каналов в кровоснабжение опухоли. При этом все исследователи соглашаются с тем, что появление в опухоли ВМ коррелирует с повышенным риском метастазирования и короткой выживаемостью. И это действительно так. Накопленный на сегодняшний день экспериментальный материал позволяет поднять вопрос о рассмотрении наличия ВМ в качестве неблагоприятного фактора прогноза течения заболевания.

Новые характеристики злокачественных опухолей имеют фундаментальное значение и определяют создание новых терапевтических подходов к лечению злокачественных опухолей на рациональной основе. Результаты данной работы вносят определенный вклад в развитие представлений об особенностях формирования каналов ВМ в меланоме человека. Формирование каналов ВМ - сложный биологический процесс, в котором задействованы несколько сигнальных путей. Не определен ее вклад в общую циркуляцию крови в опухоли. Бесспорным остается то, что наличие ВМ может иметь неоценимое значение для опухолей солидного строения, растущих массивными опухолевыми узлами с небольшим количеством васкулярной стромы. Изучение молекулярных механизмов формирования каналов ВМ позволит не только лучше понять взаимодействие между метастатической клеткой, ее микроокружением и переключением опухоли в агрессивную форму, но и предложить новый подход к диагностике и лечению злокачественных заболеваний. И возможно, когда-нибудь мы сможем ответить на вопрос - является ли рак всего лишь патологическим процессом самоуничтожения собственными автономизирующимися структурами организма-хозяина или вариантом развития, который может быть направлен в совершенно иное русло.

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Вартанян, Амалия Арташевна, 2012 год

1. Григорьева, И.Н. Особенности васкуляризации меланомы кожи человека. / И.Н. Григорьева, Я.В. Вишневская, М.Е. Абрамов, Т.К. Харатишвили, А.Ю. Барышников, Е.В. Степанова //Забайкальский медицинский вестник.—2011.—Т. 2.—С. 12-18.

2. Михайлова И.Н. Меланомные клеточные линии как основа для создания противоопухолевых вакцин. / И.Н. Михайлова, М.И. Лукашина, А.Ю. Барышников, Л.Ф. Морозова, С.Л. Киселев, Г.П. Георгиев //Вестник Росс Акад Наук.—2005.—Т. 7.—С. 37-40.

3. Abbot D.E. The epigenetic influence of tumor and embryonic microenvironment: how different are they? / D.E. Abbot, C.M. Bailey,L.M. Postovit, E.A. Seftor, N.V. Margaryan, R.E. Seftor, M.J Hendrix. // Cancer Microenviron.—2008.—Vol. 1 .—P. 13-21.

4. Aggarwal, B.B. Role of resveratrol in prevention and therapy of cancer: preclinical and clinical studies. / B.B. Aggarwal, A. Bhardwaj, R.S. Aggarwal. // Anticancer Res.—2004,—Vol. 24.—P.2783-2788.

5. Alitalo, K. Molecular mechanisms of lymphangiogenesis in health and disease. / K. Alitalo, P. Carmeliet. //Cancer Cell.—2002.—Vol. 1.—P.219-227.

6. Allamdari, FI. Angiogenesis and other markers for prediction of survival in metastatic renal cell carcinoma. / F.I. Allamdari, T. Rasmuson, K. Grankvist, O. Lungberg. // Scand J Urol Nephrol.—2007,— vol. 41(1).— P. 5-9.

7. Allenspach, E. J. Notch signaling in cancer. / E.J. Allenspach, I. Maillard, J.C. Aster, W.S. Pear. // Cancer Biol. Ther. —2002,—Vol. 1,—P. 466-476.

8. Alvarez-Breckenridge, C.A. PTEN regulates phospholipase D and phospholipase C. / C.A. Alvarez-Breckenridge, K.A. Waite, C. Eng. // Hum Mol Genet.—2007,—Vol.7.—P. 1157-1163.

9. Arakaki, N. Induction of G1 cell cycle arrest in human umbilical vein endothelial cells by flavone's inhibition of the extracellular signal regulated kinase cascade. / N. Arakaki, A. Toyofuku, Y. Emoto. // Biochem Cell Biol.—2004,—Vol. 82.—P. 583-588.

10. Asahara, T. Isolation of putative progenitor endothelial cells for angiogenesis. / T. Asahara, T. Murohara, A. Sullivan, M. Silver, T. Li, B. Witzenbichler, G. Schatteman, J.M. Isner. //Science.—1997.—Vol. 275.—P. 964-967.

11. Aster, J.C. Notch signalling in T-cell lymphoblastic leukaemia/lymphoma and other haematological malignancies. / J.C. Aster, S.A. Blacklow, W.S. Pear. // J Pathol.—2011.—Vol. 223(2).—P. 262-273.

12. Autiero, M. Role of P1GF in the intermolecular cross-talk between the VEGF receptors Fltl and Flkl. / M. Autiero, J. Waltenberger, D. Communi, A. Kranz, L. Moons, D. Lambrechts. //Nat Med.—2003.—Vol. 9(7).—P. 936-943.

13. Azam, F. Mechanism of resistance to antiangiogenesis therapy. / F. Azam, S. Mehta, A.L. Harris. // Eur J Cancer.— 2010.—Vol. 46(8).—P. 13231332.

14. Baatout, S. Endothelial differentiation using Matrigel // Anticancer Res. — 1997.—Vol. 17.—P. 451 -455.

15. Basu, G.D. A novel role of cyclooxygenase-2 in regulating vascular channel formation in human breast cancer cells. / G.D. Basu, W.S. Liang, D.A. Stephan, L.T. Wegener, B.A. Pockaj, P.A. Mukherjee. // Breast Cancer Res.—2006.—Vol. 8.—P. R69.

16. Basu, G.D. Mechanisms underlying the growth inhibitory effect of the cyclooxygenase-2 inhibitor-celecox-ib in human breast cancer. /"GrD.^Basuy

17. B. Pathangey, T.L. Tinder, S.J. Gendler, P.A. Mukherjee. // Breast Cancer Res.—2005.—Vol. 7.—P. R422-R435.

18. Becker, MR. COX-2 expression in malignant melanoma: a novel prognostic marker? / M.R. Becker, M.D. Siegelin, L. Schadlich, T. Waterboer, L. Gismann.//Melanoma Res.—2009.—Vol. 19(1).—P. 8-16.

19. Beese, M. Effect of cAMP derivates on assembly and maintenance of tight junctions in HUVEC. M. Beese, K. Wyss, M. Haubitz, I. Kirsch. // BMC Cell Biol.—.2010,—Vol. 11.—P. 68-75.

20. Benedito, R. Expression of D114 during mouse embryogenesis suggests multiple developmental roles. / R. Benedito, A. Duarte. // Gene Expr Patterns.—2005,—Vol. 5(6).—P. 750-755.

21. Bissell MJ. Tumor plasticity allows vasculogenic mimicry, a novel form of angiogenic switch: A rose by any other name? Commentary. // Am J Pathol.—1999.—Vol. 155.—P. 675-679.

22. Bissell, M. J. Putting tumours in context. / M.J. Bissell, D. Radisky. //Nature Rev. Cancer.—2001.—Vol. 1,—P.46-54.

23. Bittner, M. Molecular classification of cutaneous malignant melanoma by gene expression profiling. / M. Bittner, P. Meltzer, Y. Chen, Y. Jiang, E. Seftor, M.J. Hendrix, M. Radmacher, R. Simon, V. Sondac. // Nature.— 2000.—vol. 406.—P. 536-540.

24. Bos, J.L. Epac proteins: multi-purpose cAMP targets. // Trends Biochem Sci.—2006.—Vol. 31.—P. 680-685.

25. Bosserhoff, AK. Novel biomarkers in malignant melanoma. // Clin Chim Acta.—2006.—Vol. 367(1-2).—P. 28-35.

26. Bouck, N. How tumors become angiogenic. / N. Bouck, V. Stellmach, S.C. Hsu. // Adv Cancer Res.—1996.—Vol. 69.—P. 135-174.

27. Brakenhielm, E. Suppression of angiogenesis, tumor growth, and wound healing by resveratrol, a natural compound from red wine and grapes/ E. Brakenhielm, R.Cao, Y.Cao. // FASEB J.—2001,—Vol. 15.—P. 1798-1800.

28. Brantley, D.M. EphA receptors inhibit tumor angiogenesis and progression in vivo. / D.M. Brantley, M. Cheng, E.J. Thompson, Q. Lin, R.A. Brekken, P.E. Thoppe, R.S. Muraoka, D. Jackson. // Oncogene.—2002,—Vol. 21 — P. 7011-7026.

29. Brennan, G. Nodal activity in node governs left-right asymmetry. / G. Brennan, D.P. Norris, E.G. Robertson. // Genes Dev.—2002.—Vol. 6.—P. 2339-2344.

30. Brown, RC. Calcium modulation of adherence and tight junction function. / R.C. Brown, T.P. Davis. // Stroke.—2002,—Vol. 33. —P. 1706-1711.

31. Calderwood, D.A. / Integrin activation. // J Cell Sci.—2004—Vol. 117.—P. 657-666.

32. Campbell, I.D. / Studies of focal adhesion assembly. //Biocem Soc Trans. —2008.—Vol. 36(Pt2).—P. 263-265.

33. Cao, Y. / Positive and negative modulation of angiogenesis by VEGFR1 ligands. // Sci Signal. 2009.—Vol. 2(59).—P. 18-27.

34. Carmeliet, P. Transgenic mouse models in angiogenesis and cardiovascular disease. / P. Carmeliet, D. Collen. // J Pathol.—2000.—Vol. 190.—P. 387405.

35. Carmeliet, P. Angiogenesis in cancer and other diseases. / P. Carmeliet, R.K. Jain. //Nature.—2000,—vol. 407,—P. 249-255.

36. Carmeliet, P. Mechanisms of angiogenesis and arteriogenesis. // Nat Med.— 2000.—Vol. 6,—P. 389-395.

37. Carnochan, P. The vascularity of cutaneous melanoma: a quantitative histological study of lesions 0.85-1.25 mm in thickness. / P. Carnochan, J.C.

38. Briggs, G. Westbury, A.J.S. Davies. // Br J Cancer—1991.—Vol. 64.—P. 102-107.

39. Cebe-Suarez, S. The role of VEGF receptors in angiogenesis; complex partnership. / S. Cebe-Suarez, A. Zehnder-Jallman, K. Ballmer-Hofer. // Cell Mol Life Sci.—2006.—Vol. 63,—P. 601-615.

40. Chang, Y.S. Mosaic blood vessels in tumors: frequency of cancer cells in contact with flowing blood. / Y.S. Chang, E. diTomaso, D.M. McDonald, R. Jones, R.K. Jain, L.L. Munn. // Proc. Natl. Acad. Sci USA—2000.—"Vol. 97(26).—P. 4608-4613.

41. Chang, C.J. Oncogene signal transduction inhibitors from medicinal plants /

42. C.J. Chang, C.L. Ashendel, R.L. Geahlen. // Anticancer Res.—1995.—Vol. 15.—P .1740-1741.

43. Chen, Y. PI3K: A potential target for cancer. / Y. Chen, B.C. Wang, Y.J. Xiao. //J Cell Physiol.—2012.—Vol. 227(7).—P. 2818-2821

44. Cheng, H. Calcium sparks. / H. Cheng, W.J. Lederer. // Physiol Rev. — 2008.—Vol. 88.—P. 1491-1545.

45. Cheng, H. Uveal melanoma cells staining for CD34 and assessment of tumor vascularity. / H. Cheng, W.J. Lederer. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci.— 2002.—Vol. 43.—P. 2533-2539.

46. Clarijs, R. Presence of a fluid-conducting meshwork in xenografted cutaneous and primary human uveal melanoma. / R. Clarijs, I. Otte-Holler,

47. D.J. Ruiter, R.W. de Waal. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci.—2002.—Vol. 43,—P. 912-918.

48. Clarijs, R. Lack of lymphangiogenesis despite coexpression of VEGF-C and its receptor Flt-4 in uveal melanoma. / R. Clarijs, L. Schalkwijk, D. Ruiter, R.M. de Waal. // W Invest.Ophthalmol. Vis. Sci.—2001.—Vol. 42,—P. 1422-1428.

49. Colognato, H. Form and function: the laminin family of heterotrimers. / H. Colognato, P.D. Yurchenco. // Dev. Dynamics.—2000,—Vol. 218,—P. 213-234.

50. Cristofaro, B. Possible novel targets for theraupetic angiogenesis. / B. Cristofaro, C. Emanueli. Curr Opin Pharmacol.—2009,—Vol. 9(2).—P. 102-108.

51. Crouch, S. HGF and ligation of alphavbeta5 integrin induce a novel, cancer cell-specific gene expression required for cell scattering. / S. Crouch, C.S. Spidel, J.S. Lindsey. // Exp Cell Res.—2004.—Vol. 292.—P. 274-287.

52. Dark, G.G. Combretastatin A-4, an agent that displays potent and selective toxicity toward tumor vasculature. / G.G. Dark, S.A. Hill, V.E. Prise. // Cancer Res.—1997.—Vol. 57.—P. 1829-1834.

53. David, E. Pathology of Melanoma. // Clinical Cancer Research.—2006.— Vol. 12.—P. 2308-2326.

54. Davis, S. Isolation of angiopoietin-1, a ligand for the TIE2 receptor, by secretion-trap expression cloning. / S. Davis, T.H. Aldrich, P.F. Jones. // Cell.—1996.—Vol. 87,—P. 1161-1169.

55. De Botton, S. Platelet formation is the consenquence of caspase activation within megakaryocytes. / S. De Botton, S. Sabri, E. Daugas, Y. Zermati, J.E. Guddotri, O. Hermine. Blood.—2002.—Vol. 100.—P. 1310-1312.

56. De, S. VEGF-integrin interplay controls tumor growth and vascularization. / S. De, S. Razorenova, N.P. McCabe, T. O'Tode, T. O'Toole, J. Qin, T.V. Byzova. // Proc Natl Acad Sci USA.—2005,—Vol. 102(21).—P.7589-7594.

57. Disatnik, M.H. Integrin-mediated muscle cell spreading. The role of protein kinase C in outside-in and inside-out signaling and evidence of integrin cross-talk. / M.H. Disatnik, T.A. Rando. // J Biol. Chem.—-1999—Vol. 274.—P. 32486-32492.

58. Dome, B. Vascularization of cutaneous melanoma involves vessel co-option and has clinical significance. / B. Dome, S. Paku, B. Somlai, J. Timar. // J.Pathol.—2002.—Vol. 197.—P. 355-362.

59. Donald, M. Vasculogenic Mimicry: How Convincing, How Novel, and How Significant? / M. Donald, M. McDonald, L. Munn, R.K. Jain. // Am. J Pathol.—2000.—Vol. 156(2)—P. 383-388.

60. Donovan, D. Comparison of three in vivo human angiogenesis assays with capillaries formed in vitvo. / D. Donovan, N.J. Brown, E.T. Bishop, C.E. Lewis. //Angiogenesis.—2001 —Vol. 4,—P. 113-121.

61. Dummer, R. Resistance patterns with tyrosine kinase inhibitors in melanoma: new insights. / R. Dummer, K.T. Flaherty. // Curr Opin Oncol.— 2012.—Vol. 24(2).—P. 150-154.

62. Dvorak, H.F. Vascular permeability factor/vascular endothelial growth factor, microvascular hyperpermeability, and angiogenesis. / H.F. Dvorak, L.F. Brown, M. Detmar, A.M. Dvorak AM. // Am J Pathol.—1995,—Vol. 146.—P. 1029-1039.

63. Easty, D. J. Up-regulation of ephrin-Al during melanoma progression. / L.W. Easty, S.P. Hill, M.Y. Hsu, M.E. Fallowfield, V.A. Florenes. // Int. J. Cancer.—1999.—Vol. 84.—P. 494-501.

64. Ebos, J.M. Accelerated metastasis after short-term treatment with a potent inhibitor of tumor angiogenesis. / J.M. Ebos, C.R. Lee, W. Cruz-Munoz,

65. G.A. Bjarnason, J.G. Christensen, R.S. Kerbel. // Cancer Cell—2009—Vol. 15.—P. 232-239.

66. Eiken, H.M. Dynamics of endothelial cell behaviour in sprouting angiogenesis. / H.M. Eiken, R.M. Adams RM. // Curr Opin Cell Biol.— 2010.—Vol. 22(5).—P. 617-625.

67. Ellisen, L. W. TAN-1, the human homolog of the Drosophila Notch gene, is broken by chromosomal translocations in T lymphoblastic neoplasms. / L.W. Ellisen, J. Bird, D.C. West, A.L. Soreng, S.D. Smith, J. Sklar. // Cell.—1991.—Vol. 66.—P. 649-661.

68. Elzarrad, K. Early incorporated endothelal cells as origin of metastatic tumor vasculogenesis. / K. Elzarrad, A. Haroon, D. Reed, A.B. Al-Meidi. // Clin Exp Metastasis.—2009.—Vol. 26(6).—P. 589-98.

69. Fallowfield, M.E. Cook MG: The vascularity of primary cutaneous melanoma. / M.E. Fallowfield, M.G. Cook. // J Pathol.—1991,—Vol. 164.— P. 241-244.

70. Fan, Y.Z. Molecular regulation of vasculogenic mimicry in tumours and potential tumor-target therapy. / Y.Z. Fan, W. Sun. // World J Gastrointest Surg.—2010.—Vol. 2(4).—P. 117-124.

71. Fassina, G. Mechanisms of inhibition of tumor angiogenesis and vascular tumor growth by epigallocatechin-3-gallate. // Clin Cancer Res.—2004.— Vol. 10.—P. 4865-4873.

72. Favier, J. Angiogenesis and vascular architecture in pheochromocytomas: distinctive traits in malignant tumors. / J. Favier, P.F. Plouin, P. Corvol, J. Gasc.//Am. J. Pathol.—2002.—Vol. 161.—P. 1235-1246.

73. Feige, J.J. Tumour angiogenesis: recent progress and remaining challenges. // Bull Cancer.—2010.—Vol. 97(11).—P. 1305-1310.

74. Fernando, P. Caspase-3 activity is required for skeletal muscle differentiation. / P. Fernando, J.F. Kelly, K. Balazsi, R.S. Slack, L.A. Megeney. Proc Natl Acad Sci USA—2002.—"Vol. 99.—P. 11025-11030.

75. Ferrara, N. The biology of vascular endothelial growth factor. / N. Ferrara, T. Davis-Smyth. // Endocr Rev.—1997.—Vol. 18.—P. 4-25.

76. Ferrara, N. Pituitary follicular cells secrete a novel heparin-binding growth factor specific for vascular endothelial cells. / N. Ferrara, W.J. Henzel. // J.Biochem Biophys Res Commun.—1989.—Vol. 161.—P. 851-858.

77. Ferrara, N. The\ biology of VEGF and its receptors. / N. Ferrara, H.P. Gerber, J. LeCounter. //Nat Med.—2003,—Vol. 9,—P. 669-676.

78. Folberg, R. Fineneedle aspirates of uveal melanomas and prognosis. / R. Folberg, J.J. Augsburger, J.W. Gamel, J.A. Shields, W.R. Lang. // Am J Ophthalmol.—2000.—Vol. 100.—P. 654-657.

79. Folberg, R. Vasculogenic mimicry and tumor angiogenesis. / R. Folberg, M.J. Hendrix, A.J. Maniotis. // Am J Pathol.—2000.—Vol. 156.—P. 361381.

80. Folberg, R. Vasculogenic mimicry. / R. Folberg, A.J. Maniotis. Apmis.— 2004.—Vol. 12,—P. 508-525.

81. Folberg, R. The microcirculation of choroidal and ciliary body melanomas. / R. Folberg, M. Mehaffey, L.M. Gardner, M. Meyer, V. Rummelt, J. Pe'er. // Eye.—1997.—Vol. 11.—P. 227-238.

82. Folberg, R. Tumor Cell Plasticity in Uveal Melanoma. /R. Folberg, R. Seftor, M.J. Hendrix.//Am J Pathol.-2006,-Vol. 169,—P. 1376-1389.

83. Folberg, R: Discussion of paper by Foss et al. Br J Ophthalmol.—1997.— Vol. 81.—P. 247-248.

84. Folberg, R. Tumor progression in ocular melanomas. // J Invest Dermatol. —1993, —Vol. 100.—P. 326S-331S

85. Folberg, R. The prognostic value of tumor blood vessel morphology in primary uveal melanoma. / R. Folberg, V. Rummelt, R. Parys-Van Ginderdeuren, T. Hwang, R.F. Woolson, L.M. Gruman. //Ophthalmology.— 1993.—Vol. 100.—P. 1389-1398.

86. Folkman, J. Blood vessel formation: what is its molecular basis? / J. Folkman, P.A. D'Amore. //.Cell.— 1996.—Vol. 87.—P. 1153-1155.

87. Folkman, J. Long-term culture of capillary endothelial cells. / J. Folkman, C.C. Haudenschild, B.R. Zetter.Proc Natl Acad Sci USA.—1979.—Vol. 76. P.—5217-5221.

88. Foss, A.E. Reassessment of the PAS patterns in uveal melanoma: reply. / A.E. Foss, I.A. Cree. // Br J Ophthalmol.—1998.—Vol. 82.—P. 101-102.

89. Foss, A.J.E. Microvessel count predicts survival in uveal melanoma. / A.J.E. Foss, R.A. Alexander, L.W. Jefferies, J.L. Hungerford, A.L. Harris, S. Lightman. // Cancer Res.—1996.—Vol. 56.—P. 2900-2903.

90. Frank, N.Y. VEGFR1 expressed by malignant melanoma-initiating cells is required for tumor growth. / N.Y. Frank, T. Schatton, S. Kim, Q. Zhan, B.J. Wilson, J. Ma J.//Cancer Res.—2011.—Vol. 71(4).—P. 1474-85

91. Fukumura, D. Tumor induction of VEGF promotes activity in stromal cells. / D. Fukumura, R. Xavier, T. Sugiura, Y. Chen, E.C. Park, N.F. Lu, M. Selig, G. Nielsen, T. Taksir, R.K. Jain, B. Seed. // Cell.—1998.—Vol. 94,— P. 715-725.

92. Garber, K. Angiogenesis inhibitors suffer new setback. // Nature Biotech.— 2002.—Vol. 20,—P. 1067-1068.

93. Gavin, P. Mig-7 Linked to Vasculogenic Mimicry. / P. Gavin, S. Robertson. //Am J Pathol.—2007,—Vol. 170(5).—P. 1454- 1457.

94. George, E. Biosynthesis, Remodeling, and Functions During Vascular Morphogenesis and Neovessel Stabilization. Endothelial Extracellular Matrix. / E. George, P. Davis, R. Donald, M. Senger. // Circulation Research. —2005.—Vol. 97.—P. 1093-1107.

95. George, S. Biomarkers in clear cell renal cell carcinoma. / S. George, R.M. Bukowski. // Expert Rev Anticancer Ther—2007.—Vol. 7(12).—P. 17371747.

96. Gerger, A. Molecular predictors of response to antiangiogenesis therapies. / A. Gerger, M. LaBonte, H.L. Lenz. // Cancer J.—2011.—Vol. 17(2).—P. 134-141.

97. Ghafar, M.A. Acute hypoxia increases the aggressive characteristics and survival properties of prostate cancer cells. / M.A. Ghafar, A.G. Anastiadis, M.W. Chen, M. Burchardt, L.E. Olsson, M.C. Benson, R. Buttyan. // Prostate.— 2003,—Vol. 54.—P. 58-67.

98. Giannelli, G. Induction of cell migration by matrix metalloprotease-2 cleavage of laminin-5. / G. Giannelli, J. Falk-Marzillier, O. Schiraldi, W.G. Stetler-Stevenson, V. Quaranta. // Science.—1997.—Vol. 277—P. 225228.

99. Gimotty, P.A. The biologic and prognostic significance of dermal Ki67 expression, mitoses and tumorigenicity in thin invasive cutaneous melanoma. / P.A. Gimotty, P.A. Van Belle, D.E. Elder. // J Clin Oncol.— 2005,—Vol. 23.—P. 8065-75.

100. Graham, C.H. Extent of vascularization as a prognostic indicator in thin (0.76 mm) malignant melanomas. / C.H. Graham, J. Rivers, R.S. Kerbel, K.S. Stankiewicz, W.L. White. // Am J Pathol.—1994.—Vol. 145.—P. 510-514.

101. Greenwald, P. Clinical trials in cancer prevention: current results and perspectives for the future / P. Greenwald // J Nutr.—2004.—Vol. 134.—P. 3507S-3512S.

102. Gridley T. Notch signalling in the vasculature. // Curr Top Dev Biol. —2010.—Vol. 92.—P. 277-309.

103. Gridley, T. Notch signaling during vascular development. Proc. Natl Acad. Sci. USA.—2001.—Vol. 98,—P. 10733-10738.

104. Gross, J.L. Increased capillary endothelial cell protease activity in response to angiogenic stimuli in vitro. / J.L. Gross, D. Moscatelli, D.B. Rifkin.// Proc Natl Acad Sci USA.—1983.—Vol. 80.—P. 2623-2627.

105. Gullino PM. Angiogenesis and oncogenesis. // J Natl Cancer Inst.— 1978.—Vol. 61.—P. 639-643.

106. Gumbiner, B. M. Cell adhesion: the molecular basis of tissue architecture and morphogenesis. // Cell.—1996.—Vol. 4.—P. 345-357.

107. Guo, S. Role of Notch and its oncogenic signaling crosstalk in breast cancer. / S. Guo, M. Liu, R.P. Gouzalez-Perez. Biochem Biophys Acta.— 2011.—Vol. 1815(2).—197-213.

108. Hanahan, D. The hallmarks of cancer. / D. Hanahan, R.A. Weinberg. //Cell.—2000.—Vol. 100,—P. 57-70.

109. Hashizuma, H. Openings between defective endothelial cells explain tumor vessel leakiness. / H. Hasizuma, P. Baluk, S. Morikawa, J.W. Mclean, G. Thurson, S. Roberge, R.K. Jain, D.M. McDonald. // Am. J.Pathol.— 2000.—Vol. 156.—P. 1363-1380.

110. Hatson, T.E. Renal cell cancer. / T.E. Hatson, R.A. Figlin. // Cancer.—2007.—Vol. 13(5).—P. 282-286.

111. Hattori, H. Placental growth factor reconstitutes hematopoiesis by recruiting VEGFR1+ stem cells from bone marrow microenvironment. / H. Hattori, B. Heissing, Y. Wu, S. Dias, R. Tejada, B. Ferris, Z. Zhu, P.

112. Bohlen, Z. Werb, R.G. Crystal. // Nature Med.—2002.—Vol. 8.—P. 841— 849.

113. Hauser, S. A heparin-binding form of placenta growth factor (P1GF) is expressed in human umbilical vein endothelial cells and in placenta. / S. Hauser, H.A. Weich. // Growth Factor.—1993.—Vol. 9(4).—P. 259-268.

114. Head, M. The development of the tumor vascular-disrupting agent ASA404: current status and future opportunities. / M. Head, M.B. Jameson. //Expert Opin Invest Gruds—2010—Vol. 19(2).—P. 295-304.

115. Helczynska, K. Hypoxia promotes a dedifferentiated phenotype in ductal breast carcinoma in suti. / K. Helczynska, A. Kronblad, A. Jogi, E. Nilsson, S. Beckman, S. Pahlman. // Cancer Res.—2003.—Vol. 63.—P. 1441-1444.

116. Helfrich, E. Blood vessel maturation, vascular phenotype and angiogenic potential in malignant melanoma: One step forward for overcoming anti-angiogenic resistance? / E. Helfrich, D. Schadendorf. // Mol Oncol.—2011,—Vol. 5.—P. 137-149.

117. Hendrix, M.J. Vasculogenic mimicry and tumour-cell plasticity: lessons from melanoma. / M.J. Hendrix, E. A. Señor, A. R. Hess, R. E. Señor. //Nature Reviews Cancer.—2003.—Vol. 3.—P. 411-421.

118. Hendrix, M. J. Molecular biology of breast cancer metastasis. Molecular expression of vascular markers by aggressive breast cancer cells.

119. M.J. Hendrix, E.A. Seftor, D.A. Kirschmann, R.E. Seftor. // Breast Cancer Res.—2000.—Vol. 2.—P. 417-422.

120. Hendrix, M.J. Reprogramming metastatic tumor cells with embryonic microenvironments. / M.J. Hendrix, E.A. Seftor, R.E. Seftor, J. Kasemeier-Kulesa, P.M. Kulesa, M.L. Postovit. // Nat Res Cancer.—2007—Vol. 7.— P. 246-255.

121. Hersey, P. A randomized phase 2 study of etaracizumab, a monoclonal antibody against integrin alpha(v)beta3, + or dacarbasine in patients with stage IV metastatic melanoma. / P. Hersey, J. Sosman, S. O'Day.//Cancer.—2020.—Vol. 116(6).—P. 1526-1534.

122. Hida K. A new perspective of human endothelial cells: unexpected chromosome and centrosome abnormalities. / K. Hida, M. Klagbrun. // Cancer Res.—2005.—"Vol. 65.—P. 2507-2510.

123. Hillen, F. Tumor vascularization: sprouting and beyond. / F. Hillen, A.W. Griffioen. Cancer Metastasis Rev.—2007.—Vol. 26(3-4).—P. 489502.

124. Hiratsuka, S. Vasculogenesis, angiogenesis and special features of tumour blood vessels. Front Biosci.—2011.—Vol. 16.—P. 803-814.

125. Hiratsuka, S. Fit-1 lacking the tyrosine kinase domain is sufficient for normal development and angiogenesis in mice. / S. Hiratsuka, O. Minowa, J. Kuno, T. Noda, M. Shibuya. // Proc Natl Acad Sci £/&4.—1998.—Vol. 95(16).—P. 9349-9354.

126. Hoang, M. P. CD34 expression in desmoplastic melanoma. / M. P. Hoang, M.A. Selim, R.C. Bentley, J.L. Burchette, C.R. Shea. // Cutan. Pathol.—2001.—Vol. 28.—P. 508-512.

127. Hoijo, Y. Down-regulation of galectin-3 suppress tumorogenity of human breast carcinoma cells. / Y. Hoijo, P. Nangia-Makker, H. Inohara, A. Raz. Clin Cancer Res.—2001.—Vol. 7.—P. 661-668.

128. Holash, J. Vessel cooption, regression, and growth in tumors mediated by angiopoietins and VEGF. / J. Holash, P.C. Maisonpierre, D. Compton, P. Boland, C.R. Alexander, D. Zagzag, G.D. Yancopoulos, S.J. Wiegand. //Science.—1999,—Vol. 284,—P. 1994-1998.

129. Hood, J.D. VEGF upregulates eNOS message, protein, and NO production in human endothelial cells. / J.D. Hood, C.J. Meininger, M. Ziche, H.J. Granger. // Am J Physiol Heart Circ Physiol.—1998.—Vol. 274.—P. H1054-H1058.

130. Hynes, R. O. Specificity of cell adhesion in development: the cadherin superfamily. // Curr. Opin. Genet. Dev.—1992,—Vol. 2.—P. 621-624.

131. Hynes, R. O. Integrins in vascular development. / R.O. Hynes, B.L. Bader, K. Hodivala-Diike. // Braz. J. Med. Biol. Res.—1999.—Vol. 32.—P. 501-510.

132. Igura, K. Resveratrol and quercetin inhibit angiogenesis in vitro / K. Igura , T. Ohta , Y. Kuroda. // Cancer Lett.—2001.—Vol. 171.—P. 11-16.

133. Ilmonen, S. Prognostic value of tumour vascularity in primary melanoma. / S. Ilmonen, A.L. Kariniemi, T. Vlaykova, T. Muhonen, S. Pyrhonen, S. Asko- Seljavaara. // Melanoma Res.—1999.—Vol. 9.—P. 273-278.

134. Imazano, Y. Correlation between thymidine phosphorylase expression and prognosis in human renal cell carcinoma. / Y. Imazano, Y. Takebayashi, K. Nishiyama, S. Akiba, K. Miyadera, Y. Yamada. // J Clin Oncol.— 1997,—Vol. 15(7).—P. 2570-2578.

135. Ivanova, N. B. A stem cell molecular signature. / N.B. Ivanova, J.T. Dimos, C. Schaniel, K.A. Moore, I.R. Lemischka. // Science.—2002.—Vol. 298.—P. 601-604.

136. Jabobsson, L. VEGFRs and Notch: a dynamic collaboration in vascular patterning. / L. Jabobsson, K. Bentley, U. Gerhardt. // Biochem Soc Trans.—2009,—Vol. 37(pt6).—P. 216-233.

137. James, D. TGFbeta/activin/Nodal signaling is necessary for the maintenance of pluripotency in human embryonic stem cells. / D. James, A.J. Levine, D. Bessry, A. Hemmati-Brivanlou, A. // Development.— 2005.—Vol. 132.—P. 1273-1282.

138. Jatoi, A. A phase II trial of green tea in the treatment of patients with androgen independent metastatic prostate carcinoma / A. Jatoi, N.Ellison, P.A.Burch. // Cancer.—2003.—Vol. 97.—P .1442-1446.

139. Jazirehi, A.K. Therapeutic implications for targeting the РІЗКУAKT/mTOR signaling module in melanoma therapy. / A.K. Jazirehi,

140. P.B. Wenn, M. Dawavand. // Am J Cancer Res.-2012.-Vol. 2(2).—P. 178-191.

141. Jones, M.C. VEGFR1 (Fltl) regulates Rab4 recycling to control fibronectin polymerization and endothelial vessel branching. / M.C. Jones, P.T. Caswell, K. Moran-Jones, M. Roberts, S.T. Barry, A.S. Gampel, J.C. Norman. //Traffic.-2009.—Vol. 10.-754-766.

142. Jubb, A.M. Predicting benefit from anti-angiogenic agents in malignancy. / A.M. Jubb, A.J. Oates, S. Holden, H. Koeppen. // Nature Review Cancer.—2006.—Vol. 6.—P. 626-635.

143. Jung, Y.D. Inhibition of tumour invasion and angiogenesis by epigallocatechin gallate (EGCG), a major component of green tea. // Int J Exp Pathol.—2001.—Vol. 82,—P. 309-316.

144. Kame T. Novel insights into the differentiatial funcrions of Notch ligands in vascular formation. // J Angiogenesis Res.—2009.—Vol. 16.—P. 1-8.

145. Kamenetsky, M. Molecular details of cAMP generation in mammalian cells; a tale of two systems. / M. Kamenetsky, S. Middelhaufe, E.M. Bank, R.L. Levin, J Buck, C. Streegborn. // J Mol Biol.—2006.—Vol. 362,—P. 623-639.

146. Kanthasamy, Role of proteolytic activation of Protein Kinase C delta in oxidative stress-induced apoptosis. / A.G. Kanthasamy, M. Kitazawa, A. Kanthasamy, V. Anantharam. // Antioxid Redox Signal.—2003.—Vol. 5(5).—P. 609-620.

147. Kanthou, C. The tumor vascular targeting agent combretastatin A-4-phosphate induces reorganization of the actin cytoskeleton and early membrane blebbing in human endothelial cells / C. Kanthou, G.M. Tozer // Blood.-2002.-Vol. 99(6).-P.2060-2069.

148. Kemler, R. Classical cadherins. // Semin. Cell Biol.—1992—Vol. 3.—P. 149-155.

149. Kerbel RS. Tumor angiogenesis: past, present and the near future. Carcinigenesis.-2000.-Vol. 21.—P. 505-515.

150. Kim, C. J. The promise of microarray technology in melanoma care. / C.J. Kim, D.S. Reintgen, T.J. Yeatman. // Cancer Control.—2002.—Vol. 9.—P. 49-53.

151. Kim, K. Cyclooxygenase-2 expression in cervical intraepithelial neoplasia. / K. Kim, Y.T. Jeon, I.A. Park, J.W. Kim, N.H. Park, S.B. Kang, H.P. Lee, Y.H. Song. // Ann N Y Acad Sci.—2009,—Vol. 1171.—P. 111115.

152. Kimura, Y. Resveratrol isolated from Polygonum cuspidatum root prevents tumor growth and metastasis to lung and tumor-induced neovascularization in Lewis lung carcinoma bearing mice / Y.Kimura, H. Okuda. //JNutr.-2001.-Vol. 131.—P .1844-1849.

153. Koblizek, T.I. Angiopoietin-1 induces sprouting angiogenesis in vitro // Curr Biol.—1998.—Vol. 8,—P. 529-32.

154. Koch, U. Notch signaling in solid tumor. / U. Koch, F. Radtke.// Curr Top Dev Biol.—2010,—Vol. 92.—P. 367-409.

155. Kojima-Yuasa, A. Green tea extract inhibits angiogenesis of human umbilical vein endothelial cells through reduction of expression of VEGFreceptors / A. Kojima-Yuasa, J.J. Hua, D.O. Kennedy. // Life Sci.—2003.— Vol. 73.-P. 1299-1313.

156. Kon, K. Transformation of fibroblasts into endothelial cells during angiogenesis. / K. Kon, T. Fujiwara. // Cell Tissue Res.—1994.—278.—P. 625-628.

157. Korpelainen, E. I. Signaling angiogenesis and lymphangiogenesis. / E.I. Korpelainen, K. Alitalo. // Curr. Opin. Cell Biol.—1998.—Vol. 10.—P. 159-164.

158. Koshikawa, N. Role of cell surface metalloprotease MT1-MMP in epithelial cell migration over laminin-5. / N. Koshikawa, G. Giannelli, V. Cirulli, K. Miyazaki, V.J. Quaranta. // Cell Biol.—2000.—Vol. 148.—P. 615-624.

159. Ku, D.D. Vascular endothelial growth factor induces EGRF-dependent relaxation in coronary arteries. / D.D. Ku, J.K. Zaleski, S. Liu, T.A. Brock. // Am J Physiol Heart Circ Physiol.—1993.—Vol. 265.—P. H586-H592.

160. Kumar, R. Regulation of distinct steps of angiogenesis by different angiogenic molecules. / R. Kumar, J. Yoneda, C.D. Bucana, J. Fidler. // Int J Oncol.—1998,—Vol. 12(4).—P. 749-757.

161. Kuphal, S. Integrin signaling in melanoma. / S. Kuphal, R. Bauer, A.K. Bosserhaff. // Cancer Metastasis Rev.—2005.—Vol. 24(2).—P. 195222.

162. Laakkonen, P. A tumor-homing peptide with a targeting specificity related to lymphatic vessels. / P. Laakkonen, K. Porkka, J.A. Hoffman, E. Ruoslahti. //Nature Med.—2002,—Vol. 8,—P. 751-755.

163. LaBarge, M. A. Biological progression from adult bone marrow to mononucleate muscle stem cell to multinucleate muscle fiber in response to injury. / M.A. LaBarge, H.M. Blau. // Cell.—2002.—Vol. 111.—P. 589601.

164. Laber DA, Risk factors, classification, and staging in renal cell carcinoma. // Med Oncol.—2006.—Vol. 23(4).—P. 443-454.

165. Lai, H.C. Effect of EGCG, a major component of green tea, on the expression of Ets-1, c-Fos, and c-Jun during angiogenesis in vitro / H.C. Lai, W.T. Chao, Y.T. Chen. // Cancer Lett.-2004.-Vol. 213.-P. 181-188.

166. Lampugnani, M. G. A novel endothelial-specific membrane protein is a marker of cell-cell contacts. // J. Cell Biol.—1992.—Vol. 118,—P. 15111522.

167. Lemech, C. The potential for BRAF V600 inhibitors in advanced cutaneous melanoma. / C. Lemech, J. Infante, H.T. Arkenam. // Ther Adv Med Oncol.'-2012.—Vol. 21(2).—P. 61-73.

168. Lewis, J.M. Protein kinase C regulates alphav beta5 cytoskeletal association and focal adhesion kinase. / J.M. Lewis, D.A. Cheresh, M.A. Schwartz.//J Cell Biol.-1996.-Vol. 134(5).—P. 1323-1332.

169. Licitzky, J.C. Cyclic AMP signaling as mediator of vasculogenic mimicry in aggressive human melanoma cells in vitro. / J.C. Licitzky, D. Parriaux, E. Ristorcelli, A. Verine, D. Lombardo, P. Verrando. // Cancer Res.—2009.—Vol. 69.—P. 802-809.

170. Lin, M.T. Inhibition of vascular endothelial growth factor-induced angiogenesis by resveratrol through interruption of Src-dependent vascular endothelial cadherin tyrosine phosphorylation. // Mol Pharmacol.—2003.— Vol. 64.—P. 1029-1036.

171. Liu, Z.Y. Regulation of Notch 1 and D114 by VEGF in arterial endothelial cell: implication for modulatory arteriogenesis and angiogenesis. / Z.Y. Liu, T. Shirakawa, Y. Li, A. Soma, R.M. Fairman, M. Herlyn. // Mol Cell Biol.—2003.—Vol. 23(1).—14-25.

172. Liu, C. Prostate-specific membrane antigen directed selective thrombotic infarction of tumors. / C. Liu, S.Y. Yuan, C.S. Liao, B.V. Chang, Q. Sheng. // Cancer Res.-2002.-Vol. 62.—P. 5470-5475.

173. Liu, F.T. Galectins as promoters of tumor progression. / F.T. Liu,

174. G.A. Rabinovich. //Nat Rev Cancer.—2005.—Vol. 5.—P. 29-41.

175. Llovet, J.M. Sorafenib in advanced hepatocellular carcinoma. / J.M. Llovet, S. Ricci, V. Mazaferro. // N Engl J Med.—2008.—Vol. 359.—P. 378-390.

176. Loh, K. Reactive oxygen species enhance insulin sensitivity. /K. Loh,

177. H. Deng, A.S. Fukushima, X. Cai, B. Boivin, S. Galic. // Cell Metab.— 2009.—Vol. 10(4).—P. 260-272.

178. Ma, T.Y. Mechanism of extracellular calcium regulation of intestinal epithelial tight junction permeability: Role of cytoskeleton involvement. / T.Y. Ma, D. Tran, Y. Hoa. // Microsc Res Tech.—2000.-Vol. 51,—P. 1656-1689.

179. Madbouly, K. Microvascular tumor invasion: prognostic significance in low-stage renal cell carcinoma. / K. Madbouly, S.M. Al-Qahtani, Y.

180. Ghazwani, S. Al-Saibani, M.K. Mansi. Urology.—2007.—Vol. 69(4).—P. 670-674.

181. Maisonpierre, P.C. Angiopoietin-2, a natural antagonist for Tie-2 that disrupts in vivo angiogenesis // Science.—1997.—Vol. 277.—P.55-60.

182. Makitie, T. Microvascular loops and networks as prognostic indicators in choroidal and ciliary body melanomas. / T. Makitie, P. Summanen, A. Tarkkanen, T.J. Kivela. //Natl Cancer Inst.—1999.—Vol. 91—P. 359-367.

183. Malinda, K. M. The laminins. / K.M. Malinda, H. Kleinman. // Int. J.Biochem. Cell Biol.—1996.—Vol. 28.—P. 957-959.

184. Maniotis, A.J. Control of melanoma mophogenesis, endothelial survival, and perfusion by extracellular matrix. / A.J. Maniotis, X. Chen, C. Garcia, P.J. DeCristopher, D. Wu, J. Pe'er, M.J. Hendrix. // Lab Invest.— 2002.—Vol. 82,—P. 1031-1043.

185. Maniotis, A.J. Vascular channel formation by human melanoma cells in vivo and in vitro: vasculogenic mimicry. / A.J. Maniotis, R. Folberg, A. Hess, E.A. Seftor, L.M. Gardner, J. Pe'er, M.J. Hendrix. // Am J Pathology.-1999 -Vol. 155.—P. 739-752.

186. Margaryan, N.V. EphA2 as a promoter of melanoma tumorigenecity. / N.V. Margaryan, L. Strizzi, D.E. Abbott, E.A. Seftor, M.S. Ro, M.J. Hendrix, A. Hess. // Cancer Biol Ther.—2008.—Vol. 8.—P. 279-288.

187. Martin, T. A. Assessing microvessels and angiogenesis in human breast cancer, using VE-cadherin. / T.A. Martin, G. Watkins, J. Lane, W. G. Jiang. // Histopathology.—2005,—Vol. 46.—P. 422-430.

188. Massi, D. Evidence for differential expression of Notch receptors and their ligands in melanocytic nevi and cutaneous malignant melanoma. / D. Massi, F. Tarantini, A. Franchi, M. Paglierani, C. Di Serio, S. Pellerito. //

189. Modern Pathol.—2006.—Vol. 19.—P. 246-254.

190. Maulik, N. Redox signaling of angiogenesis. // Antioxid Redox Signal.-2002.-Vol. 4.-P. 805-815.

191. McLean, I.W. Uveal melanoma: comparison of the prognostic value of fibrovascular loops, mean of the ten largest nucleoli, cell type and tumor size. / I.W. McLean, K.S. Keefe, M.N. Burnier. // Ophthalmology.— 1997.—Vol. 104.—P. 777-780.

192. McLean, I.W. The biology of haematogenous metastasis in human uveal malignant melanoma. // Virchows Arch Pathol Anat.—1993.—Vol. 422.—P. 433-437.

193. Mehaffey, M.G. Relative importance of quantifying area and vascular patterns in uveal melanoma. / M.G. Mehaffey, R. Folberg, M. Meyer, S.E. Bentler, T. Hwang, R.F. Woolson, K.C. Moore. // Am J Ophthalmol.— 1997.—Vol. 123,—P. 798-809.

194. Mei, J. VEGR-siRNA silencing induces apoptosis, inhibits proliferation and suppresses vasculogenic mimicry in osteosarcoma in vitro. / J. Mei, Y. Gao, L. Zhang, X. Cai, Z. Qian, H. Huang, W. Huang. // Exp Oncol.—2008.—Vol. 30(1).—P. 29-34.

195. Meier, F. The RAS/RAF/MEK/ERK and PI3K/AKT signaling pathways present molecular targets for effective treatment of advanced melanoma. / F. Meier, B. Schittek, S. Burch, C. Garbe, K. Snalley, M. Herlyn. // Front Biosci.-2005.-Vol. 10,—P. 2986-3001.

196. Mikhailova, I.N. Cancer/testis genes expression in human melanoma cell lines. / I.N. Mikhailova, D.A. Kovalevsky, L.F. Morozova, O.S. Burova, A.Yu. Baryshnikov, R.S. Bibilashvili. //Mel Res.-2008.—Vol. 18(5).—P. 303-313.

197. Millauer, B. High affinity VEGF binding and developmental expression suggest FLK-1 as a major regulator of vasculogenesis and angiogenesis/Cell.-1993.-Vol. 72.-P. 835-846.

198. Monzani, E. Targeting cancer stem cells to modulate alternative vascularization mechanism. / E. Monzani, C.A. La Porta. // Stem Cell Rev.—2008.—Vol. 4.—P. 51-56.

199. Morrison, S.J. Asymmetric and symmetric stem-cell division in development and cancer. / S.J. Morrison, J. Kimble. //Nature.—2006.—Vol. 441.—P. 1068-1074.

200. Munaron, L. Endothelial calcium machinery and angiogenesis: understanding physiology to interfere with pathology. / L. Munaron, P.A. Fiorio. // Curr Med Chem.—2009,—16(35).—P. 4691-4703.

201. Naumanen, P. Mechanism of actin stress fiber assembly. /P. Naumanen, P. Lappalainen, P. Hotulainen. // J Microsc.—2008.—Vol. 231.—P. 446-454.

202. Ng, T. PKC alpha regulates betal integrin-dependent cell motility through association and control of integrin traffic. / T. Ng, D. Shima, A. Squire, P.I. Bastiaems, M.J. Humghries, P.J. Parker. // EMBO J.—1999.— Vol. 18,—P. 3909-3923.

203. Nikkola, J. Integrin chains betal and av as prognostic factors in human metastatic melanoma. / J. Nikkola, P. Vihinen, T. Vlaykova, J. Heino, S. Pyrhonen. // Mel Res.-2004.-Vol. 14(1).—P. 29-37.

204. Nilvius B. Signal transduction in vascular endothelium: the role of intracellular calcium and ion channels. //Verh Acad Geneeskd Belg.— 1998.-Vol. 60.—P. 215-219.

205. Padera, T. P. Lymphatic metastasis in the absence of functional intratumor lymphatics. / T.P. Padera, A. Kadambi, C.M. Carreira, E.B. Brown, N.C. Choi, D. Mathisen, J. Wain, R.K. Jain. // Science.—2002.— Vol. 296.—P. 1883-1886.

206. Pasquale, E. B. The Eph family of receptors. // Curr. Opin. Cell Biol.—1997.—Vol. 9.—P. 608-615.

207. Pasqualini, R. Probing the structural and molecular diversity of tumor vasculature. / R. Pasqualini, W. Arap, D.M. McDonald. // Trends Mol. Med.—2002,—Vol. 8,—P. 563-571.

208. Pasquior, E. Microtubules: a dynamic target in cancer therapy. / E. Pasquior, M. Kavallaris. //IUBMB Life.—2008.—Vol. 60.—P. 165-170.

209. Patton, A.M. Calcium as molecular target in angiogenesis. / A.M. Patton, J. Kassis, H. Dhong, E.C. Kohn. // Curr Pharm Res.—2003.—Vol. 9.—P. 543-551.

210. Paulis, Y.W. Signaling pathways in vasculogenic mimicry. / Y.W. Paulis, P.M. Soetekouw, H.M. Verheul, A. Griffioen. //Biochem Biophys Acta.—2010.—Vol. 1806(1).—P. 18-28.

211. Pellinen, T. Integrin traffic. / T. Pellinen, J. Ivaska. // J Cell Sei.— 2006.—Vol. 19(Ptl8).—P. 723-731.

212. Peng, H.H. Systemic analysis of tumor cell-induced endothelial signaling and junctions disassembly. / H.H. Peng, C. Dong. //Cell Mol Bioeng.—2009.—Vol. 2,—P. 375-385.

213. Persy, I.S. An overview of small-molecule inhibitors of VEGF signalling. / I.S. Persy, J.Y. Wick, B. Kaufman. // Nature Review Clin One.—2009.—Vol. 6.—P. 569-577.

214. Pezzella, F. P. Evidence for novel non-angiogenic pathway in breast-cancer metastasis. // F.P. Pezzella, P. Granone, A.G. Nicholson, A.L. Harris. //Lancet.—2000.—Vol. 355,—P. 1787-1788.

215. Phillips, T.M. Carcinoma cell-specific Mig-7: a new potential marker for circulating and migrating cancer cells. // T.M. Phillips, J.S. Lindsey. // Oncol Rep.—2005.—Vol. 13.—P. 37-44.

216. Populo, H. Insight into melanoma: targeting mTOR pathway for therapeutics. / H. Populo, P. Soares, J.M. Lopes. // Expert Opin Ther Targets.—2012.—Vol. 16(7).—P. 689-705.

217. Postovit, L.M. The commonality of plasticity underlying multipotent tumor cells and embryonic stem cell. / L.M. Postovit, F.F. Costa, E.A. Señor, B. Wen, R.E. Seftor, M.B. Soares, M.J. Hendrix. J Cell Biochem.— 2007.—Vol. 101.—P. 908-917.

218. Postovit, L.M. Role of Nodal in signaling and the microenvironment underlying melanoma plasticity. / L.M. Postovit, N.V. Margaryan, E.A. Seftor, M.J. Hendrix. // Pigment Cell Melanoma Res.—2008.—Vol. 21.—P. 348-357.

219. Pothhammer, T. Bone morphogenic proteins are overexpressed in malignant melanoma and promote cell invasion and migration. / T.

220. Pothhammer, T. Poser, F. Soucin, F. Battalie, M. Moser, A.K. Bosserhoff. // Cancer Res.—2005.—Vol. 65.—P. 443-456.

221. Qin, J.-Z. Interrupting activated Notch signaling triggers apoptosis in melanoma cells. // J.Z. Qin, K.C. Gatter, A.L. Harris, S. Fox, M. Buyse. // Proc. J. Invest. Dermatol.—2003.—Vol. 185A.—P. 78-89.

222. Quesada, A.R. Do not say ever never more: the ins and outs of antiangiogenic therapies. / A.R. Quesada, M.A. Medina, R. Munoz-Chapuli, A.L. Ronce. Curr Pharm Des.—2010—Vol. 16(35).—P. 39323957.

223. Rak, J. Treating cancer by inhibiting angiogenesis: new hopes and potential pitfalls. / J. Rak, R.S. Kerbel. // Cancer Metastasis Rev.—1996.— Vol. 15.—P. 231-236.

224. Ramalho-Santos, M. 'Sternness': transcriptional profiling of embryonic and adult stem cells. / M. Ramalho-Santos, T.P. Padera, A. Kadambi, C.M. Carreira, E.B. Brown. // Science.—2002.—Vol. 298.—P. 597-600.

225. Raskopf, E. siRNA targeting VEGF inhibits hepatocellular carcinoma growth and tumor angiogenesis in vivo. / E. Raskopf, A. Vogt, T. Sauerbruch, M. Schmitz. // J Hepatol.—2008.—Vol. 49(6).—P. 977-984.

226. Rathmell, W.K. VHL inactivation in renal cell carcinoma: implications for diagnosis, prognosis and treatment. / W.K. Rathmell, S. Chen. // Exp Rev Anticancer Ther.—2008.—Vol. 8(1).—P. 63-73.

227. Razorenova, S. VEGF-intergrin interplay controls tumor growth and vascularization. / S. Razorenova, N.P. McCabe, T. O'Tode, J. Qin, T.V. Byzova T.V. // Proc Natl Acad Sci USA.—2005,—Vol. 102(21).—P. 75897594.

228. Reya, T. Stem cells, cancer, and cancer stem cells. / T. Reya, S.J. Morrison, M.F. Clarke, I.L. Weissman. // Nature.—2001.—Vol. 414.—P. 105-111.

229. Reyland ME. Protein kinase C isoforms: Multifunctional regulators of cell life and death. // Front Biosci—2009—Vol. 14.—P. 2386-2399.

230. Ribatti, D. The structure of the vascular network of tumor. / D. Ribatti, B. Nico, E. Crivellato, C. Vacca. // Cancer Lett.—2007,—Vol. 218(1).—P. 18-23.

231. Risau, W. Mechanisms of angiogenesis. // Nature.—1997.—Vol. 386.—P. 671-674.

232. Robbins, J. Mouse mammary tumor gene Int-3: a member of the Notch gene family transforms mammary epithelial cells. / J. Robbins, B.J. Blonel, D. Gallahan, R.J. Callahan. // J. Virol.—1992.—Vol. 66.—P. 25942599.

233. Roring, M. Aberrant B-RAF signaling in melanoma. / M. Roring, T. Brummer. // Crit Rev Oncol.—2012.—Vol. 17(1).—P. 97-121.

234. Roscioni, S.S. Epac: effectors and biological function. / S.S. Roscioni, C.R. Elzinga, M. Schmidt. // Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmaco/.— 2006.—Vol. 377.—P. 345-357.

235. Rosenburg, I. M. Epithelial cell kinase-B-61: an autocrine loop modulating intestinal epithelial migration and barrier function. / I.M. Rosenburg, M. Goke, M. Kanai, H. Reinecker, D.K. Podolsky. // Am. J. Physiol.—1997.—Vol. 273.—P. G824-G832.

236. Rothhammer, T. Functional implication of BMP-4 expression on angiogenesis in malignant melanoma. / T. Rothhammer, F. Bataille, T. Spruss, G. Eissner, A.K. Bosserhoff. // Oncogene.—2007.—Vol. 26.—P. 4158-4170.

237. Rowin, M.E. Intracellular calcium requirements for betalintegrin activation. / M.E. Rowin, R.E. Whatley, T. Yednock, J.F. Bohnsack. // J Cell Physiol.—1998.—Vol. 175.—P. 193-202.

238. Rucci, N. A novel PKC alpha-dependent signal to ERK1/2 activated by alphav beta3 integrin in osteocasts. / N. Rucci, C. DiGiacinto, L. Orru, D. Millimaggi, R. Baron, A.J. Teti. // J Cell Sci.—2005.—Vol. 118(Ptl5).—P. 3263-3275.

239. Ruf, W. Differential role of tissue factor pathway inhibitors 1 and 2 in melanoma vasculogenic mimicry. / W. Ruf, E. Seftor, R.J. Petrovan, R.M. Weiss, L.M. Gruman, N.V. Margaryan, R. Seftor, M.J. Hendrix. // Nat Med.—2003,—Vol. 63.—P. 5381-5389.

240. Rummelt, V. Reassessment of the PAS patterns in uveal melanoma— reply. / V. Rummelt, G.H. Naumann, R. Folberg. // Br J Ophthalmol.— 1998.—Vol. 82.—P. 102-104.

241. Rummelt, V. Microcirculation architecture of metastases from primary ciliary body and choroidal melanomas. / V. Rummelt, V. E. Raskopf, A. Vogt, T. Sauerbruch. // Am. J. Ophthalmol.—1998.—Vol. 126,—P. 303-305.

242. Sainson, R.C. Cell-autonomous Notch signaling regulates endothelial branching and proliferation during vascular tubulogenesis. / R.C. Sainson, Y. Aoto, M.N. Nakato, C.C. Hughes. // FASEB J.—2005.—Vol. 19(8).—P. 1027-1029.

243. Sakamoto, T. Histological findings and prognosis of uveal malignant melanoma in Japanese patients. / T. Sakamoto, A. Nakano, F. Kita, K. Yanagi, T. Nagasawa, U. Just, K. Nakao, S. Nishikawa. // Am. J. Ophthalmol.—1996,—Vol. 121,—P. 276-283.

244. Sawano A. The phosphorylated 1169-tyrosine containing region of flt-1 kinase (VEGFR-1) is a major binding site for PLCgamma. / A. Sawano, T. Takahashi, S. Yamaguchi, M. Shibuya. // Biochem Biophys Res Commun.— 1997,-Vol. 238(2).—P. 487-491.

245. Sawano, A. Fit-1, vascular endothelial growth factor receptor 1, is a novel cell surface marker for the lineage of monocyte-macrophages in humans / A. Sawan, S. Iwai, Y. Sakurai. // Blood.—2001.-Vol. 97.—P. 785-791.

246. Schneider, U. Indocyanine-green videoangiography of malignant melanomas of the choroid using the scanning laser ophthalmoscope. / U. Schneider, F. Gelisken, W. Inhoffen, I. Kreissig. // Ger J Ophthalmol.— 1996.—Vol. 5,—P. 6-11.

247. Schwanbeck, R. The Notch signalling pathway: Molecular basis of cell content dependency. / R. Schwanbeck, S. Martini, K. Bernoth, U. Just. //Eur J Cell Biol.—2011,—Vol. 90(6-7).—P. 572-581.

248. Señor, E. A. Expression of multiple molecular phenotypes by aggressive melanoma tumor cells: role in vasculogenic mimicry. / E. A. Seftor, L.M. Gruman, D.A. Kirschmann, R. Seftor, M.J. Hendrix. // Crit. Rev. Oncol. Hematol.—2002.—Vol. 44.—P. 17-27.

249. Seftor, E. A. Molecular determinants of human uveal melanoma invasion and metastasis. / E.A. Seftor, P. Gardner, L.M. Gruman, A. Hess, M.J. Hendrix. // Clin. Exp. Metastasis.—2002.—Vol. 19,—P. 233-246.

250. Seftor, R. E. Targeting the tumor microenvironment with chemically modified tetracyclines: inhibition of laminin 5 y 2 chain promigratory fragments and vasculogenic mimicry. / R.E. Seftor, E.A. Seftor, D.A.

251. Kirschmann, M.J. Hendrix. // Mol. Cancer Ther.—2002—Vol. 1.—P. 1173-1179.

252. Segura, I. Inhibition of programmed cell death impairs in vitro vessellike structure formation and reduces in vivo angiogenesis. / I. Segura, A. Serano, M.A. Goncalez, J.L. Abad, L. Gomez, A. Bernard, H.H. Riese. // FASEB J.—2002.—Vol. 16.—P. 833-841.

253. Semenza, G.L. Expression of hypoxia-inducible factor 1: mechanism and consequences. //Biochem Pharmacol.—2000.—Vol. 59.—P. 47-53.

254. Seregard, S. Prognostic accuracy of the mean of the largest nucleoli, vascular patterns, and PC-10 in posterior uveal melanoma. / S. Seregard, B. Spangberg, C. Juul, M. Oskarsson. // Ophthalmology.—1998.—Vol. 105.— P. 485-491.

255. Serini, G. Integrins and angiogenesis. / G. Serini, D. Valdembri, F. Bussolino. // Exp Cell Res.—2006,—Vol. 312(5).—P. 651-658.

256. Sharma, P.S. VEGF/VEGFR pathway inhibitors as anti-angiogenic agents: Present and Future. / P.S. Sharma, R. Sharma, T. Tyagi. // Curr Cancer Drug Target?.—2011.—Vol. 11(5).—P. 624-633.

257. Sharma, N. Prostatic tumor cell plasticity involves cooperative interactions of distinct phenotypic subpopulations: role in vasculogenic mimicry. / N. Sharma, O. Hiratsuka, Y. Tagamishi, T. Tyagi. // Prostate.— 2002.—Vol. 50.—P. 189-201.

258. Sen, C.K. Oxygen, oxidant, and antioxidand in wound healing: an emerging paradigm. / S. Khanna, G.Gordillo, D. Bagchi, S. Roy. // Ann N Y Acad Sci.—2002.—Vol. 957.—P. 239-249.

259. Shibuya M. Differential roles of Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-1 and Receptor-2 in angiogenesis. // Biochem Mol Biol.—2006.— Vol. 9(5).—P. 469-478.

260. Shirakawa, K. Absence of endothelial cells, central necrosis, and fibrosis are associated with aggressive inflammatory breast cancer. / K.

261. Shirakawa, H. Tsuda, Y. Heike, K. Kato, R. Asada, H. Wakasugi. // Cancer Res.—2001.—Vol. 61.—P. 445-451.

262. Shirakawa, K. Hemodynamics in vasculogenic mimicry and angiogenesis of inflammatory breast cancer xenograft. / K. Shirakawa, H. Kobayashi, Y. Heike, S. Kawamoto, F. Kasumi, H. Wakasugi. // Cancer Res.—2002.—Vol. 62.—P. 560-566.

263. Shou, J. Dynamics of Notch expression during murine prostate development and tumorigenesis. / J. Shou, S. Ross, H. Koeppen, F.J. de Sauvage, W.Q. Gao. // Cancer Res.—2001.—Vol. 61.—P. 7291-7297.

264. Shubik, P. Additional literature on 'vasculogenic mimicry' not cited. / P. Shubik, B.A. Warren. // Am. J. Pathol—2000.—Vol. 156.—P. 736-742.

265. Simon-Assmann, P. Role of Laminin in physiological angiogenesis. / P. Simon-Assmann, G. Orend, E. Mammadova-Bach, C. Spenle, O. Lefebvre. Int J Dev Biol.—2011,—Vol. 55(4-5).—P. 455-465.

266. Sjaactad, M.D. Integrin-mediated calcium signaling and regulation of cell adhesion by intracellular calcium. / M.D. Sjaactad, W.J. Nelson. // Bioassay—1997.—Vol. 19(1).—P. 47-55.

267. Sjolund, J. Suppression of renal cell carcinoma growth by inhibition of Notch signalling in vitro and in vivo. / J. Sjolund, M. Johanson, S. Manna, C. Norin, A. Pietras, S. Beckman. // J Clin Invest.—2008.—Vol. 118(1).—P. 217-228.

268. Siemann, D.W. A review and update of the current status of the vasculatute-disabling agent combretastatin-A4 phosphate. / D.W. Siemann, D.J. Chaplin, P.A. Walicke. // Expert Opin Invest Drugs.—2009.—Vol. 18(2).—P. 189-197.

269. Sood, A. K. Molecular determinants of ovarian cancer plasticity. / A.K. Sood, E.A. Seftor, M.S. Fletcher, L.M. Gardner, R.E. Seftor, M.J. Hendrix. // Am. J. Pathol.—2001,—Vol. 158,—P. 1279-1288.

270. Sood, A. K. The clinical significance of tumor cell-lined vasculature in ovarian carcinoma: implications for antivasculogenic therapy. / A.K.

271. Sood, E.A. Seftor, M.J. Hendrix. // Cancer Biol. Ther.—2002.—Vol. 1.—P. 511-517.

272. Sordet, O. Specific involvement of caspases in the differentiation of monocytes into macrophages. /0. Sordet, C. Rebe, S. Plenchette, Y. Zermiti, O. Hermine, W. Vanchenker. // Blood.—2002.—Vol. 100.—P. 4446-4453.

273. Sounni, N.E. MMPs as regulators of vessel stability associated with angiogenesis. / N.E. Sounni, A. Pay, L. Host, A. Noel. // Front Pharmacol.— 2011.—Vol. 2.—P. 111-116.

274. Srivastava, A. Vascularity in cutaneous melanoma detected by Doppler sonography and histology: correlation with tumour behaviour. / A. Srivastava, L.E. Hughes, J.P. Woodcock, P. Laidler. // Br J Cancer.— 1989.—Vol. 59,—P. 89-91.

275. Stewart, J.M. Phenotypic heterogenity and instability of human ovarian tumor-initiating cells. / J.M. Stewart, P.A. Shaw, C. Gedye, M.Q. Bernandini, B.G. Nell. // Proc Natl Acad Sci USA.—2011,—Vol.—108(16) .—P. 6468-6473.

276. Stocum, D. L. A tail of transdifferentiation. // Science.—2002.—Vol. 298.—P. 1901-1903.

277. Streubel, A. Lymphoma-specific genetic abbberations in microvascular endothelial cells in B-cell lymphomas. / A. Streubel, A.

278. Chott, D. Huber, M. Exner, U. Jager, O. Wagner, J. Schwarzinger. //N Engl J Med.-2004.—Vol. 351.—P. 250-258.

279. Strieker, J. Mechanics of the F-actin cytoskeleton. / J. Strieker, T. Falzone, M.L. Gardel. // J Biomech.—2010.—Vol. 43.—P. 9-14.

280. Su, W. Plasticity of ovarian cancer cell SKOV3 and vasculogenic mimicry in vivo. / W. Su, Y.J. Feng, L.Q. Yao, W.J. Cheng, C.J. Xu, Y. Huang, H. Jang. // Int J Gynecol Cancer.—2008.—Vol. 18.—P. 475-466.

281. Sun, B. Hypoxia influences vasculogenic mimicry channel formation and tumor invasion-related protein expression in melanoma. / B. Sun, D. Zhang, S. Zhang, W. Zhang, H. Guo, X. Zhao. // Cancer Lett.—2007.—Vol. 249.—P. 188-197.

282. Suri, C. Requisite role of angiopoietin-1, a ligand for the TIE2 receptor, during embryonic angiogenesis. / C. Suri, P.F. Jones, S. Patan. // Cell.-1996.-Vol. 87.-P. 1171-1180.

283. Takanada, K. Angiogenic signaling aberrantly induced by tumor hypoxia. //Front Biosci.—2011.—'Vol. 16.—P. 31-48.

284. Tallquist, M.D. Growth factor signalling pathways in vascular development. // M.D. Tallquist, P. Soriano, R. Klinghoffer. //Oncogene.— 1999.—Vol. 18(55).—P. 7917-7932.

285. Tang, F.Y. Green tea catechins inhibit VEGF-induced angiogenesis in vitro through suppression of VE-cadherin phosphorylation and inactivation of Akt molecule. / F.Y. Tang, N. Nguyen, M. Meydani // Int J Cancer.— 2003.-Vol. 106.-P. 871-878.

286. Terman, B.I. Biological properties of VEGF/VPF receptors. // B.I. Terman, M. Dougher-Vermazen. // Cancer Metastasis Rev.—1996.—Vol. 2(1).—P. 59-163.

287. Thies, A. PAS-positive loops and networks as a prognostic indicator in cutaneous malignant melanoma. / A. Thies, U. Mangold, I. Moll, U.J. Schumacher. //J. Pathol.—2001.—Vol. 195.—P. 537-542.

288. Thoenes, L. Novel approaches in anti-angiogenic treatment targeting endothelial F-actin: a new antiangiogenic strategy? / L. Thoenes, M. Gunther. // Curr Opin Mol Ther.—2008,—Vol. 10.—P. 579-590.

289. Thompson, W.D. Tumours acquire their vasculature by vessel incorporation, not vessel in growth. / W.D. Thompson, K.J. Shiach, R.A. Fraser, L.C. Mcintosh, J.G. Simpson. // J Pathol.—1987.—Vol. 151.—P. 323-332.

290. Timar, J. Tumor sinuses — vascular channels. / J. Timar, J. Toth. //Pathol. Oncol. Res.—2000.—Vol. 6.—P. 83-86.

291. Turkbey, B. Imaging of tumor angiogenesis: functional or targeted? B. Turkbey, H. Kobayashi, M. Ogawa, M. Bernando, P.L. Choyke. // Am J Roentgenol.—2009.—Vol. 193(2).—P. 904-913.

292. Uyttendaele, H. Vascular patterning defects associated with expression of activated Notch4 in embryonic endothelium. / H. Uyttendaele, J. Ho, J. Rossant, J. Kitajewski. // Proc. Natl Acad. Sci. USA.—2001.—Vol. 98.—P. 5643-5648.

293. Vailhe B. In vitro models of angiogenesis and vasculogenesis. / B. Vailhe, D. Vittet, J. Fiege. // Lab. Invest.—2001.—Vol. 7.—P. 473-477.

294. Vallier, L. Activin/Nodal and FGF pathways cooperate to maintain pluripotency of human embryonic stem cells. / L. Vallier, M. Alexander, N.A. Pedersen. // APMIS.—2005,—Vol. 113.—P. 773-789.

295. Verez, N.F. Pathways to melanoma. / N.F. Verez, H. Tsao. // Semin Cutan Med Surg.—2010.—Vol. 29(4).—P. 210-217.

296. Wade RH. On and around microtubules: an overview. // Traffic.— 2009.—Vol. 43.—P. 177-191.

297. Wallez, Y. VE-cadherin switch. /Y. Wallez, I. Vilgrain, P. Huber. // Trends Cardiovasc Med.—2008.—Vol. 16(2).—P. 55-59.

298. Warren, B. A. The growth of the blood supply to melanoma transplants in the hamster cheek pouch. / B.A. Warren, P. Shubik. // Lab. Invest.—1996.—Vol. 15.—P. 464-478.

299. Warso, M. A. Prognostic significance of periodic acid-Schiff-positive patterns in primary cutaneous melanoma. / M.A. Warso, A.J. Maniotis, X. Chen, D. Majumdar, M.K. Patel, R. Folberg. // Clin. Cancer Res.—2001.— Vol. 7,—P. 473-477.

300. Weidner, N. Tumor angiogenesis and metastasis—correlation in invasive breast carcinoma. / N. Weidner, J.P. Semple, W.R. Welch, J. Folkman. //N Engl J Med.—1991.—Vol. 324(1).—P. 836-847.

301. Weijzen, S. Activation of Notch-1 signaling maintains the neoplastic phenotype in human Ras-transformed cells. / S. Weijzen, P. Rizzo, M. Braid, R. Vaishnav, S.M. Jonkheer, B.A. Osborne, W.M. Kast. // Nature Med.— 2002.—Vol. 8.—P. 979-986.

302. Weissan, I. L. Stem cells: units of development, units of regeneration, and units in evolution. // Cell.—2000.—Vol. 100.—P. 157-168.

303. Wei-Ying, Y. Does Vasculogenic Mimicry Exist in Astrocytoma? / Y. Wei-Ying, Z.P. Chen. // J Histochem Cytochem.—2005.—Vol. 53(8).—P. 997-1002.

304. Westweber, D. Cell adhesion dynamics at endothelial junctions: VE-cadherin as a major player. / D. Westweber, M. Winderlich, G. Cagna, A.F. Nottebaun. // Trends Cell Biol.—2009,—Vol. 19(1).—P. 8-15.

305. Wu, H.M. VEGF induces NO-dependent hyperpermeability in coronary venules. / H.M. Wu, Q. Huang, Y. Yuan, H.J. Granger. // Am J Physiol.—1996,—Vol. 271.—P. H2735-H2739.

306. Yan, M. Delta-like 4/Notch signalling and its therapeutic implications. / M. Yan, G.B. Plowman. // Cancer Res.—2007.—Vol. 13(24).—P. 7243-7246.

307. Yancopoulos, G. D. Vascular-specific growth factors and blood vessel formation. / G.D. Yancopoulos, S. Davis, N.M. Gale, J.S. Rudge, J. Holash. // Nature.—2000.—Vol. 407.—P. 242-248.

308. Yao, L. Effective targeting of tumor vasculature by the angiogenesis inhibitors vasostatin and interleukin- 12. / L. Yao, S.E. Pike, J. Setsuda, J. Parekh, G. Gupta, M. Raffeld, E.S. Jaffe, G. Tosato. // Blood.—2000.—Vol. 96,—P. 1900-1905.

309. Yoon, S.O. Role of matrix metalloproteinases in tumor angiogenesis. / S.O. Yoon, S.J. Park, C.H. Yun, A.S. Chung. // J Biochem Med Biol.— 2003.—Vol. 36(1).—P. 128-137.

310. Zagouras, P. Alterations in Notch signaling in neoplastic lesions of the human cervix. / P. Zagouras, S. Stifani, C.M. Blaumueller, M. Carcangiu, S. Artavanis-Tsakonas. // Proc. Natl Acad. Sci. USA.—1995.—"Vol. 92.—P. 6414-6418.

311. Zermati, Y. Caspase activation is required for eritroid differentiation. / Y. Zermati, C. Garrido, S. Amsellem, S. Fishelson, D. Bouskary, F. Valensi. // J Exp Med.—2001.—Vol. 193.—P. 247-254.

312. Zhang, H. Myosin-X provides a motor-based link between integrins and the cytoskeleton. / H. Zhang, J.S. Berg, Z. Li, Y. Wang, P. Lang, A.D. Sousa, A. Bhaskar, R.E. Cheney,S. Stromblad. // Nat Cell Biol.—2004 — Vol. 6.—P. 523-531.

313. Zhong, T. P. Signaling pathway fashions the first embryonic artery. / T.P. Zhong, S. Childs, J.P. Leu, M.C. Fishman. // Nature—2001.—Vol. 414.—P. 216-220.

314. Zhou, Y. Human cytotrophoblasts adopt a vascular phenotype as they differentiate: a strategy for successful endovascular invasion? / Y. Zhou, G. Zhu, D.J. Jin, G. Bauman, J.J. Kopchick. // J. Clin. Invest.—1997.—Vol. 99.—P. 2139-2151.

315. Zhu, Z. Inhibition of tumor growth and metastasis by targeting tumor-associated angiogenesis with antagonists to the receptors of vascular endothelial growth factor. / Z. Zhu, L. Witte. // Invest New Drugs.—1999.— Vol. 17.—P. 195-212.