Морфологическая характеристика репаративной регенерации фетальной печени крыс тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.03.04, кандидат медицинских наук Ельчанинов, Андрей Владимирович

• Ельчанинов, Андрей Владимирович
• кандидат медицинских наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Ельчанинов, Андрей Владимирович

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Регенерация и возраст.

1.2. Регенерация органов млекопитающих в пренатальном периоде.

1.3 Развитие печени крысы в эмбриональный и ранний постнатальный периоды.

1.4. Восстановление массы печени после частичной гепатэктомии как модель регенерации паренхиматозных органов млекопитающих.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ.

3.1. Морфологические особенности нормальной и поврежденной фетальной печени

3.2. Доказательства воспроизводимости.

3.3 Восстановление массы печени.

3.4. Клеточный состав печени после гепатэктомии в пренатальном периоде.

3.5. Митотический индекс гепатоцитов вне зоны повреждения в пре- и постнатальном периодах после резекции печени плодов крыс.

3.6. Суточная динамика митотической активности гепатоцитов вне зоны повреждения в печени плодов крыс после резекции.

3.7. Оценка стабильности времени митоза гепатоцитов вне перираневой зоны после резекции печени плодов крыс.

3.8. Иммуногистохимическое исследование пролиферации гепатоцитов вне зоны повреждения.

3.9. Характеристика пролиферации гепатоцитов в перираневой области.

3.10. Площадь гепатоцитов и их ядер в пре- и постнатальном периодах после резекции печени плодов крыс.

4. ОБСУЖДЕНИЕ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Морфологическая характеристика репаративной регенерации фетальной печени крыс»

Актуальность

Репаративная регенерация печени млекопитающих в разные периоды постнатальной жизни подробно изучена [Сидорова В.Ф., 1976]. В частности, показано, что даже у новорожденных млекопитающих печень после резекции хорошо регенерирует. При этом масса органа ^ восстанавливается за счет размножения и гипертрофии гепатоцитов, а отрастания значительного количества паренхимы от раневой поверхности не происходит, что характерно для регенерационной гипертрофии [Сидорова В.Ф., Рябинина З.А., Лейкина Е.М., 1966; Michalopoulos G.K., DeFrances М.С., 1997]. Следовательно, способность печени к регенерации формируется во время органогенеза в пренатальном периоде. Однако сведения о восстановительном росте печени плодов млекопитающих отсутствуют.

С самого начала изучения феномена регенерации многие исследователи отмечали некоторое сходство между этим процессом^ и эмбриональным развитием органов. Особенно это заметно при развитии и регенерации, конечности амфибий [Лиознер Л.Д., 1982], Сходные черты между эмбриональным развитием^ и регенерацией можно обнаружить и при восстановлении паренхиматозных органов. Например, после удаления части, печени у взрослых млекопитающих гепатоциты. начинают активно размножаться и синтезировать а-фетопротеин — маркер гепатобластов, чего не отмечается в печени взрослых особей в. норме [Michalopoulos G.K., DeFrances М.С., 1997]. Однако между эмбриональным развитием и регенерацией органов есть - коренные различия. Например, после повреждения часто регенерирует орган значительно отличающийся от удаленного, так при регенерации печени в постнатальном периоде удаленные доли не формируются вновь [Сидорова В.Ф., Рябинина З.А., Лейкина Е.М., 1966].

В регенерирующих фетальных органах млекопитающих восстановительный процесс сочетается с органогенезом. В связи с этим неизвестно, будут ли наносимая травма и последующая регенерация изменять дальнейший ход развития данного органа.

Помимо фундаментальной значимости, изучение регенерации в пренатальном периоде у млекопитающих имеет и практическую ценность. В конце 90-х годов XX века в клиническую практику внедрен ряд операций на плодах человека, поэтому выяснение восстановительной способности органов млекопитающих в пренатальном периоде после механической травмы является актуальным [Rychik J. et al., 2004].

Врожденные опухоли печени человека1 характеризуются крайне тяжелой клинической картиной и высокой смертностью пациентов. Течение таких опухолей часто осложняется водянкой плода, респираторным дистресс синдромом новорожденных, врожденной сердечной недостаточностью. Наиболее часто среди врожденных опухолей печени встречается гемангиома, мезенхимальная гамартрома, гепатобластома [Isaacs Н. Jr., 2007]. Разработка экспериментальных моделей повреждения печени плодов млекопитающих, а также изучение закономерностей регенерации фетальной печени позволит обосновать и внедрить в клиническую практику раннее хирургическое лечение врожденных опухолей печени человека.

Цель и задачи исследования

Цель: изучить особенности репаративной регенерации печени плода крысы после резекции.

Задачи исследования:

1. Разработать воспроизводимую модель резекции фетальной печени крысы;

2. Проследить динамику восстановления массы оперированной фетальной печени через 1, 2, 3, 7, 10, 14 и 25 сут после резекции;

3. Изучить изменение объемной доли гепатоцитов и гемопоэтических клеток в печени плодов крысы в ответ на резекцию через 3 ч, 1, 2, 3 и 7 сут после операции;

4. Исследовать пролиферацию гепатоцитов с помощью определения их митотического индекса, а таюке с использованием иммуногистохимического маркера пролиферации Кл67 через 6 ч, 1, 2, 3, 7, 10 и 14 сут после резекции печени плодов крысы;

5. Изучить суточную динамику митотической активности гепатоцитов в течение 48 ч после резекции в печени плодов крысы;

6. С помощью определения соотношения митотических фаз оценить стабильность времени митоза гепатоцитов в оперированной печени плодов крысы;

7. Проследить динамику изменения площади гепатоцитов и их ядер в оперированной и интактной печени плодов крысы через 1, 2, 3, 7, 10, 14 и 25 сут после резекции, и таким образом, оценить вклад гипертрофии гепатоцитов в регенерацию печени плода крысы;

8. С помощью гистологических методов исследовать процессы роста в области резекции печени плодов крысы, оценить в перираневой. зоне пролиферацию гепатоцитов с помощью определения их митотического индекса, а также с использованием иммуногистохимического маркера пролиферации Кл67, на основании полученных результатов определить способ регенерации печени плода крысы.

Научная новизна )

Разработана оригинальная воспроизводимая модель резекции печени плода крысы со стандартным объемом повреждения (22±3,7% массы органа).

Впервые показано, что печень плода крысы способна к регенерации в очень короткий срок. Масса, печени- плодов, оперированных на 17-ые сут развития, восстанавливается уже через 2 сут после резекции.

С помощью морфометрического анализа показано, что наносимая травма и регенерация не вызывают изменения соотношения- гепатоцитов и гемопоэтических клеток печени плода, что свидетельствует об отсутствии ускоренного угасания гемопоэза в печени плодов крысы.

Выявлено, что гипертрофия гепатоцитов не играет существенной роли в восстановлении массы фетальной печени крысы, регенерация осуществляется практически только за счет митотического размножения гепатоцитов.

При исследовании пролиферации гепатоцитов установлено, что резекция фетальной печени крысы, стимулирует размножение клеток как в перираневой зоне, так и на расстоянии от нее. Это свидетельствует о равномерном росте печени, и о* способе ее регенерации - регенерационной гипертрофии.

Показано, что наносимая травма не вызывает нарушения прохождения гепатоцитами стадий митотического цикла. Об этом свидетельствуют незначительные изменения соотношения фаз- митоза на разных сроках после операции, сильная положительная корреляция между индексом метафаз и митотическим индексом в опыте и контроле; 'а также предшествование многократного увеличение количества Кл67-положительных гепатоцитов пику митотического индекса.

На основании того, что после резекции печени плода- крысы сохраняется динамика увеличения массы, органа, соотношение гепатоцитов и гемопоэтических клеток, прохождение гепатоцитами- митотического цикла, сроки возрастной гипертрофии гепатоцитов не изменяются в оперированной печени, можно заключить, что резекция 22±3,7% "-массы не нарушает общего хода развития печени плода крысы.

Научно-практическая значимость

В результате проведенного исследования получены новые данные, которые теоретически обосновывают возможность операции на печени плода при определенных видах врожденной патологии (гепатобластома и др. опухоли) и высокую вероятность благоприятного исхода.

Полученные данные могут быть использованы в процессе преподавания в вузах медицинского и биологического профиля по специальностям гистология, эмбриология, цитология и патологическая анатомия.

Оригинальная модель повреждения печени в пренатальном возрасте может быть использована в научно-исследовательских разработках.

Внедрение

Результаты исследования по восстановлению массы фетальной печени используются при чтении лекций и проведении практических занятий на кафедре гистологии, цитологии и эмбриологии лечебного факультета ГОУ ВПО «Российский государственный медицинский университет».

Степень личного вклада автора в результаты исследования

Автор непосредственно участвовал в проведении всех экспериментальных исследований, самостоятельно проводил сбор материала, обработку и анализ полученных экспериментальных данных, формулирование основных положения диссертации сделал под руководством Большаковой Г.Б. '

Основные положения, выносимые на защиту

Печень плода после удаления части паренхимы способна к регенерации, которая осуществляется так же, как и у взрослых животных, по способу регенерационной гипертрофии. Однако имеются возрастные особенности: регенерация печени плодов осуществляется без участия гипертрофии гепатоцитов. Масса оперированной печени увеличивается за счет митотического размножения гепатоцитов, распределенных равномерно по всему органу.

После резекции фетальной печени и в ходе последующей регенерации соотношение гепатоцитов и гемопоэтических клеток оперированной печени плодов крыс не отличается от таковых у одновозрастных интактных животных, то есть регенерация протекает органотипически.

Наносимая травма не вызывает изменения общего хода развития фетальной печени крысы по сравнению с контролем, что проявляется в динамике увеличения массы оперированной печени, в отсутствии ускоренного угасания гемопоэза и гипертрофии гепатоцитов.

Апробация работы

Результаты исследований и основные положения работы доложены и обсуждены на конференциях «Актуальные вопросы морфогенеза в норме и патологии» (г. Москва, 2010), на VII Всероссийской конференции по патологии клетки (г. Москва, 2010), на межлабораторной конференции НИИМЧ РАМН (март, апрель 2011).

Публикации.

Основные положения диссертации отражены в 5 публикациях, из них -3 статьи в журналах, рекомендуемых ВАК РФ.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, общей характеристики материала и методов исследования, главы собственных исследований и их обсуждения, заключения, выводов и списка литературы.

Заключение диссертации по теме «Клеточная биология, цитология, гистология», Ельчанинов, Андрей Владимирович

выводы

1. Фетальная печень крыс способна к органотипической регенерации. Масса печени плодов^ оперированных на 17-ые сут развития, восстанавливается уже через 2 сут после резекции 22,0±3,7% массы органа.

2. Печень плодов крыс регенерирует по способу регенерационной гипертрофия, отрастания паренхимы от раневой поверхности не происходит.

3. Регенерация печени плодов крысы происходит за счет усиления митотической активности гепатоцитов, поскольку гипертрофия гепатоцитов отсутствует.

4. В печени плодов крысы пролиферация гепатоцитов активируется через 9-12= часов после резекции. Максимальный уровень пролиферации гепатоцитов (16,02±0;61%о) наблюдается через 24 ч после повреждения печени плодов крысы. !

5. Суточная периодичность пролиферации гепатоцитов как в регенерирующей, так и интактной печени плодов крысы не выявлена.

6. Резекция 22,0±3,7% массы печени не нарушает общего хода развития печени плода крысы по сравнению с одновозрастным контролем: сохраняется динамика увеличения массы органа* соотношение гепатоцитов и гемопоэтических клеток, прохождение митотического; цикла гепатоцитами, отсутствует гипертрофия гепатоцитов. ;

7. Впервые разработанная воспроизводимая модель регенерации печени плодов крысы позволяет изучать восстановление паренхиматозных органов плодов млекопитающих.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Регенерации паренхиматозных органов в пренатальном периоде посвящено крайне мало исследований. Однако выяснение репаративных возможностей фетальных органов млекопитающих представляет значительный интерес для биологии и медицины. Особенности регенерации фетальной печени млекопитающих изучали на модели восстановления печени плода крысы после резекции.

Разработана оригинальная методика операции на печени 17-суточного плода крысы. Объем резекции составил примерно 20%, была доказана воспроизводимость такого повреждения.

Совокупность полученных данных дает основание утверждать, что проявляющийся практически у всех классов позвоночных способ регенерации паренхиматозных органов в виде регенерационной гипертрофии проявляется уже в эмбриональном периоде. Печень плодов крыс обладает регенерационной способностью, так как i ее масса полностью восстанавливается уже через 2 суток после операции.

В регенерации печени в пре- и постнатальном периодах есть много общих черт, но есть и различия. К числу общих черт относится то, что печень восстанавливает массу за счет пролиферации гепатоцитов, сохраняет специфическую гистоструктуру. Морфометрический анализ, проведенный с помощью метода полей, показал, что после резекции в печени плода отсутствует значительный отек. Кроме того в регенерировавшей печени объемная доля гепатоцитов и гемопоэтических клеток не отличалась от соответствующего контроля. Таким образом, восстановление массы носил истинный характер, а регенерация протекала органотипически. еще не сформировался, как и не сформировались генетические механизмы организации суточного ритма пролиферации. Нам не удалось обнаружить суточный ритм митотического индекса гепатоцитов. Однако, вероятно, пролиферативная активность органов у плодов подвержена влиянию неких факторов со стороны матери, так как мы наблюдали синхронное падение митотического индекса как у оперированных, так и интактных плодов.

Соотношение фаз митоза в регенерирующей и интактной печени практически не различался, что свидетельствует о стабильном течении митоза гепатоцитов в оперированном органе. При сопоставлении динамики митотического индекса и количества гепатоцитов, в которых определяется ядерный белок К167 (клетки на различных стадиях митотического цикла), было обнаружено, что гепатоциты в регенерирующей печени плода крысы без задержки проходят стадии клеточного цикла,¡предшествующие делению и далее вступают в митоз. То есть прохождение гепатоцитами митотического цикла не нарушено.

В целом можно заключить, что регенерационный процесс, являясь, ответом органа травму, не влияет на общий ход его развития, поскольку сохраняется динамика увеличения массы органа, соотношения гепатоцитов и гемопоэтических клеток, прохождения митотического цикла, не изменяются сроки возрастной гипертрофии гепатоцитов в оперированной печени.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Ельчанинов, Андрей Владимирович, 2011 год

1. Алов И.А. Цитофизиология и патология митоза: М.: Медицина, 1972. 263 с. ' . .

2. Бабаева A.F. Регенерация: факты и перспективы. М.: Издательство РАМН., 2009. 336 с.3. . Большакова Г.Б. Способность к восстановлению миокарда плодов крыс // Онтогенез. — 1990. — Т.21, № 4. — С.409-415.

3. Большакова Г.Б. Пролиферация кардиомиоцитов у плодов крыс в норме и после повреждения сердца //Бюл. экспер. биол. — 2008. — Т.145, №4. — С. 471-^74.

4. Большакова Г.Б. Молекулярные механизмы репарации в пренатальном периоде //Архив патологии . — 2008. — № 6. — С. 53-56.

5. Механизм прямых межклеточных взаимодействий. Самоорганизация ритма синтеза белка / Бродский В.Я. и др. // Онтогенез. — 2006. — Т. 37, №5. — С. 384-393

6. Быстренина Н.Г. Суточный ритм митотической активности в эпидермисе и- печени крыс на ранних стадиях их постиатального развития // Суточные ритмы физиологических процессов организма под общ. ред. Доброхотова В.Н.Даболина В.А.. — M.,il972 — С. 14-18.

7. Верин В.К. Дифференцировка гепатоцитов и холангиоцитов в эмбриональном и постнатальном периодах онтогенеза крысы // Арх. анат. —1982. — №3. — С. 19-23.

8. Воронцова М.А. Регенерация органов у животных. М.: Сов. наука,1111949. 268 с.

9. Воронцова М.А. Восстановление утраченных органов у животных и человека. М.: Сов. наука, 1953. 122 с.

10. Грачева Н.Д. Авторадиографическое изучение пролиферативных процессов в гистогенезе печени крыс // Арх. анат. — 1966. — Т. 50, №5. — С. 38-47

11. Григорьев Н.И. Строение и регенерация печени после ее местного повреждения. М.: Медицина, 1975. 192 с.

12. Доброхотов В.Н. О некоторых закономерностях суточного ритма пролиферативных процессов // Суточные ритмы физиологических процессов организма под общ. ред. Доброхотова В.Н., Таболина В.А.. — М., 1972 — С. 5-8.

13. Доброхотов В.Н., Валвас B.C. Динамика фаз митоза и относительная продолжительность клеточного деления // Бюл. экспер. биол. — 1981. — Т.92, № 8. — С.76-78

14. Заварзин A.A. Синтез ДНК и кинетика клеточных популяций в онтогенезе млекопитающих. JL: Наука, 1967. 219 с.

15. Зайцев Т.Н. Гистологическое исследование печени линейных, нелинейных и гнотобиотических крыс: автореф., канд. мед. наук. М., 1975. 12 с.

16. Лиознер Л.Д. О различных способах регенерации // Онтогенез. — 1972. — Т.3,№ 1. —С.3-9.

17. Лиознер Л.Д. Основные проблемы учения о регенерации. М.: Наука, 1975. 102 с.

18. Лиознер Л.Д. Регенерация и развитие. М.: Наука, 1982. 167 с.

19. Левина С.Е. Некоторые виды хирургического и фармакологического воздействия на эндокринную систему высших позвоночных // Методы биологии развития под общ. ред. Т.А. Детлаф. М: Наука, 1974. — С 246

20. Романова JI.К. Регенерация легких в эксперименте и клинике. М.: Медицина, 1971. 198 с.

21. О роли функции в восстановлении поврежденных паренхиматозных внутренних органов / Романова JI.K. и др. // Онтогенез. — 1971 — Т.2, №5. — С. 3-10.

22. Романова JI.K. Регуляция восстановительных процессов. М.: Изд-во Моск. Ун-та, 1984. 176 с.

23. Рябинина З.А., Бенюш В.А. Полиплоидия и гипертрофия клеток в процессах роста и восстановления. М.: Медицина, 1973. 207 с.

24. Сидорова В.Ф. Гистогенетические и структурные изменения в печени крыс при ее регенерации после нанесения сквозных и краевых ранений // Бюлл. экспер. биол. и мед. — 1960. — №3. — С. 97-101.

25. Сидорова В.Ф., Рябинина З.А., Лейкина Е.М. Регенерация печени у млекопитающих. М.: Медицина, 1966. 205 с.

26. Сидорова В.Ф. Постнатальный рост и восстановление внутренних органов у позвоночных. М.: Наука, 1969. 189 с.

27. Сидорова В.Ф. Возраст и восстановительная способность органов у млекопитающих. М.: Медицина, 1976. 199 с.

28. Студитский А.Н. Экспериментальная хирургия мышц. М.: Издательство Академии наук СССР, 1959. 338 с. :

29. Юнкеров В.И., Григорьев С.Г. Математико-статистическая обработка данных медицинский исследований. СПб., 2002. 267с.

30. Яшина И.Н. Об образовании печеночных долек в регенерирующей печени // Бюлл. экспер. биол. и мед. — 1970. — №10. — с. 95-97.

31. Agata K., Saito Y., Nakajima E. Unifying principles of regeneration I: Epimorphosis versus morphallaxis // Develop. Growth. Differ. — 2007. — № 49. — P. 73-78. . ~

32. Adzick N.S., Lorenz H.P. Cells, Matrix, Growth Factors, and the Surgeon. The Biology of Scarless Fetal Wound Repair // Annals of Surgery—1994. —Vol. 220, №. 1.-10-18.

33. Involvement of p21 and p27 in the regulation of CDK activity and cell cycle progression in the regenerating liver / Albrecht:: J.H. et al. // Oncogene —1998;—№ 16.—P. 2141-2150.

34. Tissue response and Msxl expression after human fetal digit tip amputation in vitro / Allan e.H: et al. // Wound Repair Regen.—2006.—Vol.14, №4. —P. 398-404 . ^ .: ■ , • •

35. Alvarado A.S. Regeneration in. the metazoans: why does it happen? // BioEssays—2000. —Vol.22, №6. — P. 578-590

36. Awad M.M., Gruppuso Ph.A., Bienieki T.C. Modulation of mitogen-independent hepatocyte proliferation;during the perinatal period; in the rat;// In Vitro Cell! & Dev.Biol-,- Anim. — 1997. — Vol: 33^№ 7. — P. 562-568.

37. Awad! M. M., Gruppuso Ph. A. Cell Cycle Control during Liver Development in the Rat: Evidence Indicating! a Role for Cyclin D1 Posttranscriptional Regulation- // Cell Growth & Differentiation — 2000. — Vol.11.—P.325-334.

38. Role; of oxidative/nitrosative: stress-mediated Bcl-2 regulation in apoptosisand malignant transformation / Azad N. et al. // Ann. N.-Y. Acad. Sei.—2010.— Vol.1203.— P. 1-6.

39. Growth retardation, polyploidy, and multinucleation induced by clast3, a novel cell cycle-regulated protein / Bahar R. et al. // The Journal of biological chemistry—2002.— Vol.277, №.42. — P; 40012-40019.

40. Barbason H., Fourré F., Focan C. Synchronizing effect of corticosterone's circadian rhythm on the DNA synthesis rate in the liver of the young rat // Pathol. Biol. (Paris). —2003. —Vol.51, №4. —P. 210-211.

41. Bely A.E., Nyberg K.G. Evolution of animal regeneration: re-emergence of a field// Trends Ecol. Evol.— 2009. — Vol.25, №3.,-r- P. 161-170.

42. Regenerative healing of incisional wounds in murine fetal lungs maintained in organ culture / BlewettC J. et al. // J. Pediatr. Surg. — 1995. —Vol.30, №7. —P. 945-948. I

43. Regenerative healing of incisional wounds in midgestational murine hearts in organ culture / Blewett C.J. et al. // J. Thorac. Cardiovasc. Surg. —1997. —Vol. 113, №5.—P. 880-885.

44. Bras M., Queenan B., Susiin S.A. Programmed cell death via mitochondria: different'modes of dying // Biochemistry (Mose.). —2005. —Vol.70, №2. —P. 231-239.

45. Brito D.A., Yang Z., Ricder C.L. Microtubules do not promote mitotic slippage when the spindle assembly checkpoint cannot be satisfied // J. Cell Biol. — 2008—Vol.182, № 4 —p. 623-629.

46. Brockes J.P., Kumar A., Vellöso C.P. Regeneration as an evolutionary variable // J. Anat. — 2001. —Vol.199. — P. 3-11. :t

47. Brockes J.P., Kumar A. Comparative Aspects of . Animal Regeneration // Annu. Rev. Cell Dev. Biol. —2008. — №24. —P. 525-549.55 ; Bucher N.R., Glinos A.D. The Effect of Age on Regeneration of Rat Liver // Cancer Research—1950. — Vol.10, №5—Pi 324-332.

48. Bucher N.R., Swaffield M.N., DiTroia A.F. The influence of age upon the incorporation of thymidine-2-C14 into the DNA of regenerating rat liver // Cancer Research—1964.—Vol.24. — P. 509-512.

49. Bucher N.R., Swaffield M.N. The rate of incorporation of labeled thymidine into the deoxyribonucleic acid of regenerating rat liver inrelation to the amount of liver excised // Cancer Research — 1964. —Vol.24. —P. 1611-1625

50. Celton-Morizur S., Desdouets C. Polyploidization of liver cells // Adv Exp Med Biol. —2010. —Vol. 676. —P. 123-135.

51. Columbano A., Shinozuka H. Liver regeneration versus direct hyperplasia the FASEB Journal — 1996. — Vol.10. — P. 1118-1128.

52. Structural and functional? differentiation of sinusoidal endothelial cells during liver organogenesis in humans / Couvelard A. et al. // Blood — 1996. — Vol. 87, № 11. — P. 4568-4580.

53. Colwell A.S., Longaker M.T., Lorenz H.P. Mammalian fetal organ regeneration// Adv. Biochem. Eng. Biotechnol. —2005. — Vol. 93. — P. 83100. • ' '

54. Influence of aminoguanidine on parameters of: liver injury and regeneration induced in rats by a necrogenic dose of thioacetamidé / Diez-Fernandez C. et al. // Br. J. Pharmacol. — 1998. — Vol.125. — P. 102-108.

55. Fetal airway wound repair: a new frontier / Dohar J.E. et al. // Arch Otolaryngol. Head: Neck Surg. — 1998. — Vol 124, №1 — P. 25-29.

56. Compensatory Renal Growth after Unilateral Nephrectomy in the Ovine Fetus / Douglas-Denton R. et al. //J. Am. Soc. Nepihrol. — 2002. — №13. —P.406.410.

57. Development of hepatic sinusoidal structure with special reference to the Ito cells / Enzan H. et al. // Microscopy research and technique.—1997. — №39. — P. 336-349

58. Fabrikant J.I. The kinetics of cellular proliferation in regenerating liver // The Journal of cell biology. — 1968. — Vol 36. — P. 551-565.

59. Fausto N., Laird A.D., Webber E.M. Role of growth factors and cytokines in hepatic regeneration // The FASEB J. — 1995. — Vol. 9. — P. 1527-1536.

60. Fausto N. Liver regeneration // Journal of Hepotology.— 2000. —Vol. 32 (suppl. 1). —P. 19-31.

61. Fausto N. Knocking out genes to study liver regeneration: present and future // Am. J Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. — 1999. — Vol. 277. —P. 917-921.

62. Ferguson M.W.J., O'Kane Sh. Scar-free healing: from embryonic mechanisms to adult therapeutic intervention // The Royal Society. — 2004. — Vol. 359.—P. 839-850.

63. Characterization of Cell Types During Rat Liver Development / Fiegel H.C. et al. // Hepatology. — 2003. — Vol. 37, № 1 — P.148-154.

64. Immunocytochemical determination of' ploidy class-dependent bromodeoxyuridine incorporation! in rat liver parenchymal cells after partial hepatectomy / Frederiks W.M. et al. // Histochemistry. — 1990. — Vol. 93, №6. —P. 627-630.

65. Hepatocyte ploidy in regenerating livers after partial hepatectomy, drug-induced necrosis, and cirrhosis / Gandilleta A. et al. // Eur. Surg. Res. — 2003. — Vol.35, №3. —P. 148-160.

66. Hepatocyte ploidy in normal young rat / Gandilleta A. et al. // Comp. Biochem. Physiol. A Mol. Integr. Physiol. — 2003.: — Vol.134, №3. —P. 665673.

67. Binucleation and polyploidization patterns in developmental andregenerative rat liver growth / Gerlyng P. et al. // Cell. Prolif. — 1993. — Vol. 26, №6. —P. 557-565.

68. Pregnancy restores the regenerative capacity of the aged liver via activation of an mTORCl-controlled hyperplasia/hypertrophy switch / Gielchinsky Y. et al. // Genes & Development. —2010. —Vol.24. —P. 543-548.

69. Liver development in the rat and in man during the embryonic period (Carnegie stages 11—23) / Godlewski G. et al.,// Microscopy research andtechnique.—1997. — № 39. — P. 314-327.i

70. Liver development in the rat during the embryonic period (Carnegie stages 15-23) / Godlewski G. et al. // Acta anatómica. — 1997. — №3, Vol. 160. — P. 172-178.

71. Gorla G.R., Malhi H., Gupta S. Polyploidy associated with oxidative injury attenuates proliferative potential of cells // Journal of Cell Science. — 2001. — Vol.114.—P. 2943-2951.

72. Goss R.J., Walker M.J. Compensatory renal hypertrophy in fetal rats // J. Urol. — 1971. — Vol.106, №3. —P. 360-362.

73. Greengard O., Federman M., Knox W.E. Cytomorphometry of developing rat liver and its application to enzymic differentiation // The Journal Of Cell Biology. — 1972. — Vol. 52. — P. 261-272.

74. Liver cell polyploidization: a pivotal role for binuclear hepatocytes / Guidotti J.-E. et al. // The journal of biological chemistry. — 2003. — Vol. 278, №.21. —P. 19095-19101.

75. Relationships between hematopoiesis and hepatogenesis in the midtrimester fetal liver characterized by dynamic transcriptomic and proteomic profiles / Guo Y. et al. // PLoS ONE. — 2009. — Vol. 4, №10. — e7641. doi:10.1371/journal.pone.0007641.

76. Gupta S. Hepatic polyploidy and liver growth control // Seminar in Cancer biology. — 2000. — Vol. 10.— P.161-171.

77. Digit regeneration is regulated by Msxl and BMP4 in fetal mice / Han M. et al. //Development. — 2003. — Vol. 130. — P. 5123-5132.

78. Hata Sh., Namae M., Nishina H. Liver development and regeneration: From laboratory study to clinic therapy // Develop: Growth Differ. — 2007. — Vol. 49.1. P. 163-170.

79. Development and Regeneration of the Neonatal Digit Tip in Mice / Han M. et al. //Dev Biol. — 2008. — Vol.315, №1. —P. 125-135.

80. Iakova P., Awad S.S., Timchenko N.A. Aging reduces proliferative capacities of liver by switching pathways of C/EBPa growth arrest // Cell. — 2003.1. Vol.113. —P. 495-506.

81. Isaacs H. Jr. Fetal and neonatal hepatic tumors // J. Pediatr.Surg. — 2007. — Vol.42. —P. 1797-1803.

82. Expression of matrix' mettalloproteinases and their inhibitors during hepatic tissue repair in the rat / Knittel T. et al. // Histochem. Cell Biol. — 2000. — Vol. 113. —P. 443-453.

83. Plasticity and expanding complexity of the hepatic transcription factor network during liver development / Kyrmizi I. et al:. // Genes & Dev. — 2006. — Vol. 20 — P. 2293-2305.

84. Cellular Liver Regeneration after Extended Hepatic Resection in* Pigs / Ladurner R. et al. // HPB Surgery. — 2009. — Article ID 306740, 7 pages.

85. Control of rate and extent of the proliferative response after partial hepatectomy /Lambotte L. et al. // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. — 1997. — Vol.273. — P. 905-912.

86. Lemaigre F.P. Mechanisms of liver development: concepts for understanding liver disorders and design of novel therapies // Gastroenterology. — 2009. — Vol. 137. — P. 62-79.

87. Fetal diaphragmatic wounds heal with scar formation / Longaker M.T. et al. // J. Surg. Res. — 1991. — Vol.50, №4. —P. 375-385.

88. Lindboe C.F., Torp S.H. Comparison of Ki-67 equivalent antibodies // J. Clin. Pathol. — 2002. — № 55. — P. 467-^71

89. Liver tetraploidization is controlled by a hew process of incomplete cytokinesis / Margall-Ducos G. et al. // Journal of Cell Science. — 2007 — Vol. 120 — P. 3633-3639.

90. Mast B.A., Albanese C.T., Kapadia S. Tissue repair in the fetal intestinal tract occurs with adhesions, fibrosis, and neovascularization // Ann. Plast. Surg. — 1998. — Vol.41, №2. — P. 140-144.

91. Ploidy and nuclearity of rat hepatocytes after compensatory regeneration or mitogen-induced liver growth / Melchiorri C. et al. //Carcinogenesis. 1993 — Vol.14, №9. — P. 1825-1830.

92. Scar formation in the fetal alimentary tract / Meuli M. et al. // Journal of Pediatric Surgery. — 1995. — Vol.30, № 3. — P. 392-395.

93. Michalopoulos G.K. Liver regeneration // J. Cell. Physiol. — 2007. — Vol.213, №2. — P. 286-300.

94. Michalopoulos G. K. Liver regeneration after partial hepatectomy. critical analysis of mechanistic dilemmas // The American Journal of Pathology. — 2010. — Vol. 176, №.1 — P. 2-13.

95. Michalopoulos. G.K., DeFrances M.C. Liverl regeneration // Science. — 1997— Vol.276. — P. 60-65.

96. Michalopoulos G.K., Khan Z. Liver regeneration, growth factors, and amphiregulin // Gastroenterology. — 2005. — Vol.128, №2. —P. 503-506.

97. Hepatocytes undergo phenotypic transformation to biliary epithelium in organoid cultures / Michalopoulos G.K. et al. // Hepatology. —2002. — Vol. 36, №. 2. —P. 278-283.

98. Michalopoulos G.K., L. Barua, Bowen W.C. Transdifferentiation of rat hepatocytes into biliary cells after bile duct ligation and toxic biliary injury // Hepatology. —2005. —Vol. 41, №.3 —P. 535-544.

99. Compensatory renal hypertrophy in fetal lambs / Moore E.S. et al. // Pediatr Res. — 1979. — Vol.13, №10 — P.l 125-1128.

100. Mammalian regeneration and regenerative medicine / Muneoka K. et al. // Birth Defects Res. C. Embryo. Today. — 2008. — Vol.84, №4. — P. 265-280.

101. Nadal C., Zajdela F. Polyploïdie somatique dans le foie de rat I. Le rôle des cellules binucléées dans la genèse des cellules polyploïdes // Experimental Cell Research. — 1966. — Vol.42. — P. 99-116.

102. Naito M., Hasegawa G., Takahashi K. Development, differentiation, and maturation of Kupffer cells // Microscopy Research And Technique — 1997 — Vol.39 — P.3 50-364.

103. Nagy P., Bisgaard H.C., Snorri S.Th. Expression of hepatic transcription factors during liver development and oval cell differentiation // The Journal of Cell Biology. — 1994. — Vol. 126 — P. 223-233.

104. Reconstitution of liver mass via cellular hypertrophy in the rat / Nagy P. et al. // Hepatology. — 2001. — Vol.33, №2. — P. 339-345.

105. Nakatani T., Inouye M., Mirochnitchenko O. Overexpression of antioxidant enzymes in transgenic mice decreases cellular ploidy during liver regeneration // Exp. Cell Res. — 1997. — Vol. 236. — P. 137-146.

106. Ngo-Muller V., Muneoka K. Exo utero surgery // Development Biology Protocols.— 2000. — Vol 1. — P. 481-491.

107. Ngo-Muller V., Muneoka K. In utero and" exo utero surgery on rodent embryos // Methods Enzymol. — 2010. —Vol. 476.—P. 205-226.

108. Restoration of liver mass after injury requires proliferative and not embryonic transcriptional patterns / Otu H.H. et al.'. //The Journal of Biological Chemistry. — 2007.— Vol. 282, №.15. — P. 11197-11204.

109. Palmes D., Spiegel H.-U. Animal models of liver regeneration // Biomaterials. — 2004. — Vol.25. -^-P. 1601-1611.

110. Prometheus' challenge: molecular, cellular and systemic aspects of liverregeneration / Pahlavan P.S. et al. //Journal of Surgical Research. — 2006; —Vol. 134.—P. 238-251.

111. Hepatic resection in the fetal rabbit. Histologic comparison of tissue regeneration in the fetus versus the adult / Patricolo M. et al'.// Minerva Chir. — 1996. — Vol. 51, №11. —P. 971-977.

112. In utero partial liver resection in the rabbit model: a study on fetal tissue regeneration / Patricolo M. et al. // Fetal .Diagn. Ther. —1997. — Vol. 12, №4. —P. 232-235.

113. Acute cardiovascular effects of fetal surgery in the human / Rychik J. et al. ; // Circulation. — 2004. — Vol. 110, №. 12. — 1549-1556.

114. Fetal bladder wall regeneration with a collagen biomatrix and histological evaluation of bladder exstrophy in a fetal sheep model / Roelofs L.A.J: et al. // Fetal Diagnosis and Therapy. — 2008. — №24. — P. 7-14.

115. Roskams T., Desmet V. Embryology of extra- and intrahepatic bile ducts, the ductal plate // The Anatomical Record. — 2008. — Vol.291. — P. 628-635.

116. Liver, regeneration in transiently impaired in urokinase-deficienfr mice / Roselli H.T. et al.//Am. J. Physiol. Gastrointest Liver Physiol. —1998. — Vol. 275. —P. 1472-1479.

117. Shiojiri N. Development and differentiation of bile ducts in the mammalian liver // Microscopy research and technique—1997. — № 39. — P. 328-335.

118. Evidence for a terminal differentiation process in the rat liver / Sigal S.H. et al. // Differentiation. — 1995. — Vol.59,№1. —P. 35-42.

119. Partial hepatectomy-induced polyploidy attenuates hepatocyte replication and activates cell aging events / Sigal S.H. et al. // American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver Physiology. — 1999. — Vol. 276. — P. 1260-1272.

120. Sirica A.E., Cole S.L., Williams T. A unique rat model of bile ductular hyperplasia in which liver is almost totally replaced with well differentiated bile ductules. // Am. J. Pathol. — 1994. — Vol. 144, №. 6. —.P. 1257-1268.

121. Sirica A.E., Gainey T.W., Mumaw V.R. Ductular hepatocytes evidence for a bile ductular cell origin in furan-treated rats // Am. J. Pathol. —.1994. —.Vol. 145, №. 2. —.P. 375-383

122. Sirica A.E. Ductular hepatocytes // Histol. Histopathol. —. 1995. —.Vol. 10, №. 2. —.P. 433-456.

123. Sirica A.E., Williams T. Appearance of ductular hepatocytes in rat liver after bile duct ligation and subsequent zone 3 necrosis by carbon tetrachloride. // Am. J. Pathol. — 1992. — Vol. 140, №. 1. — P.129-136.

124. Si-Tayeb K., Lemaigre F.P., Duncanet S.A. Organogenesis and development of the liver // Developmental cell. — 2010. —№18. —P. 175-189.

125. Postnatal ontogenesis of the circadian clock within the rat liver / Sladek M. et al. // Am. J. Physiol. Regulatory Integrative Comp. Physiol. — 2006. —Vol. 292. —P. 1224-1229.

126. Fetal tibial bone healing in utero: the effects of miniplate fixation / Slate R.K. et al. // Plast. Reconstr. Surg. — 1993. —Vol. 92(5):874-83

127. Steer C.J. Liver regeneration // The FASEB J. —1995. — Vol. 9. — P.1397-1400.

128. Morphogenesis of chicken liver: identification of localized growth zones and the role of beta-catenin/Wnt in size regulation / Suksaweang S. et al.// Developmental Biology. — 2004. — Vol.266. — P. 109 122.

129. Experimental models of hepatectomy and liver regeneration using newborn and weaning rats / Tannuri A.C.A. et al. // Clinics. — 2007. — Vol. 62, №6. — P. 757-762

130. Terada T., Kitamura Y., Nakanuma Y. Expression of matrix proteinases during human intrahepatic bile duct development. A possible role in biliary cell migration // American Journal of Pathology — 1995. — Vol. 147, №. 5 — P.1207-1212.

131. Terada T., Kitamura Y., Nakanuma Y. Normal and abnormal development of the human intrahepatic biliary system: a review // Tohoku J. Exp. Med. — 1997. — № 181. — P. 19-32.

132. CCAAT/enhancer binding protein alpha regulates p21 protein and hepatocyte proliferation in newborn mice / Timchenko N.A. et al. // Mol. Cell Biol. — 1997. — Vol.17,№12. — 7353-7361.

133. Timchenko N.A., Wilde M., Darlington G.J. C/EBPalpha regulates formation of S-phase-specific E2F-pl07 complexes in livers of newborn mice // Mol. Cell Biol. — 1999. — Vol.19; №4.— P. 2936-2945.

134. Timchenko N.A. Aging and liver regeneration / Timchenko N.A. et al.// Trends in Endocrinology & Metabolism. — 2009. — №4, Vol.20. —P. 171-176.

135. Thyroid hormone regulation of rat hepatocyte proliferation and polyploidization / Torres S. et al. // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 276:155-163, 1999.

136. Vakifahmetoglu H., Olsson M. Zhivotovsky B. Death through a tragedy: mitotic catastrophe // Cell Death and Differentiation — 2008. — №15. — P. 11531162.

137. Development of the fetal rat liver: ultrastructural and stereological study of hepatocytes / Vassy J. et al. // Cell Differentiation. — 1988. — Vol. 24 — P. 924.

138. Wandzioch E., Zaret K.S. Dynamic signaling network for the specification of embryonic pancreas and liver progenitors // Science. — 2009. — Vol. 324, №5935. —P. 1707-1710.

139. Wilgus T.A. regenerative healing in fetal skin: a review of the literature // Ostom. Wound Manag. — 2007. — Vol. 53, № 6. — P. 16-33.

140. Wong C., Stearns T. Mammalian cells lack checkpoints for tetraploidy, aberrant centrosome number, and cytokinesis failure // BMC Cell Biol. — 2005. —№ 6. —P. 6-17.

141. Ontogeny of circadian organization in the rat / Yamazaki S. et al.// Biol. Rhythms. — 2009. — Vol. 24, №1. P. 55-63.

142. Yannas I.V., Kwan M.D., Longaker M.T. Early fetal healing as a model for adult organ regeneration // Tissue Engineering. — 2007. — Vol. 13, № 8. — P. 1789-1798. i

143. Zhang W. Hepatic non-parenchymal cells and extracellular matrix participate in-oval cell-mediated liver regeneration // World'J. Gastroenterol. — 2009. — Vol. 15, №5. — P. 552-560.

144. Yannas Is.V. Similarities and differences between induced organ regeneration in adults and early foetal regeneration.// J. Royal Society Interface. ■— 2005. — №2. —P. 403-417.

145. BMP signaling induces digit regeneration in neonatal mice / Yu L. et al.// Development. — 2010.— Vol.137, №4— P. 551-559.

146. Zhao R., Duncan S.A. Embryonic development of the liver // Hepatology. — 2005. — Vol. 41, № 5. — P. 956-967.

147. Zorn A.M. Liver development (October 31, 2008), StemBook, ed. The Stem Cell Research Community, StemBook, doi/10.3824/stembook.l.25.1,http ://www. stembook. or g