Морфологический анализ сперматогенеза при действии новых противоопухолевых препаратов и низкоинтенсивного лазерного излучения как радиопротектора тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.25, кандидат биологических наук Макарова, Наталья Петровна

• Макарова, Наталья Петровна
• кандидат биологических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Макарова, Наталья Петровна

Введение.

1. Обзор литературы.

1.1. Сперматогенез у млекопитающих животных. Особенности дифференцировки клеток семенника (на примере крыс).

1.2. Действие повреждающих факторов на мужские половые клетки и гонады млекопитающих животных.

1.2.1. Экспериментальные и клинические исследования гонадо- и гаметотоксического эффекта противоопухолевых препаратов.

1.2.2. Гонадо- и гаметотоксическое действие ионизирующей радиации.

1.3. Подходы к коррекции деструктивных процессов в сперматогенном эпителии и половых клетках, вызванных действием антибиотиков и ионизирующей радиацией.

1.3.1. Антибиотики группы антрациклинов (доксорубицин): механизм действия и выявленная токсичность. Возможность снижения токсичности противоопухолевых препаратов.

1.3.2. НИЛИ: особенности действия на биологическую ткань и возможность использования в качестве способа защиты сперматогенеза от повреждений, вызванных ионизирующей радиацией.

2. Материалы и методы.

2.1. Схемы экспериментов по введению крысам препаратов цитостатического ряда.

2.1.1. Получение наносомальной лекарственной формы доксорубицина.

2.1.2. Токсикологическое исследование наносомальной лекарственной формы доксорубицина на репродуктивную систему млекопитающих.

2.1.3. Схема эксперимента по изучению наносомальной лекарственной формы доксорубицина на репродуктивную систему крыс с интракраниально перевитой глиомой С6.

2.2. Схема экспериментов по изучению воздействия низкоинтенсивного лазерного излучения на сперматогенный эпителий до процедуры общего ионизирующего облучения.

2.3. Гистологическая обработка материала.

2.4. Количественные методы анализа семенников крыс всех экспериментальных групп.

2.5. Статистическая обработка результатов.

3. Результаты собственных исследований.

3.1. Исследование эффекта воздействия антрациклиновых антибиотиков (доксорубицин) на популяцию мужских половых клеток половозрелых крыс.

3.1.1. Изучение влияния наносомальных лекарственных форм доксорубицина на сперматогенный эпителий половозрелых крыс.

3.1.2. Влияние наносомальных лекарственных форм доксорубицина на сперматогенный эпителий в процессе

1 химиотерапии крыс с интракраниалыю перевитой глиомой С6.

3.2. Морфофункциональная характеристика ткани семенника при воздействии низкоинтенсивного лазерного излучения перед общим радиационным облучением крыс.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Морфологический анализ сперматогенеза при действии новых противоопухолевых препаратов и низкоинтенсивного лазерного излучения как радиопротектора»

Актуальность исследования

Сперматогенез является одним из наиболее динамичных процессов в организме млекопитающих животных и человека, связанных с клеточной пролиферацией и дифференцировкой. Он протекает под контролем специфических генов и регулируется совокупностью гормонов, цитокинов и факторов роста. Исследователи занимаются проблемой защиты и сохранения половых клеток от негативных влияний различных факторов в силу уникальной роли половых клеток в онтогенезе и в связи с необходимостью развития профилактических мер, направленных на сохранение здоровья потомства. Так, например, основная практическая задача, стоящая перед радиобиологией: выяснение не только механизмов влияния повреждающего фактора (ионизирующей радиации), но и поиск способов предотвращения или ослабления побочных эффектов с помощью природных или искусственных радиопротекторов [Круглова, Карнаухов, 2001]. Разрабатываются новые средства защиты биологических систем от различных типов воздействий и видов излучений при острых и отдаленных последствиях облучения.

Основная задача лекарственного лечения опухолей -разработка способов увеличения эффективности действия противоопухолевых средств и ослабления их побочного повреждающего воздействия. Продолжается поиск лекарственных средств, обладающих большей эффективностью поражать опухолевые клетки, не повреждая при этом здоровые органы и ткани (в том числе репродуктивную систему). Задача сохранения репродуктивного здоровья особенно актуальна для детской онкологии. За последние годы детские онкологи добились значительных успехов относительно онкологических заболеваний, которые раньше считались неизлечимыми. Правильное лечение приводит к выздоровлению ребенка. В настоящее время в мире живут многие тысячи людей, излеченных от онкологических заболеваний в детстве. Однако эти успехи достигаются за счет применения лекарственных препаратов, оказывающих значительное токсическое действие на центральную нервную систему, сердце, печень, почки, иммунную систему, костный мозг и репродуктивную систему. В связи с этим задача снижения побочных эффектов при химиотерапевтическом лечении и лучевой терапии является приоритетной для современной онкологии.

Исходя из вышесказанного возникла необходимость поиска методов защиты половых клеток от:

1) побочного токсического действия противоопухолевых препаратов цитостатического ряда, применяемых при химиотерапии злокачественных новообразований, с помощью химической модификации антибиотика (заключение в наночастицы с дальнейшей обработкой их поверхностно-активными веществами)

2) лучевого поражения с помощью профилактического действия низкоинтенсивного лазерного излучения;

Цель работы: провести морфологическое исследование ткани семенника в условиях применения новой наносомальной лекарственной формы доксорубицина и низкоинтенсивного лазерного излучения как радиопротектора.

Для достижения поставленной цели были сформулированы следующие задачи:

- Установить характер повреждений сперматогенного эпителия при действии доксорубицина и его наносомальной лекарственной формы на дифференцирующиеся клетки сперматогенного эпителия и интерстициальную ткань.

- Сопоставить характер повреждений дифференцирующихся половых клеток и интерстициальной ткани после введения доксорубицина и его модификаций на разных сроках эксперимента.

- Изучить воздействие наносомальной лекарственной формы доксорубицина на половые клетки крыс с интракраниально перевитой глиомой Сб. Сопоставить полученные результаты с состоянием сперматогенного эпителия крыс без глиомы.

- Определить эффект действия низкоинтенсивного лазерного излучения, применяемого до общего радиационного облучения, на процесс сперматогенеза и интерстициальную ткань половозрелых крыс.

Научная новизна

Проведенное комплексное морфологическое исследование семенников крыс с помощью методов световой микроскопии, количественного анализа сперматогенеза и морфометрической оценки состояния тканевых компонентов семенника позволило получить новые данные о характере изменений в семенниках крыс, возникающих в условиях применения новых наносомальных лекарственных форм доксорубицина.

Впервые показан защитный эффект низкоинтенсивного лазерного излучения, применяемого до общего радиационного облучения, на дифференцирующиеся мужские половые клетки и состояние интерстициальной ткани.

Практическая значимость работы

Результаты, полученные в ходе настоящей работы, углубляют и расширяют существующие представления о повреждающем действии ® антибиотиков антрациклинового ряда на клетки сперматогенного эпителия крыс. Показано профилактическое действие низкоинтенсивного лазерного излучения как способа коррекции нарушений сперматогенеза, индуцированных ионизирующим облучением, что пополняет знания о действии лазера на биологическую ткань. Это имеет практическое значение для понимания сочетанного действия двух видов излучений: ионизирующего и низкоинтенсивного лазерного.

Известно, что химиотерапия и радиотерапия являются фундаментальными методами лечения онкологических заболеваний, поэтому современные представления о последствиях консервативного лечения на организм млекопитающих, особенно на репродуктивную систему, являются актуальными.

Согласно ВОЗ доклинические исследования лекарственных препаратов следует проводить, выполняя требования GLP (Good Laboratory Practice) [Брайцева, 2005]. Среди основных требований, выдвигаемых этим важным документом - GLP, стоит необходимость ф определения токсичности в отношении репродуктивных функций, что и было сделано в представленной работе.

Положения, выносимые на защиту

1. Новая наносомальная лекарственная форма доксорубицина обладает меньшей токсичностью для дифференцирующихся мужских половых клеток по сравнению с ® действием свободной формы антрациклинового антибиотика.

Как прослежено в динамике (15-е и 30-е сутки) выраженный токсический эффект доксорубицина проявляется во всех экспериментальных группах, при этом в группе крыс, которым вводили антрациклиновый антибиотик в традиционном водном растворе, дегенеративные процессы в сперматогенном эпителии наиболее выражены.

2. По сравнению с интактными животными в сперматогенном эпителии крыс с интракраниально перевитой глиомой С6 в результате лечения доксорубицином и его модификациями происходит более выраженный процесс дегенерации половых клеток, приводящий к полному опустошению извитых семенных канальцев.

3. Использование низкоинтенсивного лазерного излучения перед общим радиационным облучением повышает количество сперматоцитов I, находящихся на стадии метафазы I и II деления мейоза, по сравнению с эффектом ионизирующего облучения.

4. Низкоинтенсивное инфракрасное лазерное излучение, применяемое в импульсном режиме до радиационного облучения в средних дозах, может быть включено в список средств, обладающих резистентным эффектом по отношению к сперматогенезу.

1. Обзор литературы

Заключение диссертации по теме «Гистология, цитология, клеточная биология», Макарова, Наталья Петровна

выводы

1. Свободная форма доксорубицина вызывает тяжелую степень нарушения процесса сперматогенеза, что выражено в появлении половых клеток с дегенерирующими ядрами, набухании клеток Сертоли, повреждении собственной оболочки канальцев, частичном опустошении извитых семенных канальцев.

2. Новая наносомальная лекарственная форма доксорубицина по сравнению со свободным антибиотиком ослабляет побочное повреждающее действие на сперматогенез. В динамике прослежено улучшение количественных показателей состояния сперматогенеза у крыс, получавших лечение новой наносомальной формой доксорубицина, по сравнению с крысами контрольной группы.

3. Лечение крыс с привитой глиомой С6 новой наносомальной лекарственной формы доксорубицина показало эффективность применения новой формы препарата, что проявляется в снижении некротических изменений в паренхиме семенника.

4. Применение низкоинтенсивного лазерного излучения до общего радиационного воздействия в область надпочечников позволило снизить негативные последствия радиации на процесс сперматогенеза. Выявлено изменение сперматогенного эпителия средней тяжести у крыс опытной группы по сравнению с животными контрольной группы. Применение НИЛИ приводит к увеличению в 2,5 раза количества клеток Лейдига по сравнению с интактной группой и в 2 раза по сравнению с контрольной, а также к росту площади интерстициальной ткани.

5. Полученные в настоящей работе данные указывают на возможность предотвращения побочного действия ионизирующего облучения и доксорубицина на клетки мужской репродуктивной системы экспериментальных животных (крыс).

Особая благодарность за неоценимую помощь в выполнении данной диссертационной работы выражается сотрудникам Лаборатории генетики нарушений репродукции ГУ МГНЦ РАМН: ведущему научному сотруднику, к.б.н. Шилейко Л.В. и Остроумовой Т.В.

5. Заключение

Проведенное исследование экспериментально подтвердило возможность защиты мужских половых клеток крыс при действии на организм доксорубицина за счет его химической модификации (заключение в наночастицы и обработка поверхностно-активными веществами) и с помощью НИЛИ при действии ионизирующего облучения в средних дозах.

Как известно, антрациклиновые антибиотики, в частности доксорубицин, и ионизирующее облучение широко используются в практике лечения онкологических заболеваний как отдельно, так и совместно. Поэтому в дальнейшем целесообразно изучить сочетанное действие этих двух факторов на организм млекопитающих, в частности на репродуктивную систему.

Радиопротективный эффект НИЛИ, выявленный при специфических условиях применения лазера (действие через надпочечники), требует дальнейшего экспериментального подтверждения при других контактных областях (например, органы-мишени). Работа в данных направлениях может обеспечить важные клинические преимущества для пациентов онкологических клиник не только при лечении основного заболевания, но и позволит минимизировать последствия действия антрациклиновых антибиотиков и ионизирующего облучения на репродуктивную систему.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Макарова, Наталья Петровна, 2006 год

1. Алексеева М.Н., Зубкова С.М., Миненков А.А., Першин С.Б. Устранение стрессорных изменений в тимусе при действии лазерного излучения на эндокринные железы // Бюлл.экспер.биол.-1993. №10.- с.360-361.

2. Алиев А.А., Бабаев М.Ш. Коррекция некоторыми синтетическими и природными антиоксидатами мутационного процесса, возникающего под воздействием ионизирущей радиации // Цитология и генетика.-1994. №5.- с.9-15.

3. Арав В.И., Сыч В.Ф., Железняк Е.В. и др. Влияние пептидов эпифиза на суточную динамику пролиферации сперматогониев белых крыс // Бюлл.экспер.биол.-2004. №6.-с.678-681.

4. Арав В.И., Сыч В.Ф., Железняк Е.В. Влияние эпифизэктомии на суточную ритмичность сперматогенеза // Бюлл.экспер.биол.-2003. №12.-с.683-685.

5. Ахмерова Л.Г., Свечников К.В., Осадчук А.В. Значение генотипа в становлении гормональной функции клеток Лейдига в постнаталыюм онтогенезе в диаллельных скрещиваниях у лабораторных мышей // Генетика.-2002. т.38. №2.- с. 196-206.

6. Байбеков И.М., Мавлян-Ходжаев Р.Ш., Туманов В.П. и др. Влияние низкоинтенсивного инфракрасного лазерного излучения на заживление дерматомных ран // Бюлл.экспер.биол.-1995. №2.-с.218-220.

7. Богуш Т.А., Шубина И.Ж., Смирнова Г.Б. и др. Прижизненная количественная оценка внутриклеточного распределения доксорубицина в опухолевых клетках // Бюлл.экспер.биол.-1995. №11.- с.518-520.

8. Боровская Т.Г., Гольдберг Е.Д. Влияние антибиотиков антрациклинового ряда на функциональное состояниерепродуктивной системы крыс // Бюлл.экспер.биол.-2000. №11.-с.527-530.

9. Боровская Т.Г., Гольдберг Е.Д., Абрамова Е.В. и др. Влияние хинина на морфологию семенников мыши // Бюлл.экспер.биол.-2000. №9.-с.353-355.

10. Боровская Т.Г., Гольдберг Е.Д., Абрамова Е.В. и др. Влияние хинина на морфологию семенников мыши // Бюлл.экспер.биол.-2000. №10.-с.445-447.

11. Боровская Т.Г., Пахомова А.В., Фомина Т.И. и др. Влияние платиносодержащих цитостатических препаратов на сперматогенез у крыс // Бюлл.экспер.биол.-2001. Прил.№1.-с.23-26.

12. Боровская Т.Г., Смирнова М.Е., Гольдберг Е.Д. Влияние платинсодержащих цитостатических препаратов на потомство крыс // Бюлл.экспер.биол.-1997. № 11.- с.516-519.

13. Брайцева Е.В. Введение в GLP // Биомедицина.-2005.-№1.-с.122-124.

14. Булдаков JI.A., Калистратова B.C. Радиоактивное излучение и здоровье.-М.: Информ-Атом, 2003.-165 с.

15. Быков B.JI. Сперматогенез у мужчин в конце XX века (обзор литературы) // Проблемы репродукции.- 2000. №1.- с.6-13.

16. Варфоломеева С.Р., Добреньков К.Б. Проблема антрациклиновой кардиотоксичности в детской онкологии // Вопр. гематологии.-2004. т.З. №2.-с.81-85.

17. Волкова О.В., Боровая Т.Г. Методы количественного анализа в оценке морфофункционального состояния яичника // Арх. анат.-1990. №11.- с.81-84.

18. Ворник Б.М. Мужское бесплодие: проблемы классификации и диагностики // Проблемы репродукции.- 1996. №3.-с.71-75.

19. Воробцова И.Е. Соматические и генетические последствиядействия радиации (сравнительный аспект) // Радиобиология.-1991. №4. т.31.-с.568-570.

20. Воробцова И.Е. Влияние облучения родителей на физиологическую полноценность и риск канцерогенеза у потомства первого поколения организмов разных видов // автореф.дис.докт.биол.наук.-1988.-43с.

21. Ворожейкин В.М., Назыров Ф.Г., Артыков Ш.Н. и др. Язвы желудка на фоне цирроза печени и воздействие на них низкоинтенсивным лазерным излучением инфракрасного диапазона// Арх. патологии.- 1992. №5- с. 15-21.

22. Гацура С.В., Гладких С.П., Титов М.Н. Влияние низкоэнергетического лазерного излучения на размеры экспериментального инфаркта миокарда, пол и сродство гемоглобина к кислороду // Бюлл.экспер.биол.- 2004. №4.-с. 403405.

23. Гольдберг Е.Д., Боровская Т.Г. Гонадотоксические эффекты противоопухолевых препаратов // Бюлл.экспер.биол.-2003. № 3.-с.244-252.

24. Гольдберг Е.Д., Боровская Т.Г., Полуэктова М.Е. Влияние противоопухолевых препаратов на потомство // Бюлл.экспер.биол.-2000. № 4.-С.437-439.

25. Гольдберг Е.Д., Боровская Т.Г., Фомина Т.И. и др. Морфофункциональное состояние яичников крыс после введения платидиама // Бюлл. экспер.биол.-1996. №11.- с.571-573.

26. Гольдберг Е.Д., Боровская Т.Г., Фомина Т.И. и др. Отдаленные эффекты повреждающего действия антибиотиков антрациклинового ряда на репродуктивную систему крыс // Бюлл.экспер.биол.-1996. №1.- с.55-58.

27. Гольдберг Е.Д., Боровская Т.Г., Фомина Т.И. и др. Состояние сперматогенеза у крыс после введения антрациклинового антибиотика фарморубицина // Бюлл. экспер.биол.-1995. №3.-с.308-310.

28. Гольдберг Е.Д., Фомина Т.И., Ветошкина Т.В. и др. Морфология печени в ранние и отдаленные сроки после введения противоопухолевых препаратов // Бюлл.экспер.биол.-1998. № 11.-е.561-565.

29. Данилова JI.B. Ультраструктурное исследование сперматогенеза.-М.:Наука, 1978.- 205 с.

30. Дендеберов Е.С. Состояние гематотестикулярного барьера после аллотрансплантации клеток гипофиза в дистопированный семенник// Бюлл.экспер.биол.-2001. №2.-с.232-236.

31. Дранов А. Л., Дудниченко А.С., Мезин И.А. и др. Эффективность липосомальных форм цитостатиков // Бюлл.экспер.биол.- 1996. №1.- с.85-88.

32. Евдокимов В.В., Ерасова В.И. и др. Влияние однократного общего облучения крыс на репродуктивную систему и содержание витаминов в органах у потомства // Бюлл.экспер.биол.-1998. № 12.-с.652-655.

33. Евдокимов В.В., Коденцова В.М. и др. Витаминный статус и сперматогнез крыс в поздние сроки после облучения разными дозами // Бюлл.экспер.биол.-1999. №7.-с.42-44.

34. Егоров В.Е., Москвин С.В., Ульянов В.И. Лазерная медицина: вчера и сегодня // Кремлевская медицина. Клинический вестник.-1999. №4.-с.22-29.

35. Игнатьева Е.Л., Курило Л.Ф. Гаметотоксическое действие окситетрациклина на ранний антенатальный оогенез мышей в экспериментах in vivo и in vitro // Фармакология и токсикология.-1984. №5.-с.75-77.

36. Игнатьева Е.Л., Курило Л.Ф. Гистологическая оценка репродуктивной функции яичников половозрелых мышей после антенатального воздействия окситетрациклином // Бюлл.экспер.биол.-1984. №97. т.5-с.608-610.

37. Кару Т.И., Пятибрат Л.В., Календо Г.С. Влияние излучения Не-Ne лазера на адгезивные свойства клеточной мембраны // Бюлл.экспер.биол.-1993. № 6.-с.622-623.

38. Кация Г.В., Гончаров Н.П. Взаимодействие систем гипоталамус-гипофиз-кора надпочечников и гипоталамус-гипофиз-гонады // Вестн. АМН СССР.- 1994. №12.-с.44-47.

39. Качков И.А., Биктимиров Р.Г., Захаров А.В. и др. Глиальные опухоли головного мозга: классификация, иммунопатогенез и иммуногенодиагностика // Вестн. АМН СССР.- 2005. №6.-с.36-40.

40. Коденцова В.М., Вржесинская О.А., Евдокимов В.В. Содержание рибофлавина в спермоплазме мужчин // Бюлл.экспер.биол.-2003. №3.-с.299-302.

41. Королев Ю.Н., Общие закономерности развития ультраструктурных реакций при действии электромагнитных излучений // Вопросы курортологии, физиотерапии и лечебной физической культуры.- 1997. №5.-с.З-7.

42. Курило Л.Ф. Подходы к тестированию гонадо- и гаметотоксического эффекта экзогенных факторов // Тезисы докл. междун. конф. по биоэтике.- Пущино.-ИБФМ РАН. 2527/06.-1998.-С.83-84.

43. Курило Л.Ф., Хилькевич Л.В. Современные подходы к изучению гонадо- и гаметотоксического эффекта экзогенных факторов // Медицинская генетика: экспресс-информация.-1989. №9.- с.1-16.

44. Курило Л.Ф., Хилькевич Л.В., Игнатьева Е.Л. Влияние этилового спирта на популяцию ооцитов плода крыса // Акуш. и геникол.-1984.-№7.-с.54-57.

45. Курносова Т.Р., Райцина С.С. Деструкция и регенерация семенных канальцев после локального рентгеновского облучения семенников половозрелых крыс // Онтогенез.-1987,-т.18.№2.-с. 183-191.

46. Куценко С.А. Основы токсикологии.- С-П: 2002.- с. 156-160.

47. Лушников К.В., Шумилина Ю.В., Якушина B.C. и др., Влияние низкоинтенсивного электромагнитного излучения крайне высоких частот на процессы воспаления // Бюлл.экспер.биол,-2004. №4.-с. 412-415.

48. Лысенко А.И., Кирпатовский И.Д. Анализ морфологических классификаций повреждений яичка при мужском бесплодии // Арх. патологии.- 1991. т.53. №12.-с.63-66.

49. Мазо Е.Б., Силуянов К.А. Использование локальной низкоинтенсивной лазерной терапии в лечении больных с идиопатическим бесплодием: Тез. докл. 2-я международная медицинская конференция «Мужское здоровье и долголетие». -М.: 2004.-е.83-84.

50. Мамина В.П. Значение гонадотропных гормонов и состояния тироид-адреналовой системы в реакции семенников на облучение // Пробл. репродукции.- 2001. №5.- с.27-29.

51. Мамина В.П. О механизмах действия малых доз ионизирующей радиации на сперматогенный эпителий // Пробл. репродукции.2003. №2.-c.22-24.

52. Москвин C.B., Азизов Г.А. Внутривенное лазерное облучение крови, М.: НИЦ «Матрикс», 2004, с.4-7.

53. Неворотин А.И., Введение в лазерную хирургию: Учебное пособие.-СПб.: Спецлит, 2000.- 175 с.

54. Непомнящих Г.И., Шойёхет Я.Н., Непомнящих JI.M. и др. Патоморфология радиационно-индуцированных изменений в бронхах в отдаленные сроки после воздействия // Бюлл.экспер.биол.-1995, №1.- с.91-95.

55. Нефедов И.Ю. Наследственные последствия облучения обоих родителей (экспериментальное исследование на крысах линии Вистар) // автореф. дис. . д-ра биол. наук.- Обнинск.- 1998.-с.11-12.

56. Оборотова Н.А., Барышников А.Ю. Липосомальные лекарственные формы в клинической онкологии // Успехи современной биологии.-2001.-т.121. №5.- с.464-475.

57. Орлов А.И. О применении статистических методов в медико-биологических исследованиях // Вестн. АМН СССР.- 1987. №2.-с.88-94.

58. Остроносова Н.С. Гепариновый механизм действия низкоинтенсивного лазерного излучения при лечении больных бронхиальной астмой // Иммунология.-2004. №6.-с.355-358.

59. Пакенас П.И. Определение процентного соотношения семенных канальцев и интерстициальной ткани в семенниках // Арх.анат.-1968.-т.ЬУ.№7.-с.110-113.

60. Райцина С.С. Цикл сперматогенного эпителия и кинетика сперматогенеза у млекопитающих // «Современные проблемы сперматогенеза». М.: Наука, 1982.-е.73-103.

61. Райцина С.С. Сперматогенез и структурные основы его регуляции.- М.: Наука, 1985.-207с.

62. Райцина С.С., Чуич Н.А., Хлыстова З.С. и др. Образование лимфоцитами человека, морских свинок и крыс розеток со сперматозоидами // Бюлл. экспер. биол.-1977. №4.-с.464-467.

63. Раманаускайте Р.Ю., Абронина И.Ф., Карасева Л.И. и др. Коррекция p-каротином противоопухолевого иммунитета при экспериментальной химиотерапии злокачественных новообразований // Бюлл.экспер.биол.-1994. №9.-с.295-297.

64. Рябчиков О.П., Шмелева С.П., Чуич Н.А. и др. Влияние малых доз радиации на гемопоэз в печени эмбриона и плода человека I триместра беременности // Арх. патологии.- 1995. №2- с.61-63.

65. Сазонов В.Ф. Состояние сперматогенеза и антиспермальный аутоиммунный ответ после кратковременной повторной ишемии семенника у крыс // автореф.канд.биол.наук.-Москва.- 1999.- 24 с.

66. Сергеев П.В., Семейкин А.В., Федотчева Т.А., и др. Исследование комбинированного действия доксорубицина и гестагенов на чувствительные и резистентные к доксорубицину клетки MCF-7 // Бюлл.экспер.биол.-2003. №11.-С.519-522.

67. Ситдикова С.М., Доненко Ф.В., Кабиева А.О., Полоцкий Б.Е., Мороз Л.В. Применение модификаторов множественной лекарственной резистентности для преодоления устойчивости опухолей к цитостатикам в системе in vivo // Бюлл.экспер.биол.- 1996. №4.- с.459-461.

68. Скидан И.Н. Фармакокинетика и химиотерапевтическая активность антрациклиновых антибиотиков, ассоциированных с полимерными наночастицами // автореф. дис. . канд. мед. наук.- Москва.- 2000.- 24с.

69. Скидан И.Н., Гельперина С.Э., Северин С.Е. и др. Повышение активности рифампицина, ассоциированного с наночастицами из полибутилцианоакрилата, в отношении бактерий,локализованных внутри клеток // Антибиот. и химиотер.-2003. т.48. №1.-с.23-26.

70. Субботина Т.И., Хадарцев А.А., Яшин М.А. и др. Влияние высокочастотного низкоинтенсивного облучения на репродуктивную функцию мышей линии C57BI/6 и рандомбредных мышей // Бюлл.экспер.биол.-2004. №12.-с.626-628.

71. СухачеваТ.В., Коломиец O.JL, Лосева Е.Ф. Изучение синаптонемного комплекса мыши после введения камптотецина // Бюлл. экспер.биол.-1998. №1.- с.84-88.

72. Тараховский Ю.С. Электронно-микроскопическое исследование взаимодействия липосом, содержащих ДК-холестерол, с эритроцитами человека // Бюлл.экспер.биол.-1996. т. 122. №7.-с.83-86.

73. Терещенко С.Г., Рогаткин Д.А., Лапаева Л.Г. и др. Дифференциально-диагностическая и лечебная эндоскопия с низкоинтенсивным лазерным излучением на основе биоспектрофотометрии при язвенной болезни //Вестник РАМН.-2005. №5.-с.28-31.

74. Толчева Е.В., Барышников А.Ю., Оборотова Н.А. и др. Анти-С05-иммунолипосомы как транспортная система для направленной доставки лекарственных препаратов к CD5+-клеткам // Росс.биотерапевтич.ж.-2005.т.4. №4.-с.38-43.

75. Туманов В.П., Глущенко Е.В., Серов Г.Г. и др. Влияние лазерного излучения на пролиферативную активность клеток в культуре// Бюлл.экспер.биол.-1994. №3.-с.313-315.

76. Ухов Ю.И., Астраханцев А.Ф. Морфометрические методы в оценке функционального состояния семенников //Архив анатомии.- 1983. т.84. №3.-с.66-72.

77. Франкфурт О.С. Клеточные механизмы химиотерапииопухолей.- М.:Медицина, 1976.-390с.

78. Хазанов В.А., Бородина С.А., Смирнова Н.Б. Влияние доксорубицина на окислительное фосфорилирование в митохондриях головного мозга // Бюлл.экспер.биол.-1999. №10.-с.445-447.

79. Хазанов В.А., Соломыкина С.А., Смирнова Н.Б. Влияние доксорубицина in vitro на энергозависимый транспорт кальция митохондриями головного мозга крыс // Бюлл.экспер.биол.-2000. №2.-с.183-185.

80. Хилькевич JI.B. Количественные цитофизиологические подходы к оценке повреждающего воздействия на сперматогенез // Тезисы докладов XII научной конференции болгарских аспирантов в СССР.- М.- 1990.-С.49-50.

81. Хилькевич JI.B., Курило Л.Ф. Гаметотоксический эффект антенатального воздействия тиоТЭФ у мышей // Онтогенез.-1992. №4.т.23-с.401-406.

82. Хилькевич Л.В., Курило Л.Ф. Эффект антенатального воздействия тиоТЭФ на сперматогенез половозрелых мышей линий 101/Н и СВА // Бюлл.экспер.биол.-1992. №9.т.114-С.307-308.

83. Хилькевич Л.В., Курило Л.Ф. Кинетика популяции мужских половых клеток в антенатальном периоде онтогенеза // Онтогенез.-1992.-т.23.№5.-с.506-510.

84. Хилькевич Л.В., Курило Л.Ф., Дубинская В.П. Методы оценки интоксикации в антенатальном периоде развития на сперматогенез // Тезисы докладов Всесоюзной научной конференции «Актуальные проблемы лекарственной токсикологии».-Купавна.-1990.-c.332.

85. Хилькевич Л.В., Курило Л.Ф., Игнатьева Е.Л. Эффект алкоголя и никотина на мейоз мужских половых клеток в эксперименте //

86. Тезисы докладов II Всесоюзного съезда медицинских генетиков.-Алма-ата.-1990.-c.463.

87. Хилькевич JI.B., Курило Л.Ф., Шевелева Г.А. Эффект антенатального воздействия никотином на мужские половые клетки крыс линии Вистар // Цитология и генетика.-1993. т.27. №2.-с.42-46.

88. Хлусов И.А., Расковалова Т.Ю., Кириенкова Е.В. и др. Влияние надпочечников на кроветворное микроокружение костного мозга // Бюлл.экспер.биол.-1999. №11.-е.586-587.

89. Хлыстова З.С., Шмелева С.П., Калинина И.И. и др. Влияние малых доз радиации на центральные органы эритро- и лимфоцитопоэза плода человека // Бюлл.экспер.биол.-1995. №5.-с.548-551.

90. Цыб А.Ф., Каплан М.А., Ткаченко Н.П. и др. Возможности низкоинтенсивной инфракрасной лазерной терапии атеросклеротических поражений сердечно-сосудистой системы // Вестн. АМН СССР.- 2003. №12.-с.45-52.

91. Черток В.М, Мирошниченко Н.В., Быков Д.В. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на капилляры головного мозга крыс//Бюлл.экспер.биол.-1993. №2.-с.219-221.

92. Черток В.М., Момот Л.М., Каргалова Е.П. Морфофункциональная характеристика капиллярного русла яичника крыс при воздействии низкоинтенсивного лазерного облучения // Бюлл.экспер.биол.-1998. №7.-с.110-112.

93. Чудновский В.М., Леонова Г.Н., Скопинов С.А. и др. Биологические модели и физические механизмы лазерной терапии.- Владивосток: Дальнаука, 2002.- 125с.

94. Шейко Е.А., Шихлярова А.И., Куркина Т.А. Использование низкоинтенсивного красного светового излучения дляповышения противоопухолевой эффективности циклофосфана в эксперименте // Бюлл.экспер.биол.-2004. №12.-с.665-667.

95. Шилин Д. Е., Игнашина Е. В. Использование овариопротекторов при цитостатической терапии у пациенток репродуктивного возраста // Проблемы эндокринологии.- 1999. №6.- с.36-42.

96. Ярмоненко С.П. Новая парадигма комбинированной антиангиогенно-цитотоксической терапии рака // Росс.биотерапевтич.ж.-2005.-т.4.- №4.-с.50-58.

97. Afzelius B. Electron microscopy of the sperm tail. Results obtained with a new fixative // J. Biophys. and Biochem. Cytol.-7.- 959.- 5 (2).-P. 269-278.

98. Allemann E., Gumy R., Doelker E. Drug loaded nanoparticles -Preparation methods and drug targeting issues // Eur. J. Pharm. Biopharrn.-1993.-No.39.-P.173-191.

99. Anderson R., Fassler R., Georges-Labouesse E. et al. Mouse primordial germ cells lacking betal integrins enter the germline but fail to migrate normally to the gonads // Development.- 1999.- vol. 126.- P.1655-1664.

100. Arnon J., Meirow D., Lewis-Roness H. at al. Genetic and teratogenic effects of cancer treatments on gametes and embryos // Hum.Reprod.Update.-2001.-vol.7. No.4.- P.394-403.

101. Baccetti B, Afzelius В A. The biology of the sperm cell // Monogr. Dev Biol.- 1976.-vol.10.- P. 1-254.

102. Ban Y., Asanabe U., Inagaki S., et al. Effect of chlorohydrin on rat sperm motions in relation to male reproductive functions // J.Toxicol.Sci.-1999.-24.-P.407-413.

103. Beck P.H., Kreuter J., Miiller W.E.G. et al. Improved peroral delivery of avarol with polybutylcyanoacrylate nanoparticles // Europ. J. Pharm. Biopharm. -1994.-No.40.-P.134-137.

104. Bendel-Strenzel M.R., Gomperts M., Anderson R et al. The role of cadherins during primordial germ cell migration and early gonad formation in the mouse // Mech Dev.- 2000.- vol. 91.-P. 143-152.

105. Biganzoli L, Piccart MJ: The bigger the better? Or what we know and what we still need to leam about anthracycline dose per course, dose intensity and cumulative dose in the treatment of breast cancer // Ann Oncol.-1997.- vol.8.- P. 1177-1182.

106. Borchard G., Audus K.L., Shi F. et. al. Uptake of surfactant- coated poly (methyl methacrylate)-nanoparticles by bovine brain microvessel endothelial cell monolayers // Int. J. Pharm.-1994.-No.l 10.-P.29-35.

107. Borchard G., Kreuter J. Interaction of serum components with poly(methylmethacrylate) nanoparticles and the resulting body distribution after intravenous injection in rats // J. Drug Target.-1993.-No.l.-P.15-19.

108. Brannon-Peppas L. Recent advances on the use of biodegradablemicroparticles and nanoparticles in controlled drug delivery // Int. J. Pharm.-1995.- No.l 16.-P.1-9.

109. Carreau S. Paracrine control of human Leydig cell and Sertoli cell functions // Folia Histochem Cytobiol.-1996.-vol.34.-P.l 11.

110. Cerelli J.S., Johnson L. Potential daily sperm production, Sertoli cell number, and semineferous tubule characteristics in beef bus fed conventional or gossypol-enriched diet // J.Andrology.-1999.-No4. vol.20.-P.519-528.

111. Chan S., Friedrichs K., Noel D. et al. Prospective Randomized Trial of Docetaxel Versus Doxorubicin in Patients With Metastatic Breast Cancer// J.Clin. Oncol. -1999.- 17.- P.2341-2354.

112. Chan S.Y., Tang LC, Tang G.W. et al. Spermatozoal fertilizing capacity in polyzoospermia: a preliminary study // Andrologia.-1986.- Mar-Apr.-vol. 18(2).-P.208-213.

113. Clermont Y. The cycle of the seminiferous epithelium in man // Am. J. Anat.-1963.-vol. 112.No. 1 .-P.35-52.

114. Cooke J., Hargreave T. et al. Understading the genes involved in spermatogenesis: a progress report.// Fert. Steril.- 1998.-vol.69.No.6.-P.989-1013.

115. Couvreur P., Dubernet C., Puisieux F. et. al. Controlled drug delivery with nanoparticles: current possibilities and future trends // Eur. J. Pharm. Biopharm.-1995.-No.41.-P.2- 13.

116. Couvreur P., Kante В., Grislain L. et.al. Toxicity of polyalkylcyanoacrylate nanoparticles. II. Doxorubicin loaded nanoparticles // J. Pharm. Sci.-1982.-No.71.P.790-793.

117. Couvreur P., Kante В., Lenaerts V. et. al. Tissue distribution of anticancer drugs associated to polyalkylcyanoacrylate nanoparticles //J. Pharm. Sci.-1980.-No.69.-P. 199-202.

118. Couvreur P., Kante В., Roland M. et. al. Adsorption of antineoplastic drugs to polyalkylcyanoacrylate nanoparticles andtheir release in calf serum // J. Pharm. Sci.-1979.-No.68.-P.1521-1524.

119. Couvreur P., Kante В., Roland M. et. al. Polycyanoacrylate nanocapsules as potential lysosomotropic carriers: preparation, morphological and sorptive properties // J. Pharm. Pharmacol.-1979.-No.31.-P.331-332.

120. Couvreur P., Vauthier C. Polyalkylcyanoacrylate nanoparticies as drug carriers: present state and perspectives // J. Controlled Release.-1991 .-No. 17.-P. 187-198.

121. Diemer Т., Desjardins C. Developmental and genetic disorders in spermatogenesis // Hum. Reprod. Updateio-1999.- No.5. vol.2.-P.120-140.

122. Fawcett D.W. The mammalian spermatozoon // Dev Biol.- 1975.-Jun.44(2).-P.394-436.

123. Fawcett D.W., Phillips D.M. The fine structure and development of the neck region of the mammalian spermatozoon//Anal. Rec.- 1969.- 165 (2).-P.153-184.

124. Gabizon R., Catane В., Uziely K. Prolonged circulation time and enhansed accumulation in malignant exudates of doxorubicin encapsulated in polyethylene-glycol coated liposomes // Canser Res. -1994.-54.-P.987-992.

125. Gange J.F., Desormeaux A., Perron S. et. al. Targeted delivery of indinavir to HIV-1 primary reservoirs with immunoliposomes // Biochim. Biophys. Acta.-2002.-vol.1558.-P. 198-210.

126. Gianni L., Vigano L., Locatelli A. et al: Human pharmacokinetic characterization and in vitro study of the interaction between doxorubicin and paclitaxel in patients with breast cancer // J Clin Oncol.-1997.-vol. 15.- P. 1906-1915.

127. Goncharov et al. Testicular endocrine function and spermatogenesis in men after short term radiation exposure in the vicinity of Chernobyl.// Vlth International Congress of Andrology.- Salzburg.j 25-29 May.- 1997.

128. Gorpinchenko et al. Semen parameters of clean-up workers of Chernobyl accident.// Vlth International Congress of Andrology.-Salzburg.- 25-29 May.- 1997.

129. Gordon A.N., Fleagle J.T., Guthrie D. et al. Recurrent Epithelial Ovarian Carcinoma: A Randomized Phase III Study of Pegylated Lyposomal Doxorubicin Versus Topotecan // J. Clin. Oncol.- 2001.19.- P.3312-3322.

130. Gordon A.N., Granai C.O., Rose P.G. et al. Phase II Study of Liposomal Doxorubicin in Platinum- and Paclitaxel-Refractory

131. Epithelial Ovarian Cancer // J. Clin. Oncol. -2000.- 18.- P.30933100.

132. Jassim A. Molecular and ontogenic analysis of the humansperm tail fibrous sheath // Mem.Mus.natn.Hist.nat.- 1995.166.-P.431-436.

133. Jameson J.L. Inherited disorders of the gonadotropin hormones // Mol. Cell Endocrinol.-1996.-vol. 125.-P. 143-149.

134. Jung Т., Kamm W., Breitenbach A. et. al. Biodegradable nanoparticles for oral delivery of peptides: Is there a role for polymers to affect mucosal uptake? // Eur. J. Pharm. Biopharm.-2000.-No.50.-P. 147-160.

135. Klauber N, Parangi S, Flynn E, et al: Inhibition of angiogenesis and breast cancer in mice by the microtubule inhibitors 2-methoxyestradiol and Taxol // Cancer Res.-1997.- vol.57.- P.81-86.

136. Kreuter, J. Nanoparticles. in Kreuter, J. (Ed.): Colloidal Drug Delivery Systems // M. Dekker.-New York.- 1994. P.219-342.

137. Kreuter J., Alyautdin R.N., Kharkevich D.A. et. al. Passage of peptides through the blood-brain barrier with colloidal particles (nanoparticles) // Brain Res.-1995.- No.674.-P. 171-174.

138. Kreuter J., Mills S., Davis N. et. al. Polybutylcyanoacrylate nanoparticles for the delivery of 75Se. norcholesterol // Int. J. Pharm.-1983 .-No. 16.-P. 105-113.

139. Lasbet S. Lundsberg, M.B. Bracken at al, Occupationally related magnetic field exposure and male subfertility // Fertil Ster.- 1995.-vol.63.- num.2.- Feb.- P.384-391.

140. Lawson K., Dunn N., Roelen В., Zeinstra L., Davis A., Wright C., Korving J., Hogan В. BMP4 is required for the generation of primordial germ cells in the mouse embryo // Genes Dev.- 1999.-vol.13.- P.424- 436.

141. Lukyanov A.N., Elbayoumi T.A., Torchilin V.P. et. al. Tumor-targeted liposomes: doxorubicin-loaded long-circulating liposomes modified with anti-cancer antibody // J.Control.Release.-2004.-vol.l00.-P.135-144.

142. Miller K.D., McCaskill-Stevens W., Sisk J. et al. Combination

143. Versus Sequential Doxorubicin and Docetaxel as Primary Chemotherapy for Breast Cancer: A Randomized Pilot Trial of the Hoosier Oncology Group // J Clin Oncol.- 1999.- No. 17.- P.3033-3037.

144. Nabholtz JM, Glemon K, Bontenbal M, et al: Multicenter, randomized, comparative study of two doses of paclitaxel in patients with metastatic breast cancer // J Clin Oncol.-1996.- vol. 14.-P.1858-1867.

145. Nakai M., Toshimori K., Yoshinaga K. et al Carbendazim-induced abnomal development of the acrosome // Cell Tissue Res.- 1998. No.294.-P.145-152.

146. Ostro M., Cullls P. R. Use of liposomes as Injectable-drug delivery systems // Amer J of Hospital Pharmacy.- 1989.- No.46.- P. 15761587.

147. Paulson R.B., Shanfeld J, Vorhees Ch.V. et al. Behavioral effects of smokeless Tobacco on the neonate and young Sprague dawley rat // Teratology.-1994.-No.49.-P.293-305.

148. Ramge P, Unger R.E., Oltrogge J.B. et. al. Polysorbate-80 coating enhances uptake of polybutylcyanoacrylate (PBCA)-nanoparticles by human and bovine primary brain capillary endothelial cell // Europ. J. ofNeuroscience.-vol.12 .-No.6.-P.1931.

149. Schafer V., v. Briesen H., Rubsamen-Waigmann H. et.al. Phagocytosis and degradation of human serum albumin microspheres and nanoparticles in human macrophages // J. Microencapsul. -1994.-No.l 1.-P.261-269.

150. Steiniger S.C., Kreuter J, Khalansky AS et. al. Chemotherapy of glioblastoma in rats using doxorubicin-loaded nanoparticles // Int J Cancer.-2004.-vol. 109(5).-P.759-67.

151. Skidan I., Khalansky A.S., Pereverzeva E.R. et.al. Protection Against Doxorubicin-induced Testicular Toxicity by Poly(butylcyanoacrylate) Nanoparticles // Transact. 31st CRS Meeting.-Honolulu.-2004.-P.591.

152. Steiniger S.C., Kreuter J., Khalansky A.S. et al. Chemotherapy of glioblastoma in rats using doxorubicin-loaded nanoparticles. // Int J Cancer. -2004,- May l.-vol.l09(5).-P.759-67.

153. Torchilin V.P., Weissig V. Liposomes: A practical approach.-Oxford University Press.-2003.-424P.

154. WylieC. Germ cells//Cell.- 1999.-vol.96.-P. 165-174.

155. Wylie C. Germ cells // Curr Opin Gen Dev.- 2000.- vol.10.-P.410-413.

156. Yaakobi Т., Maltz L., Oron U., Promotion of bone repair in the cortical bone of the tibia in rats by low energy laser (He-Ne) irradiation // Calcif tissue Int.- 1996.- vol.59.- P.297-300.

157. Zambetti M., Moliterni A., Materazzo C. et al. Long-Term Cardiac Sequelae in Operable Breast Cancer Patients Given Adjuvant Chemotherapy With or Without Doxorubicin and Breast Irradiation // J. Clin. Oncol. 2001.- No. 19.- P.37-43.

158. Zimmer A. K., Maincent P., Thouvenot P. et al. Hydrocortisone delivery to healthy and inflamed eyes using a micellar polysorbate 80 solution or albumin nanoparticles // Int. Pharm. -1994.-No.l 10.-P.211-222.

159. Zobel H.P., Kreuter J., Werner D. et. al. Cationic polyhexylcyanoacrylate nanoparticles as carriers for antisense oligonucleotides // Antisense Nucl. Acid Drug Devel.-1997.-No.7.-P.483-493.