Некоторые физико-химические и иммунобиологические свойства липополисахаридов Salmonella enterica sv typhi и shigellae тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат биологических наук Шмиголь, Владимир Игоревич

• Шмиголь, Владимир Игоревич
• кандидат биологических наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Шмиголь, Владимир Игоревич

Список принятых сокращений.

ВВЕДЕНИЕ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Некоторые физико-химические и иммунобиологические свойства липополисахаридов Salmonella enterica sv typhi и shigellae»

Строение ЛПС и его локализация в клеточной мембране.11

Одна из принципиальных возможностей получения нативных низкотоксичных ЛПС связана с их фракционированием с помощью различных методов и выделением «узких» гомогенных фракций ЛПС.

1 Комплексное систематическое исследование физико-химических ииммунобиологических свойств фракций ЛПС представляется весьма актуальным иvоткрывает возможность для дальнейшего исследования таких соединений в качестве иммунотропных препаратов.

Следует подчеркнуть, что проведенное нами исследование впервые привело к получению серий низкотоксичных ЛПС из вирулентных штаммов бактерий кишечной группы, возбудителей таких распространенных острых кишечных инфекций как шигеллез и брюшной тиф.

Цель работыОсновная цель работы заключалась в получении из суммарного ЛПС Shigella sonnei, фаза 1, Shigella flexneri 2а и Salmonella enterica sv typhi с использованием различных методов фракционирования ЛПС-фракций, отличающихся длинойполисахаридной цепи, в изучении физико-химических и биологических характеристик этих фракций, а также в изучении возможности выделения иммуногенных низкоэндотоксичных ЛПС.

Задачи исследования• Провести фракционирование ЛПС Sh. sonnei, фаза 1, Sh. flexneri 2а и S. enterica sv typhi.• Изучить физико-химические характеристики выделенных фракций.• Изучить иммунобиологические характеристики выделенных фракций с целью поиска низкотоксичных и высокоиммуногенных фракций ЛПС.

Научная новизна работыВпервые с использованием трех различных методов фракционирования выделены фракции ЛПС Sh. sonnei, фаза 1, Sh. flexneri 2а и S. enterica sv typhi, отличающиеся по молекулярной массе и проведен сравнительный анализ их пирогенности, эндотоксичности и иммуногенности.

Впервые установлено, что с увеличением длины О-специфического полисахарида (О-СП) уменьшается пирогенность и эндотоксичность ЛПС-фракций, причем фракция с максимально длинным О-СП обладает эндотоксичностью на уровне полисахаридных вакцин.

Впервые показано, что низкотоксичный ЛПС Sh. sonnei является иммуногенным для экспериментальных животных и индуцирует высокий уровень протективных антител.

Впервые показана способность низкоэндотоксичного ЛПС Sh. sonnei вызывать толерантность к эндотоксину у мышей.»Теоретическая и практическая значимость работыТеоретическая значимость работы заключается в расширении представлений о взаимосвязи строения ЛПС, в частности, длины полисахаридной цепи и его физико-химических характеристик с биологическими свойствами.

В результате проведенного исследования показана возможность создания протективных профилактических препаратов с высоким уровнем безопасности на основе нативного низкотоксичного ЛПС энтеробактерий.

Осуществлено получение нескольких серий низкотоксичного ЛПС Sh. sonnei, фаза I и показана их высокая иммуногенность, что свидетельствует о воспроизводимости метода фракционирования и создает предпосылки к созданию технологической схемы выделения ЛПС вакцинного качества.

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Шмиголь, Владимир Игоревич

выводы

1. Липополисахариды Sh. sonnei, фаза I, Sh. flexneri 2а и S. typhi могут быть разделены на несколько фракций, различающихся длиной О-специфи-ческого полисахарида, причем с увеличением длины О-специфического полисахарида эндотоксичность этих липополисахаридных фракций снижается.

2. Установлено, что липополисахардные фракции Sh. sonnei, фаза I, Sh. flexneri 2а и S. typhi с максимально длинным О-специфическим полисахаридом обладают токсичностью, не превышающей токсичность коммерческих полисахаридных вакцин.

3. Низкоэндотоксичные липополисахаридные фракции Sh. sonnei, фаза I, Sh. flexneri 2а и S. typhi способны к индуции первичного IgG и IgM и вторичного IgG анти-0 ответов у мышей.

4. Низкоэндотоксичная липополисахаридная фракция Sh. sonnei, фаза I способна индуцировать у морских свинок синтез специфических протективных антител на слизистых оболочках.

5. Показано, что низкотоксичная фракция Sh. sonnei, фаза 2а способна предотвращать эндотоксический шок у мышей, вызванный введением 10 LDjoo высокоэндотоксичного липополисахарида.

6. Показана воспроизводимость выделения серий низкотоксичных липополисахариднных фракций из Sh. sonnei, фаза I, что создает основу для создания технологической схемы получения низкотоксичного ЛПС.

Заключение

В результате данной работы ЛПС бактерий Sh. sonnei, Sh. flexneri и S. enterica sv typhi был успешно фракционирован по молекулярной массе и установлено, что оптимальным методом фракционирования являлось ультрацентрифугирование. При этом, ЛПС фракции, с максимально высокомолекулярным О-СП, обладали пирогенностью на уровне коммерческих полисахаридных вакцин.

Также было установлено, что высокомолекулярный ЛПС бактерий Sh. sonnei, Sh. flexneri 2a и S. enterica sv typhi обладает не только низкой пирогенностью и токсичностью, но и довольно высоким иммуногенным потенциалом, что позволяет рассматривать их в качестве потенциальных профилактических препаратов. И, действительно, в случае Sh. sonnei на основе низкотоксичной фракции C^nC(Sh.s) была создана первая вакцина против шигеллеза Зонне Шигеллвак, которая в настоящее время успешно прошла заключительную фазу клинических испытаний.

Таким образом, проведено систематическое, комплексное исследование методов выделения, физико-химических и иммунобиологических характеристик ЛПС-фракций некоторых энтеробактерий. Наиболее полно охарактеризованы фракции ЛПС Sh. sonnei, фаза I. Была продемонстрирована возможность систематического получения фракций ЛПС с безопасностью на уровне полисахаридных вакцин и высокой иммуногенностью. И, как следствие этого, возможно пилотное (тысячи доз) производство низкотоксичнного высокоиммуногенного ЛПС Sh. sonnei, фаза I.

Исходя из вышеописанного, следует предположить, что не только из бактерий, использованных в данной работе, могут быть выделены низкотоксичные высокоиммуногенные ЛПС, которые способны выступать в качестве вакцинных препаратов.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Шмиголь, Владимир Игоревич, 2004 год

1. Алексахина Н.Н., Баснакьян И. А., Аллилуев А.П., Кувакина В.И., Котельиикова О.В., Артемьева Т.А. Изучение динамики накопления В группоспецифического полисахарида при культивировании менингококка в ферментере. ЖМЭИ, 1986, №4, с. 101.

2. Егоров A.M., Осипов А.П., Дзантиев Б.Б., Гаврилова Е.М. Теория и практика иммуноферментного анализа. Москва, Высшая школа, 1991.

3. Книрель ЮА. Липополисахариды грамотрицательных бактерий. Прогресс химии углеводов, под ред. Торогова ИВ, 1985, с. 54-76.

4. Спирин А.С. Спектрофотометрическое определение суммарного количества нуклеиновых кислот. Биохимия, 1958, №23, т 5, с. 656.

5. Тимаков ВД, Петровская ВГ, Бондаренко ВМ. Биологические и генетические характеристики бактерий рода Shigella. Москва, Медицина, 1980, с. 9-14.

6. Ярилин А.А. Основы иммунологии. Москва, Медицина, 1999.

7. Aderem A, Ulevitch RJ. Toll-like receptors in the induction of the innate immune response. Nature, 2000 Aug 17, v.406(6797, p.782-787.

8. Alexander C, Rietschel ET. Bacterial lipopolysaccharides and innate immunity. J. Endotoxin Res., 2001, v.7, no.3, p.167-202.

9. Batta G, Liptak A, Schneerson R, Pozsgay V. Conformational stabilization of the altruronic acid residue in the O-specific polysaccharide of Shigella sonneLPlesiomonas shigelloides. Carbohydr. Res., 1998, v.305, p.93-99

10. Bazil V, Strominger JL. Shedding as a mechanism of down-modulation of CD 14 on stimulated human monocytes. J. Immunol., 1991, Sep 1, v.147, no.5, p.1567-1574.

11. Beutler В, Krochin N, Milsark IW, Luedke C, Cerami A. Control of cachectin (tumor necrosis factor) synthesis: mechanisms of endotoxin resistance. Science, 1986, May 23, v.232(4753, p.977-980.

12. Bouchon A, Dietrich J, Colonna M. Cutting edge: inflammatory responses can be triggered by TREM-1, a novel receptor expressed on neutrophils and monocytes. J. Immunol., 2000, May 15, v.164, no.10, p.4991-4995.

13. Brade H, Galanos C. Common lipopolysaccharide specificity: new type of antigen residing in the inner core region of S- and R-form lipopolysaccharides from different families of gram-negative bacteria. Infect. Immun., 1983, Oct, v.42, no.l, p.250-256.

14. Centani E. Immunitiitserscheinungen im experimentellen Fieber mit besonderer Beriicksichtigung des pyrogenen Stoffes aus Typhusbakterien. Klin. Wochenschr., 1942, v.21, p.664-669.

15. Centani E. Untersuchungen uber das Infections fieber das Fiebergift der Bacterien. Dtsch. Med. Wochenschr., 1894, v.20, p. 148-150

16. Chen CH, Chang CM, Nowotny AM, Nowotny A. Rapid biological and chemical analyses of bacterial endotoxins separated by preparative thin-layer chromatography. Anal. Biochem., 1975 Jan, v.63, no.l, p. 183-194.

17. Choi YH, Roehrl MH, Kasper DL, Wang JY. A unique structural pattern shared by T-cell-activating and abscess-regulating zwitterionic polysaccharides. Biochemistry, 2002 Dec 24, v.41, no.51, p. 15144-15151.

18. Coley WB. Treatment of inoperable malignant tumors with the toxins of Erysipelas and the Bacillus proligiosus. Am. J. Med. Sci., 1894, v.108, p.183-212.

19. Coley-Nauts H. Swift WE. Coley BL. The treatment of malignant minors by bacterial toxins as developed by the late William H Coley. MD. revised in the light of modern research. Cancer Res., 1946, v.6, p.205-216.

20. Curvall M, Lindberg B, Lonngren J, Nimmich W. Structural studies on the Klebsiella О group 3 lipopolysaccharide. Acta. Chem. Scand., 1973, v.27, no.7, p.2645-2659.

21. Delude RL, Savedra R Jr, Zhao H, Thieringer R, Yamamoto S, Fenton MJ, Golenbock DT. CD 14 enhances cellular responses to endotoxin without imparting ligand-specific recognition. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1995 Sep 26, v.92, no.20, p.9288-9292.

22. Dmitriev BA, Ehlers S, Rietschel ET. Layered murein revisited: a fundamentally new concept of bacterial cell wall structure, biogenesis and function. Med. Microbiol. Immunol. (Berl), 1999 Mar, v.187, no.3, p.173-181.

23. Droge W, Lehmann V, Luderitz O, Westphal O. Structural investigations on the 2-keto-3-deoxyoctonate region of lipopolysaccharides. Eur. J. Biochem., 1970 May 1, v. 14, no.l, p. 175-184.

24. Ewing, W. H. Edwards and Ewing's identification of the Enterobacteriaceae. Elsevier Science Publishers, Amsterdam, 1986, Netherlands.

25. Ewing, W. H. Serological relationships between Shigella and coliform cultures. J. Bacterid., 1953, v.66, p.333-340.

26. Fahmi H, Chaby R. Selective refractoriness of macrophages to endotoxin-induced production of tumor necrosis factor, elicited by an autocrine mechanism. J. Leukoc. Biol., 1993 Jan, v.53, no.l, p.45-52.

27. Favorite GO, Morgan HR. Effects produced by the intravenous injection in man of a toxic antigenic material derived from eberthella typhosa: clinical, hermatological, chemical, and serotological studies. J. Clin. Invest., 1942, v.21, p.589-599.

28. Feist W, Ulmer AJ, Musehold J, Brade H, Kusumoto S, Flad HD. Induction of tumor necrosis factor-alpha release by lipopolysaccharide and defined lipopolysaccharide partial structures. Immunobiology, 1989 Oct, v. 179, no.4-5, p.293-307.

29. Fischer W. Purification and fractionation of lipopolysaccharide from gram-negative bacteria by hydrophobic interaction chromatography. Eur. J. Biochem., 1990 Dec 12, v.194, no.2, p.655-661.

30. Flohe S, Heinrich PC, Schneider J, Wendel A, Flohe L. Time course of IL-6 and TNF alpha release during endotoxin-induced endotoxin tolerance in rats. Biochem. Pharmacol.,1991 Jun 1, v.41, no.l 1, p. 1607-1614.

31. Freudenberg MA, Keppler D, Galanos C. Requirement for lipopolysaccharide-responsive macrophages in galactosamine-induced sensitization to endotoxin. Infect. Immun., 1986 Mar, v.51,no.3, p.891-895.

32. Freudenberg MA, Keppler D, Galanos C. Requirement for lipopolysaccharide-responsive macrophages in galactosamine-induced sensitization to endotoxin. Infect. Immun., 1986 Mar, v.51, no.3, p.891-895.

33. Frey EA, Miller DS, Jahr TG, Sundan A, Bazil V, Espevik T, Finlay BB, Wright SD. Soluble CD 14 participates in the response of cells to lipopolysaccharide. J. Exp. Med.,1992 Dec 1, v.176, no.6, p. 1665-1671.

34. Galanos C, Jiao BH, Komuro T, Freudenberg MA, Luderitz O. Large-scale fractionation of S-form lipopolysaccharide from Salmonella abortus equi. Chemical and serological characterization of the fractions. J. Chromatogr., 1988 May 25, v.440, p.397-404.

35. Galanos C. Physical state and biological activity of lipopolysaccharides. Toxicity and immunogenicity of the lipid A component. Z. Immunol. Forsch., 1975, v. 149, p.214.

36. Gamian A, Romanowska E. The core structure of Shigella sonnei lipopolysaccharide and the linkage between O-specific polysaccharide and the core region. Eur. J. Biochem., 1982 Dec, v.129, no.l, p. 105-109.

37. Gangloff SC, Hijiya N, Haziot A, Goyert SM. Lipopolysaccharide structure influences the macrophage response via CD14-independent and CD14-dependent pathways. Clin. Infect. Dis., 1999 Mar, v.28, no.3, p.491-496.

38. Gmeiner J. The isolation of two different lipopolysaccharide fractions from various Proteus mirabilis strains. Eur. J. Biochem., 1975 Oct 15, v.58, no.2, p.621-626.

39. Goldman RC, Leive L. Heterogeneity of antigenic-side-chain length in lipopolysaccharide from Escherichia coli 0111 and Salmonella typhimurium LT2. Eur. J. Biochem., 1980, v.107, no.l, p.145-153.

40. Golenbock DT, Hampton RY, Qureshi N, Takayama K, Raetz CR. Lipid A-like molecules that antagonize the effects of endotoxins on human monocytes. J. Biol. Chem., 1991 Oct 15, v.266, no.29, p. 19490-19498.

41. Hayashi S, Wu HC. Lipoproteins in bacteria. J. Bioenerg. Biomembr., 1990 Jun, v.22, no.3), p 451-471.

42. Haziot A, Chen S, Ferrero E, Low MG, Silber R, Goyert SM. The monocyte differentiation antigen, CD 14, is anchored to the cell membrane by a phosphatidylinositol linkage. J. Immunol., 1988 Jul 15, v.141, no.2, p.547-552.

43. Hellerqvist, C. G., B. Lindberg, S. Svensson, T. Holme, and A. A. Lindberg. 1969. Structural studies on the O-specific side-chains of the cell-wall lipopolysaccharide from Salmonella typhimurium LT2. Carbohydr. Res., v.9, p.237-241.

44. Hitchcock PJ, Brown TM. Morphological heterogeneity among Salmonella lipopolysaccharide chemotypes in silver-stained polyacrylamide gels. J. Bacteriol., 1983 Apr, v. 154, no. 1, p.269-277.

45. Hoist O, Ulmer AJ, Brade H, Flad HD, Rietschel ET.Biochemistry and cell biology of bacterial endotoxins. FEMS Immunol. Med. Microbiol., 1996 Dec 1, v. 16, no.2, p.83-104.

46. Homma JY, Matsuura M, Kumazawa Y.Structure-activity relationship of chemically synthesized nonreducing parts of lipid A analogs. Adv. Exp. Med. Biol., 1990, v.256, p. 101-119.

47. Hurley J, Levin J. The Relevance of Endotoxin Detection in Sepsis, James Hurley and Jack Levin. In: Brade H, Opal SM, Vogel SN, Momsson DC (eds) Endotoxin in Health and Disease. New York: Marcel Dekker, 1999, p.841-854.

48. Imoto M. Yoshimura H, Kusumoto S. Shiba T, Total synthesis of lipid A, active principle of bacterial endotoxin. Proc. Jpn. Acad. Sci., 1984, v.60, p.285-288.

49. Janeway С A Jr, Medzhitov R. Innate immune recognition. Annu. Rev. Immunol., 2002, v.20, p. 197-216.

50. Jann B, Reske K, Jann K. Heterogeneity of lipopolysaccharides. Analysis of polysaccharide chain lengths by sodium dodecylsulfate-polyacrylamide gel electrophoresis. Eur. J. Biochem., 1975 Dec 1, v.60, no.l, p.239-246.

51. Jann K, Jann B. Polysaccharide antigens of Escherichia coli. Rev. Infect. Dis., 1987 Sep-Oct, v.9, no.5, p.517-526.

52. Jiao BH, Freudenberg M, Galanos C. Characterization of the lipid A component of genuine smooth-form lipopolysaccharide. Eur. J. Biochem., 1989 Apr 1, v. 180, no.3, p.515-518.

53. Johnson K.S. and Perry M.B. Improved techniques for the preparation of bacterial lipopolysaccharides. Can. J. Microbiol., 1976, v.22, p.29-34.

54. Johnston CA, Greisman SE. Mechanism of endotoxin tolerance. In: Hinshaw LB, ed. Handbook of Endotoxin. Vol 2. Pathophysiolology of Endotoxin. New York: Elsevier, 1985, p.359-391.

55. Kalka-Moll WM, Tzianabos AO, Bryant PW, Niemeyer M, Ploegh HL, Kasper DL. Zwitterionic polysaccharides stimulate T cells by MHC class II-dependent interactions.

56. J. Immunol., 2002 Dec 1, v.169, no.ll, p.6149-6153.

57. Kasai N, Nowotny A. Endotoxic glycolipid from a heptoseless mutant of Salmonella minnesota. J. Bacteriol., 1967 Dec, v.94, no.6, p. 1824-1836.

58. Katzenellenbogen E, Romanowska E. Structural studies on Shigella flexneri serotype 6 core region. Eur. J. Biochem., 1980 Dec, v.l 13, no. 1, p.205-211

59. Kauffmann F. Classification of bacteria. Munksgaard, Copenhagen, Denmark. 1975.

60. Kenne L, Lindberg B, Petersson K, Katzenellenbogen E, Romanowska E. Structural studies of Shigella flexneri O-antigens. Eur. J. Biochem., 1978 Nov 2, v.91, no.l, p.279-284.

61. Kenne, L., Lindberg В., Petersson K., Katzenellenbogen E., Romanowska E. Structural studies of the O-specific side-chains of Shigella sonnei phase I lipopolysaccharide. Carbohydr. Res., 1980, v.78, p.l 19-126.

62. Kim YB, Watson DW. Biologically active endotoxins from Salmonella mutants deficient in O- and R-polysaccharides and heptose. J. Bacteriol., 1967 Nov.v.94, no.5, p. 13201326.

63. Knirel YA, Rietschel ET, Marre R, Zahringer U. The structure of the O-specific chain of Legionella pneumophila serogroup 1 lipopolysaccharide. Eur. J. Biochem., 1994 Apr 1, v.221,no.l, p.239-245.

64. Kotani S, Takada H. Structural requirements of lipid A for endotoxicity and other biological activities-an overview. Adv. Exp. Med. Biol., 1990, v.256, p.13-43.

65. Kovach NL, Yee E, Munford RS, Raetz CR, Harlan JM. Lipid IVA inhibits synthesis and release of tumor necrosis factor induced by lipopolysaccharide in human whole blood ex vivo. J. Exp. Med., 1990 Jul 1, v. 172, no.l, p.77-84.

66. Krauss JH, Seydel U, Weckesser J, Mayer H. Structural analysis of the nontoxic lipid A of Rhodobacter capsulatus 37b4. Eur. J. Biochem., 1989 Apr 1, v.180, no.3, p.519-526.

67. Laemmli UK. Related Articles, Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature, 1970 Aug 15, v.227(259, p.680-685.

68. Lindberg B, Lonngren J, Nimmich W. Structural studies on Klebsiella О group 5 lipopolysaccharides. Acta. Chem. Scand., 1972, v.26, no.6, p.2231-2236.

69. Loppnow H, Brade H, Durrbaum I, Dinarello CA, Kusumoto S, Rietschel ET, Flad HD. IL-1 induction-capacity of defined lipopolysaccharide partial structures. J. Immunol., 1989 May 1, v. 142, no.9, p.3229-3238.

70. Loppnow H, Libby P, Freudenberg M, Krauss JH, Weckesser J, Mayer H. Cytokineinduction by lipopolysaccharide (LPS) corresponds to lethal toxicity and is inhibited bynontoxic Rhodobacter capsulatus LPS. Infect. Immun., 1990 Nov.v.58, no.ll, p.3743-3750.

71. Lowry, О. H., Rosenborough, N. J., Farr, A. L. and Randall, R. J. Protein measurement with Folin phenol reagent. J. Biol. Chem., 1951, v.193, p.265-275.

72. Luderitz O, Galanos C, Risse HJ, Ruschmann E, Schlecht S, Schmidt G, Schulte-Holthausen H, Wheat R, Westphal O, Schlosshardt J. Structural relationship of Salmonella О and R antigens. Ann. N Y. Acad. Sci., 1966 Jun 30, v. 133, no.2, p.349-374.

73. Lugowski C, Blach-Olszewska Z, Cembrzynska-Nowak M. Interferon induction in mice by uniform salt forms of Shigella sonnei lipopolysaccharide and its components. Arch. Immunol. Ther. Exp. (Warsz), 1978, v.26(l-6, p.513-516.

74. Lynn WA, Golenbock DT. Lipopolysaccharide antagonists. Immunol. Today., 1992 Jul, v. 13, no.7, p.271-276.

75. Mackensen A, Galanos C, Wehr U, Engelhardt R. Endotoxin tolerance: regulation of cytokine production and cellular changes in response to endotoxin application in cancer patients. Eur. Cytokine. Netw., 1992 Nov-Dec, v.3, no.6, p.571-579.

76. Madonna GS, Vogel SN. Early endotoxin tolerance is associated with alterations in bone marrow-derived macrophage precursor pools. J. Immunol., 1985 Dec, v. 135, no.6, p.3763-3771.

77. Medzhitov R, Janeway С Jr. Innate immunity. N. Engl. J. Med., 2000 Aug 3;343, no.5):338-44.

78. Medzhitov R, Janeway CA Jr. Self-defense: the fruit fly style. Proc. Natl. Acad. Sci. U S A, 1998 Jan 20, v.95, no.2, p.429-430.

79. Moudgil GC, Allan RB, Russell RJ, Wilkinson PC. Inhibition, by anaesthetic agents, of human leucocyte locomotion towards chemical attractants. Br. J. Anaesth., 1977 Feb, v.49, no.2, p.97-105.

80. Nikaido H. Vaara M. Outer membrane. In: Neidhardt FC. (ed) Escherichia coli and Salmonella typhimurium. Washington. DC: American Society for Microbiology, 1987, p.7-22.

81. Nowotni A. Heterogeneity of endotoxins. Handbook of Endotoxin, Vol 1. In: Rietschel ET (ed.), New York: Elsevier, 1984, p.308-332.

82. Nowotny A, Cundy KR, Neale NL, Nowotny AM, Radvany R, Thomas SP, Tripodi DJ. Relation of structure to function in bacterial O-antigens. IV. Fractionation of thecomponents. Ann. N Y Acad. Sci., 1966 Jun 30, v. 133, no.2, p.586-603.

83. Nowotny A. Heterogeneity of endotoxic bacterial lipopolysaccharides revealed by ion-exchange column chromatography. Nature, 1966 Apr 16, v.210, no.33, p.278-280.

84. Office of Biologies Research and Review, Centre for Drugs and Biologies, FDA. Guidelines for the production of meningococcal polysaccharide vaccines, Notice of availability of the guidelines. Fed. Register, 1985, v.50(162, p.33852.

85. Ohta M, Rothmann J, Kovats E, Pham PH, Nowotny A. Biological activities of lipopolysaccharide fractionated by preparative acrylamide gel electrophoresis. Microbiol. Immunol., 1985, v.29, no.l, p. 1-12.

86. Palva ET, Makela PH. Lipopolysaccharide heterogeneity in Salmonella typhimurium analyzed by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis. Eur. J. Biochem., 1980, v. 107, no.l, p.137-143.

87. Peterson AA, McGroarty EJ. High-molecular-weight components in lipopolysaccharides of Salmonella typhimurium, Salmonella minnesota, and Escherichia coli. J. Bacteriol., 1985 May, v.162, no.2, p.738-745.

88. Pfeiffer R. Untersuchungen uber das Choleragift. Z. Hygiene 1892, v.l 1, p.393-412.

89. Prehm P, Jann B, Jann K. The 09 antigen of Escherichia coli. Structure of thepolysaccharide chain. Eur. J. Biochem., 1976 Aug 1, v.67, no.l, p.53-56.

90. Qureshi N, Jarvis BW, Takayama K, Non-toxic RsDPLA as a potent antagonist ot toxic lipopolysacchande In: Brade H, Opal SM, Vogel SN, Momsson DC (eds) Endotoxin in Health and Disease. New York: Marcel Dekker, 1999, p.687-698.

91. Qureshi N, Takayama K, Kurtz R. Diphosphoryl lipid A obtained from the nontoxic lipopolysaccharide of Rhodopseudomonas sphaeroides is an endotoxin antagonist in mice. Infect. Immun., 1991 Jan, v.59, no.l, p.441-444.

92. Rahman MM, Guard-Petter J, Carlson RW. A virulent isolate of Salmonella enteritidis produces a Salmonella typhi-like lipopolysaccharide. J. Bacteriol., 1997 Apr, v. 179, no.7, p.2126-2131.

93. Reske K, Jann K. The 08 antigen of Escherichia coli. Structure of the polysaccharide chain. Eur. J. Biochem., 1972 Dec 4, v.31, no.2, p.320-328.

94. Rietschel ET. Westphal O. Endotoxin: historical perspectives. In: Brade H. Opal SM, Vogel SN, Morrisson DC. (eds) Endotoxin in Health and Disease. New York: Marcel Dekker, 1999, p. 1-30.

95. Rivera M, Bryan LE, Hancock RE, McGroarty EJ. Heterogeneity of lipopolysaccharides from Pseudomonas aeruginosa: analysis of lipopolysaccharide chain length. J. Bacteriol., 1988 Feb, v.170, no.2, p.512-521.

96. Rossignol DP, Hawkins LD, Christ WJ et at. Synthetic endotoxm antagonists In: Brade H, Opal SM, Vogel SN, Momsson DC (eds) Endotoxin in Health and Disease. New York: Marcel Dekker, 1999, p.699-717

97. Salimath PV, Weckesser J, Strittmatter W, Mayer H. Structural studies on the non-toxic lipid A from Rhodopseudomonas sphaeroides ATCC 17023. Eur. J. Biochem., 1983 Oct 17, v. 136, no. 1, p. 195-200.

98. Sansonetti, P. J., D. J. Kopecko, and S. B. Formal. 1981. Shigella sonnei plasmids: evidence that a large plasmid is necessary for virulence. Infect. Immun., v.34, p.75-83

99. Schade FU, Flash R, Flohe S, et al. Endotoxin tolerance. In: Brade H, Opal SM, Vogel SN, Momsson DC (eds) Endotoxin in Health and Disease. New York: Marcel Dekker, 1999, p.751-767

100. Schumann RR, Leong SR, Flaggs GW, Gray PW, Wright SD, Mathison JC, Tobias PS, Ulevitch RJ. Structure and function of lipopolysaccharide binding protein. Science, 1990 Sep 21, v.249(4975, p. 1429-1431.

101. Sereny, B. 1957. Experimental keratoconjunctivitis shigellosa. Acta Microbiol. Acad. Sci. Hung., v.4, p.367-376.

102. Somerville JE Jr, Cassiano L, Bainbridge B, Cunningham MD, Darveau RP. A novel Escherichia coli lipid A mutant that produces an antiinflammatory lipopolysaccharide. J. Clin. Invest., 1996 Jan 15, v.97, no.2, p.359-365.

103. Starnes CO. Coley's toxins in perspective. Nature, 1992 May 7, v.357(6373, p. 11-12.

104. Strittmatter W, Weckesser J, Salimath PV, Galanos C. Nontoxic lipopolysaccharide from Rhodopseudomonas sphaeroides ATCC 17023. J. Bacteriol., 1983 Jul, v. 155, no.l, p.153-158.

105. Takayama K, Qureshi N, Beutler B, Kirkland TN. Diphosphoryl lipid A from Rhodopseudomonas sphaeroides ATCC 17023 blocks induction of cachectin in macrophages by lipopolysaccharide. Infect. Immun., 1989 Apr, v.57, no.4, p. 1336-1338.

106. Tanamoto K. Chemically detoxified lipid A precursor derivatives antagonize the TNF-alpha-inducing action of LPS in both murine macrophages and a human macrophage cell line. J. Immunol., 1995 Dec 1, v.155, no.l 1, p.5391-5396.

107. Shigella flexneri type 2a, and Shigella sonnei (Plesiomonas shigelloides) bound to bacterial toxoids. Infect. Immun., 1993 Sep.v.61, no.9, p.3678-3687.

108. Tsai, С. M, С. E. Frasch, E. Rivera, and H. D. Hochstein. Measurements oflipopolysaccharide (endotoxin) in meningococcal protein and polysaccharide preparations for vaccine usage. J. Biol. Stand., 1989, v. 17, p.249-258.

109. Vaara M. Agents that increase the permeability of the outer membrane. Microbiol. Rev., 1992 Sep.56, no.3, p.395-411.

110. Vaara M. Lipopolysaccharide and the permeability of the bacterial outer membrane. In: Brade H. Opal SM. Vogel SN. Moirisson DC. (eds) Endotmin in Health and Disease. New York: Marcel Dekker, 1999, p.3I-3S.

111. Watanabe, H., and A. Nakamura. 1986. Identification of Shigella sonnei form I plasmid genes necessary for cell invasion and their conservation among Shigella species and enteroinvasive Escherichia coli. Infect. Immun., v.53, p.352-358.

112. Westphal O, Luderitz O, Rietschel ET, Galanos C. Bacterial lipopolysaccharide and its lipid A component: some historical and some current aspects. Biochem. Soc. Trans., 1981 Jun, v.9, no.3, p.191-195.

113. Westphal O, Luderitz O. Chemische Erforschung von Lipopolysacchariden Gram-negativer Bakterien. Angew. Chemie., 1954, v.66, p.407-417.

114. Westphal O. Bacterial endotoxins. The second Carl Prausnitz Memorial Lecture. Int. Arch. Allergy. Appl. Immunol., 1975, v.49(l-2, p. 1-43.

115. Whistler RL, Bemiller JN (eds). Methods in carbohydrate chemistry. New Yore and London: Academic Press, 1972.

116. Wiemann B, Starnes CO. Coley's toxins, tumor necrosis factor and cancer research: a historical perspective. Pharmacol. Ther., 1994, v.64, no.3, p.529-564.

117. Wittmann M, Larsson VA, Schmidt P, Begemann G, Kapp A, Werfel T. Suppression of interleukin-12 production by human monocytes after preincubation with lipopolysaccharide. Blood, 1999 Sep 1, v.94, no.5, p. 1717-1726.

118. Wright SD, Ramos RA, Tobias PS, Ulevitch RJ, Mathison JC. CD 14, a receptor for complexes of lipopolysaccharide (LPS) and LPS binding protein. Science, 1990 Sep 21, v.249(4975, p. 1431-1433.

119. Ziegler-Heitbrock HW. Molecular mechanism in tolerance to lipopolysaccharide. J. Inflamm., 1995, v.45, no.l, p. 13-26.