Некоторые компоненты глутаматергической системы больных с разными типами течения рассеянного склероза тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.11, кандидат наук Рязанцева, Анастасия Александровна

• Рязанцева, Анастасия Александровна
• кандидат наук
• 2015

Оглавление диссертации кандидат наук Рязанцева, Анастасия Александровна

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕН™

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Этиопатогенетические паттерны рассеянного склероза

1.2. Эксайтотоксичность в патогенезе PC

1.2.1. Глутаматэргическая система

1.2.2. Биосинтез глутамата в нервной системе

1.2.3. Глутаматные рецепторы в нервной системе

1.2.4. Переносчики глутамата

1.2.5. Глутаматные рецепторы иммуннокомпетентных клеток

1.2.6. Глутаматопосредованная эксайтотоксическая гибель нейронов при PC

1.3. Генетические аспекты развития PC

1.3.1. Полиморфизм генов GRIN2A и SLC1A2

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Характеристика обследованных лиц

2.2. Определение уровня глутамата в сыворотке крови

2.3. Выделение ДНК из лейкоцитов венозной крови

2.4. Определение аллельных вариантов генов GRIN2A и SLC1A2 методом ПЦР в режиме реального времени

2.5. Статистический анализ результатов исследования

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННОГО ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Характеристика клинического материала в зависимости от типа течения заболевания

3.2. Анализ концентрации глутаминовой кислоты у больных PC

3.3. Полиморфизм генов GRIN2A (rs2650427), GRIN2A (rs 1969060) и SLC1A2 (rs4354668) глутаматэргической системы у больных PC

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

ПРИЛОЖЕНИЕ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВПРС - вторично-прогрессирующий рассеянный склероз ГЭБ - гематоэнцефалический барьер ГА - глатирамера ацетат ИФН - интерферон

КИС - клинически изолированный синдром МРТ - магнитно-резонансная томография

ПИТРС - препараты, изменяющие течения рассеянного склероза

111 IPC - первично-прогрессирующий рассеянный склероз

ПЦР - полимеразная цепная реакция

PC - рассеянный склероз

РРС - ремиттирующий рассеянный склероз

СНД - сумма неврологического дефицита

ЦНС - центральная нервная система

ФНО - фактор некроза опухолей альфа

ЭДТА - этилендиаминтетрауксусная кислота

AMP А - а-амино-3-гидрокси-5-метил-4-изоксазолпропионовая кислота

АРОЕ - аполипопротеин Е

ASCT - аланин-серин-цистеин-транспортер

CCR5 - ген хемокинового рецептора

CLEC16- ген протеина CLEC16А, который экспрессируется на В-клетках CTLA - cytotoxic T-lymphocyte-associated antigen (молекула передачи сигнала на цитотоксических лимфоцитах)

ЕААТ - excitatory amino acid transporter (транспортер «возбуждающих» аминокислот)

EDSS - Expanded Disability Status Scale (расширенная шкала инвалидизации) GRIN2A - ген, кодирующий NR2A субъединицу NMDA-рецептора GWAS - genome-wide association study (полногеномный поиск ассоциаций) FS - functional systems score (шкала функциональных систем)

IL - интерлейкин

IL-10 - ген интерлейкина-10

IL-7R - ген рецептора интерлейкина-7

IL-2RA - ген рецептора интерлейкина-2 а

IL-4 - ген интерлейкина-4

IL-lb - ген |3-субъединицы интерлейкина-1

HLA -главный комплекс гистосовместимости человека

HLA DRB1 - аллельный вариант гена главного комплекса гистостовместимости человека

КА - каинатная кислота

mGluR — метаботропный рецептор глутамата

NAAG - N-ацетил-аспартил-глутамат

NAA - N-ацетиласпартат

NMDA - N-метил-О-аспартат

NR - субъединица NMDA — рецептора

RANTES - regulated on activation, normal T cell expressed and secreted (ген, регулирующий активность, нормальную экспрессию и секрецию Т клеток) SLC - solute carrier family (семейство растворимых переносчиков) SLC1A2 - ген, кодирующий глутаматный транспортер 2 типа (ЕААТ2) SNP - single nucleotide polymorphisms (однонуклеотидные полиморфизмы) TGFB1 - ген трансформирующего фактора роста (3 TNF а - ген фактора некроза опухоли а VDR - ген рецептора к витамину D

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Некоторые компоненты глутаматергической системы больных с разными типами течения рассеянного склероза»

ВВЕДЕНИЕ

Рассеянный склероз (PC) - широко распространенное дизиммунное воспа-лительно-нейродегенеративное заболевание ЦНС, характеризующееся образованием множественных очагов демиелинизации, неуклонно прогрессирующим течением и развитием стойкой инвалидизации [Завалишин И.А., Бойко А.Н., 2004; Переседова A.B., Завалишин И.А., 2005; Гусев Е.И., Шмидт Т.Е., Яхно H.H., 2010]. Несмотря на значительный прогресс медицинских знаний за последнее время, до сих пор нет полного понимания этиологии и патогенеза этого заболевания.

В течение последних лет накоплено много данных о мультифакториальной природе PC, согласно которой в развитии заболевания играют важную роль как эндогенные (генетическая предрасположенность, гормональный фон и др.), так и экзогенные факторы - персистирующая вирусная инфекция, экология (климат, диета) и географические особенности [Гусев Е.И., 2005; Confavreux С., 2001]. Так же обсуждается вопрос о гетерогенности PC, как заболевания с полиморфным течением, наличием клинико-диагностических диссоциаций, различными иммунопатологическими механизмами развития, наличием различных генетических профилей у больных.

Установлено, что при PC имеет место патология нейрональной трансмиссии, обусловленная, главным образом, глутаматом и его нейроактивными метаболитами с развитием эксайтотоксических механизмов повреждения нейрональных структур, реакций окислительного стресса, индукцией процессов клеточной гибели [Carpenter D., 2002; Gonsette R.E., 2008].

Степень разработанности темы. Глутаматная система — самая мощная трансмиттерная система мозга. Глутаматергические нейроциты обнаружены в коре больших полушарий, обонятельной луковице, гиппокампе, черной субстанции, мозжечке, сетчатке [Гусев Е.И. и др., 1997]. Общепризнанным является тот факт, что глутамат - основной нейромедиатор задних рогов спинного мозга. Основную

роль в запуске эксайтотоксических процессов играет гиперактивация глутамат-ных рецепторов NMDA-класса, а целостность олигодендроцитов белого вещества зависит от нормальной работы транспортера глутамата 2 типа ЕААТ2 [Domercq, М., Etxebarria, Е., 2005; Vallejo-Illarramendi A., et al., 2011]. Клетки иммунной системы (лимфоциты, моноциты), которые накапливаются в крови непосредственно перед обострением, в большом количестве содержат глутаматные рецепторы. Эти клетки могут быть использованы в качестве маркеров экзацербации и служить доказательством взаимодействия нервной и иммунной систем [Boldyrev А. А., Ка-zey V. I. et al., 2004; Miglio G., Varsaldi F., et al., 2005; Pacheco R., Gallart Т., et al., 2007; Pampliega et al., 2011]. Некоторые авторы считают, что при PC повышение экстрацеллюлярного уровня глутамата может быть связано с характерной для этого заболевания гибелью олигодендроцитов, которые, как предполагается, являются ключевыми клетками, ответственными за клиренс глутамата в белом веществе головного мозга. Наряду с этим показана избыточная продукция глутамата проникающими в ЦНС активированными иммунными клетками и его высвобождение из демиелинизированных аксонов [Stys Р.К., 2004; Werner Р. et al., 2006].

Доказана роль наследственных факторов в развитии PC. Генетические факторы влияют не только на риск развития заболевания, но и на особенности его течения [Гусев Е.И., Завалишин И.А., Бойко А.Н.,2011]. В качестве генов - кандидатов предрасположенности к PC преимущественно рассматриваются гены, так или иначе вовлеченные в иммунный ответ, гены миелина и некоторых гормонов. Считается, что вклад в развитие PC вносят ряд генов, определяющих дегенеративные изменения (например, гены, управляющие процессом апоптоза) и процессы ре-миелинизации [Судомоина М.А., Бойко А.Н., 2003;Frohman Е.М., Filippi М. et al., 2005;0ksenberg J.R., Baranzini S.E. et al., 2008].

Вместе с тем представляет интерес изучение полиморфных генов глутама-топосредованной эксайтотоксичности, как одного из главных компонентов воспалительного и нейродегенеративного процессов при PC. Полиморфизмы генов глу-таматэргической системы мало изучены и литературные данные, указывающие на

ассоциацию с частотой встречаемости определенных полиморфизмов и феноти-пическими проявлениями РС немногочисленны и противоречивы [\Vestall Б.С., е1 а1., 2008; Б^Ыв Е.М., 1пкз1ег В., е! а1., 2013]. Таким образом, необходимость комплексной оценки как самой глутаматопосредованной эксайтотоксичности, так и генетических предикторов данного процесса определяется актуальностью изучения РС с позиций комплексного взгляда на этиологию и патогенез заболевания. Цель исследования: изучить уровень глутаминовой кислоты в сыворотке крови и оценить роль полиморфных вариантов генов глутаматэргической системы у больных рассеянным склерозом в зависимости от типа течения и тяжести заболевания.

Задачи исследования:

1. Оценить особенности клинических проявлений РС в зависимости от типа течения, стадии заболевания и степени выраженности неврологических нарушений.

2. Выявить зависимость концентрации глутамата в сыворотке больных РС от пола, длительности болезни, типа течения, стадии заболевания, степени инва-лидизации, скорости прогрессирования, характера клинического дебюта болезни.

3. Изучить частоту встречаемости полиморфных вариантов генов глутаматэргической системы: гена транспортера глутамата ЗЬС1А2 гб4354668 и генов ио-нотропных рецепторов глутамата СШЮА ге 1969060, ге2650427 у больных РС и здоровых лиц.

4. Выявить ассоциации полиморфных вариантов генов ОШЫ2А (ге 1969060, ге2650427) и 8ЬС1А2 (^4354668) с типом течения, возрастом и характером клинического дебюта, скоростью прогрессирования, степенью инвалидизации, уровнем глутамата сыворотки крови.

Научная новизна. Впервые проведена комплексная оценка концентрации глутаминовой кислоты в сыворотке крови больных РС в зависимости от клинических особенностей заболевания. Установлено, что больные РС имеют достоверно высокий уровень глутамата по сравнению с группой здоровых лиц, что отражает высокую степень глутаматопосредованной эксайтотоксичности при данной пато-

логии. Увеличение уровня глутамата по сравнению с группой здоровых лиц отмечено у пациентов с ремиттирующим типом течения болезни, в стадию обострения патологического процесса, легкой степенью инвалидизации по шкале EDSS, быстрой скоростью прогрессирования и длительностью заболевания более 5 лет. Впервые установлено увеличение концентрации глутамата в группе больных с дебютом заболевания в виде пирамидных и чувствительных нарушений.

Впервые исследованы и проанализированы полиморфные варианты генов глутаматэргической системы GRIN2A (rs 1969060, rs2650427) и SLC1A2 (rs4354668) у больных PC. Установлено, что носительство генотипа GG гена GRIN2A (rs1969060) ассоциировано с более тяжелым типом течения заболевания (111IPC) и более поздним (старше 40 лет) дебютом у пациентов PC. Установлена ассоциация носительства генотипа GG гена SLC1A2 (rs4354668) с медленным темпом прогрессирования болезни. Доказано, что концентрация глутамата сыворотки у больных PC не ассоциирована с носительством генотипов TT, GT, GG гена SLC1A2.

Теоретическая и практическая значимость работы. Установленные различия в содержании глутамата у больных PC в зависимости от типа течения и стадии болезни, клинического характера дебюта и степени инвалидизации дополняют знания о патогенетических особенностях болезни и позволяют оптимизировать подходы к лечению больных. Обнаруженные ассоциации генетических вариантов с клиническими характеристиками заболевания служат основой для дальнейшего изучения механизмов развития PC. Полученные данные об особенностях распределения частот аллелей и генотипов генов глутаматэргической системы у больных PC дополняют фундаментальные сведения о генетической компоненте этого полиморфного заболевания.

С теоретической точки зрения, полученные данные могут быть использованы в качестве новых знаний о патогенезе и генетической гетерогенности PC. Сведения о связи полиморфных маркеров изученных генов с клиническими характеристиками PC могут быть использованы для оценки характера течения патологи-

ческого процесса у больных PC.

Внедрение результатов работы. Основные положения работы включены в содержание лекций и семинаров для обучения студентов и врачей на кафедре неврологии и нейрохирургии ГБОУ ВПО СибГМУ Минздрава России. Результаты исследования внедрены в работу Центра рассеянного склероза Сибирского государственного медицинского университета. Материалы, полученные в ходе исследования, используются в педагогическом процессе кафедры неврологии ГБОУ ВПО НГМУ Минздрава России.

Положения, выносимые на защиту:

1. При рассеянном склерозе имеется увеличение концентрации глутамата в сыворотке крови пациентов по сравнению со здоровыми лицами.

2. Концентрация глутаминовой кислоты в сыворотке крови больных PC сопряжена с типом течения, стадией и продолжительностью заболевания, степенью инвалидизации и клиническим характером дебюта болезни.

3. Первично-прогрессирующий PC, поздний возраст дебюта (старше 40 лет) и медленный темп прогрессирования заболевания, ассоциированы с полиморфизмами генов GRIN2A (rs 1969060) и SLC1A2 (rs4354668) глутаматэргической системы.

Апробация работы. Основные материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на VIII Международной крымской конференции «Окислительный стресс и свободнорадикальные патологии» (Судак, Крым, Украина, 2012); II Интернациональном симпозиуме «Молекулярные механизмы регуляции синаптической трансмиссии» (Киев, 2012); Международной конференции студентов и молодых ученых посвященной 115-летию СПбГМУ им.акад. И.П. Павлова «Дни биохимии в СПбГМУ» (Санкт-Петербург, 2012); Всероссийской XIX научно-практической конференции «Нейроиммунология. Рассеянный склероз» (Санкт-Петербург, 2013); VI Сибирской межрегиональной научно-практической конференции «Рассеянный склероз и другие аутоиммунные заболевания нервной системы» (Новосибирск, 2013); Съезде физиологического общества им. И.П. Пав-

лова (Волгоград, 2013); XIX научно-практической конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Современные техника и технология» (Томск, 2013); Первом Конгрессе Российского комитета исследователей рассеянного склероза «Демиелинизирующие заболевания и нейроинфекции, вопросы диагностики и терапии» (Казань, 2013); I национальной конференции с международным участием «От фундаментальной неврологической науки к клинике» (Москва, 2014 г.); Международной заочной научно-практической конференции «Теоретические и практические аспекты развития современной науки» (Москва, 2014 г.); EFNS-ENS Joint Congress of Neurology (Istanbul, 2014).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 15 работ, в том числе 4 статьи - в рецензируемых журналах ВАК, 11 тезисов в материалах отечественных и зарубежных конференций.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 107 страницах, содержит введение, обзор литературы, материалы и методы, три главы с результатами исследования и их обсуждением, заключение, выводы и практические рекомендации. Работа иллюстрирована 23 таблицами, 29 рисунками. Список литературы включает 150 наименований, из них 38 работ отечественных и 112 зарубежных авторов.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1. Этиопатогенетические паттерны рассеянного склероза

Рассеянный склероз (РС) - широко распространенное дизиммунно-нейродегенеративное заболевание ЦНС, характеризующееся образованием множественных очагов демиелинизации и неуклонно прогрессирующим течением [37]. Эта проблема остается одной из самых актуальных в неврологии и в настоящее время, что объясняется высокой распространенностью заболевания среди лиц молодого возраста и неизбежным развитием на определенной стадии стойкой ин-валидизации.

В настоящее время в мире насчитывается около 3 миллионов больных рассеянным склерозом, в том числе в России около 150 тысяч. Проведенные в последнее время на разных территориях страны эпидемиологические исследования по единой методологии показали, что большинство регионов России относятся к зоне со средней частотой РС (от 10 до 59 случаев на 100 ООО населения) [37,12]. Томская область относится к зоне среднего риска по РС. С течением времени установлено увеличение распространенности болезни: в 1999 году она составляла 25, в 2003 г. - 26, в 2010 г. - 27,11 на 100 000 населения [1,3,4]. Заболеваемость РС из года в год увеличивается на большей части территорий. Это связывают как с истинным увеличением числа больных, так и с увеличением продолжительности жизни пациентов, а также с совершенствованием методов ранней диагностики заболевания [5].

Этиология РС до сих пор остается неясной для исследователей всего мира. В течение последних лет все больше сторонников находит мультифакториальная теория РС, согласно которой в развитии заболевания играют важную роль как эндогенные (генетическая предрасположенность, гормональный фон и др.), так и экзогенные факторы - персистирующая вирусная инфекция, экология, диета и географические особенности [6,14,7,12].

Иммунопатологические механизмы развития РС достаточно хорошо изучены. Они включают в себя активацию анергичных, неактивных Т-клеток типа СБ4+ вне ЦНС; проникновение их через гематоэнцефалический барьер (ГЭБ); образование тримолекулярного комплекса, включающего соответствующий рецептор активированной Т-клетки и аутоантигена, связанный с молекулами II класса главного комплекса гистосовместимости на антигенпрезентирующих клетках (в качестве последних выступают макрофаги и клетки глии). Проникшие в нервную систему аутореактивные Т-клетки и вторично активированные макрофаги и мик-роглия секретируют провоспалительные цитокины (интерферон у, фактор некроза опухоли а, лимфотоксин и др.), которые, в свою очередь, ещё больше индуцируют и поддерживают воспалительные реакции и увеличивают проницаемость ГЭБ [10,11,13,33].

Помимо активации клеточного звена в патогенез РС вовлекается и гуморальное звено иммунитета, активируется система комплимента. Несмотря на то, что клиническое течение РС на начальных этапах характеризуется чередованием обострений и ремиссии, иммуно-воспалительный процесс в целом характеризуется постоянным течением. В результате каскада иммунологических и биохимических нарушений развивается повреждение миелина и олигодендроцитов. Однако, помимо развития воспалительных реакций, демиелинизирующего процесса и глиальных нарушений, в последнее время при РС большое внимание уделяют нейродегенерации с вовлечением в патологический процесс аксонов. Именно ак-сональное повреждение при РС считают ответственным за развитие необратимого неврологического дефицита и трансформацию ремиттирующего течения с лабильностью симптомов во вторично-прогрессирующий [1,28].

Рассматривается несколько наиболее вероятных причин деструкции аксонов при РС. Механизмом прямой иммунологической атаки аксонов при РС считают экспрессию на них молекулы I класса главного комплекса гистосовместимости, что делает их уязвимыми к цитотоксическому влиянию Т-лимфоцитов типа СБ8+. Развитие аксональной дегенерации, обусловленной воспалительными реакциями,

может быть связано с различными факторами: увеличение внеклеточного давления при воспалительном отеке, эксайтотоксическое повреждение в результате воздействия возбуждающей аминокислоты глутамата (продуцируемой активированными макрофагами и микроглией), выделение провоспалительных цитокинов [15,18]. Кроме того, аксоны особенно подвержены дегенеративным изменениям при воздействии оксида азота, продуцируемого в больших концентрациях в месте развития воспалительных реакций. Это особенно проявляется в момент электрической активности, сопровождающейся наиболее высокими метаболическими потребностями [17,16,15,18,19].

Таким образом, на сегодняшний день по данным современной литературы доказано, что в патогенезе РС эксайтотоксичность, окислительный стресс, воспаление и нейродегенерация являются центральными компонентами.

1.2. Эксайтотоксичность в патогенезе РС 1.2.1. Глутаматэргическая система

Глутаматная система - самая мощная трансмиттерная система мозга. По оценке разных источников до 40-50% синапсов в ЦНС являются глутаматэргиче-скими [20,8,21]. Глутаминовая кислота была открыта Риттхаузеном (ШйЬаизеп) в 1866 г. и уже к началу 1900-х гг. было установлено, что глутамат - важный компонент нервной ткани. Глутаматергические нейроциты были обнаружены в коре больших полушарий, обонятельной луковице, гиппокампе, черной субстанции, мозжечке, сетчатке [20,2,22].

Общепризнанным является тот факт, что глутамат — основной нейромедиа-тор задних рогов спинного мозга. Он выделяется всеми классами первичных афферентных волокон (в том числе ноцицептивными), а также аксонами многих спинальных нейронов [2,23].

В работах других авторов показано, что в дополнение к классической ней-ротрансмиттерной функции, глутамат выступает как регулятор множества про-

цессов, протекающих в нервной системе на разных этапах ее развития, начиная с регуляции пролиферации эмбриональных клеток-предшественников и процессов нейрональной дифференцировки, вплоть до формирования различных форм си-наптической пластичности, лежащих в основе когнитивных функций. В процессе развития ЦНС стимуляция глутаматных рецепторов модулирует процессы миграции нейронов, обеспечивает их выживаемость и формирование нейрональных сетей [53].

1.2.2. Биосинтез глутамата в нервной системе

Глутаминовая кислота по праву занимает центральное место в обмене аминокислот мозга. Она используется для образования глутатиона, глутамина и гам-ма-аминомасляной кислоты. Образуется глутамат из своего кетоаналога -альфа -кетоглутаровой кислоты в ходе реакции трансаминирования, протекающая в ткани мозга с большой скоростью. Образующийся при этом глутамат является для цикла трикарбоновых кислот побочным продуктом. Большое расходование альфа -кетоглутаровой кислоты восполняется за счет превращения аспарагиновой кислоты в метаболит цикла трикарбоновых кислот - щавелевоуксусную кислоту [110]. Глутаминовая кислота может быть глутамина, который поступает в нервную ткань из крови, в соответствии с рисунком 1 [135,110]. Глутамин используют как клетки глии, так и нейроны, куда он переносится транспортными белками. Они обеспечивают доступность глутамата для глутаматергических нейронов. Синтезированный глутамат собирается в синаптических пузырьках нейронов. Механизм, посредством которого глутамат выходит из синаптической щели еще остаётся спорным. Молекулярные механизмы включают в себя выброс глутамата из синаптической везикулы посредством экзоцитоза [70], который напрямую зависит от Са2+ и АТФ из цитозоля через отсек активированных анионных каналов. Последний происходит при участии белков посредников [51].

соон

СН2

сн2

1

V

АТФ АДФ + Р1 Глутаминсинтетаза

НС-ЫН, СООН

СО-Ы»а

Глутамин

Рисунок 1 - Синтез глутамата из глутамина (01г^1ес1те Я. е! а1., 1999) [135]

Наряду с этим происходит выброс глутамата из цитозоля с помощью обратного захвата из глутаматного транспортера. Метаболизируется глутамат в клетках астроглии [110]. Клеточные источники глутамата (нейроны или глиальные клетки) также остаются спорными. В настоящее время доказательств в пользу нейронов больше, потому что большинство глутамата в мозге хранится в нейронах, а не в глиальных клетках [50,48].

В зависимости от участия в работе нервных клеток глутаматные рецепторы делятся на два больших подтипа. Одни, ионотропные, соединены с ионными каналами, которые открываются после активации соответствующими молекулами (ли-гандами), так что потоки ионов вызывают электрическую активность нейрона. Другие, метаботропные (тОШЛ), структурно не связаны с ионными каналами, они управляют метаболическими процессами в клетке через специальные сигнальные молекулы-информаторы, контролируя активность ионотропных рецепторов. Лиганды, активирующие нейрональные рецепторы являются их первичными информаторами (первичными мессенджерами), а сигнальные молекулы, образующиеся при активации метаботропных рецепторов и использующиеся для корректировки сигналов внутри клетки, рассматриваются как вторичные мессендже-ры [64]. В конце 80-х годов было высказано предположение о существовании метаботропных рецепторов глутамата, связанных с в-белками, доказанное к концу столетия. В соответствии с этим, идентифицированы еще три группы рецепторов,

1.2.3. Глутаматные рецепторы в нервной системе

содержащих различные комбинации шС1и-рецепторных субъединиц. Эти рецепторы действуют через систему вторичных мессенджеров в цитоплазме или посредством ионных каналов. К настоящему времени молекулярно-биологические методы исследования позволили выявить существование, по крайней мере, 3-х подтипов ионотропных рецепторов возбуждающих аминокислот с высокой степенью родства по субъединичному «спектру» [24]. По наиболее селективному аго-нисту они получили название соответственно ЫМГ)А (от лиганда М-метил-Б-аспартата), АМРА (по чувствительности к 2-альфа-амино-3-гидрокси-5-метил-4-изоксазол-пропионовой кислоте) и КА, или каинатных рецепторов (предпочтительно воспринимающих каиновую кислоту). Важным отличием МУГОА-рецепторов от других ионотропных глутаматных рецепторов является то, что их канал проницаем не только для натрия и калия, но и для кальция, который является вторичным мессенджером и способен модулировать ответ клетки в зависимости от внешнего сигнала.

На нейрональной мембране одновременно представлены разные типы глутаматных рецепторов, взаимодействующих между собой, что приводит к возможности вариабельного ответа клетки на данный медиатор. Метаботропные рецепторы, благодаря изменению метаболического статуса клеток, оказывают влияние на ионотропные глутаматные рецепторы и связанные с ними каналы. Так, изменение активности ионотропных глутаматных рецепторов под влиянием метабо-тропных рецепторов лежит в основе модуляции активности глутаматэргических синапсов в гиппокампе [54]. Ионотропные рецепторы различных классов также подвергаются сложному взаимному влиянию. Ионотропные глутаматные рецепторы отвечают за быструю синаптическую передачу. Быстрый синаптический ответ, опосредуемый каинатными или АМРА-рецепторами, приводит к изменению мембранного потенциала (деполяризации), снятию так называемого «магниевого блока» с ИМОА-рецепторов и их активации [125,54]. Вследствие этого увеличивается проницаемость клеточной мембраны для Са2+, что приводит к запуску различных Са2+-зависимых сигнальных механизмов, в частности, активации ряда

протеинкиназ, что, в свою очередь, оказывает влияние на другие классы ионо-тропных глутаматных рецепторов.

Каналы рецептора NMDA - гетеромеры, состоят из одной функционально неактивной изоформы NR1 (NMDA-£) - субъединицы и функционально значимых изоформ подъединиц NR2 (NMDA-e) и NR3 (NMDA-x) [74]. О сложном комплексном характере строения NMDA-рецепторов свидетельствует также обнаружение 8 функционально значимых изоформ и 1 функционально неактивной изоформы NR1-субъединицы, экспрессия которых определяется альтернативным сплайсингом одного гена. Кроме того, установлено, что NR2 существует в 4 разновидностях - NR2A, NR2B, NR2C и NR2D. Полученные в последнее время данные указывают на то, что каждый рецепторный комплекс имеет в своем составе 2 субъединицы NR2 и 2-3 субъединицы NR1 [74,123,78]. NR2A-cyбъeдиницa выявлена в большинстве ганглиозных нейронов и только в одной популяции амакрин-ных клеток [46]. Таким образом, возможно, что именно субъединица NR2 определяет фармакологическую специфичность NMDA-рецепторного комплекса [92]. Поэтому неудивительно, что значительное внимание исследователи уделяют тому, какие типы субъединиц NR2 и в каком соотношении и количестве входят в функционально полноценный NMDA-рецепторный комплекс [123,78]. Известно, что субъединица NR2B участвует в механизмах и памяти и хронической боли [71]. Так же было доказано, что воздействия, приводящие к угнетению активности NMDA-рецепторов, в первую очередь, содержащих NR2A субъединицу, как в клинических, так и в экспериментальных условиях, демонстрируют антидепрессивное действие [46,65]. Для NMDA-рецепторов характерными особенностями являются: хемо- и потенциал-чувствительность, замедленная динамика активации в сочетании с длительностью эффекта, способность к временной суммации и усилению вызванного потенциала. Ионный канал, связанный с NMDA-рецепторами, отличается высокой проницаемостью для катионов (К+, Na+, Са2+) и потенциал-зависимым способом заблокирован ионом Mg2+ [8,24]. Деполяризация постси-наптической мембраны (изменение мембранного потенциала от -50 мВ до -30

мВ), происходящая в результате активации других глутаматных ионотропных рецепторов (чаще АМРА типа), устраняет «магниевый блок» и приводит к открытию канала. Кроме того, критическим условием активации рецепторов NMDA-типа является связывание глицина (или D-серина) со специфическим для него сайтом на рецепторном комплексе. Приводятся данные, что глицин в концентрации 0,1 мкМ усиливает ответы NMDA-рецептора, увеличивая вероятность открывания канала, а при полном отсутствии глицина рецептор не способен активироваться естественным лигандом, L-глутаматом [24,9]. Наибольшая плотность NMDA-рецепторов обнаружена в конечном мозге, прежде всего в гиппокампе, коре больших полушарий, миндалине и стриатуме [2,22]. Именно эти отделы мозга, как стало известно, ответственны за обучение и память, а также связаны с обработкой сенсорной информации, что требует лабильной регуляции входящих сигналов посредством синаптической пластичности [34,29,35,37].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Рязанцева, Анастасия Александровна, 2015 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Алифирова, В.М. Эпидемиологические показатели рассеянного склероза в Томской области и их динамика за последние 30 лет / В.М.Алифирова, М.А. Титова // Бюллетень сибирской медицины. - 2012. - № 3. — С. 132-134.

2. Аминокислоты в сыворотке крови у больных рассеянным склерозом / Е.М. Иванова, М.А. Барабанова, Г.Г. Музлаев и соавт. // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С.Корсакова. - 2012. - № 6. - С.50-54.

3. Атрошенкова, A.A. Клинико-эпидемиологическая характеристика рассеянного склероза в Томской области : автореф. дис. ... канд. мед. наук : 14.00.13 / Атрошенкова Анна Анатольевна. - Новосибирск, 2004. - 17 с.

4. Бабенко, С.А. Роль аллельных вариантов генов иммунного ответа в развитии рассеянного склероза : автореф. дис. ... канд. мед. наук : 03.00.15 / Бабенко Серей Андреевич. - Томск, 2008. - 23 с.

5. Бархатова, В.П. Нейротрансмиттерная организация двигательных систем головного и спинного мозга в норме и патологии / В.П. Бархатова, И.А. Завали-шин // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С.Корсакова. - 2004. - № 8. - С. 77-87.

6. Беспалов, А.Ю. Нейропсихофармакология антагонистов NMDA-рецепторов / А.Ю.Беспалов, Э.Э.Звартау.- СПб.: Невский Диалект. - 2000 - 297 с.

7. Введение в молекулярную медицину / Под ред. М. А. Пальцева. - М., 2004. - 496 с.

8. Взаимодействие L-глутаминовой кислоты с Т-лимфоцитами человека / И. А. Костанян, Е. В. Наволоцкая, Р. И. Нуриева и др. // Биоорг. хим. - 1997. - Т. 23. - С. 805-808.

9. Гланц, С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц. - М. : Практика, 1998.-459 с.

10. Гусев, Е.И. Лечение рассеянного склероза / Е.И. Гусев // Лечение нервных болезней. - 2005. - С. 1-8.

11. Гусев, Е.И. Рассеянный склероз / Гусев Е.И. и др. - М., 1997.

12. Гусев, Е.И. Рассеянный склероз / Е.И. Гусев, И.А. Завалишин, А.Н. Бойко - М. : Реал Тайм, 2011.

13. Демакова, Е.В. Метаболизм глутамата в крови больных рассеянным склерозом (клинико-биохимическое исследование) : автореф. дис. ... канд. мед. наук : 14.00.13 / Демакова Екатерина Витальевна. - Пермь, 2002.

14. Депрессия в неврологической практике / А.М. Вейн, Т.Г. Вознесенская, В.Л. Голубев, Г.М. Дюкова. - М.: МИА, 2007. - 208 с.

15. Завалишин, И.А. Рассеянный склероз: современные аспекты этиологии и патогенеза / И.А. Завалишин, М.Н. Захарова // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. Рассеянный склероз: прил. к журн. - 2003. - №2. - С. 1017.

16. Завалишин, И.А. Патогенез и лечение рассеянного склероза / И.А. Завалишин, Т.Д. Жученко, A.B. Переседова // Вестник Российской академии наук. -2001.-№7.-С. 18-22.

17. Завалишин, И.А. Рассеянный склероз и другие демиелинизирующие заболевания / И.А. Завалишин, М.Н. Захарова; под ред. Е.И.Гусева. - М., 2004. - С. 60.

18. Завалишин, И.А. Рассеянный склероз: патогенез и лечение / И.А. Завалишин, A.B. Переседова // Качество жизни. Медицина. - 2004. - С. 46-50.

19. Захарова, М.Н. Боковой амиотрофический склероз и окислительный стресс : дис. ... д-ра мед. наук / Захарова Мария Николаевна. - М., 2001. - 256 с.

20. Зефиров, A.JI. Медиаторы, эволюция представлений / A.JI. Зефиров // Вестник Российской ФМН. - 2005. - № 1. - С. 49-52.

21. Кульчицкий, В.А. Нейрофизиология защитных рефлексов / В.А. Кульчицкий. - Мн.: Полибиг,1998. - 142 с.

22. Ланг, Т.А. Как описывать статистику в медицине : аннотированное руководство для авторов, редакторов и рецензентов / Т.А. Ланг, М. Сесик ; пер. с англ. под ред. В.П. Леонова. - М.: Практическая медицина, 2011. - 480 с.

23. Магаева, C.B. Дизрегуляция нейротрансмиттерных и нейропептидных систем при паркинсонизме / C.B. Магаева, В.Г. Кучеряну, Е.В. Бочаров // Тез. докл. 2-го Украинского симпозиума по паркинсонизму. - Киев, 2004. - С. 50.

24. Малкова, H.A. Рассеянный склероз / H.A. Малкова, А.П. Иерусалимский -Новосибирск: НГМУ, 2006. - 198 с.

25. Медик, В.А. Математическая статистика в медицине / В.А. Медик, М.С. Токмачев. - М.: Финансы и статистика, 2007. - 800 с.

26. Механизмы развития нейродегенеративного процесса при рассеянном склерозе - нейропротективное влияние препаратов ß-интерферона сегодня и ней-ротрофические факторы завтра / А.Н. Бойко [и др.] // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. Рассеянный склероз : прил. к журн. - 2003. - № 2. -С. 83-90.

27. От нейрона к мозгу / Дж.Николс, А.Р.Мартин, Б.Дж. Валлас, П.А Фукс. - М. : УЗСС. - 2003 - 440 с.

28. Первые результаты объединенного общероссийского исследования по клинической генетике рассеянного склероза / Е.А. Соколова, H.A. Малкова, Д.С. Коробко и др. // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С.Корсакова. - 2013. -Вып.2. - № 2. - С. 6-9.

29. Полиморфизм микросателлитных повторов в локусе фактора некроза опухолей при рассеянном склерозе у русских, татар и норвежцев / М.А. Судомои-на [и др.] // Нейроиммунология. - 2003. - Т.2. - С. 142.

30. Пузырёв, В.П. Патологическая анатомия генома / В.П. Пузырёв, В.А. Степанов. - Новосибирск : Наука, 1997. - 224 с.

31. Рассеянный склероз и другие демиелинизирующие заболевания / Под ред. Е.И. Гусева, И.А. Завалишина, А.Н. Бойко. - М. : Миклош, 2004. - 540 с.

32. Рассеянный склероз. Избранные вопросы теории и практики / Под ред. И.А. Завалишина, В.И. Головкина. - М., 2000.

33. Связь полиморфизмов генов цитокинов со скоростью прогрессирования рассеянного склероза / Д. С. Коробко, Е. А. Кудрявцева, Н. А. Малкова, M. JL Фи-

липенко // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С.Корсакова. - 2012. -№ 2. - С. 9-15.

34. Смагина, И.В. Прогнозирование развития и течения рассеянного склероза на основе клинико-эпидемиологических, генетических и нейробиохимических характеристик : автореф. дис. ... д-ра мед. наук : 14.01.11 / Смагина Инна Вадимовна.-М,2013.-49 с.

35. Тунева, Е. О. Влияние NMDA на продукцию АФК лимфоцитами человека / Е.О. Тунева, О. Н. Бычкова, А. А. Болдырев // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2003. - Т.136, №8. - С. 184-186.

36. Флетчер, Р. Клиническая эпидемиология. Основы доказательной медицины / Р. Флетчер, С. Флетчер, Э. Вагнер. - М.: Медиа Сфера, 2004. - 352 с.

37. Центральная глутаматергическая синаптическая передача при поведенческой депрессии у крыс / И.И. Абрамец, Д.В. Евдокимов, А.Н. Талалаенко и др. // Нейронауки: теоретические и клинические аспекты. - 2005. - Т. 1. - С. 22-30.

38. Шмидт, Т.Е. Рассеянный склероз / Т.Е. Шмидт, Н.Н. Яхно. - М., 2010. -С.272.

39. A polymorphism in the ЕААТ2 promoter is associated with higher glutamate concentrations and higher frequency of progressing stroke / J. Mallolas et al. // J. Exp. Med. - 2006.

40. A polymorphism in the HLA-DPB1 gene is associated with susceptibility to multiple sclerosis / J. Field et al. // PLoS One. - 2010, 5, el3454.

41. Activity-dependent regulation of energy metabolism by astrocytes: an update / L. Pellerin et al. // Glia. - 2007. - N 55 (12). - P. 1251-1262.

42. Alternative splicing of glutamate transporter EAAT2 RNA in neocortex and hippocampus of temporal lobe epilepsy patients / G. Hoogland et al. - Epilepsy Res., 2004.

43. Analysis of correlation between serum D-serine levels and functional promoter polymorphisms of GRIN2A and GRIN2B genes / Y. Iwayama et al. // Neurosci. Lett. - 2006.

44. Antidepressant effects of ketamine in depressed patients / R.M. Berman et al. // Biol. Psychiatr. - 2000. -Vol. 47. - P. 351-354.

45. Aquaporin-4 - binding autoantibodies in patients with neuromyelitis optica impair glutamate transport by downregulating EAAT2 / R. Shannon et al. // JEM. -2005. - Vol. 205. - P. 2473-2481.

46. Association of an EAAT2 polymorphism with higher glutamate concentration in relapsing multiple sclerosis / O. Pampliega et al. // J Neuroimmunol. - 2008. -V.195. - P.194-198.

47. Association study of polymorphisms in the excitatory amino acid transporter 2 gene (SLC1A2) with schizophrenia / X. Deng et al. - BMC Psychiatry 4, 2004.

48. Autoimmune T cells protect neurons from secondary degeneration after central nervous system axotomy / G. Moalem et al. // Nature Med. - 1999. - V. 5. - P. 4955.

49. Beart, P.M. Transporters for L-glutamate: an update on their molecular pharmacology and pathological involvement / P.M. Beart, R.D. O'Shea // Br. J. Pharmacol. - 2007. - Vol.150. - P. 5-17.

50. Biochemical studies of the structure and function of the N methyl-D-aspartate subtype of glutamate receptors /AW Dunah et al. // Mol Neurobiol. - 1999. - Vol. 19. -P. 151-179.

51. Blockade of glutamate release from microglia attenuates experimental autoimmune encephalomyelitis in mice / J. Shijie et al. // Tohoku J Exp Med. - 217:8792.

52. Blockade of K1 channels induced by AMPA/kainate receptor activation in mouse oligodendrocyte precursor cells is mediated by Nal entry / K. Borges, H. Kettenmann // J Neurosci Res. - 1995. - V.42. - P. 579-593.

53. Bredt, D.S. AMPA receptor trafficking at excitatory synapses / D.S. Bredt, R.A. Nicoll // Neuron. - 2003. - Vol. 40 - P. 361-379.

54. Carpenter D. NMDA receptors and the molecular mechanisms of excitotoxici-ty, in Oxidative Stress at Molecular, Cellular and Organ Levels / Eds P. Johnson, A. Boldyrev // Research Signpost, Trivandrum. - 2002. - P. 77-88.

55. Characterizing the Mechanisms of Progression in Multiple Sclerosis: Evidence and New Hypotheses for Future Directions / E.M. Frohmanet et al. // Arch Neurol. - 2005. - V. 62. - P. 1345-1356.

56. Chazot, P.L. The NMDA receptor NR2B subunit: a valid therapeutic target for multiple CNS pathologies / P.L. Chazot // Current medicinal chemistry. - 2004.

57. Cognitive dysfunction and glutamate reuptake: effect of EAAT2 polymorphism in schizophrenia / M. Spangaro et al. // Neurosci Lett. - 2012. - Vol. 522(2). -P.151-5.

58. Compston, A. The genetics of multiple sclerosis / A. Compston // J Neurovi-rol. - 2000. - V. 6. - Suppl 2. - P. 5-9.

59. Compston, A. The genetic epidemiology of multiple sclerosis / A. Compston // Phil Trans R Soc Lond. - 1999. - V. 354. - P. 1623-1634.

60. Confavreux, C. Infections and the risk of relapse in multiple sclerosis / C. Confavreux // Brain. - 2002. - Vol. 125(5). - P. 933-934.

61. Control of GluRl AMPA receptor function by cAMP-dependent protein kinase / T.G. Banke, D. et al. // J. Neurosci. - 2000 - Vol.20. - P.89-102.

62. Depolarization, exocytosis and amino acid release evoked by hyposmolarity from cortical synaptosomes / K.Tuz, C. Peña-Segura, R. Franco, H. Pasantes-Morales // Eur. J. Neurosci. - 2004. - Vol.9. - P.916-924.

63. Determination of NMDA NR1 subunit copy number in the recombinant NMDA receptors / P. Behe et al. // Proc. Roy. Soc. London. B. - 1995. - Vol. 262. - P. 205-213.

64. Dichotomous dopaminergic control of striatal synaptic plasticity / W. Shen, M Flajolet, P Greengard, DJ Surmeier // Science. - 2008. - Vol. 321. - P. 848-851.

65. Ebers, G.C. Natural history of primary progressive multiple sclerosis / G.C. Ebers // Multiple Sclerosis. - 2004. - Vol.10. - P.8-15.

66. Engelman, H.S. The distribution of neurons expressing calcium-permeable AMPA receptorsin the superficial laminae of the spinal cord dorsal horn /H.S. Engelman, T.B. Allen, A.B. Macdermott // J. Neurosci. - 1999. - Vol.19. - P. 2081-2089.

67. Evidence of elevated glutamate in multiple sclerosis using magnetic resonance spectroscopy at 3 T. / R. Srinivasan et al. // Brain. - 2005. - Vol. 128. - P. 10161025.

68. Excitatory amino acids and multiple sclerosis: evidence from cerebrospinal fluid / P. Sarchielli et al. // Arch Neurol. - 2003. - Vol.60. - P.1082-1088.

69. Excitotoxic oligodendrocyte death and axonal damage induced by glutamate transporter inhibition / M. Domercq et al. // Glia. - 2005. - V. 2. - P. 36-46.

70. Excitotoxin-induced caspase-3 activation and microtubule disintegration in axons is inhibited by taxol / A.E. King, K. A. Southam, J. Dittmannl, J. C. Vickers // Acta Neuropathologica Communications. - 2013. - N 1. - P. 59.

71. Extended analyses support the association of a functional (GT)n polymorphism in the GRIN2A promoter with Japanese schizophrenia / Y. Iwayama-Shigeno et al. // Neurosci. Lett. - 2005.

72. Filippi, M. Imaging promary progressive multiple sclerosis: the contribution of structural, metabolic, and functional MRI techniques / M. Filippi, M. Rovaris, M.A. Rocca // Multiple sclerosis. - 2004. - N 10. - S.36-S45.

73. Floyd, R. A. Oxidative stress in brain aging-Implications for therapeutics of neurodegenerative diseases / R. A. Floyd, K. Hensley // Neurobiol. Aging. - 2002. - V. 23. -P.795-807.

74. Fundytus, M.E. Glutamate receptors and nociception: implications for the drug treatment of pain / M.E. Fundytus // CNS Drugs. - 2001. - Vol.15, N 1. - P.29-58.

75. Fusion-related release of glutamate from astrocytes / Q. Zhang et al. //J. Biol. Chem. - 2004. - Vol. 279. - P. 12724-12733.

76. Genetic polymorphisms of the human tumor necrosis factor (TNF-a) first in-tron region in multiple sclerosis (MS) in the Russian ethnic group / A.D. Alekseenkov et al. // Europ J Neurology. - 1998. - N 5, Suppl 3. - P. 124-125.

77. Genome-wide association study identifies 12 new susceptibility loci for primary biliary cirrhosis / G.F. Mells et al. // Nat Genet. - 2011. - V.43. - P. 329-332.

78. Genome-wide gene-environment study identifies glutamate receptor gene GRIN2A as a Parkinson's disease modifier gene via interaction with coffee // PLoS genetics. - 2011. - Vol. 7. - N 8. - P.l-15.

79. Genome-Wide Pharmacogenomic Analysis of the Response to Interferon Beta Therapy in Multiple Sclerosis / E. Byun et al. // Arch Neurol. - 2008. - V. 65 (3). - P. 337-344.

80. Genotype-Phenotype correlations in multiple sclerosis: HLA genes influence disease severity inferred by 1HMR spectroscopy and MRI measures / D.T. Okuda et al. // Brain. - 2009. - V. 132. - P. 250-9.

81. Glutamate gene polymorphisms predict brain volumes in multiple sclerosis / EM. Strijbis et al. // Mult Scler. - 2013. - Vol. 9(3). - P. 281-8.

82. Glutamate signaling in the lung / M. Arita et al. // Trends. Pharmacol. Sci. -

2006.-N22.-P. 344-345.

83. Glycinergic transmission in the mammalian retina / H. Wassle et al. // Molecular Neurosci. - 2009. - Vol. 2. - P. 1-12.

84. Gonsette, RE. Neurodegeneration in multiple sclerosis: the role of oxidative stress and excitotoxicity / RE. Gonsette // J Neurol Sci. - 2008. - V.274(l-2). - P.48-53.

85. Hafler, D. The distinction blurs between an autoimmune versus microbial hypothesis in multiple sclerosis / D. Hafler // J Clin Invest. - 1999. - Vol. 104(5). - P. 527-529.

86. HLA-DR2 dose effect on susceptibility to multiple sclerosis and influence on disease course / L.F. Barcellos et al. // Am J Hum Genet. - 2003. - Vol. 72. - P. 710716.

87. HLA-DRB1 and multiple sclerosis in Malta / G. Dean et al. // Neurology. -

2007.-V.70.-P. 101-105.

88. Hohlfeld, R. Biottchnologica agents for the immunotherapy of multiple sclerosis. Principles problems and perspectives / R. Hohlfeld // Brain. - 1997. - V. 120. -P.865.

89. Ikeda, H. Synaptic plasticity in spinal lamina I projection neurons that mediate hyperalgesia /H. Ikeda, B. Heinke, R. Ruscheweyh, J. Sandkuhler // Science. -2003. - Vol. 299 - P.1237-1240.

90. Increased expression and function of glutamate transporters in multiple sclerosis / A. Vallejo-Illarramendi et al. // Neurobiol Dis. - 2006. - Vol. 21(1). - P. 154-64.

91. Increased expression of cystine/glutamate antiporter in multiple sclerosis / O. Pampliega et al. // Journal of Neuroinflammation. - 2011. - P. 8:63.

92. Interleukin 7 receptor alpha chain (IL7R) shows allelic and functional association with multiple sclerosis / S.G. Gregory et al. // Nat Genet. - 2007. - Vol.39. - P. 1083-1091.

93. Ji, R. Central sensitization and LTP: do pain and memory share similar mechanisms? / R. Ji,T. Kohno, K.A. Moore, C.J. Woolf // Trends in neurosciences. - 2003. - Vol.26., N 12.-P.696-705.

94. Kanai, Y. The glutamate and neutral amino acid transporter family: physiological implications / Y. Kanai, M.A. Hediger // Eur. J. Pharmacol. - 2003.

95. Kawamata, T. Activation of spinal N-methyl-D-aspartate receptors stimulates a nitric oxide/cyclic guanosine 3',5'-monophosphate/glutamate release cascade in nociceptive signaling / T. Kawamata, K. Omote // Anesthesiology. - 1999. - Vol.91, N5. -P.1415-1424.

96. King, IL Circulating Ly-6C+ myeloid precursors migrate to the CNS and play a pathogenic role during autoimmune demyelinating disease / IL King, TL Dickendesher, BM Segal // Blood. - 2009. - V.l 13. - P. 3190-3197.

97. Kurtzke, J.F. Rating neurologic impairment in multiple sclerosis: an Expanded Disability Status Scale (EDSS) / J.F. Kurtzke // Neurology. - 1983. - V. 33, N11. -P.1444-1452.

98. Laube, B. Evidence for a tetrameric structure of recombinant NMD A receptors / B. Laube, J.Kuhse, H. Betz // J. Neurosci. - 1998. - Vol.18, N 8. - P.2954-2961.

99. Liu, X.G. Long-term potentiation of C-fiber evoked potentials in the rat spinal dorsal horn isprevented by spinal N-methyl-D-aspartic acid receptor blockage / X.G. Liu, J. Sandkuhler // Neurosci. Lett. - 1995. - Vol.191. - P. 43-46.

100. Mattson, M.P. Ageing and neuronal vulnerability / MP. Mattson, T. Magnus // Nat Rev Neurosci. - 2006. - V.7. - P.278-94.

101. Matute, C. Glutamate-mediated glial injury: mechanisms and clinical importance / C. Matute, M. Domercq, M.V. Sanchez-Gomez // Glia. - 2006. - V. 53. - P. 212-224.

102. Meta-analysis of genome scans and replication identify CD6, IRF8 and TNFRSF1A as new multiple sclerosis susceptibility loci / De Jager et al. // Nat Genet. -2009.-V. 41.-P. 776-82.

103. Monocytes in multiple sclerosis: phenotype and cytokine profile / M Kou-wenhoven et al. // J Neuroimmunol. - 2001. - V.l 12. - P. 197-205.

104. Morrow, J. D. The isoprostanes - Unique products of arachidonate peroxidation: Their role as mediators of oxidant stress / J. D. Morrow // Curr. Pharmaceut. Design. - 2006. - V. 12. - P.895-902.

105. Moshiree, B. Central sensitization in visceral pain disorders / B. Moshiree, O. Zhou, D.D. Price, G.N. Verne // Gut. - 2006. - Vol. 55. - P. 905-908.

106. Mutations in GRIN2A and GRIN2B encoding regulatory subunits of NMDA receptors cause variable neurodevelopmental phenotypes / S. Endele et al. // Nature Genet. - 2010. - V.42. - P. 1021-1026.

107. Nedergaard, M. New roles for astrocytes: redefining the functional architecture of the brain / M. Nedergaard, B. Ransom, S.A. Goldman // Trends Neurosci. -2003. - N 26 (10). - P. 523-530.

108. Neucortical neuronal, synaptic and glial loss in multiple sclerosis / C. Wegner et al. // Neurology. - 2006. - Vol. 67. - P. 960-967.

109. Neurodegeneration in multiple sclerosis / Trapp B.D. et al. // Neuroscience. - 1999. - Vol. 5. - P.48.

110. Neuroprotective effect of combination therapy of glatiramer acetate and ep-igallocatechin-3-gallate in neuroinflammation / K. Herges et al. //PLoS One. — 2011.— V. 6(10):e25456.

111. New insights into the genetics of multiple sclerosis / S.E. Baranzini, J.R. Oksenberg, S.L. Hauser // J Rehabil Res Dev. - 2002. - V. 39(2). - P. 201-209.

112. NMD A receptors: from genes to channels / N.J. Sucher, M. Awobuluyi, Y.B.Choi, S.A. Lipton // Trends. Pharmacol. Sci. - 1996. - Vol.17, N 10. - P. 348-355.

113. N-methyl- D-aspartate promotes the survival of cerebellar granule cells: pharmacological characterization / R. Balazs et al. // Neurosci. Lett. - 1989. - Vol. 101. -P. 241-246.

114. Pacheco, R. Role of glutamate on T-cell mediated immunity / R. Pacheco, T. Gallart, C. Lluis, R.Franco // J Neuroimmunol. - 2007. - Vol.185, No. 1-2. - P. 9-19.

115. Pellerin, L. Glutamate uptake into astrocytes stimulates aerobic glycolysis: amechanism coupling neuronal activity to glucose utilization / L. Pellerin, P.J. Magi-stretti // Proc Natl. Acad. Sci. USA. - 1994. - N 91(22). - P. 10625-10629.

116. Pellerin, L. How astrocytes feed hungry neurons / L. Pellerin // Mol Neuro-biol. 2005. № 32 (1). P. 59-72.

117. Peltonen, L. Old Suspects Found Guilty - The First Genome Profile of Multiple Sclerosis / L. Peltonen // NEJM. - 2007. - V. 357. - P. 927-929.

118. Pitt, D. Glutamate excitotoxicity in a model of multiple sclerosis / D. Pitt, P. Werner, C.S. Raine // Nature Medicine. - 2000. - Vol.6. - P.67-70.

119. Polymorphisms in the glial glutamate transporter SLC1A2 are associated with essential tremor / S. Thier et al. // Neurology. - 2012. - Vol. 79(3). - P. 243-8.

120. Popratiloff, A. AMPA receptor subunits underlying terminals of fine-caliber primary afferent fibers / A. Popratiloff, R.J. Weinberg, A. Rustioni // J. Neurosci. - 1996. -Vol.16. -P.3363-3372.

121. Premkumar, L. S. Stoichometry of recombinant N-methyl-D-aspartate receptor channels inferred from single-channel current patterns / L.S. Premkumar, A. Auerbach // J. Gen. Physiol. - 1997. - Vol.110. - P. 485-502.

122. Rauen, T. Localization of the glutamate transporter GLT-1 in rat and macaque monkey retinae / T. Rauen, B.I. Kanner // Neurosci. Lett. - 1994. - V.169., N 1-2.-P. 137-140.

123. Region-specific expression of subunits of ionotropic glutamate receptors (AMPA-type, KA-type and NMDA receptors) in the rat spinal cord with special reference tonociception / T. Furuyama et al. // Brain. Res. Mol. Brain. Res. - 1993. -Vol.18. - P.141-151.

124. Risk alleles for multiple sclerosis identified by a genomewide study / D. Hafler et al. // N Engl J Med. - 2007. - V. 357. - P. 851-62.

125. Rodent lymphocytes express functionally active glutamate receptors / A. A. Boldyrev et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 2004. - N 11. - V. 324. - P. 133-139.

126. Sandkuhler, J. Understanding LTP in pain pathways / J. Sandkuhler // Mol. Pain. -2007. -N 3. - P. 1-9.

127. Sawcer, S. The complex genetics of multiple sclerosis: pitfalls and prospects / S. Sawcer // Brain. - 2008. - Vol. 131. - P. 3118-31.

128. Song, I. Regulation of AMPA receptors during synaptic plasticity /1. Song, R.L. Huganir //Trends. Neurosci. - 2002 - Vol. 25. - P. 578-588.

129. Stimulation of group I metabotropic glutamate receptors evokes calcium signals and c-jun and cfos gene expression in human T cells / G. Miglio et al. // Biochem Pharmacol. - 2005. - Vol.70. - N. 2. - P. 189-199.

130. Stys, P.K. Axonal degeneration in multiple sclerosis: is it time for neuroprotective strategies? / P.K. Stys // Ann Neurol. - 2004. - Vol. 55. - P. 601-603.

131. Suzumura, A. Therapeutic strategy against multiple sclerosis / A. Suzumu-ra // Rinsho Shinkeigaku (Article in Japanese). - 2008. - Vol. 48(11). - P.937-9.

132. Synaptic amplifier of inflammatory pain in the spinal dorsal horn / H. Ikeda et al. // Scienc. - 2006. - Vol.312. - P. 1659-1662.

133. The expression of vesicular glutamate transporters VGLUT1 and VGLUT2 in neurochemically defined axonal populations in the rat spinal cord with emphasis on the dorsal horn / A.J. Todd et al. // Eur. J.Neurosci. - 2003. - Vol.17. - P.13-27.

134. The genetics of multiple sclerosis: SNPs to pathways to pathogenesis / J.R. Oksenberg, S.E. Baranzini, S. Sawser, S.L. Hauser // Nature Rev. Genet. - 2008. - V. 9. -P. 516-526.

135. The glutamate receptor ion channels / R. Dingledine et al. // Pharmacol Rev. - 1999.-Vol. 51.-P. 7-61.

136. The International Multiple Sclerosis Genetics Consortium Risk alleles for multiple sclerosis identified by a genomewide study // NEngl J Med. - 2007. - Vol. 357.-P. 851-862.

137. The International Multiple Sclerosis Genetics Consortium; The Welcome Trust Case Control Consortium 2 Genetic risk and a primary role for cell-mediated immune mechanisms in multiple sclerosis // Nature. - 2011. - Vol. 476. - P. 214-9.

138. The link between excitotoxic oligodendroglial death and demyelinating diseases / C. Matute et al. // Trends Neurosci. - 2001. - V.24. - P.224-230.

139. TNF gene polymorphisms: association with multiple sclerosis susceptibility and severity. In: Frontiers in Multiple Sclerosis: Clinical research and therapy / E.I. Gusev et al. - Martin Dunitz Publishers : London, 1997. - P.35-41.

140. TNF-alpha, TNF-beta and IL-4 gene polymorphisms in Iranian patients with multiple sclerosis / E. Kamali-Sarvestani et al. // Acta Neurol Scand. - 2007. - V. 115(3).-P. 161-166.

141. Tovar, K.R. Mobile NMDA receptors at hippocampal synapses / K.R. To-var, G.L.Westbrook // Neuron. - 2002. - V.34, N 2. - P. 255-264.

142. Tsien, Jz. The essential role of hippocampal CA1 NMDA receptor-dependent synaptic plasticity in spatial memory / Jz. Tsien, P.T. Huerta, S. Tonegawa // Cell. - 1996.-Vol. 87. -P.1327-1338.

143. Variation in interleukin 7 receptor alpha chain (IL7R) influences risk of multiple sclerosis / F. Lundmark et al. // Nat Genet. - 2007. - Vol. 39. - P. 108-1113.

144. Wang, JT. Axon degeneration: molecular mechanisms of a self-destruction pathway / JT Wang, ZA Medress, BA Barres // J Cell Biol. - 2012. - Vol. 196(1). - P. 7-18.

145. Westall, FC. Association of an EAAT2 polymorphism with higher glutamate concentration in relapsing multiple sclerosis / FC. Westall // J Neuroimmunol. -2008. - Vol. 203(1). - P. 116-7.

146. Widespread expression of the AMPA receptor GluR2 subunit at glutama-tergic synapses in the rat spinal cord and phosphorylation of GluRl in response to noxious stimulation revealed with an antigen-unmasking method / G.G. Nagy et al. // J. Neurosci. - 2004. - Vol.24. - P.5766-5777.

147. Wucherpfennig, K. Mechanisms for the induction of autoimmunity by infectious agents / K. Wucherpfennig // J Clin Invest. - 2001. - Vol. 108(8). - P. 10971104.

148. Yamakura, T. Subumt and site-specihc pharmacology ot the NMD A receptor channel / T. Yamakura, K.Shimoji // Progr Neurobiol. - 1999. - Vol. 59. - P. 279298.

149. Zhou, M. Freshly isolated hippocampal CA1 astrocytes comprise two populations differing in glutamate transporter and AMPA receptor expression / M. Zhou, HK. Kimelberg // J Neurosci. - 2001. - Vol. 21. - P. 7901-7908.

150. Zou, X. NMDA or non-NMDA receptor antagonists attenuate increased Fos expression in spinal dorsal horn GABAergic neurons after intradermal injection of capsaicin in rats / X. Zou, Q. Lin, W.D. Willis // Neuroscience. - 2001. - Vol.106, N 1. - P.171-182.