Новые бактерии рода Pseudomonas - антагонисты фитопатогенов и перспективы их использования в сельскохозяйственной практике тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.07, кандидат биологических наук Свешникова, Елена Витальевна

• Свешникова, Елена Витальевна
• кандидат биологических наук
• 2003

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Свешникова, Елена Витальевна

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Бактерии рода Pseudomonas - антагонисты фитопатогенных грибов и бактерий.

1.2. Бактерии рода Pseudomonas, способствующие росту и развитию растений.

1.3. Колонизация ризосферы растений бактериями-антагонистами рода Pseudomonas.

1.4. Применение биопрепаратов на основе псевдомонад для защиты растений от болезней.

2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.1. Объекты исследований.

2.2. Скрининг штаммов-антагонистов фитопатогенных грибов среди бактерий рода Pseudomonas.

2.3. Изучение фенотипических характеристик выделенных культур.

2.4. Определение у штаммов псевдомонад способности к синтезу индолил-3-уксусной кислоты и цитокининоподобных веществ.

2.5. Определение нитрогеназной активности штаммов псевдомонад.

2.6. Определение у штаммов псевдомонад способности к разложению соединений фосфора.

2.7. Изучение влияния железа на антифунгальную активность штаммов псевдомонад.

2.8. Исследование хитинолитической активности штаммов псевдомонад.

2.9. Изучение антагонистического воздействия штаммов псевдомонад на развитие грибных фитопатогенов.

2.10. Изучение ростстимулирующей активности штаммов псевдомонад.

2.11. Изучение оптимальных способов хранения в лабораторных условиях штаммов-антагонистов рода Pseudomonas.

2.12. Исследование эффективности применения штаммов бактерий рода Pseudomonas против корневых гнилей пшеницы в лабораторных экспериментах.

2.13. Оценка эффективности применения штаммов бактерий рода Pseudomonas против возбудителей корневых гнилей пшеницы в условиях полевого эксперимента.

2.14. Оценка эффективности применения штаммов бактерий рода Pseudomonas против твердой головни пшеницы в условиях закрытого и открытого грунтов.

2.15. Оценка эффективности применения штаммов бактерий рода Pseudomonas в качестве агентов биологического контроля заболеваний овощных культур в лабораторно-вегетационных опытах.

2.16. Характеристика агроклиматических условий вегетационных сезонов.

2.17. Получение стрептомицинрезистентной модификации штамма Pseudomonas aureofaciens ИБ 51.

2.18. Изучение способности к колонизации корней растений у стрептомицинрезистентного штамма Pseudomonas aureofaciens ИБ 5 Г.

2.19. Математическая и статистическая обработка результатов.

3. СКРИНИНГ И ИЗУЧЕНИЕ НОВЫХ ШТАММОВ PGPR PSEUDOMONAS.

3.1. Выделение и фенотипическая характеристика новых штаммов-антагонистов фитопатогенных грибов рода Pseudomonas.

3.2. Характеристика выделенных культур по наличию свойств, положительно влияющих на растение.

3.2.1. Фитогормоны, синтезируемые штаммами псевдомонад.

3.2.2. Нитрогеназная активность штаммов псевдомонад.

3.2.3. Исследование у штаммов псевдомонад способности к разложению фосфатов.

3.3. Особенности антагонистического действия штаммов псевдомонад на фитопатогенные грибы.

3.4. Изучение ростстимулирующей активности штаммов псевдомонад.

3.5. Изучение оптимальных способов хранения в лабораторных условиях штаммов-антагонистов.

4. ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ ВЫДЕЛЕННЫХ ШТАММОВ РОДА PSEUDOMONAS ДЛЯ ЗАЩИТЫ РАСТЕНИЙ ОТ БОЛЕЗНЕЙ И ПОВЫШЕНИЯ УРОЖАЙНОСТИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ КУЛЬТУР.

4.1. Изучение эффективности применения штаммов псевдомонад для защиты пшеницы от корневых гнилей, альтернариоза, твердой головни в условиях вегетационных и полевых опытов.

4.2. Изучение эффективности применения штаммов псевдомонад в качестве агентов биологического контроля заболеваний овощных культур.

5. ИЗУЧЕНИЕ КОЛОНИЗИРУЮЩЕЙ СПОСОБНОСТИ ШТАММА

PSEUDOMONAS AUREOFACIENS ИБ 51STR.

6. РЕЗУЛЬТАТЫ ПРОИЗВОДСТВЕННЫХ ИСПЫТАНИЙ

БИОПРЕПАРАТА «ЕЛЕНА».

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Новые бактерии рода Pseudomonas - антагонисты фитопатогенов и перспективы их использования в сельскохозяйственной практике»

Актуальность проблемы. Бактерии p.Pseudomonas относятся к числу наиболее перспективных агентов биологического контроля заболеваний сельскохозяйственных растений. Среди представителей этой группы микроорганизмов встречаются не только антагонисты почвенных фитопатогенов [99,101,158], многие штаммы псевдомонад активно способствуют улучшению роста и развития растений [49,131,137]. По данным ряда исследователей известно, что, являясь типичными представителями ризосферы растений и обладая высокой скоростью роста, интродуцированные псевдомонады успешно колонизируют ризосферу растения-хозяина [70,86,93].

Возможность применения в сельском хозяйстве биологических средств защиты растений, в том числе и на основе бактерий p.Pseudomonas, изучается на протяжении десятков лет. Но только в последнее время, когда был накоплен колоссальный исследовательский материал по успешному применению бактерий-антагонистов в сельскохозяйственной практике, начались действительно широкомасштабные разработки технологий получения биопрепаратов различного назначения на основе микроорганизмов [28,41,59,63].

На данный момент в России зарегистрировано всего три биопрепарата на основе живых клеток штаммов бактерий p. Pseudomonas, используемых в качестве средств биологической защиты растений, («Список пестицидов и агрохимикатов, разрешенных к применению на территории Российской Федерации. 2003 год»): планриз (на основе штамма P.fluorescens АР-33), псевдобактерин-2 (на основе штамма P.aureofaciens BS 1393) и бинорам (на основе группы штаммов P.fluorescens 7Г, 7Г2К, 17-2). Ненасыщенность отечественного рынка биологическими средствами борьбы с инфекциями растений очевидна. Подобная ситуация объясняется видимо теми трудностями, с которыми сталкиваются исследователи на долгом пути создания нового биопрепарата. Это и отсутствие корреляции между опытами in vitro и in vivo, и непостоянство защитного действия препаратов на основе микроорганизмов, а также сложности, связанные с технологией производства и консервацией биологических средств защиты растений.

Цель исследования. Выделение новых штаммов микроорганизмов р. Pseudomonas, проявляющих антагонистическую активность по отношению к фитопатогенным грибам, и их изучение с точки зрения возможности применения для защиты сельскохозяйственных растений от болезней.

Задачи исследования.

1. Выделить из природных и техногенных местообитаний новые штаммы бактерий-антагонистов p. Pseudomonas.

2. Охарактеризовать выделенные штаммы по видовой принадлежности, спектру антагонистической активности, механизмам взаимодействия штаммов псевдомонад с грибными фитопатогенами и растениями.

3. Разработать оптимальные условия хранения в лабораторных условиях штаммов-антагонистов с целью поддержания в течение длительного времени антагонистических свойств культур.

4. Оценить эффективность применения изучаемых штаммов псевдомонад для улучшения развития сельскохозяйственных растений и защиты их от болезней.

5. Изучить в лабораторных и полевых условиях приживаемость и динамику развития популяции штаммов-антагонистов, интродуцированных в ризосферу сельскохозяйственных растений.

Научная новизна. Выделена и идентифицирована группа новых штаммов p. Pseudomonas, проявляющих антагонистическую активность в отношении широкого спектра фитопатогенных грибов: Pseudomonas aureofaciens ИБ 51, Pseudomonas aureofaciens ИБ 6, Pseudomonas putida ИБ 56, Pseudomonas putida ИБ 17, Pseudomonas sp-ИБ 182.

Показано, что выделенные штаммы псевдомонад продуцируют фитогормоны, а штамм Pseudomonas sp. ИБ 182 обладает хитинолитической и нитрогеназной активностью.

При изучении механизмов антагонистических взаимоотношений штаммов псевдомонад и фитопатогенных грибов было обнаружено, что под воздействием антибиотических веществ, синтезируемых штаммами-антагонистами, наблюдается задержка прорастания спор фитопатогенов, а формирующийся мицелий имеет выраженные морфологические нарушения.

В качестве метода консервации культур штаммов-антагонистов предложен способ хранения на каолине. Показано, что в смеси каолин - КЖ в соотношении 7:3 в течение 3 месяцев сохраняется высокий титр культуры P.aureofaciens ИБ 51 без утраты антагонистической активности. Данный срок хранения является вполне достаточным с точки зрения использования биологического препарата в течение одного полевого сезона.

Практическая значимость. Разработан новый биопрепарат «Елена» на основе штамма бактерий P.aureofaciens ИБ 51 для защиты сельскохозяйственных растений от грибных фитопатогенов. Проведен комплекс испытаний в условиях открытого и закрытого грунтов, подтвердивших эффективность нового биопрепарата. В настоящее время биопрепарат «Елена» находится на стадии регистрации в Госхимкомиссии Российской Федерации.

Апробация работы. Результаты работы доложены на Всероссийской конференции «Почва, жизнь, благосостояние» (Пенза, 2000), на VI Международной конференции «Регуляторы роста и развития растений в биотехнологиях» (Москва, 2001), на XV Международной научно-технической конференции «Химические реактивы, реагенты и процессы малотоннажной химии» (Уфа, 2002), на I и II Международном конгрессе «Биотехнология - состояние и перспективы развития» (Москва, 2002, 2003), на «I конкурсе научных работ молодых ученых и аспирантов УНЦ РАН и АН

РБ» (Уфа, 2002), на II Российской научно-практической конференции «Актуальные проблемы инноваций с нетрадиционными природными ресурсами и создания функциональных продуктов» (Москва, 2003), на Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения заслуженного деятеля науки РФ и РБ, д.с.-х.н., профессора Ю.А.Усманова «Роль средств химизации в повышении продуктивности агроэкосистем» (Уфа, 2003).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 17 научных работ, в том числе 3 патента Российской Федерации.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Изучение возможности использования явления микробного антагонизма, а также способности микроорганизмов стимулировать рост и развитие растений относится к числу наиболее важных направлений прикладной микробиологии. Актуальность этих исследований, в первую очередь, связана с интересом, который во всем мире проявляют к биологическому земледелию. Очевидно, что, с точки зрения природоохранного земледелия, биологические средства защиты растений являются единственной альтернативой химическим фунгицидам.

В связи с вышесказанным не вызывает сомнений актуальность проблемы поиска, изучения и сохранения микроорганизмов - антагонистов фитопатогенов и стимуляторов роста растений.

В систему поиска агентов биологического метода борьбы с патогенными организмами входят выбор места поиска, изоляция, предварительный отбор, вторичный отбор, подробное исследование выделенных штаммов-антагонистов, полевые испытания [91].

Бактерии p. Pseudomonas относят к числу наиболее перспективных объектов для использования в сельскохозяйственной практике. Это связано с тем, что среди представителей этого рода встречаются не только антагонисты фитопатогенных грибов и бактерий; псевдомонады обладают также рядом других замечательных свойств: почва является для них естественной средой обитания, они способны усваивать разнообразные органические субстраты, легко приживаются в ризосфере и ризоплане различных растений и обладают более быстрым ростом по сравнению с другими ее обитателями. Некоторые штаммы бактерий p. Pseudomonas стимулируют рост и развитие растений.

Заключение диссертации по теме «Микробиология», Свешникова, Елена Витальевна

ВЫВОДЫ

1. Выделены, идентифицированы и депонированы в Коллекцию микроорганизмов Института биологии УНЦ РАН пять новых штаммов бактерий-антагонистов p. Pseudomonas: P.aureofaciens ИБ 51, P. aureofaciens ИБ 6, P.putida ИБ 56, P.putida ИБ 17, Pseudomonas sp.HB 182, подавляющих широкий спектр фитопатогенных грибов.

2. Выявлено, что штаммы P. aureofaciens ИБ 51 и P. aureofaciens ИБ 6 синтезируют индолил-3-уксусную кислоту и цитокининоподобные вещества. Штамм Pseudomonas sp. ИБ 182 обладает нитрогеназной и хитинолитической активностью.

3. Установлено, что антибиотические вещества, продуцируемые псевдомонадами, задерживают прорастание спор фитопатогенных грибов и вызывают нарушение морфогенеза мицелия.

4. Для штамма P.aureofaciens ИБ 51 предложен способ хранения бактерий в смеси с каолином (в соотношении 7:3). Данный метод консервации позволяет в течение трех месяцев поддерживать высокий титр культуры без утраты антагонистической активности.

5. В вегетационных и полевых мелкоделяночных опытах доказана эффективность применения штаммов псевдомонад для защиты пшеницы от корневых гнилей, альтернариоза, твердой головни, а также против бактериоза огурцов, корневых гнилей фасоли, черной парши и фитофтороза картофеля. Показано, что по эффективности использования на сельскохозяйственных культурах описанные штаммы псевдомонад не уступают известным биопрепаратам фитоспорин, планриз, Агат-25К.

6. Выявлено, что выделенные штаммы псевдомонад стимулируют рост и развитие растений. Предпосевная обработка семян пшеницы препаратом на основе штамма P.aureofaciens ИБ 51 способствовала увеличению количества белка в зерне на 13,3 % по сравнению с контролем.

7. Показано, что штамм-антагонист P. aureofaciens ИБ 51str хорошо приживается в ризосфере пшеницы, сохраняя в течение всего периода вегетации высокую численность микробной популяции (106 КОЕ/г корня) и антагонистическую активность в отношении фитопатогенных грибов. Интродуцированный штамм-антагонист не оказывает подавляющего влияния на представителей аборигенной бактериальной микробиоты ризосферы пшеницы.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Свешникова, Елена Витальевна, 2003 год

1.Алексеев Ю.В. Качество растительной продукции/ Ю.В. Алексеев.-Л.: Колос ЛО, 1978.-256 с.

2. Алексеева Р.П. Влияние фосфатмобилизующих микроорганизмов на рост растений/ Р.П. Алексеева // Использование микроорганизмов в сельском хозяйстве и промышленности.- Новосибирск: Наука. Сиб. отд-ние, 1982.-С.4.

3. Антибиотическая активность и сидерофоры Pseudomonas cepacia/ В.В.Смирнов, Е.А.Киприанова, А.Д.Гарагуля и др. //Прикладная биохимия и микробиология,-1990.-Т. 26, № 1.-С. 75-80.

4. Антимикробные и энтомопатогенные свойства штаммов Pseudomonas aureofaciens/ В.В.Смирнов, Е.А.Киприанова, А.Д.Гарагуля и др. //Прикладная биохимия и микробиология.-1999.-Т.35,№ 4.-С. 413-416.

5. Бажанов Д.П. Колонизация корней ячменя диазотрофными Pseudomonas sp., генетически измененными по признаку фиксации азота/ Д.П.Бажанов, Е.В.Рудова, Н.А.Троицкий //Докл. АН Беларуси.-1995.-Т.39, № 1.-С. 84-87.

6. Биопрепарат псевдобактерин-2 для защиты растений от широкого спектра фитопатогенов/ В.В. Кочетков, А.Г.Чигалейчик, С.Б. Петрикевич, и др. // Химия в сельском хозяйстве.-1997.-№1-С. 15-16.

7. Большой практикум по микробиологии / Под общей ред. проф.Г.Л. Селибера.- М.:Изд-во «Высшая школа», 1962.- 492с.

8. Боровая В.П. НПА «Биота»: опыт производства и применения микробиологических препаратов/ В.П. Боровая // Защита и карантин растений.-2001.-№ 8.-С.15-16.

9. Ю.Бурлуцкая Г.Р. Влияние азотфиксирующего штамма Pseudomonas fluorescens на развитие небобовых растений/ Г.Р. Бурлуцкая, 3. Кубицова, М.М. Умаров // Вестн. МГУ. Сер.17 (почвоведение). -1991.-№ 1.-С.54-58.

10. Влияние бактерий рода Pseudomonas на урожай столовой свеклы и вынос азота растениями/ В.Г.Минеев, В.П.Шабаев, О.С.Сафрина и др. // Докл. ВАСХНИЛ.-1991.-№ 9.-С.26-31.

11. Влияние салицилата натрия на популяционную динамику ризосферного штамма Pseudomonas aureofaciens в почве и на корнях пшеницы / Е.А. Мордухова, В.В. Кочетков, Е.В.Лобанова и др. //Микробиология.- 2000.-Т.69, №6.-С.844-849.

12. Выживаемость и антагонистическая активность Pseudomonas aureofaciens УКМ В-111 при хранении в высоко дисперсных материалах/ И.К.Курдиш, А.А. Рой, А.Д.Гарагуля и др. //Микробиология.-1999.-Т.68, № 3.-С.387-391.

13. ГОСТ Р 50459-92. Семена сельскохозяйственных культур. Методы определения заражености болезнями. Издание официальное.- Введ. 25.12.92.-Изд-во стандартов, 1993.- С. 13-18.

14. Гущина Ю.А. Формальдегидрезистентные бактерии рода Pseudomonas как агенты биоконтроля и биостимуляции льна/ Ю.А.Гущина, Е.В.Евдокимов // Экология сегодня.-2001.-№ 1.-С.65-67.

15. Ермакова Н.И. Новый биопрепарат РИЦ против болезней растений/ Н.И.Ермакова, М.В. Штерншис //Защита растений.-1994, № 12.-С. 18.

16. Иммуноферментная система для определения цитокининов/ Г.Р.Кудоярова, С.Ю.Веселов, Н.И.Каровайко и др. // Физиология растений.-1990.-Т.37, вып. 1.-С.193-199.

17. Иммуноферментное определение содержания индолилуксусной кислоты в семенах кукурузы с использованием меченых антител / Г.Р.Кудоярова, С.Ю.Веселов, М.И. Еркеев и др. // Физиология растений.-1986.-Т.33, вып.б.-С. 1221 -1227.

18. Каталог культур микроорганизмов.- Пущино-Москва, 1992.-363 с.2 5.К вопросу о неспецифической токсигенности некоторых представителй рода Pseudomonas / Н.Д.Михновская, И.И.Шевцова, Е.М.Рубан и др. // Микробиол. журн.- 1988.-Т.50, № 5-С.83-86.

19. Кожевин П.А. Экология микроорганизмов: эксперименты в природе / П.А.Кожевин //Природа.-1985.-№ 7.-С. 78.

20. Кравченко J1.В. Кинетика колонизации корневой поверхности злаков при интродукции ассоциативных бактерий / Л.В.Кравченко, Н.М.Макарова//Микробиология.- 1993.-Т.62, вып.3.-С.524-529.

21. Кузнецова М.А. Ризоплан и фитофтороз картофеля / М.А.Кузнецова, А.В. Филиппов //Защита растений.-1995,- № 8.-С. 19-20.

22. Лукин С.М. Эффективность использования препаратов азотфиксирующих микроорганизмов под картофель / С.М.Лукин, Г.В.Симаков, А.М.Морозов // Химия в сельском хозяйстве.-1995.-№2-3.-С.36-38.

23. О.Макарова Л. А. Погода и болезни культурных растений / Л.А.Макарова, И.И.Минкевич.-Л.:Гидрометеоиздат,1977.-144 с.

24. Марфенина О.Е. Антропогенные изменения комплексов микроскопических грибов в почвах: Афтореф. дис.д-ра биол.наук/ О.Е.Марфенина.-М.,1999.- 49 с.

25. Мелентьев А.И. Влияние метаболитов бацилл-антагонистов на прорастание спор и развитие грибов-возбудителей обыкновенной корневой гнили / А.И.Мелентьев, Н.Ф.Галимзянова //Прикладная биохимия и микробиология.-1999.-Т.35, № 3.-С.353-357.

26. Методические указания по государственным испытаниям фунгицидов, антибиотиков и протравителей семян сельскохозяйственных культур/Под ред. К.В.Новожилова.-М.,1985.-130 с.

27. Методы общей бактериологии. В 3 т./Под ред. Ф.Герхардта и др.-М.:Мир,1984.-Т.1-3.

28. Методы почвенной микробиологии и биохимии /Под ред. Д.Г. Звягинцева.- М.:Изд-во Моск. ун-та, 1991.- 304с.

29. Методы экспериментальной микологии /И.А.Дудка, С.П.Вассер, И.А.Элланская и др. Киев: Наук, думка, 1982.-552с.

30. Минеев В.Г. Влияние бактерий рода Pseudomonas на некоторые физиолого-биохимические процессы в растениях столовой свеклы /

31. B.Г.Минеев, О.С.Сафрина, В.П. Шабаев // Докл. ВАСХНИЛ.-1992.-№ 1,1. C.16-21.

32. Минеев В.Г. Химический состав растений столовой свеклы, инокулированных бактерией рода Pseudomonas/ В.Г.Минеев, О.С.Сафрина,

33. B.П. Шабаев// Докл. ВАСХНИЛ.-1991 .-№ 10.-С.21-26.

34. Мирчинк Т.Г.Почвенная микология/ Т.Г.Мирчинк.- М.:Изд-во Моск. ун-та, 1988.- 224с.

35. Назарова J1.H. Агат-25К на зерновых культурах / JI.H. Назарова // Защита и карантин растений. -2002. -№ 1.- С. 21-22.

36. Назарова JI.H. Против комплекса болезней озимой ржи / Л.Н.Назарова, В.А.Наговицин, В.Г.Черемисина //Защита растений.-1995.- № 8.-С. 18-19.

37. Никонорова А.К.Особенности взаимодействия Bacillus subtilis с Helminthosporium sativum Pam., King et Bakke / А.К. Никонорова// Микология и фитопатология.-1996.-T.30, вып. 5-6.-С.69-73.

38. Определитель бактерий Берджи: В 2 т. /Под ред. Дж.Хоулта и др.-М.:Мир,1997.-Т.1.

39. Пат.2031119 Российская Федерация, С 12 N 9/42, 1/20. Штамм бактерий Pseudomonas maltophilia-продуцент хитинолитических ферментов / Н.Б.Андреева, Т.А.Сорокина, И.А.Хмель и др. Заявлено 21.12.90; Опубл. 20.03.95. Бюл. 8.

40. Пат.2051586 Российская Федерация, 6 А01 N 63/00, С 12 N 1/20//С 12 N 1/20, С 12 R 1:40. Штамм бактерий Pseudomonas putida биостимулятор роста растений/ Н.П.Максимова, В.В.Лысак, О.К.Игнатович и др. Заявлено 12.07.91; Опубл. 10.01.96. Бюл. 1.

41. Пат.2074159 Российская Федерация, 6С 05 F 11/08 // (С 05 F11/08, С 12 R 1:065). Штамм бактерий Azotobacter chroococcum, используемый для получения бактериального удобрения/ Г.У.Ожиганова, Г.П.Ланских, И.А.Чернов. Заявлено 02.09.92; Опубл. 27.02.97.

42. Пат.2099947 Российская Федерация, А 01 N 63/00, С 12 N 1/20// (С 12 N 1/20, С 12 R 1:125. Биопрепарат Фитоспорин для защиты растений от болезней / В.В.Смирнов, И.Б.Сорокулова, Т.Г.Бережницкая и др. Заявлено 15.11.96; Опубл. 27.12.97. Бюл. 36.

43. Пат.2128914 Российская Федерация, 6 А 01 N 63/00, С 12 N 1/20// (С 12 N 1/20, С 12 R 1:125). Способ получения препарата Фитоспорин / Ф.А.Байгузина, Г.А. Штроман, Т.Н.Кузнецова и др. Заявлено 30.03.98; Опубл. 20.04.99. Бюл. И.

44. Пат.2147181 Российская Федерация, А 01 N 63/00, С 05 F 11/08. Препарат для повышения урожая растений и защиты их от болезней / А.К.Злотников, И.К.Злотникова, Н.И.Санцевич и др. Заявлено 07.09.99; Опубл. 10.04.2000.

45. Пересыпкин В.Ф. Сельскохозяйственная фитопатология/ В.Ф. Пересыпкин.- 4-е изд., перераб. и дополн.- М.:ВО «Агропромиздат», 1989.480 с.

46. Полянская J1.M. Популяционная экология актиномицетов в почвах и ее роль в управлении комплексом почвенных микроорганизмов / Л.М.Полянская, Д.Г.Звягинцев //Изв. АН СССР. Сер. биол.-1984.-№ 5.-С. 746-753.

47. Практикум по микробиологии. /Под ред. Н.С. Егорова.- М.:Изд-во Моск. ун-та, 1976.- 308с.

48. Препараты псевдобактерин-2 и псевдобактерин-3 против болезней пшеницы / Е.М. Долгова, О.П.Манько, И.Я.Зубко и др. // Химия в сельском хозяйстве,-1997.-№ 1 -С. 13-14.

49. Разумовская З.Г. Лабораторные занятия по почвенной микробиологии / З.Г. Разумовская, Г.Я.Чижик, Б.В.Громов.- Л.:Изд-во Ленингр. ун-та, I960.- 184с.

50. Сеги И. Методы почвенной микроскопии /И. Сеги.- М.:Колос,1983.296 с.

51. Сидоренко О.Д. Действие ризосферных псевдомонад на урожайность сельскохозяйственных культур /О.Д.Сидоренко // Агрохимия.-2001.-№8.-С.56-62.

52. Сидоренко О.Д. Применение бактериальных препаратов при выращивании картофеля / О.Д.Сидоренко, В.Стороженко, О.Кухаренкова // Междунар. с-х. ж.-1996.-№ 6.-С.36-38.

53. Синтез индолил-3-уксусной кислоты ризосферными псевдомонадами: Влияние плазмид биодеградации нафталина / Е. А. Мор духова, В.В. Кочетков, Ф.Я. Поликарпова и др. //Прикладная биохимия и микробиология.-1998.-Т.З4, № 3.-С.287-292.

54. Синтез фитогормона индол-3-уксусной кислоты ризосферными бактериями рода Pseudomonas / Е.А.Мордухова, Н.П.Скворцова, В.В.Кочетков и др. // Микробиология.- 1991.-Т.60, вып.З.-С.494-500.

55. Скворцова И.Н. Методы идентификации и выделения почвенных бактерий рода Pseudomonas / И.Н.Скворцова.- М.:Изд-во Моск. ун-та, 1981.-78с.

56. Смирнов В.В. Бактерии рода Pseudomonas / В.В.Смирнов, Е.А. Киприанова.-Киев: Наук, думка, 1990.-264с.

57. Смолин В.Ю. Азотфиксация в ризосфере, урожай столовой свеклы и баланс азота в пойменной почве при применении азотфиксирующих бактерий рода Pseudomonas / В.Ю. Смолин, О.С.Сафрина // Агрохимия.-1995.-№11.-С.3-15.

58. Смолин В.Ю. Химический состав растений сои при применении клубеньковых бактерий с ризосферными псевдомонадами или эндомикоризными грибами и локальном внесении азотного удобрения/ В.Ю.Смолин, В.П.Шабаев // Агрохимия,-1992.-№ 11 .-С.73-79.

59. Способность различных видов бактерий рода Pseudomonas к колонизации корней пшеницы / А.Д.Гарагуля, Л.В.Бабич, Е.А.Киприанова и др. //Микробиол. журн.-1988.-Т. 50, № 6.-С. 77-81.

60. Сторожук С.В. Высокое качество биопрепарата залог успеха / С.В. Сторожук, И.А.Сидоров, М.С.Соколов //Защита растений.-1995.- № 8.-С. 17.

61. Титаренко Л.Н. Применение ризоплана на Северном Кавказе / Л.Н.Титаренко, Г.Г.Вяткина, М.Н.Алещенко //Защита растений.-1995.- № 8.-С. 17.

62. Тригер Е.Г. Межмикробные взаимодействия в почве (на примере некоторых популяций стрептомицетов и бактерий) / Е.Г.Тригер, Л.М.Полянская, П.А.Кожевин //Микробиология.-1990.-Т. 59, № 4.-С. 688-694.

63. Умаров М.М. Ассоциативная азотфиксация /М.М.Умаров. М.: Изд-во Моск. ун-та, 1986.-136с.

64. Холмецкая М.О. Синтез индолилуксусной кислоты некоторыми фитопатогенными и непатогенными бактериями / М.О.Холмецкая, Е.В.Лобанок, Л.С.Чернин // Докл. АН Беларуси.-1996.-Т.40, № 2.-С. 80-83.

65. Шабаев В.П. Влияние ризосферной бактерии Pseudomonas fluorescens 20 и эндомикоризного гриба Glomus mosseae на урожай и рост редиса в зависимости от условий минерального питания / В.П.Шабаев, О.С.Сафрина, В.А.Мудрик // Агрохимия.-1998.-№6.-С.34-41.

66. Шабаев В.П. Урожай рапса и вынос элементов минерального питания растениями при инокуляции семян культурой ризосферной бактерии Pseudomonas fluorescens 20 на фоне различных доз азотного удобрения /В.П.Шабаев, В.Ю.Смолин // Агрохимия.-1999.-№5.-С.67-73.

67. Шабаев В.П. Функциональная активность корней кукурузы при инокуляции стимулирующими рост растений ризосферными бактериямирода Pseudomonas / В.П.Шабаев, Л.Н.Олюнина, В.Ю.Смолин // Изв. РАН.Сер. биол.-1999.-№1 .-С.39-46.

68. Шабаев В.П. СОг-газообмен растений сои и симбиотическая азотфиксация при двойной инокуляции клубеньковыми бактериями с ризосферными псевдомонадами или эндомикоризными грибами /

69. B.П.Шабаев, В.Ю.Смолин, В.А.Мудрик // Изв. РАН.Сер. биол.-1995.-№6.1. C.693-701.

70. АЫ P.Iron bound-siderophores, cyanic acid and antibiotics involved in suppression of Thielaviopsis basicola by a Pseudomonas fluorescens strain / P.Ahl, C.Voisard, G.Defago //Phytopathol. J.-1986,- № 2.-P. 121-134.

71. АП Siddiqui I. Use of rhizobacteria in the control of root rot-root knot disease complex of mungbean/ I.Ali Siddiqui, S.Ehetshamul-Haque, S. Shahid Shaukat // J.Phytopathol.-2001.-№ 6.-P.337-346.

72. Andreeva N.B. Chitinolytic activity of pigmented Pseudomonas and Xanthomonas bacteria/ N.B.Andreeva, T.A.Sorokina, I.A.Khmel //Microbios.-1996.- № 350.-P.53-57.

73. A new chlorinated phenylpyrrole antibiotic produced by the antifungal bacterium Pseudomonas cepacia/ J.N.Roitman, N.E.Mahoney, W.J.Janisiewicz, M. Benson //J. Agr. Food Chem.-1990.-Vol. 38, № 2.-P. 538-541.

74. Antifungal activiti in cell-free culture fluid of Pseudomonas solanacearum / S.Tsuyumu, S.Tsuchida, T.Nakano et al. //Ann. Phytopathol. Soc. Japan.-1989.-Vol. 55, № l.p. 9-15.

75. Bahme J.B. Spatial-temporal colonization patterns of a rhizobacterium on undergraund organs of potato / J.B.Bahme, M.N.Schroth //Phytopathology.-1987.-Vol. 77, № 7.-P. 1093-1100.

76. Becker J.O. Role of siderophores in suppression of Pythium species and production of increased-growth response of wheat by fluorescent pseudomonads / J.O.Becker, R.J.Cook //Phytopathology.-1988.-Vol. 78, № 6.-P. 778-782.

77. Biological control of Fusarium diseases, isolation of antagonistic microorganisms and seed bacterization on the control for Fusarium wilt of adzuki-bean / S.Hasegawa, F.Kodama, H.Kaneshima et al. //J. Pharmacobic-Dyn.-1987.-Vol. 10, №3.-P. 57.

78. Biological control of sheath-blight of rice in India with antagonistic bacteria / D.T.Vasantha, V.R.Malar, N.Sakthivel et al. //Plant and Soil.-1989.-Vol. 119, №2.-P. 325-330.

79. Campbell R. The search for biological control agents against plant pathogens: a pragmatic approach / R.Campbell //Biol. Agr. and Hort.-1986.-Vol. 3,№2-3.-P. 317-327.

80. Canesan P. Biological control of Sclerotium rolfsii Sacc. in peanut by inoculation with Pseudomonas fluorescens / P.Canesan, S.S. Gnanamanickam //Soil Biol. Biochem.-1987.-Vol. 19, № l.-P. 35-38.

81. Caponlgro V. Coloizzazione radicale di tabacco con Pseudomonas fluorescent! / V.Caponlgro, R. Contillo //Ann. 1st. Sper. Tabacco. Scafoti (Salerno).-1986.-Vol. 12.-P. 49-64.

82. Colin J.E. Caract6risation spectrophotometrique et activite biologique de siderophores de Pseudomonas fluorescents, antagonistes de bacteries phytopathogenes / J.E.Colin, H.Maraite //Parasitica.-1987.-Vol.43, № 4.-P. 168175.

83. Disease-suppression by Pseudomonas in the Cicer-Fusarium system/ P.Cornelis, S.Hettiarachi, X.Muunga et al. //Physiol plant.-1990.-Vol. 79, № 2, Pt. 2.-P. 102.

84. Dynamics of sugar beet colonization by Pythium ultimum and Pseudomonas species: effects on seed rot and damping-off / R.M.Osburn, M.N.Schroth, J.G.Hancook et al. //Phytopathology.-1989.-Vol. 79, № 6.-P. 709716.

85. Effect of rhizobacteria and metham-sodium on growth root microflora of celery cultivars / J.O.Becker, C.A.Hepfer, G.V.Yuen et al. //Phytopathology.-1990.-Vol. 80, № 2.-P. 206-211.

86. Gordon-Lennox G. Utilisation d'antagonistes pour l'enrobage des semences: efficacite et mode d'action contre les agents de la fonte des semis / G.Gordon-Lennox, D.Walther, D.Gindral //Bull. OEPP. Oxford etc.-1987.-Vol.17, № 4.-P. 631-637.

87. Grimes H.D. Influence of Pseudomonas putida on Nodulation Phaseolus Vulgaris/ H.D.Grimes, M.S.Mount //Soil Biol, and Biochem.-1984.-Vol.16, № l. P. 27.

88. Increase of potato tuber yields in short rotations of potato by seed tuber treatment with fluorescent Pseudomonas sp. / P.A.Bakker, A.W.Bakker, F.P. Geels et al.//Developm. in Plant Soil Sc. Dordrecht etc.-1989.-№ 40.-P. 163-170.

89. In-furrow spray as a delivery system for plant growth-promoting rhizobacteria and other rhizosphere-competent bacteria/ R.M.Zablotowicz, E.M.Tipping, F.M.Scher et al. //Can. J. Microbiol.-1991 .-Vol. 37, № 8.-P. 632.

90. Jayaswal R.K. Isolation and characterization of a Pseudomonas strain that restricts growth of various phytopathogenic fungi / R.K.Jayaswal, M.A.Fernander, R.G.Schroeder //Appl. and Environ. Microbiol.- 1990,-Vol. 56, № 4.-P. 1053-1058.

91. Kloepper J.W. Plant growth- promoting rhizobacteria and plant growth under gnotobiotic conditions/ J.W.Kloepper, M.N.Schroth // Phytopathology.-1981 .-V.71, №6.-P.642-644.

92. Kunitaka S. Purification of antifungal substance produced by Pseudomonas avenae Manns / S.Kunitaka, N. Matsuyama //Ann. Phytopathol. Soc. Japan.-1989.-Yol. 55, № 3.-P. 366-368.

93. Liang X.Y.Control of damping-off of safflower by bacterial seed treatment/ X.Y.Liang, H.C.Huang, L.J.Yanke // Can J. Pathol.- 1996.-№1.-P .45-49.

94. Liao C.H. Antagonism of Pseudomonas putida strain PP22 to phytopathogenic bacteria and its potential use as a biocontrol agent / C.H.Liao //Plant Disease.-1989.-Vol. 73, № 3.-P. 223-226.

95. Liste H.H. Stimulation of symbiosis and growth of lucerne by combined inoculation with Rhizobium meliloti and Pseudomonas fluorescens/ H.H. Liste //Zbl. Mikrobiol.- 1993.-B.148, № 3.-S. 163-176.

96. Loper J.E. Role of fluorescent siderophore production in biological control of Pythium ultimum by a Pseudomonas fluorescens strain / J.E.Loper //Phytopathology.- 1988,-Vol. 78, № 2.-P. 166-172.

97. Mao G.H. Postharvest biocontrol of gray mold of pear by Pseudomonas gladioli: Abstr. Present. 1989 Annu. Meet. Amer. Phytopathol. Soc., Richmond, Va, Aug. 20-24, 1989 / G.H.Mao, R.A.Cappellini //Phytopathology.-1989,-Vol. 79, № 10.-P. 1153.

98. Mc Laughlin R.J. Biocontrol of bacterial wilt of potato with an avirulent strain of Pseudomonas solanacearum: Interactions with root-knot nematodes / R.J.Mc Laughlin, L.Sequeira, D.P. Weingartner //Am. Potato J.-1989.-Vol. 67, № 2.-P. 93-107.

99. Mc Laughlin R.J. Evaluation of an avirulent strain of Pseudomonas solanacearum for biological control of bacterial wilt of potato / R.J.Mc Laughlin, L.Sequeira //Am. Potato J.-1988.-Vol. 65, № 5.-P. 255-268.

100. Mew T.W. Bacterization of rice plants for control of sheath blight caused by Rhizoctonia solani / T.W Mew., A.M.Rosales //Phytopathology.-1986.-Vol. 76, № 11.-P. 1260-1264.

101. Meyer J.R. Responce of Subterranean Clover to Dual Inoculation with Vesicular-arbuscular Mycorrhizal Fungi and a Plant Growth-Promoting Bacterium Pseudomonas putida / J.R.Meyer, R.G.Linderman //Soil Biol, and Biochem.-1986.-V.18, № 2.-P. 185.

102. Munoz-Garcia Andres A. The population dynamics of maize rhizoplane inoculated with Pseudomonas and Azospirillum/ A.Munoz-Garcia Andres, Maria Valdes//Rev. latinoamer. microbiol.-1995.-№ 4.-P. 305-313.

103. Nishijima F. Enhances Nodulation of Soybean by Bradyrhizobium in Presense of Pseudomonas fluorescens/ F.Nishijima, W.R.Evans, S.J. Vesper // Plant ant Soil.-1988.-Vol.111, № l.-P. 149.

104. Pietr S.J. Cucumber rhizosphere pseudomonads as antagonists of Fusarium / S.J.Pietr, R. Kempa //Interrelationships Between Microorganisms and Plants Soil: Proc. Int. Symp., June 22-27, 1987,-Praha, 1989.-P. 411-417.

105. Plant growth-promoting rhizobacteria on canola (rapeseed)/ J.W.Kloepper, D.J.Hume, F.M. Scher et al. //Plant Disease.-1988.-Vol.72, №1.-P.42-46.

106. Production of antibiotics by Pseudomonas cepacia as an agent for biological control of soilborne plant pathogens / Y.Homma, Z.Sato, F.Hirayama et al. //Soil Biot. and Biochem.-1989.-Vol. 21, № 5.-P. 723-728.

107. Production of siderophores in antagonistic and non-antagonistic strains of Pseudomonas / P.Jacque, M.Ongena, P.Delfosse et al. //5 th Eur. Congr. on Biotechnology, July 8-13, 1990. -Copengagen.-1990.-Vol.l.-P. 150-152.

108. Production of the antibiotic phenazine-l-carboxylic acid by fluorescent Pseudomonas species in the rhizosphere of wheat / L.S.Thomashow, D.M.Weller, R.F.Bonsall et al. //Appl. and Environ. Microbiol.-1990,-Vol. 56, № 4.-P. 908-912.

109. Properties of a syringomycin-macromolecular complex produced by Pseudomonas syringae pv. Syringae/ N.S.Iacobellis, P.Lavermicocca, G.Surico et al. // Plant Pathog. Bact.: Proc. 7th Int. Conf., June 11-16, 1989,-Budapest, 1990.-P. 93-97.

110. Renato de Freitas J. Pseudomonas cepacia and Pseudomonas putida as winter wheat inoculants for biocontrol of Rhizoctonia solani / J.Renato de Freitas, J.J.Germida //Can. J. Microbiol.-1991.-Vol. 37, № 10.-P. 780-784.

111. Rhodes D.J. Effects of fluorescent pseudomonads on the potato blacked syndrome / D.J.Rhodes, C. Logan //Ann. Appl. Biol.-1986.-Vol. 108, № 3.-P. 511518.

112. Root colonization efficiency, plant-growth-promoting activity and potentially related properties in plant-associated bacteria / G.Forlani, R.Pastorelli, M.Branzoni et al. II J.Genet. and Breed.- 1995.-№ 4.-P. 343-352.

113. Sarniguet A. Relationships between take-all, soil conduciveness to the disease, populations of fluorescent pseudomonads and nitrogen fertilizers/ A.Sarniguet, P.Lucas, M. Lucas //Plant ant Soil.-1992.-Vol. 145, № l.-P. 17-27.

114. Hl.Savithiry S. Bacterization of peanut with Pseudomonas fluorescent for biological control of Rhizoctonia solani and for enhanced yield / S.Savithiry, S.S.Gnanamanickam//Plant and Soil.-1987.-Vol. 102, № l.-P. 11-15.

115. Scher F.M. Colonization of soubean roots by Pseudomonas and Serratia species: relationship to bacterial motility, chemotaxis and generation time / F.M.Scher, J.W.Kloepper, C.Singleton //Phytopathology.-1988.-Vol. 78, № 8.-P. 1055-1059.

116. Sobiczewski Piotr. Mozliwosci i ograniczenia biologicznej ochronny jablek bakteriami Pantoea agglomerans i Pseudomonas sp. przed szara plesnia i mokra zgnilizna/ Piotr Sobiczewski, Hanna Bryk II Post. ochr. rosl.-1999.-№l .-C.139-147.

117. Sugimoto E.E. Oligotrophic pseudomonads in the rhizosphere: Suppressiveness to Pythium damping-off of cucumber seedlings (Cucumis sativus L.) / E.E.Sugimoto, H.A.J.Hoitink, O.H.Tuovinen IIBiol, and Fert. Soils -1990.-Vol. 9, № 3.-P. 231-234.

118. Suppression of Septoria tritici and Puccinia recondite of wheat by an antibiotic-producing fluorescent pseudomonad / E.Levy, Z.Eyal, S. Carmely et al. //Plant Pathol.-1989.-Vol. 38, № 4.-P. 564-570.

119. Suslov T.V. Rhizobacteria of sugar beets: effects of seed application and root colonization on yield/ T.V.Suslov, M.N.Schroth // Phytopathology.-1982,-Vol.72, №2.-P.199-206.

120. Swinburne T.R. Stimulation of disease development by siderophores and inhibition by chelated iron / T.R. Swinburne // Iron, Siderophores and Plant Diseases: Proc. NATO Adv. Res. Workshop, Wye, July 1-5, 1985.- New York; London, 1986.-P. 217-226.

121. Tang Weizhen. Persistence in soil of the plant growth promoting rhizobacterium Pseudomonas putida GR12-2 and genetically manipulated derived strains/ Weizhen Tang, J.J.Pasternak, R. Glick Bernard // Can.J.Microbiol.-1995.-№ 6.-P.445-451.

122. Tosi L. Evaluation of some and bacteria for potential control of safflower rust/ L.Tosi, A.Zazzerini // J. Phytopathol.-1994.-№ 2.-C.131-140.

123. Weller D.M. Antibiotics: Evidence for their operation and sites where they might by produced / D.M.Weller, L.S. Thomashow //J. Cell. Biochem.-1989.-Suppl. 13A.-P. 154.

124. Weller D.M. Relationship between in vitro inhibition of Gaeumannomyces graminis var. tritici and suppression of take-all of wheat by fluorescent pseudomonads / D.M.Weller, W.J.Howie, R.J.Cook //Phytopathology.-1988.-Vol. 78, № 8.-P. 1094-1100.

125. Wessendorf J. Effect of culture and soil conditions on survival of Pseudomonas fluorescens R1 in soil / J. Wessendorf, F.Lingens //Appl. Microbiol, and Biotechnol.-1989.-Vol. 31, № l.-P. 97-102.

126. Wilson C.L. Postharvest biological control of Penicillium rots of citrus with antagonistic yeasts and bacteria/ C.L.Wilson, E. Chalutz //Sc. hortic.-1989.-Vol. 40, № 2.-P. 105-112.

127. Zaspel J. Isolierung und Selektion fluoreszierender Pseudomonas-Arten als Antagonisten gegen Gaeumannomyces graminis (Sacc.) Arx et Olivier / J.Zaspel //Arch. Phytopathol. Pflzschutz.-1989.-Bd. 25, H. 2.-S. 123-130.