Определение частоты мутантных клеток по локусам гликофорина А и Т-клеточного рецептора с целью формирования групп риска в отношении развития рака щитовидной железы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.01, кандидат биологических наук Верещагина, Анна Олеговна

• Верещагина, Анна Олеговна
• кандидат биологических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Верещагина, Анна Олеговна

ВВЕДЕНИЕ

ОГЛАВЛЕНИЕ

ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Изменения генетического материала соматических 12 клеток при воздействии ионизирующего излучения.

1.1.1. Индукция соматического мутагенеза (механизмы 12 формирования структурных и генных мутаций).

1.1.2. Индукция нестабильности генома.

1.2 Ключевая роль мутаций в канцерогенезе.

1.3 Радиационно-индуцированный канцерогенез.

1.4 Методы оценки мутагенеза в соматических клетках по отдельным генным локусам и возможность их применения в популяционных исследованиях.

1.5. Высокий уровень соматического мутагенеза, как 30 показатель повышенного риска развития онкопатологии.

ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Характеристика обследованных групп.

2.1.1. Характеристика группы лиц, обследованных с помощью GPA-теста.

2.1.2. Характеристика группы лиц, обследованных с помощью TCR-теста.

2.2. Подготовка проточного цитометра к работе.

2.3. Определение частоты GPA-мутантных клеток.

2.3.1. Фенотипирование крови доноров.

2.3.2. Фиксация и окрашивание клеток.

2.3.3. Биотинилирование антител к М-форме гликофорина А.

2.4. Определение частоты TCR -мутантных клеток.

2.5. Статистический анализ полученных результатов.

ГЛАВА 3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Частота мутантных клеток в группах контрольных необлученных лиц.

3.1.1. Частота мутантных по TCR-локусу клеток у контрольных доноров.

3.1.2. Частота GPA-мутантных клеток у контрольных лиц.

3.2. Частота клеток с генными мутациями у жителей радиационно-загрязненных территорий Орловской области.

3.2.1. Частота GPA-мутантных клеток.

3.2.2. Частота TCR-мутантных клеток.

3.3. Частота клеток с генными мутациями у жителей радиационно-загрязненных территорий Орловской области в зависимости от возраста на момент начала радиационного воздействия.

3.3.1. Частота GPA-мутантных эритроцитов.

3.3.2. Частота TCR -мутантных клеток.

3.4. Частота мутантных клеток у лиц со злокачественными новообразованиями ЩЖ.

3.4.1. Частота TCR -мутантных клеток.

3.4.2. Частота GPA-мутантных клеток.

ГЛАВА 4 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

4.1. Частота мутантных клеток у контрольных доноров.

4.2. Влияние хронического облучения в малых дозах на уровень мутантных клеток по TCR- и GPA-локусам.

4.2.1. Влияние хронического облучения в малых дозах на уровень мутантных клеток по локусу гликофорина А.

4.2.2. Влияние малых доз хронического облучения на уровень мутантных клеток по TCR-локусу.

4.3. Повышенная частота мутантных клеток как критерий для формирования группы риска развития онкологических заболеваний.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Определение частоты мутантных клеток по локусам гликофорина А и Т-клеточного рецептора с целью формирования групп риска в отношении развития рака щитовидной железы»

На протяжении последних десятилетий радиобиологи активно стараются оценить риск для здоровья человека от воздействия ионизирующего излучения (ИИ) (особенно интересен диапазон малых доз). В отличие от воздействия ИИ в больших дозах, которое может вызывать существенные нарушения здоровья, в том числе лучевую болезнь и гибель организма, ИИ в малых дозах не всегда вызывает видимые морфофункциональные изменения у живых организмов. Тем не менее, многочисленные литературные данные показывают, что ИИ в малых дозах индуцирует комплекс цитогенетических, биохимических и биофизических изменений в клетках организма животных и человека (Бурлакова и др., 1996, 1999; Пелевина и др., 2003; Mothersill and Seymour, 2003). Хотя механизмы действия малых доз ИИ все еще остаются недостаточно изученными, можно предположить, что с обнаружением феномена радиационно-индуцированной нестабильности генома у потомков облученных клеток, большую значимость приобретают исследования изменений генетического материала, особенно интересно изучение проявлений этого явления на генном уровне при облучении человека в диапазоне малых доз. В связи с этим представляет интерес исследование генных мутаций в соматических клетках людей, подвергающихся низкоинтенсивному радиационному воздействию в малых дозах вследствие проживания на загрязненной радионуклидами территории.

Одно из самых неблагоприятных последствий воздействия радиации -индукция злокачественных новообразований. Радиационное воздействие играет роль пускового механизма в канцерогенезе, а дальнейшее развитие событий зависит от состояния репарационной, иммунной, эндокринной и других систем организма, ответственных за реакцию организма на повреждающее воздействие. При обследовании людей, облученных в малых дозах вследствие проживания на загрязненных территориях, показано, что только у части лиц развиваются вредные последствия. С 1992 г. имеет местс драматический рост числа заболевших РЩЖ, особенно среди тех лиц, кто находился в детском возрасте на момент аварии, поскольку радиочувствительность ЩЖ особенно высока у детей младшего возраста. В настоящее время в Брянской и Орловской областях показатель заболеваемости РЩЖ для лиц, облученных в детском возрасте, в 3-5 раз превышает аналогичный по стране в целом. В связи с этим проблема выявления групп повышенного канцерогенного риска является одной из самых актуальных.

Поскольку известно, что мутации играют ключевую роль в канцерогенезе, то подход для выявления групп повышенного канцерогенного риска, основанный на оценке уровня соматического мутагенеза в организме, можно рассматривать как один из наиболее перспективных. Правомерность такого подхода следует из представления, что возникновение мутаций, как правило, является стохастическим процессом, поэтому можно предположить, что количество клеток с мутациями в любом гене (в том числе и не имеющем прямого отношения к канцерогенезу) отражает общий уровень соматического мутагенеза в организме. В таком случае, лица с высокой частотой мутаций в генах, даже непосредственно не связанных со злокачественной трансформацией, будут составлять группу риска в отношении развития опухолей. Известные к настоящему времени факты (Hagmar et al., 1994; Akiyama et al., 1995, b; Grant et al., 1999; Замулаева и др., 2001; Орлова, 2002), подтверждают эту гипотезу.

Таким образом, не вызывает сомнений актуальность исследования соматического мутагенеза в отдельных генных локусах после радиационного воздействия. Среди существующих методов определения генных мутаций наиболее перспективными следует считать проточноцитометрические методы выявления клеток, мутантных по локусу Т-клеточного рецептора (TCR -тест) и по локусу гликофорина A (GPA -тест). До недавнего времени эти тесты использовались наряду с традиционными методами определения структурных мутаций для ретроспективной дозиметрии (Langlois R.G. et al,

1987; Akiyama M et al, 1991; Саенко и др., 1998, 2000). В отношении использования этих методов для выявления лиц с высоким уровнем соматического мутагенеза в литературе имеется всего несколько публикаций (Akiyama et al., 1995; Замулаева и др., 2001), однако они свидетельствуют о перспективности применения этих методов для формирования групп повышенного риска развития онкологических заболеваний ряда локализаций. В отношении патологии щитовидной железы (ЩЖ) подобных исследований не проводилось. Поэтому исследование потенциальной возможности использования оценки уровня соматических генных мутаций у больных РЩЖ, проживающих в загрязненных радионуклидами районах, представляет особый интерес в связи с повышенной частотой заболеваний ЩЖ и с тем, что РЩЖ у части таких больных обусловлен радиационным воздействием. В настоящее время доказано, что облучение ЩЖ ионизирующим излучением приводит к увеличению частоты как злокачественных, так и доброкачественных заболеваний ЩЖ. Поскольку доброкачественные узловые новообразования в ЩЖ часто ведут к злокачественной трансформации, то исследование уровня генных мутаций в соматических клетках у лиц с выявленной узловой патологией ЩЖ и проживающих н?. загрязненных радионуклидами территориях, позволит судить о возможности использования методов определения генных мутаций для формирования групп повышенного риска развития РЩЖ.

Таким образом, целью данной работы являлось выяснение нескольких вопросов. Первый из них - действительно ли у лиц, проживающих на загрязненных радионуклидами территориях, и больных РЩЖ наблюдаются повышенные частоты клеток с генными мутациями. Второй - является ли применение GPA- и TCR-тестов перспективным для формирования групп риска в отношении возникновения РЩЖ. Интерес представляла также оценка информативности указанных тестов для биодозиметрии при разных дозах облучения щитовидной железы.

Для достижения данной цели предполагалось решить следующие задачи:

1) провести сравнительное исследование частоты мутантных клеток по TCR-и GPA-локусам у жителей загрязненных в результате аварии на ЧАЭС районов и необлученных контрольных лиц;

2) установить, существует ли зависимость между дозой, поглощенной ЩЖ, и частотой мутантных клеток по GPA- и TCR-локусам у жителей загрязненных в результате аварии на ЧАЭС районов (на примере жителей Орловской области);

3) провести сравнительное исследование частоты мутантных клеток по 2 указанным локусам у жителей Орловской области с выявленной доброкачественной узловой патологией ЩЖ и без таковой;

4) провести сравнительное исследование частоты мутантных клеток по 2 указанным локусам у больных РЩЖ до лечения и у здоровых лиц;

5) оценить возможность использования данных тестов для формирования групп риска в отношении возникновения РЩЖ;

Научная новизна работы

В результате проведенных исследований показано, что у жителей загрязненных территорий, подвергающихся хроническому облучению в малых дозах, средняя частота клеток с генными мутациями по TCR- и по GPA-локусам статистически значимо превышает контрольный уровень. Однако для всех обследованных лиц не установлено прямой зависимости выхода этих мутантных клеток от степени загрязнения радионуклидами различных районов. Показано, что у постоянных жителей загрязненных территорий Орловской области с доброкачественной узловой патологией щитовидной железы средняя частота клеток с генными мутациями по TCR-локусу статистически значимо превышает не только контрольный уровень, но и этот показатель у жителей Орловской области без такой патологии. В результате исследования впервые были получены данные о частоте мутантных клеток по TCR- и по GPA-локусам у больных раком щитовидной железы до начала специфического лечения.

Практическая значимость работы

Результаты обследования жителей радиоактивно загрязненных территорий с доброкачественной узловой патологией ЩЖ, а также пациентов со злокачественными новообразованиями ЩЖ свидетельствуют о возможности выявления лиц, в том числе среди подвергшихся действию ионизирующих излучений в малых дозах, с повышенным риском развития РЩЖ, основываясь на показателях соматического генного мутагенеза в разных локусах (прежде всего, по TCR-локусу).

Основные положения, выносимые на защиту

1. У жителей Орловской области, подвергающихся хроническому низкоинтенсивному радиационному воздействию в малых дозах

1 "ХП О плотность загрязненности по Cs 6,6-213 кБк/м ) наблюдается высокая частота клеток с генными мутациями по разным локусам.

2. В отдаленные сроки после облучения в малых дозах выход клеток с генными мутациями прямо не зависит от величины дозовой нагрузки на щитовидную железу в диапазоне доз 0,41-641 мГр.

3. Лица с доброкачественной узловой патологией щитовидной железы и больные раком щитовидной железы имеют более высокие частоты клеток с мутациями по локусу Т-клеточного рецептора. Вероятно, повышенный уровень частоты клеток с генными мутациями может являться критерием для формирования группы лиц с высоким риском развития РЩЖ.

Апробация работы По теме диссертации опубликовано 8 печатных работ. Основные результаты диссертационной работы доложены на следующих конференциях:

• Международный конгресс «Энергетика 3000 (энергетика и человек)», 2001г., Обнинск; Международная школа - конференция молодых ученых "Биология - наука XXI века", 2003 г., Пущино; III съезд по радиационным исследованиям (радиобиология и радиоэкология), 2003 г., Киев; V съезд по радиационным исследованиям (радиобиология, радиоэкология, радиационная безопасность), 2006 г., Москва; International summer school "Molecular mechanisms in homeostasis and disease", 2003r., Greece; Cancel immunology and immunotherapy summer school, 2003 г., Greece; 35th Annual Meeting of the European Environmental Mutagen Society, 2005 г., Kos, Greece.

Диссертация апробирована на научной конференции экспериментального радиологического сектора ГУ-МРНЦ РАМН «20» апреля 2006 г.

Структура и объем диссертации.

Заключение диссертации по теме «Радиобиология», Верещагина, Анна Олеговна

ВЫВОДЫ

1. У жителей Орловской области, облученных в малых дозах вследствие проживания на загрязненных радионуклидами территориях, выявлено статистически значимое увеличение средней частоты клеток, мутантных по локусам Т-клеточного рецептора (TCR) и гликофорина A (GPA). Доля лиц с повышенной частотой мутантных клеток по обоим исследованным локусам также повышена по сравнению с соответствующим контролем.

2. Не установлено прямой зависимости от дозы частоты TCR- и GPA-мутантных клеток у жителей 4-х районов в различной степени загрязненных радионуклидами, хотя у жителей наиболее загрязненного Волховского района наблюдались самые высокие частоты TCR- и GPA-мутантных клеток.

3. У лиц с доброкачественной узловой патологией щитовидной железы средняя частота TCR-мутантных клеток и доля лиц с повышенной частотой мутантных по TCR-локусу клеток была статистически значимо выше, чем у обследованных без такой патологии. По средней частоте GPA- мутантных эритроцитов не выявлено статистически значимых различий между этими группами, однако имеется тенденция к увеличению доли лиц с повышенной частотой NO-вариантных эритроцитов в группе с узловой патологией щитовидной железы.

4. У больных раком щитовидной железы до начала специфического лечения установлено статистически достоверное повышение частоты TCR-мутантных клеток по сравнению со здоровыми лицами.

5. Высокий уровень частоты TCR-мутантных клеток в группе жителей Орловской области выявлен только у части лиц, тогда как в группе больных раком щитовидной железы этот показатель увеличен во всей группе и не определяется присутствием отдельных лиц с высокими частотами.

6. Проведенные исследования позволяют считать, что частоту мутантных клеток по локусам Т-клеточного рецептора и гликофорина А можно рассматривать в качестве потенциального критерия для формирования групп риска в отношении развития рака щитовидной железы.

А ■

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Верещагина, Анна Олеговна, 2006 год

1. Аклеев А.В., Алещенко А.В., Антощина М.М.Цитогенетические последствия облучения жителей Южного Урала // Радиационная биология. Радиоэкология.- 2002.- Т. 42.- № 6. С. 696-699.

2. Аклеев А.В., Веремеева Г.А., Киоизуми С. Влияние хронического радиационного воздействия на уровень соматических мутаций б клетках периферической крови людей в отдаленные сроки // Радиационная биология. Радиоэкология.- 1998.- Т. 38,- В. 4. С. 573585.

3. Ахматуллина Н.Б. Отдаленные последствия действия радиации и индуцированная нестабильность генома// Радиационная биология. Радиоэкология.- 2005.- Т. 45.- № 6. С. 680-687.

4. Бондарчук И.А. Анализ роли репарации ДНК, регуляции клеточного цикла и апаптоза в радиационно-индуцированном адаптивном ответе клеток млекопитающих// Радиационная биология. Радиоэкология.-2003.- Т. 43.-№ 1.- С. 19-28.

5. Бурлакова Е.Б., Голощапов А.Н., Горбунова Н.В. и др. Особенности биологического действия малых доз облучения// Радиационная биология. Радиоэкология.- 1996.- Т. 36.- В. 4.- С. 610-631.

6. Бурлакова Е.Б., Голощапов А.Н., Жижина Г.Н., Конрадов А.А. Новые аспекты закономерностей действия низко интенсивного облучения б малых дозах // Радиационная биология. Радиоэкология.- 1999.- Т. 39.-№1.-С. 26-35.

7. Бурлакова Е.Б., Михайлов В.Ф., Мазурик В.К. Система окислительно-восстановительного гомеостаза при радиационно-индуцированной нестабильности генома // Радиационная биология. Радиоэкология.-2001.- Т. 41.-№5.- С. 489-499.

8. Бычковская И.Б., Степанов Р.П., Федорцева Р.Ф. Особые долговременные изменения клеток при воздействии радиации в малых дозах //Радиационная биология. Радиоэкология. 2002. - Т. 42. - № 1С. 20-35.

9. Ю.Веремеева Г.А. Влияние хронического радиационного воздействия на уровень соматических мутаций в клетках периферической крови людей в отдаленные сроки: Автореф. дис. канд. биол. наук. М., 1996. -26с.

10. П.Власов О.В., Щукина Н.В., Годько A.M. Дозы облучения щитовидной железы от инкорпорированного I для населения Орловской области // Радиация и риск. 2003. - Специальный выпуск. - С.6-19.

11. Газиев А.И. Повреждение ДНК в клетках под действием ионизирующей радиации // Радиационная биология. Радиоэкология.-1999. Т. 39. - № 6. - С. 630-638.

12. З.Галактионов В.Г. Иммунология. -М.: Издательство МГУ, 1998. 420с.

13. М.Гланц С. Медико-биологическая статистика. М.: Изд. Дом «Практика», 1999. -459 с.

14. Иванов В.К., Цыб А.Ф. Медицинские радиологические последствия Чернобыля для населения России: оценка радиационных рисков. -М.: Медицина, 2002.-389 с.

15. Израэль Ю.А., Стукин Е.Д., Назаров И.М., Квасникова Е.В. Радтоактивное загрязнение природных сред после чернобыльской аварии. Радиационный мониторинг. Чернобыль: 15 лет спустя / Под ред. Н.В.Герасимовой. -М.: Контакт-культура, 2001. - С.82.

16. Имянитов Е.Н., Князев П.Г. Роль антионкогенов в опухолевом процессе // Экспериментальная онкология 1992. -Т. 14. -№ 5. -С. 318.

17. Копнин Б.П. Мишени действия онкогенов и опухолевых супрессоров: ключ к пониманию механизмов канцерогенеза // Биохимия. 2000. - Т. 65.-№1.-С. 5-33.

18. Кузьмина Н.С., Сусков И.И. Экспрессирование геномной нестабильности в лимфоцитах детей, проживающих в условиях длительного действия радиационного фактора // Радиационная биология. Радиоэкология.- 2002. Т. 42. - № 6. - С. 735-739.

19. Мазурик В.К., Михайлов В.Ф. Радиационно-индуцируемая нестабильность генома: феномен, молекулярные механизмы, патогенетическое значение // Радиационная биология. Радиоэкология,-2001. Т. 41. -№ 3. - С. 272-289.

20. Мазурик В.К., Мороз Б.Б. Проблемы радиобиологии и белок р53 // Радиационная биология. Радиоэкология.- 2001. Т. 41. -№ 5. - С. 548572.

21. Пелевина И.И., Николаев В.А., Готлиб В.Я. и др., Адаптивная реакция лимфоцитов крови людей, подвергшихся хроническому воздействию радиации в малых дозах // Радиационная биология. Радиоэкология.-1994. Т. 34. - Вып. 6. - С. 805-817.

22. ПелевинаИ.И., Алещенко А.В, Антощина М.М. Реакция популяции клеток на облучение в малых дозах // Радиационная биология. Радиоэкология. 2003.-Т. 43.-№5.-С. 161-166.

23. Пилинская М.А., Шеметун A.M., Дыбский С.С. Цитогенетический эффект в лимфоцитах периферической крови как индикатор действия на человека факторов Чернобыльской аварии // Радиобиология.- 1992. -Т. 32.-Вып. 5.-С. 632-639.

24. Рождественский JI.M., Окладников Н.Д., Смирнова Т.Н. и др. Оценка уровня мутаций в локусе гликофорина А у лиц, подвергавшихся хроническому воздействию ионизирующей радиации // Радиационная биология. Радиоэкология. 1998. - Т. 38. -№ 3. - С. 443-450.

25. Ройт А., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология.- М.: Мир, 2000. 560 с.

26. Саенко А.С., Замулаева И.А., Смирнова С.Г. и др. Определение частоты мутаций по локусам гликофорина А и Т-клеточного рецептора: информативность для биологической дозиметрии острого ипролонгированного облучения// Радиационная биология.

27. Радиоэкология.- 1998.-Т. 38.-№2.-С. 181-190.

28. Саенко А.С., Замулаева И.А., Смирнова С.Г. и др. Определение частоты мутаций по локусам гликофорина А и Т-клеточного рецептора: обследование ликвидаторов аварии на ЧАЭС// Радиационная биология. Радиоэкология. 1998. - Т. 38. - № 2. - С. 171-180.

29. Севанькаев А.В. Некоторые итоги цитогенетических исследований в связи с оценкой последствий Чернобыльской аварии // Радиационная биология. Радиоэкология.- 2000. Т. 40. - № 5. - С. 589-595.

30. Сусков И.И., Кузьмина Н.С. Проблема индуцированной геномной нестабильности в детском организме в условиях длительного действия малых доз радиации // Радиационная биология. Радиоэкология,- 2001. -Т. 41. -№ 5. С. 606-614.

31. Татосян А.Г. Онкогены // Канцерогенез/ Под ред. проф. Д.Г. Заридзе. -М.: Научный мир, 2000 С. 57-74.

32. Урбах В.Ю. Биометрические методы. М.: Наука, 1964. - 247 с.

33. Цыб А.Ф., Поверенный A.M. Повреждения щитовидной железы в период чернобыльской аварии: вероятные последствия// Последствия Чернобыльской катастрофы: Здоровье человека/ под ред. Бурлаковой Е.Б. М.: Центр экологической политики России, 1996. - С.219-228.

34. Цыб А.Ф. Радиация и патология. М.: Тровант, 2003. - 309с.

35. Чумаков П.М. Функция гена р53: выбор между жизнью и смертью//

36. Биохимия. 2000. - Т.65. - №1. - С. 34-47.

37. Akiyama М., Nakamura N., Yakoda М. et al. Somatic cell mutation in atomic bomb survivors //Radiat.Res. 1991. - V.32. - Suppl. 1. - P.278-282.

38. Akiyama M., Kyoizumi S., Hirai Y. et al. Mutation frequency in human blood cells increases with age //Mutat. Res. 1995, a. - V.338. - P. 141-149.

39. Akiyama M., Umeki S., Kusunoki Y. et al. Somatic-cell mutation as a possible predictor of cancer risk // Health Phys.-1995,b. -V.68. P. 643-649.

40. Akiyama M., Kyoizumi S., Kusunoki Y. et al. Monitoring exposure to atomic bomb radiation by somatic mutation // Environ. Health Perspect. -1996. V.104. - №3. - P.493-496.

41. Albertini R.J., Castle K.L., Borchering W.R. T-cell cloning to detect the mutant 6-thioguanine resistant lymphocytes present in human peripheral blood//Proc. Natl. Acad. Sci. 1982.- V.79.-P.6617-6621.

42. Albertini R.J. HPRT mutations in humans: biomarkers for mechanistic studies//Mutat. Res. 2001. - V.489. - P.l-16.

43. Baverstock K. Radiation-induced genomic instability: a paradigm-breaking phenomenon and its relevance to environmentally induced cancer// Mutat. Res. 2000. - V.454. - P.89-109.

44. Bigbee W.L., Langlois R.G., Swift M., Jensen R.H. Evidence for an elevated frequency of in vivo somatic cell mutations in ataxia teleangiectasia // Am. J. Hum. Genet. 1989. - V.44. - № 3. - P.402-408.

45. Cole J. and Scopek T.R. Somatic mutant frequency, mutation rates and mutational spectra in the human population in vivo // Mutat. Res. 1994. -V.304. -P.33-105.

46. Grant B.W., Trombley L.M., Hunter T.C. et al. HPRT mutations in vivo in human CD 34+ hematopoietic stem cells // Mutat. Res. 1999. - V.431. -P.183-198.

47. Grant S.G., Bigbee W.L. In vivo somatic mutation and segregation at the human glycophorin A (GPA) locus: Phenotypic variation encompassing both gene-specific and chromosomal mechanisms // Mutat. Res. 1993. - V.288. -P.163-172.

48. Grosovsky A.J., Parks K.K., Giver C., Nelson S. Clonal analysis of delayed kariotypic abnormalities and gene mutations in radiation-induced genetic instability// Molecular and Cellular Biology. 1996. - V.16. - N.ll. -P.6252-6262.

49. Hagmar L., Brogger A., Hansteen I.L. et al. Cancer risk in humans predicted by increased levels of chromosomal aberrations in lymphocytes: Nordic study group on the health risk of chromosome damage // Cancer Res. -1994. V.54. - P.2919-2922.

50. Harms-Ringdahl M. Some aspects on radiation induced transmissible genomic instability // Mutat. Res. 1998. - V.404. - P.27-33.

51. Ivanov V.K., Gorski A.I., Maksioutov M.A. et al. Thyroid cancer incidence among adolescents and adults in the Bryansk region of Russia following the Chernobyl accident // Haelth Physics. 2003. - V.84. -N1. - P.46-60.

52. Iwamoto K.S., Hirai Y., Umeki S. et al. A positive correlation between T cell receptor mutant frequencies and dicentric chromosome frequencies in lymphocytes from radiotherapy patients // J. Radiat. Res. 1994. - V.35. -P.92-103.

53. Jacob P., Kenigsberg J., Zvonova I. et al Childhood exposure due to the Chernobyl accident and thyroid cancer risk in contaminated areas of Belarus and Russia // Br. J. Cancer. 1999. - V.80. - P. 1461-1469.

54. Jamali M., Trott K.P. Persistent increase in the rates of apoptosis and dicentric chromosomes in surviving V79 cells after X-irradiation // Int. J. Radiat. Biol. 1996. - V.70.- N.6. - P.705-709.

55. Jensen R.H., Langlois R.G., Bigbee W.L. et al. Elevated frequency of glycophorin A mutations in erythrocytes from Chernobyl accident victims // Radiat. Res. 1995. - V. 141. - P.129-135.

56. Kadhim M.A., Macdonald D.A., Goodhead D.T. et al. Transmission of chromosomal instability after plutonium a-particle irradiation// Nature. -1992. V.355. - P.738-740.

57. Kadhim M.A., Moore S.R., Goodwin E.H. Interrelationships amongst radiation-induced genomic instability, bystander effects, and the adaptive response // Mutat. Res. 2004. - V.568. - P.21-32.

58. Kushiro J., Hirai Y., Kusunoki Y. et al. Development of a flow-cytometric HLA-A locus mutation assay for human peripheral blood lymphocytes // Mutat. Res. 1992. - V.272. - P. 17-29.

59. Kusunoki Y., Kyoizumi S., Kubo Y. et al. Possible role of natural killer cells in negative selectionn of mutant lymphocytes that fail to express the human leukocyte antigen-A2 allele // Mutat. Res. 2001. - V.476. - P. 123132.

60. Kyoizumi S., Nakamura N., Takebe H. et al. Frequency of variant erythrocytes at the glycophorin A locus in two Bloom's syndrome patients // Mutat. Res. 1989. - V.214. - P.215-222.

61. Kyoizumi S., Akiyama M., Hirai Y.et al. Spontaneous loss alteration of antigen receptor expression in mature CD4+ T-cells // J. Exp. Med. 1990. - V.171. -P.1981-1999.

62. Kyoizumi S., Akiyama M., Umeki S. et al. Frequency of mutant T lymphocyted defective in the expression of the T-cell antigen receptor gene among radiation-exposed people // Mutat. Res. 1992. - V.265. - P. 173180.

63. Kyoizumi S., Akiyama M., Cologne J.B. et al.Somatic cell mutations at the glycophorin A locus in erythrocytes of atomic bomb survivors: implications for radiation carcinogenesis// Radiat. Res. 1996. - V. 146. - P. 43-52.

64. Kyoizumi S., Kusunoki Y., Seyma T. et al. In vivo somatic mutations in Werner's syndrome //Hum. Genet. 1998. - V.103. -N. 4. - P. 405-410.

65. Langlois R.G., Bigbee W.L., Jensen R.H. Flow cytometric characterization of normal and variant cells with monoclonal antibodies specific for glycophorin A // J.Immunol. 1985. -V.134. - P.4009-4017.

66. Langlois R.G., Bigbee W.L., Jensen R.H. et al. Evidence for increased in vivo mutation and somatic recombination in Blooms syndrome // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1989. -V.86. -P.670-674.

67. Langlois R.G., Nisbet B.A., Bigbee W.L. et al. An improved flow cytometric assay for somatic mutation at the Glycophorin A locus in humans // Cytometry. 1990. - V.l 1. -P.513-521.

68. Langlois R.G., Akiyama M., Kusunoki Y. et al. Analysis of somatic cell mutations at the Glycophorin A locus in atomic bomb survivors: a comparative study of assay methods // Radiat. Res. -1993. V.l 36 - P.l 11117.

69. Lee J.M., Abrahamson J.L., Kandel R. et al. Susceptibility to radiation-carcinogenesis and accumulation of chromosomal breakage in p53 deficient mice // Oncogene. 1994. - V.9. - P.3731-3736.

70. Lichtarev I.A., Sobolev B.G., Kairo I.A. et al. Thyroid cancer in the Ukraine// Nature. 1995. - V. 365. - P.365.

71. Lin Y.W., Kubota M., Hirota H. et al. Somatic cell mutation frequency at the HPRT, T-cell antigen receptor and glycophorin A loci in Cockayne syndrome // Mutat. Res. 1995. - V.337. - P.49-55.

72. Little J.B. Radiation-induced genomic instability // Int. J. Radiat. Biol. -1998. V.l A. - N.6. - P.663-671.

73. Little J.B. Radiation carcinogenesis // Carcinogenesis. 2000. - V.21. -N.3. -P.397- 404.

74. Menichini P., Abbondandolo A. Somatic cell mutation in humans // New Horizons in Biological Dosimetry. New York: Wiley-Liss, Inc., 1991. -P.267-279.

75. Morley A.A., Grist S.A., Turner D.R. et al. Molecular nature of in vivo mutations in human cells at the autosomal HLA-A locus // Cancer Res. -1990. V.50. - P.4584-4587.

76. Mothersill C. and Seymour C.B. Mechanisms and implications of genomic instability and other delayed effects of ionizing radiation exposure // Mutagenesis. 1998. - V.13. - N.5. - P. 421-426.

77. Mothersill C. and Seymour C.B. Radiation-induced bystander effectcs, carcinogenesis and models // Oncogene. 2003. - V.22. - N. 451. - P.7028-7033.

78. Moysich K.B., Menezes R.J., Michalec A.M. Chernobyl-related ionizing radiation exposure and cancer risk: an epidemiological review // Lancet Oncol. 2002. - V.3. - N.5. - P. 269-279.

79. Nagataki Sh. Delayed effects of atomic bomb radiation on the thyroid // Radiation and Thyroid/ Ed. Nagataki Sh. Excerpta Medica: Amsterdam-Tokyo, 1989.-P. 1-10.

80. Rached E., Schindler R., Beer K.T. No predictive value of the micronucleus assay for patients with severe acute reaction of normal tissue after radiotherapy // European J. of Cancer. 1998. - V.34. -N.3. - P.378-383.

81. Renan M.J. How many mutations are required for tumorogenesis? Implications from human cancer data // Mol. Carcinogenesis. 1993. - V.7. -P.139-146.

82. Robbins J., Adam W.H. Radiation effects in the Marshall Islands // Radiation and Thyroid/ Ed. Nagataki Sh. Excerpta Medica: Amsterdam-Tokyo, 1989.-P.l 1-16.

83. Ron E., Modan В.,Preston D. et al. Thyroid neoplasia following low-dose radiation in childhood // Radiat.Res. 1989. - V. 120. - P.516-527.

84. Schneider A.B. Radiation-related thyroid cancer// A fundamentall and clinical text, 5th ed., Ingbar S.H. Braverman L.E., eds. Philadelphia: J.B. Lippincott, 1986. - P.801-806.

85. Tates A.D., Bernini L.F., Natajaran A.T. et al. Detection of somatic mutations in man: HPRT mutations in lymphocytes and hemoglobin mutations in erythrocytes // Mutat. Res. 1989. - V.213. - P.73-82.

86. Trott K.R., Jamali M., Manti L., Teibe A. Manifestation and mechanisms of radiation-induced genome instability in V79 Chinese hamster cells // Int. J. Radiat. Biol. 1998. - V.74. - N.6. - P.787-791.

87. Tucker J.D., Tawn E.J., Holdsworth D. Biological dosimetry of radiation workers at the Sellafild nuclear facility// Radiat. Res. 1997. -V. 148.-P.216-226.

88. Ullrich R.L., Ponnaiya B. Radiation-induced instability and its relation to radiation carcinogenesis// Int. J. Radiat. Biol. 1998. - V.74. - N.6. -P.747-754.

89. Vershenya S., Biko J., Drozd V. et al. Dose response for T-cell receptor (TCR) mutants in patients repeatedly treated with 1311 for thyroid cancer // Mutat. Res. 2004. - V.548. - P.27-33.

90. Wishkerman V.Y., Quastel M.R., Douvdevani A. et al Somatic mutations at the glycophorin A (GPA) locus measured in red cells of Chernobyl liquidators who immigrated to Israel // Environ. Health Perspectives. 1997.-V. 105. - Suppl.6. -P.1451-1454.

91. Wong F.L., Boice JD Jr, Abramson D.H. et al. Cancer incidence after retinoblastoma: radiation dose and sarcoma risk// JAMA. 1997. - V.278. -P. 1262 -1267.

92. Wright E.G. Radiation-induced genomic instability in haemopoietk cells // Health effects of low dose radiation. London: ENES, 1997. - P.27-32.