Определение ивермектинов в продуктах животного происхождения методом иммуноферментного анализа тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.02.05, кандидат биологических наук Тарасов, Илья Евгеньевич

  • Тарасов, Илья Евгеньевич
  • кандидат биологических науккандидат биологических наук
  • 2010, Москва
  • Специальность ВАК РФ06.02.05
  • Количество страниц 140
Тарасов, Илья Евгеньевич. Определение ивермектинов в продуктах животного происхождения методом иммуноферментного анализа: дис. кандидат биологических наук: 06.02.05 - Ветеринарная санитария, экология, зоогигиена и ветеринарно-санитарная экспертиза. Москва. 2010. 140 с.

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Тарасов, Илья Евгеньевич

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СОЕДИНЕНИЙ АВЕРМЕКТИНОВОЙ ГРУППЫ, ХИМИЧЕСКОЕ СТРОЕНИЕ АВЕРМЕКТИНОВ

1.1. Характеристика ивермектина

1.2. Механизм биологического действия ивермектина

1.3. Терапевтическая эффективность ивермектина 16.

1.4. Распределение ивермектина в органах и тканях животных и выделение его с молоком

1.5. Методы анализа ивермектинов в продуктах животного происхождения

1.5.1. Физико-химические методы

1.5.2. Биологические методы

1.5.3. Химико-биологические методы

1.5.4. Методы подготовки проб для анализа ивермектина 41 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Получение конъюгата ивермектина с бычьим сывороточным альбумином

2.2. Получение моноклональных антител

2.2.1. Иммунизация

2.2.2. Миеломная клеточная линия

2.2.3. Культивирование клеток

2.2.4. Слияние клеток и выращивание гибридом

2.2.5. Криоконсервация гибридом

2.2.6. Получение асцитных жидкостейусо держащих МКА

2.2.7. Получение МКА из асцитных жидкостей

2.3. Иммунохимические свойства моноклональных антител

2.3.1. Субтипирование МКА '

2.3.2. Методы твердофазного иммуноферментного анализа

2.4. Получение конъюгата моноклональных антител с пероксидазой ^ ^ хрена

2.5. Метрологические параметры метода ИФА

2.5.1. Чувствительность метода

2.5.2. Специфичность метода

2.5.3. Воспроизводимость метода '

2.6. Постановка конкурентного ИФА

2.7. Приготовление калибровочных проб

2.8. Отбор проб биоматериала

2.9. Экспериментальная контаминация образцов

2.10. Экстрагирование ивермектина из проб молока, мышц, печени и ^ жира

2.11. Определение ивермектина в биоматериале методом ВЭЖХ с использованием флюоресцентного детектора

2.11.1. Реактивы и оборудование

2.11.2. Подготовка реагентов и растворов

2.11.3. Условия хроматографирования

2.11.4. Отбор и подготовка проб для анализа

2.11.5. Метрологические характеристики метода

2.12. Препараты, использованные для обработки животных

2.13. Изучение выделения ивермектина с молоком и его определение в органах и тканях сельскохозяйственных животных

2.14. Обработка полученных результатов 65 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Разработка иммуноферментного метода определения ивермектина в продуктах животного происхождения

3.1.1. Получение конъюгата ивермектина с бычьим сывороточным альбумином

3.1.2. Получение МКА к ивермектину

3.2. Использование МКА 4с6 в конкурентном ИФА

3.2.1. Чувствительность метода

3.2.2. Специфичность метода

3.2.3. Воспроизводимость метода

3.3. Оценка эффективности экстракции ивермектина из проб мяса, жира, печени и молока

3.4. Изучение динамики выведения препаратов на основе ивермектина из организма животных с молоком

3.5. Изучение распределения ивермектина в органах и тканях животных

4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

5. ВЫВОДЫ

6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Рекомендованный список диссертаций по специальности «Ветеринарная санитария, экология, зоогигиена и ветеринарно-санитарная экспертиза», 06.02.05 шифр ВАК

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Определение ивермектинов в продуктах животного происхождения методом иммуноферментного анализа»

>

Актуальность работы ! 1

В связи с глобальным распространением и интенсивным использованием в сельском хозяйстве химических средств, в том числе ветеринарных препаратов, возникает проблема1 их контроля в получаемой животноводческой продукции. Препараты, могут выделяться у обработанных животных в виде исходных соединений и их метаболитов с молоком, накапливаться в органах и 1 тканях животных и в случае вынужденного убоя или не соблюдения времени выдержки животного после обработки препаратами попадать с продуктами животного происхождения в организм человека. Это может привести к развитию дисбактериоза и аллергических реакций. Для предотвращения этого необходимо разрабатывать и совершенствовать методы контроля ветеринарных препаратов, применяемых в сельском хозяйстве [1,28].

Авермектины - одна из наиболее востребованных групп соединений, используемых как в агрономии, так и в ветеринарии во всем мире. Благодаря высокой акарицидной, инсектицидной и нематоцидной активности эти соединения широко применяются в мировой и российской сельскохозяйственной практике в качестве антипаразитарных средств. Данная группа соединений была открыта в середине семидесятых годов прошлого века. Семейство авермектинов включает ряд естественных и полусинтетических молекул макроциклических лактонбв, таких как авермектин, абамектин, ивермектин, аверсектин и др., отличающихся по некоторым структурным и физико-химическим свойствам [12,13,100].

В настоящее время в качестве основного, утвержденного метода для определения остаточных количеств ивермектина в биологическом материале используется метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с флюоресцентным детектором и его различные модификации [64].

Благодаря высокой точности измерения, селективности и простоте обработки полученных данных метод ВЭЖХ стал во многих странах «золотым

I I стандартом» определения ивермектина., Однако он имеет ряд недостатков, основными из которых являются: высокая стоимость оборудования, сложная и многостадийная подготовка проб для анализа, а также низкая скорость его I проведения. Не лишены недостатков и другие физико-химические и биологические методы определения ивермектина [32].

В качестве альтернативы ВЭЖХ за рубежом используется иммуноферментный метод определения ивермектина в продуктах животного происхождения на основе поликлональных антител. Преимуществами данного метода являются: высокая специфичность, скорость и простота постановки реакции, а также сравнительно невысокая стоимость процедуры анализа [93]. Однако по сравнению с поликлональными антителами моноклональные антитела имеют ряд преимуществ по специфичности и чувствительности вместе с невысокой стоимостью процедуры анализа [106]. Этот факт был взят за основу при разработке иммуноферментного метода.

Большинство работ, посвященных изучению динамики выделения ивермектинсодержащих препаратов с молоком и распределению их в органах и тканях животных, охватывают короткий период наблюдений - от 7 до 28 дней [36,41,42]. Но в литературе также .'есть данные о том, что остаточные количества ивермектина обнаруживаются у животных в течение двух месяцев после проведения обработки ивермектинсодержащими препаратами [42, 92, 117]. В нашей работе мы более детально рассмотрели период выделения ивермектина с молоком, а также его распределение в органах и тканях животных после применения наиболее распространенных ивермектинсодержащих препаратов. 1 1 I

Цель работы ]

Целью данной работы являлась разработка иммуноферментного метода выявления ивермектина и его определение в продуктах животного I происхождения.

Основные задачи исследований

Для достижения поставленной цели было необходимо решить следующие задачи:

1. Получить конъюгат ивермектина с бычьим сывороточным альбумином (БСА).

2. Получить моноклональные антитела к ивермектину и изучить их иммунохимические свойства. I

3. Разработать конкурентный иммуноферментный метод для определения остаточных количеств ивермектинов.

4. Оптимизировать методику подготовки продуктов животного происхождения для количественного . определения ивермектина методом иммуноферментного анализа.

5. С помощью разработанного 'метода изучить динамику выделения лекарственных средств с молоком и их распределение в органах и тканях крупного рогатого скота.

Научная новизна работы

Получены моноклональные антитела, специфически взаимодействующие с ивермектином.

На основе полученных моноклональных антител разработан конкурентный иммуноферментный метод определения остаточных количеств ивермектина в продуктах животного- происхождения (молоко, мясо, печень, жир).

Разработана методика подготовки проб для ИФА на основе экстрагирования и концентрации ивермектина с помощью органических растворителей.

Методом ИФА изучена динамика выделения ивермектина с молоком I после применения противопаразитарных препаратов (гиподектин-Н, дермацин, новомек).

С помощью разработанного метода изучено распределение ивермектина в органах и тканях животных после применения препаратов (новомек, гиподектин-Н).

I )

Практическая ценность работы

Разработаны методические рекомендации по определению остаточных количеств ивермектина в молоке, органах и тканях крупного рогатого скота I методом иммуноферментного анализа.

Материалы рассмотрены и одобрены ученым советом ГИГУ ВНИИВСГЭ и секцией «Ветеринарная санитария, гигиена и экология» Отделения ветеринарной медицины РАСХН (Протокол №3, 8 июня 2010г.). Утверждены I I

Отделением ветеринарной медицины Россельхозакадемии 17 сентября 2010г.

Установлены сроки выведения ■ ивермектина из организма животного с молоком и его распределение в органах и тканях после применения ивермектинсодержащих препаратов.

Основные положения, выносимые на защиту

Полученные экспериментальные данные позволяют вынести на защиту следующие основные положения: I

• результаты работы по получению МКА к ивермектину;

• результаты разработки ИФА и предварительной подготовки проб для проведения анализа;

• результаты изучения выделения ивермектина с молоком и его распределения в органах и тканях.

Апробация работы

Материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на заседаниях ученого совета ВНИИВСГЭ (2009, 2010 гг.).

Публикации

По материалам диссертации опубликованы три научные работы.

Объем и структура диссертации

Диссертационная работа изложена на 122 стр. машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, собственных результатов исследования, обсуждения, выводов, практических предложений, списка литературы и приложения. Материалы диссертации иллюстрированы 12 таблицами и 19 рисунками. Список литературы включает 123 отечественных и зарубежных источника.

Похожие диссертационные работы по специальности «Ветеринарная санитария, экология, зоогигиена и ветеринарно-санитарная экспертиза», 06.02.05 шифр ВАК

Заключение диссертации по теме «Ветеринарная санитария, экология, зоогигиена и ветеринарно-санитарная экспертиза», Тарасов, Илья Евгеньевич

5. ВЫВОДЫ

1. Получена гибридомная линия клеток 4С6, продуцирующая моноклональные антитела к ивермектину.

2. С использованием моноклональных антител разработан конкурентный иммуноферментный метод, позволяющий определять остаточные количества ивермектина в биологическом материале с чувствительностью до 1 нг/мл/г.

3. Разработана методика подготовки проб биоматериала, позволяющая быстро и эффективно экстрагировать ивермектин. Степень извлечения из проб тканей и органов составляет 75-82%, из проб молока - 80-89%.

4. Показана динамика выделения препаратов на основе ивермектина с молоком. Установлено, что препарат новомек, примененный в дозе 200мкг/кг, выделяется на протяжении 28 суток.

5. При внутрикожном введении новомек в дозе 8 мкг/кг выделяется с молоком на протяжении 14 суток.

6. Препараты дермацин и гиподектин-Н, примененные в дозах 0,6мкг/кг и Змкг/кг соответственно, не выделяются с молоком.

7. Показано распределение ивермектина в органах и тканях животных после применения ивермектинсодержащих препаратов. Новомек, введенный подкожно в дозе 200мкг/кг, обнаруживается в мышцах, печени и жире на протяжении 21 суток.

8. Выделения ивермектина после обработки животных препаратом гиподектин-Н не наблюдалось. Незначительное количество (2-Знг/г) ивермектина определялось в ткани печени на 3 сутки после обработки животных.

6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Разработанный конкурентный иммуноферментный метод с использованием моноклональных антител может быть применен для определения остаточных количеств ивермектина в региональных лабораториях.

Разработаны и утверждены методические рекомендации по определению остаточных количеств ивермектина в молоке, органах и тканях крупного рогатого скота (Утв. Отделением ветеринарной медицины Россельхозакадемии 17 сентября 2010г.).

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Тарасов, Илья Евгеньевич, 2010 год

1. Абрамов В. Е. Теоретическое обоснование создания новых препаративных форм альбендазола и клозантела для борьбы с эндо- и эктопаразитами с. ж.//Дисс. д. вет. наук.-2000.- 55 с.

2. Апалькин В.А. Эффективность пурона при паразитозах телят./ Ф.А.Волков, В.В.Тарасов, О.В. Шевченко // Профилактика паразитарных болезней животных ивермектином. 1991. - С.22-26

3. Апалькин В.А. Эффективность ивомека при паразитозах жвачных животных/ Н. М. Понамарев // Эпизоотология, диагностика, профилактика и меры борьбы с инфекционными болезнями животных.- 1992.-С. 111-114.

4. Апалькин В.А. Лечебная и экономическая эффективность ивомека в животноводстве Горного Алтая / Н.М. Пономарев // Профилактика гельминтозов животных,-1991 .-№.2.-С.26-31.

5. Апалькин В.А. Ивомек при гиподерматозе в Сибири / С. Д. У гай // Эпизоотология, диагностика, профилактика и меры борьбы с болезнями животных.- 1997.-С. 183-184.

6. Бёккер Ю. Спектрометрия.// Тезерсфера.-2009.- С.376-377.

7. Васильяров Г.Г. Концентрирующие патроны./ Г.С.Алексеев// ДИАПАК. -2007-Вып. 2.- 56 с.

8. Викторов A.B. ВЭЖХ-флуоресцентный метод определения микроколичеств аверсектина С в растительных объектах. / и др.// Биотехнология.- 1996.-№6.-С.55-62.

9. Волков Ф.А. Ивермектин в ветеринарии./Апалькин В.А.//-1995.1.1. Новосибирск.-С.5-6.

10. Гигиенические нормативы содержания пестицидов в объектах окружающей среды (перечень) Дополнение №3 к ГН 1.2.1323-03 Гигиенические нормативы ГН 1.2.1876,-06.

11. Гигиенические нормативы содержания пестицидов в объектах окружающей среды (перечень) Дополнение №6 к ГН 1.2.1323-03 Гигиенические нормативы ГН 1.2.2221- 07.

12. Головкина Л.П. Природный авермектиновый комплекс и его модификации в борьбе с паразитами животных.// Дисс. д. биол. наук.- Тюмень.-2003.-с15-16.

13. Гульчинская Т. С. Авермектинсо держащие инъекционные лекарственные средства на российском рынке ветпрепаратов// Зооиндустрия.-2001.-9с.

14. Егоров A.M. Теория и практика иммуноферментного анализа./ А.П. Осипов, Б.Б. Дзантиев, Е.М.Гаврилова. М.: Высш. шк.- 1991.-23с.

15. Жданова В.В.// Критерии оценки методов исследования: электронная версия// Методическое пособие "Вектор-Бест" Совершенствование качества работы клинико-диагностических лабораторий. Новосибирск, 1999.

16. Иванова A.B. Борьба с гиподерматозом крупного рогатого скота и эффективность некоторых препаратов группы макроциклических лактонов в борьбе с этим заболеванием.// Перспективные технологии и новые разработки.2004. Электронный ресурс.

17. URL: http://www.sibpatent.ru/default.asp;?khid=54028&a 11=1 &sort= 1 (дата обращения 13.09.2008).

18. Кузьмин: A.A., Антгельминтики в ветеринарной медицине.//Институт экспериментальной и клинической ветеринарной медицины УАА11. 2003. Электронный ресурс. URL материала: http://vetmedical.ru/publish/?id=:33 (дата обращения 14.08.2010).

19. Матвенцев В.Д. и др. //А. с. СССР № 1145668 (1981).• ■ 1 . ' ''

20. Материалы симпозиума МСД AFBET. Современные исследованияпо борьбе с животными паразитами., Австралия^ 1983, 20 с.

21. МУК 4.1.1012-01. Определение массовой концентрации аверсектина С в органах и тканях. животных, плазме и молоке методом флуоресцентной высокоэффективной жидкостной хроматографии.

22. МУК 4.1.1821-03. Определение остаточных количеств ивермектина в печени, почках, мясе, жире сельскохозяйственных животных и молоке методомвысокоэффективной жидкостной, хроматографии;

23. Непоклонов A.A. Новое в борьбе с гиподерматозом крупного рогатого скота//Животноводство России.-2000.-№5.-с.22-26

24. Непоклонов A.A. Оздоровление стад крупного рогатого скота от гиподерматоза/ЛВетеринария.- 2002.-№ 10.-с.З.

25. Непоклонов A.A. Внутрикожное применение Новомека при гиподерматозе / Г.Т. Брюшинина и др.//Ветеринария.- №10.-2001.- с. 11-12.

26. Непоклонов A.A. Гиподектин для профилактики и лечения при гиподерматозе / Брюшинина Г.Т. //Ветеринария.-1998.-№3.-с.6-9.

27. Павлов С.Д. Сравнительная оценка препаратов системного действия при гиподерматозе крупного рогатого скота. /Окунев А. М. // Сибирский вестник с/х науки. -1990. №6. - 66-69.

28. Русаков С. В. Экологические аспекты применения ивомека, дуотина и фармацина в ветеринарии. Дисс. к.биол.наук.-1997.- с.20-21.

29. Сафиуллин Р.Т. Экономически обоснованные схемы дегельминтизации ремонтного молодняка свиней при кишечных нематодозах в специализированных хозяйствах // Тр. ВИГИС.-М.-1992.-Т.31.-С.106-116.

30. Семенов C.B. Новая лекарственная форма ивермектина, ее фармакологические свойства и эффективность при лечении паразитарных болезней животных.//Дисс. к. биол. Наук.-М.-2009.-163 с.

31. Сидоркин В.А. Научные основы разработки и применения новых отечественных противопаразитарных лекарственных средств. // Дисс д.вет.наук.- Саратов.-2002.-467с. \

32. Тарасов И.Е. ИФА для определения ивермектина с использованием моноклональных антител/ Л.В. Костина, В.В. Цибезов, А.Ю. Козлов, A.A.

33. Непоклонов, Т.Н. Алипер, О.А. Верховский. // Ветеринария. 2009.- №4.-с.59-61.

34. Тарасов И.Е. Конкурентный иммуноферментный анализ ивермектина с использованием моноклональных антител/ JI.B. Костина, В.В. Цибезов, А.Ю. Козлов, А.А. Непоклонов, Т.И. Алипер, О.А. Верховский. -М.: Труды ВИЭВ.-том75.- 2009.- 692с.

35. Ямов В.З. Эффективное средство при гиподерматозе КРС./ М.Н. Евстафьев // Вопросы ветеринарной арахноэнтомологии.-Тюмень.- 1986.-вып.З.-с.9-10.

36. Ямов В.З. Средство ликвидации гиподерматоза./ Окунев A.M., Захаров Р.В // Уральские нивы.-1989.-№11.-С.22-23.

37. Alan L. Chicoine. Ivermectin use and resulting milk residues on 4 Canadian dairy herds./ David A. Durden, George MacNaughton, and Patricia M. Dowlin // Can Vet J.- 2007.-Vol.48.-P.836-838.

38. Alva-Valdes R. Efficacy of ivermectin in oral paste formulation against immature gastrointestinal and pulmonary nematodes in cattle./ G.W.Benz, D.H. Wallance, J.R Egerton., S.J. Gross, J.W. Wooden// II Amer. J. Vet. Res. 1984. - N4. - P.685-686.

39. Alvinerie M. Cinétiques plasmatiques de l'ivermectine chez la vache/ J.F. Sutra, P. Galtier, P.L. Toutain. //Recueil MedVet.- 1993.-169.- P.259-261.

40. Alvinerie M. Determination of ivermectin in milk by high performance liquid chromatography./J.F.Sutra, P.Galtier and P.L.Toutain // Ann Rech Vet.- 1987.-18.-P.269-724.

41. Alvinerie M. Ivermectin in goat plasma and milk after subcutaneous injection./ J.F. Sutra, P. Galtier // Vet. Res. -1993. -V. 24, 5. -P. 417-427.

42. Anastasio A. Residue study of ivermectin in plasma, milk and mozzarella cheese following subcutaneous administration to buffalo (Bubalus bubalis)./ M. Esposito, M. Amorena et al.// J. Agric Food Chem. -2002. -V. 50, 18. -P. 52.

43. Alvinerie M. Microdose d'ivermectine chez la vache laitiere: concentration plasmatiques et residue dans le lait./ J.F.Sutra, P. Galtier, P.L.Toutein// Rev. Med.- 1994.- p.761-764.

44. Armour J. Efficacy ivomec F against parasites of cattle. / K. Bairden, J.M. Preston // II Vet. Ree. 1980. - V. 107. - N6. - P.226-227.

45. Armour F. Persistent antelmintic activ of ivermectin in cattle. / K.Bairden, A.F. Batty et al. //Vet. Rec.-1985. -V. 116. -P. 151-153.

46. Barth D. Investigation of the efficacy of ivermectin against ectoparasites in cattle/ I.H.Sutherland // Zentralblatt fur Bacteriologies, Parasitenkunde, Infektionskrankheiten und Hygiene.-1980.-Abt.-I.-267.-319.-№57.

47. Barth D. Persistent anthelmintic effect of ivermectin in cattle.// J. Vet. Ree.-1983.-V. 113.- №14.- P. 300.

48. Benakhla A. L hypodermosis bovine en Algeria: reflexions sur la mise en place d un project de controle./A. Benakhla, C. Boulard// Commission of the European Communities, Brussels. 8 10 May. 1992. P. 77-84.

49. Benakhla A. Comparative efficacy of different insecticides in the treatment of cattle hypodermosis in northeastern Algeria/ Losson B., Lonneux J.F. et al. // Vet.Res.-1998.-V.29.-P.21 -29.

50. Benz G.W. Use ivermectin in Cattle, Sheep, Goats, and swine./ R.A.Roncalli, S.J. Gross // In Ivermectin and Abamectin; Campbell W.C., Ed.: Sprigtr-Verlag.-1989.-P.201-215.

51. Burg R.W. Avermectins, new Familiy of potent Anthelmintic: agents production organism and fermention. / E.E. Miller, I.B. Baker et al.// Antimicrob. Agent Chetmother.-1979.-V.J 5.-N3.-P.361-367.

52. Burg R.W. Isolation and Characterization of the Producing Organism. / Stapley E.O. // In ivermectin and Abamectin; Campbell W.C., Ed.: Sprigtr-Verlag.-New York.-1989.-P.24-33.

53. Campbell W.C. Ivermectin: a potent new antiparasitic agent.// Science.-1983.- P.823-828.

54. Campbell W.C. Ivermectin:a review of efficacy and safety./G.W. Benz5

55. J. Vet.Pharmacol.Ther.-1984.-P. 1-16.i

56. Campbell W.C. Ivermectin and Abamectin//Springer -Verlag.- New York.-1989.-P.362

57. Chiou R: Determination of ivermectin in? human plasma and- milk by highperformance liquid chromatography with fluorescence detection./ R.J. Stubbs, W.F. Bayne // J. Chromatogr.- 1987.- P. 196-202.

58. Chiu S. H. L. Metabolism and Tissue Residues./ Lu Y. H.// NY.- 1984,1i I

59. Chiu S.H:E. Metabolism ofdvermectin in tissues of cattle, sheep and rats/ Ii.Sestokas, R. Taub et al. //Drug. Metab. Disp. -1986. -V. 14. -P. 590.

60. Chiu S. H. L. Compative in vivo and in vitro metabolism of ivermectin in of steers, sheep, swine and rat/ Taub R., Sestokas E., Lu A. Y. IT., Jacob T. A.// Drug Metab. Rev. -1987.-№18.-P. 289-302

61. Crooks S. R. H. Detection of Ivermectin Residues in Bovine Liver Using an Enzyme Immunoassay./others// Analyst 123;-nö. 2.- 1998.-P. 355-58.

62. Crooks S.R.H. Review of methodology for the determination of macrocyclic lactone residues in biological matrices./ M. Danaher, L.C. Ho wells, V. Cerkvenik-Flajs, O'Keefe M.//Journal of Chromatography.- 2006.- P. 175- 203.

63. Crooks S.R.H. Detection of unwanted residues of ivermectin in bovine milk by dissociation-enhanced lanthanide fluoroimmunoassay: / P. Ross, C.S. Thompson, S.A. Haggan, C.T. Elliott//Luminescence.- 2000:- P.371-376.

64. Danaher M; Review of methodology for the determination of macrocyclic lactone residues in biological matrices./ Howells L.C., Crooks S.R., Cerkvenik-Fläjs V., O'Keeffe M.// J. Chromatogr., Analyt. Technol. Biomed. Life Sei.-2006.-P. 175-203. !

65. David A. Durden Ivermectin use and resulting milk residues on 4. Canadian dairy herds./ George MacNaughton, and Patricia M. Dowling// Can. Vet. J.-2007.-August.- P. 836-838.

66. De Montigny P. Liquid chromatographic determination of ivermectin in animal plasma with trifluoroacetic anhydride and N-methylimidazole as the derivatization reagent./ J.S. Shim, J.V. Pivinichny //J. Biomed Anal.- 1990.- P.50711.

67. Doeglas J. Monoclonal antibodies for immunoassay of avermectins / Schmidt et al.// J.Agric.Food Chem.- 1990.-Vol.38.-P.1763-1770.

68. Europen Communities/Brussels 1993- pp.71-84.

69. Duce I.R. Actions of dihydroavermectin Bla on insect muscle./ Scott R.H. //Br. J.Pharmacol.- 1985.-V.85.№ 2.-P.395-401.

70. Egerton J.R. Avermectins, new family of potent anthelmintic agents: efficacy of the Bla component. / D.A. Ostlind, L.S. Blair// Antimicrob. Agents Chemother.- 1979.- V.15.-P.372-378.

71. Egerton J.R. 22,23-Dihydroavermectin-Bl,a new broad-spectrum antiparasitic agent./ J. Birnbaum, L.S. Blair // Br. Vet J. 1980.-V.136.-P.88-97.

72. Egerton J.R. The anthelmintic efficacy of ivermectin in experimentally infected cattle. / C.H. Eary and D. Suhayda // Veterinary Parasitology.- 1981.- V.8.-P. 59-70.

73. ELISA Kits for Food and Feed Safety: AVMs(Avermectin,Ivermectin, abamectin) ELISA kit, product number 246-16©2008 Gentaur Molecular Products.

74. Empel W. Efficacy of ivermectin against actoparasites in heifers. /iL

75. Kozanecki M. // Proc.l4m Wrld. Congr. on diseases of cattle held on 26-29 August in Dublin. P.5-840.

76. Feng X. P. Study of the nematode putative GAB A type-A receptor subunits: evidence for modulation by ivermectin. / J. Hayashi, R. N. Beech et al.// J. Neurochem.-2002.-Vol. 83.-P. 870-878.i

77. Floate K. D. Thin-Layer Chromatographic Detection of Ivermectin in Cattle Dung./ W. G. Taylor, R. W. Spooner// Journal of Chromatography.- V. 694.-1997.-P. 246-51.

78. Guillot F.S. The infectivity of surviving Psoroptes ovis on cattle treated with ivermectin./ W.P. Meleney // Vet. Parasitol.- 1982.- V.10.-P. 73-78.

79. G. Albers-Schonberg. Avermectins Structure Determination./ et al.// J. Am. Chem. Soc.- 198l.-V. 103.-№14.-P. 4216-4221.

80. Halley B. A. The environmental impact of the use of ivermectin: environmental effects and fate./ T. A. Jacob , A. Y. H. Lu // Chemosphere.- 1989.-V.18.-P. 1543-1563.

81. He J. Multiresidue analysis of avermectins in bovine liver by immunoaffinity column cleanup procedure and liquid chromatography with fluorescence detector./ X.Hou, H.Jiang, J.Shen // J. AOAC Int.- 2005.-V. 88.-№4.-P.1099-1103.

82. Hotson I.K. Efficacy of topically administered ivermectin aqainst cattle parasites / W.I. Bliss, I.L. Cox, R.A. Roncalli, I.H. Sutherland // Vet.Parasitol.-1985.-P.112.

83. Jacob T.A. Ivermectin: a potent new anti-parasitic agent. / Science.-1983.-V.221.-P.823-828.

84. Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives (JECFA). Residues of some veterinary drugs in food animals (FNP 41-14) FAO Food and Nutrition Paper: WHO.- 2000.-P. 53-57.

85. Jozef Vercruysse Breed difference in the pharmacokinetics of ivermectin administered subcutaneously to Holstein and Belgian Blue calves/ et al. //Veterinary Parasitology.-2008.-P. 137.

86. Kass I. S. The effects of avermectin and drugs related to acetylcholine and 4-aminobutyric acid on transmission in Ascaris suum./A.O. Stretton and C. C. Wang//Mol. Biochem. Parasitol.- 1984.-V. 13.-P. 213-225.

87. Kass I. S. Avermectin Bla: a paralyzing anthelmintic that affects interneurons and inhibitory motoneurons in Ascaris. / Wang C. C., Walrond J. P., Stretton A. O. W.// Proc. Natl Acad. Sci. USA.- 1980.-V.77.-P.6211-6215.

88. Khan M.F. The feasibility of exterminating warble fly (Hypoderma species) on regional basis.//Vet.Parasitol.- 1977.-№3.-P.217-223.

89. Kofer J. Trial of ivermectin against ectoparasites of cattle and calves.// Rew.Appl.Entomol.-1989.- V.72.-P. 197-199.

90. Kojima K. Determination of 22,23-dihydroavermectin Bla in dog plasma using solid-phase extraction and high-performance liquid chromatography./ K. Yamamoto, Y. Nakanishi, H.Katae // J. Chromatogr.- 1987.-V. 413.-P. 326-31.

91. Kohler G. Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predefined specificity/ G. Kohler, C.Milstain//Nature. 1976.-Vol.256.-P.495-497.

92. Li J.S. Immunoaffinity column cleanup procedure for analysis of ivermectin in swine liver. / X.W Li., H.B. Hu // J. Chromatogr. B. Biomed Sci. Appl.- 1997.- V.696.-№1.- p.199-171.

93. Lifschitz A. Bioequivalence of ivermectin formulations in pigs and cattle. / Pis A, Alvarez L et al.// J. Vet. Pharmacol. Ther.- 1999.-V. 22.-P. 27-34.

94. List of EURO-DIAGNOSTIC A products: Ivermectine EIA, cat. code 5141IVERlp © 2008 ELISA Technologies, Inc).

95. McDonald P.D. Solid Phase Extraction Application guide and Bibliography./ Bouvier E.S.P.// A Resource for Sample Preparation Methods Development, Waters, Milford, MA.-1995.

96. Michael H. Fisher. The chemistry and pharmacology of avermectins/ Mrozik. Helmut// Annual Review of Parasitology and Toxicology.-1992.-P.537-553.

97. Mitsui Y. Simple and sensitive enzyme liked immunosorbent assay for ivermectin./ H. Tanimori, T. Kitagawa, Y. Fujimaki, Y. Aoki // Am. J. Trop. Med. Hyd.- 1996.-V.54.-№3.- p.243-248.

98. Nakane P.K. Peroxidase-labelled antibody a new method of conjugation/ A. Kawaoi // J. Histochem. Cytochem. - 1974. - Vol. 22. - № 4. - P. 1084-1092.

99. Niec R. Anthelmintic action of ivermectin in cattle. / Eddi C., Gomez B. // Revista de Medicina Veterinaria (Buenos Aires).- 1982.-V. 63.-P. 456-458.

100. Nordlander I. Determination of ivermectin residues in swine tissues an improved clean-up procedure using solid-phase extraction. / H. Johnsson // Food Add Cont.- 1990.-V. 7.-P. 79-82.

101. Omura S. Ivermectin: 25 years and still going strong / H.Johnsson // International Journal of Antimicrobial Agents.-2008.-P. 91-98.

102. Ostlind D.A. Insecticidal activity of the anti-parasitic avermectins./ S. Cifelli, R. Lang // Vet.Rec.-P. 105-168.

103. Pivnichny J.V. Direct determination of ivermectins in plasma at nanogram levels by high-performance liquid chromatography. / J.S.K. Shim, L.A. Zimmerman//J. Pharm. Sei.- 1983 .-V. 72.-P. 1447-50.

104. Sams R. Chemical assay of avermectins by high performance liquid chromatography with fluorescence detection.// Vet. Parasitol.- 1993.-V.48.-P.59-66.

105. Samsonova J.V. Biosensor immunoassay of ivermectin in bovine milk./ G.A. Baxter, S.R. Crooks, C.T. Elliott // J. AOAC Int. 2002.-V.85.-№4.- P.879-882.

106. Samsonova J.V., Determination of ivermectin in bovine liver by optical immunobiosensor./ G.A. Baxter, S.R. Crooks, C.T. Elliott // Biosens Bioelectron.-2002.-V. 17.-№6-7.-P.523-529.

107. Schmidt D.J. Monoclonal antibodies for immunoassay of Avermectins./ C.E.Clarkson, T.A.Swanson, M.L. Egger, R.E.Carlson, J.M.Van Emon, A.E. Karu // J. Agric. Food Chem.- 1990.- V.38.- p.1763-1770.

108. Schnitzerling H.J. Normal phase liquid chromatographic determination of nanogram quantities of ivermectin in cattle blood or plasma./ Nolan J. // J. Assoc. Anal. Chem.- 1985.-V. 68.-P. 36-40.

109. Shiwen X. Preparation and characterization of monoclonal antibodies against avermectin./ L. Shu, S. Dongbo and G. Donghua. // Hybridoma (Larchmt).-2009.-V.28.-№3 .-P. 173-6.

110. Simpson N. Sample preparation for chromatographic separation and overview./ T.A. Dean, J.W.Oudsema, C.F. Pool //Anal. Chim. Acta.- 1990.

111. Snyder L.R. Practice of Liquid Chromatography//J.J. Kirkland, Wiley-Interscience.- N-Y.-1971.

112. Stapley E.D. Avermectins, antiparasitic lactones produced by Streptomyces avermitilis isolated from a soil in Japan.// Trends in Antibiotic Research. Japan Antibiotics Research Association.-Tokyo.- 1982.- P. 154-170.

113. Swan G.E. Persistent anthelmintic effect of ivermectin in cattle. / Harvey R.G.// Journal of the South African Veterinary Association.-1983.- V.54.- P.249-250.

114. Tarry D.W. Progress on the warble fly eradication scheme in Great Britain. In:C.BOULARD u H.THORNBERRY (Hrsg.).Warble fly control in Europe. A symposium in the EC-Programme.Brussels 16./17.9/1982.A.A. Balkema/Rotterdam/Boston 1984, S.73-77.

115. Taylor W.G. Thin-layer chromatographic detection of ivermectin in cattle serum./ TJ. Danielson, R.L.Orcutt // J. Chromatogr.- 1994.-V. 661.-P. 327-33.

116. Tolan T.W. Determination of avermectins in plasma at nanogram levels using high-performance liquid chromatography with flourescence detection./ P.Eskola, D.W.Fink, H.Mrozik, L.A. Zimmerman // J. Chromatogr.- 1980.-V. 190.-P. 367-76.

117. Toutain P.L. Plasma and milk kinetics of therapeutic doses of ivermectin for dairy cows./ M. Alvinerie, P. Galtier // Proc. of 4th Congress of European Association for Veterinary Pharmacology and Toxicolody,Budapest, Hungary.-1988.-P. 165-170.

118. Toutain PL. Kinetic and insecticidal properties of ivermectin residues in the milk of dairy cows/ et 2X.II J. Vet Pharmacol Ther.- 1988-Vol. 11.-P.288-291.

119. Tway P.C. Determination of ivermectin in cattle and sheep tissues using high-performance liquid chromatography with fluorescence detection./ J.S. Wood, G.V. Downing // J. Agricul. Food Chem.- 1981.-V.29.-P.1059-63.

120. Weber N.E. Use of Xenobiotics in Food-Producing Animals in the United States/ D.H. Hutson, D.R. Hawkins, G.D. Paulson, and C.B. Struble// Xenobiotics and Food-Producing Animals. Washington, DC: American Chemical Society.- 1992.

121. Weimin Shi. Determination of multiresidue of avermectins in bovine live r by an indirect competitive ELISA./He Jihong, Jiang Haiyang, Hou Xiaolin, Yang Junhong, Shen Jianzhong// J. Agr. Food Chem.- 2006.-V. 54.-№17.-P. 6143-6146.

122. Wesley L. Shoop. Structure and activity of avermectin and milbemycins in animal health. / Helmut Mrozik, Michael H. Fisher.//Veterinary Parasitology.-1995.-P. 139-156.

123. Yaswinskii T.A. Effectivenss of evermectin in the tretment of eguine Parascaris equorum and O.equi infections. / Hamm D. // Amer. J. vet. Res.-1982.-V.43.-№6.-P.1095.

124. ZiefM. Sample preparation. / Kiser R.// Am.Lab.-1990.

Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.