Патогенез инфекционного процесса, вызываемого поксвирусными рекомбинантами, экспрессирующими ген ENV вируса лейкоза крупного рогатого скота тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.02, кандидат ветеринарных наук Бекелча Ассефа Арарса

• Бекелча Ассефа Арарса
• кандидат ветеринарных наук
• 2003

Оглавление диссертации кандидат ветеринарных наук Бекелча Ассефа Арарса

1. ВВЕДЕНИЕ.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. Вирус осповакцины.

2.1.1. Строение вируса.

2.1.2. Репликация вируса.

2.1.3. Клиническое проявление инфекции.

2.1.4. Патогенностъ и вирулентность.

2.1.5. Возможные поствакцинальные осложнения.

2.1.6. Векторные системы на основе вируса осповакцины.

2.1.7. Безопасность ВОВ ирекомбинантных вакцин.

2.2. Вирус бычьего лейкоза.

2.2.1. Классификация.

2.2.2. Морфология и физико-химические свойства ВБЛ.

2.2.3. Геном ВБЛ.

2.2.4. Структурные белки ВБЛ.

2.2.5. Иммунитет и средства специфической профилактики.

2.2.6. Проблемы разработки вакцины против ВБЛ.

2.2.7. Разработка рекомбинантных вакцин против ВБЛ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Патогенез инфекционного процесса, вызываемого поксвирусными рекомбинантами, экспрессирующими ген ENV вируса лейкоза крупного рогатого скота»

Лейкоз крупного рогатого скота (КРС) относится к числу опухолевых заболеваний, индуцируемых вирусной инфекцией. Возбудителем является вирус бычьего лейкоза (ВБЛ). Это РНК - содержащий вирус из семейства Кейоутёае, подсемейства Опсоутпае. Он входит в одну группу с возбудителем Т-клеточного лейкоза человека. ВБЛ, являясь экзогенным ретровирусом, имеет чрезвычайно высокое распространение среди животных, особенно в условиях индустриального животноводства с высокой концентрацией поголовья в хозяйствах. Инфи-цированность животных в некоторых стадах может превышать 50%. У части инфицированных животных развивается лимфоцитоз, у отдельн-рых - опухолевая форма болезни, приводящая их к гибели (Симонян Г.А., 1975; Кудрявцева Т.П., 1969).

Мероприятия по борьбе с бычьим лейкозом направлены на предупреждение ВБЛ - инфекции, как этиологической основы заболевания. При невысоком проценте инфицированных животных, достаточно диагностировать ВБЛ - инфекцию с помощью хорошо разработанных серологических методов, а затем удалить зараженных животных из стада. Однако в хозяйствах с высокой степенью инфицированности животных такой подход не может быть использован по экономическим соображениям. В этом случае большую пользу в борьбе с лейкозом могла бы оказать вакцинация против ВБЛ. Такая вакцинация привела бы к резкому снижению процента зараженных животных, с последующим освобождением стада от них с помощью традиционных подходов.

Современная биотехнология, основанная на методах генетической инженерии, позволяет разрабатывать вакцины нового типа, в частности - живые рекомбинантные вакцины на основе вирусных векторов (Альтштейн А.Д., 1987). Вирусные векторы способны доставлять генетическую информацию в клетки млекопитающих, используя для проникновения в клетку, природный механизм вирусной инфекции. Наиболее изученными и эффективными вирусными векторами, обеспечивающими in vivo транзиентную экспрессию доставляемых генов, являются векторы на основе генома поксвирусов. Они способны транс-дуцировать различные типы клеток, как делящиеся, так и неделящиеся.

В последнее время интенсивно изучается возможность использования вируса осповакцины в качестве вектора, экспрессирующего про-тективные гены патогенных вирусов. Получено более 50 различных ре-комбинантных штаммов вируса осповакцины и их количество продолжает увеличиваться (Воробьев A.A., 1996; Ada, 1989, Альтштейн А.Д. и др. 1992, 1994, Бендукидзе К.А. и др., 1990). Успешно испытаны рекомбинантные вирусы осповакцины, несущие гены вирусов гепатита,

Эпштейн-Барр, герпеса, везикулярного стоматита, бешенства, чумы крупного рогатого скота и др. (Черное В.И. и др., 1990; Smith et al., 1983; Moss et al., 1984; Paoletti E. et al., 1984; Mackett M. et al.,1982, 1985; Kieny et al., 1984; Yilma et al., 1988).

Интерес исследователей к данному вирусу объясняется наличием свойств, делающих его перспективным для использования в качестве вектора при разработке моно- и поливалентных рекомбинантных вакцин (Букринская А.Г., Жданов В.М., 1991, Гашников П.В. и др., 1994). Вирус имеет большую пакующую емкость и повышенную физическую стабильность. Благодаря уникальному набору вирусных ферментов и промоторов обеспечивается достаточно высокий уровень экспрессии и должный процессинг рекомбинантных белков (Moss В., Flexner С., 1987; Nalkano Е., et al., 1982). Вирус осповакцины имеет широкий спектр хозяев; хорошо реплицируется во многих видах клеточных культур, как от позвоночных, так и беспозвоночных животных, а также в куриных эмбрионах; Делецией одного или нескольких генов, несущественных для репликации, может быть достигнута аттенуация ВОВ для конкретного вида животного (Moss, 1985, 1987). Положительной характеристикой ВОВ является также высокая иммуногенность и отсутствие онкогенной активности (Бургасов П.Н., Безденежных И.С., 1997).

В настоящее время показана возможность конструирования рекомбинантных ВОВ, несущих ген env (ген протективного антигена)

ВБЛ. Это одно из наиболее перспективных направлений по разработке живой противолейкозной вакцины. Создан целый ряд рекомбинантов ВОВ (РВОВ), экспрессирующих ген env ВБЛ, которые отличаются по свойствам основного вируса-вектора, по промотору, контролирующему экспрессию env гена, и по встроенной в вирус генно-инженерной конструкции (Бендукидзе К.А. и др. 1990, Альтштейн А.Д. и др., 1994, Ohishi К., et al, 1990, Portetelle D. 1990, Daniel R.C., 1993).

В экспериментах in vitro показана функциональная активность таких рекомбинантов. Они сохранили способность размножаться и индуцировать в культурах клеток образование оболочечного белка gp51 БЛВ. Биологические свойства рекомбинантов изучаются. Рекомбинан-ты предполагается использовать для создания живой рекомбинантной вакцины против бычьего лейкоза.

Не смотря на относительно большое количество опубликованных работ, посвященных изучению биологии ВОВ, эксперитментальные данные, характеризующие поведение рекомбинантных вирусов in vivo, практически отсутствуют. В связи с чем, исследование основных характеристик векторной системы в различных организмах представляет самостоятельный научный интерес.

Целью данной работы явилось изучение векторов на основе вируса осповакцины сконструированных для доставки и экспресии in vitro и in vivo протективного гена env ВБЛ, исследование экспрессии и функциональной активности продуктов экспрессии в культурах клеток млекопитающих, а также изучение патогенеза поствакцинальной инфекции у привитых животных.

Непосредственно задачами данной работы было:

Сравнение in vitro, в культурах клеток млекопитающих кинетики накопления продукта экспрессии целевого гена env ВБЛ в зависимости от исходного вируса-вектора и генно-инженерной конструкции.

Изучение функциональных свойств рекомбинантов, экспресси-рующих целевой ген в организме кроликов.

Изучить безвредность, реактогненность и особенности инфекционного процесса у телят, привитых рекомбинантами, экспрессирую-щими gp51 ВБЛ.

Научная новизна. Получены новые экспериментальные данные по биологическим свойствам рекомбинантов вируса осповакцины, экс-прессирующих ген env ВБЛ. Путем трансдукции клеточной культуры определена эффективность векторов, в которых трансген находится под контролем синтетических поксвирусных промоторов. Показана функциональная активность гена env ВБЛ, встроенного в геном ВОВ, продукт экспрессии которого вызывал гуморальный иммунный ответ при внутрикожном заражении кроликов. Показано существенное снижение нейровирулентной активности рекомбинантов по сравнению с исходными штаммами ВОВ. Установлена безвредность и дана оценка реактогенности рекомбинантного ВОВ для телят. Ограниченная поствакцинальная инфекция характеризовалась доброкачественным течением, местной воспалительной реакцией, лихорадкой, региональным лимфаденитом и краткосрочным лейкоцитозом. Установлено время перси-стенции вакцинного штамма в организме привитых животных.

Практическая значимость. Работа представляет не только научный интерес, но и может иметь практическое приложение. Разработка таких рекомбинантов является новым перспективным направлением в создании специфических средств профилактики лейкоза крупного рогатого скота. Векторы на основе вируса осповакцины могут служить дополнительным источником рекомбинантного антигена для разработки новых методов серологической диагностики.

Публикации. По материалам диссертации опубликованы 4 печатные работы. Результаты работ представлены на молодежной международной конференции "Живые системы и биологическая безопасность населения" (Москва, 2002 г.), на 4 международной научно-практической конференции "Актуальные проблемы ветеринарной медицины и ветеринарно-санитарного контроля сельскохозяйственной продукции" (Москва, 2002), на 4 международной конференции "Пища, экология, человек" (Москва, 2001). Результаты работы доложены и обсуждены на расширенном заседании кафедры биологии, вирусологии и генной инженерии МГУ прикладной биотехнологии.

2. Обзор литературы

2.1.Вирус осповакцины

Вирус осповакцины (ВОВ) является наиболее удобной моделью для изучения возможности разработки рекомбинантных вакцин против ретровирусных инфекций (1994, Альтштейн А.Д. и др., 1994, Черное В.И. и др., 1990, Burny А., 1990).

ВОВ относится к семейству Poxviridae, подсемейству Chordopoxvirinae (поксвирусы позвоночных), в роду Orthopoxvirus (вирус осповакцины) (Moss В., 1985). Жизненный цикл поксвирусов происходит в цитоплазме клетки, в значительной степени автономно от ядра. В связи с этим ВОВ имеет свою систему транскрипции (Taylor S., 1988), способную синтезировать функциональную мРНК в полиаденилированной, кэпиро-ванной и метилированной форме (Paoletti Е., 1984).

2.1.1. Строение вируса.

Вирионы внутриклеточного вируса состоят из двояковогнутой сердцевины и боковых тел, расположенных в местах вогнутостей. Сердцевина и боковые тела окружены внешней мембраной. Поверхность вириона покрыта многочисленными трубчатыми структурами (Moss В., 1987). Методом двумерного электрофореза в составе вирионов обнаружено более 100 полипептил дов. А при использовании [ Н] фруктозы в вирионе выявили 14 гликополипептидов.

Геном поксвирусов представлен линейной двухцепочечной ДНК с ковалентно замкнутыми концами. ДНК ВОВ имеет размер 186-192 т.п.н. в зависимости от штамма вируса и кодирует более 200 полипептидов (Рязанкина О.И., Щулкунов С.Н., 1993; Dales S., Polo В., 1981; Joklin W., 1966) В адсорбции на поверхности клеток участвуют белки 54К, 32К и 29К, а также гликопротеид 37К. Существенную роль в проникновении вируса в клетку могут играть белки 59К и 34К, а также белок внешней мембраны 14К. Белок 14К, экспонируясь на клеточной поверхности, вызывает также слияние клеток в поликариоциты. Этот белок высококонсервативен внутри группы ортопоксвирусов. Его изменение приводит к уменьшению как размера вирусных бляшек на культуре клеток, так и инфекционности вируса.

Заключение диссертации по теме «Патология, онкология и морфология животных», Бекелча Ассефа Арарса

5. Выводы

1. Проведено исследование in vitro функциональной активности рекомбинантных вирусов осповакцины, экспрессирующих ген env ВБЛ под контролем различных промоторов в культуре клеток почки зеленой мартышки CV-1. Показано, что уровень экспрессии трансгена под контролем синтетических промоторов в 4-5 раза выше, чем под контролем естественного поксвирусного ранне-позднего промотора р7,5, и не зависел от природы вируса-вектора (WR или Lister).

2. Цитопатогенное действие рекомбинанта WK4BLV, полученного на основе исходного шт. WR, было более выражено и становилось полным на 4-5 часов раньше, чем ЦГЩ аналогичного рекомбинанта (LK4BLV), полученного на основе шт. Lister.

3. Исследована in vivo функциональная активность рекомбинантных вирусов осповакцины, экспрессирующих ген env ВБЛ под контролем поксвирусного промотора р7,5. Рекомбинантные вирусы при накожном введении индуцируют у кроликов синтез антител против gp51 ВБЛ, титр которых резко возрастает после повторной вакцинации животных. Установлена зависимость индукции гуморального иммунного ответа от исходного вируса-вектора. Уровень антител у кроликов, привитых WK4BLV, был выше, чем у кроликов, привитых LK4BLV.

4. In vivo, на мышах линии Balb/c исследована нейровирулент-ность рекомбинантных вирусов осповакцины, экспрессирующих ген env ВБЛ под контролем различных промоторов. Установлено существенное снижение нейровирулентности всех рекомбинантов по сравнению с исходными вирусами. Более того, рекомбинанты штамма Lister, не вызывали гибель животных даже в концентрированном виде. Ней-ровирулентная активность рекомбинантов WR также была существенно снижена, но была выше, чем у исходного штамма Lister.

5. Установлена безвредность и дана оценка реактогенности ре-комбинантного WK4BLV. У привитых телят развивается вакцинальный инфекционный процесс, который характеризуется местной воспалительной реакцией, лихорадкой, и краткосрочным лейкоцитозом. Наиболее интенсивно эти признаки отмечали на 4-5 день после введения препарата, после чего они полностью исчезали у всех животных.

6. Рекомбинантный вирус реизолировали в течение 3-16 дней после вакцинации только с места введения. В этот период и в последующие сроки из внутренних органов вирус реизолировать не удалось.

2.3.3аклк>чение

Анализ опубликованных данных позволяет сформулировать проблему и образно представить ее актуальность. Лейкоз крупного рогатого скота является самым распространенным вирусным заболеванием. Не существует средств специфической профилактики, пригодных для практического применения. Это связано в первую с низкой эффективностью и высокой себестоимостью вакцинных препаратов, полученных по традиционной технологии. Одним из перспективных направлений в создании средств специфической профилактики против ВБЛ-инфекции является разработка живых рекомбинантных вакцин на основе вируса осповакцины. Получено несколько рекомбинантных вирусов, экспрессирующих ген протективного белка ВБЛ. Они различаются по исходному штамму вируса, промотору и генно-инженерной конструкции. При разработке любых вакцин основными требованиями являются безопасность и иммунологическая эффективность. В случае с рекомбинантными вакцинами проблема безопасности становится наиболее актуальной (Marcus-Secura et al., 1989). Пока не разработаны методы определения полной безвредности генноинженерных вакцин, поскольку результатом генетических модификаций могут быть изменения вирулентности, тканевого тропизма, круга хозяев вируса и т.д. Важная часть оценки безвредности рекомбинантных вирусов ос-повакцины является тщательное изучение их "поведения" в живых системах in vitro и in vivo, и анализ выявленных отклонений с учетом свойств исходного вируса, на основе которого была создана векторная система.

На основании проведенных исследований в лаборатории генетики вирусов ИБГ был подобран рекомбинантный вирус ос-повакцины (РВОВ) на основе штамма Листер и ранне-позднего промотора P65, сохраняющий поксвирусный tk - ген (L -P65tk+), который был использован для приготовления экспериментальных серий живой вакцины против ВБЛ. Этот штамм отличался наибольшей способностью индуцировать антитела к gp51 ВБЛ у кроликов (антисыворотки кроликов титровали в ELISA на 96-луночных плашках "Costar" сенсибилизированных моноклональными антителами против gp51BБЛ и насыщенных рекомбинантным антигеном, полученным, из клеток, зараженных рекомбинантом ВОВ) и незначительной нейровирулентностью для мышей.

3. Собственные исследования

3.1.Материалы и методы.

Вирусы. В работе использовали вирус осповакцины штамм Lister и WR, а также 6 рекомбинантов, полученные на их основе, несущие env-reH вируса бычьего лейкоза, любезно предоставленные д.м.н Альтштейном (ИБГ).

WK4BLV и LK4BLV - рекомбинанты на основе штамма WR или Lister соответственно. Содержат env ген BLV, встроенный в ген тими-динкиназы под контролем поксвирусного промотора Р7,5. Тк-фенотип рекомбинантного вируса восстановлен путем встройки tk-гена вируса простого герпеса.

W65BLV (L65BLV) и W601BLV (L601BLV) - епу-ген BLV встроен в ген тимидинкиназы под контролем синтетического ранне-позднего промотора белка Р65 и позднего промотора Р601 соответственно (Рис. l).

Культуры клеток. В работе использовали клетки линий: CV-1 (клетки почки зеленой мартышки); 293 - (клетки эмбриональной почки человека); Rat 2 (клетки почки крысы). Все клеточные линии были получены из лаборатории генетики вирусов ИБГ РАН. р38 С

VVtk i vv

P65 env

PRB65-BLV

HSVtk

P65-BLV с

P601-BLV

P7.5

1-tk

P65 f 4 env r-tk

LacZ I

P601

P7.5

K4-BLV l l

Рис. 1 Схема геномов вируса осповакцины (VV) и викторов на основе VV, экспрессирующие ген env BLV

Обозначения: р38 - ген, кодирующий белок р38 ВОВ, VVtk - тимидинкиназный ген ВОВ, env - ген ВБЛ, кодирующий поверхностные гликопротеиды gp51-gp30, HSVtk - тимидинкиназный ген вируса простого герпеса, 1-tk - часть тимидинкиназного гена, фланкирующего встроеный env ген ВБЛ слева, r-tk-часть тимидинкиназного гена, фланкирующего встроеный env ген ВБЛ спрва, Р7.5 - поксвирусный ранне-поздний промотор, Р65 - синтетический ранне-поздний прмотор, Р601- синтетический поздний промотор.

Животные и эксперименты in vivo. В работе использовали мышей линии ВАЬЬ/с весом 10-12 г, кроликов породы белый великан весом 3,5-4,0 кг. телят в возрасте 14-18 мес. из хозяйств Вологодской, Московской и Калужской областей.

Клиническое осмотр подопытных животных проводили ежедневно в течение 7 дней после прививки с обзязательной термометрией тела дважды утром и вечером. Осматривали и документировали место введения рекомбинантного вируса осповакцины. Проводили пальпирование поверхностных лимфоузлов.

Гематологическое исследование подопытных животных проводили по общепринятой методике. Подсчет лейкоцитов проводили в камере Горяева. Лейкоформулу выводили по результатам подсчета 100 клеток в мазках окрашенных по Романовскому-Гимза.

Патологоанатомическое и гистологическое исследования проводили после убоя и вскрытия телят, находившихся в остром опыте по испытанию реактогенных свойств рекомбинантных вирусов. Для гистоисследования брали кусочки селезенки, лимфоузлов, печени, сердца, почек, легких, скелетной мускулатуры, кожи и подкожной клетчатки в месте введения вакцины. Кусочки ткани фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина и жидкости Карнуа. Целлоидиновые срезы окрашивали гематоксилин-эозином и заключали в бальзам.

Вирусологическое исследование. Реизоляцию рекомбинантного вируса оповакцины из органов и тканей зараженных мышей кроликов и телят проводили после убоя или вскрытия павших животных. Кусочки ткани измельчали ножницами и растирали в фарфоровой ступке со стеклом и жидким азотом до получения гомогенной кашицеобразной массы. Все операции выполняли с соблюдением стерильных условий. Готовили 10% суспензию, добавляя до нужного объема среду Игла содержащую по 500 ЕД/мл пенициллина и стрептомицина. После осветления суспензии низко скоростным центрифугированием надосадочную жидкость собирали и помещали на хранение при -20°С. Инфекционность надосадочной жидкости определяли по специфическому цитопатогенному эффекту на культуре клеток CV-1

Серологические исследования с целью выявления анти-ВБЛ антител проводили с помощью ИФА и реакции иммунодиффузии в геле агара с использованием коммерческого диагностикума производства Курской биофабрики. Антитела к вирусу осповакцины определяли в реакции нейтрализации на культуре клеток CV-1.

Статистический анализ. Для оценки статистической значимости результатов использовали критерий Стьюдента. Значимыми считали Р<0,05. Обработку экспериментальных данных проводили с помощью программы Microsoft Excel.

Список литературы диссертационного исследования кандидат ветеринарных наук Бекелча Ассефа Арарса, 2003 год

1. Альтштейн А.Д. Вирусные инфекции и генетическая инженерия. Биотехнология, 1987, № 3, с.276 283.

2. Альтштейн А.Д, Анджапаридзе С.Г, Антонова Т.П. и др.

3. Двойные рекомбинанты вируса осповакцины, экспресси-рующие поверхностный антиген вируса гепатита В и ти-мидинкиназу вируса простого герпеса. РАН, 1986, т.289. №6, с. 1493-1496.

4. Альтштейн А.Д, Анджапаридзе С.Г, Баев A.A. и др. Доклады

5. АН СССР, 1986, т.289, с. 1493-1496.

6. Альтштейн А.Д, Бендукидзе К.А, Захарова Л.Г. Экспрессияоболочечного гликопротеида вируса бычьего лейкоза ре-комбинантными вирусами осповакцины Труды ВИЭВ, М, 1991, т. 70, с.101-107.

7. Альтштейн А.Д, Валихов А.Ф. Подходы к живой вакцине против бычьего лейкоза на основе вируса осповакцины.- 5 Конф. Рос. Федерации "Нов. направления биотехнологии", Пущино 18-22 мая 1992: Тез. докл. Б.М, 1992, с.52.

8. Альтштейн А.Д, Захарова Л.Г, Гриненко Н.Ф. и др. Получение и изучение поксвирусных рекомбинантов , экспрес-сирующих чужеродные гены: Молек. генет, микроб, и вирус. 1994, № 4. с.27.

9. Альтштейн А.Д, Тарасишин Л.А, Захарова Л.Г. и др. Выявление общей антигенной детерминанты в главном внутреннем белке неродственных онковирусов. Вопр. вирусол. 1980, №2, с. 196-201.

10. Букринская А.Г, Жданов В.М. Молекулярные основы патогенности вирусов. М.:Медицина, 1991

11. Бурба Л.Г. Основные результаты научных исследований попроблеме лейкозов сельскохозяйственных животных и птиц, проводимых странами-членами СЭВ. Бюлл. ВИЭВ, 1977, 30, с.4-12.

12. Бурба Л.Г., Кузьмичев B.C. Серологическое и гематологическое проявление гемобластозов крупного рогатого скота. Этиол., патогенез и вопр. эпизоотол. лейкоза круп, рогат, скота. Новосибирск, 1986, с. 19-24.

13. Бурба Л.Г., Нахмансон В.М, профилактика лейкозов и мерыборьбы с ними. Лейкозы и злокачественные опухоли животных." М.: Агропромиздат. (под ред. В.П.Шишкоа и Л.Г.Бурбы), 1988, с.321-328.

14. Бурба Л.Г., Шишков В.П. Принципы борьбы с гемобластозамикрупного рогатого скота с применением серологического метода исследования. Arch. exp. Vetrinarmed. 1986, 40, 3 с.313-316.

15. Бургасов П.Н., Безденежных И.С. Научные основы организации профилактики инфекционных болезней. М. .-Медицина, 1977.-C.38-40,119-138

16. Бусол В.А. Этиология гемобластозов крупного рогатого скота.

17. Автореф. дисс. доктора вет. наук. Москва. 1983, 44 с.

18. Валихов А.Ф. Биологические свойства вируса лейкоза крупного рогатого скота: диагностика и профилактика инфекции. Дисс. докт. М., ВИЭВ, 1992.

19. Валихов А.Ф. Изучение онкорнавируса, выделенного при лейкозе крупного рогатого скота// В кн.: Проблемы экспериментальной онкологии и лейкоза человека и животных (под ред. Л.М.Шабада, В.П.Шишкова) М.: Колосс, 1979, с.205-213.

20. Валихов А.Ф., Шишков В.П., Бурба Л.Г. Лейкозы крупного рогатого скота Вирусологические аспекты - М.: ВНИИ-ТЭИСУ, 1980, с.76.

21. Валихов А.Ф. Кузьмичев B.C., Иванова Л.А. и др. Иммуногенность рекомбинантного вируса осповакцины, экспресси-рующего оболочечный гликопротеид вируса бычьего лейкоза Труды ВИЭВ, М., 1991, т.70, с.92-100.

22. Васин A.B. Термоустойчивость ретровируса лейкоза крупногорогатого скота в молоке. Тезисы докладов Всес. конф. "Распознавание и меры борьбы с лейкозом человека иживотных". Белая церковь, 22-24 сентября 1982, 196-197 с.

23. Взоров А.И, Генцов Ю.Ю, Григорьев В.Б. Образование вирусоподобных частиц белков ВИЧ-1 экспрессируемым ре-комбинантным вирусом осповакцины. Молекулярная биология, 1991. М.: г.20, Вып. 6, с. 1666-1674.

24. Гашников П.В, Дмитриев И.П, Щелкунов С.Н. Разработкаживых вакцин пролонгированного действия на основе вируса осповакцины.: Молек. генет. микроб, и вирусол.-1994, № 4, с.28.

25. Гулюкин М.И, Бурба Л.Г, Иванова Л.А. и др. Экспериментальное воспроизведение лимфолейкоза на телятах. Ветеринария, 1987, 2, с.22-28.

26. Гулюкин М.И, Бурба Л.Г, Иванова Л.А. Результаты серологических и морфофункциональных исследований крови телят от инфицированных вирусом лейкоза и больных лимфолейкозом матерей. Ветеринария, 1985, 11,с.32-38.

27. Гулюкин М.И, Васин A.B., Замараева Н.В. пути передачи вируса лейкоза крупного рогатого скота. Обзор литературы. Ветеринария 11, 1990. с.27-31.

28. Гурвич Э.Б, Мовсесянц A.A., Степаненкова Л.П. Об участиивируса вакцины в патогенезе различных клинических форм поствакцинальных осложнений.Ж.микробиол.-1979.-№11.-С.73-78

29. Кадыров У.Г. Оспа. /В кн. Паголого-анатомическая диагностика болезней крупного рогатого скота.; Под ред. Шишкова В.П. и др.- М.:Агропромиздат.-1987.- с.141-146

30. Кряжевская М.В. Рекомбинантные поксвирусы, экспрессирующие селективные гены. Дисс. канд. ИОГен АН СССР. М, 1990.

31. Кряжевская М.В, Захарова Л.Г, Альтштейн А.Д. Генетическаянестабильность поксвирусных рекомбинантов, содержащих два tK-гена. Молек. механизы генетич. процесс. -М.: ИОГен АН СССР, 1990, с.36.

32. Кудрявцева Т.П. Патоморфологические и клиникоанатомические показатели при лейкозах и ретикулезах крупного рогатого скота. Автореф. дисс. доктора вет. наук. Москва, 1969, 48 с.

33. Кукайн P.A., Нагаева Л.И., Крикун В.А. и др. Формированиеиммунитета к БЛВ у крупного рогатого скота и овец в процессе иммунизации различными препаратами. Труды ВИЭВ, 1983, 59, с.52-56.

34. Кукайн P.A., Нагаева Л.И., Шишков В.П. и др. Способ получения вакцины против лейкоза крупного рогатого скота. A.C. 820015, СССР. Заявл. 28.06.77. 2502342/30-15, опубл. Б .И. 1987, с.39.

35. Лихачев Н.В., Борисович Ю.Ф. Биологические свойства возбудителя оспы. Ветеринария.-1964.-№7.-с. 12-15

36. Лопарев В.Н., Бездетное О.Н., Черное В.И. Картирование несущественных областей в геноме вируса осповакцины. Молек. генетика, микроб, и вирусол., 1988, № 12, с.33-38.

37. Лопарев В.Н., Черное В.И. Сравнительный рестрикционныйанализ Hind III-F фрагментов ДНК 4 штаммов вируса осповакцины. Молек. генет. микробиол. и вирусол., 1986.11, с.26-30.

38. Меньшикова З.Н., Махмуд А.З., Шишков В.П. Электронномикроскопическая характеристика вариантов морфогенеза бычьего лейкозного вируса. Теоретич. и практич. вопр. лейкозов и злокачественных опухолей с.-х. животных. М, 1979, 107, с.13-19.

39. Надточей Г.А., Валихов А.Ф., Бурба Л.Г., Горбатов В.А. Морфологическая характеристика и иммунологические свойства онкорнавируса типа С крупного рогатого скота. Доклады ВАСХНИЛ Л, 1976, 5, с.31-33.

40. Нахмансон В.М. Лекоз крупного рогатого скота. 1986.- М.: Росельхозиздат, 221 с.

41. Парфанович М.И., Жданов В.М., Лазаренко A.A. и др. Некоторые аспекты специфической профилактики онкорнави-русной инфекции и лейкоза крупного рогатого скота. Труды ВИЭВ, 1983, 59, с.59-64.

42. Парфанович М.И, Симонян Г.А, Федорова H.A. и др. Протективные свойства инактивированной цельновиринной вакцины против лейкоза крупного рогатого скота. Диагност, профилакт. и борьба с лейкозом круп, рогат, скота. Персиановка, 1986, с.10-13.

43. Парфанович М.И, Федорова H.A., Ярославцева Н.Г, Жданов

44. В.М. Инактивированная вакцина из вируса крупного рогатого скота. Основы технологии и контроля. Имунно-генность и защитные свойства. Науч. основы технол. пром-сти пр-ва вет. биол. препаратов. Тез. докл. 3 Всес. конф.М, 1987, с. 45-47.

45. Рязанкина О.И, Щелкунов С.Н. Картирование генов вируса осповакцины. Молек. биолог, т. 27, вып. 2, 1993, М.: Hayка, с.269-287.

46. Сверчков A.B. Культуральные, антигенные, иммуногенныесвойства рекомбинантных вирусов осповакцины, содержащих ген env BJI КРС. Дисс. раб. на соиск. уч. степени к.б.н. М., 1992.

47. Симонян Г.А. Клинико-гематологическая и цитоморфологическая диагностика различных форм лейкоза крупного рогатого скота. Автореферат дисс. доктора вет. наук. М., 1975, 43 с.

48. Черное В.И, Челяпов Н.И, Антонова Т.П. и др. Использованиевируса осповакцины в качестве вектора для создания живых генно-инженерных вакцин. Вирусы и вирус, заболев. 1990, № 18, с.59-60.

49. Шишков В.П., Бурба Л.Г, Иванова Л.А. и др. Иммуноферментный метод определения антител к вирусу лейкоза крупного рогатого скота. Бюл. ВНИИ эксперим. вет. 1985,58, с. 23-25.

50. Шишков В.П., Иткин Б.З., Крикун В.А. и др. Поэтапное оздоровление хозяйства от лейкоза. Ветеринария. 1986, 5, с.40-42.

51. Шишков В.П., Кукайн Р.А., Иткин Б.З. и др. Вакцинация крупного рогатого скота против вируса бычьего лейкоза. Доклады ВАСХНИЛ. 1979, 9, с. 24-26.

52. Щелкунов С.Н., Маренникова С.С., Блинов В.М. и др. Полнаякодирующая последовательность генома вируса натуральной оспы.- Докл. АН (Россия) 1993, 328, № 5, с. 629-632. Ин-т мо. биол. НПО "Вектор", п. Кольцово Но-восиб. обл.

53. Astier Т., Mamoun R., Guillemain В. et al. Characterization of antibodies responsible for the inhibition of BLV induced early polykaryocytosis. Ann. Rech. Vet. 1978, 9, p. 699-708.

54. Barrett N., Mitterer A. et al. Large-Seal production and purificationof a vaccinia recombinant derived HIV- gp 160 and analysis of the immunogenicity// 11 AIDS research and human retroviruses VS.- 1989, № 2, p. 31-46.

55. Baxby D. Recombinant poxvirus vaccines.- Rev. Med. Microbiol.,1993 4 №2, p. 80-88.

56. Benton C.V., Soria A.E., Gilden R.V. Direct syncytial assay of thequantitation of bovine leukemia virus. Infect. Immunol. 1978 ,20,p.307-309.

57. Blanktnstein P., Fechner H., Looman A.C. et al., Polimerase chainreaction (PCR) for detection of BLV provirus. Berlin. Wochenschrift, 1998, 111(5), 180

58. Bouillant A.M.P. Analogy between lymphotropic human retroviruses and large animal retroviruses. Can. Vet. J. 1986. 27 11 448-454.

59. Brantl S., Eldarov M.V., Robler H., et al. Expression of env sequences of the bovine leukemia virus in Saccharomyces cer-evisiao. 12th Int. Spec. Symp. Yeasts Genet. Non-Conv. Jeasrs. Weimar., 1987 .

60. Bruck C., Portetelle D., Burny A. et al. Topographical analysis of

61. BLV gp51 epitopes involved in viral functions Virology 1982, 122, p. 353-362.

62. Brack C., Portetelle D., Zavada J., Burny A. Molecular dissectionof bovine leukemia virus envelope glicoprotein (BLV gp51) by monoclonal antibody study. Modern trends in human leukemia. V. (Neth R., ed.), Berlin, 1983, p. 222-226.

63. Buller R. M.L, Chakrabarti S, Coper J.A. et al. Deletion of thevaccinia virus grown factor gene reduces virus virulence. J.Virol. 1988, v 62, № 3, p. 866-874.

64. Burny A. Cell transformation by bovine leukemia virus. Retroviruses of human AIDS and related animal diseas: colloq. cent, gardes, Maraes-La-Coquette/Paris. (Girard M., ed.) 1987, p. 87-89.

65. Burny A, Bex F, Brack C. et al. Biochemical studies on enzooticand sporadic types of bovine leukosis. In: Antiviral mechanisms in the control of neoplasia. (P. Chandre, ed.), 1987, p. 83-99.

66. Burny A, Brack C, Chantrenne H. et al. Bovine leukemia virus:molecular biology and epidemiology. Viral Oncology. (G. Klein, ed.), N.-Y, Raven Press. 1980, p. 231-189.

67. Burny A, Brack C, Cleuter Y. et al. Bovine leukemia virus, a versatile agent with various pathogenic effects in various animal species. Cancer Res, Suppl. 1985, 45, 9, p. 4578-4582.

68. Buxton B.A, Hinkle N.C, Schultz R.D. Role of insects in thetransmission of bovine leukosis virus: Potential for transmission by stable flies, horn flies, and tabanids. Amer. J. Vet. Res. 1985,46, l,p. 123-126.

69. Calafat J, Hageman P, Ressang A. Structure of C type virus particles in lymphocyte cultures of bovine origin.- J. Nat. Cancer Inst. 1974, Vol 52, № 4, p. 1257-1260.

70. Calafat J, Ressang A. A. Study on morphology of bovine leukemiavirus and localization of the viral antigens. Vet. Microbiol. 1976, l,p. 193-194.

71. Chatterjee R, Gupta P, Kashmiris S.V.S, Ferrer J.F. Phytohemagglutinin activation of the transcription of the bovine leukemia virus genome requires de novo protein synthesis. J. Virol. 1985,54, 3, p. 860-863.

72. Copeland T.D, Morgan M.A, Oroszlan S. Complete amino acidsequence of the nucleic acid binding protein of bovine leukemia virus. FEBS Lett. 1983, 156, p. 37-40.

73. Coulston J, Naif H, Brandon R. et al. Molecular cloning and sequencing of an Australian isolate of proviral bovine leukemia virus DNA: Comparison with other isolates. J. Gen. Virol.1990, 71, 8, p. 1737-1746.

74. Dales S., Pogo B. Biology of poxviruses. Virology mophographs1981, Vol 18-30-37. Ed. by D.Kingsbury and H.Zur Hausen, Springer-Verlag, N-Y.

75. Daniel R.C.W., Gatei M.H., Good M.F. et al. Recombinant viralvaccined for enzootic bovine leucosis. Immunol, and Cell. Biol., 1993, v 71, № 5, p. 399-404.

76. Daniel R.C.W et al. Recombinant viral vaccined for enzootic bovine leucosis. Immunol, and Cell. Biol., 1994, v 81, № 5, p. 398-414.

77. Derse D. Bovine leukemia virus transcription is controlled by a virus-encoded trans-acting factor and by cis-acting response elemenets. J. Virol. 1987 61 8 p. 2462-2471.

78. Derse D. Transacting regulation of bovine leukemia virus mRNAprocessing. J. Virol. 1988 62 4 p. 1115-1119.

79. Driscoll D.M., Olson C. Bovine leukemia virus associated antigensin lymphocyte cultures. Am. J. Vet. Res. 1977 38 p. 18971898.

80. Earl P.L., Moss B., Morrison R.P., Nishio C. B. T-lymphocytepriming and protection against Friend leukemia by vaccinatia-retrovirus env gene recombinant. Science 1986, 234, p. 728-731.

81. Flexner Ch., Hiigin A., Moss B. Prevention of vaccinia virus infection in immunodefecient mice by vector-directed IL-2 expression. Nature /London/ 1987, v.330, p. 259-262.

82. Francki R., Fauquet C., Knudson D. Classification and namenclature of viruses-5th ICTV Report. Arch. Virol. 1991. Suppe 2.

83. Fukuyama Shin-ichi, Kodama Kazuo, Hirahara Tadashi et al. Protection againsr bovine leukemia virus infection by use of inactivated vaccines in cattle.- J. Vet. Med. Sei, 1993, 55, № 1, p. 99-106.

84. Ghysdael J., Bruck C., Kettmann R., et al. Bovine leukemia virus

85. Curr. Top. Microb. Immun.- 1984, Vol. 112, p. 1-19.

86. Ghysdael J., Kettmann R., Burny A. Translation of bovine leukemiavirus gemon information in heterologous protein synthesizing systems programmed with virion RNA and in cell-lines persistently infected by BLV. Ann. Rech. Vet. 1978, 9, p. 627634.

87. Joklin W. The poxviruses. Bacteriological Reviews, March 1966,p. 33-66.

88. Kaaden O.R, Frenzel B, Dietzchold B. Isolatio of a pi5 polypeptide from bovine leukemia virus and detection of specific antibodies in leukemic cattle. Virology, 1977, 77, p. 501-509.

89. Kaczorek M. Les vaccins recombinants Leff infec. microbiol. Clin- 1992, vol 7, №5, p. 194-198.

90. Katoh I, Yoshinaka Y, Sagata N. The bovine leukemia virus X region encodes a trans-activator of its long terminal repeat. Jap. J. Cancer Res. Gann, 1987, 78, 2, p. 93-98.

91. Kono Y, Arai K, Sentsui H, et al. Protection against bovine leukemia virus infection in sheep by active and passive immunization. Jap. J. Vet. Sci. 1986, 48, 1, p. 117-125.

92. Long C.W, Henderson L.E, Oroszlan S. Isolation and characterization of low molecular weight DNA binding propeins from retroviruses. Virology 1980, 104, p. 491-496.

93. Mackett M, Smith G.L, Moss B. General method for productionand selection of infections vaccinia virus recombinants expressing foreign genes. J. Viral, 1982, v. 49, № 3, p. 857-864.

94. Mackett M, Smith G.L, Moss B. Vaccinia virus: a selectableeukaryotic cloning and expression vector. Proc. Natl. Acad. Sci. VSA, 1982, v. 79, № 18, p. 7415-7419.

95. Mammerickx M, Cormann A, Burny A, et al. Eradication of enzootic bovine leukosis based in the detection of the disease by the GP immunodiffusion test. Ann. Rech. Vet. 1978, 9, p. 885-894.

96. Mamoun R.Z, Astier-Gin T., Kettmann R. The pX region of thebovine leukemia virus is transcribed as a 2,1-kilobase mRNA. J.Virol 1985, 54, 2, p. 625-629.

97. Mamoun R.Z, Morisson M, Rebeyrotte N. Sequence variability ofbovine leukemia virus env gene and its relevance to the structure and antigenicity of the glicoprotins. J. Virol. 1990, 64, 9, p. 4180-4188.

98. Mansky L.M. The primary nucleotide sequence of the bovine leukemia virus RNA hackaging signal can influence efficient RNA packaging and virus replication. Virol.,2002, 301(2), 272-280

99. Maruyama K., Fukushina T., Mochizuki S. Cross-reactive antibodies to BLV and in bovine and human hosts with retrovitus infection. Vete. Immund. Immunopathd., 1989, 22, 3, p. 265273.

100. McDonald H.C., Graves D.C., Ferrer J.F. Isolation and characterization of an antigen of bovine C-type virus. Cancer Res. 1976, 26, p. 1251-1257.

101. Miller J.M., Van der Maaten J.M., Schmerr M.J.F. Vaccination ofcattle with binary ethyleneimine-treated bovine leukemia virus. Am. J. Vet. Res. 1982, 44, p. 64-67.

102. Miller J.M., Van der Maaten M.J. Infectivity test of secretions andexcretions from cattle infected with bovine leukemia virus. J.Natl. Cancer Inst. 1979, 62, 2, p. 425-429.

103. Miller J.M., Van der Maaten M.J., Schmeer M.J.F. Vaccinationwith glycosidase-treated glicoprotein antigen does not prevent bovine leukemia virus infection in cattle. 5th Int. Symp. on Bovine leukosis. Tubingen, (O.C.Straub ed.) 1984, p. 507513.

104. Moss B. Replication of poxviruses. J. Virology, v. 51, 1985, p. 685705.

105. Moss B., Flexner C. Vaccinia virus expression vertors. Annu. Rev.1.munol. Vol 5. Palo Alto. Calif., 1987, p. 305-324.

106. Moss B., Rosenblum N., Garon F. Glycoprotein synthesis in cellinfected with vaccinia virus Virology, 1973, vol. 55, p. 143156.

107. Nalkano E., Panicali D., Paoletti E. Molecular genetics of vacciniavirus: Demonstration of market rescue.- Proc. Natl. Acad. Sei., 1982, vol. 79, p. 1593-1596.

108. Ohishi K., Maruyama T., Shida H., et al. Immunogenicity of a recombinant vaccinia virus expressing envelope a glycoproteinof bovine leukemia virus. Vaccine 1988, 6, p. 428-432.

109. Ohishi K, Suzuki H, Maruyma T, et al. Induction of neutralizingantibodies against bovine leukemia virus in rabbing bovine leukemia virus envelope glycoprotein. Am. J. Vet. Res. 1990, 51,8,p. 1170-1173.

110. Oie M, Ichihachi Y. Characterization of vaccinia polypeptides. J.

111. Virology, v. 113. 1981, p. 263-276.

112. Oie M, Ichihachi Y. Modification of vaccinia virus penetrationproteins analyzed by monoclonal antibodies. J.Virology. v. 157, 1987, p. 449-460.

113. Onuma M, Hodatsu T, Yamamoto S, et al. Protection by vaccination against bovine leukemia virus infection in sheep. Am. J. Vet. Res. 1984, 45, p. 1212-1215.

114. Oroszlan S, Miller J.M, Van der Maaten M.J. Characteristics ofthe major internal protein and RNA-dependent DNA polymerase of bovine leukemia virus. J. Gen. Virol. 1975, 29, p. 305-314.

115. Oroszlan S, Sarngadnaran M.G, Copeland T.D. et al. Primarystructure analysis of the major internal protein p 24 of human type CT-cell leukemia virus. Proc. Natl. Acad. Sci. VSA,1982, 72, p. 1291-1294.

116. Paez E, Dallo S, Esterban M. Virus attenuation and identificationof structural proteins of vaccinia virus that are selectively modified during virul persistence. J. Virol, v. 61, 1987, p. 2642-2647.

117. Panicali D, Paoletti E. Construction of poxviruses as a cloningvectors: insertion of the thymidine kinase gene from herpes simplex virus into the DNA of infection vaccinia virus. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1982, v. 79, № 12, p. 4927-4931.

118. Parfanovich M.I, Zhdanov V.M, Lazarenko A.A, et al. The possibility of specific protection against bovine leukaemia virus infection and bovine leukaemia inaktivated BLV. Brit. Med. J, 1983, 139, 2, p. 137-146.

119. Patrascu I.V, Coman S, Sandu I, et al. Mihailescu D. Specificprotection against bovine leukemia virus infection conferredon cattle by Romanian inactivated vaccine BL-VACC-RO. Rev. Roum. Med. Virol. 1980, 31, p. 95-102.

120. Perkus M.E., Piccine A., Lipinskas B.R., Podetti E. Recombinantvaccinia virus: immunization against multiple pattogens. Scince, 1985, v. 229, p. 981-984.

121. Rice N., Stephens R., Burny A. The gag and pol genes of bovineleukaemia virus, nucleotide sequence and analysis. J. Virology, 1985, 142, № 2, p. 357-377.

122. Rice N.R., Simek S.L., Dobois G.C., et al. Expression of the bovineleukaemia virus X region in virus-infected cells. J.Virol. 1987, 61, 5, p. 1577-1585.

123. Robert-Guroff M., Gallo R.C. HTLV: the familly of human T lymphotropic retroviruses and their role in leukemia and AIDS. Biochem. and Mol. Epidemiol. Cancer: Proc. Abbott Lab.-UCLA Symp. N.Y. 1986. p. 293-301.

124. Roberts D.H., Lucas M.H., Sands, et al. Further studies on the useof the BL20 cell line as a vaccine against bovine leukaemia virus infection. 5th Int. Symp. on bovine leukosis. Tubingen, 19-21 Oct. 1982 (O.C.Straub, ed.) 1984, p. 481-492.

125. Rodrigues J.F., Esterban M. Mapping and nucleotide sequence ofthe vaccinia virus gene that encodes a 14-kilodalton fusion protein. J.Virol, v. 61, 1987, p. 3550-3554.

126. Rosen C.A., Sodroski J.G., Willems L., et al. The 3'region of bovine leukaemia virus gerome encodes a trans-activator protein. EMBO journal 1986, 5, 10, p. 2585-2589.

127. Rosenthal S., Drescher B., Weber S. Nucleotide sequece analysis ofthe 3' half of genome of bovine leukaemia virus grown in FLK cells. Acta virol. 1990, 34, 1, p. 1-10.

128. Rossler H., Burkhardt H., Rosenthal S., et al. Einflub verschiedener

129. Kultivierungs edingungen auf die expression des bovine leukosevirus in permanent infizierten fötalen lammernieren -Zellinien. Arch. exp. Veterinarmed. 1986, 40, 3, p. 377-386.

130. Sagata N., Yasunaga T,m Tsuzuku-Kawamura J., et al. Completenucleotide sequence of the genom of bovine leukaemia virus: its evolutionary relationship to other retroviruses. Proc. Nat. Acad. Sei. USA. Biol. Sei. 1985, 82, 3, p. 677-681.

131. Schultz A.M., Copeland T.D., Oroszlan S. The envelope proteins ofbovine leukaemia virus: purification and sequence analysis. Virology 1984, 135, 2, p. 417-427.

132. Scida H., Tochikura T., Sato T., et al. Effects of the recombinantvaccinia viruses that express HTLY-I enveljpe gene on HTLV-I infection. EMBO Journal 1987, 6, 11, p. 3379-3384.

133. Taylog J, Paoletti E. Poxviruses as eukaryotic cloning and expression vectors. Future medical and veterinary vaccines Mo v. Front. Ver. Immund - Basel, etc, 1988, p. 197-217.

134. Theilen G.H, Ruppanner R.V, Miller J.M, et al. Continuing studies using non-viral antigen to protect cattle against bovine leukemia virus infection. 5th Int. Symp. on bovine leukosis. Tubingen. 19-21 Oct. 1982 (O.C.Straub, ed.) 1984, p. 493500.

135. Theilen G.H. Method of protecting cattle and sheep against bovineleukemia virus and vaccines for use there in. Пат. США, заявлен 3.11.80. № 205.062, опуб. 6.04.82. № 4.323.5.55.

136. Thiry L, Sprecher-Goldberger S, Jacquemin et al. Bovine leukemia virus-related antigens in lymphocyte cultures infected with AIDS-associated viruses. Science 1985, 227, 4693, p. 1482-1484.

137. Uckert W, Hertling I, Kraft R, et al. Structural components of bovine leukemia virus: further biochemical and immunological characterization of major structural proteins and glucoproteins. Virus Res. 1986, 4, 4, p. 343-356.

138. Uckert W, Wunderlich V, Gysdael, et al. Bovine leukemia virus

139. BLV) a structural model based on ctmical crosslinking studies. Virology 1984, 133, p. 386-392.

140. Willems L, Bruck C, Portetelle D, et al. Expression of a cDNAclone corresponding to the long open reading frame (XBL-1) of bovine leukemia virus. Virology 1987a, 160, 1, p. 55-59.

141. Willems L, Gao C, Kettmann R, Burny A. Expression of the pXproducts of the bovine leukemia virus. Arch. int. physiol. et biochem. 1987b, Gatei M.H, Good M.F, 95, 5, p. 252.

142. Wilier J, Haas L, Kaaden O-R. Isolation of infectious proviral bovine leukemia virus DNA from productively infected cells. J. Veter. Med. B, 1987, 3, 4, 9, p. 670-678.

143. Wuu K.D, Graves D.C, Ferrer J.F. Inhibition of the reverse transcriptase of bovine leukemia virus by sera from leukemic cattle and immunological characterization of the enzyme. Cancer Res. 1977, 37, p. 1438-1442.

144. Yoshinaka Y, Katoh I, Copeland T.D. et al. Bovine leukemia virusproteas: purification, chimical analysis, and in vitro processing of gag precursor polyproteins.- J. Virol, 1986, vol. 57,3, p. 826-832.

145. Zajac V., Ban J., Altaner C., et al. Bovine leukemia virus: recloning of specific DNA fragments. Neoplasma 1986, 33, 5, p. 545550.