Прогностический потенциал тетраспанинов и протеаз экзосом при колоректальном раке тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.12, кандидат наук Замбалова Елена Анатольевна

• Замбалова Елена Анатольевна
• кандидат наук
• 2020

Оглавление диссертации кандидат наук Замбалова Елена Анатольевна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Клинико-эпидемиологические аспекты колоректального рака

1.2 Общая характеристика экзосом

1.3 Тетраспанины экзосом

1.4 Тетраспанины СБ151 и Тврап8 и их роль в канцерогенезе

1.5 Протеазы экзосом

1.6 ADAM10 и ADAM17 и их роль в канцерогенезе

1.7 Роль тканевых и экзосомальных ММР и ЕММРЯШ в канцерогенезе

1.8 Тетраспанин-неассоциированные 20S протеасомы

1.9 Экзосомальные белки как перспективные прогностические факторы при злокачественных опухолях

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Клиническая характеристика больных

2.2 Материал исследования

2.3. Методы исследования

2.3.1 Выделение экзосом из плазмы крови

2.3.2 Количественная оценка белка

2.3.3 Типирование экзосом плазмы крови

2.3.4 Определение уровня суммы альфа и бета субъединиц 20 Б протеасом в экзосомах

2.3.5 Анализ субпопуляций ADAM10/ADAM17 экзосом

2.3.6 Анализ субпопуляций ММР9/MMP2/EMMPRIN экзосом

2.3.7 Анализ субпопуляций тетраспанинов Тврап8/СВ151 экзосом

2.3.8 Оценка общей и безрецидивной выживаемости

2.4. Методы статистической обработки результатов исследования

ГЛАВА 3 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1 Характеристика экзосом плазмы крови

3.2 Субпопуляции тетраспанинов и протеаз в экзосомах плазмы крови больных ПТК и больных КРР

3.3 Субпопуляционный состав экзосом и содержание тетраспанинов Тврап8 и СЭ151 в экзосомах во взаимосвязи с клинико-морфологическими параметрами больных КРР

3.4 Уровень 20Б протеасом и металлопротеиназ и их связь с клинико-морфологическими параметрами больных КРР

3.5 Взаимосвязь экзосомальных тетраспанинов и протеаз у больных ПТК и больных КРР

3.6 Создание математической модели прогнозирования онкологического риска у больных ПТК с учетом особенностей субпопуляций тетраспанинов и протеаз экзосом

3.7 Дополнительные факторы прогноза местно-распространенного колоректального рака, а также факторы риска гематогенного метастазирования

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

КРР - колоректальный рак ПТК - полипы толстой кишки

ADAM10 и ADAM17 - a disintegrin And Metalloproteinase - протеазы семейства ADAM с функцией шеддаз

EGFR1 - рецептор эпидермального фактора роста 1 типа

EMMPRIN - extracellular matrix metallo-proteinase inducer - внеклеточный

индуктор матриксных металлопротеназ

FGF2 - фактор роста фибробластов-2

HER2 - рецептор эпидермального фактора роста 2 типа

HGF - фактор роста гепатоцитов

HIF-1 - фактор, индуцируемый гипоксией-1

HSPs - белки теплового шока

IGFBP - белок, связывающий инсулиноподобный фактор роста IGF-I - инсулиноподобный фактор роста

iRHOM2 - некаталитическая внутримембранная ромбоидная протеаза-2

MMPs - matrix metalloproteinases - матриксные металлопротеиназы

SDF1 - фактор стромальных клеток-1

TGF-a - трансформирующий фактор роста альфа

TGFP - трансформирующий фактор роста бета

TNFa - фактор некроза опухолей альфа

Tspan8 - тетраспанин-8

uPA - активатор плазминогена урокиназного типа

VEGF - фактор роста эндотелия сосудов

VEGFR1 - рецептор фактора роста эндотелия сосудов 1 типа

ВВЕДЕНИЕ

Колоректальный рак (КРР) является третьей по распространенности онкологической патологией в мире и занимает второе место в структуре смертности от злокачественных новообразований среди мужчин и женщин [85]. В общей структуре онкологической заболеваемости Российской Федерации рак ободочной и прямой кишки составляет 11,9% и занимает третье место среди мужского и женского населения [6]. Актуальна проблема КРР и для отдельных областей РФ. Так, например, в Томской области в течение 2005 - 2015 гг. число больных колоректальным раком увеличилось на 39,9% [18].

Выживаемость больных КРР в значительной степени связана со стадией заболевания на момент выявления. Пятилетняя выживаемость для больных КРР, диагностированных на ранней стадии, составляет более 90%, при диагностике на поздней стадии составляет приблизительно 7%. Статистические данные показали, что в 2018 году было зарегистрировано не менее 1,8 миллиона новых случаев КРР и 0,86 миллиона связанных со смертельным исходом [104].

Почти в 20% случаев КРР изначально манифестирует как метастатический. Примерно у одной трети пациентов с неметастатическим КРР в течение трех лет возникают рецидивы опухоли или развиваются гематогенные метастазы (чаще в печень) [100].

В настоящее время существует несколько методологий скрининга, основанных на эндоскопическом анализе слизистых оболочек с последующей биопсией и анализом кала на скрытую кровь. Эти методы имеют ограничения: эндоскопические исследования инвазивны, дороги, связаны с дискомфортом пациентов и процедурными рисками, также его точность зависит от уровня квалификации и опыта оператора, в то время как тест на скрытую кровь в кале -неинвазивен и доступен, но обладает недостаточной чувствительностью и

специфичностью для самостоятельного использования в качестве диагностического теста [54; 116; 181].

Нередко при колоноскопии или рентгенологическом обследовании толстой кишки обнаруживаются полипы, которые являются наиболее значимым предраковым заболеванием, причем рак ободочной и прямой кишки в 90% случаев развивается из аденоматозных полипов.

Согласно современным рекомендациям, все железистые полипы подлежат удалению. Несмотря на то, что полипэктомия позволяет снизить заболеваемость раком толстой кишки на 20%, она не гарантирует отсутствия рецидива ПТК и развития в дальнейшем злокачественных опухолей. Кроме того, среди оперированных по поводу аденом толстой кишки в 6 раз чаще развивается КРР, чем в общей популяции [38]. Прогнозирование риска малигнизации у больных с полипами толстой кишки в анамнезе является важной задачей современной онкологии.

Сывороточные биомаркеры, такие как СЕЛ (раково-эмбриональный антиген) и CA19-9 (углеводный антиген 19-9), считаются одними из лучших доступных прогностических маркеров для КРР [29; 181]. Однако низкая чувствительность и низкая специфичность этих маркеров влияет на их использование в качестве биомаркеров для ранней диагностики, их уровень экспрессии рассматривается только для пострезекционного мониторинга пациентов с уже диагностированным раком [30; 62; 160].

Некоторые исследования предлагают циркулирующие опухолевые клетки в качестве ценных индикаторов прогрессирования злокачественных новообразований и прогностических факторов общей и безрецидивной выживаемости больных КРР [170]. Тем не менее, они крайне редки в крови и имеют короткий срок жизни, существуют определенные дискуссионные моменты в идентификации фенотипа циркулирующих опухолевых клеток [37].

Последние исследования показали, что потенциальные биомаркеры, ранее обнаруженные при жидкой биопсии на основе анализа сыворотки и мочи, действительно сконцентрированы в экзосомах [120]. Следовательно, выделение экзосом из биологических жидкостей и анализ их содержания может иметь огромный диагностический и прогностический потенциал.

Экзосомы представляют собой наноразмерные (30-100 нм) везикулярные структуры с мембрано-связанными фосфолипидами, которые относятся к большой популяции внеклеточных везикул, конститутивно высвобождаемой клетками для обеспечения межклеточной коммуникации [52; 83; 106]. Экзосомы несут сложный биомолекулярный груз, который включает белки, пептиды, липиды и нуклеиновые кислоты, и который способны передавать клеткам-реципиентам, таким образом происходит обмен между соседними клетками в микроокружении опухоли или перемещение в сосудистом русле для достижения отдаленных участков-мишеней со следующим изменением физиологических функций клеток-реципиентов [91]. Экзосомы выделяются из многих типов клеток, включая эритроциты, тромбоциты, лимфоциты, дендритные клетки и опухолевые клетки [171].

Показано, что рост опухолей, ангиогенез, ремоделирование внеклеточного матрикса, метастазирование и иммунный надзор стимулируются экзосомами [76; 93]. Экзосомы являются ключевыми медиаторами межклеточной коммуникации, при злокачественных новообразованиях они обеспечивают средства для поддержания агрессивности опухоли [90].

Результаты проведенных исследований позволили установить экзосомы и их специфическое содержимое в качестве ключевых регуляторов неоангиогенеза опухоли [69], резистентности к терапии [108] и формирования метастатических ниш [105]. Исследования экзосом, полученных из плазмы пациентов со злокачественными новообразованиями, показывают, что они отражают молекулярное и генетическое содержание родительских опухолевых клеток.

Многие исследования по применению экзосом в клинической практике сосредоточены на микроРНК, однако существуют ограничения в отношении экзосомных микроРНК как прогностических маркеров злокачественных опухолей.

В настоящее время направление исследований смещается в сторону изучения белков, т.к. активно развиваются протеомные технологии и аналитические средства для изучения экзосомальных протеинов, выделенных из различных биологических жидкостей. Белковый состав экзосом разнообразен и включает в себя общие везикулярные и специфические белки. Тетраспанины составляют 12% всего белкового состава экзосом, а CD9, CD63, CD81 являются экзосомальными биомаркерами. Другими важными тетраспанинами являются Tspan8 и CD151. Около 32% белкового состава экзосом составляют ферменты [103]. Важную роль в функциональной активности внеклеточных везикул играют протеазы, ферменты класса гидролаз. Выделяют тетраспанин-ассоциированные, тетраспанин-неассоциированные протеазы, а также протеазы с неизвестной локализацией в экзосомах [167]. К тетраспанин-ассоциированным протеазам относятся ADAM10, ADAM17 и матриксные металопротеиназы (MMPs). Среди внеклеточных циркулирующих протеасом выделяют два пула - свободный и экзосомальный. 20S протеасомы включают в группу тетраспанин-неассоциированных экзосомальных протеаз. Известно, что концентрации экстраклеточных протеасом в плазме крови при патологических состояниях повышается, поэтому они могут рассматриваться как дополнительные биомаркеры [133].

Большинство доступных в настоящее время исследований основаны на изучениии клеточных культур in vitro. На данный момент увеличивается количество исследований экзосом, выделенных их различных биологических жидкостей у онкологических больных, однако информация о биологических функциях экзосомальных тетраспанинов и протеаз экзосом плазмы крови

ограничена, и их клиническое значение при КРР остается недостаточно изученным.

Таким образом, рост заболеваемости КРР, высокие показатели смертности, сложность проведения скрининга, необходимость прогнозирования онкологического риска у больных с полипами толстой кишки, значительная доля метастатического КРР в общей структуре рака, а также значимость протеаз и тетраспанинов экзосом в патогенезе рака на примере клеточных культур обуславливает актуальность поиска факторов риска развития КРР у больных с полипами и дополнительных факторов прогноза местно-распространенного КРР.

Цель: изучить прогностический потенциал тетраспанинов и протеаз экзосом плазмы крови при колоректальном раке с оценкой их роли в инвазии и метастазировании.

Задачи исследования:

1. Выявить различия в субпопуляциях тетраспанинов, тетраспанин-ассоциированных и тетраспанин-неассооциированных протеаз экзосом между больными с полипами толстой кишки и больными колоректальным раком.

2. Оценить связь субпопуляционного состава, популяций тетраспанинов (Tspan8, CD151) и протеаз (ЛБЛМ10, ЛБЛМ17, ММР2, ММР9, EMMPRIN, 20S протеасом) в экзосомах плазмы крови больных колоректальным раком с клинико-морфологическими параметрами.

3. Выявить взаимосвязи между уровнем тетраспанинов и протеаз в экзосомах плазмы крови у больных с полипами толстой кишки и у больных колоректальным раком.

4. Разработать математическую модель прогнозирования онкологического риска у больных полипами толстой кишки с учетом особенностей субпопуляций тетраспанинов и протеаз экзосом.

5. Выявить дополнительные, ассоциированные с белками экзосом плазмы крови, факторы прогноза местно-распространенного колоректального рака.

Научная новизна

Впервые выявлены различия в уровне 20S протеасом, А0АМ10+А0АМ17-, ММР9-позитивных и трипл-позитивных экзосом плазмы крови, экспрессирующих как ММР9, так и ММР2 и ЕММРКШ, у больных КРР по сравнению с больными полипами толстой кишки, что свидетельствует о возможности их применения для прогнозирования онкологического риска.

У больных КРР впервые выявлена взаимосвязь CD9/СD24 субпопуляции, СЭ151+ субпопуляции в циркулирующих экзосомах и экзосомальных 20S протеасом с распространенностью опухолевого процесса, что показывает их значимость в прогрессии КРР.

Впервые выявлены дополнительные прогностические факторы течения местно-распространенного колоректального рака, ассоциированные с уровнем 20Б протеасом и ММР9+, АБАМ10+АБАМ17- и ММР9+ММР2+БММРК1№ субпопуляций экзосом.

Теоретическая и практическая значимость

Получены фундаментальные данные о взаимосвязях между уровнем тетраспанинов и протеаз в экзосомах у больных колоректальным раком: между субпопуляциями Tspan8+CD151+ и А0АМ10+А0АМ17+, между субпопуляцией Тврап8-СВ151+ и ММР9+ММР2+БММРШК- экзосом. Кроме того, уровень АОАМ-протеаз в экзосомах был связан с уровнем матриксных металлопротеиназ, что свидетельствует о тесных взаимосвязях тетраспанинов и тетраспанин-ассоциированных протеаз в экзосомах при КРР, в то время как у больных с полипами толстой кишки экзосомальные протеазы экспрессировались независимо от тетраспанинов.

Получены фундаментальные данные об особенностях содержания 20S протеасом, СВ9+СБ24+, ММР9+ММР2+ЕММРШ№ и СБ151+ субпопуляций с учетом межполовых различий, а также во взаимосвязи с распространенностью опухолевого процесса и локализацией опухоли у больных КРР.

Для прогнозирования онкологического риска у больных с полипами толстой кишки значимыми являются уровень 20 S протеасом, ММР9+ и MMP9+MMP2+EMMPR.IN+ субпопуляций экзосом.

Выявленные дополнительные факторы, ассоциированные с уровнем 20S протеасом и MMP9+, ADAM10+ADAM17- и MMP9+MMP2+EMMPRIN+ субпопуляций экзосом позволяют уточнить прогноз у больных с местно-распространенным колоректальным раком.

Положения, выносимые на защиту

1. Уровень 20S протеасом, MMP9+, MMP9+MMP2+EMMPRIN+ субпопуляций экзосом связан с риском малигнизации аденоматозных полипов толстой кишки.

2. У больных КРР существует связь уровня экзосомальных 20S протеасом, CD151+, CD9+CD24+ экзосом с распространенностью опухолевого процесса и локализацией первичной опухоли, а также ассоциированные с полом различия в уровне субпопуляций Tspan8/CD151 и MMP9+MMP2+EMMPRIN+ циркулирующих экзосом.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Прогностический потенциал тетраспанинов и протеаз экзосом при колоректальном раке»

Апробация работы

Результаты исследований докладывались и обсуждались на IV Петербургском международном онкологическом форуме «Белые ночи - 2018» (Санкт-Петербург, 2018), XXII Международном Симпозиуме имени Чарльза Гейдельбергера по изучению рака (Томск, 2018), XV международной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Перспективы развития фундаментальных наук» (Томск, 2019), Российской научно-практической конференции, посвященной 40-летию НИИ онкологии Томского НИМЦ

«Фундаментальная и клиническая онкология: достижения и перспективы развития» (Томск, 2019).

Работа выполнена при поддержке Российского фонда фундаментальных исследований совместно с Администрацией Томской области: грант №18-415703006 р_мол_а «Тетраспанины и протеазы экзосом как факторы прогноза и предикторы гематогенного метастазирования при колоректальном раке» (руководитель - Е.А. Замбалова).

Публикации

По теме опубликовано 12 научных работ, в том числе 5 статей в журналах, рекомендованных Высшей аттестационной комиссией Российской Федерации.

Личный вклад автора

Личный вклад автора состоит в изучении и анализе литературы по теме диссертационного исследования, в непосредственном участии в выделении экзосом плазмы крови больных колоректальным раком и больных с полипами толстой кишки, типировании экзосом, изучении субпопуляций экзосомальных тетраспанинов и протеаз методами проточной цитометрии и Вестерн блоттинга, оценке результатов исследования, их обработке, интерпретации, а также подготовке научных публикаций.

Структура и объем диссертации

Диссертационная работа изложена на 119 страницах машинописного текста и состоит из введения, четырех глав, заключения, выводов и списка использованной литературы. Работа иллюстрирована 15 таблицами и 23 рисунками. Библиографический указатель содержит 191 источник, из них 19 отечественных и 172 зарубежных.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Клинико-эпидемиологические аспекты колоректального рака

Колоректальный рак (КРР) занимает лидирующие позиции в распространенности, являясь во всем мире третьим среди онкологических заболеваний по частоте у мужчин и вторым по частоте у женщин [15]. Высокий уровень заболеваемости КРР более характерен для индустриализованных стран с высоким уровнем доходов: высокие ее показатели регистрируются в Америке, Австралии, Европе и Южной Корее, средние показатели - в Латинской Америке и низкие - в Африке и Азии [36].

В Российской Федерации также отмечается достаточно высокий уровень заболеваемости и смертности от КРР. В общей структуре онкологической заболеваемости рак толстой кишки составляет 11,9%. Среди мужчин этот показатель достигает 12,1%, занимая третье место после злокачественных новообразований дыхательных путей (16,9%) и предстательной железы (14,9 %). Среди женского населения КРР составляет 11,7% и занимает третье место после гинекологического рака (20,9%) и рака кожи (14,6%). В 2018 году в России зарегистрировано более 18 тысяч летальных случаев от КРР [6].

Проблема КРР также актуальна и для регионов РФ, например, в Томской области данная патология занимает второе место (без учета рака кожи). В течение 2005 - 2015 гг. число больных колоректальным раком в Томской области увеличилось на 39,9 %. Наибольшие показатели заболеваемости регистрируются в возрасте старше 55 лет. Средний возраст заболевших в 2015 г. составил 56,3 года, таким образом, КРР в Томской области болеет преимущественно трудоспособное активное население, что, несомненно влияет на социально-экономическое положение региона [18].

В настоящее время достаточно четко сформулированы факторы риска развития КРР, к ним, в первую очередь, относится генетическая предрасположенность, также определены патологические состояния, при которых КРР возникает гораздо чаще, чем в здоровой популяции. Также к факторам риска КРР относят: возраст старше 50 лет, курение, злоупотребление алкоголем, избыточное употребление красного мяса, гиподинамия, ожирение [141].

Наиболее значимым предраковым заболеванием являются полипы толстой кишки (ПТК), причем рак ободочной и прямой кишки в 90% случаев развивается из аденоматозных полипов, риск малигнизации других гистологических форм ПТК кратно ниже, в частности, малигнизация гиперпластических полипов наблюдается примерно в 1% случаев. Однако вопрос об уровне риска озлокачествления аденоматозных ПТК остается предметом дискуссий. Считается, что малигнизация железистых полипов наступает в среднем в 10%, а ворсинчатых — в 23-50% случаев. Такой разброс обусловлен неоднородностью контингента больных ПТК, включаемых в исследования. Неблагоприятными факторами являются множественные полипы, которые малигнизируются до 20 %, возраст - у пациентов старше 60 лет риск достигает 6-8%, размеры новообразования - при аденомах, диаметром 1 -2 см злокачественная трансформация наблюдается в 2050% и ряд других.

Согласно современным рекомендациям, все железистые полипы подлежат удалению. Несмотря на то, что удаление полипов позволяет снизить заболеваемость КРР на 20%, полипэктомия не гарантирует отсутствия рецидива ПТК и развития в дальнейшем злокачественных опухолей. Кроме того, среди оперированных по поводу аденом толстой кишки в 6 раз чаще развивается рак ободочной и толстой кишки, чем в общей популяции [38; 116]. Прогнозирование онкологического риска у больных с полипами толстой кишки в анамнезе явилось одной из задач нашего исследования.

В программу скрининга КРР входят колоноскопия и тест на скрытую кровь в кале или иммуноцитохимический тест кала. Инвазивность, сложность, продолжительность эндоскопического исследования, низкая чувствительность теста, трудновыполнимая подготовка к анализу кала делают проведение скрининга трудновыполнимым. Ранние стадии рака толстой кишки обычно бессимптомны или малосимптомны, до 70% и более больных поступают в стационар на поздних стадиях заболевания [10].

Для колоректального рака характерно лимфогенное метастазирование, а также гематогенное метастазирование в печень. Около 20-22% колоректальных карцином изначально манифестируют как метастатический колоректальный рак [100].

Таким образом, рост заболеваемости и смертности КРР, высокий процент метастатических форм, сложность проведения скрининга, необходимость прогнозирования риска малигнизации у больных с полипами толстой кишки делают актуальным поиск неинвазивных прогностических маркеров КРР. В настоящее время большое значение придают циркулирующим внеклеточным везикулам как перспективным объектам для жидкостной биопсии опухолей.

1.2 Общая характеристика экзосом

Экзосомы представляют собой мембранные везикулы размером 30-100 нанометров, секретируемые во внеклеточное пространство различными типами клеток, в том числе и опухолевыми [126]. Они обнаружены во многих биологических жидкостях, таких как плазма, сыворотка крови, моча, слюна, грудное молоко, спинномозговая жидкость, бронхоальвелярный лаваж, а также при патологических выпотах (например, асцит) [139]. Экзосомы участвуют во многих физиологических и патологических процессах, таких как межклеточная

передача сигналов, ремоделирование стромы, индукция ангиогенеза, участие в процессе метастазировании и химиорезистентности [3].

Белковый состав экзосом разнообразен и включает в себя общие везикулярные белки и специфические, которые отражают их происхождение из определенного типа клеток (рисунок 1).

Белки экзосом

I

Рисунок 1 - Тетраспанины, тетраспанин-ассоциированные и тетраспанин-

неассоциированные белки экзосом

К общим белкам относятся: белки высококонсервативного семейства тетраспанинов, необходимые для связывания и транспортировки микроРНК (CD63, CD81 и CD9), Alix и Tsg101 - белки для транспортировки и биогенеза экзосом, интегрины, белки теплового шока HSP60, HSP70, HSP90. Экзосомы богаты белками цитоскелета (F- и G-актин) и актинсвязывающими белками

(кофилин-1, профилин-1, тубулины), несут ГТФ-азы семейства Rab и аннексины, которые способствуют слиянию мембран [134].

1.3 Тетраспанины экзосом

Тетраспанины - семейство мембранных белков, содержащих 4 трансмембранных фрагмента, составляют 12% белкового состава экзосом. Тетраспанины CD9, CD63, CD81 являются экзосомальными биомаркерами [167]. Они содержат 4 трансмембранных фрагмента и две внеклеточные петли - ЕС1 -короткую и ЕС2-длинную, именно последняя отвечает за взаимодействие с другими белками (рисунок 2).

МН2' 'СООН

Рисунок 2 - Структура тетраспанинов: ЕС1 - короткая внеклеточная петля, ЕС2 -длинная внеклеточная петля, TD - трансмембранные домены, линиями отмечены дисульфидные мосты, связывающие цистеин-обогащенные районы

Тетраспанины формируют так называемые богатые тетраспанинами микродомены, взаимодействующие с большим количеством трансмембранных и

цитозольных сигнальных белков. Их основными партнерами являются сами тетраспанины, интегрины, рецепторы адгезии, сигнальные рецепторы, матриксные металлопротеиназы [157]. Микродомены цитоплазматической мембраны, обогащенные тетраспанинами, необходимы для внутриклеточной передачи сигналов и регулирования многих процессов [156].

Они, взаимодействуя с различными молекулами и формируя надмолекулярные комплексы, участвуют в биогенезе экзосом, сортировке экзосомальных белков, клеточной адгезии, поглощении экзосом клетками-реципиентами и презентации экзосомами антигенов с последующим иммунным ответом [17]. В крови здоровых доноров наиболее часто встречаются экзосомы с экспрессией СЭ9 и СЭ24, секретируемые эндотелиоцитами и клетками крови. При злокачественных новообразованиях происходит перераспределение субпопуляций экзосом. Так, например, при колоректальном раке увеличивается доля экзосом, секретированных эндотелиоцитами и тканевыми макрофагами (СБ9, СБ81, СБ63), а доля экзосом с экспрессией СБ24 снижается [53].

1.4 Тетраспанины СБ151 и Тэрап8 и их роль в канцерогенезе

Другими важными тетраспанинами являются Тврап8 и СЭ151. Известно, что они способствуют метастазированию, и их нокдаун влияет на метастатический потенциал аденокарциномы поджелудочной железы крыс [168].

СБ151 (ОР-27, ТБРЛК-24) представляет собой белок плазматической мембраны, который образует тетраспаниновые сети с интегринами (а3р1, абр1, а7р1 и абр4), внутриклеточными сигнальными молекулами (Р14К и РКС), белками суперсемейства иммуноглобулинов и другими тетраспанинами, такими как CD9, CD81 и CD63 [31]. Основными функциями СБ151 являются поддержание целостности эпителиальных клеток, агрегация тромбоцитов, регуляция слияния мембран, подвижность клеток, а также участие в ангиогенезе и

метастазировании опухолей [46]. Чаще всего CD151 экспрессируется в эндотелиальных клетках и тромбоцитах, а также гиперэкспрессируется в ряде злокачественных опухолей (рак предстательной железы, рак желудка, рак эндометрия и немелкоклеточный рак легкого) [20; 46]. CD151 располагается внутриклеточно в эндосомальных и лизосомальных везикулах, следовательно, он может высвобождаться из клеток в составе экзосом. Действительно, было показано, что при раке предстательной железы высвобождаются экзосомы, обогащенные CD151 [140]. Tspan8 является одним из членов семейства тетраспанинов, который также образует тетраспаниновые сети с разными мембранными белками, например, интегринами. Tspan8 обнаружен в экзосомах, секретируемых клетками карциномы поджелудочной железы и колоректальных карцином [124; 150]. Ассоциация Tspan8 и a6ß4 активирует паксиллин и FAK, тем самым поддерживая клеточную подвижность.

CD151 в сочетании с TGF-ß способствует инвазии и метастазированию посредством активации сигнальных путей Smad2/3, c-Akt, Erk1/2, JNK, JUN и MMP-9 [153]. CD151 усиливает пролиферацию кератиноцитов путем активации транскрипционного фактора STAT3, регулятора клеточной пролиферации и апоптоза [152]. Нокдаун CD151 снижает интегрин-опосредованную миграцию и инвазию клеток через FAK (фокально адгезивную киназу) и Racl-опосредованную сигнализацию [20]. CD151 связан с ламинин-связывающими интегринами и участвует в процессах клеточной миграции через активацию Ras, Rac1, Cdc42 [154]. Участие CD151 в регуляции клеточной подвижности обусловлено его воздействием на протеазы. Так в ассоциации с ММР14 он регулирует шеддазную активность ADAM 10 и ADAM17 [16]. Выявлено, что гиперэкспрессия CD151 в опухолевой ткани коррелирует с низкой выживаемостью онкологических больных [97].

Экспрессия Tspan8 коррелирует с метастатическим потенциалом карциномы печени, толстой кишки и поджелудочной железы [60]. Ассоциация

Tspan8 и абр4 активирует паксиллин и FAK, тем самым поддерживая клеточную подвижность. При колоректальном раке Tspan8 обладает, по-видимому, проинвазивным потенциалом, взаимодействуя с абр4-интегрином, протеинкиназой С, E-кадгерином, клаудином-7, EpCAM и CD44 [87]. На ксеногенной модели мышей, показано, что специфические антитела к Tspan8 уменьшают подвижность клеток, блокируют ангиогенез опухоли in vivo и ингибируют рост колоректального рака [61]. Таким образом, Tspan8 ответственен за подвижность клеток, а CD151 вносит вклад в адгезию и деградацию матрикса, участвуя в метастазировании опухолей [191].

Экзосомальные CD151 и Tspan8 взаимодействуют с SDF1 (stromal cell-derived factorl), CXCR4 (C-X-C chemokine receptor type 4), VEGFR1, что влияет на формирование лимфогенных метастазов. CD151- и Tspan8-позитивные экзосомы поддерживают деградацию внеклеточного матрикса, участвуют в ремоделировании стромы, метастазировании опухолей, что доказано на BSp73ASML клеточной линии аденокарциномы поджелудочной железы крыс [191]. Избыточная экспрессия Tspan8 в экзосомах, полученных из BSp73ASML клеточной линии, способствует селективному отбору белков в экзосомы, включая VCAM-1 (vascular cell adhesion molecule 1- васкулярная молекула клеточной адгезии 1) и а4-интегрин, которые участвуют в преимущественном связывании их с эндотелиальными клетками [47].

1.5 Протеазы экзосом

Около 32% белкового состава экзосом составляют ферменты (рисунок 3)

Рисунок 3 - Функциональные группы белков экзосом

Важную роль в функциональной активности внеклеточных везикул играют протеазы, ферменты класса гидролаз, расщепляющие пептидные связи между аминокислотами в белках и пептидах. Показано, что экзосомы несут комплекс протеаз и их активаторов.

Экзосомальные протеазы можно разделить на три группы: тетраспанин-ассоциированные (структурно и функционально связанные), и тетраспанин-неассоциированные, а также протеазы с неизвестной локализацией в экзосомах (рисунок 4) [167].

К тетраспанин-ассоциированным протеазам экзосом относятся ADAMs (a disintegrin and metalloproteinases), MMPs (матриксные металлопротеазы) и EMMPRIN.

Рисунок 4 - Тетраспанин-ассоциированные и тетраспанин-неассоциированные

протеазы экзосом

1.6 ADAM10 и ADAM17 и их роль в канцерогенезе

Семейство АОАМ-протеаз состоит из 22 членов, идентифицированных в геноме человека, из которых только 12 (АОАМ8, 9, 10, 12, 15, 17, 19, 20, 21, 28, 30 и 33) кодируют активные ферменты.

Тетраспанин-ассоциированные протеазы АОАМ10 и АОАМ17 представляют собой трансмембранные «молекулярные ножницы», которые осуществляют шеддинг - примембранный протеолиз белков, что приводит к расщеплению внеклеточного домена трансмембранных белков [138]. Субстратами шеддаз являются рецепторы факторов роста (EGFR1, НЕЯ2, TGFp-IIIR), рецепторы адгезии (СБ44 и L1CAM), Fas-L - рецептор апоптоза. В результате шеддинга происходит модификация клеточных рецепторов с изменением сигналинга от рецепторов факторов роста и адгезии, а также появление растворимых форм рецепторов в биологических жидкостях: sCD44, sEGFR1,

sHER2, sTGFbeta-ШR, sFasL [21]. Большинство растворимых форм этих рецепторов индуцируют клеточную подвижность, что может влиять на метастатический потенциал [138].

ADAM10 обнаруживается в экзосомах, секретируемых разными типами клеток, в про- и зрелой форме. ADAM17 также идентифицируется в экзосомах из различных линий опухолевых клеток, его протеолитическая активность вовлечена в процессинг CD44, TGF-a и амфирегулина [20; 150].

В экзосомах преобладают зрелые формы ADAM10 и ADAM17. Время и механизм включения зрелых металлопротеиназ во внеклеточные везикулы и активация их проформ остаются неизвестными. Известно, что ADAM10 проявляет протеолитическую активность в мультивезикулярных тельцах, следовательно, зрелая ADAM10 уже включена в экзосомы [39]. ADAM-10 способствует шеддингу Е-кадгерина, наличие растворимой формы которого во внеклеточной среде приводит к потере межклеточных контактов, что облегчает миграцию клеток, тем самым увеличивает метастатический потенциал [22]. Экзосомальные EpCAM и CD46 из асцитической жидкости больных раком яичников расщепляются ADAM-металлопротеиназами, что приводит к появлению их растворимых форм [109]. Примембранный протеолиз CD23, L1CAM и CD44, опосредованный АОАМ10, может происходить в мультивезикулярных тельцах внутри клеток, а также в экзосомах, высвобождающихся из ЯРМ1 8866 В-клеточной линии хронической миелоидной лейкемии, OVMz и SKOV3ip клеточных линий карцином яичников [118]. Данный протеолиз в мультивезикулярных тельцах может объясняться повышенной доступностью сайта связывания АОАМ10 в СО23 в условиях эндосомального рН [39]. Снижение активности iRHOM2 (некаталитическая внутримембранная ромбоидная протеаза 2) не влияло на высвобождение АОАМ10 из экзосом, следовательно, включение зрелого АОАМ10 в экзосомы не было опосредовано данным белком. В последнее время в исследованиях показано, что транслокация про-ADAM10 от

эндоплазматического ретикулума к комплекску Гольджи, ферментативный процессинг и перенос к цитоплазматической мембране опосредованы членами подгруппы TspanC8 - Tspan5, 10, 14, 15, 17 и 33 [136]. Активность ADAM10 также модулируется за счет взаимодействия с тетраспанинами CD9, CD81, CD82 [158]. Данные тетраспанины присутствуют в экзосомах и могут регулировать включение зрелого ADAM10 в экзосомы и его протеолитическую активность. ADAM17 переносится в эндоплазматический ретикулум в неактивной латентной форме, который взаимодействует с неактивным белком iRHOM2. Это способствует транслокации про-ADAMH в комплекс Гольджи, где он активируется фуриновой протеин-конвертазой [99]. Снижение регуляции iRHOM2 в клетках А549 подавляет не только созревание и уровень поверхностной экспрессии ADAM17, но также предотвращает высвобождение зрелого ADAM17 в составе экзосом. Мечение антителами ADAM17 в клетках A549, стимулированных форбол-12-миристат-13-ацетатом, показало, что по крайней мере часть зрелого ADAM17 в экзосомах была получена из поверхностного-ассоциированного зрелого ADAM17 в составе липидных рафтов, богатых флотилином. Эти данные свидетельствуют о том, что зрелая ADAM17 в экзосомах получена из комплекса Гольджи и клеточной поверхности [24].

Показано, что гиперэкспрессия ADAM17 индуцирует подвижность опухолевых клеток при раке простаты in vitro [25]. ADAM17 контролирует TNFa и EGFR сигнальные пути. В клеточных линиях опухолей головного мозга, культивируемых в гипоксических условиях, увеличился уровень экспрессии ADAM17, активность которого коррелировала с увеличением инвазии опухолевых клеток [173]. При раке толстой кишки ADAM 17 сверхэкспрессируется независимо от стадии или степени злокачественности опухоли и участвует в процессах пролиферации и ангиогенеза [121]. При почечно-клеточном раке ингибирование ADAM17 уменьшает инвазию и блокирует образование опухоли [117]. Нокдаун экспрессии ADAM17 с

использованием малых интерферирующих РНК в HMT3522 S1 клеточной линии карциномы молочной железы снижает прогрессирование опухоли [94]. На клеточных культурах (A549 эпителиальная клеточная линия альвеолярной легочной карциномы, MDA-MB-231 клеточная линия эпителиального рака молочной железы, HEK293 линия клеток эмбриональной почки человека и THP-1 линия клеток моноцитарной лейкемии человека) показано высвобождение ADAM17 в экзосомах, который затем распространяется и способствует расщеплению своих субстратов на более отдаленных клетках [148]. Масс-спектрометрический анализ протеома экзосом MDA-MB-231 клеточной линии эпителиального рака молочной железы и HPAF-II линии аденокарциномы поджелудочной железы показал, что комбинации интегринов экзосом связаны с образованием специфических метастазов. Комбинация абр4 и абр1 интегринов ассоциирована с метастазами в легких, а avP и avp3 интегрины связаны с метастазами в печени и головном мозге. Так как ADAM протеазы экзосом взаимодействуют с интегринами, то можно предположить, что связь ADAM-интегрины поддерживает органотропность метастазов [144].

1.7 Роль тканевых и экзосомальных ММР и EMMPRIN в канцерогенезе

В процессах опухолевой инвазии и метастазирования наибольшее значение отводят тетраспанин-ассоциированным протеазам, к которым относят матриксные металопротеиназы (MMPs) - семейство секретируемых или мембрано-ассоциированных цинк-зависимых протеаз.

MMP2 и MMP9 относятся к семейству секретируемых или мембрано-ассоциированных цинк-зависимых протеаз [102]. Субстратами для MMPs являются коллаген IV типа, эластин, фибронектин и ламинин, а также белки клеточной поверхности - E-кадгерин, фибрин и интерлейкин-1. Таким образом, они модулируют взаимодействие клеток и внеклеточного матрикса [144].

В нормальных физиологических условиях активность MMPs регулируется на уровне транскрипции, посттрансляционной модификации и ингибирования специфическими белками - тканевые ингибиторы металлопротеиназ, а2-макроглобулин [32]. В патофизиологических условиях, например при раке, высокая внеклеточная активность MMPs способствует росту опухоли, тканевой инвазии, ангиогенезу и метастазированию [89]. Высокий уровень ММР2 и MMP9 в плазме крови у больных колоректальным раком и раком желудка коррелирует с метастазами в лимфатические узлы [123]. Экзосомы, выделенные из асцитической жидкости больных раком яичников, содержат протеолитически активные ММР2 и ММР9 [102]. Данных об экспрессии MMPs в экзосомах при колоректальном раке не выявлено. Известно, что активность MMP2 и MMP9 играет ключевую роль в инвазии клеток меланомы [110]. Гиперэкспрессия ММР2 связана с плохим прогнозом у больных немелкоклеточным раком легких и раком яичников [162].

Внеклеточные везикулы, высвобождающиеся из 8701-ВС клеточных культур рака молочной железы и НТ-1080 клеток фибросаркомы, содержат ММР-9 в про- и зрелой форме с протеолитической активностью [144]. Перенос экзосомами MMP2, MMP3, MMP9 и MT1-MMP увеличивает их содержание в отдаленных от первичной опухоли участках, в частности в лимфатических узлах и ткани легкого [59]. Graves et al. в своей работе показали, что внеклеточные везикулы асцита при раке яичников содержат протеолитические ферменты, включая MMP2, MMP9. Взаимодействие MMP-богатых везикул со стромальными клетками может потенциально активировать многочисленные ферментативные процессы и сигнальные каскады, которые будут способствовать метастазированию рака яичников [125].

EMMPRIN (CD147, базигин) представляет собой гликопротеин клеточной поверхности, который принадлежит к суперсемейству иммуноглобулинов и высоко экспрессируется на поверхности многих клеток [43]. Его гиперэкспрессия выявлена при опухолях разной локализации: плоскоклеточная карцинома ротовой

полости [65], остеосаркома [64], рак молочной железы [80] и рак яичников [33]. Клеточные линии карциномы яичника человека ОУСАЯЗ, SKOV3 и А2780 выделяют везикулы с разным уровнем ЕММРЯШ и стимулируют проангиогенную активность эндотелиальных клеток пупочной вены человека в зависимости от его уровня экспрессии [182].

ЕММРЫК облегчает секрецию ММР1, ММР3, ММР9 из опухолевых клеток, фибробластов и клеток эндометрия, что приводит к деградации базальной мембраны и внеклеточного матрикса, тем самым ведет к распространению опухоли [86]. Известно, что ЕММРЯШ, выделенный из опухолевых клеток, паракринным способом стимулирует продукцию матричных металлопротеиназ соседними фибробластами [164]. Кроме того, он также стимулирует экспрессию фактора роста эндотелия сосудов и гиалуроновой кислоты, что приводит к ангиогенезу и множественной лекарственной устойчивости, которая, возможно, развивается путем активации фосфатидилинозитол-3-гидроксикиназы (Р13К) и митоген-активированных протеинкиназ (МАРК) [78]. Повышенная секреция ЕММРКГЫ с сопутствующим увеличением секреции ММР9 может обеспечивать более высокий метастатический потенциал, поскольку повышенная экспрессия этих двух белков выявлена при раке предстательной железы и плоскоклеточной карциноме шейки матки и является плохим прогностическим показателем для данных пациентов [81]. Внеклеточные везикулы, секретируемые линиями раковых клеток МСБ-7, МОА-МБ-231, L3.6pL и Нек293Бр1 стимулируют секрецию ЕММРШК и ММР9 [84]. Экзосомы опухолевых клеток доставляют ЕММРКГЫ в фибробласты, тем самым увеличивая продукцию ММР и способствуя опухолевой инвазии и метастазированию [111].

1.8 Тетраспанин-неассоциированные 20S протеасомы

К тетраспанин-неассоциированным протеазам относятся PAPP-A (Pregnancy-associated plasma protein-A) и 20S протеасомы [13].

Протеасомная система представлена двумя каталитическими комплексами: 20S- и 26S-протеасомами. Протеолиз происходит непосредственно в 20S-протеасоме, коровая (основная) часть которой состоит из 4 сложенных гептамерных колец, включающих два внешних а-кольца и два внутренних Р-кольца - а1-7; pi-7; pi-7; а1-7 (рисунок 5) [149]. Активация 20S-протеасомы происходит путем присоединения к внешним а-субъединицам регуляторных частиц (19S, PA28). Три из семи Р-субъединиц являются каталитическими активными и ответственными за протеолитическую активность протеасомы - pi, Р2 и р5 проявляют каспазо-, трипсин- и химотрипсинподобную активность соответственно [95].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Замбалова Елена Анатольевна, 2020 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Анализ циркулирующих экзосом - новый метод ранней и дифференциальной диагностики рака поджелудочной железы / Р.Б. Самсонов [и др.] // Российский биотерапевтический журнал. - 2017. - Т. 16. - С. 69-70.

2. Внутриклеточный и циркулирующий пулы протеасом: значение при злокачественных новообразованиях различных локализаций / Е.Е. Шашова [и др.] // Сибирский онкологический журнал. - 2015. - № 6. - С. 76-82.

3. Выделение и характеризация экзосом плазмы крови больных раком молочной железы и колоректальным раком / С.Н. Тамкович [и др.] // Биомедицинская химия. - 2017. - Т. 63. - № 2. - С. 165-169.

4. Диагностическое значение экзосомальных микроРНК при колоректальном раке / Р.Б. Самсонов [и др.] // Колопроктология. - 2018. - Т. 2. -№ 64. - С. 25-31.

5. Зайкова Ю.Я. Протеасомы и их возможная роль во внеклеточном пространстве / Ю.Я. Зайкова, И.Н. Евтеева, А.С. Цимоха // Цитология. - 2013. -Т. 55. - № 11. - С. 753-760.

6. Каприн А.Д. Злокачественные новообразования в России в 2018 году (заболеваемость и смертность) / А.Д. Каприн, В.В. Старинский, Г.В. Петрова. -М.: МНИОИ им. П.А. Герцена - филиал ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России, 2019. - 250 с.

7. Коваль В.Д. Роль убиквитин-протеасомной системы в развитии рака эндометрии / В.Д. Коваль, И.В. Кондакова, Л.В. Спирина // Вопросы онкологии. -2012. - Т. 58. - № 4. - С. 473-480.

8. Контаминация препаратов экзосом, выделенных из биологических жидкостей / А.Е. Григорьева [и др.] // Биомедицинская химия. - 2017. - Т. 63. -№ 1. - С. 91-96.

9. Малек А.В. Возможности применения нановезикулярных технологий в онкологии : Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук / А.В. Малек. - Санкт-Петербург: Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Петрова», 2020. - 36 с.

10. Мешков А.В. Хирургическое лечение больных колоректальным раком, осложненным кишечной непроходимостью, в условиях специализированного онкологического центра / А.В. Мешков, Е.П. Кривощеков // Фундаментальные исследования. - 2015. - № 1. - С. 103-106.

11. Оценка диагностической роли микроРНК в составе экзосом циркулирующей крови при раке щитовидной железы / Р.Б. Самсонов [и др.] // Опухоли головы и шеи. - 2015. - Т. 5. - № 3. - С. 45-49.

12. Протеасомы и экзосомы при раке яичников: связь с особенностями клинического течения и прогнозом / Н.В. Юнусова [и др.] // Сибирский онкологический журнал. - 2014. - № 4. - С. 53-59.

13. Связь экспрессии металлопротеиназы PAPP-A c экспрессией ростовых и транскрипционных факторов при раке эндометрия / Н.В. Юнусова [и др.] // Известия Российской академии наук. Серия биологическая. - 2013. - Т. 2013. -№ 3. - С. 284-291.

14. Система экзосомальных межклеточных коммуникаций и ее роль в процессе метастатической диссеминации / А.В. Малек [и др.] // Вопросы онкологии. - 2014. - Т. 60. - № 4. - С. 429-436.

15. Шакиров Р.К. Критерий прогнозирования метастазов в печень у больных колоректальным раком / Р.К. Шакиров, И.Г. Гатауллин, А.А. Валиев // Поволжский онкологический вестник. - 2015. - № 4. - С. 59-62.

16. Экзосомальные микро-РНК - потенциальный предиктивный маркер эффекта неоадъювантной терапии рака молочной железы / И.М. Коваленко [и др.] // Вопросы онкологии. - 2018. - Т. 64. - № 6. - С. 758-767.

17. Экзосомы и передача (эпи)генетической информации опухолевыми клетками / Е.М. Чевкина [и др.] // Успехи молекулярной онкологии. - 2015. - Т. 2.

- № 3. - С. 8-20.

18. Эпидемиология колоректального рака в Томской области / И.Н. Одинцова [и др.] // Сибирский онкологический журнал. - 2017. - Т. 4. - № 16. -С. 89-95.

19. ADAM-10 на поверхности экзосом крови больных раком молочной железы: новые механизмы опухолевой диссеминации / А.К. Сомов [и др.] // Вопросы онкологии. - 2019. - Т. 65. - № 5. - С. 678-683.

20. A role for exosomes in the constitutive and stimulus-induced ectodomain cleavage of L1 and CD44 / A. Stoeck [et al.] // Biochemical Journal. - 2006. - Vol. 393.

- № 3. - P. 609-618.

21. ADAM10 Is Upregulated in Melanoma Metastasis Compared with Primary Melanoma / S.B. Lee [et al.] // Journal of Investigative Dermatology. - 2010. -Vol. 130. - № 3. - P. 763-773.

22. ADAM10 mediates E-cadherin shedding and regulates epithelial cell-cell adhesion, migration, and -catenin translocation / T. Maretzky [et al.] // Proceedings of the National Academy of Sciences. - 2005. - Vol. 102. - № 26. - P. 9182-9187.

23. ADAM10 Sheddase Activity is a Potential Lung-Cancer Biomarker / T. Yoneyama [et al.] // Journal of Cancer. - 2018. - Vol. 9. - № 14. - P. 2559-2570.

24. Advances in membranous vesicle and exosome proteomics improving biological understanding and biomarker discovery / F. Raimondo [et al.] // PROTEOMICS. - 2011. - Vol. 11. - № 4. - P. 709-720.

25. Ali N. Phorbol Ester-induced Shedding of the Prostate Cancer Marker Transmembrane Protein with Epidermal Growth Factor and Two Follistatin Motifs 2 Is Mediated by the Disintegrin and Metalloproteinase-17 / N. Ali, V. Knauper // Journal of Biological Chemistry. - 2007. - Vol. 282. - № 52. - P. 37378-37388.

26. An activated form of ADAM10 is tumor selective and regulates cancer stem-like cells and tumor growth / L. Atapattu [et al.] // The Journal of Experimental Medicine. - 2016. - Vol. 213. - № 9. - P. 1741-1757.

27. Analysis of exosome release and its prognostic value in human colorectal cancer / J. Silva [et al.] // Genes, Chromosomes and Cancer. - 2012. - Vol. 51. - № 4. -P. 409-418.

28. Andreu Z. Tetraspanins in Extracellular Vesicle Formation and Function / Z. Andreu // Frontiers in Immunology. - 2014. - Vol. 5. - № 442. - P. 1-12.

29. ASCO 2006 Update of Recommendations for the Use of Tumor Markers in Gastrointestinal Cancer / G.Y. Locker [et al.] // Journal of Clinical Oncology. - 2006. -Vol. 24. - № 33. - P. 5313-5327.

30. Assessment of a Combined Panel of Six Serum Tumor Markers for Lung Cancer / R. Molina [et al.] // American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. - 2016. - Vol. 193. - № 4. - P. 427-437.

31. Association of the tetraspanin CD151 with the laminin-blinding integrins a3b1, a6b1, a6b4 amd a7b1 in cell in culture and in vivo / L.M. Sterk [et al.] // Journal of Cell Science. - Vol. 6. - № 115. - P. 1161-1173.

32. Baker A.H. Metalloproteinase inhibitors: biological actions and therapeutic opportunities / A.H. Baker // Journal of Cell Science. - 2002. - Vol. 115. - № 19. -P. 3719-3727.

33. Basigin-2 is the predominant basigin isoform that promotes tumor cell migration and invasion and correlates with poor prognosis in epithelial ovarian cancer / S.-H. Zhao [et al.] // Journal of Translational Medicine. - 2013. - Vol. 11. - № 92. -P. 1-12.

34. Bhayana S. Role of Exosomes in Development of Premetastatic Niche / S. Bhayana, M. Yadav, N.K. Jacob // Diagnostic and Therapeutic Applications of Exosomes in Cancer. - Elsevier, 2018. - P. 247-260.

35. Bias in High-Throughput Analysis of miRNAs and Implications for Biomarker Studies / C. Backes [et al.] // Analytical Chemistry. - 2016. - Vol. 88. -№ 4. - P. 2088-2095.

36. Boyle P. ABC of colorectal cancer. Epidemiology / P. Boyle, J.S. Langman // Clinical review. - 2000. - № 321. - P. 805-808.

37. Bracci L. The role of exosomes in colorectal cancer disease progression and response to therapy / L. Bracci, F. Lozupone, I. Parolini // Cytokine & Growth Factor Reviews. - 2020. - Vol. 51. - P. 84-91.

38. Brenner H. Colorectal cancer / H. Brenner, M. Kloor, C.P. Pox // The Lancet. - 2014. - Vol. 383. - № 9927. - P. 1490-1502.

39. CD23 Sheddase A Disintegrin and Metalloproteinase 10 (ADAM10) Is Also Required for CD23 Sorting into B Cell-derived Exosomes / J.A. Mathews [et al.] // Journal of Biological Chemistry. - 2010. - Vol. 285. - № 48. - P. 37531-37541.

40. CD147 Is a Promising Target of Tumor Progression and a Prognostic Biomarker / A. Landras [et al.] // Cancers. - 2019. - Vol. 11. - № 11. - P. 1-17.

41. CD147, MMP9 expression and clinical significance of basal-like breast cancer / Y. Liu [et al.] // Medical Oncology. - 2013. - Vol. 30. - № 1. - P. 1-5.

42. CD147 Promotes Cell Small Extracellular Vesicles Release during Colon Cancer Stem Cells Differentiation and Triggers Cellular Changes in Recipient Cells / D. Lucchetti [et al.] // Cancers. - 2020. - Vol. 12. - № 2. - P. 1-23.

43. CD147/EMMPRIN overexpression and prognosis in cancer: A systematic review and meta-analysis / X. Xin [et al.] // Scientific Reports. - 2016. - Vol. 6. - № 1. - P. 1-12.

44. CD151 Amplifies Signaling by Integrin a6ß1 to PI3K and Induces the Epithelial-Mesenchymal Transition in HCC Cells / A. Ke [et al.] // Gastroenterology. -2011. - Vol. 140. - № 5. - P. 1629-1641.

45. CD151 confers metastatic potential to clear cell sarcoma of the soft tissue in animal model / K. Kawashima [et al.] // Oncology Letters. - 2019. - Vol. 17. -P. 4811-4818.

46. CD151—A Striking Marker for Cancer Therapy / S. Kumari [et al.] // Biomarkers in Cancer. - 2015. - Vol. 7. - P. 7-11.

47. Cell Surface Tetraspanin Tspan8 Contributes to Molecular Pathways of Exosome-Induced Endothelial Cell Activation / I. Nazarenko [et al.] // Cancer Research.

- 2010. - Vol. 70. - № 4. - P. 1668-1678.

48. Circulating proteasome levels are an independent prognostic factor for survival in multiple myeloma / C. Jakob [et al.] // Blood. - 2007. - Vol. 109. - № 5. -P. 2100-2105.

49. Circulating Proteasomes Are Functional and Have a Subtype Pattern Distinct from 20S Proteasomes in Major Blood Cells / A. Zoeger [et al.] // Clinical Chemistry. - 2006. - Vol. 52. - № 11. - P. 2079-2086.

50. Circulating proteasomes are markers of cell damage and immunologic activity in autoimmune diseases. / K. Egerer [et al.] // The Journal of Rheumatology. -2020. - Vol. 29. - № 10. - P. 2045-2052.

51. Colangelo N.W. Extracellular vesicles originating from glioblastoma cells increase metalloproteinase release by astrocytes: the role of CD147 (EMMPRIN) and ionizing radiation / N.W. Colangelo, E.I. Azzam // Cell Communication and Signaling.

- 2020. - Vol. 18. - № 1. - P. 1-14.

52. Colombo M. Biogenesis, Secretion, and Intercellular Interactions of Exosomes and Other Extracellular Vesicles / M. Colombo, G. Raposo, C. Thery // Annual Review of Cell and Developmental Biology. - 2014. - Vol. 30. - № 1. - P. 255289.

53. Comparative Subpopulation Analysis of Plasma Exosomes from Cancer Patients / S.N. Tamkovich [et al.] // Biochemistry (Moscow), Supplement Series B: Biomedical Chemistry. - 2018. - Vol. 12. - № 2. - P. 151-155.

54. Current status of screening for colorectal cancer / K. Garborg [et al.] // Annals of Oncology. - 2013. - Vol. 24. - № 8. - P. 1963-1972.

55. Delos Santos R.C. Charming neighborhoods on the cell surface: Plasma membrane microdomains regulate receptor tyrosine kinase signaling / R.C. Delos Santos, C. Garay, C.N. Antonescu // Cellular Signalling. - 2015. - Vol. 27. - № 10. -P. 1963-1976.

56. Desmond B.J. Circulating Extracellular Vesicle MicroRNA as Diagnostic Biomarkers in Early Colorectal Cancer—A Review / B.J. Desmond, E.R. Dennett, K.M. Danielson // Cancers. - 2019. - Vol. 12. - № 52. - P. 1-16.

57. Differential protein profiling of renal cell carcinoma urinary exosomes / F. Raimondo [et al.] // Molecular BioSystems. - 2013. - Vol. 9. - № 6. - P. 1-14.

58. DNA damage-induced ubiquitylation of proteasome controls its proteolytic activity / T.N. Moiseeva [et al.] // Oncotarget. - 2013. - Vol. 4. - № 9. - P. 1338-1348.

59. D'Souza-Schorey C. Biology and proteomics of extracellular vesicles: harnessing their clinical potential / C. D'Souza-Schorey, D. Di Vizio // Expert Review of Proteomics. - 2014. - Vol. 11. - № 3. - P. 251-253.

60. E-Cadherin/p120-Catenin and Tetraspanin Co-029 Cooperate for Cell Motility Control in Human Colon Carcinoma / C. Greco [et al.] // Cancer Research. -2010. - Vol. 70. - № 19. - P. 7674-7683.

61. Effect of an anti-human Co-029/tspan8 mouse monoclonal antibody on tumor growth in a nude mouse model / N. Ailane [et al.] // Frontiers in Physiology. -2014. - Vol. 5. - P. 1-19.

62. Elevated levels of preoperative CA 15-3 and CEA serum levels have independently poor prognostic significance in breast cancer / J.S. Lee [et al.] // Annals of Oncology. - 2013. - Vol. 24. - № 5. - P. 1225-1231.

63. Emerging roles of exosomes during epithelial-mesenchymal transition and cancer progression / D.W. Greening [et al.] // Seminars in Cell & Developmental Biology. - 2015. - Vol. 40. - P. 60-71.

64. EMMPRIN co-expressed with matrix metalloproteinases predicts poor prognosis in patients with osteosarcoma / N. Futamura [et al.] // Tumor Biology. -

2014. - Vol. 35. - № 6. - P. 5159-5165.

65. EMMPRIN Expression in Oral Squamous Cell Carcinomas: Correlation with Tumor Proliferation and Patient Survival / L.S. Monteiro [et al.] // BioMed Research International. - 2014. - Vol. 2014. - P. 1-9.

66. Evaluation of quantitative miRNA expression platforms in the microRNA quality control (miRQC) study / P. Mestdagh [et al.] // Nature Methods. - 2014. -Vol. 11. - № 8. - P. 809-815.

67. Exosomal microRNAs and other non-coding RNAs as colorectal cancer biomarkers: a review / A. Francavilla [et al.] // Mutagenesis. - 2019. - P. 1-18.

68. Exosomal microRNAs as liquid biopsy biomarkers in prostate cancer / J. Wang [et al.] // Critical Reviews in Oncology/Hematology. - 2020. - Vol. 145. - P. 113.

69. Exosomal miR-135b shed from hypoxic multiple myeloma cells enhances angiogenesis by targeting factor-inhibiting HIF-1 / T. Umezu [et al.] // Blood. - 2014. -Vol. 124. - № 25. - P. 3748-3757.

70. Exosomal Proteins as Diagnostic Biomarkers in Lung Cancer / B. Sandfeld-Paulsen [et al.] // Journal of Thoracic Oncology. - 2016. - Vol. 11. - № 10. -P. 1701-1710.

71. Exosomes / G.K. Patel [et al.] // Diagnostic and Therapeutic Applications of Exosomes in Cancer. - Elsevier, 2018. - P. 261-283.

72. Exosomes - Structure, Biogenesis and Biological Role in Non-Small-Cell Lung Cancer / M. Frydrychowicz [et al.] // Scandinavian Journal of Immunology. -

2015. - Vol. 81. - № 1. - P. 2-10.

73. Exosomes as potential sources of biomarkers in colorectal cancer / Y. Xiao [et al.] // Cancer Letters. - 2020. - Vol. 476. - P. 13-22.

74. Exosomes from human colorectal cancer induce a tumor-like behavior in colonic mesenchymal stromal cells / L. Lugini [et al.] // Oncotarget. - 2016. - Vol. 7. -№ 31. - P. 50086-50098.

75. Exosomes in Cancer: Circulating Immune-Related Biomarkers / A. Gluszko [et al.] // BioMed Research International. - 2019. - Vol. 2019. - P. 1-9.

76. Exosomes in cancer: small particle, big player / X. Zhang [et al.] // Journal of Hematology & Oncology. - 2015. - Vol. 8. - № 1. - P. 83-96.

77. Expression of Beclin-1 in the Microenvironment of Invasive Ductal Carcinoma of the Breast: Correlation with Prognosis and the Cancer-Stromal Interaction / A. Morikawa [et al.] // PLOS ONE. - 2015. - Vol. 10. - № 5. - P. 1-11.

78. Expression of CD147 and Lewis y antigen in ovarian cancer and their relationship to drug resistance / J. Gao [et al.] // Medical Oncology. - 2014. - Vol. 31. -№ 5. - P. 920-928.

79. Expression of CD147 and matrix metalloproteinase-11 in colorectal cancer and their relationship to clinicopathological features / X. Tian [et al.] // Journal of Translational Medicine. - 2015. - Vol. 13. - № 1. - P. 337-348.

80. Expression of HAb18G is associated with tumor progression and prognosis of breast carcinoma / F. Liu [et al.] // Breast Cancer Research and Treatment. - 2010. -Vol. 124. - № 3. - P. 677-688.

81. Expression of MMP9 and CD147 in invasive squamous cell carcinoma of the uterine cervix and their implication / Y. Weiwei [et al.] // Pathology - Research and Practice. - 2009. - Vol. 205. - № 10. - P. 709-715.

82. Extracellular Proteasomes Are Deficient in 19S Subunits as Revealed by iTRAQ Quantitative Proteomics: EXTRACELLULAR PROTEASOMES LACK 19S SUBUNITS / A.S. Tsimokha [et al.] // Journal of Cellular Physiology. - 2017. -Vol. 232. - № 4. - P. 842-851.

83. Extracellular vesicles for liquid biopsy in prostate cancer: where are we and where are we headed? / V.R. Minciacchi [et al.] // Prostate Cancer and Prostatic Diseases. - 2017. - Vol. 20. - № 3. - P. 251-258.

84. Extracellular Vesicles Secreted from Cancer Cell Lines Stimulate Secretion of MMP-9, IL-6, TGF-p1 and EMMPRIN / J.S. Redzic [et al.] // PLoS ONE. - 2013. -Vol. 8. - № 8. - P. 1-9.

85. Global cancer statistics 2018: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries / F. Bray [et al.] // CA: A Cancer Journal for Clinicians. - 2018. - Vol. 68. - № 6. - P. 394-424.

86. Grass G.D. How, with whom and when: an overview of CD147-mediated regulatory networks influencing matrix metalloproteinase activity / G.D. Grass, B.P. Toole // Bioscience Reports. - 2016. - Vol. 36. - № 1. - P. 1-16.

87. Hemler M.E. Tetraspanin proteins promote multiple cancer stages / M.E. Hemler // Nature Reviews Cancer. - 2014. - Vol. 14. - № 1. - P. 49-60.

88. High extracellular matrix metalloproteinase inducer/CD147 expression is strongly and independently associated with poor prognosis in colorectal cancer / A. Stenzinger [et al.] // Human Pathology. - 2012. - Vol. 43. - № 9. - P. 1471-1481.

89. Huang K.-J. The relevance and role of vascular endothelial growth factor C, matrix metalloproteinase-2 and E-cadherin in epithelial ovarian cancer / K.-J. Huang, L.-H. Sui // Medical Oncology. - 2012. - Vol. 29. - № 1. - P. 318-323.

90. Immunomodulatory role of microRNAs transferred by extracellular vesicles: Immunomodulatory role of EV-delivered miRNAs / L. Fernandez-Messina [et al.] // Biology of the Cell. - 2015. - Vol. 107. - № 3. - P. 61-77.

91. Integrated systems for exosome investigation / M.F. Peterson [et al.] // Methods. - 2015. - Vol. 87. - P. 31-45.

92. Joint features and complementarities of Tspan8 and CD151 revealed in knockdown and knockout models / S. Yue [et al.] // Biochemical Society Transactions. - 2017. - Vol. 45. - № 2. - P. 437-447.

93. Kalluri R. The biology and function of exosomes in cancer / R. Kalluri // Journal of Clinical Investigation. - 2016. - Vol. 126. - № 4. - P. 1208-1215.

94. Kenny P.A. Targeting TACE-dependent EGFR ligand shedding in breast cancer / P.A. Kenny, M.J. Bissell // Journal of Clinical Investigation. - 2007. -Vol. 117. - № 2. - P. 337-345.

95. Kisselev A.F. Importance of the Different Proteolytic Sites of the Proteasome and the Efficacy of Inhibitors Varies with the Protein Substrate / A.F. Kisselev, A. Callard, A.L. Goldberg // Journal of Biological Chemistry. - 2006. -Vol. 281. - № 13. - P. 8582-8590.

96. Kosaka N. Decoding the Secret of Cancer by Means of Extracellular Vesicles / N. Kosaka // Journal of Clinical Medicine. - 2016. - Vol. 5. - № 22. - P. 111.

97. Lack of CD151/integrin a301 complex is predictive of poor outcome in node-negative lobular breast carcinoma: opposing roles of CD151 in invasive lobular and ductal breast cancers / H.M. Romanska [et al.] // British Journal of Cancer. - 2015.

- Vol. 113. - № 9. - P. 1350-1357.

98. Loktionov A. Biomarkers for detecting colorectl cancer non-invasively: DNA, RNA or proteins? / A. Loktionov // World Journal of Gastroentestinal Oncology.

- 2020. - Vol. 12. - № 2. - P. 124-147.

99. Lopez-Verrilli M.A. Schwann cell-derived exosomes enhance axonal regeneration in the peripheral nervous system: Glial exosomes promote axonal regeneration / M.A. Lopez-Verrilli, F. Picou, F.A. Court // Glia. - 2013. - Vol. 61. -№ 11. - P. 1795-1806.

100. Loree J.M. Recent developments in the treatment of metastatic colorectal cancer / J.M. Loree, S. Kopetz // Therapeutic Advances in Medical Oncology. - 2017. -Vol. 9. - № 8. - P. 551-564.

101. Low-density lipoprotein mimics blood plasma-derived exosomes and microvesicles during isolation and detection / B.W. Sodar [et al.] // Scientific Reports. -2016. - Vol. 6. - № 1. - P. 1-12.

102. Malignant ascites-derived exosomes of ovarian carcinoma patients contain CD24 and EpCAM / S. Runz [et al.] // Gynecologic Oncology. - 2007. - Vol. 107. -№ 3. - P. 563-571.

103. Mathivanan S. Exosomes: Extracellular organelles important in intercellular communication / S. Mathivanan, H. Ji, R.J. Simpson // Journal of Proteomics. - 2010. - Vol. 73. - № 10. - P. 1907-1920.

104. Meeting report from the joint IARC-NCI international cancer seminar series: a focus on colorectal cancer / M.J. Gunter [et al.] // Annals of Oncology. - 2019.

- Vol. 30. - № 4. - P. 510-519.

105. Melanoma exosomes educate bone marrow progenitor cells toward a pro-metastatic phenotype through MET / H. Peinado [et al.] // Nature Medicine. - 2012. -Vol. 18. - № 6. - P. 883-891.

106. Membrane vesicles, current state-of-the-art: emerging role of extracellular vesicles / B. György [et al.] // Cellular and Molecular Life Sciences. - 2011. - Vol. 68.

- № 16. - P. 2667-2688.

107. Metalloproteinases at the surface of small extrcellular vesicles in advanced ovarian cancer: Relationships with ascites volume and peritoneal canceromatosis index / N.V. Yunusova [et al.] // Clinica Chimica Acta. - 2019. - Vol. 494. - P. 116-122.

108. Microparticles and their emerging role in cancer multidrug resistance / J. Gong [et al.] // Cancer Treatment Reviews. - 2012. - Vol. 38. - № 3. - P. 226-234.

109. Microparticles That Form Immune Complexes as Modulatory Structures in Autoimmune Responses / C. Burbano [et al.] // Mediators of Inflammation. - 2015. -Vol. 2015. - P. 1-15.

110. Microtubule-Dependent Matrix Metalloproteinase-2/Matrix Metalloproteinase-9 Exocytosis: Prerequisite in Human Melanoma Cell Invasion / E.-M. Schnaeker [et al.]. - 2004. - № 64. - P. 8924-8931.

111. Microvesicles mediate transfer of P-glycoprotein to paclitaxel-sensitive A2780 human ovarian cancer cells, conferring paclitaxel-resistance / F. Zhang [et al.] // European Journal of Pharmacology. - 2014. - Vol. 738. - P. 83-90.

112. MMP-9 expression varies according to molecular subtypes of breast cancer / E.M. Yousef [et al.] // BMC Cancer. - 2014. - Vol. 14. - № 1. - P. 609-621.

113. MMP9 induction by vascular endothelial growth factor receptor-1 is involved in lung-specific metastasis / S. Hiratsuka [et al.] // Cancer Cell. - 2002. -Vol. 2. - № 4. - P. 289-300.

114. MMP9 modulates the metastatic cascade and immune landscape for breast cancer anti-metastatic therapy / M. Owyong [et al.] // Life Science Alliance. - 2019. -Vol. 2. - № 6. - P. 1-16.

115. Mochizuki S. ADAMs in cancer cell proliferation and progression / S. Mochizuki, Y. Okada // Cancer Science. - 2007. - Vol. 98. - № 5. - P. 621-628.

116. Molecular markers for colorectal cancer screening / B.T. Dickinson [et al.] // Recent advances in clinical practice. - 2015. - Vol. 64. - № 9. - P. 1485-1494.

117. Multiple Acquired Renal Carcinoma Tumor Capabilities Abolished upon Silencing of ADAM17 / A. Franovic [et al.] // Cancer Research. - 2006. - Vol. 66. -№ 16. - P. 8083-8090.

118. Neutrophil-derived microvesicles enter cartilage and protect the joint in inflammatory arthritis / S.E. Headland [et al.] // Science Translational Medicine. - 2015. - Vol. 7. - № 315. - P. 1-13.

119. New and Paradoxical Roles of Matrix Metalloproteinases in the Tumor Microenvironment / A. Noël [et al.] // Frontiers in Pharmacology. - 2012. - Vol. 3. -P. 1-9.

120. Niel G. van. Shedding light on the cell biology of extracellular vesicles / G. van Niel, G. D'Angelo, G. Raposo // Nature Reviews Molecular Cell Biology. - 2018. -Vol. 19. - № 4. - P. 213-228.

121. Overexpression of ADAM9 enhances growth factor-mediated recycling of E-cadherin in human colon cancer cell line HT29 cells / T. Hirao [et al.] // Experimental Cell Research. - 2005. - Vol. 312. - P. 331-339.

122. Phosphoproteins in extracellular vesicles as candidate markers for breast cancer / I.-H. Chen [et al.] // Proceedings of the National Academy of Sciences. - 2017.

- Vol. 114. - № 12. - P. 3175-3180.

123. Prognostic and diagnostic implications of MMP-2, MMP-9, and VEGF-a expressions in colorectal cancer / R.F. Araujo Jr [et al.] // Pathology - Research and Practice. - 2015. - Vol. 211. - № 1. - P. 71-77.

124. Prognostic significance of CD151 overexpression in non-small cell lung cancer / M.J. Kwon [et al.] // Lung Cancer. - 2013. - Vol. 81. - № 1. - P. 109-116.

125. Proinvasive Properties of Ovarian Cancer Ascites-Derived Membrane Vesicles / L.E. Graves [et al.] // Cancer Research. - 2004. - Vol. 64. - № 19. - P. 70457049.

126. Properzi F. Exosomes: the future of biomarkers in medicine / F. Properzi, M. Logozzi, S. Fais // Biomarkers in Medicine. - 2013. - Vol. 7. - Exosomes. - № 5. -P. 769-778.

127. Protease Cargo in Circulating Exosomes of Breast Cancer and Ovarian Cancer Patients / S.N. Tamkovich [et al.] // Asian Pacific Journal of Cancer Prevention.

- 2019. - Vol. 20. - № 1. - P. 255-262.

128. Proteasome activity in tumors of the female reproductive system / I.V. Kondakova [et al.] // Russian Journal of Bioorganic Chemistry. - 2012. - Vol. 38. -№ 1. - P. 89-92.

129. Proteasome Functioning in Breast Cancer: Connection with Clinical-Pathological Factors / E.E. Shashova [et al.] // PLoS ONE. - 2014. - Vol. 9. -Proteasome Functioning in Breast Cancer. - № 10. - P. 1-11.

130. Protein content and functional characteristics of serum-purified exosomes from patients with colorectal cancer revealed by quantitative proteomics: Serum-purified exosomes from patients with CRC / Y. Chen [et al.] // International Journal of Cancer. - 2017. - Vol. 140. - № 4. - P. 900-913.

131. Protein Profiling and Sizing of Extracellular Vesicles from Colorectal Cancer Patients via Flow Cytometry / Y. Tian [et al.] // ACS Nano. - 2018. - Vol. 12. -№ 1. - P. 671-680.

132. Proteolytic Potential of the MSC Exosome Proteome: Implications for an Exosome-Mediated Delivery of Therapeutic Proteasome / R.C. Lai [et al.] // International Journal of Proteomics. - 2012. - Vol. 2012. - P. 1-14.

133. Proteomic analysis of affinity-purified extracellular proteasomes reveals exclusively 20S complexes / V.A. Kulichkova [et al.] // Oncotarget. - 2017. - Vol. 8. -№ 60. - P. 102134-102149.

134. Proteomic Analysis of Two Types of Exosomes in Human Whole Saliva / Y. Ogawa [et al.] // Biological & Pharmaceutical Bulletin. - 2011. - Vol. 34. - № 1. -P. 13-23.

135. Quantitative proteomic analysis of paired colorectal cancer and non-tumorigenic tissues reveals signature proteins and perturbed pathways involved in CRC progression and metastasis / M.K. Sethi [et al.] // Journal of Proteomics. - 2015. -Vol. 126. - P. 54-67.

136. Quek C. The role of extracellular vesicles in neurodegenerative diseases / C. Quek, A.F. Hill // Biochemical and Biophysical Research Communications. - 2017. - Vol. 483. - № 4. - P. 1178-1186.

137. Rana S. Exosomal Tumor MicroRNA Modulates Premetastatic Organ Cells / S. Rana, K. Malinowska, M. Zöller // Neoplasia. - 2013. - Vol. 15. - № 3. - P. 281295.

138. Regulation of A disintegrin and metalloproteinase (ADAM) family sheddases ADAM10 and ADAM17: The emerging role of tetraspanins and rhomboids / A.L. Matthews [et al.] // Platelets. - 2017. - Vol. 28. - № 4. - P. 333-341.

139. Role of exosomal proteins in cancer diagnosis / W. Li [et al.] // Molecular Cancer. - 2017. - Vol. 16. - № 145. - P. 1-12.

140. Sandvig K. Proteomic Analysis of Microvesicles Released by the Human Prostate Cancer Cell Line PC-3 / K. Sandvig, A. Llorente // Molecular & Cellular Proteomics. - 2012. - Vol. 11. - № 7. - P. 1-11.

141. Santarelli R. Processed Meat and Colorectal Cancer: A Review of Epidemiologic and Experimental Evidence / R. Santarelli, F. Pierre, D. Corpet // Nutrition and Cancer. - 2008. - Vol. 60. - Processed Meat and Colorectal Cancer. -№ 2. - P. 131-144.

142. Sharova N. Multiple Forms of Proteasomes and their Role in Tumor Fate / N. Sharova, L. Zakharova // Recents patents on Endocrine, Metabolic and Immune Drug Discovery. - 2008. - Vol. 2. - № 3. - P. 1-10.

143. Shiao S.L. Regulation of prostate cancer progression by the tumor microenvironment / S.L. Shiao, G.C.-Y. Chu, L.W.K. Chung // Cancer Letters. - 2016. - Vol. 380. - № 1. - P. 340-348.

144. Shimoda M. Metalloproteinases in extracellular vesicles / M. Shimoda, R. Khokha // Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular Cell Research. - 2017. -Vol. 1864. - № 11. - P. 1989-2000.

145. Sixt S.U. Extracellular, circulating proteasomes and ubiquitin — Incidence and relevance / S.U. Sixt, B. Dahlmann // Biochimica et Biophysica Acta (BBA) -Molecular Basis of Disease. - 2008. - Vol. 1782. - № 12. - P. 817-823.

146. Sixt S.U. Extracellular Alveolar Proteasome: Possible Role in Lung Injury and Repair / S.U. Sixt, J. Peters // Proceedings of the American Thoracic Society. -2010. - Vol. 7. - Extracellular Alveolar Proteasome. - № 1. - P. 91-96.

147. Specificity of the proteasome population secreted from cells into the culture medium / V.A. Kulichkova [et al.] // Doklady Biological Sciences. - 2004. -Vol. 399. - № 1-6. - P. 503-506.

148. Stimulated release and functional activity of surface expressed metalloproteinase ADAM17 in exosomes / E. Groth [et al.] // Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular Cell Research. - 2016. - Vol. 1863. - № 11. - P. 2795-2808.

149. Subcellular localization of proteasomes and their regulatory complexes in mammalian cells / P. Brooks [et al.] // Biochemical Society. - 2000. - Vol. 346. -P. 155-161.

150. Systemic presence and tumor-growth promoting effect of ovarian carcinoma released exosomes / S. Keller [et al.] // Cancer Letters. - 2009. - Vol. 278. -№ 1. - P. 73-81.

151. Targeting the Tetraspanins with Monoclonal Antibodies in Oncology: Focus on Tspan8/Co-029 / M. Bonnet [et al.] // Cancers. - 2019. - Vol. 11. - Targeting the Tetraspanins with Monoclonal Antibodies in Oncology. - № 2. - P. 1-14.

152. Tetraspanin CD151 plays a key role in skin squamous cell carcinoma / Q. Li [et al.] // Oncogene. - 2013. - Vol. 32. - № 14. - P. 1772-1783.

153. Tetraspanin CD151 Regulates Transforming Growth Factor Signaling: Implication in Tumor Metastasis / R. Sadej [et al.] // Cancer Research. - 2010. -Vol. 70. - Tetraspanin CD151 Regulates Transforming Growth Factor Signaling. -№ 14. - P. 6059-6070.

154. Tetraspanin CD151 Stimulates Adhesion-dependent Activation of Ras, Rac, and Cdc42 by Facilitating Molecular Association between p 1 Integrins and Small GTPases / I.-K. Hong [et al.] // Journal of Biological Chemistry. - 2012. - Vol. 287. -№ 38. - P. 32027-32039.

155. Tetraspanin protein contributions to cancer / H.-X. Wang [et al.] // Biochemical Society Transactions. - 2011. - Vol. 39. - № 2. - P. 547-552.

156. Tetraspanin-enriched microdomains: a functional unit in cell plasma membranes / M. Yanez-Mo [et al.] // Trends in Cell Biology. - 2009. - Vol. 19. -Tetraspanin-enriched microdomains. - № 9. - P. 434-446.

157. Tetraspanins as regulators of the tumour microenvironment: implications for metastasis and therapeutic strategies: Tetraspanin: implication and therapeutic strategy / S. Detchokul [et al.] // British Journal of Pharmacology. - 2014. - Vol. 171. -№ 24. - P. 5462-5490.

158. Tetraspanins Regulate ADAM10-Mediated Cleavage of TNF-a and Epidermal Growth Factor / C. Arduise [et al.] // The Journal of Immunology. - 2008. -Vol. 181. - № 10. - P. 7002-7013.

159. TGF-beta signalling in colon carcinogenesis / P. Lampropoulos [et al.] // Cancer Letters. - 2012. - Vol. 314. - № 1. - P. 1-7.

160. The characteristics of the serum carcinoembryonic antigen and carbohydrate antigen 19-9 levels in gastric cancer cases / N. Wada [et al.] // Surgery Today. - 2017. - Vol. 47. - № 2. - P. 227-232.

161. The characterization of exosomes from biological fluids of patients with different types of cancer / N.V. Yunusova [et al.] // PHYSICS OF CANCER: INTERDISCIPLINARY PROBLEMS AND CLINICAL APPLICATIONS: Proceedings of the International Conference on Physics of Cancer: Interdisciplinary Problems and Clinical Applications (PC IPCA'17). - Tomsk, Russia, 2017. - P. 1-4.

162. The correlation between immunohistochemical expression of MMP-2 and the prognosis of epithelial ovarian cancer / T. Ekinci [et al.] // Polish Gynaecology. -2014. - Vol. 85. - № 2. - P. 121-130.

163. The Emerging Roles and Clinical Potential of Exosomes in Cancer / L. Min [et al.] // Diagnostic and Therapeutic Applications of Exosomes in Cancer. - Elsevier, 2018. - P. 285-311.

164. The microvesicle as a vehicle for EMMPRIN in tumor-stromal interactions / S.S. Sidhu [et al.] // Oncogene. - 2004. - Vol. 23. - № 4. - P. 956-963.

165. The Present and Future of Prostate Cancer Urine Biomarkers / M. Rigau [et al.] // International Journal of Molecular Sciences. - 2013. - Vol. 14. - № 6. -P. 12620-12649.

166. The prognostic and clinicopathologic characteristics of CD 147 and esophagus cancer: A meta-analysis / H. Li [et al.] // PLOS ONE. - 2017. - Vol. 12. -№ 7. - P. 1-15.

167. The Role of Exosomal Tetraspanins and Proteases in Tumor Progression / N.V. Yunusova [et al.] // Biochemistry (Moscow), Supplement Series B: Biomedical Chemistry. - 2018. - Vol. 12. - № 3. - P. 191-202.

168. The tetraspanins CD151 and Tspan8 are essential exosome components for the crosstalk between cancer initiating cells and their surrounding / S. Yue [et al.] // Oncotarget. - 2015. - Vol. 6. - № 4. - P. 2366-2384.

169. The tumor microenvironment promotes cancer progression and cell migration / V. Salvatore [et al.] // Oncotarget. - 2017. - Vol. 8. - № 6. - P. 9608-9616.

170. Thorsteinsson M. The clinical significance of circulating tumor cells in non-metastatic colorectal cancer - A review / M. Thorsteinsson, P. Jess // European Journal of Surgical Oncology (EJSO). - 2011. - Vol. 37. - № 6. - P. 459-465.

171. Tkach M. Communication by Extracellular Vesicles: Where We Are and Where We Need to Go / M. Tkach, C. Thery // Cell. - 2016. - Vol. 164. - № 6. -P. 1226-1232.

172. Toward tailored exosomes: The exosomal tetraspanin web contributes to target cell selection / S. Rana [et al.] // The International Journal of Biochemistry & Cell Biology. - 2012. - Vol. 44. - № 9. - P. 1574-1584.

173. Transcription factor Sp1 induces ADAM17 and contributes to tumor cell invasiveness under hypoxia / A. Szalad [et al.] // Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. - 2009. - Vol. 28. - № 1. - P. 1-29.

174. Tspan8 and Tspan8/CD151 knockout mice unravel the contribution of tumor and host exosomes to tumor progression / K. Zhao [et al.] // Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. - 2018. - Vol. 37. - № 1. - P. 1-23.

175. TSPAN8, identified by Escherichia coli ampicillin secretion trap, is associated with cell growth and invasion in gastric cancer / K. Anami [et al.] // Gastric Cancer. - 2016. - Vol. 19. - № 2. - P. 370-380.

176. Tspan8 is expressed in breast cancer and regulates E-cadherin/catenin signalling and metastasis accompanied by increased circulating extracellular vesicles / M. Voglstaetter [et al.] // The Journal of Pathology. - 2019. - Vol. 248. - № 4. - P. 421437.

177. TSPAN8 promotes colorectal cancer cell growth and migration in LSD1-dependent manner / H.-S. Zhang [et al.] // Life Sciences. - 2020. - Vol. 241. - P. 1-33.

178. TSPAN8 serves as a prognostic marker involving Akt/MAPK pathway in nasopharyngeal carcinoma / X. Lin [et al.] // Annals of Translational Medicine. - 2019. - Vol. 7. - № 18. - P. 470-470.

179. Tspan8-Tumor Extracellular Vesicle-Induced Endothelial Cell and Fibroblast Remodeling Relies on the Target Cell-Selective Response / Mu [et al.] // Cells. - 2020. - Vol. 9. - № 2. - P. 1-35.

180. Tumor Exosomal RNAs Promote Lung Pre-metastatic Niche Formation by Activating Alveolar Epithelial TLR3 to Recruit Neutrophils / Y. Liu [et al.] // Cancer Cell. - 2016. - Vol. 30. - № 2. - P. 243-256.

181. Tumor markers in colorectal cancer, gastric cancer and gastrointestinal stromal cancers: European group on tumor markers 2014 guidelines update: Tumor Markers in Different Cancers / M.J. Duffy [et al.] // International Journal of Cancer. -2014. - Vol. 134. - № 11. - P. 2513-2522.

182. Tumor Vesicle—Associated CD147 Modulates the Angiogenic Capability of Endothelial Cells / D. Millimaggi [et al.] // Neoplasia. - 2007. - Vol. 9. - № 4. -P. 349-357.

183. Tumor-derived exosomal proteins as diagnostic biomarkers in non-small cell lung cancer / L. Niu [et al.] // Cancer Science. - 2019. - Vol. 110. - № 1. - P. 433442.

184. Tumour-associated circulating microparticles: A novel liquid biopsy tool for screening and therapy monitoring of colorectal carcinoma and other epithelial neoplasia / A. Willms [et al.] // Oncotarget. - 2016. - Vol. 7. - № 21. - P. 1-9.

185. Turunen S.P. Membrane-type matrix metalloproteases as diverse effectors of cancer progression / S.P. Turunen, O. Tatti-Bugaeva, K. Lehti // Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular Cell Research. - 2017. - Vol. 1864. - № 11. -P. 1974-1988.

186. Tyrosine phosphorylation of cofilin at Y68 by v-Src leads to its degradation through ubiquitin-proteasome pathway / Y. Yoo [et al.] // Oncogene. - 2010. - Vol. 29.

- № 2. - P. 263-272.

187. Ultra-sensitive liquid biopsy of circulating extracellular vesicles using ExoScreen / Y. Yoshioka [et al.] // Nature Communications. - 2014. - Vol. 5. -№ 3591. - P. 1-8.

188. Upregulation of CD147 promotes cell invasion, epithelial-to-mesenchymal transition and activates MAPK/ERK signaling pathway in colorectal cancer / T. Xu [et al.] // International Journal of Clinical and Experimental Pathology. - 2014. - Vol. 7. -№ 11. - P. 7432-7441.

189. Wang X. Salivary biomarkers in cancer detection / X. Wang, K.E. Kaczor-Urbanowicz, D.T.W. Wong // Medical Oncology. - 2017. - Vol. 34. - № 1. - P. 1-12.

190. Yanez-Mo M. Functional interplay between tetraspanins and proteases / M. Yanez-Mo, M.D. Gutierrez-Lopez, C. Cabanas // Cellular and Molecular Life Sciences.

- 2011. - Vol. 68. - № 20. - P. 3323-3335.

191. Yue S. Tspan8 and CD151 promote metastasis by distinct mechanisms / S. Yue, W. Mu, M. Zoller // European Journal of Cancer. - 2013. - Vol. 49. - № 13. -P. 2934-2948.