Производные прогестерона, селективно взаимодействующие с его мембранными рецепторами, и их избирательные эффекты тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.03.01, кандидат наук Поликарпова Анна Вадимовна

• Поликарпова Анна Вадимовна
• кандидат наук
• 2019

Оглавление диссертации кандидат наук Поликарпова Анна Вадимовна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. РЕЦЕПТОРЫ ПРОГЕСТЕРОНА

1.1.1. Ядерные рецепторы прогестерона

1.1.1.1. Изоформы ядерного рецептора прогестерона

1.1.1.2. Строение, субклеточная локализация и механизм проведения сигнала ядерного рецептора прогестерона

1.1.1.3. Тканевое распределение и регуляция экспрессии ядерного рецептора прогестерона

1.1.1.4. Лигандсвязывающая активность ядерного рецептора прогестерона

1.1.2. Мембранные рецепторы прогестерона

1.1.2.1. Семейство PAQR

1.1.2.2. Строение и субклеточная локализация мембранных рецепторов прогестерона

1.1.2.3. Сигнальные пути прогестерона, опосредуемые мембранными рецепторами прогестерона

1.1.2.4. Тканевое распределение и регуляция экспрессии мембранных рецепторов прогестерона

1.1.2.5. Лигандсвязывающая активность мембранных рецепторов прогестерона

1.1.3. Другие сенсоры прогестерона

1.1.3.1. Рецепторы окситоцина и у-аминомасляной кислоты

1.1.3.2. Компонент мембранного рецептора прогестерона

1.2. КОРТИКОСТЕРОИД-СВЯЗЫВАЮЩИЙ ГЛОБУЛИН

1.3. ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИЕ СВОЙСТВА ПРОГЕСТИНОВ

1.3.1. Половые различия при аутоиммунных и инфекционных заболеваниях

1.3.2. Иммуномодулирующие эффекты прогестерона в репродуктивной системе

1.3.3. Иммуномодулирующие эффекты прогестерона при беременности

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. БИОЛОГИЧЕСКИЙ МАТЕРИАЛ

2.1.1. Клеточные линии

2.1.1.1. Обоснование выбора клеточной линии BxPC3 длярадиолигандного анализа

2.1.1.2. Обоснование выбора культуры мононуклеарных клеток (PBMC) и других клеточных линий (Jurkat, THP-1, ^62) для определения эффектов прогестерона и его аналогов

2.1.1.3. Обоснование выбора дрожжей для определения транскрипционной активности

2.1.2. Используемые в работе животные

2.1.2.1. Обоснование выбора крысиного материала для радиолигандного анализа

2.2. МАТЕРИАЛЫ

2.2.1. Реактивы

2.2.2. Исследуемые синтетические стероиды

2.3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ МЕТОДЫ

2.3.1. Культивирование клеток

2.3.1.1. Культивирование клеточных линий

2.3.1.1.1. Особенности культивирования линии BxPC3

2.3.1.1.2. Приготовление лизата клеток BxPC3

2.3.1.1.3. Особенности культивирования линий Jurkat, THP-1 и ^62

2.3.1.2. Выделение PBMC из периферической крови доноров

2.3.1.3. Инкубация клеток с гормонами

2.3.1.4. Культивирование дрожжевых клеток

2.3.1.4.1. Трансформация клеток дрожжей

2.3.1.4.2. Отбор клонов методом ПЦР и электрофореза в агарозном геле

2.3.2. Радиолигандный анализ

2.3.2.1. Измерение и анализ связывания [3Н]прогестерона с целыми клетками линии BxPC3

2.3.2.2. Измерение и анализ связывания [3Н]прогестерона с цитозольной фракцией матки

2.3.2.3. Получение бесстероидной сыворотки, измерение и анализ связывания [3Н]прогестерона с транскортином сыворотки крови

2.3.2.4. Анализ результатов радиолигандного анализа

44

45

2.3.3. Определение антагонистической и агонистической активности соединений к nPRs в

клетках дрожжей

2.3.4. Молекулярно-биологические методы

2.3.4.1. Определение экспрессии мРНК цитокинов методом ПЦР-РВ

2.3.4.1.1. Выделение РНК из клеток

2.3.4.1.2. Обработка РНК ДНКазой

2.3.4.1.3. Синтез кДНК

2.3.4.1.4. Количественная ПЦР в реальном времени

2.3.4.1.5. Анализ результатов ПЦР-РВ

2.3.4.2. Секвенирование ПЦР продуктов

2.3.5. Биохимические методы

2.3.5.1. Иммуноблоттинг

2.3.5.2. Определение концентрации цитокинов в культуральной среде

2.3.6. Статистическая обработка данных

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ: ПОИСК ПРОИЗВОДНЫХ ПРОГЕСТЕРОНА, СЕЛЕКТИВНО ВЗАИМОДЕЙСТВУЮЩИХ С ЕГО МЕМБРАННЫМИ РЕЦЕПТОРАМИ

3.1. КОНКУРЕНТНАЯ АКТИВНОСТЬ ПРОИЗВОДНЫХ ПРОГЕСТЕРОНА ПРИ СВЯЗЫВАНИИ С МЕМБРАННЫМИ РЕЦЕПТОРАМИ ПРОГЕСТЕРОНА В КЛЕТКАХ ЛИНИИ BxPC3

3.2. КОНКУРЕНТНАЯ АКТИВНОСТЬ ПРОИЗВОДНЫХ ПРОГЕСТЕРОНА ПРИ СВЯЗЫВАНИИ С ЯДЕРНЫМИ РЕЦЕПТОРАМИ ПРОГЕСТЕРОНА МАТКИ КРЫСЫ

3.3. ВЛИЯНИЕ ВЫБРАННЫХ СОЕДИНЕНИЙ НА ТРАНСКРИПЦИОННУЮ АКТИВНОСТЬ nPR-B, ЭКПРЕССИРОВАННОГО В ДРОЖЖАХ Saccharomyces сегву181ав

3.4. КОНКУРЕНТНАЯ АКТИВНОСТЬ ПРОИЗВОДНЫХ ПРОГЕСТЕРОНА ПРИ СВЯЗЫВАНИИ С ТРАНСКОРТИНОМ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА

ГЛАВА 4. РЕЗУЛЬТАТЫ: ВЛИЯНИЕ ВЫБРАННЫХ АНАЛОГОВ НА ПРОДУКЦИЮ ЦИТОКИНОВ ИММУННЫМИ КЛЕТКАМИ

4.1. ВЛИЯНИЕ ВЫБРАННЫХ СОЕДИНЕНИЙ НА ЭКСПРЕССИЮ ЦИТОКИНОВ В КЛЕТКАХ ЛИНИИ JURKAT

4.2. ВЛИЯНИЕ ВЫБРАННЫХ СОЕДИНЕНИЙ НА ЭКСПРЕССИЮ ЦИТОКИНОВ В КЛЕТКАХ ЛИНИИ THP-1

4.3. ВЛИЯНИЕ ВЫБРАННЫХ СОЕДИНЕНИЙ НА ЭКСПРЕССИЮ ЦИТОКИНОВ В КЛЕТКАХ ЛИНИИ К562

4.4. ВЛИЯНИЕ ВЫБРАННЫХ СОЕДИНЕНИЙ НА ЭКСПРЕССИЮ ЦИТОКИНОВ В МОНОНУКЛЕАРНЫХ КЛЕТКАХ КРОВИ (PBMC)

4.4.1. Половые различия в экспрессии мРНК цитокинов в PBMC

4.4.2. Влияние прогестерона и его селективных к mPRs аналогов в концентрации 10 мкМ на экспрессию мРНК цитокинов

4.4.3. Сравнение уровней мРНК исследуемых цитокинов в контрольных образцах с образцами после обработки прогестероном

4.4.4. Влияние прогестерона и его селективных к mPRs аналогов (20 и 50 мкМ) на экспрессию мРНК провоспалительных цитокинов в клетках PBMC

4.4.5. Влияние прогестерона и его селективных к mPRs аналогов (20 и 50 мкМ) на экспрессию противовоспалительных цитокинов в клетках PBMC

4.4.6. Влияние прогестерона и его селективных к mPRs аналогов (20 и 50 мкМ) на экспрессию факторов клеточного иммунного ответа в клетках PBMC

4.4.7. Соответствие изменений в экспрессии мРНК изменениям в уровне секретируемого белка цитокинов в клетках PBMC

4.4.8. Суммированные результаты по влиянию прогестерона и его селективных к mPRs аналогов на экспрессию мРНК факторов иммунитета в разных клеточных линиях

ГЛАВА 5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ПРИЛОЖЕНИЕ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

БЛАГОДАРНОСТИ

ВВЕДЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Производные прогестерона, селективно взаимодействующие с его мембранными рецепторами, и их избирательные эффекты»

Актуальность проблемы

Стероидный гормон прогестерон абсолютно необходим для нормального функционирования репродуктивной системы, а также для сохранения беременности. Множество эффектов этого стероидного гормона в организме животных и человека опосредуется его рецепторами, относящимися к семейству ядерных рецепторов (nPRs) [Смирнов, 2005]. Однако исследования последних лет показывают, что немаловажную роль в регуляции многих физиологических процессов играет связывание прогестинов с мембранными рецепторами прогестерона (mPRs) [Valadez-Cosmes et al., 2016]. Эффекты этих гормонов, опосредуемые разными типами рецепторов, существенно различаются. К настоящему времени пока не удалось обнаружить полных избирательных агонистов и антагонистов mPRs, поэтому актуальность создания селективных лигандов mPRs, имеющих агонистическую и антагонистическую активность, не вызывает сомнений. Знание лигандсвязывающих свойств этих рецепторов является необходимым условием для создания селективных аналогов прогестерона, которые могут найти практическое применение в таких областях медицины, как акушерство и гинекология, терапия гормонзависимых опухолей и иммунотерапия. Поиск селективных агонистов и антагонистов mPRs является стартовой точкой для изучения механизмов передачи сигнала через эти рецепторы, а также для выявления физиологических эффектов прогестерона, опосредуемых через mPRs, одним из которых является его иммуномодулирующее действие. Прогестерон выполняет ключевую роль в процессах овуляции, имплантации бластоцисты и поддержании беременности в женском организме. Падение уровня прогестерона у многих видов млекопитающих и изменение уровня экспрессии его рецепторов у человека определяет начало процесса родов [Pieber et я1., 2001]. Важную роль во всех этих процессах играют иммунные клетки, рекрутируемые в репродуктивные органы и ткани женского организма, в том числе в яичник и плаценту - места синтеза прогестерона. Здесь они подвергаются действию высоких концентраций этого гормона, доходящих до уровня 125 мкМ. В связи с этим активно изучается действие прогестинов на иммунные клетки, в том числе и в концентрациях, обнаруживаемых в местах синтеза прогестерона. Процессы овуляции, имплантации и родовой деятельности сравнивают с локальным воспалением [Berbic et я1., 2014; Vinketova et я1., 2016]. Кроме того, во время беременности и в разные фазы менструального цикла меняется иммунный ответ на инфекции. В литературе существует множество противоречивых данных о влиянии прогестерона на разные типы иммунных клеток, а также о роли рецепторов, через которые осуществляет свое действие этот гормон. На настоящий момент нет единства в данных об экспрессии разных типов рецепторов в иммунных клетках, хотя большинство исследователей не находят ядерных

рецепторов прогестерона в Т-лимфоцитах [Dosiou et а1., 2008; Lissauer et а1., 2015]. Кроме того, не существует общепринятого мнения о влиянии прогестинов на экспрессию провоспалительных и противовоспалительных факторов, секретируемых этими клетками. Прогестерон и его синтетические аналоги, по-видимому, могут оказывать как провоспалительное, так и противовоспалительное действие в зависимости от концентрации гормона, типа иммунных клеток и их происхождения, ткани-мишени и уровня других про- и противовоспалительных факторов и требует дальнейшего изучения.

Исходя из вышесказанного, целью настоящей работы стал поиск производных прогестерона, селективно взаимодействующих с его мембранными рецепторами, и изучение их влияния на иммунную систему.

Для реализации поставленной цели нами были сформулированы следующие задачи:

1. Изучить возможность использования клеточной культуры BxPC3 аденокарциномы поджелудочной железы человека в качестве объекта для изучения лигандсвязывающих характеристик mPRs.

2. Исследовать сродство девяти новых производных прогестерона к mPRs в клетках линии BxPC3 и к nPRs из цитозольной фракции маток крыс и выбрать соединения, наиболее селективные к mPRs.

3. Исследовать взаимодействие синтетических производных прогестерона с транскортином крови человека для определения влияния потенциальных селективных аналогов на биодинамику глюкокортикоидов.

4. Проанализировать влияние прогестерона и выбранных соединений на экспрессию мРНК провоспалительных и противовоспалительных цитокинов в некоторых иммунных клеточных линиях человека (Jurkat, ТНР-1, К562).

5. Сравнить эффекты прогестерона и селективных лигандов mPRs на экспрессию мРНК и секрецию белка провоспалительных и противовоспалительных цитокинов в первичной культуре мононуклеарных клеток крови человека (РВМС).

Научная новизна исследования

В настоящей работе была показана возможность использования клеточной культуры ВхРС3 аденокарциномы поджелудочной железы человека, для которой характерно отсутствие экспрессии мРНК nPR при наличии высокой экспрессии мРНК mPRs, в качестве объекта для изучения лигандсвязывающих характеристик mPRs. Было исследовано сродство девяти новых синтетических производных прогестерона к рецепторам прогестерона разных типов. По результатам работы были выбраны два наиболее селективных к mPRs аналога, их действие на иммунные клетки человека впервые было изучено в этой работе.

Теоретическая и практическая значимость работы

Теоретическое значение работы заключается в изучении структуры лигандсвязывающего кармана mPRs с помощью анализа связывания производных прогестерона с различными модификациями в структуре стероида. Это позволило выявить ряд особенностей взаимодействия прогестинов с данным типом рецепторов, таких как незначимость 3-кетогруппы и важность заместителей в 6 и 19 положении стероидного скелета. Селективные агонисты и антагонисты мембранных рецепторов прогестерона необходимы для изучения физиологических эффектов прогестерона, опосредуемых через данные рецепторы. С использованием выбранных селективных к mPRs аналогов было показано, что действие прогестерона на иммунные клетки осуществляется через его мембранные рецепторы. Кроме того, обнаружено преимущественно провоспалительное действие прогестерона и его селективных к мембранным рецепторам аналогов на макрофаги и мононуклеарные клетки периферической крови, но противовоспалительное на Т-лимфоциты. Лиганды mPRs во всех случаях действовали однонаправлено с прогестероном, поэтому можно ожидать, что они будут оказывать и в целом организме аналогичное прогестерону действие, не оказывая при этом побочных эффектов в клетках, содержащих nPRs.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Среди новых производных прогестерона найдены два соединения, практически не имеющие сродства к nPRs, но взаимодействующие с mPRs, а следовательно, являющиеся их селективными лигандами. Это соединения 19-гидроксипрегн-4-ен-20-он и 19-гидроксипрегн-3-ен-20-он.

2. Новые селективные лиганды тРЯБ обладают иммуномодуляторным действием, аналогичным действию прогестерона на изучаемые иммунные клетки. Действие прогестерона на исследованные иммунные клетки (Т-лимфоциты, моноциты, мононуклеарные клетки крови) осуществляется через тРЯБ.

3. Все исследованные стероиды оказывали на иммунные клетки как провоспалительные, так и противовоспалительные эффекты.

4. Направленность действия прогестинов на экспрессию и секрецию цитокинов зависит от фенотипа данной иммунной клетки и может быть как стимулирующей, так и ингибирующей в отношении одного и того же фактора.

Апробация результатов диссертации

Основные результаты работы были представлены на Международной научной конференции «Ломоносов - 2013» (Москва, 2013), на Кластере конференций «Оргхим-2016» (Репино, Санкт-Петербург, 2016), на совместном съезде федерации Европейских

физиологических обществ (Вена, Австрия, 2017), на 43 съезде федерации Европейских биохимических обществ (Прага, Чехия, 2018).

Диссертация апробирована на заседании кафедры физиологии человека и животных биологического факультета МГУ имени М.В. Ломоносова (протокол от 2 апреля 2019 г.).

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 9 печатных работ: 5 статей в периодических изданиях, индексируемых аналитическими базами Scopus и Web of Science и 4 тезиса в сборниках докладов научных конференций.

Личный вклад автора

Соискатель участвовала в каждом этапе выполнения данной диссертационной работы, в том числе в планировании протокола исследования, проведении экспериментов, статистической обработке и обобщении результатов, написании статей и тезисов докладов, представлении результатов работы на российских и международных конференциях.

Структура и объем работы

Диссертационная работа изложена на 121 странице и состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы, материалы и методы исследования, результаты, обсуждение результатов, заключение, список цитируемой литературы. Работа проиллюстрирована 8 таблицами и 33 рисунками. Список литературы включает 186 источников.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. РЕЦЕПТОРЫ ПРОГЕСТЕРОНА

Прогестерон - стероидный гормон, синтезируемый клетками плаценты, яичников и надпочечников, необходим для нормального функционирования репродуктивных органов, а также для инициации и поддержания беременности. Кроме того, прогестерон оказывает множество других эффектов, включая регуляцию органов и систем, прямо не относящихся к репродуктивным, таких как мозг, молочная железа, сердечно-сосудистая и иммунная системы. Разнообразие внутриклеточных сигналов, инициируемых прогестероном в различных биологических системах, позволяет предположить существование нескольких различных типов сенсоров прогестерона, опосредующих эффекты этого гормона. Можно считать доказанным участие нескольких групп рецепторных белков в передаче сигнала прогестерона и его производных. Ими являются ядерные рецепторы прогестерона (nPRs), мембранные рецепторы прогестерона (mPRs), компоненты мембранного рецептора прогестерона (PGRMC), а также рецепторы гамма-аминомасляной кислоты (GABAa) и окситоцина (OTR) [Токмаков и Фуками, 2009]. Некоторые используемые в клинике синтетические прогестины, такие как медроксипрогестерона ацетат (МПА), левоноргестрел, несторон, также могут действовать через глюкокортикоидные (GR) и андрогенные (AR) ядерные рецепторы [Liu et al., 2010].

1.1.1. Ядерные рецепторы прогестерона

Большинство эффектов прогестерона в организме человека и других млекопитающих опосредовано его рецепторами, относящимися к семейству ядерных рецепторов. Кроме рецепторов прогестерона это семейство включает также рецепторы других стероидных гормонов (андрогенов AR, эстрогенов ER, глюкокортикоидов GR и минералкортикоидов MR), рецепторы тиреоидных гормонов, витамина D3, ретиноевых кислот, сенсоры некоторых негормональных соединений (желчные кислоты, производные холестерина). Ядерные рецепторы прогестерона имеют сходную структурную организацию и представляют собой транскрипционные факторы, которые обеспечивают прямой контроль экспрессии генов [Смирнов, 2005].

1.1.1.1. Изоформы ядерного рецептора прогестерона

У человека ядерный рецептор прогестерона nPR экспрессируется в нескольких изоформах, являющихся продуктом одного гена PGR, локализованного в 11 хромосоме [Law et al., 1987]. Наиболее представлены в организме две изоформы nPR-A (94 кДа) и nPR-B (120 кДа), которые образуются в результате иницицации транскрипции с двух разных промоторов одного гена. nPR-A представляет собой укороченную форму рецептора, у которой отсутствует N-концевой фрагмент из 164 аминокислотных остатков. Изоформы nPR различаются по спектру

индуцируемых прогестероном ответов. Исследования in vitro с использованием репортерных конструкций, находящихся под контролем прогестерон-чувствительного элемента, показали, что nPR-B является преобладающим посредником индуцированной прогестероном активации транскрипции, тогда как изоформа nPR-А обладает минимальной транскрипционной активностью. В этой парадигме nPR-А ингибирует транскрипционную активность nPR-B, особенно когда уровень первой изоформы преобладает (т.е. соотношение nPR-A/nPR-B больше 1). Это привело к выдвижению гипотезы, что nPR-А является эндогенным репрессором nPR-B и что чувствительность клеток к прогестерону обратно пропорциональна отношению nPR-A/nPR-В [Pieber et al., 2001; Vegeto et al, 1993; Merlino et al., 2007]. Функциональные различия между двумя изоформами были выявлены на нокаутных мышах. Данные исследования показали, что мыши, нокаутные по nPR-A, имеют нормальное развитие молочной железы, тогда как у мышей, нокаутных по nPR-B, морфогенез и функционирование молочной железы нарушалось. Однако, было установлено, что нокаутные по nPR-A мыши были стерильными, таким образом, изоформа nPR-A играет важную роль в функционировании яичников и матки и необходима для процессов овуляции и децидуализации [Mulac-Jericevic et al., 2003; Mulac-Jericevic et al., 2000; Fernandez-Valdivia et al., 2005]. Микроматричный анализ клеток рака молочной железы показал, что 65 из 94 регулируемых прогестероном генов регулировались только nPR-B, 25 были общими для обеих изоформ и 4 регулировались только nPR-A [Richer et al., 2002].

Третья изоформа nPR-C (45 - 50 кДа) представляет изоформу, укороченную с N-конца, и является продуктом мРНК, экспрессированной в клетках рака молочной железы и образованной в результате инициации трансляции по остатку метионина 595 [Wei et al., 1990]. Изоформа nPR-C обладает способностью связывать лиганд, но не имеет ДНК-связывающей активности. Положительная регуляция экспрессии этой изоформы в эндометрии во время родовой деятельности может противодействовать эффектам, опосредованным nPR-А и nPR-B, путем сокращения уровня прогестерона [Condon et al., 2006]. Однако, некоторые исследования позволяют предположить, что изоформа nPR-C не экспрессируется in vivo и не играет особой роли в сигналинге прогестерона [Samalecos and Gellersen, 2008].

1.1.1.2. Строение, субклеточная локализация и механизм проведения сигнала ядерного рецептора прогестерона

Ядерные рецепторы прогестерона имеют модульную (доменную) организацию, включающую несколько независимых, но функционально связанных доменов. Изоформы А и B ядерного рецептора состоят из идентичных С-концевого лигандсвязывающего домена (ЛСД), центрального ДНК-связывающего домена (ДСД) и амино-концевого домена (АКД). Рецептор также содержит два домена активации транскрипции - активационные функции (АФ): АФ1 - в

АКД и АФ2 - внутри ЛСД. Для изоформы PR-B характерно наличие дополнительной АФ3 в домене АКД (рисунок 1) [Hill et al., 2012].

Рисунок 1. Схема строения ядерных рецептора прогестерона человека nPR-A и nPR-B. ЛСД - лигандсвязывающий домен, ДСД - ДНК-связывающий домен, АКД - амино-концевой домен, ИД - ингибиторный домен, СКР - С-концевое расширение, ш - шарнир, АФ1, АФ2 и АФ3 - активационные функции 1, 2 и 3, полипролиновый мотив - 421-428, K388 - сайт сумоилирования [Hill et al., 2012].

Активационные функции АФ1 и АФ3 амино-концевого домена взаимодействуют с белками-коактиваторами и могут действовать независимо от связывания рецептора с лигандом. Амино-концевой домен обеих изоформ пРЯ содержит функционально независимый ингибиторный домен (ИД), подавляющий активность АФ1 и АФ2 и являющийся сильным репрессором транскрипции. Отсутствие АФ3 в пРЯ-А способствует проявлению активности этого домена, что делает изоформу пРЯ-А репрессором пРЯ-В и других ядерных рецепторов стероидов [Ноу1апё е! а1., 1998]. ДНК-связывающий домен является наиболее консервативным доменом пРЯб и состоит из двух цинковых пальцев и С-концевого расширения. Аминокислотные остатки в составе ДНК-связывающего домена распознают и связывают гормончувствительные элементы (ГЧЭ) на ДНК. Лигандсвязывающий домен представляет собой мультифункциональный домен, опосредующий связывание рецептора с лигандом, димеризацию, взаимодействие рецептора с белками теплового шока (Нбр), локализацию в ядро и трансактивационную функцию. С помощью рентгеноструктурного анализа показано, что структура ЛСД образована складыванием а-спиралей 11-13 в три слоя ^§иеге, 1999]. Гормональные лиганды индуцируют конформационные изменения в ЛСД (особенно в 12 а-спирали) и формируют карман активационной функции АФ2, которая связывается с

корегуляторами, опосредующими активацию или ингибирование транскрипции [Grimm et al., 2016].

C помощью иммуногистохимического окрашивания и конфокальной микроскопии была определена субклеточная локализация изоформ А и В. Было показано, что nPR-A локализуется в клеточном ядре даже в отсутствие прогестерона. Большая часть изоформы nPR-B, наоборот, находится в цитоплазме в отсутствие лиганда, однако после связывания с гормоном быстро транслоцируется в ядро [Leslie et al., 2005].

Находясь в цитоплазме, nPRs взаимодействуют с белком теплового шока Hsp90, экранирующим ДНК-связывающий домен рецептора. Связывание nPRs с прогестероном вызывает распад комплекса рецептора c Hsp90 и димеризацию. В присутствии лиганда-агониста (прогестерон) димерный рецептор, связываясь с прогестерон-чувствительным элементом в промоторе гена-мишени, рекрутирует многокомпонентные комплексы коактиваторов, коинтеграторов и гистоацетилтрансфераз, что обеспечивает деконденсацию хроматина и инициацию транскрипции. Особую роль играет 12-я а-спираль рецептора. Связывание nPRs с прогестероном вызывает изменение ориентации этой спирали, что препятствует взаимодействию рецептора с корепрессором и способствует взаимодействию с коактиватором [Смирнов, 2008].

Кроме классического геномного механизма проведения сигнала nPRs также могут опосредовать быстрые негеномные эффекты прогестерона. В амино-концевом домене рецептора содержится полипролиновый мотив, заключенный между 421 и 428 аминокислотными остатками. Этот мотив обеспечивает прямое взаимодействие с SH3 доменом различных цитоплазматических сигнальных молекул, включая c-Src тирозинкиназы, и стимуляцию их активности [Boonyaratanakornkit, 2001]. В экспериментах с клетками опухоли молочной железы показано, что PR-A в присутствии прогестерона взаимодействует с белком Ga13, а синтетический прогестин МПА способствует взаимодействию PR с тирозинкиназой c-Src и активации PI3K, приводя к запуску каскада малых ГТФаз [Fu et al., 2008].

1.1.1.3. Тканевое распределение и регуляция экспрессии ядерного рецептора прогестерона

Экспрессия транскриптов nPR наблюдается как в репродуктивной системе, так и в органах и тканях, не относящихся к репродуктивным, причем активность промоторов тканеспецифична. Кроме того, экспрессия nPRs может зависеть от различных факторов. Например, известно, что простагландины дозозависимо повышают экспрессию мРНК nPR-A в клетках миометрия человека, но не действуют при этом на уровень мРНК nPR-B [Madsen, 2004]. Эстрадиол же, наоборот, приводит к повышению экспрессии изоформы nPR-B, действуя через ERa [Flototto et al., 2004]. Экспрессия мРНК nPRs была обнаружена в эпителиальных, гладкомышечных и стромальных клетках матки, маточных сосудах, мочевом пузыре, капсулярной области почек,

двенадцатиперстной и тонкой кишке мышей. Показано, что введение 17Р-эстрадиола валерата овариэктомированным мышам индуцирует экспрессию транскриптов nPRs в эпителиальных клетках матки, влагалища и мочеиспускательного канала. Кроме того, эстрогены индуцируют экспрессию рецептора в клетках поджелудочной железы мыши [Uotinen et al., 1999].

Большинство исследований изоформ nPR-A nPR-B проведено на модельных объектах, в которых экспрессируется только одна изоформа, т.е. гомодимер nPR является доминантной формой рецептора. Однако, в клетках, коэкспрессирующих обе изоформы nPRs, может встречаться три формы рецептора (гомодимер nPR-B, гомодимер nPR-A, гетеродимер nPR-A и nPR-B). У животных в зависимости от ткани преобладает одна из изоформ, например, в репродуктивных органах грызунов экспрессируется в основном nPR-A, тогда как в мозге преобладает изоформа nPR-B [Kato et al., 1993]. Более того, изоформы nPR-A и nPR-B часто экспрессируются в разных клетках репродуктивного тракта, таким образом, действие прогестерона опосредовано гомодимером рецептора [Gava et al., 2004]. Однако у человека большинство клеток-мишеней прогестерона экспрессируют nPR-A и nPR-B на эквивалентных уровнях. Клетки, экспрессирующие только одну изоформу, встречаются редко. Следовательно, чувствительность тканей к прогестерону определяется суммарным действием через преобладающий гетеродимер nPR-A и nPR-B [Bedaiwy et al., 2015]. Экспрессия nPRs обнаружена в нейронах гипоталамуса и клетках гипофиза, секретирующих лютеинизирующий гормон (ЛГ) [Gadkar-Sable et al., 2005]. В миометрии человека изоформа nPR-B экспрессируется на высоком уровне на протяжении всей беременности, тогда как индукция экспрессии nPR-A наблюдается только после начала родов. Эти данные позволяют предположить, что повышающая экспрессия nPR-A в миометрии в конце беременности может быть причиной инициации родовой деятельности, приводя к выключению действия прогестерона [Pieber et al., 2001].

1.1.1.4. Лигандсвязывающая активность ядерного рецептора прогестерона

В трансфецированных рецепторами человека nPR-A и nPR-B клетках линии CHO K1 показана высокая аффинность обеих изоформ ядерного рецептора, независимо от количества экспрессированного белка [Dijkema et al., 1998]. Стероиды основных классов кортикостерон, тестостерон и эстрадиол являются очень слабыми конкурентами за связывание с nPRs в цитозоле матки крыс, богатой этими рецепторами [Лисанова и соавт., 2013]. Замена ангулярных метильных групп молекулы прогестерона этильной или этенильной группами ведет к снижению сродства к ядерному рецептору прогестерона [Kelder et al., 2010]. Показано, что 3-кетогруппа прогестерона является ключевой для узнавания лиганда рецептором. Эта группа играет решающую роль в формировании сети водородных связей с аминокислотными остатками лигандсвязывающего кармана nPR. В образовании водородных связей с 3 -кето группой гормона принимают участие Gln725, Arg766 и Phe778 с привлечением молекулы воды. Наиболее

вероятным донором для 20-кетогруппы является Thr894, так как он присутствует только в рецепторах, которые связывают гормоны, содержащие 17-алкил-кетогруппу (nPR, GR, MR) [Williams and Sigler, 1998]. Вместе с тем, прямых доказательств формирования полярных связей 20-кетогруппы прогестерона с nPR не получено.

1.1.2. Мембранные рецепторы прогестерона

Экспериментальные данные показывают, что ядерные рецепторы стероидов, в том числе рецепторы прогестерона, могут опосредовать быстрые негеномные эффекты гормонов. Однако, быстрые эффекты прогестерона и других стероидных гормонов наблюдаются и в клетках, лишенных ядерных рецепторов. Тот факт, что одним из ранних эффектов прогестерона в ряде клеток и тканей является быстрое снижение уровня внутриклеточного цАМФ, позволяет предполагать участие ассоциированных с G-белком трансмембранных рецепторов в передаче сигнала стероида. Обнаруженные белки имеют молекулярную массу около 40 кДа и принадлежат к семейству рецепторов прогестинов и адипонектина (PAQR), которые включают в свою структуру семь трансмембранных доменов, являющихся характеристикой ассоциированных с G-белками трансмембранных рецепторов. Филогенетическая консервативность mPRs у разных видов позвоночных (от рыб и земноводных до человека) говорит о функциональной значимости этих белков. Показано участие мембранных рецепторов прогестерона в важнейших физиологических функциях репродуктивных тканей, печени, нейроэндокринных тканей, в иммунной системе, в процессах нервной и сердечно-сосудистой систем, а также в развитии опухолей молочной железы и яичников [Токмаков и Фуками, 2009].

1.1.2.1. Семейство PAQR

В семейство рецепторов прогестинов и адипонектина (PAQR) входят по крайней мере 11 генов млекопитающих. Филогенетический анализ показал, что все белки семейства могут быть распределены по трем подсемействам. Подсемейство I включает белки PAQR1, PAQR2, PAQR3 и PAQR4, родственные рецептору адипонектина (AdipoR). Данные белки встречаются также в грибах. PAQR5, PAQR7 и PAQR8 кодируют мембранные рецепторы прогестерона mPRa, mPRp и mPRy соответственно и образуют подсемейство II. Рецепторы этого подсемейства найдены только у хордовых животных. Кроме того, были обнаружены PAQR6 (mPRô) и PAQR9 (mPRs), которые также способны обеспечивать действие прогестерона. PAQR10 и PAQR11 образуют подсемейство белков III, родственных гемолизину. У бактерий гемолизин функционирует как порообразующий мембранный белок [Smith et al., 2008]. Белки семейства PAQR не были обнаружены у архебактерий, в связи с чем предполагается, что эволюция предшественника гена PAQR произошла у последнего общего предка эубактерий и эукариот [Tang et al., 2005].

1.1.2.2. Строение и субклеточная локализация мембранных рецепторов прогестерона

Рецепторы адипонектина, AdipoRl и AdipoR2, имеют топологию, обратную таковой рецепторов, сопряженных с G-белками (GPCR), т.е. их N-конец обращен в цитоплазму, а C-конец - во внеклеточное пространство. В то же время мембранные рецепторы прогестинов, mPRa, ß и Y по данным, полученным с помощью антител против N- и C-концовых участков рецепторов, имеют такую же топологию, что и GPCRs (рисунок 2) [Tang et al., 2005].

Внеклеточные фрагменты

аДаПТ°Р </APPLl^>

Рисунок 2. Схематическое изображение рецепторов AdipoR1/2 и mPRa.

Методом иммуноцитохимии удалось обнаружить, что mPRa локализуется на клеточной мембране. В трансфецированных этим рецептором клетках наиболее активное связывание [3Н]-прогестерона наблюдается в мембранной фракции. Незначительное связывание идентифицируется также в микросомальной и ядерной фракциях [Thomas et al., 2007]. Иммунофлюоресцентный анализ показал, что mPRp локализуется в плазматической мембране клеток кумулуса. Однако в фибробластах эмбриона мыши mPRp был обнаружен только в мембранах эндоплазматического ретикулума [Qiu et al., 2008]. Гибридный белок овцы mPRa-GFP, экспрессируемый в клетках CHO, также не выявляется на плазматической мембране и локализуется внутри клетки в эндоплазматическом ретикулуме. Сходно распределяется эндогенный mPRp в лютеальных клетках яичника овцы [Ashley et al., 2006]. На апикальных мембранах реснитчатых клеток, направленных в люмен фаллопиевых труб у человека и мыши, найдены рецепторы mPRp и mPRy, причем, mPRp локализуется на самой ресничке, а mPRy - на ее основании [Nutu et al., 2007].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Поликарпова Анна Вадимовна, 2019 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Гохелашвили А.М., Гогебашвили Н.В., Датунашвили И.Т., Бежиташвили Н.Д., Джаши Л.М., Саникидзе Т.В. Изучение иммуномодуляторной активности прогестерона в экспериментальной модели клеток Jurkat // Georgian medical news. - Т.232-233. - С. 112—116.

2. Лисанова О.В., Щелкунова T.A., Морозов И. А., Рубцов П.М., Левина И.С., Куликоваа Л.Е., Смирнов А.Н. Подходы к конструированиюизбирательных лигандов мембранного рецептора прогестерона альфа // Биохимия (Москва). - 2013. - Т.78 - №3. - С.320-328.

3. Мичурина А.О., Поликарпова А.В., Левина И.С., Куликова Л.Е., Заварзин И.В., Гусева А.А., Морозов И.А., Рубцов П.М., Смирнова О.В., Щелкунова Т.А. Изучение агонистического и антагонистического действия производных прогестерона в регуляции транскрипционной активности ядерного рецептора В прогестерона человека в дрожжевой модельной системе // Биохимия (Москва). - 2018. - Т.83. - №5. - С.749-762.

4. Смирнов АН., Покровская Е.В., Шевченко В.П., Нагаев И.Ю., Мясоедов Н.Ф., Левина И.С., Куликова Л.Е., Камерницкий А.В. Видовые и тканевые особенности распределения белков, связывающих 16а,17а-циклоалкановые производные прогестерона // Биоорганическая химия. -2002. - Т.28. - №3. - С.251-257ю

5. Смирнов А.Н. Молекулярная биология прогестерона // Российский химический журнал. -2005. - Т. XLIX. - №1. - С.64-74.

6. Смирнов А.Н. Элементы эндокринной регуляции // Издательская группа «Гэотар-Медиа». - 2008.

7. Смирнов А.Н. Эндокринная регуляция // Издательская группа «Гэотар-Медиа» - 2009.

8. Токмаков А.А., Фуками Я. Внегеномные механизмы действия прогестерона // Цитология. - 2009. - Т.51. - №5. - С.403-416.

9. Федюшкина И.В., Скворцов В.С., Ромеро Рейес И.В., Левина И.С. Молекулярный докинг и 3D-QSAR производных 16а.17а-циклоалканопрогестеронов как лигандов рецепторов прогестерона // Биомедицинская химия. - 2013. - Т.59. - С.622-635.

10. Щелкунова Т.А, Морозов И.А. Молекулярные основы и тканевая специфичность действия прогестинов // Молекулярная биология. - 2015. - Т.49. - №5. - С.728-748.

11. Abelius M.S., Lempinen Е., Lindblad K., Ernerudh J., Berg G., Matthiesen L., Nilsson L.J., Jenmalm M.C. Th2-like chemokine levels are increased in allergic children and influenced by maternal immunity during pregnancy // Pediatric allergy immunology. - 2014. - V.25. - №4. - P.387-393.

12. Aflatoonian R, Tuckerman E, Elliott SL, Bruce C, Aflatoonian A, Li TC, Fazeli A. Menstrual cycle-dependent changes of Toll-like receptors in endomentrium // Human reproduction. -2007. - V.22.

- №2. - P.586-593.

13. Akison L.K., Robertson S.A., Gonzalez M.B., Richards J.S., Smith C.W., Russell D.L., Robker R.L. Regulation of the ovarian inflammatory response at ovulation by nuclear progesterone receptor // American journal of reproductive immunology. - 2018. - V.79. - №6. - e12835.

14. Akk G., Covey D.F., Evers A.S., Steinbach J.H., Zorumski C.F. Mennerick S. Mechanisms of neurosteroid interactions with GABA(A) receptors // Pharmacology & therapeutics. - 2007. -.V.116. №1. - P.35-57.

15. Andersen C.Y. Characteristics of human follicular fluid associated with successful conception after in vitro fertilization // The journal of clinical endocrinolofy and metabolism. - 1993. - V.77. -№5.

- P.1227-1234.

16. Areia A., Vale-Pereira S., Alves V., Rodrigues-Santos P., Moura P., Mota-Pinto A. Membrane progesterone receptors in human regulatory T cells: a reality in pregnancy // BJOG. - 2015. - V.122. -№11. - P.1544-1550.

17. Areia A., Vale-Pereira S., Alves V., Rodrigues-Santos P., Santos-Rosa M., Moura P., Mota-Pinto A. Can membrane progesterone receptor alpha on T regulatory cells explain the ensuing human labour? // Journal of reproductive immunology. - 2016. - V.113. - P.22-26.

18. Arruvito L., Giulianelli S., Flores A.C., Paladino N., Barboza M., Lanari C., Fainboim L. NK cells expressing a progesterone receptor are susceptible to progesterone-induced apoptosis // Journal of immunology. -2008. - V.180. - №8. - P.5746-5753.

19. Ashley R.L, Clay C.M., Farmerie T.A., Niswender G.D., Nett T.M. Cloning and characterization of an ovine intracellular seven transmembrane receptor for progesterone that mediates calcium mobilization // Endocrinology. - 2006. - V.147. - №9. - P.4151-4159.

20. Ashley R.L., Arreguin-Arevalo J.A., Nett T.M. Binding characteristics of the ovine membrane progesterone receptor alpha and expression of the receptor during the estrous cycle // Reproductive biology and endocrinology. - 2009. - V.7 - №42 - P.42.

21. Baravalle M.E., Stassi A.F., Velazquez M.M., Belotti E.M., Rodriguez F.M., Ortega H.H., Salvetti N.R. Altered expression of pro-inflammatory cytokines in ovarian follicles of cows with cystic ovarian disease // Journal of comparative pathology. - 2015. - V.153. - №2-3. - P. 116-130.

22. Beagley K.W., Gockel C.M. Regulation of innate and adaptive immunity by the female sex hormones oestradiol and progesterone // FEMS immunology and medical microbiology. - 2003. - V.38.

- №1. - P.13-22.

23. Bedaiwy M.A., Dahoud W., Skomorovska-Prokvolit Y., Yi L., Liu J.H., Falcone T., Hurd W.W., Mesiano S. Abundance and localization of progesterone receptor isoforms in endometrium in women

with and without endometriosis and in peritoneal and ovarian endometriotic implants // Reproductive sciences. - 2015. - V.22. - №9. - P.1153-1161.

24. Berbic M., Ng C.H., Fraser I.S. Inflammation and endometrial bleeding // Climacteric. - 2014. -V.17. - №2. - P.47-53.

25. Blackmore P.F., Lattanzio F.A. Cell surface localization of a novel non-genomic progesterone receptor on the head of human sperm // Biochemical and biophysical research communications. - 1991. - V.181. - №1 - P.33 -336.

26. Bommer I., Muzzio D.O., Zygmunt M., Jensen F. Progesterone and estradiol exert an inhibitory effect on the production of anti-inflammatory cytokine IL-10 by activated MZ B cells // Journal of reproductive immunology. - 2016. - V.116. - P. 113-116.

27. Boonyaratanakornkit V., Scott M.P., Ribon V. et al. Progesterone receptor contains a proline -rich motif that directly interacts with SH3 domains and activates c -Src family tyrosine kinases // Molecular Cell. - 2001. - V.8. - P.269-280.

28. Boots C.E., Jungheim E.S. Inflammation and human ovarian follicular dynamics // Seminars in reproductive medicine. - 2015. - V.33. - №4 - P.270-275.

29. Boyum A. (1968) Isolation of mononuclear cells and granulocytes from human blood. Isolation of mononuclear cells by one centrifugation and of granulocytes by combining centrifugation and sedimentation at 1 g // Scandinavian journal of clinical and laboratory investigation. Supplementum. -1968. - V.97. - P.77-89.

30. Brannstrom M., Norman R.J., Seamark R.F., Robertson S.A. Rat ovary produces cytokines during ovulation // Biology of reproduction. - 1994. - V.50. - №1. - P.88-94.

31. Brunton P.J., Russel J.A. Endocrine induced changes in brain function during pregnancy // Brain Research. - 2010. - V.1364. - P.198-215.

32. Burton R.M., Westphal U. Steroid hormone-binding proteins in blood plasma // Metabolism. -1972, - V.21 - №3ro - P.253-276.

33. Buscher U., Chen F.C.K., Kentenich H., Schmiady H. Cytokines in the follicular fluid of stimulated and nonstimulated human ovaries; is ovulation a suppressed inflammatory reaction? // Human reproduction. - 1999. - V.14. - №1 - P.162-166.

34. Byrns M.C. Regulation of progesterone signaling during pregnancy: implications for the use of progestins for the prevention of preterm birth // The jornal of steroid biochemistry and molecular biology. - 2014. - V.139. - P. 173-181.

35. Cai Z., Stocco C.O. Expression and regulation of progestin membrane receptors in the rat corpus luteum // Endocrinology. - 2005. - V.146. - №12 - P. 5522- 5532.

36. Cahill M.A., Jazayeri J.A., Catalano S.M., Toyokuni S., Kovacevic Z., Richardson D.R. The emerging role of progesterone receptor membrane component 1 (PGRMC1) in cancer biology // Biochimica et biophysica acta. - 2016. - V.1866. - P.339-349.

37. Calandra T. Macrophage migration inhibitory factor and host innate immune responses to microbes // Scandinavian journal of infection diseases. - 2003. - V.35. - №9. - P.573-576.

38. Camilletti M.A., Ferraris J., Abeledo-Machado A., Converse A., Faraoni E.Y., Pisera D., Gutierrez S., Thomas P., Diaz-Torga G. Participation of membrane progesterone receptor a in the inhibitory effect of progesterone on prolactin secretion // Journal of neuroendocrinology. - 2018. - V.30.

- №9. - e12614.

39. Cannon M.J., Petroff M.G., Pate J.L. Effects of prostaglandin F2alpha and progesterone on the ability of bovine luteal cells to stimulate T lymphocyte proliferation // Biology of reproduction. - 2003.

- V.69. - №2. - P.695-700.

40. Charles N.J., Thomas P., Lange C.A. Expression of membrane progesterone receptors (mPR/PAQR) in ovarian cancer cells: implications for progesterone-induced signaling events // Hormones & cancer. - 2010. - V.1. - №4. - P.167-176.

41. Chen Y., Lv W., Jia J., Wang J., Yang J. Evaluation of serum concentrations of tumor necrosis factor (TNF)-a, interleukin (IL)-2, IL-10, and nitric oxide (NO) during estrous cycle, early pregnancy and abortion in goats // Animal reproduction science. - 2016. - V.174. - P.73-79.

42. Clancy K.B., Baerwald A.R., Pierson R.A. Systemic inflammation is associated with ovarian follicular dynamics during the human menstrual cycle // PLos One. - 2013. - V.8. - №5. - e64807.

43. Compston A., Coles A. Multiple sclerosis // Lancet. - 2008. - V.372. - №9648. - P.1502-1517.

44. Condon J.C., Hardy D.B., Kovaric K., Mendelson C.R. Up -regulation of the progesterone receptor (PR) - C isoform in laboring myometrium by activation of nuclear factor -kappaB may contribute to the onset of labor through inhibition of PR function // Molecular Endocrinology. - 2006. -V.20. - №4. - P.764-775.

45. Corkum C.P., Ings D.P., Burgess C., Karwowska S., Kroll W., Michalak T.I. Immune cell subsets and their gene expression profiles from human PBMC isolated by Vacutainer Cell Preparation Tube (CPTTM) and standard density gradient // BMC immunology. - 2015. - V.16. - P.48.

46. Crespo D., Goetz F.W., Planas J.V. Luteinizing hormone induces ovulation via tumor necrosis factor a-dependent increases in prostaglandin F2a in nonmammalian vertebrate // Scientific reports. -2015. - V.16. - №5. - 14210.

47. Curry A.E., Vogel I., Skogstrand K., Drews C., Schendel D.E., Flanders W.D., Hougaard D.M., Thorsen P. Maternal plasma cytokines in early- and mid-gestation of normal human pregnancy and their association with maternal factors // Journal of reproductive immunology. - 2008. - V.77. - №2. - P.152-160.

48. de los Santos M.J., García-Láez V., Beltrán-Torregrosa D., Horcajadas J.A., Martínez-Conejero J.A., Esteban F.J., Pellicer A., Labarta E. Hormonal and molecular characterization of follicular fluid, cumulus cells and oocytes from pre-ovulatory follicles in stimulated and unstimulated cycles // Human reproduction. - 2012. - V.27. - №6. - P.1596-1605.

49. Dekel N., Gnainsky Y., Granot .I, Racicot K., Mor G. The role of inflammation for a successful implantation // American journal of reproductive immunology. - 2014. - V.72. - №2. - P.141-147.

50. Di Renzo G.C., Giardina I., Clerici G., Brillo E., Gerli S. Progesterone in normal and pathological pregnancy // Hormone molecular biology and clinical investigation. - 2016. - V.27 - №1. P.35-48.

51. Dijkema R., Schoonen W.G., Teuwen R., van der Struik E., de Ries R.J., van der Kar B.A., Olijve W. Human progesterone receptor A and B isoforms in CHO cells. I. Stable transfection of receptor and receptor -responsive reporter genes: transcription modulation by (anti)progestogens // The journal of steroid biochemistry and molecular biology. - 1998. - V.64. - №3 -4. - P. 147-156.

52. Dosiou C., Hamilton A.E., Pang Y., Overgaard M.T., Tulac S., Dong J., Thomas P., Guidice L.C. Expression of membrane progesterone receptors (mPRs) on human T lymphocytes and Jurkat cells and activation of G proteins by progesterone // The journal of endocrinology. - 2008. - V. 196. - p.67-77.

53. Dressing G.E., Thomas P. Identification of membrane progestin receptors in human breast cancer cell lines and biopsies and their potential involvement in breast cancer // Steroids. - 2007. - V.72. - №2. - P.111-116.

54. Dressing G.E., Goldberg J.E., Charles N.J., Schwertfeger K.L., Lange C.A. Membrane progesterone receptor expression in mammalian tissues: a review of regulation and physiological implications // Steroids. - 2011. - V.76. - P.11-17.

55. Dressing G.E., Alyea R., Pang Y., Thomas P. Membrane progesterone receptors (mPRs) mediate progestin induced antimorbidity in breast cancer cells and are expressed in human breast tumors // Hormones & cancer. -. 2012. - V.3. - №3. - P.101-112.

56. Fernandes M.S., Pierron V., Michalovich D., Astle S., Thornton S., Peltoketo H., Lam E.W., Gellersen B., Huhtaniemi I., Allen J., Brosens J.J. Regulated expression of putative membrane progestin receptor homologues in human endometrium and gestational tissues // The journal of endocrinology. -2005. - V.187. - №1. - P.89-101.

57. Fernandez-Valdivia R., Mukherjee A., Mulac-Jericevic B., Conneely O.M., DeMayo F.J., Amato P., Lydon J.P. Revealing progesterone's role in uterine and mammary gland biology: insights from the mouse // Seminars in reproductive medicine. - 2005. - V.23. - №1. - P.22 -37.

58. Fettke F., Schumacher A., Canellada A., Toledo N., Bekeredjian-Ding I., Bondt A., Wuhrer M., Costa S.D., Zenclussen A.C. Maternal and fetal mechanisms of B cell regulation during pregnancy: human chorionic gonadotropin stimulates B cells to produce IL-10 while alpha-fetoprotein drives them to apoptosis // Frontiers in immunology. - 2016. - V.7. - P.495

59. Flototto T., Niederacher D., Hohmann D., Heimerzheim T., Dall P., Djahansouzi S., Bender

H.G., Hanstein B. Molecular mechanism of estrogen receptor (ER)alpha-specific, estradiol -dependent expression of the progesterone receptor (PR) B -isoform // The journal of steroid biochemistry and molecular biology. - 2004. - V.88. - №2. - P.13-142.

60. Fox J.E., Burow M.E., McLachlan J A , Miller C.A. 3rd. Detecting ligands and dissecting nuclear receptor-signaling pathways using recombinant strains of the yeast Saccharomyces cerevisiae // Nature protocols. - 2008. - V.3. - №4. - P.637-645.

61. Fu X.D., Giretti M.S., Baldacci C., Garibaldi S., Flamini M., Sanchez A.M., Gadducci A., Genazzani A.R., Simoncini T. Extra -nuclear signaling of progesterone receptor to breast cancer cell movement and invasion through the actincytoskeleton // PLoS One. - 2008. - V.3. - №7. - P.e2790.

62. Fujiwara H. Do circulating blood cells contribute to maternal tissue remodeling and embryo-maternal cross-talk around the implantation period? // Molecular human reproduction. - 2009. - V.15.

- №6. - P.335-343.

63. Gadkar -Sable S., Shas C., Rosario G., Sachdeva G., Puri C. Progesterone receptors: various forms and functions in reproductive tissues // Frontiers in bioscience: a journal and virtual library. -2005. - V.10. - P.2118-2130.

64. Gardill B.R., Vogl M.R., Lin H.Y., Hammond G.L., Muller Y.A. Corticosteroid-binding globulin: structure-function implications from species differences // PLos One. - 2012. - V.7. - №12. -e52759.

65. Gava N., Clarke C.L., Byth K., Arnett-Mansfield R.L., deFazio A. Expression of progesterone receptors A and B in the mouse ovary during the estrous cycle // Endocrinology. - 2004. - V. 145. - №7.

- P.3487-3494.

66. Giguere V. Orphan nuclear receptors: from gene to function // Endocrine reviews. - 1999. -V.20. - №5. - P.689-725.

67. Givan A.L., White H.D., Stern J.E., Colby E., Gosselin E.J., Guyre P.M., Wira C.R. Flow cytometric analysis of leukocytes in the huan female reproductive tract: comparison of fallopian tube, uterus, cervix and vagina // American journal of reproductive immunology. - 1997. - V.38. - №5. -P.350-359.

68. Gleicher N., Barad D.H. Gender as risk factor for autoimmune diseases // Journal of autoimmunity. - 2007. - V.28. - №1. - P.1-6.

69. Goncharov A.I., Maslakova A.A., Polikarpova A.V., Bulanova E.A., Guseva A.A., Morozov

I.A., Rubtsov P.M., Smirnova O.V., Shchelkunova T.A. (2017) Progesterone inhibits proliferation and modulates expression of proliferation-related genes in classical progesterone receptor-negative human BxPC3 pancreatic adenocarcinoma cells // The jornal of steroid biochemistry and molecular biology. -2017. - V.165. - №PtB. - P.293-304.

70. Gong H., Chen Y., Xu J., Xie X., Yu D., Yang B., Kuang H. The regulation of ovary and conceptus on the uterine natural killer cells during early pregnancy, Reproductive biology and endocrinology // Reproductive biology and endocrinology. - 2017. - V.15 - №1. - P.73.

71. Grazzini E., Guillon G., Mouillac B., Zingg H.H. Inhibition of oxytocin receptor function by direct binding of progesterone // Nature. - 1998. - V.392. - №6675. - P.509-512.

72. Grimm S.L., Hartig S.M., Edwards D.P. Progesterone receptor signaling mechanism // Journal of molecular biology. - 2016. - V.428. - №19. - P.3831-3849.

73. Hall O.J., Limjunyawong N., Vermillion M.S., Robinson D.P., Wohlgemuth N., Pekosz A., Mitzner W., Klein S.L. Progesterone-based therapy protects against influenza by promoting lung repair and recovery in females // PLoS pathogens. - 2016. - V. 12. - №9. - e1005840.

74. Hill K.K., Roemer S.C., Churchill M.E., Edwards D.P. Structural and functional analysis of domains of the progesterone receptor // Molecular and cellular endocrinology. - 2012. - V.348. - №2. - P.418-429.

75. Hirata T., Osuge Y., Hamasaki K., Hirota Y., Nose E., Morimoto C., Harada M., Takemura Y., Koga K, Yoshino O, Tajima T, Hasegawa A, Yano T, Taketani Y. Expression of toll-like receptors 2, 3, 4 and 9 genes in the human endometrium during the menstrual cycle // Journal of reproductive immunology. - 2007. - V.74. - №1-2. - P.53-60.

76. Hovland A.R., Powell R.L., Takimoto G.S., Tung L., Horwitz K.B. An N-terminal inhibitory function, IF, suppresses transcription by the A -isoform but nit the B -isoform of human progesterone receptors // The journal of biological chemistry. -1998. - V.273. - №10. - P.5455-5460.

77. Hughes G.C. Progesterone and autoimmune disease // Autoimmunity reviews. - 2012. - V.11. -№6-7. - P.A502-A514.

78. Huijbregts R.P., Helton E.S., Michel K.G., Sabbaj S., Richter H.E., Goepfert P.A., Hel Z. Hormonal contraception and HIV-1 infection: medroxyprogesterone acetate suppresses innate and adaptive immune mechanisms // Endocrinology. - 2013. - V.154. - №3. - P.1282-1295.

79. Imhof M.O., McDonnell D.P. Yeast RSP5 and its human homolog hRPF1 potentiate hormone-dependent activation of transcription by human progesterone and glucocorticoid receptors // Molecular and cellular biology. - 1996. - V.16. - №6. - P.2594-2605.

80. Ingman W.V., Robker R.L., Woitiez K., Robertson S.A. Null mutation in transforming growth factor beta1 disrupts ovarian function and causes oocyte incompetence and early embryo arrest // Endocrinology. - 2006. - V. 147. - №2. - P.835-845.

81. Ingman W.V., Jones R.L. Cytokine knockouts in reproduction: the use of gene ablation to dissect roles of cytokines in reproductive biology // Human reproduction Update. - 2008. - V.14. - №2. -P.179-192.

82. Irvin S.C., Herold B.C. Molecular mechanism linking high dose medroxyprogesterone with HIV-1 risk // PLoS One. - 2015. - V.10. - №3. - e0121135.

83. Jain S.K., Kannan K., Prouty L., Jain S.K. Progesterone, but not 17beta-estradiol, increases TNF-alpha secretion in U937 monocytes // Cytokine. - 2004. - V.26. - №3. - P.102-105.

84. Jeng M.H., ten Dijke P., Iwata K.K., Jordan V.C. Regulation of the levels of three transforming growth factor beta mRNAs by estrogen and their effects on the proliferation of human breast cancer cells // Molecular and cellular endocrinology. - 1993. - V.97. - №1-2. - P.115-123.

85. Jilma B., Dirnberger E., Löscher I., Rumplmayr A., Hildebrandt J., Eichler H.G., Kapiotis S., Wagner O.F. Menstrual cycle-associated changes in blood levels of interleukin 6, alpha1 acid glycoprotein and C-reactive protein // The journal of laboratory and clinical medicine. - 1997. - V.130. - №1. - P.69-75.

86. Johansson E.L., Rask C., Fredriksson M., Eriksson K., Czerkinsky C., Holmgren J. Antibodies and antibody-secreting cells in the female genital tract after vaginal or intranasal immunization with cholera toxin B subunit or conjugates // Infectiona and immunity. - 1998. - V.66. - №2. - P.514-520.

87. Karteris E., Zervou S., Pang Y., Dong J., Hillhouse E.W., Randeva H.S., Thomas P. Progesterone signaling in human myometrium through two novel membrane G protein coupled receptors: potential role in functional progesterone withdrawal at term // Molecular endocrinology - 2006. - V.20. - №7. -P.1519-1534.

88. Kasubuchi M., Watanabe K., Hirano K., Inoue D., Li X., Terasawa K., Konishi M., Itoh N., Kimura I. Membrane progesterone receptor beta (mPRß/Paqr8) promotes progesterone-dependent neurite outgrowth in PC12 neuronal cells via non-G protein-coupled receptor (GPCR) signaling // Scientific reports. - 2017. - V.7. - №1. - P.5168.

89. Kato J., Hirata S., Nozawa A., Mouri N. The ontogeny of gene expression of progestin receptors in the female rat brain // The journal of steroid biochemistry and molecular biology. - 1993. - V.47. -P.173-182.

90. Kelder J., Azevedo R., Pang Y., de Vlieg J., Dong J., Thomas P. Comparison between steroid binding to membrane progesterone receptor alpha (mPRalpha) and to nuclearprogesterone receptor: correlation with physicochemical properties assessed by comparative molecular field analysis and identification of mPRalpha-specific agonist // Steroids. - 2010. - V.75. - №4 -5. - P.314-322.

91. Khan K.N., Masuzaki H., Fujishita A., Kitajima M., Sekine I., Matsuyama T., Ishimaru T. Estrogen and progesterone receptor expression in macrophages and regulation of hepatocyte growth facto by ovarian steroids in women with endometiosis // Human reproduction. - 2005. - V.20. - №7. -P.2004-2013.

92. King A.E., Critchley H.O. Oestrogen and progesterone regulation of inflammatory processes in the human endomentrium // The jornal of steroid biochemistry and molecular biology. - 2010. - V.120. - №2-3. - P.116-126.

93. Klieber M.A., Underhill C., Hammond G.L., Muller Y.A. Corticosteroidbinding globulin, a structural basis for steroid transport and proteinase-triggered release // The journal of biological chemistry. - 2007. - V.282. - №40. P.29594-29603.

94. Konecna L., Yan M.S., Miller L.E., Scholmerich J., Falk W., Straub R.H. Modulation of IL-6 production during the menstrual cycle in vivo and in vitro // Brain, behavior, and immunity. - 2000. -V.14. - №1. - P.49-61.

95. Kowalik M.K., Slonina D., Rekawiecki R., Kotwica J. Expression of progesterone receptor membrane component (PGRMC) 1 and 2, serpine mRNA binding protein 1(SERBP1) and nuclear progesterone receptor (PGR) in the bovine endometrium during the estrous cycle and the first trimester of pregnancy // Reproductive biology. - 2013. - V.13. - №1. - P.15-23.

96. Labombarda F., Meffre D., Delespierre B., Krivokapic-Blondiaux S., Chastre A., Thomas P., Pang Y., Lydon J.P., Gonzalez S.L., De Nicola A.F., Schumacher M., Guennoun R. Membrane progesterone receptors localization in the mouse spinal cord // Neuroscience. - 2010. - V.166 - №1 -P. 94- 106.

97. Larsen B., Hwang J. Progesterone interactions with the cervix: translational implications for term and preterm birth // Infectious diseses in obstetric and gynecology. - 2011. - 353297.

98. Lauszus F.F., Klebe J.G., Bek T., Flyvbjerg A. Increased serum IGF-I during pregnancy is associated with progression of diabetic retinopathy // Diabetes. - 2003. - V.52. - №3. - P.852-856.

99. Law M L., Kao F.T., Wei Q., Hartz J.A., Greene G.L., Zarucki-Schulz T., Conneely O.M., Jones C., Puck T.T., O'Malley B.M. et al. The progesterone receptor gene maps to human chromosome band 11q13, the site of the mammary oncogene int -2 // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. - 1987. - V.84. - №9. - P.2877-2881.

100. Lee J.H., Ulrich B., Cho J., Park J., Kim C.H. Progesterone promotes differentiation of human cord blood fetal T cells into T regulatory cells but suppresses their differentiation into Th17 cells // Journal of immunology. - 2011. - V.187. - №4. - P.1778-1787.

101. Lee J.H., Lydon J.P., Kim C.H. Progesterone suppresses the mTOR pathway and promotes generation of induced regulatory T cells with increased stability // European journal of immunology. -2012. - V.42. - №10. - P.2683-2696.

102. Lee S.K., Kim C.J., Kim D.J., Kang J.H. Immune cells in the female reproductive tract // Immune network. - 2015. - V.15. - №1. - P.16-26.

103. Lei J.H., Yang X., Peng S., Li Y., Underhill C., Zhu C., Lin H.Y., Wang H., Hammond G.L. Impact of corticosteroid-binding globulin deficiency on pregnancy and neonatal sex // J Clin Endocrinol Metab. - 2015. - V.100 - №5 - P.1819-1827.

104. Leslie K.K., Stein M.P., Kumar N.S., Dai D., Stephens J., Wandinger-Ness A., Glueck D. Progesterone receptor isoform identification and subcellular localization in endometrial cancer // Gynecologic oncology. - 2005. - V.96. - №1. - P. 32-41.

105. Levina I.S., Pokrovskaya E.V., Kulikova L.E., Kamernitzky A.V., Kachala V.V., Smirnov A.N. 3- and 19-Oximes of 16a,17a-cyclohexanoprogesterone derivatives: synthesisand interactions with progesterone receptor and other proteins // Steroids. - 2008. - V.73. - №8. - P.815-827.

106. Li R., Rezk A., Healy L.M., Muirhead G., Prat A., Gommerman J.L., Bar-Or A, MSSRF Canadian B cells in MS team. Cytokine-defined B cell responses as therapeutic targets in multiple sclerosis // Frontiers in immunology. - 2016. - V.6. - P.626.

107. Lin H.Y., Muller Y.A., Hammond G.L. Molecular and structural basis of steroid hormone binding and release from corticosteroid-binding globulin // Molecular and cellular endocrinology. -2010. - V.316. - №1. - P.3-12.

108. Lissauer D., Eldershaw S.A., Inman C.F., Coomarasamy A., Moss P.A., Kilby M.D. Progesterone promotes maternal-fetal tolerance by reducing human maternal T-cell polyfunctionality and inducing a specific cytokine profile // European journal of immunology. - 2015. - V.45. -№10. -P.2858-2872.

109. Littauer E.Q., Esser E.S., Antao O.Q., Vassilieva E.V., Compans R.W., Skountzou I. H1N1 influenza virus infection results in adverse pregnancy outcomes by disrupting tissue-specific hormonal regulation // PLoS pathogens. - 2017. - V.13. - №11. - e1006757.

110. Liu L., Zhao L., She H., Chen S., Wang J.M., Wong C., McClure K., Sitruk-Ware R., Brinton R.D. Clinically relevant progestins regulate neurogenic and neuroprotective responses in vitro and in vivo // Endocrinology. - 2010. - V.151. - №12. - P.5782-5794.

111. Lu J., Reese J., Zhou Y., Hirsch E. Progesterone-induced activation of membrane-bound progesterone receptors in murine macrophage cells // The journal of endocrinology. - 2015. - V.224. -№2. - P.183-194.

112. Madsen G., Zakar T., Ku C.Y., Sanborn B.M., Smith R., Mesiano S. Prostaglandins differentially modulate progesterone receptor -A and -B expression in human myometrial cells: evidence for prostaglandin -induced functional progesterone withdrawal // The journal of clinical endocrinolofy and metabolism. - 2004. - V.89. - №2. - P.1010-1013.

113. Mansour I, Reznikoff-Etievant MF, Netter A. No evidence for the expression of the progesterone receptor on peripheral blood lymphocytes during pregnancy // Human reproduction. - 1994. - V.9. -№8. - P.1546-1549.

114. McCombe P.A. The short and long-term effects of pregnancy on multiple sclerosis and experimental autoimmune encephalomyelitis // Journal of clinical medicine. - 2018. - V.7. - №12. -e494.

115. Merlino A.A., Welsh T.N., Tan H., Yi L.J., Cannon V., Mercer B.M., Mesiano S. Nuclear progesterone receptors in the human pregnancy myometrium: evidence that parturition involves functional progesterone withdrawal mediated by increased expression of progesterone receptor-A // The journal of clinical endocrinolofy and metabolism. - 2007. - V.92. - №5. - P.1927-1933.

116. Mills CD., Kincaid K., Alt J.M., Heilman M.J., Hill A.M. M-1/M-2 macrophages and the Th1/Th2 paradigm // Journal of immunology. - 2000. - V.164. - №12. - P.6166-6173.

117. Mittelman-Smith M.A., Rudolph L.M., Mohr M.A., Micevych P.E. Rodent models of non-classical progesterone action regulating ovulation // Frontiers in endocrinology. - 2017. - V.8. -P.165.

118. Molvarec A., Szarka A., Walentin S., Beko G., Karadi I., Prohaszka Z., Rigo J. Jr. Serum leptin levels in relation to circulating cytokines, chemokines, adhesion molecules and angiogenic factors in normal pregnancy and preeclampsia // Reproductive biology and endocrinology. - 2011. - V.9. - P. 124.

119. Mulac-Jericevic B., Mullinax R.A., DeMayo F.J., Lydon J.P., Conneely O.M. Subgroup of reproductive functions of progesterone mediated by progesterone receptor-B isoform // Science. - 2000. - V.289. - №5485. - P.1751-1754.

120. Mulac-Jericevic B., Lydon J.P., DeMayo F.J., Conneely O.M. Defective mammary gland morphogenesis in mice lacking the progesterone receptor B isoform // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. - 2003. - V.100. - №17. - P.9744-9749.

121. Nagy G., Koncz A., Telarico T., Fernandez D., Ersek B., Buzas E., Perl A. Central role of nitric oxide in the pathogenesis of rheumatoid arthritis and systemic lupus erythematosus // Arthritis research & therapy. - 2010. - V.12. - №3. - P.210.

122. Natale C.A., Duperret E.K., Zhang J., Sadeghi R., Dahal A., O'Brien K.T., Cookson R., Winkler J.D., Ridky T.W. Sex steroids regulate skin pigmentation through nonclassical membrane-bound receptors // eLife. - 2016. - V.5. - e15104.

123. Ndiaye K., Poole D.H., Walusimbi S., Cannon M.J., Toyokawa K., Maalouf S.W., Dong J., Thomas P., Pate J.L. Progesterone.effects on lymphocytes may be mediated by membrane progesterone receptors // Journal of reproductive immunology. - 2012. - V.95. - №1-2. - P.15-26.

124. Nutu M., Weijdegard B., Thomas P., Bergh C., Thurin-Kjellberg A., Pang Y., Billig H., Larsson D.G. Membrane progesterone receptor gamma: tissue distribution and expression in ciliated cells in the fallopian tube // Molecular reprodroduction and development. - 2007. - V.74. - №1. - P.843- 850.

125. Nutu M., Weijdegard B., Thomas P., Thurin-Kjellberg A., Billig H., Larsson D.G. Distribution and hormonal regulation of membrane progesterone receptors beta and gamma in ciliated epithelial cells

of mouse and human fallopian tubes // Reproductive biology and endocrinology. - 2009. - V.7. - №89.

- P.1-14.

126. Pace M.C., Thomas P. Steroid-induced oocyte maturation in Atlantic croaker (Micropogonias undulates) is dependent on activation of the phosphatidylinositol 3-kinase-Akt signal transduction pathway // Biology of reproduction. - 2005. - V.73. - №5. - P.988-996.

127. Pang Y., Dong J., Thomas P. Characterization, neurosteroid binding and brain distribution of human membrane progesterone receptors delta and {epsilon} (mPRdelta and mPR{epsilon}) and mPRdelta involvement in neurosteroid inhibition of apoptosis // Endocrinology. - 2013. - V.154. - №1

- P.283-295.

128. Pang Y., Dong J., Thomas P. Progesterone increases nitric oxide synthesis in human vascular endothelial cells through activation of membrane progesterone receptor-a // American journal of physiology. Endocrinology and metabolism. - 2015. - V.308. - №10. - P.899-911.

129. Pang Y., Thomas P. Additive effects of low concentrations of estradiol-17beta and progesterone on nitric oxide production by human vascular endothelial cells through shared signaling pathways // The journal of steroid biochemistry and molecular biology. - 2017. - V.165. - P.258-267.

130. Peltier M.R., Tee S.C., Smulian J.C. Effect of progesterone on proinflammatory cytokine production by monocytes stimulated with pathogens associated with preterm birth // American journal of reproductive immunology. - 2008. - V.60. - №4. - P.346-353.

131. Peluso J.J, Pappalardo A., Losel R., Wehling M. Progesterone membrane receptor component 1 expression in the immature rat ovary and its role in mediating progesterone's antiapoptotic action // Endocrinology. - 2006. - V. 147. - №6. - P.3133-3140.

132. Pieber D., Allport V.C., Hills F., Johnson M., Bennett P.R. Interactions between progesterone receptor isoforms in myometrial cells in human labour // Molecular human reproduction. - 2001. - V.7.

- №9. - P.875-879.

133. Polese B., Gridelet V., Araklioti E., Martens H., Perrier d'Hauterive S., Geenen V. The endocrine milieu and CD4 T-lymphocyte polarization during pregnancy // Frontiers in endocrinology. - 2014. -V.5. - P.106.

134. Pollard J.K., Mitchell M.D. Intrauterine infection and the effects of inflammatory mediators on prostaglandin production by myometrial cells from pregnant women // American journal of obstetrics and gynecology. - 1996. - V.174. - №2. - P.682-686.

135. Pudney J., Quayle A.J., Anderson D.J. Immunological microenvironments in the human vagina and cervix: mediators of cellular immunity are concentrated in the cervical transformation zone // Biology of reproduction. - 2005. - V.73. - №6. - P.1253-1263.

136. QiuHB., Lu S.S., Ji K.L., Song X.M., Lu Y.Q., Zhang M., Lu K.H. Membrane progestin receptor beta (mPRß): a protein related to cumulus expansion that is involved in vitro maturation of pig cumulus-oocyte complexes // Steroids. - 2008. - V.73. - №14. - P. 1416-1423.

137. Raghupathy R. Th1-type immunity is incompatible with successful pregnancy // Immunology today. - 1997. - V.18. - P.478-482.

138. Recalde G., Moreno-Sosa T., Yúdica F., Quintero C.A., Sánchez M.B., Jahn G.A., Kalergis A.M., Mackern-Oberti J.P. Contribution of sex steroids and prolactin to the modulation of T and B cells during autoimmunity // Autoimmunity reviews. - 2018. - V.17. - №5. - P.504-512.

139. Richer J.K., Jacobsen B.M., Manning N.G., Abel M.G., Wolf D.M., Horwitz K B. Differential gene regulation by the two progesterone receptor isoform In human breast cancer cells // The journal of biological chemistry. - 2002. - V.277. - №7. - P.5209-5218.

140. Robinson D.P, Klein S.L. Pregnancy and pregnancy-associated hormones alter immune responses and disease pathogenesis // Hormones and behavior. - 2012. - V.62. - №3. - P.263-271.

141. Rothaug M., Becker-Pauly C., Rose-John S. The role of interleukin-6 signaling in nervous tissue // Biochimice et biophysica acta. - 2016. - V.1863. - №6 Pt A. - P.1218-1227.

142. Saito S., Nakashima A., Shima T., Ito M. Th1/Th2/Th17 and regulatory T-cell paradigm in pregnancy // American journal of reproductive immunology. - 2010. - V.63. - №6. - P.601-610.

143. Salzman A.L., Linn S.C., Szabo C. Progesterone inhibits inducible nitric oxide synthase mRNA expression in human intestinal epithelialcells // International journal of molecular medicine. - 2000. -V.6. -№2. - P.209-216.

144. Samalecos A., Gellersen B. Systematic expression analysis and antibody screening do not support the existence of naturally occurring progesterone receptor (PR)-C, PR-M or other truncated PR isoforms //Endocrinology. - 2008. - V.149. - P. 5872-5887.

145. Schumacher A., Costa S.D., Zenclussen A.C. Endocrine factors modulating immune responses in pregnancy // Frontiers in immunology. - 2014. - V.5. - P.196.

146. Shah N.M., Herasimtschuk A.A., Boasso A., Benlahrech A., Fuchs D., Imami N., Johnson M.R. Changes in T cell and dendritic cell phenotype from mid to late pregnancy are indicative of a shift from immune tolerance to immune activation // Frontiers in immunology. - 2017. - V.15. - №8ro - P. 1138.

147. Shen P., Fillatreau S. Antibody-independent functions of B cells: a focus on cytokines // Nature reviews. Immunology. - 2015. - V.15. - №7. - P.441-451.

148. Shi B., Liu X., Thomas P., Pang Y., Xu Y., Li X., Li X. Identification and characterization of a progestin and adipoQ receptor (PAQR) structurally related to Paqr7 in the ovary of Cynoglossus semilaevis and its potential role in regulating oocyte maturation // General and comparative endocrinology. - 2016. - V.237. - P.109-120.

149. Shynlova O., Lee Y.H., Srikhajon K., Lye S.J. Physiologic uterine inflammation and labor onset: integration of endocrine and mechanical signals // Reproductive sciences. -2013. - V.20. - №2. - P.154-167.

150. Sirotkin A.V. Cytokines: signaling molecules controlling ovarian functions // The international journal of biochemistry & cell biology. - 2011. - V.43. - №6. - P.857-861.

151. Smirnov A.N., Pokrovskaya E.V., Shevchenko V.P., Levina I.S., Kamernitzky A.V. Interactions of 16a,17a-cyclohexane derivatives of progesterone with the progesterone receptor from rat uterus // Biochemistry (Moscow/ - 1998. - V.63. - №9 - P.1090-1097.

152. Smith J.L., Kupchak B.R., Garitaonandia I., Hoang L.K., Maina A.S., Regalla L.M., Lyons T. Heterologous expression of human mPRa, mPRp and mPRy in yeast confirms their ability to function as membrane progesterone receptors // Steroids. - 2008. - V.73. - №11. - P.1160- 1173.

153. Soldin O.P., Guo T., Weiderpass E., Tractenberg R.E., Hilakivi-Clarke L., Soldin S.J. Steroid hormone levels in pregnancy and 1 year postpartum using isotope dilution tandem mass spectrometry // Fertility and sterility. - 2005. - V.84. - №3. - P.701-710.

154. Somerset D.A., Zheng Y., Kilby M.D., Sansom D.M., Drayson M.T: Normal human pregnancy is associated with an elevation in the immune suppressive CD25+ CD4+ regulatory T-cell subset // Immunology. - 2004. - V.112. - P.38-43.

155. Stites D.P., Siiteri P.K. Steroids as immunosuppressants in pregnancy // Immunological reviews. - 1983. - V.75. - P. 117-138.

156. Stricker R., Eberhart R., Chevailler M.C., Quinn F.A., Bischof P., Stricker R. Establishment of detailed reference values for luteinizing hormone, follicle stimulating hormone, estradiol, and progesterone during different phases of the menstrual cycle on the Abbott ARCHITECT ® analyzer // Clinical chemistry and laboratiry medicine. - 2006. - V.44. - №7. - P.883-887.

157. Szekeres-Bartho J., Hadnagy J., Pacsa, A.S. The suppressive effect of progesterone on lymphocyte cytotoxicity: unique progesterone sensitivity of pregnancy lymphocytes // Journal of reproductive immunology. - 1985. - V.7. - №2. - P. 121-128.

158. Szekeres-Bartho J., Halasz M., Palkovics T. Progesterone in pregnancy; receptor-ligand interaction and signaling pathways // Journal of reproductive immunology. - 2009. - V.83. - №1-2. -P.60-64.

159. Tan W., Aizen J., Thomas P. Membrane progestin receptor alpha mediates progestin-induced sperm hypermotility and increased fertilization success in southern flounder (Paralichthys lethostigma) // General and comparative endocrinology. - 2014. - V.200 - P.18-26.

160. Tan W., Thomas P. Activation of Pi3K/Akt pathway and modulation of phosphodiesterase activity via membrane progestin receptor-alpha (mPRalpha) regulate progestin-initiated sperm hypermotility in Atlantic croaker // Biology of reproduction. - 2014. - V.90. - №5.105, P. 1-11 (b).

161. Tang Y.T., Hu T., Arterburn M., Boyle B., Bright J.M., Emtage P.C., Funk W.D. PAQR proteins: a novel membrane receptor family defined by an ancient 7-transmembrane pass motif // Journal of molecular evolution. - 2005. - V.1. - P.372- 380.

162. Tedeschi S.K., Bermas B. Costenbader K.H. Sexual disparities in the incidence and course of SLE and RA // Clinical immunology. - 2013. - V.149. - №2. - P.211-218.

163. Tezabwala B.U., Johnson P.M., Rees R.C. Inhibition of pregnancy viability in mice following IL-2 administration // Immunology. - 1989. - V.67. - №1. - P.115-119.

164. Thomas P., Pang Y., Dong J., Groenen P., Kelder J., de Vlieg J., Zhu Y., Tubbs C. Steroid and G protein binding characteristics of the seatrout and human progestin membrane receptor alpha subtypes and their evolutionary origins // Endocrinology. - 2007. - V. 148. - №2. - P.705- 718.

165. Thomas P. Characteristics of membrane progestin receptor alpha (mPRalpha) and progesterone membrane receptor component 1 (PGMRC1) and their roles in mediating rapid progestin actions // Frontiers in neuroendocrinology. - 2008. - V.29 - №2, P.292-312.

166. Thomas P, Pang Y. Membrane progesterone receptors (mPRs): evidence for neuroprotective, neurosteroud signaling and neuroendocrine functions in neuronal cells // Neuroendocrinology. -2012. -V.96. - №2. - P.162-171.

167. Thomas P., Pang Y. Protective actions of progesterone in the cardiovascular system: Potential role of progesterone receptors (mPRs) in mediating rapid effects // Steroids. - 2013. - V.78. - №6. -P.583-588.

168. Thomas P., Pang Y., Dong J. Enhancement of cell surface expression and receptor functions of membrane progestin receptor alpha (mPRalpha) by progesterone receptor membrane component 1 (PGRMC1): evidence for a role of PGRMC1 as an adaptor protein for steroid receptors // Endocrinology. - 2014. - V.155. - №3. - P. 1107-1119.

169. Tubbs C., Thomas P. Progestin signaling through an olfactory G protein and membrane progestin receptor-alpha in Atlantic croakersperm: potential role in induction of sperm hypermotility // Endocrinology. - 2009. - V.150. - №1. - P.473-484.

170. Uotinen N., Puustinen R., Pasanen S., Manninen T., Kivineva M., Syvala H., Tuohimaa P., Ylikomi T. Distribution of progesterone receptor in female mouse tissues // General and comparative endocrinology. - 1999. - V.115. - №3. - P.429-441.

171. Valadez-Cosmes P., Vazquez-Martinez E.R., Cerbon M., Camacho-Arroyo I. Membrane progesterone receptors in reproduction and cancer // Molecular and cellular endocrinology. - 2016. -V.434. - P. 166-175.

172. Vares G., Sai S., Wang B., Fujimori A., Nenoi M., Nakajima T. Progesterone generates cancer stem cells through membrane progesterone receptor-triggered signaling in basal-like human mammary cells // Cancer Letterst. - 2015. - V.362. - №2. - P.167-173.

173. Vegeto E., Shahbaz M.M., Wen D.X., Goldman M.E., O'Malley B.W., McDonnell D P. Human progesterone receptor A form is a cell- and promoter-specific repressor of human progesterone receptor B function // Molecular endocrinology. - 1993. - V.7. - №10. - P.1244-1255.

174. Vince G.S., Johnson P.M. Is there a Th2 bias in human pregnancy? // Journal of reproductive immunology. - 1996. - V.32. - №2. - P.101-104.

175. Vinketova K., Mourdjeva M., Oreshkova T. Human decidual stromal cells as a component of the implantation niche and a modulator of maternal // Journal of pregnancy. - 2016. - 8689436.

176. Wegmann T.G., Lin H., Guilbert L., Mosmann T.R. Bidirectional cytokine interactions in the maternalfetal relationship: is successful pregnancy a TH2 phenomenon? // Immunology today. - 1993. - V.14. - P.353-356.

177. Wei L.L., Gonzalez-Aller C., Wood W.M., Miller L.A., Horwitz K B. 5'-Heterogeneity in human progesterone receptor transcripts predicts a new amino-terminal truncated ''C''-receptor and unique A-receptor messages // Molecular endocrinology. - 1990. - V.4. - №12. - P.1833-1840.

178. Williams S.P. and Sigler P.B. Atomic structure of progesterone complexed with its receptor // Nature. - 1998. - V.393 - P.392- 396.

179. Williams W.V. Hormonal contraception and the development of autoimmunity: a review of the literature // The Linacre quarterly. - 2017. - V.84. - №3. - P.275-295.

180. Wira C.R., Rodriguez-Garcia M., Patel M.V. The role of sex hormones in immune protection of the female reproductive tract // Nature reviews. Immunology. - 2015. - V.15. - №4. - P.217-230.

181. Xie M., You S., Chen Q., Chen X., Hu C. Progesterone inhibits the migration and invasion of A549 lung cancer cells through membrane progesterone receptor alphamediated mechanisms // Oncology reports. - 2013. V.29. - P.1873-1880.

182. You S., Zuo L., Varma V. Broad tissue expression of membrane progesterone receptor Alpha in normal mice // Journal of molecular histology. - 2010. - V.41 - №2-3, P. 101-110.

183. Zhu Y., Rice C.D., Pang Y., Pace M., Thomas P. Cloning, expression, and characterization of a membrane progestin receptor and evidence it is an intermediary in meiotic maturation of fish oocytes // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. - 2003. - V.100. -№5. - P.2231-2236.

184. Zhu Y., Bond J., Thomas P. Identification, classification, and partial characterization of genes in humans and other vertebrates homologous to a fish membrane progestin receptor // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. - 2003. - V.100. - P.2237-2242 (b).

185. Ziegler S.M., Feldmann C.N., Hagen S.H., Richert L., Barkhausen T., Goletzke J., Jazbutyte V., Martrus G., Salzberger W., Renne T., Hecher K., Diemert A., Arck P.C., Altfeld M. Innate immune responses to toll-like receptor stimulation are altered during the course of pregnancy // Journal of reproductive immunology. - 2018. - V.128. - P.30-37.

186. Zuo L., Li W., You S. Progesterone reverses the mesenchymal phenotypes of basal phenotype breast cancer cells via a membrane progesterone receptor mediated pathway // Breast cancer research. -2010. - V.12. - №3. - P.R34

БЛАГОДАРНОСТИ

Автор выражает искреннюю благодарность Татьяне Анатольевне Щелкуновой за чуткое руководство, помощь и поддержку на всех этапах исследования; Ольге Вячеславовне Смирновой, Петру Михайловичу Рубцову, Ивану Алексеевичу Морозову, Айтсане Алексеевне Маслаковой за помошь в освоении методик и техническую поддержку во время работы над исследованием; Татьяне Александровне Балакиной, Наталье Сергеевне Сиротиной, Полине Александровне Абрамичевой, Надежде Сергеевне Павловой, Алексею Игоревичу Гончарову, Виктории Львовне Шляпиной за профессиональные советы и помощь в экспериментальной работе; Инне Соломоновне Левиной и всему коллективу лаборатории химии стероидных соединений ИОХ им. Н.Д. Зелинского РАН за возможность изучать интересные соединения; Ольге Дмитриевне Лопиной за внимательное прочтение и рецензирование работы; Александре Александровне Гусевой за помощь в анализе результатов; Сергею Олеговичу Кирюхину и Оксане Олеговне Кирюхиной за внимательное отношение, ценные замечания, информационную и моральную поддержку; сотрудникам кафедры физиологии человека и животных биологического факультета МГУ за положительное отношение и всестороннюю помощь; Татьяне Егоровой, Марьяне Бардиной, Марине Дженковой, Анне Стариковой, Ивану Галкину, Светлане Васильевой, Виктории Скопенковой, Анне Шмидт, Никите Трушкину за искренний интерес и помощь в решении сложных ситуаций; Сергею Литвинову, Анфисе Поповой, Евгении Лагеревой, Всеволоду Павшинцеву, Евгению Тихонову, Андрею Поветкину, Михаилу Лебедину, Татьяне Данилиной, Арине Лебединой за участие в исследовании в качестве доноров крови; друзьям и родным, особенно, Елене Львовне Поликарповой, Вадиму Геннадьевичу Поликарпову, Юлии Вадимовне Коцюк, Елене Михайловне Уколовой, Олегу Владимировичу Кирюхину за понимание, неоценимую помощь и поддержку на всех этапах работы.