Разработка автоматизированного количественного агглютинационного текста (АКАТ) и его применение для иммунодетекции возбудителей и диагностики инфекций тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат биологических наук Коноплева, Мария Вениаминовна

• Коноплева, Мария Вениаминовна
• кандидат биологических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Коноплева, Мария Вениаминовна

ОГЛАВЛЕНИЕ.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1 Развитие и совершенствование иммунологических методов на основе феномена агглютинации.

1.1 Теория преципитации и агглютинации в иммунохимии.

1.2 Разработка систем автоматизации и объективизации агглютинационных тестов.

2 Применение агглютинационных тестов для серодиагностики сифилиса, а также для иммунодетекции возбудителей бруцеллеза и туляремии.

2.1 Методы серодиагностики сифилиса.

2.2 Методы выявления бруцелл.

2.3 Методы выявления РгатмвеИа иНагегшв.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

3 Материалы.

3.1 Штаммы бактерий и бактериальные антигены.

3.2 Антисыворотки и антитела.

3.3 Формалинизированные эритроциты барана.

3.4 Клинический материал.

3.5 Диагностические тест-системы.

3.6 Комплектующие аппаратно-программного комплекса «Критерий 2».

4 Методы исследования.

4.1 Иммунизация мышей.

4.2 Получение гибридом.

4.3 Выделение моноклональных и поликлональных антител.

4.4 ИФА для определения ЛПС бруцелл.

4.5 ИФА для определения ЛПС Р.пИагег^з.

4.6 Приготовление тестовых и контрольных эритроцитов для РПГА.

4.7 РПГА для определения ЛПС и микробных клеток бруцелл и Р.пИаге^в.

4.8 РПГА для выявления антитрепонемных антител.

4.9 Аппаратно-программный комплекс «Критерий 2» и методика автоматизированного количественного определения реакции агглютинации.

4.10 Клинические исследования АПК «Критерий 2».

4.11 Статистические методы.

РЕЗУЛЬТАТЫ

5 Общая характеристика программы анализа изображений РПГА

Критерий 2».

6 Разработка РПГА-АКАТ для серодиагностики сифилиса.

7 Разработка РПГА-АКАТ и системы сравнения на основе ИФА для иммунодетекции бруцелл.

7.1 Получение и характеристика моноклональных антител, специфичных к ЛПС бруцелл.

7 2 Разработка референсного ИФА для иммунодетекции бруцелл.

7.3 Разработка РПГА-АКАТ для иммунодетекции бруцелл.

7.4 Определение чувствительности и специфичности РПГА-АКАТ для иммунодетекции бруцелл в сравнении с референсным тестом ИФА.

8 Разработка РПГА-АКАТ и системы сравнения на основе ИФА для иммунодетекции F.tularensis.

8.1 Разработка референсного ИФА для иммунодетекции F.tularensis.

8 2 Разработка РПГА-АКАТ для иммунодетекции F.tularensis.

ОБСУЖДЕНИЕ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка автоматизированного количественного агглютинационного текста (АКАТ) и его применение для иммунодетекции возбудителей и диагностики инфекций»

Актуальность проблемы

Существует множество методов, применяемых для иммунодетекции различных маркеров возбудителей инфекций и иммунодиагностики инфекционных заболеваний. Каждый метод имеет свои преимущества и недостатки. Методы, основанные на разных принципах, дополняют друг друга в верификации результатов иммуноанализа. Иммунологические методы могут обладать высокой чувствительностью и специфичностью, сравнимой в предельных значениях с молекулярно-биологическими тестами [23, 135]. Метод иммуноферментного анализа (ИФА), основанный на принципе иммуносорбции, где антитела взаимодействуют с антигеном на твердой фазе, а несвязавшийся избыток реагентов удаляется, обладает высокой чувствительностью и специфичностью, однако этот метод многоэтапный, требует специального оборудования и высокой квалификации персонала. Агглютинационные тесты, основанные на принципе иммунопреципитации (агглютинации), где взаимодействие антител и антигенов происходит в оптимальном соотношении в растворе с образованием «решетки» из антигенов и антител, удобны и просты в постановке, в принципе могут обладать сравнимой с ИФА чувствительностью, но имеют один существенный недостаток субъективизм учета результатов [38, 160]. В современных условиях, когда требования доказательной медицины направлены на исключение ошибок лабораторного персонала путем автоматизации и даже роботизации диагностических методологий, методы твердофазного иммуноанализа подверглись более интенсивному развитию, чем агглютинационные тесты, поскольку больше соответствовали предъявляемым требованиям. В связи с этим, в ходе непрерывного совершенствования иммунодиагностических методов вообще, для агглютинационных тестов наиболее актуальным становится их объективизация, автоматизация, стандартизация, разработка аналитических количественных характеристик [54, 160]. 6

Попытки автоматизации и даже роботизации агглютинационых тестов предпринимались неоднократно, но только фирме Olympus (Япония) удалось создать роботизированную систему для учета результатов реакции пассивной гемагглютинации (РПГА) и зарегистрировать ее для применения в лабораторной практике, успешно пройдя испытания в FDA (США) [100]. Система Olympus применяется для серодиагностики сифилиса и цитомегаловируса, а также при определении групп крови. Остальные, весьма разнообразные по принципу, попытки автоматизации агглютинационных тестов не получили практического приложения. Однако система Olympus, несмотря на использование очень дорогостоящего оборудования и компьютерного программного обеспечения, не обладает возможностями количественного анализа результатов. Olympus лишь объективизирует учет результатов РПГА и выражает его в трех вариантах (положительный, отрицательный и неопределенный), а еще в 30-50-е годы прошлого века в классических исследованиях Heidelberger и Kendall, Zinsser, Jones и Pol было доказано, что преципитация и агглютинация, лежащие в основе агглютинационных тестов, являются аналитическими количественными реакциями. Метод количественной агглютинации, разработанный в 19291935 гг. Heidelberger и Kendall, позволяет осуществить точное аналитическое определение общего весового количества агглютининов в антисыворотках. Реакция количественной агглютинации была использована для исследования антисывороток к бруцеллам, пневмококкам, гемолитическим стрептококкам, стафилококкам, менингококкам, гонококкам, дизентерийным микробам, дрожжам, H.influenzae В и B.pertussis, B.proteus и S.typhosa [11]. Поэтому становится очевидным, что для того чтобы решать многие научные и иммунодиагностические задачи, используя наряду с иммуносорбентными методами количественные агглютинационные тесты, необходимо разработать методологию количественной, объективной и автоматизированной оценки результатов этих тестов, удобную для применения не только в научных целях, но и в клинической практике. 7

Агглютинационные методы прямой иммунодетекции возбудителей инфекционных заболеваний бактериальной и вирусной природы широко используются. Эти тесты применяют для обнаружения возбудителей хелико-и кампилобактерной инфекции [130], менингококковой инфекции [104], пищевых токсикоинфекций [124], в том числе холерного токсина и энтеротоксина Е.соИ [89], трихомониаза [29], а также ВИЧ [77], аденовирусов [105], герпесвирусов и ротавирусов [114, 167], и возбудителей других инфекций. Кроме того, эти тесты используют для определения групп крови с помощью моноклональных антител [177]. В России, согласно приказу МЗ РФ № 64 от 21.02.2000 «Об утверждении номенклатуры клинических лабораторных исследований», для диагностики 85 инфекций, вызываемых вирусами, бактериями, грибами, гельминтами и простейшими, используют 165 агглютинационных тестов, из которых доля РПГА составляет 32%. Однако до сих пор агглютинационные тесты используют либо в качественном, либо в полуколичественном варианте (определение титра) с визуальным субъективным способом оценки их результатов [54, 63].

Большинство возбудителей инфекций, диагностируемых с помощью агглютинационных тестов, требуют постоянного эпидемиологического надзора и ранней диагностики инфекционных заболеваний. Массовый серологический скрининг населения в России на маркеры сифилиса (около 70 миллионов анализов ежегодно) проводится в подавляющем числе случаев с использованием морально устаревших субъективных методов: реакция Вассермана (РВ), реакция микропреципитации (РМП), реакция иммунофлюоресценции (РИФ), а также РПГА с визуальным учетом результатов. Однако известно, что РПГА - очень удобный простой метод, высокочувствительный и специфичный к Т.раШйит. В настоящее время в условиях перехода на современные методы диагностики сифилиса в России (Приказ МЗ РФ № 87 от 26.03.2001 «О совершенствовании серологической диагностики сифилиса»), этот метод является альтернативой ИФА и может широко применяться как скрининговый или подтверждающий тест. Главный 8 недостаток РПГА - отсутствие объективного автоматизированного учета результатов. А это противоречит основным требованиям, предъявляемым к современным методам иммунодиагностики [54].

В настоящее время в России сохраняется опасность эпизоотических вспышек бруцеллеза и туляремии, а также существует возможность осуществления актов биотерроризма, связанных с этими инфекциями. Однако как в России, так и в мире, отсутствуют доступные коммерческие тест-системы для иммунодетекции возбудителей бруцеллеза и туляремии, основанные на современных автоматизированных технологиях. Для решения проблем мониторинга за особо опасными инфекциями агглютинационные тесты для иммунодетекции возбудителей представлены среди рекомендованных для полевых исследований диагностикумов как простые, удобные и относительно дешевые тесты [103].

Таким образом, разработка автоматизированного количественного агглютинационного теста для иммунодетекции возбудителей и иммунодиагностики инфекций является актуальной проблемой здравоохранения России для скрининга населения, мониторинга животных и окружающей среды в целях биобезопасности, эпидемиологического надзора и диагностики актуальных инфекций.

Цель работы:

Разработать автоматизированный количественный агглютинационный тест (АКАТ) для определения антигенов и антител на модели РПГА и автоматизированную количественную РПГА для иммунодетекции возбудителей бруцеллеза и туляремии, а также для серодиагностики сифилиса.

Задачи исследования:

1. На модели РПГА разработать методологию автоматизированного количественного агглютинационного теста (АКАТ), основанную на преобразовании визуального ряда данных реакции агглютинации в шкалу количественных значений, полученную в результате оцифровывания изображений, их компьютерной обработки, введения эталонов и расчета коэффициента регрессии.

2. Разработать аппаратно-программный диагностический комплекс, включающий модифицированный сканер, компьютер, принтер, базовое и специализированное программное обеспечение с базой данных для количественного учета результатов агглютинационных тестов (на модели РПГА), применимый для иммунодетекции возбудителей и диагностики инфекций.

3. Разработать вариант РПГА-АКАТ для серодиагностики сифилиса с использованием коммерческих диагностических тест-систем и провести клинические испытания автоматизированного комплекса для серодиагностики сифилиса вариантом РПГА-АКАТ, оценить его преимущества перед обычной методологией.

4. Разработать вариант РПГА-АКАТ для определения антигенов бруцелл с использованием моноклональных антител против ЛПС и изучить чувствительность и специфичность РПГА-АКАТ для иммунодетекции ЛПС в клетках различных видов бруцелл по сравнению с иммуноферментным анализом.

5. Разработать вариант РПГА-АКАТ для определения антигенов РЛиЬгегшв с использованием моноклональных и поликлональных антител против возбудителя туляремии и изучить чувствительность и специфичность РПГА-АКАТ для иммунодетекции ЛПС в клетках различных подвидов возбудителя туляремии в сравнении с иммуноферментным анализом.

Научная новизна

1. Впервые на модели РПГА разработан автоматизированный количественный агглютинационный тест (АКАТ) для определения антигенов и антител, применимый для различных научных и иммунодиагностических целей, в частности, для иммунодетекции возбудителей и диагностики инфекционных заболеваний. С помощью АКАТ решена задача количественной оценки результата реакции агглютинации.

2. Впервые создан аппаратно-программный диагностический комплекс (АПК), необходимый для получения оцифрованных изображений микропланшетов с тестами РПГА, последующего вычисления коэффициента регрессии и классификации полученных изображений по 4-х «крестовой системе». Показана применимость данного АПК для иммунодетекции возбудителей и диагностики инфекций.

3. Впервые разработан вариант РПГА-АКАТ, применяемый для выявления анти-трепонемных антител при серодиагностике сифилиса.

4. Впервые для автоматизированного количественного учета результатов РПГА-АКАТ при серодиагностике сифилиса разработана база данных, позволяющая архивировать информацию о пациентах, параметрах тестирования и полученных результатах в виде коэффициентов регрессии, оценки в 4-х «крестовой системе» и диагностического заключения, а также формировать отчеты с протоколами исследований и проводить целенаправленный поиск данных.

5. Впервые разработан вариант РПГА-АКАТ с использованием моноклональных антител для определения ЛПС и микробных клеток различных видов бруцелл с чувствительностью 103-104 м.к./мл и 0,1-0,2 нг/мл ЛПС, не обладающий перекрестной реакцией с гетерологичными микроорганизмами и по чувствительности превышающий ИФА.

6. Впервые разработан вариант РПГА-АКАТ для определения микробных клеток и ЛПС с чувствительностью 103-104 м.к./мл и 0,25 нг/мл ЛПС, не обладающий перекрестной реакцией с гетерологичными микроорганизмами, и сравнимый по чувствительности с ИФА.

7. Впервые для агглютинационных тестов для расчета достоверности различия положительных значений реакции в опыте по сравнению с

11 контролем и совершенствования интерпретации результатов введено отсекающее значение (cut-off), основанное на количественной оценке результата реакции (коэффициенте регрессии). Показано применение cut-off для прямой иммунодетекции возбудителей бруцеллеза и туляремии методом РПГА-АКАТ.

Научно-практическая значимость

1. Применение технологии автоматизированного количественного агглютинационного теста (АКАТ) позволяет производителям агглютинационных тест-систем (РПГА, латекс-агглютинации и др.) создать новое поколение простых, быстрых, удобных в постановке диагностических тест-систем с новыми возможностями количественного и объективного учета результатов реакции, а затем широко внедрить их для различных целей иммунодиагностики инфекций.

2. Разработанный высокочувствительный тест на основе АКАТ для определения антигенов возбудителя бруцеллеза применим для их иммунодетекции в биологических материалах, а также смывах и пробах из объектов окружающей среды. В настоящее время в России отсутствуют коммерческие тест-системы для прямой иммунодетекции возбудителя бруцеллеза и туляремии.

3. Разработанный высокоэффективный аппаратно-программный комплекс (АПК) «Критерий 2» для серодиагностики сифилиса применяется для первичного массового обследования населения и при дальнейшем лечении больных сифилисом и наблюдении за ними. Кроме того, АПК «Критерий 2» применим для выявления маркеров возбудителя сифилиса в ликворе. Применение АПК позволяет организовать работу по серодиагностике сифилиса методом РПГА в соответствии с современными требованиями доказательной медицины, так как оно дает возможность объективно классифицировать изображения, как по привычной для дерматовенерологов 4-х «крестовой системе», так и по количественному параметру, характеризующему интенсивность реакции (коэффициенту регрессии). Важной частью АПК является База Данных (БД), позволяющая удобно протоколировать процесс постановки РПГА, проводить поиск по пациентам и организациям, а также формировать несколько видов отчетов. Применение АПК «Критерий 2» и РПГА-АКАТ в клинической практике позволяет повысить выявляемость анти-трепонемных антител и снизить количество неопределенных результатов. Применение АПК «Критерий 2» в условиях широкомасштабного скрининга позволяет также не только значительно улучшить качество серодиагностики сифилиса, но и экономить реактивы и рабочее время, затрачиваемые на ретестирование.

Внедрение полученных результатов в практику

1. Зарегистрирован автоматизированный диагностический комплекс для учета результатов РПГА с использованием тест-системы «Люис РПГА тест» (№ ФС 02012005/2712-06).

2. Диагностический комплекс и методика РПГА-АКАТ используется в лабораторной практике в ведущих центрах дермато-венерологической службы: ГУ ЦНИКВИ, ГУЗ РКВД г. Чебоксары, 121 п-ка г. Москвы, 1-й КВД г. Москвы, КВД г. Мытищи, КВД г. Сочи, КВД г. Калуги, КВД г. Ханты-Мансийска, КВД г. Нижневартовска, КВД г. Майкоп, КВД г. Тверь, КВД г. Кызыл, КВД г.Тольятти.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Коноплева, Мария Вениаминовна

выводы

1. Впервые на модели РПГА разработана методология автоматизированного количественного агглютинационного теста (АКАТ), применимая для различных научных и иммунодиагностических целей, в частности, для иммунодетекции возбудителей и диагностики инфекций. Методология основана на количественной оценке результата реакции агглютинации путем компьютерной обработки оцифрованного изображения реакции в 96-луночном планшете, вычислении зависимого от интенсивности реакции коэффициента регрессии, а также на введении отсекающего значения (cut-off).

2. Впервые разработан аппаратно-программный комплекс (АПК «Критерий 2»), включающий модифицированный сканер, компьютер, принтер, базовое и специализированное программное обеспечение с базой данных для количественного учета результатов агглютинационных тестов (на модели РПГА), применимый для иммунодетекции возбудителей и диагностики инфекций.

3. Разработан вариант РПГА-АКАТ для определения анти-трепонемных антител в сыворотке крови человека. Проведены клинические испытания АПК «Критерий 2» и РПГА в формате АКАТ для серодиагностики сифилиса с помощью тест-системы «Люис РПГА тест» на 26000 сывороток. Продемонстрировано повышение чувствительности (на 43%) и специфичности (в 12 раз) РПГА-АКАТ по сравнению с РПГА с визуальным учетом данных.

4. Разработан РПГА-АКАТ на основе моноклональных антител для определения антигенов бруцелл со 100% специфичностью и чувствительностью 104 м.к./мл для бактериальных клеток и 0,1-0,2 нг/мл для ЛПС. В прямых экспериментах по сравнению РПГА-АКАТ и ИФА показана более высокая чувствительность РПГА-АКАТ для бактериальных клеток и одинаковая чувствительность для ЛПС.

157

5. Разработан РПГА-АКАТ на основе поликлональных антител против ЛПС Рли1агет1з со 100% специфичностью и чувствительностью 103 -105 т.к./мл для бактериальных клеток и 0,25 нг/мл для ЛПС. Продемонстрирована большая чувствительность РПГА-АКАТ по сравнению с ИФА.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Коноплева, Мария Вениаминовна, 2007 год

1. Ананова Е.В. Метод иммунофлуоресценции в диагностике туляремии // Метод иммунофлуоресценции в диагностике инфекционных заболеваний. М., 1969. - С. 42-44.

2. Ананова Е.В., Емельянова О.С. Применение люминесцентно-серологического метода для выявления туляремийного микроба // Лабор. Дело. 1964. - № 1. - С. 35-39.

3. Аронова Н.В. Липополисахариды бактерий рода Francisella как иммунодоминантные антигены и их фазовых вариации в условиях in vivo // Автор, дисс. канд. биол. наук. Ростов-на-Дону. - 2005. - С. 22.

4. Бутенко, Р.Г., Гусев, М.В., Киркин, А.Ф., Корженевская, Т.Г., Маркарова, E.H. // Клеточная инженерия. М., «Высш. шк.», 1987. - С. 89-120.

5. Вершилова П.А. Методика получения антигена для РНГА // Лабораторные методы диагностики бруцеллеза. М. - 1968. - С. 4-11.

6. Иммунодиагностикум эритроцитарный для выявления поверхностного антигена вируса гепатита «В» в РПГА жидкий // Экспериментально-производственный регламент № 71. М., Мин. Здрав. СССР. - 1987.

7. Кожные и венерические болезни // Руководство для врачей. под ред. Скрипкина Ю.К. - М., Медицина, 1996. - Т. 4. - С. 3-138.

8. Королюк и др. Способ оценки реакции гемагглютинации // Патент SU 1327004 Al.- 1987.

9. Краткий определитель бактерий Берги // Под ред. Дж Хоупта. Пер. с англ. М., 1980-С. 135-136.

10. Кэбот Е., Мейер М. Реакция преципитации. Агглютинация // Гл. 2 и 3 в кн. Экспериментальная иммунохимия. М., 1968. - С. 29-139.

11. Леви М.И., Басова H.H. Эритроцитарные диагностикумы и их применение в серологии // Проблемы особо опасных инфекций. -Саратов, 1970. Вып. 2, №12. - С. 207-213.

12. Леви М.И., Басова H.H., Сучков Ю.Г. Реакция пассивной гемагглютинации и реакция нейтрализации антител при некоторых инфекциях // ЖМЭИ. 1962. - № 10. - С. 40-45.

13. Лямкин Г.И., Ляпустина Л.В., Малецкая О.В., Соколова И.А., Таран И.Ф., Ткаченко Л.И., Дальвадянц В.Г., Тамбовцев A.B. Состояние и перспективы лабораторной диагностики бруцеллеза // Клин. Лаб. Диагностика. 2002. - № 12. - С. 46-49.

14. Меринов С.П., Меринова Л.В., Шишкина Л.П. Выявление антигенов туляремийного микроба и антител к нему иммуноферментным методом // Тез. Докл. Всесоюз. Конф., Ставрополь, 26-27 мая 1986 г. -Ставрополь, 1986. Ч. I. - С. 210-213.

15. Методические указания по профилактике и лабораторной диагностике бруцеллеза людей» (МУ 3.1.7.1189-03) МЗ // Москва. 2003.

16. Мещерякова И.С. Таксономия, идентификация и иммунологическая диагностика возбудителя туляремии // Автор, дисс. докт. биол. наук -1990.

17. Мещерякова И.С., Емельянова О.С. Реакция нейтрализации антител при туляремии // ЖМЭИ. 1968. - № 11. - С. 43-48.

18. Мещерякова И.С., Кормилицына М.И., Родионова И.В., Константинова Н.Д. Характеристика новых видов патогенных микроорганизмов // ЖМЭИ-1995.-№5.-С. 3-9.

19. Носков Ф.С., Конникова P.E., Баяр Г.А. Лиофилизированные эритроцитарные диагностикумы для реакции непрямой гемагглютинации // Воен. мед. журн. 1973. - № 5. - С. 52-53.

20. Оноприенко Н.Н. Сравнительная характеритика липополисахаридов бактерий рода Francisella // Автор, дисс. кан. биол.наук 2001. - С. 20.

21. Пименова М.Н., Гречушкина Н.Н., Азова Л.Г., Семенова Е.В., Мыльникова С.И. // Руководство к практическим занятиям по микробиологии: практическое пособие под ред. Егорова Н.С. -М., изд-во Моск. ун-та, 1983. - С.133-134.

22. Скворцов В. Т., Бондаренко В. М. Определение ультрамикроколичеств антител к бактериофагу, основанное на специфическом извлечении комплексов фаг-антитело с помощью иммуносорбентов // Вопр. вирусол. 1971. - № 4. - С. 603-605.

23. Умнова Н.С., Желудков М.М., Павлова И.П., Шаханина К.Л. Выявление антигенов возбудителя бруцеллеза иммуноферментным методом // ЖМЭИ. 1987. - № 9. - С. 103-107.

24. Фримель Г. // Иммунологические методы. М., Медицина, 1987.

25. Ширяев Д.Т., Токарев С.А., Шевченко С.Ф. Использование реакции нейтрализации антител для ретроспективной диагностики эпизоотий туляремии // ЖМЭИ. 1964. - № 5. - С. 50-53.

26. Шмутер М.Ф., Айкимбаев М.А., Тлеугабылов М.К. Использование туляремийного антительного диагностикума для выявления специфического антигена в трупах павших грызунов // Проблемы особо опасных инфекций. Саратов, 1973. - Вып. 1. - С. 190-194.

27. Adu-Sarkodie Y., Opoku B.K., Danso K.A., Weiss H.A., Mabey D. Comparison of latex agglutination, wet preparation, and culture for thedetection of Trichomonas vaginalis // Sex. Transm. Infect. 2004. - V. 80, N. 3. -P.201-203.

28. A1 Dahouk S., Tomaso H., Nockler K., Neubauer H. The detection of Brucella spp. using PCR-ELISA and real-time PCR assays // Clin. Lab. -2004. V. 50, N. 7-8. - P. 387-394.

29. A1 Dahouk S., Tomaso H., Nockler K., Neubauer H., Frangoulidis D. Laboratory-based diagnosis of brucellosis a review of the literature. Part II: serological tests for brucellosis // Clin. Lab. - 2003. - V. 49, N. 11-12. - P. 577-589.

30. Al-Qudah A.A., Mostratos A. Reiter haemagglutination test: a screening test for syphilis // Br. J. Vener. Dis. 1982. - V. 58, N. 5. - P. 281-285.

31. Al-Shamahy H.A., Wright S.G. Enzyme-linked immunosorbent assay for brucella antigen detection in human sera // J. Med. Microbiol. 1998. - V. 47, N.2.-P. 169-172.

32. Araj G.F. Human brucellosis: a classical infectious disease with persistent diagnostic challenges // Clin. Lab. Sci. 1999. - V. 12, N. 4. - P. 207-212.

33. Augenbraun M., Rolfs R., Johnson R., Joesoef R., Pope V. Treponemal specific tests for the serodiagnosis of syphilis. Syphilis and HIV Study Group // Sex. Transm. Dis. 1998. - V. 25, N. 10. - P. 549-552.

34. Bernoco D., Mottu A., Waltz L. (Hoffman-La Roche Inc.) Apparatus and analysis for agglutination reaction // Patent US 4148607. 1979.

35. Bobrovnik S.A. Analysis of dose-dependent antibody titration curves // Ukr. Biokhim. Zh. 2003. - V. 75, N. 4. - P.139-145.

36. Boivin A., Mesrobeanu L. Contributiona l'etude de la composition chimique des bacteries substance azotes et phosphorees "acido-solubles" // Compt. Rend. Soc. Biol. 1933. - V. 112. - P. 76.

37. Bowden R.A., Cloeckaert A., Zygmunt M.S., Dubray G. Outer-membrane protein- and rough lipopolysaccharide-specific monoclonal antibodies protect mice against Brucella ovis // J. Med. Microbiol. 1995. - V. 43, N. 5.-P. 344-347.

38. Bricker B.J. PCR as a diagnostic tool for brucellosis // Vet. Microbiol. -2002. V. 90, N. 1-4. - P. 435-446.

39. Castro R.R., Prieto E.S., Santo I., Azevedo J., Exposto F.L. Evaluation of the passive particle agglutination test in the serodiagnosis and follow-up of syphilis // Am. J. Clin. Pathol. 2001. - V. 116, N. 4. - P. 581-585.

40. Chand P., Gupta R.K., Khanna R.N., Sadana J.R. Detection of brucella antigen in bovine fetal stomach contents by agar gel precipitation and counter-immunoelectrophoresis // Res.Vet. Sci. 1987. - V. 43, N. 1. - P. 132-133.

41. Cloeckaert A., Jacques I., Bowden R.A., Dubray G., Limet J.N. Monoclonal antibodies to Brucella rough lipopolysaccharide: characterization and evaluation of their protective effect against B. abortus // Res. Microbiol. -1993.-V. 144, N. 6.-P. 475-484.

42. Coppola N. New diagnostic frontiers in Brucellosis // Infez. Med. 2001. -V. 9, N. 3.-P. 130-136.

43. Corbel M.J. Brucellosis: an Owerview // Emerging Infectious Diseases. -1997.-V.3,N. 2.-P. 213-221.

44. Cox P.M., Logan L.C., Noris L.C. Automated, quantitative microhemagglutination assay for Treponema pallidum antibodies // Appl. Microbiol. 1969. - V. 18, N. 3. - P.485-489.

45. Delamaire M. Automation of the immunohematology laboratory // Transfus. Clin. Biol. 2005. - V. 12, N. 2. - P. 163-168.

46. Dobrokhotov B.P., Stefanova T.A., Malenkova E.A. Detection of Pasteurella pestis antigens in the pellets of birds of prey as a method of revealing plague epizootics // Zh. Mikrobiol. Epidemiol. Immunobiol. 1971. - V. 48, N. 1. -P. 132-135.

47. Dorigo-Zetsma J.W., Belewu D., Meless H., Sanders E., Coutinho R.A., Schaap A., Wolday D. Performance of routine syphilis serology in the164

48. Ethiopian cohort on HIV/AIDS // Sex. Transm. Infect. 2004. - V. 80, N. 2. -P. 96-99.

49. Ebel A., Bachelart L., Alonso J.M. Evaluation of a new competitive immunoassay (BioElisa Syphilis) for screening for Treponema pallidum antibodies at various stages of syphilis // J. Clin. Microbiol. 1998. - V. 36, N. 2.-P. 358-361.

50. Ebel A., Vanneste L., Cardinaels M., Sablon E., Samson I., De Bosschere K., Hulstaert F., Zrein M. Validation of the INNO-LIA syphilis kit as a confirmatory assay for Treponema pallidum antibodies // J. Clin. Microbiol. -2000. -V. 38, N. 1.-P. 215-219.

51. Egglstone S.I., Turner A.J.L. Serological diagnosis of syphilis. PHLS Syphilis Serology Working Group. // Commun. Dis. Public Health. 2000. -V. 3, N. 3. - P. 158-162.

52. Eichmann F., Meyer J.C., Schmid E., Luger A., Schmidt B.L. Specificity and sensitivity of the solid phase hemadsorption test: a study of treated and untreated syphilitics // Z. Hautkr. 1983. - V. 58, N. 19. - P. 1369-1388.

53. Elfaki M.G., Uz-Zaman T., Al-Hokail A.A., Nakeeb S.M. Detection of Brucella DNA in sera from patients with brucellosis by polymerase chain reaction//Diagn. Microbiol. Infect. Dis. -2005. -V. 53, N. 1. P. 1-7.

54. Ellis J., Oyston P.C., Green M., Titball R.W. Tularemia. // Clin. Microbiol. Rev. 2002. - V. 15, N. 4. -P.631-646.

55. Ellis R.W., Sobanski M.A. Diagnostic particle agglutination using ultrasound: a new technology to rejuvenate old microbiological methods // J. Med. Microbiol. 2000. - V. 49, N. 10. - P. 853-859.

56. Farshy C.E., Hunter E.F., Helsel L.O., Larsen S.A. Four-step enzyme-linked immunosorbent assay for detection of Treponema pallidum antibody // J. Clin. Microbiol. 1985. - V. 21, N. 3. - P. 387-389.

57. Fears M.B., Pope V. Syphilis fast latex agglutination test, a rapid confirmatory test // Clin. Diagn. Lab. Immunol. 2001. - V. 8, N. 4. - P. 841-842.

58. Fenton K.A., Lowndes C.M. Resent trends in the epidemiology of sexually transmitted infections in the European Union // Sex. Transm. Infect. 2004. -V. 80.-P. 255-263.

59. Forbes J.M., Anderson M.D., Anderson G.F., Bleecker G.C., Rossi E.C., Moss G.S. Blood transfusion costs: a multicenter study // Transfusion. -1991. -V. 31, N. 4. P. 318-323.

60. Forsman M., Sandstrom G., and Sjostedt A. Analysis of 16S ribosomal DNA sequence of Francisella strain and utilization for determination of the genus and for identification of strain by PCR // Int. J. Syst. Bacteriol. 1994. - V. 44.-P. 38-46.

61. Fujimura K., Ise N., Ueno E., Hon T., Fujii N., Okada M. Reactivity of recombinant Treponema pallidum (r-Tp) antigens with anti-Tp antibodies in human syphilitic sera evaluated by ELISA // J. Clin. Lab. Anal. 1997. - V. 11, N. 6.-P. 315-322.

62. Fulop M.J., Webber T., Manchee R.J. Use of a zwitterionic detergent for the restoration of the antibody binding capacity of immunoblotted Francisella tularensis lipopolysaccharide // Anal. Biochem. 1992. - V. 203, N. 1. - P. 141-145.

63. Galfre, G., Milstein, C. Preparation of monoclonal antibodies: strategies and procedures. // Meth. Enzymol. 1981. -V. 73. - P. 3-45.

64. Geraci D., Locorotondo G., Parlato A., Cocchiara R., Caracappa S., Scarlata F., Cascio A. Enzyme-linked immunosorbent assay for Brucella melitensis-associated antigens // Microbiologica. 1988. - V. 11, N. 3. - P. 213-218.

65. Gerbier G., Garin-Bastuji B., Pouillot R. et al. False-positive serological reactions in bovine brecellosis: evidence of the role of Yersinia enterocolitica 0:9 // Vet. Res. 1997. - V. 28. - P. 375-383.166

66. Gosbell I.B., Sullivan E.A., Maidment C.A. An unexpected result in an evaluation of a serological test to detect syphilis // Pathology. 1999. - V. 31, N. 4.-P. 398-402.

67. Gurtler L. Difficulties and strategies of HIV diagnosis // Lancet. 1996. -V. 348, N. 9021.-P. 176-179.

68. Hagedorn H.J., Kraminer-Hagedorn A., De Bosschere K., Hulstaert F., Pottel H., Zrein M. Evaluation of INNO-LIA syphilis assay as a confirmatory test for syphilis // J. Clin. Microbiol. 2002. - V. 40, N. 3. - P. 973-978.

69. Heidelberger M„ Kendall F.E. // J. Exp. Med. 1929. - V.50. - P.809.

70. Heidelberger M., Kendall F.E. // J. Exp. Med. 1935. - V. 62. - P. 697.

71. Heidelberger M., Kendall F.E., Soo Hoo C.M. // J. Exp. Med. 1933. - V. 58.-P. 137.

72. Heizmann W., Botzenhart K., Doller G., Schanz D., Hermann G., Fleischmann K. Brucellosis: serological methods compared // J. Hyg. (Lond). 1985. - V. 95, N. 3. - P. 639-653.

73. Hijikata K., Sakuma H., Kato T., Yamamoto H. Olympus, Ltd. Analyzing apparatus and method for immunological agglutination reactions // Patent US4727033. 1985.

74. Iarkov S.P., Skopinskaia S.N. Liposomal immunoassay as a method for detecting microorganism antigens and their antibodies // Vestn. Ross. Akad. Med. Nauk. 1999. - N. 8. - P. 39-43.

75. Ito T., Kuwahara S., Yokota T. Automatic and manual latex agglutination tests for measurement of cholera toxin and heat-labile enterotoxin of Escherichiacoli//J. Clin. Microbiol. 1983.-V. 17, N. l.-P. 7-12.

76. Jenkins C.M., Johnson S.T., Bellissimo D.B., Gottschall J.L. Incidence of weak D in blood donors typed as D positive by the Olympus PK 7200 // Immunohematol. 2005. - V. 21, N. 4. - P. 152-154.

77. Johansson A., Forsman M., Sjostedt A. The development of tools for diagnosis of tularemia and typing of Francisella tularensis // APMIS. 2004. -V. 112, N. 11-12.-P. 898-907.

78. Joint FAO/WHO expert committee on brucellosis // World Health Organ Tech. Rep. Ser. 1986. -V. 740. - P. 1-132.

79. Karal'nik B.V., Erkinbekova B.K., Studentsova V.K., Grushina T.A. The demonstration of bacterial antigens in milk // Zh. Mikrobiol. Epidemiol. Immunobiol. 1994. - N. 6. - P. 96-97.

80. Kaufmann A.F., Meitzer M.I., Schmid G.P. The economic impact of a bioterrorist attack: are prevention and postattack intervention programs justifiable? // Emerg. Infect. Dis. 1997. - V. 3, N. 2. - P. 83-94.

81. Khensen P.V. Способ агглютинации частиц для одновременного исследования нескольких аналитов в одном образце // Patent RU 2111488 Cl,G01N33/53.- 1998.

82. Kocabeyoglu 0. The antigenic relationship between Brucella abortus, Brucella melitensis and Yersinia enterocolitica serotype 0:3 and 0:9 // Mikrobiyol. Bui. 1990. - V. 24, N. 3. - P. 218-225.

83. Köhler G., Milstein C. Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predefined specificity // Nature. 1975. - V. 256. - P. 495-497.

84. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 // Nature 1970. - V. 227. - P. 680-685.

85. Larsen S.A., Steiner B.M. Rudolph A.H. Laboratory diagnosis and interpretation of tests for syphilis // Clin. Microbiol. Rev. 1995. - V. 8, N. l.-P. 1-21.

86. Lefevre J.C., Bertrand M.A., Bauriaud R. Evaluation of the Captia enzyme immunoassays for detection of immunoglobulins G and M to Treponema169pallidum in syphilis // J. Clin. Microbiol. 1990. - V. 28, N. 8. - P. 17041707.

87. Lefevre P.C., Blancou J., Dedieu L., Diallo A., Libeau G., Thiaucourt F. Field diagnostic kits: a solution for developing countries? // Rev. Sci. Tech. 1993.-V. 12,N.2.-P. 451-460.

88. Leinonen M., Herva E. The latex agglutination test for the diagnosis of meningococcal and haemophilus influenzae meningitis. // Scand. J. Infect. Dis. 1977. - V. 9, N. 3. - P.187-191.

89. Lengyel A., Adam E., Nasz I. Latex agglutination and adenoviruses. II. Detection of antigens // Acta Microbiol. Hung. 1993. - V. 40, N. 2. - P. 85-90.

90. Levine S., Puck T.T., Sagik B.P. // J. Exp. Med. 1953. - V. 98. - P. 521.

91. Liakhov V.F., Borisenko K.K., Potekaev N.S., Borisova T.K., Sidorova E.V. The dynamics of Treponema-specific blood immunoglobulins in early forms of syphilis // Vestn. Dermatol. Venerol. 1990. - N. 8. - P. 38-42.

92. Luber A., Schmidt B.L., Schonwald E. The SPHA technic (solid phase hemadsorption) in syphilis serology. A year's experience in routine laboratory procedure // Hautarzt. 1982. - v. 33, N. 3. - P. 138-144.

93. Luger A.F., Schmidt B.L, Kaulich M. Significance of laboratory findings for the diagnosis of neurosyphilis // Int. J. STD AIDS. 2000. - V. 11, N. 4. -P. 224-234.

94. Malessa R., Agelink M.W., Hengge U., Mertins L., Gastpar M., Brockmeyer N.H. Oligosymptomatic neurosyphilis with false negative CSF-VDRL in HIV-infected individuals? // Eur. J. Med. Res. 1996. - V. 1, N. 6. - P. 299302.

95. Marangoni A., Sambri V., Olmo A., D'Antuono A., Negosanti M., Cevenini R. IgG western blot as a confirmatory test in early syphilis // Zentralbl. Bakteriol. 1999. -V. 289, N. 2. -P. 125-133.

96. Matte C. Method and apparatus for analyzing liquid substances likely to form agglutinates // Patent US3617222. 1971.

97. Mazeron M.C., Alain-Albertini S. Human cytomegalovirus infection: new methods for virological diagnosis // Pathol. Biol. Paris. - 1993. - V. 41, N. 5.-P. 487-494.

98. Medical and public health effects of attack with chemical or biological weapons // Health Aspects of Chemical and Biological Weapons 1st edition - WHO, Geneva. - 1970. - Annex 4.

99. Meshcheriakova I.S., Umnova N.S., Shakhanina K.L., Pavlova I.P. Use of the ELISA immunoenzyme method for the detection of the causative agent of tularemia // Zh. Mikrobiol. Epidemiol. Immunobiol. 1988. - N. 2. - P. 109-112.

100. Mohabir L.A. Cytomegalovirus antibody screening on the Olympus PK7100 // Immunohematol. 1992. - V. 8, N. 2. - P. 41-43.

101. Muller F., Sinzig G. Specificity and sensitivity of immunological diagnosis of congenital neonatal syphilis by the 19S(IgM)-FTA-ABS test // Z. Hautkr. 1982. -V. 57, N. 13.-P. 983-1001.

102. Nakane P.K., Kawaoi A.J. Peroxidase-labeled antibody. A new method of conjugation // Histochem. Cytochem. 1974. - V. 22, N. 12. - P. 10841091.

103. Nelson H.D. Screening for syphilis. U.S. Preventive Services Task Force (USPSTF): Brief update // Agency for Healthcare Research and Quality. -Rockville, 2004. P. 1-13.

104. Norris S.J. Polypeptides of Treponema pallidum: progress toward understanding their structural, functional, and immunologic roles // Microbiol. Rev. 1993. - V. 57, N. 3. - P. 750-779.

105. Notermans S., Wernars K. Immunological methods for detection of foodborne pathogens and their toxins // Int. J. Food Microbiol. 1991. - V. 12, N. 1.-P. 91-102.

106. Novaretti M.C., Navarro S.P., Dorlhiac-Llacer P.E., Chamone D.A. K phenotyping using a PK-7200 automated analyzer // Immunohematol. -1998.-V. 14, N. l.-P. 22-25.

107. Obisesan K.A., Ahmed Y. Routine antenatal syphilis screening a case against // Afr. J. Med. Med. Sci. - 1999. - V. 28, N. 3-4. - P. 185-187.

108. Olympus PK TP System. Microhemagglutination test for detection of Treponema pallidum antibodies using the Olympus PK Instrument // User's guide. 2003.

109. On S.L. Identification methods for Campylobacters, helicobacters, and related organisms // Clin. Microbiol. Rev. 1996. - V.9, N. 3. - P.405-422.172

110. Onishchenko G.G., Monisov A.A., Gul'chenko L.P., Fedorov Iu.M. Morbidity from zooanthroponotic and natural-focus infections and the measures for their prevention // Zh. Mikrobiol. Epidemiol. Immunobiol. -1999.-N. 4.-P. 14-18.

111. Ozturk R., Mert A., Kocak F., Ozaras R., Koksal F., Tabak F., Bilir M., Aktuglu Y. The diagnosis of brucellosis by use of BACTEC 9240 blood culture system // Diagn. Microbiol. Infect Dis. 2002. - V. 44, N. 2. - P. 133-135.

112. Palmer H.M., Higgins S.P., Herring A.J., Kingston M.A. Use of PCR in the diagnosis of early syphilis in the United Kingdom // Sex. Transm. Infect. -2003.-V. 79, N. 6.-P. 479-483.

113. Pappas G., Panagopoulou P., Christou L., Akritidis N. Brucella as a biological weapon // Cell. Mol. Life Sci. 2006. - V. 63, N. 19-20. - P. 2229-2236.

114. Perera V.Y., Creasy M.T., Winter A.J. Nylon bead enzyme-linked immunosorbent assay for detection of sub-picogram quantities of Brucella antigens //J. Clin. Microbiol. 1983. -V. 18, N. 3. - P. 601-608.

115. Perry M.B., Bundle D.R. Lipopolysaccharide antigens and carbohydrates of Brucella // In L.G. Adams (ed.), Advances in brucwellosis research. Texas A&M University Press, College Station, Tex. - 1990. - P. 76-88.

116. Peruski A.H., Johnson L.H. 3rd, Peruski L.F. Jr. Rapid and sensitive detection of biological warfare agents using time-resolved fluorescence assays //J. Immunol. Methods. 2002. - V. 263, N. 1-2. - P. 35-41.

117. Plapp F.V., Sinor L.T., Rachel J.M. The evolution of pretransiusion testing: from agglutination to solid-phase red cell adherence tests // Crit. Rev. Clin. Lab. Sci. 1989. - V. 27, N. 2. - P. 179-209.

118. Маслова с соавт. Характеристика структуры и антигенной активности липополисахаридов у разных видов Francisella. //Молек. генетика, микробиол. и вирусол. 1998. - №3. - С.26-29.

119. Potasman I., Even L., Banai M., Cohen E., Angel D., Jaffe M. Brucellosis: an unusual diagnosis for a seronegative patient with abscesses, osteomyelitis, and ulcerative colitis // Rev. Infect. Dis. 1991. - V. 13, N. 6. -P. 1039-1042.

120. Proteobacteria, part B // Bergey's manual of systematic bacteriology 2 and ed. Springes-Verlag, NY. 1984. - V.2.

121. Radcliffe K. European guidelines for STD. // Int. J. STD&AIDS. V. 12, Suppl. 3.

122. Rai G.P., Rao K.M. Preliminary studies on comparative efficacy of Brucella abortus antigens in indirect immunofluorescence technique // Indian J. Med. Res. 1986. - V. 84. - P. 448-450.

123. Ratushna V.G., Sturgill D.M., Ramamoorthy S., Reichow S.A., He Y., Lathigra R., Sriranganathan N., Hailing S.M., Boyle S.M., Gibas C.J. Molecular targets for rapid identification of Brucella spp. // BMC Microbiol. -2006.-V. 6.-P. 13-33.

124. Reisner B.S., Mann L.M., Tholcken C.A., Waite R.T., Woods G.L. Use of the Treponema pallidum-specific captia syphilis IgG assay in conjunction174with the rapid plasma reagin to test for syphilis // J. Clin. Microbiol. 1997.- V. 35, N. 5. P. 1141-1143.

125. Reiss R.F., Malavade V., Johnson C.L., Hendricks E., Rabin B.I., Marsh W.L. Blood grouping with the Olympus PK7100 testing system // Clin. Lab. Haematol. 1988. - V. 10, N. 4. - P. 385-390.

126. Robinson-Dunn B. The microbiology laboratory's role in response to bioterrorism // Arch. Pathol. Lab. Med. 2002. - V. 126, N. 3. - P. 291-294.

127. Robuchon-Merovak R.G., Robuchon-Merovak C.R. Apparatus for displaying the results obtained on an agglutination support // Patent US4104031. 1978.

128. Rojas N., Freer E., Weintraub A. et al. Immunochemical identification of Brucella abortus lipopolysaccharide epitopes // Clin. Diagn. Lab. Immunol.- 1994.-V. 1, N. 2. P. 206-213.

129. Romanowski B., Sutherland R., Fick G.H., Mooney D., Love E.J. Serologic response to treatment of infectious syphilis // Ann. Intern. Med. 1991. - V. 114, N. 12.-P. 1005-1009.

130. Roop R.M. 2nd, Preston-Moore D., Bagchi T., Schurig G.G. Rapid identification of smooth Brucella species with a monoclonal antibody // J. Clin. Microbiol. 1987. - V. 25, N. 11. - P. 2090-2093.

131. Sandstrom G., Tarnvik A., Wolf-Watz H., Lofgren S. Antigen from Francisella tularensis: nonidentity between determinants participating in cell-mediated and humoral reactions // Infect. Immun. 1984. - V. 45, N. 1. -P. 101-106.

132. Sandstrom G.E., Wolf-Watz H., Tarnvik A. Duct ELISA for detection of bacteria in fluid samples // J. Microbiol. Methods. 1986. - V. 5. - P. 4147.

133. Santini C., Baiocchi P., Berardelli A., Venditti M., Serra P. A case of brain abscess due to Brucella melitensis // Clin. Infect. Dis. 1994. - V. 19, N. 5. -P. 977-978.

134. Sato T., Kubo E., Yokota M., Kayashima T., Tomizawa T. Treponema pallidum specific IgM haemagglutination test for serodiagnosis of syphilis // Br. J. Vener. Dis. 1984. - V. 60, N. 6. - P. 364-370.

135. Scientific Committee on Animal Health and Animal Welfare. Brucellosis in Sheep and Goats // SANCO.C.2/AH/R23/2001. 2001. - P. 31.

136. Sequeira P.J. Serological diagnosis of untreated early syphilis. Importance of the differences in THA, TPHA, and VDRL test titres // Br. J. Vener. Dis. -1983.-V. 59, N.3.-P. 145-150.

137. Shakir R.A., Al-Din A.S., Araj G.F., Lulu A.R., Mousa A.R., Saadah M.A. Clinical categories of neurobrucellosis. A report on 19 cases // Brain. -1987. -V. 110, Pt. 1. P. 213-223.

138. Sharma Y. Method for detecting immunological agglutination and biochemical agent therefore // Patent US4319882. 1982.

139. Sobanski M.A., Ellis R.W., Hastings J.G. Rotavirus detection using ultrasound enhanced latex agglutination and turbidimetry // J. Immunoassay.- 2000. V. 21, N. 4. - P. 315-325.

140. Stemshorn B.W. Recent progress in the diagnosis of brucellosis // Dev. Biol. Stand. 1984. - V. 56. - P. 325-340.

141. Tárnvik A., Lofgren S., Ohlund L., Sandstrom G. Detection of antigen in urine of a patient with tularemia // Eur. J. Clin. Microbiol. 1987. - V. 6, N. 3.-P. 318-319.

142. Thakar Y.S., Chande C., Mahalley A.D., Saoji A.M. Seroprevalence of syphilis by TPHA test // Indian J. Pathol. Microbiol. 1996. - V. 39, N. 2. -P. 135-138.

143. The use of Protein-A Sepharose to purify murine IgG monoclonal antibodies // Separation News. Pharmacia. - V.13-5.

144. Tiensiwakul P. Solid-phase hemadsorption assay for IgM antibody to Treponema pallidum in serum and umbilical cord blood // Clin. Lab. Sci. -1990. -V. 3, N. 5. P. 341-343.

145. Tight R.R., White A.C. Quantitative microhaemagglutination assay for Treponema pallidum antibodies in experimental syphilis // Br. J. Vener. Dis.- 1980. V. 56, N. 5. - P. 291-296.

146. Tijssen P., Kurstak E. Highly efficient and simple methods for the preparation of peroxidase and active peroxidase-antibody conjugates ensyme immunoassays //Anal. Biochem. 1984. -V. 136, N. 2. - P. 451-457.

147. Tret'iakov S.I., Iarkov S.P., Zlobin V.N., Kalinin Iu.T. The use of solidphase liposomal immunoassay for determining a bacterial antigen of lipopolysaccharide nature // Zh. Mikrobiol. Epidemiol. Immunobiol. 1992. -N. 11-12.-P. 43-46.

148. Vizcaino N., Chordi A., Fernandez-Lago L. Characterization of smooth Brucella lipopolysaccharides and polysaccharides by monoclonal antibodies. // Res. Microbiol. 1991. - V. 142, N. 9. - P. 971-978.

149. Voak D. Monoclonal blood group antibodies // Beitr. Infiisionsther. 1989. -V. 24.-P. 200-213.

150. Wenger JD, Hollis DG, Weaver RE, Baker CN, Brown GR, Brenner DJ, Broome CV. Infection caused by Francisella philomiragia (formerly Yersinia philomiragia). A newly recognized human pathogen // Ann. Intern. Med. 1989. - V. 110, N. 11. - P. 888-892.

151. Westphal O. and Jann K. Extraction with phenol-water and further application of the procedure // Methods in Carbohydrate Chemistry. 1965. -V.5.-P. 83-90.

152. Weynants V., Gilson D., Cloeckaert et al. Characterization of smooth lipopolysaccharides and O polysaccharides of Brucella species by competition binding assays with monoclonal antibodies // Infect. Immunol. -1997.-V. 65.-P. 1939-1943.

153. World Health Organization. Treponema infections // Technical report series. -Geneva, WHO, 1982.-674.

154. Young E.J. An overview of human brucellosis // Clin. Infect. Dis. 1995. -V. 21, N. 2. - P. 283-290.

155. Young H. Guidelines for serological testing for syphilis // Sex. Transm. Infect. 2000. - V. 76, N. 5. - P. 403-405.

156. Young H., Henrichsen C., Robertson H.H. Treponema pallidum haemagglutination test as a screening procedure for the diagnosis of syphilis // Br. J. Vener. Dis. 1974. - V. 50. - P. 341-346.

157. Young H., Moyes A., McMillan A., Patterson J. Enzyme immunoassay for anti-treponemal IgG: screening or confirmatory test? // J. Clin. Pathol. -1992. -V. 45, N. 1. -P. 37-41.

158. Young H., Moyes A., Seagar L., McMillan A. Novel recombinant-antigen enzyme immunoassay for serological diagnosis of syphilis // J. Clin. Microbiol. 1998. - V. 36, N. 4. - P. 913-917.

159. Zimmerman S.J., Gillikin S., Sofat N., Bartholomew W.R., Amsterdam D. Case report and seeded blood culture study of Brucella bacteremia // J. Clin. Microbiol. 1990. - V. 28, N. 9. - P. 2139-2141.

160. Zinsser H.//J. Immunol.- 1930.-V. 18.-P. 483.

161. Zrein M., Maure I., Boursier F., Soufflet L. Recombinant antigen-based enzyme immunoassay for screening of Treponema pallidum antibodies in blood bank routine // J. Clin. Microbiol. 1995. - V. 33, N. 3. - P. 525-527.