Разработка бактериального препарата на основе штамма-продуцента нитритредуктазы для снижения остаточного нитрита натрия в мясных продуктах тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 05.18.07, кандидат технических наук Лаптев, Иван Александрович

• Лаптев, Иван Александрович
• кандидат технических наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат технических наук Лаптев, Иван Александрович

Основные обозначения и сокращения.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Применение нитрита натрия в производстве мясных продуктов.

1.2. N-нитрозоамины и другие побочные эффекты остаточного нитрита натрия в мясных продуктах.

1.3. Превращения нитрита натрия в мясных продуктах.j ^

1.4. Механизм проявления нитритом натрия антимикробных свойств.^

1.5. Механизм проявления нитритом натрия антиокислительных свойств.

1.6. Механизм образования окраски мясных продуктов.

1.7. Механизм формирования органолептических свойств мясных продуктов.

1.8. Способы снижения остаточного нитрита натрия. Бактериальная денитрификация.

1.9. Применение микроорганизмов в производстве мясных продуктов. Staphylococcus carnosus и его генетический аппарат денитрификации.

Цель и задачи исследования.

Глава 2. Методики постановки эксперимента и методы исследований.

2.1. Схема постановки эксперимента. Характеристика объектов исследования.

2.2. Методы исследований.

2.2.1. Выделение плазмиды из грамотрицательных микроорганизмов.

2.2.2. Выделение плазмиды из грамположительных микроорганизмов.

2- 2.3. Выделение хромосомной ДНК из прокариотических и эукариотических микроорганизмов.

2. 2.4. Очистка плазмидной и хромосомной ДНК в градиенте хлористого цезия.

2.2.5. Выделение фрагмента ДНК из легкоплавкой агарозы.

2.2.6. Закладка штамма на хранение в глицерине.

2.2.7. Приготовление компетентной культуры Е. coli для трансформации электропорацией.

2.2.8. Электропорация Е. coli.

2.2.9. Перенос по Саузерну.

2.2.10. Гибридизация по Саузерну.

2.2.11. Дотирование ДНК.

2.2.12. Рестрикция ДНК.

2.2.13. Щелочное дефосфорилирование ДНК.

2.2.14. Полимеразная цепная реакция.

2.2.15. Получение мутантных штаммов, дефектных по гену thy К. ' Приготовление компетентной культуры Staphylococcus carnosus для трансформации электропорацией.

2.2.17. Электропорация компетентной культуры Staphylococcus carnosus.

2.2.18. Определение содержания нитрита натрия в бактериальной среде и мясных продуктах.

2.2.19. Определение степени окисления жира по пероксидному числу.

2.2.20. Дистилляционный метод определения окислительных изменений с 2-тиобарбитуровой кислотой.

2.2.21. Определение кислотного числа.

2.2.22. Определение содержания нитрозопигментов мясных продуктах.

2.2.23. Оценка органолептических показателей.

2.2.24. Оценка микробиологических показателей.

2.2.25. Определение количества молочнокислых микроорганизмов.

2.2.26. Определение влагосвязывающей способности мясопродуктов.

2.2.27. Потенциометрический метод определения рН мясопродуктов.

2.2.28. Определение массовой доли влаги.

2.2.29. Определение массовой доли белка.

2.2.30. Определение массовой доли жира.

2.2.31. Определение массовой доли золы.

2.2.32. Определение содержания хлорида натрия.

2.2.33. Клинические испытания in vivo.

Глава 3. Разработка систем селекции и экспрессии. Получение штаммапродуцента фермента нитритредуктазы.

3.1. Выбор штамма для создания продуцента фермента нитритредуктазы.

3.2. Конструирование термочувствительного вектора pBTmcs для грамположительных микроорганизмов.

3.3. Получение штамма Staphylococcus carnosus (thyAT).

3.4. Получение в составе pUC19 конструкций для замещения промотора нитритредуктазного оперона.

3.4.1. Клонирование флангов для интеграции.

3.4.2. Клонирование промоторов.

3-4.3. Клонирование селективных маркеров.

3.4.4. Получение промежуточных конструкций.

3.4.5. Получение конечных конструкций.

3.5. Введение в составе pBTmcs конструкций для замещения промотора нитритредуктазного оперона.

3.6. Трансформация, получение интеграции плазмид для замещения промотора оперона nir и изучение нитритредуктазной активности клонов.

3.7 Замена селективного маркера в pBT-dxyl-nirR.

3.8. Замена промотора гена xylA в плазмиде рВТ.^

3-9. Трансформация, получение интеграции плазмиды pBT-thyA-gap-nirR и изучение нитритредуктазной активности клонов.

Глава 4. Изучение нитритредуктазной активности штамма S. carnosus LIAс использованием модельной фаршевой системы.

Глава 5. Разработка бактериального препарата «Биоцвет».

Глава 6. Комплексное исследование вареных колбас, изготовленных с применением бактериального препарата «Биоцвет».

Социальные и экономические эффекты от использования бактериального препарата «Биоцвет».

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка бактериального препарата на основе штамма-продуцента нитритредуктазы для снижения остаточного нитрита натрия в мясных продуктах»

Повышение качества выпускаемой продукции является одной из важных задач, стоящих перед пищевой промышленностью. Эта задача в полной мере относится к мясному производству.

Пищевая ценность и качество продуктов, в том числе изделий из мяса, определяется не только содержанием в них белков, жиров, углеводов, витаминов и минеральных солей и других важных компонентов, но также отсутствием вредных веществ.

Для придания характерного цвета, улучшения вкусоароматических характеристик мясных продуктов, а также для предотвращения их бактериальной и окислительной порчи применяют нитрит натрия. Проявление нитритом данных свойств является результатом реакции его производного — оксида азота с различными соединениями мышечной ткани или жизненно-важными для микроорганизмов соединениями. Образование оксида азота (II) из нитрита зависит от таких параметров как: рН среды, температура, наличие восстановителей и денитрифицирующих микроорганизмов. Но даже при комплексном применении приведенных условий значительная часть добавляемого нитрита натрия остается неиспользованной и обнаруживается в готовом продукте.

Наличие свободного нитрита натрия в изделиях из мяса представляет собой некоторую опасность для здоровья человека, поскольку нитриты относятся к токсическим веществам, являются мутагенами и предшественниками канцерогенных нитрозаминов. Поэтому вопрос о возможных путях снижения содержания нитрита натрия в мясных изделиях имеет большое практическое значение.

Отсутствие на данный момент времени веществ, способных функционально заменить нитрит натрия, не позволяет исключить его из рецептур и делает необходимым вести работы по изысканию способов снижения остаточных концентраций нитрита.

Нами предложен микробиологический метод снижения уровня остаточного нитрита - применение бактериального препарата на основе генетически-модифицированного денитрифицирующего штамма Staphylococcus carnosus.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология пищевых продуктов (по отраслям)», Лаптев, Иван Александрович

Выводы

1. Для получения мясных продуктов, не содержащих остаточные концентрации нитрита натрия, разработан штамм Staphylococcus carnosus LIA-96 - продуцент фермента нитритредуктазы, превосходящий традиционно используемый по скорости и полноте восстановления ионов нитрита. За 12 ч культивирования данный штамм полностью утилизировал нитрит натрия в L-среде при 20 °С, в то время как исходный штамм - S. carnosus В-8953 только на 50%. Штамм Staphylococcus carnosus LIA-96 находится на национальном патентном депонировании в коллекции ВКПМ под номером В-9518.

2. Проведены доклинические испытания in vivo штамма S. carnosus В-9518, в результате которых штамм был признан безопасным по показателям безвредности, токсичности, токсигенности и вирулентности. Молекулярно-генетическая экспертиза бактериального препарата «Биоцвет», проведенная в ГУ НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН установила, что штамм S. carnosus В-9518 не является генетически модифицированным микроорганизмом. Подтверждена стабильность фенотипических и генотипических признаков, установлено отсутствие генов, кодирующих белки-токсины.

3. На модельных фаршевых системах показана возможность применения штамма S. carnosus (В-9518) для снижения остаточного нитрита натрия в мясных изделиях. При добавлении к образцам штамма S. carnosus В-9518 нитрит не обнаруживался через 6 ч при его введении 3 мг на 100 г фарша, через 12 ч при 5 мг и через 14 ч при введении 7,5 мг на 100 г фарша.

4. На основе штамма S. carnosus (В-9518) разработан бактериальный препарат «Биоцвет» для производства термически обработанных предварительно ферментированных мясных изделий, утверждена нормативная документация - ТУ 9229-047-02068640-07.

5. Проведены комплексные исследования опытных образцов вареной колбасы с добавлением бактериального препарата «Биоцвет» и нитрита натрия в количестве 3 мг, 5 мг и 7,5 мг на 100 г сырья. Результаты исследований говорят о возможном снижении уровня вводимого нитрита натрия в вареных колбасах с 0,0075% до значения 0,003%. При этом качество продукта не ухудшается по сравнению с получаемым традиционным методом, а восстановление ионов нитрита происходит полностью.

6. Разработана рецептура вареной колбасы «Экстра-М» первого сорта с применением бактериального препарата «Биоцвет», а также технология ее производства. Посол проводят в вакуумных мешалках при 8.12 °С в течение 6 ч после добавления к измельченному сырью бактериального препарата и нитрита натрия в количестве 100 г и 3 г на 100 кг, соответственно.

7. Разработан проект нормативной документации на производство вареной колбасы «Экстра-М» первого сорта с применением бактериального препарата «Биоцвет», ТУ 9213-.-02068640-08. Технология апробирована в промышленных условиях на ОАО «ИКМА».

Список литературы диссертационного исследования кандидат технических наук Лаптев, Иван Александрович, 2008 год

1. Андухар Г., Риверон О. Влияние нитрата на вкус свиного мяса при посоле. Материалы международного симпозиума "Нитриты и качество мясных продуктов", Варна. 1981, с.93-97.

2. ВНИИМП. Научное обеспечение инновационных процессов в мясоперерабатывающей отрасли: Сборник докладов 8-й Международной научной конференции памяти В.М. Горбатова. Часть 1. М.: ВНИИМП, 2005. - 168 с.

3. Джорджевич В.В., Радович Н.И. Влияние нитритов на некоторые свойства мясных продуктов и значение отдельных факторов в их остаточном содержании. Материалы международного симпозиума "Нитриты и качество мясных продуктов". Варна. 1981, стр.54.

4. Журавская и др, "Исследование и контроль качества мяса и мясопродуктов", М: Агропромиздат, 1985. - 296 стр.

5. Костюковский Я.Л., Меламед Д.Б., Успехи современной химии., 1998 Т.57, стр. 626-655.

6. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Молекулярное клонирование, 1984.

7. Рубенчик Б.Л. Профилактика загрязнения пищевых продуктов канцерогенными веществами, Киев: Здоровье, 1983. 160 стр.

8. Чиркина Т.Ф., Хлебников В.И. Роль пищевых добавок в повышении качества мясных консервов. ЦНИИТЭИ, 1986, обзорная информация.

9. Ahnert-Hilger В.Н. G, Molecular aspects of tetanus and botulinum neurotoxin poisoning, Prog. Neurobiol. 46(1995) 83-96.

10. Allen C.E., Foegeding E.A. Some lipid characteristics and interactions in muscle. Food Technology, 1981, vol.35. №5, p.253-257.

11. Archer D.L. et al., Evidence that ingested nitrate and nitrite are benefical to health, Journal of Food Protection, 2002, Vol. 65, №5. p.872-875

12. Barriere, C., Centeno, D., Lebert, A., Leroy-Se'trin, S., Berdague', J.L., Talon, R., 2001a. Roles of superoxide dismutase and catalase of Staphylococcus xylosus in the inhibition of linoleic acid oxidation. FEMS Microbiology Letters 201, 181- 185.

13. Binkerd E.F., The history and use of nitrate and nitrite in the curing of meat. Food Cosmet Toxicol. 1975 Dec;13(6):655-61.

14. Borawska M. et al., Roczniki Akademii Medycznej w Biafymstoku, The nitrate and nitrite contents in a whole day's hospital diet during the spring season, 1997, Vol.41, №2, p.202-209.

15. Dich J., Jarvinen R et al., Food Additives Contamination, Dietary intakes of nitrate, nitrite and NDMA in the Finnish Mobile Clinic Health Examination Survey, 1996, Vol.13, №5, p.541-552

16. Drapier J.C., Interplay between NO and Fe-S. clusters: Relevance to biological systems, Methods: A Companion to Methods Enzymol. 11 (1997) 319-329.

17. Cammack R., C.L. Joannou, Xiao-Yuan Cui, Claudia Torres Martinez, Shaun R. Maraj, Martin N. Hughes, Nitrite and nitrosyl compounds in food preservation, Biochimica et Biophysica Acta 1411 (1999) 475-488.

18. Christiansen L.N., R.B. Tompkin, A.B. Shaparis, R.W., Johnson, D.A. Kautter, Effect of sodium nitrite and nitrate on Clostridium botulinum growth and toxin production in a summer style sausage, J. Food Sci. 40 (1975) 488-490

19. Clarke M.J., J.B. Gaul, Chemistry relevant to the biological effects of nitric oxide and metallonitrosyls, Struct. Bonding 81 (1993) 147-181.

20. Cooke J.P., J. Dzau, A. Creager, Endothelial dysfunction in hypercholesterolemia is corrected by L-arginine, Basic Res. Cardiol. 86, (Suppl 2) (1991) 173181.

21. Cross, C. K., and P. Ziegler. 1965. Comparison of the volatile fractions from cured and uncured meat. J Food Sci 30:610-614.

22. Cui X.Y., C.L. Joannou, M.N. Hughes, R. Cammack, The bactericidal effects of transition metal complexes containing the NO group on the food-spoilage bacterium Clostridium sporogenes, FEMS Microbiol. Lett. 98 (1992) 67-70.

23. Dee G., C. Rice-Evans, S. Obeyesekera, S. Meraji, M. Jacobs, K.R. Bruckdorfer, The modulation of ferryl myoglobin formation and its oxidative effects on low density lipoproteins by nitric oxide, FEBS Lett. 294 (1991) 3842.

24. Dykhuizen R.S., A. Fraser, C. Duncan, C.C. Smith, M. Golden, N. Benjamin, C.Leifert, Antimicrobial effect of acidified nitrite on gut pathogens: importance of dietary nitrate in host defense. Antimicrob Agents Chemother. 1996 Jun; 40(6): 1422-5.

25. Dykhuizen R.S., A. Fraser, H. McKenzie, M. Golden, C. Leifert, N. Benjamin, Helicobacter pylori is killed by nitrite under acidic conditions, Gut 42 (1998) 334-337.

26. Ennahar, S., Sonomoto, K., Ishizaki, A., 1999. Class Ha bacteriocins from lactic acid bacteria: antibacterial activity and food preservation. Journal of Bioscience and Bioengineering 87, 705- 716.

27. Erkkila, S., Petaja, E., Eerola, S., Lilleberg, L., Mattila-Sandholm, T., Suihko, M.-L., 2001a. Flavour profiles of dry sausages fermented by selected novel meat starter cultures. Meat Science 58, 111-116.

28. Esterbauer H., J. Gebicki, H. Puhl, G. Jurgens, The role of lipid peroxidation and antioxidants in oxidative modification of LDL, Free Radic. Biol. Med. 13 (1992)341-390.

29. Evan M. Hetrick, Jae Ho Shin, Nathan A. Stasko, C. Bryce Johnson, Daniel A. Wespe, Ekhson Holmuhamedov and Mark H. Schoenfisch, Bactericidal Efficacy of Nitric Oxide-Releasing Silica Nanoparticles, ACSNano, VOL. 2, NO. 2, 235-246, 2008.

30. Fang F.C., Nitric oxide and infection, KLUWER ACADEMIC PUBLISHERS, 1999, 544 стр.

31. Feiner G. Meat products handbook: Practical science and technology. WOODHEAD PUBLISHING LIMITED, Cambridge, England, 2006.

32. Furukawa Т., H. Kohno, R. Tokunaga, S. Taketani, Nitric oxide-mediated inactivation of mammalian ferrochelatase in vivo and in vitro: possible involvement of the iron-sulphur cluster of the enzyme, Biochem. J. 310 (1995) 533-538.

33. Ganzle, M.G., Vogel, R.F., 2003. Studies on the mode of action of reutericyclin. Applied and Environmental Microbiology 69, 1305-1307

34. Girotti A.W., Mechanism of lipid peroxidation, Free Radic. Biol. Med. 1 (1985) 87-95.

35. Gorbunov N.V., A.N. Osipov, B.W. Day, B. Zayas-Rivera, V.E. Kagan, N.M. Elsayed, Reduction of ferrylmyoglobin and ferrylhemoglobin by nitric oxide: a protective mechanism against ferryl hemoprotein-induced oxidations, Biochemistry 34 (1995) 6689-6699.

36. Goss S.P., N. Hogg, B. Kalyanaraman, The effect of nitric oxide release rates on the oxidation of human low density lipoprotein, J. Biol. Chem. 272 (1997) 21647-21653.

37. Gotz F. Staphylococcus carnosus: a new host organism for gene cloning and protein production. Soc Appl Bacteriol Symp Ser. 1990;19:49S-53S. Review.

38. Halliwell В., J.M. Gutteridge, Oxygen toxicity, oxygen radicals, transition metals and disease, Biochem. J. 219 (1984) 1-14.

39. Haskin C.J., N. Ravi, J.B. Lynch, E. Munck, L. Que, Reaction of NO with the reduced R2 protein of ribonucleotide reductase from Escherichia coli, Biochemistry 34 (1995) 11090-11098.

40. Herring, H. K. 1973. Effect of nitrite and other factors on the physico-chemical characteristics and nitrosamine formation in bacon. Proc Meat Ind Res Conf, Amer Meat Inst Found, Chicago, IL. pp. 47-60.

41. Hogg N., B. Kalyanaraman, Nitric oxide and lipid peroxidation (review), Biochimica et Biophysica Acta 1411 (1999) 378-384.

42. Hornsey, H. C. 1956. "The colour of cooked cured pork. I. Estimation of the nitric oxide-haem pigments". J. Sci. Food Agric. 7:534-540.

43. Hotchkiss J.H., Cancer surveys, Preformed N-nitroso compounds in foods and beverages, 1989, Vol.8, №2, p.295-321.

44. Hudson J.A., Comparison of response-surface models for Listeria monocytogenes, Food Res. Int. 27 (1994) 53-59.

45. Hui Y. H., Meat Science and Applications, MARCEL DEKKER, INC. NEW YORK »BASEL, 2001.

46. Judge M.D., Chich J.J. Palatability of pregior and mechanically processed nitrite-free hams. J. Food Science, 1979, vol.44, №6, p.1775-1777.

47. Igene J.O., Pearson A.M. Role of phospholipids and triglycerides in warmed-over flavor development in meat model system. J. Food science, 1979, vol.44, №5 p.1285-1290.

48. Igene J.O., K.Yamauchi, Mechanisms by which nitrite inhibits the development of warmed-over flavour (WOF) in cured meat, Food Chemistry 18, (1985), 118.

49. Inoue S., S. Kawanishi, Oxidative DNA damage induced by simultaneous generation of nitric oxide and superoxide, FEBS Lett. 371 (1995) 86-88.

50. Kanner J., S. Harel, R. Granit, Nitric oxide as an antioxidant, Arch. Biochem. Biophys. 289 (1991) 130-136.

51. Kanner J., S. Harel, R. Granit, Nitric oxide, an inhibitor of lipid oxidation by lipoxygenase, cyclooxygenase and hemoglobin, Lipids 27 (1992) 46-49.

52. Knowles R., Denitrification, Microbiological reviews, 1982, Vol.46, №l,p.43-70.

53. Leroy F, Verluyten J, De Vuyst L. Functional meat starter cultures for improved sausage fermentation. Int J Food Microbiol. 2006 Feb 15;106(3):270-85. Epub 2005 Oct 5. Review.

54. Lovitt R.W., J.G. Morris, D.B. Kell, The physiology of Clostridium sporogenes NCIB 8053 growing in defined media, J. Appl. Bacteriol. 62 (1987) 81-92.

55. MacDonald B., Gray J.O. Role of nitrite in cured meat flavor: antioxidant role of nitrite. J. Food Science, 1980, vol.45, №4, p.893-897.

56. Marth E.H., Disease characteristics of Listeria monocytogenes, Food Technol. 42(1988) 165-168.

57. Montel, M.C., Masson, F., Talon, R., 1998. Bacterial role in flavour development. Meat Science 49 (Suppl. 1), 111 -123.

58. Neubauer H, Götz F. Physiology and interaction of nitrate and nitrite reduction in Staphylococcus carnosus. J Bacteriol. 1996 Apr;178(7):2005-9.

59. Neubauer H, Pantel I, Götz F. Molecular characterization of the nitrite-reducing system of Staphylococcus carnosus. J Bacteriol. 1999 Mar; 181 (5): 1481-8.

60. Niinivaara F., Über den Einfluss von Bacterienreinkulturen auf die Reifung und Umrötung der Rohwurst. Avta Agr. Fenn. 84, 128 pages, 1955.

61. Nickoloff J.A.(pe,aaKTop). 1995. "Electroporation Protocols for Microorganisms", 367 CTp.

62. O'Leary V., A. Graham, V. Darley-Usmar, D. Stone, The effect of lipid hydroperoxides on the copper dependent oxidation of low density lipoprotein, Biochem. Soc. Trans. 21 (1993) 89S.

63. Olesen, P.T., Stahnke, L.H., 2003. The influence of precultivation parameters on the catabolism of branched-chain amino acids by Staphylococcus xylosus and Staphylococcus carnosus. Food Microbiology 20, 621- 629.

64. Palli D et al., Red meat, family history and increased risck of gastric cancer with microsatellite instability. Cancer Research, 2001, Vol. 61, p.5415-5419, July 15.

65. Park J.W., H.K. Kim, Strand scission in DNA induced by S-nitrosothiol with hydrogen peroxide, Biochem. Biophys. Res. Commun. 200 (1994) 966-972.

66. Patel RP, McAndrew J, Sellak H, White CR, Jo H, Freeman BA, Darley-Usmar VM., Biological aspects of reactive nitrogen species. Biochim Biophys Acta. 1999 May 5; 1411(2-3):385-400.

67. Payne M.J., C. Glidewell, R. Cammack, Interactions of Iron-thiol-nitrosyl compounds with the phosphoroclastic system of Clostridium sporogenes, J. Gen. Microbiol. 136 (1990) 2077-2087.

68. Payne M.J., L.F.J. Woods, P. Gibbs, R. Cammack, Electron paramagnetic resonance spectroscopic investigation of the inhibition of the phosphoroclastic system of Clostridium sporogenes by nitrite, J. Gen. Microbiol. 136 (1990) 2067-2076.

69. Pearson A.M., Tauber F.W. 1984. Processed Meats. 2nd ed. Van Nostrand Reinhold Company, New York, NY.

70. Perigo J. A., T.A. Roberts, Inhibition of Clostridia by nitrite, J. Food Technol. 3 (1968)91-94.

71. Price, J. F., and B. S. Schweigert. 1987. The Science of Meat and Meat Products. 3rd ed. Food and Nutrition Press. Westport, CN.

72. Rao D.N.R., A.I. Cederbaum, Generation of reactive oxygen species by the redox cycling of nitroprusside, Biochim.Biophys. Acta 1289 (1996) 195-202.

73. Ross, R.P., Morgan, S., Hill, C., 2002. Preservation and fermentation: past, present and future. International Journal of Food Microbiology 79, 3- 16.

74. Roy B., M. Lepoivre, Y. Henry, M. Fontecave, Inhibition of ribonucleotide reductase by nitric oxide derived from thionitrites: reversible modifications of both subunits, Biochemistry 34 (1995) 5411-5418.

75. Sasaki Y h flp. 2004. "thyA as a selection marker in construction food-grade host-vector and integration systems for Streptococcus thermophilus". Applied and Environmental Microbiology, 70(3): 1858-1864 cTp.

76. Sen N.P., Webb K et al, IARC scientific publications, The confirmation of low levels of volatile nitrosamines by oxidation to nitramines, 1983 №45, p.499-508.

77. Schleifer K.H. and Fischer U. Description of a new species of the genus Staphylococcus: Staphylococcus carnosus. Int. J. Syst. Bacteriol., 1982, 32, 153-156.

78. Sjogren, J., Magnusson, J., Broberg, A., Schnu rer, J., Kenne, L., 2003. Antifungal 3-hydroxy fatty acids from Lactobacillus plantarum MiLAB 14. Applied and Environmental Microbiology 69, 7554—7557.

79. Shepard S.E. et al., Food Chemistry Toxicology, Assessment of the risk of formation of carcinogenic N-nitroso compounds from dietary precursors in the stomach,1987, Vol.25, №1, p.91-108.

80. Stahnke, L.H., Hoick, A., Jensen, A., Nilsen, A., Zanardi, E., 2002. Maturity acceleration of Italian dried sausage by Staphylococcus carnosus— relationship between maturity and flavor compounds. Journal of Food Science 67, 1914-1921.

81. Stiles, M.E., Hastings, J.W., 1991. Bacteriocin production by lactic acid bacteria: potential for use in meat preservation. Trends in Food Science & Technology 2, 247-251.

82. Tarr H.L.A., Bacteriostatic action of nitrites, Nature 147 (1941) 417-418.

83. Tellefson C.S., Bowers J.A. Aroma, color and lipid oxidation of turkey muscle emulsion. J. Food Science, 1982, vol.47, №2, p.393-396.

84. Tjener, K., Stahnke, L.H., Andersen, L., Martinussen, J., 2004b. Growth and production of volatiles by Staphylococcus carnosus in dry sausages: influence of inoculation level and ripening time. Meat Science 67, 447-452.

85. Tompkin R.B., L.N. Christiansen, A.B. Shaparis, The effect of iron on botulinal inhibition in perishable canned cured meat, J. Food Technol.13 (1978) 521-527.

86. Tricker A.R. et al., Cancer surveys, Environmental exposure to preformed nitroso-compounds, 1989, Vol.8, №2, p.251-272.

87. Tricker A.R. et al., Mutation research, Carcinogenic N-nitrosamines in the diet: occurrence, formation, mechanisms and carcinogenic potential, 1991, Vol.259, №3, p.277-289.

88. Wasserman A. The nitrites nitrosamines situation. Food England, 1978, v.50, p.110-116.

89. Watts, B. M. 1954. Oxidative rancidity and discoloration in meats. Food Res 5:1-52.

90. Wieland K.P., Wieland B., Gotz F., A promoter-screening plasmid and xylose-inducible, glucose-repressible expression vectors for Staphylococcus carnosus.Gene. 1995 May 26;158(l):91-6.

91. Wogan M.J., Juedes G.N., Peroxynitrite-induced mutation spectra of pSP189 following replication in bacteria and in human cells. Mutat Res. 1996 Jan 17;349(1):51-61.

92. Woods L.F.J., J.M. Wood, P.A. Gibbs, The involvement of nitric oxide in the inhibition of the phosphoroclastic system in Clostridium sporogenes by sodium nitrite, J. Gen. Microbiol. 125 (1981) 399-406.

93. Woods L.F.J., J.M. Wood, A note on the effect of nitrite inhibition on the metabolism of Clostridium botulinum, J. Appl. Bacteriol. 52 (1982) 109-110.

94. Zumft W.G., Cell Biology and Molecular Basis of denitrification, Microbiology and molecular biology review, 1997, Vol.61, №4, p.533-616.

95. Всероссийская Коллекция Промышленных Микроорганизмов1. ФГУПГосНИИГенетика

96. И Росс*», Мота, 117545,1-ый Дороижй проезд, 1,«ГУПГоеНИИГвиета ВКПМ: ft [phone]; фис: (09S) 3151210; Эл. почп: vfcpmggenetRcs.ru;8953 . 16 .06.061. СПРАВКА

97. Всероссийская Коллекция Промышленных Микроорганизмов

98. ВКПМ), ФГУП ГосНИИгенетика приняла на национальное патентное депонирование 10 декабря 2004г.культуру Staphylococcus camosus SPHC-108

99. Область применения ;антагонист бактерий группы кишечной палочки, сальмонеллы, протеи.

100. Депозитор: Московский Государственный Университет прикладной биотехнологии (МГУ 1 Lb)

101. КОЛЛЕКЦИОННЫЙ НОМЕР ВКПМ В-8953

102. Всероссийская Коллекция Промышленных Микроорганизмов1. ФГУП Го с НИ И Генетика

103. О России, Моим, 117545,1-ыи Дорожный проезд, 1, и ГУПГосНИИ Генетта ВКГ1М; Я (095} 3(51210; фмс: [phone]; Эт. почта; vtpmg&ewtta.iu;1. S518 . 10.11.061. СПРАВКА

104. Всероссийская Коллекция Промышленных Микроорганизмов

105. ВКПМ), ФГУП ГосНИИгенетика приняла на национальное патентное депонирование 9 ноября 2006г.культуру Staphylococcus carnosus LIA-96

106. Область применения штамма: обладает антагонистической активностью по отношению к бактериям кишечной группы, сальмонеллы, протеи. Ароматообразуюший, денитрифицирующий

107. Депозитор: Московский Государственный Университет прикладной биотехнологии (МГУПБ)

108. КОЛЛЕКЦИОННЫЙ НОМЕР ВКПМ В-9518