Разработка биотехнологического метода обработки меховой овчины тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат технических наук Перелыгина, Лилия Сергеевна

• Перелыгина, Лилия Сергеевна
• кандидат технических наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат технических наук Перелыгина, Лилия Сергеевна

Введение Стр.

Глава 1. Создание новых препаратов на основе прокариотических 9 организмов

1.1. Влияние органического вещества на абиотическую компоненту окружающей среды

1.2. Выделение и применение в промышленности 15 микроорганизмов деструкторов

1.3. Анализ биотехнологических процессов в кожевенно-меховом 29 производстве

Глава 2. Организация экспериментов и методы исследования

2.1. Объекты исследования и методика проведения эксперимента

2.2. Методы исследования

Глава 3. Экспериментальная часть

3.1 О возможности использования Бак-концентрата для 47 подготовительных процессов мехового производства

3.1.1.Изучение морфолого-физиологических свойств микроорганизмов, выделенных из сточных вод после процесса обезжиривания

3.2.Влияние и изучение свойств культуры Amphibacillus sp

3.2.1.Адаптация выделенной культуры Amphibacillus sp на 61 синтетических средах

3.2.2.Изучение деструкции жировых веществ выделенной 72 культурой Amphibacillus sp

3.3. Условия культивирования и их влияние на активность 80 ферментов продуцируемых культурой Amphibacillus sp

3.3.1. Изучение влияния внешних факторов на изменение 85 концентрации белка, продуцируемого культурой Amphibacillus sp

3.4.Разработка схем получения биомассы и проведения 91 биотехнологических методов подготовительных процессов при обработке меховой овчины

3.4.1.Изучение возможности проведения биотехнологического 97 процесса обезжиривания меховой овчины с использованием бактериальной суспензии

3.5 Оценка качества готового полуфабриката

3.6. Анализ качественного состояния сточных вод

Глава 4. Технико-экономическое обоснование разработанной биотехнологической методики

4.1. Разработка стоимости бактериальной суспензии

4.1.2. Подбор необходимого оборудования

4.2. Расчет расхода химических материалов 112 Выводы 116 Список использованных источников 118 Приложение 1 127 Приложение 2 128 Приложение 3 129 Приложение

Список сокращений

СПАВ - Синтетические поверхностно-активные вещества АПАВ - Анионные поверхностно-активные вещества НПАВ - Неионогенные поверхностно-активные вещества БиоПАВ- Биологические поверхностно-активные вещества БАК-концентрат - Бактериальный концентрат Бак-суспензия - Бактериальная суспензия

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка биотехнологического метода обработки меховой овчины»

Актуальность работы. В последнее время, можно отметить существенный прогресс в решении наиболее сложных вопросов технологии кожи и меха, позволяющих приблизить существующие процессы переработки к «экологически чистым».

Предметом повышенного внимания технологов являются подготовительные процессы, на которых образуется основная масса загрязнений, поступающих на очистные сооружения. При этом необходимо учитывать большую продолжительность жидкостных обработок и их решающее влияние на качество готовой продукции. Однако, на большинстве предприятий, занимающихся переработкой овчин и пушно-мехового сырья, очистные сооружения либо отсутствуют, либо несовершенны, и не могут соответствовать установленным стандартам качества вод без серьезного их обновления. Таким образом, меховые предприятия должны выпускать не только конкурентноспособную продукцию, но и обеспечить экологическую безопасность окружающей среды от возможных отрицательных последствий. Все это ведет к тому, что руководители предприятий стремятся внедрять технологии, которые позволяют получать полуфабрикат с высокими показателями качества и параметрами, соответствующими ГОСТу, выработанными с минимальными затратами труда, химматериалов, времени и воздействием на окружающую среду.

В связи с этим становится актуальным совершенствование технологических процессов переработки меховой овчины, учитывая при этом физико-механические, химические свойства предъявляемые к готовой продукции, но и предполагаемый уровень технического воздействия, оказываемый в последствии на окружающую среду, в частности на нативные водные объекты. При невозможности решения поставленных целей традиционными методами, было предложено использовать биотехнологический метод, основанный на использовании культур микроорганизмов. Общая тенденция предлагаемой технологии - это замена или существенное снижение количества вредных химических материалов в рабочих ваннах: синтетические поверхностно-активные вещества (СПАВ), формалина, карбоната натрия.

Поэтому поставленная задача по разработке бактериальной суспензии содержащей микроорганизмы, продуцирующие ферменты с липолитическими свойствами, актуальна для мехового производства. Вследствие чего целесообразно выделение и адаптация микробных продуцентов способных деструктировать жировые вещества в присутствии СПАВ. Однако СПАВ отрицательно воздействует на сложившийся биоценоз нативных водных объектов. В связи с этим необходимо снижение расхода СПАВ в подготовительных процессах мехового производства.

Целью настоящей работы являлось:

Разработка биотехнологического метода проведения подготовительных процессов переработки овчинно-шубного сырья и снижение уровня токсического загрязнения сточных вод, образующихся после проведения подготовительных процессов.

Задачи:

1. Выделить и изучить возможность использования прокариотических организмов со специфическими свойствами в процессе отмоки и обезжиривания меховой овчины.

2. Выделить микроорганизмы способные расщеплять жировые вещества в присутствии СПАВ «Превоцелл W-OF-7».

3. Подбор оптимальных условий культивирования прокариотических организмов со специфическими свойствами.

4. Разработать методику получения маточного раствора.

5. Изучить влияние биотехнологического метода обработки меховой овчины на физико-механические и химические свойства полуфабриката и проанализировать качественное состояние образующихся сточных вод.

Научная новизна.

При выполнении диссертационной работы получены следующие результаты:

1. Выделены и проведена селективная адаптация микроорганизмов, способных деградировать жировые вещества, в присутствии СПАВ «Превоцелл W-OF-7». i

2. Изучена способность выделенных организмов использовать СПАВ в качестве источника углерода.

3. Подобраны и разработаны условия культивирования выделенного прокариотического организма, способного деградировать жировые вещества, в присутствии СПАВ.

4. Разработана схема получения культуральной жидкости, содержащей культуру рода Amphibacillus sp и продуцирующей ею экзофермент.

5. Проведены подготовительные процессы переработки меховой овчины с использованием культуральной жидкости, позволяющей сохранить качество готовой продукции, при снижении уровня техногенного воздействия на окружающую среду.

Практическая ценность.

На основе экспериментальных исследований выделен и отобран микробный продуцент, способный утилизировать как жировые вещества (шерстный жир, сульфатированный рыбий жир) в присутствии СПАВ, так и сам

СПАВ.

Разработан микробиологический метод проведения подготовительных процессов (отмоки и обезжиривания) меховой овчины.

3 3

Достигнуто снижение концентрации СПАВ с 8 г/дм до 1 г/дм и позволяет заменить высокотоксичные компоненты на менее токсичные.

Апробация технологии была проведена на базе опытного производства УНПК «ЭКОМ ».

По результатам эксперимента, данные работы вошли в грант «Молодые ученые ВГТУ», 2004 год.

Апробация работы. Результаты исследований были представлены на следующих конференциях: 7-ая Международная Пущинская школа-конференция «Биология наука - XXI века» (Пущино, 2003г.); 8-ая Международная Пущинская школа - конференция «Биология наука - XXI века» (Пущино, 2004г); 6-ая Международная научная конференция «Экология Южной Сибири и сопредельных территорий» (Абакан, 2003 г); 7-ая Международная научная конференция «Экология Южной Сибири и сопредельных территорий» (Абакан, 2004 г); 6-ая Межрегиональная научно-практическая конференция «Развитие меховой промышленности России» (Москва, 2004г); Научно - практическая конференция «Молодые ученые Сибири» (Улан-Удэ, 2003 г); Всероссийская internet- конференция «Проблемы экологии в современном мире» (Тамбов, 2003 г); Труды 4-ой Международной конференции молодых ученых и студентов «Актуальнбые проблемы современной науки» (Самара, 2003г); Межрегиональная научно-техническая конференция «Молодежь Сибири - Наука России» (Красноярск, 2004г) и на конференциях преподавателей, научных сотрудников и аспирантов ВосточноСибирского государственного технологического университета (Улан-Удэ, 2004г).

Теоретические и экспериментальные результаты исследования обсуждались на научных семинарах кафедр «Биотехнология» и «Технология кожи, меха и товароведения непродовольственных товаров» ВСГТУ в 20032004 гг.

Апробация разработанной технологии была проведена в производственных условиях опытного производства УНГЖ «ЭКОМ» ВСГТУ.

Публикации. По результатам выполненных исследований опубликовано 12 печатных работ.

Выражаю глубокую благодарность за оказанную помощь и поддержку при выполнении работы кандидату технических наук, доценту Шалбуеву Дмитрию Валерьевичу и профессору, доктору биологических наук Цыренову Владимиру Жигжитовичу.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Перелыгина, Лилия Сергеевна

Выводы

1. Изучены и описаны морфологические особенности, физиологические и культуральные свойства выделенных микроорганизмов из сточных вод после процесса обезжиривания. На основании проведенной селективной адаптации, выделен микробный продуцент способный, деструктировать жировые вещества в присутствии СПАВ. Определена его родовая принадлежность - Amphibacillus sp.

2. Показано, что культура Amphibacillus sp способна вовлекать в конструктивный и энергетический обмен, жировые вещества различной химической природы: модифицированный - сульфатированный рыбий жир и природный - свиной жир, шерстный жир.

3. Показано, что культура Amphibacillus sp относится к СПАВ толерантным культурам, способных продуцировать экзоферменты в присутствии данных ингредиентов.

4. Изучено влияние активной реакции среды на свойство культуры Amphibacillus sp. Показано, что экзоферменты продуцируемые в нейтральной среде обладают максимальной липолитической активностью 77,00 ед/г и минимальной протеолитической активностью 9,00 ед/г, при продолжительности культивирования 24 часа, и температуре (37±0,5)°С с механическим воздействием 250 об/мин.

5. Разработана принципиальная технологическая схема получения культуральной жидкости, основанная на применении культуры Amphibacillus sp и синтетической среды, включающей сульфатированный рыбий жир, СПАВ и минеральные соли.

6. Разработана экологически чистая технология, основанная на использовании маточных растворов культуральной жидкости для процессов отмоки и обезжиривания меховой овчины. Данная технология исключает использование карбоната натрия и формальдегида, а также уменьшает расход

3 3

СПАВ с 8 г/дм до 1 г/дм , что позволяет снизить уровень токсического загрязнения сточных вод.

7. Разработаны составы для проведения процессов отмоки и обезжиривания, подобраны условия проведения подготовительных процессов мехового производства.

8. Установлено, что экобиотехнологический метод проведения подготовительных процессов переработки меховой овчины позволяет снизить уровень токсического загрязнения сточных вод.

Заключение

Рисунок 1 - Схема проведения эксперимента

Для проведения экспериментальных исследований на всех этапах работы использовали: бурятскую полутонкорунную меховую овчину, СПАВ неионогенный Превоцелл W-OF-7, жировые вещества различной химической природы, препарат Байкал ЭМ-1 (на начальном этапе исследования):

1. Меховая овчина полутонкорунная - шерстный покров полутонкорунных овчин на основной площади густой, однородный, i штапельного или штапельно-косичного строения, со средней или крупной извитостью. Площадь овчин должна быть не менее 24 дм .

2. Шерстный жир - представляет собой смесь эфиров высших жирных кислот с одноатомными спиртами: холестерином, изохолестерином, оксихолестерином и др. В виде эфирных соединений в нем содержится от 43 до 52% трудно омыляемых веществ и 10-15% стеаринов. В состав шерстного жира входят следующие жирные кислоты: ланопальмитиновая, стеариновая, пальмитиновая, олеиновая, а также небольшое количество уксусной, масляной и церитиновой кислот. По физическим свойствам шерстный жир представляет собой мягкую жироподобную массу, плавящуюся при температуре около Зо С.

3. Сульфатированный рыбий жир - продукт сульфатирования жидкой фракции рыбьего жира, густая жидкость от коричневого до темно-коричневого цвета (ТУ 6-01-868). Получают обработкой ворвани серной кислотой с последующей промывкой и нейтрализацией. Гарантийный срок хранения 6 месяцев со дня изготовления. Применяется в качестве осн эмульгирующих жиров при составлении смесей для жирования кож всех в эвных идов.

4. Свиной технический жир - мазеобразная масса от белого до темно-коричневого цвета. Содержание нутряного жира-сырца составляет в среднем 12-13% к живой массе животного. Чистого жира в свином сале содержимся от 90 до 98%, плотность при 15°С 915-938 кг/дм3,. Получают вытапливанием, центрифугированием или прессованием. Применяют в производстве мыла.

5. Превоцелл WOF- 7. Представляет собой продукт оксиэтилирования, технических жирных спиртов. По внешнему виду «Превоцелл W-OjF- 7» воскообразная масса белого цвета, растворяется при температуре 40-45°С. Продукт устойчив к воздействию жесткой воды, кислот и щелочей. Превоцелл WOF-7 обладает хорошей смачивающей способностью.

6. Препарат «Байкал ЭМ-1» - представляет собой желто-коричневую жидкость с кефирно-силосным запахом. Кислотность ЭМ-1 не ниже 3,5 г/дм". В ЭМ-препарат входит 80 штаммов полезных микробов и продуктов их жизнедеятельности. Собранные микроорганизмы включают как аэробные так и анаэробные разновидности. ЭМ-1 содержит молочно-кцслые, фотосинтетические, азотсодержащие бактерии, дрожжевые грибки, фер(менты, аминокислоты, нуклеиновые кислоты.

На начальном этапе для решения первой задачи в лабораторных условиях был выполнен ряд экспериментов.

Для приготовления маточного раствора из препарата Байкал ЭМ-1, в емкость объемом 3 дм3 вносили 3 см3 препарата (1:1 ООО) с добавлением ягодного сиропа на основе войлочной вишни в количестве 30 см для процесса брожения. Полученный раствор выдерживали в герметично закрытой емкости при температуре (25±0,5)°С, в течение 7 суток без механического воздействия.

Для дальнейших исследований были разработаны 9 типов бактериальных суспензий, где в качестве источника углерода присутствовал, шерстный жир с концентрацией от 1 до 3 г/дм3, СПАВ неионогенный и маточный раствор с

3 3 расходом от 1 до 3 см /дм . Также провели процессы отмоки и обезжиривания на основе маточного раствора.

Культивирование составов проводили в течение 24 часов, при температуре (37 ±0,5)°С, переменным механическим воздействием на «Shaker type 357", частота колебания 150 оборотов в минуту, амплитуда 7, по 2 Часа в сутки. Выходными параметрами являлись: рН бактериальной суспензии, кислотность, оптическая плотность среды. Измерение выходных параметров проводили через 0; 48; 96; 144; 192; 240; 264; 336; 384; 432; 504 часа. По истечении времени культивирования были отобраны 4 типа бактериальных суспензий с максимальным значением оптической плотности. Данные бак-суспензии использовались для проведения отмочно-обезжиривающих процессов обработки меховой овчины.

Для проведения подготовительных процессов были отобранные методом асимметрической бахромы образцы меховой овчины размером 10x10 см пресно-сухого метода консервирования. Процесс отмоки проводили при температуре 25-30°С, ЖК (жидкостный коэффициент) =10, продолжительность 12-16 часов при постоянном механическом воздействии, которое осуществлялось на встряхивателе «Shaker Туре 357» с частотой колебаний 200 об/мин, амплитудой 7.

Процесс обезжиривания проводили при температуре (40±2)°С при постоянном механическом воздействии на встряхивателе «Shaker Туре 357» с частотой колебаний 100 об/мин, амплитудой 7 в течение 45 мин.

В качестве контрольного варианта использовали образцы меховой овчины, обработанные по типовой методике (1988 г.) представленной в таблице 1.

Список литературы диссертационного исследования кандидат технических наук Перелыгина, Лилия Сергеевна, 2004 год

1. Слащин Ю.А, Микроорганизмы на службе у человечества // Дачный сезон, 2001, №7, с. 2-3.

2. Егоров Н.С. Метаболизм микроорганизмов. М.: МГУ,1986.

3. Асонов Н.Р. Микробиология. М.: Колос,1997.-352 с.

4. Родин В.Е., Слизкин А.Г., Мирошников В.В. // Биотехнологические ресурсы Тихого океана. М: ВНИРО, 1986. с. 86-94.

5. Безбородов A.M. Биотехнология продуктов микробного синтеза. М.: Агропромиздат, 1991. 240с.

6. Купина Н.М., Слуцкая Т.Н., Калиниченко Т.П.// Изв. ТИНРО. 1983. Т. 108. С. 90-97.

7. Каверзнева Е.Д.// Прикл. Биохимия и микробиология. 1971. Т.7. №2. С. 225-228.

8. Карасевич Ю.Н., Зайцев Г.М. Утилизация 4- хлорбензойной и 2,4-дихлорбензойной кислот смешанной культурой микроорганизмов // Микробиология.-1984.-Т.53.-Вып. 3- С. 374-380.

9. Bennet С. Control of microbial problrms and corrosion in closed system // Pap. Technol. and Ind. 1985.-V. 26. -N.7. - P. 331-335.

10. Tobin R.S., Scott C.C.// Water Res.- 1988. V.10.- P. 529-535.1.. Morgan P., Watkinson R.J.// Crit. Rev. Biotechnol. -1989. -V. 8- P. 305-333.

11. Ганиткевич Я.В. // Биотехнология. 1998. Т. 4. №5. С. 575-583.

12. Diamant R.M.E. (Pitman). The prevetion,1989.

13. Рапорт И.А. Химические мутагены в селекции и защите природы.-Вестн. АН СССР, 1983, №11, с.59-67.

14. Ребиндер П. А. Поверхностно-активные вещества. Минск.: Наука, 1990.-306с.

15. Судариков С.А. Промышленность и экология. Киев.:Наукова думка. 1981.-116с.

16. Cardim C.G.,Calelani D., Sortini C. Treccaniv. La degradazion mocrofica dei detergenti di sintesi // Ann. microfica end inzimal. 1966. -16. -№ 416.

17. Bird J.A., Cain R.B. Microbial degradation of the cytoplasmic membrane of bacillus subtilis by sodium dodecylsylphate // Eur. J. Biockem. 1967. -2. - №4. -P. 454-459.

18. Микробиологическая очистка вод от поверхностно-активных веществ./ Ставская С.С., Удод В.М., Таранова JI.A. и др. Киев.: Наук, думка,1988.- 181 с.

19. Патент RU 2115629 С 1 С 12 N1/20, С 02 F 3/34. Консорциум штаммов микроорганизмов деструкторов для очистки почв, почвогрунтов, от нефтепродуктов и остаточной замазученности./ Голодяева Г.П., Старовойт Т.А./ 96119717/13 Опубл. 20.07.098. Бюл. № 20.

20. Мицкевич Е.В. и др. Микробные деструкторы некоторых Хлорорганических соединений./ Мицкевич Е.В., Мицкевич И.П., Перелыгина В.В.// Прикладная Биохимия и Микробиология. 2000, Т.36,№6. С. 642-646.

21. Lovely D.R., Philips E.J. // Appl. Environ. Microbiol.- 1987. № 53. - P. 2623-2641.

22. Lovely D.R., Philips E.J. // Appl. Environ. Microbiol.- 1986- № 51. P. 683-689.

23. McCarthy A.J., Broda P.// J. Gen. Microb.- 1984.- V.130.- P. 277-285.

24. Moore S., Stein W. H. // J. Biol. Chem. 1981.- V. 192.- № 2. - P. 663671.

25. Hoyler R. // Biol. Technol. V.9(l 1). - P. 1034.

26. Perle M., Kimchie S., Sheif G. // Water Res.- 1995.- № 29. P. 15491554.

27. Hanaki K., Matsuo Т., Nagase M. // Biotech. Bioeng. 1988.- № 23.- P. 1591-1610.

28. Dolfrng J., Mulder J. // Appl. Environ. Microbiol.- 1989. № 49. - P. 1142-1145.

29. BarthaR.//Microb.Ecol.- 1986- V. l.-P. 155-172.31 .Fedorak P.M., Westlake D.W. // Can. J. Microbiol. 1988. - V. 27.- P. 432443.

30. Ставская C.C. Биологическое разрушение ПАВ. Киев.: Наукова Думка, 1991.-113 с.

31. Ставська С.С., Таранова JI.A. Бшопчный розклад анюнних детергентов. BicH. АН урср, 1985, № 9, с. 87-93.

32. Елисеев С.А., Кучер Р.В. ПАВ и биотехнология. Киев.: Наукова Думка, 1991.-113 с.

33. Методы общей микробиологии / Под редакцией Герхардта Ф.И. и др. -М.: Мир, 1984. т.З. 264с.

34. Удод В.М. и др. Микроорганизмы деструкторы ряда неионногенных ПАВ/ Удод В.М., Подорван Н.И., Венгжен Г.С.// Микробиология. 1983, Т.52, Вып.З, с. 370-377.

35. Патент 0270805 ЕПВ (ЕР), МКИ* С 12N 1/20, С 02 F 3/34, В 09В 5/00. Микробиологический способ и препараты разложения углеводородов / Р.А. Vadenberg Опубл. 06.05.88.

36. Патент RU 2174496 С 2 С 12 N1/26, С 02 F 3/34. Биопрепарат Родер для очистки почв, почвогрунтов от нефти и нефтепродуктов./ Мурыгина В.П., Войшвилло Н.Е., Калюжный С.В./ 99110890/13 Опубл. 31.05.2001. Бюл. № 28.

37. Градова и др. Биотехнологические способы очистки почв, загрязненных синтетическими моющими средствами./ Градова Н.Б., Кожевин П.А., Рабинович H.JL, Корчмару С .С.// Биотехнология. 1996. № 11. С. 46-50.

38. А.с. 1158258 А. МКИ СССР. Способ рекультивации нефтезагрязненных почв/ Исмайлов Н.М. (СССР). Опубл. 30.05.85.

39. Милерр Дж. Эксперименты в молекулярной генетике. М.: Мир, 1976.440 с.

40. Мурзанов Б.Г., Битеева М.Б. Биотехнология очистки нефтезагрязненных территорий. Обзорная информация. -М.: НИИСЭНТИ, 1992. Вып. 3, с.36.

41. Патент RU 2166542 С 2 С 12 N1/14, С 02 F 3/34. Штамм Actinomyces sp. 1-96 А, усваивающий нефть и продукты ее переработки/ Чекасина Е.В., Егоров И.В., Иванова Л.А., Тихомирова О.И./.- 99114353/13. Опубл. 10.05.2001.

42. А.с. 1184852. МКИ. Способ очистки сточных вод от СПАВ/ Думанский Л.В. (СССР). Опубл. 15.09.84.

43. Ротмистров М.Н., Ставская С.С. Разрушение алкилсульфатов бактериями // Микробиология, 1987, т. 47, № 2. с. 338-341.

44. Wachi Y., Yanagi М., Katsura Н. Decomposition of surface active agents by bacteria siolated from deonazed water. J. Soc. Cosmet. Chem.,- 1980- Vol 31,— №2, pp. 67-81.

45. A.c. № 1232649. Использование консорциума бактерий для очистки сточных вод./ Удод В.М. (СССР). Опубл. 14.05.84.

46. Патент SU 1592330 А 1 С 12 N 1/20 С 02 F 3/34. Консорциум штаммов микроорганизмов деструкторов для очистки сточных вод от провецелла и мочевины/ Рой А.А., Муравьев В.Р., Тимошенко М.Н./. 4427574/31-13. Опубл. 15.09.90. Бюл. № 34.

47. Семенов A.M. и др. Лабораторные тесты для оптимизации интродукции в почву микроорганизмов деструкторов нефти / Семенов A.M., Куличевская И.С., Халимов Э.М., Гузев B.C. // Прикладная биохимия и микробиология, 19998, т.34, № 5, С. 220-224.

48. Neu T.R., Poralla К.// Lett. Appl. Microbiol. 1997. - V.25- № 2.- P. 91-94.

49. Bergeys Manual of systimatic bacteriology. Baltimore; London: Williams; Wilkins- 1984-1986. 1599 p.

50. Cooper D.G. Goldenberg B. G. // Appl. Environ. Microbiol. 1987 - V. 53.- № 2.- P. 224-229.

51. Desai J.D.//J.Sci. Ind. Res.- 1987.- V.46.- №.10.- P. 440-449.

52. Gutnick D.L., Minas W. // Biochem. Soc. Trans. 1987.- V. 15.- № 6.- P. 22-35.

53. Hommel R., Kleber H.-P. // Chem. Geselschaft. DDR. 1989. Bd. 36.- №1. S. 2-7.

54. Pat. UK. 1986. № 2172898 A.

55. Zhang G.,Miller R.M. // Appl.Envirion.Microbiol. 1995.- V. 61.- №6.-P. 1420-1425.

56. Patel R.M., Desai A.J. // Appl.Envirion.Microbiol. 1990. - V. 32- №5. -P.521-525.

57. Yakimov M.M., Timmis K.N., Wray V., Fredrickson H.L. // Apl. Envir. Microbiol. 1995. -V. 61. -№ 5. - P. 1706-1713.

58. Arino S., Marchal R., Vandecasteel J.-P.// J.Appl. Microbiol.- 1998.- V. 84. № 5.- P. 769-776.

59. Турковская O.B., Дмитриева T.B., Муратова А.Ю.// Прикладная Биохимия и микробиология. 2001. Т. 37 №1. С. 80-85.

60. Ito.Y., Saito Т.// Bull. Jap. Soc. Sci. fish.- 1983.- V. 29.- № 10. P. 942947.

61. Echardt T.// Plasmid.- 1978. V. I. - №4. - P. 885-889.

62. Yoshihara K., Atamatsu I., Kamishima H. // Kami Pa Gikyoshi. 1985. V. 39. № 7 - P. 681-690.66. http:// www.bioplaneta.ru67. http:// www.kstu.ru

63. Карасевич Ю.И. Основы селекции микроорганизмов, утилизирующих синтетические органические соединения. М.: Наука, 1982. - 144с.

64. А.с. 1131901 МКИ С 02 F 3/34 Способ биологической очистки сточных вод от неионогенных ПАВ Анаэробными микроорганизмами/ Беляев В.А., Гвоздяк П.И., Удод В.М. (СССР). Опбл. 23.02.89.

65. А.с. 835970 МКИ С 02 F 3/34 Способ биохимической очистки сточных вод от соединений шестивалентного хрома / Серпокрылов Н.С., Жуков И.М. (СССР). Опубл. 15.12.85.

66. А.с. 854029 МКИ С 12 N 15/00 Штамм Pseudomonas ALCALIGENES № И, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ДЕГРАДАЦИИ ФОРМАЛЬДЕГИДА/ Грирорьева М.Н., Бородулина О.В., Борисова С.М. (СССР) Опубл. 15.01.88.

67. А.с. 1226841 МКИ С 02 3/34 Способ биохимической очистки сточных вод от этилендиамина./ Ильичев С.Н., Малицкая Я.Л., Салькова А.А. (СССР). Опубл. 07.12.86.

68. Савельева О.В.и др. Анаэробное сообщество, разлагающее 2-аминобейзойную кислоту/ Савельева О.В., Котова И.Б., Нетрусов А.И.// РЖ Биотехнология, 2000, №5. 93с.

69. So Chi Ming, Youhg L.Y. Isolation and characterization of a sulfate-reducing bacterium that anaerobically degrades alkanes./ Appl. And Envitron. Microbiol. -1999-65-№7-P. 2969-2976.

70. Рохвард О.Д. Ферменты в меховом производстве. М.: Легкая индустрий, 1977.-224с.

71. Чурмис Т.К., Ужкурская А.П. Химия протеолитических ферментов. -Вюлнюс, 1983.- 96 с.

72. Шестакова И.С. и др. Ферменты в кожевенном и меховом производстве / Шестакова И.С, Миронова Т.Ф., Моисеева Л.В. М.: Легпромиздат, 1990. -128 с.

73. Бабкина В.Г. и др. Биотехнология микробных ферментов. Бабкина В.Г., Петрова И.С. М.: Наука и техника ,1969. - 204с.

74. Ерохина Л.И. Материалы симпозиума по химии протеолитических ферментов. Вюлнюс, 1983. -133с.

75. Нецепляев С.В., Панкратов А.Я. Лабораторный практикум по микробиологии пищевых продуктов животного происхождения. М.: Агропромиздат, 1990. - 223 с.

76. Ласков Ю.М. и др. Очистки сточных вод предприятий кожевенной и меховой промышленности / Ласков Ю.М., Федоровская Т.Г., Жмаков Г.Н. М.: Легкая и пищевая промышленность, 1984.-166 с.

77. Жмаков Г.Н. Очистка сточных вод меховой промышленности предприятий Болгарии // Кожевенно-обувная промышленность, 1977, № 4, с. 51-54.

78. Левенко Т.И. ПАВ в кожевенной и меховой промышленности. М.: Химия, 1974. - 154с.

79. Симинов Е.А. идр. Очистка сточных вод и сокращение водопотребления в меховой промышленности / Симонов Е.А., Пурим Я.А., Королькова Е.А. // Кожевенно-обувная промышленность, 1982, № 2, с. 115-120.

80. Улусой Э. Современная технология обработки овчины // Кожевенно-обувная промышленность. -1991. № 4. - С. 7-9.

81. Brigman G., Kuhn R. Gesundheits.- Ing. 1989. Be. 80, H.4, s. 115-120.

82. Плешков Б.П. Практикум по биохимии растений. Изд. 2-е, доп. П 38 и перераб. М., Колос, 1976.

83. Иоффе Б.В. и др. Физические методы определения строения органических соединений/ Иоффе Б.В., Костиков P.P., Разин В.В. М.: Высшая школа, 1984.-336с.

84. Лерина И.В., Паденко А.И. Лабораторные работы по микробиологии. -М.: Экономика, 1986.

85. Нецепляев С.В., Панкратов А.Я. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии. М.: МГУ, 1986.

86. Методы обще бактериологии пер. с анг./ под ред. Герхордт Ф. и др. М.: Мир, 1983. Т.2- С.536.

87. Методика выполнения измерений рН в водных потенциометрическим методом: ПНД Ф 14. 1:2:3:4.121-97.- М.: ГУАК Госкомэкологии России,1997.-7с.

88. Головтеева А.А. и др. Лабораторный практикум по химии и технологии кожи и меха / Головтеева А.А., Куциди Д.А., Санкин Л.Б. М.: Легкая и пищевая промышленность, 1987. - 312 с.

89. Грачева А.А. и др. Лабораторный практикум по технологии ферментных препаратов/ Грачева И.М., Грачев Ю.П., Мосичев М.С. М.: Легкая и пищевая промышленность, 1982. - 240 с.

90. Шторосберг А.Д. Практическая химия белка/ Ред. А. Дарбре. М.: Мир, 1989. С. 180-196.

91. Лабораторный практикум по микробиологии/ Арутонян Н.С., Янова Л.И., Аришева Е.А. и др.- 2-е изд., перераб. и доп.- М.: Агропромиздат, 1991. -160 с.

92. Плещков Б.П. Практикум по биохимии растений. Изд. 2-е, доп. П 38 и перераб. М., Колос, 1976.-246с.

93. Лабораторный практикум по технологии ферментных препаратов/ Грачева И.М., Грачев Ю.П., Мосичев М.С. и др.- М.: Легкая и пищевая промышленность, 1982.- 240 с.

94. Шкурки меховые и овчина шубная выделанные. Методы определения содержания несвязанных жировых веществ: ГОСТ 26029-84.- Введ. 01.07.85.-М., 1985.-21с.

95. Лурье Ю.Ю. Аналитическая химия промышленных сточных вод.- М.: Химия, 1984.- 448 с.

96. Брагинский Л.П. Некоторые принципы классификации пресноводных экосистем по уровням токсической загрязненности// Гидробиологический журнал, 1985, т.21, №6, с. 65-74.

97. Шалбуев Д.В. Изучение возможности снижения уровня техногенного воздействия при выполнении процесса обезжиривания меховой овчины.:

98. Автореферат на соискание ученой степени кандидата технических наук.-Красноярск: 1999.

99. Определитель бактерий Берджи в 2-х томах. 9-е изд.- М.: Мир, 1997.

100. Буззубов Н.А. Химия жиров. Учебник для средних специальных учебных заведений. М., Пищепромиздат, 1962.-307с.

101. Голубев В.Н. Пищевая биотехнология: Учебное пособие для пищевой специальности вузов./ В.Н. Голубев, И.Н. Жиганов.- М.: ДеЛи принт, 2001.- 122 с.

102. Жилина Т.Н. и др. Новые алкалофильные и факультативно-анаэробные сахаролитические бациллы из озера Магади/ Жилина Т.Н., Гарноав Е.С., Заварзин Г.А.// Микробиология, 2001, т. 70, №6, с. 825-837.

103. Есина Г.Ф., Санкин Л.Б. Отделка меха: Учеб. Пособие для вузов.- М., Легпромбытиздат, 1994. -208 с.