Разработка и экспериментально-клиническое изучение двухфазной питательной среды для выделения гемокультуры тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.07, кандидат медицинских наук Горелова, Виктория Геннадьевна

• Горелова, Виктория Геннадьевна
• кандидат медицинских наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Горелова, Виктория Геннадьевна

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. ЭТИОЛОГИЧЕСКАЯ СТРУКТУРА БАКТЕРИЕМИИ И СЕПСИСА И МЕТОДЫ ИХ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ

1.1. Особенности современной этиологической структуры бактериемии и сепсиса

1.2. Современные методы выделения гемокультуры

1.3. Питательные среды в лабораторной диагностике бактериемии и сепсиса СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. МАТЕРИАЛЫ

2.2. МЕТОДЫ.

3. КОНСТРУИРОВАНИЕ ДВУХФАЗНОЙ ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЫ ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ ГЕМОКУЛЬТУРЫ

3.1. Экспериментальное обоснование состава жидкой питательной среды обогащения гемокультуры (жидкая фаза)

3.1.1. Подбор источников азотистого питания

3.1.2. Изучение влияния различных стимуляторов роста на накопление микроорганизмов

3.1.3. Обеспечение энергетических потребностей микробов и подбор сорбентов для продуктов их метаболизма.

3.1.4. Изучение влияния различных антикоагулянтов и инактиваторов бактерицидных субстанций крови на рост тест-штаммов

3.1.5. Определение оптимальной буферной системы среды обогащения

3.1.6. Изучение чувствительности жидкой среды обогащения и скорости роста тест штаммов

3.1.7. Изучение показателей эффективности накопления тест -штаммов в жидкой среде обогащения

3.1.8. Изучение качества разработанной жидкой среды обогащения в модельных опытах

3.2. Разработка плотной питательной среды для выделения гемокультуры (твердая фаза)

3.3. Определение оптимального соотношения жидкой и твердой фаз в двухфазной среде

3.4. Определение величины посевной дозы тест-пггаммов для двухфазной среды

4. РАЗРАБОТКА ПРОМЫШЛЕННОЙ ТЕХНОЛОГИИ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ДВУХФАЗНОЙ СРЕДЫ ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ ГЕМОКУЛЬТУРЫ

5. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНО-КЛИНИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ ДВУХФАЗНОЙ ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЫ ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ ГЕМОКУЛЬТУРЫ

5.1. Изучение биологических свойств двухфазной питательной среды в модельных опытах

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка и экспериментально-клиническое изучение двухфазной питательной среды для выделения гемокультуры»

Бактериемия и сепсис продолжают оставаться одной из актуальных проблем современной медицины в силу неуклонной тенденции к росту количества больных и стабильно высокой летальности даже в самых авторитетных отечественных и зарубежных клиниках. Летальность от сепсиса занимает 13-ое место среди всех причин смертности (Бондаренко A.JI. с соавт., 2001 г., Бодман К.Ф. с соавт., 2004 г., Покровский В.И., Поздеев O.K., 1999 г., Smego R.A. с соавт., 1999 г., Смирнов И.В., 2004 г., Ющук Н.Д., 1990 г.).

Высокая летальность при бактериемии и сепсисе в значительной мере связана с изменением этиологической структуры сепсиса и преобладанием в настоящее время полирезистентных к антибиотикам возбудителей, что в определенной степени объясняет недостаточную эффективность антибактериальной терапии и более высокую, по данным ряда исследователей смертность от сепсиса в сравнении с доантибиотическим периодом (Генчиков JI.A. с соавт., 1986 г., Прямухина Н.С. с соавт, 1996 г., Рафиев Х.К., Саттаров С.С., 2001 г., Руднов В.А., 2000 г., Finkelstein R. с соавт., 2000 г., Dubost J.J. с соавт.2002 г.).

Исходя из этого, к актуальным задачам здравоохранения также относятся поиски путей снижения заболеваемости и летальности населения от сепсиса и создание средств для проведения эффективной диагностики.

Раннее обнаружение микроба-возбудителя в сочетании с оптимальной антибактериальной терапией позволяет кардинально улучшить результаты лечения и значительно снизить летальность (Котлярова А.Н., 2003 г.).

В связи с этим не ослабевает интерес ученых к проблеме бактериологической диагностики и лечения бактериемии и сепсиса, а также организации эффективной противосептической службы (Гельфанд Б.Д., Руднов В.А. и др., 2004 г.).

В 80-х годах прошлого столетия возникла новая клиническая дисциплина - сепсисология, так как было констатировано, что «сепсис перешагнул туберкулез; есть фтизиатрия, должна быть и сепсисология». Для решения проблем сепсисологии была создана научная и лечебная база повышения квалификации врачей и профессорско-преподавательского состава по всем вопросам, касающимся диагностики и лечения бактериемии и сепсиса (Гуревич П.С., 1984 г., Бочоришвили В.Г., Долидзе Н.Г., 1986 г.).

Известно, что в постановке диагноза и расшифровке этиологической структуры бактериемии и сепсиса ведущую роль играют лабораторные исследования.

Кровь является одним из наиболее распространенных образцов клинического материала, исследуемого в бактериологических лабораториях. Обнаружение микробов в крови, будучи одним из наиболее ответственных и трудных микробиологических исследований, расценивается как решающий диагностический критерий, так как точный диагноз, а в дальнейшем и эффективные терапевтические мероприятия, могут быть определены только при положительной гемокультуре (Покровский В.И., Поздеев O.K., 1999 г., Ребенок Ж.А., 2001 г., Самсыгина Г.А., 2003 г., Семина H.A. с соавт., 2001 г.).

Микробиологические исследования крови требуют обеспечения лабораторной службы страны стандартными высокоэффективными питательными средами. Однако исследователи сообщают о плохой оснащенности лабораторий питательными средами для посевов крови, что увеличивает срок постановки диагноза (Волкова И.В., 2001 г., Семина H.A.,2001 г.).

Отечественная промышленность производит значительное количество сухих питательных сред широкого ассортимента, стандартных по своим качественным показателям. Однако для выделения гемокультуры выпускалась всего одна среда - в ФГУП «Аллерген» г. Ставрополь. Это среда узкогоцелевого назначения, только для выделения гемокультуры стрептококка при подозрении на стрептококковую инфекцию.

В то же время известно, что современная этиологическая структура бактериемии и сепсиса чрезвычайно разнообразна и представлена широким спектром грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов (Бондаренко А.Л. с соавт., 2001 г., Брусина Е.Б., 2001 г., Зайцев A.A., 2003 г., Ковалева И.С., 2000 г.,Котлярова А.Н., 2003 г., Меркушев Н.В., 2003 г., Федоровский В.В., Афанасова Л.Н., 2003 г., Бодман К-Ф., 2004 г.). Поэтому одной среды для работы с гемокультурой недостаточно. В настоящее время в связи с отсутствием коммерческих питательных сред для выделения гемокультуры практические лаборатории пользуются средами лабораторного приготовления, которые, как известно, трудоемки и нестандартны, так как изготовляются в различных лабораториях с использованием разных ингредиентов, по разным рецептурам, не проходят тестирование с контрольными штаммами, и поэтому не могут обеспечить сопоставимых данных по результатам исследований.tБолее того, по литературным данным, отечественные среды лабораторного изготовления имеют ряд недостатков, к которым относят образование сгустка фибрина при посеве крови в питательную среду, отсутствие в средах инактиваторов бактерицидных субстанций крови, узкий перечень выделяемых микроорганизмов, длительные сроки инкубации посевов (от 3 до 5 суток, а нередко и более того), низкий процент высеваемости гемокультур (от 5 до 20 %, реже около 30 %) (Бадиков В.Д.с соавт., 1998 г., Кулагин П.В. с соавт., 2001 г., Багирова Н.С., Дмитриева Н.В., 2002 г., Бодман К-Ф. с соавт., 2004 г.). Очевидно, по этим причинам в методических рекомендациях по диагностике и терапии сепсиса рекомендовано исключить использование сред лабораторного приготовления, заменив их средами во флаконах промышленного производства (Гельфанд Б.Р. с соавт., 2004 г.)Зарубежные фирмы для выделения гемокультуры выпускают жидкие питательные среды и двухфазные системы во флаконах в готовом к употреблению виде (фирмы «01£со», «Ыо-Мепеих», «Охо1ё» и др.). Эти препараты сложны по составу, содержат сочетание специальных пептонов, набор витаминов, антикоагулянты, инактиваторы бактерицидных свойств крови, сложные буферные системы. Питательных сред, аналогичных по назначению и составу, отечественная промышленность не выпускает.

В связи с вышеизложенным, целью настоящих исследований явилась разработка и экспериментально-клиническое изучение двухфазной питательной среды для выделения гемокультуры.

Для достижения указанной цели в работе были поставлены и решены следующие задачи:— разработать рецептуру жидкой питательной среды обогащения для гемокультуры с учетом физиологических потребностей основных клинически значимых возбудителей бактериемии и сепсиса (жидкая фаза);— определить в жидкой питательной среде обогащения чувствительность, скорость роста и накопительный эффект микроорганизмов;— разработать оптимальный состав плотной питательной среды для использования её в качестве твёрдой фазы при конструировании двухфазной среды;— изучить чувствительность твердой фазы и скорость роста тест-штаммов на ней;— разработать экспериментально-производственную технологию серийного выпуска двухфазной питательной среды для выделения гемокультуры;— определить целевые биологические свойства разработанной двухфазной среды в модельных опытах;— изучить биологические свойства двухфазной питательной среды для выделения гемокультуры с использованием клинического материала;— предложить схему бактериологического исследования крови с использованием двухфазной питательной среды для выделения гемокультуры.

Научная новизна.

Научно обоснован и экспериментально апробирован состав новой среды обогащения для гемокультур. Разработанная среда обеспечивала высокую скорость роста, а также накопление при минимальных концентрациях клинически значимых возбудителей бактериемии и сепсиса. Получено положительное решение по заявке № 2003119514/13 (020615) о выдаче патента на среду обогащения для выделения гемокультур.

На основе сконструированной среды обогащения впервые создана двухфазная питательная среда, увеличивающая высеваемость микроорганизмов в 2 раза при ускорении роста гемокультур на 18-20 ч. Получено положительное решение по заявке № 2003137242/13 (039884) о выдаче патента на двухфазную среду для микробиологического исследования крови.

Практическая значимость.

Впервые в России разработана и апробирована на производстве предприятия НПО «Питательные среды» ФГУП НПО «Микроген» МЗ и СР РФ двухфазная питательная среда для выделения гемокультуры.

Внедрение среды в практику позволит обеспечить лабораторную службу страны стандартными препаратами для бактериологического исследования крови и будет способствовать снижению межлабораторных вариаций результатов исследований, сокращению времени проведения анализа и установления диагноза при подозрении на бактериемию и сепсис.

Заключение диссертации по теме «Микробиология», Горелова, Виктория Геннадьевна

ВЫВОДЫ

1. На основе изучения физиологических потребностей возбудителей бактериемии и сепсиса разработана жидкая среда обогащения гемокультуры, состоящая из смеси панкреатических гидролизатов каспийской кильки и казеина в соотношении 1:1, экстракта кормовых дрожжей, глюкозы, парааминобензойной кислоты, агара микробиологического, цитрата натрия и трис-буфера.

2. Показана зависимость эффективности накопления высокотребовательных микроорганизмов (S.pyogenes Dickl и N.meningitidis 637) от содержания глюкозы в среде обогащения. Оптимальный накопительный эффект достигается при внесении в среду глюкозы в количестве 10 г/л.

3. Жидкая среда обогащения обладает высокой чувствительностью и ускоряет рост гемокультур на 18-20 часов. Показатель эффективности накопления клинически значимых возбудителей бактериемии и сепсиса превосходит среду лабораторного приготовления в 1,5-3 раза в зависимости от вида микроорганизма.

4. На основе жидкой среды обогащения экспериментально обоснована и впервые разработана промышленная технология получения готовой к употреблению двухфазной питательной среды для выделения гемокультуры.

5. Созданная двухфазная питательная среда для выделения гемокультуры стандартна, превосходит контрольную по чувствительности при минимальных посевных дозах микроорганизмов, что позволяет выделить гемокультуру с исходной низкой напряженностью бактериемии.

6. Испытания с клиническими образцами экспериментально-производственной двухфазной среды для выделения гемокультуры показали ее преимущества перед средой лабораторного приготовления как по срокам выделения, так и по проценту высеваемости широкого спектра клинически значимых микроорганизмов.

7. Предложенная схема бактериологического исследования крови с использованием двухфазной среды позволяет ускорить лабораторную диагностику бактериемии и сепсиса с сокращением сроков установления диагноза на 18-20 часов, а также своевременно провести эффективную антибактериальную терапию.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Горелова, Виктория Геннадьевна, 2005 год

1. Акимкин В.Г., Покровский В.И. Нозокомиальный сальмонеллез взрослых. -М., 2002.-130 с.

2. Багирова Н.С., Дмитриева Н.В. Бактериемии у больных гемобластозами // Пробл. Гематологии и переливания крови.-2002.-№4.- С. 21-33.

3. Бадиков В .Д., Журавлева Л.Е., Болехан В.Н., Тихонов Ю.Г., Мазайшвили К.В. Совершенствование методов микробиологического исследования крови у больных с гнойно-септическими инфекциями // Клиническая лабораторная диагностика. -1998.-№7-С. 17-19.

4. Баронец Н.Г. Витамин "К" как стимулятор роста микроорганизмов //Микробиология.- 2003.-С.104-105.

5. Бендас Л.Г., Раскин Б.М., Баранова А.К. Стимулятор бактериального роста из кормовых дрожжей // Лаб.дело.- 1974.-№1.-С. 43-45.

6. Блинкин С.А. Методы ускоренной бактериологической диагностики кишечных инфекций. М., 1963.-С.64-72.

7. Блинкова Л.П., Горобец О.Б., Мельникова В.А. Физиологические и биохимические свойства микроорганизмов // Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований / Под ред. A.C. Лабинской, Л.П. Блинковой, A.C. Ещиной.- М., 2004.

8. Бодман К.-Ф., Лоренц Дж., Бауэр Т.Т., Эвиг С., Траутман М., Фогель Ф. Нозокомиальная пневмония: профилактика, диагностика, лечение // Клин, микробиология и антимикробная химиотерапия.-2004.- Т.6.- №1.- С. 92102.

9. Бондарев Л.С., Заполотная A.A. // Врач.дело.-1990-№6.-С. 221-223.

10. Бондаренко В.М.,Лопушанская O.B. /Комплексный экспресс-метод идентификации гемокультур энтеробактерий //Матер. Всесоюзной научно-практической конференции: "Проблемы клинической микробиологии в неинфекционной клинике". М., 1983.-С. 133-134.

11. Бондаренко В.М., Марченко В.Г., ,Лопушанская О.В., Руднев И.А., Яблочков А.Л. Этиологическая структура токсико-септических состояний // Эпидемиология и микробиология раневых инфекций: Сб. науч. тр.- М., 1986,- С.31-33.

12. Бондаренко А.Л., Красных А.Н., Попонин М.В., Широнина Н.Л. Случай сепсиса клепсиеллезной этиологии // Ж-л эпидемиологии и инфекционные болезни.- 2001.-№ 4.-С. 35-36.

13. Бочирошвили В.Г., Долидзе Н.Г. Организация противосепсисной службы в Грузии. //В сб. Эпидемиология и микробиология раневых инфекций. -М.Д986.-С.15-17.

14. Брико Н.И., Ещина A.C., Ряпис Л.А. Лабораторная диагностика стрептококковых инфекций. М.,2000.-63 с.

15. Брусина Е.Б. Эволюция эпидемиологического процесса госпитальных гнойно-септических инфекций в хирургии // Ж-л эпидемиология и инфекционные болезни.-2001.-№ 2.- С.10-12.

16. Вайнтруб С.Н., Каюмова М.К. Выделение изменённых форм стафилококка при септических состояниях у детей // Матер. Всесоюзной научно-практической конференции "Проблемы клинической микробиологии в неинфекционной клинике".- M., 1983.-С.114.

17. Васильева Е.И., Фесечко Л.В., Марченкова A.B., Файнштейн Е.Ш. Клиническая значимость микробиологических исследований крови //Актуальные вопросы клиники железно-дорожной медицины: Опыт диагностики и лечения больных ЦКБ МПС России.- М.Д997.-С. 130-131.

18. Виноградова И.Н., Котова О.Г., Третьякова Л.И. Использование физико-химических показателей в качестве теста однородности казеина приизготовлении питательных сред // Ж-л микробиологии, эпидемиологии и иммунологии.-1966.-№8.-С. 144-145.

19. Вишневская С.М. Изучение питательных сред для выявления бактериемии у хирургических больных // Ж-л лаб. дело.-1983 .-№ 11.-С.58-60.

20. Волкова И.В. Диагностика инфекционного эндокардита // Клинич. антибиотикотерапия.-2001.-№5-Т.6.-С.51 -53.

21. Гельфанд Б.Р., Руднов В.А., Проценко Д.Н., Гельфанд Е.Б., Звягин А.А., Ярошецкий А.И., Романовский Ю.Я. Сепсис: определение, диагностическая концепция, патогенез и интенсивная терапия // Инфекции и антимикробная терапия.- №2- Т.6.- С.46 60.

22. Генчиков JI.A. Здоровье населения и среда обитания //Ежемесячный информ. бюллетень Рос. Респ. информ. аналит. центра Госсанэпиднадзора России.- 1994.-№1.-С. 14-17.

23. Генчиков JI.A., Володина Н.И., Обухова Т.М. Эпидемиологические аспекты сепсиса // Эпидемиология и микробиология раневых инфекций: Сб. науч. тр.- М., 1986.-С.6-8.

24. Горобец О.Б., Блинкова Л.П., Батуро А.П. Влияние примесей в агарах на качество питательных сред // Клин. лаб. диагностика.-2001.-№11.-С. 34.

25. Грубер И.М., Мельникова В.А., Андреева О.А. Усовершенствование питательной среды для выделения бактерий.рода Haemophilus //Матер. 5-й Рос. конф. " Современные проблемы антимикробной химиотерапии".- М., 2003.-С. 16.

26. Грубер И.М., Мельникова В.А. Селективная питательная среда для бактерий родаНаеторЫ lus. // Клинич. лаб. диагн.- 2004.-№1.-С.50-52.

27. Гостев B.C. Биохимические основы медицинской бактериологии.-М.,1951.-С. 88-91.

28. Демешева М.И., Нечисляев В.А. Подбор и конструирование питательных сред для выращивания бифидобактерий // "Актуальные вопросы вакцинно сывороточного дела в XXI веке": Сб. науч. тр.-Пермь, 2003.-С. 290-293.

29. Дехнич А.В. и др. Эпидемиология антибиотикорезистентности нозокомиальных штаммов Staphylococcus aureus в России: результаты многоцентрового исследования //Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия.-2002.-Т.4.-№4.-С.325-337.

30. Егорова Н.С. Метаболизм микроорганизмов. М., 1986.-С. 86-106.

31. Емельянова О.С. Микробиология туляремии. М.Д960.-С. 51-95.

32. Жемчугов В.Е. Механизмы сохранения и распространения патогенных микроорганизмов // Эпидемиология и инфекционные болезни.- 2004.-№ 6.-С. 54-58.

33. Зайцев А.А., Карпов О.И., Сидоренко С.В. Стафилококки и ванкомицин: тенденции противостояния // Антибиотики и химиотерапия.- 2003.-№6.- С. 20-26.

34. Зубков М.Н., Гугуцидзе Е.Н., Чегин В.М., Овсянкин В.М., Кулешов И.Ю. Использование микробиологических и иммунологических методов для экспресс -диагностики сепсиса // Ж-л микробиологии.- 1987.-№3.- С. 120.

35. Зуева Л.П. Основание стратегии борьбы с госпитальными инфекциями и пути ее реализации // Эпидемиология и инфекционные болезни.- 2000.- № 6.-С.10-13.

36. Иосебашвили Т., Чиквиладзе Д. Роль энтеробактерий в развитии гнойно-воспалительных процессов: Сб. науч. тр. Тбилисского госмедуниверситета.-2000.-№36.-196-200.

37. Кизеветтер И.В. Переработка морских водорослей и других промысловых водных растений. М., 1967.- 416 с.

38. Киселева Б.С., Красноголовец В.Н. Роль Klebsiella pneumoniae в этиологии бактериального сепсиса //Микробиология, эпидемиология и иммунология.-1983.-№2.-С. 20-25.

39. Кобахидзе-Ониани М.А., Жвания М.А. Основные принципы лечения неонатального сепсиса у недоношенных // Сб. тр. Тбилисского госмедуниверситета .-2003.-№4.-С. 49-52.

40. Ковалёва Е.П., Сёмина Н.А. Внутрибольничные инфекции в педиатрии // Эпидемиология и инфекционные болезни.- 2002.-№ 5.-С.4-6.

41. Королева И.С., Лыткина И.Н., Чистякова Г.Г., Свистунова Т.С., Быкова Р.Н. Эпидемиологические особенности носительства Haemophilus influenzae типа В // Эпидемиология инфекционных болезней.- 2000,- №3.-С.15-19.

42. Коршунова Г.С. Эпидемиологическая ситуация по внутрибольничным инфекциям в Российской федерации в 1997-2001 гг.// Эпидемиология и инфекционные болезни .- 2002.-№5.-С. 22-24.

43. Костюкова Н.Н. Этиологическая структура острых гнойных менингитов и методы их микробиологической диагностики // Клинич. лаб. диагн.-2001 .-№8.-С.25-32.

44. Котлярова А.Н. Оптимизация антибактериальной профилактики и терапии хирургического сепсиса у детей // Матер. 5-й Рос. конф. "Современные проблемы антимикробной химиотерапии М., 2003.- С. 55.

45. Котлярова А.Н. Оптимизация антибактериальной профилактики и терапии хирургического сепсиса у детей. // Матер. 5 Рос. конф. «Современные проблемы антимикробной химиотерапии». М.,-2003.-С. 55.

46. Коэн Д. Современные подходы к лечению сепсиса: есть ли новые надежды? //Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия.-2002.-Т.4-№4.-С.300-313.

47. Красильников А.П. Микробиологический словарь-справочник.-Мн.,1986.-С.42-43; 87-88.

48. Кулагин П.В., Савченко Р.П., Иванова B.C., Липовская А.Г., Кулагина И.Г. Диагностическая эффективность микробиологического анализа крови в условиях стационара клинической больницы // Клинич. лаб. диагн.-2001.-№11.-С.36 -37.

49. Лабинская A.C. Микробиология с техникой микробиологических исследований. М., 1978.-С. 351-352.

50. Лабораторная диагностика стрептококковых инфекций / Под ред. В.И. Покровского.- М., 2000.- С. 28-30.

51. Лазарева Е.Б., Мартынова В.А. Этиологическая структура лихорадочных состояний у гематологических больных по данным бактериологических исследований. М., 1983.-С.74-75.

52. Лихварь H.A., Горшанова E.H., Ряполова Р.Г., Швецова Е.А. Получение сухих казеиновых гидролизатов //Технология производства сухих диагностических питательных сред: Сб. науч. тр. Махачкала, 1974.- № 6.-С. 36-38.

53. Машковский М.Д., Бабаян Э.А., Обоймакова А.Н., Булаев В.М., Северцев В.А., Любимов Б.И., Соколов С.Д., Тенцова А.И. Государственная фармакопея СССР.- М., 1990.- С. 194-195.

54. Меджидов М.М. Справочник по микробиологическим питательным средам.-М.: Медицина, 2003.- 208 с.

55. Медицинская микробиология /Под ред. A.M. Королюк, В.Б. Сбойчаков.- 2 изд.- СПб: ЭЛБИ-СПб, 2002.-267 с.

56. Мельникова В.А., Скаженик В.Ю. Основы приготовления питательных сред / Под ред. A.C. Лабинской, Л.П.Блинковой, A.C. Ещиной // Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований.- M., 2004.-С. 104-118.

57. Меньшиков В.В. Лабораторная медицина мира начала XXI столетия (заметки с 18-го международного конгресса клинической химии и лабораторной медицины) //Клин. лаб.диагн.-2003.-№4.-С. 52-54.

58. Меньшиков В.В. Научно-практический симпозиум «Организация, менеджмент и экономика клинической лабораторной службы учреждений здравоохранения» // Клин. лаб. диагн.- 2004.- №3.-С. 50-52.

59. Меньшиков Д.Д., Каншин H.H., Пахомова Г.В., Смирнова C.B., Воленко A.B., Лазарева Е.Б. Профилактика и лечение внутрибольничных гнойно-септических инфекций //Эпидемиология и инфекционные болезни.-2000.-№5.-С.44-46.

60. Методические указания по применению унифицированных микробиологических (бактериологических) методов исследования вклинико-диагностических лабораториях: Приложение 1 к приказу МЗ СССР № 535 от 22 апреля 1985 г.

61. Методы общей бактериологии / Под ред. Ф. Герхардта и др.- М., 1983.-Т.1.- С. 364-366.

62. Миронов А.Ю., Савицкая К.И., Воробьёв A.A. Условно-патогенные микроорганизмы при гнойно-воспалительных заболеваниях лор-органов и менингитах // Микробиология.- 2001.-№ 2.-С.21-25.

63. Митрохин С.Д. Мупироцин: профилактика внутрибольничных инфекций, вызываемых золотистым стафилококком, и оздоровление госпитальной среды // Антибиотики и химиотерапия.- 2003.- Т. 48.-№ 9.-С. 13-19.

64. Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований /Под ред. A.C. Лабинской, Л.П. Блинковой, A.C. Ещиной.-М., 2004.- 533 с.

65. Омарова Э.Б., Меджидов М.М., Султанов 3.3 Способ получения стимулятора роста микроорганизмов из кормовых дрожжей. Пат. на изобретение № 2227158, БИМП, 2004, №11, Зч:516.

66. Османов С.К. Получение и экспериментальное изучение питательных сред с гидролизатами крови животных для микробиологической диагностики стрептококковых инфекций: Автореф. канд. дис., к.м.н.- М., 1982.

67. Основные методы лабораторных исследований в клинической бактериологии.- Женева, 1994.- С. 23-27.

68. Основные питательные среды производства Санофи Диагностике Пастер, применяемые в клинической бактериологии: Каталог.-1999.

69. Осокина Т.И., Астарханова Л.А. Сухие питательные среды для выделения и идентификации стрептококка // Международный конгресс «Ликвидация и элиминация инфекционных болезней прогресс и проблемы».- СПб, 2003.-175 с.

70. Покровский В.И. Проблемы внутрибольничных инфекций // Эпидемиология и инфекционные болезни.- 1996.-№ 2.- С. 4-9.

71. Покровский В.И., Поздеев O.K. Медицинская микробиология.- М.,1999,-С. 583-588.

72. Прямухина Н.С., Коршунова Г.С., Семина H.A., Тясто A.C. Здоровье населения и среда обитания // Ежемесячный информбюллетень Рос. Респ. информ. аналитического центра Госкомсанэпиднадзора России.- 1994.-№12.-С. 1-5.

73. Прямухина Н.С., Семина H.A., Коршунова Г.С., Морозова О.Т. Внутрибольничные инфекции новорожденных // Эпидемиология и инфекционные болезни.-1996.-№2.-С. 15-18.

74. Рафиев Х.К., Сатторов С.С. Этиологическая структура гнойно-воспалительных заболеваний в различных отделениях больниц Душанбе // Эпидемиология и инфекционный болезни.- 2001.-№5.-С. 13-15.

75. Ребенок Ж.А. Возможность диагностики септических заболеваний // Эпидемиология и инфекционные болезни.- 2001.-№2-С.47-50.

76. Руднов В.А. Современные принципы антибактериальной терапии сепсиса // Антибиотики и химиотерапия.- 2000.- Т. 45.-№ 7.- С. 3-5.

77. Руднов В.А. Сепсис. Эволюция представлений, необходимость унификации терминологии и критериев диагноза //Хирургия .-2000.-№4.-С. 36-40.

78. Руководство по микробиологии, клинике и эпидемиологии инфекционных болезней / Под ред. Н.Н.Жукова-Вережникова.- М.Д962.-Т.1.-С. 340-350.

79. Савицкая К.И., Сёмина H.A., Галкин В.В., Абаш Ю.Б. Значение лабораторных исследований в профилактике госпитальной инфекции // Эпидемиология и инфекционные болезни.-2001.-№2.- С. 16-21.

80. Савицкая К.И., Семина H.A., Галкин В.В. Клиническая микробиология: роль сотрудников лаборатории в контроле за госпитальной инфекцией // Эпидемиология и инфекционные болезни.- 2000.-№5.-С. 20-25.

81. Самсыгина Г.А. Антибактериальная терапия сепсиса у детей // Антибиотики и химиотерапия.- 2003.- Т. 48.-№ 8.- С. 17-27.

82. Семина H.A. Научные и организационные принципы профилактики внутрибольничных инфекций // Эпидемиология и инфекционные болезни.-2001.-№5.-С. 5-6.

83. Сёмина H.A., Вымола Ф., Красильников А.П., Влодавец В.В., Белокрысенко С.С. Роль лабораторных исследований в эпидемиологическом надзоре за гнойно-септическими инфекциями // Эпидемиология и микробиология раневых инфекций.- M., 1986.-С. 6-8.

84. Скала JI.3., Сидоренко C.B., Нехорошева А.Г., Резван С.П., Карп В.П. Практические аспекты современной клинической микробиологии. М., 1997.-С. 102-103.

85. Смирнов И.В. Возбудитель иерсиниоза и близкие к нему микроорганизмы //Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия.- 2004.-Т.6.-№1.-С. 10-21.

86. Смолянская А.З., Сакаян H.H., Дронова О.Н., Гриненко Г.И., Соколова В.И. Эпидемиологическое значение синегнойной палочки в онкологической клинике // Эпидемиология и микробиология раневых инфекций: Сб.науч.тр.-M., 1986.-С. 14-15.

87. Снелл Э. Основные бактериальные ростовые вещества // Физиология бактерий.-M., 1954.-С. 153-182.

88. Справочник по препаратам фирмы «Oxoid».- Изд.З-е.-С. 4-5.

89. Страчунский JI.C., Решедько Г.К., Рябкова E.J1. и др. Рекомендации по оптимизации антимикробной терапии нозокомиальных инфекций., вызванных грамотрицательными бактериями и интенсивной терапией

90. Пособие для врачей) //Клиническая и антимикробная химиотерапия.2002.-Т.4.-№4.-С.З 79-390.

91. Телишевская Л.Я. Белковые гидролизаты.- М., 2000 .- 295 с.

92. Федоров В.В., Куликова М.А. Бактериемия: клинико-бактериологические аспекты проблемы // Клин, лабораторная диагностика.- 1995.- №3.-С. 3-7

93. Федоровский В.В., Афанасова Л.Н. Анализ микрофлоры и результаты теста на госпитальный штамм в хирургическом стационаре // Матер. 5-й Рос. конф. "Современные проблемы антимикробной химиотерапии".- М.,2003.- С. 35.

94. ЮО.Ходоесевич Л.С., Крылова Л.Е., Шипанов И.Н., Воротынцев А.Н., Мочалова Л.Г., Кочетков Н.М. Случай сепсиса, вызванного Haemophilus Influenzae, осложненного абсцессом и разрывом миокарда // Эпидемиология и инфекционные болезни.- 2005.-№5.-С. 53-54

95. Черкасская P.C., Сёмина H.A., Дарбеева О.С., Мамонтова Т.Н. Характеристика условно-патогенных микроорганизмов возбудителей гнойных инфекций новорожденных // Эпидемиология и микробиология раневых инфекций: Сб. науч. тр.- М.,1986.- С. 27-29.

96. ЮЗ.Ющук Н.Д., Фролов В.М., Пересадин H.A. Клепсиеллезный сепсис //Советская медицина.- 1990.-№6.-С.79-83.

97. Abbot К.С., Agodoa L.Y. Etiology of bacterial septicemia in chronic dialysis patients in the United States //Clin.Nephrol.-2001.-56.-2-124-131.

98. Bibes В., Lion C., Rabaud C., May T. Infections a streptocoque du groupe В chez l'adulte:Etude clinique de 41 bacteriemies //Med. Et malad. Infec. — 2002.-32.-6.-294-298.

99. Castaneda M.R. A practikal method for rautine blood cultures in brucellosis //Proc. Sos.Exp. Biol .Med.,64,114-115. (1947).

100. Cohen Jonathan The immunopathogenesis of sepsis. // Nature (Gr. Brit.).-2002.-420.-6917.-885-891.

101. Cultura media manual, bio Merieux ,1994, 29. Гемолайн 2-х фазного действия.

102. Difco Laboratories. Product for Microbiology.- 1996/97.-86-87.

103. Fernandez G.M.,Ramos J.M.,Marrero J. et. all. Bacteremic pneumococcal promised patients without AIDSrThe impact of beta-lactam resistance on mortality // Int.J.Innfec. Diseasis.- 2003.-7,№1- 46-52.

104. Finkelstein R., Fusman R., Oren I., Kassis I., Yashman N. Clinical and epidemiologic significance of coagulase-negative staphylococci bacterimia in a tertiary cfre university Israeli hospital //Amer.J.Infec. Contr. 2002.-30.-1.-21-25.

105. Hall M.M.,Mueske C.A., Washington I.A. /Evaluation of a biphasis medium for blood cultures // Amer. Sos.Mikrobiol.,Los Angeles.Calif.- 1979.,311.

106. Hall M.M.,Mueske C.A. Waschington J.A. Evaluation of a biphasis medium for blood cultures //J.Clin.Mikrobiol.,10, 6773 -676 (1979).

107. Halmann M., Benedict M., Mager I. Natritional reguirements of Pasteurella tularensis for growth from small inocula // Jörn. General. Microbiol.- 1967.-vol.49.-3 .-451-460.

108. Hill J.M.,Dorn G.L.,Lemeshev Juri. Rapid detektion and quantitation of septicemia // Amer. J.Clin., Pathol., 1980, 73, №2, 305.

109. HiMedia Laboratories Limited, 2002.-28.

110. L hospital quirend malade Rossion Pierre // Sei. et. Vie. 1998.- 965.- 90-97.

111. Lisby Gorm, Brasholt Marie S., Teglbjerg Lars. Bacteremia and meningitides causet by a macrolidesensitive strain of streptococcus pneumoniae during treatment with azitromycin // Clin.Infec. Diseases.- 2001.-33.-3.-415-416.

112. Mackenzie A.R., Laing R., MacDonald A.G., Smith C.C. //Ann. Rheum Diseases.-1997.-56.,№7.-403-404.

113. Mackowiak P.,Prowne R., Southevn P., Smith I. Polimicrobial septsis: analisis of 184 cases using log linear models. "Abstrs^111 Annu.Meet. Amer.Sos.Microbiol. Los Angeles.Calif., 1979 , Washington,D.C.,1979, 13.

114. Macphail G.L.P., Taulor G.D., Buchanan-Chell M.,Ross C., Wilson S., Kureishi A. Epidemiology, treatment and outcome of candidemia : A five-year review at three Canadian hospitals // Mycoses.-2002.-45.-5-6.-141-145.

115. Matejcka F.,Spanik S.,Trupl I. Nosocomial bacteremia due to Klebsiella pneumoniae in cancer patients : Analisis of 49 episodes // Antiinfec.Drugs and Chemother.- 1998. 16 , №3-4. - 233-236.

116. Meynell J., Meynell E. Theory and Practice in Experimental Bacteriology, 2d ed, Cambridge, 1969.

117. Neuman Mark I., Harper Marvin B. Time to positivity of blood cultures ror children with Streptococcus pneumoniae bacteremia // Clin. Infec. Diseases.-2001.- 33.-8.-1224-1328.

118. Passaro D.I., Smith D.S., Hett E.C., Reingold A.L., Daily P., Van Beneden C.A., Vugia D.Y. Invasive group A streptococcfl infections in the San Francisco Bay area, 1989-1999. //Epidemiol. And Infec.- 2002.-129.-3.-471-478.

119. Pirt S. John. Principles of Microbe and cell cultivation // Blackwell Scientific publications Oxford London Edinburg Melbourn, 1975.

120. Prats G., Sanchez F. El hemocultivo en lostiempos de la reaccion en cadena de la polimerasa //Med. clin. 1997 - 108, №14 - p. 534 - 536.

121. Quality control of culture media. Difco laboratories. Detroit Michigan, USA, 1975.-40. 49.

122. Reid Karlene C., Cockerill Franklin R., Patel Robin. Clinikal and epidemiological features of Enterococcus casseliflavus flavescens and Enterococcus gallinarum bacteremia. A. report of 20 cases // Clin. Infec. Diseases.-2001.-32.-11.-1540-1546.

123. Rossion Pierre . L hopital qui rend malade // Sci.et. vie.-1998. №965 .- 90- 97.

124. Scribner Ronald K., Welch David F. / Isolator. Neutrolization of the inhibitory effect of sodium polyanetholesulfonate on Neisseria meningitidis in blood cultures Processed with the Du Pont Isolator System // J. Clin. Microbiol, 1984.-20.-1.-40-42.

125. Smego R.A., Frean J., Koornhof H.J. Yersiniosis: microbiological and clinicoepidemiological aspects of plaque and non-plaque Yersinia infections. //Eur.J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 1999.-18.-1-15.

126. Steig Torkil, Iohannesen Niels, Schnheyder Henrik C. Propensity of streptococcus pneumoniae for the aorta. Report of 3 cases // Scfiid. J. Infec. Diseases.-2001.-33.-10.-772-774.

127. Takala A.K., Eskola I., Peltola H., Makela P.H. // Pediat. Infect. Dis. -1989.-8.-297-302.

128. Tee Wee, Montgomery Janet, Dyall-Smith Michael. Bacteremia cfused by a Helicobacter pullarum like organism. // Clin. Infec. Diseases.-2001.-33.-10.-1789-1791.

129. Unal S., Masterton R., Goossens H. Bacteriemia in Europe Antimicrobial Susceptibility Data from the Mystic Surveillance programme. // International Joornal of antimicrobial agents. 2004; 23: 155- 163.

130. Vaqueiro Subirats Montserrat, Sampere Valero M., Font Creus Bernat at all. Bacteriemia pneumococica en pacientes mayors de 65 anos // Med. Clin.- 2001.-117.-7.-241-245.