Разработка и применение ПЦР-технологий для молекулярно-генетической диагностики герпесвирусов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.10, кандидат биологических наук Евсегнеева, Жанна Витальевна

  • Евсегнеева, Жанна Витальевна
  • кандидат биологических науккандидат биологических наук
  • 2012, МоскваМосква
  • Специальность ВАК РФ14.03.10
  • Количество страниц 118
Евсегнеева, Жанна Витальевна. Разработка и применение ПЦР-технологий для молекулярно-генетической диагностики герпесвирусов: дис. кандидат биологических наук: 14.03.10 - Клиническая лабораторная диагностика. Москва. 2012. 118 с.

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Евсегнеева, Жанна Витальевна

ИСПОЛЬЗОВАННЫЕ СОКРАЩЕНИЯ

ВВЕДЕНИЕ 7 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава 1. Характеристика герпесвирусов человека и основных клинических проявлений инфекции

1.1. Структура и организация вирусного генома

1.2. Репродукция вирусных частиц

1.3. Основные клинические формы герпесвирусных инфекций

1.4. Герпесвирусные инфекции в неонатологии и педиатрии

Глава 2. Методы лабораторной диагностики герпесвирусной инфекции

2.1. Электронная микроскопия

2.2. Цитологический метод

2.3. Серологические методы

2.3.1. Иммунофлюоресцентный метод

2.3.2. Иммуноферментный метод

2.4. Вирусологический метод

2.5. Молекулярно-биологические методы

2.5.1. Мультипраймерная ПЦР

2.5.2. ПЦР в режиме реального времени

2.5.3. ПЦР in situ

Рекомендованный список диссертаций по специальности «Клиническая лабораторная диагностика», 14.03.10 шифр ВАК

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка и применение ПЦР-технологий для молекулярно-генетической диагностики герпесвирусов»

Актуальность проблемы. Герпесвирусная инфекция (ГВИ) представлена группой ДНК-вирусов, широко распространенных в человеческой популяции. Наиболее существенное социальное и эпидемиологическое значение имеют вирусы простого герпеса 1 и 2-го типа (ВПГ 1 и ВПГ 2); цитомегаловирус (ЦМВ) и вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ). Герпесвирусная инфекция человека, как причина смертельных исходов при вирусных заболеваниях, занимает одно из главных мест [22,29,36,46]. В связи с ростом заболеваемости ГВИ репродуктивной части населения, многообразием клинических проявлений, в которых преобладают бессимптомные формы течения, определенными трудностями в диагностике и терапии Европейское региональное бюро ВОЗ включило ГВИ в группу болезней, которые определяют будущее инфекционной патологии [22].

Наибольшую угрозу для здоровья представляют герпетические нейроинфекции (летальность достигает 20%) [64,80,147,194], офтальмогерпес (почти у половины больных приводит к развитию катаракты или глаукомы) [72,133,196] и генитальный герпес (ГГ) [75,81,86,89,108,142]. Следует отметить и возможную роль вирусов герпеса в развитии неопластических процессов, неблагоприятное влияние на течение беременности и родов [74,91], патологию новорожденных и др. [7,17,44]. Первичное заражение беременных женщин ГВИ может приводить к неблагоприятным исходам беременности, внутриутробному инфицированию (ВУИ) плода и тяжелым осложнениям новорожденных вплоть до их гибели. В связи с разнообразием и неспецифичностью клинических проявлений, а также неоднозначностью протекания инфекционного процесса из-за особенностей иммунной системы новорожденных, лабораторная диагностика герпесвирусных инфекций представляет собой актуальную проблему.

Герпес новорожденных возникает в результате ВУИ преимущественно ВПГ 2 [95,120,122]. Заболевание протекает тяжело с распространенными поражениями кожи, слизистых оболочек полости рта, глаз, центральной нервной системы (ЦНС) и внутренних органов (печень, легкие) [66]. Цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ) широко распространена в человеческой популяции и, при первичном заражении беременных женщин может приводить к неблагоприятным исходам беременности [101,127]. Недоношенные новорожденные дети (ННД) с низкой массой тела представляют группу высокого риска по развитию герпесвирусной инфекции. Диагностика герпесвирусных инфекций у новорожденных детей (НД) часто представляет собой сложную задачу из-за отсутствия четко выраженной специфической клинической симптоматики и в связи с особенностями иммунной системы [99].

Возникновение сочетанных ГВИ, увеличение частоты появления штаммов с нетипичными клиническими проявлениями заставляет искать новые подходы для быстрой и дифференциальной диагностики. В настоящее время в медицинской практике для диагностики ГВИ применяются иммуноферментные методы, дифференциальное определение штаммов которыми невозможно, а реакция организма на внедрение вируса оценивается по уровню вырабатываемых антител к вирусу. Применяемые методы определения титров противогерпетических антител являются только косвенным свидетельством активности процесса и специфического иммунного ответа, в то время как для понимания этиологии, стадии и течения процесса врачи должны располагать сведениями о наличии или отсутствии самих герпесвирусов или их антигенов. Классически герпесвирусы (ГВ) обнаруживали культуральным методом, однако указанная методика требует специальных условий проведения и длительна по времени.

Поэтому в последние годы в клинической лабораторной диагностике всё большее внимание уделяется молекулярно-генетическим технологиям в выявлении ГВИ [192], в особенности полимеразной цепной реакции (ПЦР) и ее разновидностям: ПЦР в режиме реального времени (ПЦР РВ), мультипраймерной ПЦР (мПЦР), ПЦР с обратной транскрипцией (ПЦР ОТ), ПЦР in situ, методу NASBA (Nucleic Acids Sequence-Based Amplification), секвенированию нуклеиновых кислот; гибридизационному анализу и технологиям биочипов [5,13,21,48,52,61,97,165,166,185]. Наиболее широкое применение указанные подходы получили в современной медицине, особенно при диагностике инфекционных и наследственных заболеваний [1,21,52,168]. Генодиагностика становится составной частью современной лабораторной медицины. ПЦР-технологии позволяют оперативно провести прямое определение присутствия, оценки количества и локализации герпесвирусов в различных клинических образцах (слюна, кровь, моча, ткани и др.), высокоспецифичны и высокочувствительны, что важно для современной клинической медицины.

В практиктической работе неонатологи, педиаторы, акушеры-гинекологи и другие специалисты, анализируя различные клинические образцы от взрослых и детей, часто наблюдают смешанное инфицирование несколькими инфекционными агентами различной природы. Уникальные возможности для такого анализа представляет собой мультипраймерный ПЦР (мПЦР) [78,79,87,119,196]. Поэтому разработка отечественных наборов для мПЦР-анализа герпетической инфекции (в частности, ВПГ, ЦМВ и ЭБВ) в различных клинических образцах и их клиническая апробация представляет собой актуальную задачу.

Традиционные методы ПЦР дают качественную информацию о наличии инфекционного агента с чувствительностью не менее 103 - 104 геномэкв/мл. Для ряда инфекций и в частности мониторинга лечения необходима количественная оценка вирусной нагрузки: вирус иммунодефицита человека, вирусы гепатита и герпеса. Высокая инфицированность ННД ЦМВ ставит вопрос о своевременной диагностике ЦМВИ у беременных женщин и о вертикальной передаче вируса. Количественный анализ вирусоносительства необходим при оценке эффективности проводимой лекарственной терапии, в частности, беременных женщин, новорожденных и детей различных возрастных групп. Разработка и практическое применение современных генетических подходов в выявлении и количественной оценке содержания в различных биологических жидкостях (кровь, слюна, моча) таких важнейших вирусов, как ВПГ, ЦМВ и ЭБВ, даст возможность правильной и быстрой постановки диагноза и проведения мониторинга адекватной лекарственной терапии. В частности было показано, что содержание у беременных ЦМВ в количестве свыше 105 геномов на мл значительно увеличивает вероятность внутриутробного поражения плода вирусом

100]. К тяжелым поражениям плода, иногда с летальным исходом, приводит сочетанное заражение новорожденного ВПГ и ЦМВ [54,62,136,140,147,167]. Поэтому разработка и клиническая апробация набора реагентов ПЦР РВ для качественного и количественного определения ДНК ВПГ и ДНК ЦМВ представляется актуальной.

На клеточном и тканевом уровне информация о пространственном распределении выявляемых генетических элементов получается с использованием технологий нерадиоизотопного гибридизационного анализа (например, FISH на хромосомах) и ПЦР in situ. ПЦР in situ - информативный и точный метод, открывающий новые возможности в диагностике ГВИ, позволяющий оценить относительное количество внутриклеточной ДНК и тропность вируса к определённым тканям при изучении отпечатков органов, в частности у мёртворождённых детей, при патологоанатомических исследованиях [104,150].

Разработка и применение высокочувствительных и высокоспецифичных молекулярно-генетических методов в диагностике ГВИ даст возможность определить место и роль указанных подходов в общей системе клинической лабораторной диагностики, определить преимущества и недостатки по сравнению с традиционными методами исследования, возможность оперативной постановки точного диагноза, что чрезвычайно важно для неонатологии и педиатрии. Поэтому представляется актуальным применение и клиническая апробация разработанных диагностических подходов в педиатрической практике и неонатологии.

Целью работы явилась разработка и клиническая апробация молекулярно-генетических технологий для диагностики герпесвирусных инфекций и сравнительная оценка их возможностей с традиционными методами.

Задачи исследования.

1. Разработка и клиническая апробация набора реагентов мультипраймерной ПЦР для одновременного выявления ДНК вируса простого герпеса, цитомегаловируса и вируса Эпштейн-Барра в одной пробе.

2. Оптимизация компонентов реакции и клиническая апробация наборов реагентов для определения ДНК вируса простого герпеса и цитомегаловируса методами ПЦР in situ и ПЦР в режиме реального времени для оценки вирусной нагрузки.

3. Проведение сравнительного анализа возможностей и характеристик ПЦР технологий, иммуноферментного и быстрого культурального методов.

4. Оценка динамики изменения маркеров цитомегаловирусной инфекции у недоношенных новорожденных детей в течение первого года жизни, находящихся в отделениях реанимации и интенсивной терапии.

5. Поиск неинвазивного клинического материала для выявления внутриутробной цитомегаловирусной инфекции у недоношенных новорожденных детей.

Научная новизна.

1. Проведена разработка, оптимизация компонентов и условий проведения реакций для мультипраймерного ПЦР, ПЦР in situ и ПЦР в режиме реального времени для диагностики герпесвирусных инфекций и последующая клиническая апробация наборов.

2. Впервые разработан и практически использован алгоритм комплексного обследования недоношенных новорожденных детей с клиническими признаками внутриутробной инфекции на основании использования молекулярно-генетических и вирусологических методов для выявления герпесвирусной инфекции.

3. Проведен сравнительный анализ разработанных молекулярно-генетических методов с традиционными, включающими иммуноферментный анализ и вирусологическое исследование быстрым культуральным методом.

4. Показаны возможности количественной оценки вирусной нагрузки методом ПЦР в режиме реального времени.

5. Проведена апробация модифицированного метода ПЦР in situ для выявления ДНК ВПГ, ДНК ЦМВ и сравнительный анализ данной модификации с быстрым культуральным методом и стандартной ПЦР.

Практическая значимость.

1. Использование быстрых, высокочувствительных и высокоспецифичных ПЦР-технологий дает возможность оперативной постановки диагноза, выявления внутриклеточной локализации инфекционного агента и количественной оценки вирусной нагрузки, что особенно важно для неонатологической и педиатрической практики.

2. Лабораторный скрининг прямых маркеров герпесвирусных инфекций недоношенных новорожденных детей предпочтительнее проводить по моче, так как в ней вирусные частицы накапливаются в больших количествах, а получение биологического материала проводится неинвазивным способом.

3. Для постановки лабораторного диагноза внутриутробного инфицирования герпесвирусной инфекцией у недоношенных новорожденных детей и детей раннего возраста наиболее оптимальным является сочетание ПЦР и быстрого культурального методов. Серологические тесты применяются в качестве дополнительных для уточнения фазы течения заболевания.

4. Использование современных молекулярно-генетических технологий в диагностике герпесвирусных инфекций новорожденных в неонатальном периоде позволяет найти этиологическое объяснение причин врожденных дефектов и снизить смертность детей в раннем возрасте.

5. Внедрение в практику предложенного алгоритма лабораторной диагностики цитомегаловируса у недоношенных новорожденных детей позволит быстро установить диагноз и уменьшить количество осложнений.

Внедрение результатов исследования.

Полученные результаты используются в работе отделения реанимации и интенсивной терапии новорожденных ГБ № 8 и ДГКБ № 13 г. Москвы. Материалы диссертационной работы включены в курс лекций и практических занятий для студентов, клинических ординаторов и интернов кафедры клинической лабораторной диагностики ФУВ ГБОУ ВПО РНИМУ, кафедры неонатологии ФУВ ГБОУ ВПО РНИМУ, аспирантов и ординаторов кафедры кожных и венерических болезней РУДН.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Отечественный мультипраймерный набор для ПЦР-анализа с одновременным выявлением ДНК вирусов простого герпеса, Эпштейн-Барра и цитомегаловируса перспективен для проведения скрининговых обследований населения.

2. Метод ПЦР in situ по чувствительности не уступает стандартному ПЦР, а использование указанной технологии наиболее целесообразно для изучения патогенеза инфекции и установления внутриклеточной локализации вирусной ДНК.

3. Определение количества ДНК ВПГ и ДНК ЦМВ с использованием метода ПЦР в режиме реального времени позволяет проводить оценку вирусной нагрузки и осуществлять выбор адекватной лекарственной терапии.

4. Маркеры цитомегаловирусной инфекции у недоношенных новорожденных детей с сочетанной врожденной патологией выявляются достоверно чаще, чем у доношенных новорожденных. Проведение трехкратного вирусологического обследования на наличие цитомегаловирусной инфекции в разные сроки первого года жизни повышает эффективность диагностики.

5. Молекулярно-генетические, вирусологические и серологические методы диагностики герпесвирусных инфекций у недоношенных новорождённых детей рационально применять комплексно согласно разработанному алгоритму.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Похожие диссертационные работы по специальности «Клиническая лабораторная диагностика», 14.03.10 шифр ВАК

Заключение диссертации по теме «Клиническая лабораторная диагностика», Евсегнеева, Жанна Витальевна

ВЫВОДЫ:

Разработан и клинически апробирован мультипраймерный набор для одновременного определения ДНК вирусов простого герпеса, цитомегаловируса и вируса Эпштейн-Барра, который может быть использован для проведения скрининговых исследований.

2. Апробация оптимизированных наборов реагентов для определения ДНК вируса простого герпеса и цитомегаловируса методами ПЦР in situ и ПЦР в режиме реального времени показала эффективность указанных технологий для оценки локализации вирусов и вирусной нагрузки в различных клинических образцах.

3. Для выявления прямых маркеров вируса оптимально одновременное использование ПЦР и быстрого культурального метода, а серологические маркеры необходимы в качестве дополнительных тестов для определения стадии инфекционного процесса.

4. Исследование динамики появления прямых и серологических маркеров цитомегаловирусной инфекции у недоношенных новорожденных детей с клиническими признаками внутриутробной инфекции показало необходимость проведения трехкратного обследования в течение первого года жизни.

5. Предпочтительным неинвазивным клиническим материалом для диагностики внутриутробной цитомегаловирусной инфекции является моча, в которой вирус накапливается в больших количествах, чем в других биологических пробах.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ:

1. Для проведения екрининговых исследований оптимально использовать мультипраймерный набор для одновременного определения ДНК вирусов простого герпеса, цитомегаловируса и вируса Эпштейн-Барра, что ускорит проведение анализа и снизит его себестоимость.

2. Для диагностики внутриутробной герпесвирусной инфекции у недоношенных новорожденных детей рекомендуется применять одновременно быстрый культуральный метод и ПЦР.

3. Для выявления прямых маркеров герпесвирусов у новорожденных детей рационально использовать мочу, так как в ней вирус содержится чаще, накапливается в больших количествах, и биологический материал является неинвазивным.

4. Рекомендуется трехкратное обследование недоношенных детей с клиническими признаками внутриутробной инфекции на наличие цитомегаловируса: на первой неделе жизни, через 1-3 месяца и 4-7 месяцев после рождения из-за длительной персистенции вируса и возможной реактивации инфекции.

5.Показано проведение серологического обследования на наличие специфических ^М и антител с оценкой авидности ^в-антител, которая имеет прогностическое значение, так как присутствие низкоавидных антител класса к цитомегаловирусу сочетается с появлением прямых маркеров цитомегаловируса через 1-6 месяцев после рождения.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Евсегнеева, Жанна Витальевна, 2012 год

1. Адаскевич В.П. Заболевания, передаваемые половым путем. // 1997. Витебск. Издательство витебского медицинского института, 310 с.

2. Альбицкий В. Ю. Состояние здоровья детей дошкольного возраста, родившихся недоношенными.// Рос. педиатр, журнал. -1998.- № 4. С. 12-15

3. Асади С.М., Дегтярева A.B., Мухина Ю.Г., Володин H.H. и др. Внутриутробная ЦМВ инфекция и атрезия внепеченочных желчных протоков.// Генодиагностика инфекционных болезней -2007, Сборник трудов, т. 3, 357-359, М., 2007.

4. Бажора Ю.И., Кресюн В.И., Запорожан В.Н. и др. Молекулярно-генетические и биофизические методы исследования в медицине.// К.: Здоров'я, 1996. - с.206.

5. Баранов А. А., Альбицкий В. Ю., Волчина С. Я. Глубоконедоношенные дети как биоэтическая проблема.// Рос. педиат. журнал. 1999. - № 1. - С. 29-32

6. Баринский И.Ф., Шубладзе А.К., Каспаров A.A., Гребенюк В.Н. Герпес (этиология, диагностика, лечение). 1986. М. Медицина. 272 с.

7. Барычева Л. Ю., Орехов К. В.// Иммунология. 2004. - № 6. - С. 8-12

8. Безнощенко Г.Б., Долгих Т.И., Кривчик Г.В. Внутриутробные инфекции (вопросы диагностики и врачебной тактики).// Москва: Мед. книга, Н.Новгород, изд. НГМА, 2003.- 88с.: ил

9. Букринская А.Г., Жданов В.М. Молекулярные основы патогенности вирусов.// 1991. М., Медицина. 255 с.

10. Буштырев В.А., Лаура Н. В., Захарова Н. И. Оценка состояния здоровья недоношенных новорожденных с перинатальными инфекциями.// Рос. вестник перинатологии и педиатрии. 2006. - № 3. - С. 11-14

11. Введение в молекулярную медицину. Под ред. Пальцева М.А. 2004. М, Медицина, 496 с.

12. Ведяков A.M., Долгих М.С. Детекция ДНК цитомегаловируса в различном биологическом материале у больных с аллотрансплантатами органов методом полимеразной цепной реакции.// Клиническая лабораторная диагностика.-1998.-11.- с. 19-24

13. Вирусология в 3-х томах/Под ред. Б.Филдса, Д.Найпа. перев. С англ. -М.: Мир, 1989.

14. Власова М.А. Влияние бессимптомной генитальной герпетической инфекции на исход беременности и состояние здоровья новорожденного.//2000. Дисс. к.м.н. Владивосток.

15. Володин Н. Н. Неонатология: национальное руководство.// М.: Геотар-медиа, 2007. С. 848

16. Володин Н. Н., Дегтярев Д. Н., Ковтун И. Ю. и др. Перспективы использования метода ПЦР для ранней диагностики герпесвирусной инфекции у новорожденных детей.// генодиагностика в современной медицине (сборник тезисов) М. - 2000. - С. 197-198

17. Воронцова Ю.Н., Володин H.H., Дегтярев Д.Н. и др. Особенности клинических проявлений врожденной цитомегаловирусной инфекции у недоношенных новорожденных. Рос.вестн. перинатологии и педиатрии. 2004; 49 (2): 60-66.

18. Горбунова В.Н., Баранов B.C. Введение в молекулярную диагностику и генотерапию наследственных заболеваний. //1997, СПб., Специальная литература. 287 с.

19. Гранитов В.М. Герпетическая инфекция. // Новгород: изд. НГМД-2001.-С.88

20. Гриноу А., Дж. Осборн. Врожденные перинатальные и неонатальные инфекции.// Пер. с анг. М.: Медицина, 2000. - С. 288

21. Дегтярев Д.Н., Дегтярева М.В., Ковтун И.Ю., Шаламова J1.B. Принципы диагностики внутриутробных вирусных инфекций у новорожденных и тактика ведения детей группы риска. // Перинатология сегодня. 1997. - № 3. -С. 18-24

22. Дементьева Г. М. Профилактическая и превентивная неонатология. Низкая масса тела при рождении. Гипоксия плода и новорожденного: лекция для врачей. М., 1999. - С. 70

23. Дидковский H.A., Малашенкова И.К., Танасова А.Н. и другие. Герпес-вирусная инфекция: клиническое значение и принципы терапии. 2004, РМЖ, 12, №7, 459-465.

24. Дидковский H.A., Малашенкова И.К., Танасова А.Н. и другие. Патогенетические аспекты герпетической инфекции тяжелого течения. 2007, Бюллетень эксп. патологии и мед., 2, 76-81.

25. Дмитриев Г.А. Лабораторная диагностика бактериальных урогенитальных инфекций.// 2003. М., Медицинская книга, Н. Новгород: Издательство НГМА, 336 с.

26. Долгих Т. И. Лабораторная диагностика основа информационного обеспечения диагностического процесса при оппортунистических инфекциях (обзор литературы).// Клин. Лаб. Диагн. - 2008. - № 1. - С. 49-51

27. Долгих Т. И. Оценка эффективности лабораторных методов диагностики врожденной ЦМВИ.// Клиническая лабораторная диагностика -2000. -№ 11. -С. 35

28. Екимов А.Н., Шипулин Г.А., Бочкарев Е.Г. Рюмин Д.В. Новейшие технологии в генодиагностике: полимеразная цепная реакция в реальном времени (Real-Time PCR).

29. Ефимов Е. И. Диагностика и биокоррекция нарушений антиинфекционного гомеостаза в системе «мать-дитя».// Н. Новгород: Изд-во НГМА. 2004. - С. 376

30. Закина A.A. Патогенетические аспекты перинатальных герпесвирусных инфекций у детей. // Дисс. к.м.н. Санкт-Петербург, 2006.

31. Ивановская Т.Е., Гусман Б.С. Заболевания, обусловленные вирусами герпеса / Патологическая анатомия болезней плода и ребёнка: Руководство для врачей// Под ред. Т.Е.Ивановской, Л.В. Леоновой. -М. 1989. Т.2. С.266-271.

32. Исаков В.А., Борисова В.В., Исаков Д.В. Герпес: патогенез и лабораторная диагностика. Руководство для врачей. 1999. С-Петербург. Издательство «Лань», 192 с.

33. Климова P.P. и др. Получение и свойства моноклональных антител к вирусу герпеса 1 и 2 типа.// ЖМЭИ.- 1999. № 5. - С. 99-103.

34. Коломиец A.A., Вотяков В.И., Бикбулатов P.M. Генерализованная герпетическая инфекция: факты и концепция. Минск. 1992. 350 с.

35. Коломиец А.Г., Малевич Ю.К., Коломиец Н.Д. Многоликий герпес. Минск. 1988. 70 с.

36. Круглова А.И. Молекулярно-генетическоая идентификация и дифференциация герпесвирусов человека. // Дисс.к.б.н. М., 2004.

37. Кущ А. А., Федорова Н. Е., Климова Р. Р. Быстрый культуральный метод диагностики герпесвирусных инфекций.// Методические рекомендации №02.030-08, Роспотребнадзор. М. 2008. - С. 20

38. Кущ A.A., Хахалин J1.H. Клиника, лечение и лабораторная диагностика герпесвирусных заболеваний человека. Руководство для врачей. // М., ЗАО «НИАРМЕДИК ПЛЮС», 1998.- 46 с.

39. Леган М.В., Чернявский А.М., Мироненко С.П. и др. Исследование герпесвирусов в крови больных с сердечнососудистой патологией.// Клиническая лабораторная диагностика.-2003.- № 4.- с. 48-49.

40. Львов Н.Д. Вирусы герпеса человека 6,7 и 8 типов новые патогены семейства Herpesviridae//Bonpocbi вирусологии.-1999.-3 .-с. 105-109.

41. Львова И.И., Минаева Н.В. Возрастные особенности инфицированности и типичных клинических проявлений инфекций, вызванных вирусами простого герпеса и цитомегалии у детей. 2005, №3, 128-134.

42. Льюин Б. Гены. Под ред. Георгиева Г.П. 1987. М. Мир. 544 с.

43. Макарова Н.Е., Кущ A.A.,Иванова Л.А. и др. Получение моноклональных антител к сверхранним белкам цитомегаловируса человека и их применение для выявления инфицированных клеток. Вопр. вирусол. 1996; 41 (1): 28-32.

44. Марченко Л.А. Генитальный герпес. Новые клинические аспекты. Проблемы репродукции.-1996.- 4.- с. 29-33.

45. Никонов А. П., Асцатурова О. Р. Генитальный герпес и беременность.// Гинекология 2002. - Т. 4. - № 1. - С. 4-6

46. Нисевич Л. Л., Талалаев А. Г. Основные причины смерти новорожденных.// Руководство по педиатрии. Неонатология. Москва 2006.- С. 432-448

47. Нисевич Л.Л., Каск Л.Н., Адиева A.A., Кущ A.A. Перинатальные факторы риска инфицирования плода, патологии и смерти в перинатальном и младенческом возрасте. Вопр. акушерства, гинекологии и перинаталогии. 2007; 6(4): 13-17.

48. Павлюк A.C. Методы лабораторной диагностики заболеваний, вызванных вирусом простого герпеса.// Заболевания, передаваемые половым путем.- 1994.-3.- с. 3-7.

49. Полетаев А. В., Будыркина Т. С., Морозов С. Г. и др. Инфекция матери как причина патологии плода и новорожденного.// Аллергология и иммунология 2001. - Т. 2. - № 2. - С. 110-116

50. Протоколы диагностики, лечение и профилактики внутриутробной инфекции у новорожденных детей -М.:ГОУ ВУНМЦ МЗ РФ. 2001. - С. 96

51. Ребриков Д. В., Трофимов Д. Ю. ПЦР «в реальном времени»: подходы к анализу данных (обзор).// Прикладная биохимия и микробиология 2006. - Т. 42.-№5.-С. 520-528

52. Саики Р., Гиленстен У., Эрлих Г. Полимеразная цепная реакция. В кн. Анализ генома. Методы. Под ред. К.Дейвис. М. Мир. 1990. 176-190.

53. Серов В. Н. Сочетанная внутриутробная герпетическая и цитомегаловирусная инфекция и ее влияние на плод и новорожденного.// Материалы III съезда Российской ассоциации специалистов перинатальной медицины М.: ГОУ ВУНМЦ МЗ РФ 2000. - С. 76-77

54. Серов В. Н., Тютюнник В. Д., Зубков В. В. Перинатальные исходы у беременных с инфекционными заболеваниями и плацентарной недостаточностью.// Акушерство и гинекология. 2001. - № 1. - С. 16-21

55. Скоромец А. П. Инфекционные поражения нервной системы у новорожденных: Автореф. дис. доктора мед. наук С.Пб. - 2001. - С. 70

56. Сорокина М. Н., Скрипченко Н. В. Вирусные энцефалиты и менингиты у детей.// Москва 2004. - С. 424

57. Сухих Г.Т. Иммунология беременности. // М.: Изд. РАМН-2003. С.400

58. Федорова Н.Е., Меджидова М.Г., Воронцова О.Н. и др. Количественные лабораторные методы для диагностики цитомегаловирусной инфекции у недоношенных новорожденных детей.// Вопросы вирусологии. -2005.-№ 1.-С. 9-14

59. Цинзерлинг А. В., Мельникова В. Ф. Перинатальная инфекция: практическое руководство.// Практич. рук-во. СПб.: Эпби СПб. - 2002. - С. 352

60. Щербо С.Н. Разработка и применение гибридизационных и ПЦР технологий для молекулярного анализа геномов микроорганизмов.// 2005. Дисс. д.б.н., Москва

61. Andorsky D. J., Lund D. P., Lillehei C. W. Nutritional and other postoperative management of neonates with clinical outcomes.// J. Pediatr. 2001. -V. 139.-P. 27-33

62. Baumal C. R., Levin A. V., Read S. E.Cytomegalovirus retinitis in immunosuppressed children.// Am. J. Ophthalmol. 1999. - V. 127. - № 5. - P. 550558

63. Brown Z. A., Gardella C., Wald A., Morrow R. A., Corey L. Genital herpes complicating pregnancy.// Obstet Gynecol. 2005. - V. 106. - P. 845-856

64. Bruisten S. M., Cairo I., Fennema H., Pijl A., Buimer M., Peerbooms P. G. H. et al. Diagnosing genital ulcer disease in a clinic for sexually transmitted diseases in Amsterdam.// J. Clin. Microbiol. 2001. - V. 39. - P. 601-605

65. Buchman T.G., Simpson T., Nosal C., Roisman B,. Nahmias A.J. The structure of herpes simplex virus DNA and its application to molecular epidemiology. // Ann. NY Acad. Sci.-1980.-354.-p.270-290.

66. Campadelli-Fiume G., Foa-Tomasi L., Cassai E. Evidence that herpes simplex virus DNA is transcribed by cellular RNA polymerase Costanzo F.,B.// J of Virol. 1977. - V. 21. - P. 996-1001

67. Casas I, Pozo F, Trallero G, Echevarria J. M, Tenorio A. Viral diagnosis of neurological infection by RT multiplex PCR: a search for entero- and herpesviruses in a prospective study.//J. Med. Virol.-1999.-57.-2.- p. 145-151.

68. Cassinotti P, Mietz H, Siegl G. Suitability and clinical application of a multiplex nested PCR assay for the diagnosis of herpes simplex virus infections // J. Med. Virol.-1996.-50.-1.- p.75-81.

69. Cassinotti P, Siegl G. A nested-PCR assay for the simultaneous amplification of HSV-1, HSV-2, and HCMV genomes in patients with presumed herpetic CNS infections.// J Virol Methods.-1998.-71.-l.- p.105-114.

70. Centers for Disease Control and Prevention Website. Sexually transmitted disease guidelines.//http://www.cdc.gov/std/treat ment/2006/rr551 l.pdf.

71. Chou S. Differentiation of cytomegalovirus strains by restriction analysis of DNA sequences amplified from clinical speciments // J.Infect.Dis.l990.Vol.l62. № 3.P. 738-742.

72. Chou S. Newer methods for diagnosis of cytomegalovirus infection // Rev. Infect. Dis. 1990. Vol.12. Suppl.7.P.727-736.

73. Clements J.B., Hay J. RNA and protein synthesis in herpesvirus-infected cells // J.Gen. Virol. 1977. Vol.35. № 1. P. 1-12.

74. Corey L., Handsfield H. H. Genital herpes and public health; addressing a global problem.// JAMA. 2000. - V. 283. - P. 791-794

75. Croen K.D., Ostvove J.M., Dragovic L.I. et al. Patterns of gene expression and sites of latency in human nerve ganglia are different for varicella-zoster and herpes simplex virus // Proc.Nat.Acad.Sci USA. 1988. Vol. 85. № 24.P.9773-9777.

76. Cusini M., Ghislanzoni M. The importance of diagnosing genital herpes.// J Antimicrob Chemother 2001. - V. 47. - P. 9-16

77. Daiminger A., Schalasta G., Betzt D., Enders G. Detection of Human Cytomegalovirus in Urine Samples by Cell Culture, Early Antigen Assay and Polymerase Chain Reaction. // Infection.-1994.-22.-l.-p.24-28.

78. Desselberger U. Herpes simplex virus infection in pregnancy: diagnosis and significance.// Intervirology. 1998. - V. 41. - P. 185-190

79. Edward K., Wagner's, Herpes Virus Research.// http://www.dbc.uci.edu/.

80. Edwards K., Logan J., Saunders N. Real-time PCR.// Horizon Bioscence -2004.-P. 1-36

81. El Borai N., Inouer M., Levefre C at al. J. Obstet. Geneacol. Res., 1997, 23, 17-24.

82. Enright A. M., Prober C. G. Neonatal herpes infection: Diagnosis, treatment and prevention.// Semin Neonatol 2002. - V. 7. - P. 283-291

83. Fang X.F., Song B., Tu Y.Y., Tong J.Z., Faul J.L., Bai H. Rapid detection of glycoprotein G gene for the diagnosis and typing of herpes simplex virus infection in genital herpes.// Sex. Transm. Infect.-1999.-75.-6.-p.396-397.

84. Fluit A.C., van Stijp J.A.G., Miltenburg L.A.N, et al. The use of a hybridization assay for the study of host deferences against HSV // J.Virol. Meth.1989. Vol.26. № 3. P.269-278.

85. Forman M., Charache P., Arthur R. The use of polymerase chair reaction for detection of cytomegalovirus in clinical specimens // Abstr. Ann. Meeting Am.Soc.Microbiol. (New Orlean).-1989. D-238. P. 122

86. Freedman E., Mindel A., Jones C.I. Epidemiological, clinical and laboratory aids for the diagnosis of neonatal herpes an Australian perspective. // Herpes. -2004. - V. 11. - № 2. - P. 38-40

87. G. J. J. van Doornum, Guldemeester J., Osterhaus A. D. M. E. et al. Diagnosing Herpesvirus Infections by Real-Time Amplification and Rapid Culture.// Journal of Clinical Microbiology 2003. - P. 576-580

88. Gaytant M. A. et al. Congenital cytomegalovirus infection: review of the epidemiology and outcome.// Obstet. Gynecol. Surv. 2002. - V. 57. - P. 245-256

89. Gonzalez-Villasenor L.I. A duplex PCR assay for detection and genotyping of Herpes simplex virus in cerebrospinal fluid. // Mol. Cell. Probes. 1999.-13.-4.-p.309-314.

90. Graza A., Silverio C., Ferreira J.P. et al. Congenital or neonatal cytomegalovirus infection? Acta Med. Port. 2004; 17 (4): 335-340.

91. Gressens P., Langston C., Martin J. R. In Situ PCR Localization of Herpes Simplex Virus DNA Sequences in Disseminated Neonatal Herpes Encephalitis.// J of Neuropathology and Experimental Neurology 1994. - V. 53. - № 5. - P. 469-482

92. Haarr L., Shukla D., Rodahl E. et al. Transcription from the gene encoding the herpesvirus entro receptor nectin 1 (HveC) in nervous tissue of adult mouse.// Virol. 2001. - V. 287. - P. 301-309

93. Haase A.T., Retzel E. F., Staskus K. A. Amplification and detection of lentiviral DNA inside cells.// Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1990. - V. 87. - P. 49714975

94. Haliona B. Epidemiology of genital herpes resentadvancer.// Eur. J. Dermatol - 1999.-V. 9. -№3.-P. 177-184

95. Halwachs-Baumann G., Genser B.,Pailer S. Et al. Human cytomegalovirus load in various body fluids of congenital infected newborns. J.Clin. Virol. 2002; 25: 81-87.

96. Hassan J., Connell J. Translational mini-review series on infectious disease: congenital cytomegalovirus infection: 50 years on.// Clin Exp Immunol. -2007. V. 149. - № 2. - P. 205-210

97. Herold B.C. Glycoprotein C of herpes simplex virus type 1 plays a principal role in the adsoption of virus to cells and in infectivity // J.Virol. 1991.Vol.65.№ 3. P. 1090-1098.

98. Hill D. J., Petrik J., Arany E. Growth factors and the regulation of fetal growth.// Obstst. Gynecol. 1998. - V. 92. - № 2. - P. 179-183

99. Hobson A., Wald A., Wright N., Corey L. Evaluation of a quantitative competitive PCR assay for measuring herpes simplex virus DNA content in genital tract secretions. // J. Clin. Microbiol.-1997.-35.-3.- p.548-552.

100. Honess R. W., Roizman B. Regulation of herpesvirus macro-molecular synthesis. I. Cascade regulation of the synthesis of three groups of viral proteins.// J of Virol. 1974. - V. 14. - P. 8-19

101. Hukkanen V., Rehn T., Kajander R., Sjoroos M., Waris M. Time-resolved fluorometry PCR assay for rapid detection of herpes simplex virus in cerebrospinal fluid.// J. Clin. Microbiol.-2000.-38.-9.-p. 3214-3218.

102. Ikegaya H., Motani H., Sakurada K. et al., Forensic application of Epstein-Barr virus genotype: correlation between viral genotype and geographical area. J. Virol., Methods, 2008, v. 147, 78-85.

103. Jackson R, Morris DJ, Cooper RJ, Bailey AS, Klapper PE, Cleator GM, Tullo AB. Multiplex polymerase chain reaction for adenovirus and herpes simplex virus in eye swabs. // J. Virol. Methods. 1996. - 56. - 1.- p. 41-48.

104. Jones C.L. Herpes simplex virus infection in the neonate: clinical presentation and management. // Neonatal Network 1996. -V. 15.-P. 11-15

105. Karen B.Fowler, Robert F. Et al. Risk Factors for Congenital Cytomegalovirus Infection in the Offspring of Young Women: Exposure to Young Children and Recent Onset of Sexual Activity. Pediatrics. 2006; 118: 286-292.

106. Kawana T. Vertical transmission of alpha herpes virus.// Nippon. Rinsho -2000. V. 58. - № 4. - P. 871-876

107. Kenneson A., Cannon M. Review and meta-analysis of the epidemiology of congenital cytomegalovirus (CMV) infection. // Rev Med Virol. 2007. - V. 17. - № 4.-P. 253-76.

108. Kessler H.H, Muhlbauer G., Rinner B., Stelzl E., Berger A., Dorr H.W, Santner B., Marth E., Rabenau H. Detection of Herpes simplex virus DNA by realtime PCR. // J. Clin. Microbiol.-2000.-38.-7.- p.2638-2642.

109. Kieff E.D., Hoyer B., Bachenheimer S.L., Roizman B. Genetic relatedness of type 1 and 2 herpes simplex virus.// J. Virol.- 1972.- 9.- p. 738-745.

110. Kimberlin D. W. Herpes simplex virus infections in newborn. // Semin. Perinatol. 2007. - V. 31. - P. 19-25

111. Kimberlin D. W. Herpes Simplex Virus, Meningitis and Encephalitis in Neonates.// J. Herpes 2004. - V. 11. - № 2. - P. 65-76

112. Kleinschmidt-De Masters B. K., Gilden D. H. The expanding spectrum of herpes simplex virus infection of the nervous system.// Brain Pathol. 2001. - V. 11. - № 4. - P. 440-451

113. Knipe D.M. , Howley P.M. Fields Virology, 5th Edition.// Copyright B©2007 Lippincott Williams & Wilkins

114. Knipe D.M. Fundamental Virology.// Lippicott W&W. Philadelphia, 2001.-P. 1123-1185

115. Kubota N., Wada K., Ito Y. et al. One-step multiplex real-time PCR assay to analyze the latency patterns of Epstein-Barr virus infection, J. Virol., Methods, 2008, v. 147, 26-36.

116. Kudashov N.I., Ozerova O.E., Voroshilova G.P., Lvov N.D., Ivanova N.V. The role of herpes simplex virus in the pathogenesis of cerebral lesions and visceral disorders in newborn infants. // Akush. Ginekol.- 1990- 1.- p. 24-28.

117. Kudo E., Shiota H., Kinouchi Y., Mimura Y., Itakura M. Detection of herpes simplex virus DNA in tear fluid of stromal herpetic keratitis patients by nested polymerase chain reaction//Jpn. J. Ophthalmol. -1996.-40.-3 p. 390-396.

118. Kwong A. D., Kruper J. A., Frenkel N. Herpes simplex virus virion host shutoff function.//J of Virol. 1988. -V. 62. - P. 912-921

119. Lazzarotto T.,Guerra B.,Lanari M. Et al. New advances in the diagnosis of congenital cytomegalovirus infection. J. Clin. Virol. 2008; 41 (3): 192-197.

120. Linssen C.F.M., Jacobs J.A., Stelma F. et al. Herpes simplex virus load in bronchoalveolar lavage fluid is related to poor outcome in critically ill patients.// Intensive Care Med. 2008. - V. 34. - № 12. - P. 2202-2209

121. Lucotte G, Bathelier C, Lespiaux V, Bali C, Champenois T. Detection and genotyping of herpes simplex vims types 1 and 2 by polymerase chain reaction.// Mol. Cell. Probes.-1995.-9.-5.-p.287-290.

122. Mariotti M., Lefrere J.J., Rouger Ph. La technique de "Polymerase chain reaction" (PCR) // Spectra boil. 1989. Vol.7 №3. P. 45-47.

123. McGeoch D.J. The genome of herpes simplex virus: structure, function and evolution//Biol.Chem.Hoppe-Seyler. 1986. Vol. 367. P.477.

124. Meerbach A., Sauerbrei A., Meerbach W. et al. Fatal outcome of herpes simplex virus type 1-induced necrotic hepatitis in a neonate.// Med Microbiol Immunol.-2006.-V. 195.-P. 101-105

125. Michaels M.G. Treatment of congenital cytomegalovirus: where are we now? Expert. Rev. Anti. Infect. Ther. 2007; 5 (3): 441-448.

126. Mindel A. Genital herpes "the forggotten epidemic"// J. Internat. Herpes Management Forum.-1994.-1 (2).-p.39-48.

127. Mladina N., Mehikic G., Pasik A. TORCH infection in mother as a course of neonatal morbidity.// Med. Arh. 2000. - V. 54. - P. 273-276

128. Mocarski E.S. Cytomegalovirus: biology and replication.- In book: The human herpesviruses. Ed. by Roizman B., Whitley R.J., Lopez C., New York, 1993, P. 173-226.

129. Musiani M., Zerbini M., Gentilomi G. et al. An amplified dot immunoassay for the direct quantitation of adapted and wild strains of human cytomegalovirus //J.Virol.Meth.l989.Vol.24 № 3. P. 327-334.

130. Naidu A.S. Site specific inversion sequence of the herpes virus genome: domaine and structural features // Acta mictobiol. Hung 1991. Vol. 38. № 3-4. P.245.

131. Najioullah F., Bosshard S., Thouvenot D. et al. Diagnosis and surveillance of herpes simplex virus infection of the central nervous system. // J Med Virol 2000. -V. 61.-№4. -P. 468-73

132. Nelson C.T., Demmler G.J. Cytomegalovirus infection in the pregnant mother, fetus and newborn infant. Clin. Perinatol. 1997; 24: 151-160.

133. Norrild B. Immunochemistry of herpes virus glicoproteins // Curr.Top.Micro-biol.Immunol. 1980. Vol. 90., P.67.

134. Nuovo G. PCR in situ hybridization.// NY, Raven Press 1992

135. Nuovo G. Preparation of samples for polymerase chain reaction in situ.// Scan Microsc Suppl. 1996. - V. 10. - P. 49-55

136. Nuovo G., Gallery F., McConnell P. Analysis of non specific DNA synthesis during in situ PCR.// PCR Method Applic. - 1994. - V. 4. - P. 342 - 349

137. Nuovo G., Gallery F., McConnell P., Becker J., Bloch W. An improved technique for the in situ detection of DNA after polymerase chain reaction amplification.// Am J Pathol. 1991. - V. 139. - P. 1239 - 1244

138. Nuovo G., Gallery F., McConnell P., Horn R., Bloch W. Importance of different variables for enchansing in situ detection of PCR amplified DNA.// PCR Methods Appl. - 1993. -V. 2. - № 305. - P. 312

139. Nuovo G., Gorgone G., McConnell P. In situ localization of PCR -amplified human and viral cDNAs.// PCR Methods Appl. 1992. - V. 2. - P. 117123

140. O'Riordan D. P., Golden C. W., Aucott S. W. Herpes Simplex Virus Infection in Preterm Infant.// J. Pediatrics. 2007. - V. 22. - P. 1613-1620

141. Proffit M. R., Schindler S. A. Rapid detection of HSV with enzyme-linked virus inducible system employing a genetically modified cell line.// Clin Diagn Virol 1995.-V. 4.-P. 175-82

142. Rawlinson W. et al. Viruses and other infections in stillbirth: what is the evidence and what should we be doing?// Pathology. 2008. - V. 40. - № 2. - P. 14960

143. Read S. J., Kurtz J. B. Laboratory Diagnosis of Common Viral Infections of the Central Nervous System by using a Simple Multiplex PCR Screening Assay. // J. Clin. Microbiol.-1999.-37.-5.- p.1352-1355.

144. Revello M. et al. Preconceptional primary human cytomegalovirus infection and risk of congenital infection // J. Infect. Dis. 2006. - V. 193. - № 6. -P.783-7

145. Roizman B. Herpesviruses. In: The Molecular Biology of Tumor Viruses. // Ed. By Tooze J. 1973. p.470-501.

146. Roizman B., Batterson W. Herpesviruses and their replication // Virology / Eds.by B.N.Fields et al. New York, 1985. P. 497-526.

147. Rudnick C. M., Hoekzema G. S. Neonatal herpes simplex virus infections.// Am Fam Physician. 2002. - V. 65. - № 6. - P. 1138-1142

148. Safrin S., Shaw H., Bolan G., Cuan J., Chiang C.S. Comparison of virus culture and the polymerase chain reaction for diagnosis of mucocutaneous herpes simplex virus infection//Sex. Transm. Dis. 1997.-24.-3.- p. 176-180.

149. Saiki R.K., Gelfand D.H., Stoffel S.et al. Primer-directed enzymatic amplification of DNA with a thermostable DNA polymerase // Science. 1988. Vol.239. № 4839. P. 487-491.

150. Sakrauski A, Weber B, Kessler HH, Pierer K, Doerr HW. Comparison of two hybridization assays for the rapid detection of PCR amplified HSV genome sequences from cerebrospinal fluid.//J. Virol. Methods. -1994.-50.-l-3.-p.l75-184.

151. Sauberbrei F., Eichborn U., Hottenrott G., Wutzler P. Virological diagnosis of herpes simplex encephalitis.// J. Clin. Virol. 2000. - V. 17. - P. 31 - 36

152. Schochetman G., Ou Chi-Yih, Jones Wands K. Polymerase chain reaction // J.Infec. Diseases. 1988. Vol.158. № 6. P. 1154-1157.

153. Shore S., Nahmias A. Immunology of herpes simplex virus: Immunology of human infection // Ed. Nahmias A.I. O'Reilly R.N.Y. 1992., P.21-72.

154. Slomka M. J., Emery L., Munday P. E. et al. A comparison of PCR with virus isolation and direct antigen detection for diagnosis and typing of genital herpes.//J Med Virol 1998,-V. 55.-P. 177-183

155. Spann W., Pachmann K., Zabnienska H. et al. In situ amplification of single copy gene segments in individual cells by the polymerase chain reaction // Infection. 1991. Vol.19. № 4. P. 242-244.

156. Spear P. Herpes Simplex Virus: receptors and ligands for cell entry.// Cellular Microbiology. 2004. - № 6. - P. 401-410

157. Spear P., Longnecker R. Herpesvirus entry: an Update.//J.of virol.-2003.-V.77.- № 19.-P. 10179-10185

158. Squier W. Shaken baby syndrome: the quest for evidence.// Dev. Med. Child Neurol. 2008. - V. 50. - № 1. - P. 10-14

159. Stinski M.F., Mocarski E.S., Thomsen D.R. DNA of human cytomegalovirus: size heterogeneity and defectiveness resulting from serial undiluted passage.//J. Virol.-1979.-V.31 .-P.231-239.

160. Stow N. D. Localization of an origin of DNA replication within the TRS/IRS repeated region of the herpes simplex virus type 1 genome.// EMBO J. -1982.-V. l.-P. 863-867

161. Syridou G., Spanakis N., Konstantinidou A. et. al. Detection of cytomegalovirus, parvovirus B19 and herpes simplex viruses in cases of intrauterine fetal death: association with pathological findings. //J. Med. Virol. 2008. - Vol.80. -№10. -P.1776-82.

162. Tang Y.-W., Mitchell P. S., Espy M. J., Smith T. F., Persing D. H. Molecular Diagnosis of Herpes Simplex Virus Infections in the Central Nervous System.//J. Clin. Microbiol., 1999.-6.-p.2127-2136.

163. Taylor T. J., Brockman M. A., McNamee E. E., Knipe D. M. Herpes Simplex Virus.// Front Biosci. 2002. - V. 7. - P. 752-764

164. Tognon M., Cassai E., Rotola A., Roizman B. The heterogeneous regions in herpes simplex virus 1 DNA. // Microbiologica.-1983.- 6.- p. 191-198.

165. Tunback P., Bergstrom T., Claesson B. A. et al. Early acquisition of herpes simplex virus type 1 antibodies in children—a longitudinal serological study.// J Clin Virol 2007. - V. 40. - № 1. - P. 26-30

166. Twagira M., Hadzic N., Smith M., et al. Disseminated neonatal herpes simplex virus (HSV) type 2 infection diagnosed by HSV DNA detection in blood and successfully managed by liver transplantation.// Eur J Pediatr 2004. - V. 163 - № 3. -P. 166-169

167. Van Doornum G. J. J., Guldemeester J., Osterhaus A. D. M. E. et al. Diagnosing Herpesvirus Infections by Real-Time Amplification and Rapid Culture.// Journal of Clinical Microbiology 2003. - P. 576-580

168. Vaughan P.J., Purifoy D.J., Powell K.L. DNA-binding protein associated with herpes virus DNA polymerase // J.Virol. 1985. Vol. 53. P. 501-508.

169. Vesanen M., Piiparinen H., Kallio A., Vaheri A. Detection of herpes simplex virus DNA in cerebrospinal fluid samples using the polymerase chain reaction and microplate hybridization.// J. Virol. Methods.-1996.- 59.- l-2.-p. 1-11.

170. Wagner E. K., Roizman B. Ribonucleic acid synthesis in cells infected with herpes simplex virus. I. Patterns of ribonucleic acid synthesis in productively infected cells.// J of Virol. 1969. - V. 4. - P. 36-46

171. Wald A., Huang M., Carrell D. et al. Polymerase Chain Reaction for Detection of Herpes Simplex Virus (HSV) DNA on Mucosal Surfaces: Comparison with HSV Isolation in Cell Culture.// The Journal of Infectious Diseases 2003. - V. 188.-№ 1.-P. 1345-1351

172. Warford A.L., Chung J.W., Drill A.E., Steinberg E. Amplification techniques for detection of herpes simplex virus in neonatal and maternal genital specimens obtained at delivery // J.Clin.Microbiol. 1989. Vol. 27. № 6. P. 1324-1328.

173. Weller S.K. et al. Cloning, sequencing, and functional analysis of oriL, a herpes simplex virus type 1 origin of DNA synthesis.// Molecular & Cellular Biology. 1985.-V. 5.-P. 930-942

174. Whitley R. J. Herpes simplex virus in children.// Curr Treat Options Neurol -2002. V. 4.-P. 231-237

175. Wildy P. Portraits of viruses. Herpes virus // Intervirology. 1986. Vol.25. P.l 17-140.

176. Winnacker E.L. From genes to clones (introduction to gene technology).-Weinheim, 1987.

177. Yamamoto A.Y., Mussi-Pinhata M.M., Cristina P. et al. Congenital cytomegalovirus infection in preterm and full-term newborn infants from a population with a high seroprevalence rate. Pediatr. Infect. Dis. J. 2001; 20 (2): 188-192.

178. Yamamoto T, Nakamura Y.A. Single tube PCR assay for simultaneous amplification of HSV-1/-2, VZV, CMV, HHV-6A/-6B, and EBV DNAs in cerebrospinal fluid from patients with virus-related neurological diseases.// J. Neurovirol.-2000.- 6.- 5.-p. 410-417.

179. Yerly S., Perrin L., Van Delden C. et al. Cytomegalovirus quantification in plasma by an automated real-time PCR assay. 2007, J. Clin. Virol., 38, 298-303.

Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.