Разработка методов синтеза псевдопептидов и мономеров пептидно-нуклеиновых кислот тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.10, кандидат химических наук Баранов, Александр Владимирович

• Баранов, Александр Владимирович
• кандидат химических наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат химических наук Баранов, Александр Владимирович

Список сокращений

Введение

1 Литературный обзор

1.1 ДНК в нанотехнологии.

1.1.1 Линейные ДНК в наноэлектронике.

1.1.2 Агрегация наночастиц посредством ДНК.

1.1.3 Разветвленные мотивы на основе ДНК.

1.1.4 Сложные ДНК-мотивы в качестве структурных строительных блоков.

1.1.5 Протяженные линейные ДНК, свернутые в сложные мотивы

1.1.6 Прототипы молекулярных двигателей на основе ДНК.

1.1.7 Основанные на ДНК биосенсоры

1.1.8 Выводы.19 /

1.2 Обзор методов компьютерной химии.

1.2.1 Различия между методами молекулярной механики, полуэмпирическими и ab initio методами.

1.2.2 Компоненты ab initio вычислений.

1.2.3 Базисы

1.2.4 Методы.

1.2.5 Типы вычислений.

1.2.6 Изучение растворов.

1.2.7 Некоторые примеры использования методов компьютерной химии в современных иследованиях.

1.3 Обзор методов двумерной ЯМР-спектроскопии.

1.3.1 Применение современных методов ЯМР.

1.3.2 Модернизация представления 1D 13С ЯМР-спектров: DEPT

1.3.3 Гомоядерная корреляционная спектроскопия: COSY.

1.3.4 Полная корреляционная спектроскопия: TOCSY.

1.3.5 Гетероядерная односвязная корреляционная спектроскопия: HMQC и HSQC.

1.3.6 Спектроскопия гетероядерной корреляции через несколько связей: НМВС.

1.3.7 Корреляции через пространство: ядерный эффект Оверхаузера и эксперимент NOESY

2 Теоретическая часть

2.1 Синтез псевдопептидов.

2.1.1 Изучение стадии восстановления защищенных дикарбоновых аминокислот.

2.1.2 Синтез псевдопептида Boc-L-Glu(7-OBzl)-^-GlyOAll.

2.1.3 Синтез псевдопептида BocGly-#-L-Glu(7-OBzl)OAll

2.1.4 Синтез псевдопептида Cbz-L-Glu(7-OtBu)-^(Ns)-i^His(Ns)OMe

2.1.5 Синтез защищенных псевдопептидов, содержащих остатки пролина.'1.49 /

2.2 Синтез мономеров 03 ПНК на основе псевдопептидов Glu-^-Gly и Gly-Ф-Glu.

2.3 ЯМР-эксперименты по доказательству структуры полностью защищенных мономеров 03 ПНК на основе псевдопептидов Gly-^-Glu и Glu-Ф-ау.

3 Экспериментальная часть

3.1 Синтез защищенных /3-аминоспиртов.

3.2 Синтез псевдопептида Glu^-Gly.

3.3 Синтез защищенного псевдопептида Gly-^-Glu.

3.4 Синтез защищенного псевдопептида Glu-^-His

3.5 Синтез защищенных псевдопептидов состава ProGly-^-Pro.

3.6 Синтез Cbz-защищенных цитозина и аденина.

3.7 Синтез мономеров 03 ПНК на основе псевдопептида Glu-^-Gly

3.8 Синтез мономеров 03 ПНК на основе псевдопептида Gly-^-Glu

Выводы

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка методов синтеза псевдопептидов и мономеров пептидно-нуклеиновых кислот»

Создание аналогов природных пептидов, содержащих в своем составе восстановленную пептидную связь (Ф), представляет интерес с точки зрения изучения их взаимодействия с протеолитическими ферментами с целью применения данных пепти-домиметиков в медицине. В связи с изучением сигнальных пептидов мозга, особый интерес представляют псевдопептиды типа ProGly-Ф-Рго. Регулярное чередование пептидной и псевдопептидной связи является основой для другого важного класса аналогов биополимеров — пептидно-нуклеиновых кислот (ПНК). Такая модификация природной пептидной связи позволяет получать не подверженные биодеградации структуры, подобные НК, что в сочетании с аффинностью к олигонуклеотидам определяет их перспективность в различных областях биотехнологии.

Таким образом, является актуальной проблема поиска наиболее оптимального подхода к созданию псевдопептидной связи, а также рациональных способов де-риватизации псевдопептидов и синтез на их основе новых биологически активных соединений.

Результаты, полученные ранее в нашей лаборатории, позволяют говорить о высоком сродстве декамеров 03 ПНК с регулярной структурой, построенной из тимин-содержащих мономеров на основе псевдопептидов Glu-^-Gly и Gly-^-Glu, к комплементарным олигонуклеотидам, и о возможности управлять степенью этого сродства посредством изменения состава буферной среды [1]. Таким образом, актуальной становится задача препаративного получения уже синтезированных ранее мономеров для получения олигомеров 03 ПНК, а также разработка путей синтеза новых мономеров, содержащих остатки других нуклеиновых оснований.

1 Литературный обзор б

Пептидно-нуклеиновые кислоты активно изучаются последние два десятилетия. В частности, обширный обзор методов получения олигомеров ПНК, а также применения полученных олигомеров в различных областях биохимии, был опубликован менее года назад [1].

ПНК являются эффективными НК-миметиками, поэтому, если говорить об их потенциальных сферах применения, следует рассмотреть новые способы использования самих нуклеиновых кислот. Благодаря совместным наработкам в области нанотех-нологии и кристаллографии появился новый класс материалов, представляющих собой разнообразные дву- и трехмерные упорядоченные структуры, построенные из цепей ДНК. Пока еще рано говорить о реальном применении таких наноразмерных упорядоченных структур, однако исследования ведутся по многим направлениям, начиная от создания наноразмерных проводящих материалов, и заканчивая ДНК-компьютингом и нанороботами. Практически во всех подобных структурах задействованы короткие оцДНК последовательности, поэтому вполне вероятно, что ПНК, как и другие НК-миметики, могут служить им успешной альтернативой, привнося в результирующие структуры новые свойства.

С ростом сложности экспериментальной работы, а также увеличением производительности персональных компьютеров, в химии все чаще используются кванто-вомеханические ab initio вычисления, способные дать точную картину молекулярной структуры, реакционной способности, спин-спиновых взаимодействий и других свойств рассматриваемых веществ. Краткий обзор методов таких расчетов, а также некоторые результаты взаимодействия нуклеиновых оснований в составе НК и ПНК, приведен во второй части данного обзора.

Все более сложные структуры требуют новых методов их исследования. В последние десятилетия происходило развитие методов двумерной ЯМР-спектроскопии, что позволило изучать структуру органических молекул с крайне высокой точностью. Знание двумерных ЯМР-методов необходимо для современного исследователя и кратко изложено в заключительной части данного обзора.

Заключение диссертации по теме «Биоорганическая химия», Баранов, Александр Владимирович

Выводы

1. Разработан новый метод восстановления дикарбоновых си-аминокислот.

2. Впервые синтезированы два защищенных производных псевдопептида ProGly-Ф-Рго.

3. Впервые осуществлен синтез двух цитозинсодержащих мономеров 03 ПНК на основе псевдопептидов Glu^-Gly и Cly-vf-Glu.

4. Проведена оптимизация схемы синтеза полученных ранее двух тиминсодержа-щих мономеров 03 ПНК на основе псевдопептидов Glu^-Gly и Gly^-Glu и одного аденинсодержащего мономера 03 ПНК на основе псевдопептида Gly-Ф-Glu.

5. Проведен анализ структуры полученных по разработанной в ходе настоящей работы схеме тимин-, цитозинсодержащих мономеров 03 ПНК на основе псевдопептидов Glu^-Gly и Gly^-Glu, а также аденинсодержащего мономера 03 ПНК на основе псевдопептида Gly^-Glu с помощью методов двумерной ЯМР-спектроскопии, который показал однозначность структуры выделенных продуктов реакции алкилирования гетероциклических нуклеиновых оснований бромацильными производными защищенных псевдопептидов Glu^-Gly и Gly-Ф-Glu.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Баранов, Александр Владимирович, 2008 год

1. Боярская Н. П. Кандидатская диссертация. — М. — 2007.

2. Taubes G. Biophysics: Double Helix Does Chemistry at a Distance-But How? // Science. — 1997. — V. 275, N 5305. P. 1420-1421.

3. Porath D. Direct measurement of electrical transport through DNA molecules. // Nature. 2000. - V. 403. - P. 635-638.

4. Braun E., Eichen Y., Sivan U., Ben-Yoseph G. DNA-templated assembly and electrode attachment of a conducting silver wire. // Nature. — 1998. — V. 391. P. 775-778.

5. Kasumov A., Kociak M., GueronS., Reulet В., Volkov V., Klinov D., Bouchiat H. Proximity-Induced Superconductivity in DNA. // Science. — 2001. — V. 291. — P. 280-282.

6. Lee J. A cooperative conformational change in duplex DNA induced by Zn2+ and other divalent metal ions. // Biochem. Cell Biol. — 1993. — V. 71, NN 3-4. — P. 162-168.

7. Wettig S. D. M-DNA: a self-assembling, molecular wire for nanoelectronics and biosensing. //Anal. Sci. 2003. - V. 19. - P. 23-26.

8. Park S. H. Three-Helix Bundle DNA Tiles Self-Assemble into 2D Lattice or ID Templates for Silver Nanowires. // Nano Lett. — 2005. — V. 5, N 4. — P. 693-696.

9. Keren K., Krueger M., Gilad R., Ben-Yoseph G., Sivan U., Braun E. Sequence-Specific Molecular Lithography on Single DNA Molecules. // Science. — 2002. — V. 297. P. 72-75.

10. Keren К., Berman R., Buchstab E., Sivan U., Braun E. DNA-Templated Carbon Nanotube Field-Effect Transistor. // Science. — 2003. — V. 302. — P. 1380.

11. Alivisatos P. Colloidal quantum dots. From scaling laws to biological applications. // Pure Appl. Chem. 2000. - V. 72, N 1-2. - P. 3-9.

12. Mirkin C., Letsinger R., Mucic R., Storhoff J. A DNA-based method for rationally assembling nanoparticles into macroscopic materials. // Nature. — 1996. — V. 382.- P. 607-609.

13. Alivisatos A., Johnsson K., Peng X., Wilson Т., Loweth C., Bruchez M., Schultz P. Organization of 'nanocrystal molecules' using DNA. // Nature. — 1996. — V. 382.- P. 609-611.

14. Mucic R., Storhoff J., Mirkin C., Letsinger R. DNA-Directed Synthesis of Binary Nanoparticle Network Materials. // J. Am. Chem. Soc. — 1998. — V. 120. — P. 12674-12675.

15. Rosi N., Mirkin C. Nanostructures in Biodiagnostics. // Chem. Rev. — 2005. — V. 105. — P. 1547-1562.

16. Maeda Y. Two-dimensional assembly of gold nanoparticles with a DNA network template. // Appl. Phys. Lett. 2001. - V. 79, N 8. - P. 1181.

17. Mirkin C. Programming the Assembly of Two- and Three-Dimensional Architectures with DNA and Nanoscale Inorganic Building Blocks. // Inorg. Chem. — 2000. — V. 39, N 11. P. 2258-2272.

18. Li Y., Tseng Y., Kwon S., d'Espaux L., Scott Bunch J., McEuen P., Luo D. Controlled assembly of dendrimer-like DNA. // Nat. Mater. — 2004. — V. 3. — P. 38-42.

19. Ho Um S., Lee J., Park N., Kwon S., Umbach C., Luo D. Enzyme-catalysed assembly of DNA hydrogel. // Nat. Mater. 2006. - V. 5. - P. 797-801.

20. Seeman, N. C. Nucleic acid junctions and lattices. //J. Theor. Biol. — 1982. — V. 99, N 2. P. 237-247.

21. Seeman, N. С. New motifs in DNA nanotechnology. // Nanotechnology. — 1998. — V. 9. P. 257-273.

22. Chen J., Seeman N. Synthesis from DNA of a molecule with the connectivity of a cube. // Nature. 1991. - V. 350. - P. 631-633.

23. Zhang Y., Seeman N. The Construction of a DNA Truncated Octahedron. // J. Am. Chem. Soc. 1994. - V. 116. - P. 1661-1669.

24. Malo J., Mitchell J., Venien-Bryan C., Harris J., Wille H., Sherratt D., Turberfield A. Engineering a 2D Protein-DNA Crystal. // Angew. Chem. Int. Ed. — 2005. — V. 44, N 20. P. 3057-3061.

25. Li X., Yang X., Qi J., Seeman N. Antiparallel DNA Double Crossover Molecules As Components for Nanoconstruction. // J. Am. Chem. Soc. — 1996. — V. 118, N 26. P. 6131-6140.

26. Winfree E., Liu F., Wenzler L., Seeman N. Design and self-assembly of two-dimensional DNA crystals. // Nature. 1998. - V. 394. - P. 539-544.

27. Sha R., Liu F., Millar D., Seeman N. Atomic force microscopy of parallel DNA branched junction arrays. // Chem. Biol. — 2000. V. 7, N 9. - P. 743-751.

28. Seeman N. DNA Nicks and Nodes and Nanotechnology. // Nano. Lett. — 2001. — V. 1, N 1. P. 22-26.

29. LaBean Т., Yan H., Kopatsch J., Liu F., Winfree E., Reif J., Seeman N. Construction, Analysis, Ligation, and Self-Assembly of DNA Triple Crossover Complexes. // J. Am. Chem. Soc. 2000. - V. 122. - P. 1848-1860.

30. He Y., Tian Y., Chen Y., Deng Z., Ribbe A., Mao C. Sequence Symmetry as a Tool for Designing DNA Nanostructures. // Angew. Chem. Int. Ed. — 2005. — V. 44, N 41. — P. 6694-6696.

31. Mao, C. Signed Two-Dimensional DNA Holliday Junction Arrays Visualized by Atomic Force Microscopy. // J. Am. Chem. Soc. — 1999. — V. 121. P. 54375443.

32. Park S., Yin P., Liu Y., Reif J., LaBean Т., Yan H. Programmable DNA Self-Assemblies for Nanoscale Organization of Ligands and Proteins. // Nano Lett. —2005. V. 5, N 4. — P. 729-733.

33. Yan H., LaBean Т., Feng L., Reif J. Directed nucleation assembly of DNA tile complexes for barcode-patterned lattices. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. — 2003.- V. 100, N 14. P. 8103-8108.

34. Shih W., Quispe J., Joyce G. A 1.7-kilobase single-stranded DNA that folds into a nanoscale octahedron. // Nature. — 2004. — V. 427. — P. 618-621.

35. Rothemund P. Folding DNA to create nanoscale shapes and patterns. // Nature. —2006. V. 440. - P. 297-302.

36. Yang X., Liu В., Vologodskii A., Kemper В., Seeman N.C. Torsional Control of Double Stranded DNA Branch Migration. // Biopolymers. — 1998. — V. 45. — 69-83.

37. Yurke В., Turberfield A. J., Mills A. P., Simmel F. C., Neumann J. L. A DNA-fuelled molecular machine made of DNA. // Nature. — 2000. — V. 406, N 6796. — P. 605-608.

38. Shin, J. S., Pierce, N. A. A Synthetic DNA Walker for Molecular Transport. // J. Am. Chem. Soc. 2004. - V. 126, N 35. - P. 10834-10835.

39. Yin P., Yan H., Daniell X. G., Turberfield A. J., Reif J. H. A unidirectional DNA walker that moves autonomously along a track. // Angew. Chem. Int. Ed. — 2004.- V. 43, N 37. P. 4906-4911.

40. Tian Y., He Y., Chen Y., Yin P., Mao C. A DNAzyme that walks processively and autonomously along a one-dimensional track. // Angew. Chem. Int. Ed. — 2005. — V. 44, N 28. P. 4355-4358.

41. Kang J., Klenerman D., Zhou D., Liu D., Bruckbauer A., Abell C., Balasubramanian S. A Reversible pH-Driven DNA Nanoswitch Array. //J. Am. Chem. Soc. — 2006.- V. 128. — P. 2067-2071

42. Liedl Т., Olapinski M., Simmel F. С. A Surface-Bound DNA Switch Driven by a Chemical Oscillator. // Angew. Chem. Int. Ed. 2006. — V. 45, N 30. — P. 5007-5010.

43. Seela F., Budow S. pH-Dependent Assembly of DNA-Gold Nanoparticles Based on the i-Motif: A Switchable Device with the Potential of a Nanomachine. // Helv. Chim. Acta. 2006. - V. 89. - P. 1978-1980.

44. Dittmer W. U., Reuter A., Simmel F. C. A DNA-based machine that can cyclically bind and release thrombin. // Angew. Chem. Int. Ed. — 2004. — V. 43, N 27. — 3550-3553.

45. Stojanovic M. N., Kolpashchikov D. M. Modular Aptameric Sensors. //J. Am. Chem. Soc. 2004. — V. 126, N 30. - P. 9266-9270.

46. Simmel F. C. DNA Nanodevices: Prototypes and Applications. // Nanodevices for the Life Sciences, 1st edition, Kumar, C. S. S. R. (ed.) Wiley-VCH, Weinheim. — 2006. P. 89.

47. Foresman J., Frisch A. Exploring chemistry with electronic structure methods. 2nd edition. // Gaussian, Inc. — 1996. — P. 305.

48. Cheeseman J., Trucks G., Keith Т., Frisch M. A comparsion of models for calculating nuclear magnetic resonance shielding tensors. //J. Chem. Phys. — 1996. — V. 104. P. 5497-5503.

49. Tamulis A., Tamulis V., Graja A. Quantum mechanical modeling of self-assembly and photoinduced electron transfer in PNA based artificial living organism. // Journal of Nanoscience and Nanotechnology. — 2006. — V. 6. — P. 965-973.

50. Sponer J., Leszczynski J., Hobza P. Electronic Properties, Hydrogen Bonding, Stacking, and Cation Binding of DNA and RNA Bases. // Biopolymers. — 2001. — V. 61, N 1. P. 3-31.

51. Sponer J., Hobza P. Structure, energetics, and dynamics of the nucleic Acid base pairs: nonempirical ab initio calculations. // Chem. Rev. — 1999. — V. 99. — P. 3247-3276.

52. Hobza P., Sponer J., Reschel T. Density Functional Theory and Molecular Clusters. // J. Comput. Chem. 1995. - V. 16. - P. 1315-1325.

53. Sponer J., Leszczynski J., Hobza P. Base stacking in cytosine dimer. A comparison of correlated ab initio calculations with three empirical potential models and density functional theory calculations. //J. Comput. Chem. — 1996. — V, 17. — P. 841-850.

54. Sponer J., Hobza P. Sequence dependent intrinsic deformability of the DNA base amino groups. An ab initio quantum chemical analysis. // Theochem.—J. Mol. Struct. 1994. - V. 304. - P. 35-40.

55. Sponer J., Hobza P. Nonplanar Geometries of DNA Bases. Ab Initio Second-Order Mdler-Plesset Study. // J. Phys. Chem. 1994. - V. 98. - P. 3161-3164.

56. Kabelac M., Ryjacek F., Hobza P. Already Two Water Molecules Change Planar H-bonded Structure of the Adenine.Thymine Base Pair to the Stacked Ones: a Molecular Dynamics Simulation Study. // Phys. Chem. Chem. Phys. — 2000. — V. 2. P. 4906-4909.

57. Claridge T. High-resolution NMR techniques in organic chemistry. // Tetrahedron organic chemistry series. Editors: Baldwin J., Williams R. — 1999. — V. 19.-— P. 396.

58. Aue W., Bartholdi E., Ernst R. Two-dimensional spectroscopy. Application to nuclear magnetic resonance. // J. Chem. Phys. — 1976. — V. 64. — P. 2229-2246.

59. Braunschweiler L., Ernst R. Coherence Transfer by Isotropic Mixing: Application to Proton Correlation Spectroscopy. // J. Magn. Reson. — 1983. — V. 53. — P. 521-528.

60. Smith M., Claridge Т., Tranter G., Sansom M., Fleet G. Secondary structure in oligomers of carbohydrate amino acids. // Chem. Commun. — 1998. — V. 39. — P. 2041-2042.

61. Macura S., Huang Y., Suter D., Ernst R. Two-dimensional correlated spectroscopy (COSY) for measurement of 1H-1H spin-spin coupling constants. //J. Magn. Reson. 1981. - V. 43. - P. 259-281.

62. Mitsunobu O. The use of diethyl azodicarboxylate and triphenylphosphine in synthesis and transformation of natural products. //J. Synthesis. —1981. — V. 13, N 1. P. 1-29.

63. Guo Z., Xian M., Zhang W., McGill A., Wang P. G. N-Nitrosoanilines: a new class of caspase-3 inhibitors. // Bioorg. Med. Chem. 2001. - V. 9, N 2. - P. 99-106.

64. Rubini E., Gilon C., Selinger Z., Chorev M. Synthesis of isosteric methylene-oxy pseudopeptide analogues as novel amide bond surrogate units. // Tetrahedron — 1986. V. 42, N 21. - P. 6039-6045.

65. Ho M., Chung J., Tang N. A convenient synthesis of chiral N-Boc-amino ethers as potential peptide bond surrogate units. // Tetrahedron Lett. — 1993. — V. 34, N 41. P. 6513-6516.

66. Trotter N., Brimble M., Harris P., Callis D., Sieg F. Synthesis and neuroprotective activity of analogues of glycyl-L-prolyl-L-glutamic acid (GPE) modified at the a-carboxylic acid. // Bioorg. Med. Chem. 2005. - V. 13, N 2. - P. 501-517.

67. Sibrian-Vazquez M., Spivak D. Convenient synthesis of 3-(S)-amino-7-bytyrolactone. // Synlett. — 2002. N 7. — P. 1105-1106.

68. Truong V., Gauthier J., Boyd M., Roy В., Scheigetz J. Practical and efficient route to (S)-7-fluoroleucine. // Synlett. — 2005. N 8. - P. 1279-1280.

69. Caputo R., Cassano E., Longobardo L., Palumbo G. Chiral N-protected /3-iodamines from ct-aminoacids: a general synthesis. // Tetrahedron Lett. — 1995. — V. 36, N 1. P. 167-168.

70. Boyarskaya N., Prokhorov D., Kirillova Yu., Zvonkova E., Shvets V. Synthesis of protected pseudopeptides from dicarboxylic amino acids by Mitsunobu condensation. // Tetrahedron Lett. 2005. - V. 46, N 43. — P. 7359-7362.

71. Боярская H., Кириллова Ю., Прохоров Д., Стотлаид Е., Звонкова Е., Швец В. Синтез двух новых тиминсодержащих мономеров отрицательно заряженных ПНК. // Доклады Академии наук. 2006. - Т. 408, №1. - С. 55-58.

72. Мальцева Н., Хаин В. Борогидрид натрия // — М.: Наука. — 1985. — 207 с.

73. McKennon М., Meyers A. A convenient reduction of amino acids and their derivatives. //J. Org. Chem. 1993. - V. 58, N 13. - 3568-3571.

74. Falorni M., Porcheddu A., Taddei M. Mild reduction of carboxylic acids to alcohols using cyanuric chloride and sodium borohydride. // Tetrahedron Lett. — 1999. — V. 40, N 23. P. 4395-4396.

75. Kokotos G. A convenient One-Pot Conversion of N-Protected Amino Acids and Peptides into Alcohols. // Synthesis. 1990. - N 4. - P. 299-301.

76. Rodriguez M., Llinares M., Doulut S., Heitz A., Martinez J. A facile synthesis of chiral N-protected /З-amino alcohols. // Tetrahedron Lett. — 1991. — V. 32, N 7 — P. 923-926.

77. Haaima G., Lohse A., Buchardt 0., Nielsen P. E. Peptide Nucleic Acids (PNAs) containing Thymine monomers derived from chiral amino acids: hybridization and solubility properties of D-Lysine PNA. // J. Chem. Int. Ed. — 1996. V. 98, N 17.- P. 1939-1941.

78. Ашмарин И. П. Глипролины в составе регуляторных трипептидов. // Нейрохи-мия. 2007. - Т. 24, Но. 1. - С. 5-7.

79. Гершкович А. А., Кибирев В. К. Химический синтез пептидов. // Киев, Наукова думка, 1992. — 360 с.

80. Dueholm К., Egholm М., Buchardt О. An Efficient Synthesis of Boc-Aminoacetaldehyde and its Application to the • Synthesis of N-(2-Aminoethyl)Glycine Esters. // Organic Preparations And Procedures Int. — 1993. V. 25, N. 4. - P. 457-461.

81. Meltzer P., Liang A., Matsudaira P. Peptide Nucleic Acids: Synthesis of Thymine, Adenine, Guanine, and Cytosine Nucleobases. //J. Org. Chem. — 1995. — V. 60.- P. 4305-4308.

82. Nielsen P., Egholm M., Berg R., Buchardt O. Sequence selective recognition of DNA by strand displacement with a thymine-substituted polyamide. // Science. — 1991.- V. 254. P. 1497-1500.