Разработка технологии концентрирования глубинной культуры вакционного штамма Brucella melitensis Rev - 1 для приготовления живой сухой вакцины против бруцеллеза овец и коз тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.06, кандидат биологических наук Пиков, Александр Васильевич

• Пиков, Александр Васильевич
• кандидат биологических наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Пиков, Александр Васильевич

ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ, УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ,

СИМВОЛОВ, ЕДИНИЦ И ТЕРМИНОВ

ВВЕДЕНИЕ

ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Возбудители бруцеллеза сельскохозяйственных животных 13 1.1.1 Номенклатура и классификация

1.1.2 ПАТОГЕННОСТЬ

1.2 Средства специфической профилактики бруцеллеза

1.2.1 Специфическая иммунопрофилактика бруцеллеза

1.2.2 Вакцина на основе штамма Brucella melitensis Rev

1.3 Способы концентрирования микробных культур

1.4 ОСНОВНЫЕ ЗАКОНОМЕРНОСТИ ПРОЦЕССА ФИЛЬТРАЦИИ И ОСОБЕННОСТИ МЕМБРАННОГО ОБОРУДОВАНИЯ, ИСПОЛЬЗУЕМОГО ДЛЯ РАЗДЕЛЕНИЯ МИКРОБНЫХ КУЛЬТУР

2 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 46 2.1. Материалы и методы

2.2 Экспериментальное изучение возможности применения мембранной техники для концентрирования глубинных культур

Brucella melitensis Rev -1.

2.3 Разработка промышленной технологии мембранного концентрирования глубинных культур Brucella melitensis Rev

2.4 Выбор метода и отработка режима стерилизации установки микрофильтрации мСартокон-2"

2.5 Отработка режима и параметров мембранного концентрирования глубинных культур Brucella melitensis Rev -1 в производственных условиях

2.6 Определение безвредности микробных концентратов культур Brucella melitensis Rev — 1, полученных мембранным способом 82 2.7 Оценка качества вакцин, приготовленных на основе концентратов, полученных мембранным способом

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ

ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка технологии концентрирования глубинной культуры вакционного штамма Brucella melitensis Rev - 1 для приготовления живой сухой вакцины против бруцеллеза овец и коз»

Бруцеллез (Brucellosis) - инфекционная, зооантропонозная, преимущественно хронически протекающая болезнь, вызываемая бактериями рода Brucella, проявляющаяся абортами, задержанием последа, эндометритами и расстройством опорно-двигательной системы (бурситы), у самцов -орхитами. Известно, что такое инфекционное заболевание как бруцеллёз, имеет не только ветеринарное, но и медико-санитарное значение. С развитием человеческого общества искоренение бруцеллёза является одной из актуальных проблем. В настоящее время перед медицинской и ветеринарной наукой и практикой в ближайшие годы стоит задача содействовать сокращению этой болезни среди животных. Указанная задача является вполне реальной, поскольку подтверждена практическим опытом борьбы с данным заболеванием в ряде стран ближнего и дальнего зарубежья.

Уровень производства продуктов животноводства играет большую роль в экономическом развитии человечества, а животные являются национальным богатством каждой страны. По данным ВОЗ и МЭБ, бруцеллез человека и животных в современном мире распространен сравнительно широко. Только в последнем десятилетии он регистрировался в 28 странах Европы, в 18 странах Америки, в 12 странах Азии, в 21 стране Африки и в 3 странах Океании. На всех континентах наиболее широко распространен бруцеллез крупного рогатого скота.

По данным ВОЗ и МЭБ за последние годы произошли существенные изменения в эпизоотической ситуации по бруцеллезу во многих странах мира. На сегодняшний день 38 государств освободились от этой болезни, в 5 странах болезнь встречается как исключение, в 50 - в виде единичных вспышек, в 38 -как эпизоотия.

Успехи, достигнутые в ликвидации бруцеллеза в Российской Федерации, несмотря на их научную и практическую значимость не позволяют в настоящее время сделать заключение о том, что проблема ликвидации бруцеллеза сельскохозяйственных животных окончательно решена. Это подтверждается возникновением новых очагов данного заболевания в различных регионах РФ. Инфекция наносит значительный ущерб животноводству, который складывается из потери воспроизводительной способности, выбраковке ценных в племенном отношении животных, абортов и рождении слабых, нежизнеспособных сельскохозяйственных животных.

Бруцеллез относится к зоонозам, передающимся от больных животных человеку, и принадлежит к опасным заболеваниям, что определяет значение вопроса вакцинопрофилактики данной инфекционной патологии, который за последние годы приобрел особую актуальность. Это связано с рядом факторов:

- снижением уровня производства вакцинных препаратов;

- нарушением календаря профилактических прививок;

- ростом заболеваемости бруцеллезом среди сельскохозяйственных животных и особенно среди овец и коз; недостаточностью финансирования исследований по разработке эффективных средств вакцинопрофилактики бруцеллеза нового поколения;

- ухудшением эпидемиологической и экологической обстановок.

Современная система профилактики инфекционных заболеваний основывается на проведении общих ветеринарно-санитарных мероприятий, выявлении источников инфекции - больных животных и ликвидации источников, применении средств специфической иммунопрофилактики. Наиболее значимым элементом в системе предупреждения бруцеллезной инфекции является вакцинопрофилактика.

Что касается Российской Федерации в отношении бруцеллеза животных, то наиболее неблагополучным по бруцеллезу мелкого и крупного рогатого скота остаются Южный и Северо-Кавказский Федеральные округа. В них с 1991 года по 2005 год было выявлено 740 неблагополучных пунктов по бруцеллезу крупного рогатого скота и 183 пункта по бруцеллезу мелкого рогатого скота, в которых заболело бруцеллёзом 139790 голов крупного рогатого скота и 21252 головы мелкого рогатого скота. Например, только в 2003 году в этом регионе выявлено 103 неблагополучных населенных пункта, в которых зарегистрировано 8527 больных животных, в то время, как в 1992 году числилось неблагополучными по бруцеллёзу мелкого рогатого скота всего 20 пунктов.

С сохранением эпизоотической напряженности в регионах с развитым животноводством (особенно овцеводства) эпидемиологическая обстановка остаётся сложной. Так, по данным Госсанэпиднадзора в Российской Федерации ежегодно регистрируется от 400 до 700 человек больных бруцеллёзом, у которых впервые установлен диагноз. Больные регистрируются преимущественно на территориях с развитым овцеводством, что в значительной степени связано с особенностями уклада жизни у людей и потреблением продуктов от инфицированных овец и коз (молоко, мясо, сыр).

В среднем 47% больных от общего числа на территории Российской Федерации бруцеллезом людей выявляются в Северо-Кавказском Федеральном округе и до 15% в Приволжском Федеральном округе.

По данным Госсанэпиднадзора, пик заболеваемости людей бруцеллёзом зарегистрирован в 1993 году. Было выявлено 755 человек вновь инфицированных. В течение последнего десятилетия почти в 3 раза увеличилось число заболевших детей в возрасте до 14 лет в общей заболеваемости «впервые диагностированного» бруцеллеза с 5 до 15%, что является показателем напряженной эпидемиологической ситуации по бруцеллезной инфекции. Периодически регистрируются коллективные заболевания людей с числом заболевших 10 и более человек.

Ослабление контроля за проведением противобруцеллезных мероприятий на животноводческих объектах, несоблюдение руководителями животноводческих хозяйств и владельцами скота в частном секторе ветеринарного законодательства способствуют появлению и распространению скрытых очагов инфекции, о чем свидетельствует регистрация больных людей на территориях, где выявлены больные бруцеллезом сельскохозяйственные животные. Проведение умелых, научно обоснованных, подтверждённых опытом и практикой прошлых лет, противоэпизоотических мероприятий позволит достичь желаемого результата.

Не менее важным является ликвидация бруцеллёза в эпидемиологическом отношении, так как больные бруцеллезом животные являются источником инфекции для людей. Однако ликвидация этой болезни представляет большую проблему, требующую значительных трудозатрат и материальных средств на проведение комплекса ветеринарно - санитарных и организационно -хозяйственных мероприятий.

Восприимчивость к бруцеллёзу всех видов домашних животных, а так же человека, определяет его социально - экономически значимой инфекцией. Бруцеллёз регистрируют наиболее часто в регионах Поволжья, Урала и Северного Кавказа.

В соответствии с целями и задачами утвержденной 27 октября 2008 г. председателем Правительства Российской Федерации В.В.Путиным федеральной целевой программы «Национальная система химической и биологической безопасности Российской Федерации (2009-2013 годы)» необходимо разрабатывать и внедрять современные методы, средства защиты и технологии производства для обеспечения защиты населения и окружающей среды от негативных влияний и угроз, вызванных факторами химического и биологического характера, что делает решение рассматриваемого вопроса актуальным.

В общем комплексе оздоровительных мероприятий при бруцеллезе важную роль занимает вакцинация животных. В борьбе с бруцеллезом крупного рогатого скота нашли свое применение вакцины на основе штаммов В.abortus из штаммов 19, 82, 75/79 - АВ, а так же адъювантная вакцина с использованием штамма В. abortus KB 17/100, и мелкого рогатого скота на основе штамма В. abortus 19 и B.melitensis Rev-1.

По данным сотрудников ООО «Агровет» потребность в вакцине против бруцеллеза на основе штамма B.melitensis Rev-1 на территории Российской Федерации и стран ближнего зарубежья составляет более 10 млн. доз в год, что также является серьезной предпосылкой для совершенствования технологии ее приготовления.

Биологические особенности микробных культур вакцинных штаммов бруцеллеза (повышенные питательные потребности, длительность выращивания, наличие диссоциации и др.) делают производство препаратов на их основе дорогостоящим из-за высокого процента брака, довольно высокой себестоимости исходного сырья и значительных потерь на стадии концентрирования. В условиях коммерциализации эти причины привели к резкому снижению объемов производства бруцеллезных вакцин.

Таким образом, приготовление препарата с необходимым содержанием количества прививочных доз во флаконе (ампуле) за счет повышения выхода микробных клеток вакцинного штамма при сохранении их видовых и иммуногенных свойств на этапах концентрирования и лиофилизации обеспечивает рентабельность производства и является актуальной задачей.

Цель настоящей работы состоит в разработке технологии концентрирования глубинной культуры вакцинного штамма Brucella melitensis Rev-1 для приготовления живой сухой вакцины против бруцеллеза овец и коз.

Для достижения поставленной цели необходимо решить следующие задачи:

1. На основании проведенного анализа данных литературы о патогенных свойствах вакцинных штаммов возбудителя бруцеллеза, его культуральноморфологических свойствах, методах культивирования микроорганизмов обосновать выбор способа концентрирования бруцелл;

2. Обосновать выбор аппаратуры для проведения процесса концентрирования;

3. Определить режимы подготовки оборудования, параметры ведения процесса, обеспечивающие получение концентрированных микробных культур вакцинного штамма Brucella melitensis Rev - 1 при сохранении регламентированных биологических свойств;

4. Оценить качество бруцеллезной живой сухой вакцины и ее полуфабрикатов, полученных с использованием вновь разработанной технологии концентрирования, и выдать заключение о ее соответствии нормативным требованиям.

На защиту выносятся следующие основные научные положения и результаты исследования:

1. Возможность концентрирования глубинных культур вакцинного штамма Brucella melitensis Rev-1, с использованием установки «Сартокон - 2».

2. Параметры подготовки и стерилизации оборудования.

3. Параметры процесса концентрирования, обеспечивающие получение микробных концентратов бруцелл в промышленных условиях и воспроизведение технологического процесса концентрирования.

4. Возможность получения готового препарата вакцины против бруцеллеза овец и коз, отвечающего требованиям НД, на основе микробных концентратов, полученных мембранным способом.

Научная новизна заключается в том, что впервые при производстве сухой бруцеллезной вакцины разработана и внедрена в практику технология концентрирования глубинных культур вакцинного штамма Brucella melitensis Rev-1 на пористых мембранах в режиме проточной фильтрации; теоретически и экспериментально обоснован материал мембран и диаметр их пор; отработаны режимы подготовки оборудования и параметры ведения процесса, обеспечивающие получение вакцинного препарата с высоким содержанием иммунизирующих доз в единице объема и отвечающего требованиям нормативной документации.

Практическая значимость работы состоит в том, что на основании предложенных автором технологических решений и методических приемов, обосновано включение в действующий регламент производства РП №938420017-46392258 стадии концентрирования с использованием установки «Сартокон - 2», определены последовательность выполняемых операций, точки и показатели контроля ведения процесса концентирования, обеспечивающие воспроизведение технологического процесса приготовления вакцины, соответствующей требованиям НД.

По результатам диссертации опубликовано 3 статьи в научных журналах, рекомендованных ВАК.

Материалы диссертации доложены на Всероссийской научной конференции молодых ученых «Наука - производство - технология -экология.» (г.Киров, 2010).

Полученные результаты реализованы в следующих документах:

1. Ведомость изменений № 1 к регламенту производства РП №938420-01746392258 «Вакцина против бруцеллеза овец и коз и инфекционного эпидидимита баранов из штамма Brucella melitensis Rev-1 живая сухая»; утверждена заместителем генерального директора ООО «Агровет» по производству 19.03.2011 г.

2. Инструкция по подготовке установки «Сартокон - 2» и проведению процесса концентрирования глубинной культуры штамма Brucella melitensis

Яеу-1 на установке «Сартокон - 2»; утверждена заместителем генерального директора ООО «Агровет» по производству 19.03.2011 г.

Автор лично участвовал в планировании и проведении экспериментов по отработке технологии концентрирования и получения конечной формы вакцины бруцеллезной живой сухой.

Сухая живая бруцеллезная вакцина, приготовленная с использованием мембранного метода концентрирования, испытывалась совместно с З.М. Бедоевой, Г.В.Комоско, С.М.Кузнецовым, С.П.Коржавиной.

Результаты совместных исследований приводятся с согласия соавторов.

Работа была выполнена в период 2006 - 2012 гг. на базе Межвузовского научно-исследовательского центра коллективного пользования ВятГУ и ООО «Агровет» (Кировская обл., пгт Левинцы).

Объем и структура диссертации. Работа изложена на 109 страницах машинописного текста. Диссертационная работа включает: введение, аналитический обзор, выбор направления исследований, теоретические и экспериментальные исследования, обобщение результатов исследований, выводы и заключение. Список использованной литературы включает 123 источника, из них 100 отечественных, 17 - иностранных и 6 - материалы из сети Интернет. Работа иллюстрирована 11 таблицами и 17 рисунками, содержит 2 приложения.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология (в том числе бионанотехнологии)», Пиков, Александр Васильевич

выводы

1. Выбран и обоснован мембранный способ концентрирования бруцелл.

2. Выбран способ и отработаны режимы стерилизации установки «Сартокон-2».

3. Отработаны режимы концентрирования глубинных культур Brucella melitensis Rev-1 на установке мембранной фильтрации «Сартокон-2».

4. Разработана технология концентрирования глубинных культур вакцинного штамма Brucella melitensis Rev-1, с использованием установки мембранной фильтрации «Сартокон-2».

5. Приготовленные вакцинные препараты на основе микробных концентратов, полученных с использованием разработанной технологии концентрирования, отвечают требованиям НД.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

И в заключение следует отметить, что в начале 2000-х годов в России сложилась напряженная обстановка с обеспечением средствами профилактики, лечения и диагностики бруцеллеза мелкого рогатого скота.

Как известно, одним из основных средств профилактики бруцеллезной инфекции является вакцина бруцеллезная живая сухая из штамма Brucella melitensis Rev - 1. Однако используемая в технологии производства недостаточно стандартная схема концентрирования нативных культур не всегда позволяет гарантированно получать полуфабрикаты бруцеллезной вакцины.Решение этой проблемы представлялось возможным с помощью новых технологий, предусматривающих внедрение мембранной техники.

Учитывая вышеизложенное, основной целью настоящей работы являлась разработка технологии концентрирования культуры глубинной культуры вакцинного штамма Brucella melitensis Rev-1 для приготовления живой сухой вакцины против бруцеллеза овец и коз.

На первом этапе настоящей работы была оценена возможность использования мембранной техники для получения концентратов вакцины, оценены материалы мембран, способ и режимы их стерилизации. Показано, что использование мембран «Ультрасарт» на основе полисульфона с диаметром пор 300 кДа позволяет получать кондиционные концентраты, отвечающие требованиям НД. Также показана целесообразность использования мембран на основе полисульфона с диаметром пор 300 кДА, по сравнению с другими типами изученных мембран.

Исследовано влияние параметров процесса стерилизации на показатели качества подготовки мембранной техники.

На заключительном этапе работы были получены серии вакцины бруцеллезной живой сухой, приготовленной с использованием разработанной технологии концентрирования. Образцы препаратов, как свидетельствуют их испытания, по показателям качества полностью соответствовали требованиям НД.

Таким образом, в результате проведенных исследований разработаны требования к материалам мембран, выбрана установка, отработаны режимы ее стерилизации и концентрирования, позволяющие получать полуфабрикаты вакцинных штаммов возбудителей бруцеллеза и готовить на их основе вакцину бруцеллезную живую сухую, соответствующую требованиям на вакцинный препарат.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Пиков, Александр Васильевич, 2012 год

1. М.В. Гусев, Минеева Л.А. Микробиология.-М.: Академия, 2003. -464 с.

2. Бруцеллез сельскохозяйственных животных. Под редакцией профессора И. А. Косилова.- Новосибирск, 1999.

3. Авилов В.М, Бруцеллез животных и его специфическая профилактика /В.М. Авилов, В.В. Селиверстов, В.Ф. Пылинин и др.// Ветеринария.- 1997.-№7.-С. 3-13.

4. Авилов В.М. Состояние и перспектива специфической профилактики бруцеллеза овец /В.М. Авилов, И.А. Косилов, П.К. Аракелян Ветеринария. -1999. №3. С. 8-12.

5. Шумилов К.В. Бруцеллёз животных и его специфическая профилактика / Шумилов К.В., Авилов В.М., Калмыков В.В// Ветеринария. -1997.-№4.-С. 3-13.

6. Шумилов К.В., Скляров О.Д. Бруцеллез животных в России и его специфическая профилактика// Сб. науч. тр. ВГНКИ.-М., 2005.-С. 182-187.

7. Авилов В.М. Специфическая профилактика при бруцеллезе овец в экспериментальных условиях /В.М. Авилов, И.А. Косилов, П.К. Аракелян// Ветеринария.- 2002. № 11.- С. 9-12.

8. Таран И.Ф. Бруцеллез (микробиология, иммунология, эпидемиология, профилактика) / Таран И.Ф., Лямкин Г.И. // Ставрополь: БОТХН, 1996.-176с.

9. Кассал Б.Ю. «Бруцеллёз сельскохозяйственных животных». Омск 1989 г. С. 88-98.

10. Ашепа М.Б. Опыт оздоровления хозяйств от бруцеллеза /М.Б. Ашепа, Н.В. Маковеев, А.Т. Баннов//Ветеринария. -1973. -№2.-С.47-48.

11. Иванов М.М. Оценка эффективности противобруцеллезных вакцин из штаммов 82, 89/23, Н-12 и Rev-1 /М.М.Иванов // Ветеринария. 1971. -№7.-С. 32-34.

12. Иванов A.A. Сравнительная характеристика противоэпизоотической эффективности некоторых противобруцеллезных вакцин в овцеводческих хозяйствах. Автореф. дис. к.в.н. Омск, 1996.-20 с.

13. Юсупов О.Ю. Результаты испытания вакцины из штамма B.melitensis Rev-1 для иммунизации овцематок и ярок /О.Ю. Юсупов, JI.B. Малушко, Г, Хаитов //Труды ДагНРГОИ. 1984. С. 7-9.

14. Абылдаев М.А. Материалы сравнительного производственного испытания вакцин из штаммов 53Н38 и 45/20, 19 и Рев-1 /Абдылдаев М. А., Шумилов К.В., Ким В.И. и др. //Меры борьбы с болезнями с.-х. животных и птиц в Киргизии.-1988.-Вып. 2.- С. 52-60.

15. Бруцеллез. Под редакцией Вершиловой П.А. -М.: Медицина, 1972 г.-439 с.

16. Уласевич П.С. Стабильность свойств штамма B.melitensis Rev-1. /П.С. Уласевич//Труды ВИЭВ,- 1965.- Т.31,- 18-25.

17. Alton G.G. Rev.l Brucella melitensis vaccine. The stability of the degree of attenuation /G.G. Alton S.S. Elberg., D. Crouch, J.Comp.// Path.- 1967.-Vol.77.- P.293-300.

18. K.B. Шумилов. Эталонная серия вакцинного штамма B.melitensis Rev-1. / K.B. Шумилов, У.Э. Ниязов, H.A. Михайлов и др.// Сборник научных трудов ВГНКИ. М. -1983. С. 3-11.

19. Бровик Е.А. Реактогенность овец при различных способах иммунизации вакциной из штамма B.melitensis Rev-1 Е.А. Бровик Бюл.ВИЭВ, 1990.-ВЫП.75.-С.25-27.

20. Клочков Г.С., Скореев A.A. Реактогенность вакцины из штамма Рев-1. Пути совершенствования профилактики и диагностики бруцеллеза с.-х. животных Сб. науч. тр, Омск, 1990. 58-62.

21. Уласевич П.С., Аливердиев A.A., Юсупов О.Ю. и др. Сравнительное изучение на овцах иммуногенных свойств бруцеллезных вакцин из штаммов B.melitensis Rev-1 и В.abortus 19. Сб.науч.тр. ДагНИВИ.-1972. Т.5. 70-80.

22. Уласевич П.С., Аливердиев A.A., Юсупов О.Ю. Иммунизация овец вакциной из штамма Brucella melitensis Rev-1 //Ветеринария.-1975.-№12.-С. 57-59.

23. Иванов Н.П. и др. Состояние иммунитета против бруцеллеза у овец в различные сроки после вакцинации и ревакцинации вакциной из штамма Рев-1//Меры борьбы с туберкулезом и бруцеллезом с.-х. животных в Казахстане.- Алма-Ата, 1986.- С. 16-26.

24. Юсупов О.Ю. Опыт борьбы с бруцеллезом овец//Ветеринария.-1983.-№6.-С. 15-16.

25. Шумилов К.В., Акулов А.В. Изучение вакцинных штаммов Brucella abortus 104-М, Brucella melitensis Rev-1, Brucella abortus 82. //Tp. ВИЭВ.-1977.-T.45.-C.29-36.

26. Скляров О.Д. Влияние инертных газов на сохранность свойств бруцелл в вакцине из штамма Brucella abortus 19. Дис к.в.н. на правах рукописи. Москва, 1990.- 117 с.

27. Щукин Е.Д., Перцов А.В., Амелина Е.А. Коллоидная химия. М.: Высшая школа, 1992.

28. Уонг Д., Кооней Ч., Демайн А. и др. Ферментация и технология ферментов. Пер. с англ. М.: Легкая и пищевая пром. 1983г. 336 с.

29. AL-Malack М.Н. Technical and economic aspects of crossflow microfiltration// Desalimination, 2003, V. 155, No. 1, P. 89-94.

30. Соколов В.И. Современные промышленные центрифуги. М.: Машиностроение. 1967. 522 с.

31. Т. Брок. Мембранная фильтрация. М.: Мир, 1987.-464 е., с ил.

32. Свитцов А.А. Введение в мембранные технологии. М.: ДеЛи принт, 2007, 280 с.

33. Mulder М. Basic principles of membrane technology. Dodrecht: Kluwer Academic, 1995.

34. Кисиленко П.Н. Разработка электрофлотационной технологии концентрирования биосуспензий из технологических растворов и сточных вод. Автореф. дис. к.т.н., 2002.- 21 с.

35. О.В.Смирнов, С.В.Воробъева. Биосистемы. Реферат. Тюменский центр Международной Академии наук экологии и безопасности жизнедеятельности.// Режим доступа: www.roman.by|r-12984.html.

36. А.А.Баран, А.Я. Тесленко. Флокулянты в биотехнологии. Ленинград, «Химия», Ленинградское отделение, 1990.

37. Тесленко А .Я., Гирфанова Ф.А., Медведев Ю.В., Концентрирование суспензий микроорганизмов с помощью флокулянтов.- М., 1984.

38. Тимофеева С. Сточные воды предприятий молочной промышленности и современные методы их обезвреживания. Химия и технология воды, 1992, т.14,№8-С. 610-618.

39. Равич-Щербо М.И., Анненков Г.А. Физическая и коллоидная химия. М.:1968, 240 с.

40. Фридрихсберг Д.А. Курс коллоидной химии. Л.:Химия, 1984, 368 с.

41. Бортников И.И., Босенко A.M. Машины и аппаратымикробиологических производств. -Минск: Вышэйшая школа, 1982. -400 с.

42. Шкоп Я.Я. Фомченко Н.В. Агрегация клеток микроорганизмов в процессе разделения микробных суспензий.- М.: ИНТИТЕЙ микробпром, 2002.-60с.45.3апольский А.К., Бирни А.А. Коагулянты и флокулянты в процессе очистки воды.-Л.: Химия, 1987, -203 с.

43. Бабенко Ю.Д. Очистка воды коагулянтами.- М.:Наука, 2000.- 487 с.

44. Золотов Ю.А. Основы аналитической химии в двух книгах. Книга 1. Общие вопросы. Методы разделения. Учеб. для вузов.-2-е изд., перераб. и доп.- М.: Высш. шк., 2000.- 351 е., с ил.

45. Р.Г. Кочаров, Г.Г. Каграманов. Расчет мембранного разделения жидких смесей. РХТУ им. Д.И. Менделеева.-М.,2001.-128 с.

46. Bowen W.R., Jenner F. Theoretical descriptions of membrane filtrations of colloids and fine particles: an assessment and review// Adv. Colloid Interface Sci., 1995, V. 56, P. 141-200.

47. Жужиков B.A. Фильтрование. M.: Химия, 1971.

48. Патент РФ № 2077216 A23C19/02 A23C19/024 1997. Способ осаждения белков молока.5 2. Патент РФ № 2065703 A23J1/20 A01J11/00 1996. Способ изоэлектрической коагуляции белков молочной сыворотки и электролизер для его осуществления.

49. Измайлова В.Н. Нарушение устойчивости дисперсных систем -основа очистки сточных вод// Итоги науки и техники. М.: ВИНИТИ, 1988. -20,- 6-33.

50. Мархасин И.Л., Утящева Л.Х., Назаров В.Д. Физико-химические методы очистки сточных вод// Итоги науки и техники. -М.:В1ШИТИ, 1977. 20.-С. 34-59.

51. C.B. Яковлев, И.Г. Краснобородько, В.М. Рогов. Технология электрохимической очистки воды. Ленинград. Стройиздат. Ленинградское отделение, 1987.

52. Господинов Д.Г., Шкарин A.B., Способ электрохимической очистки сточных вод от взвешенных частиц и нефтепродуктов. Патент РФ № 2307797.

53. Патент РФ № 2094384 С 02 F 1/463, 1/465, 1997. Электрохимический способ очистки белковосодержащих жидких сред и устройство для его осуществления.

54. Кисиленко П.Н., Тушев A.A., Колесников В.А. Разработка электрофлотационной технологии концентрирования белковых веществ из растворов. Успехи в химии и химической технологии: Тез. докл.: Вып. XIV: Ч.5./РХТУ им. Д.И. Менделеева. М., 2000., с.40.

55. Дытнерский Ю.И. Мембранные процессы разделения жидких смесей. М., «Химия», 1975, 232 с.

56. Дытнерский Ю.И. Обратный осмос и ультрафильтрация. М.: Химия, 1978,- 352 с.

57. С.Т. Хванг, К. Каммермейер. Мембранные процессы разделения. М.: Химия, 1981.

58. М. Мудлер. Введение в мембранную технологию. М.: Мир, 1999, 513 с.

59. Лейси P.E., Леб С. Технологические процессы с применением мембран. М.: Мир, 1976, С. 240-269.

60. М.Т. Брик. Энциклопедия мембран в двух томах. «Киево-Могилевская академия» 2005 Г.-660 с.

61. Н.П. Блинов. Основы биотехнологии. Издат.: Наука, 1995. 600 с.

62. Начинкин О.И. Полимерные микрофильтры. М.: Химия, 1985.-216 е., с ил.

63. Концентрирование белоксодержащих растворов.// Режим доступа: www.septech.ru.

64. Ультра и микрофильтрация.// Режим доступа: www.membrane.msk.ru.

65. Новый подход к управлению рисками при производстве ЛС.// Режим доступа: www.healtheconomics.ru.

66. Крашенюк А.И. Способ получения живой гриппозной вакцины. Патент РФ №2033182.

67. Новиков В.И., Баталова Т.А. Способ получения антитоксической сыворотки. Патент РФ № 2062617.

68. Казьянин A.B. Стратегия и тактика использования отечественных медицинских иммунобиологических препаратов в системе эпидемиологического контроля за HBV-инфекцией. Автореф. дисс. на соиск. уч.ст. дмн. на правах рукописи, 2005.

69. Петров В.Ф., Николаева A.M., Казьянин A.B., Пархоменко Т.Г., Борисова В.Н., Мельников В.А., Буданов М.В. Противовирусный препарат и способ получения иммуноглобулина для профилактики и лечения вирусных заболеваний. Патент РФ №2144379.

70. Долгов Д.Л. Конструирование ассоциированной пятивалентной вакцины против вирусных болезней птиц инактивированной эмульсионной. Автореф. дисс. на соиск. уч.ст. к.в.н. на правах рукописи, 2008.

71. Анкер С.С., Лещенко А.А., Комоско Г.В., Шевцов А.Н., Савельев С.П. Способ концентрирования споровых культур в производстве сибиреязвенных вакцинных препаратов. Патент РФ № 2151798.

72. Брык М.Т., Цапюк Е.А. Ультрафильтрация. АН УССР. Ин-т коллоидной химии и воды им. А.В. Думанского.- Киев: Наук, думка, 1989, 283 с.

73. Стромберг А.Г., Семченко Д.П. Физическая химия. -4-е изд., испр. -М.: Высш. шк., 2001. 527 С., с ил.

74. Jonson G, Dialisis// Synthetic membranes: science, engineering and applications/ Ed. by P.M. Bungay, H.K. Lonsdale and M.N. de Pinto. Dordrecht: D. Reidel Publishing company, 1986.

75. Polotsky A.E., Cherkasov A.N. Mechanism of selective transport through ultrafiltration membranes from the standpoint of generalized sieving model // 41st Microsymposium on Polymer Membranes. Praque, July 15-19, 2001. Book of Abstracts, p. 57.

76. Lee S., Park G., Amy G., Hong S.-K., Moon S.-H., Lee D.-H., Cho J. Determination of membrane pore size distribution using the fractional rejection of nonionic and charged macromolecules// J. Membr. Sci., 2002. V. 201, No. 1-2, P. 191-201.

77. Nakao S. Determination of pore size and pore size distribution. 3. Filtration membranes // J. Membr. Sci. 1994. V. 96, p. 131-165.

78. Sleytr U.B., Sara M. Ultrafiltration membranes with uniform pores from crystalline bacterial cell envelope layers (Mini-review) // Appl. Microbiol, and Biotechnol. 1986. V. 25, p. 83-90.

79. Cornelissen E.R., van den Boomgaard Th., Strathmann H. Physicochemical aspects of polymer selection for ultrafiltration and micro filtration membranes// Colloids and Surfaces, Ser. A, 1998, V. 138, No. 2-3, P. 283-289.

80. Drioli. Membrane Science And Technology. Elsevier Science. 2005. 516 P.

81. Baker R.W. Membrane Technology and Applications. Wiley. 2004.

82. Rijn C.J. Nano and Micro Engeneered Membrane Technology. Elsevier Science & amp; Technology Books. 2004. P. 399.

83. Z.F. Gui, H.S. Muralidhara. Membrane Technology. ButterworthHeinemann. 2010. P. 312.

84. Поляков B.C., Максимов Е.Д., К вопросу моделирования процесса проточной микрофильтрации// ТОХТ, 1995, Т. 29, №3, С. 300-308.

85. Поляков С.В., Максимов Е.Д., Поляков B.C. Об одномерной модели микрофильтрации// ТОХТ, 1995, Т. 29, №4, С. 357-361.

86. Поляков Ю.С., Казенин Д.А., Максимов Е.Д., Поляков С.В. Кинетическая модель объемной фильтрации с обратимой адсорбцией// ТОХТ, 2003, Т. 37, №5, С. 471-478.

87. Баренблатт Г.И., Ентов В.М., Рыжик В.М. Теория нестационарной фильтрации жидкости и газа. М., «Недра», 1972.

88. И.В. Тихонов, Е.А. Рубан, Т.Н. Грязнева, А.Я. Самуйленко, В.А. Гаврилов. Биотехнология. СПб.: ГИОРД, 2005.

89. Поляков С.В. Концентрационная поляризация в узком канале с полупроницаемыми стенками и турбулизатором// ТОХТ, 1992, Т. 26, №4, С. 534-539.

90. Briant P.L.T. Concentration polarization in reverse osmosis desalimination with variable flux and incomplete salt resection// Ind. Eng. Chem. Fundam., 1965, V. 4, No. 4, Р/ 439-445.

91. Поляков C.B., Максимов Е.Д. К расчету процесса ультрафильтрации в плоском канале при образовании геля на поверхности мембраны// ТОХТ, 1986, Т. 20, №4, С. 448.

92. Bowen W.R., Yousef H.N.S., Calvo J.I., Dynamic crossflow ultrafiltration of colloids: a deposition probability cake filtration approach// Separ. Purif. Technol., 2001, V. 24, P. 297-308.

93. Hong S., Faibish R.S., Elimelech M. Kinetics of Permeate Flux Decline in Crossflow Membrane Filtration of Colloidal Suspensions// J. Colloid Interface Sci., 1997, V. 196, No. 2, P. 267-277.

94. H.C. Орлов. Ультра- и микрофильтрация. Теоретические основы. М. МХТИ. 1990.

95. Дытнерский Ю.И. Баромембранные процессы. Теория и расчет. М.: Химия, 1986, 272 с.

96. Черкасов А.Н., Пасечник В. А. Мембраны и сорбенты в биотехнологии. -JL: Химия, 1991.-240 с.

97. Chercasov A.N., Pokotsky А.Е., Critical partical-to-pore size ratio in ultrafiltration//J. Membr. Sci., 1995, V. 106, No. 1-2, P. 161-166.

98. Дубяга В.П., Перепечкин Jl.П., Каталевский Е.Е. Полимерные мембраны. М.:. Химия, 1981.-231 с.

99. Jonsson С., Jonsson A.-S. Influense of the membrane material on the adsorptive fouling of ultrafiltration membranes// J. Membr. Sci., 1995, V. 108, No. 1-2, P. 79-87.

100. McGure K.S., Lawson K.W., Lloyd D.R. Pore size distribution determination from liquid permeation through microporous membranes// J. Membr. Sci., 1995, V. 99, No. 2, P.127-137.

101. Использование ультрафильтрации в процессе переработки молока.// Режим доступа: www.worldreferat.ru .

102. Установки микрофильтрационные.// Режим доступа: www.chemanalitica.com .

103. Ковалев С.В., Хрипков Ю.И. Процессы и аппараты биотехнологии.-М.: ВАХЗ, 1998.

104. Поляков Ю.С. Ультра- и микрофильтрация в половолоконных аппаратах с образованием осадка на поверхности мембран. Дис. на соиск. уч. ст. к.т.н. Москва, 2004, 150 с.

105. Лялин В.А. Теория, практика создания и внедрения аппаратов и установок для ультрафильтрации биологических растворов и сушкиполучаемых растворов. Автореф. дис. на соиск. учен. степ. д.т.н.- М., 1991.-53 с.

106. Зенов Н.И. Совершенствование технологии производства вакцины против бруцеллеза из штамма Brucella abortus 82. Автореф. дис. на соиск. учен. степ, канд.вет.наук.- М., 1992.-18 с.

107. Рахимбаев С.Ж. Технология непрерывного культивирования Brucella melitensis Rev-1 в биологических реакторах. Дисс. на соиск. уч.ст. к.вет.н. Алма-Ата, 2007.- 140 с.

108. Регламент производства РП №938420-017-46392258 «Вакцина против бруцеллеза овец и коз и инфекционного эпидидимита баранов из штамма Brucella melitensis Rev-1 живая сухая» ООО «Агровет», 2007.

109. Ашмарин И.П., Воробьев A.A. Статистические методы в микробиологических исследованиях.- Л.: Медгиз, 1962.

110. Инструкция по эксплуатации установки «Сартокон-мини», Владимир, «Владисарт», 2001.

111. Паспорт на мембрану «Ультрасарт» на основе полисульфона с диаметром пор 300 кДа для установки «Сартокон-мини», Владимир, Владисарт, 2007.

112. Паспорт на мембрану «Микросарт» на основе полипропилена с диаметром пор 0,2 мкм для установки «Сартокон-мини», Владимир, Владисарт, 2007.

113. Паспорт на мембрану «Микросарт» на основе ацетата целлюлозы с диаметром пор 0,2 мкм для установки «Сартокон-мини», Владимир, Владисарт, 2007.

114. Паспорт на мембрану «Микросарт» на основе ацетата целлюлозы с диаметром пор 0,45 мкм для установки «Сартокон-мини», Владимир, Владисарт, 2007.

115. Инструкция по эксплуатации установки ультра-микрофильтрации «Сартокон-2», Владимир, «Владисарт», 2001.

116. Дж. Ф. Уокер. Формальдегид, пер. с англ. П.П. Коржева. М.: 1957, 608 с.

117. Парр Г.С., Рожанская Т.И. Ультрафильтрационные процессы выделения биологически активных веществ. М.: ЦБНТИ Медбиопрома, 1986. Вып. 6, 32 с.

118. Паспорт на мембрану «Ультрасарт» на основе полисульфона с диаметром пор 300 кДа для установки «Сартокон-2», Владисарт, 2007.

119. ВЕДОМОСТЬ ИЗМЕНЕНИИ №1 к регламенту производства РП №938420-017-46392258 «Вакцина против бруцеллеза овец и коз и инфекционного эпидидимита баранов из штамма Brucella melitensis Rev-1 живая сухая»г. Киров, 2011

120. УТВЕРЖДАЮ» Заместитель генерального директор ООО «Агровет Комоско Г ВТ^уЛ^^2/^г2011 г

121. Инструкция по подготовке установки «Сартокон-2» и проведению процесса концентрирования глубинной культуры штамма Brucella melitensis Rev-1 на установке «Сартокон-2»г. Киров, 2011