Разработка технологии приготовления нового пробиотического продукта "Стевилонг" тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Черняев, Сергей Иванович

  • Черняев, Сергей Иванович
  • кандидат биологических науккандидат биологических наук
  • 1999, Калуга
  • Специальность ВАК РФ03.00.23
  • Количество страниц 146
Черняев, Сергей Иванович. Разработка технологии приготовления нового пробиотического продукта "Стевилонг": дис. кандидат биологических наук: 03.00.23 - Биотехнология. Калуга. 1999. 146 с.

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Черняев, Сергей Иванович

Оглавление

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1 Функции защитной микрофлоры желудочно-кишечного тракта человека, последствия нарушений ее баланса и роль пробиоти-ковв укреплении неспецифической резистентности

1.2 Значение и пути оптимизации бифидофлоры человека

1.3 Роль пробиотиков в укреплении здоровья людей

1.4 Механизм действия пробиотиков

1.5 Природный подсластитель - натуральная биологически активная добавка растительного происхождения «Стевиозид»

1.6 Создание новых продуктов функционального питания -ключевое направление в обеспечении защиты человеческой популяции от неблагоприятного воздействия окружающей среды

Глава 2. Материалы и методы исследований

2.1 Штаммы бифидобактерий

2.2 Кефирные грибки

2.3 Сухое обезжиренное молоко

2.4 Биологически активная добавка растительного происхождения «Стевиозид»

2.5 Приготовление кисломолочных пробиотиков с использованием молочнокислых микроорганизмов

2.5.1 Приемка и подготовка компонентов

2.5.2 Гомогенизация, пастеризация (стерилизация) молока и охлаж- 47 дение до температуры внесения закваски

2.6 Приготовление заквасок

2.6.1 Методика приготовления производственной закваски бифидобактерий

2.6.2 Методика приготовления грибковой кефирной закваски

2.7 Приготовление кисломолочного продукта

2.8 Определение культуральных свойств штаммов бифидобактерий

на различных питательных средах

2.9 Методы определения специфической активности препаратов и продуктов функционального питания

2.10 Методы определения количества живых микроорганизмов (КОЕ)

2.11 Определение активности кислотообразования экспериментально-производственных серий продукта

2.12 Определение антагонистической активности штаммов бифидо-бактерий находящихся в продукте

2.13 Требования к проведению микробиологического контроля чистоты продукта

2.14 Оборудование для производства лечебно-диетических кисломолочных продуктов

Глава 3. Экспериментально-лабораторные исследования

штаммов, входящих в состав закваски, при изготовлении поликомпонентного кисломолочного пробиотика «Стеви-лонг»

3.1 Оценка динамики развития штаммов бифидобактерий и кефирных грибков при совместном и раздельном культивировании

3.2 Изучение кислотообразующей активности штаммов бифидобактерий и кефирных грибков

3.3 Изучение антагонистической активности ассоциированных штаммов бифидобактерий

3.4 Изучение адгезивных свойств бифидобактерий

3.5 Изучение адгезивности производственно-перспективных штаммов бифидобактерий

3.6 Изучение бактериоциногенных свойств бифидобактерий

3.7 Разработка технологии приготовления нового пробиотического продукта «Стевилонг»

3.8 Определение удельной и активной кислотности продукта при внесении стевиозида в различных концентрациях

3.9 Сравнительная характеристика органолептических показателей продукта при внесении стевиозида в различных концентрациях

3.10 Конструирование кисломолочного продукта с использованием сложных поликомпонентных заквасок и стевиозида

3.10.1 Виды продукта

3.10.2 Характеристика компонентов и основных материалов

3.11 Описание биотехнологического процесса ферментации

3.11.1 Приемка сырья и приготовление нормализованной смеси

3.11.2 Гомогенизация, пастеризация и охлаждение молока

3.11.3 Заквашивание и сквашивание смеси, перемешивание и охлаждение

3.12 Характеристика полученного продукта

3.13 Проведение испытаний готового продукта

3.14 Контроль закваски на отсутствие посторонней микрофлоры

3.15 Полный контроль готового кисломолочного продукта

3.15.1 Определения количества живых бифидобактерий

3.15.2 Параллельное контрольное тестирование продукта

Глава 4. Приготовление и контроль кисломолочного

пробиотика «стевилонг» в производственных

условиях

4.1 Оборудование необходимое для производства кисломолочного продукта «Стевилонг»

4.2 Схема комбинированного цеха-модуля для производства кисломолочных продуктов функционального назначения

4.3 Схема обособленного цеха-модуля для производства кисломолочных продуктов функционального назначения

4.4 Описание промышленного производства кисломолочного продукта «Стевилонг»

4.5 Характеристика полученного продукта

4.6 Микробиологический контроль кисломолочного продукта «Стевилонг»

4.6.1 Проведение испытаний готового продукта

4.6.2 Средняя проба готового продукта

4.6.3 Контроль закваски на отсутствие посторонней микрофлоры

4.7 Полный контроль готового кисломолочного продукта

4.8 Определения количества живых бифидобактерий

4.9 Контрольное тестирование продукта органами ГСЭН

Глава 5. Доклинические и клинические испытания

кисломолочного пробиотика «Стевилонг»

Заключение

Выводы

Практические предложения

Список литературы

Приложения

Рекомендованный список диссертаций по специальности «Биотехнология», 03.00.23 шифр ВАК

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка технологии приготовления нового пробиотического продукта "Стевилонг"»

Введение

Актуальность, новизна, научная и практическая значимость проблемы

В условиях всё возрастающей интенсификации техногенного воздействия цивилизации - широкого применения ксенобиотиков, включая хи-миотерапевтические препараты, воздействия физических и биологических факторов, локальных и глобальных экологических катастроф, происходят значительные микроэкологические нарушения в человеческом организме, имеющие серьёзные последствия, как для отдельных индивидуумов, так и для общества в целом.

Иными словами, эти факторы оказывают крайне негативное воздействие на биологическую составляющую иммунной системы - нормальную аутофлору человека.

Перечисленные факторы могут быть ответственны за селекцию и распространение в природе штаммов микроорганизмов с атипическими свойствами, и за формирование в организме человека новых микробных сообществ.

К важным последствиям воздействия ксенобиотиков на нормальную аутофлору человека нужно отнести и формирование контингентов с врожденной сниженной резистентностью к условно-патогенным микроорганизмам.

Изменение этиологической структуры известных инфекционных заболеваний, с заменой традиционных патогенов на антибиотикорезистент-ные условно-патогенные микроорганизмы, также, в определённой степени, обусловлено ослаблением той части микрофлоры хозяина, которая ответственна за сохранение индивидуальной стабильности микробиоценозов и колонизационную резистентность.

Спектр клинических синдромов и патологических состояний, этио-патогенез которых, как полагают, может быть связан с изменением состава и функций нормальной микрофлоры, населяющей организм хозяина, в настоящее время достаточно широк и имеет тенденцию к увеличению.

Полноценная жизнедеятельность человека невозможна без нормального функционирования целостного экологического комплекса макро- и микроорганизмов.

Организм человека и его микрофлора существуют в состоянии постоянного взаимодействия, протекающего в условиях влияния факторов внешней среды.

Микрофлора, совместно с соответствующим биотопом, представляет собой микробную экологическую систему.

Специалистами отмечаются значительные сдвиги в аутофлоре человека, вызванные такими факторами, как изменение среды обитания, возрастание стрессовых нагрузок, бесконтрольное и бессистемное применение антибиотических и сульфаниламидных препаратов, а также лучевая и химиотерапия.

Одним из глобальных факторов нарушения общего гомеостаза населения является экологический прессинг, связанный с радиационными катастрофами. Например, авария на Чернобыльской АЭС затронула ряд областей России, в том числе Калужскую, Брянскую, Орловскую, Смоленскую.

Воздействие радиации, даже в относительно небольших дозах, нарушает способность организма самому управлять восстановлением ау-тофлоры.

Пагубное воздействие Чернобыля затронуло и неспецифическую составляющую иммунной системы человека - аутофлору, ослабив естественный иммунитет организма.

Проблема усугубляется также наблюдающимся дефицитом в рационе питания россиян биологически активных компонентов, растительных тканей, витаминов, ненасыщенных жирных кислот, минеральных веществ.

Одной из проблем нынешнего времени становится профилактика и лечение пострадиационных дисбактериозов, поскольку в развитии радиационного синдрома желудочно-кишечный симптомокомплекс является определяющим.

По данным Института питания РАМН, 30 процентов населения России имеют различные поражения системы пищеварения, изменяющие процессы всасывания и переваривания пищевых веществ, а миллионы людей нашей страны страдают сахарным диабетом или входят в группу диабетического риска.

По мнению ведущих специалистов мира, решить проблему оздоровления населения можно при помощи бактериопрофилактики и бактерио-терапии, в т. ч. потреблением продуктов питания с биологически активными добавками (БАД), корректирующими их пищевую ценность, обладающими, к тому же, антимутагенными свойствами. В последнее время БАД рассматриваются как многофункциональные регуляторы микробиоценоза желудочно-кишечного тракта, деконтаминанты, антиоксиданты, иммуномодуляторы, нормализаторы холестеринового обмена, источники сбалансированного поступления микронутриентов и т.д.

Восстановить баланс аутофлоры можно потребляя в пищу, например, кисломолочные продукты-эубиотики (пробиотики) на основе бифи-до- и лактобактерий, а также метаболически сходных с ними других представителей нормальной микрофлоры человека.

Особый интерес представляют кисломолочные продукты^ ферментированные симбиотическими заквасками, основанными на штаммах бифи-добактерий, лактобацилл, кефирных грибках, т.е. микроорганизмах, спо-

собных адаптироваться в желудочно-кишечном тракте и оказывать благотворное влияние на процессы обмена и всасывания.

Вопрос о целесообразности промышленного производства и применения пробиотиков, основанных на ассоциациях бифидобактерий и лактобацилл, для нормализации микробиоценоза макроорганизма и, в первую очередь, его кишечника решен положительно в разных странах мира.

В настоящее время существует большое число моно- и комплексных биопродуктов, в состав которых входят различные виды бифидобактерий, лактобацилл, а также препараты, содержащие наряду с живыми клетками данных микроорганизмов и различные биологически активные добавки (витамины, ферменты, различные бифидогенные факторы).

Включение бифидобактерий в состав продуктов лечебно-диетического и детского питания, особенно для детей первого года жизни, является целесообразным, как для профилактики, так и для лечения дисбактериозов кишечника.

В настоящее время во многих странах мира выпускается свыше 250 различных разновидностей кисломолочных продуктов диетического и детского питания, причем на долю Европы, в основном Северного ее региона, приходится 62% мирового выпуска этих продуктов, Азии - 29%, Африки - 5,5%, Северной Америки - 3% и Южной Америки - 0,5%.

В Японии широко применяются разнообразные кисломолочные продукты на основе бифидобактерий. За рубежом разработано промышленное производство ферментированных продуктов, заквасками которых являются как монокультуры микроорганизмов видов B.bifidum, В. longum, В.breve, так и в сочетании со штаммами семейства Lactobacillus, например, L.acidophilus, S.thermophilus, L.bulgaricus. В России на основе представителей бифидобактерий и лактобацилл разработаны ацидофиль-

ные адаптированные смеси "Малютка", "Бифилин", "Бифилакт", "Биолакт", "Балдырган", "Балбобек", "Лактовит", "Аэлита" и др.

Биопрепараты, выпускаемые в сухих фармакопейных формах - би-фидумбактерин, лактобактерин, бификол (Россия), лиобифидус, бифидо-гене (Франция), эугалан (Швейцария), омнифлора (Германия), сеактон, релактон, лактобациллин (Чехия, Словакия) и другие, содержат либо один вид бифидобактерий, лактобактерий или кишечных палочек, либо комплекс этих видов.

Данные по видовому составу бифидофлоры у детей и взрослых, а также данные клиницистов о недостаточной эффективности существующих сухих моно- и комплексных препаратов, позволили нам обосновать целесообразность производства продуктов функционального питания, содержащих в составе заквасок ассоциации таких видов бифидобактерий как, B.bifidum, B.longum и L.acidophilus, которые наиболее соответствуют потребностям детей первых лет жизни и взрослых.

Решить проблему обеспечения кисломолочными пробиотиками детского населения РФ, предполагалось целевой Федеральной Программой "Дети России". Обеспечение кисломолочными пробиотиками детского населения территорий, подвергшихся радиационному загрязнению, должны были осуществлять промышленные предприятия, строительство которых, в соответствие с целевой Федеральной Программой "Дети Чернобыля", намечалось в Брянской и Орловской областях.

Федеральная программа "Диабет" была призвана позаботиться о специальных продуктах питания, предназначенных для больных сахарным диабетом.

Однако из-за высокой проектной стоимости и отсутствия финансирования, данные Программы не были реализованы.

Целью данной работы является разработка технологии приготовления нового пробиотического кисломолочного продукта, обогащенного

стевиозидом и содержащего в качестве действующего начала поликомпонентную закваску, основанную на штаммах эубиотиков различных видов.

Задачами данной работы являются:

- изучение биологических свойств различных видов бифидобактерий и кефирных грибков по совместимости их в поликомпонентном пробио-тике для создания, на их основе, нового кисломолочного продукта.

- разработка на основе бифидобактерий и кефирных грибков лабораторной технологии получения нового пробиотического кисломолочного продукта "Стевилонг", содержащего подсластитель растительного происхождения;

- апробация лабораторной технологии приготовления пробиотического продукта "Стевилонг" на биотехнологических модулях и разработка нормативно-технической документации для его промышленного производства.

Научная новизна. Впервые разработан новый кисломолочный продукт "Стевилонг", обладающий широким спектром защитных факторов, содержащий в качестве действующего начала два вида бифидобактерий (В.Ыйёит и ВЛог^ит), кефирные грибки и стевиозид - природный подсластитель растительного происхождения.

Впервые установлена оптимальная концентрация стевиозида, не оказывающая негативного влияния на микробиологические процессы приготовления продукта и на углеводный обмен в организме человека при его потреблении.

Практическая значимость работы.

На основе лабораторных исследований и производственных испытаний, разработана биотехнологическая линия, оснащенная отечественным оборудованием и позволяющая получать пробиотический продукт "Стевилонг" и другие лечебно-диетические продукты.

Разработаны Технические условия и Технологическая инструкция на производство кисломолочного продукта «Стевилонг», которые утверждены Институтом питания РАМН для широкого использования в практике здравоохранения.

Пробиотик "Стевилонг" внедрен в промышленное производство на двух предприятиях Калужской области: АО «Маслодельный завод «Куйбышевский» и КАП «Коммунар».

Результаты данной работы взяты за основу при разработке и реализации целевых областных программ «Развитие индустрии детского питания в Калужской области», «Диабет», «Профилактика йоддефицитных состояний» и «Техническое переоснащение предприятий пищевой и перерабатывающей отраслей АПК Калужской области».

Положения, выносимые на защиту.

1. Биологическая оценка динамики развития, кислотообразующей активности, адгезивности и бактериоциногенности бифидобактерий различных видов в моно-культурах и ассоциациях друг с другом и кефирным грибком.

2. Промышленная биотехнология производства нового кисломолочного пробиотического продукта "Стевилонг".

Похожие диссертационные работы по специальности «Биотехнология», 03.00.23 шифр ВАК

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Черняев, Сергей Иванович

Выводы

1. Изучение биологических свойств штаммов бифидобактерий В. ЫШит и В. 1оп§дт показало, что они обладают выраженной адгезивностью и бакте-риоциногенностью. Наличие антагонистической активности не оказало существенного взаимовлияния их друг на друга, что позволяет использовать их в комплексном препарате (закваске).

2. Исследования комплексного препарата выявили, что он обладает большей антагонистической активностью по отношению к патогенным и условно-патогенным микроорганизмам в сравнении с монопрепаратами из этих же штаммов.

3. Установлена оптимальная концентрация стевиозида (0,3 %), не оказывающая негативного влияния на микробиологические процессы приготовления продукта и на углеводный обмен в организме человека при его потреблении.

4. Создан новый кисломолочный пробиотик "Стевилонг", основу которого составляют бифидобактерии двух видов (В. ЫШит и В. 1оп§ит), а также кефирные грибки и подсластитель растительного происхождения.

5. На основе исследований биологических свойств молочнокислых микроорганизмов, в лабораторных и производственных условиях, разработана биотехнологическая линия, оснащенная отечественным оборудованием, позволяющая получать пробиотический продукт "Стевилонг" и другие лечебно-диетические продукты.

6. В результате проведенных доклинических и клинических испытаний установлено, что новый пробиотический продукт "Стевилонг" обеспечивает улучшение микробиоценоза кишечника, предотвращает возникновение кожных аллергических проявлений и является перспективным для применения у больных сахарным диабетом.

7. Разработана нормативно-техническая документация по приготовлению

Стевилонга» и введены в эксплуатацию два биотехнологических модуля для промышленного производства лечебно-диетических продуктов.

Практические предложения

1. Разработана строительно-монтажная документация на создание биотехнологических мини-модулей, производственная апробация которых позволяет рекомендовать их для широкого внедрения.

2. Разработанная нами биотехнологическая линия, в сравнении с традиционными, позволяет в 5 раз уменьшить производственные площади и энергозатраты, а также снизить затраты на оборудование в 7,2 раза.

Заключение

Рождение человека означает для него, с первых минут, замену стерильных условий внутриутробного развития, на условия существования в разнообразнейшем мире микроорганизмов. Интенсивная колонизация кожных покровов и органов, имеющих контакты с внешней средой, ведет к формированию микроэкологической системы макроорганизма.

Микроэкологическая система макроорганизма - это состояние динамического равновесия, определяемое его физиологическими и иммунобиологическими особенностями, а также видовым и количественным составом микробных ассоциаций и разнообразием их биохимической активности (Куваева И.Б., Ладодо К.С., 1991). Различные нарушения подвижного равновесия симбиотных микроорганизмов нормальной аутофло-ры, принято называть дисбиозом, дисбактериозом, микроэкологическим дисбалансом или микроэкологическими нарушениями в макроорганизме (Ардатская М.Д., 1995; Веселов А.Я., 1988; Любянская В., 1989).

В течение длительного периода применения антибактериальных препаратов в литературе появилось много сообщений о различного рода проявлениях так называемой лекарственной болезни, одной из форм которой является дисбиоз (Пинегин В.В. с соавт., 1984).

В последние годы в связи с увеличением числа детей и взрослых с нарушением обменных процессов, микробиоценоза кишечника, энзимопа-тиями и другими заболеваниями, актуальными являются поиски путей нормализации микрофлоры, поскольку нормальной микрофлоре принадлежит защитная роль в макроорганизме. Это в первую очередь относится к контингенту, проживающему на территориях, пострадавших от последствий экологических катастроф.

Таким образом, лечение и профилактика дисбиотических состояний, в настоящее время является одной из важнейших проблем современного общества.

Из вышеизложенного следует, что разработка, производство и широкое применение продуктов питания повседневного спроса на основе представителей нормальной аутофлоры человека, позволяющих производить перманентную коррекцию микроэкологического статуса пищеварительного тракта, имеют крайне важное значение для восстановления здоровья человеческой популяции.

Показано, что колонизация кишечника в первые часы жизни ребенка осуществляется хаотически, но уже ко 2-4 дню формируется "типичная микрофлора грудного ребенка", состоящая на 90-95 % из бифи-добактерий. Такое становление микрофлоры характерно для детей, родившихся в регионе с нормальной экологией.

Динамика формирования кишечной микрофлоры человека в различные периоды жизни общества нашла отражение в ряде отечественных и зарубежных работ.

Микрофлора кишечника человека состоит в норме на 85-98 % из бифидобактерий. Именно бифидофлоре принадлежит ведущая роль в нормализации микробиоценоза кишечника, улучшении процессов всасывания и гидролиза жиров, белкового и минерального обменов, поддержании неспецифической резистентности организма.

К глубокому сожалению, с каждым годом нам приходится констатировать тот факт, что состояние окружающей нас среды изменяется и не в лучшую сторону. Известно, что состояние окружающей среды -это показатель качества жизни человека. И сейчас как никогда стала актуальной проблема «человек - среда». Человечество вступило в эпоху бурного научно-технического и социально-экономического развития. По мере развития человечества растут побочные эффекты этого развития: истощение невозобновимых природных ресурсов, загрязнение окружающей среды, разрушение природных экосистем.

Индустриализация, урбанизация, новые условия труда и быта, бурное развитие химии, психоэмоциональная насыщенность жизни людей, применение новых лекарственных форм оказывает особое воздействие на человека, что выражается в непосильном напряжении для него, а также в "отступлении" человеческого организма перед новыми условиями.

Если рассматривать человеческий организм и его микрофлору как единую экологическую систему, то становится понятным, какую роль играет взаимосвязь макроорганизма и микрофлоры в состоянии здоровья человека. В настоящее время отмечается целый ряд заболеваний, которые связаны с нарушением микробиоценоза и, в первую очередь, с элиминацией бифидофлоры.

При изучении заболеваний органов пищеварения неинфекционной этиологии, показана тесная коррелятивную связь частоты обнаружения дефицита бифидофлоры и частоты обнаружения ассоциаций условно-патогенных микроорганизмов с проявлением таких заболеваний как га-стродуоденит, энтероколит, патология гепатобилиарной системы. При заболеваниях органов пищеварения патологические сдвиги в организме находятся в прямой зависимости с элиминацией бифидофлоры. Утрата сдерживающей, антагонистической функции кишечной флоры приводит к беспрепятственному размножению условно-патогенных микроорганизмов (Дорофейчук В.Г. с соавт., 1986; Тараканов Б.В., 1998).

Поиски путей нормализации микробиоценоза кишечника весьма актуальны. Одним из путей является целесообразность создания новых продуктов-эубиотиков для нормализации микрофлоры кишечника и повышения иммунологической реактивности организма.

Вопрос о целесообразности использования микробов рода Bifidobacterium для нормализации микрофлоры кишечника решен однозначно положительно. Теоретическим обоснованием этому послужили данные углубленного изучения микрофлоры кишечника в норме (у здоровых людей) и при различных патологических состояниях у детей и взрослых. Установлено, что в кишечнике детей и взрослых людей обитает от 1 до 5 видов или биоваров бифидобактерий одновременно.

Многолетними наблюдениями отечественных и зарубежных авторов показано, что видовой состав бифидобактерий различных возрастных групп имеет отличия. Существуют виды бифидобактерий, которые характерны для раннего детского возраста; в нашем регионе для детей в возрасте до года характерны виды B.bifidum и B.longum (Насонова Т.А. с соавт., 1983). Японским исследователям удалось показать, что у японских детей выделяются также «детские виды» B.bifidum, В.breve и B.infantis (Cummings J.H. et al., 1987).

Практический опыт использования бифидосодержащих препаратов во всем мире говорит в пользу применения этих препаратов как для восстановления бифидофлоры и нормализации микробиоценоза кишечника, так и для повышения резистентности организма.

В настоящее время существует несколько способов восстановления бифидофлоры, и все они, так или иначе, связаны с введением живых видов бифидобактерий per os или же препаратов, содержащих как живые клетки бифидобактерий, так и бифидогенные факторы.

Широкое применение вида В. bifidum для производства препаратов и обогащения лечебно-диетических продуктов как у нас в стране, так и за рубежом обусловлено тем, что этот вид в норме встречается в кишечнике как детей, так и взрослых людей. Причем, у детей он является преобладающим (Бевз Н.И., 1991).

Ретроспективный анализ данных зарубежной и отечественной литературы показал, что в кишечнике здоровых детей и взрослых людей с большим постоянством встречается и другой' вид - B.longum. Его высе-ваемость у детей составляет 40-70 %. У взрослых этот вид доминирует в кишечнике. Это убедило нас в том, что вид В. 1о1щит необходимо также использовать для нормализации микрофлоры кишечника детей и взрослых (Бевз Н.И., 1991).

Учитывая, что в настоящее время ввиду ухудшения общей экологической обстановки, возникновением стрессовых ситуаций, ослабления иммунной защиты организма постоянно увеличиваются рост и частота заболевания сахарным диабетом - четверть населения планеты страдают этим недутом (Поскребышева Г.И., 1998), одним из важнейших факторов его лечения и профилактики является функциональное питание. В связи с этим возникает потребность в специализированных продуктах питания для обширного контингента.

При создании комплексного кисломолочного продукта сахар был заменен стевиозидом (экстрактом из листьев двулистника стевия), экологически чистым натуральным продуктом, являющимся гликозидом по природе и практически единственной альтернативой химическим подсластителям.

Стевиозид рекомендуется всем людям без ограничения возраста и пола, но особенно больным сахарным диабетом, так как он низкокалориен, не требует для своего усвоения выделения инсулина и снижает уровень содержания сахара в крови, нормализует белковый, углеводный и минеральный обмены, а также регулирует давление, не вызывает кариеса и диатезов.

Поэтому целью наших исследований явилось создание универсальной биотехнологической цепи для производства новых комплексных продуктов, содержащего наиболее адекватные для детей и взрослых виды молочнокислых микроорганизмов, а также биологически активную добавку - подсластителя не требующего инсулина для своего усвоения организмом.

В основу разработки технологии получения поликомпонентного кисломолочного продукта с использованием заквасок на основе кефирных грибков и двух видов бифидобактерий, лактобацилл и молочнокислых стрептококков, а также обогащенного естественным подсластителем растительного происхождения в производственных условиях, были положены отобранные и изученные многими учеными штаммы, а также технологические методики, используемые для приготовления различных кисломолочных продуктов.

Таким образом, конструирование каждого нового функционального продукта питания, создание биотехнологических комплексов для их производства, а также внедрение этих продуктов в практику здравоохранения, являются еще одним шагом в защите и охране здоровья человека, являющегося высшим представителем живой природы на нашей планете.

Результаты исследований и создания условий для производства кисломолочных пробиотиков с широким спектром защитных факторов, показали перспективность данного направления при условии применения культуральных свойств используемых штаммов микроорганизмов, а также специфических особенностей вносимых биологически активных компонентов, что согласовывается с данными других авторов, описывающих процессы конструирования новых кисломолочных пробиотиков на основе сложных поликомпонентных заквасок (Бевз Н.И., 1991; Андросова Н.Л. с соавт., 1995; Анистратенко Е.А. с соавт., 1995; Барышникова Е.П., 1995; Бондаренко В.М. с соавт., 1995; Дунченко Н.И., 1995; Крашенинин П.Ф., 1995; Кривенцева Л.Д. с соавт., 1995; Мухамеджанова Т.Г. с соавт., 1995; Семенихина В.Ф., 1995; Богатырев А.Н. с соавт., 1997; Зайцев А.Н. с соавт., 1997).

В результате проведенных работ нами создан новый поликомпонентный продукт функционального назначения не имеющий отечественных аналогов и представляющий собой гомогенную массу сквашенного цельного молока кислотностью 80-100 °Т (рН 4,4-4,8), однородной средне-тягучей сметанообразной консистенции, без газообразования на поверхности, имеет выраженный кисломолочный запах с нежным фруктовым оттенком, глянцево-белый цвет, вкус - кисломолочный с нежным привкусом пастеризованного молока и приятным умеренно-сладким привкусом стевии.

Таким образом, благодаря проведенным исследованиям, создан новый кисломолочный продукт, обладающий заданными лечебно-профилактическими свойствами: антагонистической активностью по отношению к патогенной и условно-патогенной микрофлоре кишечника человека, способностью к сдерживанию ее роста и восстановлению уровней полезных популяций микроорганизмов; способностью активизировать иммунологическую реактивность организма человека и уровень его общей неспецифической резистентности; отсутствием необходимости выделения организмом человека инсулина для усвоения естественного подсластителя растительного происхождения.

Учитывая, что микробная масса продукта находится в живой и наиболее активной форме и является мощным биологическим средством подавления гнилостной микрофлоры, а также активным естественным средством для нормализации аутофлоры человека, данный продукт может быть рекомендован к потреблению всеми людьми (особенно проживающими на территориях, пострадавших от последствий экологических катастроф), без ограничения возраста и пола, в том числе страдающими дисбактериозами, пониженным иммунитетом, диареями различной этиологии, сахарным диабетом, нарушениями белкового, углеводного и минерального обмена, а также нуждающимися в регулировании артериального давления.

Сконструированный для получения в промышленных масштабах кисломолочный продукт лечебно-диетического и диабетического питания «Стевилонг», а также биотехнология его производства, позволяет сделать очередной шаг в решении проблемы оздоровления населения.

Благодаря проведенным исследованиям нами создан кисломолочный продукт с заданными лечебно-профилактическими свойствами: антагонистической активностью по отношению к патогенной и условно-патогенной микрофлоре кишечника человека, способностью к сдерживанию ее роста и восстановлению уровней полезных популяций микроорганизмов; способностью активизировать иммунологическую реактивность организма человека и уровень его общей неспецифической резистентности; отсутствием необходимости выделения организмом человека инсулина для усвоения естественного подсластителя растительного происхождения.

Разработанные нами биотехнологические схемы обособленного и комбинированного цехов-модулей обеспечивают гарантированный выпуск кисломолочных лечебно-диетических продуктов с использованием заквасок основанных на штаммах эубиотиков, а также обогащенных другими защитными факторами.

Кисломолочный продукт «Стевилонг» по органолептическим, физико-химическим и микробиологическим параметрам соответствует показателям, полученным при лабораторно-экспериментальных выработках.

Разработанные нами биотехнологические цехи-модули могут быть рекомендованы для тиражирования с целью решения проблем обеспечения детей и взрослых, проживающих на территориях, пострадавших от экологических катастроф, биологически полноценными натуральными продуктами питания на молочной основе, а также обогащенными различными биологически активными добавками, обладающими направленными защитными свойствами.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Черняев, Сергей Иванович, 1999 год

Список литературы

1. Адаме М. Бактериофаги - М., 1961, 527 с.

2. Алмагамбетов А.Х., Бондаренко В.М.- Моделирование транслокации кишечной микрофлоры на конвенциональных животных.// Журн. микробиол. - 1991. - №8. - С. 15-17.

3. Алмагамбетов К.Х., Горская Е.М., Бондаренко В.М. Транслокация кишечной микрофлоры и ее механизмы. "Ж. микробиол.", 1990. 10. 74-79.

4. Андросова Н.Л., Селезнев И.А., Иванова Т.В. Культивирование микроорганизмов в субстратах, обогащенных селеном. //Материалы Международной науч.-технич. конф. «Прикладная биотехнология на пороге XXI века»., 13-15 апреля 1995. с. 49.

5. Анистратенко Е.А., Дедюхина В.П. Проблемы коррекции питания человека в современных условиях с учетом достижений пищевой биотехнологии. //Материалы Международной науч.-технич. конф. «Прикладная биотехнология на пороге XXI века»., 13-15 апреля 1995. с. 23-24.

6. Ардатская М.Д. Исследование содержания и профиля низкомолекулярных метаболитов сахаролитической толстокишечной микрофлоры в норме и патологии: Дисс. ... канд.мед.наук. - М., 1995. - 134 с.

7. Асонов Н.Р. Микробиология. «Агропромиздат». -М., 1988, с.294-306.

8. Байбаков В.И, Карих Т.Д., Барукаева Л.А. и др.. - Нормализация кишечной микрофлоры и общего состояния мышей линии 1СЯ под влиянием концентрата бифидобактерий. - 1997. - Т42, №3. - С. 20-24.

9. Барышникова Е.П. Биосинтез витаминов группы В в молочных продуктах, содержащих бифидобактерии. //Материалы Международной науч.-технич. конф. «Прикладная биотехнология на пороге XXI века»., 13-15 апреля 1995. с. 69-70.

Ю.Бевз Н.И., Буданова Е.В., Гончарова Г.И., Пашков Е.П., Тер-Асатуров Г.П. Микрофлора кишечника у больных воспалительными заболеваниями че-

люстно-лицевой области. //Жури, микробиол. - 1994. -№ 4. - С. 16-19.

11 .Бевз Н.И. Новый препарат-эубиотик на основе двух видов бифидобакте-рий (В. bifidum и В. longum) и его нормализующая микробиоценоз кишечника активность. //Автореферат диссертации на соискание уч. степени канд. биол. наук. -М., 1991.

12. Билибин АФ. Дисбакгериоз. - Ежегодник БМЭ, т. 3, -М, 1971, с. 344-352.

13. Блохина И.Н, Соколова KJL, Угадчиков ГА Эубиошки в профилакшке и лечении заболеваний. // Материалы международной конференции «Политика в области здорового питания в России. -М., 1997. С. 25.

14. Богатырев А.Н., Большаков О.В., Измеров Н.Ф., Княжев В.А., Матаев С.И., Тутельян В.А. Проблемы обогащения продуктов и рационов. Значение биологически активных добавок в коррекции пищевого статуса и профилактике профессиональных и других неинфекционных заболеваний. //Материалы международной конференции «Политика в области здорового питания в России. -М., 1997. С. 24.

15.Бондаренко В.М., Учайкин В.Ф., Мурашова О.А., Бевз Н.И., Абрамов Н.А. Дисбактериоз. Современные возможности профилактики и лечения. -М., "Партнер", 1994, с. 14.

16. Бондаренко В.М., Учайкин В.Ф., Мурашова А.О., Абрамов Н.А. Дисбиоз. "Партнер", -М., 1995, с.10-14.

17. Бондаренко В.М., Боев Б.В., Лыкова Е.А., Бевз Н.И. Дисбактериозы желудочно-кишечного тракта. -М., 1997. - с.4-14.

18. Бондаренко В.М., Петровская В.Г.- Ранние этапы развития инфекционного процесса и двойственная роль нормальной микрофлоры. // Вестн. Рос. АМН,- 1993,-№3,-С. 7- 10.

19. Бондаренко В.М., Петровская В.Г., Яблочков А.Л. - Антилизоцимный фактор Klebsiella pneumoniae: природа, биологические функции и генетический контроль. // ЖМЭИ,- 1994,- август-сентябрь(приложение).- С.22-27.

20. Бондаренко В.М., Горская Е.М. Новые подходы к моделированию, диагностике и лечению дисбактериозов кишечника // Медицинские аспекты микробной экологии/Под ред. Шендерова Б.А. - М., 1992. Вып.6., с.23-26.

21. Бухарин О.В., Валышев А.В.- Факторы персистенции кишечной микрофлоры при дисбиозе. // Вестник Рос. АМН,- 1997,- №3.- с. 19-22.

22. Бухарин О.В., Гриценко В.А., Дерябин Д.Г.- Место внутривидового фе-нотипического разнообразия в экологии Escherichia coli и Staphylococcus aureus. //Вестник Рос. АМН,- 1997,- №3.- С. 34-39.

23. Бухарин О.В., Усвятцов Б.Я., Чернова O.JI. - Антилизоцимный признак стафилококков в диагностике и санации бактерионосительства.// ЖМЭИ,-1993, №6,- с.32-33.

24. Веселов А .Я. Современные представления о нормальной микрофлоре пищеварительного тракта взрослого человека и изменениях ее при некоторых заболеваниях органов пищеварения//Лаб.дело. - 1988. ~№4. -с.3-11.

25. Волгарев М.Н., Батурин А.К. Мониторинг питания в России. Эпидемиология алиментарно-зависимых заболеваний питания в Российской Федерации. //Материалы международной конференции «Политика в области здорового питания в России. -М., 1997. С. 14.

26. Воробьев А.А., Анджапаридзе О.Г., Дроздов С.Б. и др.- Научные основы борьбы с инфекционными заболеваниями. // Вестник Рос. АМН,- 1995.-№8,- С. 40-44.

27. Воробьев А.А., Абрамов Н.А., Бондаренко В.М., Шендеров Б.А.- Дисбак-териозы - актуальная проблема медицины // Вестник Рос. АМН.- 1997,-№3.- С. 4-7.

28. Воробьев А.А., Борисова У.В., Борисов В.А. - Липополисахариды гра-мотрицательных вирулентных бактерий и их роль в инфекции и иммунитете. // Веста. Рос. АМН. - 1997. - № 3. - С.10-13.

29. Вульф Е.В., Малеева О.Ф. //Мировые ресурсы полезных растений, -М., -1965.

30. Гапочко К.Г., Кудрин И.Д., Самбукова Т.В., Савельев А.П. - Индивидуально-личностные особенности человека как фактор этиологии поствакцинальных реакций. // Журн. микробиол. - 1990. - № 7. - С. 55-59.

31. Голышевская В.И., Гончарова Г.И., Лянная A.M. // Тезисы докладов на-учно-практич. конф. «Диабетические состояния человека, пути профилактики и лечение». Пермь - 1993, с. 26-27.

32. Гончарова Г. И. Бифидофлора человека и необходимость ее оптимизации. //Бифидобактерии и их использование в клинике, медицинской промышленности и сельском хозяйстве. 1986. Сб. научных трудов МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского, М., стр. 10-17.

33. Гончарова Г. И., Семенова Л. П., Лизько H.H., Лянная А. М., Козлова Э. П. Инструкция по приготовлению кисломолочного бифидумбактерина на молочных кухнях. МНИИЭМ, ИМБП, 1987.

34. Гончарова Г.И., Семенова Л.П., Лянная A.M. Бифидофлора человека, ее нормализующие и защитные функции. // Антибиотики и мед. Биотехнология. - 1987. -№3. - с. 179-183.

35. Гончарова Г.И., Дорофейчук В.Г., Смолянская А.З и др. - Микробная экология в норме и при патологии. // Антибиотики и химиотерапия. - 1989 -№ 6. - С.462-466.

36. Гончарова Г.И., Лянная A.M., Семенова Л.П. и др. в кн.: Иммунобиологические препараты. М. 1989 ст. 140-146.

37. Горская Е.М., Ленцнер Х.П., Ленцнер A.A. и др. - Адгезивные свойства бактерий кишечного происхождения. // ЖМЭИ,-1991,- №10,- С. 5-8.

38. Грачева Н.М., Поспелова В.В., Гаврилов А.Ф. и др. Применение бактерийных биопрепаратов у больных с острыми кишечными инфекциями // Медицинские аспекты микробной экологии /Под ред. Шендерова Б.А. -М., 1991, с.183-190.

39. Гринин A.C. с соавт. Человек. Экотехнологии. Омнигенная экология. Том 1У.//Уч. пособие. -Брянск, ГСХАД998.

40. Долгушина В.Ф. - Изучение иммунокорригирующих свойств бактерийных препаратов ( лактобактерина, бифидумбактерина ) и бемитила у беременных с урогенитальной инфекцией. // ЖМЭИ.- 1991.- №4.- С.56-58.

41. Донских Е.Е., Гончарова Г.И. - Качественный и количественный состав кислот, образуемых бифидобактериями. // Журн. микробиол. - 1988. - № 7.-С. 11-15.

42. Дорофейчук В.Г., Бейер JI.B., Карасева Г.Н., Богданович Н.Е. , Келемее-ваМ.М. , Волков А. И. - Значение дефицита бифидофлоры при гастроэнтерологических заболеваний у детей и коррекция ее бифилактом. М.//Сб.научн.трудов. Бифидобактерии и их использование в клинике, медицинской промышленности и сельском хозяйстве. - М, сб. науч. тр. МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского, 1986, стр. 122-124.

43. Дунченко Н.И. Разработка йогуртов нового поколения. //Материалы Международной науч.-технич. конф. «Прикладная биотехнология на пороге XXI века»., 13-15 апреля 1995. с. 57-58.

44. Евлашкина В.Ф., Чуприна Р.П., Несчесляев В.А. - Стабильность жизнеспособности лактобактерина. // Тезисы докладов научно-практической конференции. - Пермь. - 1993. - С. 27-28.

45. Зайцев А.Н., Шатров Г.Н. Токсиколого-гигиеническая оценка природного посластителя стевиозида (сахарола) // Отчет по НИР ИП РАМН. -М., 1997, 17 с.

46. Зубенко В.Ф. Новый природный заменитель сахара.//Вестник с/х науки, -М„ -1990, -3, -с.93.

47. Зубенко В.Ф. //Сах. свекла, производство и переработка, -1990, -5, -с.49.

48. Инструкция по приготовлению молочных смесей на молочных кухнях системы здравоохранения. //Издание официальное. -М., 1988. с.5-9, 1213,15-16, 22-23, 31.

49. Исаева Н.П., Шахмарданов М.З., Земскова JI.H и др. - Механизмы воздействия пробиотиков на функциональное состояние лимфоцитов при ост-

ром шигеллезе. //Журнал микробиол.- 1994,- №6,- С. 107-108.

50. Кафарская Л.И., Ефимов Б.А. и др. - Изучение состояния микрофлоры кишечника у лиц, находящихся в контакте с различными антимикробными препаратами. // Журнал микробиол,-1991,- №9,- С. 25-27.

51. Козлова Э.П., Семенова Л.П. Микрофлора кишечника недоношенных детей, больных сепсисом и ее коррекция бифидумбактери-ном.//Вопр.охр.мат. - 1976 - №1 - с. 50-52.

52. Козлова Э.П. Микрофлора кишечника новорожденных детей в норме и патологии и пути восстановления ее бифидумбактерином: Автореф. дисс. канд. мед. наук - М., 1978, 18 с.

53. Корначев Ф.С. - Система оперативного управления внутрибольничными инфекциями в родильных домах.//Журн. микробиол.-1992. - № 5-6. - С. 34-37.

54. Корниенко А.В. и др. Перспективный заменитель сахара. // Сахарная свекла. - 1993 - №1.

55. Корниловская Е.Д. //Введение в культуру стевии - низкокалорийного заменителя сахара/ВНИИ сах. свеклы, отв. ред. Зубенко В.Ф.,-г.Киев, -1990, -с.125.

56. Коршунов В.М., Иванова Н.П., Кафарская Л.И., Гладько И.А., Ефимов Б.А., Смеянов В.В. Нормальная микрофлора кишечника, дисбактериозы и их лечение.// Методич.разработки - М: РГМУ, 1994.

57. Крашенинин П.Ф. Биотехнология молочных продуктов детского и лечебного питания. //Материалы Международной науч.-технич. конф. «Прикладная биотехнология на пороге XXI века»., 13-15 апреля 1995. с. 36.

58. Кривенцева Л.Д., Колеснов А.Ю. Подбор заквасок молочнокислых бактерий для детского питания. //Материалы Международной науч.-технич. конф. «Прикладная биотехнология на пороге XXI века»., 13-15 апреля 1995. с. 55-56.

59. Куваева И.Б., Ладодо К.С. - Микроэкологические и иммунные нарушения

у детей : Диетическая коррекция. - М. - 1991. С. 240.

60. Куваева И.Б., Орлова Н.Г., Веселова O.JI. Метаболические последствия функциональных нарушений кишечного микробиоценоза и возможности диетической коррекции // Психолого-деонтологические аспекты и новые направления в гастроэнтерологии. Поиски. Решения. / под ред. Зайцевой Е.И. - Смоленск-Москва, 1991., с. 85-88.

61. Кудинова Г.И., Елизарова И.П. Разумовская М.Н., Козлова Э.П. Становление микрофлоры кишечника у здоровых новорожденных 1-й недели жизни при раннем вскармливании//Акушерство и гинекология. -№9, -1989, ею 22-25.

62. Кудрин А.Н. Роль питания в регуляции жизнедеятельности и гоиеостаза организма. //Фармацевтическая газета., №4, -М.,1996.

63. Кулинич Д.Г., Абатуров А.Е., Герасименко О.Н., Верник А.Г. - Взаимосвязь состояния иммунитета и микробиоценоза кишечника у детей раннего возраста, больных острыми заболеваниями органов дыхания. // Журн. микробиол. - 1992. - № 5-6. - С. 27-29.

64. Кушнарева М.В., Дементьева Г.М., Черноног И.Н. и др. - Эффективность эубиотика «Бифацид» при применении комплексной антибактериальной терапии новорожденных детей с инфекционно-воспалительными заболеваниями. // Антибиотики и химиотерапия. - 1996. -Т41, № 11. - С. 28-33.

65. Лебедева М.Н., Гончарова Г.И., Лизько H.H. - "Ж. микробиол.", 1974, N 9, с.36-41.

66. Ленцнер A.A., Ленцнер Х.П., Микельсаар М.Э. и др.// Антибиотики и мед. биотехнология. - 1987. - №3. - с.173-179.

67. Лизько H.H., Гончарова Г.И., Семенова Л.П. - Коррекция микроэкологии кишечника у лиц в экстремальных условиях. // Тезисы докладов VII Всесоюзной конференции про проблемам космической биологии и медицины. - Калуга. - 1986. - М. - «Наука». - С. 88-89.

68. Лизько H.H., Хамагаева И.С. и др. Изучение бифидогенных свойств оли-

госахаридов в молочной сыворотке.//Материалы Всесоюзной научно-техн.конф., г.Киев, 1991, ч.1, с. 170.

69. Лизько H.H., Наумов A.A. и др. Особенности микрофлоры пищеварительного тракта у спортсменов.// Тезисы докладов научно-практ.конф. «Дисбиотическое состояние человека, пути профилактики и лечения». -Пермь, 1993., с. 42.

70. Литяева Л.М. - Микроэкологические подходы к профилактике инфекционных заболеваний у новорожденных. - Автореф. дисс.... д-ра мед.наук. -М. - 1994.

71. Лопатина Т.К., Николаенко В.Н., Петрова М.С., Золотухо В.А., Отрошен-ко Л.И., Карпенок Т.В. Динамика численности субпопуляций лимфоцитов у детей с дисбиозом кишечника в процессе лечения их бифидумбактери-ном. //Сб. научных трудов МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского, М., 1996, с. 131-135.

72. Лопатина Т.К., Бляхер М.С., Николаенко В.Н. и др. - Иммуномодули-рующее действие препаратов-эубиотиков. // Вестн. Рос. АМН,- 1997,-№3,- С. 30-34.

73. Лыкова У. А., Бондаренко В.М., Изачик Ю.А. и др. - Коррекция пробио-тиками микроэкологических и иммунологических нарушений при гастро-дуоденальной патологии у детей. // Журн. микробиол. - № 2. - 1996. - с. 88-91.

74. Любянская В. Облигатный симбиоз микрофлоры толстой кишки и организма. -Вильнюс, 1989. -98 с.

75. Лянная A.M., Сильченко H.A., Лисунова С.А., Левченко Т.А. Разработка нового кисломолочного продукта на основе штаммов бифидобактерий разных видов. // Проблемы медицинской биотехнологии и иммунологии инфекционных болезней. Сб. науч. трудов МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского -М., 1996, с. 96-101.

76. Мама и кроха. Питание: десять важнейших советов будущей матери. //

Лицензионный журнал Издательского дома ОВА-ПРЕСС. Экстра-выпуск «Беременность»., №1., 1995., с. 7-9.

77. Мамулашвили И. //Субтропические культуры, -1990, -3, -с. 125.

78. Малышева З.В., Цветаева Т.Ю., Поспелова В.В., Ворошилина H.H. Микробные и иммуноглобулиновые биопрепараты в комплексной терапии воспалительных процессов женской половой сферы. //Сб. Науч. Трудов МНИИЭМ им. Т.Н. Габричевского -М., 1996, с. 138-141.

79. Мельникова В.М., Беликов Г.П., Щербакова Э.Г. и др. - Проблемы хими-опрофилактики и химиотерапии эндогенной инфекции и дисбактериоз. // Вестник Рос. АМН.- 1997,- №3,- С. 26- 29.

80. Меньшиков Д.Д., Янискер Г.Я. - Экологическая общность облигатно-анаэробный и аэробных возбудителей гнойных процессов. // Журн. мик-робиол. - 1990 - №5. - С.28-31.

81. Методы микробиологического контроля продуктов детского, лечебного питания и их компонентов: Методические указания. -М.: Информационно-издательский центр Минздрава России, 1998.-95с.

82. Мечников И.И. - Этюды оптимизма. - М., Наука, 1987.

83. Михайлова И.И., Иванников И.О., Горячкина Л.А. и др. Ятрогенные аллергические заболевания и псевдоаллергические синдромы на почве кишечного дисбактериоза // Клинический вестник ПМЦ РФ. - 1994., №2, с.61-63.

84. Мурашова А.О., Новокшонов A.A., Учайкин В.Ф. - Эффективность применения бифиокефира для лечения острых кишечных инфекций и коррекции дисбиоза у детей. // Журн. микробиол. - 1994. - №6. - С. 108-110.

85. Мухамеджанова Т.Г., Беркетова Л.В., Агапова Е.В., Кантаре М.М. Молочнокислые продукты, обогащенные бета-каротином. //Материалы Международной науч.-технич. конф. «Прикладная биотехнология на пороге XXI века»., 13-15 апреля 1995. с. 87.

86. Насонова Т.А., Мальцев В.Н. Современные представления о значении

нормальной микрофлоры тела в норме и патологии. //Успехи совре-мен.биологии. -1983. Т.96. -С. 139-150.

87. Наумова О.В., Белова Е.Е., Хабазова Е.И. Аутофлора человека в норме и патологии и ее коррекция. -Горький, 1988.-52 с.

88. Новокшонова В.А., Феклисова JT.B., Поспелова В.В., Ханина Г.И., Пока-тилова А.И., Мескина Е.Р., Темкина В.Н. Результаты применения биопрепаратов, содержащих бифидобактерии вида B.adolescentis, в лечении кишечных инфекций у детей. //Сб. научных трудов МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского, М., 1996, с. 125-130.

89. Олейниченко Е.В. Побочные биологические эффекты антибактериальной терапии у пульмонологических больных и пути их коррекции: Дисс. ...канд.мед.наук. -М., 1997., -122с.

90. Пинегин В.В., Мальцев В.Н., Коршунов В.Н. Дисбактериозы кишечника. -М., 1984. - 144 с.

91. Покровский В.И. Структура питания и здоровье населения России. //Материалы международной конференции «Политика в области здорового питания в России. -М., 1997. С. 8.

92. Попова-Барзашка С., Коршунов В.М., ТарабранаН.П., Боссарт В. - Определение антагонистической активности лактобактерий Солко (Lactobaccillus acidophilus LAT 11/83) при использовании гнотобиологи-ческой технологии. // Журн. микробиол. -1990. - №9. - С.3-6.

93. Поскребышева Г.Н. Солодка стахис и стевия в домашних заготовках. -М.1998.: Агрономическое селекционное общество., с.39-40.

94. Поспелова В.В., Манвелова М.А., Рахимова Н.Г. и др. Ацидофильные бактерии и их значение в системе средств, регулирующих бактериоценоз // Медицинские аспекты микробной экологии / Под ред. Шендерова Б.А. -М., 1991., с. 175-182.

95. Равич Р. Дружественные бактерии. Как лактобактерии и бифидобактерии могут восстановить ваше здоровье. //Материалы к продуктам #3000

"Lactobacillus Acidophilus" и #5002 "Jerusalem Artichoke Flour" M., "Ви-таМакс", 1995, c.5-7.

96. Рахманов P.C., Конышев И.С. - Молоко в солдатской кружке. // Военно-экономич. Журн. - 1992. - №8. - С. 41-43.

97. Ремизов В.М. Слаще сахара и меда. //Сельская жизнь. - 1996,- №80.

98. Романенко Г.А. Научное обеспечение в области политики производства продовольственного сырья и пищевых продуктов. Национальные программы в России. //Материалы международной конференции «Политика в области здорового питания в России. -М., 1997. С. 10.

99. Савилов Е.Д., Колесников С.И., Савченков М.Ф., Злобин В.И. - Инфекционная заболеваемость в условиях техногенного загрязнения окружающей среды. // Вестник Рос. АМН. - 1996. - № 8. - С.37-40.

100.Сайтов М.М., Никитенко В.И., Есипов В.К., Писецкий С.Н.- О роли дис-бактериоза в развитии хирургической инфекции. // Вестник Рос. АМН,-1997,-№3,-С. 17-19.

101.Салитринник Л.И., Любешкина Е.Г., Розанцев Э.Г. Экологический сорбент многоцелевого назначения. //Материалы Международной науч,-технич. конф. «Прикладная биотехнология на пороге XXI века»., 13-15 апреля 1995. с. 27-28.

102.Саноцкий И.В., Уланова И.П. //Критерии вредности в гигиене и токсикологии при оценке опасности химических соединений, -М., -1975, -с.59.

ЮЗ.Семенихина В.Ф. Перспективы развития биотехнологии кисломолочных продуктов. Создание принципиально новых культур молочнокислых бактерий с использованием генетической и клеточной инженерии. //Материалы Международной науч.-технич. конф. «Прикладная биотехнология на пороге XXI века»., 13-15 апреля 1995. с. 54-55.

104.Серженко С.В., Филатов Н.Н - Опыт применения бифидумбактерина для профилактики острых респираторных вирусных инфекций в детских дошкольных учреждениях Москвы, // Журн. микробиол,- 1993,- №6,- С. 61-

105.Скурихин И.М., Нечаев А.П. Все о пище с точки зрения химика. М., 1991.

Юб.Смоляр В.И. //Введение в культуру стевии - низкокалорийного заменителя сахара/ВНИИ сах. свеклы, отв. ред. Зубенко В.Ф.,-г.Киев, -1990, -с. 112, 118.

107.Соколова К.Я., Сильванова H.H., Якимычева Е.А. и др. Принципы разработки различных форм продуктов лечебного питания для нормализации микрофлоры кишечника // Медицинские аспекты микробной экологии / Под ред. Шендерова Б.А. - М., 1991., с. 160-168.

108.Стевиозид. Технические условия - 9169 - 009 - 29617106 - 95.

109.Стефани Д.В., Вельтищев Ю.Е. - Клиническая иммунология и иммунопатология детского возраста. - М. - 1996.

1 Ю.Тараканов Б.В. Использование пробиотиков в животноводстве. Калуга. :ДСХиП, ВНИИФБиП. 1998. 53с.

111 .Технологическая инструкция по приготовлению и применению заквасок для кисломолочных продуктов. //ВНИМИ. -М., 1992, с. 15-44.

112.Тутельян В.Н. Как улучшить наш пищевой статус.//Науч. статья в ж. для диабетиков: «Диановости», №11, -М., 1997, с. 9.

113. Тутельян В.Н. Биологически активные добавки к пище - реальный путь улучшения здоровья. //Медицинский курьер. №3-4, 1998., -М., с.48-51.

Ш.Федорова И.М., Бляхер М.С. и др. - Характер гемопоэза у животных при экспериментальном угнетении иммунной системы : восстановление естественное и на фоне бифидумбактерина. // Вестник Рос. АМН,- 1997,- №3,-с. 40-43.

Ш.Чахава О.В., Горская Е.М., Рубан С.З. - Микробиологические и иммунологические основы гнотобиологии. - М., 1982.

Нб.Чернышев В.И., Эссель А.Е„ Лебеденко A.A. - Характеристика микрофлоры кожи при различных клинических вариантах аллергических дер-

матозов у детей. // Вестн. дерматол. и венеролог,- 1991. - №10. - С.35-39.

117 .Черняев С.И., Казаков AB., Сошин CA, Черняева МН. Бифифруг - реальность и перспективы //Молочная промышленность. №1.1998. С. 16-17.

Ш.Черняев С.И., Лагунова У.З., Черняева М.Н. Некоторые аспекты микробной экологии человека. // Омнигенная экология. Под ред. Гринина A.C. -Брянск,БГСХА, Том IV. 1999.

119.Черняев СИ., Гринин АС., Пронин Л.Т., Сошин CA, Черняева МН. Кисломолочные эубиошки - пищевые продукты дня восстановления экологического баланса организма Тез. докл. Российская научно-техническая конференция Калуга: КФМГТУ им НЭБаумана, 1997. С. 209.

120 .Черняев С.И., Гринин АС, и др. Сравнительная характеристика жидкого концентрата бифидобакгерий и сухого бифидумбакгерина Тез. доки Российская научно-техническая конференция Калуга: КФМГТУ им Н ЭБаумана, 1997, С. 208.

121 .Черняев СИ., Черняева МН, Гринин АС. Экологические аспекты бифидобакгерий. Науч. докл. Российская научно-техническая конференция Калуга: КФМГТУ им. НЭ. Баумана, 1998. С. 228-231.

122.Черняева М.Н Микроэкологические аспекты макроорганизмов в трудах И.И. Мечникова.// Тез. докл. Российская научно-техническая конференция Калуга: КФМГТУ им Н Э. Баумана, 1998.

123.Чернятина Л.Ф., Бережной В.Ф., Тулупова A.A. - Методика оценки эффективности применения бифидумбакгерина для профилактики гнойно-воспалительных заболеваний новорожденных. // Журн. микрооб.- 1990. -№4. - С.36-39.

124.Чистякова В.П. Гипотрофия у недоношенных детей. : Автореф. на соиск. уч.степ. д.м.н. (14.00.09) -М., 1980, - 31 с. - В надзаг.: 2 Моск.Гос. Ордена Ленина мед. институт им Н.И.Пирогова.

125.Шалыгина A.M., Крусь Г.Н., Морозова В.В. Новый кисломолочный продукт. //Материалы Международной науч.-технич. конф. «Прикладная биотехнология на пороге XXI века»., 13-15 апреля 1995. с. 51.

126.П1арипова И.С., Сергевнин В.И., Красинский Э.Л. и др. - Оценка лечебно-профилактического действия свечей с лактобактерином на микробиоценоз кишечника детей. //Журн. микробиол. - 1994. - №7. - С. 30-31.

127.Шендеров Б.А., Манвелова М.А. - Функциональное питание. Микроэкологические аспекты. - М. - 1994.

128.Шендеров Б.А. - Медицинская микробная экология : современное состояние и перспективы. // Антибиотики и химиотерапия. - 1996. - Т 41, №10. -С.10-12.

129.Ahmed М. S., Dobberstein R. Н. 1982. Stevia rebaudiana. III. Highperformance liquid chromatographic separation and quantitation of rebaudiosides B, D, and E, dulcoside A, and steviolbioside. J. Chromatogr. 245: 373-376.

130.Akashi H., Yokoyama Y. /Shokuhin Kogio, -1975, -18, -p.34.

131.Apperloo-Renkema Y.Z. Bootsma H., Mulder B.I. et al. Host-microflora interaction sistemic lupus erythematosus (SLE): colonization resístanse of the indigenous bacteria of the intestinal tract //Epidemiology and Infection. -1994. -V.112. -№2. -P.367-373.

132.Bai Kang. Research on the Therapeutic efficacy of Bifido-biogen for Endotoxemia in Patients with Hapatie Cirrohosis.// Abstracts. International bit. conference. Sept. 12-13,1990, p. 56.

133.Bergey's manual of determinative bacteriology, 8-th ed. Baltimore: Williams Wilkins Co. 1974, 1246 p.

134.Blanco J., Alonco P., Blanco M. - Mecanismos de patogénesis de Escherichia coli causantes de ifecciones extraintestinales. // Enferm. Infecc. y Microbiol. Clin. - 1991. - 9 N10. - P.640-651.

135.Bloksma K„ Ettekoven H., Hothuis F.M. van Noorle-Jansen L., De Reuver K.J., Kreeflenberg J.G., Willers J.M. Effects of lactobacilli on parametrs of non-specific resistance of mice // Med.Microbiol. Immunol. 1981. V.I 70. P. 45-53.

136.Bogdanov I.G., Popkhirstov P., Marinov L. Anticancer effect of antibioticum bulgaricum on sarcoma 180 and on the select form of Eriich carcinoma// Abst. VII Intern. Cancer. Congress. 1962. P. 364.

137.Bogdanov I.G., Dalev P.G., Gurevich A.L, Kolosov M.N., Malkova V.P., Plemyannikova L.A., Sorocima I.B. Antitumor glycopeptides from Lactobacillus bulgaricus cell wall // FEBS Lett. 1975. V. 57. P.259-261.

138.Bonvie L., Bonvie B., Gates D. 1997. The stevia story, a tale of incredible sweetness and intrigue. B.E.D. Publications, Atlanta.

139.Boriello S.B. Microbial flora of the gastrointestinal tract // Microbial metabolism in the Digestive tract / Ed. Hill M.J.- N.Y., 1986., p. 2-16.

140.Chan R.C.Y., Reid G., Irvin R.T., Bruce A.W., Costerton J.W. Competitive exclusion of uropathogens from human uroepithelial cells by Lactobacillus whole cells and cell wall fragments // Infection and Immunity. 1985. V.47. P. 84-89.

141.Brucher H. Naturwiss Rdsch, -1974, -27, -ps.231.

142.Cummings J.H., Englist H.N. Fermentation in the human large intestine and the available substrates //Am.J.Clin.nutr. - 1987. V. 45. -P. 1243-1255.

143.Das S„ Das A.K., Murphy R.A., Punwani I.C., Nasution M.D., Kinghorn A.D. 1992. Evaluation of the cariogenic potential of the intense natural sweeteners stevioside and rebaudioside A. Caries Res. 26: 363-366.

144.Duchmann R., Kaiser I., Hermann E. et.al. Tolerance exists towards resident intestinal flora but is broken in active inflammatory bowel disease (IBD) // Clinical and Experimental Immunology. - 1995/? V.102.-№3.-p.448-455.

145.Facklam Richard R., Breiman Robert E. - Current trends in bacterial respiratory pathoens. //Amer. J. Med. - 1991. - 91 N6A. - P. 6-11.

146.Frisell, 1951. Studies on bacterium bifidum in healthy infants. -Actapaediatrica, 1951, v. 40, No. 8, p. 1-120.

147.Fujinuma K., Saito K., Nakazato M., Kikuchi Y., Ibe A., Nishima T. 1986. Thin layer chromatographic detection and liquid chromatographic

determination of stevioside and rebaudioside A in beverages and foods following reverse phase column chromatography. J. Assoc. Off. Anal. Chem. 69: 799-802.

148.Fuller R. - Probiotics in men and animals. // Journal of Applied Bacteriology. -1989. - Vol. 66. - P.365-378.

149.Haenel, Bendig. Intestinal flora in health and disease.-Prog. Food and Nutr. Science, 1975, v. 1, No. 1, p. 21-64.

150.Haga T., Ise R., Kobayashi T. 1976. A method for purifying stevioside (English abstr.). Jap. Patent 51-131900.

151.Hanson J. R., De Oliveira B. H. 1993. Stevioside and related sweet diterpenoid glycosides. Nat. Prod. Rep. 10: 301-309.

152.Hedden P., Kamiya Y. 1997. Gibberellin biosynthesis: enzymes, genes and their regulation. Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 48: 431-460.

153.Hilliam M. Int.Food Ingredients, 1993,5, p.40-42.

154.IJughes D.B., Hoover D.G. Food Technology, 1991, v.45,112-113.

155.Juchiro F. //Agr. biol. chem., -1989, -53,6, -p. 1603-1608.

156.Gamez A., Baquero F., Nombela C. - El geneto Proteus. Aspectos patogenios y epidemiologios.//Enferm. in fece y microbiol ckin. -1991.-9 N 8.-P.498-505.

157.Gilliland S.E., Nelson C.R., Maxwell C. Assimilation of cholesterol by Lactobacillus acidophilus//Appl;Environ.Microbiol,1985.V.49.№2.P.377-381.

158.Gilliland. S.E. Health and nutritional benefits from lactic acid bacteria // FEMS Microbiol.Rev. 1990. V.87. №1-2. P.175-188.

159.Goldin B.R., Gorbach S.L. The effect of milk and lactobacillus feeding on human intestinal bacterial enzyme activity // Amer. J. Clin-Nutr. 1984. V.39. P.756-761.

160.Gurgui N, Noya C., Rabella N. et al. - Respiratory tract infections after heart transplantation. // 5-th Eur. Congr. Clin. Microbiol. And Infect. Diseases. -Oslo, Sept. 9-11, 1991: Abstr. - [Oslo] [1991]. - P. 174.

161.Kinghorn A.D. 1992. Food ingredient safety review: Stevia rebaudiana leaves.

Herb Research Foundation, Boulder.

162.Kitada Y., Sasaki M., Yamazoe Y., Nakazawa H. 1989. Simultaneous determination of stevioside, rebaudioside A, and C and dulcoside A in foods by high-performance liquid chromatography. J. Chromatogr. 474: 447-451.

163.Lee A., Neglected N. The microbial ecology of the gastrointestinal tract // Adv. Microb.Ecol..-1985.-V.8 -p.l 15-162.

164.Lee S.J., Lee K.R., Park J.R. et al. //Hanguk Sikp'um Kwahankhoe Chi.,-1979, -II, -p.224.

165.Lidbeck A., Overvik E. - Effect of Lact acidophilus supplements on mutogen excretion infaeces and urine in humans. // Microb. Ecol. Health and Disease. -1992.-v.5Nl.-P. 59-67.

166.Lizko N.N. - Stress and intestinal microflora. // Die Nahrung. - 1987. - Vol. 31.-N5,6.-P. 443-447.

167.Lizko N.N., Shilov V.M., Syrych C.R. - Particularities in the formation of an intestinal dysbacteriosis in man under extreme condition. // Die Nahrung. -1987. - Vol. 31. - N6,7. - P. 559-605.

168.Lizko N.N. Problems of microbial ecology in the men space mission.//Acta Astronáutica, V01.23, 1991, c. 163-169.

169.Lovering, N.M. and Reeleder, R.D. 1996. First report of Septoria steviae on stevia (Stevia rebaudiana) in North America. Plant Disease 80: 959.

170.Lulko A., Malchanov R. - Men's remedy aerococcobacterinum for local wound treatmrnt. // 5-th Eur. Congr. Clin. Microbiol. And Infect. Diseases. -Oslo, Sept. 9-11, 1991: Abstr. - [Oslo] [1991]. - P. 130.

171.Majamaa H., Isolauri E. Probiotics: a novel approach in the management of food allergy// J.Allergy and Clin.Immunol. -1997. -V.99. -№2. -P. 179-185.

172.Matsui M., Matsui K., Kawasaki Y., Oda Y., Noguchi T., Kitagawa Y., Sawada M., Hayashi M., Nohmi T., Yoshihira K., Ishidate M. J., Sofuni T. 1996. Evaluation of the genotoxicity of stevioside and steviol using six in vitro and one in vivo mutagenicity assays. Mutagenesis 11: 573-579.

173.Mauri P., Catalano G., Gardana C., Pietta P. 1996. Analysis of Stevia glycosides by capillary electrophoresis. Electrophoresis 17: 367-371.

174.Miguel 0.//Rev. med.Parag.,-1966,-7,-p.200.

175.Mims C. A. - The origin of human infections and the crucial role of person-to-person spred. // Epidemiol, and Infec. - 1991. - Vol. 106, N 3. - P. 432.

176.Mitsuhashi N., Murata N. J. Jap. Soc.Nutr.Food Sci., 1991, v.44, p. 365-372.

177.Mitsuhashi H. //Extraction of stevioside, a new sweetener, study on the investigation of purification methods and the properties of stevioside. Hokkido University, -Hokkido, -1975.

178.Mitsuhashi H. The practical use of stevia and research and development data. Eds O.Katayama, T.Simita, K.Hayashi and H.Mitsuhashi,-ISU Co. Ltd,-Japan, -1978.

179.Mitsuoka T. Bifidobacteria and Microflora, 1984, v. 3, p. 11.

180.Mulder R.W. - Probiotics as a tool against salmonella contamination // World Poultry. - 1991. - 7 N3/ - P. 36-38.

181.Nikolova-Damyanova B., Bankova V. and Popov S. 1994. Separation and quantitation of stevioside and rebaudioside A in plant extracts by normal-phase high performance liquid chromatography and thin-layer chromatography: a comparison. Phytochem. Anal. 5: 81-85.

182.Nishiyama P., Alvarez M., Vieira L. G. E. 1992. Quantitative analysis of stevioside in the leaves of Stevia rebaudiana by near infrared reflectance spectroscopy. J. Sci. Food Agric. 59: 277-281.

183.0'Sallivan M.G., Thornton G., O'Sallivan G.C., Collins J.K. - Probiotic bacteria: myth or reality? // Trends in Food Science and Technology. - 1992. -Vol.3.-P. 309-314.

184.Planas G.M., Kuc J. //Science, -1968, -162, -p. 1007.

185.Phillips K.C. //Stevia: steps in developing a new sweetener /Eds. K.Phillips & Associates, -Newbury, Berkshire, UK, -1989, -p. 1-43.

186.Reddy G.V., Shahani K.M., Banerjec M.R. Inhibitory effect of the yogurt on

Ehrlich ascites tumor cell proliferation // J. National Cancer Institute. 1973. V. 50. P. 815-817.

187.Rowland I.R., Grasso P. Degradation of N-nitrosamine by intestinal bacteria//

Appl.Microbiol. 1975. V.29. P. 7-12. 188.Saito J., Takani Т., Powland J. Microb. Ecology in Health and Dis.- 1992. v.5, -№2, p. 105-110.

189. Salminen S., Isoluari E., Onella T. Gut flora in normal and disordered states //

Chemotherapy. - 1995. -Y.41. - Suppl. 1. -P.5-15. 190.Salminen S., Isoluari E., Salminen E. Clinical uses probiotics for stabilizing the gut mucosal barrier: successful strains and future chellenges // Antonie van Leeuwenhoek. -1996. -V.70. -№2-4. P. 347-358. 191.Schiffman S.S., Pecore S.D., Booth B.J., Losee M.L., Carr B.T., Sattely-Miller E., Graham B.G., Warwick Z.S. 1994. Adaptation of sweeteners in water and in tannic acid solutions. Phys. Behavior 55: 547-559. 192.Shibata H., Sonoke S., Ochiai H., Nishihashi H., Yamada M. 1991. Glycosylation of steviol and steviol-glucosides in extracts from Stevia rebaudiana Bertoni. Plant Physiol. 95: 152-156. 193.Shibata H„ Sawa Y., Oka Т., Sonoke S., Kim K.K., Yoshioka M. 1995. Steviol and steviol-glycoside. Glucosyltransferase activities in Stevia rebaudiana Bertoni. Purification and partial characterization. Arch. Biochem. Biophys. 321: 390-396. 194.Sgorbati В., Smiley M.B. and Sozzi T. Plasmids andphages in B.

longum.//Microbiologica.- 1983, v. 6.-P. 169-173. 195.Simon G.L., Gorbach S.L. Intestinal microflora // Med.Clin. North Amer. -

1982. -V.66. -p.567-574. 196.Stab. Fur. Verwalt. L. org (фирма) . Joghurt production from milk.// Патент.

Япония. Заявка № 086406,1982. 197.Stenfors Lars-Eric - Secretory IgA and IgG -coated bacteria in nasopharynx of children an immunofluorescence study. // Acta oto-laryngol. - 1991. - Vol. 111.

-N6. - P. 1139-1145.

198.Striedner J., Czygan F.-C. and Braunegg G. 1991. Contributions to the biotechnological production of sweeteners from Stevia rebaudiana Bertoni. I. A method for the serial analysis of diterpene glycosides by HPLC. Acta Biotechnol. 11:495-499.

199.Suzuki I., Nomura M., Morichi T. - Isolation of lactic acid bacteria, which suppress mold growth and antifungal action // Miilchwissen-schaft. - 1991. -Vol. 46. - P. 635-639.

200.Tan S., and Ueki H. 1994. Method for extracting and separating sweet substances of Stevia rebaudiana Bertoni (English abstr.). Jap. Patent 06007108.

201.Tannock G.W. The normal microflora: new concepts in health promotion//Microbiol. Sciences. 1988. V.5. P. 4-8.

202.Terada A., Hara H., Oishi H. et al. Microb. Ecology in Health and Dis.- 1992. v.5, -№2, p.87-92.

203.Tissier H. Recherches sur la flora intestinal des nourrissons. Theses Paris., 1900, p. 1-253.

204.Tissier H.. Repartition des microbes dans l'intestin du norri-sson.- Annales de 1'institute Pasteur, 1905, v. 19, p. 109-123.

205.Van Calsteren, M.-R., Bussinre, Y. and Bissonnette, M. C. 1993. Spectroscopic characterization of two sweet glycosides from Stevia rebaudiana. Spectroscopy 11: 143-156.

206.Veldman A. - Probiotica. // Tijschr diergeneesk. - 1992. - 117. - N12. - P. 345348.

207.Vocker Rusch C. - Mensch und microbe. Microbiologische theropie. // Therapeutikon. - 1992. - 6 N6. - P. 292- 293, 295-298.

208.Wada Kouichi, Suzuki Norio // J. Jap. Assoc. Infec. Diseases. - 1992. - 66 N5. - P. 620-627.

209.Wang X., Gibson G.R. Effect of the in vitro fermentation of oligofructouse

and inulin by bacteria growing in the human large intestine // J.Appl.Bacteriol. -1993. -V.75 -№4. -P.373-380.

21 O.Wilson K.H., Perini F. Role of competition for nutrients in suppression of Clostridium difficile by the colonic microflora // Infection and Immunity. 1988. V.56. P. 2610-2614.

211.Wingard R.A. //Experientie, -1980, -36, -p.519-520.

212.Wrong O.M., Edmonds C.H., Chadwick V.S. The large intestinal: its role in mammalian nutrition and homeostasis. -M.T.P. Press, Cambridg, e.a., 1981. -Sharp 10.-127p.

213.Xili L., Chenggjiany B.C., Eryi X., Reiming S., Yuengming W., Haodong S., Zhiyan H. 1992. Chronic oral toxicity and carcinogenicity study of stevioside in rats. Food Chem. Tox. 30: 957-965.

214.Yamada A., Ohgaki S., Noda T., Shimizu M. //J. Food Hyg. Soc. Japan, 198526, -2, -p.169.

Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.