Разработка технологии рециклизации некондиционного кожевенного сырья для получения биополимера тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 05.19.05, кандидат наук Тумурова Туяна Булатовна

• Тумурова Туяна Булатовна
• кандидат наук
• 2022

Оглавление диссертации кандидат наук Тумурова Туяна Булатовна

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список условных сокращений и обозначений

Введение

ГЛАВА 1. СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ ПЕРЕРАБОТКИ КОЛЛАГЕНСОДЕРЖАЩИХ ОТХОДОВ

1.1 Характеристика твердых коллагенсодержащих отходов кожевенного производства

1.2 Современные способы переработки коллагенсодержащих отходов

1.3 Современные перспективы использования коллагенсодержащих отходов 25 ГЛАВА 2 ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1 Выбор объектов и характеристика исследования

2.2 Общие методы исследования

2.2.1 Биохимические методы, применяемые для характеристики некондиционного кожевенного сырья

2.2.2 Биохимические методы, применяемые для характеристики кислотного агента

2.2.3 Микробиологические методы исследования кислотного агента

2.2.4 Оптимизация технологии культивирования кислотного агента

2.2.5 Методики исследований физико-химических и коллоидно-химических свойств полученных биополимеров из некондиционного кожевенного сырья

2.3 Инструментальные методы исследования

2.4 Методики оценки ранозаживляющего действия и гистолого- 43 морфологическая характеристика биополимеров

ГЛАВА 3. РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ ПОЛУЧЕНИЯ БИОПОЛИМЕРА

3.1 Изучение процесса разупорядочения структуры коллагена в процессе щелочной обработки некондиционного кожевенного сырья

3.2 Разработка и оптимизация технологических параметров получения кислотного агента

3.2.1 Изучение биохимических свойств кислотного агента

3.2.2 Изучение культуральных и морфолого-физиологических свойств микроорганизмов в составе культивируемых кисломолочных композиций

3.2.3 Оптимизация технологии получения кислотного агента

3.3 Исследование функциональных свойств полученных биополимеров из некондиционного кожевенного сырья

3.3.1 Изучение физико-химических свойств полученных биополимеров

3.3.2 Изучение коллоидно-химических свойств полученных биополимеров

ГЛАВА 4. ОЦЕНКА РАНОЗАЖИВЛЯЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ БИОПОЛИМЕРОВ, ПОЛУЧЕННЫХ В ПРОЦЕССЕ РЕЦИКЛИЗАЦИИ КОЛЛАГЕНСОДЕРЖАЩИХ ОТХОДОВ

4.1 Изучение динамики заживления термической раны по результатам биохимических и гистолого-морфометрических исследований

ГЛАВА 5. ЭКОНОМИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ. РАСЧЕТ СЕБЕСТОИМОСТИ ПОЛУЧЕНИЯ БИОПОЛИМЕРА

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Список литературных источников

Приложение А. Акт производственных испытаний технологии

Приложение Б. Техническое условие «Биополимер коллагена»

Приложение В. Результаты исследования общей токсичности на экспериментальных животных полученных биополимеров 1 и

Приложение Г. Результаты исследования биополимеров 1 и 2 на содержание токсических металлов, пестицидов и микробиологические показатели

ОСНОВНЫЕ УСЛОВНЫЕ ОБОЗНАЧЕНИЯ И СОКРАЩЕНИЯ

КМК - кисломолочная композиция ЖК - жидкостный коэффициент МПА - мясопептонный агар МПБ - мясопептонный бульон

ДСК - дифференциально сканирующая колориметрия ТГА - термогравиметрический анализ РЭМ - растровая электронная микроскопия ИК - инфракрасный

БПК - биологическое потребление кислорода

ПФЭ - полнофакторный эксперимент

ПАВ - поверхностно-активное вещество

САА - суммарная антиоксидантная активность

ПОЛ - перекисное окисление липидов

t - температура культивирования, оС

т - продолжительность технологического процесса, ч

Насв - коэффициент пересчета на абсолютно сухое вещество

Тсв- температура сваривания, оС

а -натяжение поверхностное, Дж/м2

Г - величина адсорбции, моль/м2

© - краевой угол смачивания, о

Wад - работа адгезии, Дж/м2

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность работы. В настоящее время кожевенная промышленность сталкивается с проблемой разработки и реализации долговременной стратегии экологически безопасного производства. Традиционно кожевенная промышленность вносит значительный вклад в экономику страны, а также активно взаимодействует со смежными промышленными отраслями, обеспечивая их стандартным ассортиментом кожи и иных изделий, а также продуктами переработки коллагенсодержащих отходов. Рециклизация некондиционного кожевенного сырья является актуальным решением на современном этапе, позволяющим не только снизить неблагоприятное воздействие на окружающую среду, но и получить продукт с высокой добавочной стоимостью. Некондиционное кожевенное сырья является основным источником получения коллагенсодержащих продуктов, в состав которых входит белок коллаген, имеющий уникальную сложную структуру, разупорядочение которой достигается под действием агрессивных химических продуктов (кислот, щелочей) и ферментов.

Известно, что коллаген и его производные применяются в качестве биополимеров для биомедицинского применения. А также являются основными структурными компонентами соединительной ткани, которые играют доминирующую роль в поддержании биологической и структурной целостности внутриклеточного матрикса, проявляющие уникальные механические свойства, за счет плотно сформированной спиральной структуры. Основные преимущества коллагена и его производных над природными полимерами заключаются в биосовместимости, антигенности, кроме того они обладают ранозаживляющим действием, активно взаимодействуя с клетками, участвующими в восстановлении внеклеточного матрикса и кожи.

Одним из экономически выгодных направлений рециклизации некондиционного кожевенного сырья, является его переработка с применением кисломолочной композиции в качестве кислотного агента. Применение кисломолочной композиции позволяет проводить обработку исходного сырья в менее агрессивных средах на этапе деструкции кислотолабильных связей, получая коллагеновый продукт (биополимер), но и рационально использовать некондиционное кожевенное сырье и вторичные продукты молочной промышленности.

Работа направлена на решение актуальной проблемы по разработке технологии рециклизации некондиционного кожевенного сырья с получением биополимера, обладающего ранозаживляющим действием.

Степень разработанности темы исследования

В работах были представлены исследования, связанные с переработкой коллагенсодержащих отходов кожевенной и меховой промышленностей Wang B. (2013, 2016), Чурсина В.И. (2003-2022), Савчук О. (2017, 2019), Анфимова П.Е. (2008), Артюшковой Е.Б. (2019, 2020), Сапожниковой А.И. (19852021).

Наиболее распространенное направление связано с применением биополимера коллагена в технологии местного лечения, а также в создании коллагеновых комплексов с иммобилизованными биоактивными веществами.

Исследования, связанные с применением продуктов на основе коллагена в качестве ранозаживляющего агента, были представлены в работах следующих исследователей: Wang B. (2021), An B. (2016), Давиденко Н. (2015), Chang, W. (2013). Lee C.H. (2001), Сапожниковой А.И. (2009, 2010, 2013), Андреева A.A., Карпухина А.Г. (2014); Новиковой Л.С., (2011, 2012, 2016), David G. (2020).

Цель и задачи. Целью работы являлась разработка технологии рециклизации некондиционного кожевенного сырья с использованием кисломолочной композиции.

Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

1. Обосновать метод щелочной обработки некондиционного кожевенного сырья.

2. Оптимизировать параметры технологического режима получения кисломолочной композиции.

4. Разработать технологию рециклизации некондиционного кожевенного сырья с использованием кисломолочной композиции.

5. Изучить влияние кислотного агента на физико-химические и коллоидно-химические свойства, полученного биополимера;

6. Исследовать ранозаживляющее действие биополимера на экспериментальных животных на модели термического ожога.

7. Дать обоснование экономической эффективности разработанной технологии рециклизации некондиционного кожевенного сырья с получением биополимера.

Научная новизна работы

1. Впервые показана возможность получения биополимера из некондиционного кожевенного сырья с использованием кисломолочной композиции.

2. Оптимизированы параметры технологического режима получения кисломолочной композиции, используемой в качестве кислотного агента.

3. Показано, что полученный биополимер из некондиционного кожевенного сырья, проявлял ранозаживляющее, противовоспалительное и антиоксидантное действие.

Теоретическая и практическая значимость работы:

1. Разработана и запатентована технология переработки некондиционного кожевенного сырья с получением биоактивного коллагенового продукта с использованием кисломолочной композиции.

2. Установлено, что кисломолочная композиция, культивируемая на обезжиренном молоке и молочной сыворотке, обладала оптимальными характеристиками, такими как высокая титруемая кислотность, высокое содержание молочной кислоты, и была использована в качестве кислотного

агента, применяемого для разупорядочивания структуры макромолекулы коллагена.

3. Разработаны параметры применения биополимера в качестве ранозаживляющего агента. Было определено, что при нанесении 100 мг биополимера на среднюю площадь раны 3,45 см2, на 7 сутки наблюдалось уменьшение площади раны на 24,8% в сравнении с контролем.

4. По результатам работы проведены производственные испытания на базе ООО «МИП «ЭКОМ». Себестоимость производства биополимера по разработанной инновационной технологии рециклизации некондиционного кожевенного сырья и коллагенсодержащих отходов, составит 892,4 руб/кг, срок окупаемости 2,4 года.

5. Разработано, получено и зарегистрировано ТУ «Биополимер» №20

Объекты и методы исследования

В качестве объектов исследования применяли некондиционные шкуры крупного рогатого скота (КРС) пресно-сухого способа консервирования, кисломолочные композиции, молочную кислоту.

Методологические основы и методы исследования.

В работе использованы следующие методы исследования: микроскопирования, вискозиметрии, колориметрии, сталагмометрии.

Работа выполнена на основе анализа теоретического материала и результатов практических исследований, с использованием современных, стандартных и оригинальных методов определения химических и физических свойств коллагенсодержащих отходов и продуктов, полученных из них, а также методов, применяемых в биотехнологии и микробиологии, современные физико-химические методы анализа, такие как капиллярный электрофорез, метод определения динамической вязкости. Изучение гистолого-морфологических характеристик проводили с использованием микроскопа AXIOSTAR plus, видеокамеры для MICROCAM и программы Micromedimages 1,0.

Были проведены совместные исследования на базе Центра коллективного пользования «Прогресс» «ВСГУТУ», Биотехнологического и Кожевенного центров ВСГУТУ, а также Центра коллективного пользования «Байкальского института природопользования СО РАН».

Степень достоверности и апробацию результатов оценивали по стандартным методам математической статистики, а также с помощью пакета программ «Biostat-2006». Корреляционный анализ проводили по Пирсону, расчет достоверности проводили по критерию Стьюдента.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Результаты экспериментальных исследований влияния вида щелочной обработки на разрушение щелочелабильных связей в структуре коллагена.

2. Технологические параметры получения кисломолочной композиции применяемой в качестве кислотного агента для разрушения кислотолабильных связей в структуре коллагена.

3. Технология получения биополимера из некондиционного кожевенного сырья, включающая щелочно-солевую обработку и кислотное растворение в кисломолочной композиции.

4. Результаты экспериментальных исследований физико-химических и коллоидно-химических свойств биополимеров.

5. Оценка ранозаживляющего действия биополимера на модели термического ожога на экспериментальных животных.

6. Результаты экспериментальных исследований по ранозаживлению по данным гистологического и морфометрического исследования термической раны.

Достоверность полученных результатов и выводов подтверждается применением современных методов исследования, апробацией основных положений диссертационной работы в научной периодической печати и на конференциях, а также внедрением технологии по рециклизации коллагенсодержащих отходов.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка технологии рециклизации некондиционного кожевенного сырья для получения биополимера»

Апробация работы

Результаты работы были представлены на XIII, XIV, XV, XVI Международных научно-практических конференциях «Кожа и мех в XXI веке: технология, качество, экология, образование»" (Улан-Удэ, 2017, 2018, 2019, 2020, 2021 гг.); International Leather Engineering Congress Innovative Aspects for Leather Industry (Турция, Измир, 2017, 2019, 2021 г.г); 5, 6 Международных научно-практических конференциях студентов (Монголия, Улан-Батор, 2017, 2018 г.г.); ежегодных национальных конференциях ВСГУТУ (Улан-Удэ, 2017, 2018, 2019, 2020, 2022 г.г.); XVI Всероссийской конференции молодых ученых, аспирантов и студентов с международным участием «Пищевые технологии и биотехнологии», (Казань, 2019 г.); Всероссийской научной конференции с международным участием «Механизмы адаптации микроорганизмов к различным условиям среды обитания» (Иркутск, 2019 г.); Международной научно-практической конференции «Перспективные материалы и инновационные технологии: биотехнология, прикладная химия и экология (Киев, 2017, 2018, 2020 г.г.).

Личный вклад автора состоит в постановке цели, задач исследования и их решение; в выборе и обосновании методик экспериментов; непосредственном участии в проведении экспериментов; анализе и обобщении полученных экспериментальных результатов.

Соответствие диссертации паспорту научной специальности. Диссертационная работа соответствует пунктам 3, 10 и 27 паспорта специальности 05.19.05 - Технология кожи, меха, обувных и кожевенно-галантерейных.

Публикации. По теме научной работы, отражающей ее основное содержание, опубликовано 21 печатных работ, в том числе 3 статьи входящие в рецензируемые журналы ВАК, 4 статьи в журналах, входящих в базу данных Scopus, а также получен 1 патент и 1 ТУ «Биополимер».

Объем и структура диссертации Диссертация состоит из введения, 5 глав, выводов, библиографического списка из 213 наименований. Диссертация

изложена на 183 страницах машинописного текста и содержит 36 рисунков, 37 таблиц и 4 приложения.

Диссертационная работа выполнена на кафедре «Технология кожи, меха. Водные ресурсы и товароведение» в соответствии с тематическим планом НИР кафедры по теме «Перспективные технологии переработки коллагенсодержащего сырья» 2016-2020 гг, международной программы ERANETRUS Plus и Фонда содействия инновациям (2017-2018 гг.). Работа была поддержана грантами «УМНИК» (2017-2019 гг.) и «Молодые ученые ВСГУТУ» (2019, 2021), а также при финансовой поддержке Министерства образования и науки Российской Федерации в виде гранта в форме субсидий для научных исследований в сотрудничестве с иностранными организациями (Соглашение 075-15-2021-975, 2021).

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Во введении представлено обоснование выбора темы диссертационной работы, сформулированы цель и задачи исследования, отражена научная новизна и практическая значимость полученных результатов, приведена структура диссертации.

В первой главе проведен анализ научной литературы, как отечественных авторов, так и зарубежных, связанный с характеристикой коллагенсодержащих отходов, образующихся на кожевенных предприятиях. Рассмотрены современные способы выделения коллагена из коллагенсодержащих отходов, и их возможное применение в качестве ранозаживляющего агента.

Во второй главе приведена характеристика объектов и методов исследования для получения биополимера из некондиционного кожевенного сырья. Представлена сетевая модель эксперимента. Описаны стандартные и оригинальные методики, а также современное оборудование, применяемое для исследования комплекса свойств биополимеров. Полученные

экспериментальные данные обрабатывали методом математической статистики.

В третьей главе описано влияние метода щелочной обработки в процессе получения биополимера из некондиционного кожевенного сырья. Разработана и оптимизирована технология получения кисломолочной композиции, применяемой в качестве кислотного агента для разупорядочивания структуры макромолекулы коллагена, представленной микробиоценозом кислототолератных микроорганизмов и продуктов их жизнедеятельности, а именно молочной кислотой и ферментами. По результатам проведенных исследований была усовершенствована технологическая карта и изучено влияние кислотного агента на свойства биополимеров, полученных с применением кисломолочной композиции и молочной кислоты. Исследованы физико-химические и коллоидно-химические показатели полученных биополимеров.

В четвертой главе представлены результаты изучения ранозаживляющего действия, полученных биополимеров 1 и 2 и фармакопейного препарата на экспериментальных животных на модели термического ожога. Оценку ранозаживляющего действия проводили по методу вульнографии и биохимическому анализу крови экспериментальных животных. Для характеристики степени заживления термической раны проведены гистолого-морфометрические исследования.

В пятой главе представлены результаты по расчету экономической эффективности получения биополимера, производство которого, включает в себя следующие затраты: материальные затраты (химические вещества, воду), затраты на электроэнергию, заработную плату рабочим, амортизация оборудования и здания, а также накладные расходы.

ГЛАВА 1. СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ ПЕРЕРАБОТКИ КОЛЛАГЕНСОДЕРЖАЩИХ ОТХОДОВ

В главе представлена характеристика твердых коллагенсодержащих отходов, образующихся на предприятиях кожевенной промышленности. Проведен анализ отечественных и зарубежных авторов, занимающихся вопросами переработки коллагенсодержащих отходов кожевенной промышленности. А также рассмотрены современные способы применения продуктов на основе коллагена в различных отраслях промышленности. Результаты проведенного анализа были опубликованы в работах [1-3].

1.1 Характеристика твердых коллагенсодержащих отходов кожевенного производства

Кожевенная промышленность, согласно стратегии замкнутого цикла в экономике, фокусируется на ресурсной производительности и сохранении экологической обстановки, за счет оптимизации технологической карты, применения новых технологий, обновления оборудования или методов управления [4]. Ресурсосбережение в целом относится к проблемным сферам современной экономики, развитию которой препятствует слабая разработанность его ключевых компонентов, а также противодействие субъектов хозяйствования [5]. Для сохранения экологической обстановки и реализации мероприятий в области ресурсосбережения необходимо развитие малоотходных производств [6, 7], и внедрение инновационных технологий, направленных на рациональное использование сырьевых ресурсов, а также на переработку вторичных продуктов с получение различных продуктов с сохранением баланса ценных компонентов с широким спектром действий [8].

Существует два основных метода снижения негативного воздействия от производства кожи на окружающую среду. Первый метод основан на малоотходном производстве, которое исключает использование вредных химических материалов, изменение технологического цикла с сокращением образования отходов производства. Второй метод связан с комплексной очисткой сточных вод и их повторного использования, а также экологически

безопасным обращением с твердыми отходами и их переработкой с получением продукта для широкого спектра применения [9].

На кожевенных предприятиях в процессе получения готовой кожи образуются отходы, наибольшую долю которых составляют твердые отходы [10, 11]. Уже на стадии контурирования кожевенного сырья и его сортировки до 30-50% от его массы попадает в отходы, вследствие неравномерной толщины, неправильной конфигурации или неправильного хранения кожевенного сырья. Такие отходы подразделяются на возвратные и безвозвратные, а также на недубленые (обрезь после контурирования, мездра, спилковая обрезь) и дубленые отходы (стружка, обрезь с готовой кожи, пыль кожевенная) [12]. Дубленые отходы кожевенной промышленности не находят должного применения и вывозятся на свалки или сжигаются - теплопроводная способность дубленых отходов равна 15-16 МДж/кг, но такой вид утилизации несет негативные последствия, так как при сгорании выделяются летучие газы, которые выбрасываются в атмосферу [13]. Наиболее экологичным методом считается экстракция коллагена из дубленых отходов и дальнейшее его использование [14]. В большинстве дубленые отходы, а именно хромовая стружка используется как наполнитель для различных типов полимеров в комбинации с целлюлозой, поливиниловым спиртом, полиуретаном, а также с каучуком, полимолочной кислотой, полистиролом и эпоксидными полимерами, как правило, для изготовления различных материалов [15].

При выделении коллагена из дубленых отходов дополнительно необходимо проводить процесс раздубливания, что увеличивает себестоимость готового продукта. Тогда как переработка недублёных органосодержащих отходов является наиболее приоритетным методом, рециклизации, так как они содержат ценное природное сырье, которое еще не подвергалось химической обработке и выход готового продукта выше, чем у дубленых отходов.

Значительная часть органосодержащих отходов до сих пор подвергаются захоронению или частичному захоронению, и такой способ

утилизации может нанести вред окружающей среде, так как органические материалы являются благоприятной средой для развития патогенных микроорганизмов под действием абиотических и биотических факторов, что приводит к выделению вредных газов и заражению почвы.

Для снижения негативного воздействия на окружающую среду необходимо вовлекать такие отходы в рециклинг [16] и повышать эффективность использования сырьевых ресурсов путем их комплексной переработки [17-20].

Современное развитие исследований по применению продуктов на основе коллагена диктуются доступностью и уникальной структурой данного белка, и его широким спектром применения [21].

По мнению авторов, [22] коллаген, эластин и кератин, являющиеся основными структурными белками кожевенного сырья, имеют большие перспективы применения продуктов на их основе для ветеринарии, медицины, биотехнологии и косметологии, способствующие развитию ресурсосберегающему направлению переработки органосодержащих отходов.

Известно, что коллаген является основным структурным белком, составляет примерно 25% всех белков млекопитающих [23], который содержится в соединительных тканях, а также в коже, костях, сухожилиях или хрящах.

Он представляет семейство трехмерных молекул для структурной целостности и других функций. Три а-цепи, образующие тройную спиральную часть молекулы, состоят из повторяющихся пептидных триплетов глицина-XY, также X и Y могут быть любой аминокислотой, но в основном они представлены пролином и гидроксипролином [24]. Повторяющиеся последовательности данных пептидных остатков позволяют формировать полужесткие, стабильные трехспиральные молекулы. Содержание пролина и оксипролина составляет 20% от общего количества всех аминокислот, а глицина и аланина - до 50%. Каждая цепь содержит более 1000 аминокислотных остатков и 300 нм в длину [25].

Семейство коллагена состоит из 28 видов и более 40 кодирующих коллаген генов. Их общей структурной особенностью является наличие тройной спирали. Но молекула коллагена может состоять из трех цепей при одинаковой последовательности аминокислот, такая последовательность называется «гомомерной», если две цепи имеют одинаковые последовательности, и одна последовательность отличительная от двух других, или все три цепи имеют разные последовательности, то их называют гетеромерными. Основные типы коллагена, содержащиеся в коже, представлены фибриллярными коллагенами типа I, III, V в виде корзиночновидных переплетений [26, 27]. Нефибриллярные коллагены не способны образовывать фибриллы и к ним относятся коллагены типа IV, VI-VIII, XIV и в основном они являются фундаментом при образовании мембран. Возможность ремоделирования коллагена часто наблюдается на стадии заживления ран [28].

Молекула коллагена I типа имеет диаметр около 1,6 нм и длину около 300 мкм, а коллагеновые фибриллы формируются с диаметром около 100 нм [29] и с молекулярной массой 270-300 кДа [30]. Структура коллагена стабилизирована межмолекулярным водородом, ковалентными связями, а также ионными, гидрофобными и электростатическими взаимодействиями между боковыми остатками аминокислот [31]. Высокое содержание иминогрупп в коллагене приводит к образованию уникальных наборов водородных связей, не встречающихся в других белках [32]. Механические свойства фибриллообразующих коллагенов зависят от наличия ковалентных поперечных связей [33].

Коллаген и его производные проявляют различные свойства, включающие формирование тканевого каркаса, миграцию клеток, ангиогенез и восстановление тканей [34], что открывает возможность применения в косметической, ветеринарной или медицинской промышленностях [35].

В тканях эластин встречается в виде волокон и содержится в легких, дерме, склере, венах хрящах и артериях [36]. Входящий в состав

внеклеточного матрикса (ВКМ) эластин является нерастворимым волокнистым белком, который отвечает за придание эластичности дерме и его содержание варьируется в пределах 2-4% от массы сухой кожи. Предполагается, что период полураспада белка эластина составляет не менее 70-ти лет [37]. Он является основным компонентом эластичных волокон (~ 90%), которые образуются на этапе эластогенеза, представленного взаимодействием большого количества белков и других молекул с образованием каркаса, богатого микрофибриллами фибриллина [38].

Эластин нерастворим в воде, из-за наличия специфических поперечных связей, десмозина и изодесмозина, которые ответственны за образование трехмерной сети из 60-70 аминокислот между двумя точками сшивания [39]. А также эластин устойчив к действию протеолитических ферментов, кислот и оснований. Предшественник эластина - это тропоэластин, который представлен полипептидной цепью с молекулярной массой от 70 до 100 кДа, и содержит аминокислотную последовательность из 26 аминокислот [40, 41]. Гидрофильные области в структуре тропоэластина содержат остатки лизина, 2-3 остатка аланина и имеет 1 остаток пролина, такая последовательность составляет до 55% от всей последовательности аминокислот и содержит значительно меньше полярных аминокислот. Подвергаясь посттрансляционной модификации, а именно образованию поперечных связей за счет окисления боковых цепей лизина и образования альдегидных групп, объясняет устойчивость к протеолизу [42, 43].

Рекомбинантный эластин сохраняет свои механические свойства, аналогичные нативному эластину, и является биосовместимым, что делает его пригодным для использования в качестве белкового каркаса [44, 45]. Рекомбинантный эластин применяют в биомедицине для регенерации кожи, крупных артерий, связок, мочевого пузыря и легких [46]. А также гидролизаты эластина активно применяют в косметологии в качестве регенерирующего и увлажняющего средства, которое применяют для ухода за кожей или в ветеринарии и зоотехнике [47].

Считается, что кератин является наиболее специфичным белком шкуры. Он не растворим воде, растворах солей, кислот, эфирах, а также не расщепляется ферментами желудочно-кишечного тракта человека и животных и не усвояем [48].

Он волокнистый белок, образующий основную структурную составляющую пера, волос, шерсти, рогов, копыт. Волосы крупного рогатого скота и овец получают в качестве побочного продукта на кожевенных заводах после процесса намазного обезволашивания кожевой ткани. Известно, что волос снятый методом намазного обезволашивания составляет до 5% сухих волос в пересчете на массу необработанной шкуры. И поэтому волос после процесса обезволашивания также не перерабатывается и выбрасывается на свалки, что не только приводит к потере кератиновых ресурсов, но и к загрязнению окружающей среды [49]. Кератиновые отходы классифицируются как материал категории 3 в Постановлении (ЕС) 1774/2002 Европейского парламента и Совета 3-го Октябрь 2002 г. [50].

Кератин состоит из длинных полипептидных цепей, расположенных вдоль оси, и содержит больше глутаминовой кислоты, лейцина, серина, пролина и валина, но наиболее специфичные аминокислоты - цистин и цистеин. Сапожниковой А.И. и соавторами установлено, что перспективней применять биологические активные добавки на основе кератина в виде молекулярно-диспергированной субстанцией [51].

Кератины в целом подразделяются на твердые и мягкие, отличающиеся содержанием серы. Так в твердых кератинах содержится до 5% серы, а в мягких - 1% [52]. В зависимости от молекулярной структуры подразделяются на а- и Р-кератин (или кератин I, II типов); а-кератин, широко известный как кератин млекопитающих, содержится в коже, шерсти, копытах, китовом усе; Р-кератин, также известный как кератин птиц и рептилий, содержится в когтях, чешуе, перьях и клювах [53]. Как а-, так и Р-кератин построены из 310 аминокислот [54, 55], но в а-кератине аминокислоты образуют правостороннюю закрученную спираль, стабилизированную водородными

связями [56], а Р-кератин имеет другую структуру, образует жесткую плоскую поверхность, слегка изогнутую относительно друг друга, создавая тем самым складчатую структуру [57]. По данным молекулярных масс а-кератин имеет меньшую молекулярную массу от 40 до 56,5 кДа и более кислую среду (рН 4,5-6,0), тогда как Р-кератин имеет большую молекулярную массу от 50 до 70 кДа, с нейтральным или основным зарядом (рН 6,5-8,5) [58].

Поскольку а-спираль более растяжима и в ней легко разрываются водородные связи, полипептидные цепи приобретают более устойчивую Р -конформацию. Эти особенности кератинов позволяют изменять форму волос и шерсти при тепловой и механической обработке [59].

Образованные дисульфидные связи в структуре кератина, а также внутри- и межмолекулярные мостики, образованные между полярными и неполярными аминогруппами, проявляют уникальные свойства кератина, такие как: прочность, нерастворимость, устойчивость к ферментативному лизису и высокую стабильность [60]. Кроме того, кератин устойчив к термической обработке из-за своей высокой температуры денатурации (точка плавления > 215°С) [61], и не реагируют на окружающую среду [62].

Основными видами экстракции кератина являются гидротермический, кислотный, щелочной или ферментативный гидролиз. Во время гидролиза происходит разрушение дисульфидных и пептидных связей и при действии того и иного реагента получают продукт различной степени деструкции. Обработка кератинсодержащего сырья кислотой, щелочью или высокой температурой приводит к образованию низкомолекулярных продуктов, а для сохранения функциональных свойств кератина и для получения высокомолекулярных продуктов на основе кератина, предлагается применять ферментативный гидролиз [63].

По мнению авторов [64], кератинсодержащее сырье представляет собой ценное сырье, переработка которого открывает новые области применения в качестве вторичного сырья или вспомогательного вещества. И современный уровень разработок позволяет получать нативный кератин с сохранением

молекулярной структуры и биологической активности для получения продуктов применяемых в биотехнологии, ветеринарии, медицине, косметологии.

Таким образом, рациональное использование сырьевых ресурсов кожевенной промышленности и переработка органосодержащих продуктов, является наиболее перспективным направлением. В результате обработки кожевенного сырья большая часть органосодержащих отходов представлена белком коллагеном.

1.2 Современные способы переработки органосодержащих отходов

Согласно технологической карте обработки кожевенного полуфабриката, значительное образование коллагенсодержащих отходов, не подвергшихся, дублению образуется на начальных этапах [65]. И основным компонентом образованных отходов является белок коллаген, который можно перерабатывать с получением продуктов широкого спектра применения.

Внедрение новых методов на этапах экстракции коллагена в основном направлено на уменьшение времени переработки коллагена, снижение потребления энергии и химических реагентов [66].

Современные методы переработки недубленых отходов кожевенной промышленности основаны на кислотном, щелочном, ферментом растворении или нейтральных солевых растворах, и кислых растворах с добавлением ферментов [67].

Недубленое коллагенсодержащее сырье подвергали кислотному растворению в пропионовой кислоте или уксусной кислоте для солюбилизации коллагена. Выход коллагена при растворении в пропионовой кислоте составил 93%, а при растворении в уксусной кислоте - 85% [68]. Для извлечения коллагена из кожевенного сырья применяют уксусную кислоту в смеси с этилендиаминтетрауксусной кислотой, экстракцию проводят в 2 стадии [69].

Многие способы переработки коллагенсодержащих отходов кожевенной промышленности основываются на комбинации нескольких

20

методов. Для увеличения выхода коллагена предлагается проводить измельчение сырья с последующей обработкой в растворе щелочи, промывкой и растворении в органической кислоте, в данном случае в уксусной кислоте [70]. Наиболее распространенным методом для удаления глобулярных белков, протеогликанов и гликопротеинов, присутствующих в структуре коллагена, является, предварительная щелочно-солевая обработка [71]. Известен метод экстракции коллагена из шкур телят, которые предварительно измельчали, обрабатывали 0,5н раствором уксусной кислоты, с последующей обработкой пепсином 0,3%. После ферментной отработки проводили осаждение хлоридом натрия [72]. По мнению авторов, уксусная кислота является самой распространенной кислотой, которую применяют для растворения коллагена, она диспергирует коллаген в однородный раствор, сохраняя при этом естественную структуру коллагена [73]. Также помимо уксусной кислоты можно использовать лимонную, молочную или соляную кислоты [74].

В процессе выделения коллагена из сухожилий крупного рогатого скота использовали 0,1 н. раствор гидроксида натрия в качестве предварительной обработки, 0,5 М уксусную кислоту для экстракции, 0,9 М раствор хлорида натрия на стадии высаливания, центрифугирование и диализ для очистки, и лиофилизацию в качестве конечной стадии [75, 76].

В работе [77] для удаления белков, ДНК и РНК предлагается использовать протеолитический фермент трипсин, ферменты нуклеазы или этилендиаминтетрауксусную кислоту (ЕДТА). Известен метод растворения порошка коллагена в растворе, содержащем уксусную кислоту, этилацетат и воду в соотношении 40:30:30 [78]. Для получения полностью гидролизованного коллагена проводят гидролиз в присутствии соляной кислоты при температуре 120-125°С [79]. В следующем способе гольевую обрезь и гольевой спилок промывают, подвергают гидротермообработке, золению и нейтрализации. Золение проводят в 2-3%-ном растворе пероксида водорода, добавляют в него йодид калия,

нагревают до температуры 100°С и выдерживают в таком режиме в течение 8 мин, добавляют едкий натр и промывают. Нейтрализацию проводят уксусной кислотой до рН 7,0, затем измельчают и гомогенизируют сырье [80].

Желатин извлекаются из кожи и костей с помощью кислоты или щелочных ванн при высоких температурах [81]. Известен простой, недорогой и контролируемый метод для прямого извлечения коллагеновых мезоструктур из сухожилий крупного рогатого скота с использованием водной системы гидроксид натрия (№ОН) и мочевины с последующими циклами замораживания-оттаивания и обработкой ультразвуком, после данной обработки можно выделить коллагеновые фибриллы диаметром 26-230 нм [82].

Известен метод экстракции коллагена кислым раствором, а именно серной или соляной кислотой, после обработки в щелочном растворе, в состав которого входит гидроксид кальция, экстракцию проводят от 3 до 8 раз и делят на фракции: твердая, жидкая и жировая, далее сушат и измельчают [83].

Самый распространённый способ выделения коллагена - это ферментативный метод. Для получения растворов коллагена, применяют комбинированные методы выделения коллагена, которые заключаются в предварительной щелочной или кислотной обработке с последующим растворением в ферменте.

Известен метод выделения коллагена из сухожилий крупного рогатого скота. На первом этапе сырье обрабатывали кислотой, затем расщепляли пепсином, очищали, замораживали и лиофилизировали [84]. Коллаген из шкуры животного растворяли в пепсине, после чего проводили растворение в уксусной кислоте и диализ в течение 3-х дней и лиофилизировали с помощью сублимационной сушилки [85].

Следующий метод экстракции коллагена заключался в криообработке сухожилий, с последующей их промывкой

физиологическим раствором с фосфатным буфером, растворением в 0,5 М уксусной кислоте, либо в 0,003 М хлориде натрия и далее растворением с пепсином, полученного из слизистой оболочки желудка свиньи в соотношении 80 Ед/мг и осаждением 0,9 М хлоридом натрия, диализом, сушкой и замораживанием [86].

Китайские ученые, коллагенсодержащие отходы предварительно промывали для удаления примесей, высушивали и суспендировали в воде, при этом рН суспензии доводили до 2,0. Затем к суспензии добавляли пепсин, реакцию проводили при 38°С в течение 3 ч. по истечению времени рН суспензии доводили до 5,0, нагревали до 100°С и выдерживали при такой температуре в течение 5 мин. На конечном этапе фильтрат собирали, лиофилизировали и измельчали, после чего получали порошок коллагена [87].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Тумурова Туяна Булатовна, 2022 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРНЫХ ИСТОЧНИКОВ

1. Шалбуев, Д.В. К вопросу о развитии кожевенной и меховой промышленности в Республике Бурятия / Д. В. Шалбуев, Н.И. Атанов, Т. Б. Тумурова // Известия вузов. Технология легкой промышленности. - 2022. -№1. DOI: 10.46418/0021 -3489_2022_52_01_10

2. Шалбуев, Д.В. Экологически чистые технологии переработки кожевенного и мехового сырья / Д.В. Шалбуев, В.Д. Раднаева, Н.В. Советкин, Т.Б. Тумурова // Экология и промышленность России. - 2020. - №7. - С. 3036.

3. Тумурова, Т. Б. Современные способы применения продуктов на основе коллагена для ранозаживления / Т. Б. Тумурова, Дм. В. Шалбуев // Кожа и мех в XXI веке: материалы конференции. - Улан-Удэ: Изд-во ВСГУТУ. - 2019. - С. 27-32.

4. Hu, J. Ecological utilization of leather tannery waste with circular economy model / J. Hu, Z. Xiao, R. Zhou, W. Deng, M. Wang, Sh. Ma // Journal of Cleaner Production. - 2011. - V.3. I. 2(3). - P. 221-228.

5. Кононенко, Е. С. Маркетинговый механизм ресурсосбережения в экономике региона: автореф. дис. на соиск. учен. степ. д-р экон. наук. - Ростов-на-Дону, 2017. - 51 с.

6. Богатырев, В. А. Ресурсосбережение как направление модернизации экономики [Электронный ресурс] / В. А. Богатырев, А. В. Богатырев, А. Ю. Ефимычев // Организатор производства. - 2011. - №1. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/resursosberezhenie-kak-napravlenie-modernizatsii-ekonomiki (дата обращения: 05.11.2021).

7. Vania, G. Zuin. Green and Sustainable Separation of Natural Products from Agro-Industrial Waste: Challenges, Potentialities, and Perspectives on Emerging Approaches / G. Zuin Vania, L. Z. Ramin // Chemistry and Chemical Technologies in Waste Valorization. - 2018. P 229-282. https://doi.org/10.1007/978-3-319-90653-9_8

8. Сапожникова, А. И. Товары нового поколения на основе продуктов рециклинга отходов животного происхождения / А. И. Сапожникова, М. В. Горбачева, И. М. Гордиенко // Товароведение, технология и экспертиза: инновационные решения и перспективы развития: Материалы национальной научно-практической конференции, Москва, 28 октября 2020 года. - Москва: ЗооВетКнига, 2020. - С. 11-16.

9. Dixit, S. Toxic hazards of leather industry and technologies to combat threat: a review / S. Dixit, A. Yadav, D. Dwivedi Pr., M. Das // Journal of Cleaner Production. - 2015. - V. 87. - P. 39-49.

10. Vanitha, S. Valorization of solid waste from the tannery industry: Preparation of adsorbent by cost effective method/ S. Vanitha, M. Kumar // International Journal of Pharmacy and Technology. - 2016. - V. 8. - P. 2337723386.

11. Ramdhani, M. A. Model of Green Technology Adaptation in Small and Medium-Sized Tannery Industry / M. A. Ramdhani, H. Aulawi, A. Ikhwana, Y. Mauluddin // Journal of Engineering and Applied Sciences. - 2017. - V. 12. I. 4. -P. 954-962.

12. Баблоян, В. П. Справочник кожевенника (Отделка. Контроль производства) [Электронный ресурс] / В. П. Баблоян, И. А. Еремина, Е. И. Шуленкова. под ред. Н. А. Балберовой. М.: Легпромбытиздат, 1987. - 256 c. Режим доступа: http://furlib.ru/books/item/f00/s00/z0000006/st 162. shtml (Дата обращения 1.04.2020).

13. Famielec, S. Chromium Concentrate Recovery from Solid Tannery Waste in a Thermal Process/ S. Famielec // Materials. - 2020. - V. 13. I. 7. - P. 15331546. https://doi.org/10.3390/ma13071533

14. Prochon, M. Hazardous Waste Management of Buffing Dust Collagen / M. Prochon, A. Marzec, O.Dzeikala // Materials. - 2020. - V. 13. I. 7. - P. 14981513. https://doi.org/10.3390/ma13071498

15. Kilif, E. Leather Waste to Enhance Mechanical Performance of High-Density Polyethylene / E. Kilif, Q. Tarrés, M. Delgado-Aguilar, X. Espinach, P.

Fullana-i-Palmer, R. Puig // Polymers. - 2020. - V. 12. I. 9. - P. 2016-2031. https://doi.org/10.3390/polym12092016

16. Кравченя, Г. Н. Направления и возможности переработки отходов кожевенного производства [Электронный ресурс] / Г. Н. Кравченя, Е. И. Кордикова, А. В. Спиглазов // Труды БГТУ. Серия 2: Химические технологии, биотехнология, геоэкология. 2017. №2. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/napravleniya-i-vozmozhnosti-pererabotki-othodov-kozhevennogo-proizvodstva (дата обращения: 09.04.2022).

17. Chojnacka, K. Progressing sustainable technologies of leather wastes valorization as solutions for the circular economy / K. Chojnacka, D. Skrzypczak, K. Mikula, A. Witek-Krowiak, G. Izydorczyk, K. Kuligowski, P. Bandrów, M. Kulazynski // Journal of Cleaner Production. - 2021. - V. 313. doi.org/10.1016/jjclepro.2021.127902.)

1S. Koppiahraj, K. Leather Waste Management Scenario in Developed and Developing Nations / K. Koppiahraj, S. Bathrinath, S. Saravanasankar // International Journal of Engineering and Advanced Technology (IJEAT). - 2019. -V. 9. I - 1S4 - P. S52-S57. doi:10.35940/ijeat.A1056.1291S419

19. Jiang, H. The status and developments of leather solid waste treatment: A mini-review / H. Jiang, J. Liu, W. Han // Waste Management & Research. - 2016. -V. 34. I - 5 - P. 399-40S. doi: 10.1177/0734242x16633772

20. Yorgancioglu, A. Value Addition to Leather Industry Wastes and ByProducts: Hydrolyzed Collagen and Collagen Peptides [Электронный ресурс] / A. Yorgancioglu, B. Baçaran, A. Sancakli // Waste in Textile and Leather Sectors. 2020. DOI: 10.5772/intechopen.92699

21. Чурсин, В. И. Свойства биополимерных композиций на основе продуктов гидролиза коллагена и полисахаридов / В. И. Чурсин // Журнал прикладной химии. - 200S. - Т. S1. - №. 5. - С. S21-S24.

22. Сапожникова, А. И. Научно-техническое обоснование путей и возможностей решения экологических проблем в кожевенной

промышленности / А. И. Сапожникова, Д. В. Шалбуев // Вестник Технологического университета. - 2017. - Т. 20. - № 15. - С. 61-66.

23. He, L. Collagen and collagen mimetic peptide conjugates in polymer science/ L. He, P. Theato // European Polymer Journal. - 2013. - V. 49. I 10 - P. 2986-2997.

24. Bella, J. Collagen structure: new tricks from a very old dog // Biochemical Journal. - 2016. - V. 473. I 8 - P. 1001-1025. doi:10.1042/BJ20151169

25. Gordon, M.K. Collagens / M.K. Gordon, R.A. Hahn // Cell and Tissue Research. - 2009. - V. 339. I 1 - P. 247-257. doi.org/10.1007/s00441-009-0844-4

26. Борзых, О.Б. Синтез коллагена в коже, его функциональные и структурные особенности / О. Б. Борзых, Н. А. Шнайдер, Е. И. Карпова, М. М. Петрова, О. М. Демина, Р. Ф. Насырова // Медицинский вестник Северного Кавказа. - 2021. - Т. 16. - № 4. - С. 443-450. doi.org/10.14300/mnnc.2021.16108

27. Ding, C. The response of collagen molecules in acid solution to temperature / C. Ding, M. Zhang, K. Wu, G. Li // Polymer. - 2014. - V. 55. I 22 -P. 5751-5759.

28. Li, Y. Targeting and mimicking collagens via triple helical peptide assembly / Y. Li, S. M. Yu // Current Opinion in Chemical Biology. - 2013. - V. 17. I. 6. - P. 968-975.

29. Chang, S.-W. Molecular biomechanics of collagen molecules / S.-W. Chang, M. J. Buehler // Materials Today. - 2014. - V. 17. I. 2. - P. 70-76. doi:10.1016/j.mattod.2014.01.019

30. Pastorino, L. at all. Oriented collagen nanocoatings for tissue engineering / L. Pastorino, E. Dellacasa, S. Scaglione, M. Giulianelli, F. Sbrana, M. Vassalli, C. Ruggiero // Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. - 2014. - V. 114. - P. 372-378.

31. Skopinska-Wisniewska, J. Dialysis as a method of obtaining neutral collagen gels / J. Skopinska-Wisniewska, K. Olszewski, A. Bajek, A. Rynkiewicz, A. Sionkowska //Materials Science and Engineering: C. - 2014. - V. 1. I. 40. - P. 65-70. doi: 10.1016/j.msec.2014.03.029.

32. Meiners, F. Impact of temperature and electrical potentials on the stability and structure of collagen adsorbed on the gold electrode/ F. Meiners, M. Ahlers, I. Brand, G. Wittstock // Surface Science. - 2015. - V. 631. - P. 220-228. doi:10.1016/j.susc.2014.07.001

33. Ricard-Blum, S. The collagen family // Cold Spring Harbor Perspectives in Biology. - 2010. - V. 3 I. 1. - P. 1-20. doi:10.1101/cshperspect.a004978.

34. Stylianou, A. Investigation of the influence of UV irradiation on collagen thin films by AFM imaging/ A. Stylianou, D. Yova, E. Alexandratou // Materials Science and Engineering: C. - 2014. - V. 45. - P. 455-468. doi:10.1016/j.msec.2014.09.006.

35. Henriksen, K. Type I Collagen / K. Henriksen, M. A. Karsdal // Biochemistry of Collagens, Laminins and Elastin. - 2016. - V. 1. I. 11 - P. 1-11. doi: 10.1016/b978-0-12-809847-9.00001-5

36. Yoseph, Z. Extraction of elastin from tannery wastes: A cleaner technology for tannery waste management/ Z. Yoseph, G. C. Jayakumar, B. A. Demessie, A. T. Selvi, K.J. Sreeram, J. R. Rao // Journal of Cleaner Production. -2019. - V. 243. - P. 1-7. doi:10.1016/j .jclepro.2019.118471

37. Wen, Q. Elastin Biomaterials in Dermal Repair/ Q. Wen, S. M. Mithieux, A. S. Weiss // Trends in Biotechnology. - 2020. - V. 38. I. 3. - P. 280-291. doi.org/10.1016/j.tibtech.2019.08.005.

38. Panwar, P. Expression of elastolytic cathepsins in human skin and their involvement in age-dependent elastin degradation / P. Panwar, T. Hedtke, A. Heinz, P.-M. Andrault, et. all // Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - General Subjects. - 2020. - V. 1864. https://doi.org/10.1016Zj.bbagen.

39. Sionkowska, A. Collagen blended with natural polymers: Recent advances and trends // Progress in Polymer Science. - 2021. - V. 122. - P. 1-12. doi.org/10.1016/j.progpolymsci.2021.101452

40. Wahart, A. Role of Elastin Peptides and Elastin Receptor Complex in metabolic and cardiovascular diseases / A. Wahart, T. Hocine, C. Albrecht, A.

Henry, T. Sarazin, L. Martiny, L. Duca // The FEBS Journal. - 2019. - V. 286. - P. 2980-2993. doi: 10.1111/febs.14836

41. Yanagisawa, H. Unraveling the mechanism of elastic fiber assembly: The roles of short fibulins / H. Yanagisawa, E. C. Davis // The International Journal of Biochemistry & Cell Biology. - 2010. - V. 42. I. 7. - P. 1084-1093. doi: 10.1016/j.biocel.2010.03.009

42. Mora Huertas, A. C. Degradation of tropoelastin and skin elastin by neprilysin / A. C. Mora Huertas, C.E.H. Schmelzer, C. Luise, W. Sippl, M. Pietzsch, W. Hoehenwarter, A. Heinz // Biochimie. - 2018. - V. 146. - P. 73-78. doi.org/10.1016/j.biochi.2017.11.018.

43. Hong, Y. J. Serum Elastin-Derived Peptides and Anti-Elastin Antibody in Patients with Systemic Sclerosis / Y. J. Hong, J. Kim, B. R. Oh, Y. J. Lee, E. Y. Lee, E. B. Lee, Y. W. Song // Journal of Korean Medical Science. - 2012. - V. 27. I. 5. - p. 484-488. doi:10.3346/jkms.2012.27.5.48

44. Muiznieks, L.D. Genipin Cross-Linking of Elastin and Elastin-Based Proteins // Protein Scaffolds. - V. 1798. - P. 213-221. doi.org/10.1007/978-1-4939-7893-9_17

45. Machado, R. Elastin-Based Nanoparticles for Delivery of Bone Morphogenetic Proteins/ R. Machado, P. C. Bessa, R. L. Reis, J. C. Rodriguez-Cabello, M. Casal // Nanoparticles in Biology and Medicine: Methods and Protocols, Methods in Molecular Biology. - 2012. - V. 906. - P. 353-363. DOI 10.1007/978-1-61779-953-2_29

46. Ferraro, V. The "sisters" a-helices of collagen, elastin and keratin recovered from animal by-products: Functionality, bioactivity and trends of application/ V. Ferraro, M. Anton, V. Sante-Lhoutellier // Trends in Food Science & Technology. - 2016. - V. 51. - P. 65-75. doi:10.1016/j.tifs.2016.03.006

47. Патент № 2092071 C1 Российская Федерация, МПК A23K 1/10. Способ получения эластина № 95117244/13: заявл. 06.10.1995: опубл. 10.10.1997 / А. И. Сапожникова, С. А. Каспаръянц, Н. В. Месропова, Н. М. Гордиенко.

48. Алимарданова, М. Биохимия мяса и мясных продуктов: Учебное пособие. — Астана: Фолиант. - 2009. — 184 с.

49. Li, R. Preparation of regenerated wool keratin films from wool keratin-ionic liquid solutions/ R. Li, D. Wang // Journal of Applied Polymer Science. - 2012.

- V. 127. I. 4. P. 2648-2653. doi:10.1002/app.37527

50. Kornillowicz-Kowalska, T. Biodegradation of keratin waste: Theory and practical aspects / T. Kornillowicz-Kowalska, J. Bohacz // Waste Management. -2011. - V. 31. I. 8. - P. 1689-1701. doi:10.1016/j.wasman.2011.03

51. Сапожникова, А. И. Оптимизация получения кератносодержащего препарата из овечьей шерсти / А. И. Сапожникова, О. В. Баранцева // Ветеринарная медицина. - 2009. - № 1-2. - С. 16-17.

52. Karthikeyan, R. Industrial applications of keratins-A review / R. Karthikeyan, S. Balaji, P. K. Sehgal // Journal of Scientific & Industrial Research. -

2007. - V. 66. - P. 710-715.

53. Meyers, M. A. Biological materials: Structure and mechanical properties/ M. A. Meyers, P.-Y. Chen, A. Y-M. Lin, Y. Seki // Progress in Materials Science. -

2008. - V. 53. I. 1. - P. 1-206.

54. Loschke, F. Regulation of keratin network organization/ F. Loschke, K. Seltmann, J.-E. Bouameur, T. M. Magin // Current Opinion in Cell Biology. - 2015.

- V. 32. - P. 56-64.

55. Ma, B. Pure keratin membrane and fibers from chicken feather/ B. Ma, X. Qiao, X. Hou, Y. Yang, // International Journal of Biological Macromolecules. -2016. - V. 89. - P. 614-621. doi:10.1016/j.ijbiomac.2016.04

56. Lazarus, B. S. Engineering with keratin: A functional material and a source of bioinspiration/ B. S. Lazarus, C. Chadha, A. Velasco-Hogan, J. D.V. Barbosa, I. Jasiuk, M. A. Meyers // iScience. - 2021. - V. 24. I. 8. - P. 1-48. doi.org/10.1016/j.isci.2021.102798

57. McKittrick, J. The Structure, Functions, and Mechanical Properties of Keratin / J. McKittrick, P.-Y. Chen, S. G. Bodde, W. Yang, E. E. Novitskaya, M. A.

Meyers // JOM. - 2012. - V. 64. I. 4. - P. 449-468.doi:10.1007/s11837-012-0302-8

58. Yu, B. Assembly and recognition of keratins: A structural perspective [Электронный ресурс] / B. Yu, D. Kong, C. Cheng, D. Xiang, L. Cao, Y. Liu, Y. He // Seminars in Cell & Developmental Biology. - 2021. /doi.org/10.1016/j.semcdb.2021.09.018

59. Луценко Н.Г. Начала биохимии: Курс лекций / РХТУ им. Д.И. Менделеева - М.: МАИК «Науки. Интерпериодика». - 2002. - 125 с.

60. Pulidori, E. One-Pot Process: Microwave-Assisted Keratin Extraction and Direct Electrospinning to Obtain Keratin-Based Bioplastic/ E. Pulidori, S. Micalizzi, E. Bramanti, L. Bernazzani, C. Duce, C. De Maria, et all // International journal of molecular sciences. - 2021. V. 22. I. 17. doi: 10.3390/ijms22179597

61. Ranjit, E. Biofunctional approaches of wool-based keratin for tissue engineering / E. Ranjit, S. Hamlet, R. George, A. Sharma, R. Love // Journal of Science: Advanced Materials and Devices. - 2022. - V.7. I.1. doi.org/10.1016/j.jsamd.2021.10.001

62. Wang, B. Keratin: Structure, mechanical properties, occurrencein biological organisms, and efforts at bioinspiration [Электронный ресурс] / B. Wang, W. Yang, J. Mc Kittrick, M. A. Meyers // Progress in Materials Science. -2016. - V. 76. - P. 229-318.

http: //meyers group. ucsd.edu/papers/j ournals/Meyers%20403. pdf (дата обращения 12.03.2022)

63. Eslahi, N. An investigation on keratin extraction from wool and feather waste by enzymatic hydrolysis/ N. Eslahi, F. Dadashian & N. H. Nejad // Preparative Biochemistry & Biotechnologyю - 2013. -V. 43. I. 7. - P. 624-648 doi: 10.1080/10826068.2013.763826

64. Бобылева, О. В. Кератинсодержащие отходы: проблемы переработки и новые решения в утилизации / О. В. Бобылева, А. И. Сапожникова // Товароведение, технология и экспертиза: инновационные решения и перспективы развития: Материалы национальной научно-практической

конференции, Москва, 28 октября 2020 года. - Москва: ЗооВетКнига, 2020. -С. 39-45.

65. Buljan, J. Mass balance in leather processing [Электронный ресурс] / J. Buljan, G. Reich, J. Ludvik //United Nations industrial development Organization. Regional Programme for Pollution Control in the Tanning Industry in South-East Asia. - 2000. - P. 27. https://www.ilifo.org/images/Mass balance.pdf (дата обращения 12.01.2022)

66. Oliveira, V. de. M. Physical, biochemical, densitometric and spectroscopic techniques for characterization collagen from alternative sources: A review based on the sustainable valorization of aquatic by-products [Электронный ресурс] / V. de M. Oliveira, C. R. D. Assis, B. de A. M. Costa, R. C. de A. Neri, F. T. Monte, H. M. S. da C. V. Freitas, A. L. F. Porto // Journal of Molecular Structure. - 2021. - V. 1224. doi:10.1016/j.molstruc.2020.12902

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0022286020313466?via%3Dih ub (дата обращения 12.01.2022)

67. Schmidt, M. M. Collagen extraction process [Электронный ресурс] / M. M. Schmidt, R.C.P. Dornelles, R.O. Mello, E.H. Kubota, M.A. Mazutti, A.P. Kempka, I.M. Demiate // International Food Research Journal. - 2016. - V. 23. I. 3. - P. 913-922. http://www.ifrj.upm.edu.my/23%20(03)%202016/(1).pdf (дата обращения 12.01.2022)

68. Masilamani, D. Extraction of collagen from raw trimming wastes of tannery: a waste to wealth approach / D. Masilamani, B. Madhan, G. Shanmugam, S. Palanivel, B. Narayan // Journal of Cleaner Production. - 2016. - V. 113, - P. 338-344. doi: 10.1016/j.jclepro.2015.11.087

69. Savchuk, O. Extraction and Characterization of Collagen Obtained from Collagen-Containing Wastes of the Leather Industry / O. Savchuk, N. Raksha, L. Ostapchenko, O. Mokrousova, O. Andreyeva // Solid State Phenomena. - 2017/ -V. 267 - P.172-176. doi.org/10.4028/www.scientific.net/ssp.267.172.

70. Патент № 2322249 Российская Федерация, МПК A61K 35/32 Способ получения коллагена из биологического материала № 2006138769/15: заявл. 02.11.2006: опубл. 20.04.2008 / П.Е. Анфимов, Н.С. Краснова.

71. Сапожникова, А. И. Изучение возможности получения золей коллагена пероксидно-щелочным способом / А. И. Сапожникова, Д. В. Белевцова // Известия высших учебных заведений. Серия: Химия и химическая технология. - 2006. - Т. 49. - № 12. - c. 73-76.

72. Yang, J. Novel Modification of Collagen: Realizing Desired Water Solubility and Thermostability in a Conflict-Free Way / J. Yang, C. Ding, L. Tang, F. Deng, Q. Yang, H. Wu, L. Chen, Y. Ni, L. Huang, M. Zhang // ACS Omega. -2020. - V. 5 I. 11. - P. 5772-5780. doi: 10.1021/acsomega.9b03846

73. Yang, H. Changes in aggregation behavior of collagen molecules in solution with varying concentrations of acetic acid / H. Yang, S. Xu, L. Shen, W. Liu, G. Li // International Journal of Biological Macromolecules. - 2016. - V. 92. -P. 581-586. doi:10.1016/j.ijbiomac.2016.07.08

74. Bayon, B. Biopolymers from Wastes to High-Value Products in Biomedicine / B. Bayon, I. R. Berti, A. M. Gagneten, G. R. Castro // Waste to Wealth. - 2017. - P. 1-44. doi:10.1007/978-981-10-7431-8_1

75. Yulianti, D. H. Isolation, purification, and characterization of bovine tendon collagen and analysis of glycine, proline, and hydroxyproline by highperformance liquid chromatography-fluorescence / D. H. Yulianti, T. I. Rukmana // International Journal of Applied Pharmaceutics. - 2018. - V. 10. I. 1. - P. 311-315. doi.org/10.22159/ijap.2018.v10s1.69

76. Mehta, A. Microenvironmental changes in collagen/polyvinyl alcohol blends in the presence of ionic liquid: A spectroscopic analysis / A. Mehta, I. Kanungo, J. R. Rao, N. N. Fathima // Journal of Bioactive and Compatible Polymers. - 2015. - V. 30. I. 2. - P. 167-177. doi:10.1177/0883911514566016

77. Troy, E. Nature-Based Biomaterials and Their Application in Biomedicine [Электронный ресурс] / E. Troy, M.A. Tilbury, A.M. Power, J.G. Wall // Polymers. - 2021. - V. 13. I. 19. doi.org/10.3390/polym13193321.

https://www.researchgate.net/publication/354934368 Nature-

Based Biomaterials and Their Application in Biomedicine. (дата

обращения 19.01.2022)

78. Montalbano, G. Biomimetic Scaffolds Obtained by Electrospinning of Collagen-Based Materials: Strategies to Hinder the Protein Denaturation / G. Montalbano, C. Tomasina, S. Fiorilli, S. Camarero-Espinosa, C. Vitale-Brovarone, L. Moroni // Materials. - 2021. - V. 14. I. 16. https://doi.org/10.3390/ma14164360

79. Патент № 2680968 Российская Федерация, МПК C07K 1/12 Способ получения полностью гидролизованного коллагена № 2018133623: заявл. 24.09.2018: опубл. 01.03.2019 / Э.М.Тер-Саркисян.

80. Патент № 2731984 Российская Федерация, МПК A23J 1/10 Способ получения коллагена из кожевенного сырья. № 2019126889: заявл. 26.08.2019: опубл. 09.09.2020 / Артюшкова Е.Б., Фурман Ю.В., Жеребилов Н.И., Аниканов А.В.

81. Duconseille, A. Gelatin structure and composition linked to hard capsule dissolution: A review / A. Duconseille, T. Astruc, N. Quintana, F. Meersman, V. Sante-Lhoutellier, // Food Hydrocolloids. - 2015. - V. 43. - P. 360-376. doi:10.1016/j.foodhyd.2014.06.00

82. Pei, Y. Liquid-Exfoliated Mesostructured Collagen from the Bovine Achilles Tendon as Building Blocks of Collagen Membranes / Y. Pei, K. E. Jordan, N. Xiang, R. N. Parker, X. Mu, L. Zhang, Z. Feng, Y. Chen, C. Li, C. Guo, K. Tang, D. L. Kaplan. // ACS Applied Materials & Interfaces. - 2021. -V. 13. I. 2. - P. 3186-3198. doi: 10.1021/acsami.0c20330

83. Патент 2756795 Российская Федерация, МПК A23J 1/10. Способ получения коллагенового материала в виде частиц и полученный этим способом коллагеновый материал. №2 2018143971: заявл. 14.02.2017: опубл. 05.10.2021 бюл. №28 / Т. Майснер, А.В. Слот

84. Patent JP2017144731A. Method for biofabricating composite material [Электронный ресурс] / Publication of 2017-08-24.

https://patents. google. com/patent/JP2017144731 A/en (дата обращения 19.01.2022)

85. Dybka, K. Гидролизат коллагена как новая диетическая добавка [Электронный ресурс] / K. Dybka, P. Walczak // Научный вестник лодзинского технического университета. Пищевая химия и биотехнология. - 2009. - Т. 73. 1058. - с. 83-92.

https://geladrink.ru/local/templates/main/pdf/25d63c0c0cb23c8caa8d15beb3dcb29 d.pdf (дата обращения 19.01.2022)

86 Delgado, L. M. Acetic acid and pepsin result in high yield, high purity and low macrophage response collagen for biomedical applications / L. M. Delgado, N. Shologu, K. Fuller, D. I. Zeugolis // Biomedical Materials. - 2017. - V. 12. I. 6. -P. doi: 10.1088/1748-605x/aa838d

87. You, Y. Fabrication of a novel high-performance leather waste-based composite retention aid [Электронный ресурс] /Y. You, J. Zhanga, X. Sun // RSC Advances. - 2019. - V. 9. I. 28. - P. 16271-16277. doi:10.1039/C9RA02407G

88. Georgiana, M. Collagen-Based Drug Delivery Systems for Tissue Engineering [Электронный ресурс] / M. Georgiana, I. Titorencu, M. Violeta // Biomaterials Applications for Nanomedicine. - 2011. - P. 333-359. doi:10.5772/22981 (дата обращения 11.01.2022)

89. Hussien, M. Enzymatic Hydrolysis of Limed Trimmings: Preparation, Characterization and Application of Collagen Hydrolysate / M. Hussien, S. K. Ramadass, B. Madhan, J. Rao // Journal of the american leather chemists association. - 2017. V. 112. I. 2. - P. 44 - 51

90. Mohammad, A.W. Process for production of hydrolysed collagen from agriculture resources: Potential for further development / A.W. Mohammad, N.M. Suhimi, A.G.K.A. Aziz, J.M. Jahim // Journal of Applied Sciences. - 2014. V. 14. I. 12. - P.1319-1323 .doi:10.3923/jas.2014.1319.1323

91. Gomez-Guillén, M.C. Functional and Bioactive Properties of Collagen and Gelatin from Alternative Sources: A review / M.C. Gomez-Guillén, B.

Giménez, M.E. López-Caballero, M.P. Montero. // Food Hydro-colloids. - 2011.

- V. 25. I. 8. - P. 1813-1827.

92. Патент № 2278166 C1 Российская Федерация, МПК C14C 1/00, C09H 1/00, C09H 1/04. Способ получения белкового гидролизата: № 2004137635/12: заявл. 23.12.2004: опубл. 20.06.2006 / В. И. Чурсин, Д. А. Сафронов, Ш. А. Маллашахбанов [и др.]; заявитель Федеральное государственное унитарное предприятие "Центральный научно-исследовательский институт кожевенно-обувной промышленности" (ФГУП ЦНИИКП).

93. Чурсин, В. И. Совместимость биополимеров в композициях и свойства плёнок / В. И. Чурсин // Дизайн и технологии. - 2012. - № 32(74). -С. 69-75.

94. Чурсин, В. И. Ферментативно-термическая деструкция коллагенсодержащих отходов неспецифическими ферментными препаратами / В. И. Чурсин, К. А. Громова // Дизайн и технологии. - 2016. - № 53(95). - С. 57-63.

95. Hong, H. Amylase Enhances Production of Low Molecular Weight Collagen Peptides from the Skin of Spent Hen, Bovine, Porcine and Tilapia / H. Hong, H. Fan, B. C. Roy, J. Wu // Food Chemitry. - 2021. - V. 352. - P. 129355.

96. Wang, J. Extraction and Characterization of Acid-soluble and Pepsin-soluble Collagen from Skin of Loach (Misgurnus anguillicaudatus)/ J. Wang, X. Pei, H. Liu, D. Zhou // International Journal of Biological Macromolecules.

- 2018. - V. 106. - P. 544-550.

97. Акчурина, Р. А. Получение биополимерных композиций на основе продуктов ферментативно-термической деструкции голья / Р. А. Акчурина, В. И. Чурсин // Инновационное развитие легкой и текстильной промышленности (ИНТЕКС-2014): тезисы докладов всероссийской научной студенческой конференции, Москва, 15-16 апреля 2014 года / Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Московский государственный университет дизайна и технологии». - Москва: Федеральное государственное бюджетное

образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московский государственный университет дизайна и технологии", 2014. - С. 74-75.

98. Noorzai, S. Collagen Extraction from Various Waste Bovine Hide Sources / S. Noorzai, C. J. R. Verbeek, M. C. Lay, J. Swan // Waste and Biomass Valorization. - 2020. - V. 11. I. 11. - P. 5687-5698. doi:10.1007/s12649-019-00843-2

99. Mocan, E. Aspects of Collagen Isolation Procedure / E. Mocan, O. Tagadiuc, V. Nacu // Curierul Medical. - 2011. - V.2. I.320. - P. 3-5.

100. León-López, A. Hydrolyzed Collagen—Sources and Applications / A. León-López, A. Morales-Peñaloza, V.M. Martínez-Juárez, A. Vargas-Torres, D.I. Zeugolis, G. Aguirre-Álvarez // Molecules. - 2019. - V. 24. I. 22. - P. 40314047.

101. Dragunova, M. Microbial Consortium for Processing Secondary Collagen-Containing Raw Materials into Feeds for Farm Animals/ M. Dragunova, M. V. Pozdnyakova, A, K. Asyakina, L. V. Kriger, O. S. Velichkovitch, N. V. Kozlova, O. Y. Prosekov // International Journal of Engineering & Technology. -2018. - V. 7. I. 4.38. - P. 125-130. doi.org/10.14419/ijet.v7i4.38.24337.

102. Патент 2635995 Российская Федерация, МПК A61K 38/39 Гидролизат коллагена и его применение. № 2014126216: заявл. 21.11.2012: опубл. 17.11.2017 бюл. №32 /Фрех Х-У, Эссер Ш., Хаусманнс Ш.

103. Pei, Y. Dissolution of collagen fibers from tannery solid wastes in 1-Allyl-3-methylimidazolium chloride and modulation of regenerative morphology / Y. Pei, S. Chu, Y. Zheng, J. Zhang, H. Liu, X. Zheng, K. Tang // ACS Sustainable Chemistry & Engineering. - 2018. V.7. I. 2. - P. 2530-2537. doi: 10.1021/acssuschemeng.8b05428

104. Liu, S., Li, Q. & Li, G. Investigation of the solubility and dispersion degree of calf skin collagen in ionic liquids // J Leather Sci Eng. - 2019. - V. 1, I. 11. https://doi.org/10.1186/s42825-019-0013-9)

105. Патент 2406732 Российская Федерация, МПК C08H 1/06 Коллагеновый порошок и термопластичная композиция на основе коллагена для приготовления сформованных изделий № 2008140320/05: заявл. 13.03.2006: опубл. 20.12.2010 бюл. №35 / В. ЭТАЙО ГАРРАЛДА, О. КОТЛАРСКИ, Ф. МАЗЕР, М. МЕЙЕР.

106. Ocak, B. Film-forming ability of collagen hydrolysate extracted from leather solid wastes with chitosan // Environmental Science and Pollution Research. - 2018. - V. 25. I. 5. - P.4643-4655. doi.org/10.1007/s11356-017-0843-z

107. Thanikaivelan, P. Collagen based magnetic nanocomposites for oil removal applications / P. Thanikaivelan, N.T. Narayanan, B.K. Pradhan, P.M. Ajayan // Scientific reports. - 2012. - V. 2. I. 1. - P.1-7. https://doi.org/10.1038/srep00230

108. Thanikaivelan, P. Nanobiocomposite from Collagen Waste Using Iron Oxide Nanoparticles and Its Conversion Into Magnetic Nanocarbon / P. Thanikaivelan, T. N. Narayanan, B. K. Gupta, A. L. M. Reddy, P. M. Ajayan // Journal ofNanoscience and Nanotechnology. - 2015. - V. 15. I. 6. - P. 4504-4509. doi:10.1166/jnn.2015.9720

109. Berhanu T. M., Bifunctional Hybrid Composites from Collagen Biowastes for Heterogeneous / T. M. Berhanu, R. Murali, P.Thanikaivelan// Applications ACS Omega. - 2017. - V. 2 I. 8. - P. 5260-5270. DOI: 10.1021 /acsomega.7b01011

110. Kandamchira, A. Influence of functionalized nanoparticles on conformational stability of type I collagen for possible biomedical applications / A. Kandamchira, S. Selvam, N. Marimuthu, S.K. Janardhanan, N.N. Fathima // Materials Science and Engineering: C. - 2013. V. 33. I. 8. P. 4985-4988.

111. Liu, D. Collagen and Gelatin / D. Liu, M. Nikoo, G. Boran, P. Zhou, J. M. Regenstein //Annual Review of Food Science and Technology. - 2015. -V. 6. I. 1. - P. 527-557. doi: 10.1146/annurev-food-031414-111800

112. Захарова, В. А. Композиционные биополимерные пленки целевого назначения / В. А. Захарова, В. И. Чурсин // Инновационное развитие легкой и текстильной промышленности (ИНТЕКС-2018): Сборник материалов Международной научной студенческой конференции, Москва, 17-19 апреля 2018 года. - Москва: Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Российский государственный университет имени А.Н. Косыгина (Технологии. Дизайн. Искусство)", 2018. - С. 173-177.

113. Чурсин, В. И. Получение белковых продуктов из отходов кожевенного производства / В. И. Чурсин, К. А. Громова // Переработка отходов текстильной и легкой промышленности: теория и практика: Материалы докладов Международной научно-практической конференции, Витебск, 30 ноября 2016 года / Витебский государственный технологический университет. - Витебск: Витебский государственный технологический университет, 2016. - С. 116-119.

114. Патент 2609635 Российская Федерация, МПК A23J 1/10. Способ получения коллагенового белка из сырья животного происхождения, коллагеновые продукты и способы их использования. №2 2015155932: заявл. 25.12.2015: опубл. 02.02.2017 бюл. №4 / Ф.А. Азарченко

115. Патент 2671401 Российская Федерация, МПК A23K 38/01. Гидролизат коллагена и его применение. № 2015121573: заявл. 04.11.2013: опубл. 31.10.2018 бюл. №31 / Эссер Ш, Гизен-Визе М., Фрех Х-У., Хаусманнс Ш.

116. Wang, H. A Review of the Effects of Collagen Treatment in Clinical Studies // Polymers. - 2021. - V. 13. I. 22. - P. 3868. https://doi.org/10.3390/polym13223868

117. An, B. Collagen interactions: Drug design and delivery / B. An, Y.-S. Lin, B. Brodsky // Advanced Drug Delivery Reviews. - 2016. - V. 97. - P. 69-84. doi:10.1016/j.addr.2015.11.013.

118. Catalina, M. Tailor-made biopolymers from leather waste valorization / M. Catalina, J. Cot, A.M. Balu, J. C. Serrano-Ruizb, R. Luque // Green Chemistry. - 2012. - V.14. I. 2. - P. 308-312.

119. Marzec, E. Efficacy evaluation of electric field frequency and temperature on dielectric properties of collagen cross-linked by glutaraldehyde/ E. Marzec, K. Pietrucha, // Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. - 2018. - V. 162. - P. 345-350. doi:10.1016/j.colsurfb.2017.12.0

120. Xu, Q. Collagen- and hyaluronic acid-based hydrogels and their biomedical applications / Q. Xu, J.E. Torres, M. Hakim, P.M. Babiak, P. Pal, C.M. Battistoni, M. Nguyen, A. Panitch, L. Solorio, J.C. Liu, // Materials Science and Engineering: R: Reports. - 2021. - V. 146. - P. 100641 doi.org/10.1016/j.mser.2021.100641.

121. Nitipir, C.O. Hybrid collagen-NaCMC matrices loaded with mefenamic acid for wound healing / C.O. Nitipir, S.T. Marin, M.M. Marin, M.A. Kaya, M.V. Ghica, N.A. Mederle // Revista de Chimie. - 2017. - V. 68. I. 11. -P. 2605-2609.

122. Cui, M. Preparation, Cell Compatibility and Degradability of Collagen-Modified Poly(lactic acid) / M. Cui, L. Liu, N. Guo, R. Su, F. Ma // Molecules. - 2015. - V. 20. I. 1. - P. 595-607. doi:10.3390/molecules20010595

123. Davidenko, N. Control of crosslinking for tailoring collagen-based scaffolds stability and mechanics / N. Davidenko, C. F. Schuster, D. V. Bax, N. Raynal, R. W. Farndale, S. M. Best, R. E. Cameron // Acta Biomaterialia. -2015. - V. 25. - P. 131-142. doi:10.1016/j.actbio.2015.07.034

124. КР101742594. Preparation Method of a Dental Collagen Membrane with Improved Durability and a Dental Collagen Membrane Prepared Thereby [Электронный ресурс]

https://patents.google.com/patent/KR101742594B 1/en?oq=%D0%9A%D0%A010 1742594 (дата обращения 15.12.2021)

125. Banglmaier, R. F. (2015). Induction and quantification of collagen fiber alignment in a three-dimensional hydroxyapatite-collagen composite

scaffold/ R. F. Banglmaier, E. A. Sander, P. J. VandeVord // Acta Biomaterialia.

- 2015. - V. 17. - P. 26-35. doi:10.1016/j.actbio.2015.01.033

126. Kozlowska, J. Effects of different crosslinking methods on the properties of collagen-calcium phosphate composite materials/ J. Kozlowska, A. Sionkowska // International Journal of Biological Macromolecules. - 2015.

- V. 74. - P. 397 - 403. doi:10.1016/j.ijbiomac.2014.12.02

127. Albu, M.G. Collagen Gels and Matrices for Biomedical Application / M.G. Albu // Lambert Academic Publishing, GmbH & Company KG. - 2011.

128. Wang H. A Review of the Effects of Collagen Treatment in Clinical Studies // Polymers. - 2021. - V. 13. I. 22. - P. 3868. https://doi.org/10.3390/polym13223868

129. Abas, M. Collagen in diabetic wound healing / M. Abas, M. El Masry, H. Elgharably // Wound Healing, Tissue Repair, and Regeneration in Diabetes. - 2020. - P. 393-401. doi:10.1016/b978-0-12-816413-6.00019-8

130. Indrani, D. J. Preparation of Chitosan/Collagen Blend Membranes for Wound Dressing: A Study on FTIR Spectroscopy and Mechanical Properties. / D. J. Indrani, F. Lukitowati, Y. Yulizar, // IOP Conference Series: Materials Science and Engineering. - 2017. - V. 202. - P. 1-10. doi:10.1088/1757-899x/202/1/012020)

131. Mousavi, S. Comparative study of collagen and gelatin in chitosan-based hydrogels for effective wound dressing: Physical properties and fibroblastic cell behavior / S. Mousavi, A. B. Khoshfetrat, N. Khatami, M. Ahmadian, R. Rahbarghazi // Biochemical and Biophysical Research Communications. - 2019. - V. 518. I. 4. - P. 625-631 https://doi.org/10.1016Zj.bbrc.2019.08.102.)

132. Chang, W. K. Gentamicin-Collagen Implants to Reduce Surgical Site Infection / W. K. Chang, S. Srinivasa, A. D.Mac Cormick, A. G. Hill // Annals of Surgery. - 2013. - V. 258. I. 1. - P. 59-65. doi:10.1097/sla.0b013e3182895b8c

133. Anghel, N. Transcutaneous Drug Delivery Systems Based on Collagen/Polyurethane Composites Reinforced with Cellulose / N. Anghel, V.M. Dinu, L. Verestiuc, I.A. Spiridon // Polymers. - 2021. - V. 13. I. 11. - P. 1845. https://doi.org/10.3390/polym13111845

134. Wagermaier, W. Collagen, Reference Module in Materials Science and Materials Engineering [Электронный ресурс] / W. Wagermaier, P. Fratzl // Elsevier. - 2016. doi.org/10.1016/B978-0-12-803581-8.01493-4. https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/B9780128035818014934 (дата обращения 11.12.2021)

135. Nii, T. Strategies Using Gelatin Microparticles for Regenerative Therapy and Drug Screening Applications // Molecules. -2021. - V. 26. I. 22. -P. 6795. https://doi.org/10.3390/molecules26226795.

136. Shekhter, A. B.(2017). Medical applications of collagen and collagen-based materials / A. B. Shekhter, A. L. Fayzullin, M. N. Vukolova, T. G. Rudenko, V. D. Osipycheva, P. F. Litvitsky // Current Medicinal Chemistry.

- 2017. - V. 26. I. 3. P. 506-516. doi:10.2174/09298673256661712051

137. Патент 2715715 Российская Федерация, МПК A61K 38/39. Стерильный прозрачный концентрированный раствор биосовместимого коллагена, способ его получения и применения № 2019106356: заявл. 06.03.2019: опубл. 03.03.2020 бюл. №7 / Осидак Е.О., Домогатский С.П., Осидак М.С.

138. Патент 2306345 Российская Федерация С 1 МПК С14С1/08. Способ пикелевания овчинно-мехового сырья [Текст] / Шалбуев Д.В., Думнов В.С., Фалилеева О.Ю. - №2006100181/12; заявл. 10.01.06; опубл. 20.09.2007. Бюл. №26. - 9 с.

139. Патент 2715639 Российская Федерация С1 МПК С14С 1/00. Способ получения биоактивного коллагенового продукта [Текст] / Шалбуев Д.В., Тумурова Т.Б. - №2019121295; заявл. 04.07.2019; опубл. 02.03.2020. Бюл. №7.

- 9 с.

140. ГОСТ 6413-77. Кислота бензойная техническая. Технические условия. [Текст]. - Введ. 1979-01-01. -Сб. ГОСТов. - М.: ИПК Издательство стандартов, 1997. 11 с.

141. ГОСТ 58144-2018. Вода дистиллированная. Технические условия. [Текст]. - Введ. 2021-07-01. -Сб. ГОСТов. - М.: ИПК Издательство стандартов, 2021.

142. ГОСТ 938.25-73. Кожа. Метод определения содержания влаги. Введ. 1967-07-01. - Сб. ГОСТов. - М.: ИПК Издательство стандартов, 2003. 4 с.

143. ГОСТ 938.5-68 Кожа. Метод определения содержания веществ, экстрагируемых органическими растворителями. 1967-07-01 Сб. ГОСТов. -М.: ИПК Издательство стандартов, 2003. 4 с.

144. ГОСТ 938.2-67 Кожа. Метод определения содержания золы. Введ. 1968-07-01 Сб. ГОСТов. -М.: ИПК Издательство стандартов, 2003. 8 с.

145. ГОСТ 25011 - 2017. Мясо и мясные продукты Методы определения белка. Введ. 2018-07-01. Официальное издание. М.: Стандартинформ, 2018. 16 с.

146. ГОСТ Р 53242-2008 Кожа. Метод определения рН [Текст]. - Введ. 2010-01-01. - М.: Стандартинформ, 2010. - 7 с.

147. ГОСТ 938.25-73 Кожа. Метод определения температуры сваривания. Введ. 1975-01-01. - Сб. ГОСТов. - М.: ИПК Издательство стандартов, 2003. 5 с.

148. Битуева Э.Б., Хвайнова Е.М. Физико-химические методы анализа пищевых систем. Улан-Удэ. ВСГУТУ. 2011. 44 с.

149. ГОСТ 22935-2-2011. Молоко и молочные продукты. Органолептический анализ. Часть 2. Рекомендуемые методы органолептической оценки. Дата введения 2013-01-01. с. 19.

150. ГОСТ 3626-73 Молоко и молочные продукты. Методы определения влаги и сухого вещества. Сб. ГОСТов. - М.: Стандартинформ, 2009 год. 16 с.

151. ГОСТ 3624-92. Молоко и молочные продукты. Титриметрические методы определения кислотности. [Текст]. - Введ. 1994-01-01. -Сб. ГОСТов. -М.: ИПК Издательство стандартов, 2004. 10 с.

152. ГОСТ 32892-2014. Молоко и молочные продукты. Метод измерения активной кислотности. [Текст]. - Введ. 2016-01-01. -М.: ИПК Издательство стандартов, 2015. 12 с.

153. ГОСТ 54758-2011 Молоко и продукты переработки молока. Методы определения плотности. Введ. 2013-01-01. -М.: Стандартинформ, 2012 год. 18 с.

154. ГОСТ 29112-91. Среды питательные плотные. Общие технические условия. Введ. 1992-10-01. -М.: Стандартинформ, 2004 год. 12 с.

155. Нецепляев, С.В., Панкратов А.Я. Лабораторный практикум по микробиологии пищевых продуктов животного происхождения / С.В. Нецепляев, А.Я. Панкратов - М. Агропромиздат, 1990. - 223 с.

156. Ахназаров, С.Л. Методы оптимизации эксперимента в химической технологии / С.Л. Ахназаров, В.В. Кафаров Учебн. Пособие для хим.-технол. Спец.вузов. М.: Высшая школа, 1985. 327 с.

157. ГОСТ Р 53242-2008 Кожа. Метод определения рН [Текст]. - Введ. 2010-01-01. - М. : Стандартинформ, 2010. - 7 с.

158. ГОСТ 23041-2015 Мясо и мясные продукты. Метод определения оксипролина [Текст]. - Введ. 2016-07-01. - М.: Стандартинформ, 2019. - 11 с.

159 ГОСТ 10028-81 Вискозиметры капиллярные стеклянные. Технические условия. [Текст]. - Введ. 1983-01-01. - М. : Стандартинформ : Изд-во стандартов, 2005. - 15 с.

160. ГОСТ 33768-2015 Метод определения кинематической вязкости и расчет динамической вязкости прозрачных и непрозрачных жидкостей. [Текст]. - Введ. 2017-00-01. - М.: Стандартинформ: Изд-во стандартов, 2019. - 20 с.

161. ГОСТ Р 50097-92 (ИСО 9101-87). Поверхностно-активные вещества. Определение межфазного натяжения. Метод объема капли. [Текст]. - Введ. 2017-00-01. М.: Издательство стандартов. 1992. 5 с.

162. Киселев. М. Г. Определение краевого угла смачивания на плоских поверхностях/ М. Г. Киселев, В. В. Савич, Т. П. Павич // Наука и техника. 2006. №1. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/opredelenie-kraevogo-ugla-smachivaniya-na-ploskih-poverhnostyah (дата обращения: 11.05.2022)..

163. Цыренова С.Б. Чебунина Е.И. Балдынова Ф.П. Руководство к решению примеров и задач по коллоидной химии/ Учебное пособие. - Улан-Удэ: Изд-во ВСГТУ, 2000. - 210 с.

164. INCA Energy. Руководство пользователя [текст] / Oxford Instruments Analytical, 2004. - 73 с]

165. ГОСТ Р 55569-2013. Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Определение протеиногенных аминокислот методом капиллярного электрофореза. Дата введения 2015-07-01. М.: Стандартинформ, 2014. 20 с.

166. Крупенникова, В.Е. Методическое указание: Определение динамической вязкости на ротационном вискозиметре Вrookfiend DV-II+ Pro/ В.Е. Крупенникова, В.Д. Раднаева, Б.Б. Танганов // Улан-Удэ: ВСГТУ. 2011. 47 с.

167. О мерах по дальнейшему совершенствованию организационных форм работы с использованием экспериментальных животных (не действует на территории РФ с 25.06.2020 на основании постановления Правительства Российской Федерации от 13.06.2020 N 857). https://docs.cntd.ru/document/456016716?section=status

168. Европейская конвенция о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях (ETS N 123) (рус., англ.) 01 января 1991/ https://docs.cntd.ru/document/901909691?section=status

169. Парамонов, Б.А. Методы моделирования термических ожогов кожи при разработке препаратов для местного лечения/ Б.А. Парамонов, В.Ю. Чеботарев // Бюлл. эксп. биол. и мед. - 2002. -Т. 134, №11. - С. 593-597.

170. Каркищенко, Н. Н. Лабораторные животные (положение и руководство). Москва. Межакадемическое издательство «ВПК». - 2003. - 138 с.

171. Камышникова В.С. Методы клинических лабораторных исследований. - 8-е изд. - М.: ООО «МЕДпресс-информ». - 2015. - 736 с.

172. Бах, А. Н. Количественный метод определения активности каталазы в крови/ А. Н. Бах, С. Зубкова // Acta Biochim. Pol. - 1946. Т. 2 № 3- С. 57-59.

173. Uchiyama, M. Determination of malonaldehyde precursor in tissues by thiobarbituric acid test/ M. Uchiyama, M. Michara // Anal. Biochem. - 1978. - №2 1. -V. 86 - Р. 271-728.

174. Яшин, А.Я. Аналитические возможности жидкостного хроматографа «Цвет Яуза» с электрохимическими детекторами / А.Я. Яшин, Я.И. Яшин // Российский химический журнал (Ж. Хим. об-ва им. Д.И. Менделеева). - 2002. -Т. 46, №4. - С. 109-115.

175. Лакни, Г.Ф. Биометрия: Учеб. пособие для биол. спец. вузов-4-е ИЗД., перераб. и Доп.-М.: Высш. шк., 1990.-352 С.

176. Voroshilin, R.A. Technology of enzymatic-acid hydrolysis of bone raw material in production of gelatin/ R.A. Voroshilin // Theory and practice of meat processing. -2021. V. 6. I. 3. P. 279-284. https://doi.org/10.21323/2414-438X-2021-6-3-279-284

177. Drozdova N. A. Влияние различных пищевых добавок и ингредиентов на технологические характеристики животных белков/ N. A. Drozdova, V. V. Nasonova // Theory and practice of meat processing. - 2016. V.3. P. 48-56 DOI 10.21323/2414-438X-2016-1-3-48-56 file:///C:/Users/%D0%9F%D0%B0%D0%B2%D0%B5%D0%BB/Downloads/vliy anie-razlichnyh-pischevyh-dobavok-i-ingredientov-na-tehnologicheskie-harakteristiki-zhivotnyh-belkov.pdf

178. Патент 2031597 Российская Федерация, МПК A23J 1/10, С09Н 1/00, С14С 1/08. Способ получения коллагенового золя [Текст] / Каспарьянц С.

А., Сапожникова А. И., Месропова Н. В., Гордиенко И. М., Акопян В. Б., Петров П. Е. / №5022810/13, заявл.12.02.1992 опубл. 27.03.1995. - 8с.

179. Пат. 2322249 Российская Федерация, МПК А61К35/32, А61К35/36, А61К38/39. Способ получения коллагена из биологического материала [Текст] / Анфимов П.Е., Краснова Н.С.; заявитель и патентообладатель "Нижегородский научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию». - № 2006138769/15; заявл. 02.11.2006; опубл. 20.04.2008. Бюл. № 11. - 2 с.

180. Патент №2588440 Российская Федерация, МПК A23J 1/10, A23J 3/04, Способ получения коллагенового белка из продуктов кожевенного производства [Текст]/ Савельев Ю. А., Сидехменов Ю. А., Романов А. М. Патентообладатель ООО "СТАРМИКС» №2015113076/10, заявл. 10.04.2015. опубл. 27.06.2016 г. бюл. №18

181. Пат. 2314700 Российская Федерация, МПК А23С 9/12, С^ 1/20, С14С 1/08. Способ получения закваски для пикелевания овчинно-шубного и мехового сырья [Текст] / Шалбуев Д.В., Думнов В.С. Фалилеева О.Ю.; заявитель и патентообладатель "Восточно-Сибирский государственный университет технологий и управления». - 2006100229/13, заявл 10.01.2006;. опубл. 20.01.2008. Бюл. № 2. - 8 с.

182. Тумурова, Т.Б. Биодобавки на основе коллагена в полимерных композиционных материалах / А. Б. Балданов, Л. А. Бохоева, Д. В. Шалбуев, Т. Б. Тумурова // Нанотехнологии в строительстве: научный интернет-журнал. - 2022. - Т. 14. - № 2. - С. 137-144. - DOI 10.15828/2075-8545-2022-14-2-137144. - EDN PZKGOD.

183. Тумурова, Т.Б. Получение биополимера из органосодержащих отходов / Т. Б. Тумурова, Д. В. Шалбуев, В. Д. Раднаева, И. Бямбаа // Экология и промышленность России. - 2022. - Т. 26. - № 4. - С. 9-13.

184. Тумурова, Т. Б. Изучение влияния кисломолочной композиции на степень разрушения макроструктуры коллагена / Тумурова Т. Б., Шалбуев Дм.

В. // Кожа и мех в XXI веке: материалы конференции. - Улан-Удэ, Изд-во ВСГУТУ. - 2018. - С. 12-17.

185. Царегородцева, Е. В. Технология хранения, переработки и стандартизация мяса и мясопродуктов: учебное пособие для вузов/ Е. В. Царегородцева. М.: Издательство Юрайт, 2020.— 290 с. (Высшее образование). Текст: // Образовательная платформа Юрайт [сайт]. — URL:https://urait.ru/bcode/457321 (Дата обращения: 19.03.2022).

186. Кухарева, Л.В. Метод получения коллагена из телячьей шкуры для тканевой инженерии и клеточного культивирования/ Л.В. Кухарева, И.И. Шамолина, Полевая Е.В. // Цитология. - 2010. Т. 52. №7. С.597-602. http://www.tsitologiya.incras.ru/52 7/kukhareva.pdf

187. Зипаев, Д.В. Молочная сыворотка - ценное сырье для вторичной переработки известия вузов/ Д.В. Зипаев, А.В. Зимичев // Пищевая технология. - 2007. - № 2. - с. 14-16 file:///C:/Users/%D0%9F%D0%B0%D0%B2%D0%B5%D0%BB/Downloads/mol ochnaya- syvorotka-tsennoe- syrie-dlya-vtorichnoy-pererabotki. pdf

188. Конарбаева З. К. Биотехнология получения национальных кисломолочных продуктов на основе пробиотических микроорганизмов: дис. на соиск. учен. степ. д-р фил. наук. - Алматы. - 2014. - 132 с.

189. Наканиси, К. Инфракрасные спектры и строение органических соединений / К. Наканиси. - М.: Мир, 1965. 220 с.

190. Смаилова, М. Н. Вторичное молочное сырье с применением БАД растительного происхождения/ М. Н. Смаилова, Ж. Х. Какимова, Г. Т. Салкинбаева/ / Recent Studies of Applied Sciences. - 2015. с. 73-77. file:///C:/Users/TEMP.TYUANA.023/DownIoads/5-13 Smailova 5.pdf

191. Болога, М.К. Особенности минерализации белковых концентратов при электрофизической обработке молочной сыворотки/ М.К. Болога, Е.Г. Врабие, Т.Г. Степурина // Электронная обработка материалов. - 2013. Т.49. №6. c. 61-65 osobennosti-mineraIizatsii-beIkovyh-kontsentratov-pri-eIektrofizicheskoy-obrabotke-moIochnoy-syvorotki.pdf

192. Bergey's Manual of Systematic Bacteriology Book Review. Int. J. Syst. Bacteriol. - 1985. - P. 408. https://doi.org/10.1099/00207713-35-3-408

193. Макаричев, Ю.А. Методы планирование эксперимента и обработки данных: учеб. пособие / Ю.А. Макаричев, Ю.Н. Иванников - Самара. - 2016. - 131 с.

194. ГОСТ 33701-2015. Определение и применение показателей точности методов испытаний нефтепродуктов. М.: Стандартинформ. 11.10.2016 с. 60.

195. Antipova, L.V. Properties of preparations functional biopolymers of a fish origin/ L.V. Antipova, O.P. Dvorianinova, S.A. Storublevtsev, A.Z. Cherkesov // Proceedings of the Voronezh State University of Engineering Technologies. 2014. I.3. p. 103-105. https://doi.org/10.20914/2310-1202-2014-3-103-105

196. Фаттахов, В. Л. Влияние кислотно-основного состояния среды на течение раневого процесса при сахарном диабете/ В. Л. Фаттахов, Ю. С. Винник, О. В. Теплякова // Сибирское медицинское обозрение. - 2009. - №6. URL: https://cyberleninka.ru/article/nvliyanie-kislotno-osnovnogo-sostoyaniya-sredy-na-techenie-ranevogo-protsessa-pri-saharnom-diabete (Дата обращения: 22.03.2022).

197. Литвинова, Т.Н. Биогенные элементы. Комплексные соединения: учеб.-метод. пособ. / Т.Н. Литвинова, Н.К. Выскубова, Л.В. Ненашева под ред. проф. Т.Н. Литвиновой — Ростов н/Д: Феникс. - 2009. - 283 с.

198. Болгова, С.Б. Рыбные коллагены: получение, свойства и применение: дис. на соиск. учен. степ. канд. техн. наук. - Воронеж. - 2015. -159 с.

199. Пахомова, О.А. Практикум по аналитической химии аминокислот и белков: учебное пособие/ О.А. Пахомова, Н.Я. Мокшина - Елец: Елецкий государственный университет им. И.А. Бунина, 2015. - 71 с.

200. Андреева, И.В. Термическая стабильность коллагена в тканях межпозвонкового диска / И.В. Андреева, Н.Ю. Игнатьева, С. В. Аверкиев и [др] // Вестник Московского университета. Серия 2. Химия. 2007. №1. URL:

https://cyberleninka.ru/article/n/termicheskaya-stabilnost-kollagena-v-tkanyah-mezhpozvonkovogo-diska (дата обращения: 18.04.2022).

201. Гончарова, Н. В. Изучение химико-технологических свойств этанольного экстракта сосны, полученного из окорки древесины, и его возможного применения в кожевенно-меховой промышленности / Н. В. Гончарова, Н. В. Сячинова, Е. А. Думнова // Химия растительного сырья, 2014. № 2. С. 243-247. URL: http://journal.asu.ru/cw/article/view/jcprm.1402243.

202. Крутько, Э. Т. Технология биоразлагаемых полимерных материалов: учеб.-метод. пособие для студентов специальности 1-48 01 02 «Химическая технология органических веществ, материалов и изделий» специализации 1-48 01 02 04 «Технология пластических масс» / Э. Т. Крутько, Н. Р. Прокопчук, А. И. Глоба. - Минск: БГТУ, 2014. - 105 с.

203. Клындюк, А. И. Поверхностные явления и дисперсные системы: учеб. пособие для студентов химико-технологических специальностей / А. И. Клындюк. - Минск: БГТУ, 2011. - 317 с.

204. Шалбуев, Д. В. Изучение динамической вязкости биополимеров, полученных из некондиционного кожевенного сырья / Д. В. Шалбуев, Тумурова Т. Б. // Костюмология. — 2022 №2. — URL: https://kostumologiya.ru/PDF/17TLKL222.pdf

205. Sahana, T. G. Biopolymers: Applications in wound healing and skin tissue engineering/ T. G. Sahana, P. D. Rekha // Molecular Biology Reports. doi: 10.1007/s11033-018-4296-3 10.1007/s11033-018-4296-3

206. Davison-Kotler, E. Sources of collagen for biomaterials in skin wound healing/ E. Davison-Kotler, W.S. Marshall, E. Garcia-Gareta // Bioengineerin. -2019. - V.6. - P. 56.

207. T. Tumurova, Use of collagen fleeces to treat thermal burns / T. Tumurova, Dm. Shalbuev, S. Lebedeva, S. Zhamsaranova, B. Munkhuu // 5 th International leather engineering congress.- Izmir - Turkey, 2019, Р. 157-160.

208. Тумурова, Т. Б. Влияние консорциума микроорганизмов на репаративные свойства коллагенового препарата при технических ожогах / Т.

Б. Тумурова, Дм. В. Шалбуев, С. Н. Лебедева, С. Д. Жамсаранова // Механизмы адаптации микроорганизмов к различным условиям среды обитания: тез. докл. - Иркутск, 2019, С. 206-208.

209. Тумурова, Т. Б. Изучение ранозаживляющего действия коллагеновой матрицы / Т. Б. Тумурова, Дм. В. Шалбуев, С. Н. Лебедева, С. Д. Жамсаранова // Биотехнология в интересах экологии и экономики Сибири и Дальнего Востока. - Улан-Удэ, Изд-во ВСГУТУ, 2018, С. 69-73.

210. Лебедева, С. Н. Ранозаживляющее действие гидрогеля полигексаметиленгуанидин гидрохлорида при ожогах / С. Н. Лебедева, О. С. Очиров, С. А. Стельмах [и др.] // Acta Biomedica Scientifica (East Siberian Biomedical Journal). - 2017. - Т. 2. - № 4(116). - С. 93-96. - DOI 10.12737/article_59fad51d481658.42549272.

211 Беляков, Н.А. Антиоксидантная активность биологических жидкостей человека: методология и клиническое значение/ Н.А. Беляков, С.Г. Семесько // Эфферентная терапия. - 2005. - Т. 11, № 1. - c. 5-22 https: //szgmu.ru/files/terapy/Terap_No_01_2005. pdf

212 Лебедева, С.Н. Оценка репаративной эффективности коллагеновых матриц на модели термического ожога / С.Н. Лебедева, А.А. Тыхеев, Д.В. Шалбуев, Т.Б. Тумурова, М. Баяржаргал, С.Д. Жамсаранова // Acta Biomedica Scientifica. - 2022. - Т. 7 - № 1. - С. 220-231.https://doi.org/10.29413/ABS.2022-7.1.25

213. Soloveva, A.G. The study of biochemical parameters of liver mitochondria as markers of hypoxia in burn regeneration after experimental thermal injury/ Soloveva A.G., Kulakova K.V., Orlinskaya N.Yu., Galova E.A. // Современные технологии в медицине. - 2018. - Т.10. №1. - с. 81-87. https:// doi.org/10.17691/stm2018.10.1.10

Приложение А

Акт производственных испытаний технологии

Акт

о внедрении инновационной технологии рециклизации некондиционного кожевенног о сырья с получением биополимера, обладающего ранозаживляюшим действием

Комиссия в составе представителей общества с ограниченной ответственностью «Малое инновационное предприятие «ЭКОМ» (ООО «МИН «ЭКОМ»): исполнительного директора к.т.н., дои. Советкина II.В., бригадира экспериментального отделочного производства Маркеева Д.А. - с одной стороны и представителей кафедры «Технология кожи. меха. Водные ресурсы и товароведение» ФГБОУ ВО «Восточно-Сибирский государственный университет технологий и управления» соискателя Тумуровой Т.Н.. д.т.н.. доц. Раднаевой В.Д. составили настоящий акт о внедрении инновационной технологии рециклизации некондиционного кожевенного сырья с получением биополимера, обладающего ранозаживляюшим действием.

Для разработки инновационной технологии рециклизации некондиционного кожевенного сырья с получением биополимера, обладающего ранозаживляюшим действием, использовали

некондиционнуюшкуру крупного рогатого скота (КРС) пресно-сухого метода консервирования в количестве 1 шт. после процесса отмоки.

Разработка инновационной технологии рециклизации некондиционного кожевенного сырья с получением биополимера, заключалась в применении кисломолочнойкомпозиции в качестве кислотного растворителя для получения биополимера коллагена, обладающего ранозаживляющим действием. Кисломолочная композиция была получена культивированием на обезжиренном молоке симбиотической курунговой закваске с величиной титруемой кислотности от 240-280 °Т в состав, которой также вносят молочную творожную сыворотку. Методом математического моделирования полнофакторного эксперимента было установлено, что оптимальным соотношением обезжиренного молока и творожной молочной сыворотки является 1:1 для достижения значений титруемой кислотности в диапазоне 240-310°Т.

Некондиционную шкуру КРС и обрезь подвергали отмоке и мездрению согласно технологии, действующей на ООО «МИГ1 «ЭКОМ», подвергали щелочно-солевой обработке, солевой промывке, нейтрализации, промывке в проточной воде с последующим измельчением на мясорубке для дальнейшего растворения в кисломолочной композиции. Растворение проводили при величине титруемой кислотности 286 "Т, рН кисломолочной композиции 3,1 при температуре 36 ±2 "С и ЖК=1 (биополимер коллагена 1).

В качестве контрольиойтехнологии (биополимер коллагена 2)применяли технологии, в которой на стадии кислотного растворения использовали 40% - ную молочную кислоту. А также в качестве сравнения выступал биоактивный белковый препарат «ЭКОМ НА», разработанный на ООО «МИЛ «ЭКОМ», согласно ТУ 20.59.51-002-66510814-201.

У биополимеров коллагена полученных по инновационной технологии и контрольной технологии были определены физико-химическиепоказатели (таблица 1).

Таблица 1 - Физико-химические показатели биополимеров коллагена

Показатель ТУ 20.59.51-00266510814-201 Биополимер 1 Биополимер 2

Внешний вид Гель непрозрачный. Цвет от серого до коричневого. Допускается появление осадка при отстаивании. При понижении температуры до (3-4)'С допускается застудневание раствора. Гель непрозрачный. Цвет белый. Гель непрозрачный. Цвет коричневый.

Запах Свойственный запаху животного сырья без запаха гнили и прогоркания Слабый кисломолочный, без запаха гнили Слабый, без запаха гнили

Массовая доля влаги, %,не более 92,0 93,2 94,4

Массовая доля белка, %,не менее 10,0 6,6 4,6.

Водородный показатель рИ, ед. р! I 4,5 4,4 4,2

Массовая доля азота, не менее 2,0 1,1 0,7

Плотность, кг/м1 1040 1146 1112

Массовая доля золы, %, не более 2,5 1,7 1,0

Анализ данных (таблица 1) показал, что применение инновационной технологии рециклизации некондиционного кожевенного сырья с

получением биополимера, кисломолочной композицией,позволяет получить биополимер, не значительно отличающийся по физико-химическим показателям, с препаратом, разработанным на предприятии ООО МИЛ «ЭКОМ» по ТУ 20.59.51-002-66510814-2018.

Таким образом, по результатам проведенных производственных испытаний, было установлено, что применение кисломолочной композиции позволяет получить биополимер коллагена, при этом, исключая применение концентрированных кислот и термическую обработку на этапе кислотного растворения.

Выводы и рекомендации

1. Производственные испытания показали, что разработанная инновационная технология рециклизации некондиционного кожевенного сырья кисломолочной композицией, позволяет получить биополимер, обладающего ранозаживляющим действием.

2. Установлены параметры технологии переработки коллагенсодержащего сырья. В качестве кислотного агента предлагается использование кисломолочной композиции, культивируемой на курунговой закваске, при температуре культивирования не ниже (36±2)°С, исоотпошепии обезжиренного молока и молочной творожной сыворотки' 1:1. Культивирование проводят до достижения величины титруемой кислотности не менее 300°Т,с содержанием молочной кислоты до 30 г/дм3.

3. При реализации опытной технологии рециклизации некондиционного кожевенного сырья предлагается использовать на этапе кислотного растворения кисломолочную композицию, тем самым заменить исключить применение агрессивных кислот (молочной, уксусной и др. кислот), для получения биополимера коллагена.

4. Па основании проведенных производственных испытаний технологии переработки коллагенсодержащего сырья с использованием

Приложение Б

Техническое условие «Биополимер» №20.59.51-004-66510814-2022.

г. Улан-Удэ 2022

ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО 11(1 ТЕХНИЧЕСКОМУ РЕГУЛИЛОВАШПГ, и МГТРОЛОГИИ ФБУ "Бурятский ЦСМИ

1 Назначение и область применения

1.1 Настоящие технические условия распространяются на биополимер коллагена (далее - биополимер, продукция), получаемый из коллагенсодержащих отходов кожевенной промышленности, некондиционного кожевенного и овчинно-шубного сырья.

Биополимер предназначен для использования в качестве сырьевого компонента для создания материала подложки для иммобилизации ранозаживляющего агента при производстве изделий медицинского назначения (раневых повязок, лейкопластырей и другие средств, предназначенных для контакта с поврежденными кожными покровами).

1.2 В зависимости от способа обработки исходного сырья, биополимер выпускают двух типов:

- тип 1 («Биополимер коллагена 1») - полученный при растворении колла-генсодержащего сырья в кисломолочной композиции;

- тип 2 («Биополимер коллагена 2») — полученный при растворении колла-гесодержащего сырья в молочной кислоте.

1.3 Пример записи продукции в документах: «Биополимер коллагена 1 по ТУ 20.59.51 -004-66510814-2022».

1.4 В настоящих технических условиях используются термины с соответствующими определениями по ГОСТ 3123, ГОСТ 18157, ГОСТ 180 109331, ГОСТ 30722, ГОСТ Р 54098.

1.5 При производстве продукции используется технология «Способ получения биоактивного коллагенового продукта» (Патент на изобретение № 2715639).

2 Технические требования

2.1 Технические характеристики

2.1.1 Биополимер должен соответствовать требованиям настоящих ТУ и изготавливаться в соответствии с технологической инструкцией, утвержденной изготовителем.

2.1.2 По органолептическим и физико-химическим показателям продукция должна соответствовать требованиям, указанным в таблице 1.

Таблица 1 - Органолептические и физико-химические показатели

Наименование показателя Характеристика показателя

Биополимер коллагена 1 Биополимер коллагена 2

Внешний вид Гель непрозрачный. Белого цвета. При понижении температуры до (3 -4) °С допускается застудневание. Гель непрозрачный. Коричневого цвета. При понижении температуры до (3 - 4) °С допускается "Застудневание

гкгу.ип'овмтюи мы 141.11" ФЬУ "Буршсхнй нем» - иггад

Наименование показателя Характеристика показателя

Биополимер коллагена 1 Биополимер коллагена 2

Запах Свойственный запаху животного сырья без запаха гнили и прогоркания

Массовая доля влаги, %, не более 94 95

Массовая доля белка, %, не менее 5,0 3,0

Водородный показатель рН, ед. рН 4,4±1,0 4,2±1,0

Массовая доля общего азота, %, не менее 2,0 1,0

Плотность, кг/м3 1146±20 1112±20

Массовая доля золы, %, не более 2,5

Массовая доля жировых веществ, %, не более 2,0

Посторонние примеси Не допускаются

2.1.3 Подлинность продукции определяется качественной реакцией на окси-пролин.

2.1.4 Микробиологические показатели биополимера должны соответствовать Единым санитарно-эпидемиологическим и гигиеническим требованиям к товарам, подлежащих санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю), утв. Решением Комиссии таможенного союза от 28.05.2010 № 299 и указаны в таблице 2.

Таблица 2 - Микробиологические показатели

Наименование показателя Характеристика показателя

Мезофильные аэробные и факультативно-анаэробные микроорганизмы, КОЕ/г (см3), не более МО2

Общее число дрожжевых и плесневых грибов, КОЕ/г (см3) отсутствие

Бактерии семейства Enterobacteriaceae, в 1 г (см') отсутствие

Бактерии вида Staphylococcus aureus, в 1 г (см3) отсутствие

Pseudomonas aeruginosa, в 1 г (см3) отсутствие

Патогенные микроорганизмы, в т.ч. сальмонеллы, масса продукта, г (см'), в которой не допускается 25

«FJFPATMIOE агентство по техническому

РЕГУЛИРОВАНИЮ II МЕТРОЛОГИИ

ФБУ "Бурятский ЦСМ" ЗА PI . HCl 1'ИРОДАИЫ ТУ и КШ1

Внесен, 3« W

2.2 Требования к еырыо м материалам

2.2.1 Для изготовления биополимера применяют коллагенсодержащие недубленые отходы, образующиеся в процессе контурирования и обрезки краев невыделанных шкур животных, а также некондиционное кожевенное и овчинно-шубное сырье (смесь гольевую консервированную, обрезь спилковую шкур крупного и мелкого рогатого скота, свиней).

Конкретный перечень применяемых сырья, консервантов, технологических вспомогательных средств, ссылки на документы, в соответствии с которыми они изготовлены, и (или) сведения об изготовителе, и (или) показатели качества приводят в технологической инструкции.

2.2.2 Используемое для производства биополимера сырье животного происхождения должно соответствовать «Единым ветеринарным (ветеринарно-санитарным) требованиям, предъявляемым к товарам, подлежащим ветеринарному контролю (надзору)», утвержденным Решением Комиссии Таможенного союза от 18.06.2010 № 317, и иметь клейма в соответствии с Приказом Минсельхоза РФ от 03.08.2007 №383

3 Требования безопасности

3.1 Биополимер нетоксичен и пожаровзрывобезопасен.

3.2 По токсикологическим показателям, обеспечивающим безопасность, биополимер относится к 4 классу опасности (малоопасные вещества) в соответствии с ГОСТ 12.1.007.

Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны должны соответствовать требованиям СП 2.2.3670-20.

3.3 Технологический процесс должен соответствовать требованиям безопасности по ГОСТ 12.3.002.

3.4 Пожарная безопасность помещений должна соответствовать ГОСТ 12.1.004, электробезопасность - по ГОСТ Р 12.1.019.

3.5 Производственные помещения должны быть оборудованы приточно-вытяжной вентиляцией по ГОСТ 12.4.021.

3.6 Применяемое оборудование должно отвечать требованиям ГОСТ 12.2.003.

3.7 Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать ПДК, предусмотренных ГОСТ 12.1.005.

3.8 Показатели микроклимата, освещенности и шума на рабочих местах должны соответствовать требованиям СанПиН 1.2.3685-21, ГОСТ 12.1.003.

ФКДВРМЬНОЕАГШТГПЮПО ТЕХНИЧЕСКОМУ ri.IV.HtP08.VtmW И МЕТРОЛОГИИ ФБУ "Бурятский ПСМ» ЗАРЕГИСТРИРОВАНЫ ГУ и ЮТ1

4 Требования охраны окружающей среды

4.1 Основными видами негативного воздействия на окружающую среду при производстве биополимера являются сточные воды, осадки, образующиеся в результате очистки сточных вод и выбросы в атмосферу.

4.2 Предельные допустимые концентрации вредных веществ в атмосферном воздухе и сточных водах не должны превышать норм, установленных СанПиН 1.2.3685-21.

Контроль качества атмосферного воздуха осуществляется в соответствии с ГОСТ 17.2.3.01.

Сточные воды, образующиеся в процессе выделки шкур, должны подвергаться очистке и сбрасываться в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.3684-21.

4.3 Контроль содержания загрязняющих веществ в сточных водах и атмосферном воздухе осуществляется в соответствии с программой производственного контроля, утвержденной в установленном порядке.

5 Требования к маркировке

Потребительская и транспортная упаковка должна содержать следующие сведения о продукции:

- наименование и местонахождение изготовителя;

- товарный знак изготовителя (при наличии);

- наименование и тип продукции;

- номер партии;

- массу нетто и брутто;

- дату изготовления;

- срок годности;

- условия хранения;

- обозначение настоящих,ТУ.

6 Требования к упаковке

6.1 11родукцию фасуют в стеклянные или полимерные емкости (потребительская упаковка) по ГОСТ 32131, ГОСТ 33756, ГОСТ 34036, массой (объемом) 50 г (мл) и 100 г (мл).

Допускаемое отрицательное отклонение по массе или объему должно соответствовать ГОСТ 8.579.

Допускаются другие виды потребительской упаковки по согласованию с потребителем, обеспечивающие сохранность изделий при транспортировании, хранении и использовании.

ФКДЕМЬНСЕ «ТШТСТВППОТЕШ1ГГССКОМУ : |:гу гиров<нчк1 и «етролошн ФБУ "Бурятский ЦСМ" ам'ьшсп'ПРОВАЛЫту и каи

6.2 Потребительскую упаковку с биополимером укупоривают всеми видами укупорочных средств, обеспечивающих сохранность продукции при транспортировании, хранении и использовании.

6.3 Фасованную продукцию упаковывают в ящики из гофрированного картона по ГОСТ 13511, ГОСТ 13841, ГОСТ 34033 или по другим нормативным или техническим документам.

Допускается упаковывать продукцию в ящики, изготовленные по нормативным или техническим документам из коробочного картона по ГОСТ 7933, тарного склеенного картона по ГОСТ 9421 или комбинированные из гофрированного и коробочного картона.

Допускается упаковывать биополимер одного типа в термоусадочную пленку по ГОС Т 25776 на лотках из гофрированного картона или без лотков с последующим упаковыванием в ящики.

6.4 Конструкция ящиков с продукцией должна обеспечивать сохранность упаковки при транспортировании и хранении. Ящики могут быть оклеены одной или несколькими лентами. Допускается применять ленты: клеевую по ГОСТ 18251, полиэтиленовую с липким слоем по ГОСТ 20477 или импортную синтетическую аналогичного назначения (скотч).

6.5 Допускается применение упаковочных материалов по другой действующей нормативной документации.

7 Правила приемки

7.1 Продукцию принимают партиями. Партией считают любое количество биополимера одного типа, полученного в одну смену и оформленное одним документом, содержащим следующие сведения:

- наименование изготовителя, его товарный знак (при наличии);

- наименование и тип биополимера;

- номер партии и дату выработки;

-условия хранения;

- срок годности;

- количество упаковочных единиц;

- массу нетто;

- результаты испытаний;

- обозначение настоящих ТУ.

7.2 Для проверки соответствия продукции требованиям настоящих ТУ проводят приемо-сдаточные и периодические испытания.

7.3 Приемо-сдаточные испытания проводят по следующим показателям: внешний вид, цвет, запах, посторонние примеси, водородный показатель (рН).

7.4 Периодические испытания проводят в соответствии с программой произ-

водственного контроля по следующим показателям:—-- -

МЕТРО.'! С1ГИ11

ФЬ"У "Бурятский ЦСМ» ЗЛРГ.ГИО РИРОВЛПЫ ТУ >< КАН

6

- массовая доля влаги, массовая доля белка, массовая доля общего азота, массовая доля золы, массовая доля жировых веществ, плотность - с периодичностью не реже одного раза в три месяца;

- микробиологические показатели - с периодичностью не реже одного раза в

год.

Токсикологические и клинические (клинико-лабораторные) показатели безопасности определяют на стадии постановки продукции на производство.

Определение подлинности продукции проводится по требованию заказчика.

7.5 Для проведения приемо-сдаточных испытаний продукции от партии отбирают 10% единиц упаковки, но не менее трех.

7.6 При получении неудовлетворительных результатов испытаний проводят повторный анализ проб, отобранных от той же выборки.

Результаты повторного анализа распространяются на всю партию.

8 Методы контроля

8.1 Отбор и подготовка проб - по ГОСТ 3252 (4.1), ГОСТ 26669, ГОСТ 31904.

8.2 Внешний вид, цвет и запах определяют органолептически.

8.3 Определение посторонних примесей - по ГОСТ 11293-2017 (8.15).

8.4 Определение массовой доли влаги - по ГОСТ 3252 (п. 4.5), ГОСТ 33692 (п.7.5).

8.5 Определение массовой доли белка - по ГОСТ 25011, ГОСТ 33692 (п.7.7).

8.6 Определение массовой доли общего азота - по ГОСТ 33692 (п.7.6).

8.7 Определение массовой доли жира - по ГОСТ 3252 (п.4.11), ГОСТ 33692

(п.7.8).

8.8 Определение плотности - по 18995.1.