Роль дендритных клеток мыши в ответе на Т-независимые антигены 2-го типа тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.09, кандидат биологических наук Хоченков, Дмитрий Александрович

• Хоченков, Дмитрий Александрович
• кандидат биологических наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Хоченков, Дмитрий Александрович

Содержание.

Список сокращений.

Актуальность проблемы.

Цели и задачи.

Научная новизна.

Научно-практическая значимость.

Основные положения, выносимые на защиту.

Часть 1. Обзор литературы.

Глава 1. Антигены: природа и взаимодействие с клетками иммунной системы.

1.1. Общие сведения об антигенах.

1.2. Т-независимые антигены 2-го типа.

1.3. Активация В-лимфоцитов Т-независимыми антигенами.

Глава 2. В-лимфоциты: субпопуляции и роль в иммунном ответе.

2.1. В-1 лимфоциты: свойства и функциональная роль в организме.

2.2. Роль В-1 лимфоцитов в иммунном ответе на Т-независимые антигены 2 типа.

2.3. В-2 клетки: отличительные особенности и роль в иммунитете.

Глава 3. Дендритные клетки - ключевые участники иммунного ответа.

3.1. Общая характеристика дендритных клеток.

3.2. Процессинг и презентация антигенов в комплексе с МНСи MHC-II молекулами.

3.3. Взаимодействие дендритных клеток с В-лимфоцитами.

Часть 2. Экспериментальные исследования.

Глава 4. Материалы и методы исследований.

4.1. Животные.

4.2. Антигены.

4.3. Получение дендритных клеток.

4.4. Нагрузка дендритных клеток Т-независимыми антигенами.

4.5. Получение суспензии спленоцитов.

4.6. Получение В-1 и В-2 клеток мыши.

4.7. Культивирование клеток in vitro.

4.8. Определение числа АОК и ИГОК с помощью клеточного иммуноферментного анализа (ELISPOT).

4.9. Фенотипирование клеток при помощи проточной цитометрии.

4.10. Статистическая обработка результатов экспериментов.

Глава 5. Результаты собственных исследований.

5.1. Получение флуоресцентного конъюгата a-1-З-декстрана с ФИТЦ

5.2. Нагрузка дендритных клеток конъюгатом Деке.

5.3. Активация дендритных клеток Т-независимыми антигенами 2 типа

5.4. Индукция иммунного ответа in vitro a-1-З-декстраном, связанным с дендритными клетками.

5.5. Индукция иммунного ответа in vitro полисахаридом S3, связанным, с дендритными клетками.

5.6. Индукция иммунного ответа in vitro ПВП-360 и ПВП-10, связанными с дендритными клетками.

5.7. Активация дендритных клеток при совместной нагрузке

ТН-2 антигенами и ЛПС.

5.8. Индукция образования АОК при помощи ТН-2 антигена, связанного с xid-дендритными клетками.

5.9. Взаимодействие дендритных клеток с В-1 и В-2 клетками.

Глава 6. Обсуждение результатов.

Выводы.

Благодарности.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Роль дендритных клеток мыши в ответе на Т-независимые антигены 2-го типа»

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ

Дендритные клетки (ДК) - семейство лейкоцитов костномозгового происхождения. Особенно много их в местах взаимодействия с окружающей средой (кожа и слизистые оболочки). ДК являются основными антиген-презентирующими клетками (АПК) [18]. ДК наделены способностью индуцировать первичный иммунный ответ; они участвуют также в формировании иммунологической памяти и поддержании толерантности. Помимо презентации клеткам Аг, «встроенных» в главный комплекс гистосовместимости (major histocompatibility complex - МНС), активированные ДК продуцируют цитокины, стимулирующие наивные Т лимфоциты [114].

Большая часть касающихся ДК данных получена при изучении их роли в ответе на Т-зависимые антигены (ТЗ Аг). Известно, однако, что многие Аг относятся к Т-независимым (ТН Аг), ответ на которые осуществляется без участия Т хелперов [82]. Это связано с тем, что ТН Аг неспособны встраиваться в МНС и презентироваться таким способом Т лимфоцитам [40]. В число ТН Аг входит большинство бактериальных поли- и липополисахаридов, а также синтетические полимеры с повторяющимися Аг-эпитопами (например, поливинилпирролидон с мол. массой 350 кДа, полимеры D-аминокислот) [18]. ТН Аг подразделяются на ТН-1 Аг, обладающие митогенной активностью и являющиеся поликлональными активаторами В клеток и ТН-2 Аг. ТН-2 Аг митогенами не являются.

Иммуногенность ТН-2 Аг относительно невелика [82].

Основными продуцентами антител (Ат) к ТН Аг являются В-1 лимфоциты и клетки маргинальной зоны селезенки (MZ-B клетки). Эти субпопуляции обладают рядом характерных особенностей, отличающих их от «обычных» или конвенциональных В-2 клеток [5, 6].

Ответ В-1 и ]УЕ-В клеток на проникшие в организм патогены не требует формирования зародышевых центров и клонов Аг-специфичных Т и В лимфоцитов, поэтому он начинается практически сразу и приводит к образованию ^М Ат [23]. ТН-2 Аг не вызывают появления клеток памяти, продуцирующих Ат других изотипов. Более специфичный и мощный адаптивный иммунный ответ, обусловливаемый В-2 клетками, развивается позднее, приводя как к образованию ^О Ат, так и к появлению клеток памяти. Таким образом, В-1 и М2-В лимфоциты обеспечивают первую линию защиты организма от патогенов и относятся к клеткам, соединяющим врожденный и адаптивный иммунитет [21, 100].

Значительную роль в иммунном ответе играют клеточные взаимодействия. Так, ДК необходимы для активации наивных Т клеток и индукции ответа на ТЗ Аг [18]. Клеточные и молекулярные механизмы иммунного ответа на ТЗ Аг хорошо изучены. Механизмы «запуска» В клеток ТН-2 Аг исследованы значительно хуже. Известно, что для ТН-2 ответа необходимо наличие повторяющихся Аг-детерминант, высокий молекулярный вес, «жесткость» структуры и т.д. [82]. В то же время неясно, какие механизмы обеспечивают пролиферацию и дифференцировку В-1 клеток под влиянием ТН-2 Аг; не исследованы клеточные взаимодействия и факторы, участвующие в процессе; неизвестна роль ДК в ответе и т.д. Ответ на все эти вопросы существенен для развития представлений об иммунитете. Вместе с тем до сих пор этот вопрос даже не ставился. Выяснение роли ДК в ответе на ТН-2 Аг может представлять определенный интерес и с практической точки зрения. Не исключено, что использование ДК позволит увеличить иммуногенность бактериальных ТН-2 Аг и найдет применение при создании «дендритных вакцин». Все это и определяет актуальность настоящей работы.

ЦЕЛИ И ЗАДАЧИ

Целью настоящего исследования является изучение роли ДК в иммунном ответе мышей на Т-независимые антигены 2 типа.

Для достижения этой цели требовалось решить следующие задачи:

• Получить наивные ДК из костномозговых предшественников;

• Синтезировать флуоресцентный конъюгат а(1—>3) декстрана;

• Отработать нагрузку полученных ДК ТН Аг 1-го и 2-го типов;

• Охарактеризовать фенотипически наивные ДК, и ДК нагруженные ТН-2 Аг;

• Получить и охарактеризовать субпопуляции В-1 клеток перитонеальной полости и В-2 клеток селезенки мышей;

• Отработать условия совместного культивирования ДК со спленоцитами, В-1 и В-2 клетками;

• Определить число антитело- и иммуноглобулин-образующих клеток в культурах спленоцитов, В-1 и В-2 клеток при инкубации их с ДК, нагруженными ТН-1 и ТН-2 Аг.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

• Впервые показано прямое связывание ТН-2 Аг наивными ДК, выращенными из костномозговых предшественников,

• Впервые исследовано взаимодействие ДК, нагруженных и не нагруженных ТН-2 Аг, с В-1 и В-2 лимфоцитами мыши в системе in vitro,

• Впервые продемонстрирована иммуногенность ТН-2 Аг, связанных с ДК, и установлено, что она выше таковой самих Аг,

• Впервые показано, что ТН-2 Аг, связанные с ДК, индуцируют как появление антитело-образующих клеток, так и увеличение числа клеток, продуцирующих поликлональные иммуноглобулины. При этом поликлональная активация ниже, чем при ответе на нативные ТН-2 Аг,

• Впервые показано, что xid-мутация не влияет на способность ДК, презентировать ТН-2 Аг, и индуцировать иммунный ответ в системе in vitro,

• Впервые установлено, что в образовании антитело- и иммуноглобулин-продуцентов, индуцированных ТН-2 Аг, связанными с ДК, существенную роль играют контактные взаимодействия между клетками,

• Впервые показано, что основными клетками, отвечающими на ТН-2 Аг, связанные с ДК, являются В-1 лимфоциты.

НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ

Настоящая работа относится к числу фундаментальных исследований. Использован новый подход в изучении механизмов иммунного ответа на ТН-2 Аг - выяснение роли ДК в этом процессе.

Данные об особенностях активации ДК полисахаридными ТН-2 Аг, входящими в состав ряда микроорганизмов, имеют значение для выяснения механизмов взаимодействия патогенов с иммунной системой хозяина. Выявление влияния ДК на функциональную активность В-1 и В-2 клеток и роли в этом процессе контактных взаимодействий расширяют наши представления о взаимодействиях лимфоидных и миелоидных клеток.

Выявленное повышение иммуногенности полисахаридных ТН-2 Аг при связывании их с ДК, открывает новые перспективы при разработке вакцин на основе ДК.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ

1. ТН-2 Аг (а(1—>3) декстран, полисахарид БЗ и поливинил-пирролидон 360 кДа), связанные с ДК, индуцируют иммунный ответ в культуре спленоцитов. Для индукции ответа на ТН-2 Аг, связанные с ДК, требуется непосредственный контакт В лимфоцитов и ДК.

2. Поликлональная активация В лимфоцитов, индуцированная ТН-2 Аг связанными с ДК, ниже таковой при ответе на нативные ТН-2 Аг.

3. ДК, полученные из костномозговых предшественников х1с1-мышей под действием ОМ-СЗБ, по исследованным параметрам не отличаются от ДК, выделенных из костного мозга нормальный мышей.

4. Основными клетками, отвечающими на ТН-2 Аг, связанные с ДК, являются В-1 клетки.

Заключение диссертации по теме «Клиническая иммунология, аллергология», Хоченков, Дмитрий Александрович

выводы

1. ДК, выращенные из костно-мозговых предшественников, способны связывать ТН-2 Аг.

2. Показано, что полисахаридные ТН-2 Аг, связанные с ДК, обладают иммуногенностью. При этом в культуре спленоцитов, ТН-2 Аг, связанные с ДК, вызывают более сильный и специфичный иммунный ответ, чем нативные ТН-2 Аг.

3. Поликлональная активация В клеток ТН-2 Аг в составе ДК, меньше, чем под действием нативных ТН-2 Аг.

4. Для индукции иммунного ответа на ТН-2 Аг требуется непосредственный контакт нагруженных Аг ДК и В лимфоцитов.

5. ДК, полученные из костномозговых предшественников xid-мышей, не отличаются по способности связывать ТН-2 Аг и индуцировать иммунный ответ от ДК, полученных от нормальных мышей.

6. При индукции иммунного ответа in vitro на ТН-2 Аг, связанные с ДК, основными продуцентами Ат являются В-1 лимфоциты.

БЛАГОДАРНОСТИ

Автор сердечно благодарит коллектив лаборатории биосинтеза иммуноглобулинов за помощь и поддержку при постановке экспериментов и написании настоящей работы.

Особо следует отметить неоценимый вклад научного руководителя проф. Е.В. Сидоровой в обсуждении результатов и написании диссертации.

Автор выражает признательность Рубаковой Э.И., сотруднице лаборатории экспериментальной иммуногенетики ЦНИИ туберкулеза РАМН, за помощь в освоении метода получения дендритных клеток.

Работа выполнена при поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (Грант № 08-04-00233-а).

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Хоченков, Дмитрий Александрович, 2012 год

1. Гаврилова М.В., Чернышева И.Н., Сидорова Е.В. Роль различных субпопуляций B-клеток в иммунном ответе на Т-независимые антигены 2-го типа. // Мед. иммунология. 2007. Т.9. С.39^-6.

2. Дьяков И.Н., Григорьев И.В., Сидорова Е.В., Чернышова И.Н. Функциональная активность В клеток мыши. Роль микроокружения // Медицинская Иммунология. 2008. Т.10. С.51-58.

3. Макаренкова И.Д., Ахматова Н.К., Семенова И.Б., Беседнова H.H., Звягинцева Т.Н. Сульфатированные полисахариды из морских бурых водорослей индукторы созревания дендритных клеток. // Тихоокеанский мед. журнал. 2009. № 3. С.36-39.

4. Сидорова Е.В. Субпопуляции B-лимфоцитов и их функциональная роль. // Успехи современной биологии. 2002. Т. 122. С.467-479.

5. Сидорова Е.В. Что нам известно сегодня о В-клетках. // Успехи современной биологии. 2006. № 3. С. 227-241.

6. Хоченков Дм.А. Биология дендритных клеток. // Биол. Мембраны. 2008. Т.25. С.403-419.

7. Aderem A., Ulevitch R.J. Toll-like receptors in the induction of the innate immune response. // Nature. 2000. V.406. P.782-787.

8. Allman D., Pillai S. Peripheral В cell subsets. // Curr. Opin. Immunol. 2008. V.20. P. 149-157.

9. Alugupalli K.R., Leong J.M., Woodland R.T., Muramatsu M., Honjo Т., Gerstein R.M. Bib lymphocytes confer T cell-independent long-lasting immunity. // Immunity. 2004. V.21. P.379-390.

10. Ardavin C., Wu L., Li C.L., Shortman K. Thymic dendritic cells and T cells develop simultaneously within the thymus from a common precursor population. //Nature. 1993. V.362. P.761-763.

11. Arunachalam В., Phan U.T., Geuze H.J., Cresswell P. Enzymaticreduction of disulfide bonds in lysosomes: characterization of a gamma-interferon-inducible lysosomal thiol reductase (GILT). // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 2000. V.97. P.745-750.

12. Bachmann M.F., Rohrer U.H., Kiindig T.M., Biirki K., Hengartner H., Zinkernagel R.M. The influence of antigen organization on B cell responsiveness. // Science. 1993. V.262. P.1448-1451.

13. Balazs M., Martin F., Zhou T., Kearney J. Blood dendritic cells interact with splenic marginal zone B cells to initiate T-independent immune responses. // Immunity. 2002. V.17. P.341-352.

14. Baumgarth N. A two-phase model of B-cell activation. // Immunol. Rev. 2000. V.176. P. 171-180.

15. Bergtold A., Desai D.D., Gavhane A., Clynes R. Cell surface recycling of internalized antigen permits dendritic cell priming of B cells. // Immunity. 2005. V.23. P.503-514.

16. Berland R., Wortis H.H. Origins and functions of B-l cells with notes on the role of CD5. // Annu. Rev. Immunol. 2002. V.20. P.253-300.

17. Bishop G., Haxhinasto S., Stunz L.L., Hostager B.S. Antigen-specific B-lymphocyte activation. // Crit. Rev. Immunol. 2003. V.23. P.149-197.

18. Bjorck P., Flores-Romo L., Liu Y.J. Human interdigitating dendritic cells directly stimulate CD40-activated naive B cells. // Eur. J. Immunol. 1997. V.27. P. 1266-1274.

19. Boes M., Prodeus A.P., Schmidt T., Carroll M.C., Chen J. A critical role of natural immunoglobulin M in immediate defense against systemic bacterial infection. // J. Exp. Med. 1998. V.188. P.2381-2386.

20. Booth J., Wilson H., Jimbo S., Mutwiri G. Modulation of B cell responses by Toll-like receptors. // Cell Tissue Res. 2011. V.343. P. 131-140.

21. Bos N.A., Cebra J.J., Kroese F.G.M. B-l cells and the intestinal microflora. // Curr. Top. Microbiol. Immunol. 2000. V.252. P.211-220.

22. Brunswick M., Finkelman F.D., Highet P.F. Picogram quantities of anti-Ig antibodies coupled to dextran induce B cell proliferation. // J. Immunol. 1988.V. 140. P.3364—3372.

23. Carroll M. The role of complement and complement receptors in induction and regulation of immunity. // Annu. Rev. Immunol. 1998. V.16. P.545-568.

24. Castellino F., Zhong G., Germain R.N. Antigen presentation by MHC class II molecules: invariant chain function, protein trafficking, and the molecular basis of diverse determinant capture. // Hum. Immunol. 1997. V.54. P. 159-169.

25. Cella M., Engering A., Pinet V., Pieters J., Lanzavecchia A. Inflammatory stimuli induce accumulation of MHC class II complexes on dendritic cells. //Nature. 1997. V.388. P.782-787.

26. Chumley M.J., Dal Porto J.M., Cambier J.C. The unique antigen receptor signaling phenotype of B-l cells is influenced by locale but induced by antigen // J. Immunol. 2002. V.169. P.1735-1743.

27. Cobb B.A., Kasper D.L. Zwitterionic capsular polysaccharides: the new MHCII-dependent antigens. // Cell. Microbiol. 2005. V.7. P.1398-1403.

28. Colino J., Shen Y., Snapper C.M. Dendritic cells pulsed with intact streptococcus pneumoniae elicit both protein- and polysaccharide-specific immunoglobulin isotype responses in vivo through distinct mechanisms. // J. Exp. Med. 2002. V.195. P.l-13.

29. Cresswell P., Bangia N., Dick T., Diedrich G. The nature of the MHC class I peptide loading complex. // Immunol. Rev. 1999. V.172. P.21-28.

30. Crowley M.T., Inaba K., Witmer-Pack M.D., Gezelter S., Steinman

31. Delamarre L., Pack M., Chang H., Mellman I., Trombetta E.S. Differential lysosomal proteolysis in antigen-presenting cells determines antigen fate. // Science. 2005. V.307. P.1630-1634.

32. Dintzis H.M., Dintzis R.Z., Vogelstein B. Molecular determinants of immungenicity: the immunon model of immune response. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1976. V.73. P.3671-3675.

33. Do R.K., Hatada E., Lee H., Tourigny M.R., Hilbert D., Chen-Kiang S. Attenuation of apoptosis underlies B lymphocyte stimulator enhancement of humoral immune response. // J. Exp. Med. 2000. V.192. P.953-964.

34. Dorshkind K., Montecino-Rodriguez E. Fetal B-cell lymphopoiesis and the emergence of B-l-cell potential. // Nature Rev. Immunol. 2007. V.7. P.213-219.

35. Dubois B., Massacrier C., Vanbervliet B., Fayette J., Briere F., Banchereau J., Caux C. Critical role of IL-12 in dendritic cell induceddifferentiation of naive B lymphocytes. // J. Immunol. 1998. V.161. P.2223-2231.

36. Ehrenstein M.R., Notley C.A. The importance of natural IgM: scavenger, protector and regulator. // Nat. Rev. Immunol. 2010. V.10. P.778-786.

37. Elsen S., Doussiere J., Villiers C.L., Faure M., Berthier R., Papaioannou A., Grandvaux N., Marche P.N., Vignais P.V. Cryptic 02-generating NADPH oxidase in dendritic cells. // J. Cell. Sci. 2004. V.117. P.2215-2226.

38. Fagarasan S., Honjo T. T-independent immune response: new aspects of B-cell biology. // Science. 2000. V.290. P.89-92.

39. Fang Y., XuC., FuY., Holers V., Molina H. Expression of complement receptors 1 and 2 on follicular dendritic cells is necessary for the generation of a strong antigen-specific IgG response. // J. Immunol. 1998. V.160.1. P.5273-5279.

40. Gallucci S., Matzinger P. Danger signals: SOS to the immune system. // Curr. Opin. Immunol. 2001. V. 13. P. 114-119.

41. Groom J.R., Fletcher C.A., Walters S.N., Grey S.T., Watt S.V, Sweet M.J., Smyth M.J., Mackay C.R., Mackay F. BAFF and MyD88 signals promote a lupus-like disease independent of T cells. // J. Exp. Med. 2007. V.204. P.1959-1971.

42. Haas K.M., Poe J.C., Steeber D.A., Tedder T.F. B-la and B-lb cellsexhibit distinct developmental requirements and have unique functional roles in innate and adaptive immunity to S. pneumoniae. // Immunity. 2005. V.23. P.7-18.

43. Hall A., Nobes C.D. Rho GTPases: Molecular switches that control the organization and dynamics of the actin cytoskeleton. // Phil. Trans. R. Soc. Lond.

44. B. Biol. Sci. 2000. V.355. P.965-970.

45. Hardy R.R., Hayakawa K. B cell development pathways. // Annu. Rev. Immunol. 2001. V.19. P.595-621.

46. Hayakawa K., Hardy R.R., Parks D.R., Herzenberg L.A. The "Ly-1 B" cell subpopulation in normal immunodefective, and autoimmune mice. // J. Exp. Med. 1983. V.157. P.202-218.

47. Heyman B. Regulation of antibody responses via antibodies, complement, and Fc receptors. // Annu. Rev. Immunol. 2000. V.18. P.709-737.

48. Inaba K, Steinman RM. Dendritic and B-cell function during antibody responses in normal and immunodeficient (xid) mouse spleen cultures. // Cell. Immunol. 1987. V.105. P.432-442.

49. Inaba K., Turley S., Iyoda T., Yamaide F., Shimoyama S., Reis e Sousa

50. N., Takatsu K., Takaki S. Increased numbers of B-l cells and enhanced responses against TI-2 antigen in mice lacking APS, an adaptor molecule containing PH and SH2 domains. // Mol. Cell Biol. 2004. V.24. P.2243-2250.

51. Jiang W., Swiggard W.J., Heufler C., Peng M., Mirza A., Steinman R.M., Nussenzweig M.C. The receptor DEC-205 expressed by dendritic cells and thymic epithelial cells is involved in antigen processing. // Nature. 1995. V.375. P.151-155.

52. Johansson B., Ingvarsson S., Bjorck P., Borrebaeck C.A. Human interdigitating dendritic cells induce isotype switching and IL-13-dependent IgM production in CD40-activated naive B cells. // J. Immunol. 2000. V.164. P. 18471854.

53. Jurgens M., Wollenberg A., Hanau D., de la Salle H., Bieber T. Activation of human epidermal Langerhans cells by engagement of the high affinity receptor for IgE, Fc epsilon RI. // J. Immunol. 1995. V.155. P.5184-5189.

54. Kanswal S., Katsenelson N., Allman W., Uslu K., Blake M.S.,

55. Akkoyunlu M. Suppressive effect of bacterial polysaccharides on BAFF system is responsible for their poor immunogenicity. // J. Immunol. 2011. V.186. P.2430-2443.

56. Kato M., Neil T.K., Fearnley D.B., McLellan A.D., Vuckovic S., Hart D.N. Expression of multilectin receptors and comparative FITC-dextran uptake by human dendritic cells. // Int. Immunol. 2000. V.12. P.1511-1519.

57. Kawahara T., Ohdan H., Zhao G., Yang Y.G., Sykes M. Peritoneal cavity B cells are precursors of splenic IgM natural antibody-producing cells. // J. Immunol. 2003. V.171. P.5406-5414.

58. Kenny J.J., Guelde G., Fischer R.T., Longo D.L. Induction of phosphocholine-specific antibodies in X-linked immune deficient mice: in vivo protection against a Streptococcus pneumoniae challenge. // Int. Immunol. 1994. V.6. P.561-568.

59. Kindred B. Nude mice in immunology. // Prog. Allergy. 1979. V.26 P. 137-23 8.

60. Kroese F.G., Ammerlaan W.A., Deenen G.J. Location and function of B-cell lineages. //Ann. NY. Acad. Sci. 1992. V.651. P.44-58.

61. Lautscham G., Rickinson A., Blake N. TAP-independent antigenpresentation on MHC class I molecules: lessons from Epstein-Barr virus. // Microbes Infect. 2003. V.5. P.291-299.

62. Litinskiy M.B., Nardelli B., Hilbert D.M., He B, Schaffer A., Casali P., Cerutti A. DCs induce CD40-independent immunoglobulin class switching through BLyS and APRIL. //Nat. Immunol. 2002. V.3. P.822-829.

63. Lutz M.B., Kukutsch N., Ogilvie A.L., Rossner S., Koch F., Romani N., Schuler G. An advanced culture method for generating large quantities of highly pure dendritic cells from mouse bone marrow. // J. Immunol. Methods. 1999. V.223. P.77-92.

64. Macpherson A.J., Uhr T. Induction of protective IgA by intestinal dendritic cells carrying commensal bacteria. // Science. 2004. V.303. P. 16621665.

65. Martin F., Kearney J. B-cell subsets and the mature preimmune repertoire. Marginal zone and BIB cells as part of a "natural immune memory". // Immunol. Rev. 2000. V.175. P.70-79.

66. Meltzer U., Goldblatt D. Pneumococcal polysaccharides interact with human dendritic cells. // Infect. Immun. 2006. V.74. P. 1890-1895.

67. Mond J. J., Lees A., Snapper C. T cell-independent antigens type 2. 11 Annu. Rev. Immunol. 1995. V.13. P.655-592.

68. Mond J.J., Stein R.E., Subbarao B., Paul W.E. Analysis of B cell activation requirements with TNP-conjugated polyacrylamide beads. // J. Immunol. 1979. V.23. P.239-245.

69. Pierre P., Mellman I. Developmental regulation of invariant chain proteolysis controls MHC class II trafficking in mouse dendritic cells. // Cell. 1998. V.93. P.1135-1145.

70. Pozdnyakova O., Guttormsen H.-K., Lalani F.N., Carroll M.C., Kasper D.L. Impaired antibody response to group B streptococcal type III capsular polysaccharide in C3- and complement receptor 2-deficient mice. // J. Immunol. V.170. P.84-90.

71. Qi H., Egen J.G., Huang A.Y., Germain R.N. Extrafollicular activation of lymph node B cells by antigen-bearing dendritic cells. // Science. 2006. V.312. P. 1672-1676.

72. Qin, D. Wu J, Vora K.A., Ravetch J.V., Szakal A.K., Manser T., Tew J.G. Fey receptor IIB on follicular dendritic cells regulates the B cell recall response. // J. Immunol. 2000. V.164. P.6268-6275.

73. Ray A., Karmakar P., Biswas T. Up-regulation of CD80-CD86 and IgA on mouse peritoneal B-l cells by porin of Shigella dysenteriae is Toll-like receptors 2 and 6 dependent. // Mol. Immunol. 2004. V.41. P. 1167-1175.

74. Reid R.R., Prodeus A.P., Khan W., Hsu T., Rosen F.S., Carroll M.C.

75. Endotoxin shock in antibody-deficient mice: unraveling the role of natural antibody and complement in the clearance of lipopolysaccharide. // J. Immunol. 1997. V.159. P.970-975.

76. Reis de Sousa C., Stahl P.D., Austyn J.M. Phagocytosis of antigens by Langerhans cells in vitro. // J. Exp. Med. 1993. V.178. P.509-519.

77. Renshaw B.R., Fanslow W.C., Armitage R.J., Campbell K.A., Liggitt D., Wright B., Davison B.L., Maliszewski C.R. Humoral immune responses in CD40 ligand-deficient mice. // J. Exp. Med. 1994. V.180. P. 1889-1900.

78. Sato A., Hashiguchi M., Toda E., Iwasaki A., Hachimura S., Kaminogawa S. CDllb+ Peyer's patch dendritic cells secrete IL-6 and induce IgA secretion from naive B cells. // J. Immunol. 2003. V.171. P.3684-3690.

79. Savina A., Amigorena S. Phagocytosis and antigen presentation in dendritic cells. // Immunol. Rev. 2007. Vol. 219. P.143-156.

80. Scher I., Mosier D.E., Baese M., Paul W.E. T independent responses in B cell defective CBA/N mice to Brucella abortus and to trinitrophenyl (TNP) conjugates of Brucella abortus. // Eur. J. Immunol. 1978. V.8. P.459^463.

81. Schneider P. The role of APRIL and BAFF in lymphocyte activation. // Curr. Opin. Immunol. 2005. V.17. P.282-289.

82. Sidorova E.V., Li Sheng L., Devlin B., Chernishova I., Gavrilova M. Role of different B cell subsets in the specific and polyclonal immune response to T independent antigens type 2. // 2003. Immunol. Lett. V.88. P.37-42.

83. Singh-Jasuja H., Scherer H.U., Hilf N., Arnold-Schild D., Rammensee H.G., Toes R.E., Schild H. The heat shock protein gp96 induces maturation of dendritic cells and down-regulation of its receptor. // Eur. J. Immunol. 2000. V.30. P.2211-2215.

84. Snapper C.M., Mclntyre T.M., Mandler R., Pecanha L.M., Finkelman F.D., Lees A., Mond J.J. IL-10 selectively regulates murine isotype switching. // Int. Immunol. 1996. V.8. P.781-790.

85. Stambach N.S., Taylor M.E. Characterization of carbohydrate recognition by langerin, a C-type lectin of Langerhans cells. // Glycobiology. 2003. V.13.P.401-410.

86. Steele-Mortimer O., Knodler L.A., Finlay B.B. Poisons, ruffles and rockets: Bacterial pathogens and the host cell cytoskeleton. // Traffic. 2000. V.l. P.107-118.

87. Sulzer B., Perelson A.S. Immunons revisited: binding of multivalent antigen to B cells. // Mol. Immunol. 1997. V.34 P.63-74.

88. Tang H.L., Cyster J.G. Chemokine upregulation and activated T cell attraction by maturing dendritic cells. // Science. 1999. V.284. P.819-822.

89. Tang H.L., Cyster J.G., Ansel K.M., Reif K., Ekland E.H., Hyman P.L., Luther S.A., Ngo V.N. Follicular stromal cells and lymphocyte homing to follicles. // Immunol. Rev. 2000. V.176. P.181-193.

90. Timens W., Boes A., Poppema S. Human marginal zone B cells are not an activated B cell subset: strong expression of CD21 as a putative mediatorfor rapid B cell activation. // Eur. J. Immunol. 1989. V.19. P.2163-2166.

91. Trombetta E.S., Ebersold M., Garrett W., Pypaert M., Mellman I. Activation of lysosomal function during dendritic cell maturation. // Science. 2003. V.299. P. 1400-1403.

92. Trombetta E.S., Mellman I. Cell biology of antigen processing in vitro and in vivo. // Annu. Rev. Immunol. 2005. V.23. P.975-1028.

93. Tzianabos A.O., Wang Y., Kasper D.L. Structural rationale for the modulation of abscess formation by Staphylococcus aureus capsular polysaccharides. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2001. V.98. P.9365-9370.

94. Villadangos J.A., Schnorrer P., Wilson N.S. Control of MHC class II antigen presentation in dendritic cells: a balance between creative and destructive forces. // Immunol. Rev. 2005. V.207. P.191-205.

95. Vos Q., Lees A., Snapper C. B-cell activation by T-cell-independent type 2 antigens as an integral part of the humoral immune response to pathogenic microorganisms. // Immunol. Rev. 2000. V.176. P. 154-170.

96. Wardemann H., Boehm T., Dear N., Carsetti R. B-la B cells that link the innate and adaptive immune responses are lacking in the absence of the spleen. // J. Exp. Med. 2002. V.195. P.771-780.

97. Wen L., Shinton S.A., Hardy R.R., Hayakawa K. Association of B-l B Cells with follicular dendritic cells in spleen. // J. Immunol. 2005. V.174. P.6918-6926.

98. Whitmore A.C., Neely H.R., Diz R., Flood P.M. Rapid induction ofsplenic and peritoneal B-la cells in adult mice by thymus independent type 2 antigen. // J. Immunol. 2003. V.173. P.5406-5414.

99. Wykes M., Pombo A., Jenkins C., MacPherson G.G. Dendritic cells interact directly with naive B lymphocytes to transfer antigen and initiate class switching in a primary T dependent response. // J. Immunol. 1998. V.161. P.1313-1319.

100. Zamze S., Martinez-Pomares L., Jones H., Taylor P.R., Stillion R.J., Gordon S., Wong S.Y. Recognition of bacterial capsular polysaccharides and lipopolysaccharides by the macrophage mannose receptor. // J. Biol. Chem. 2002. V.277. P.41613-41623.

101. Zhang J., Liu Y.J., MacLennan I.C. MacLennan I.C, Gray D., Lane P.J. B cell memory to thymus-independent antigens type 1 and type 2: the role of lipopolysaccharide in B memory induction. // Eur. J. Immunol. 1988. V.18. P.1417-1424.