Роль межклеточных взаимодействий через щелевые контакты в канцерогенезе тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.14, доктор медицинских наук Крутовских, Владимир Андреевич

• Крутовских, Владимир Андреевич
• доктор медицинских наук
• 2005

Оглавление диссертации доктор медицинских наук Крутовских, Владимир Андреевич

Список использованных сокращений.

Введение.

Глава 1 Современные представления о структуре и функции щелевых контактов (обзор литературы).

1.1 Топология белков коннексинов и функциональные свойства их отдельных доменов.

1.2 Функция щелевых контактов.

1.3 Нарушение межклеточных щелевых контактов при раке.

1.4 Нарушения функции коннексинов при неопухолевых патологиях человека.

1.5 Экспериментальные модели заболеваний на основе нокаута генов индивидуальных коннексинов у мышей.

Глава 2 Исследования функционального состояния межклеточной сообщаемости через щелевые контакты в опухолях крыс и человека.

2.1 Метод оценки функциональной межклеточной сообщаемости через щелевые контакты в живой ткани печени ex vivo.

2.2 Межклеточная сообщаемость гепатоцитов предопухолевых очаговых поражений печени крыс.

2.3 Подавление межклеточной сообщаемости в печени крыс при хроническом воздействии различных печёночно-специфичных опухолевых промоторов.

2.4 Механизмы нарушений функции щелевых контактов в опухолях печени крыс.

2.5 Оценка фунционального состояния межклеточных щелевых контактов в опухолях печени человека.

Глава 3 Изучение с помощью целенаправленного мутагенеза свойств белка щелевых контактов коннексина 43, регулирующих опухолеродность клеток in vivo.

Глава 4 Вовлечение межклеточных взаимодействий через щелевые контакты в распространение сигналов клеточной гибели.

4.1 ВС31 клетки подвержены массивной спонтанной гибели апоптозом.

4.2 Апоптотические ВСЗ1 клетки экспрессируют Сх43.

4.3 Межклеточная сообщаемость между апоптотическими и здоровыми ВСЗ 1 клетками.

4.4 Апоптотические клетки распространяют через ЩК в окружающую их популяцию здоровых клеток гибель-запускающие сигналы.

4.5 Подавление межклеточной сообщаемости у ВС31 клеток экспрессией доминантно-негативного мутанта Сх43 снижает уровень клеточной гибели.

4.6 Подавление межклеточной сообщаемости блокатором ЩК 18р-глицирэтиновой кислотой также снижает уровень клеточной гибели.

4.7 Ионы кальция, как одни из наиболее вероятных сигнальных молекул, передающих через ЩК клеточную гибель.

Глава 5 Роль мутационных повреждений генов щелевых контактов коннексинов в этногенезе рака человека.

5.1 Поиск мутаций коннексина32 в опухолях печени человека.

5.2 Мутационный анализ коннексина37 в опухолях легкого, молочной железы и сосудов человека.

5.3 Мутации коннексина 43 в опухолях толстой кишки человека.

Глава 6 Редкие рецессивно ассоциированные с наследственной глухотой варианты гена коннексина 26, как новый возможный фактор генетической предрасположенности к раку желудочно-кишечного тракта.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Роль межклеточных взаимодействий через щелевые контакты в канцерогенезе»

Актуальность проблемы.

Отличительной особенностью канцерогенеза является многообразие этиологических факторов, вовлеченных в этот процесс. Помимо общепризнанной роли в генезе рака генетических повреждений ряда генов, белковые продукты которых регулируют клеточную пролиферацию, дифференцировку и клеточную смерть (Hanahan D, Weinberg RA, 2000; Vogelstein В, Kinzler KW, 2004), а также осуществляют репарационный контроль клеточного генома, существенный вклад в канцерогенез вносят и нарушения межклеточных взаимодействий (Васильев ЮМ, 1997; Yamasaki Н, 1990). Контактируя между собой, клетки получают разнообразную сигнальную информацию, опосредованно влияющую на практически все аспекты их жизнедеятельности. Аппарат межклеточных взаимодействий состоит из нескольких структурно и функционально различных типов межклеточных соединений. Большинство из них - адгезивные соединения, десмосомы, плотные контакты - имеют выраженную структурно-механическую функцию, объединяя клетки в единое целое, т.е. ткань. Щелевые же контакты (ЩК), представляя собой микроскопические водяные канальцы, напрямую соединяющие цитоплазмы клеток, обеспечивают непосредственный обмен метаболитами и сигнальными молекулами между клетками в пределах данной ткани (рис.1, глава 1).

Являясь неотъемлемой составной частью комплексного аппарата межклеточных взамодействий, ЩК вносят существенный вклад в обеспечение поддержания разнообразных параметров тканевого гомеостаза (Крутовских ВА, 2000; Kumar N.M., GilulaN.B., 1996; Willecke К. с соавт., 2002). с

Соответственно, нарушение функции щелевых контактов существенно влияет на клеточную пролиферацию, дифференцировку, клеточную гибель, что в свою очередь имеет значительный этиопатогенетический вклад в процесс формирования новообразований (Yamasaki Н., 1990; Yamasaki Н.,

Naus C.C.G., 1996; Trosko J.E., Ruch R.J., 1998; Krutovskikh V, 2002; Ruch R.J., Trosko J.E.,2001).

Резкое снижение способности сообщаться между собой через ЩК было отмечено in vitro у опухолевых клеток еще несколько десятилетий назад (Lowenstein W.R., Kanno Y. 1966). Этиологическая значимость этого феномена, а также отвечающие за эти нарушения механизмы долгое время оставались во многом неясными, в основном, из-за отсутствия фундаментальных знаний о молекулярной структуре щелевых контактов.

До последнего времени оставалось также неясно, сопровождается ли опухолевый рост in vivo утратой межклеточной сообщаемости через ЩК аналогично феномену, описанному ещё много лет назад в культуре опухолевых клеток.

Благодаря недавнему бурному прогрессу в области биологии межклеточных взаимодействий, в частности, открытие семейства белков ЩК - коннексинов (Сх), стало возможным получение высокоспецифичных антисывороткок и молекулярных генных проб ко многим индивидуальным белкам этого семейства, что существенно расширило экспериментальные возможности в изучении как функции ЩК и входящих в их состав коннексинов, так и механизмов их нарушений в канцерогенезе.

В частности, многочисленные эксперименты по восстановлению межклеточной сообщаемости у коммуникационно дефектных линий раковых клеток путём устойчивой трансфекции в них генов ЩК коннексинов показали, что межклеточная сообщаемость является сильным опухолеподавляющим фактором (Rose В. с соавт., 1991; Eghbali В, с соавт., 1991; Chen Sh-Ch. с соавт., 1995). В то же время в ряде случаев обнаружилось, что подавление опухолеродности клеток при искусственном восстановлении экспрессии в них белков коннексинов далеко не всегда и не обязательно непосредственно связано с улучшением межклеточной сообщаемости. Более того, оказалось, что для подавления опухолеродного фенотипа важно не само по себе восстановление межклеточной сообщаемости, а в большей мере тип индивидуального коннексина, с помощью которого это было произведено (Mesnil М. с соавт., 1995).

Таким образом, было предположено, что белки ЩК коннексины, наряду со своей основной функцией обеспечивать межклеточную сообщаемость формированием каналов щелевых контактов, также обладают дополнительными свойствами, имеющими существенное влияние на поведение опухолевых клеток.

Выяснение механизмов повреждения межклеточной сообщаемости при опухолевом процессе может существенно улучшить диагностику рака, способствовать разработке новых методов его лечения, а также способствовать разработке новых онкопрофилактических стратегий.

Цель работы.

Оценка этиопатогенетической значимости нарушений межклеточных взаимодействий через щелевые контакты в канцерогенезе.

Задачи исследования:

1. Выявить функциональные нарушения межклеточной сообщаемости через ЩК на разных этапах канцерогенеза in vivo.

2. Изучить молекулярные механизмы нарушения функций ЩК в экспериментальном и спонтанном канцерогенезе.

3. Выявить молекулярные механизмы подавления опухолевого роста белками ЩК коннексинами.

4. Экспериментально проверить предположение о многофункциональной природе белков коннексинов и оценить потенциальный вклад этих функций в коннексин-опосредованное подавление опухолевого роста.

Научная новизна.

Впервые было показано, что в опухолях печени человека межклеточная сообщаемость резко снижена по сравнению с окружающей их непораженной тканью.

Впервые на экспериментальной модели гепатоканцерогенеза крыс было продемонстрировано, что предопухолевые очаговые поражения уже на самых ранних этапах своего формирования могут быть коммуникационно изолированы от окружающей их нормальной паренхимы печени.

Впервые были получены экспериментальные доказательства распространения среди опухолевых клеток через их ЩК сигнальных молекул, запускающих механизм клеточной гибели.

Впервые были обнаружены соматические мутационные повреждения гена коннексина43 (Сх43) в спорадических опухолях толстой кишки человека. Было также выявлено, что мутации гена Сх43 происходят на довольно поздних этапах формирования новообразований колоректального рака, и их возникновение тесно связано с появлением признаков озлокачествления.

Также впервые было обнаружено, что редкие варианты гена коннексина26, вызывающие врождённую доречевую глухоту по рецессивному типу, могут быть дополнительным фактором генетической предрасположенности к ракам желудочно-кишечного тракта.

Научно-практическая значимость работы.

Полученные в работе данные расширяют современные представления о молекулярно-генетических механизмах канцерогенеза и имеют конкретную практическую значимость.

В частности, экспериментально обнаруженная возможность распространения в популяции опухолевых клеток через ЩК вызывающих клеточную гибель сигналов может быть успешно использована для повышения эффективности лекарственной терапии рака.

Специфический характер обнаруженных в опухолях толстой кишки человека мутаций Сх43 - сдвиг рамки считывания из-за инсерции-делеции единичных нуклеотидов в карбоксильно-терминальном домене белка -дополняет имеющиеся ранее представления о молекулярных механизмах канцерогенеза толстой кишки. Разрушение в результате таких мутаций способности Сх43 взаимодействовать с целым рядом сигнально активных белков (р-катешш, ZO-1, кпаудин, дребрин и другие) (Giepmans B.N.G., Moolenaar W.H., 1998, Toyofuku Т. с соавт., 1998; Ai Zh. с соавт., 2000; Jin Ch., с соавт., 2000; Butkevich Е. с соавт., 2004) приводит к неконтролируемой пролиферации опухолевых клеток. Природа этих мутации также убедительно указывает на наличие нераспознанной ранее сигнальной активности Сх43 в контроле опухолевого фенотипа.

Обнаруженная в данной работе тесная взаимосвязь специфического мутационного повреждения Сх43 в его карбокси-терминальной части с появлением признаков инвазивности опухолей толстой кишки может быть использована в клинической практике в качестве нового диагностического критерия опухолевой прогрессии.

Возникающие при раке толстой кишки в результате сдвигающих рамку считывания мутаций новые аминокислотные последовательности в составе белковой молекулы Сх43 обладают сильной антигенностью и могут служить иммуно-диагностической и иммуно-терапевтической мишенью.

Высокая частота гетерозиготных носителей редких вариантов гена Сх26 среди больных раком желудочно-кишечного тракта позволяет использовать наличие этих вариантов в качестве нового критерия для раннего выявления групп повышенного онкологического риска.

Основные положения, выносимые на защиту. Опухолевый рост in vivo сопровождается значительным снижением межклеточной сообщаемости через ЩК, в основе чего лежат различные механизмы ; так 1) межклеточная сообщаемость через ЩК является сильным противоопухолевым фактором; 2) межклеточная сообщаемость между опухолевыми клетками через ЩК может являться путём распространения в опухолевой клеточной популяции сигналов, запускающих процесс клеточной смерти, что является существенной составляющей опухоль-подавляющего эффекта межклеточной сообщаемости.

Белки ЩК коннексины являются опухолевыми супрессорами, способными подавлять опухолевый рост независимо от межклеточной сообщаемости через ЩК. Именно это свойство и обусловливает ярко выраженную вариабельность противоопухолевого потенциала каждого из 20 известных индивидуальных коннексинов.

Индивидуальные коннексины могут быть избирательно и высоко специфично соматически мутированы в отдельных типах раков человека. Мутационно модифицированные коннексины могут приобретать способствовать ускорять опухолевую прогрессию, а редкие варианты гена коннексина26 могут быть новым фактором предрасположенности к ракам желудочно-кишечного тракта.

Апробация работы.

Диссертация была представлена на международных конференциях по межклеточным щелевым контактам [Хирошима (Япония, 1993), Кей Ларго (США, 1997), Гватт (Швейцария, 1999), Гонолулу (США, 2001), Кембридж (Англия, 2003)], на ежегодных симпозиумах американской ассоциации по изучению рака (1991, 1993, 1995, 1997, 1999, 2002), международном симпозиуме по раннему выявлению и предотвращению рака (Париж, Франция, 2002). Всего по теме диссертации было сделано 40 устных и постерных презентаций.

Связь с планом научных исследований: Данное исследование является частью научного проекта отдела канцерогенеза МАИР, одобренного научным советом Международного Агентства по Исследованию Рака.

Публикации.

Результаты исследования опубликованы в 34 научных публикациях в отечественной и международной научной периодике.

Объем и структура диссертации.

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, пяти глав, описывающих результаты собственных исследований, заключения, выводов и практических рекомендаций. Объём работы составляет 176 страниц. Диссертация проиллюстрирована 50 рисунками и 7 таблицами. Список цитированной литературы содержит 17 отечественных и 256 зарубежных источников.

Заключение диссертации по теме «Онкология», Крутовских, Владимир Андреевич

ВЫВОДЫ

1. Установлено, что уровень межклеточной сообщаемости через щелевые контакты (ЩК) в опухолях печени, как человека, так и крыс, по сравнению с окружающей их нормальной тканью, существенно снижен. Кроме того, уже на самых ранних этапах формирования новообразований печени крыс происходит их коммуникационная изоляция от окружающей нормальной печёночной паренхимы по гетерогенному типу.

2. В основе нарушений межклеточной сообщаемости в опухолях лежат различные механизмы, определяющиеся как гистогенезом опухоли, так и спектром экспрессируемых опухолью индивидуальных белков ЩК -коннексинов. Наиболее распространённым механизмом функциональной несостоятельности коннексинов в опухолях является их аномальная транслокация из межклеточных контактов латеральных мембран в цитозоль опухолевых клеток.

3. Экспериментальное модулирование интенсивности межклеточной сообщаемости некоторых типов умеренно сообщающихся между собой опухолевых клеток in vitro показало, что полное её подавление значительно повышает их злокачественный потенциал. В то же время, дополнительное увеличение эндогенного уровня межклеточной сообщаемости коммуникирующих между собой раковых клеток в состоянии полностью подавить их опухолеродность in vivo.

4. Противоопухолевый эффект межклеточной сообщаемости частично связан с распространением среди коммуникирующих опухолевых клеток сигнальных молекул, запускающих процесс клеточной гибели апоптозом. Наиболее вероятным посредником передачи клеточной гибели через ЩК среди опухолевых клеток являются ионы Са2+.

5. Белки ЩК коннексины способны подавлять опухолеродность клеток независимо от их способности обеспечивать межклеточную сообщаемость формированием канальцев ЩК. Внутрицитоплазматическое перемещение мутационно изменённого белка Сх43 из участков межклеточных контактов латеральных мембран клеток существенно усиливает его коммуникационно-независимый противоопухолевый потенциал.

6. Независимая от межклеточной сообщаемости противоопухолевые свойства коннексинов носит выраженный индивидуальный коннексин- и ткане-специфический характер.

7. Прогрессия спорадических аденокарцином толстой кишки разной степени дифференцировки может сопровождаться соматическими мутационными повреждениями коннексина43. Мутации этого гена возникают на относительно поздних стадиях развития опухолей и тесно связаны с появлением патоморфологических признаков озлокачествления этих новообразований.

8. Гетерозиготное носительство отдельных редких вариантов гена Сх26 может быть дополнительным фактором генетической предрасположенности к ракам желудочно-лишечного тракта.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Обнаруженный нами феномен распространения клеточной гибели в монослое коммуникирующих опухолевых клеток через ЩК может лечь в основу разработки новых подходов к лечению рака. Медикаментозное или биоинженерное повышение коммуникационной способности опухолевых клеток в сочетании с целенаправленной химиотерапией может существенно повысить цитотоксический ответ опухолевых клеток на лечение.

2. Тесная связь обнаруженных соматических мутационных повреждений гена Сх43 в аденокарциномах толстой кишки с их инвазивно-агрессивным поведением указывает на целесообразность включения в клинико-патоморфологическую практику анализа на мутационные повреждения гена Сх43 как нового критерия озлокачествления аденокарцином толстой кишки.

3. Существенное повышение частоты гетерозиготного носительства отдельных вариантов гена Сх26 среди больных раком желудочно-кишечного тракта указывает на необходимость раннего массового выявления носителей таких гетерозигот Сх26 с целью их дальнейшего наблюдения как группы повышенного онкологического риска. Последующее регулярное обследование этой группы может способствовать раннему выявлению раковых заболеваний и, тем самым, существенно повысить вероятность их последующего полного излечения. Кроме того, учитывая этиопатогенетическую роль вышеуказанных вариантов Сх26 в возникновении прелингвальной несиндромной глухоты по рецессивному типу, массовое выявление гетерозиготных носителей редких вариантов Сх26 позволит также избежать в дальнейшем рождения гомозиготных детей, страдающих врождённой доречевой глухотой.

Список литературы диссертационного исследования доктор медицинских наук Крутовских, Владимир Андреевич, 2005 год

1. Божкова В.П., Розанова Н.В. Современное состояние проблемы щелевых контактов и представление об их роли в развитии.// Онтогенез. 1998.-Т. 29, №1, С. 5-20.

2. Божкова В.П. Современное состояние проблемы щелевых контактов и представление об их роли в развитии //Тез. докл. II Съезд биофизиков России. М.: МГУ, 1999.

3. Гайнуллина С.М. Стволовые клетки как клеточная переносящая система: роль щелевых контактов. //Тез. докл. Научная конференция «постгеномная эра в биологии и проблемы биотехнологии». Казань. 2004.

4. Дадали Е.Л., Федотов В.П., Мерсиянова И.А., Исмаилов Ш.М., Руденская Г.Е., Барышникова НВ. Клинические характеристики наследственной моторно-сенсорной невропатии с мутациями в гене коннексина-32. // Медико-генетический научный центр РАМН, Москва.

5. Дадали Е.Л., Угаров И.В., Шаркова И.В. и Кириленко Н.Б. Проблемы классификации наследственных полинейропатий // Медицинская генетика. 2003. Т2. №5. С. 194-2000.

6. Евразии: информационные технологии и моделирование" (WITA-2001). Новосибирск: Сибирское отделение РАН, Институт цитологии и генетики, 2001.

7. Коган Е.А. Автономный рост и прогрессия опухолей. // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии, 2002. - Т. 12, №4, С.45-49.

8. Коган Е.А. Межклеточные взаимодействия при опухолевом росте // М.А. Пальцев, А.И. Иванов. Межклеточные взаимодействия. М.: Медицина, - 1995.-С.127-189.

9. Крутовских В.А. Роль нарушений межклеточных щелевых контактов в генезе рака и других петологических состояний. // Архив Патологии, -2000.-Т. 61,№1 С. 3-7

10. Маркова Т.Г., Мегрелишвилли С.М., Зайцева Н.Г., Шагина И.А. и Поляков A.B. ДНК-диагностика при врожденной и ранней детской тугоухости и глухоте. // Вестник отриноларингологии. 2002 - Т.6., №12, С.15.

11. Сигнаевский М.А. Межклеточные взаимодействия по типу щелевых контактов в клеточных линиях рака предстательной железы человека.// Дисс. канд. мед. наук. СПб. - 1999.

12. Шаровская Ю.Ю., Марголис Л.Б. и Хюльзер Д.Ф. Регуляция проницаемости щелевых контактов в культуре клеток Hela, трансфицированных генами коннесинов Сх32 и Сх26// Тез. докл. II Съезд биофизиков России. М.: МГУ, 1999.

13. Яицкий Н.А, Дубина М.В., Васильев C.B., Попов Д.Е. и Крутовских В.А. Научно-клиническое значение молекулярно-генетических изменений межклеточных щелевых контактов при раке толстой кишки. // Вестник РАМН. 2003 - Т.10, С. 24-29.

14. Ai Zh., Fischer A., Spray D.C., Brown A.M.C. and Fishman G.I. (2000). Wnt-1 regulation of connexin43 in cardiac myocytes. J. Clin. Invest., 105, 161-171.

15. Andrew S.E. and Peters A.C. (2001). DNA instability and human disease. Am. J. Pharmacogenetics, 1, 21-28.

16. Asamoto M., Takahashi S., Imaida K., Shirai T. and Fukushima S. (1994). Increased gap junctional intercellular communication capacity and connexin43 and -26 expression in rat bladder carcinogenesis. Carcinogenesis, 15,2163-2166.

17. Asamoto M., Toriyama-Baba T., Krutovskikh V., Cohen S.M. and Tsuda H. (1998) Enhanced tumorigenecity of rat bladder squamous call carcinoma cells after abrogation of gap junctional intercellular communication. Jpn. J. Cancer Res., 89,481-496.

18. Backer D.L., Evans W.H., Green C.R. and Warner A. (1995). Functional analysis of amino acid sequences in connexin 43 involved in intercellular communication through gap junctions. J. Cell Sci., 108, 1455-1467.

19. Badd S.L. and Lipton S.A. (1998). Calcium tsunamis: do astrocytes transmit cell death messages via gap junctions during ischemia? Nat. Naurosci., 1, 431-432.

20. Bannasch P. (1986). Preneoplastic lesions as end points in carcinogenicity testing. I. Hepatic preneoplasia. Carcinogenesis, 7, 689-695.

21. Bannasch P., Zerban H. and Hacker H.J. (1985). Foci of altered hepatocytes, rat. In: Jones TC, Mohr U and Hunt RD, Eds. Digestive system (Monographs on pathology of laboratory animals), Berlin, Heidelberg, New York, Springer-Verlag, pp. 10-30.

22. Behrens J., Mareel M.M., Van Roy F.M. and Birchmeier W. (1989). Dissecting tumor cell invasion: epithelial cells acquire invasive properties after loss of uvomorulin-mediated cell-cell adhesion. J. Cell Biol., 108, 24352447.

23. Ben-Ze'ev A. (1997). Cytoskeletal and adhesion proteins as tumor suppressors. Current opinion in Cell Biol., 9, 99-108.

24. Berke G., Krutovskikh V. and Yamasaki H. (2003). Connexin 37 gene is not mutated in lung carcinomas 3LL and CMT. Cancer Letters, 195, 67-72.

25. Beyer E.C., Paul D.L. and Goodenough D.A. (1990). Connexin family of gap junction proteins. J. Membrane Biology, 116, 187-194.

26. Bennett M.V.L., Barrio L.C, Bargiello T.A., Spray D.C., Hertzberg E. and Saez J.C. (1991). Gap junctions: new tool, new answers, new questions. Neuron, 6, 305-320.

27. Bergoffen J., Scherer S.S., Wang S., Oronzi Scott M., Bone L.J., Paul D.L., Chen K., Lensch M.W., Chance P.F. and Fischbeck K.H. (1993). Connexinmutations in X-linked Charcot-Marie-Tooth disease. Science, 262, 20392042.

28. Bignold L.P. (2002). The mutator phenotype theory can explain the complex morphology and behavior of cancer. Cell Mol. Life Sci., 58, 950-958.

29. Blanc E.M., Bruce-Keller J. and Mattison M.P. (1998). Astrocytic gapjunctional communication decreases neuronal vulnerability to oxidative• 2+ •stress-induced disruption of Ca homeostasis and cell death. J. Neurochem.,70, 958-970.

30. Brandt BiH. (2002). Molecular diagnostics of solid malignant tumours. Clin. Lab., 48, 605-615.

31. Bond L.S., Bechberger J.F., Khoo N.K.S. and Naus C.C.G. (1994). Transfection of glioma C6 cell with connexin32: the effects of expression of nonendogenous gap junction protein. Cell Growth Differ., 5, 179-186.

32. Bowling N., Huang X., Sandusky G.E., Fouts R.L., Mintze K., Esterman M., Allen P.D. Maddi R., MsCall E., and Vlahos C.J. (2002). Protein kinase C-alfa and -epsilon modulate connexin43 phosphorylation in human heart. J. Mol. Cell. Cardiol., 33, 789-798.

33. Britz-Cunningham S.H., Shah M.M., Zuppan C.W. and Fletcher W.H. (1995). Mutations of the Connexin43 gap-junction gene in patients with heart malformations and defects of laterality. N. Engl. J. Med., 332, 1323-1329.

34. Brobby G.W., Muller-Myhsok B. and Hortsmann R.D. (1998) Connexin 26 R143W mutation associated with recessive nonsyndromic sensoneural deafness in Africa. N. Engl. J. Med., 338,548-549.

35. Bruzzone R., White T.W., Scherer S.S., Fischbeck K.H. and Paul D.L. (1994). Null mutations of connexin32 in patients with X-linked Charcot-Marie-Tooth disease. Neuron, 13, 1253-1260.

36. Budunova I.V. (1994). Alteration of gap junctional intercellular communication during carcinogenesis. The Cancer J., 7, 228-237.

37. Budunova I.V. and Williams G.M. (1994). Cell culture assays for chemicals with tumor promoting or tumor-inhibiting activity based on the modulation of intercellular communication. Cell Biology and Toxicology, 10, 71-116.

38. Bullions L.C., and Levine A.J. (1998). The role of beta-catenin in cell adhesion, signal transduction, and cancer. Cancer Biology, 10, 81-87.

39. Cameron R.G. (1989). Identification of putative first cellular step of chemical hepatocarcinogenesis. Cancer Lett. 47, 163-167.

40. Casey B. and Ballabio A. (1995). Connexin43 mutations in sporadic and familial defects of laterality. N. Engl. J. Med., 333, 941.

41. Castro C., Gomez-Hernandez J.M., Silander K. and Barrio L.C. (1999). Altered formation of hemichannels and gap junction channels by C-terminal connexin-32 mutatioins. J. Neurosci., 19, 3752-3760.

42. Chang W.W.L. and Nadler N.J. (1975). Renewal of the epithelium in the descending colon of the mouse. IV. Cell population kinetics of vacuolated-columnar and mucous cells. Am. J. Anat., 144, 39-56.

43. Chen Sh.-Ch., Pelletier D.B., Ao P. and Boynton A.L. (1995). Connexin43 reverses the phenotype of transformed cell and alters their expression of cyclin/cyclin-dependent kinases. Cell Growth & Differ., 6, 681-690.

44. Chipman J.K. (1995). Connexin genes as tumor suppressor genes? Hum. Exp. Toxicol.; 14, 539-540.

45. Cohn E.S. and Kelley P.M. (1999). Clinical phenotype and mutations in connexin 26 (DFNB1/GJB2), the most common cause of childhood hearing loss. Am. J. Med. Genet. 98, 130-136.

46. Cortina M.L., Kang J., Lin J.H.-C., Bueno E., Hansen T.W., He L., Liu Y. and Nedergaard M. (1998). Astrocytic gap junctions remain open during ischemic conditions. J. Neurosci., 18,2520-2537.

47. Cunliffe J. (1997). Morphostasis: an evolving perspective. Med. Hypotheses, 49, 449-459.

48. Dahl G., Werner R., Levine E. and Rabadan-Diehl C. (1992). Mutational analysis of gap junction formation. Biophys. J.} 62, 172-180.

49. Dang X., Doble B.W. and Kardami E. (2003). The carboxyl-tail connexin-43 localizes to the nucleus and inhibits cell growth. Mol Cell Biochem., 242, 3538.

50. Davidson J.F., Guo H.H. and Loeb L.A. (2002). Endogenous mutagenesis and cancer. Mutation Research, 509, 17-21.

51. Davidson J.S., Baumgarten I.M. and Harley E.H. (1986). Reversible inhibition of intercellular junctional communication by glycyrrhetinic acid. Biochem. Biophys. Res. Comm., 143, 29-36.

52. Denoyelle F, Lina-Granade G, Plauchu H, Bruzzone R, Chaib H, Levi-Acobas F, Weil D and Petit C. (1998). Connexin 26 gene linked to a dominant deafness. Nature, 393, 319-320.

53. Deschenes S.M., Walcott J.L., Wexler T.L., Scherer S.S. and Fischbeck K.H. (1997). Altered trafficking of mutant connexin32. J. Neurosci., 17, 90779084.

54. Doble B.W., Ping P., and Kardami E. (2000). The epsilon subtype of protein kinase C isrequired for cardiomyocyte connexin43 phosphorylation. Circ. Res., 86, 293-301.

55. Dong J., Katz D.R., Eng C.M., Kornreich R. and Desnick R.J. (2001). Nonradioactive detection of the common Connexin 26 167delT and 35delG mutations and frequencies among Ashkenazi Jews. Mol. Genet. Metab., 73, 160-163.

56. Dubina M., Iaitckii N.A., Popov D.E., Vasil'ev S.V. and Krutovskikh V. (2002). Connexin 43, but not connexin 32, is mutated at advanced stages of human sporadic colon cancer. Oncogene, 21, 4992-4996.

57. Duflot-Dancer A., Mesnil M. and Yamasaki H. (1997). Dminant-negative abrogation of connexin-mediated cell growth control by mutant connexin genes. Oncogene, 15 2151-2158.

58. Eghbali B., Kessler J.A., Reid L.M., Roy C. and Spray D.C. (1991). Involvement of gap junctions in tumorigenesis: Transfection of tumor cells with connexin 32 cDNA retards growth in vivo. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88,701-10705.

59. Erichsen H.C. and Chanock SJ. (2004). SNPs in cancer research and treatment. Br. J. Cancer. 90, 747-751.

60. Estin D., Li M., Spray D. and Wu J.K. (1999). Connexins are expressed in primary brain tumors and enhance the bystander effect in gene therapy. Neurosurgery, 44, 361-368.

61. Estvill X., Fortina P., Surray S., Rabionet R., Melchionda S., D'Agruma L., Mansfield E., Rappoport E., Govea N., Mila M., Zelante L. and Gasparini P. (1998). Connexin-26 mutations in sporadic and inherited sensorineural deafness. Lancet, 351, 394-398.

62. Everts R.P., Nakatsukasa H., Marseden E.R., Hsia C.C., Dansford H.A. and Thorgeirsson S.S. (1990). Cellular and molecular changes in the early stages of chemical hepatocarcinogenesis in the rat. Cancer Res., 50, 3439-3444.

63. Fields S. and Song O. (1989). A novel genetic system to detect proteinprotein interactions. Nature, 340, 245-247.

64. Fishel R. (2001). The selection for mismatch repair defects in hereditary nonpolyposis colorectal cancer: revising the mutator hypothesis. Cancer Res., 61,7369-7374.

65. Fishman G.I., Moreno A.P., Spray D.C. and Leinwand L.A. (1991). Functional analysis of human cardiac junction channel mutants. Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 88,3525-3529.

66. Fishman G.I., Eddy R.L., Shows T.B., Rosental L. and Leinward L.A. (1991). The human connexin gene family of gap junction proteins: distinct chromosomal locations but similar structures. Genomics, 10, 250-256.80.

67. Fitzgerald D.J., Knowles S.E., Ballard F.J. and Murray A.W. (1983). Rapid and reversible inhibition of junctional communication by tumor promoters in mouse cell line. Cancer Res., 43, 3614-3618.

68. Fitzgerald D.J., Mesnil M., Oyamada M., Tsuda H., Ito N. and Yamasaki H. (1989). Changes in gap junction protein (connexin32) gene expression during rat liver carcinogenesis. J. Cell Biochem., 41,97-102.

69. Foote CI, Zhou L, Zhu X and Nicholson BJ. (1998). The pattern of disulfide linkages in the extracellular loop regions of connexin 32 suggests a model for the docking interface of gap junctions. J. Cell Biol., 140, 1187-1197.

70. Gabriel H.-D., Jung D., Butzler C., Temme A., Traub O., Winterhager E. and Willecke K. (1998). Transplacental uptake of glucose is decreased in embryonic lethal Connexin26-deficient mice. J. Cell Biol., 140, 1453-1461.

71. Giepmans B.N.G. and Moolenaar W.H. (1998). The gap junction protein connexin43 interacts with the second PDZ domain of the zona occludens-1 protein. Current Biology, 8, 931-934.

72. Giepmans B.N., Verlaan T., Hengeveld H., Janseen J., Calafat M.M., Falk M.M., and Moolenaar W.H. (2001). Gap junction protein connexin43 interacts directly with microtubbbules. Curr. Biol., 11, 1364-1368.

73. Giepmans B.N., Verlaan T., and Moolenaar W.H. (2001). Connexin43 interacts with ZO-1 and alfa- and beta-tubulin. Cell Commun. Adhes., 8, 219223.

74. Goldberg G.S., Lampe P.D. and Nocholson B.J. (1999). Selective transfer of endogenous metabolites through gap junctions composed of different connexins. Nat. Cell Biol., 1,457-459.

75. Goldberg G.S., Bechberger J.F., Tajima Y., Merritt M., Omori Y., Gawinowicz M.A., Narayanan R., Tan Y., Sanai Y., Yamasaki H., Naus

76. C.C., Tsuda H. and Nicholson B.J. (2000). Connexin43 suppresses MFG-E8 while inducing contact growth inhibition of glioma cells. Cancer Res., 60, 6018-6026.

77. Gong X., Li E„ Klier G., Huang Q., Wu Y., Lei H., Kumar N.M., Horwitz J. and Gilula N.B. (1997). Disruption of ot3connexin gene leads to proteolysis and cataractogenesis in mice. Cell, 12, 833-843.

78. Goode E.L., Ulrich C.M. and Potter J.D. (2002). Polymorphisms in DNA repair genes and associations with cancer risk. Cancer Epidemil. Biomarkers Prev., 11, 1513-1530.

79. Guan X., Wilson S., Schelender K.K. and Ruch R.J. (1996). Gap junction disassembly and connexin43 dephosphorylation induced by 18-glycyrretinic acid. Mol. Carcinogenesis, 16, 157-164.

80. Guan X., Cravatt B.F., Ehring G.R., Hall J.E., Boger D.L., Lerner R.A. and Gilula N. (1997). The sleep-inducing lipid Oleamide deconvolute gap junction communication and calcium wave transmission in glial cells. J. Cell Biol., 139, 1785-1792.

81. Guldenagel M., Ammermuller J., Feigenspan A., Teubner B., Degen J., Sohl G., Willecke K. and Weiler R. (2001). Visual transmission defidits in mice with targeted disruption of the gap junction gene connexin36. J. Neurosci., 21, 6036-6044.

82. Han J., Hankinson S.E., Ranu H., De Vivo I. and Hunter D.J. (2004). Polymorphisms in DNA double-strand break repair genes and breast cancer risk in the Nurses' healthy study. Carcinogenesis, 25, 189-195.

83. Hanahan D. and Weinberg R.A. (2000). The hallmarks of cancer. Cell, 100, 57-70.

84. Hendrich S. and Pitot H.C. (1987). Enzymes of glutatione metabolism as biochemical markers during hepatocarcinogenesis. Cancer Metastasis Rev., 6, 155-178.

85. Harris K.C., Erbe C.B., Firszt J.B., Flanary V.A. and Wackym P.A. (2002). A novel connexin 26 compound heterozygous mutation results in deafness. Laryngoscope, 112, 1159-1162.

86. Hertig C.M., Eppenberger-Ebenhardt M., Koch S. and Eppenberger H,M. (1996). N-cadherin in adult cardiomyocytes in culture. I. Functional role of N-cadherin and impairment of cell-cell contact by truncated N-cadherin mutant. J. Cell Sci., 109, 1-10.

87. Herve J.-C., Bourmeyster N., and Sarrouilhe D. (2004). Diversity in proteinprotein interactions of connexins: emerging roles. Biochim. Biophys. Acta. 1662,22-41.

88. Holder J.W., Elmore E. and Barrett J.C. (1993). Gap junction function and cancer. Cancer Res., 53, 3475-3485.

89. Hollstein M., Marion M.J., Lehmann T., Welsh J., Harris C.C., Martel-Planche G., Kudters I. and Montesano R. (1994). p53 mutations at A:T base pairs in angiosarcomas of vinyl chloride-exposed factory workers. Carcinogenesis, 15, 1-3.

90. Hu J.J., Mohrenweiser H.W., Bell D.A., Leadon S.A. and Miller M.S. (2002). Symposium overview: gentic polymorphisms in DNA repair and cancer risk. Toxicol. Appl. Pharmacol., 185, 64-73.

91. Huang R.P., Fan Y., Hossain M.Z., Peng A., Zeng Z.L. and Boynton A.L. (1998). Reversion of neoplastic phenotype of human glioblastoma cells by connexin 43. Cancer Res., 58, 5089-5096.

92. Hully J.R., Su Y., Lohse J.K., Griep A.E., Sattler C.A., Haas M.J., Dragan Y., Peterson J., Neveu M. and Pitot H.C. (1994). Transgenic hepatocarcinogenesis in the rat. Am. J. Pathol., 145, 384-397.

93. Imyanitov E.N., Togo A.V. and Hanson K.P. (2004). Searching for cancer-associated gene polymorphisms: promises and obstacles. Cancer Lett., 204, 3-14.

94. Ionasescu V., Ionasescu R. and Searby C. (1996) Correlation between connexin32 gene mutations and clinical phenotype in X-linked dominant Charcot-Marie-Tooth neuropathy. Am. J. Med. Genet., 63, 486-491.

95. Jacobi C., Leipziger J., Nitschke R., Ricken S. and Greger R. (1998). No evidences for cell-to-cell coupling in rat colonic crypts: studies with Lucifer yellow and with photobleaching. Pflugers Arch., 436, 83-89.

96. Jin Ch., Lau A.F. and Mertyn K.D. (2000). Identification of connexin-interacting proteins: application of yeast two-hybrid screen. Methods, 20, 219-231.

97. John S.A., Kondo R., Wang S.Y., Goldhaber J.I. and Weiss J.N. (1999). Connexin-43 hemichannels opened by metabolic inhibition. J. Biol. Chem., 274, 236-240.

98. Juneja S.C., Barr K.J., Eders G.C. and Kidder G.M. (1999) Defects in the germ line and gonads of mice lacking connexin43. Biol. Reprod., 60, 12631270. ,

99. Kelley P.M., Harris D.J., Comer B.C., Askew J.W., Fowler T., Smith S.D. and Kimberling W.J. (1998). Novel mutations in the connexin 26 gene (GJB2) that cause autosomal recessive (DFNB1) hearing loss. Am. J. Hum. Genet. 62, 792-799.

100. Kelsell D.P., Dunlop J., Stevens H.P., Lench N.J., Liang J.N., Parry G., Mueller R.F., and Leigh I.M. (1997). Connexin 26 mutations in hereditary non-syndromic sensorineural deafness. Nature, 387, 80-83.

101. Kinzler K.W. and Vogelstein B. (1996). Lessons from hereditary colorectal cancer. Cell, 87, 159-170.

102. Kirchhoff S., Nelles E., Hagendorff A., Kruger O., Traub O. and Willecke K. (1998). Reduced cardiac conduction velocity and predisposition to arrhythmias in connexin40-deficient mice. Current Biology, 8, 299-302.

103. Klann R.C., Fitzgerald D.J., Piccoli C., Slaga T.J. and Yamasaki H. (1989). Gap junctional intercellular communication in epithelial cell lines fromselected stages of SENCAR mouse skin carcinogenesis. Cancer Res., 49, 699-705.

104. Klaunig J.E. and Ruch RJ. (1990). Role of inhibition of intercellular communication in carcinogenesis. Laboratory Investigation, 62, 135-144.

105. Korinek V., Barker N., Morin P.J., van Wichen D., de Weger R., Kinzler K.W., Vogelstein B. and Clevers H. (1997). Costitutive transcriptional activation by a (3-Catenin-Tcf complex in APC-/- colon carcinoma. Science, 275, 17841787.

106. Kronengold J., Trexler E.B., Bukauskas F.F., Bargiello T.A. and Verselis V.K. (2003). Pore-linig residues identified by single channel SCAM studies in Cx46 hemichannels. Cell Communication and Adhesion. 10,193-199.

107. Krutovskikh V.A., Oyamada M. and Yamasaki H. (1991). Sequential changes of gap junctional intercellular communications during multistage rat liver carcinogenesis: direct measurement of communication in vivo. Carcinogenesis, 12, 1701-1706.

108. Krutovskikh V. and Yamasaki H. (1995). Ex-vivo dye transfer assay as an approach to study gap junctional intercellular communication disorders in hepatocarcinogenesis. In: Progress in Cell Research, 4, 93-97. Ed. Kanno Y. et al., Elsevier Science B.V.

109. Krutovskikh V., Mironov N. Yamasaki H. (1996). Human connexin37 is polymorphic but not mutated in tumors. Carcinogenesis, 17, 1761-1763.

110. Krutovskikh V. and Yamasaki H. (1997). The role of gap junctional intercellular communication disorders in experimental and human carcinogenesis. Histology and Histopathology Journal, 12, 761-768.

111. Krutovskikh V., Asamoto M. and Tsuda H. (1997). Differential dose-dependent effect of □□carotenes and lycopene on gap junction intercellular communication in rat liver in vivo. Jpn. J. Cancer Res., 88, 1121-1124.

112. Krutovskikh V. and Yamasaki H. (2000). Connexin gene mutations in human genetic diseases. Mutation Res., 462, 197-207.

113. Krutovskikh V., Troyanovsky S.M., Piccoli C., Tsuda H., Asamoto M. and Yamasaki H. (2000). Differential effect of subcellular localization of communication impairing gap junction protein connexin43 on tumor cell growth. Oncogene, 19, 505-513.

114. Krutovskikh V., Piccoli C. and Yamasaki H. (2002). Gap junction intercellular communication propagates cell death in cancerous cells. Oncogene, 21, 1989-1999.

115. Kumar N.M. and Gilula N.B. (1996). The gap junction communication channel. Cell, 84, 381-388.

116. Kumar N.M., Friend D.S. and Gilula N.B. (1995). Synthesis and assembly of human □ 1 gap junctions in BHK cells by DNA transfection with the human □ l cDNA. J. Cell Sci., 108, 3725-3734.

117. Kumari SS, Varadaraj K, Valinas V and Brink PR. (2001). Site-directed mutations in thetransmembrane domain M3 of human connexin37 alter channel conductance and gaiting. Biochem. Biophys. Res. Commun., 280, 440-447.

118. Lampe P.D. and Lau A.F. (2000). Regulation of gap junctions by phosphorylation of connexins. Arch. Biochem. Biophys., 384, 205-215.

119. Lampe P.D., TenBroek E.M., Brut J.M., Kurata W.E,. Johnson R.G. and Lau A.F. (2000). Phosphorylation of Connexin43 on serin368 by protein kinase C regulates gap junctional communication. J Cell Biol., 149, 1503-1512.

120. Lecanda F., Towler D.A., Ziambaras K., Cheng S.-L., Koval M., Stainberg T.H. and Civitelli R. (1998). Gap junctional communication modulates gene expression in osteoblastic cells. Mol. Biol. Cell, 9, 2249-2258.

121. Lee W.S., Tomasetto C. and Sager R. (1991). Positive selection of candidate tumor-suppressor genes by subtractive hybridization. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88, 2825-2829.

122. Leube R.E. (1995). The topogenic fate of the polytopic transmembrane proteins, synaptophysin and connexin, is determined by their membrane-spanning domains. J. Cell Sci., 108, 883-894.

123. Li H., Liu T.-F., Lazrak A., Peracchia C., Goldberg G.S., Lampe P.D. and Johnson R.G. (1996). Properties and regulation of gap junctional hemichannels in the plasma membranes of cultured cells. J. Cell Biol., 134, 1019-1030.

124. Lin J.H., Weigel H., Cortina M.L., Liu Sh., Bueno E., Hansen A.J., Hansen T.W., Goldman S. and Negergaard M. (1998). Gap junction mediated propagation and amplification of cell injury. Nat. Neurosci., 1, 494-500.

125. Liu Y., Ke X., Qi Y., Li W. and Zhu P. (2002). Connexin26 gen (GJB2): prevalence of mutations in Chinese population. J. Hum. Genet., 47, 688-690.

126. Loewenstein W.R. and Kanno Y. (1966). Intercellular communication and the control of the tissue growth; lack of communication between cancer cells. Nature, 209, 1248-1249.

127. Loewenstein W.R. and Rose B. (1992). The cell-cell channel in the control of growth. Semin. Cell Biol., 2, 59-79.

128. Loktionov A. (2004). Common gene polymorphisms, cancer progression and prognosis. Cancer Lett., 208, 1-33.

129. Loukola A., Eklin K., Laiho P., Salovaara R., Kristo P., Jarvinen H., Mecklin J.-P., Launonen V. and Aaltonen L.A. (2001). Microsatellite marker analysis in screening for hereditary nonpolyposis colorectal cancer (HNPCC). Cancer Res., 61, 4545-4549.

130. Mackay D., Ionides A., Kibar Z., Rouleau G., Berry V., Moore A., Shiels A. and Bhattacharya S. (1999). Connexin46 mutations in autosomal dominant congenital cataract. Am. J. Hum. Genet. 64, 1357-1364.

131. Martinez A.D., Hayrapetyan V., Moreno A.P., and Beyer E.C. (2003). A carboxyl terminal domain of connexin43 is critical for gap junction plaque formation but not for homo- or hetero-oligomerization. Cell Commun Adhes., 10, 323-328.

132. Mendelboim O., Berke G., Fridkin M., Feldman M., Eisenstein M. and Eisenbach L. (1994). CTL induction by tumor-associated antigen octapeptide derived from a murine lung carcinoma. Nature, 369, 67-71.

133. Milks L.C., Kumar N.M., Houghten R., Unwin N. and Gilula N.B. (1988) Topology of the 32-kd gap junction protein determined by site-directed antibody localizations. The EMBO J., 7, 2967-2975.

134. Miyaki M., Konishi M., Tanaka K., Kikuchi-Yanoshita R., Muraoka M., Yasuno M., Igari T., Koike M., Chiba M. and Mori T. (1997). Germline mutation of MSH6 as the cause of hereditary nonpolyposis colorectal cancer. Nature Genetics, 17,271-272.

135. Mehta P.P., Hotz-Wagenblatt A., Rose B., Shalloway D. and Lowenstein W.R. (1991). Incorporation of the gene for cell-cell channel into transformed cells leads to normalization of growth. J. Membr. Biol., 124, 207-225.

136. Mesnil M. (2002). Connexins and cancer. Biol. Cell., 94, 493-500.

137. Mesnil M., Montesano R. and Yamasaki H. (1986). Intercellular communication of transformed and non-transformed rat liver epithelial cells. Exp. Cell Res., 165, 391-402.

138. Mesnil M., Krutovskikh V.A., Piccoli C., Elfgang C., Traub O., Willecke K. and Yamasaki H. (1995). Negative growth control of HeLa cells by connexin genes: connexin-species specificity. Cancer Res., 55, 629-639.

139. Mesnil M., Piccoli C., Tiraby G., Willecke K. and Yamasaki H. (1996). Bystander killing of cancer cells by herpes simplex virus thymidine kinase gene is mediated by connexins. Proc. Natl. Acad. Sci., 93, 1831-1835.

140. Moorby C. and Patel M. (2001). Dual functions for connexins: Cx43 regulates growth independently of gap junction formation. Exp. Cell Res., 271,238-248.

141. Morin P.J., Sparks A.B., Korinek V., Barker N., Clevers H., Vogelstein B. and Kinzler K.W. (1997). Activation of P-catenin-Tcf signaling in colon cancer by mutation in p-catenin or APC. Science, 275, 1787-1790.

142. Morin P.J. (2000). Beta catenin signaling and cancer. BioEsseys, 21, 10211030.

143. Musil L.S. and Goodenough D.A. (1991). Biochemical analysis of Connexin43 intercellular transport, phosphorylation, and assembly into gap junctional plaques. J. Cell Biol. 115, 1357-1374.

144. Naus CCG, Elisevich K, Zhu D, Belliveau D and Del Maestro R. (1992). In vivo growth of C6 glioma cells transfected with connexin43 cDNA. Cancer Res., 52, 4208-4213.

145. Naus C.C.G., Bond S.L., Berchberger J.F. and Rushlow W. (2000). Identification of genes differentially expressed in C6 glioma cells transfected with connexin43. Brain Res. Brain Res. Review, 32, 259-266.

146. Neilsen P.A. and Kumar N.M. (2003). Differences in expression patterns between mouse connexin-30.2 (Cx30.2) and its putative human orthologue, connexin-31.9. FEBS Lett., 540, 151-156.

147. Nelis E., Haites N. and van Broeckhoven C. (1999). Mutations in the peripheral myelin genes and associated genes in inherited peripheral neuropathies. Hum. Mutat., 13, 11-28.

148. Neveu M.J., Hully J.R., Babcock K.L., Hetzberg E.L., Nicholson B.J., Paul D.L. and Pitot H.C. (1994) Multiple mechanisms are responsible for altered expression of gap junction genes during oncogenesis in rat liver. J. Cell Sci., 107, 83-95.

149. Nicholson B, Dermietzel R, Teplow D, Traub O, Willecke K and Revel JP. (1987). Two homologous protein components of hepatic gap junctions. Nature, 329, 732-734.

150. Nicholson G.A., Yeung L. and Corbett A. (1998). Efficient neuropathophysiologic selection of X-linked Charcot-Marie-Tooth families: ten novel mutations. Neurology, 51, 1412-1416.

151. Nicholson B., Dermietzel R., Teplow D., Traub O., Willecke K. and Revel J.-P. (1987). Two homologous protein components of hepatic gap junctions. Nature, 329, 732-734.

152. Oh S., Ri Y., Bennett M.V.L., Trexler E.B., Verselis V.K. and Bargiello T.A. (1997). Changes in permeability caused by connexin 32 mutations underlie X-linked Charcot-Marie-Tooth disease. Neuron, 19, 927-938.

153. Olbina G., and Eckhart W. (2003). Mutations in the second extracellular region of connexin43 prevent localization to the plasma membrane, but do not affect its ability to suppress cell growth. Mol. Cancer Res., 1, 690-700.

154. Omori Y., Mesnil M. and Yamasaki H. (1996). Connexin 32 mutations from X-linked Charcot-Marie-Tooth disease patients: functional defects and dominant negative effects. Mol. Biol. Cell, 7, 907-916.

155. Omori Y., Krutovskikh V.A., Tsuda H. and Yamasaki H. (1996). Connexin32 gene mutation in a chemically induced rat liver tumor. Carcinogenesis, 17, 2077-2080.

156. Passini M.B., Luceri C., Caderni G. and Dolara P. (1998). Intercellular communication in normal and aberrant crypts of rat colon mucosa. Cancer Letters, 123, 77-81.

157. Paul D.L. (1995). New functions of gap junctions. Current Opinion in Cell Biology, 7, 665-672.

158. Penman S.M., Tsai M.Y., Burn J. and Goodship J.J. (1997). Absence of mutations in the regulatory domain of the gap junction protein connexin 43 in patients with visceroatrial heterotaxy. Heart, 77, 369-370.

159. Pfahnl G. and Dahl G. (1999). Gating of Cx46 gap junction hemichannels by calcium and voltage. Pfugers Arch. 437, 345-353.

160. Piechocki R., Burk R.D. and Ruch R.J. (1999). Regulation of connexin32 and sonnexin43 gene expression by DNA methylation in rat liver cells. Carcinogenesis, 20,401-406.

161. Pochapin M.B., Sanger J.M. and Sanger J.W. (1983). Microinjection of Lucifer yellow CH into sea urchin eggs and embryos. Cell Tissue Res., 234, 309-318.

162. Polakis P. (1997). The adenomatous polyposis coli (APC) tumor suppressor. Biochem. Biophys. Acta, 1332, F127-F147.

163. Proulx A., Lin Z.X. and Naus C.C.G. (1997). Transfection of rhabdomyosarcoma cells with connexin 43 induced myogenic differentiation. Cell growth Differ., 8, 533-540.

164. Rabionet R. and Estivill X. (1999). Allele specific oligonucleotide analysis of the common deafness mutation 35delG in connexin 26 (GJB2) gene. J. Med. Genet. 36 260-261.

165. Rabadan-Diehl S., Dahl G. and Werner R. (1994). A connexin32 mutation associated with Charcot-Marie-Tooth disease does not affect channel formation in oocytes. FEBS Lett., 351, 90-94.

166. Rahman S. and Evans H. (1991). Topography of connexin32 in rat liver gap junctions. Evidence for an intramolecular disulphide linkage connecting the two extracellular peptide loops. J Cell Sci., 100, 567-578.

167. Rawanduzy A., Hansen A., Hansen T.W. and Nedergaard M. (1997). Effective reduction of infarct volume by gap junction blockade in a rodent model of stroke. J. Nerosurg., 87, 916-920

168. Reaume A.G., de Sousa P.A., Kulkarni S,. Langille B.L., Zhu D., Davies T.C., Juneja S.C., Kidder G.M. and Rossant J. (1995). Cardiac malformation in neonatal mice lacking connexin43. Science, 267, 1831-1834.

169. Reed K.E., Westphale E.M., Larson D.M., Wang H.-Z., Veenstra R.D. and Beyer E.C. (1993) Molecular cloning and functional expression of human connexin37, en endothelial cell gap junction protein. J. Clin. Invest., 91, 9971004.

170. Ressot C., Gomes D., Dautigny A., Pham-Dinh D. and Bruzzone R. (1998). Connexin mutations associated with X-linked Charcot-Marie-Tooth disease show two distinct behaviors: loss of function and altered gating properties. J. Neurosci., 18, 4063-4075.

171. Revel J.P. and Karnovsky MJ. (1967). Hexagonal array of subunits in intercellular junctions of the mouse heart and liver. J. Cell Biol., 33, C7-C12.

172. Richard G., Smith L.E., Bailey R.A., Itin P., Hohl D., Epstain Jr. E.H., di Giovanna J.J., Compton J.G. and Bale S.J. (1998). Mutations in the humanconnexin gene GJB3 cause erythrokeratoderma variabilis. Nat. Genet., 20, 366-369.

173. Rodina A., Mittelman L. Piccoli C., Krutovskikh V. and Budunova I. (2005). Gap junction protein connexin26 interacts with transcription factor YAF2. JBC (submitted).

174. Romualdi A., Niessen H., Dombrowski F., Willecke K. and Ott T. (2002) Quantitative analysis of gap junctional intercellular communication in precision-cut mouse liver slices. Cell Tissue Res., 307, 315-320.

175. Rose B., Mehta P.P., and Lowenstein W.R. (1993). The gap junction protein gene suppress tumorigenicity. Carcinogenesis, 14, 1073-1075.

176. Rubin J.B., Verselis V.K., Bennet M.Y. and Bargiello T.A. (1992). A domain substitution procedure and its use to analyze voltage dependence of homotypic gap junctions formed by connexins 26 and 32. Proc. Natl. Acad. USA, 89, 3820-3824.

177. Ruch RJ and Trosko JE. (2001). Gap junction communication in chemical carcinogenesis. Drug Metab. Rev., 33, 117-124.

178. Saez J.C., Connor J.A., Spray D.C. and Bannett M.V.L. (1989). Hepatocyte gap junctions are permeable to the second messenger, inositol 1,4,5-triphosphate, and to calcium ions. Pros. Natl. Acad. Sci. USA., 86, 27082712.

179. Saito T, Barbin A, Omori Y and Yamasaki H. (1997) Connexin 37 mutations in rat hepatic angiosarcomas induced by vinyl chloride. Cancer Res., 57, 375377.

180. Saito T., Krutovskikh V., Marion M.J., Ishak K.G., Bennett W.P. and Yamasaki H. (2000). Human hemangiosarcomas have a common polymorphism but no mutations in the connexin37 gene. Int. J. Cancer, 86, 67-70.

181. Scherer S.S., Xu Y.T., Nelles E., Fischbeck K., Willecke K. and Bone L.J. (1998). Connexin32-null mice develop demyelinating peripheral neuropathy. Glia, 24, 8-20.

182. Scholzen T. and Gerdes J. (2000). The Ki-67 protein: from the known and unknown. J. Cellular Physiology., 182, 311-322.

183. Scott D.A., Kraft M.L., Stone E.M., Sheffield V.C. and Smith R.J.H. (1998). Connexin mutations and hearing loss. Nature, 391, 32.

184. Shiels D, Mackay A, Ionides V Berry A, Moore S and Bhattacharya B. (1998). A missense mutation in the human connexin50 gene (GJA8) underlies autosomal dominant "zonular pulverulent" cataract, on chromosome lq. Am. J. Hum. Genet. 62, 526-532.

185. Shimcha I., Geiger B., Yehuda-Levenberg Sh., Salomon D., and Ben-Ze'ev A. (1996). Suppression of tumorigenicity by plakoglobin: an augmenting effect of N-cadherin. J.Cell Biology, 133, 199-209.

186. Simon A.M., Goodenough D.A., Li En and Paul D.L. (1997). Female fertility in mice lacking connexin37. Nature, 385, 525-529.

187. Simon A.M., Goodenough D.A. and Paul D.L. (1998). Mice lacking connexin40 have cardiac conduction abnormalities characteristic of atrioventricular block and bundle branch block. Current Biology, 8, 295-298.

188. Singal R., Tu Z.J., Vanwert J.M., Ginder G.D. and Kiang D.T. (2000). Modulation of the connexin26 tumor suppressor gene expression through methylation in human mammary epithelial cell lines. Anticancer Res., 20, 5964.

189. Skerrett I.M., Kasperek E., Shin J.H., Ahmed S., and Nicholson B.J. (2003). Mapping conformational changes associated with gap junction channel gating using a disease-related mutation. International Gap junction conference, Cambridge, 2003.

190. Sohl G. and Willecke K. (2004). An update on connexin genes and their nomenclature in mouse and man. Cell Communication and Adhesion, 10, 173-180.

191. Solt D.B. and Farber E. (1976). New principle for the analysis of chemical carcinogenesis. Nature (Lond), 263, 702-703.

192. Sosinsky G. (1995). Mixing of connexins in gap junction membrane channels. Proc Natl Acad Sci USA., 92, 9210-9214.

193. Stauffer K.A. (1995). The gap junction proteins pi-connexin (connexin32) and p2-connexin (connexin26) can form heteromeric hemichannels. J. Biol Chem. 270, 6768-6772.

194. Steel K.P. (1998). One connexin, two diseases. Nature Genetics, 20, 319-320.

195. Steel K.P. (1998). A new era in the genetics of deafness. N. Engl. J. Med., 339, 1545-1547.

196. Steele Jr. E.C., Lyon M.F., Favor J., Guillot P.V., Boyd Y., Church R.L.1998). A mutation in the connexin 50 (Cx50) gene is a candidate for the No2 mouse cataract. Curr. Eye Res., 17 883-889.

197. Stergiopoulos K., Alvarado J.L., Mastroianni M., Ek-Vitorin J.F., Taffet S.M., and Delmar M. (1999). Hetero-domain interactions as mechanisms for the regulation of connexin channels. Circ. Res, 84, 1144-1155.

198. Stojkovic T., Latour P., Vandenberghe A., Hurtevent J.F. and Vermersch P.1999). Sensorineural deafness in X-linked Charcot-Marie-Tooth disease with connexin 32 mutation R142Q. Neurology, 52, 1010-1014.

199. Stout Ch, Goodenough D.A. and Paul D.L. (2004). Connexins: functions without junctions. Current Opinion in Cell Biol., 16, 507-512.

200. Suchyna T.M., Xu L.X., Gao F., Furtner C.R. and Nicholson B.J. (1993). Identification of a proline residue as a transduction element involved in voltage gating of gap junctions. Nature, 365, 847-849.

201. Tan L.W., Bianco T. and Dobrovic A. (2002). Variable promoter CpG island methylation of the putative tumor suppressor gene connexin 26 in breast cancer. Carcinogenesis, 23,231-236.

202. Tatematsu M., Tsuda H., Shirai T., Masui T. and Ito N. (1987). Placental glutatione S-transferase (GST-p) as a new marker for hepatocarcinogenesis: in vivo short-term screening for hepatocarcinogens. Toxicol. Pathol., 15, 6068.

203. Temme A., Buchmann A., Gabriel H.D., Nelles E., Schwarz M. and Willecke K. (1997). High incidence of spontaneous and chemically induced liver tumors in mice deficient for connexin32. Curr. Biol., 7, 713-716.

204. Trosko JE. (2003). The role of stem cells and gap junctional intercellular communication in carcinogenesis. J Biochem Mol Biol. 36, 43-48.

205. Trosko JE, Chang CC, Upham BL and Tai MH. (2004). Ignored hallmarks of carcinogenesis: stem cells and cell-cell communication. Ann. NY Acad Sci., 1028, 192-201.

206. Trosko JE and Ruch RJ. (1998). Cell-cell communication in carcinogenesis. Front. Biosci., 15, d208-236.

207. Trosko JE and Ruch RJ. (2003). Gap junctions as targets for chemoprevention and chemotherapy. Curr. Drug Targets, 3, 465-482.

208. Torok K., Strauffer K. and Evans W.H. (1997). Connexin32 of gap junctions contain two cytoplasmic calmodulin-binding domains. Biochem. J. 326, 479483.

209. Toyofuku T., Yabuki M., Otsu K., Kuzuya T., Hori M. and Tada M. (1998). Direct association of the gap junction protein connexin43 with ZO-1 in cardiac myocytes. J. Biol. Chem., 172, 12725-12731.

210. Verselis V.K., Ginter C.S. and Bargiello T.A. (1994). Opposite voltage gating polarities of two closely related connexins. Nature, 368, 348-351.

211. Vogelstein B. and Kinzler K.W. (2004). Cancer genes and the pathways they control. Nat. Med., 10, 789-799.

212. Wargovich M.J. and Cunningham J.E. (2003). Diet, individual responsiveness and cancer prevention. J Nutr., 133, 2400S-2403S.

213. Wei Ch-J, Xu X, and Lo C. (2004). Connexins and cell signaling in development and disease. Annu. Rev. Cell Dev. Biol., 20, 811-838.

214. White T.W., Deans M.R., Kelsell D.P. and Paul D. (1998). Connexin mutations in deafness. Nature, 394, 630-631.

215. White T.W., Goodenough D.A. and Paul D.L. (1998). Targeted ablation of connexin50 in mice results in microphthalmia and zonular pulverulent cataracts. J. Cell Biol., 143, 815-825.

216. White T.W., Deans M.R., Kelsell D.P. and Paul D.L. (1998). Connexin mutations in deafness. Nature, 394, 630-631.

217. White T.W., Paul D.L., Goodenough D.A. and Bruzzone R. (1995). Functional analysis of selective interactions among rodent connexins. Mol. Biol. Cell, 4,459-470.

218. Willecke K,. Hennemann H., Dahl E., Jungbluth S. and Heynkes R. (1991). The diversity of connexin genes encoding gap junction proteins. Eur. J. Cell Biol., 56, 1-7.

219. Willecke K., Eiberger J., Degen J., Eckardt D., Romualdi A., Guldenagel M., Deutsch U. and Sohl G. (2002). Structural and functional diversity of connexin genes in the mouse and human genome. Biol. Chem., 383, 725-737.

220. Willecke K., Heynkes R., Dahl E., Stutenkemper R., Hennemann H., Jungbluth S., Suchyna T. and Nicholson B.J. (1991). Mouse connexin37: cloning and functional expression of a gap junction gene highly expressed in lung. J. Cell Biol., 114, 1049-1057.

221. Winokur T.S. and Leiberman M.W. (1990). Immunofluorescent analysis of gamma-glutamyl transpeptidase and glutation-S-transferase-P during the initial phase of experimetal hepatocarcinogenesis. Carcinogenesis, 11, 365369.

222. Wolszon L.R., Rehder V., Kater S.B. and Macagno E.R. (1994). Calcium wavee that cross gap junctions may signal neuronal death during development. J. Neurosci., 14, 3437-3448.

223. Yamasaki H. (1990). Gap junctional intercellular communication and carcinogenesis. Carcinogenesis, 7, 1051-1058.

224. Yamasaki H., Mesnil M., Omori Y., Mironov N. and Krutovskikh V. (1995). Intercellular communication and carcinogenesis. Mutat. Res., 333, 181-188.

225. Yamasaki H. and Naus C.C.G. (1996). Role of connexin in growth control. Carcinogenesis, 17,1199-1213.

226. Yeh H.I., Chou Y., Liu H.F., Chamg S.C. and Tsai C.H. (2001). Connexin37 gene polimorphism and coronary arterydisease in Taiwan. Int J Cardiol., 81, 251-255

227. You S., Tu Z.J. and Kiang D.T. (1998). Direct modulation of tumor suppressor connexin 26 gene by human chorionic gonadotropin in rat mammary glands. Cancer Res., 58, 1498-1502.

228. Zhang Y.W., Morita I., Ukeda M., Ma K.W. and Murota S. (2001). Connexin43 suppress proliferation of osteosarcoma U20S cells through post-transcriptional regulation of p27. Oncogene, 20, 4138-4149.

229. Zhou X.W., Pfahnl A., Werner R., Hudder A., Llanes A., Lubeke A. and Dahl G. (1997). Identification of a pore lining segment in gap junction hemichannels. Biophys. J., 72, 1946-1953.

230. Zhu D., Caveney S., Kidder G.M., Naus C.C.G. (1991). Transfection of C6 glioma cells with connexin43 cDNA: analysis of expression, intercellular coupling, and cell proliferation. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88, 1883-1887.