Роль рецепторов эстрогенов, протестерона, андрогенов, онкобелка HER-2, антигена Ki-67 в прогнозе рака молочной железы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.46, кандидат медицинских наук Аникеева, Наталья Валерьевна

• Аникеева, Наталья Валерьевна
• кандидат медицинских наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Аникеева, Наталья Валерьевна

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 .Эпидемиология и клинико-морфологическая характеристика рака молочной железы.

1.2. Гормональная (эстрогенная) гипотеза развития рака молочной железы.

1.3.Рецепторы стероидных гормонов и их роль в развитии рака молочной железы, клинико-прогностическое значение.

1.4. Экспрессия рецепторов НЕЯ-2 в клетках рака молочной железы.

1.5. Маркер пролиферативной активности Кл-67 в клетках рака молочной железы.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Характеристика обследуемой группы пациентов.

2.2. Иммуногистохимическое определение рецепторов эстрогенов,' прогестерона, андрогенов, онкобелка НЕК-2, антигена Клв клетках рака молочной железы.

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Морфологические, клинические и прогностические характеристики рака молочной железы в обследованной группе пациентов.

3.2. Иммуногистохимическое определение содержания рецепторов эстрогенов и прогестерона в клетках рака молочной железы.

3.3. Иммуногистохимическое определение содержания рецепторов андрогенов в клетках рака молочной железы.

3.4. Содержание и экспрессия рецепторов андрогенов в клетках рака молочной железы с различными РЭ/РП-фенотипами.

3.5. Иммуногистохимическое определение экспрессии онкобелка НЕК-2 в клетках рака молочной железы.

3.6. Иммуногистохимическое определение экспрессии антигена Kiв клетках рака молочной железы.

Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Роль рецепторов эстрогенов, протестерона, андрогенов, онкобелка HER-2, антигена Ki-67 в прогнозе рака молочной железы»

Актуальность темы.

Рак молочной железы (РМЖ) является серьезной медицинской и социальной проблемой для большинства развитых стран мира. Несмотря на значительные достижения последней четверти века в понимании биологии и клиники заболевания, а также кардинальные изменения в подходе к лечению, проблема продолжает оставаться высокоактуальной.

К настоящему моменту сообщается более чем о ста факторах прогноза, дающих представление о биологическом поведении опухоли, а для предсказания клинического течения опухолевого процесса и исхода при РМЖ большое значение придается иммуногистохимическим маркерам [Пожарисский K.M., Леенман Е.Е., 2000].

Одними из первых вошедших в практику клеточных маркеров были рецепторы эстрогенов (РЭ) и прогестерона (РП), роль которых в генезе гормонозависимых опухолей доказана большим количеством исследований [Семиглазов В.Ф. и соавт., 1992]. Определение РЭ и РП в ткани опухоли сейчас рассматривается как обязательное условие для его успешного гормонального лечения РМЖ [Allred D.C. et al., 1998; Бернштейн Л.М., 2000; Семиглазов В.Ф., 2001]. Степень реакции на гормональную терапию также существенно зависит от наличия РЭ и РП в опухоли: ее эффективность составляет около 10 % при РЭ-отрицательных опухолях, примерно 50 % при РЭ-положительных опухолях и около 75 % при опухолях, содержащих одновременно РЭ и РП. Тем не менее, известны случаи резистентности к гормональной терапии больных с РЭ- и РП-положительными опухолями, поэтому гормонально-рецепторный статус опухоли оказывается не всегда достаточным показателем гормональной чувствительности РМЖ [Летягин В.П., 2004].

Исследования последних лет выявили, что злокачественные опухоли молочной железы в 50 % случаев содержат рецепторы андрогенов [Selim

A.G. et al., 2002], однако их роль в течении опухолевого процесса пока неясна. Предполагается, что в дополнение к рецепторам эстрогенов и прогестерона, рецепторы андрогенов могут быть важны в контроле за ростом РМЖ [Brys M. et al., 2002], a также в более тщательном отборе пациентов для проведения адекватной гормональной терапии [Zarghami N. et al., 1997].

Не вызывает сомнения тот факт, что эстрадиол индуцирует синтез факторов роста [Бернштейн JI.M., 1998; 2000], рецепторы которых, например, рецептор эпидермального фактора роста, .имеют сходство с некоторыми онкобелками. В их число входит мембранный гликопротеид HER-2 [Wang D., 1993], являющийся членом семейства тирозинкиназных рецепторов и одним из самых перспективных маркеров для предсказания возникновения рецидивов заболевания, появления метастазов, резистентности к химио- и гормонотерапии РМЖ [Slamon D. et al, 2001; Пожарисский К.М., Леенман Е.Е., 2000; Хансон К.П., 2002].

Ведущим фактором в механизме злокачественной трансформации клеток, в биологическом поведении уже возникших опухолей является их пролиферативная активность. Для выявления особенностей пролиферации клеток злокачественных опухолей человека широко используется антиген Ki-67, экспрессирующийся практически во всех фазах митотического цикла и отражающий величину пролиферативного пула [Пожарисский К.М., Леенман Е.Е., 2000].

До сегодняшнего дня значимость отдельных вышеперечисленных маркеров, выявляемых иммуногистохимическим методом, остается недоказанной, кроме того, на сегодняшний день согласованного мнения о прогностической роли экспрессии рецепторов эстрогенов, прогестерона и, особенно, андрогенов, антигена Ki-67, онкобелка HER-2 и сочетания этих факторов нет.

Цель исследования

Комплексное изучение содержания и уровня экспрессии рецепторов эстрогенов, прогестерона, андрогенов, экспрессии онкобелка НЕК-2 (с-егЬВ2) и антигена К1-67 и определение диагностической значимости этих маркеров, выявляемых иммуногистохимическим методом, для прогноза клинического течения рака молочной железы. Задачи исследования

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить содержание и уровень экспрессии рецепторов андрогенов с одновременным определением содержания и уровня экспрессии рецепторов эстрогенов и рецепторов прогестерона в клетках рака молочной железы.

2. Изучить клинико-морфологические особенности течения рака молочной железы с различными гормонально-рецепторными фенотипами опухоли.

3. Определить экспрессию онкобелка НЕЯ-2 в клетках рака молочной железы с различными гормонально-рецепторными фенотипами.

4. Определить уровень экспрессии антигена КЬ-67 в клетках рака молочной железы с различными гормонально-рецепторными фенотипами.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. В клетках рака молочной рецепторы эстрогенов выявляются в 48 % случаев, рецепторы прогестерона - в 43 % случаев, рецепторы андрогенов — в 47 % случаев.

2. В клетках рака молочной железы рецепторы андрогенов выявляются в 69 % опухолей, содержащих рецепторы эстрогенов и прогестерона, и в 11% опухолей, не содержащих рецепторы эстрогенов и прогестерона.

3. Основными гормонально-рецепторными фенотипами рака молочной железы являются те, в которых отмечается одновременная экспрессия рецепторов эстрогенов, прогестерона и андрогенов или одновременное отсутствие рецепторов стероидных гормонов.

4. Опухоли, не содержащие рецепторы эстрогенов и прогестерона, а также содержащие только рецепторы прогестерона, характеризуются более злокачественным клиническим течением. Научная новизна

Впервые проведено комплексное изучение клинико-лабораторных характеристик клеток рака молочной железы: содержания и уровня экспрессии рецепторов эстрогенов, прогестерона, андрогенов, онкобелка НЕЯ-2, антигена Кл-67 с применением высокочувствительного и специфичного иммуногистохимического метода.

Впервые отмечено, что опухоли, не содержащие рецепторы эстрогенов и прогестерона, а также имеющие только рецепторы прогестерона, характеризуются более агрессивным клиническим течением.

Впервые одновременно с рецепторами эстрогенов и прогестерона определили содержание и уровень экспрессии рецепторов андрогенов в клетках рака молочной железы, что позволило выделить дополнительную группу пациентов с опухолями, не содержащими рецепторы эстрогенов и прогестерона и имеющими рецепторы андрогенов.

Комплексный подход к изучению рака молочной железы с определением совокупности клеточных маркеров, выявляемых иммуногистохимическим методом, и сравнение их с клинико-морфологическими критериями прогноза клинического течения опухоли позволил выделить важную роль наличия и уровня экспрессии рецепторов прогестерона. Снижение уровня экспрессии рецепторов прогестерона в клетках рака молочной железы является важным предсказательным фактором низкой эффективности противоопухолевой гормональной терапии и может рассматриваться как показатель неблагоприятного прогноза клинического течения рака молочной железы.

Практическая значимость работы

Предложена программа комплексного лабораторного иммуногистохимического исследования клеток рака молочной железы, включающая определение содержания и уровня экспрессии рецепторов стероидных гормонов: эстрогенов, прогестерона, андрогенов, онкобелка НЕЯ-2 и антигена Кл-67, для формирования прогноза клинического течения рака молочной железы и отбора групп пациентов для проведения адекватной гормональной и химиотерапии.

Выделены группы пациентов с опухолевыми фенотипами, обладающими неблагоприятными прогностическими и предсказательными характеристиками.

При отсутствии в клетках рака молочной железы рецепторов эстрогенов и рецепторов прогестерона рекомендуется дополнительное количественное определение рецепторов андрогенов чувствительным й высокоспецифичным иммуногистохимическим методом, что позволит в случае выявления в опухоли рецепторов андрогенов, выделить группу пациентов для дальнейшего клинического обследования и наблюдения с целью решения вопроса о выборе гормональной противоопухолевой терапии.

Апробация работы

Результаты исследования изложены в виде стендового доклада на Международной конференции в г. Иркутске (сентябрь 2003 г.); на IV Конгрессе по аутоиммунитету «ТЧК-клетки (СБ56, СБ 16) и экспрессия антигена Кь67 в раке молочной железы с различным гормонально-рецепторным статусом» (г. Будапешт, ноябрь 2004 г.); на

Международном конгрессе по РМЖ (г. Брюссель, январь 2006 г.).

Заключение диссертации по теме «Клиническая лабораторная диагностика», Аникеева, Наталья Валерьевна

ВЫВОДЫ

1. Рецепторы андрогенов обнаруживаются в 47 % случаев рака молочной железы. Уровень экспрессии рецепторов андрогенов в опухоли достоверно ниже, чем уровень экспрессии рецепторов эстрогенов и рецепторов прогестерона.

2. Содержание рецепторов андрогенов в клетках рака молочной железы связано с наличием рецепторов эстрогенов и прогестерона в опухоли. Рецепторы андрогенов выявляются в 69 % опухолей, имеющих рецепторы эстрогенов и прогестерона и в 11 % опухолей не содержащих рецепторы эстрогенов и прогестерона. Распространен вариант фенотипа рака молочной железы (32 %), когда в опухоли отсутствует весь комплекс стероидных гормонов.

3. Фенотипы рака молочной железы, характеризующиеся отсутствием рецепторов эстрогенов обладают более злокачественным течением. У пациентов с такими фенотипами опухолей достоверно чаще встречаются метастазы в регионарные лимфатические узлы.

4. Низкий уровень экспрессии рецепторов прогестерона в клетках рака молочной железы сочетается с высокими уровнями экспрессии антигена К1-67, онкобелка НЕЯ-2 в опухолевых клетках и является самостоятельным предсказательным критерием ответа на противоопухолевую гормональную терапию и показателем неблагоприятного прогноза клинического течения.

5. Максимальная экспрессия онкобелка НЕЯ-2 в клетках опухоли является независимым фактором прогноза клинического течения рака молочной железы, связана с высоким метастатическим потенциалом опухоли и с одинаковой частотой встречается в различных гормонально-рецепторных фенотипах рака молочной железы.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для определения прогноза клинического течения рака молочной железы рекомендуется комплексное иммуногистохимическое определение уровня экспрессии рецепторов стероидных гормонов: эстрогенов, прогестерона и андрогенов в сочетании с определением уровня экспрессии онкобелка HER-2 и антигена Ki-67 в клетках рака молочной железы.

2. При определении уровня экспрессии рецепторов эстрогенов и прогестерона в клетках рака молочной железы следует обращать особое внимание на опухоли, не имеющие рецепторы эстрогенов и прогестерона или содержащие только рецепторы прогестерона, а также те, в которых независимо от уровня экспрессии рецепторов эстрогенов отмечается снижение уровня экспрессии рецепторов прогестерона, так как такие фенотипы рака молочной железы характеризуются более агрессивным злокачественным течением и являются неблагоприятными в плане ответа на гормонотерапию.

119

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Аникеева, Наталья Валерьевна, 2006 год

1. Бассалык Л.С.(под ред.) Рецепторы стероидных гормонов в опухолях человека.-М: 1987.

2. Бернштейн Л.М. Внегонадная продукция эстрогенов (роль в физиологии и патологии). -СПб: Наука, 1998.

3. Бернштейн Л.М. Гормональный канцерогенез. -СПб: Наука, 2000.

4. Бернштейн Л.М. Современная эндокринология гормонзависимых опухолей//Вопросы онкологии.-2002.- Т.48.- №4.-С.496-503.

5. Возный Э.К. //Маммолог 2005.~№5 -С.

6. Волченко H.H., Франк Г.А. Комплекс морфологических и прогностических факторов при раке молочной железы: Пособие для врачей.-М., 2000.

7. Дедов И.И., Мельниченко Г.А., Фадеев В.В. Эндокринология. -2003 — М.:Медицина.

8. Захарцева Л.М., Воробьева Л.И., Манжура Е.П. Морфологическиеиммуногистохимические критерии прогноза при раке эндометрия// 0нкология.-2001. -Т.З.- №4. -С.252-256.

9. Зайратьянц О.В., Колобов C.B., Акопян К.В., Опаленов К.В., Барсанова Т.Г. Особенности экспрессии рецепторов эстрогенов, прогестерона и HER-2 клетками рака молочной железы//Архив патологии.—2004.-№5.-С.9-12.

10. Инг Нэнси Г., О'Мэлли Берт У. Суперсемейство рецепторов стероидных гормонов: молекулярные механизмы действия//Молекулярная эндокринология, 2003.-М.:Медицина.-С. 191-208.

11. Коган Е.А., Угрюмов Д.А. Соотношение процессов пролиферации и клеточной гибели в немелкоклеточном раке легкого с железистойдифференцировкой на разных стадиях опухолевой прогрессии//Архив патологии. -2002. -Вып. 1-С. 33-37.

12. Коршунов А.Г., Шишкина JI.B., Голанов A.B. Пролиферативные маркеры в менингиомах: иммуногистохимическое исследование и анализ прогностической значимости//Архив патологии.-2002.-Вып. 64.- №1.~С. 29-33.

13. Летягин В.П. Первичные опухоли молочной железы.-2004.-М.: «Миклош».

14. Пожарисский K.M., Леенман Е.Е. Значение иммуногистохимических методик для определения характера лечения и прогноза опухолевых заболеваний//Архив патологии. -2000.-Вып. 5.-С. 3-11.

15. Полак Дж., Ван норден С. Введение в иммуногистохимию: современные методы и проблемы. 1987.-М., Мир.

16. Розен В.Б. Основы эндокринологии: 3-е издание, переработанное и дополненное.-1994.-М: изд-во МГУ .-С.384.

17. Семиглазов В.Ф., Веснин А.Г., Моисеенко В.М. Минимальный рак молочной железы.—1992.-М. :Гиппократ.

18. Семиглазов В.Ф. Современные подходы к гормонотерапии рака молочной железы как отражение патогенеза заболевания//Вопросы онкологии-2001 -Т.47.-С. 195-199.

19. Справочник Видаль. Лекарственные препараты в России: Справочник.-2006.-М.:АстраФармСервис.-С.268.

20. Упоров A.B., Семиглазов В.Ф., Пожарисский K.M. Иммуногистохимическое изучение клеток рака молочной железы с использованием различных маркеров пролиферации//Архив патологии-2000.-Вып.2.-С.26-30.

21. Упоров А.В., Цырлина Е.В., Пожарисский К.М.//Вопросы онкологии.-1998-№3.-С.316-324.

22. Хансон К.П. Ген erbB2 (HER2/neu): от открытия до клинического использования // Вопросы онкологии.—2002.-Т.48.-№2.-С. 137-145.

23. Цырлина Е.В., Бернштейн JI.M. Рецепторы гормонов как основное звеногормонотерапии опухолей// Гормонзависимые опухоли: Материалы IX Всероссийской конференции. Под ред. чл-корр. РАМН К.П. Хансона, академика РАМНВ.И.Чиссова. СПб. -2002. -С.82-86.

24. Юдаев Н.А., под ред. Биохимия гормонов и гормональной регуляции. -М., 1976.-С.380.

25. Agoff S.N., Swanson Р.Е., Linden Н., Hawes S.E., Lawton T.J. Androgen receptor expression in estrogen receptor-negative breast cancer. Immunohistochemical, clinical, and prognostic associations//Am.J.Clin.Pathol-2003 -Vol. 120(5).-P.725-731.

26. Al-Ahwal M.S. HER-2 positivity and correlations with other histopathologic features in breast cancer patients—hospital based study//J.Pak.Med.Assoc.-2006.-Vol.56(2).-P.65-68.

27. Albain K.S., Allred D., Clark G.M. Breast cancer outcome and predictors of outcome: are there age differentials?//J.Natl.Cancer Inst.Monogr-1994-Vol.l6.-P.35-42.

28. Ali I.U., Campbell G., Lidereau R., Callahan R. Lack of evidence for the prognostic significance of c-erbB-2 amplification in human breast carcinoma//OncogeneRes.-1988.-Vol.3(2).-P. 139-146.

29. Allred D.C., Harvey J.M., Berardo M., Clark G.M. Prognostic and predictive factors in breast cancer by immunohistichemical analysis.//Mod.Path. -1998.-Vol.ll.-P. 155-168.

30. Almasri N.M., A1 Hamad M. Immunohistochemical evaluation of human epidermal growth factor receptor 2 and estrogen and progesterone receptors in breast carcinoma//Breast Cancer Res.-2005.-Vol.7(5).-P.598-604.

31. Bai X.Z., Masters J.R., O'Donoghue N. et al. Prognostic markers in clinically localised prostate cancer//Int. J. Oncol.- 1999-Vol. 14.-P.785-791.

32. Bartlett J.M.,Going J.J., Mallon E.A., et.al. Evaluating HER-2/neu amplification and over-expression in breast cancer//J.Pathol.-2001-Vol.l95(4).-P.422-428.

33. Bartlett J.M., Forsyth A. Detection of HER-2 gene amplification by fluorescence in situ hybridization in breast cancer//Methods Mol.Med.-2006. -Vol.120. —P.309-322.

34. Barlett J.M., Going J.J., Mallon E.A. et al. Evaluating HER-2/neu amplification and over-expression in breast cancer//J.Pathol.- 2001.-Vol. 195(4).-P.422-428.

35. Beato M., Chalepakis G., Schauer M., Slater E.P. DNA regulatory elements for steroid hormones//J.Steroid Biochem.-1989.-Vol.32(5).-P.737-747.

36. Berger J., Wagner J.A. Physiological and therapeutic roles of peroxisome proliferator-activated receptors//Diabetes Technol.Ther.-2002.-Vol.4(2).-P.163-174.

37. Bernoux A., de Cremoux P., Laine-Bidron C. et al.Estrogen receptor negative and progesterone receptor positive primary breast cancer: pathological characteristics and clinical outcome//Breast Cancer Res. Treat-1998-Vol.49(3).-P.219-225.

38. Bose S., Mohammed M., Shintaku P., Rao P.N. HER-2/neu gene amplification in low to moderately expressing breast cancers: possible role of chromosome 17/HER-2/neupolysomy//Breast J.-2001.-Vol.7(5). -P.337-344.

39. Braun N., Papadopulos T., Muller-Hermelink H.K. Cell cycle dependent distribution of the proliferation-associated Ki-67 antigen in human embryonic lung cells//Virchows Arch.B.Cell.Pathol.-1988-Vol.56.-P.25-33.

40. Bridger J.M., Kill I.R., Lichter P. Association of Ki-67 with satellite DNA of the human genome in early G1 cells//Chromosome Res.-1998.—Vol.6. — P. 1324.

41. Brinkmann A.O.Molecular basis of androgen insensitivity//Mol.Cell Endocrinol 2001 -Vol. 179.-P. 105-109.

42. Bruno S., Darzynkiewicz Z. Cell cycle dependent expression and stability of the nuclear protein detected by Ki-67 antibodies in HL-60 cells//Cell Prolif. -1992.-Vol.25.-P. 31-40.

43. Brys M., Wojcik M., Romanowicz-Makowska H., Krajewska W.M. Androgen receptor status in female breast cancer: RT-PCR and Western blot studies//J. Cancer Res.ciin.0ncol.—2002.-Vol.l28(2).-P.85-90.

44. Chariyalertsak S., Chariyalertsak S., Ruangvejvorachi P. Immunohistochemical detection of estrogen and progesterone receptors in primary breast cancer//Asian Pac.J.Allergy Immunol.-1998.-Vol.l6(4).-P. 161-166.

45. Chelsky D., Ralph R., Jonak G. Sequence requirements for synthetic peptide-mediated translocation to the nucleus//Mol. Cell Biol-1989-Vol.9-P.2487-2492.

46. Chen Y.Y., Schnitt S.J. Prognostic factors for patients with breast cancers 1cm and smaller//Breast Cancer Res Treat.-1998.-Vol.51(3)-P.209-225.

47. Choi D.H., Kim S., Rimm D.L. et al. Immunohistochemical biomarkers in patients with early-onset breast carcinoma by tissue microarray//Cancer J— 2005 .-Vol.11(5).-P.404-411.

48. Cobleigh M.A., Tabesh B., Bitterman P. et al. Gene expression and prognosis in breast cancer patients with 10 or more positive lymph nodes//Clin. Cancer Res.- 2005 .-Vol. 11 .-P.8623-8631.

49. Contesso G.,Mouriesse H., Friedman S., Genin J. et al. The importance of histologic grade in long-term prognosis of breast cancer: a study of 1,010 patients, uniformly treated at the Institut Gustave-Roussy//J.Clin.Oncol-1987.-Vol.5(9).-P. 1378-1386.

50. Coscun H.S., Altinbas M. et.al. HER2 expression in Turkisch breast cancer patients from a single center// Breast Cancer. -2000. -Vol.11. -P.41.

51. Costarelli L., Piro F.R., Fortunato L. Hormone-dependence and C-ERBB2: relationship between estrogen receptor expression, estrogen-regulated proteins, and C-ERBB2 in breast carcinoma//Suppl Tumori.-2005.-Vol.4.-P.171.

52. Costarelli L., Piro F.R., Fortunato L. Predictive variables of lymphatic metastasis in breast carcinoma with a diameter below 2 cm//Suppl Tumori-2005 -Vol.4 -P. 172.

53. Dingwall C. Transport across the nuclear envelope: enigmas and explanations//Bioessays—1991 -Vol. 13.-P.213-218.

54. Dinny J.Graham, Christine L. Clarke. Physiological action os progesterone in target tissues//Endocrine Reviews. -Vol. 18,№4. -1997.-P.502-514.

55. Dotzlaw H, Alkhalaf M, Murphy LC. Characterization of estrogen receptor variant mRNAs from human breast cancers//Mol.Endocrinol.-1992-Vol.6(5).-P.773-785.

56. Duchrow M., Gerdes J., Shluter C. The proliferation -associated Ki-67 protein: definition in molecular terms//Cell Prolif.-1994.-Vol.27.-P.235-242.

57. Duchrow M, Schmidt MH, Zingler M, Anemuller S, Bruch HP, Broil R. Suppression of cell division by pKi-67 antisense-RNA and recombinant protein//Cell Physiol. Biochem.- 2001.-Vol. 11(6).-P.331-338.

58. Duffy MJ. Biochemical markers in breast cancer: which ones are clinically useful?//Clin. Biochem.-2001.-Vol.34(5).-P.347-352.

59. Du Manoir S., Guillaud P., Camus E.et al. Ki-67 labelling in postmitotic cells defines different Ki-67 pathways within the 2c compartment//Cytometry. — 1991.-Vol. 12.-P.45 5-463.

60. Elledge R.M., Osborne C.K., Oestrogen receptors and breast cancer// Brit.Med.J. -1997. -Vol.314. -P.1843-1844.

61. Farnsworth W.E. Roles of estrogen and SHBG in prostate physiology// The Prostate. -1996. -Vol.28. -P. 17-23.

62. Fehm T., Maul H., Gebauer S. et al. Prediction of axillary lymph node status of breast cancer patients by tumorbiological factors of the primary tumor//Strahlenther Onkol. -2005.-Vol.l81.-P.580-586.

63. Ferlay J., Bray F., Pisani P., Parkin D.M. Cancer Incidence, Mortality and Prevalence Worldwide//Pathology and Genetics of Tumors of the Breast and Female genital organs. Ed. By Tavassoli F.A.-2003.-IARCPress, Lyon.

64. Fitzgibbons P.L., Page D.L., Weaver D., Thor A.D. et al. Prognostic factors in breast cancer. College of American Pathologists Consensus Statement 1999//Arch.Pathol.Lab.Med.-2000-Vol. 124(7)-P.966-978.

65. Fonatsh C., Duchrow M., Rieder H. Assignment of the human Ki-67 gene (MK 167) to 10q25ter//Genomics-1991.-Vol. 11.-P.476-477.

66. Fukushi Y., Sato S., Yokoyama Y., Kudo K. et al. Detection of numerical aberration in chromosome 17 and c-erbB2 gene amplification in epithelial ovarian cancer using recently established dual color FISH// Eur. J. Gynaecol. Oncol. -2001.-22(l).-P.23-25.

67. Fuqua S.A. Where is the lesion in hormone-independent breast cancer?//J. Natl. Cancer Inst.-1992,-Vol.84.-P.554-555.

68. Gerdes J., Lemke H., Baish H et al. Cell cycle analysis of a cell proliferation-assosiated human nuclear antigen defined by the monoclonal antibody Ki-67// J.Immunol.-1984.-Vol.l33.-P.1710-1715.

69. Gerdes J., Shwab U., Lemke H et al. Production of a mouse monoclonal antibody reactive with a human nuclear antigen associated with cell proliferation//Int. J.Cancer.-1983.-Vol.31.-P. 3-20.

70. Hall R.E., Clements J.A., Birrell S.N., Tilley W.D. Prostate-specific antigen and gross cystic disease fluid protein-15 are co-expressed in androgen receptor-positive breast tumours//Br.J.Cancer.-1998.-Vol.78(3).-P.360-365.

71. Hang D.H., Salto-Tellez M., Chin L.L. Tissue microarray study for classification of breast tumors//Life Sci.-2003.-Vol.73(25).-P.3189-3199.

72. Hayes D.F. Prognostic and predictive factors revisited//Breast.-2005-Vol. 14(6).—P.493-499.

73. He Q., Mao Y., Wu J., Decker C., Merza M., Wang N., Eriksson S., Castro J., Skog S.Cytosolic thymidine kinase is a specific histopathologic tumour marker for breast carcinomas//Int.J.Oncol-2004.-Vol.25(4).-P.945-953.

74. Heidebrecht H.J., Buck F., Haas K. et al. Monoclonal antibodies Ki-S3 and Ki-S5 eield new data on the "Ki-67" proteins//Cell Prolif. -1996. -Vol.29. -P.413-425.

75. Henderson B.E., Feigelson H.S.Hormonal carcinogenesis//Carcinogenesis-2000.-Vol.21(3).-P.427-433.

76. Hiipaka R.A., Liao S. Molecular mechanism of androgen action//Trends in Endocrinol.Metab.—1998. -Vol.9. -P.317-324.

77. Hilakivi-Clarke L. Estrogens, BRCA1, and breast cancer//Cancer Res.-2000.-Vol.60(18).-P .4993-5001.

78. Hiort O., Naber S.P. et al. The role of androgen receptor gene mutations in male breast carcinoraa//J.Clin.Endocrinol.Metab.-1996.-Vol.81(9)-P.3404-3407.

79. Hlupic L., Jakic-Razumovic J., Bozikov J. Prognostic value of different factors in breast carcinoma//Tumori.-2004.-Vol.90 (l).-P.l 12-119.

80. Honma N., Sakamoto G., Akiyama F., Esaki Y. et al. Breast carcinoma in women over the age of 85: distinct histological pattern and androgen, estrogen and progesterone receptor status//Histopathology.-2003.-Vol.42(2).-P.120-127.

81. Ing N.H., Tsai S.Y.,Tsai MJ. Progesterone and estrogen. In: Gwatlcin R.B.L.,ed. Genes in mammalian reproduction. New York: Wiley-Liss.-1992.~ P.271-291.

82. Jansen R.L., Hupperets P.S., Arends J.W. et.al. MIB-1 labelling index an independent prognostic marker in primary breast cancer//Brit. J.Cancer.-1998- Vol.78.-P.460-465.

83. James J.J., Evans A.J., Pinder S.E. et al. Bone metastases from breast carcinoma: histopathological radiological correlations and prognostic features//Br. J. Cancer.- 2003 - Vol.89.-P.660-665.

84. Jensen M.L., Kiaer H., Andersen J et al. Prognostic comparison of three classifications for medullary carcinomas of the breast//Histopathology.-19971. Vol.30(6).-P.523-532.

85. Kato S., Masuhiro Y., Watanabe M. et al. Molecularmechanism of a cross-talk between oestrogen and growth factor signaling pathways//Genes Cells.— 2000- Vol.5-P.593-601.

86. Kettyle W.M., Arky P.A. Endocrine Pathophysiology.-200l.-Binom Publishers,N-Y.-P.241.

87. Keshgegian A.A., Johnston E., Cnaan A.et al. Bcl-2 oncoprotein positivity and high MIB-1 (Ki-67) proliferative rate are independent predictive markers for recurrence in prostate carcinoma//Amer.J.Clin.Pathol.-1998.-Vol.l 10.-P.443-449.

88. Kill I.R. Localization of the Ki-67 antigen within the nucleolus: evidence for a fibrillarin-deficient region of the dense fibrillar component//J.Cell Sci.-1996. -Vol.109. -P. 1253-1263.

89. Killeen J.L., Ortega-Lopez A., Shaha J.et al. Pathology of borderline HER-2/neu breast carcinoma: a biologically distinct phenotype//Breast Cancer Res. Treat.-2006.-Vol.l5.-P.213-217.

90. Kim H.J., Cui X., Hilsenbeck S.G., Lee A.V. Progesterone receptor loss correlates with human epidermal growth factor receptor 2 overexpression in estrogen receptor-positive breast cancer//Clin. Cancer Res.-2006.-Vol. 12.- P. 1013-1018.

91. Koda M., Sulkowski S., Kanczuga-Koda L. Expression of ERalpha, ERbeta and Ki-67 in primary tumors and lymph node metastases in breast cancer//Oncol.Rep—2004.-Vol.1 l(4).-P.753-759.

92. Kronqvist P., Kuopio T., Nykanen M., Helenius H. Predicting aggressive outcome in T1N0M0 breast cancer//Br.J.Cancer.-2004.-Vol.91(2).-P.277-281.

93. Kun Y., How L.C., Hoon T.P. Classifying the Estrogen receptor Status of Breast Cancer by Expression Profiles Reveales a poor Prognosis Subpopulation Exhibiting High Expression of the ERBB2 Receptor//Hum.Mol. Genet.-2003.-Vol.69(3).-P.387-399.

94. Kurokawa H.,Arteaga c.L. Inhibition of cerbB receptor (HER) tyrosine kinases as a strategy to abrogate antiestrogen resistance in human breast cancer // Clin. Cancer Res. -2001. -Vol.7 (12 Suppl.). -P.4436-4442.

95. Lamovec J., Bracko M. Metastatic pattern of infiltrating lobular carcinoma of the breast: an autopsy study//J.Surg.Oncol.-1991-Vol.48(l).-P.28-33.

96. Liehr J.G. Hormone-associated cancer: mechanistic similarities between human breast cancer and estrogen-induced kidney carcinogenesis in hamsters// Environ.Health Perspect.-1997.-Vol. 105 .-P.5 65-5 69.

97. Lin V.C., Thai W.C., Eng A.S. Distinct molecular Pathways Mediate Progesterone-Induced Growth Inhibition and Focal Adhesion/ZEndocrinology. -2003.-Sept.ll. —P.237-250.

98. Magaud J.P., Sargent I., Clarke P.J. et al. Double immunocytochemical labeling of cell and tissue samples with monoclonal anti-bromdeoxyuridine//J. Histochem. Cytochem. -1989. -Vol.37. -P. 1517-1527.

99. Maier W.P., Rosemond G.P., Goldman L.I. A ten year study of medullary carcinoma of the breast//Surg.Gynecol.Obstetric.-1977.-Vol.l44(5).-P. 695698.

100. McGuire W.L. Steroid receptors in human breast cancer//Cancer Res.-1978-Vol.3 8.-P.4289-4291.

101. Mochen C., Giardini R., Costa A., Silvestrini R. MIB-1 and S-phase cell fraction predict survival in non-Hodgkin's lymphomas//Cell Prolif-1997-Vol.30(l).-P.37-47.

102. Moinfar F., Okcy M., Tsybrovskyy O. et al. Androgen receptors frequently are expressed in breast carcinomas: potential relevance to new therapeutic strategies//Cancer.-2003.-Vol.98(4).-P.703-711.

103. Mora G.R., Tindall D.J. Activation of androgen receptor// Prostate Cancer. Biology, Genetics, and the New Therapeutics//Eds L.W.K.Chunget et al-Totowa; New Jersey 2001.-P.219-239.

104. Munoz de Toro M.M., Maffini M.V., Kass L., Luque E.H. Proliferative activity and steroid hormone receptor status in male breast carcinoma//J. Steroid Biochem.Mol.Biol.-1998.-Vol.67(4).-P.333-339.

105. Murphy C.E., Carder P.S., Landsdown H.R., Speirs V. Steroid hormone receptor expression in male breast cancer//Eur J.Surg.Oncol.—2006.— Vol.23(l).—P.44-47.

106. Nakajima M., Sawada H., Yamada Y. et al. The prognostic significance of amplification and overexpression of c-met and c-erbB2 in human gastric carcinomas.//Ibid.-1999.-Vol.85.-P. 1894-1902.

107. Nakanishi H., Oshawa M., Naka N. et al.Immunohistochemical detection of bcl-2 and p53 proteins and apoptosis in soft tissue sarcomas: their correlations with prognosis.//Oncology.-1997.-Vol.54.-P.238-244.

108. Navarra S., Melita P., Di Mauro S., Calbo L. et al. Hormone receptors in breast cancer//Minerva Med.-1981.-Vol.72(20).-P.1277-1282.

109. Nicholson R.I., Gee J.M.W., Harper M.E., et al. ErbB signaling in clinical breast cancer: relationship to endocrine sensitivity/ZEndocrine-Related Cancer. -1997.-Vol.4-P.l-9.

110. Nicholson R.I., Hutcheson I.R., Harper M.E. et al. Modulation of epidermal growth factor receptor in endocrine-resistant, oestrogen receptor-positive breast cancer//Endocrine-Related Cancer.-2001.-Vol.8.-P.175-182.

111. Nicholson R.I., McClelland R.A., Gee J.M. et al. Epidermal Growth factor receptor expression in breast cancer: association with response to endocrine therapy//Breast Cancer Research and Treatment.-1994.-Vol.29.-P.l 17-125.

112. Nixon A.J., Neuberg D., Hayes D.F., Gelman R. et al. Relationship of patient age to pathologic features of the tumor and prognosis for patients with stage I or II breast cancer//J.Clin.Oncol.-1994.-Vol.l2(5).-P.888-894.

113. Nizze H.,al-Thobhani A.K., Terpe H. Steroid hormone receptor status and other immunohistichemical prognostic markers in benign and malignant diseases of the breast//Zentrabl Chir. -1998. -Vol.123. -Suppl.15. -P.14-18.

114. Nordstrom B., Strang P., Bergstrom R.et al. A comparison of proliferation markers and their prognostic value for women with endometrial carcinoma//Cancer (Philad.).-1996.-Vol.77. -P.1041-1052.

115. Papantoniou V.J., Souvatzoglou M.A., Valotassiou VJ.et al., Relationship of cell proliferation (Ki-67) to 99mTc-(V)DMSA uptake in breast cancer// Breast Cancer Res.-2004.-Vol.6(2).-P.56-62.

116. Pasquali R., Vicennati V., Gambineri A., Pagotto U. Hormones and pathophysiology of obesity//Eat.Weight Disord.-2001.-Vol. 6.-P.9-20".

117. Perez E.A. HER-2 as a prognostic, predictive, and therapeutic target in breast cancer.//Cancer Control.-1999.-Vol.6.-P.233-240.

118. Persons D.L., Tubbs R.R., Cooley L.D. et al. HER-2 fluorescence in situ hybridization: results from the survey program of the College of American Pathologists//Arch. Pathol. Lab. Med.-2006.-Vol.l30.-P.325-331.

119. Pich A., Margaría E., Chiusa L., Candelaresi G. et al. Androgen receptor expression in male breast carcinoma: lack of clinicopathological association//Br. J. Cancer.-1999.-Vol.79.-P.959-964.

120. Prati R., Apple S.K.Histopathologic characteristics predicting HER-2/neu amplification in breast cancer//Breast J-2005.-Vol.l 1-P.433-439.

121. Robertson J.F., Cannon P.M., Nicholson R.I., Blarney R.W. Oestrogen and progesterone receptors as prognostic variables in hormonally treated breast cancer//Int. J. Biol. Markers.-1996.-Vol.l l(l).-P.29-35.

122. Rochefort H., Platet N., Hayashido Y., Derocq D. et al. Estrogen receptor mediated inhibition of cancer cell invasion and motility: an overview//.!. Steroid Biochem.Mol.Biol.-1998.-Vol.65(l-6).-P.163-168.

123. Rose D.S., Maddox P.H., Brown D.C. Which proliferation makers for routine immunohistology? A comparison of five antibodies//J. Clin. Path.-1994. -Vol.47.-P.1010-1014.

124. Roskell D.E., Buley I.D. Traditional and estsblished indicators of prognosis and treatment success/ZMethodes Mol. Med.-2006.-Vol.l20.-P.79-89.

125. Ross J.S., Fletcher J.A. The HER-2/neu oncogene in breast cancer: prognostic factor, predictive factor and target for therapy .//Stem Cells.-1998.-Vol. 16.-P.413-442.

126. Rubin J., Jarden Y. The basic biology of HER-2/neu //Annals of oncology. -2001.-Vol.12.-P.9-13.

127. Rusiecki S.A., Holford T.R. et al. Breastcancer risk factors according to joint estrogen receptor and progesterone receptor status//Cancer Detect.Prev — 2005.-Vol. 29(5).-P.419-426.

128. Santen R.J., Manni A., Harvey H., Redmond C. Endocrine treatment of breast cancer in women//Endocr.Rev.-1990.-Vol.l 1(2).-P.221-265.

129. Sasaki K., Murakami T., Kawasaki M., Takahashi M. The cell cycle associated change of the Ki-67 reactive nuclear antigen expression//Acta Pathol. Jpn-1989.-Vol.39(10).-P.638-642.

130. Sasano H., Kimura M. et al. Aromatase and steroid receptors in gynecomastia and male breast carcinoma: an immunohistochemical study// J.Clin. Endocrinol.Metab.—1996.—Vol.81(8).-P.3063-3067.

131. Scawn R., Shousha S. Morphologic spectrum of estrogen receptor-negative breast carcinoma//Arch. Pathol. Lab. Med.-2002.-Vol.l26.-P.325-330.

132. Schonk D.M., Kuijpers H.J., van Drunen E., van Dalen C.H. et al. Assignment of the gene(s) involved in the expression of the proliferation-related Ki-67 antigen to human chromosome 10//Hum.Genet.-1989.-Vol.83(3).-P.297-299.

133. Schlatter L.K., Howard K.J., Parker M.G., Distelhorst C.W. Comparison of the 90-kilodalton heat shock protein interaction with in vitro translated glucocorticoid and estrogen receptors//Mol Endocrinol.-1992.-Vol.6.-132-140.

134. Selim A.G., El-Ayat G., Wells C.A. Androgen receptor expression in ductal carcinoma in situ of the breast: relation to oestrogen and progesterone receptors//J.Clin.Pathol.-2002.-Vol.55(l).-P.14-16.

135. Sengupta S., Wasylyk B. Physiological and pathological consequencesof the interactions of the p53 tumor suppressor with the glucocorticoid, androgen, and estrogen receptors//Aim.N-Y.Acad.Sci.-2004.-Vol.l023 -P.54-71.

136. Sholzen T., Gerdes J. The Ki-67 protein: from the known and the unknown//Cell Physiol.-2000.-Vol.l82.-P.311-322.

137. Silver P.A. How proteins enter the nucleus//Cell.-1991.-Vol.64.-P.489-497.

138. Sjogren S., Inganas M., Lindgren A. et al. Prognostic and predictive value of c-erbB2 over expression in primary breast cancer alone and combination with other prognostic markers.//J.Clin.Oncol.-1998.-Vol. 16.-P.462-469.

139. Slamon D.J.,Godolphin W., Jones L.A. Studies of HER-2/neu proto-oncogen in human breast ovarian cancer.//Science.-1989.-Vol.244.-P.707-712.

140. Slamon D., Pegram M. Rationale for trastuzumab (Herceptin) in adjuvant breast cancer trials//Semin. 0ncol.-2001 -Vol.21.-P.13-19.

141. Szabo B.K., Aspelin P., Kristoffersen Wiberg M., Tot T. et al. Invasive breast cancer: correlation of dynamic MR features with prognostic factors// Eur.Radiol-2003 -Vol. 13(11 ).-P.2425-2435.

142. Thike A.A., Chung MJ, Fook-Chong S., Tan P.H. Immunohistochemical expression of hormone receptors in invasive breast carcinoma: correlation of results of Hscore with pathological parameters//Pathology.-2001.-Vol.33(l).-P.21-25.

143. Tsai S.Y., Carlstedt-Duke J.,Weigel N.W. Molecular interactions of steroid hormone receptor with its enhancer element: evidence for receptor dimmer formation//Cell.-1998.—Vol.55.—P.361-369.

144. Van Dierendock J.H., Keijzer R., van de Velder C.J.et al. Nuclear distribution of the Ki-67 antigen during the cell cycle: comparison with growth fraction in human breast cancer cells//Cancer Res.-1989.-Vol.49.-P.2999-3006.

145. Van Oijen M.G., Medema R.H., Slootweg P.J.et al. Positivity of the proliferation marker Ki-67 in non-cycling cells//Amer. J.Clin.Path.-1998. -Vol.110.-P.24-31.

146. Verheijen R., Kuijpers H.J.H.,van Dier R.et al. Ki-67 detects a nuclear matrix-associated proliferation-related antigen. Localization in mitotic cells and association with chromosomes//J.Cell Sci. -1989.-Vol.92.-P.531-540.

147. Wang D., Konifhi J., Koshiyama M. et al. Expression of c-erbB2 protein and epidermal growth factor receptor endometrial carcinomas. Correlation with clinicopathological and steroid receptor status //Cancer.-1993.-Vol 72. -P.2628-2637.

148. WHO. Pathology and Genetics of Tumors of the Breast and Female genital organs. Ed. By Tavassoli F.A.-2003.-IARCPress, Lyon.

149. Xu L., Bai Z.H., Xu R.C., Yan H. et al. Expressions of Her-2, EGFR, PS-2 and ER in breast cancer and their clinical implications//Nan Fang Yi Ke Da Xue XueBao.-2006.-Vol.26.-P.231-233.

150. Yue W, Santen RJ., Wang JP, Li Y. Genotoxic Metabolites of estradiol in breast: potential mechanism of estradiol induced carcinogenesis//.!. Steroid Biochem.Mol.Biol 2003. -Vol.86(3-5). -P.477-486.

151. Yamashita H.m, Yandj Y., Nishio M. Immunohistochemical evaluation of hormone receptor status for predicting response to endocrine therapy in mestatatic breast cancer//Breast Cancer.-2006.-Vol. 13(l).-P.74-83.

152. Yamauchi H., Stearns V., Hayes D.F. When is a tumor marker ready for prime time? A case study of c-erbB-2 as a predictive factor in breast cancer//J.Clin. 0ncol.-2001 .-Vol. 19(8).-P.2334-2356.

153. Zarghami N., Grass L., Diamandis E.P. Steroid hormone regulation of prostate-specific antigen gene expression in breast cancer/ZBr.J.Cancer— 1997.-Vol.75(4).-P.579-588.

154. Zhou D., Battifora H., Yokota J., Yamamoto T. et al. Association of multiple copies of the c-erbB-2 oncogene with spread of breast cancer//Cancer Res-1987.-Vol.47.-P.6123-6125.

155. Zhou D.J., Ahuja H., Cline M.J. Proto-oncogene abnormalities in human breast cancer: c-ERBB-2 amplification does not correlate with recurrence of disease//Oncogene.-1989.-Vol.4.-P. 105-108.

156. Zhu L., Loo W.T., Chen C.W., Chow L.W. Possible predictive markers related to micrometastasis in breast cancer patients//Oncol.Rep.-2006.-Vol.l5-P.1217-1223.