Система обеспечения безопасности продукции животноводства при использовании анаболических стероидов, производных стильбена и β-адреностимуляторов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, доктор биологических наук Комаров, Александр Анатольевич

• Комаров, Александр Анатольевич
• доктор биологических наук
• 2006

Оглавление диссертации доктор биологических наук Комаров, Александр Анатольевич

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Международно-правовые аспекты применения анаболических агентов в животноводстве

1.2. Стероидные гормоны и производные стильбена: общая характеристика, метаболизм, фармакокинентика и токсикологическая оценка

1.3. Общая характеристика, метаболизм и фармакокинетика (3-адреностимуляторов

1.4. Методы определения анаболических агентов

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Система обеспечения безопасности продукции животноводства при использовании анаболических стероидов, производных стильбена и β-адреностимуляторов»

Актуальность темы. В качестве веществ, обладающих анаболическим действием, наиболее широко применяются стероидные гормоны, производные стильбена и Р-адреностимуляторы (Р-агонисты). Использование анаболических стимуляторов в животноводстве обусловлено экономическими факторами, но главная опасность заключается в риске воздействия на здоровье человека остаточных количеств этих веществ в животноводческой продукции. За последние 30 лет описано более 10 ООО случаев аномального полового развития у детей, вызванного присутствием в продовольствии остаточных количеств анаболических веществ [191, 284, 337, 407, 409]. Полученная в последние годы информация об уязвимости эндокринного равновесия на разных этапах жизни, обусловливает необходимость дифференцированного подхода к людям различного пола и возраста, особенно детям, при оценке гормонального воздействия. Действие экзогенных гормонов может нарушить это тонкое равновесие в организме, что подтверждается непредсказуемыми отдаленными последствиями случайного воздействия стероидов в препубертатном возрасте на репродуктивную функцию посредством механизма, названного «гормональный импринтинг» [55, 226, 363,436].

Убедительные доказательства канцерогенности природных и синтетических стероидных эстрогенов и производных стильбена позволили Международному агентству по изучению рака (IARC) отнести их к группе признанных канцерогенов для людей [273]. Андрогенные анаболические стероиды классифицированы агентством в качестве вероятных канцерогенов для человека [270]. Установлено, что катехоловые и оксиметаболиты эстрогенов обладают мутагенностью и генотоксичностью, проявляющимися независимо от гормональных рецепторов [559]. Если в прошлом оценка риска для гормонов была основана на предположении об исключительной связи их канцерогенного потенциала с гормональной активностью, принимая во внимание последние данные о гено-токсичности метаболитов, допустимый уровень для этих веществ в продовольствии не может быть установлен.

Синтетические гормоны медленнее метаболизируются по сравнению с природными аналогами, позволяют добиться значительного повышения продуктивности в животноводстве и снизить себестоимость продукции, что вызвало всплеск их использования в последние годы. В то же время, токсикологическое действие и метаболизм синтетических анаболиков до настоящего времени недостаточно изучены, что существенно усложняет оценку риска, связанную с их применением [436].

Экспрессия ферментов, метаболизирующих лекарственные препараты, регулируется гормонами, поэтому анаболические стероиды могут продлевать сроки выведения из организма различных лекарственных средств и повышать их остаточное содержание в животноводческой продукции [371,374, 551, 562].

Хотя Р-адреностимуляторы не являются стероидными гормонами, по фармакологическим свойствам их можно сравнить со стероидами. Они вызывают ингибирование процессов катаболизма мышечных белков и липогенеза в тканях, что способствует получению постного мяса, пользующегося большим спросом на рынке. В разных странах имели место многочисленные случаи отравления людей мясной продукцией, содержавшей остаточные количества адреностимуляторов, сопровождающиеся такими симптомами, как: тахикардия, мышечный тремор, гипокалиемия, тахифилаксия, возбуждение, головные боли, усиленная потливость, сонливость, мышечные спазмы, повышение артериального давления, тошнота [77, 96, 344, 349, 424, 452, 501]. Особую опасность представляет потребление такой продукции людьми с сердечно-сосудистыми заболеваниями.

Имеющиеся на сегодняшний день данные не позволяют в полной мере оценить риск, связанный с применением анаболических стимуляторов роста в животноводстве, поэтому для этих веществ не может быть установлен безопасный уровень суточного потребления.

В связи с вышеизложенным, использование анаболиков в животноводстве запрещено в странах Европейского Союза и Российской Федерации [25, 125, 158].

В ряде стран (США, Канаде и др.) некоторые природные и синтетические гормональные стимуляторы роста сельскохозяйственных животных официально разрешены, а также широко распространено нелегальное использование анаболических препаратов, поэтому необходимо систематически контролировать применение этих веществ при выращивании животных и определять их остаточное содержание в животноводческой продукции. В странах ЕС такой контроль уже систематически осуществляется в соответствии с директивой 96/23/ЕС [126], а введение его в Российской Федерации сдерживает отсутствие методической и законодательной базы.

Анализ имеющихся данных об отрицательном влиянии анаболических агентов на здоровье человека, а также экспорт в Россию пищевых продуктов из стран, где законодательно разрешено применение этих опасных ксенобиотиков, делают актуальными разработку национальной системы контроля безопасности продукции животноводства при их использовании.

В соответствии с рекомендациями Codeх Alimentarius, такая система должна быть построена на многоуровневом контроле, сочетающем преимущества использования экспрессных технологий для скрининга большого массива образцов на начальном этапе исследований с обязательным подтверждением положительных результатов современными физико-химическими методами, позволяющими проводить надежную идентификацию определяемых веществ [118]. Скрининговые методы должны обладать высокой чувствительностью, специфичностью, простотой, экспрессностью и относительно низкой себестоимостью. Всем этим требованиям наиболее полно отвечают иммунохимические методы, в частности ИФА.

Подтверждающие методы должны обеспечивать надежную идентификацию определяемых веществ. Идеальным подтверждающим методом для определения анаболических агентов в биосубстратах является хроматомасс-спектрометрия (ГХ-МС), сочетающая высокую эффективность разделения веществ капиллярной газовой хроматографией с селективным масс-спектрометрическим детектированием.

Цель и задачи исследований. Цель настоящей работы заключалась в создании двухуровневой системы аналитического контроля за использованием анаболических стимуляторов роста сельскохозяйственных животных и определения остаточного содержания анаболиков в продукции животноводства.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

• синтезировать гаптены низкомолекулярных анаболических агентов с функциональными карбоксильными группами, получить иммуногены путем конъюгирования их с белками и специфические антитела для определения анаболиков иммунохимическим методом;

• оптимизировать условия эспрессного определения анаболических агентов методом ИФА, оценить чувствительность и специфичность метода;

• разработать нормативную документацию и организовать производство ИФА-наборов для экспрессного определения анаболических агентов в объектах ветеринарно-санитарного надзора;

• разработать подтверждающие (арбитражные) хроматомасс-спектрометрические методики определения анаболических веществ в организме сельскохозяйственных животных, в кормах и продукции животноводства;

• создать оригинальную библиотеку масс-спектров производных анаболиков для идентификации их на масс-спектрометрах типа «ионная ловушка»;

• провести метрологическую аттестацию арбитражных методик определения анаболических агентов в биосубстратах, оценить правильность получаемых результатов с использованием международных аттестованных стандартных образцов.

Научная новизна работы. Впервые разработаны оригинальные способы синтеза ряда гаптенов низкомолекулярных анаболических агентов с функциональными карбоксильными группами для конъюгирования с белками-носителями: диэтилстильбэстрол-о-карбоксиметила (патентом РФ № 2192408),

3-о-карбоксиметилэтинилэстрадиола (патент РФ № 2214995), тренболон-17-гемисукцината и 19-нортестостерон-17-гемисукцината (патент РФ № 2193566) [14-16]. Карбоксипроизводные диэтилстильбэстрола - 4-[1-этил-2(4-гидроксифенил)-1-бутенил] феноксиуксусная кислота и этинилэстрадиола - 0-[19-нор-17а-этинил-17(3-гидрокси-прегна-1,3,5(10)-триен-3-ил]гликолевая кислота синтезированы впервые. Путем конъюгирования синтезированных гапте-нов с белками созданы оригинальные иммуногены (патенты РФ № 2218351 и № 2218352) [17, 18].

Синтезированные иммуногены позволили получить антитела, специфичные для определения индивидуальных анаболиков (19-нортестостерона, этинилэстрадиола, тренболона и 17-метилтестостерона), а так же целого класса близких по структуре соединений: производных стильбена и (З-адреностимуляторов. Подобраны условия: структура иммуногенов (строение гаптенов, эпитопная плотность конъюгатов), природа и концентрация твердофазных антигенов, условий сенсибилизации носителя твердофазным антигеном и инкубации с ним антител, обеспечившие высокую чувствительность и специфичность определения анаболиков методом ИФА. Для экспрессного определения анаболиков методом ИФА разработаны простые и экономичные способы их извлечения из биологических жидкостей, органов, тканей животных, кормов и оптимизированы условия ферментативного гидролиза конъюгированных форм этих соединений с серной и глюкуроновой кислотами. Предложены эффективные методики экстракции анаболических стероидов, производных стильбена из биосубстратов, очистки и концентрирования экстрактов методом ВЭЖХ, позволившие проводить надежную идентификацию и количественное определение этих соединений в организме сельскохозяйственных животных и продукции животного происхождения методом ГХ-МС на масс-спектрометрах типа «ионная ловушка». Разработана методика, обеспечивающая одновременное хроматомасс-спектрометрическое определение в биосубстратах p-адреностимуляторов различных типов путем очистки гидролизованных образцов оптимизированным способом твердофазной экстракции на картриджах с комбинированным обращеннофазовым и ионообменным сорбентом. Оптимизированы способы предварительной дериватизации и хроматографического разделения анаболических агентов, обеспечившие проведение их надежной идентификации и количественного анализа методом ГХ-МС с соблюдением международных требований. Создана оригинальная библиотека масс-спектров производных анаболических агентов и их дейтерированных аналогов для идентификации этих соединений на масс-спектрометрах типа «ионная ловушка» с внутренним источником ионизации.

Практическая значимость работы. Впервые в Российской Федерации создана двухуровневая система контроля безопасности продукции животноводства при использовании анаболических стимуляторов роста животных. Для экспрессного определения основных представителей синтетических эстрогенов (диэтилстильбэстрола, этинилэстрадиола), андрогенов (19-нортестостерона, тренболона, 17-метилтестостерона) и Р-адреностимуляторов (кленбутерола) в кормах, организме животных и продукции животного происхождения разработаны и зарегистрированы Россельхознадзором тест-системы ИФА. Чувствительность большинства разработанных тест-систем не уступает, а в ряде случаев (для кленбутерола в 10 раз, а 19-нортестостерона в 16 раз) превосходит показатели зарубежных аналогов. Разработаны простые и экономичные способы извлечения анаболиков из биосубстратов для определения методом ИФА, исключающие использование дорогостоящего метода твердофазной экстракции. На тест-системы подготовлена, согласована и утверждена нормативная документация и организовано их серийное производство в России. Для подтверждающего анализа анаболиков в подозрительных образцах, показавших положительные результаты в ИФА, разработаны, утверждены Управлением ветеринарии Федерального агентства по сельскому хозяйству и аттестованы Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии арбитражные методики определения массовых долей анаболических стероидов, производных стильбе-на и p-адреностимуляторов методом ГХ-МС в объектах ветеринарно-санитарного надзора. Использование относительно недорогих и простых в эксплуатации масс-спектрометров типа «ионная ловушка» позволило обеспечить невысокую стоимость анализа при достижении высокой чувствительности и селективности определения за счет возможности работы на анализаторах этого типа в режимах тандемной масс-спектрометрии и селективного удерживания ионов. С целью гармонизации отечественных и международных подходов к оценке качества результатов измерений при метрологической аттестации методик впервые оценена расширенная неопределенность измерения. Материалы диссертационной работы вошли в методическое пособие «Контроль за содержанием ветеринарных препаратов в кормах и продукции животноводства» ( издательство «Пищепромиздат», 2003), использованы в лекциях и семинарах на курсах повышения квалификации специалистов государственной ветеринарной службы и предприятий агропромышленного комплекса.

Апробация работы. Результаты диссертационной работы доложены и обсуждены на IX Международном конгрессе Европейской ассоциации ветеринарной фармакологии и токсикологии (Лиссабон, 2003), Международном форуме «Аналитика и аналитики» (Воронеж, 2003), XI Московском международном ветеринарном конгрессе (Москва, 2003), II Московском международном конгрессе «Биотехнология: состояние и перспективы развития» (Москва, 2003), VII Всероссийском конгрессе «Здоровое питание населения России» (Москва, 2003), II Международной научно-практической конференции «Научно-технический прогресс в животноводстве России - ресурсосберегающие технологии производства экологически безопасной продукции животноводства» (Дубовицы, 2003), Международной научной конференции «Медико-биологические проблемы экологической безопасности агропромышленного комплекса» (Сергиев Посад, 2003), III Международной конференции «Птицеводство - мировой и отечественный опыт» (Москва, 2004), Всероссийском ветеринарном конгрессе и XII Международном Московском конгрессе по болезням мелких домашних животных (Москва, 2004), NATO Advanced Research Workshop «Food Safety and Security» (Issyk-Kul, 2004), II Съезде Общества биотехнологов России (Москва, 2004), V Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины, ветеринарно-санитарного контроля и биологической безопасности сельскохозяйственной продукции» (Москва, 2004), III Международном симпозиуме «Современные проблемы ветеринарной диетологии и нутрициологии» (Санкт-Петербург, 2005), научно-практической конференции «Продовольственная безопасность России» (Москва, 2005), III Международной конференции «Экстракция органических соединений» (Воронеж, 2005), Всероссийской конференции «Лекарственные средства для животных и корма. Современное состояние и перспективы» (Москва, 2006), Всероссийском ветеринарном конгрессе и XIV Международном Московском конгрессе по болезням мелких домашних животных (Москва, 2006), V Международном симпозиуме по анализу остаточных количеств гормонов и ветеринарных препаратов (Антверпен, 2006), Международном конгрессе по аналитической химии (Москва, 2006), заседаниях Ученого совета ФГУ «ВГНКИ» в 2000-2005 гг., заседаниях научно-методической комиссии по химиотерапевтическим лекарственным средствам для животных ФГУ «ВГНКИ» в 2004-2005 гг., межлабораторном совещании сотрудников ФГУ «ВГНКИ» в 2006 г.

Публикации результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 65 статей и тезисов докладов в отечественных и зарубежных изданиях, одно методическое пособие (3 п. л.), 2 методических указания, получено 5 патентов РФ на изобретение.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Технология создания тест-систем для экспрессного иммунохимического определения анаболических агентов в организме животных и продукции животного происхождения.

2. Разработка подтверждающих (арбитражных) методик определения анаболических стероидов, производных стильбена и Р-адреностимуляторов в объектах ветеринарно-санитарного надзора с помощью ГХ-МС.

3. Современные подходы к метрологической аттестации разработанных методик: алгоритм оценивания неопределенности измерения и контроль правильности разультатов измерения содержания анаболиков в биосубстратах с использованием международных аттестованных стандартных образцов.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 390 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических предложений, списка литературы, включающего 581 источник, 27 из которых опубликованы в отечественных и 554 - в зарубежных изданиях и приложений. Работа иллюстрирована 57 таблицами и 104 рисунками.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Комаров, Александр Анатольевич

4. ВЫВОДЫ

1. Создана система обеспечения безопасности продукции животноводства при использовании анаболических стимуляторов роста животных, включающая экспресс-определение основных представителей синтетических эстрогенов (диэтилстильбэстрола, этинилэстрадиола), андрогенов (19-нортестостерона, тренболона, 17-метилтестостерона) и адреностимуляторов (кленбутерола) в кормах, организме животных и продукции животного происхождения методом иммуноферментного анализа и подтверждающий анализ анаболиков в подозрительных образцах, показавших положительные результаты в ИФА, арбитражным методом хроматомасс-спектрометрии.

2. Разработаны новые способы синтеза гаптенов низкомолекулярных анаболических агентов с функциональными карбоксильными группами, позволившие получить иммуногены путем конъюгирования их с белками методами, исключающими возможность олигомеризации в процессе синтеза. Впервые синтезированы карбоксипроизводные диэтилстильбэстрола - 4-[1-этил-2(4-гидроксифенил)-1-бутенил]феноксиуксусная кислота и этинилэстрадиола - 0-[ 19-нор-17а-этинил-17р-гидрокси-прегна-1,3,5(10)-триен-3-ил]гликолевая кислота и на их основе созданы оригинальные иммуногены.

3. Получены поликлональные антитела, специфичные как для избирательного определения индивидуальных синтетических стероидов (19-нортестостерона, 17-метилтестостерона, 17-этинилэстрадиола, тренболона), так и группового анализа близких по структуре анаболиков: производных стильбена и (3-адреностимуляторов.

4. Оптимизированы показатели: структура иммуногенов, титр иммунных сывороток, концентрация и природа твердофазных антигенов, условия сенсибилизации носителя твердофазным антигеном и инкубации с ним антител, обеспечивающие высокую чувствительность и специфичность определения анаболиков методом непрямого конкурентного твердофазного иммуноферментного анализа. Чувствительность большинства разработанных тест-систем практически не уступала, а в ряде случаев (для кленбутерола - в 10 раз, а 19-нортестостерона - в 16 раз) превосходила показатели зарубежных аналогов.

5. Для экспрессного определения анаболических агентов методом иммуноферментного анализа разработаны простые и экономичные способы их извлечения из биологических жидкостей, органов, тканей животных, кормов и оптимизированы условия ферментативного гидролиза конъю-гированных форм этих соединений с серной и глюкуроновой кислотами. Правильность получаемых результатов показана на образцах биосубстратов с внесенными добавками определяемых веществ и путем определения остаточного содержания стимуляторов в биологических жидкостях, органах и тканях экспериментальных животных, получавших анаболики.

6. Предложены эффективные методики экстракции анаболических стероидов, производных стильбена из биосубстратов, очистки и концентрирования экстрактов методом ВЭЖХ, дающие возможность проводить их надежную идентификацию и количественное определение в организме животных и продукции животного происхождения методом ГХ-МС на масс-спектрометрах типа «ионная ловушка» с пределом обнаружения 0,1- 0,5 мкг/кг.

7. Разработана методика, обеспечивающая одновременное хроматомасс-спектрометрическое определение в биосубстратах р-адреностимуляторов анилинового, фенольного и резорцинового типов путем очистки образцов оптимизированным способом твердофазной экстракции на картриджах с комбинированным обращеннофазовым и ионообменным сорбентом после протеолиза мышечной ткани субтилизином А или ферментативного гидролиза конъюгированных форм анаболиков в печени, почках, моче и сетчатке глаза животных пищеварительным соком Helix pomatia.

8. Оптимизированы способы дериватизации и условия хроматографическо-го разделения анаболических агентов, позволяющие проводить их надежную идентификацию и количественный анализ методом ГХ-МС в режимах полного ионного тока, селективного удерживания ионов и тандемной масс-спектрометрии.

9. Создана оригинальная библиотека масс-спектров электронной ионизации дериватов анаболических стероидов, производных стильбена, Р-адреностимуляторов и их дейтерированных аналогов, которая может быть использована для идентификации этих веществ на масс-спектрометрах типа «ионная ловушка» с внутренним источником ионизации.

10. С целью гармонизации отечественных и международных подходов к оценке качества результатов количественного химического анализа впервые оценена расширенная неопределенность измерения массовой доли анаболических стероидов, производных стильбена и р-адреностимуляторов в биосубстратах. Проведена метрологическая аттестация хроматомасс-спектрометрических методик подтверждающего определения анаболических агентов в биосубстратах. Правильность результатов измерения, получаемых с использованием аттестованных методик, продемонстрирована путем идентификации и количественного определения анаболиков в международных аттестованных стандартных образцах.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

В рамках созданной системы контроля за применением анаболических стимуляторов роста в животноводстве и определения их остаточного содержания в животноводческой продукции разработаны и зарегистрированы Россельхоз-надзором ИФА тест-системы для экспрессного определения этих ксенобиотиков в биосубстратах. Тест-системы успешно прошли комиссионные испытания и организовано их серийное производство в Российской Федерации. На тест-системы составлена, согласована и утверждена в установленном порядке нормативная документация:

1. Технические условия на тест-систему «Диэтилстильбэстрол-ИФА» (ТУ 9398-031-11361534-2005).

2. Инструкция по применению тест-системы, «Диэтилстильбэстрол-ИФА», утверждена Россельхознадзором 30.11.2005 г., per. № ПВР-1-1.5/01467.

3. Технические условия на тест-систему «19-Нортестостерон-ИФА» (ТУ 9398-032-11361534-2005).

4. Инструкция по применению тест-системы, «19-Нортестостерон-ИФА», утверждена Россельхознадзором 30.11.2005 г., per. № ПВР-1-1.5/01470.

5. Технические условия на тест-систему «Тренболон-ИФА» (ТУ 9398-03311361534-2005).

6. Инструкция по применению тест-системы, «Тренболон-ИФА», утверждена Россельхознадзором 30.11.2005 г., per. № ПВР-1-1.5/01469.

7. Технические условия на тест-систему «Метилтестостерон-ИФА» (ТУ 9398-034-11361534-2005).

8. Инструкция по применению тест-системы, «Метилтестостерон-ИФА», утверждена Россельхознадзором 30.11.2005 г., per. № ПВР-1-1.5/01468.

9. Технические условия на тест-систему «Этинилэстрадиол-ИФА» (ТУ 9398-035-11361534-2005).

10. Инструкция по применению тест-системы, «Этинилэстрадиол-ИФА», утверждена Россельхознадзором 06.12.2005 г., per. № ПВР-1-1.5/01486.

11 .Технические условия на опытную партию на тест-систему «Кленбутерол-ИФА» (ТУ 9398-001-00494189-2004).

12.Временное наставление по применению тест-системы «Кленбутерол-ИФА» для количественного определения кленбутерола методом иммунофер-ментного анализа, утверждено Департаментом ветеринарии Минсельхоза России 07.05.2004 г., № 13-5-02/1060.

13.Технические условия на тест-систему «Кленбутерол-ИФА» (ТУ 9398-03011361534-2005).

14.Инструкция по применению тест-системы «Кленбутерол-ИФА», утверждена Россельхознадзором 30.11.2005 г., per. № ПВР-1-1.5/01471.

Для подтверждающего определения анаболических агентов в «подозрительных» образцах, показавших положительные результаты в ИФА, разработаны, утверждены Управлением ветеринарии Федерального агентства по сельскому хозяйству и аттестованы Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии арбитражные методики определения массовых долей анаболических стероидов, производных стильбена и Р-адреностимуляторов (Р-агонистов) методом ГХ-МС:

1. «Методические указания по определению массовой доли анаболических стероидов и стильбенов в кормах, физиологических жидкостях, органах и тканях животных методом газовой хроматографии с масс-спектрометрическим детектором», утверждены Управлением ветеринарии Федерального агентства по сельскому хозяйству 10.10.2005 г., № 5-1-14/987, Свидетельство об аттестации МВИ № 3-2005 от 25.01.2005 г.

2. «Методические указания по определению массовой доли Р-агонистов в кормах, физиологических жидкостях, органах и тканях животных методом газовой хроматографии с масс-спектрометрическим детектором», утверждены Управлением ветеринарии Федерального агентства по сельскому хозяйству 10.10.2005 г., № 5-1-14/991, Свидетельство об аттестации МВИ № 4-2005 от 25.01.2005 г.

Для профессиональной переподготовки специалистов государственной ветеринарной службы и предприятий агропромышленного комплекса издано методическое пособие: «Контроль за содержанием ветеринарных препаратов в кормах и продукции животноводства». - М.: Пищепромиздат, 2003. - 76 с.

1.5. Заключение

Широкое использование ряда природных и синтетических анаболических гормонов в США и других странах в качестве промоторов роста продуктивных животных способствовало всестороннену изучению побочных эффектов, связанных с остаточным содержанием их в животноводческой продукции.

Имеющиеся на сегодняшний день данные не позволяют количественно оценить риск, связанный с применением анаболических стимуляторов роста в животноводстве, поэтому для этих веществ нельзя установить пороговый уровень воздействия и, следовательно, допустимое суточное потребление.

С целью снижения риска для потребителя, необходимо организовать постоянный надзор за использованием анаболических стимуляторов роста в животноводстве, что требует разработки адекватных программ контроля на стадии выращивания животных и определения остаточного содержания анаболиков в животноводческой продукции.

Современная стратегия контроля остаточного содержания анаболических стероидов, производных стильбена и р-агонистов на стадии выращивания животных и в продукции животноводства должна включать двухуровневую систему с использованим скрининговых и подтверждающих методов анализа.

На первом этапе для скрининга анаболиков в биосубстратах наиболее перспективно использовать экспресс-методы на основе ИФА. Подозрительные образцы, показавшие положительные результаты в ИФА, должны быть проанализированы подтверждающими методами. Самым перспективным подтверждающим методом анализа на сегодняшний день является хроматомасс-спектрометрия, позволяющая проводить прямую идентификацию аналита.

Учитывая вышеизложенное, для обеспечения безопасности продукции животноводства в стране, особую актуальность приобретает разработка двухуровневой системы контроля за применением анаболических стимуляторов роста продуктивных животных.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы и методы

Работа выполнена в отделе безопасности кормов и пищевых продуктов Всероссийского государственного Центра качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов (ФГУ «ВГНКИ») и опытном хозяйстве центра «Манихино».

2.1.1. Получение иммунореагентов для определения анаболических агентов иммунохимическими методами

2.1.1.1. Синтез карбоксипроизводного ДЭС - диэтилстильбэстрола-о-карбоксиметила (ДЭС-КМ)

Ход синтеза гаптена, степень экстракции и чистоту синтезированного продукта контролировали методом тонкослойной хроматографии (ТСХ) на пластинах с силикагелем марки «Силуфол» ИУ-254. В качестве подвижной фазы при ТСХ на стадии проведения синтеза использовали смесь хлороформ/ эфир (97:3), при контроле выхода и чистоты синтезированного продукта - смесь хлороформ/ метанол (90:10). Пластины просматривали под источником УФ-лучей марки ВИО-1 с длиной волны 253 нм или опрыскивали 0,1% спиртовым раствором бромфенолового синего.

Структуру синтезированого карбоксипроизводного ДЭС - ДЭС-КМ подтверждали методом протонного магнитного резонанса (ПМР) на приборе «Bruker-ЗОО» (растворитель - дейтерированный диметилсульфоксид - ДМСО-ёб, стандарт - тетраметилсилан) в лаборатории ядерного магнитного резонанса Института элементоорганических соединений им. А.Н. Несмеянова РАН.

Для синтеза использовали ДЭС фирмы «Sigma» (США) с чистотой 99% . ДЭС-КМ синтезировали следующим способом. Раствор 0,536 г (2 ммоля) ДЭС в 24 см абсолютного этилового спирта обрабатывали 1,7 см 2н раствора эти-лата натрия, смешивали с 1,0 г (6 ммоль) этилового эфира бромуксусной кисло

Л л 1 ты, выдерживали 1 час при 20 С и далее разбавляли 30 см эфира и 30 см воды. Полученную реакционную смесь подкисляли концентрированной соляной кислотой до рН 1,0, встряхивали и отделяли верхний эфирный слой. Эфирную вытяжку промывали тремя порциями воды по 5 см3 каждая и экстрагировали 3% раствором едкого калия до тех пор, пока экстракт не переставал мутнеть при подкислении.

Щелочные вытяжки объединяли, выдерживали 8-12 часов при 20°С в атмосфере азота и доводили рН до 6-8. Выпавший осадок исходного фенола (ДЭС) отделяли фильтрованием. Фильтрат подкисляли концентрированной соляной кислотой до рН 1. Выпавший осадок 4-[1-этил-2(4-гидроксифенил)-1-бутенил]феноксиуксусной кислоты (ДЭС-КМ) трижды промывали водой на фильтре и сушили на воздухе.

2.1.1.2. Синтез карбоксипроизводных 17а-этинилэстрадиола (ЭТЭ)- 17 а-этинилэстрадиола-3-гемисукцината (ЭТЭ-ГС) и 3-(о-карбоксиметил)этинил-эстрадиола (КМ-ЭТЭ)

Ход синтеза ЭТЭ-ГС и чистоту синтезированного продукта контролировали методом ТСХ на пластинах с силикагелем марки «Силуфол» ИУ-254. В качестве подвижной фазы использовали смесь хлороформ/ этилацетат/ вода в (17:13:0,02). Пластины опрыскивали 0,25% водным раствором перманганата калия или спиртово-водным раствором метиленовой сини и просматривали в УФ-свете с длиной волны 253нм.

Структуру синтезированных карбоксипроизводных подтверждали методами УФ- ИК- и ПМР-спектроскопии.

Для синтеза использовали ЭТЭ фирмы «Sigma» (США) с чистотой 99%, Т пл. 182-183°С. Пиридин сушили над едким кали в течение недели и перегоняли при атмосферном давлении. Уксусный ангидрид применяли свежеперегнанный.

А 1 О

При перегонке отбирали фракцию с Т. кип. 137- 140 С, nD 13920.

Янтарный ангидрид получали путем нагревания янтарной кислоты с уксусным ангидридом. Для этого в двугорлую колбу, снабженную капельной воронкой и дефлегматорной колонкой помещали 15 г янтарной кислоты, 30 г (24мл) уксусного ангидрида и 0,1 мл фосфорной кислоты. Смесь кипятили в течение 30 минут и медленно перегоняли с такой скоростью, чтобы температура вверху колонки не превышала 120°С. После отгонки 10 мл уксусной кислоты прибавляли еще 10 мл уксусного ангидрида и перегонку возобновляли. Процесс повторяли дважды. В заключение заменяли дефлегматорную колонку нисходящим холодильником и отгоняли непрореагировавший уксусный ангидрид. Остаток растирали эфиром. Образовавшийся осадок отделяли фильтрованием. Сырой янтарный ангидрид перекристаллизовывали из 12 мл уксусного ангидрида, отфильтровывали, промывали небольшим количеством абсолютного эфира и сушили при 40°С. В дальнейшей работе использовали полученный янтарный ангидрид с Т.пл. 119-120°С.

ЭТЭ-ГС синтезирорвали следующим способом. Смесь 200 мг ЭТЭ, 250 мг янтарного ангидрида и 1,5мл пиридина нагревали при 90-95°С на глицериновой бане в течение 8 часов. После этого реакционную смесь выливали, при сильном перемешивании, в 30 мл 2% соляной кислоты, охлаждаемой в смеси воды и льда.

Выпавшее масло при растирании твердело. Осадок отделяли фильтрованием, трижды растирали на фильтре с ледяной водой и сушили на воздухе. Получили 245 мг сырого вещества. Из 90% водного метанола вещество шло маслом. 200 мг неочищенного эфира (ЭТЭ-ГС) растворяли в 1мл ацетона и смешивали с 5мл сухого диэтилового эфира. Выпадали примеси грязного цвета. После фильтрации при перемешивании медленно прибавляли 14 мл гексана. После стояния в холодильнике при 4-5°С выпадало белое кристаллическое вещество (ЭТЭ-ГС), которое отделяли фильтрованием и далее сушили в вакуум-эксикаторе над пя-тиокисью фосфора.

Ход синтеза КМ-ЭТЭ контролировали методом ТСХ на пластинах с сили-кагелем марки «Силуфол» ИУ-254. В качестве подвижной фазы использовали смесь гексан/ бензол/ этилацетат (2:1:1). Хроматограммы проявляли путем опрыскивания 10% -ым раствором серной кислоты в метаноле с последующим нагреванием при 100-120°С до появления ярко окрашенных пятен синевато-красного цвета.

КМ-ЭТЭ синтезировали следующим способом. Раствор 29,6 мг (0,1 ммоля) 7

ЭТЭ в 0,4 см диметилсульфоксида (ДМСО) приливали при перемешивании к суспензии 22 мг (0,4 ммоля) порошкообразного едкого кали в 0,4 см3 ДМСО. Через 30 минут прибавляли раствор 22 мг (0,2 ммоля) метилового эфира хло-руксусной кислоты в 0,1см ДМСО, перемешивали 1 час, после чего добавляли 0,1см3 воды и продолжали перемешивание в течение 30 минут. Реакционную массу разбавляли 5см3 холодной воды (рН 9,0-9,5), переносили в делительную воронку, подкисляли 5% соляной кислотой и экстрагировали последовательно 2, 1 и 1см этилацетата. Объединенные этилацетатные вытяжки промывали 2 порциями по 5 см3 воды, встряхивали с 0,5 см3 насыщенного раствора соли, сушил над сульфатом натрия, осветляли активированным углем и упаривали в вакууме на водяной бане при 100°С. При охлаждении маслянистый остаток [19-нор-17а-этинил-17р-гидрокси-прегна-1,3,5(10)триен-3-ил]оксиуксусной кислоты (КМ-ЭТЭ) кристаллизовался.

2.1.1.3. Синтез карбоксипроизводных 17/3-тренболона(ТБ) - тренболон-17-гемисукцината (ТБ-ГС) и 17/3-тренболон-3(о-карбоксиметил)оксима (17/3-ТБ-КМО)

Ход синтеза ТБ-ГС и чистоту синтезированного продукта контролировали методом ТСХ на пластинах с силикагелем марки «Силуфол» ИУ-254. В качестве подвижной фазы для ТСХ использовали смесь хлороформ/ ацетон (10:1). Пластины просматривали в УФ-свете с длиной волны 253 нм или опрыскивали 0,1% спиртовым раствором бромфенолового синего.

Способ получения янтарного ангидрида описан в п. 2.2.1.2. При проведении синтеза использовали свежепрокаленный углекислый калий и сухие растворители, перегнанные в вакууме. Для синтеза использовали 17Р-ТБ (эстра-4,9,11-триен-17р-гидрокси-3-он) фирмы «Sigma» (США) с чистотой 98% после перекристаллизации из спирта, Т пл. 186-187°С.

ТБ-ГС синтезировали следующим способом. Смесь 135 мг (0,5 ммоля) 17р-ТБ, 200 мг (2 ммоля) янтарного ангидрида, 1,2 см ДМСО и 20 мг (0,15 ммоля) углекислого калия нагревали четыре часа при 80°С. Далее реакционную смесь охлаждали до 20°С и обрабатывали 10 см3 2% соляной кислоты. Выпавший осадок отделяли фильтрованием и растирали на стеклянном фильтре трижды с 3 см3 воды и сушили на воздухе. После перекристаллизации из метанола получали целевой продукт - ТБ-ГС.

В экспериментах использовали аминооксиуксусную кислоту -NH2OCH2COOH • 0,5НС1 • 0,5Н20 с Т пл. 155-156°С фирмы «Lancaster».

17Р-ТБ-КМО синтезировали следующим способом. 170 мг 17Р-ТБ и 170 мг гидрохлорида аминооксиуксусной кислоты растворяли в 4 мл этилового спирта. Реакционную смесь нейтрализовали прибавлением 1 мл раствора 4 % гидро-ксида натрия. Полученный раствор выдерживали пять часов при 20°С, выливали в 40 мл холодной воды, подкисленной 0,15 мл концентрированной соляной кислоты и оставляли на ночь в холодильнике при 2-3°С. На утро выпавший на стенках стакана осадок собирали при помощи стеклянной палочки и переносили в пробирку. Далее реакционную массу дважды растирали с водой, воду сливали, а остаток растирали с 2 мл смеси этилового эфира и этилацетата и переносили в чашку Петри. При стоянии постепенно кристаллизовался целевой продукт 17Р-ТБ-КМО.

2.1.1.4. Синтез карбоксипроизводных 17(3-19-нортестостерона (19-НТ) - 19-нортестостерон-17-гемисукцината (19-НТ-ГС) и 17/3-19-нортестостерон-3(о-карбоксиметил) оксима (17(3-19-НТ-КМО)

Ход синтеза 19-НТ-ГС и образование продукта контролировали методом ТСХ на пластинах с силикагелем марки «Силуфол» ИУ-254. В качестве подвижной фазы использовали смесь хлороформ/ изопропиловый спирт (7:1). Пластины просматривали после опрыскивания 0,1% спиртовым раствором бромфенолового синего.

Способ получения янтарного ангидрида описан в п. 2.2.1.2. При проведении синтеза использовали 19-НТ фирмы «Fluka» с чистотой 99%, свежепрокален-ный углекислый калий и сухие растворители, перегнанные в вакууме.

19-НТ-ГС синтезировали следующим способом. Смесь 27,4 мг (0,1 ммоль) 19-НТ, 15 мг (0,15 ммоль) янтарного ангидрида, 0,1 см3 диметилацетамида и 8мг

0,07 ммоль) углекислого калия нагревали 10-15 минут при 110°С. Далее реакционную смесь охлаждали до 20°С и обрабатывали 10см3 2% соляной кислоты. Выпавший осадок отделяли фильтрованием и растирали на стеклянном фильтре трижды с Зсм3 воды и сушили на воздухе.

17Р-19-НТ-КМО получали конденсацией 19-НТ с карбоксиметоксиламином в среде пиридина. Для этого к 20 мг 19-НТ добавляли 1мл сухого пиридина и 50мг карбоксиметоксиламина. Реакционную смесь перемешивали на магнитной мешалке при комнатной температуре в течение 5 часов и оставляли на ночь. Затем реакционную смесь упаривали досуха в вакууме. К сухому остатку добавляли 25 мл дистиллированной воды и доводили рН до 8,0 8%-ным раствором NaOH. Водный раствор экстрагировали бензолом (8 раз по 10 мл). Водную фазу подкисляли до рН 3,0 1н НС1 и экстрагировали этил ацетатом (8 раз по 10 мл). Экстракт упаривали досуха, сухой остаток 17Р-19-НТ-КМО взвешивали. 2.1.1.5. Синтез карбоксипроизводного 17-метилтестостерона (МТ) - 17-метилтестостерон-З(о-карбоксиметил) оксима (МТ-КМО)

Контроль за ходом реакции и образованием конечного продукта осуществляли методом ТСХ на пластинах с силикагелем марки «Силуфол» ИУ-254. В качестве подвижной фазы использовали смесь хлористый метилен/ метиловый спирт (95:5). Пластины просматривали в УФ-свете с длиной волны 253 нм или опрыскивали 2% раствором серной кислоты и анисового альдегида в метаноле с последующим прогреванием при 100-110°С в течение 2-3 минут.

Аминоуксусную кислоту синтезировали обработкой трет-бутилкарбонилгидроксиламина бромуксусной кислотой с последующим превращением полученного производного в аминоуксусную кислоту обработкой концентрированной соляной кислотой в течение 20 минут при 20°С.

Для синтеза использовали МТ «ACROC» с чистотой 97% после двух пере-кристаллизаций (Т пл. 163-164°С, чистота > 99%).

МТ-КМО получали путем конденсации МТ с аминоуксусной кислотой. Для этого раствор 0,5г МТ и 0,6 г аминооксиуксусной кислоты в 100 мл 95% этилового спирта подщелачивали до рН 8 с помощью 5% едкого натра (10 мл) и кипятили 1,5 часа. Далее реакционную смесь упаривали в вакууме, разбавляли 20 мл воды, экстрагировали двумя порциями (по 5 мл) диэтилового эфира и щелочную фазу подкисляли 20% соляной кислотой. Выпавший осадок экстрагировали смесью эфира и этилацетата в соотношении 1:1. Экстракт промывали небольшим количеством воды, сушили сульфатом натрия и упаривали в вакууме.

После двух перекристаллизаций из смеси бензола с гексаном получали целевой продукт (МТ-КМО) в виде белого кристаллического вещества. 2.1.1.6. Конъюгирование карбоксипроизводных анаболических стероидов и ДЭС с белками-носителями

Трибутиламин и диоксан, используемые для конъюгивования, сушили несколько суток над гидратом окиси калия. Изобутилхлорформиат сушили над прокаленным хлористым кальцием и перегоняли, как и диметилформамид при атмосферном давлении. В таблице 6 приведены физико-химические свойства соединений, используемых для получения коъюгатов карбоксипроизводных стильбенов и анаболических стероидов с белками.

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Комаров, Александр Анатольевич, 2006 год

1. ГОСТ Р 8.563-96. Государственная система обеспечения единства измерений. Методики выполнения измерений.

2. Иммуноферментный анализ: Пер. с англ / Под ред. Т. Нго и Г. Ленхоффа. -М.: Мир, 1988.-446с.

3. Интенсивность роста, обмен азотистых веществ и энергии у бычков в переходный период выращивания под влиянием кленбутерола/ Каленюк В.Ф., Матвеев В.А., Комкова Е.Е., Купий СЛ., Тагиров Н.С. // Сельскохозяйственная биология. 1993. - №6. - С.68-72.

4. Лебедев, А.Т. Масс-спектрометрия в органической химии/ А.Т. Лебедев. М.: БИНОМ. Лаборатория знаний. - 2003. - 493с.

5. Манухина, А.И. Влияние кленбутерола на морфофункциональное состояние эндокринных желез, скелетных мышц и жировых депо бычков/ Манухина А.И., Кальницкий Б.Д. // Доклады Россельхозакадемии. 2000. - №2. -С.40-43.

6. Матвеев, В.А. Гормональный статус и продуктивность бычков при применении Р-агониста кленбутерола / Матвеев В.А.// III-я международная конференция «Актуальные проблемы биологии в животноводстве». Тезисы докладов, Боровск. - 2000. - С.325-327.

7. Машковский, М.Д. Лекарственные средства / М.Д. Машковский. -Т.1. 14-е издание. М.: ООО «Издательство Новая Волна». - 2001. - С.230-243.

8. Метаболизм белков и липидов у молодняка крупного рогатого скота при добавлении в рацион кленбутерола / Кальницкий Б.Д., Аитова М.Д., Ерим-бетов К.Т., Матющенко П.В.// Доклады Россельхозакадемии. 1994. - №4. - С.36-37.

9. Обмен веществ и продуктивность бычков приприменении кленбутерола в переходный период выращивания / Каленюк В.Ф., Ниязов Н.С., Матвеев В.А., Тагиров Н.С. // Калужский центр научно-технической информации. -1992. -№1. -С.92.

10. Патент РФ № 2192408 Способ получения замещенной арилоксиуксусной кислоты / Комаров А.А., Панин А.Н., Писков В.Б. // Приоритет от 12.05.2000. Опубликован 10.11.2002 Бюл. №31.

11. Патент РФ № 2193566 Способ получения моноэфира янтарной кислоты из 17-оксистероида и янтарного ангидрида / Комаров А.А., Панин А.Н., Писков В.Б. // Приоритет от 12.03.2001. Опубликован 27.11.2002 Бюл. № 33.

12. Патент РФ № 2214995 Способ получения 0-арилгликолевых кислот / Комаров А.А., Панин А.Н., Писков В.Б. // Приоритет от 19.06.2002. Опубликован 27.10.2003 Бюл. №30.

13. Применение твердофазного конкурентного иммуноферментного анализа для определения фумонизинов группы В / Кононенко Г.П., Буркин А.А., Зотова Е.В., Соболева Н.А. // Прикладная биохимия и микробиология. -1999. Т.35. - №2. - С.206-211.

14. Розен, В.Б. Основы эндокринологии/ В.Б. Розен. М.: Изддательство МГУ. - 1994.-384с.

15. Руководство ЕВРАХИМ/СИТАК Количественное описание неопределенности в аналитических измерениях. 2-е издание, С.-Петербург: ВНИИМ им. Д.И. Менделеева, 2002. 149 с.

16. Руководство по выражению неопределенности измерения, С.-Петербург: ВНИИМ им. Д.И. Менделеева, 1999. 126 с.

17. Синтез омега-фенилениновых и омега-фенилендииновых эфиров. Тиоэфи-ров и аминов / Волков А.Н., Скворцов Ю.М., Данда И.И., Шостаковский М.Н. // Журнал органической химии. 1970. - т.6. - №5. - С.897-902.

18. Тагиров, Н.С. Гормональный статус у бычков в переходный период выращивания и при применении кленбутерола: Автореферат дис. канд. биол. наук: 03.00.13/ Н.С. Тагиров; ВНИИФБиП с.-х. животных. Боровск. -1994.-25с.

19. Указание Главного государственного ветеринарного инспектора по организации Государственного ветеринарного надзора за содержанием гормональных стимуляторов роста и тиреостатиков в продукции животного происхождения № 13-7-1/900 от 04.10.99г.

20. Фофана, Н.В. Влияние кленбутерола на морфофункциональное состояние мышечной и жировой тканей бычков/ Фофана Н.В. // Доклады Россельхо-закадемии. 1998. - №3. - С.33-34.

21. Чучалин, А. Г. Бронхиальная астма. Сальбутамол./ Под ред. А.Г.Чучалина, И.Хамида. М.,ФАРМЕДИНФО. - 1992 - С.98-117.

22. Abraham G.E. Radioimmunoassay of steroids in biological materials /Abraham G.E.//Acta Endocrinol. 1974.-V.75 (Suppl. 183). - P. 1-41.

23. Abraham G.E. Solid-phase radioimmunoassay of estradiol-17p/ Abraham G.E.// Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism.- 1969. V.29. - P.866-870.

24. Adam A. Detection of clenbuterol residues in hair/ Adam A., Gervais N., Panoyan A. et al.// The Analyst. 1994. - V.l 19. - P.2663-2666.

25. Adam A. Radioimmunoassay for albuterol using a monoclonal antibody: application for direct quantification in horse urine/ Adam A., Ong H., Sondag D. et al.// Journal of Immunoassay. 1990. - V.l 1. - P.329-345.

26. Adlercreutz H. Estrogen metabolism and excretion in oriental Caucasian women/ Adlercreutz H., Gorbach S.L., Goldin B.R. et al.// J. Natl. Cancer Inst. -1994. -V.86. P.1076-1082.

27. Amendola L. Determination of clenbuterol in human urine by GC-MS-MS-MS: confirmation analysis in antidoping control/ Amendola L., Colamonici C., Rossi F., Botre F.// Journal of Chromatography. 2002. - V.773. - P.7-16.

28. Andersson A.M. Exposure to exogenous estrogens in food: possible impact on human development and health /Andersson A.M. and Skakkebaek N.E.// European Journal of Endocrinology. 1999.- V.140.- P. 477-485.

29. Andre F. Developments in residue assay and metabolism study of growth-promoters by mass spectrometric analysis/ Andre F., Le Bizec В., Montrade M.-P. et al. // Analyst. 1994. - V.l 19. - P.2529-2535.

30. Anggard E. Derivatives of sympathomimetic amines for gas chromatography with electron capure detection and mass spectrometry/ Anggard E., Hankey A.// Acta Chem. Scan. 1969. - V.23. - P.3110-3119.

31. Anstead G.M. The estradiol pharmacophore: Ligand structure-estrogen receptor binding affinity relationships and a model for the receptor binding site/ Anstead G.M., Carlson K.E., Katzenellenbogen J.A. // Steroids.- 1997. V.62. - P.268-303.

32. Antignac J.-P. Conjugated analytes hydrolysis. Sample preparation. (Lecture)/ Antignac J.-P. // School for Advanced Residue Analysis in Food. Session 3 (6th-7th October 2003.) SARAF, Nantes.

33. Arts C.J.M. Oestrogen radioreceptor assay for multi-residue screening of bovine urine for oestogenic anabolic compounds/ Arts C.J.M., Kemperman P.T.W., Van Den Berg H.// Food Addit. Contam. 1989. - V.6. - P. 103-116.

34. Assessment of potential risks to human health from hormone residues in bovine meat and meat products. Opinion Of The Scientific Committee On Veterinary Measures Relating To Public Health. European Commission. - 1999. - 136 p.

35. Ayotte C. Testing for natural and synthetic anabolic agents in human urine/ Ay-otte C., Goudreault D., Charlebois A.// Journal of Chromatography B. 1996. -V.687. - P.3-25.

36. Baird D.T. Steroid dynamics under steady-state dynamics/ Baird D.T., Horton R., Longcope C., Tait J.F. // Rec. Prog. Hormone Res. 1969. - V.25. - P.611-664.

37. Ball P. Catechol oestrogens (2- and 4-hydroxyestrogens): Chemistry, biogenesis, metabolism, occurrence and physiological significance/ Ball P., Knuppen R. // Acta Endocrinol. 1980. - V.93(Suppl. 232) - P.l-127.

38. Banerjee S.K. Induction of chromosome aberrations in Syrian hamster renal cortical cells by various estrogens/ Banerjee S.K., Banerjee S., Li S.A. and Li J.J. // Mutat. Res. 1994. - V.311. - P. 191-197.

39. Barker S.A. Acetals and ketals of the tetritols, pentitols and hexitols/ Barker S.A., Bourne E.J. // Adv. Carbohydr. Chem. 1952. - V.7. - P.l37-245.

40. Barraud B. Determination of the binding of trenbolone and zeranol to rat liver DNA in vivo, as compared to 17p-oestradiol and testosterone/ Barraud В., Lugnier A. and Dirheimer G.// Food Addit. Contam. 1984. - V.l.- P.l47-155.

41. Batjoens P. Gas chromatography-mass spectrometric confirmation of anabolic compounds in injection sites/ Batjoens P. and De Brabander H.F. // Analyst. -1994.-V. 119.-2607-2610.

42. Batjoens P. Gas chromatographic-tandem mass spectrometric analysis of clen-buterol residues in faeces/ Batjoens P., Courtheyn D., De Brabander H.F., Ver-cammen J., De Wasch K., Logghe M.// Journal of Chromatography A. 1996. -V.750. - P.133-139.

43. Benoit E. Gas chromatographic/mass spectrometric analysis of 19-nortestosterone urinary metabolites in cattle/ Benoit E., Guyot J.L., Courtot D. and Delatour P. // Ann. Rech. Vet. 1989. - V.20. - P.485-491.

44. Bergink E.W. Metabolism and receptor binding of nandrolone and testosterone under in itro and in vivo conditions/ Bergink E.W., Geelen J.A.A. and Turpijn E.W. //ActaEndocrinologica. 1985. -Suppl. 271. -P.31-37.

45. Bernstein L. The epidemiology of breast cancer/ Bernstein L.// Women and Cancer.- 1998.-V.1.-P.7-13.

46. Bernstein L. Hormone levels in older women: a study of post-menopausal breast cancer patients and healthy population controls/ Bernstein L., Ross R.K., Pike

47. М.С., Brown J.B. and Henderson B.E. // Br. J. Cancer. 1990. - V.61. - P.298-302.

48. Berrino F. Serum sex hormone levels after menopause and subsequent breast cancer/ Berrino F., Muti P., Micheli A. et al.// J. Natl. Cancer Inst. 1996. -V.88. - P.291-296.

49. Bilbao-Garay J. Intoxicacion por Clenbuterol. Datos clinicos у analiticos en un brote en Mostoles/ Bilbao-Garay J., Hoyo-Jimenez J.F., Lopez-Jimenez M. et al. // Rev. Clin. Esp. 1997. -V.197. - P.92-95.

50. Birch A.J. Hydroaromatic steroid hormones. Part 1. Ю-Nortestosterone/ Birch A.J. // Journal of the Chemical Society. 1950. - V.44. - P.367-368.

51. Bocca B. Simultaneous determination of Zilpaterol and other beta agonists in calf eye by gas chromatography/tandem mass spectrometry/ Bocca В., Fiori M., Cartoni C. and Brambilla G.// Journal of AOAC International. 2003. - V.86 (1). - P.8-14.

52. Bocchinfuso W.P. Hormonal signaling pathways in mammary glands of ERKO/WNT-1 mice/ Bocchinfuso W.P., Couse J.F., Hively W.P., Varmus H.E., and Korach K.S. // Proc. 80Ih Annual Meeting Endocr. Soc. 1998. - P.5.

53. Boeseken J. The use of boric acid for the determination of the configuration of carbohydrates/ Boeseken J. // Adv. Carbohydr. Chem. 1949. - V.4. - P. 189210.

54. Both-Miedema R. 19-nortestosterone. Its metabolism in the rabbit/ Both-Miedema R., Van Groenestein T.J.A., De Groot W.C. et al.// Steroids Lipids Res.- 1972. V.3.-P.49-58.

55. Bouffault J.C. Anabolic activity of trenbolone acetate alone or in association with estrogens/ Bouffault J.C., Willemart J.P. In: Anabolics in Animal Production (by ed. Meissonnier E.). Office International des Epizootics, Paris. -1983. - P.155-192.

56. Bowers L. D. Separation and confirmation of anabolic steroids with quadrupole ion trap tandem mass spectrometry/ Bowers L. D., Borts D.J.// Journal of Chromatography B. 1996. - V.687. - P.69-78.

57. Boyd D. Matrix solid phase dispersion (MSPD) as a multiresidue extraction technique for p-agonists in bovine liver tissue/ Boyd D., O'Keeffe M. and Smyth M.R.// Analyst. 1994. - V. 119. - P. 1467-1470.

58. Boyd D. Matrix solid phase dispersion linked to solid phase extraction for beta agonists in liver samples: An update/ Boyd D., O'Keeffe M. and Smyth M.R.// Analytical Proceedings. 1995. - V.32. - P.301-303.

59. Boyd D. Methods for the determination of p-agonists in biological matrices/ Boyd D., O'Keeffe M. and Smyth M.R.// The Analyst. 1996. - V.21. - P.1R-10R.

60. Boyd D. Application of matrix solid-phase dispersion for the determination of clenbuterol in liver samples/ Boyd D., Shearan P., Hopkins J.P. et al. // Ana-lytica Chimica Acta. 1993. -V.275. -P.221-226.

61. Boyd D. Matrix solid phase dispersion linked to immunoassay techniques for the determination of clenbuterol in bovine liver samples/ Boyd D., Shearan P., Hopkins J.P., O'Keeffe M., Smyth M.R.// Anal. Proc. 1993. - V.30. - P. 156-157.

62. Boyd J. Molecular genetics analysis of clear cell adenocarcinomas of the vagina associated and unassociated with diethylstilbestrol exposure in utero/ Boyd J., Takahashi H., Waggoner S.E., Jones L.A. et al. // Cancer. 1996. - V.77. -P.507-513.

63. Bradlow H.L. Modified technique for elution of polar steroid conjugates from Amberlite-XAD-2/ Bradlow H.L. // Steroids. 1977. - V.30. - P.581-582.

64. Brambilla G. Food poisoning following consumption of clenbuterol-treated veal in Italy/ Brambilla G., Loizzo A., Fontana M. et al.// Journal American Med. Assoc.- 1997.-V.278.-P.635.

65. Brooks R.V. Detection of anabolic steroids by radioimmunoassay/ Brooks R.V., Firth R.G. and Sumner R.A.// British Journal of Sports Medicine. 1975. - V.9.- P.89-92.

66. Brooks R.V. Detection of anabolic steroid administretion to athletes/ Brooks R.V., Jeremiah G., Webb W.A. et al.// Journal of Steroid Biochemistry. 1979.- V.11.-P.913-917.

67. Calvarese S. Experimental administration of 19-nortestosterone and dexa-methasone in cattle: elimination of the two drugs in different biological matrices/ Calvarese S., Rubini P., Urbani G. et al. // Analyst. 1994. - V.119. -P.2611-2615.

68. Cao K. Covalent binding of catechol estrogens to glutathione catalyzed by horseradish peroxidase, lactoperoxidase or rat liver microsomes/ Cao K., Deva-nesan P.D., Ramanathan R. et al. // Chem. Res. Toxicol. 1998. - V.I 1. -P.917-924.

69. Carlstrom K. Low endogenous estrogen levels analytical problems and tissue sensitivity/ Carlstrom K. // Acta Obstet. Gynecol. Scand., Suppl. 163. - 1996. -V.75.-P.11-15.

70. Carraway K.K. Carbodiimide modification of proteins/ Carraway K.K., Kosland D.E. // Methods Enzymol. 1972. - V.25. - P.616.

71. Cartoni G.P. Capillary gas chromatographic-mass spectrometric detection of anabolic steroids/ Cartoni G.P., Ciardi M., Giarrusso A. et al. // Journal of Chromatography. 1983. - V.279. - P.515-522.

72. Castagnetta L.A. Gas chromatography/ mass spectrometry of catecholestrogens/ Castagnetta L.A., Granata O.M., Arcuri F.P., Polito L.M., Rosati F., Cartoni G.P. // Steroids. 1992. -V.57. - P.437-443.

73. Cavalieri E.L. Molecular origin of cancer: Catechol estrogen-3,4-quinones as endogenous tumor initiators/ Cavalieri E.L., Stack D.E., Devanesan P.D. et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. - V.94. - P.10937-10942.

74. Chan E.C.Y. Preparation and characterization of immunogens for antibody production against metanephrine and normetanephrine/ Chan E.C.Y., Ho P.C. // J. Immunol. Methods. 2002. - V.266. - P. 143.

75. Chang C. Androgen Receptor: an overview/ Chang C., Saltzman A., Yeh S. et al. // Crit. Rev. Eukaryotic Gene Expr. 1995. - V.5. - P.97-125.

76. Chu F.S. Ethylendiamine modified bovine serum albumin as protein carrier in the production of antibody against mycotoxins/ Chu F.S., Lau H.P., Fan T.S., Zhang G.S.// J. Immunol. Methods. 1982. - V.55. - P.73.

77. Cirimele V. Testing of the anabolic stanozolol in human hair by gas chromatog-raphy-negative ion chemical ionization mass spectrometry/ Cirimele V., Kintz P., Ludes B. // Journal of Chromatography. 2000. - V.740. - P.265-271.

78. Clouet A. Identification of endogenous 19-nortestosterone in pregnant ewes by gas chromatography-mass spectrometry/ Clouet A., Le Bizec В., Montrade M., Monteau F. and Andre F. // Analyst. 1997. - V.122. - P.471-474.

79. Codex Alimentarius. V. 3. Residues of Veterinary Drugs in Foods, 2nd ed. Food and Agriculture Organization of the United Nations, Rome, 1993.

80. Collins S. Multi-residue analysis for p-agonists in urine and liver samples using mixed phase columns with determination by radioimmunoassay/ Collins S., O'Keeffe M. and Smyth M.R. // The Analyst. 1994. V. 119. - P.2671 -2674.

81. Cooper J. Comparison of the efficiencies of enzymatic and chemical hydrolysis of (nortestosterone and diethylstilboestrol) glucuronides in bovine urine/ Cooper

82. J., Currie W., Elliott C.T.// Journal of Chromatography. 2001. - V.757. -P.221-227.

83. Courtheyn D. Multi-residue enzyme immunoassays for screening for beta-agonists in faeces and feeds/ Courtheyn D., Bakeroot V., De Voider F., Ver-cammen J.//J. Food Agric. Immunol.- 1994.-V.6.-P. 131-139.

84. Courtheyn D. Recent developments in the use and abuse of growth promoters/ Courtheyn D., Le Bizec В., Brambilla G. et al.// Analytica Chimica Acta. -2002. V.473. - P.71-82.

85. Courtheyn D. Beta-Agonists in animal feed II: optimization of the extraction/ Courtheyn D., Moermans R., Schilt R., Boenke A. // Food Addit. Contam. -1996. V. 13. - P.493-510.

86. Cristino A. Control of the illegal use of clenbuterol in bovine production/ Cris-tino A., Ramos F., da Silveira M.I.N. // Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 2003. - V.32. - P.311 -316.

87. Daeseleire E. Metabolism of 17p-19-nortestosterone in urine of calves after oral intake and intramuscular administration/ Daeseleire E., De Guesquiere A. and Van Peteghem C. // Analytica Chimica Acta. 1993. - V.275. - P.95-103.

88. Daeseleire E. Validation of multi-residue methods for the detection of anabolic steroids by GC-MS in muscle tissues and urine samples from cattle/ Daeseleire E., Vandeputte R. and Van Peteghem C. // Analyst. 1998. - V.l23. - P.2595-2598.

89. Daeseleire E. Multiresidue analysis of anabolic agents in muscle tissues and urines of cattle by GC-MS/ Daeseleire E., DeGuesquiere A., Van Peteghem C.H.// J. Chromatogr. Sci. 1992. - V.30. - P.409-414.

90. Damasceno L. Derivatization procedures for the detection of P2-agonists by gas chromatographic/mass spectrometric analysis/ Damasceno L., Ventura R., Or-tuno J., Segura J.// Journal of Mass Spectrometry. 2000. - V.35. - P. 12851294.

91. De Brabander H.F. Nortestosterone in Cattle/ De Brabander H.F., van Hende J., Batjoens P. // Analyst. 1994. - V.l 19. - P.2581-2585.

92. Debruyckere G. Detection of 19-nortestosterone and its urinary metabolites in miniature pigs by gas chromatography-mass spectrometry/ Debruyckere G. and Van Peteghem C.//Journal of Chromatography. 1991. - V.564. - P.393-403.

93. Degand G. Determination of clenbuterol in bovine tissues and urine by enzyme immunoassay/ Degand G., Bernes-Duyckaerts A. and Maghuin-Rogister G.// Journal of Agricultural and Food Chemistry. 1992. - V.40 - P.70.

94. Degroodt J.M. Immunoaffinity chromatography purification of salbutamol in liver and HPLC-fluorometric detection at trace residue level/ Degroodt J.M., Wyhowski-de-Bukanski В., Srebrnik S. // Z. Lebensm. Unters. Forsch. 1992. -V.195. - P.566-568.

95. Delahaut Ph. Development of a specific radioimmunoassay for the detection of clenbuterol residues in treated cattle/ Delahaut Ph., Dubois M., Pri-Bar I., Buchman O., Degand G. and Ectors F.// Food Additives and Contaminants. -1991.-V.8.-P.43-53.

96. Determination of beta agonists in tissue. / Canadian Food Inspection Agency. Centre for Veterinary Drug Residues. Health of Animals Laboratory. 2000. -Version BAGS-SP01. - 13 p.

97. Din N. An investigation of supercritical fluid extraction of trenbolone from beef/ Din N., Bartle K.D., Clifford A.A. // J. High Resolute. Chromatogr. 1996. -V.19.-P.465-469.

98. Donike M. Acylierung mit Bis(acylamiden). N-Methyl-bis(trifluoroacetamid) und bis(trifluoracetamid), zwei neue Reagenzien zur Trifluoracetylierung/ Donike M. // J. Chromatogr. 1973. - V.78. - P.273-279.

99. Duckett S.K. Effect of anabolic implants on beef musculature lipid content / Duckett S.K., Wagber D.G., Owen F.N. et al.// J. Anim. Sci. 1999. - V. 77. -P. 1100- 1104.

100. Dugal R. Radioimmunoassay of anabolic steroids: an evaluation of three antis-era for the detection of anabolic steroids in biological fluids/ Dugal R., Dupuis

101. С., Bertrand M.J.// British Journal of Sports Medicine. 1977. - V.l 1. - P. 162169.

102. Dumasia M.C. Screening and confirmatory analysis of P-agonists, P-antagonists and their metabolites in horse urine by capillary gas chromatography-mass spectrometry/ Dumasia M.C. & Houghton E.// J. Chromatogr. 1991. - V.564. -P.503-513.

103. Dumasia M.C. Studies related to the metabolism of anabolic steroids in the horse: the phase I and phase II biotransformation of 19-nortestosterone in man in the equine castrate/ Dumasia M.C. and Houghton E.// Xenobiotica. 1984. -V.14. - P.647-655.

104. Dumasia M.C. Steroids in equine testes: the identification of endogenous 19-hydroxy and 19-nor neutral steroids by gas chromatography-mass spectrometry/ Dumasia M.C., Houghton E. and Jackiw M. // Journal of Endocrinology. 1989. - V.120.-P.223-229.

105. Dumasia M.C. Studies related to the metabolism of anabolic steroids in the horse: the metabolism of 1-dehydrotestosterone and the use of fast atom bombardment mass spectrometry in the identification of steroid conjugates/ Dumasia

106. М.С., Houghton E., Bradley C.V. and Williams D.H.// Biomedical and Envi-ronmantal Mass Spectrometry. 1983. - V.l0. - P.434-440.

107. Dunn T.G. Metabolites of estradiol-17 and estradiol-17-3-benzoate in bovine tissues/ Dunn T.G., Kaltenbach C.C., Koritnik D.R., Turner D.L. and Niswender G.D. // J. Anim. Sci. 1977. - V.46. - P.659-673.

108. Durbeck H.W. Gas chromatographic and capillary column chromatographic-mass spectrometric determination of synthetic anabolic steroids/ Durbeck H.W., Buker I., Scheulen B. and Telin В.// Journal of Chromatography. 1978. -V.167. - P.117-124.

109. Ekins R. Towards immunoassays of greater sensitivity, specificity and speed: an overview. In: Monoclonal Antibodies and development in Immunoassay /by ed. A. Albertini and R. Ekins. Elsevier/North-Holland Biomedical Press, Amsterdam.-1981.

110. Elliott C.T. Development of a dual label time-resolved fluoroimmunoassay for the detection of P-agonists in cattle urine/ Elliott C.T., Baxter A., Haasnoot W. et al.// Food Agric. Immunol. 1996. - V.8. - P.219-227.

111. Elliott C.T. Observations on the effects of long-term withdrawal on carcass composition and residue concentrations in clenbuterol-medicated cattle/ Elliott C.T., Crooks S.R.H., McEvoy J.D.G. et al.// Vet. Res. Commun. 1993. - V.l7. - P.459-468.

112. Elliott C.T. Investigation of dissociation enhanced lanthanide fluoroimmunoassay as an alternative screening test for veterinary drug residues/ Elliott C.T., Francis K.S., McCaughey WJ. // Analyst. 1994. - V.l 19. - P.2565-2569.

113. Elliott C.T. Effective laboratory monitoring for the abuse of the beta-agonist clenbuterol in cattle/ Elliott C.T., McEvoy J.D.G., McCaughey WJ. and Shortt H.D. // The Analyst. -1993. V.l 18. - P.447-448.

114. Enmark E. Human estrogen receptor P-gene structure, chromosomal localization and expression pattern/ Enmark E., Pelto-Huikko M., Grandien K. et al. // J. Clin. Endocrinol. Metabol. 1997. - V.82. - P.4258-4265.

115. Ере B. Site-specific covalent binding of stilbene-type and steroidal estrogens to tubulin following metabolic activation in vitro/ Ере В., Hegler J. and Metzler M. // Carcinogenesis. 1987. - V.8. - P. 1271 -1275.

116. Eriksson H. Excretion of steroid hormones in adults. Steroids in urine from a pregnant woman/ Eriksson H. and Gustafsson J.-A.// European Journal of Biochemistry. 1970. - V. 16. - P.268-277.

117. Erlanger B.F. Principles and methods for the preparation of drug protein conjugates for immunological studies/ Erlanger B.F. // Pharmacol. Rev. 1973. -V.25. - P.271.

118. Erlanger B.F. The preparation of Antigenic Hapten-carrier conjugates: a survey/ Erlanger B.F. // Methods Enzymol. 1980. - V.70(A). - P.85.

119. Erlanger B.F. Steroid-protein conjugates. I. Preparation and characterization of conjugates of bovine serum albumin with testosterone and with cortisone/ Erlanger B.F., Borek F., Beiser S.M. and Lieberman S.// J. Biol. Chem. 1957. -V.228. -P.713-727.

120. Evrard P. In vitro metabolism of trenbolone: study of the formation of cova-lently bound residues/ Evrard P., Maghuin-Rogister G.// Food Addit. Contam. -1988.-V.5.-P.59-65.

121. Fahmy D. Some observations on the determination of Cortisol in human plasma by radioimmunoassay using antisera against cortisol-3-BSA/ Fahmy D., Read G.F., Hillier S.G.// Steroids. 1975. - V.26(3). - P.267-280.

122. Fara G.M. Epidemic of breast enlargement in an Italian school / Fara G.M., Del Corvo G., Bernuzzi S., Bigatello A., Di Pietro C., Scaglioni S., Chiumello G. // Lancet. 1979. - V. 11. - P.295-297.

123. Farjam A. Immunoafflnity pre-column for selective on-line sample pre-treatment in high-performance liquid chromatography determination of 19-nortestosterone/ Farjam A., de Jong G.J., Frei R.W. et al.// J. Chromatogr. -1988. V.452. - P.419-433.

124. Feigelson H.S. Estrogens and Breast cancer/ Feigelson H.S., and Henderson B.E.// Carcinogenesis. 1996. - V.17. - P.2279-2284.

125. Fodey T.L. The appraisal of an automated multi-immunoaffmity chromatography system to detect anabolic agents in bile and urine/ Fodey T.L., Elliott C.T., Crooks S.R.H., McCaughey W.J. // Food Agric. Immunol. 1996. - V.1996. -P. 157-167.

126. Fotherby K, Metabolism of synthetic steroids/ Fotherby K., James F.L.// Adv. Steroid Biochem. Pharmacol. 1972. - V.3. - P.67-165.

127. Frenkel K. Carcinogen-mediated oxidant formation and oxidative DNA damage/ Frenkel K. // Pharmac. Ther. 1992. -V.53. - P.127-166.

128. Fuentes M. Aldehyde-dextran-protein conjugates to immobilized amino-haptens cross-reactions in the immunodetection/ Fuentes M., Mateo C., Fernandez-Lafiiente R., Guisan J.M. // Enzyme Microb. Technol. 2005. - V.36. - P.510.

129. Gaillard Y. Detection of illegal clenbuterol use in calves using hair analysis-Application in meat quality control/ Gaillard Y., Balland A., Doucet F. and Pepin G.// Journal of Chromatography В. -1997. V.703. - P.85-95.

130. Gaskell S.J. Quantification of steroid conjugates using fast atom bombardment mass spectrometry/ Gaskell S.J. // Steroids. 1990. - V.55. - P.458-462.

131. Giguere V. Estrogen receptor P: Re-evaluation of estrogen and antiestrogen signaling/ Giguere V., Tremblay A., Tremblay G.B. // Steroids. 1998. - V.63. -P.335-339.

132. Ginsburg E.S. Half-life of estradiol in postmenopausal women/ Ginsburg E.S., Gao X., Shea B.F., Barbieri R.L. // Gynecologic and Obstetric Investigation. -1998. V.45. - P.45-48.

133. Gleixner A. Einmalapplikation, Mehrfachapplikation und Metabolitenmuster von Clenbuterol beim Menschen/ Gleixner A., Sauerwein H. and Meyer H.H.D.// Archiv fur Lebensmittelhygiene. -1996. V.47. - P.131-135.

134. Gower D.B. Steroid catabolism and urinary excretion/ Gower D.B. In Biochemistry of Steroid Hormones (by ed. H.L.J. Makin). Blackwell Scientific Puubli-cations, Oxford. - 1984. -P. 349-382.

135. Gowik P. Measurement of P-agonist residues in retinal tissue of food producing animals/ Gowik P., Julicher В., Ladwig M. and Behrendt D. // Analyst. 2000. -V.125.-P.1103-1107.

136. Greenwald P. Endometrial cancer after menopausal use of estrogens/ Greenwald P., Caputo T.A. and Wolfgang P.E. // Obstet. Gynecol. 1977. - V.50. - P.239-243.

137. Guide to the Expression of Uncertainty in Measurement. ISO, Geneva, 1993. ISBN 92-67-10188-9.

138. Guyer C.G. Trace analysis of clenbuterol using supercritical fluid extraction and gas-chromatographic techniques/ Guyer C.G.// Dissertation Abstracts International. -1991.-V.52.-P.117.

139. Haasnoot W. Fast clenbuterol residue analysis in urine by HPLC with on-line automated sample processing using immunoaffinity chromatography/ Haasnoot W., Ploum M.E., Paulussen R.J.A. et al. // Journal of Chromatography. 1990. -V.519. - P.323.

140. Haasnoot W. Determination of fenoterol and ractopamine in urine by enzyme immunoassay/ Haasnoot W., Stouten P., Lommen A. et al.// Analyst. 1994. -V.l 19. - P.2675-2680.

141. Haasnoot W. A fast immunoassay for the screening of P-agonists in hair/ Haasnoot W., Stouten P., Schilt R. and Hooijerink D. // Analyst. 1998. - V.l23. -P.2707-2710.

142. Haasnoot W. Development of a tube enzyme immunoassay for «оп-site» screening of urine samples in the presence of Р-agonists/ Haasnoot W., Streppel L., Cazemier G. et al.// Analyst. 1996. - V. 121. - P.l 111-1114.

143. Haber E. Automated sample preparation and gas chromatographic-mass spec-trometric analysis of urinary androgenic anabolic steroids/ Haber E., Munoz-Guerra J. A., Soriano C. et al.// Journal of Chromatography B. 2001. - V.755. -P. 17-26.

144. Hahn B.N. Systemic Lupus Erythematosus/ Hahn B.N. In: Harrison s Principle of Internal Medicine (by ed. Fauci A.S.). MacGraw-Hill, New-York. - 1998. -P. 1874-1880

145. Hahnau S. Evaluation of commercially available ELISA test kits for the detection of clenbuterol and other p2-agonists/ Hahnau S. and Julicher В.// Food Additives and Contaminants. 1996. - V.l3. - P.259-274.

146. Hakomori S. A rapid permethylation of glycolipid, and polysaccharide catalyzed by methylsulfinyl carbanion in dimethyl sulfoxide/ Hakomori S.// J. Bio-chem. 1964. - V.55. - P.205-208.

147. Hamoir T. Comparison of purification procedures for the isolation and detection of anabolic residues in faeces using gas chromatography-mass spectrometry/ Hamoir Т., Courtheyn D., De Brabander H. et al. // Analyst. 1998. - V.123. -P.2621-2624.

148. Hampl R. Practical aspects of screening of anabolic steroids in doping control with particular accent to nortestosterone radioimmunoassay using mixed antis-era/ Hampl R. and Starka L. // Journal of Steroid Biochemistry. 1979. - V.l 1. - P.933-936.

149. Han X. DNA single strand breaks in the kidneys of Syrian hamsters treated with steroidal estrogens: hormone-induced free radical damage preceeding renal ma-lignancy\ Han X. and Liehr J.G. // Carcinogenesis. 1994a. - V.l5. - P.997-1000.

150. Handbook of Derivatives for Chromatography (by ed. K. Blau and G.C. King). -Heyden, London. 1977. - Ch. 2-6.

151. Hanly W.C. Review of Polyclonal Antibody Production Procedures in Mammals and Poultry/ Hanly W.C., Artwohl J.E. and Bennett B.T. // ILAR Journal. -1995.-V.37(3). -P.l-31.

152. Harrison L.M. Effect of extended use of single anabolic steroids on urinary steroid excretion and metabolism/ Harrison L.M., Martin D., Gotlin R.W. and Fen-nessey P.V. // Journal of Chromatography. 1989. - V.489. - P. 121-126.

153. Hartmann S. Simultaneous determination of anabolic and catabolic steroid hormones in meat by gas chromatography-mass spectrometry/ Hartmann S., Steinhart H. // Journal of Chromatography B. 1997. - V.704. - P. 105-117.

154. Hawkins R.A. Estimation of oestrone sulphate, oestradiol-17P and oestrone in peripheral plasma: concentrations during the menstrual cycle and in men/ Hawkins R.A., Oakey R.E. // J. Endocr. 1974. - V.60. - P.3-17.

155. Hayashi N. Estrogen-induced cell transformation and DNA adduct formation in cultured Syrian hamster embryo cells/ Hayashi N., Hasegawa K., Komine A. et al. // Mol. Carcinogenesis. 1996. -V.16. - P.149-156.

156. Hayes C.L. 17P-Estradiol hydroxylation catalyzed by human cytochrome P450 1В1/ Hayes C.L., Spink D.C., Spink B.C., Cao J.Q., Walker N.J., Sutter T.R.// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996. - V.93. -P.9776-9781.

157. Helbo V. Development of a radioreceptor assay for P2 adrenergic agonists/ Helbo V., Vandenbroeck M., Maghuin-Rogister G.// Arch. Lebensmittelhyg. -1994. V.45. - P.57-61.

158. Henderson B.E. Hormonal chemoprevention of cancer in women/ Henderson B.E., Ross R.K. and Pike M.C.// Science. 1993. - V.259. - P.633-638.

159. Herbst A.L. Developmental Effects of Diethylstilbestrol (DES) in Pregnancy/ Herbst A.L., Bern H.A. New York, NY: Thieme-Stratton. - 1988.

160. Hernandez-Carrasquilla M. External contamination of bovine hair with p2-agonist compounds: evaluation of decontamination strategies/ Hernandez-Carrasquilla M.// Journal of Chromatography B. 2002. - V.767. - P. 235-243.

161. Hernandez-Carrasquilla M. Gas chromatography-mass spectrometry analysis of p2-agonists in bovine retina/ Hernandez-Carrasquilla M. // Analytica Chimica Acta. 2000. - V.408. - P.285-290.

162. Hernandez-Carrasquilla M. Gas chromatography-mass spectrometry analysis of anabolic compounds in bovine hair: evaluation of hair extraction procedures/ Hernandez-Carrasquilla M. // Analytica Chimica Acta. 2001. - V.434. - P.59-66.

163. Hertz R. The estrogen problem retrospect and prospest/ Hertz R. In: Estrogens in the environment: II influenced on development (by ed. J.A. McLachlan). -New York: Elsevier. 1985.-P. 1-11.

164. Hewitt S.A. Screening and confirmatory strategies for the surveillance of anabolic steroid abuse within Northern Ireland/ Hewitt S.A., Kearney M., Currie J.W., Young P.B., Kennedy D.G. // Analytica Chimica Acta. 2002. - V.473. -P.99-109.

165. Highman B. Osseous changes and osteosarcomas in mice continuously fed diets containing diethylstilbestrol or 17P-estradiol/ Highman В., Roth S.I., and Greenman D.L. // J. Natl. Cancer. 1987. - V.76. - P.653-662.

166. Hodgson A.V. Estrogen-induced microsatellite DNA alterations are associated with Syrian hamster kidney tumorigenesis/ Hodgson A.V., Ayala-Torres S., Thompson E.B. and Liehr J.G. // Carcinogenesis. 1998. -V.19. - P.2169-2172.

167. Hoffmann B. Anabolic agents with sex hormone-like activities: Problems of residues/ Hoffmann В., Evers P. In: Drug Residues in Animals (by ed. Rico A.G.). Academic Press, New York. - 1986. - P.l 11-146.

168. Hoffmann B. Metabolic fate of anabolic agents in treated animals and residue levels in meat/ Hoffmann В., Karg H. // Environ. Qual Safety Suppl. 1976. -V.5. - P.l81-191.

169. Hoogenboom L.A.P. Estrogenic activity of estradiol and its metabolites in the ER-CALUX assay with human T47D breast cells/ Hoogenboom L.A.P., de Haan L., Hooijerink D. et al. // APMIS . 2001. - V. 109. - P. 101-107.

170. Hooijerink H. Screening for gestagens in kidney fat using accelerated solvent extraction and liquid chromatography electrospray tandem mass spectrometry/ Hooijerink H., van Bennekom E.O., Nielen M.W.F. // Analytica Chimica Acta. 2003.-V.483.-P.51-59.

171. Houghton E. Studies related to the metabolism of anabolic steroids in the horse: the identification of some 16-oxygenated metabolites of 19-nortestosterone/ Houghton E. and Dumasia M.C. //Xenobiotica. 1980. - V. 10. -P.381-390.

172. Houghton E. Studies related to the metabolism of anabolic steroids in the horse: testosterone/ Houghton E. and Dumasia M.C.// Xenobiotica. 1979. - V.9. -P.269-279.

173. Houghton E. Some applications of chromatography to steroid analysis in the horse/ Houghton E., Dumasia M.C. and Teale P. // Analyst. 1988. - V.l 13. -P.l 179-1187.

174. Houghton E. The use of stable isotopes and gas chromatography/mass spectrometry in the identification of steroid metabolites in the equine/ Houghton E., Dumasia M.C., Teale P.// Steroids. 1990. - V.55. - P.433-439.

175. Houghton E. Detection of the administration of anabolic preparations of nan-droline to the entire male horse/ Houghton E., Ginn A., Teale P. et al. // Equine Veterinary Journal. 1986. - V.l8. - P.491-493.

176. Houghton E. Application of gas chromatography/mass spectrometry to steroid analysis in equine sports: problems with enzyme hydrolysis/ Houghton E., Grainger L., Dumasia M.C. et al. // Organic Mass Spectrometry. 1992. - V.27. -P.1061-1070.

177. Howell L. Melanin as an adsorbent for drug residues/ Howell L., Godfrey M., Sauer M.J. // Analyst. 1994. - V.l 19. - P.2691-2693.

178. Howells L. Extraction and clean-up of the p-agonist salbutamol from liver and its determination by enzyme immunoassay/ Howells L., Sauer M., Sayer R., Clark D.// Anal. Chim. Acta. 1993. - V.275. - P.275-278.

179. Huseby R.A. Demonstration of a direct carcinogenic effect of estradiol on Ley-dig cells of the mouse/ Huseby R.A.// Cancer Res. 1980. - V.40. - P. 10061013.

180. IARC monographs on the evaluation of the carcinogenic risk of chemicals to humans. Vol. 21. Sex hormones (II). International Agency for Research on Cancer, Lyon. - 1979. - P. 173.

181. IARC Monographs on the evaluation of the carcinogenic risks to humans. Volume 27. Sex Hormones. International Agency for Research on Cancer, Lyon. -1995.

182. IARC Monographs on the evaluation of the carcinogenic risks to humans. Volume 66. Some pharmaceutical drugs. International Agency for Research on Cancer, Lyon. - 1996.

183. IARC Monographs on the evaluation of the carcinogenic risks to humans. Volume 72. Some hormones, postmenopausal hormone therapy, and hormonal contraception. International Agency for Research on Cancer, Lyon. - 1998.

184. IARC Overall evaluations of carcinogenicity: an updating of IARC Monographs. Volumes 1 to 42. Supplement №7. International Agency for Research on Cancer, Lyon. - 1987.

185. International Vocabulary of Basic and General Terms in Metrology. ISO, Geneva, 1993. ISBN 92-67-10175-1.

186. Itoh S. Identification of estrogen-modified nucleosides from calf thymus DNA reacted with 6-hydroxyestrogen-6-sulfates/ Itoh S., Hirai Т., Tutsuka Y. et al.// Chem. Res. Toxicol. 1998. -V.l 1. - P. 1312-1318.

187. Jansen E.H.J.M. Comparison between spectrophotometric and chemilumines-cence detection in enzyme immunoassays for nortestisterone/ Jansen E.H.J.M., Bergman J.J., Van den Berg R.H., Zomer G.// Anal. Chim. Acta. 1989. -V.227. - P. 109-117.

188. JECFA-Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives. Fifty-second meeting. Summary and Conclusions. Rome 2-11 February. - 1999.

189. JECFA-WHO Evaluation of certain veterinary drugs residues in food. Thirty-second report of the Joint FAO/WHO Expert Commitee on Food Additives. WHO technical Report Series 763. World Health Organization, Geneva. -1988.

190. Jenster G. Coactivators and corepressors as mediators of nuclear receptor function: An update/ Jenster G. // Molec. Cell Endocrinol. 1998. - V.43. - P. 1-7.

191. Jiang W. Formaldehdye-mediated aggregation of proteins antigens: comparison of untreated and formalinized model antigens/ Jiang W., Schwendeman S.P.// Biotechnol. Biotechnol. 2000. - V.70. - P.5.

192. Jimenez-Carmona M.M. Ion-pair/supercritical fluid extraction of clenbuterol from samples/ Jimenez-Carmona M.M., Тепа M.T. and Luque de Castro M.D.// Journal of Chromatography. 1995. - V.711. - P.269-276.

193. Joffe M. Accidental gynecomastia in children- Discussion / Joffe M., Chiumello G., Thonneau P. et al.// APMIS. 2001. - V.109. - P. S207-S209.

194. Jondorf W.R. 19-Nortestosterone, a model for the use of anabolic steroid conjugates in raising antibodies for radioimmunoassay/ Jondorf W.R. // Xenobi-otica. 1977. - V.7.-P.671-681.

195. Jondorf W.R. Radioimmunoassay technique for detecting urinary excretion products after administration of synthetic anabolic steroids to the horse/ Jondorf W.R. and Moss M.S.// Xenobiotica. 1978. - V.8. - P. 197-206.

196. Jondorf W.R. On the raising of antibody to the synthetic anabolic steroid trien-bolone, its partial characterization and preliminary application for radioimmunoassay/ Jondorf W.R. // Experientia. 1980. - V.36. - P.394-395.

197. Joshi U.M. A sensitive and specific enzymeimmunoassay for serum testosterone/ Joshi U.M., Shah H.P. and Susheela P.S. // Steroids. 1979. - V.34. -P.35-42.

198. Jouquey A. Analytical methods for trenbolone/ Jouquey A., Mouren M., Salmon J. In: Anabolics in Animal Production (by ed. E. Meissonnier). Office International des Epizootics, Paris. - 1983. - P.423-441.

199. Kaijser M. In utero exposures and breast cancer: a study of opposite-sexed twins/ Kaijser M., Lichtenstein P., Granath F. et al. // J. Natl. Cancer Inst. -2001.-V. 93.-P. 60-62.

200. Kanzaki M. A sensitive, non-isotopic immunoassay for progesterone using the avidin-biotin system/ Kanzaki M., Iwasawa A.// Biomed. Res. 1995. - V.16. -P.381-386.

201. Key T.J.A. The dose-effect relationship between «unopposed» estrogens and endometrial mitotic rate: Its central role in explaining and predicting endometrial cancer risk/ Key T.J.A., Pike M.C. // Br. J. Cancer. 1988. - V.57. -P.205-212.

202. Kicman A.T. Radioimmunoassay for nandrolone metabolites/ Kicman A.T. and Brooks R.V. // Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 1988. -V.6. - P.473-483.

203. Kicman A.T. Development of a radioimmunoassay for the synthetic anabolic steroid methenolone/ Kicman A.T. In: new Methods of Detection of Doping with Synthetic and Natural Androgens in Sport. PhD thesis, University of London.- 1989.- P.92-110.

204. Kinter M. Tandem mass spectrometry in drug-abuse testing exemplified for anabolic steroids/ Kinter M., Shipe J.P. and Savory J.// Clinical Chemistry. -1988.-V.34.-P.2176.

205. Kirkman H. Estrogen-induced tumorr of the kidney. III. Growth characteristics in the Syrian hamster/ Kirkman H.// Natl. Cancer. Inst. Monogr. 1959. -No.l. -P. 1-57.

206. Klein C.B. Are diethylstilbestrol and estradiol mutagenic?/ Klein C.B.// Proc. Am. Assoc. Cancer Res. 1995. - V.36. - P.259.

207. Klein K.O. Estrogen levels in childhood determined by an ultrasensitive recombinant cell bioassay/ Klein K.O., Baron J., Colli M.J., McDonnell D.P., Cutler

208. G.B. // J. Clin. Invest. 1994. - V.94. - P.2475-2480.

209. Kopitar Z. Pharmakokinetik und Metabolitenmuster von Clenbuterol bei der Ratte/ Kopitar Z. and Zimmer A. // Arzneim.- Forsch. Drug Res. 1976. - V.26. - P.1435-1441.

210. Kramer P.M. Integration of Liquid Chromatogfaphy with Immunoassay: An Approoch Combining the Strength of Both Methods / Kramer P.M., Li Q.X. and Hammock B.D.// Journal of AOAC Int. 1994. - V.77. - P. 1275-1287.

211. Kuiper G.G.J.M. Cloning of a novel estrogen receptor expressed in rat prostate and ovary/ Kuiper G.G.J.M., Enmark E., Pelto-Huikko M., Nilsson S., Gustafsson J.-A. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996. - V.93. - P.5925-5930.

212. Kuiper H.A. Illegal use of p-adrenergic agonists: European Community/ Kuiper

213. H.A., Noordam M.Y., van Dooren-Flipsen M.M.H. et al.// Journal of Animal Science. 1998. - V.76. - P.195-207.

214. Kundu N. Production of antisera against contraceptive steroids/ Kundu N., Keenan S. and Slaunwhite W.R. // Steroids. 1977. - V.30. - P.85-96.

215. Larner J.M.The naturally occurring C-17 fatty acid esters of estradiol are long-acting estrogens/ Larner J.M., MacLusky N.J., Hochberg R.B. // J. Steroid. Bio-chem. 1985 . - V. 22. - P. 407-413.

216. Lasne C. Study of various transforming effects of the anabolic agents trenbolone and testosterone on Syrian hamster embryo cells/ Lasne C., Lu Y.P., Orfila L., Ventura L. and Chouroulinkov I.// Carcinogenesis. 1990. - V.l 1. - P.541-547.

217. Lau J.H.W. Determination of clenbuterol, salbutamol, and cimaterol in bovine retina by electrospray ionization-liquid chromatography-tandem mass spectrometry/ Lau J.H.W., Khoo C.S., Murby J.E.// Journal of AOAC International. -2004. -V.87. -P.31-38.

218. Lavigne J.A. The effects of catechol-O-methyltransferase inhibition on estrogen metabolite and oxidative DNA damage levels in estradiol-treated MCF-7 cells/ Lavigne J.A., Goodman J.E., Fonong T. et al. // Cancer Res. 2001. - V.61. - P. 7488-7494.

219. Le Bizec B. Endogenous nandrolone metabolites in human urine: preliminary results to discriminate between endogenous and exogenous origin/ Le Bizec В., Bryand F., Gaudin I. et al. // Steroids. 2002. - V.67. - P.105-110.

220. Le Bizec B. Le controle des anabolisants dans la viande / Le Bizec В., Mar-chand P., Andre F.// Ann. Toxicol. Anal. 2000. - Vol. XII. - No. 1. - p. 43-48.

221. Le Bizec B. Monitoring anabolic steroids in meat-producing animals. Review of current hyphenated mass spectrometric techniques/ Le Bizec В., Marchand P., Maume D., Monteau F., Andre F.// Chromatographia. 2004. - V.59. - P.S-3 -S-12.

222. Le Bizec B. Detection and identification of anabolic steroids in bovine urine by gas chromatography-mass spectrometry/ Le Bizec В., Montrade M.-P., Monteau F. and Andre F. // Analytica Chimica Acta. 1993. - P.275. - P. 123-133.

223. Le Bizec B. Detection and identification of anabolic steroids in bovine urine by gas chromatography-mass spectrometry/ Le Bizec В., Monrade M.-P., Monteau F. et al. // Analytica Chimica Acta. 1993. - V.275. - P.123-133.

224. Lee H.B. Perfluoro and chloro amide derivatives of aniline and chloroanilines. A comparison of their formation and gas chromatographic determination by massselective and electron capure detection/ Lee H.B.// J. Chromatogr. 1988. -V.457. - P.267-278.

225. Lee M.S. Rapid identification of drug metabolites with tandem mass spectrometry/ Lee M.S. and Yost RAM Biomedical and Environmental Mass Spectrometry. 1988. - V.l 5. - P. 193-204.

226. Leyssens L. Determination of p2-receptor agonists in bovine urine and liver by gas chromatography-tandem mass spectrometry/ Leyssens L., Driessen C., Jacobs A. et al.// Journal of Chromatography B. 1991. - V.564. - P.515-527.

227. Li J.J. Estrogen carcinogenesis in Syrian hamster tissues: Role of metabolism / Li J.J. and Li SAM Fed. Proc. 1987. - V.46. - P.1858-1863.

228. Li J.J. Estrogen carcinogenesis in the hamster kidney: A hormone-driven multistep process/ Li J.J. and Li S.AM Prog. Clin. Biol. Res. 1996. - V.394. -P.255-267.

229. Li J.J. Estrogen carcinogenesis in the hamster kidney: Role of cytotoxicity and cell proliferation/ Li J.J., Gonzalez S., Banerjee S.S., Li S.AM Environ. Health Perspect. 1993. - V.101 (Suppl. 5). - P.259-264.

230. Li K-M. Formation of the depurinating 4-hydroxyestradiol (4-OHE2)-l-N7Gua and 4-OHE2-l-N3Ade adducts by reaction of E2-3,4-quinone with DNA/ Li KM., Devanesan P.D., Rogan E.G., Cavalieri E.L. // Proc. Amer. Assoc. Cancer Res.- 1998.-V.39.-P.636.

231. Liehr J.G. Carcinogenicity of catechol estrogens in Syrian hamsters/ Liehr J.G., Fang W.E., Sirbasku D.A., Ari-Ulubelen A. // J. Steroid Biochem. 1986. -V.24. -P.353-356.

232. Liehr J.G. 4-Hydroxylation of estrogens as marker of human mammary tumors/ Liehr J.G., Ricci M.J. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996. - V.93. - P.3294-3296.

233. Liehr J.G. Mechanism of inhibition of estrogen-induced renal carcinogenesis in male Syrian hamsters by Vitamin С/ Liehr J.G., Roy D. and Gladek A. // Carcinogenesis. 1989. -V.10. -P.1983-1988.

234. Liehr J.G. Estrogen-dependent kidney tumors/ Liehr J.G., Sirbasku D.A. In: Tissue Culture of Epithelial Cells (by ed. Taub M.). -Plenum Press, New York. 1985. - P.205-234.

235. Lipschutz A. Structure and origin of uterine and extragenital fibroids induced experimentally in the guinea pig by prolonged administration of estrogens/ Lipschutz A., and Vargas L. Jr.// Cancer Res. 1994. - V.l. - P.236-248.

236. Loizzo A. Italian baby food containing diethylstilboestrol three years later/ Lo-izzo A., Gatti G.L., Macri A., Moretti G., Ortolani E., Palazzesi S. // Lancet. -1984. V.5.- P.1014-1015.

237. Lopez de Alda M.J. Review of analytical methods for the determination of estrogens and progestogens in waste waters/ Lopez de Alda M.J., Barcelo D. // Fresenius J. Anal. Chem. 2001. - V.371. - P.437-447.

238. Lowry O.H. Protein measurement with the Folin fenol reagent/ Lowry O.H., Rosebrough N.J., Farr A.L., Randall R.G.// J. Biol. Chem. 1951. - V.l93. -P.265-275.

239. Machnik M., Due M., Parr М., von Kuk С., Schanzer W. Case study: doping substances in equestrian food supplements. Chromatographia. 2004. - V.59. -P.S-131 -S-139.

240. Maistro S. Beta blockers to prevent clenbuterol poisoning/ Maistro S., Chiesa E., Angeletti R. and Brambilla G.// Lancet. 1995. - V.346. - P. 180.

241. Marash S. Animals: chemical inputs for nutrition and health- overview/ Marash S., Oppenberg В., Takei N. CEN Marketing Research Report. -1999.-P.201.8004Q-201.8004R.

242. Marchand P. Ultra trace detection of a wide range of anabolic steroids in meat by gas chromatography coupled to mass spectrometry/ Marchand P., Le Bizec В., Gade C., Monteau F., Andre F.// Journal of Chromatography A. 2000. -V.867.-V.219-233.

243. Margard M.A. Determination of androsterone in pig fat using supercritical fluid extraction and gas chromatography-mass spectrometry/ Margard M.A., Berg H.E.B., Tagesson V. et al.// J. Agric. Food Chem. 1995 . - V.43. - P. 114-120.

244. Martinez-Navarro J.F. Food poisoning related to consumption of illicit P-agonist in liver/ Martinez-Navarro J.F.// Lancet. 1990. - V.336. - P. 1311.

245. Martlbauer E. Immunochemical detection of antibiotics and sulfonamides/ Martlbauer E., Usleber E., Schneider E., Dietrich R. // Analyst. 1994. - V.l 19. -P.2543-2548.

246. Martucci C.P. P450 Enzymes of estrogen metabolism / Martucci C.P., Fishman J.// Pharmac. Ther.- 1993. V.57. - P.237-259.

247. Masse R. Studies on anabolic steroids. III. Detection and characterization of stanozolol urinary metabolites in humans by gas chromatography-mass spectrometry/ Masse R., Ayotte C., Bi H. et al.// Journal of Chromatography. 1989. - V.497. - P. 17-37.

248. Masse R. Studies on anabolic steroids. VII Analysis of urinary metabolites of formebolone in man by gas chromatography-mass spectrometry/ Masse R., Bi H. and Du P.// Analytica Chimica Acta. 1991. - V.247. - P.211 -221.

249. Masse R. Gas chromatographic/mass spectrometric analysis of 19-nortestosterone. Urinary metabolites in man/ Masse R., Laliberte C., Tremblay L. et al.// Biomedical Mass Spectrometry. 1985. - V. 12. - P.l 15-121.

250. Maume D. N-Methyl-N-alkylsilyltrifluoroacetamide-I2 as a new derivatization reagent for anabolic steroid control/ Maume D., Le Bizec В., Marchand P., Montrade M.-P. and Andre F. // Analyst. 1998. - V.l23. - P.2645-2648.

251. Maxwell R.L. An SPE colum-teflon sleeve assembly for in-line retention during supercritical fluid extraction of analytes from biological matrices/ Maxwell R.L., Lightfield A.R., Stolker A.A.M.// J. High Resolut. Chromatogr. 1995. - V.l8. -P.231-234.

252. McLachlan J. Functional toxicology: a new approach to detect biologically active xenobiotics/ McLachlan J. // Environ. Health Perspect. 1993. - V.l01. -P.386-387.

253. McLachlan J.A. Morphological and neoplastic transformation of Syrian hamster embryo fibroblasts by diethylstilbestrol and its analogs/ McLachlan J.A., Wong A., Degen G.H., Barrett J.C.// Cancer Res. 1982. - V.42. - P.3040-3045.

254. Mena M.A. Early postnatal androgenization imprints selective changes in the action of estrogens in the rat uterus/ Mena M.A., Arriaza C.A., Tchernitchin A.N. // Biol. Reprod. 1992. - V.46. - P. 1080-1085.

255. Messeri G. Helix pomatia-induced conversion of some 3P-hydroxysteroids/ Messeri G., Cugneto G., Moneti G. et al.// Journal of Steroid Biochemistry. -1984. V.20. - P.793-796.

256. Metzler M. Metabolism and genotoxicity of the xenobiotic growth promoters zeranol, trenbolone acetate and melengestrol acetate/ Metzler M.//Critical Review.-1999.-V.213.-345-391.

257. Metzler M. Metabolism of some anabolic agents: toxicological and analytical aspects/ Metzler M.// Journal of Chromatography. Biomedical Applications. -1989. -V.489.-P.11-21.

258. Meyer H.H.D. The pharmacokinetics and residues of clenbuterol in veal calves/ Meyer H.H.D. and Rinke L.M. // Journal of Animal Science. 1991. - V.69. -P.4538-4544.

259. Meyer H.H.D. Development of a sensitive microtitration plate enzyme-immunoassay for the anabolic steroid trenbolone/ Meyer H.H.D., Hoffmann S.// Food Addit. Contam. 1987. - V.4. - P. 149.

260. Meyer H.H.D. Ruckstandsanalytik sexual-hormonwirksamer anabolika bei masttieren im ppt-Bereich mittels HPLC/RIA/ Meyer H.H.D., Rapp M., Funcke A.P. // GIT Labor-Medizin. 1987. - V.4. - P.127-132.

261. Mitchell G.A. Illegal use of P-adrenergic agonists in the United States/ Mitchell G.A. and Dunnavan G.// Journal of Animal Science. 1998. - V.76. - P.208-211.

262. Montessissa C. The use of cultured hepatocytes from goats and cattle to investigate xenobiotic oxidative metabolism/ Montessissa C., Anfossi P., Vant Klooster G. and Mengelers M. // Vet. Res. Comm.- 1996. V.20. - P.449-460.

263. Multi residue analysis IAC/GC-MS P-agonists./ Rijksinstitut voor Volksge-zondheid en Milieuhygiene (RIVM). S.O.P.: ARO/114. Revision 5. -1997.09.29,- 13p.

264. Multi residue analysis of anabolic agents./ Rijksinstitut voor Volksgezondheid en Milieuhygiene (RIVM). S.O.P.: ARO/113. Revision 6. 2001.04.26. - 12p.

265. Nagasawa H. Longterm effects of progesterone or diethylstilbestrol with or without estrogen after maturity on mammary tumorigenesis in mice/ Nagasawa H., Mori Т., Nakajima YJI Eur. J. Cancer. 1980. - V.l6. - P. 1583-1589.

266. Nebel R.L. Symposium: cowside tests. On-farm milk progestrone tests/ Nebel R.L. // J. Dairy Sci. 1988. - V.71. - P. 1682-1699.

267. Neeman M. Methylation of alcohols with diazomethane/ Neeman M., Caserio M.C., Roberts J.D., Johnson W.S.// Tetrahedron. 1959. - V.6. - P.36-47.

268. Newbold R.R. Induction of uterine adenocarcinoma in CD-I mice by catechol estrogens/ Newbold R.R., Liehr J.G.// Cancer Research. 2000. -V.60. -P.235-237.

269. Nielen M.W.F. Value of alternative sample matrices in residue analysis for stanozolol/ Nielen M.W.F., Hooijerink H., Essers M.L. et al.// Analytica Chimica Acta. 2003. - V.483. - P.l 1-17.

270. Noble R.L. The development of prostatic adenocarcinoma in Nb rats following prolonged sex hormone administration/ Noble R.L. // Cancer Res. 1977. -V.37. - P.1929-1933.

271. Noonan J.S. A method for detecting amphetamine using gas chromatography of a halogenated derivative/ Noonan J.S., Murdick P.W., Ray R.S. // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1969. - V. 168. - P.205-209.

272. Nutter L.M. Characterization of DNA damage induced by 3,4-estrone-o-quinone in human cells/ Nutter L.M., Ngo E.O., Abul-Hajj Y.J.// J. Biol. Chem. 1991. -V.266. - P. 16380-16386.

273. Nutter L.M. An o-quinone form of estrogen produces free radicals in human breast cancer cells: Correlation with DNA damage/ Nutter L.M., Wu Y-Y., Ngo E.O., Sierra E.E., Gutierrez P.L., Abul-Hajj Y.J. // Chem. Res. Toxicol. 1994. - V.7. - P.23-28.

274. O'Keeffe M. Analytical methods for р-agonists/ O'Keeffe M. In: Methods for Veterinary Drug Residue Analysis in Food. The National Food Centre. Research Report No. 9. -Dublin. 1999. - P.2-13.

275. O'Keeffe M. Analytical methods for resorcylic acid lactones/ O'Keeffe M. In: Methods for veterinary drug residue analysis in food. The National Food Centre. Research Report No. 9. Dublin. - 1999. - P. 13-15.

276. O'Keeffe M.J. Supercritical fluid extraction(SFE) as a multi-residue extraction procedure for P-agonists in bovine liver tissue/ O'Keeffe M.J., O'Keeffe M. and Glennon J.D.// The Analyst. 1999. - V.124. - P. 1355.

277. O'Keeffe M.J. Supercritical fluid extraction of veterinary drug residues from meat/ O'Keeffe M.J., O'Keeffe M. The National Food Centre. Research Report No. 19. -Dublin.- 1999.- 18p.

278. O'Keeffe M.J. Supercritical fluid extraction of clenbuterol from bovine liver tissue/ O'Keeffe M.J., O'Keeffe M., Glennon J.D. et al. // The Analyst. 1998. -V.123. - P.2711.

279. Odell V.D. In: Margoulies M. (ed) Protein and Polypeptide Hormones. Ex-cerpta Med., Amsterdam. - 1971.

280. Ogawa S. The complete primary structure of human estrogen receptor p and its heterodimerization with Eralpha in vivo and vitro/ Ogawa S., Inoue S., Wata-nabe T. et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1998. -V.243. -P.122-126.

281. Olah G.A. Iodotrimethylsilane a versatile synthetic reagent/ Olah G.A. and Narang S.C.// Tetrahedron. - 1982. - V.38. - P.2225-2277.

282. Oriundi M.P. Screening of calf urine for 19-nortestosterone: matrix effect in some immunoassays/ Oriundi M.P., Angeletti R., Bastiani E. et al. // Analyst. -1995. V.120. - P.577-579.

283. Paisley S.I. Effects of implants of daily gains of steers wintered on dormant native tallgrass prairie, subsequent performance, and carcass characteristics/ Paisley S.I., Horn G.W., Ackerman C.J. et al. // J. Anim. Sci. 1999. - V. 77. - P. 291-299.

284. Parkin D.M. Cancer incidence in five continents/ Parkin D.M., Whelan S.L., Ferlay J., Raymond L., Young J. Volume VII. IARC Scientific Publications № 143. International Agency for Research on Cancer, Lyon. - 1997.

285. Parks O.W. Determination of melengestrol acetate in supercritical fluid-solid phase extracts of bovine fat tissue by HPLC-UV and GC-MS/ Parks O.W., Shadwell R.J., Lightfield A.R., Maxwell R.J. // J. Chromatogr. Sci. 1996. -V.34. - P.353-357.

286. Pasquino A.M. Transient pseudo-precocious puberty by probable oestrogen intake in 3 girls/ Pasquino A.M., Balducci R., Manca Bitti M.L., Spadoni G.L., Boscherini B. // Archiv Dis. Child. 1982. - V.57. - P.954-956.

287. Pauillac S. An improved method for the production of antibodies to lipophilic carboxyl hapten using small amount of hapten-carrier conjugate/ Pauillac S., Naar J., Branaa P., Chinain M. //J. Immunol. Methods.- 1998.- V.220.- P. 105.

288. Perez-Comas A. Premature sexual development in Puerto Rico/ Perez-Comas A. // Boletin Asociacion Medica de Puerto Rico. 1988. - V.80. - P.85-90.

289. Petit C.R. In vivo covalent binding of 17a-OH- and 17f3-OH-trenbolone to rat liver DNA/ Petit C.R., Fournier P.A., Rico A.G. et al. //Ann. Rech. Vet. 1989. - V.20. - P.319-326.

290. Pham-Huu-Trung M.T. A direct determination of plasma aldosterone/ Pham-Huu-Trung M.T. and Corvol P.// Steroids. 1974. - V.24. - P.587-598.

291. Pike M. Exogenous hormones and breast cancer risk/ Pike M., Bernstein L., Spicer D. In: Current Therapy in Oncology (by ed. J. Neiderhuber).- St. Louis, B.C. Decker.- 1993.-P.292-302.

292. Ploum M.E. Test strip enzyme immunoassays and the fast screening of nortes-tosterone and clenbuterol residues in urine samples at the part per billion level/ Ploum M.E., Haasnoot W., Paulussen R.J.A. et al.// J. Chromatogr. 1991. -V.564. - P.413-427.

293. Polettini A. Bioanalysis of f32-agonists by hyphenated chromatographic and mass spectrometric techniques/ Polettini A. // Journal of Chromatography B. -1996. V.687. - P.27-42.

294. Polettini A. Determination of p2-agonists in hair by gas chromatography/mass spectrometry/ Polettini A., Montagna M., Segura J. and de la Torre X.// Journal Mass Spectrom. 1996. - V.31. - P.47-54.

295. Polettini A. Clenbuterol and beta-adrenergic drugs detected in hair of treated animal by ELISA/ Polettini A., Segura J., Gonzalez G. et al.// Clin. Chem. -1995. V.41. - P.945-946.

296. Potischman N. Reproducibility of laboratory assays for steroid hormones and sex hormone-binding globulin/ Potischman N., Falk R.T., Laiming V.A., Siiteri P.K., Hoover R.N. // Cancer Res. 1994. - V.54. - P.5363-5367.

297. Pottier J. Plasma kinetics, excretion in milk and tissue levels in the cow following implantation of trenbolone acetate/ Pottier J., Busigny M., Grandadam J.A. // J. Anim. Sci. 1979. - V.41. - P.962-968.

298. Pottier J. Differences in the biotransformation of a 17p-hydroxylated steroid, trenbolone acetate, in rat and cow/ Pottier J., Cousty C., Heitzman R.J., Reynolds I.P.// Xenobiotica. 1981. - V. 11. - P.489-500.

299. Pulce C. Collective human food poisonings by clenbuterol residues in veal liver/ Pulce C., Lamaison D., Keck G. et al. // Veterinary and Human Toxicology. -1991. V.33. - P.480-481.

300. Rajah T.T. The mutagenic potential of antiestrogens at the HPRT locus in V79 cells/ Rajah T.T., Pento J.T.// Res. Commun. Molec. Path. Pharmacol. 1995. -V.89. - P.85-92.

301. Ramos F. Clenbuterol food poisoning diagnosis by gas chromatography-mass spectrometric serum analysis/ Ramos F., Cristino A., Carrola P. et al.// Analytica Chimica Acta. 2003. - V.483. - P.207-213.

302. Rao P.N. Metabolites of estradiol-17 in bovine liver: Identification of the 17-D-glucopyranoside of estradiol-17/ Rao P.N., Purdy R.H., Williams M.C. et al. // Journal Steroid Biochem. 1979. - V. 10. - P. 179-185.

303. Rapp M. Determination of hormone contaminants in milk replacers by high-performance liquid chromatography and immunoassay/ Rapp M. and Meyer H.H.D. // Journal of Chromatography. Biomedical Applications. 1989. -V.489. - P.l81-189.

304. Rapp V.M. Nachweismoglichkeiten des trenboloneinsatzes in der rindermast: radioimmunologische bestimmung und validierung der ergebnisse mittels HPLC/RIA/ Rapp V.M. und Meyer H.H.D. // Archiv fur Lebensmittelhygiene. 1985. - V.36. - P.25-48.

305. Remy R. Residues of growth promoting substances in meat/ Remy R. and De-beuckelaere W. Association des Consommateurs- Test-Achats S.C. Contract No. B5-1050/93/006893 1994. - P.71.

306. Report on Assessment of Risks of Hormonal Growth Promoters in Cattle with Respect to Risks Arising from Abusive Use and Difficulties of Control. EEC, April. - 1999.

307. Residue Analysis in Food. Principles and Applications (by ed. M. O'Keeffe). -Harwoor Academic Publishers. 2000. - 308 p.

308. Residue analysis of 17a- and 17p-trenbolone in bovine urine, meat and liver. Rijksinstitut voor Volksgezondheid en Milieuhygiene (RIVM). S.O.P.: ARO/443. Revision 0. 2000.04.10. - 14p.

309. Richold M. The genotoxicity of trenbolone, a synthetic steroid/ Richold M. // Arch. Toxicol. 1988. - V.61. - P.249-258.

310. RIDASCREEN® 19-Nortestosterone // Enzyme immunoassay for the quantitative analysis of 19-nortestosterone. Art. No.: R 2801.- R-Biopharm AG, Darmstadt, Germany. 28-01-1997. 24 p.

311. RIDASCREEN® Clenbuterol Fast // Enzyme immunoassay for the quantitative analysis of Clenbuterol and other P-agonists. Art. No.: R 1701.- R-Biopharm AG, Darmstadt, Germany. 02-02-06. 28 p.

312. RIDASCREEN® DES // Enzyme immunoassay for the quantitative analysis of diethylstilbestrol. Art. No.: R 2701.- R-Biopharm AG, Darmstadt, Germany. 99-07-19.-24 p.

313. RIDASCREEN® Ethinylestradiol // Enzyme immunoassay for the quantitative analysis of ethinylestradiol. Art. No.: R2501.- R-Biopharm AG, Darmstadt, Germany. 99-07-26. 24 p.

314. RIDASCREEN® Methy{testosterone // Enzyme immunoassay for the quantitative analysis of methyltestosterone. R-Biopharm AG, Darmstadt, Germany. 17-02-94.-23 p.

315. RIDASCREEN® Trenbolon // Enzyme immunoassay for the quantitative analysis of trenbolone. Art. No.: R 2601.- R-Biopharm AG, Darmstadt, Germany. 98-05-05.-28 p.

316. Robins M.J. Catalytic monomethylation of the cis-glycol system by diazome-thane. Effects of novel inorganic catalysts on isomer ratios/ Robins M.J., Lee A.S.K, Norris F.// Carbohydr. Res. 1975. - V.41. - P.304-307.

317. Roda A. Development of a sensitive, direct luminescent enzyme immunoassaay for plasma 17(3-estradiol/ Roda A., Girotti S., Piacentini A.L., Preti S., Lodi S.// Anal. Biochem. 1986. - V.156. - P.267-273.

318. Rosenfield R.L. Role of androgens in growth and development of the fetus, child and adolescent/ Rosenfield R.L.// Adv. Pediatr. 1972. - V.19. - P. 172213.

319. Rossi S.A. Short-column gas chromatography/tandem mass spectrometry for the detection of underivatized anabolic steroids in urine/ Rossi S.A., Johnson J.V. and Yost R.A.// Biological Mass Spectrometry. 1994. - V.23. - P. 131-139.

320. Roy D. Temporary decrease in renal quinone reductase activity induced by chronic administration of estradiol to male Syrian hamsters/ Roy D., Liehr J.G. // J. Biol. Chem. 1988. - V.263. - P.3646-3651.

321. Rumsey T.S. Performance and digestibilities of beef cattle diets supplemented with either soybean meal or roasted soybeans and implanted with Synovex/ Rumsey T.S., Elsasser Т.Н., Kahl S. // J. Anim. Sci. 1999. - V. 77. - P. 16311637.

322. Ryann J.J. Trenbolone acetate: experiences with bound residues in cattle tissues/ Ryann J.J., Hoffmann B. // Journal Assoc. Offic. Anal. Chem. 1978. - V.61. -P.1274-1279.

323. Salleras L. Epidemiologic study of an outbreak of clenbuterol poisoning in Catalonia, Spain/ Salleras L., Dominguez A., Mata E. et al. // Public Health Rep. -1995. V.l 10. - P.338-342.

324. Sample R.H.B. Gas chromatography/mass spectrometry screening for anabolic steroids/ Sample R.H.B. and baenziger J.C. In: Analytical Aspects of Drug Testing (by ed. D.G. Deutsch). John Wiley& Sons Inc., London. - 1989. -P.247-272.

325. Sasco A.J. Epidemiology of breast cancer: an environmental disease? / Sasco

326. A. J.// APMIS. 2001. - V. 109. - P.321-322.

327. Sasco A.J. Migrations et cancers / Sasco A.J.// Revue de Medecine Interne. -1989.-V.10.-P. 341-348.

328. Sauer M.J. P-Agonist abuse in food producing animals: studies of in vitro liver metabolism to evaluate potential target residues/ Sauer M.J., Graham P.J., Lake

329. B.G., Howells L. & Coldham G. In: Proceedings of the EuroResidue III Conference on Residues of Veterinary Drugs in Food (by ed. N. Haagsma and A. Ruiter). Veldhoven, The Netherlands. - 1996. - P.844-847.

330. Sauer M.J. Determination of clenbuterol residues in bovine liver, urine and eye by enzyme immunoassay/ Sauer M.J., Pickett R.J.H., MacKenzie A.L. // Anal. Chim. Acta. 1993. - 275. - P. 195-203.

331. Sauer R.O. Derivatives of the methylchlorosilanes. I. Trimethylsilanol and its simple ethers/ Sauer R.O.// J. Am. Chem. Soc. 1944. - V.66. - P. 1707-1710.

332. Saugy M. Test methods: anabolics/ Saugy M., Cardis C., Robinson N., Schweizer C. // Bailliere's Clinical Endocrinology and Metabolism. 2000. -V.14. - P.l 11-133.

333. Schanzer W. Metabolism of boldenone in man: gas chromatographic/mass spectrometric identification of urinary excreted metabolites and determination of excretion rates/ Schanzer W. and Donike M. // Biological Mass Spectrometry. -1992.-V.21.-P.3-16.

334. Scheutwinkel M. Studies on the genotoxicity of the anabolic drugs trenbolone and zearanol/ Scheutwinkel M., Hude W.V.D., Basler A. // Arch. Toxicol. -1986.-V.59.-P.4-6.

335. Schiffmann D. Trenbolone induces micronucleus formation and neoplastic formation in Syrian hamster embryo fibroblasts but not in mouse C3H10T1/2 cells/ Schiffmann D., Hieber L., Schmuck G. et al. // Arch. Toxicol. 1988. - V.62. -P.49-53.

336. Schilt R. Beta-agonists in animal feed I: first intercomparison of clenbuterol in animal feed materials/ Schilt R., Hooijerink H., Courtheyn D., Boenke A // Food Addit. Contam. 1996. - V.l3. - P.477-492.

337. Schilt R. Screening of cattle urine samples for the presence of beta-agonists with a functional test: some preliminary results/ Schilt R., Hooijerink H., Huf F.A., Zuiderveld O.P., Bast A. // Analyst. 1994. - V.l 19. - P.2667-2670.

338. Schmid J. Biotransformation of clenbuterol/ Schmid J., Prox A., Zimmer A., Keck J. and Kaschke S.// Fresenius J. Anal. Chem. 1990. - V.337. - P. 121

339. Schmidt N.A. Steriod profiling- an update/ Schmidt N.A., Borburgh H.J., Pend-ers T.J. and Weykamp C.W. // Clin. Chem. 1985. - V.31. - P.637-639.

340. Schnitzler R. Induction of micronuclei by stilbene-type and steroidal estrogens in Syrian hamster embryo and ovine seminal vesicle cell in vitro/ Schnitzler R., Foth J., Degen G.H., Metzler M.// Mutat. Res. 1994. - V.311. - P. 85-93.

341. Schoene C. Preliminary study of the metabolism of 17a-methyltestosterone in horses utilizing gas chromatography-mass spectrometric techniques/ Schoene C., Nedderman A.N.R. and Houghton E.// Analyst. 1994. - V.l 19. - P.2537-2542.

342. Schwartz N.N. Silicon derivatives/ Schwartz N.N., O'Brien E., Karlan S., Fein M.M. Carboranes. V. // Inorg. Chem. 1965. - V.4. - P.661-664.

343. Scippo M.L. Control of the illegal administration of natural steroid hormones in the plasma of bulls and heifers/ Scippo M.L., Degand G., Duyskaerts A., Maghuin-Rogister G.I I Analyst. 1994. - V.l 19. - P.2639-2644.

344. Scippo M.-L. Receptor-based screening assays: new perspectives in anti-doping control/ Scippo M.-L., Willemsen P., Danyi S. et al.// Chromatographia. 2004. - V.59. - P.S-23 - S-28.

345. Scippo M-L. Detection of illegal growth promoters in biological samples using receptor binding assays/ Scippo M-L., Van De Weerdt C., Willemsen P. et al.// Analytica Chimica Acta. 2002. - V.473. - P. 135-141.

346. Seegers J.C. The cytotoxic effects of estradiol-170, catecholestradiols and meth-oxyestradiols on dividing MCF-7 and HeLa cells/ Seegers J.C., Aveling M.-L., Van-Aswegen C.H. et al.// Journal Steroid Biochem. 1989. - V.32. - P.797-809.

347. Segura J. Hair analysis and detectability of single dose administration of androgenic steroid esters/ Segura J., Pichini S., Peng S.H., De la Torre X // Forensic Science International. 2000. - V.l07. - P.347-359.

348. Segura J. Derivatization procedures for gas chromatographic determination of xenobiotics in biological samples, with special attention to drugs of abuse and doping agents/ Segura J., Ventura R., Jurado C. // J. Chromatogr. B. 1998. -V.713. - P.61-90.

349. Service R.F. New role for estrgen in cancer? / Service R.F.// Science. 1998. -V. 279.-P. 1631- 1633.

350. Shackleton C.H.L. Use of Sep-pak® cartridges for urinary steroid extraction: evaluation of the method for use prior to gas chromatographic analysis/ Shackle-ton C.H.L. and Whitney J.O. // Clinica Chimica Acta. 1980. - V.l07. -P.231-243.

351. Shelver W.L. Evaluation of commercial immunoassays for cross-reactivity to clenbuterol stereoisomers and bovine metabolites/ Shelver W.L. and Smith D.J.// Food Additives and Contaminants. 2000. - V.l7. - P.837-845.

352. Shimizu H. Serum oestrogen levels in postmenopausal women: comparison of American whites and Japanese in Japan/ Shimizu H., Ross P.K., Bernstein L., Pike M.C., Henderson B.E. // Br. J. Cancer. 1990. - V.62. - P.451-453.

353. Siiteri P.K. Hormonal basis of risk factors for breast and endometrail cancer/ Siiteri P.K., Nisker J.A., Hammond G.L. In: Hormones and Cancer (by ed. S. Iacobelli, R.J.B. King, H.P. Lindner, M.E. Lippman). New York, Raven Press. - 1980. - P.499-505.

354. Simonella A. Solid-phase extraction and HPLC determination of anabolic hormones in bovine biological samples/ Simonella A., Torreti L.// Lab. 2000. -V.4. - P.38-39.

355. Sioufi A. Gas chromatographic determination of amantadine hydrochloride (Symmetrel) in human plasma and urine/ Sioufi A., Pommier F. // J. Chroma-togr. 1980. - V. 183. - P.33-39.

356. Smith D.J. Distribution, Elimination, and Residues of 14C.Clenbuterol HCL in Holstein Calves/ Smith D.J. and Paulson G.D. // Journal of Animal Science. -1997. V.75. - P.454-461.

357. Smith D.J. The pharmacokinetics, metabolism, and tissue residues of adrenergic agonists in livestock/ Smith D.J.// Journal of Animal Science. 1998. - V.76. - P. 173-194.

358. Smith D.J. Identification of ractopamine hydrochloride metabolites excreted in rat bile/ Smith D.J., Giddings J.M., Feil V.J. and Paulson G.D. // Xenobiotica. -1995. V.25. - P.511-520.

359. Smith J.L. Implant sequence effects in intact male Holstein veal calves: live and slaughter traits/ Smith J.L., Wilson L.L., Swanson D.L. // J. Anim. Sci. 1999. -V. 77. - P. 3125-3132.

360. Sofroniew M.V. A method for the consistent production of high quality antisera to small peptide hormones/ Sofroniew M.V., Madler M., Muller O.A., Sciba P.C. // Fresenius Z. Anal. Chem. 1978. - V.290. - P. 163-164.

361. Soldin S.J. Receptor assays in the clinical laboratory/ Soldin S.J. // Clinical Biochemistry. 1996. - V.29. - P.439-444.

362. Sonderfan A.J. Regulation of testosterone hydroxylation by rat liver microsomal cytochrome Р-450/ Sonderfan A.J., Arlotto M.P., Dutton D.R. et al. // Arch. Biochem. Biophys. 1987. - V.255. - P.27-41.

363. Sporano V. Clenbuterol residues in non-liver containing meat as a cause of collective food poisoning/ Sporano V., Grasso L., Esposito M., Oliviero G., Brambilla G., and Loizzo A.// Veterinary and Human Toxicology. 1998. - V.40. -P.141-143.

364. Spranger B. Disposition of 17p-trenbolone in humans/ Spranger В., Metzler M. // J. Chromatography. 1991. - V.564. - P.485-492.

365. Stack D. Molecular characteristics of catechol estrogen quinines in reactions with deoxyribonucleosides/ Stack D., Byun J., Gross M.L., Rogan E.G., Cava-lieri E. // Chem. Res. Toxicol. 1996. - V.9. - P.851-859.

366. Stan H.-J. Determination of residues of anabolic drugs in meat by gas chromatography-mass spectrometry/ Stan H.-J. and Abraham B. // Journal of Chromatography. 1980. - V.l 95. - P.231 -241.

367. Stanker L.H. Introduction to immunoassays for residue analysis/ Stanker L.H., Beier R.C. In: Immunoassays for Residue Analysis-Food Safety (by ed. R.C. Beier and L.H. Stanker). ACS Symposium Series 621 - 1996. - P. 16-27.

368. Stephany R.W. Results of hormone residue analyses of bovine meat and liver imported into the EU and originating from the ASU «Hormone Free cattle Program»/ Stephany R.W., Andre F. Fist interim report to the European Commission.- 1999.

369. Stoffel B. Effects of the P-adrenergic agonist clenbuterol in cows: lipid metabolism, milk production, pharmacokinetics and residues/ Stoffel B. and Meyer H.H.D.// Journal of Animal Science. 1993. - V.71. - P. 1875-1881.

370. Stolker A. A.M. Analytical strategies for residue analysis of veterinary drugs and growth-promotingagents in food-producing animals- a review/ Stolker A.A.M., Brinkman U.A.Th.// Journal of Chromatography A. 2005. - V.1067. - P.15-53.

371. Su L. Molecular mechanisms of gene inactivation by different mutagens/ Su L., Klein C.B.// Proc. Am. Ass. Cancer Res. 1999. - V.40. - P.546-547.

372. Su L. Mechanisms of gene inactivation by estrogens/ Su L., Zinaman R., Klein C.B.// Proc. Am. Ass. Cancer. Res. 1998. - V.39. - P.93.

373. Sutter T.R. Complete cDNA sequence of human dioxin-inducible mRNA identifies a new gene subfamily of cytochrome P450 that maps to chromosome 2/ Sutter T.R., Tang Y.M., Hayes C.L. et al.// J. Biol. Chem. 1994. - V.269. -P.13092-13099.

374. Tang P.W. A new method for hydrolyzing sulfate and glucuronyl conjugates of steroids/ Tang P.W. and Crone D.L. // Analytical Biochemistry. 1989. -V.l82. -P.289-294.

375. Teale P. The development of a gas chromatographic/mass spectrometric screening procedure to detect the administration of anabolic steroids to the horse/ Teale P. and Houghton E.// Biological Mass Spectrometry. 1991. - V.20. -P.109-114.

376. The reproductive system. In: Pharmacology (by ed. H.P. Rang and M.M.Dale).-Churchill Livingstone, Edinburgh. 1987. - P.413-432.

377. Thibodeau P.A. Induction by estrogens of methotrexate resistance in MCF-7 breast cancer cells / Thibodeau P.A., Bissonnette N., Kocsis Bedard S., Hunting D., Paquette B. // Carcinogenesis. 1998. - V. 19. - P. 1545-1552.

378. Thieme D. An Improved Method for Clenbuterol Screening using High resolution Selected Ion recording/ Thieme D., Kingston R., Ordsmith N., Williams E. // Application Note No. AN38/ICA Version 2. Micromass Limited, September.- 1999, 8p.

379. Toniolo P.G. A Prospective study of endogenous estrogens and breast cancer in postmenopausal women/ Toniolo P.G., Levitz M., Zeleniuch-Jacquotte A., Banerjee S., Koenig K.L. et al. // J. Natl. Cancer. Inst. 1995. - V.87. - P. 190197.

380. Traynor I.M. Detection of multi-P-agonist residues in liver matrix by use of a surface plasma resonance biosensor/ Traynor I.M., Crooks S.R.H., Bowers J., Elliott C.T. // Analytica Chimica Acta. 2003. - V.483. - P. 187-191.

381. Tsui P.T. Д9 Tetrahydrocannabinol - Protein Conjugates/ Tsui P.T., Kelly K.A., Ponpipom M.M., Strahilevitz M. and Sehon A.H.// Can. J. Biochem. -1974.-V.52.-P. 252-258.

382. Tsuji A. Synthesis of corticosteroid haptens/ Tsuji A., Smulowtiz M., Liang J.S., Fukushima D.K.// Steroids. 1974. - V.24. - P.739-751.

383. Tsutsu Т. Aneuploidy induction in human fibroblasts: comparison with results in Syrian hamster fibroblasts/ Tsutsu Т., Suzuki N., Maizumi H., Barrett J.C.// Mutation Research. 1990. - V.240. - P.241-249.

384. Tsutsui T. Aneuploidy induction and cell transformation by diethylstilbestrol: a possible chromosomal mechanism in carcinogenesis/ Tsutsui Т., Maizumi H., McLachlan J.A. and Barrett J.C. // Cancer Research. 1983. - V.43. - P.3814-3821.

385. Tsutsui T. 17P-Estradiol-induced cell transformation and aneuploidy of Syrian hamster embryo cells in culture/ Tsutsui Т., Suzuki N., Fukuda S. et al. // Carcinogenesis. 1987. - V. 11. - P. 1715-1719.

386. Tsutsui T. Alteration in diethylstilbestrol-induced mutagenicity and cell transformation by exogenous metabolic activation/ Tsutsui Т., Suzuki N., Maizumi H., McLachlan J.A., Barrett J.C.// Carcinogenesis. 1986. - V.7. - P. 14151418.

387. Vaitukaitis J.L. A method for producing specific antisera with small doses of immunogen/ Vaitukaitis J.L., Robbins J.B., Nieschlag E. & Ross G. T. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 1971. - V.33. - P.988-991.

388. Van der Vies J. Implications of basic pharmacology in the therapy with esters of nandrolone/ Van der Vies J. // Acta Endocrinologica. 1985. - V.l 10, suppl. 271,-P. 38-44.

389. Van Eenoo Criteria in chromatography and mass spectrometry- a comparison between regulations in the field of residue and doping analysis/ Van Eenoo, Delbeke F.T.// Chromatographia.- 2004. V.59. - Suppl.l. - P. S39-S44.

390. Van Ginkel L.A. Review: Immunoaffinity chromatography, its applicability and limitations in multi-residue analysis of anabolizing and doping agents/ Van Ginkel L.A.// Journal of Chromatography. 1991. - V.564. - P.363-403.

391. Van Ginkel L.A. Development and validation of a multiresidue method for beta-agonists in biological samples and animal feed/ Van Ginkel L.A., Stephany R.W., van Rossum H.J.// J. AO AC Int. 1992. - V.75. - P.554-560.

392. Van Ginkel L.A. Effective monitoring of residues of nortestosterone and its major metabolites in bovine urine and bile/ Van Ginkel L.A., Stephany R.W., van Rossum H.J. et al.// Journal of Chromatography. 1989. - V.489. - P.95-104.

393. Van Hoof N. Norchlorotestosterone acetate: an alternative metabolism study andл

394. GC-MS analysis in kidney fat, urine, and faeces/ Van Hoof N., De Wasch K., Poelmans S. et al.// Chromatographia. 2004. - V.59. - P.S-85 - S-94.

395. Van Nie. A carcinogenic action of testosterone, provoking uterine tumors in mice/ Van Nie// Nature. 1961. - V.l92. - P. 1303.

396. Van Peteghem C.H. A comparison of chemiluminescence immunoassay and radio immunoassay for the detection of nortestosterone residues in meat/ Van Peteghem C.H., Van Look L.J. // Anal. Chim. Acta. 1988. - V.205. - P.223-228.

397. Van Puymbroeck M. Identification of selective metabolites to reveal the abuse of some synthetic anabolic steroids in cattle/ Van Puymbroeck M. // Doc-toraatsproefschrift. 2000. - 21 Op.

398. Van Puymbroeck M. Identification of some important metabolites of boldenone in urine and feces of cattle by gas chromatography-mass spectrometry/ Van Puymbroeck M., Kuilman M.E.M., Maas R.F.M. et al.// The Analyst. 1998. -V.123. - P.2453-2456.

399. Vandenbroeck M. Identification and characterization of 19-nortestosterone in urine of meat-producing animals/ Vandenbroeck M., Van Vyncht G. and Gaspar P.// Journal of Chromatograpgy . 1991. - V.564. - P.405-412.

400. Vanluchene E. Conversion of free 3p-hydroxy-5-ene steroids by incubation with Helix pomatia / Vanluchene E., Eechaute W. and Vanderkerckhove D. // Journal of Steroid Biochemistry. 1982. - V.16. - P.701-703.

401. Vogt K. Radioimmunologische Bestimmung von Trenbolon in Muskel, Leber, Nieren, Fett sowie Leber- und Nierenzellsaft von Mastkalbern nach subkutaner Implantation von Revalor/ Vogt K. // Archiv fur Lebensmittelhygiene. 1984. - V.35. - P.121-148.

402. Vree T.B. Enterohepatic cycling and pharmacokinetics of oestradiol in postmenopausal women / Vree T.B., Timmer C.J.// J. Pharm. Pharmacol. 1998. -V.50. - 857-864.

403. WHO Food Additives Series 43. Toxicological evaluation of certain veterinary drug residues in food. Prepared by the 52nd meeting of the joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives JECFA. 2000.

404. WHO. Evaluation of certain foodadditives and contaminants. Twenty-seventh report of the Joint FAO/WHO Expect Committee on Food Additives. technical report Series, No. 696. - 1983.

405. Williams K.R. Metabolism of anabolic agents in the racing greyhound/ Williams K.R., Anderson R.A. and Grey P.J. // Analytica Chimica Acta. 1993. - V.275. -P. 163-172.

406. Wong S.S. Preparation of immunotoxins and other drug conjugates for targeting therapeutics/ Wong S.S. In: Chemistry of Protein Cinjugation and Cross-Linking. CRC Press, Boston, USA. 1993. - Chap.l 1.

407. Workshop Beta-Agonists in Retina. 15-16 May 2000, Berlin // Organizing laboratory: EU Reference Laboratory for Residues of Veterinary Drugs (Berlin). -2000,136p.

408. Wynne P.M. An Improved method for the extraction of anabolic steroids from equine urine/ Wynne P.M., Batty D.C., Vine J.H. and Simpson N.J.K. Varian Application Note. M 2763. - 2000. - 18p.

409. Yamamoto I. Enzyme immunoassay for clenbuterol, a p2-adrenergic stimulant/ Yamamoto I. and Iwata K.// Journal of Immunoassay. 1982. - V.3. - P. 155171.

410. Yamazaki H. Progesterone and testosterone hydroxylation by cytochromes P450 2C19, 2C9 and 3A4in human liver microsomes/ Yamazaki H., Shimada T.// Arch. Biochem. Biophys. 1997. - V.346. - P. 161-169.

411. Yoon J.M. Gas chromatographic and mass spectrometric analysis of conjugated steroids in urine/ Yoon J.M. and Lee K.H.// J. Biosci.- 2001. V.26. - P.627-634.

412. Yoshioka N. Determination of a- and p-trenbolone in bovine muscle and liver by liquid chromatography with fluorescence detection/ Yoshioka N., Akiyama Y., Takeda N.// Journal of Chromatography B. 2000. - V.739. - P.363-367.

413. Zalko D. Metabolic fate of clenbuterol in calves/ Zalko D., Bories G. and Tulliez J. // Journal Agric. Food Chemistry. 1998. - V.46. - P. 1935-1943.

414. Zalko D. Evidence for a New and Major Metabolic Pathway of Clenbuterol Involving in Vivo Formation of an N-Hydroxyarylamine/ Zalko D., Debrauwer L., Bories G. and Tulliez J.// Chem. Res. Toxicol. 1997. - V.l0. - P. 197-204.

415. Zalko D. Comparative Metabolism of Clenbuterol by Rat and Bovine Liver Microsomes and Slices/ Zalko D., Perdu-Durand E., Debrauwer L. et al. // Drug Metabolism and Disposition. 1998. - V.26. - P.28-35.

416. Zhu B.T. Functional role of estrogen metabolism in target cells: review and perspectives / Zhu B.T., Conney A.H. // Carcinogenesis. 1998. - V.l9. - P. 1-27.

417. Zhu B.T. The carcinogenic activity of ethinyl estrogens is determined by both their hormonal characteristics and their conversion to cathechol metabolites/ Zhu B.T., Roy D„ Liehr J.G. // Endocrinology. 1993. -V.132. - P.577-583.

418. Zimmer A. Einmalapplikation, Mehrfachapplikation und Metabolitenmuster von Clenbuterol beim Menschen/ Zimmer A. // Arzneim.- Forsch./Drug Res. -1976.-V.26.-P.1446-1450.

419. Zimmer A. Pharmakokinetik und Metabolitenmuster von Clenbuterol beim Kaninchen und bein Hund / Zimmer A. //Arzneim.- Forsch./ Drug Res. 1976. -V.26. - P. 1442-1445.