Скрытая инфекция, вызванная вирусом гепатита В: эпидемиологическая, вирусологическая и клинико-морфологическая характеристика тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.02.02, кандидат медицинских наук Гордейчук, Илья Владимирович

• Гордейчук, Илья Владимирович
• кандидат медицинских наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Гордейчук, Илья Владимирович

Список сокращений.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Общая характеристика и особенности цикла репликации ВГВ.

1.2. Клиническое манифестирование и серологические маркеры ВГВ-инфекции.

1.3. Понятие о скрытой ВГВ-инфекции.

1.4. Диагностика скрытой ВГВ-инфекции.

1.4.1. Выявление поверхностного антигена ВГВ.

1.4.2. Определение вирусной ДНК.

1.4.3. Исследование биоптатов печени.

1.5. Распространенность скрытой ВГВ-инфекции.

1.6. Клиническая значимость скрытой ВГВ-инфекции.

1.6.1. Значение скрытой ВГВ-инфекции для службы крови.

1.6.2. Скрытая ВГВ-инфекция после самолимитирующегося острого гепатита В.

1.6.3. Скрытая ВГВ-инфекция у пациентов, имевших хронический вирусный гепатит В и утративших НВб

§.

1.6.4. Скрытая ВГВ-инфекция и фульминантная печеночная недостаточность.

1.6.5. Скрытая ВГВ-инфекция у пациентов с криптогенными хроническими заболеваниями печени.

1.6.6. Скрытая ВГВ-инфекция у реципиентов трансплантации органов и пациентов программного гемодиализа.

1.6.7. Скрытая ВГВ-инфекция и риск реактивации гепатита у иммунокомпромитированных лиц.

Резюме.

Глава 2. Материалы и методы исследования 2.1. Характеристика обследованных лиц

2.1.1. Условно здоровое население Республики Тыва.

2.1.2. Пациенты с хроническим гепатитом С.

2.1.3. Пациенты с хроническими заболеваниями печени, наиболее часто встречающимися на территории РФ.

2.2 Методы исследования

2.2.1. Серологические и молекулярные методы исследования.

2.2.2. Анализ нуклеотидных последовательностей ВГВ.

2.2.3. Микроскопическое и иммунохимическое исследование биоптатов печени.

2.2.4. Статистические методы исследования.

Глава 3. Результаты обследования населения Республики Тыва.

Глава 4. Выявление скрытой ВГВ-инфекции среди

HBsAg-нeгaтивныx пациентов с ХГС.

Глава 5. Результаты обследования пациентов с

HBsAg-нeгaтивными ХЗП различной этиологии.

Глава 6. Анализ нуклеотидных последовательностей участков генома ВГВ, выделенных от пациентов со скрытой ВГВ-инфекцией.

Глава 7. Обсуждение.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Скрытая инфекция, вызванная вирусом гепатита В: эпидемиологическая, вирусологическая и клинико-морфологическая характеристика»

Актуальность темы

Гепатит В (ГВ) представляет собой важнейшую медико-социальную проблему мирового здравоохранения. Считается, что ВГВ-инфекцию перенесло более половины населения Земли, при этом около 350 млн. имеют хронический гепатит В (ХГВ). Каждый год в мире регистрируется более 4 млн. случаев острого гепатита В (ОГВ) и около 1 млн. смертей в результате ВГВ-ассо-циированной патологии печени. До половины хронически инфицированных лиц погибают от таких осложнений заболевания, как печеночная недостаточность, цирроз печени (ЦП) и гепатоцеллюлярная карцинома (ГЦК) [6]. В странах Азии и Африки ГЦК, ассоциированная с ВГВ-инфекцией, занимает ведущее место в структуре онкопатологии. Данная проблема существует и на территории Российской Федерации, имеющей регионы, эндемичные по ВГВ-инфекции. Высокий уровень заболеваемости, возможность хронизации инфекции, а также утрата больными трудоспособности и возможность летальных исходов влекут за собой огромный демографический и экономический ущерб для государства.

Открытие В.Б. В1шпЬег§ [15] поверхностного антигена ВГВ (HBsAg) в сыворотке крови австралийских аборигенов в 1965 г., последующее использование этого открытия в диагностике ГВ и создание вакцины сыграли решающую роль в предотвращении инфицирования миллионов людей. Появление методов детекции и количественной оценки ДНК ВГВ в сыворотке крови и ткани печени позволило повысить чувствительность выявления ВГВ-инфек-ции, определить критерии начала лечения и разработать способы оценки его эффективности, а секвенирование вирусной ДНК расширило возможности применения индивидуального подхода в лечении каждого пациента. Кроме того, на основании анализа нуклеотидных замен в ДНК вируса стало возможным оценить риск формирования резистентности при использовании того или иного противовирусного средства.

До недавнего времени считалось, что клинически ВГВ-инфекция может протекать в одной из трех форм (Санитарные правила РФ 3.1.1.2341-08):

1. острый ГВ (ОГВ), характеризующийся симптомами острого поражения печени и интоксикации (с желтухой или без нее) и отличающийся многообразием клинических проявлений и исходов заболевания;

2. хронический гепатит В (ХГВ), характеризующийся длительным воспалительным поражением печени, которое может переходить в более тяжелое заболевание — цирроз и первичный рак печени, оставаться без изменений или регрессировать под влиянием лечения или спонтанно;

3. длительное персистирование поверхностного антигена ВГВ (HBsAg) в сыворотке крови пациентов при отсутствии клинически выраженного гепатита.

Необходимым условием для диагностики ВГВ-инфекции, протекающей в одной из описанных форм, является определение НВбА§ в сыворотке крови.

Однако, еще в 1978 г. был зарегистрирован случай развития острого ГВ у реципиента после переливания крови, содержащей антитела к капсидному белку ВГВ (анти-НВс) в отсутствие HBsAg и антител к нему (анти-НВэ). В дальнейшем было показано, что ДНК вируса может определяться в сыворотке крови и ткани печени пациентов, у которых доступными методами не выявлялся сывороточный НВзА§. Данное явление получило название «скрытая (латентная) ВГВ-инфекция».

Следует отметить, что НВбА§ по-прежнему является основным, а порой и единственным маркером ВГВ, определяемым у доноров крови и других тканей. Так, в РФ в соответствии с санитарно-эпидемиологическими правилами СП 3.1.1.2341-08 для исключения ВГВ-инфекции у доноров крови используется только определение НВзА§.

В Международной классификации болезней Десятого пересмотра фигурирует диагноз «Хронический гепатит неуточненный» (К73.9), который ставится на основании наличия у пациентов гепатита при отсутствии данных о вирусном, токсическом, аутоиммунном или ином поражении печени. Само определение скрытой ВГВ-инфекции свидетельствует о том, что диагностический поиск, ограниченный исследованием НВзА§, окажется неэффективным, а инфицированные лица пополнят группу пациентов с гепатитом неустановленной этиологии.

Другим важным фактором, диктующим необходимость глубокого исследования скрытой ВГВ-инфекции, является возможность ее присутствия при ко-инфекции другими вирусами. Известно, что коинфекция ВГВ у пациентов с хроническим гепатитом С (ХГС) может в значительной мере сказываться на течении заболевания, уровне вирусной нагрузки, а также эффективности лечения. Отсутствие информации об особенностях течения ХГС при коинфек-ции ВГВ, протекающей в скрытой форме, не позволяет разработать рекомендации ведения соответствующих пациентов.

Необходимость исследования распространенности скрытой ВГВ-инфекции в различных группах населения также обусловлена ее возможным онко-генным потенциалом. ВГВ был одним из первых вирусов, для которых была подтверждена связь с канцерогенезом у человека. По разным оценкам ВГВ-инфекция является причиной формирования 60-80% случаев ГЦК, регистрируемых в мире [45]. Известно, что даже пациенты, имевшие ХГВ и утратившие НВзА§, находятся в группе риска формирования ГЦК. При этом факторами риска являются: перинатальное заражение, более 30 лет серопозитивно-сти по HBsAg и наличие цирроза печени [31].

Несмотря на возросший интерес к проблеме скрытой ВГВ-инфекции, наблюдающийся в последние годы, до настоящего момента не существует единого представления о распространенности данного явления в различных группах населения, а также его клинической значимости. Значительные расхождения в получаемых разными исследователями данных о распространенности скрытой ВГВ-инфекции связаны с использованием при определении HBsAg и ДНК ВГВ методов с различной чувствительностью, а также с тем, применялись ли в ходе исследования методы выявления ВГВ в ткани печени. Наиболее современные из применяемых тест-систем для иммуноферментного определения НВэА§ позволяют детектировать его в концентрации 0,01 нг/мл сыворотки крови. До настоящего времени результаты определения распространенности скрытой ВГВ-инфекции при использовании таких тест-систем не приводились. Кроме того, на настоящий момент наблюдается нехватка данных о патоморфологических изменениях в ткани печени при скрытой ВГВ-инфекции.

Цель работы

Определить эпидемиологические, молекулярно-вирусологические и клини-ко-морфологические особенности скрытой ВГВ-инфекции у лиц с высоким риском инфицирования ВГВ и пациентов с хроническими заболеваниями печени неуточненной этиологии.

Задачи

1. Определить встречаемость скрытой ВГВ-инфекции среди условно здорового населения Республики Тыва — региона РФ, эндемичного по гепатиту В.

2. Выявить скрытую ВГВ-инфекцию у НВБА§-негативных пациентов с хроническими заболеваниями печени, распространенными на территории РФ.

3. Дать молекулярную и клинико-морфологическую характеристику скрытой ВГВ-инфекции.

4. На основании результатов исследования оптимизировать алгоритм диагностики скрытой ВГВ-инфекции у лиц с высоким риском инфицирования ГВ и пациентов с ХЗП неустановленной этиологии.

Положения, выносимые на защиту

1. С использованием высокочувствительных методов детекции маркеров ВГВ (НВбА§ определялся тест-системой с чувствительностью 0,01 нг/мл; ДНК ВГВ — <125 копий/мл) установлена частота встречаемости скрытой ВГВ-инфекции среди условно здорового населения региона РФ, гиперэндемичного по ГВ (Республика Тыва) — 0,42%.

2. Выявленные случаи скрытой ВГВ-инфекции характеризуются минимальными клинико-биохимическими и морфологическими изменениями, а также низким уровнем виремии и отсутствием в структуре HBsAg аминокислотных замен, способных повлиять на эффективность его детекции в иммуноферментном анализе.

3. Определение ДНК ВГВ в гепатобиоптатах методом ПЦР с последующим электронномикроскопическим исследованием и иммуноцитохимической детекцией вирусных белков в рамках алгоритма обследования HBsAg-нe-гативных пациентов с хроническими заболеваниями печени позволяет выявлять скрытую ВГВ-инфекцию в ранее не диагностированных случаях.

Научная новизна

1. Скрытая ВГВ-инфекция в регионах с различной эндемичностью по ГВ выявлялась с использованием иммуноферментных тест-систем с высокой чувствительностью (HBsAg — 0,01 нг/мл).

2. С использованием электронной микроскопии и иммунохимических методов исследования биоптатов печени пациента со скрытой ВГВ-инфекцией проведено описание клеточных структур гепатоцитов.

3. По результатам анализа фрагментов последовательностей 8-гена ВГВ, выделенных из образцов сыворотки крови и ткани печени пациентов со скрытой ВГВ-инфекцией, показана их генетическая разнородность.

4. Представлены данные подтверждают нецелесообразность дальнейшего расширения спектра антител, используемых в тест-системах для иммуно-ферментного выявления НВбА§ при диагностике скрытой ВГВ-инфекции.

5. Предложено расширение алгоритма диагностики скрытой ВГВ-инфекции у лиц с высоким риском инфицирования ГВ и пациентов с хроническими заболеваниями печени неустановленной этиологии путем определения ДНК ВГВ в гепатобиоптате с последующим применением электронной микроскопии и иммунохимических методов детекции вирусных антигенов.

Практическая значимость

1. В ходе проведенного исследования установлено, что возможность диагностики скрытой ВГВ-инфекции зависит от чувствительности применяемых серологических, молекулярно-вирусологических и морфологических методов.

2. Применение предложенного алгоритма диагностики скрытой ВГВ-инфекции у лиц с высоким риском инфицирования ХЗП позволяет уточнить этиологию заболевания у лиц с гепатитом неустановленного генеза.

3. Дальнейшее улучшение серологической диагностики скрытой ВГВ-ин-фекции путем внесения антител к новым антигенным эпитопам при разработке иммуноферментных тест-систем является нецелесообразным.

Внедрение результатов и апробация работы

Алгоритм диагностики скрытой ВГВ-инфекции у лиц с высоким риском инфицирования ГВ и пациентов с хроническими заболеваниями печени неустановленной этиологии внедрен и применяется в научно-исследовательской работе клинического отделе и отдела вирусных гепатитов ИПВЭ им. М.П. Чумакова РАМН.

Материалы диссертационной работы представлены в виде постерного доклада Р-39 на международном конгрессе по вирусным гепатитам 13th International Symposium on Viral Hepatitis and Liver Disease (2009 г., Вашингтон), на VIH Российской конференции с международным участием «Вирусные гепатиты» (2009 г., пос. Московский, РФ), на XI Славяно-Балтийском научном форуме (2009 г., г. Санкт-Петербург), на XV Российской гастроэнтерологической неделе (2009 г., г. Москва), УШ Международном симпозиуме гепатологов Республики Беларусь «Актуальные вопросы гепатологии» (2009 г., Могилев, Республика Беларусь), ХУЛ Российском Национальном конгрессе «Человек и лекарство» (2010 г., г. Москва).

Апробация диссертации состоялась 19 августа 2010 г. на заседании Ученого совета Института полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П. Чумакова РАМН (протокол №1 от 19 августа 2010 г.).

Публикации по теме диссертации

По теме диссертации опубликовано 7 научных работ, в том числе 2 статьи — в реферируемых журналах ВАК.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 115 страницах текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, 4 глав собственных исследований и обсуждения полученных результатов, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, включающего 6 отечественных и 103 зарубежных источника. Диссертационная работа иллюстрирована 25 таблицами, 15 рисунками и имеет 2 иллюстрированных приложения.

Заключение диссертации по теме «Вирусология», Гордейчук, Илья Владимирович

Выводы

1. Встречаемость скрытой ВГВ-инфекции среди условно здорового населения Республики Тыва — региона, эндемичного по ВГВ-инфекции, оцененная с использованием тест-системы для диагностики НВбА§ с чувствительностью 0,01 нг/мл и ПЦР с чувствительностью <125 копий ДНК ВГВ/мл, составила 0,42% (2/481).

2. Исследование сывороток крови HBsAg-нeгaтивныx лиц в неэндемичном по ВГВ регионе РФ (г. Москва) показало, что вероятность присутствия скрытой ВГВ-инфекции низкая даже в группах пациентов с повышенным риском инфицирования ВГВ. При исследовании сывороток крови 200 пациентов с ХГС и 142 пациентов с НВзАц-негативными ХЗП ни одного случая скрытой ВГВ-инфекции выявлено не было. ДНК ВГВ была обнаружена в биоптате печени у 1 из 50 пациентов с HBsAg-нeгaтивными ХЗП.

3. Выявление морфологических признаков гепатита и фиброза печени при углубленном анализе случая скрытой ВГВ-инфекции свидетельствует о клинической значимости данной формы инфекции.

4. Ни в одном из случаев скрытой ВГВ-инфекции в нуклеотидных последовательностях вирусного генома не было выявлено мутаций, способных обусловить снижение эффективности детекции HBsAg в иммунофермент-ных тест-системах. У всех пациентов со скрытой ВГВ-инфекцией отсутствие HBsAg в сыворотке крови ассоциировалось с низким уровнем вирусной нагрузки.

5. Разработан алгоритм диагностики скрытой ВГВ-инфекции среди лиц с высоким риском инфицирования ГВ и пациентов с хроническим гепатитом неустановленной этиологии, включающий исследование биоптатов печени с применением молекулярных, электронномикроскопических и иммуноцитохимических методов.

Практические рекомендации

1. В обследование пациентов ХЗП неуточненной этиологии необходимо включать диагностический поиск скрытой ВГВ-инфекции.

2. Использование высокочувствительных методов определения HBsAg (чувствительность теста не менее 0,01 нг/мл) и ДИК ВГВ (чувствительность теста не менее 100-150 копий/мл) позволит улучшить диагностику ВГВ-инфекции и снизить вероятность ее трансмиссии от HBsAg-нeгaтивныx пациентов.

3. Диагностика скрытой ВГВ-инфекции у пациентов с ХЗП неустановленной этиологии должна проводиться с определением ДНК ВГВ в ткани печени, а также с использованием специфических морфологических методов (электронная микроскопия, иммуногистохимическое и иммуноцито-химическое исследования).

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Гордейчук, Илья Владимирович, 2011 год

1. Вирусные гепатиты в Российской Федерации 2009. Справочник / Под ред. Г.Г. Онищенко, А.Б. Жербуна. — СПб.: НИЭМ им. Пастера, 2009. — С. 17-41.

2. Ганина А. Лабораторная диагностика и эпидемиология скрытого HBsAg-негативного гепатита В // Труды Института полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П.Чумакова. — 2007. — №24. — С. 163— 170.

3. Идрисова Л.Р, Кюрегян К.К., Лопаткина Т.Н. и др. Применение высокочувствительной ПЦР для выявления крытой HBV-инфекции у больных с хроническими гепатитами // Клиническая и лабораторная диагностика. — 2005. — № 9. — С. 54.

4. Подымова С.Д. Болезни печени. 3-е изд. — М.: Медицина, 1998. — 708 с.

5. Шахгильдян И.В., Михайлов М.И., Онищенко Г.Г. Парентеральные вирусные гепатиты (эпидемиология, диагностика, профилактика). — М.: ФГОУ «ВУНМЦ Росздрава», 2003. — С. 22-27.

6. Aach R.D., Alter H.J., Hollinger F.B. et al. Risk of transfusing blood containing antibody to hepatitis-B surface antigen // Lancet. — 1974. —Vol. —2. —P. 190-193.

7. Aoki M., Saito Т., Watanabe H. et al. Clinical significance of a highly sensitive enzyme immunoassay of hepatitis В surface antigen using a novel electron spin resonance technique // J. Med. Virol. — 2002. — Vol. 2. — P. 166-170.

8. Bartenschlager R., Junker-Niepmann M., Schaller H. The P gene product of hepatitis B virus is required as a structural component for genomic RNAencapsidation// J. Virol. — 1990. — Vol. 11. —P. 5324-5332.

9. Beck J., Nassal M. Hepatitis B virus replication // World J. Gastroenterol. — 2007. — Vol. 1. — P. 48-64.

10. Bellecave P., Gouttenoire J., Gajer M. et al. Hepatitis B and C virus coinfection: a novel model system reveals the absence of direct viral interference // Hepatology. — 2009. — Vol. 1. — P. 46-55.

11. Berasain C., Betes M., Panizo A. et al. Pathological and virological findings in patients with persistent hypertransaminasaemia of unknown aetiology // Gut. — 2000. — Vol. 3. — P. 429-435.

12. Besisik F., Karaca C., Akyuz F. et al. Occult HBV infection and YMDD variants in hemodialysis patients with chronic HCV infection // J. Hepatol.2003. — Vol. 4. — P. 506-510.

13. Bloquel B., Jeulin H., Burty C. et al. Occult hepatitis B infection in patients infected with HIV: report of two cases of hepatitis B reactivation and prevalence in a hospital cohort // J. Med. Virol. — 2010. — Vol. 2. — P. 206-212.

14. Blumberg B.S., Alter H.J., Visnich S. A "new" antigen in leukemia sera // JAMA. —1965. —Vol. 191. —P. 541-546.

15. Bock C.T., Schwinn C., Locarnini S. et al. Structural organization of the hepatitis B virus minichromosome // J. Mol. Biol. — 2001. — Vol. 1. — P. 183-196.

16. Brechot C. Pathogenesis of hepatitis B virus-related hepatocellular carcinoma: old and new paradigms // Gastroenterology. — 2004. —Vol. 5.1. P. 56-61.

17. Cacciola I., Pollicino T., Squadrito G. et al. Occult hepatitis B virus infection in patients with chronic hepatitis C liver disease // N. Engl. J. Med. — 1999.1. Vol. 1. —P. 22-26.

18. Cacoub P., Terrier B. Hepatitis B-related autoimmune manifestations // Rheum. Dis. Clin. North Am. — 2009. — Vol. 1. — P. 125-137.

19. Carman W.F. The clinical significance of surface antigen variants of hepatitis B virus // J. Viral Hepat. — 1997. — Vol. 4. — P. 11-20.

20. Carman W.F., Korula J., Wallace L. et al. Fulminant reactivation of hepatitis B due to envelope protein mutant that escaped detection by monoclonal HBsAg ELISA// Lancet. — 1995. — Vol. 345. — P. 1406-1407.

21. Carman W.F., Zanetti A.R., Karayiannis P. et al. Vaccine-induced escape mutant of hepatitis B virus // Lancet. — 1990. —Vol. 336. — P. 325-329.

22. Chan H.L. Tsang S.W-C., Leung N.W-Y. et al. Occult HBV infection in cryptogenic liver cirrhosis in an area with high prevalence of HBV infection //Am. J. Gastroenterol. — 2002. — Vol. 5. — P. 1211-1215.

23. Chazouilléres O., Mamish D., Kim M. et al. "Occult" hepatitis B virus as source of infection in liver transplant recipients // Lancet. — 1994. — Vol. 343. —P. 142-146.

24. Chemin I., Zoulim F., Merle P. et al. High incidence of hepatitis B infections among chronic hepatitis cases of unknown aetiology // J. Hepatol. — 2001. — Vol. 3.—P. 447-454.

25. Chen C., Yang H., Iloeje U.H. Hepatitis B virus DNA levels and outcomes in chronic hepatitis B // Hepatology. — 2009. — Vol. 5. — P. 72-84.

26. Chen D.S. Natural history of chronic hepatitis B virus infection: new light on an old story // J. Gastroenterol. Hepatol. — 1993. — Vol. 5. — P. 470-475.

27. Cheung W., Chan H.L-Y., Leung V.K-S. et al. Reactivation of hepatitis B virus infection with persistently negative HBsAg on three HBsAg assays in alymphoma patient undergoing chemotherapy // J. Clin. Virol. — 2010. — Vol. 2. —P. 193-195.

28. Chisari F.V., Pasquinelli C., Shoenberger J.M., et al. Hepatitis С virus core and E2 protein expression in transgenic mice // Hepatology. — 1997. —Vol. 3.—P. 719-727.

29. Chon C.Y., Ahn S.H., Park Y.N et al. Long-term clinical and histological outcomes in patients with spontaneous hepatitis В surface antigen seroclearance // J. Hepatol.— 2005. —Vol.42. — P. 188-194.

30. Dhédin N., Douvin C., Kuentz M. et al. Reverse seroconversion of hepatitis В after allogeneic bone marrow transplantation: a retrospective study of 37 patients with pretransplant anti-HBs and anti-HBc // Transplantation. — 1998. — Vol. 5. — P. 616-619.

31. Douglas D.D., Rakela J., Wright T.L., Krom R.A. et al. The clinical course of transplantation-associated de novo hepatitis В infection in the liver transplant recipient // Liver Transpl Surg. — 1997. — Vol. 2. — P. 105-111.

32. Echevarría J., González R., Torres P. et al. Efficacy of hepatitis В virus (HBV) DNA screening and characterization of acute and occult HBV infections among blood donors from Madrid, Spain // Transfusion. — 2010.1. Vol. 1. —P. 221-230.

33. El-Sherif A., Abou-Shady M., Abou-Zeid H. et al. Antibody to hepatitis В core antigen as a screening test for occult hepatitis В virus infection in Egyptian chronic hepatitis С patients // J. Gastroenterol. — 2009. — Vol. 4.1. P. 359-364.

34. Felsenstein J. Confidence limits on phylogenies: An approach using the bootstrap // Evol. — 1985. — Vol. 39. — P. 783-791.

35. Ganem D., Prince A.M. Hepatitis B virus infection — natural history and clinical consequences // N. Engl. J. Med. — 2004. — Vol. 11. — P. 1118— 1129.

36. Gerlich W.H., Brener C., Saniewski M. et al. Occult hepatitis B virus infection: detection and significance // Dig Dis. — 2010. — Vol. 1. — P. 116-125.

37. Gerlich W.H., Glebe D., Schüttler C.G. Deficiencies in the standardization and sensitivity of diagnostic tests for hepatitis B virus // J. Viral Hepat. — 2007. —Vol. 1.—P. 16-21.

38. Gu H., Fang Y., Shang Q.L. et al. Prevalence of occult hepatitis B virus infection among hepatopathy patients and healthy people in China // J. Infect. — 2009. — Vol. 5. — P. 383-388.

39. Hamatake R.K., Lau J.Y.N. Hepatitis B and B protocols // Humana press Inc.2004. —Vol.1.

40. Hass M., Hannoun C., Kalinina T. et al. Functional analysis of hepatitis B virus reactivating in hepatitis B surface antigen-negative individuals // Hepatology. — 2005. — Vol. 1. — P. 93-103.

41. Hepatitis B virus edited by Lai C.L. & Locarnini S. 2-nd edition. — International Medical Press Ltd, 2008.

42. Hollinger F.B. Hepatitis B virus infection and transfusion medicine: science and the occult // Transfusion. — 2008. — Vol. 5. — P. 1001-1026.

43. Hoofnagle J.H. Reactivation of hepatitis B // Hepatology. — 2009. — Vol. 5.1. P. 156-165.

44. Hoofnagle J.H., Carithers R.L., Shapiro C., Ascher N. Fulminant hepatic failure: summary of a workshop // Hepatology. — 1995. —Vol. 1. — P. 240-252.

45. Hui C., Leung N., Yuen S-T. et al. Natural history and disease progression in Chinese chronic hepatitis B patients in immune-tolerant phase // Hepatology.2007. — Vol. 2. —P. 395-401.

46. Hui C., Sun J., Au W.Y. et al. Occult hepatitis B virus infection in hematopoietic stem cell donors in a hepatitis B virus endemic area // J. Hepatol. — 2005. — Vol. 6. — P. 813-819.

47. Hunt C.M., McGill J.M., Allen M.I., Condreay L.D. Clinical relevance of hepatitis B viral mutations // Hepatology. — 2000. — Vol. 5. — P. 10371044.

48. Ie S.I., Thedja M.D., Roni M. et al. Prediction of Conformational Changes by Single Mutation in the Hepatitis B Virus Surface Antigen (HBsAg) Identified in HBsAg-Negative Blood Donors // Virol J. — 2010. — Vol. 1.1. P. 326.

49. Iizuka H., Ohmura K.5 Ishijima A. Correlation between anti-HBc titers and HBV DNA in blood units without detectable HBsAg // Vox Sang. — 1992.1. Vol. 2. —P. 107-111.

50. Ilan Y., Nagler A., Zeira E. et al. Maintenance of immune memory to the hepatitis B envelope protein following adoptive transfer of immunity in bone marrow transplant recipients // Bone Marrow Transplant. — 2000. — Vol. 6.1. P. 633-638.

51. Jeantet D. Chemin I., Mandrand B. et al. Cloning and expression of surface antigens from occult chronic hepatitis B virus infections and their recognition by commercial detection assays // J. Med. Virol. — 2004. —Vol. 4. —P. 508-515.

52. Kao J. Diagnosis of hepatitis B virus infection through serological and virological markers // Expert Rev Gastroenterol Hepatol. — 2008. — Vol. 4.1. P. 553-562.

53. Katchaki J.N., Siem T.H., Brouwer R. Serological evidence of presence of HBsAg undetectable by conventional radioimmunoassay in anti-HBc positive blood donors // J. Clin. Pathol. — 1978. — Vol. 9. — P. 837-839.

54. Katz L.H., Fraser A., Gafter-Gvili A. et al. Lamivudine prevents reactivation of hepatitis B and reduces mortality in immunosuppressed patients: systematic review and meta-analysis // J. Viral Hepat. — 2008. — Vol. 2. — P. 89-102.

55. Khudyakov Y. Coevolution and HBV drug resistance // Antivir. Ther. (Lond.). —2010. — Vol. 3. — P. 505-515.

56. Kimbi G.C., Kramvis A., Kew M.C. Integration of hepatitis B virus DNA into chromosomal DNA during acute hepatitis B // World J. Gastroenterol. — 2005. — Vol. 41. — P. 6416-6421.

57. Komori M., Yuki N., Nagaoka T. et al. Long-term clinical impact of occult hepatitis B virus infection in chronic hepatitis B patients // J. Hepatol. — 2001. — Vol. 6. — P. 798-804.

58. Lalazar G., Rund D., Shouval D. Screening, prevention and treatment of viral hepatitis B reactivation in patients with haematological malignancies // Br. J. Haematol. — 2007. — Vol. 5. — P. 699-712.

59. Lavanchy D. Hepatitis B virus epidemiology, disease burden, treatment, and current and emerging prevention and control measures // J. Viral Hepat. — 2004. — Vol. 2. — P. 97-107.

60. Leistner C.M., Gruen-Bernhard S., Glebe D. Role of glycosaminoglycans for binding and infection of hepatitis B virus // Cell. Microbiol. — 2008. —Vol. 1. —P. 122-133.

61. Leung N. Chronic hepatitis B in Asian women of childbearing age // Hepatol Int. — 2009. — Vol. 3. — P. 24-31.

62. Levast M., Larrat S., Thelu M-A. et al. Prevalence and impact of occult hepatitis B infection in chronic hepatitis C patients treated with pegylated interferon and ribavirin // J. Med. Virol. — 2010. — Vol. 5. — P. 747-754.

63. Loriot M.A., Marcellin P., Walker F. et al. Persistence of hepatitis B virus DNA in serum and liver from patients with chronic hepatitis B after loss of HBsAg // J. Hepatol. — 1997. — Vol. 2. — P. 251-258.

64. Luo K., Hou J., Wang Z. et al . Prevalence of naturally occurring surface gene variants of hepatitis B virus in nonimmunized surface antigen-negative Chinese carriers // Hepatology. — 2001. — Vol. 5. — P. 1027-1034.

65. Madejon A., Manzano M.L., Arocena C. et al. Effects of delayed freezing of liver biopsies on the detection of hepatitis C virus RNA strands // J. Hepatol. — 2000.—Vol. 6.—P. 1019-1025.

66. Marusawa H., Uemoto S., Hijikata M. et al. Latent hepatitis B virus infection in healthy individuals with antibodies to hepatitis B core antigen // Hepatology. — 2000. — Vol. 2. — P. 488-495.

67. Mason A., Sallie R., Perrillo R. et al. Prevalence of herpesviridae and hepatitis B virus DNA in the liver of patients with non-A, non-B fulminant hepatic failure // Hepatology. — 1996. — Vol. 6. — P. 1361-1365.

68. Matsuoka S., Moriyama K., Nirei K. et al. Influence of occult hepatitis B virus coinfection on the incidence of fibrosis and hepatocellular carcinoma in chronic hepatitis C // Intervirology. — 2008. — Vol. 5. — P. 352-361.

69. McMahon B.J., Hoick P., Bulkow L., Snowball M. Serologic and clinical outcomes of 1536 Alaska Natives chronically infected with hepatitis B virus // Ann. Intern. Med. — 2001. — Vol. 9. — P. 759-768.

70. Medrano F.J., Sanchez-Quijano A., Pineda J., Lissen E. Isolated anti-HBc and hepatitis B virus occult infection // Vox Sang. — 1991. — Vol. 2. — P. 140.

71. Nakajima E., Fujii H., Moriyama K. et al. Glyl45 to Arg substitution in HBs antigen of immune escape mutant of hepatitis B virus // Biochem. Biophys. Res. Commun. — 1992. — Vol. 3. — P. 1152-1157.

72. Nassal M., Junker-Niepmann M., Schaller H. Translational inactivation of RNA function: discrimination against a subset of genomic transcripts during HBV nucleocapsid assembly// Cell. — 1990. — Vol. 6. — P. 1357-1363.

73. Neau D., Lafon M-E., Dabis F., Winnock M. Occult hepatitis B virus infection in HIV-infected patients with isolated antibodies to hepatitis B core antigen: Aquitaine cohort, 2002-2003 // Clin. Infect. Dis. — 2005. — Vol. 5.1. P. 750-753.

74. Norman J.E., Beebe G.V., Hoofnagle J.H., Seff L.B. Mortality follow-up of the 1942 epidemic of hepatitis B in the U.S. Army // Hepatology. — 1993. — Vol. 4. —P. 790-797.

75. Ogata N. Zanetti A.R., Yu M. et al. Infectivity and pathogenicity in chimpanzees of a surface gene mutant of hepatitis B virus that emerged in a vaccinated infant // J. Infect. Dis. — 1997. — Vol. 3. — P. 511-523.

76. Okamoto H., Omi S., Wang Y. et al. The loss of subtypic determinants in alleles, d/y or w/r, on hepatitis B surface antigen // Mol. Immunol. — 1989.1. Vol. 2.—P. 197-205.

77. Onozawa M., Hashino S., Darmanin S. HB vaccination in the prevention of viral reactivation in allogeneic hematopoietic stem cell transplantation recipients with previous HBV infection // Biol. Blood Marrow Transplant. — 2008.—Vol. 11. —P. 1226-1230.

78. Pollicino T., Navarra G., Mondello S. et al. Occult hepatitis B virus in liver tissue of individuals without hepatic disease // J. Hepatol. — 2008. — Vol. 5.1. P. 743-746.

79. Pollicino T., Raimondo G., Navarra G., et al. Occult hepatitis B virus in liver tissue of individuals without hepatic disease // J. Hepatol. — 2008. — Vol. 5.1. P. 743-746.

80. Prange R., Weir M., Loffler-Mary H. Chaperones involved in hepatitis B virus morphogenesis // Biol. Chem. — 1999. — № 3. — P. 305-314.

81. Saisho H., Imamura T., Yokosuka O. et al. Lamivudine treatment in a patient with hepatitis B virus reactivation after allogenic peripheral bone marrow transplantation // Leuk. Lymphoma. — 2005. — Vol. 6. — P. 915-917.

82. Saitou N., Nei M. The neighbor-joining method: A new method for reconstructing phylogenetic trees // Molec. Biol. Evol. — 1987. — Vol. 4. — P. 406-425.

83. Saldanha J., Gerlich W., Leile N. et al. An international collaborative study to establish a World Health Organization international standard for hepatitis B virus DNA nucleic acid amplification techniques // Vox Sang. — 2001. — Vol. 1. —P. 63-71.

84. Satake M., Taira R., Yugi H. et al. Infectivity of blood components with low hepatitis B virus DNA levels identified in a lookback program // Transfusion.2007.—Vol. 47.—P. 1197-1205.

85. Seitz S., Urban S., Antoni C., Böttcher B. Cryo-electron microscopy of hepatitis B virions reveals variability in envelope capsid interactions // EMBO J. —2007. —Vol. 18. —P. 4160-4167.

86. Sengupta S., Rehman S., Durgapal H. et al. Role of surface promoter mutations in hepatitis B surface antigen production and secretion in occult hepatitis B virus infection // J. Med. Virol. — 2007. — Vol. 3. — P. 220-228.

87. Sheldon J., Soriano V. Hepatitis B virus escape mutants induced by antiviral therapy // J. Antimicrob. Chemother. — 2008. — Vol. 4. — P. 766-768.

88. Sherlock S., Parbhoo S.P. The management of acute hepatic failure // Postgrad Med J. — 1971. — Vol. 47. — P. 493-498.

89. Shire N.J., Rouster S.D., Rajicic N., Sherman K.E. Occult hepatitis B in HIV-infected patients // J. Acquir. Immune Defic. Syndr. — 2004. —Vol. 3.1. P. 869-875.

90. Simonetti J., Bulkow L., McMahon B.J. et al. Clearance of hepatitis B surface antigen and risk of hepatocellular carcinoma in a cohort chronically infected with hepatitis B virus // Hepatology. — 2010. — Vol. 5. — P. 1531— 1537.

91. Tallo T., Tefanova V., Priimagi L. D2: major subgenotype of hepatitis B virus in Russia and the Baltic region // J Gen Virol. — 2008. — Vol. 8. — P.• 1829-1839.

92. Tamura K., Dudley J., Nei M., Kumar S. Molecular Evolutionary Genetics Analysis (MEGA) software version 4.0 // Molec. Biol. Evol. — 2007. — Vol. 24.—P. 1596-1599.

93. Teo E.K., Ostapowicz G., Hussain M. et al. Hepatitis B infection in patients with acute liver failure in the United States // Hepatology. — 2001. — Vol. 4.1. P. 972-976.

94. Torbenson M., Kannangai R., Astemborski J. et al. High prevalence of occult hepatitis B in Baltimore injection drug users // Hepatology. — 2004. — Vol. 1. —P. 51-57.

95. Torres-Baranda R., Bastidas-Ramírez B.E., Maldonado-González M., Sánchez-Orozco L.V. Occult hepatitis B in Mexican patients with HIV, an analysis using nested polymerase chain reaction // Ann Hepatol. — 2006. — Vol. 1. —P. 34-40.

96. Wachs M.E., Amend W.J., Acher N.L. et al. The risk of transmission of hepatitis B from HBsAg(-), HBcAb(+), HBIgM(-) organ donors // Transplantation. — 1995. —Vol. 2. — P. 230-234.

97. Wagner A.A., Denis F., Weinbreck P. et al. Serological pattern 'anti-hepatitis B core alone' in HIV or hepatitis C virus-infected patients is not fully explained by hepatitis B surface antigen mutants //AIDS. — 2004. —Vol. 3. — P. 569-571.

98. Wang J.T., Sheu J.C., Lin J.T. et al. Minimal role of hepatitis B virus in posttransfusion non-A, non-B hepatitis in Taiwan: a study by polymerase chain reaction // J. Formos. Med. Assoc. — 1991. —Vol. 5. — P. 471-475.

99. Yang M., Li 1., Hung Y.S. et al. The efficacy of individual-donation and minipool testing to detect low-level hepatitis B virus DNA in Taiwan // Transfusion. — 2010. — Vol. 1. — P. 65-74.

100. Yotsuyanagi H., Hino K., Kimura S. et al. Frequent presence of HBV in the sera of HBsAg-negative, anti-HBc-positive blood donors // Transfusion. — 2001.—Vol.9. —P. 1093-1099.