Совершенствование технологии клонального микроразмножения флокса метельчатого (Phlox paniculata L.) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.01.08, кандидат наук Мазаева Анна Сергеевна

  • Мазаева Анна Сергеевна
  • кандидат науккандидат наук
  • 2019, ФГБОУ ВО «Российский государственный аграрный университет - МСХА имени К.А. Тимирязева»
  • Специальность ВАК РФ06.01.08
  • Количество страниц 191
Мазаева Анна Сергеевна. Совершенствование технологии клонального микроразмножения флокса метельчатого (Phlox paniculata L.): дис. кандидат наук: 06.01.08 - Виноградарство. ФГБОУ ВО «Российский государственный аграрный университет - МСХА имени К.А. Тимирязева». 2019. 191 с.

Оглавление диссертации кандидат наук Мазаева Анна Сергеевна

Введение

1. Обзор литературы

1.1. История культуры и классификация современных сортов флокса метельчатого

1.2. Традиционные способы вегетативного размножения растений флокса метельчатого

1.3. Использование методов биотехнологии в системе воспроизводства растений флокса метельчатого

1.3.1. Этап введения в культуру

1.3.2. Этап мультипликации

1.3.3. Этап ризогенеза

1.3.4. Этап адаптации к нестерильным условиям

1.4. Методы длительного хранения in vitro растений в состоянии замедленного роста

2. Экспериментальная часть

2.1. Место проведения, условия и объекты исследований

2.2. Методика исследований

2.2.1. Этап введения в культуру

2.2.2. Депонирование

2.2.3. Этап мультипликации

2.2.4. Этап ризогенеза

2.2.5. Этап адаптации к нестерильным условиям

2.2.6. Морфологические и фенологические особенности при выращивании

2.3. Результаты исследований

2.3.1. Совершенствование способов введения флокса метельчатого

в культуру in vitro

2.3.1.1. Влияние способов стерилизации на приживаемость эксплантов

2.3.1.2. Определение оптимального места выращивания исходного материала для введения флокса метельчатого в культуру in vitro

2.3.1.3. Влияние БАВ с цитокининовой активностью на приживаемость эксплантов на этапе введения в культуру

2.3.2. Выявление условий длительного депонирования флокса метельчатого в условиях замедленного роста при низких положительных температурах

2.3.3 Совершенствование элементов технологии клонального микроразмножения флокса метельчатого на этапе мультипликации

2.3.3.1. Подбор минерального состава питательной среды

2.3.3.2. Выявление оптимальной длительности субкультивирования

2.3.4. Совершенствование элементов технологии клонального микроразмножения флокса метельчатого на этапе ризогенеза

2.3.4.1. Разработка элементов трехэтапной, энерго- и ресурсосберегающей технологии клонального микроразмножения с использованием синтетических цитокининов

2.3.4.2. Разработка элементов трехэтапной, энерго- и ресурсосберегающей технологии клонального микроразмножения с применением синтетических цитокининов и ауксинов

2.3.5 Этап адаптации регенерантов к нестерильным условиям

2.3.5.1. Влияние состава субстрата на приживаемость микрорастений флокса метельчатого на этапе адаптации

2.3.6. Морфологические и фенологические особенности развития флокса метельчатого в зависимости от способов вегетативного размножения

3. Экономическая оценка клонального микроразмножения флокса метельчатого по трехэтапной технологии

Заключение

Список использованной литературы Приложения

133

Рекомендованный список диссертаций по специальности «Виноградарство», 06.01.08 шифр ВАК

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Совершенствование технологии клонального микроразмножения флокса метельчатого (Phlox paniculata L.)»

Введение

Актуальность. Флокс метельчатый (Phlox paniculata L.) является популярным, широко распространенным и универсальным цветочным растением. В настоящее время его широко используют для создания миксбордеров, бордюров, цветочных групп и в срезке для цветочных композиций. В связи с этим основными задачами селекции и размножения флокса метельчатого является получение широкого ассортимента высокодекоративных, длительно цветущих сортов, устойчивых к выгоранию и длительно сохраняющихся в свежем виде в срезке [71, 111].

В настоящее время остро ощущается ограниченный сортимент флокса метельчатого. Сорта, созданные российскими селекционерами (Гаганов П.П. 1930; Шаронова М.Ф. 1965; Репрев Ю.А. 1983; Шаповал Т.П.; Фетисова И.В. 1993; Скратынь Н.Ю. 1970; Борисова В.Г. 2013; Константинова Е.А. 1985; Алексашин П.И. 2012; Калугина А.В.) доступны только в ботанических садах или у коллекционеров. А ассортимент, представленный в современных питомниках, ограничивается легко размножаемыми сортами с невысокими декоративными качествами и классической окраской цветка. Помимо этого, при традиционных способах размножения в тканях растений накапливается большое количество грибных и вирусных заболеваний и наблюдается недостаток качественного посадочного материала этих растений.

Методы клонального микроразмножения садовых растений активно используются по всему миру, давая возможность получать оздоровленный посадочный материал высших категорий качества. В связи с этим, для размножения флокса метельчатого перспективно разрабатывать элементы технологии размножения растений в культуре тканей, при котором полученные растения генетически идентичны исходному экземпляру.

Однако, в настоящее время данная технология не реализует в полной мере потенциал флокса метельчатого, и требует разработки приемов, позволяющих оптимизировать способы введения флокса метельчатого в культуру in vitro, условия длительного депонирования, снизить длительность

периода субкультивирования на этапе мультипликации, увеличить коэффициент размножения микрорастений, сократить длительность этапа корнеобразования и повысить приживаемость регенерантов на этапе адаптации к нестерильным условиям. Помимо этого, практически нет сведений о развитии ex vitro растений при выращивании в условиях открытого грунта.

Цель исследований - разработка элементов технологии размножения флокса метельчатого (Phloxpaniculata L.) в культуре in vitro.

Задачи исследований:

1. Оптимизировать этап введения микрочеренков флокса метельчатого в стерильную культуру.

2. Выявить оптимальные условия длительного депонирования флокса метельчатого в условиях замедленного роста при низких положительных температурах.

3. Определить оптимальный минеральный состав питательной среды и длительность субкультивирования флокса метельчатого на этапе мультипликации.

4. Разработать трехэтапную, энерго- и ресурсосберегающую технологию ускоренного размножения флокса метельчатого в культуре in vitro.

5. Выявить оптимальный состав субстрата для приживаемости микрорастений флокса метельчатого на этапе адаптации к нестерильным условиям.

6. Установить морфологические и фенологические особенности развития растений флокса метельчатого размноженных in vitro и зелеными черенками.

7. Дать оценку экономической эффективности трехэтапной, энерго- и ресурсосберегающей технологии клонального микроразмножения флокса метельчатого.

Научная новизна. Впервые на всех этапах клонального микроразмножения 9 сортов флокса метельчатого, в том числе двух новых

сортов селекции РГАУ-МСХА им. К.А. Тимирязева (заявки на выдачу патентов на селекционное достижение № 78180/8057178 и № 78182/8057179) разработаны и испытаны способы совершенствования технологии ускоренного размножения in vitro. Установлены оптимальные способы отбора растительного материала для введения микрочеренков в культуру in vitro, минеральный состав питательной среды и длительность субкультивирования флокса метельчатого на этапе мультипликации. Разработана и испытана трехэтапная, энерго- и ресурсосберегающая технология клонального микроразмножения флокса метельчатого с совмещением этапов мультипликации и ризогенеза. Выявлены морфологические и фенологические особенности развития растений флокса метельчатого размноженных in vitro и зелеными черенками при выращивании в открытом грунте.

Практическая значимость. Экспериментально доказано, что разработанный способ получения стерильной культуры с учетом места и условий выращивания растений перед введением в культуру in vitro, оптимальной концентрации стерилизующего агента, времени стерилизации эксплантов и состава питательной среды позволяет эффективно вводить экспланты в стерильную культуру при значительном снижении уровня контаминации. Разработанный способ длительного депонирования флокса метельчатого при низких положительных температурах позволяет успешно сохранять ратения-регенеранты в течение 12 месяцев, без дополнительных пересадок на свежую питательную среду. Оптимизированный минеральный состав питательных сред, с учетом длительности субкультивирования, позволяет увеличить выход хорошо развитых in vitro растений. Разработана и испытана трехэтапная энерго- и ресурсосберегающая технология клонального микроразмножения флокса метельчатого с совмещением этапов мультипликации и ризогенеза, которая на 65-70 дней ускоряет производственный процесс, позволяет в 1,5 раза снизить себестоимость и в 6 раз увеличить уровень рентабельности производства адаптированных

микрорастений. Установлено, что по морфологическим признакам ex vitro растения не отличаются, от растений, размноженных зелеными черенками, однако на 15-25 дней раньше зацветают и на 15-20 дней дольше цветут.

Методология и методы исследований. В виде источников информации при планировании и проведении исследований использованы монографии, научные статьи, авторефераты диссертаций. В ходе работы использовались общие методы исследований: наблюдения, сравнения и измерения. Статистическая обработка данных проводилась с использованием пакета анализа Microsoft Office Exсel 2010 и методических материалов [39, 42]. Их применение подтвердило достоверность полученных результатов исследований.

Положения, выносимые на защиту:

1. Оптимизация этапов культивирования сортов флокса метельчатого in vitro.

2. Трехэтапная, энерго- и ресурсосберегающая технология клонального микроразмножения флокса метельчатого.

3. Морфологические и фенологические особенности развития растений флокса метельчатого в зависимости от способа вегетативного размножения

Апробация работы. Результаты работы доложены и обсуждены на научных и научно-практических конференциях: XIX Международная научно-практическая конференция: «Роль науки в развитии социума: теоретические и практические аспекты», 2016; Международная научно-практическая конференция, посвященная 130-летию Н.И. Вавилова (Москва, декабрь 2017).

Публикации. По диссертации опубликовано 10 научных работ, из них 2 в изданиях, рекомендованных ВАК РФ, 2 заявки поданы на получение патента.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 191 странице и содержит следующие главы: введение, обзор литературы,

экспериментальная часть, результаты исследований, экономическая оценка, заключение и список использованной литературы. Работа содержит 24 таблицы, 45 рисунков , 13 приложений. Список литературы содержит 252 источника, из которых 132 на иностранном языке.

1. Обзор литературы

1.1. История культуры и классификация современных сортов флокса метельчатого

Флокс метельчатый (Phlox paniculata L.) относится к семейству Синюховые (Polemmoniaceae Juss), роду Флокс (Phlox L.). В настоящее время насчитывает порядка 70 видов и межвидовых гибридов [77, 80].

Существует несколько версий происхождения названия этого растения. Флокс, в переводе с греческого - «пламя». Скорее всего, такое название растение получило за яркую окраску, а также связано с древнегреческими мифами и странствиями Одиссея, у большинства видов окраска цветков разной насыщенности как теплых, так и холодных тонов и напоминает пламя [28]. Вторая версия немецкого происхождения, в переводе «flocken» - хлопья (снега). Окраска цветов может быть белой, розовой, красной, фиолетовой, зеленой, а также сочетать в себе несколько цветов одновременно (сорта Мишенька, Наташа, Твистер).

Родиной флоксов считают Северную Америку. В Европу флокс попал благодаря британскому ботанику Джеймсу Шерарду в 1732 году. Существуют данные, что примерно в этот же отрезок времени 1732-1740 Джон Бартрам, американский натуралист, отправлял найденные в Северной Америке образцы флоксов британскому ботанику Питеру Коллинсону.

В 1737 году, шведский ученый-естествоиспытатель, Карл Линней, впервые описал род Флокс (Phlox L.) в своих работах «Роды растений» («General plantarum» 1737) [77].

В конце XIX начале XX вв. во многих странах активно развивалась селекционная работа с флоксами.

Флокс метельчатый занимает ведущее место среди представителей рода Флокса (Phlox L.). Высота растений от 35-60 до 150-180 см являются родоначальниками большей части современных сортов и гибридов (57, 38). За последние 100 лет в нашей стране создано более 1600 сортов флокса

метельчатого. В России массовая популярность к флоксам метельчатым приходит на 30 годы XX века. В этот период времени отечественными селекционерами создана большая коллекция сортов флокса метельчатого (Гаганов П.Г. 1930; Квасников Б.В. 1947; Краснова Н.С. 1950; Харченко Е.Д. 1950; Берлизов Н.И. 1954; Репрев Ю.А. 1969).

сорт Наташа сорт Мишенька

Оригинатор L.Klinkhamer Оригинатор Дронов М.

Рисунок 1 - Сорта флокса метельчатого Неоценимый вклад в селекционное развитие флоксов метельчатых вложил Гаганов Павел Гаврилович. Гаганов П. Г. не только сотрудничал с зарубежными селекционерами, такими как Карл Форстер 1943, но и заложил генетическую базу современных сортов флокса метельчатого, новые направления в селекции (появление таких окрасок цветков как голубые синие и дымчатые). Репрев Юрий Андреевич в 70-80 годах XX века пополнил отечественный ассортимент флоксов метельчатых крупноцветковыми, голубыми и синими сортами (Сандро Ботичелли, Моя Любовь, Голубая Отрада), дымчатыми сортами (Врубель, Старина и т.д.).

сорт Алексей Ленский сорт Вий

Оригинатор Константинова Е.А. Оригинатор Калугина А.В.

Рисунок 2 - Сорта флокса метельчатого Современный ассортимент включает порядка 500 сортов и с каждым годом селекционеры увеличивают этот список (Колоколенковы Т.Н и А.В 2007; Марковский Ю.Б. 2010; Кудрявцева О.К. 2010; Калугина А.В. 2012; Зверев Д.С. 2013; Кругловы И.Н и Г.В. 2014) (рисунок 1-4). В последние несколько лет основными направлениями, в селекции флокса метельчатого, является создание сортов с причудливой формой лепестков цветка, с дымчатой окраской и с контрастными штрихами на лепестках и листьях, пестролистные сорта с различным градиентом, а также мелкоцветковые махровые формы и сорта [79, 63].

Высота растений флокса метельчатого варьируется от 35 до 150 см. наиболее распространённой высотой растений принято считать 60-70 или 80100 см [7, 8, 17]. Различают следующие группы флоксов метельчатых: высокие (выше 100 см); средние (50-100 см); низкорослые (25-50 см) [58, 59].

Классификация флоксов по срокам цветения: ранний (III декада июня -I декада июля); среднеранний (I декада июля - II декада июля); средний (III

декада июля - I декада августа); среднепоздний (I декада августа - II декада августа); поздний (III декада августа - I декада сентября) [40, 55].

сорт Звездный дождь сорт Румяный

Оригинатор Хватова В.Н. Оригинатор Квасников Б.В.

Рисунок 3 - Сорта флокса метельчатого

Плод коробочка, в котором образуется два или три семени. Цветок обоеполый. Венчик состоит из пяти лепестков, сросшихся в длинную трубку. Внутри трубки находится пестик, который не достигает поверхности лепестков, внутри пять нитевидных тычинок. Цветки собраны в соцветие метелку или щиток. Листья сидячие, узколанцетные, ланцетовидные или заостренно-эллиптические, супротивные, диной 5-15 см и шириной 1,5-4,0 см, расположены крестообразно, может присутствовать опушенность. Листья так же могут быть пестролистными с белой и желтой окраской. Окраска может быть не только одноцветной, но и двухцветной и трехцветной. У некоторых сортов в окраске присутствуют пятна, штрихи, точки, мазки, ободки, колечки и тени (рисунок 1-4).

Основная окраска венчика: белая, светло-розовая, розовая, лососево-розовая, оранжево-красная, малиново-красная, малиновая, пурпурная, голубая, синяя, сиреневая, лиловая, фиолетовая. Лепестки не соприкасаются, слабо перекрываются почти по всей длине или сильно перекрываются. Корневая система мочковатого типа [73, 81, 82, 83]. Флоксы требовательны к влажности и насыщенности почвы питательными веществами, так как тонкие разветвленные корни располагаются в поверхностных слоях почвы на глубине от 5 до 20 см [114]. Стебли у флокса метельчатого прямые, прочные, к концу вегетации одревесневающие. Одной из особенностей метельчатого флокса являются соцветия. Соцветия флокса метельчатого может плотным, средней плотности или рыхлым.

Рыхлым соцветие принято считать когда между цветками имеются заметные промежутки; средней плотности - цветки примыкают друг к другу, промежутков нет или они маленькие; плотное - цветки частично перекрывают друг друга, промежутков нет совсем [81, 82, 83].

Форма соцветий может быть: овальной, овально-конической, округлой, округло-конической, цилиндрической, узкоцилиндрической, наклоненно овально-конической, дробно-конической, конической с выступом, плоской, плоскоокруглой [19, 159].

Размер цветков может быть от 2,5 до 4 см. Раскрытие цветков происходит неравномерно. Полного цветения флокс метельчатый достигает спустя неделю после открытия первого бутона. Существуют сорта, которые никогда не раскрывают цветки полностью, например, сорта Бутоник, Midnight Feelings, Pure Feelings, Natural Feelings, Mikes Choice [27].

сорт Мозаика сорт Реснички

Оригинатор Константинова Е.А. Оригинатор Хватова В.Н.

Рисунок 4 - Сорта флокса метельчатого

При выборе места посадки для флокса метельчатого следует учитывать сортовые особенности, так как растение может портится от росы и лепестки соцветий могут сильно или слабо выгорать и терять декоративность.

1.2. Традиционные способы вегетативного размножения растений флокса метельчатого

Флокс метельчатый размножается вегетативным и семенным способом [101, 156, 159].

При вегетативном способе размножения сорт сохраняет все материнские признаки. При семенном размножении происходит расщепление в потомстве [109].

Вегетативные способы размножения: зеленое черенкование; черенкование одревесневшими побегами; боковыми побегами; пазушными почками; ростовыми побегами; корневыми черенками; листовыми

черенками; разбор цветущего соцветия на черенки во время цветения [28, 37, 38, 85].

Наиболее распространенными способами вегетативного размножения флокса метельчатого являются: деление куста, стеблевые черенки, листовые черенки или пазушные почки с листьями.

В зависимости от сорта семена собирают в конце сентября у ранних сортов и в октябре-ноябре у поздних сортов. Собранные семена высевают в грунт или в ящики на глубину 1,5-3 см. Промерзание семян зимой не снижает всхожести. Цветение при семенном размножении наступает через длительный срок [36].

Есть гипотеза, что семена флоксов через 2-3 месяца после сбора теряют свою жизнеспособность. Мария Павловна Бединггауз (1948) в своей работе опровергла данную теорию. Семена высевали через пять месяцев после сбора. Очищенные от коробочек семена предварительно, в течение десяти дней, промораживали, подвергали смачиванию, а затем снова промораживали. Семена высевали поздней осенью в ящики и присыпали снегом. После данной процедуры в конце весны наблюдали дружные всходы

[7].

Деление куста

Делением куста флоксы следует размножать осенью (август) или ранней весной (конец апреля, начало мая). Так можно обеспечить лучшую приживаемость. Весеннее деление проводят как можно раньше [68]. Растения выкапывают, осматривают на наличие повреждений и вредителей, делят корневище на несколько частей. Полноценная делянка должна содержать не менее 3-4 ростовых почек и 5-6 корневых отпрысков [78]. При осеннем делении на делянке должно быть не меньше двух-трех соцветий и не менее пяти вегетативных глазков [70, 71, 110]. Растения выкапывают в конце августа - начале сентября, в конце цветения, в этот период хорошо видно заложившиеся почки. Во время деления побеги укорачивают, оставляя часть зеленых листьев. Полностью обрезать побеги не следует. Данная операция

может вызвать прорастание органов возобновления, а это может отрицательно сказаться на подготовке растения к зиме и последующему цветению [56, 77]. Растения которые поделили весной зацветут в тот же год, если деление происходило осенью, то растения зацветут только на следующий сезон [97, 114]. Если деление произведено с запозданием, то растения тщательно укрывают теплоизолирующим материалом. Деление куста рекомендуется производить каждые 4-6 лет [27]. Чем моложе куст, тем высококачественнее будет полученный посадочный материал. Ростовые побеги после весеннего деления можно отдельно укоренить в притенённом месте [18, 103]. При делении важно не допустить пересыхание корней, растения высаживают сразу после деления. При соблюдении основных правил агротехники флоксы метельчатые могут выращиваться без пересадки порядка 10 лет, но при этом уменьшается продолжительность цветения и размер соцветий [76].

Размножение флоксов ростовыми побегами в мае практически всегда дает 100 % приживаемость. С трехлетнего растения можно взять не более 60% побегов.

Черенкование

Оптимальным временем для черенкования считается период вегетации (май-июнь) до стадии бутонизации. Размер черенков не должен превышать 810 см. Черенки высаживают в ящики с грунтом, присыпают 3 см слоем речного песка и накрывают стеклом или пленкой. Черенки каждый день опрыскивают водой. К высадке в открытый грунт черенки будут готовы примерно через 20-25 дней.

В своей работе Спицина М.А. и Артюхова А.В. в 2014 году при сравнении основных способов размножения флокса метельчатого, отметили, что в производственных условиях наиболее эффективно размножение одревесневшими черенками. Авторы при данном способе размножения от трех-четырех летнего растения, без ущерба материнскому растению, смогли получить до шести единиц стандартного посадочного материала. При

зеленом черенковании так же отмечено высокое количество укоренившихся растений, но при использовании данного способа растения достигали стандартных размеров только на следующий год [101].

Рисунок 5 - Схема размножения флокса метельчатого листовыми черенками

(Калинина А.С.)

В своих исследованиях авторы выделили следующие способы черенкования флокса метельчатого:

1. Ранние весенние черенки с пяткой (Никитина Н.Г.) [76].

2. Зелёные черенки (рисунок 6) [27, 28].

3. Листовые черенки (Г.Г. Треспе) (рисунок 5) [57].

4. Пазушные черенки с пяткой [7].

Если необходимо избавиться от таких вредителей, как стеблевые нематоды, то используют размножение корневыми черенками. Но данный способ использую редко по причине трудоемкости.

U 4

Рисунок 6 - Размножение флокса стеблевыми черенками: 1 - места резки стебля на черенки; 2 черенок; 3 - песок; 4 - земля (Калинина А.С.)

По данным Сергеевой О.В., Леппа Н.В. и Рачеевой А.И (2016) лучшую приживаемость (до 100%) получили от стеблевых черенков и определили, что на приживаемость черенков несущественно влияет регулятор роста -корневин. Параллельно с этим исследователи провели изучение технологии выращивания флокса метельчатого. Исследование показало, что конец июня является лучшим временем для размножения флокса метельчатого черенками. Более поздние сроки посадки могут привести к низкой приживаемости [98].

В Курганской области Кокаревой Е.А., Семизельниковой О.А. и Кислицыной А.А (2018) проанализировано влияние субстрата и сроков черенкования на отрастание и сохранность флокса метельчатого при размножении зелеными черенками. В зависимости от срока размножения стеблевыми черенками частота приживаемости, в течение сезона меняется. В мае-июня, для заготовки черенков, можно использовать весь стебель, так как растение находится в стадии интенсивного роста. Заготовку черенков проводят следующим образом: стебель делят так, чтобы на каждом черенке оставалось по два-три узла. Верхний срез должен быть выше узла на 5-10 см,

а нижний срез сразу под узлом. Для предотвращения иссушения черенка верхние листья наполовину обрезают, а нижние листья удаляют. Черенки высаживают на глубину 2-3 см на расстоянии 4-6 см Почву необходимо поддерживать во влажном состоянии. Корни у черенков появляются через месяц после посадки. Черенкование, проведенное в оптимальные сроки может гарантировать цветение растений к осени. По данным исследования число прижившихся растений на 20% больше в торфяной почве, чем в обыкновенном черноземе. Так же авторами установлено, что приживаемость растений сократилась на 27% с черенков, взятых с побегов, которые уже сформировали бутоны. Низкую приживаемость растений флокса метельчатого связали с тем, что питательные вещества поступали в соцветия.

При пересадки укоренившихся черенков растения нужно заглублять на 1,5-2 см для лучшего образования молодых корней.

1.3. Использование методов биотехнологии в системе воспроизводства растений флокса метельчатого

Клональное микроразмножение in vitro - инновационный метод вегетативного размножения для получения растений генетически идентичных исходному экземпляру. В основе этого метода лежат тотипотентность клеток, регенерация и апикальное доминирование три постулата клонального микроразмножения [29, 43, 191]. Тотипотентность клеток - способность соматической клетки, под воздействием экзогенных факторов, давать начало целому растительному организму [15, 14, 16, 104].

Методы in vitro используют, когда применение обычных способов размножения затруднено или существуют трудности фитосанитарного контроля.

С помощью клонального микроразмножения можно решить такие проблемы как:

1. возможность получения оздоровленных растений, свободных от вирусных, грибных и бактериальных болезней и вредителей;

2. ускоренное размножение ценных форм растений, отдельных генотипов, новых перспективных сортов;

3. сокращение продолжительности селекционного процесса;

4. получение в большом количестве вегетативного потомства трудно размножаемых в обычных условиях видов, сортов и гибридов растений;

5. сохранение генофонда и биоразнообразия растений;

6. возможность работы в лабораторных условиях в течение всего года и планирование выпуска растений к определенному сроку;

7. размножение сеянцев без вывода растений из ювенильной фазы;

8. возможность длительного хранение пробирочных растений;

9. возможность обмена материала в международном масштабе без риска занесения вредителей [23, 25].

Положительные и отрицательные стороны микроклонального размножения описаны во многих работах исследователей [46, 47, 123, 222, 228, 229]. Рассмотрев положительные качества можно выделить недостатки этого метода:

1. биотехнологические методы требуют наличие оснащенных специальной техникой лабораторий и высококвалифицированных кадров;

2. тщательный отбор исходных форм;

3. затраты на дорогостоящие реактивы;

4. отработка методики адаптации растений к нестерильным условиям.

Культура тканей in vitro может служить созданию новых сортов и

уникальных форм [112]. Регенерация растений в культуре in vitro происходит путем эмбриогенеза или органогенеза. В 1977 году Murashige и в Катаева Н. В. и Бутенко Р. Г. 1983 году в своих работах предложили различные методы размножения растений in vitro:

1. регенерация растений через полученный каллус, индукция соматического эмбриогенеза в тканях каллуса;

2. использование недифференцированных тканей (без образования каллуса);

3. образование каллуса, получение из него суспензии и регенерацию растений из клеток суспензии;

4. развитие зародыша через получение биполярных структур из клеток;

5. пролиферация пазушных побегов;

6. индукция развития побегов из ткани эксплантов в процессе культивирования [12, 207].

Каллусные ткани состоят из множества дифференцированных клеток, которые в свою очередь могут стать потенциальными растениями, но при использовании данной технологии получение расщепления форм исходного растения значительно возрастает [44, 45]. Так как может происходить полиплоидизация и анеуплоидизация числа хромосом.

Возникновение и преобразование клеток, тканей и органов (морфогенез) обуславливает размножение растений in vitro [34, 147]. Один из самых распространенных методов клонального микроразмножения это активация меристем, основанный на снятии апикального доминирования [113]. Этого можно достигнуть несколькими способами: удаление апикальной меристемы и последующее микрочеренкование побегов; индуцирование пазушных побегов в результате добавления в питательную среду регуляторов цитокининового типа.

В промышленном масштабе в основном используют размножение микрочеренкованием [50, 60]. Размножение через пролиферацию меристем используют в том случае, если маточное растение произрастает на неизолированном участке, если произведен обмен растениями в международном масштабе [118]. Данная методика позволит избежать получения зараженного материала [224, 225]. Пролиферация пазушных почек может быть эффективнее микрочеренкования в масштабе единичного побега, но только если размножение не активирует развитие каллуса и адвентивных

Похожие диссертационные работы по специальности «Виноградарство», 06.01.08 шифр ВАК

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Мазаева Анна Сергеевна, 2019 год

Список использованной литературы

1. Абраменко, Н.М., Бондаренко П.А., Ткаченко В.Д. Культура in vitro земляники для получения и ускоренного размножения безвирусных клонов. - Всесоюзная 4 конференция. Культура клеток растений и биотехнология, Кишинев: Штиинца, 1983, с. 53-58.

2. Акимова, С.В. Разработка новых приемов подготовки растений малины ремонтантной к этапу адаптации к нестерильным условиям / Акимова С.В., Киркач В.В. // 69-я студенческая научно-практическая конференция, посвященная 200-летию со дня рождения Н.И. Железнова 14-17 марта 2016 года. 3 место секции Плодоводство.

3. Акимова, С.В. Совершенствование приемов подготовки к этапам адаптации и доращивания ex vitro растений малины ремонтантной / Акимова С.В., Киркач В.В. // Сборник тезисов выступлений студентов-участников X Московской научно-практической конференции «Студенческая наука», проходившей в вузах Москвы в период с 26 октября по 30 ноября 2015 года. - 2016. - 1том. - С.578-580.

4. Акимова, С.В. Совершенствование способов подготовки микрорастений малины к адаптации / С.В. Акимова, А.Н. Викулина, И.Н. Буянов, А.П. Глинушкин // Плодоводство и ягодоводство России. - 2014. - Т. 39. - С. 16-19.

5. Аладина, О.Н., Акимова С.В., Ковалева И.С., Дубровская С.О., Батрак Е.Р., Аладин С.А. Адаптация микрорастений малины (Rubus L.) и сирени (Syringa L.) к нестерильным условиям // Известия ТСХА. - 2009. - вып. 3. - С. 98-110.

6. Бакун, Т.В. Особенности микроклонального метода размножения земляники. // Проблемы вегетативного размножения в садоводстве. -М.: ТСХА, 1985. - С.122-128.

8. Беляева, Т.Н., Бутенкова АН., Чикин Ю.А., Гайворонских О.А. Сравнительная оценка сортов флокса (Phlox L.) при интродукции на юге Томской области // Вестник Томского государственного университета. Биология. 2012. №4 (20). -С. 68-76.

9. Бленда, В. Ф. Регенерация черной смородины из апикальной меристемы. Индукция морфогенеза в культуре тканей растений / В. Ф. Бленда, Е. Д. Кириленко // Гормональная регуляция онтогенеза растений. М: Наука 1982. -С. 42-45.

10. Бунцевич, Л.Л., Беседина Е.Н., Костюк М.А., Макаркина М.В. Разработка составов питательных сред для интродукции в культуру in vitro эксплантов сортов малины и крыжовника / Плодоводство и виноградарство юга России. - 2014. - № 28 (4). - С.46-55

11. Бургутин, А.Б. Микроклональное размножение растений винограда. Перевод пробирочных растений в почвенную культуру / А. Б. Бургутин //Биология культивируемых клеток и биотехнология: междунар. конф. -Новосибирск., 1988. С. 121.

12. Бургутин, А.Б., Бутенко Р.Г., Катаева Н.В., Голодрига П.Я. Быстрое клональное размножение виноградного растения // Сельскохозяйственная биология, - 1983,- N 5,- С. 48-50 .

13. Бутенко, Р. Г. Индукция морфогенеза в культуре тканей растений. / Р. Г. Бутенко // Гормональная регуляция онтогенеза растений / Р. Г. Бутенко. М.: Изд. «Наука», 1984. - С. 42-54.

14. Бутенко, Р.Г. Биология клеток высших растений in vitro и биотехнологии на их основе: Учеб. пособие. - М.: ФБК-ПРЕСС, 1999.

15. Бутенко, Р.Г. Биотехнология растений: культура клеток. / пер. В. И. Негрука - С предисл. Бутенко Р. Г. М.: Агропромиздат, 1989, 280 с.

16. Бутенко, Т.И., Муромцев, Р. Г. Основы сельскохозяйственной биотехнологии / Г. С. Муромцев, Р. Г. Бутенко, Т. И. Тихоненко, М. И. Прокофьев. - М., 1990. - 384 с

17. Верещагина, И.В. Вегетативное размножение декоративных многолетников / И.В. Верещагина. - Барнаул.: Алтайск. книж. изд-во., 1977.

18. Верещагина, И.В. Перезимовка декоративных многолетников в Алтайском крае. Новосибирск: Алтайское кн. изд-во, 1996. С. 40-42.

19. Верещагина, И.В., Рубцова В.В., Чигаева А.Ф., Хуторная Ю.И. Флоксы в Сибири Новосибирск: Наука, Сибирское отделение, 1969. - 100 с.

20. Вечернина, Н.А. Сохранение биологического разнообразия редких, исчезающих видов, уникальных форм и сортов растений методами биотехнологии: дис. ... д-ра биол. наук. Барнаул, 2006. 325 с.

21. Высоцкий, В. А. Клональное микроразмножение растений // Культура клетокрастений и биотехнология. Под ред. Бутенко Р. Г., 1986, 360 с.

22. Высоцкий, В. А. Культура изолированных тканей и органов плодовых растений: оздоровление и микроклональное размножение // С/х биотехнология, 1983, №7, с. 42-45.

23. Высоцкий, В.А. Выращивание оздоровленного посадочного материала нейтральнодневных и ремонтантных сортов земляники //В.А. Высоцкий, Л.В. Алексеенко Садоводство и виноградарство -2000. - №1. - С. 14-16.

24. Высоцкий, В.А. О генетической стабильности при клональном микроразмножении плодовых и ягодных культур // Сельскохозяйственная биология. - 1995. - № 5. - С. 57-63

25. Высоцкий, В.А. Роль биотехнологических методов в интродукции, размножении, селекции и сохранении генофонда редких и нетрадиционных растений//В.А. Высоцкий, Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования-2015.. - №11. - С.27-29.

26. Высоцкий, В.А., Попов Ю.Г., Трушечкин В.Г. Регенерация изолированных меристематических верхушек древесных растений in vitro / Плодоводство и ягодоводство Нечерноземнойполосы. Т. IX,- М., 1976.- С. 89-100.

27. Гаганов, П.Г. Флоксы многолетние. - М.: ОГИЗ - Сельхозгиз, 1955. -с.194.

28. Гайшун, В.В. Флоксы. - М.: Издательский Дом MS^ 2010. - с. 32

29. Деменко, В.И // Микроклональное размножение садовых растений: Уч. Пособие. - М.: ФГОУ ВПО РГАУ - МСХА им. К.А. Тимирязева, 200756 с.

30. Деменко, В.И, Викулина А.Н., Трушечкин В.Г. Проблемы размножения садовых растений методом in vitro на современном этапе и способы их решения // Плодоводство и ягодоводство России.-2014.- вып.:1. - С. 111116.

31. Деменко, В.И., Лебедев В.Г. Адаптация растений, полученных in-vitro, к нестерильным условиям // Известия ТСХА. - 2010.- вып.:1. - С. 73-85.

32. Деменко, В.И., Шестибратов К.А., Лебедев В.Г. Укоренение - ключевой этап размножения растений in-vitro // Известия ТСХА. - 2011.- вып.:1. -С. 60-71.

33. Деменко, В.И., Шестибратов К.А., Лебедев В.Г. Укоренение - ключевой этап размножения растений in-vitro // Известия ТСХА. - 2011. - вып.:1. -С. 60-71.

34. Дитченко, Т.И. Культура клеток, тканей и органов растений: Курс лекций//Минск: БГУ, 2007. - 102 с.

35. Дмитриева, Н.Н. Проблема регуляции морфогенеза и дифференциации в культуре клеток и тканей растений. // Культура клеток растений. М.: 1980, с.113-123.

36. Долганова, З.В. Биологические аспекты повышения продуктивности и декоративности корневищных многолетников в лесной зоне Сибири: автореф. дис. д-ра с.-х. наук: 06.01.07. Барнаул, 2003. 32 с.

37. Долганова, З.В., Клементьева Л.А. Изменчивость ритмов роста и развития видов и сортов рода Phlox L. в условиях лесостепи Алтайского Приобья // Материалы всероссийского научно-практич. совещ. по флоксам «Phlox-2014». - М.: изд-во БС МГУ им. Ломоносова, 2014. -с.54-59.

38. Дорохова, Е.М. Флоксы в наших садах. М.: 2017

39. Доспехов, Б.А. Методика полевого опыта (с основами статистической обработки результатов исследований). -5-е изд., доп. и перераб. - М.: Агропромиздат, 1985. - 351 с.

40. Дьякова, Г.М. Флоксы. - М.: Изд-во Кладезь-Букс, 2009. - 96 с.

41. Зарипова, А.А. Вестник Оренбургского государственного университета, 2009. 6, 2009. Культура зародышей Paeonia anómala L

42. Исачкин, А.В. Основы научных исследований в садоводстве: Рабочая тетрадь / А.В. Исачкин, В.А. Крючкова. - 3-е изд., исправл. и доп. - М.: Изд-во РГАУ-МСХА, 2015. - 94 с.

43. Калашникова, Е. А. Практикум по сельскохозяйственной биотехнологии. / Е. А. Калашникова, Е. З. Кочиева, О. Ю. Миронова -М.: КолосС. - 2006. - 162 с.

44. Калашникова, Е. А., Родин А. Р. Получение посадочного материала древесных, цветочных и травянистых растений с использованием методов клеточной и генной инженерии: учеб. пособие; изд. 2, испр. и доп. М.: МГУЛ, 2001. 73 с.

45. Калинин, Ф.А., Сарнацкая В.В., Полищук В.Е. Методы культуры тканей в физиологии и биохимии растений. - Киев, 1980. - 488 с.

46. Катаева, Н.В., Аветисова В.А. Клональное размножение растений в культуре ткани // Культура клеток растений. М., 1981.С. 137-149.

47. Катаева, Н.В., Бутенко Р.Г. Клональное микроразмножение растений / Н. В. Катаева, Р. Г. Бутенко. - Москва: Наука, 1983.

48. Клоконос, Н.П. Получение безвирусного посадочного материала ягодных культур / Н.П. Клоконос// Сб. науч. тр./ ВНИИС им. И.В. Мичурина -Мичуринск, 1989. 76 с.

49. Ковалева, И.С, Ханбабаева О.Е., Мазаева А.С., Мацнева А.Е., Введение в культуру in vitro сеянцев флокса метельчатого (Phlox paniculata L.). Международный научный журнал Издательство: Учебно- методический центр "Триада" (Москва). - Вып.3 -2017. - С.79-84

50. Ковалева, И.С. Особенности микроклонального размножения сортов крыжовника / И.С. Ковалева, Т.В. Данилова // Агро XXI. - 2001. - № 5. -С. 21.

51. Ковалева, И.С., Мазаева А.С., Ханбабаева О.Е., Мацнева А.Е., Сорокопудов В.Н.// Разработка оптимальных условий длительного депонирования коллекции оздоровленных клонов флокса метельчатого (Phlox paniculata L.)// ВЕСТНИК КрасГАУ: Выпуск 8. -2019. С. 47-51

52. Ковалева, И.С., Ханбабаева, О.Е., Мазаева А.С., Мацнева А.Е., Оптимизация условий культивирования сортов флокса метельчатого (Phlox paniculata L. )//Вестник Курской Государственной Сельскохозяйственной Академии Издательство: Курская сельскохозяйственная академия (Курск)ISSN: 1997-0749- Вып. 9. -2018. - С. 108-110

53. Коваленко, В. А. Диагностика хозяйственно ценных признаков и клональное микроразмножение винограда in vitro: автореф. Дис. канд. с.-х. наук: 06.01.08, 03.00.12 / В. А. Зленко - Ялта, 1991. - 22 с.

54. Ковальчук, И. Ю. Микроклональное размножение малины, как метод сохранения биоразнообразия растений в Казахстане / Ковальчук И. Ю., Мухитдинова З. Р., Турдиев Т. Т. и др. // Биотехнология как инструмент сохранения биоразнообразия растительного мира - 2008: мат. II Всероссийской научн.-практич. конф. [Электронный ресурс] -Волгоград, 2008.

55. Кожевникова, Т.Ю. Предварительные итоги интродукции флокса метельчатого (Phlox paniculata L.) в Нижнем Поволжье // Бюллетень Ботанического сада Саратовского гос. Ун-та, 2012. Вып. 10. - С.124-127.

56. Кокарева, Е.А., Семизельникова О.А., Кислицына А.А. // Влияние срока и субстрата на вегетативное размножение культуры флокса в условиях курганской области // Сборник статей по материалам II Всероссийской (национальной) научно-практической конференции. Под общей редакцией С.Ф. Сухановой. 2018. С. 78-83.

57. Константинова, Е.А. Флоксы. - М.: ЗАО «Фитон+», 2002. - 192 с.

58. Константинова, Е.А., Воронина С.И. Современный ассортимент флокса метельчатого: 1 выпуск. каталог. СПб.: Фитон, 2014. 25 с.

59. Константинова, Е.А., Воронина С.И. Современный ассортимент флокса метельчатого: 2 выпуск. каталог. СПб.: Фитон, 2016.

60. Коренев, И. А. Перспективы развития микроклонального размножения древесных и недревесных растений в Костромской области // Труды Санкт-Петербургского НИИ лесного хозяйства. 2011. Вып. 1 (24). Ч. 2. С. 52-55.

61. Корнацкий, С.А Научно-практический анализ технологичности конечных этапов микроразмножения // Мат. международной научно-практической конференции. «Проблемы устойчивого развития садоводства Сибири». - Барнаул. - 2003. - С.296 - 300.

62. Корнацкий, С.А. Комплекс факторов, влияющих на жизнеспособность, рост и развитие микрорастений после культуры in vitro / Плодоводство и ягодоводство России. - М. - 1999. - С.64-68.

63. Котелова, Н.В., Виноградова О.Н. Оценка декоративности деревьев и кустарников по сезонам года // Физиология и селекция растений и озеленение городов. М.: МЛТИ, 1974. С.37-44.

64. Кочумова, А.А., Миронова О.Ю. Разработка технологии размножения флоксов in vitro//62 студенческая научная конференция 1 -е Вавиловские чтения среди студентов и школьников. Секция «Генетика, селекция и биотехнология»: сборник тезисов. М.: РГАУ-МСХА имени К.А. Тимирязева, 2009. С. 42.

65. Куликов, И.М., Высоцкий В.А., Рыжкова Н.С. Экономика содержания коллекций ягодных культур in vitro //Биоресурсы, биотехнологии, экологически безопасное развитиеагропромышленного комплекса: Сб. научн. тр. ГНУ ВНИИЦиСК. - Вып 40.-2012 - С. 443-447.

66. Кутас, Е.Н. Научные основы клонального микроразмножения растений на примере интродуцированных сортов голубики высокой и брусники обыкновенной: Автореф. дис. д-ра биол. наук. - М., 1997. - 35 с

67. Кухарчик, Н.В. Вегетативное размножение плодовых и ягодных культур in vitro / Н.В. Кухарчик [и др.] // Генетические основы селекции растений: в 4 т.; науч. ред. А.В. Кильчевский, Л.В. Хотылева. - Мн.: Беларус. навука, 2012. - Т. 3: Биотехнология в селекции растений. Клеточная инженерия. - Гл. 5. - С.289-315.

68. Кухарчик, Н.В./Вегетативное размножение плодовых и ягодных культур in vitro / Н. В. Кухарчик [и др.] // Генетические основы селекции растений: в 4 т. Т. 3. Биотехнология в селекции растений. Клеточная инженерия / науч. ред.: А. В. Кильчевский, Л. В. Хотылева. - Минск: 2012. - Гл. 5. - С. 289-315.

69. Кухарчик, Н.В./Размножение плодовых растений в культуре in vitro / Н. В. Кухарчик [и др.]; под общ. ред. Н. В. Кухарчик. - Минск: Беларуская навука, 2016. - 208 с.

70. Лаврентьев, П.И. Размножение многолетних флоксов. -Владимирское книжное издательствво, 1957.

71. Мазаева, А.С. Агротехника Флокса метельчатого (Phlox paniculata L.)// Вестник Ландшафтной архитектуры Издательство: Довганюк А.И. -Вып.15. - 2018- С. 44-46.

72. Мазаева, А.С. Инициация стерильных культур флокса метельчатого (Phlox Paniculata L.) / Ковалева И.С., Ханбабаева О.Е., Мацнева А.Е.// Доклады ТСХА. - 2018. С. 24-27.

73. Мазаева, А.С. Флокс метельчатый (Phlox paniculata L.). Проблематика культуры: особенности размножения, болезни и методики оценки декоративных качеств// Материалы XIX международной научно-практической конференции: «Роль науки в развитии социума: теоритические и практические аспекты» . - Ч1.- 3(16).-2016.-С. 27-29.

74. Малаева, Е.В., Коновалова Л.Н., Молканова О.И. Использование биотехнологических методов для сохранения и поддержания коллекции актинидии в культуре in vitroZ/Плодоводство и ягодоводство России 2009 - 21с. 212-218.

75. Мамаева, Н.А., Коротков О.И., Молканова О.И. Возможность сохранения коллекции редких и ценных растении в генетических банках in vitro // Вестник Красноярского Государственного Аграрного Университета_ 2008 - 2. С. 72-76.

76. Мантрова, Е.З. Флоксы (культура и особенности питания). - М.: Изд-во Мин. коммунального хоз-ва РСФСР, 1959. - 59 с.

77. Матвеев, И.В. Флоксы метельчатые / Под общ. ред. проф., д.б.н. В.С. Новикова. - М.: Фитон XXI, 2014. - 152 с.

78. Матушкина, О. В. Размножение плодовых культур in vitro: проблемы и перспективы / О. В. Матушкина, И. Н. Пронина // Агро XXI. - 2011. - № 7-9. - С. 15-16.

79. Мельникова, М.Н., Бондаренко Н.А., Степанов А.Ф. О декоративной оценке различных сортов флокса метельчатого//Состояние и перспективы развития садоводства в Сибири: материалы II Нац. науч. -практ. конф., посвящ.85-летию плодового сада Омского ГАУ имени профессора А.Д. Кизюрина, 7-9 дек. 2016 г. Омск, 2016. С. 193-196.

80. Мельникова, М.Н., Кондратьева С.В., Бондаренко Н.А. История и изучение флокса. Сызрань: Наука и современность. 2016. С. 117-119.

81. Методика государственного испытания сельскохозяйственных культур: Декоративные культуры. - М.: Колос, 1968. - Вып 6. - 223 с.

82. Методика Государственного сортоиспытания декоративных культур. -М., 1968. - 224 с.

83. Методика проведения испытаний на отличимость, однородность и стабильность флокс метельчатый, флокс пятнистый и их гибриды (для сортов кустовых флоксов Phlox Paniculata L., Phlox Maculata L., Phlox Hybridae) 27.01.2006 г. № 12-06/2.

84. Митрофанова, О. В. Вирусные болезни промышленных культур и биотехнологические приемы их оздоровления. Автореферат докторской диссертации. 1992,42 с.

85. Митрофанова, О.В. Методические указания по диагностике болезней цветочных культур и меры борьбы с ними. / Сост. Митрофанова. А.С. Кольцова. -Ялта: Гос. Никит. ботан. сад, 1977. - 23 с.

86. Муратова, С. А. Особенности введения в культуру in vitro плодовых и ягодных растений / С. А. Муратова, М. Б. Янковская, Д. Г. Шорников // Плодоводство: науч. тр. / Ин-т плодоводства Нац. акад. наук Беларуси;

редкол.: В. А. Матвеев (гл. ред.) [и др.]. - Самохваловичи, 2005. - Т. 17, ч. 2. - С. 182-185.

87. Муратова, С.А., Янковская М.Б., Шорников Д.Г. Генотипические особенности растений при культивировании in vitro//Биотехнология как инструмент сохранения биоразнообразия растительного мира: материалы II Всероссийской научнопрактической конференции, г. Волгоград, 19-21 августа 2008 г. Белгород: БелГУ, 2008. С. 222-226.

88. Орлов, П.Н. Роль перивискулярных волокон в образовании придаточных корней у зеленых черенков садовых растений // Плодоводство ТСХА. 1985. Вып.6. С. 102-115.

89. Осипова, Л. В. Микроклональное размножение земляники в искусственной культуре / Л. В. Осипова, С. Л. Расторгуев, В. М. Тюленев // Биол. науч. информ. Центр ин. лаб. 1986. - 43. - С. 27-31.

90. Пищева, Г.Н. Регенерационные особенности первичных эксплантов Phlox paniculata L. в культуре in vitro// Достижения науки и техники АПК 2016.

91. Подорожный, В.Н. Производство оздоровленного посадочного материала алычи и клоновых подвоев косточковых плодовых культур с использованием биотехнологических методов: Автореф. дисс. канд. с.-х. наук. -Краснодар, 1996. -19с.

92. Поляков, А.В. Получение регенерантов овощных культур и их размножение in vitro: методические рекомендации. - М.: ГНУ ВНИИО РАСНХ, 2005. - 36 с.

93. Поляков, А.В., Линник Т.А. Производство оздоровленного посадочного материала сортов земляники садовой (Fragaria x Ananassa Duch.) с низкой усообразующей способностью методом клонального микроразмножения in vitro// Вестник МГОУ. Серия «Естественные науки» 2014 - 3.

94. Поляков, А.В., Линник Т.А., Таланова Л.А. Повышение эффективности размножения сортов земляники садовой (Fragaria ananassa Duch.), характеризующихся низкой усообразующей способностью // Вестник Рязанского гос. агротехнологического ун-та им. П.А. Костычева: научно-производств. журнал. - 2013. - № 3 (19). - С. 42-46.

95. Попов, Ю.Г. Оздоровление и размножение плодовых и ягодных растений методом культуры меристематических верхушек/ Ю.Г.Попов// Метод. Указания. - М., 1979.

96. Попов, Ю.Г., Равкин A.C. Применение метода культуры меристематических верхушек в селекционной работе с земляникой // Тканевые и клеточные культуры в селекции растений. - м.; "Колос", 1979. - С.115-123.

97. Потапов, С.П.// Методика постановки опытов с плодовыми, ягодными и цветочно-декоративными растениями: пособие для учителей / С.П. Потапов [и др.]; под ред. В.А. Комисарова. М.: Просвещение, 1982. С.-239.

98. Сергеева, О.В., Лепп Н.В., Рачеева А.И. изучение технологии выращивания и размножения флокса метельчатого (Phlox Paniculata L.) //Сборник научных трудов Международной научно-практической конференции молодых учёных и студентов. 2016// с. 80-82

99. Сковородников, Д Н. Результаты использования клонального микроразмножения ремонтантных форм малины / Ученые записки Орловского государственного университета. Серия: Естественные, технические и медицинские науки. - 2011. - № 3. - С.327-330.

100. Соловых, Н. В., Муратова С. А., Янковская М. Б. Клональное размножение ягодных культур in vitro // «Актуальные проблемы размножения ягодных культур и пути их решения»: мат. междунар. научн. -метод. дистанционной конф. [Электронный ресурс], 2010.

101. Спицина, М.А., Артюхова А.В // Вегетативные способы размножения флокса метельчатого (Phlox paniculata L. )- Плодоводство и ягодоводство России-2014. т 39_с. 205-207.

102. Таратонов, Н.А. Влияние экзогенных факторов на рост и развитие регенерантов в процессе формирования дигаплоидных форм сахарной свеклы// автореф. диссер. на соиск. уч.степ.канд. сельскохоз. наук, Рамонь, 1999. - 28 с.

103. Удинцова, С.М. Многолетние флоксы/ С.М. Удинцова//Интродукция и приемы культуры цветочно-декоративных растений. -М.: Наука, 2015.

104. Упадышев М.Т. Клональное микроразмножение ежевики и малины черной / М.Т.Упадышев, В.А. Высоцкий Новое в ягодоводстве Нечерноземья -1990. -М.- С. 56-65.

105. Упадышев, М.Т. Изменчивость признаков у некоторых ягодных и плодовых культур при микроразмножении / М.Т. Упадышев // Плодоводство: науч. тр. - Самохваловичи, 2006. - Т. 18, ч. 1: Методическое обеспечение устойчивого развития современного плодоводства -С. 136-139.

106. Упадышев, М.Т. Модификационная изменчивость при микроразмножении и зеленом черенковании ягодных и плодовых культур// Плодоводство и ягодоводство России: Сб. науч. тр. Межд. науч. методич. конф. «Мониторинг и методика исследований в садоводстве в нестабильных экологических условиях: (24-25 ноября 2005 г.) / ВСТИСП. - М., 2005. - Т. XIV. - С. 215-224.

107. Упадышев, М.Т. Модификационная изменчивость ягодных и плодовых культур в зависимости от способа размножения // Сельскохозяйственная биология. - 2003. - №3. - С. 64-71.

108. Френкина Т.А. Селекция флоксов в России: вчера, сегодня, завтра/ Т.А. Френкина// Цетоводство. -2013-№2.

109. Ханбабаева, О.Е. Гаметофитная самонесовместимость в селекции львиного зева (Antirrhinum majus L.): Монография/О.Е. Ханбабаева. М.: Изд-во РГАУ-МСХА имени К.А. Тимирязева, 2011.143с.

110. Ханбабаева, О.Е., Мазаева А.С., Березкина И.В. Изучение биологических особенностей однолетних цветочных культур при различных типах посадки// «Научная жизнь» №8 Издательство: Наука и образование. - Вып.8. - 2018. - С.97-105.

111. Ханбабаева, О.Е., Мазаева А.С., Мацнева А.Е., Сорокопудов В.Н.// Использование дикорастущих лекарственных растений в ландшафтном строительстве города Москвы//"Земля" Издательство: Успехи современной науки ISSN: 2587-6856.- Вып 2. - 2019.-С.32-39.

112. Царев, А.П., Погиба С.П., Тренин В.В. Селекция и репродукция лесных древесных пород// Учебник. — М.: Логос, 2003. — 520 с

113. Черевченко, Т.М., Лаврентьева А.Н., Иванников Р.В. Биотехнология тропических и субтропических растений in vitro. Киев: Наук. думка, 2008. - С. 559.

114. Чуб, В.В., Малеева Ю.В. «Современный сад»; Изд-во ЭКСМО 2001.

115. Шарафова, О.Ф., Поляков А.В., Лебедева Н.Н. Оптимизированная технология клонального микроразмножения флокса метельчатого (Phlox paniculata L.) 2008.

116. Шевелуха, B.C., Дегтярев С. В. и др. Сельскохозяйственная биотехнология. М., Из-во МСХА, 1995, 300 с.

117. Шевелуха, B.C., Калашникова Е. А. и др. Сельскохозяйственная биотехнология. Учеб. - М.: Высшая школа, 1998, с. 416.

118. Шевелуха, B.C., Калашникова Е. А., Воронин Е. С. и др. Сельскохозяйственная биотехнология. Учеб. 2-е изд., перераб. и доп. — М.: Высшая школа, 2003, с. 469.

119. Шмыкова, Н.А., Шумилина Д.В., Супрунова Т.П. Получение удвоенных гаплоидов у видов рода Brassica L./ // Вавиловский журнал генетики и селекции. - 2015. - № 19(1). - С. 111-120.

120. Шорников, Д.Г. Оптимизация условий культивирования in vitro ягодных и декоративных культур / Д.Г. Шорников, С.А. Брюхина, С.А. Муратова, М.Б. Янковская, Р.В. Папихин // Вестник ТГУ - 2010. - Т.15, Вып.2. - С. 640-645.

121. Abu-Qaoud, H, Skirvin RM, Chevreau E (1990) In vitro separation of chimeral pears into their component genotypes. Euphytica 48:189-196.

122. Adams, K.L., Wendel JF (2005) Polyploidy and genome evolution in plants. Curr Opin Plant Biol 8(2):135-141.

123. Adaniya, S., Shirai D. (2001) In vitro induction of tetraploid ginger (Zingiber officinale Roscoe) and its pollen fertility and germinability. Sci Hortic 88:277-287.

124. Aitken-Christie, J., Singh A.P. (1987) Cold storage of tissue cultures. In: Bonga J.M., Durzan D.J. (eds) Cell and tissue culture in forestry, vol 2. Martinus Nijhoff, Dordrecht, pp 285-304.

125. Anderson-Cook, C.M.: Regression and ANOVA: an integrated approach using SAS software. — Amer. Statistics 58: 172-173, 2004.

126. Attree, S.M.; Fowke, L. C. Embryogeny of gymnosperms: advances in synthetic seed technology of conifers. Plant Cell Tissue Organ Cult. 35: 1-35; 1993.

127. Bailey, L.H. (1950) the standard cyclopedia of Horticulture. Vol. III, P-2. MacMillan Co, New York, pp 2586-2590.

128. Bailiss, K.W., Balazs, E., and Kiraly, Z., The Role of Ethylene and Abscisic Acid in TMV-Induced Symptoms in Tobacco, Acta Phytopatol. Acad. Sci. Hungary, 1977, vol.12, nos. 3-4, pp. 133-140.

129. Bajaj, Y.P.S.////High-Tech and Micropropagation //1986.

130. Bajaj, Y.P.S.//High-Tech and Micropropagation //1990.

131. Balazs, E., Sziraki, I., and Kiraly, Z., The Role of Cytokinins in the Systemic Acquired Resistance of Tobacco Hypersensitive to Tobacco Mosaic Virus, Physiol. Plant Pathol, 1977, vol. 11, pp. 29-37.

132. Banks, T.J. and L.L. Smith. 1985. Micropropagation of Hosta tsushimensis. HortScience 20 P.- 154.

133. Behzad, Kaviani //In vitro flowering and micropropagation of lisianthus (Eustoma grandiflorum) in response to plant growth regulators (NAA and BA)//2014.

134. Bhojwani, S.S., Dantu, P.K.: Plant Tissue Culture: an Introductory Text. — Springer, New Delhi, India 2013.

135. Bhojwani, S.S., Razdan, M.K.: Plant Tissue Culture: Theory and Practice. A Revised Ed. — Elsevier, Amsterdam, 1996.

136. Boxus, P. and Quoirin M. (1974). La culture de meristems apicaux de quelques especes de Prunus. Bull. Soc. R. Bot. Belg. 107, 91-101

137. Bridgen, M.P., Staby G.L. (1981) Low pressure and low oxygen storage of plant tissue cultures. Plant Sci Lett 22. P.- 177-186.

138. Brunt, A.A.. Crabtrcc K., Dallwitz M.J., Gibbs A.J., Watson L. and Zurchcr E.J.// Plant Viruses Online: Descriptions and lists from the VIDE database. 1997. In: (cds.). 10 Nov. 2002.

139. Burchi, G.; Mercuri, A.; De Benedetti, L., et al. Transformation methods applicable to ornamental plants. Plant Tissue Cult. Biotech. 2. P.- 94-104; 1996.

140. Caplin, S.M. (1959) Mineral-oil overlay for conservation of plant tissue cultures/ Am J Bot 46 P.- 324-329

141. Carvalho, J.F.R., Carvalho CR, Otoni WC (2005) In vitro induction of polyploidy in annatto (Bixa orellana). Plant Cell Tissue Organ Cult 80 P.- 6975

142. Cassells, A.C. and G. Minas. 1983. Plant and in vitro factors influencing the micropropagation of Pelargonium cultivars by bud-tip culture. Scientia Horticulturac 21:53-65.

143. Chakraborti, S.P., Vijayan K, Roy BN, Qadri SMH (1998) In vitro induction of tetraploidy in mulberry (Morus Alba L.) Plant Cell Rep 17 P.- 799-803.

144. Chaturvedi, H.C. // Proc. Natl. Symp. On Applied Biotechnoloy of Medicinal, Aromatic and Timber Yielding Plants. Calcutta, 1984. P. 179-188.

145. Chaturvedi, R., Razdan M.K., Bhojwani S.S. (2003) Production of haploids of neem (Azardirachta indica A. Jurs.) by another culture. Plant Cell Rep 21 P.-531-537.

146. Chaturvedi, R., Razdan, M.K.., Bhojwani, S.S.: An efficient protocol for the production of triploid plants from endosperm callus of neem, Azadirachta indica A.Juss. — J. Plant Physiol. 160 P.- 557-564, 2003.

147. Cheliak, W.M.; Klimaszewska, K.; Genetic variation in somatic embryogenic response in open-pollinated families of black spruce. Theor. Appl. Genet. 82 P.- 185-190; 1991.

148. Chen, L.J., Zhu XY, Gu L, Wu J (2005) efficient callus induction and plant regeneration from anthers of Chinese narcissus (Narcissus tazetta L.var. Chinensis Roem). Plant Cell Rep 24 P.- 401-407.

149. Cheng, C.H., and Chang W. L. 1979. Studies on varietal resistance to the brown plant hopper in Taiwan, p 251-271 in international Rice Research Institute. Brown plant hopper: threat to rice production in Asia, Los Banos, Philippines.

150. Cheng, Y-H.; Yang, J-S.; Yeh, S-D. Efficient transformation of papaya by coat protein gene of papaya ringspot virus mediated byAgrobacterium following liquid-phase wounding of embryogenic tissues with carborundum. Plant Cell Rep. 16 P.- 127-132, 1996.

151. Clarke, S.F., Burritt, D.J., Jameson, P.E., and Guy, P.L., Influence of Plant Hormones on Virus Replication and Pathogenesis-Related Proteins in Phaseolus vulgaris L. Infected with White Clover Mosaic Potexvirus, Physiol. Molec. Plant Pathol. 1998, vol. 53, pp. 195-207.

152. Cole, J.S., Desiree, L., Fernandes, D.L., Changes in the Resistance of Tobacco Leaf to Erysiphe cichoracearum DC. Induced by Topping, Cytokinins and Antibiotics, Ann. Appl. Biol., 1970, vol. 66, pp. 239-243.

153. Coleman, G.D.; Ernst, S. G.In vitro shoot regeneration ofPopulus deltoides: effect of cytokinin and genotype. Plant Cell Rep. 8 P.- 459-462; 1989.

154. Conner, L.N. and Conner A.J. (1984) Comparative water loss from leaves of Solanum laciniatum plants cultured in vitro and in vivo/ Plant Science Lett 36 P.- 241-246

155. Conover, C.A., Poole RT (1984) Acclimatization of indoor foliage plants. Horticultural Reviews 6, P.- 119-154

156. Dai, H., Zhang Z., Gao X., Wang F. (2004) In vitro propagation of Linsmaier subulata L. Acta Hortic Sin 31 P.- 397-399

157. Das, T., Mitra G. // Plant Cell, Tissue and Organ Cult. 1990. Vol. 22, № 2. P. 95-103.

158. Debergh, P.C. and Maene L.J. (1981) A scheme for commercial propagation of ornamental plants by tissue culture. Sci. Hortic.14 P.- 335-345

159. Declerck, V. and S.S. Korban. 1995. Shoot regeneration from leaf tissues of Phlox paniculata L. J. Plant Physiol. 147 P.- 441-46.

160. Druart, P. In vitro promotion of root formation by appy shoots trough darkness effect on endogenous phenols and peroxidases // Z. Pflanrenphysiol, 1982. № 1085. P.429-436.

161. Dudits, D., Nemet, G., and Haydu, Z. (1975). Study of callus growth and organ formation in wheat (Triticum aestivum) tissue cultures.

162. Durham, R.E.; Korban, S. S. Effects of explant size, pretreatment, and light intensity on shoot regeneration from in vitro-grown apple leaves. In: Schmidt, H.; Kellerahls, M., ed. Progress in temperate fruit breeding. Dordrecht: Kluwer Acad. Publ.; 1994 P.- 355-359.

163. Edwards, H.H., Effect of Kinetin, Abscisic Acid, and Cations on HostParasite Relations of Barley Inoculated with Erysiphe graminis f. sp. hordei, Phytopathol. Z., 1983, vol. 107, pp. 22-30.

164. Eeckhaut, T.G.R., Werbrouck S.P.O., Leus L.W.H., Van Bockstaele E.J., Debergh P.C. (2004) Chemically induced polyploidization in Spathiphyllum wallisii Regel through somatic embryogenesis. Plant Cell Tissue Organ Cult 78:241-246.

165. Eom, S.H., Yang, H.S., Weston, L.A. (2006) an evaluation of the allelopathic potential of selected perennial groundcovers: Foliar volatiles of catmint (Nepeta x faassenii) inhibit seedling growth. J Chem Ecol 32:1835-1848

166. Ferguson, C.J., Jansen, R.K. (2002) A chloroplast DNA phylogeny of eastern Phlox (Polemoniaceae): implications of congruence and incongruence with the ITS phylogeny. Am J Bot 89 P.- 1324-1335

167. Fraga, M., Alonso M., Borja M. Shoot Regeneration Rates of Perennial Phlox are Dependant on Culvar and Explant Type // Hort. Science. - 2004. -Vol. 39 (6). - P. 1373-1377.

168. Fuchs, H. Phlox. Stauden- und Polsterphlox. 1994. P.- 115.

169. Gercheva, P.; Zimmerman, R. H.; Owens, L. D., et al. Particle bombardment of apple leaf explants influences adventitious shoot formation. HortScience 29 P.- 1536-1538; 1994.

170. Gmitter, F.G., Ling, X.B., Deng, X.X.: Induction of triploid plants from endosperm calli in vitro. — Theor. Appl. Genet. 80 P.- 785-790, 1990.

171. Gu, X.F., Yang A.F., Meng H., Zhang J.R. (2005) In vitro induction of tetraploid plants from diploid Zizyphus jujuba Mill. cv. Zhanhua. Plant Cell Rep 24 P.- 671-676.

172. Hadi, M.Z.; Bridgen, M. P. Somaclonal variation as a tool to develop pest resistant plants ofTorenia fournieri Compacta Blue. Plant Cell Tissue Organ Cult. 46 P.- 43-50; 1996.

173. Hadi, M.Z.; McMullen, M. D.; Finer, J. J. Transformation of 12 different plasmids into soybean via particle bombardment. Plant Cell Rep. 15:500-505; 1996.

174. Hammerschlag, F. A. Somaclonal variation. In: Hammerschlag, F. A.; Litz, R. E., ed. Biotechnology of perennial fruit crops. Wallingford, UK: C.A.B. Intl.; 1992 P.- 35-56.

175. Hansen, A.L., Gertz A., Joersbo M., Andersen S.B. (1998) Antimicrotubule herbicides for in vitro chromosome doubling in Beta vulgaris L. ovule culture. Euphytica 101 P.- 231-237.

176. Hare, R. Free Planters Notes // 1975. -V. 26,(4). -P. 39-38.

177. Henderson, K.P., Taji, A.M. and Williams, R.R. 1994. Effects of reduced humidity and paclobutrazol on acclimatisation of tissue-cultured plants. Int. Plant Propag. Soc.

178. Henshaw, G.G. (1978) freeze preservation of potato shoot-tip cultures/ Ann Bot (London)

179. Hiraoka, N. (1988) Nonfrozen storage of cell cultures and its effect on metabolites. In: Bajaj Y.P.S. (ed) Biotechnology in agriculture and forestry, vol 4. Medicinal and aromatic plants I. Springer, Berlin Heidelberg New York, pp 157-168.

180. Hoshino, Y., Miyashita, T., Thomas, T.D.: In vitro culture of endosperm and its applications in plant breeding: approaches to plant breeding. — Sci. Hort. 130 P.- 1-8, 2011.

181. Hussey, G. In vitro methods of plant propagation // Sei.Hort.1975.- V. 25. N 1- P. 24-28.

182. III-Whan. S. and S.K. Schuyler. 1998. Influence of bombardment with BA-coatcd microprojcctilcs on shoot organogenesis from Phlox paniculata L. and Pinus pinea L. tissues. In vitro Cell. Dev. Biol. - Plant 34 P.- 300-302.

183. Jain, A., G.R. Rout, and S.N. Raina. 2002. Somatic embryogenesis and plant regeneration from callus cultures of Phlox paniculata Linn. Scientia Hon. 94:137-143. Jap. Soc. Hort. Sci. 68 P.- 397-401.

184. Johri, B.M., Bhojwani, S.S.: Growth responses of mature endosperm in cultures. — Nature 208 P.- 1345-1347, 1965.

185. Kadota, M., Niimi Y (2002) In vitro induction of tetraploid plants from a diploid Japanese pear cultivar (Pyrus pyrifolia N. cv. Hosui). Plant Cell Rep 21 P.- 282-286..

186. Kavanagh, K.L., D.H. Lee, A.P. Drew, and C.A. Maynard 1993. The effects of GA3 and organic solvents on acclimatization of tissue culture propagated black cherry (Prunus serotina Ehrh.) plantlets. For. Sci. 39(4) P.- 644-654.

187. Kalaiselvi, R., Rajasekar M. and Gomathi S. Cryopreservation of Plant Materials - A Review// India- International Journal of Chemical Studies 2017; 5(5) P.- 560-564.

188. Keller J. Zur Rolle in vitro-Kultur in Genbanken // Vortr. Pfl anzenzüchtg. -V. 27 - 1994. - S. 287-295.

189. Koga M., Hirashima, K., Fushihara, H., Mitsui, H. and Nakahara T. 1999. The effects of the length of the culture period and size of the plantlets at potting on survival of tissue-cultured strawberry plantlets raised without the operation of acclimatization. J. P.-254-259.

190. Korban S.S.; O'Connor, P.A.; Elobeidy, A. Effects of thidiazuron, naphthaleneacetic acid, dark incubation and genotype on shoot regeneration fromMalus leaves. J. Hort. Sci. 67 P.- 341-349; 1992.

191. Koul, K.K., Raina S.N. (1996) Male and female meiosis in diploid and colchitetraploid Phlox drummondii Hook. (Polemoniaceae). Bot J Linn Soc 122 P.- 243-251.

192. Kyte, L. and J. Kleyn. 1996. Plants from test tubes: An introduction to micropropagation. Timber Press, Ore.

193. Laine, E.; David, A. Regeneration of plants from leaf explants of micropropagated clonalEucalyptus grandis. Plant Cell Rep. 13 P.- 473-476; 1994.

194. Lalibcrtc, S.L., Chretien, and J. Victh 1985. In vitro plantlct production from young capitulum explants of Gerhera jamesonii. HortScience 20 P.- 137-139.

195. Leege, A. D.; Tripepi, R. R. Rapid adventitious shoot regeneration from leaf explants of European birch. Plant Cell Tissue Organ Cult. 32 P.-123-129; 1993.

196. Leitch, I.J., Bennett M.D. (1997) Polyploidy in angiosperms. Trends Plant Sci 2 P.- 470-476.

197. Lendvai, G, Levin D.A. (2003) Rapid response to artificial selection on flower size in Phlox. Heredity 90 P.- 336-342.

198. Li H Zhang J, Zhang Q (2005) recent advances in horticultural studies of Phlox and its major cultivated species. Acta Hortic Sin 32 P.- 954-959.

199. Linsmaicr, E.M. and F. Skoog 1965. Organic growth factor requirements of tobacco tissue cultures. Physiol. Plant. 18P.- 100-127.

200. Liu, Z. and Bushnell W.R., Effects of Cytokinins on Fungus Development and Host Response in Powdery Mildew of Barley, Physiol. Molec. Plant Pathol., 1986, vol. 29, no. 1, pp. 41-52.

201. Long, R.D., Curtin T.F., Cassels A.C. An investigation of the effects of bacterial contaminations on potato nodal cultures // Acta Hortic., 1988. -V.225. - P. 83-90.

203. Merkle, S.A. Strategies for dealing with limitations of somatic embryogenesis in hardwood trees. Plant Tissue Cult. Biotech. 3 P.- 112-121; 1995.

204. Meyer, M.M.Jr. 1980. In vitro propagation of Hosta sieboldiana. HortScience 15 P.- 737-738.

205. Miyashita, T., Ohashi T., Shibata F., Araki H., Hoshino Y.: Plant regeneration with maintenance of the endosperm ploidy level by endosperm culture in Lonicera caerulea var. emphyllocalyx. — Plant Cell Tissue Organ Cult. 98 P.-291-301, 2009.

206. Mize, C.W.,K.J. Kochlcr and M. E. Compton. 1999. Statistical considerations for in vitro research: II. Data to presentation. In Vitro Cell. Dev. Biol. -Plant. 35 P.- 122-126.

207. Murashige, T. and F. Skoog. 1962. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures. Physiol. Plant. 15 P.- 473-497.

208. Olensen, M.N. and M. Fonncsbcch. 1975. Phlox plants from shoot tips. Acta Hort. 54 P.- 95-99.

209. Oliveira, M.M.; Miguel C.M.; Raquel, M.H. Transformation studies in woody fruit species. Plant Tissue Cult. Biotech. 2 P.- 76-93; 1996.

210. Otto SP, Whitton J (2000) Polyploid incidence and evolution. Ann Rev Genet 34 p.- 401-437

211. Papachatz, M., P.A. Hammer, and P.M. Hascgawa. 1980. In vitro propagation of Hosta plantaginea. HortScience 15 P.- 506-507.

212. Paques, M. Vitrifi cation and micropropagation: causes,remedies and prospects // Acta Hortic, 1991. - V. 289. - P. 283-290.

213. Park, M.J., Park J.H., Lee S.G., Shin H.D. (2010) First confirmed report on powdery mildew of Phlox paniculata caused by Golovinomyces magnicellulatus in Korea. Plant Pathol J 26(3) P.- 295

214. Petersen, K.K., Hagberg P, Kristiansen K (2003) Colchicine and oryzalin mediated chromosome doubling in different genotypes of Miscanthus sinensis. Plant Cell Tissue Organ Cult 73 P.- 137-146.

215. Phillips, G.C.; Hubstenberger, J. F.; Hansen, E. Plant regeneration by organogenesis from callus and cell suspension cultures. In: Gamborg, O. L.; Phillips, G.C., ed. Plant cell tissue and organ culture: fundamental methods. Berlin Heidelberg: Springer-Verlag; 1995 P.- 67-79.

216. Pierik, R.L.M. In vitro culture of higher plants. Dordrecht: Martinus Nijhoff Publ.; 1987.

217. Pinto, A.C.R., Demate, M.E.S. P., Santos, D.M.M., Barbosa, S., Crest, S.: Growth regulators for in vitro propagation of Tilandsia gardneri (Bromeliaceae). — Acta Hort. 1002 P.- 51-57, 2013.

218. Ponchia, G, Roselli G (1980) Prove di micropropopagazione di due cloni di ciliegio acido (Prunus cerasus L.). Riv Ortoflorofrutt it 64 P.- 229-240

219. Prasad, R.N., Chaturvedi HC. 1988. Effect of season of collection of explants on micropropagation of Chrysanthemum morifolium. Biologia Plantarum 30(1), 20-24.

220. Predieri, S. (2001) Mutation induction and tissue culture in improving fruits. Plant Cell Tissue Organ Cult 64 P.- 185-210

221. Preece, J.E. The most tricky part of micropropagation: establishing plants in greenhouses and fields / Comb.Proc. Intern. Plant Propagators' Soc. - 2002 -Vol.51. - C. 300-303

222. Raghuvanshi, S.S., Pathak C.S. (1975) Polyploid breeding and possibility of raising double varieties in Phlox drummondii Hook. Cytologia (Tokyo) 40 P.-355-363

223. Raja, V.G., Koul K.K.., Raina, S.N., Parida, A.: Ploidy dependant genomic stability in tissue cultures of ornamental Phlox drummondii Hook. — Plant Cell Rep. 12 P.- 12-17, 1992.

224. Razdan, A., Razdan M.K., Rajam M.V., Raina, S.N.: Efficient protocol for in vitro production of androgenic haploids of Phlox drummondii. — Plant Cell Tissue Organ Cult. 95 P.- 245-250, 2008.

225. Razdan, M.K. (2003) Introduction to plant tissue culture, 2nd edn. Science Publishers, Enfield

226. Rout, G.R., Mohapatra A., Jain S.M.: Tissue culture of ornamental pot plant: a critical review on present scenario and future prospectus. — Biotechnol. Adv. 24 P.- 531-560, 2006.

227. Sakai, A. Yamakawa M., Sakata D., Harada T., Yakuwa T., Development of Whole Plant from an Exeised Strawberry Runner Apex Frozen to -196C // Low Temp. Sci.: Sec. B. 1978. V. 36. P. 31.

228. Sanford, J.C. (1983) Ploidy manipulations. In: Moore JN, Janick J (eds) Methods in fruit breeding. Purdue Univ. Press, West Lafayette, pp 100-123

229. Sanford J. C.; Smith, F. D.; Russel, J. A. Optimizing the biolistic process for different biological applications. Methods Enzymol. 217 P.- 483-509; 1993.

230. Schnabelrauch, L.S. and K.C.Sink. 1979. In vitro propagation of Phlox subulata and Phlox paniculata. HortScience 14 P.- 607-608.

231. Shao, J., Chen C., Deng X. (2003) In vitro induction of tetraploid in pomegranate (Punica granatum). Plant Cell Tissue Organ Cult 75 P.- 241-246

232. Shestibratov, K.A. and Vidyagina O.E. Efficient Technique for Long-Term in Vitro Storage of Transgenic Aspen Genotypes// American Journal of Plant Sciences, 2018, 9, 2593-2600

233. Singha, S. In vitro propagation of Seckel pear. In: Proc Conf Nursery production of fruit plants through tissue culture: application and Feasibility// 1980

234. Skirvin, R. Sources and frequency of somaclonal variation / R. Skirvin // Hort. Sci. - 1994. - 29. - Р. 1232-1236

235. Smith, R.H.: Plant Tissue Culture: Techniques and Experiments. 3rd Ed. Elsevier, New Delhi 2013.

236. Sopory, S.K., Munshi M (1996) Anther culture. In: Jain S.M., Gupta P.K., Newton R.J. (eds) Somatic embryogenesis in woody plants. Vol. I. Angiosperms. Kluwer Academic publishers, Dordrecht, pp 145-176

237. Supena, E.D.J., Subharsono S, Jacobsen E, Clusters JBM (2006) Successful development of a shed—microspore culture protocol for doubled haploid production Indonesian hot pepper (Capsicum annum L.). Plant Cell Rep 25 P.- 1-10.

238. Swartz, H.J. Small fruit and grape tissue culture from 1980 to 1985: commercialization of the technique / H.J. Swartz, I.T. Lindstrom // Tissue culture as a plant production system for horticultural crops: Conferense on tissue culture. Beltsville, MD, 1986. - P. 201-220

239. Sziraki, I., Balazs, E., and Kiraly, Z., Role of Different Stresses in Inducing Systemic Acquired Resistance to TMV and Increasing Cytokinin Levels in Tobacco, Physiol. Plant Pathol., 1980, vol. 16, pp. 277-284.

240. Takashi, Harada et al. Stades the Morphogenesis of asparagus asparagus organ formation in the in vitro culture of segments with a node excited from the shoots seedlings // J. Fac. Agr. Hokkaido Univ, 1983. V. 61. № 3. P. 295306.

241. Thao, N.T.P., Ureshino K, Miyajima I, Ozaki Y, Okubo H (2003) Induction of tetraploids in ornamental Alocasia through colchicine and oryzalin treatments. Plant Cell Tissue Organ Cult 72 P.- 19-25

242. Thomas, T.D., Bhatnagar A.K., Bhojwani S.S.: Production of triploid plants of mulberry (Morus alba L.) by endosperm culture. — Plant Cell Rep. 19 P.-395-399, 2000.

243. Thomas, T.D., Chaturvedi, R.: Endosperm culture: a novel method of plant improvement. — Plant Cell Tissue Organ Cult. 93 P.- 1-14, 2008.

244. Tran, Thanh Van M, Chlyah H, Chlyah A (1974) Regulation of organogenesis in thin layers of epidermal and sub-epidermal cells.

245. Van, Duren M., Mopurgo R., Dolezel J., Afza R. (1996) Induction and verification of autotetraploids in diploid banana (Musa acuminata) by in vitro techniques. Euphytica 88 P.- 25-34

246. Varga, M., Humphries E.C. (1974) Root formation on petioles of detached primary leaves of dwarf bean (Phaseolus vulgaris) pretreated with gibberellic acid, triiodobenzoic acid, and cytokinins

247. Wherry, E.T. 1955. The genus Phlox. Monogr. III. Morris Arbor. Philadelphia.

248. Wilkins, C.P., Dodds J.H. Tissue culture conservation of woody specie // Tissue culture of trees / Ed. J.H. Dodds. - London, 1983. - P. 55-56

249. Zhang Yanni; Shen Hongjian; L.R.Iyan / Cutting propagation of tender branch of Phlox paniculata// Journal of Northeast Forestry University 34(3) P.- 45-46, 56 2006

250. Zhao, F-C, Nilanthi D, Yang Y-S, Wu H (2006) Anther culture and haploid plant regeneration in purple cone flower (Echinacea purpurea L.). Plant Cell Tissue Organ Cult 86 P.- 55-62.

251. Ziv, M. (1991) Vitrification: morphological and physiological disorders of in vitro plants. In: Debergh PC and Zimmerman RH (eds) Micropropagation Technology and Application (pp. 45-69) Kluwer. Dordrecht.

252. Ziv, M. Meir G and Halevy AH (1983) Factors influencing the production of hardened glaucous carnation plantlets in vitro/ Plant Cell Tissue Organ Cult. 2 P.- 55-60.

Приложения

Приложение А

Таблица А1- Морфологическая характеристика объектов исследований

Сорт Оригинатор/ год Окраска Высота куста, см Форма соцветия Расположе ние лепестков Диаметр венчика Срок цветения

венчика

Дракон Гаганов П.Г. Год: 1958 темно-пурпурно-фиолетовый с серебристыми штрихами и маленьким карминовым ярким глазком 70-80 округло-коническое не перекрыва ются 3,7-4,0. средний

Успех Гаганов П.Г. Год: 1937. фиолетовый, с большим белым центром 70-80 округло-коническое сильно перекрыва ются 3,8-4,0 средний

Игорь Тальков Константинов а Е.А. Год: 1987. светло фиолетовый 70-75 полушаровид ное не перекрыва ются 4,3-4,5 средне-ранний

Цвет Яблони Харченко Е.Д. нежно-розовый с белым центром 70 плоскоокругл ое не перекрыва ются 4,3-4,5 средне-ранний

Сорт Оригинатор/ год Окраска Высота куста, см Форма соцветия Расположе ние лепестков венчика Диаметр венчика Срок цветения

Конек-Горбунок Сурикова В.Я, Константинов а Н.Ю. Год: 2006. серебристо-дымчатый с фиолетово-пурпурной звездочкой 65-70 округло-коническое не перекрыва ются 3,5-3,7 средне-ранний

Иоганн Себастиан Бах Репрев Ю.А. Год: 1987. малиново-коричневый с серой дымкой и карминовым колечком 80 округло-коническое не перекрыва ются 4,0-4,3 средне-ранний

Danielle J. Verschoor белый с салатовым отсветом в зеве 70-80 овально-коническое слабо перекрыва ются почти по всей длине 3,0 -3,5 средне-ранний

Sweet Summer Favorite H. Tonies (Недерланды). Год: 2008. нежно-розовый с лиловыми переливами 60-70 округлое не перекрыва ются 2,8-3,0 средне-ранний

Сорт Оригинатор/ год Окраска Высота куста, см Форма соцветия Расположе ние лепестков венчика Диаметр венчика Срок цветения

Sweet Summer Sensation H.Tonies (Недерланды). Год: 2008. нежно розовая с темно-малиновым глазком 70-80 округлое не перекрыва ются 2,9-3,1 средне-ранний

Шурочка (сеянец) РГАУ-МСХА Год: 2019 нежно розовая с темно розовыми штрихами в центре 90-110 шаровидная не перекрыва ются 1,8-2,0 средне-ранний

Марго (сеянец) РГАУ-МСХА Год: 2019 фиолетовая с белым, четко очерненным центром 120-130 пирамидальн ая не перекрыва ются 1,8-2,2 средне-ранний

Сорт Дракон Автор: Гаганов П.Г. Год: 1958. Высота: 70-80 см. Размер цветка: 4-4,5 см. Куст прочный, компактный. Соцветие округло-коническое. Насыщенно пурпурный с дымкой из серебристых штрихов, широким кольцом расположенных по краю лепестков и ярким большим центром. Листья темно-зеленые. Цветение: июль-сентябрь.

Сорт Danielle. Автор: J. Verschoor Высота куста 70-80 см Размер цветка 3-3,5 см Белый с салатовым отсветом в зеве. Цветок волнисто-колесовидный формы. Трубка салатовая. Соцветие плотное, овально-коническое. Куст прямостоячий, прочный, компактный. Стебли прочные. Листья темно-зеленые. Среднераннего цветения. Цветение продолжительное с конца июня по август. Устойчивый к грибным болезням сорт. Среднераннего цветения.

Сорт Sweet Summer Sensation. Автор: H.Tonies (Нидерланды). Год: 2008. Высота: 70-80 см Окраска цветка нежно розовая с темно-малиновым глазком. Крупное плотное соцветие. Листья овально-ланцетовидные, голые, шириной от 1,5 до 4 см и длиной от 5 - 7 до 15 см. В течении цветения листья меняют свой цвет от темно красноватой до зеленой. Цветет в июле, августе, иногда в сентябре.

Сорт Успех. Автор: Гаганов П.Г. Год: 1937. Высота куста 70 см Фиолетовый с большим белым центром. Может слегка выгорать на ярком солнце, но не портится от осадков. Цветок плоско-колесовидный. Соцветие округло-коническое, большое, плотное. Куст гармоничный, компактный, с густой темно-зеленой листвой. Великолепный сорт, один из лучших в мировом ассортименте. Разрастается и размножается быстро. Цветение с июля по август. Назначение сорта: цветники, посадка изолированной группой, срезка

Сорт Sweet Summer Favorite. Автор: H. Tonies (Нидерланды). Год: 2008. Высота 60-70 см, диаметр - 30 см Цветки - 2,8-3 см в, нежно-розовые с

лиловыми переливами, белым центром и маленьким тёмно-розовым колечком. Соцветие округлое или полусферическое, плотное. Цветение длительное. Листва глянцевая тёмно-зелёная, устойчивая к мучнистой росе.

Сорт Игорь Тальков Автор: Константинова Е.А. Год: 1987. Высота куста 70 см. Размер цветка 4,5 см. Фиолетовый, половина лепестка более светлая по тону. Не выгорает. В сумерках меняет цвет на синевато-фиолетовый. Соцветие полушаровидное, большое, плотное. Очень прочный куст, густая листва. Срок цветения среднеранний (июль-август).

Сорт Цвет Яблони. Автор: Харченко Е.Д. Размер куста 70 см Размер цветка 4,5 см Цветение продолжительное с конца июня по август. Теплого нежно-розового оттенка, с большим белым цветом. Цветки колесовидные с пурпурной трубкой. Соцветие - плотное. В основании широкий зонтик. Куст компактный. Стебли прочные, в верхней части темноокрашенные. Листья густые светло-зеленые. Сорт долго цветущий. Назначение сорта: цветники, группы, срезка (Константинова Е.А. 2014)

Сорт Конек-Горбунок Авторы: Сурикова В.Я, Константинова Н.Ю. Год: 2006. Размер куста 65-70 см. Размер цветка 3,7 см. Серебристо-дымчатый с фиолетово-пурпурной звездочкой, в начале роспуска фиолетово-пурпурный с белой звездой в центре. Соцветие округло-коническое, большое, ветвистое, средней плотности. Куст компактный, устойчивый, зимостойкий. Цветение обильное и продолжительное. Срок цветения среднеранний (июль-август).

Сорт Иоганн Себастиан Бах Автор: Репрев Ю.А. Год: 1987. Высота куста 80 см. Цветки диаметром 3-3,8 см, нежный красный тон лепестков с лилово-сероватой дымкой, в центре цветка небольшое белое просветление и тонкая карминовая звездочка. Соцветие округлое или полусферическое, плотное. Листва глянцевая тёмно-зелёная, устойчивая к мучнистой росе. Цветение длительное.

Сорт Шурочка. Высота 90-110; диаметр 50-60. Куст прямостоящий, быстро разрастающийся. Листья зеленые, глянцевые, опушенность отсутствует, лист длиной 6-9 см, шириной 2,5 см Форма соцветия шаровидная. Окраска цветка светло розовая с темно розовыми штрихами в центре. При своевременной профилактической обработке не поражается вредителями и болезнями. Устойчив к выгоранию и ржавчине. Назначение сорта: цветочное оформление клумбы, миксбордеры; срезка

Сорт Марго. Высота куста 120-130, диаметр 50-60. Куст прямостоящий, прочный, быстро разрастающийся. Листья зеленые, глянцевые, опушенность отсутствует, лист длиной 6-9 см, шириной 2,5 см Форма соцветия пирамидальная. Окраска цветка светло-фиолетовая с белым, четко очерненным центром. Устойчив к выгоранию и ржавчине. Назначение сорта: цветочное оформление клумбы, миксбордеры; срезка

Приложение Б

Динамика увеличения коэффициента размножения микрорастений флокса метельчатого после введения в культуру in vitro на трех этапах мультипликации

Приложение Б1 - Анализ изменчивости коэффициента размножения микрорастений на трех этапах мультипликации

Источник вариации SS df ms о2 F F05 F01 Pin,% НСР05

Общая 265,89 149 0,70 100

Фактор (а) 88,76 4 22, 19 0,12 19,01 2,37 3,32 34 0,77

Фактор (Ь) 13,85 2 6,93 0,07 5,93 3,00 4,61 6 0,50

Взаимодействие (аЬ) 5,68 8 0,71 1,17 0,61 1,94 2,51 3 1,64

Случайная 157,60 135 1,17 1,98 57

Приложение Б2 - Доли влияния факторов исследуемых сортов (а) и пасажа (Ь) на коэффициент размножения флокса метельчатого на этапе мультипликации

■ Сорт (фактор а) Пассаж (фактор Ь) Взаимодействие (ab) Случайная

Источник вариации 88 шэ о2 Ра Р05 Р01 р1п% НСР05

Общая 12,20 0,242 100

Фактор (а) 9,88 2,47 0,052 47,91 2,55 3,70 82 0,273

Случайная 2,32 0,05 0,293 18

Приложение Б4 - Анализ изменчивости данных коэффициента размножения флокса метельчатого (1 пассаж)

Источник вариации 88 шэ о2 Ра Р05 Р01 р1п% НСР05

Общая 118,75 2,427 100

Фактор (а) 19,12 4,78 0,261 2,21 2,55 3,70 11 1,768

Случайная 99,63 2,17 2,166 89

Приложение Б5 - Анализ изменчивости данных коэффициента размножения флокса метельчатого (2 пассаж)

Источник вариации 88 шэ о2 Ра Р05 Р01 р1п% НСР05

Общая 111,69 2,289 100

Фактор (а) 19,10 4,78 0,276 2,37 2,55 3,70 12 1,705

Случайная 92,58 3,01 2,013 88

Приложение Б6 - Анализ изменчивости данных коэффициента размножения флокса метельчатого (3 пассаж)

Источник вариации 88 шэ о2 Ра Р05 Р01 р1п% НСР05

Общая 94,63 1,965 100

Фактор (а) 20,83 5,21 0,360 3,25 2,55 3,70 18 1,522

Случайная 73,80 1,60 1,604 82

Приложение В

Влияние регуляторов роста цитокининовой природы на приживаемость эксплантов флокса метельчатого при введении в культуру in vitro (сорт Успех)

Приложение В1-Анализ изменчивости данных приживаемости флокса метельчатого сорта Успех

Источник вариации SS ms о2 Fa F05 F01 pin% HCP05

Общая 140591,48 1559,185 100

Фактор (a) 113757,15 14219,64 1406,718 93,26 1,94 2,51 90 16,790

Случайная 26834,32 152,47 152,468 10

Приложение В2-Анализ изменчивости данных коэффициента размножения флокса метельчатого сорта Успех

Источник вариации SS ms о2 Fa F05 F01 pin% HCP05

Общая 530,51 5,808 100

Фактор (a) 418,98 52,37 5,174 82,64 1,94 2,51 89 1,084

Случайная 111,54 0,63 0,634 11

Приложение ВЗ-Анализ изменчивости данных длины побегов флокса метельчатого сорта Успех

Источник вариации SS ms о2 Fa F05 F01 pin% HCP05

Общая 320,62 3,032 100

Фактор (a) 188,46 23,56 2,281 31,37 1,94 2,51 75 1,178

Случайная 132,16 0,75 0,751 25

Приложение Г1- Анализ изменчивости состояние микрорастений флокса метельчатого после 12 месяцев депонирования в зависимости от разрабатываемых приемов

Источник вариации SS df ms о2 F F05 F01 pin % НСР 05

Общая 241,96 239 0,94 100

Фактор (а) 189,14 5 37, 83 0 166,66 2,21 3,02 81 0,301

Фактор (Ь) 0,10 1 0,10 0 0,46 3,84 6,63 0 0,122

Взаимодейств ие (аЬ) 0,97 5 0,19 0,23 0,86 2,21 3,02 0 0,490

Случайная 51,75 228 0,23 1,16 19

Приложение Д

Подбор оптимального минерального состава питательной среды на этапе мультипликации. Зависимость коэффициента размножения и длины побегов от макро солевого состава сред.

Приложение Д1- Анализ изменчивости данных коэффициента размножения микрорастений флокса метельчатого от макро солевого состава сред

Источник вариации 88 шэ о2 Р Р05 Р01 Р1п,% НСР05

Общая 218,40 239 0,111 100

Фактор (а) 18,53 2 9,27 0,562 24,27 3,00 4,61 10 0,228

Фактор (Ь) 102,25 3 34,08 0,069 89,27 2,60 3,78 50 0,287

Взаимодействие (аЬ) 10,57 6 1,76 0,382 4,61 2,10 2,80 6 0,636

Случайная 87,05 228 0,38 1,123 34

Приложение Д2-Анализ изменчивости данных длины побегов микрорастений флокса метельчатого от макро солевого состава сред

Источник вариации 88 шэ о2 Р Р05 Р01 Р1п,% НСР05

Общая 95,32 239 0,117 100

Фактор (а) 18,93 2 9,47 0,183 121,55 3,00 4,61 20 0,103

Фактор (Ь) 33,26 3 11,09 0,208 142,38 2,60 3,78 31 0,130

Взаимодействие (аЬ) 25,37 6 4,23 0,078 54,30 2,10 2,80 35 0,287

Случайная 17,75 228 0,08 0,586 13

Приложение Е

Выявление оптимальной длительности субкультивирования флокса метельчатого на этап мультипликации. Влияние концентрации цитокинина (6-БАП) и длительности субкультивирования на коэффициент размножения in vitro флокса метельчатого

Приложение Е1 - Анализ изменчивости данных длительности субкультивирования на коэффициент размножения in vitro флокса метельчатого в зависимости от концентрации цитокинина (6-БАП)

Источник вариации SS df ms о2 F F05 F01 pin % НС Р 05

Общая 526,21 359 2,24 100

Генотип сорта (а) 56,28 2 28,14 0,23 118,7 2 3,02 4,67 10 0,147

Длительность пассажа (b) 296,63 2 148,3 2 1,23 625,7 4 3,02 4,67 55 0,147

Концентрация 6-БАП (с) 13,24 3 4,41 0,05 18,62 2,63 3,84 2 0,185

Взаимодействие (ab) 18,49 4 4,62 0,11 19,50 2,40 3,38 5 0,339

Взаимодействие (ас) 25,23 6 4,21 0,13 17,74 2,13 2,86 6 0,409

Взаимодействие (bc) 18,70 6 3,12 0,10 13,15 2,13 2,86 4 0,409

Взаимодействие (abc) 20,84 12 1,74 0,15 7,33 1,78 2,24 7 0,770

Случайная 76,80 324 0,24 0,24 11

Источник вариации SS df ms о2 F F05 Foi pin% НСР 05

Общая 177,79 359 0,78 100

Генотип сорта (а) 15,03 2 7,52 0,06 410,34 3,02 4,67 8 0,041

Длительность пассажа (b) 123,28 2 61,64 0,51 3365,25 3,02 4,67 65 0,041

Концентрация 6-БАП (с) 5,53 3 1,84 0,02 100,63 2,63 3,84 3 0,051

Взаимодействие (ab) 6,23 4 1,56 0,04 85,02 2,40 3,38 5 0,094

Взаимодействие (ас) 8,99 6 1,50 0,05 81,84 2,13 2,86 6 0,114

Взаимодействие (bc) 7,93 6 1,32 0,04 72,11 2,13 2,86 6 0,114

Взаимодействие (abc) 4,86 12 0,40 0,04 22,11 1,78 2,24 5 0,214

Случайная 5,93 324 0,02 0,02 2

Приложение Е3-Анализ изменчивости данных длительности субкультивирования (45 дней) на коэффициент размножения in vitro флокса метельчатого в зависимости от концентрации цитокинина (6-БАП)

Источник вариации SS df ms о2 F Fo5 Foi Pin,% НСР05

Общая 54,84 119 0,33 100

Фактор (а) 26,31 2 13,15 0,08 134,40 3,00 4,61 49 0,163

Фактор (Ь) 7,50 3 2,50 0,16 25,55 2,60 3,78 12 0,206

Взаимодействие (аЬ) 10,46 6 1,74 0,10 17,81 2,10 2,80 25 0,455

Случайная 10,57 108 0,10 0,67 15

Источник вариации SS df ms о2 F F05 F01 Pin,% НСР05

Общая 12,66 119 0,08 100

Фактор (а) 6,64 2 3,32 0,02 194,37 3,00 4,61 53 0,068

Фактор (Ь) 2,00 3 0,67 0,03 39,07 2,60 3,78 14 0,086

Взаимодействие (аЬ) 2,18 6 0,36 0,02 21,25 2,10 2,80 22 0,190

Случайная 1,84 108 0,02 0,16 11

Приложение Е5-Доли влияния факторов исследуемых сортов (а) и длительности субкультивирования (45 дней) (Ь) на коэффициент размножения флокса метельчатого

■ Сорт (фактор а) Длительность

культивирования (фактор Ь) Взаимодействие (ab)

Случайная

метельчатого

Приложение Е7-Анализ изменчивости данных длительности субкультивирования (55 дней) на коэффициент размножения in vitro флокса метельчатого в зависимости от концентрации цитокинина (6-БАП)

Источник вариации SS df ms о2 F F05 F01 Pin,% НСР05

Общая 79,13 119 0,57 100

Фактор (а) 45,72 2 22,86 0,21 300,11 3,00 4,61 60 0,144

Фактор (Ь) 19,07 3 6,36 0,09 83,43 2,60 3,78 22 0,181

Взаимодействие (аЬ) 6,11 6 1,02 0,08 13,37 2,10 2,80 10 0,401

Случайная 8,23 108 0,08 0,95 8

Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.