Структурное изучение стеринов и некоторых сопутствующих токсинов морских губок тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.10, кандидат химических наук Санталова, Елена Анатольевна

• Санталова, Елена Анатольевна
• кандидат химических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат химических наук Санталова, Елена Анатольевна

1. ВВЕДЕНИЕ.

2. СТЕРИНЫ ГУБОК.

2.1. Литературный обзор.

2.1.1. Общие сведения о стеринах.

2.1.2. Методы исследования стеринов.

2.1.2.1. Хроматографическое выделение и разделение стеринов.

2.1.2.2. Газо-жидкостная хроматография.

2.1.2.3. Масс-спектрометрия.

2.1.2.4. СпектроскопияЯМР 'Н и 13С.

2.1.3. Некоторые литературные данные о губках и их стеринах.

2.2. Обсуаедение результатов.

2.2.1. Выделение фракций свободных стеринов губок и их разделение.

2.2.2. Стерины трех губок рода Xestospongia (отряд Haplosclerida, семейство Petrosiidae).

2.2.3. Стерины и другие стероидные соединения пяти губок рода Haliclona (отряд Haplosclerida, семейство Chalinidae).,.

2.2.4. Стерины Callyspongia sp. (отряд Haplosclerida, семейство Callyspongiidae).

2.2.5. Стерины двух губок рода Amphimedon (отряд Haplosclerida, семейство Niphatidae).

2.2.6. Стерины семи губок рода Oceanapia (отряд Haplosclerida, семейство Phloeodictyidae).

2.2.7. Стерины Lissodendoryx behringi (отряд Poecilosclerida, семейство Coelosphaeridae).

2.2.8. Стерины Clathria major (отряд Poecilosclerida, семейство Microcionidae).

2.2.9. Стерины Monanchora clathrata (отряд Poecilosclerida, семейство Crambeidae).

2.2.10. Стерины двух образцов губки Geodinella robusta (отряд Astrophorida, семейство Geodiidae).

2.2.11. Стерины Erylus formosus (отряд Astrophorida, семейство Geodiidae).

2,2.12. Стерины Melophlus sarasinorum (отряд Astrophorida, семейство

Ancorinidae).

2.2.13. Стерины Agelas mauritiana (отряд Agelasida, семейство Agelasiidae).

2.2.14. Стерины Darwinella australiensis (отряд Dendroceratida, семейство Darwinellidae).

2.2.15. Стерины Scalarispongia sp. (отряд Dictyoceratida, семейство Thorectidae).

2.2.16. Стерины губки Phakellia elegans (отряд Halichondrida, семейство Axinellidae).

2.2.17. Стерины губки Teichaxinella labirintica (отряд Halichondrida, семейство Axinellidae).

2.2.18. Стерины неидентифицированной губки сем. Axinellidae (отряд Halichondrida).

2.2.19. Стерины Didiscus aceratus (отряд Halichondrida, семейство Desmoxyidae).

2.2.20. Стерины Topsentia sp. (отряд Halichondrida, семейство Halichondriidae).

2.2.21. Стерины Axynissa aplysinoides (отряд Halichondrida, семейство Halichondriidae).

2.2.22. Стерины неидентифицированной известковой губки (класс Calcarea).

2.2.23. Некоторые заключения из сравнительного анализа стеринов изученных губок.

2.3. О функциях стеринов губок.

3. ТОКСИНЫ, СОПУТСТВУЮЩИЕ ИЗУЧЕННЫМ СТЕРИНАМ.

3.1. Гемолитическая активность спиртовых экстрактов исследованных губок.

3.2. Свободные жирные кислоты из Amphimedon sp. 1:.

3.3. Сестертерпеноиды из губки Darwinella australiensis.

3.4. Тритерпеновые гликозиды из губки Melophlus sarasinorum.

3.5. Тритерпеновые гликозиды из губки Erylus formosus.

3.6. 2,3-Секо-стероидные кислоты из губки Haliclona sp. 5.

3.7. Дитерпеноиды с 9-метиладениновым фрагментом и бромсодержащий алкалоид из губки Agelas mauritiana.

3.8. Биполярный сфингозиноподобный липид из губки Oceanapia sp. 1.

3.9. Производное сесквитерпеноида из губки Axinyssa aplysinoides.

3.10. Полициклический гуанидиновый алкалоид из губки Monanchora clathrata.

3.11. Результаты параллельного исследования разных групп вторичных метаболитов губок.

4. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

5. ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Структурное изучение стеринов и некоторых сопутствующих токсинов морских губок»

Губки (тип Porifera) принадлежат к одной из самых древних групп животных и имеют самый разнообразный набор стеринов среди представителей животного царства. Стерины губок включают как обычные для эукариотических организмов мембранные компоненты (холестерин и его распространенные производные), так и соединения с необычными структурными чертами, функциональная роль которых остается неясной [13]. Исследование функций необычных стеринов морских губок до сих пор является актуальным направлением в изучении этих соединений.

Полученные ранее результаты параллельного изучения цитотоксичных вторичных метаболитов и стериновых фракций из одних и тех же морских беспозвоночных (голотурий, морских звезд, губок) позволили предположить, что, по крайней мере, в ряде случаев замена обычных стеринов на редкие представляет собой механизм защиты мембран токсин-продуцирующих видов от воздействия собственных токсинов. Наличие такой функциональной взаимосвязи («биохимической координации») в голотуриях и морских звездах между Д7-стеринами и станолами, с одной стороны, и токсичными гликозидами, с другой стороны, было обосновано ранее [4]. Была высказана гипотеза, что и в губках наличие разных необычных стеринов может быть связано с присутствием различных сопутствующих мембранолитических токсинов [5, 6].

Мембранотропные вторичные метаболиты губок давно рассматриваются в качестве потенциальных лекарственных средств. Если механизм их цитотоксического воздействия связан со стериновыми составляющими мембран, то изучение стеринов соответствующих продуцентов перспективно с точки зрения создания комбинированных препаратов с пониженной токсичностью.

Данная работа является первым систематическим изучением биохимической координации среди губок. Целью настоящего исследования являлись выделение, установление структуры свободных стеринов и сопутствующих им гемолитиков и цитотоксинов губок, а также выявление некоторых закономерностей совместного присутствия этих двух различных по своим биологическим функциям групп соединений (стеринов и токсинов) в организме животного. В дополнение к этому представляло интерес изучение распределения свободных стеринов в представителях различных таксонов Porifera, что могло дать новую хемотаксономическую информацию.

В данной работе мембранолитическая активность этанольных экстрактов, фракций и индивидуальных соединений была определена на мышиных эритроцитах. Как известно, эритроциты животных имеют высокое содержание холестерина (25-30%) и являются традиционной моделью для изучения функционального состояния мембран. В случае гемолиза визуально наблюдается непосредственный результат действия различных веществ на мембрану эритроцитов.

В качестве объектов исследования были выбраны тридцать пять образцов губок, относящихся, за исключением одной известковой губки (класс Calcarea) к классу Demospongiae. Мы изучили стерины данных беспозвоночных, а также гемолитическую активность этанольных экстрактов большинства губок. Этанольные экстракты из тридцати видов показали различную степень гемолитической активности, вплоть до ее отсутствия. Из экстрактов семи губок, показавших наибольшую активность, нами были выделены гемолитические агенты разной химической природы (жирные кислоты, терпеноиды, гликозиды, стероидные кислоты, алкалоиды).

В диссертации использованы следующие сокращения:

ТСХ — тонкослойная хроматография; ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография высокого давления; ГЖХ - газо-жидкостная хроматография; ОВУ -относительное время удерживания;

СК ЯМР и 13С — спектроскопия ядерного магнитного резонанса на протонах и ядрах углерода; КССВ — константа спин-спинового взаимодействия; ХС — химический сдвиг; DEPT (Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer) - ЯМР-эксперимент с неискаженным усилением сигнала с помощью переноса поляризации с протона на ядро углерода; 1D NOE (Nuclear Overhauser Effect) — одномерный ЯМР-эксперимент ядерного эффекта Оверхаузера; NOESY (Nuclear Overhauser Effect Spectroscopy) - спектроскопия ядерного эффекта Оверхаузера; COSY (Correlation Spectroscopy) - корреляционная спектроскопия; TOCSY (Total Correlation Spectroscopy) - полная корреляционная спектроскопия; HSQC (Heteronuclear Single Quantum Correlation) - ЯМР-эксперимент гетероядерной одноквантовой корреляции; НМВС (Heteronuclear Multiple-Bond Correlation) - ЯМР-эксперимент гетероядерной корреляции через несколько связей;

МС - масс-спектрометрия; HRFABMS (High Resolution Fast Atom Bombardment Mass-spectrometry) — масс-спектрометрия высокого разрешения с ионизацией быстрыми атомами; MALDI-TOF (Matrix Assistant Laser Desorbtion/Ionization Time-of-Flight Mass-spectrometry) - масс-спектрометрия с матричной лазерной десорбцией/ионизацией; ГЖХ-МС - хромато-масс-спектрометрия; CAD (Collision Activation Dissociation) - вид масс-спектрометрии с диссоциацией, активированной столкновениями.

Нам представлялось удобным использовать для стероидных соединений часто употребляемую для них нумерацию, при которой стероидные ядра обозначаются буквами, а боковые цепи - цифрами. Таким образом, каждому стерину (стероиду) дается обозначение, состоящее из одной буквы и одной цифры. Например, холестерин будет иметь при этом номер А4. Соединения нестероидного характера пронумерованы обычным способом. Ниже приводятся структуры и буквенные обозначения тетрациклических ядер стероидов (схема 1) и их боковых цепей (схема 2). Среди стероидов, представленных на схемах 1 и 2, присутствуют как соединения, идентифицированные в данной работе, так и те, которые упоминаются при обсуждении результатов.

Автор выражает глубокую благодарность научному руководителю Макарьевой Т.Н., а также академику Стонику В.А. за чуткость и всяческую поддержку, к.х.н. Денисенко В.А., к.х.н. Дмитренку А.С, н.с. Дмитренку П.С., Моисеенко О.П., к.б.н. Прокофьевой Н.Г., к.х.н. Пономаренко Л.П. за съемку ЯМР- и масс-спектров, проведение биотестирования и ГЖХ-анализа, за абсолютно бескорыстную помощь в работе, ценные идеи и критические замечания.

Схема 1. Тетрациклические фрагменты стеринов (А-Н), кетостероидов (J), перекисей стеринов (K,L) и их буквенные обозначения

Заключение диссертации по теме «Биоорганическая химия», Санталова, Елена Анатольевна

5. ВЫВОДЫ

1. Изучен стериновый состав 35-ти образцов морских губок, принадлежащих (за исключением одной губки класса Calcarea) к 7-ми отрядам, 16-ти семействам, 19-ти родам и 14-ти видам класса Demospongiae. Стерины губок Lissodendoryx behringi, Clathria major, Monanchora clathrata, Geodinella robusta, Darwinella australiensis, Phakellia elegans, Axynissa aplysinoides, Teichaxinella labirintica, Didiscus aceratus, Oceanapia toxophila, a также неидентифицированной губки рода Scalarispongia изучены впервые. С помощью ГЖХ, ГЖХ-МС и 'Н, 13С ЯМР -спектроскопии всего идентифицировано 73 стерина, включая большое число редких соединений, и 7 Д4-3-кетостероидов.

2. Показано, что отдельные комбинации стеринов определенных структурных типов могут характеризовать некоторые роды и семейства Porifera.

3. Изучены гемолитики и цитотоксины семи губок, в том числе идентифицированы 17 свободных жирных кислот из губки рода Amphimedon, сарасинозиды А\, А2 и Аз из Melophlus sarasinorum, агелазин В, эпиагелазин С и 4-бром-пиррол-2-карбоновая кислота из Agelas mauritiana, М,М'-бис-[(611,78)-7,8-дигидро-а-бисаболен-7-ил]-мочевина из Axinyssa aplysinoides, крамбесцидин 359 из Monanchora clathrata.

3. Установлены структуры четырех новых сестертерпеноидов из губки Darwinella australiensis — халисульфатов 8, 9, 10 и нативного десульфатированного производного халисульфата 7.

4. Установлены структуры двух новых тритерпеновых гликозидов из губки Melophlus sarasinorum: Зр-0-[р-Б-глюкопиранозил-(1—»-2)-р-0-глюкопиранозил-(1—»6)-р-В-М-ацетил-2-амино-глюкопиранозил-( 1 —»2)-Р-Б-ксилопиранозил-(4—* 1 )-Р-В-Ы-ацетил-2-амино-галактопиранозил]-30-нор-8а,9а-оксидо-8,9-секо-ланоста-7,9(11),24-триен-23-она и Зр-0-[Р"В-глюкопиранозил-(1->2)-Р-В-глюкопиранозил-(1—>6)-Р-0-М-ацетил-2-амино-глюкопиранозил-( 1 —>2)-Р-0-ксилопиранозил-(4—► 1 )-Р-Б-М-ацетил-2-амино-галактопира-нозил] -3 0-нор-ланоста-8( 14),24-диен-15,23-диона.

5. Установлено строение шести новых 2,3-секо-стероидных кислот из губки рода Haliclona, относящихся к неизвестной ранее группе окисленных стероидов.

6. На основании полученных данных выдвинуты следующие предположения о взаимосвязи между присутствием разных групп вторичных метаболитов в губках:

1) интенсификация в организмах некоторых губок конкурентных путей биосинтеза терпеноидов или стероидов, может вызывать количественный метаболический сдвиг в биосинтезе свободных стеринов, что проявляется в низком содержании последних;

2) высокое содержание Д -стеринов, а также уменьшение количества свободных стеринов у ряда губок являются приспособительными механизмами защиты от собственных токсинов; 3) в отличие от токсичных голотурий и морских звезд, у губок, продуцентов тритерпеновых гликозидов, литическое воздействие этих соединений на мембраны клеток блокируется с помощью защитного механизма, который не связан со значительными структурными изменениями стеринов.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Санталова, Елена Анатольевна, 2005 год

1. Baker В.J., Kerr R.G. Biosynthesis of Marine Sterols in Marine Natural Products Diversity and Biosynthesis // Marine Natural Products Diversity and Biosynthesis / Scheuer, P.J. (Ed.).-Berlin: Springer-Verlag, 1993. Vol. 10. P.l-32.

2. Еляков Г.Б., Стоник B.A. Стероиды морских организмов. М.: Наука, 1988. — 208 с.

3. Djerassi С., Silva C.J. Sponge sterols: origin and biosynthesis // Acc. Chem. Res. 1991. Vol. 24. P. 371-378.

4. Калинин В.И., Левин B.C., Стоник B.A. Химическая морфология: тритерпеновые гликозиды голотурий. Владивосток: Дальнаука, 1994.-284 с.

5. Макарьева Т.Н. Вторичные метаболиты из морских беспозвоночных: структура, свойства. Биохимическая координация: автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора химических наук. Владивосток: Дальнаука, 1997. - 51 с.

6. Стоник В.А. Морские полярные стероиды // Успехи химии. 2001. Т. 70, № 8. С. 774-817.

7. Bergquist P.R., Hofheinz W., Oesterhelt G. Sterol composition and the classification of the Demospongiae // Biochem. Syst. Ecol. 1980. Vol. 8. P. 423-435.

8. Idler D.R., Safe L.M. Separation of steryl acetates by silver ion chromotography // Steroids. 1972. Vol. 19. P. 315-318.

9. Heftmann E., Lin T. Steroid analysis by high-perfomance liquid chromatography // J. Liquid Chromatogr. 1982. Vol. 5. P. 121-173.

10. Djerassi C. Recent advances in mass-spectrometry of steroids // Pure and Appl. Chem. 1978. Vol. 50. P. 171-184.

11. Вульфсон H.C., Заикин В.Г. Масс-спектрометрический метод определения положения двойных связей в непредельных стероидах // Успехи химии. 1973. Т. 42, № 8. С. 1379-1414.

12. Rubinstein I., Goad L.J., Clague A.D.H., Mulheirn L.J. The 220 MHz NMR spectra of phytosterols // Phytochemistry. 1976. Vol. 15. P. 195-200.

13. Дмитренок A.C. Применение спектральных методов для структурных исследований некоторых вторичных метаболитов: автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук. Владивосток: Дальнаука, 1998. - 23 с.

14. De Simone F., Dini A., Minale L., Riccio R., Zollo F. The sterols of the asteroid Echinaster sepositus И Сотр. Biochem. Physiol. 1980. Vol. 66B. P. 351-357.

15. Itoh Т., Sica D., Djerassi C. Minor and trace sterols in marine invertebrates. Part 35. Isolation and structure elucidation of seventy-four sterols from the sponge Axinella cannabina II J. Chem. Soc. Perkin Trans. Part I. 1983. P. 147-153.

16. Nes W.R., Krevitz K., Behzadan S. Configuration at C-24 of 24-methyl and 24-ethyl-cholesterol in tracheophytes // Lipids. 1976. Vol. 11. P. 118-126.

17. Wright J.L.C., Mclnnes A.G., Shimizu S. et al. Identification of C-24 alkyl epimers of marine sterols by C-13 Nuclear magnetic resonance spectroscopy // Canad. J. Chem. 1978. Vol. 56. P. 1898-1903.в

18. Koizumi N., Fujimoto Y., Takeshita Т., Ikekawa N. Carbon-13 nuclear magnetic resonance of 24-substituted steroids // Chem. and Pharm. Bull. 1979. Vol. 27. P. 38-42.

19. Koizumi N., Morisaki M., Ikekawa N. et al. Absolute configuration of 24-hydroxycholesterol and related compounds // Tetrahedron Lett. 1975. P. 2203-2206. .

20. Itoh Т., Yoshida K., Tamura Т., Matsumoto T. Co-occurrence of C-24 epimeric 24-ethyl-A7-sterols in the roots of Trichosanthes japonica II Phytochemistry. 1982. Vol. 21. P. 727730.

21. Матвеев B.C., ред. Курс зоологии. Т. I. М.:Высшая школа, 1966. - 552 с.

22. Колтун В.М. Четырехлучевые губки северных и дальневосточных морей СССР. -Л.: Наука, 1966.-112 с.

23. De Rosa М., Minale L., Sodano G. Metabolism in Porifera. II. Distribution of sterols // Сотр. Biochem. and Physiol. 1973. Vol. 46B. P. 823-837.

24. Kanasawa A., Teshima S., Hyodo S. Sterols of the sponges (Porifera, Demospongiae) // Сотр. Biochem. and Physiol. 1979. Vol. 62B. P. 521-525.

25. Bergquist P.R., Lavis A., Cambie R.C. Sterol composition and classification of the Porifera//Biochem. Syst. Ecol. 1986. Vol. 14. P. 105-112.

26. Bergquist P.R., Karuso P., Cambie R.C., Smith D.J. Sterol composition and classification of the Porifera // Biochem. Syst. Ecol. 1991.Vol. 19. P. 17-24.

27. De Rosa M., Minale M., Sodano G. Metabolism in Porifera. I. Some studies on the biosynthesis of fatty acids, sterols and bromocompounds by the sponge Verongia aerophoba И Сотр. Biochem. and Physiol. B. 1973. Vol. 45. P. 883-893.

28. De Rosa M., Minale L., Sodano G. Metabolism in Porifera. V. Biosynthesis of 19-nor-stanols; conversion of cholesterol into 19-nor-cholestanols by the sponge Axinella polypoides H Experientia. 1975. Vol. 31. P. 758-759.

29. De Rosa M., Minale L., Sodano G. Metabolism in Porifera. VI. Biosynthesis of 3p-Hydroxymethyl-A-nor-5a-steranes from cholesterol by Axinella verrucosa // Ibid. 1975. Vol. 31. P. 408-409.

30. Bibolino L., Minale L., Sodano G. Investigations on the ring contraction step in the biosynthesis of A-nor-stanols by the marine sponge Axinella verrucosa // Chem. Commun. 1978. № 13. P. 524-525.

31. Minale L., Riccio R., Scalona O. et al. Metabolism in Porifera. VII. Conversion of 7,7-3H2.-fucosterol into calysterol by the sponge Calyx nicaensis II Experientia. 1977. Vol. 33. P. 1550-1551.

32. Fromont J., Kerr S., Kerr R., Riddle M., Murphy P. Chemotaxonomic relationships within, and comparisons between, the orders Haplosclerida and Petrosida (Porifera: Demospongiae) using sterol complements // Biochem. Syst. Ecol. 1994. Vol. 22. P. 735-752.

33. Castellanos L., Zea S., Osorno O., Duque C. Phylogenetic analysis of the order Halichondrida (Porifera, Demospongiae), using 3P-hydroxysterols as chemical characters // Biochem. Syst. Ecol. 2003.Vol. 31. P. 1163-1183.

34. Заренков H.A. Теоретическая биология. M.: Изд-во Моск. ун-та, 1988. - 213 с.

35. Kokke W.C.M.C., Tarchini С., Stierle D.B., Djerassi С. Isolation, structure elucidation, and partial synthesis of xestosterol, a biosynthetically significant sterol from the sponge Xestospongia muta И J. Org. Chem. 1979. Vol. 44. P. 3385-3388.

36. De Luca P., De Rosa M., Minale L., Sodano G. Marine sterols with a new pattern of side-chain alkylation from the sponge Aplysina (=Verongia) aerophoba II J. Chem. Soc. Perkin Trans. Pt I. 1972. № 17. P. 2132-2135.

37. Kerr R.G., Kerr S.L., Djerassi C. Biosynthetic studies of marine lipids. 26. Elucidation Ф of the biosynthesis of mutasterol, a sponge sterol with a quaternary carbon in its side chain // J.

38. Org. Chem. 1991. Vol. 56. P. 63-66.

39. Giner J.-L., Gunasekera S.P., Pomponi Sh.A. Sterols of the marine sponge Petrosia weinbergi: implications for the absolute configurations of the antiviral orthoesterols and weinbersterols // Steroids. 1999. Vol. 64. P. 820-824.

40. Sica D., Zollo F. Petrosterol, major sterol with a cyclopropane side chain in sponge Petrosia ficiformis II Tetrahedron Lett. 1978. № 9. P. 837-838.

41. Khalil M.W., Djeracci C., Sica D. Minor and trace in marine invertebrates. IVII. (24R)-24,26-Dimethylcholesta-5,26-dien-3p-ol, a new sterol from the sponge Petrosia ficiformis // Steroids. 1980. Vol. 35. P. 707-719.

42. Theobadl N., Shoolery J.N., Djerassi C. et al. Minor and trace sterols in marine invertebrates. 7. 24-Ethyl-A5,24(28),28-cholestatrien-3P-ol a naturally occurring allenic marine sterol // J. Amer. Chem. Soc. 1978. Vol. 100. P. 5574-5575.

43. Sheikh Y.M., Djerassi C. Steroids from sponges // Tetrahedron. 1974. Vol. 30. P. 40954103.

44. Migliuolo A., Piccialli V., Sica D. Steroidal ketones from the sponge Geodia ж cydonium И J. Nat. Prod. 1990. Vol. 53. P. 1262-1266.

45. Brown F.J., Djerassi C. Elucidation of the course of the electron impact induced fragmentation of a,P-unsaturated 3-ketosteroids // J. Amer. Chem. Soc. 1980. Vol. 102. P. 807.

46. Frost D.J., Ward J.P. Stereochemistry of 7, 24(28)-stigmastadien-3p-ol and the fucosterols // Tetrahedron Lett. 1968. № 34. P. 3779-3782.

47. Itoh Т., Sakurai S., Tamura Т., Matsumoto T. Occurence of 24(E)-Etylidene sterols in two Solanaceae seed oils and rice bran oil. // Lipids. 1979. Vol. 15. P. 22-25.

48. Seides A.M., Rovirosa J., San Martin A., Gros E.G. A new sterol from the sponge Haliclona chilensis (Thiele) // Experientia. 1985. Vol. 41. P. 34-35.

49. Erdmann T.R., Scheuer P.J. 28-Isofucosterol: major sterol of a marine sponge // Lloydia. 1975. Vol. 38. P. 359-360.

50. Makarieva T.N., Stonik V.A., Ponomarenko L.P., Kalinovsky A.I. Isolation of (24R)-24,25-methylene-5a-cholestan-3P-ol, a new cyclopropane-containing sponge sterol // J. Chem. Research (S). 1996. № 10, P. 468-469.

51. Пономаренко Л.П. Стерины и стериноподобные соединения из некоторых морских беспозвоночных: автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук. Владивосток: Дальнаука, 2001- 26 с.

52. Silva Ch., Djerassi С. Isolation, stereochemistry, and biosynthesis of sormosterol, a novel cyclopropane-containing sponge sterol // Collect Czech. Chem. Commun. 1991. Vol. 56. P. 1093-1105.

53. Elenkov I.J., Stefanov K.L., Andreev S.N., Popov S.S., Christie W.W., Robertson G.W., Shepherd T. Sterol composition of the Black Sea sponge Lissodendoryx variisclera II Сотр. Biochem. Physiol. 1996. Vol. 115B. P. 287-289.

54. Silva C.J., Djerassi C. Biosynthetic studies of marine lipids. 36. The origin of common sterol side chains in eleven sponges using 3-3H.-squalene // Сотр. Biochem. Physiol. 1992. Vol. 101B. P. 255-268.

55. Knapp F.F., Schroepfer G.J. Chemical synthesis, spectral properties and chromatography of 4a-methyl and 4p-methyl isomers of 24R-24-ethyl-5a-cholestan-3P-ol and 24S-24-ethyl-cholesta-5,22-dien-3P-ol // Steroids. 1975. Vol. 26. P. 339-357.

56. Hill M.S. Symbiotic zooxantellae enhance boring and growth rate of the tropical sponge Anthosigmella varians forma varians II Mar. Biol. 1996. Vol. 125. P. 649-654.

57. Cafleri F., Ciminiello P., D'Auria M.V., Santacroce C. Sterol composition of the marine sponge Crambe crambe II Biochem. Syst. Ecol. Vol. 12. P. 203-204.

58. Braekman J.C., Daloze D., Tavares R., Hajdu E., Van Soest R.W.M. Novel polycyclic guanidine alkaloids from two marine sponges of the genus Monanchora II J. Nat. Prod. 2000. Vol. 63. P. 193-196.

59. Carballeira N.M., Negron V. Identification and characterization of two new methylicosadienoic acids from Erylus formosus II Ibid. 1991. Vol. 54. P. 305-309.

60. Bohlin L., Gehrken H.P., Scheuer P.J., Djerassi C. Minor and trace sterols in marine invertebrates. XVI. 3£-hydroxymethyl-A-nor-5a-gorgostane, a novel sponge sterol // Steroids. 1980. Vol. 35. P. 295-304.

61. Di Giacomo G., Dini A., Falco В., Marino A., Sica D. Sterols from the sponge Agelas oroides И Сотр. Biochem. Physiol. 1983. Vol. 74B. P. 499-501.

62. Duque C., Cepeda N., Martinez A. The steryl ester and phospholipid fatty acids of the sponge Agelas conifera from the Colombian Caribbean// Lipids. 1993. Vol. 28. P. 767-769.

63. Catalan C.A.N., Lakshmi V., Schmitz F.J., Djerassi C. Minor and trace sterols in marine invertebrates. 39. 24^,25^-24,26-Cyclocholest-5-en-3|3-ol, a novel cyclopropyl sterol // Steroids. 1982. Vol. 40. P. 455-463.

64. Kolesnikova I.A., Makarieva T.N., Stonik V.A. Natural products from the lake Baikal organisms II. Sterols from the sponge Lubomirskia baicalensis II Сотр. Biochem. Physiol. 1992. Vol. 103B.P. 501-503.

65. Rubinstein I., Goad L.J. Sterols of the siphonous marine alga Codium fragile И Phytochemistry. 1974. Vol. 13. P. 481-484.

66. Kokke W.C.M.C., Fenical W.H., Рак C.S., Djerassi C. Minor and trace sterols in marine invertebrates. IX. Verongulasterol a marine sterol with a novel side chain alkylation pattern // Tetrahedron Lett. 1978. № 45. P. 4373-4376.

67. Minale L., Sodano G. Marine sterols: unique Зр-hydroxymethyl-A-nor-steranes from the sponge Axinella verrucosa //J. Chem. Soc. Perkin Trans. Pt. I. 1974. № 20. P. 2380-2384.

68. Eggersdorfer M.L., Kokke W.C.M.C., Crandell C.W. et al. Sterols in marine invertebrates. 32. Isolation of 3P-(hydroxymethyl)-A-nor-5a-cholest-15-ene, the first naturally occurring sterol with 15-16 double bond//Ibid. 1982. Vol. 47. P. 5304-5309.

69. Bohlin L., Gehrken H.P., Scheuer P.J., Djerassi C. Minor and trace sterols in marine invertebrates. 16. 3p-Hydroxymethyl-A-nor-5a-gorgostane, a novel sponge sterol // Steroids. 1980. Vol. 35. P. 295-304.

70. De Nanteuil G., Ahond A., Poupat C., Potier P. Isolement et identification de onze sterols de type hydroxymethyI-3p nor-A cholestane du spongiaire, Pseudaxinyssa cantharella II Teetrahedron. 1985. Vol. 41. P. 6035-6039.

71. Gunasekera S.P., Sennet S.H., Kelly-Borges M. Ophirapstanol trisulfate, a new biologically active steroid sulfate from the deep water marine sponge Topsentia ophiraphidites И J. Nat. Prod. 1994. Vol. 57. P. 1751-1754.

72. Fusetani N., Takahashi M., Matsunaga Sh. Topsentiasterol sulfates, antimicrobial sterol sulfates possessing novel side chains, from a marine sponge, Topsentia sp. // Tetrahedron. 1994. Vol. 50. P. 7765-7770.

73. McKee Т.С., Cardellina J.H., TischlerM., Snader K.M., Boyd M.R. Ibisterol sulfate, a novel HIV-inhibitory sulfated sterol from the deep water sponge Topsentia sp. // Tetrahedron Lett. 1993. Vol. 34. P. 389-392.

74. Ishibashi M., Yamagishi E., Kobayashi J. Topsentinols A-J, new sterols with highly branched side chains from marine sponge Topsentia sp. // Chem. Pharm. Bull. 1997. Vol. 45. P. 1435-1438.

75. Iguchi K., Shimura H., Yang Zh., Yamada Y. A new 5a,8a-epidioxy sterol from the Okinawan marine sponge of the Axinyssa genus // Steroids. 1993. Vol. 58. P. 410-413.

76. Iwashima M., Terada I., Iguchi K., Yamori T. New biologically active marine sesquiterpenoid and steroid from the Okinawan sponge of the genus Axinyssa // Chem. Pharm. Bull. 2002. Vol. 50. P. 1286-1289.

77. Catalan C.A.N., Thompson J.E., Kokke W.C.M.C., Djerassi C. Biosynthetic studies of marine lipids 3. Experimental demonstration of the course of side chain extension in marine sterols//Tetrahedron. 1985. Vol. 41. P. 1073-1084.

78. Stoilov I.L., Thompson J.E., Djerassi C. Biosynthetic studies of marine lipids. 10. Double side chain extension in the triply alkylated sponge sterol xestosterol // Tetrahedron Lett. 1986. Vol.27. P. 4821-4824.

79. Lawson M.P., Stoilov I.L., Thompson J.E., Djerassi C. Cell membrane localization of sterols with conventional and unusual side chains in two marine Demosponges // Lipids. 1988. Vol. 23. P. 750-754.

80. Djerassi C. Recent studies in the marine sterol field // Pure and Appl. Chem. 1981. Vol. 53. P.873-890.

81. Carballeira N., Thompson J.E., Ayanoglu E., Djerassi C. Biosynthetic studies ofmarine lipids. 5. The biosynthesis of long-chain branched fatty acids in marine sponges // Ibid. 1986. Vol. 51. P. 2751-2756.

82. Hahn S., Lam W.-K., Wu I., Silva C.J., Djerassi C. Unusual pattern of fatty acid biosynthesis. Evidence for C-19 desaturase activity in freshwater sponges //J. Biol. Chem. 1989. Vol. 264. P. 21043-21046.

83. Lam W.-K., Hahn S., Ayanoglu E., Djerassi C. Phospholipid studies of marine organisms. 22. Structure and biosynthesis of a novel brominated fatty acid from a Hymeniacidonid sponge // J. Org, Chem. 1989. Vol. 54. P. 3428-3432.

84. Kerr R.G., Baker R.J. Marine sterols //Nat. Prod. Rep. 1991. Vol. 8. P. 465-497.

85. Lawson M.P., Thompson J.E., Djerassi C. Cell membrane localization of long chain C24-C30 fatty acids in two marine Demosponges // Lipids. 1988. Vol. 23. P. 741-749.

86. Stonik V.A., Elyakov G.B. Secondary metabolites from Echinoderms as chemotaxonomic markers // Bioorganic Marine Chemistry. Berlin: Springer-Verlag, 1988.Vol. 2. P. 43-86.

87. Stonik V.A., Ponomarenko L.P., Makarieva T. N., Boguslavsky V.M., Dmitrenok A.S., Fedorov S.N., Strobikin S. A. Free sterol compositions from the sea cucumbersV

88. Pseudostichopus trachus, Holothuria (Microtele) nobilis, Holothuria scabra, Trochostoma orientale and Bathyplotes natans II Сотр. Biochem. Physiol. 1998. Vol. 120B. P. 337-347.

89. Anisimov M.M., Shentsova E.B., Scheglov V.V. et. al. Mechanism of cytotoxic action of some triterpene glycosides // Toxicon. 1978. Vol. 16. P. 207-218.

90. Makarieva T.N., Denisenko V.A., Stonik V.A., Milgrom Yu.M., Rashkes Ya.W. Rizochalin, a novel secondary metabolite of mixed biosynthesis from the sponge Rizochalina

91. Л incrustata II Tetrahedron Lett. 1989. Vol. 30. P. 6581-6584.

92. Makarieva T.N., Stonik V.A., Dmitrenok A.S., Krasokhin V.B., Svetashev V.I., Vysotskii M.V. New polar steroids from the sponges Trachyopsis halichondroides and Cymbastela coralliophila II Steroids. 1995. Vol. 60. P. 316-320.

93. Stonik V.A., Makarieva T.N., Dmitrenok A.S. Sarcochromenol sulfates A-C and sarcohydroquinone sulfates A-C, new natural products from the sponge Sarcotragus spinulosus (Schmidt) // J. Nat. Prod. 1992. Vol. 55. P. 1256-1260.

94. Пономаренко Л.П., Макарьева Т.Н., Стоник В.А. Новый нортритерпеноид из глубоководной губки Sarcotragus spinulosus II Изв. Академии наук. Сер. химич. 1998. Т. 10. С. 2072-2074.

95. Неопубликованные данные Макарьевой Т.Н.

96. Bergquist P.R., Lawson М.Р., Lavis A., Cambie R.C. Fatty acid composition and the classification of the Porifera//Biochem. Syst. Ecol. 1984. Vol. 12. P. 63-84.

97. Дембицкий B.M., Челомин В.П. Липиды губок // Изв. АН СССР. Сер. биологич. 1985. № 1.С. 53-60.

98. Дембицкий В.М., Небылицин Б.Д. Липиды морского происхождения. II. Сравнительное исследование фосфолипидного и жирнокислотного состава морских губок Японского моря//Биоорганическая химия. 1980. Т. 6, № 10. С. 1542-1548.

99. Djerassi С., Lam W.-K. Sponge phospholipids II Асс. Chem. Res. 1991. Vol. 24. P. 69-75.

100. Nemoto Т., Yoshino G., Ojika M., Sakagami Y. Amphimic acids and related long-chain fatty acids as DNA topoisomerase-I inhibitors from an Australian sponge, Amphimedon sp. //Tetrahedron. 1997. Vol. 53. P. 16699-16710.

101. Andersson B.A., Holman R.T. Pyrrolidides for mass spectrometric determination of the position of the double bond in monounsaturated fatty acids // Lipids. 1973. Vol. 9. P. 185190.

102. The Lipid Library. Mass spectrometry of fatty acid derivatives / W.W.Christie. Scottish Crop Research Institute. Электронные данные. - Интернет-сайт. -http://www.rmidlibrary.co.uk - яз. англ.

103. Carballeira N.M., Lopez M.R. On the isolation of 2-hydroxydocosanoic and 2-hydroxytricosanoic acids from the marine sponge Amphimedon compressa II Lipids. 1989. Vol. 24. P. 89-91.

104. Carballeira N.M., Negron V., Reyes E.D. Novel monounsaturated fatty acids from the sponges Amphimedon compressa and Mycale laevis II J. Nat. Prod. 1992. Vol. 55. P. 333-339.

105. Faulkner D.J. Marine natural products // J. Nat. Prod. Rep. 2002. Vol. 19. P. 1-66.

106. Семенов A.A. Очерк химии природных соединений. Новосибирск: Наука, 2000. - 664 с.

107. Kernan M.R., Faulkner D.J. Sesterterpene sulfates from a sponge of the family Halichondriidae // J. Org. Chem. 1988. Vol. 53. P. 4574-4578.

108. Fu X., Ferreira M.L.G., Schmitz F.J., Kelly M. Halisulfate 7, a new sesterterpenesulfate from a sponge, Coscinoderma sp. // J. Nat. Prod. 1999. Vol. 62. P. 1190-1191.

109. Phuwapraisirisan Pr., Matsunaga Sh., van Soest R.W.M., Fusetani N. Shinsonefuran, a cytotoxic furanosesterterpene with a novel carbon skeleton, from the deep-sea sponge Stoeba externa II Tetrahedron Lett. 2004. Vol. 45. P. 2125-2128.

110. Makarieva T.N., Rho J.-R., Lee H.-S., Santalova E.A., Stonik V.A., Shin J. New ^ sesterterpene sulfates from the sponge Darwinella australiensis II J. Nat. Prod. 2003. Vol. 66. P.1010-1012.

111. Espada A., Jin^nez C., Rodriguez J., Crews Ph., Riguera R. Sarasinosides D-G: four new triterpenoid saponins from the sponge Asteropus sarasinorum И Tetrahedron. 1992. Vol. 48. P. 8685-8696.

112. Lee H.-S., Seo Y., Cho K.W., Rho J.-R., Shin J., Paul V.J. New triterpenoid saponins from the sponge Melophlus isis И J. Nat. Prod. 2000. Vol. 63. P. 915-919.

113. Schmitz F.J., Ksebati M.B., Gunasekera S.P., Agarwal S. Sarasinoside Aj: a saponinVcontaining amino sugars isolated from a sponge // J. Org. Chem. 1988. Vol. 53. P. 5941-5947.

114. D'Auria M.V., Paloma L.G., Minale L., Riccio R. Jereisterol A and B: two 30-methoxy-secosteroids from the Pacific sponge Jereicopsis graphidiophora II Tetrahedron Lett. 1991. Vol. 32. P. 2149-2152.

115. Шашков A.C., Чижов O.C. Спектроскопия 13С-ЯМР в химии углеводов и родственных соединений // Биоорганическая химия. Т. 2, № 4. С. 437-504.-Л 139. Шашков А.С. Спектры ЯМР 13С родоначальных гексопираноз // Изв. АН СССР.

116. Сер. химии. 1983. № 6. С. 1328-1336.

117. Costantino V., Fattorusso E., Mangoni A., Aknin M., Gaydou E.M. Novel 3p-methoxysteroids from the Senegalese sponge Microscleroderma spirophora II Steroids. 1994. Vol. 59. P. 181-184.

118. Wu S.-H., Luo X.-D., Ma Y.B., Liu J.-K., Wu D.-G., Zhao В., Lu Y., Zheng Q.T. Two novel secoergosterols from fungus Tylopilus plumbeoviolaceus II J. Nat. Prod. Vol. 63. P. 534-536.

119. Schroepfer G.J., Parish E.J., Chen H.W., Kandutsch A.A. Inhibition of sterol biosynthesis in L cells and mouse liver cells by 15-oxygenated sterols // J. Biol. Chem. 1977. Vol. 252. P. 8975-8980.

120. Dunlap N.K., Sabol M.R., Bauer Ph.E., Watt D.S. Synthesis of biological markers in fossil fuels. 3. Degraded and rearranged Cn hopanes // J. Org. Chem. 1985. Vol. 50. P. 18261829.

121. Неопубликованные данные Антонова A.C.

122. Pika J., Andersen R.J., Blancasterol, a cytotoxic 9,11-secosteroid isolated from the Northeastern Pacific marine sponge Pleraplysilla sp. // Tetrahedron. 1993. Vol. 49. P. 87578760.

123. Jagodzinska B.M., Trimmer J.S., Fenical W., Djerassi C. Sterols in marine invertebrates. 51. Isolation and structure elucidation of C-18 functionalized sterols from the soft coral Simtlaria dissecta III. Org. Chem. 1985. Vol. 50. P. 2988-2992.

124. Kobayashi M., Haribaby В., Anjaneyulu V. Marine sterols. XXI. Isolation of (24S)-3p-hydroxyergost-5-en-21-oic acid from a Sclerophytum sp. of soft coral // Chem. Pharm. Bull. 1992. Vol.40. P. 233-234.

125. Carney J.R., Yoshida W.Y., Scheuer P.J. Kiheisterones, new cytotoxic steroids from a Maui sponge // J. Org. Chem. 1992. Vol. 57. P. 6637-6640.

126. Carney J.R., Scheuer P.J., Kelly-Borges M. Three unprecedented chloro steroids from the Maui sponge Strongylacidon sp.: kiheisterones C, D and E // J. Org. Chem. 1993. Vol. 58. P. 3460-3462.

127. Nakatsu Т., Walker R.P., Thompson J.E., Faulkner D.J. Biologically-active sterol sulfates from the marine sponge Toxadocia zumi И Experientia. 1983. Vol. 39. P. 759-761.

128. Masuno M.N., Pawlik J.R., Molinski T.F. Phorbasterones A-D, cytotoxic nor-ring A steroids from the sponge Phorbas amaranthus И J. Nat. Prod. 2004. Vol. 67. P. 731-733.

129. Будзикевич Г., Джерасси К., Уильяме Д. Интерпретация масс-спектров органических соединений. М.: Мир, 1966. - 324 с.

130. ФизерЛ., ФизерМ. Стероиды.-М.: Мир, 1964.-982 с.

131. Duan H., Takaishi Y., Momota H., Ohmoto Y., Taki Т., Tori M., Takaoka Sh., Jia Y., Li D. Immunosuppressive terpenoids from extracts of Tripterygium wilfordii II Tetrahedron. 2001. Vol. 57. P. 8413-8424.

132. Munkombwe N.M., Hughest N.A., Duri Z.J. Acid metabolites from Spirostachys africana И Phytochemistry. 1998. Vol. 47. P. 1653-1655.

133. Braekman J.-C., Daloze D., Stoller C., van Soest R.W.M. Chemotaxonomy of Agelas (Porifera: Demospongiae) // Biochem. Syst. Ecol. 1992. Vol. 20. P. 417-431.

134. Iwagawa Т., Kaneko M., Okamura H., Nakatani M., van Soest R.W.M. New alkaloids from the Papua New Guinean sponge Agelas nakamurai II J. Nat. Prod. 1998. Vol. 61. P. 13101312.

135. Hattori Т., Adachi K., Shizuri Y. New agelasine compound from the marine sponge Agelas mauritiana as an antifouling substance against macroalgae // J. Nat. Prod. 1997. Vol. 60. P. 411-413.

136. Cafieri F., Fattorusso E., Mangoni A., Taglialatela-Scafari O. Dispacamides, antihistamine alkaloids from Carribean Agelas sponges // Tetrahedron Lett. 1996. Vol. 37. P. 35873590.

137. Cafieri F., Fattorusso E., Mangoni A., Taglialatela-Scafari O. Clathramides, unique bromopyrrole alkaloids from the Carribean sponge Agelas clathrodes II Tetrahedron. 1996. Vol. 52. P. 13713-13720.

138. Cafieri F., Fattorusso E., Taglialatela-Scafari O. Novel bromopyrrole alkaloids from the sponge Agelas dispar // J. Nat. Prod. 1998. Vol. 61. P. 122-125.

139. Lindel Th., Hochgurtel M. The alkyne pathway to keramadine from the marine sponge Agelas sp. // Tetrahedron Lett. 1998. Vol. 39. P. 2541-2544.

140. Nakamura H., Kobayashi J., Ohizumi Y., Hirata Y. Novel bisabolene-type sesquiterpenoids with a conjugated diene isolated from the Okinawan sea sponge Theonella cf. swinhoei И Ibid. 1984. Vol. 25. P. 5401-5404.

141. Sullivan B.W., Faulkner D.J., Okamoto K.T., Chen M.H.M., Clardy J. (6R,7S)-7-Amino-7,8-dihydro-a-bisabolene, an antimicrobial metabolite from the marine sponge Halichondria sp. III. Org. Chem. 1986. Vol. 51. P. 5134-5136.

142. Gulavita N.K., de Silva E.D., Hagadone M.R., Karuso P., Scheuer P.J. Nitrogenous bisabolene sesquiterpenes from marine invertebrates // Ibid. 1986. Vol. 51. P. 5136-5139.

143. Jares-Erijman E.A., Sakai R., Rinehart K.L., Crambescidins: new antiviral and cytotoxic compounds from the sponge Crambe crambe И J. Org. Chem. 1991. Vol. 56. P. 57125715.

144. Garson M., Simpson J.S. Marine isocyanides and related natural products structure, biosynthesis and ecology //Nat. Prod. Rep. 2004. Vol. 21. P. 164-179.

145. Vetter W., Walter W. Preparation of pyrrolidides from fatty acids via trimethylsilyl esters for gas chromatographic-mass spectrometric analysis // J. Cromatogr. 1990. Vol. 513. P. 405-407.

146. Prokof eva N.G., Chaikina E.L., Kicha A.A., Ivanchina N.V. Biological activities of steroid glycosides from starfish// Сотр. Biochem. Physiol. 2003. Vol. 134B. P. 695-701.

147. Prokof eva N.G., Utkina N.K., Chaikina E.L., Makarchenko A.E. Biological activities of marine sesquiterpenoid quinines: structure-activity relationships in cytotoxic and hemolytic assays // Сотр. Biochem. Physiol. 2004. Vol. 139B. P. 169-173.