Терапия больных псориазом на основе изучения показателей активности ферментов нуклеинового обмена и цитокинов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.11, кандидат медицинских наук Саруханова, Анна Генриховна

• Саруханова, Анна Генриховна
• кандидат медицинских наук
• 2003

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Саруханова, Анна Генриховна

Глава 1. Обзор литературы:

1.1. Современные аспекты этиологии и патогенеза псориаза. 1.1.2. Роль различных цитокинов и хемокинов в патогенезе псориаза.

1.2. Современные методы терапии больных псориазом.

1.2.1. Перспективы применения препаратов нуклеиновой природы в дерматологии.

Глава 2. Материалы и методы исследования. 2.1 Клиническая характеристика больных.

2.2. Лабораторные методы исследования:

2.2.1.Подготовка материала к исследованию.

2.2.2. Определение концентрации эпидермального фактора роста.

2.2.3. Определение концентрации различных цитокинов (ИЛ-2, ИЛ-4, ФНО-а).

2.2.4. Определение активности ферментов нуклеинового обмена.

2.3. Статистическая обработка результатов.

Глава 3. Изменения в системе цитокинов у больных псориазом.

3.1. Концентрация эпидермального фактора роста (ЭФР) в эпидермисе и сыворотке крови больных псориазом.

3.2. Концентрация фактора некроза опухоли - альфа (ФНО - а) в коже больных псориазом.

3.3. Уровень цитокинов (ИЛ-2, ИЛ-4, ФНО-а) в сыворотке крови больных псориазом.

3.4. Изменение уровней цитокинов (ИЛ-2, ИЛ-4, ФНО -а) при комплексном лечении больных псориазом с препаратом дрожжевой РНК (энкад).

Глава 4. Оценка пуринового метаболизма у больных псориазом.

4.1. Активность ферментов нуклеинового обмена - аденозиндезаминазы (АДА) и пуриннуклеозидфосфорилазы (ПНФ) в сыворотке крови и эритроцитах больных псориазом до лечения.

4.2. Изменение активности ферментов нуклеинового обмена после комплексного лечения ПУВА-терапией и препаратом дрожжевой РНК (энкад) и после традиционной терапией.

Глава 5. Терапевтическая эффективность комплексного метода лечения псориаза с использованием препарата дрожжевой РНК (ближайшие и отдаленные результаты).

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Терапия больных псориазом на основе изучения показателей активности ферментов нуклеинового обмена и цитокинов»

Псориаз является одним из наиболее распространенных дерматозов неизвестной этиологии и недостаточно изученным патогенезом, распространенность которого варьирует от 1 до 3 % общей популяции (Мордовцев В.Н. с соавт. 1991, Задорожный Б.А., 1983., Puszczak Z. et.al. 1985).

Проблема псориаза в настоящее время приобретает особую значимость в связи с наблюдающимся увеличением количества регистрируемых случаев дерматоза, возникновением форм, протекающих резистентно к проводимому лечению, а также в связи с повышением процента тяжелых (артропатической,эритродермическойидр.) форм псориаза (Довжанский С.И. 1991.,СкрипкинЮ.К. 1995, Владимиров В.В., 1995, и др.).

Обычные формы псориаза протекают относительно доброкачественно и практически не влияют на общее состояние больных, однако, частые рецидивы и крайне длительное течение болезни причиняют им много душевных страданий, тяжело отражаясь при этом на состоянии нервной системы и психики, и выключают совершенно полноценных в физическом отношении людей из трудовой и общественной деятельности.

Несмотря на многочисленные исследования при псориазе (Машкиллейсон A.JI. с соавт., 1990., Скрипкин Ю.К., Каламкарян А.А. с соавт. 1987., 1989., 1995., Короткий Н.Г. и соавт. 1987, и др.) и неоднократное обсуждение проблемы на международных научных форумах, этиология заболевания остается неизвестной, не решены многие вопросы патогенеза, все еще не разработаны надежные методы лечения и профилактики рецидивов дерматоза.

Перечисленные обстоятельства выдвигают проблему псориаза на передний план научной и практической дерматологии и придают ей большую социально-медицинскую значимость.

Несмотря на различные мнения о природе этого дерматоза, поражение кожи в значительной степени связывают с нарушением процессов пролиферации и дифференцировки эпидермальных кератинощггов (Мордовцев В.Н. с соавт., 1991., Скрипкин Ю.К. с соавт. 1995).

Известно, что пролиферативная активность регулируется разнообразными факторами. Важное место в цепи регуляции этих процессов при псориазе отводят предшественникам нуклеиновых кислот (Саркисов Д.С. с соавт. 1970., Маркушева Л.И. с соавт. 1998).

К настоящему времени получено много данных о разнообразных нарушениях обмена веществ, возникающих в организме больных псориазом. Эти нарушения затрагивают белковый, углеводный, липидный, водно-электролитный и другие виды обмена (Беренбейн Б.А., Шумай Н.И. 1980., Яговдик Н.3.1984. и др.).

Кроме того, все больше внимания уделяется иммунологическим механизмам формирования псориаза (Скрипкин Ю.К. и соавт., 1993, Резайкина А.В., и соавт., 1995., Милевская С.Г. и соавт., 1998., Leivo Т., et.al., 1993, Menter А.,1998.,. и др.).

В ряду систем, ответственных за процессы пролиферации, одно из ключевых мест принадлежит ферментным системам обмена пуриновых соединений. Выполняя множество функций, они принимают участие почти во всех видах обмена, являясь предшественниками нуклеиновых кислот (Тихонов Ю.В. и соавт. 1996).

Установлено, что нарушение метаболизма пуриновых нуклеотидов активно влияет на иммунные расстройства организма. (Ворновицкая Г.И. и соавт.,1994г). Эти системы находятся в тесной взаимосвязи. Факторами, осуществляющими эту взаимосвязь, являются ферменты пуринового метаболизма: аденозиндезаминаза (АДА) и пуриннуклеозидфосфорилаза (ПНФ) (Тихонов Ю.В. Маркушева Л.И., 1998., Giblett E.R., et.al. 1972.,1975., Harry W. et.al., 1993).

Иззестно, также, что метаболическая и пролиферативная активности клетки регулируются специальными сигнальными молекулами (лигандами). Псориаз может индуцироваться изменением концентрации регуляторных внеклеточных лиганд или изменением количества (активности) воспринимающих их клеточных рецепторов.

В качестве регуляторов клеточного роста могут выступать множество молекул. Многие из них идентифицированы как митогены соединительно-тканных или эпителиальных клеток семейства белков эпидермального фактора роста, инсулиноподобного фактора роста, фактора роста фибробласгов (King L.E., 1983.,Aaronson S.A.et.al. 1990, Gearing A.J. et.al., HanneyK. et.al.1986.,1992., Christofer E. 1996.И др.).

В настоящее время определяющее значение в регуляции структурных процессов как в норме, так и при развитии патологических состояний отводится межклеточным взаимодействиям, которые реализуются при помощи цитокиновых каскадов, согласованным синтезом цитокинов (Самсонов В.А., и соавт., 1997г., Шегай М.М., и соавт., 1998г., B.J. Nicoloff et.al. 1991., Kishimoto Т. et.al. 1992 Nicola N.A.1994. Vollmer S.et.al. 1994., Kupper T.S.1995., Dugas N. 1998., Seifert M., et.al., 2000 и др.).

Посредством секреции Т-лимфоцитами некоторых иммунорегуляторных цитокинов может изменяться пролиферативная активность эпидермальных клеток.

В последние годы в результате развития иммуно-биохимических методов исследования появились новые возможности более углубленного изучения клеточных механизмов иммунопатогенеза кожных болезней, в том числе и псориаза (Самсонов В.А., Маркушева Л.И., 1996 , Резайкина АВ.и соавт. 1995., Christopher Е., et.al. 1991., Lecewicz-Torun. et.al. 1999., Tikura Y., et. al. 1999., Voorhees J.J. 1999., и др.).

Несмотря на существование многочисленных методов исследования патогенеза псориаза, и лечения больных псориазом, на сегодняшний день остается актуальным расширение поиска новых патогенетических звеньев и усовершенствование терапии больных псориазом.

В последние годы перспективным направлением в терапии псориаза является разработка комплексных методов лечения, направленных одновременно на несколько патогенетических механизмов развития псориаза. Большое внимание придается лечению больных псориазом методом ПУВА-терапии в комбинации с различными средствами: РЕ

ПУВА-терапия, ПУВА-терапия в сочетании с эссенциале, ПУВА-терапия с иммуномодуляторами (Машкиллейсон A.JI. и соавт 1990., Самсонов В.А., Олисова М.О. 1991., Владимиров В.В. и соавт. 1995., Шахмейстер И.Я. 1996., Русак Ю.Э., и соавт., 1997., Ellis C.N. et.al. 1987.).

Возможность сочетания ПУВА-терапии и других методов лечения является ближайшей перспективой для увеличения эффективности терапии псориаза.

Особенности пролиферативной активности клеток эпидермиса и характер воспалительных процессов при псориазе является важным показателем для назначения методов лечения, направленных на коррекцию этих нарушений.

В последние годы стало ясно, что важной особенностью лекарственных препаратов из класса метаболитов нуклеинового обмена является воздействие на биосинтез и биотрансформацию нуклеиновых кислот. Многие активные препараты являются ингибиторами ДНК-полимераз. Для других препаратов этого класса биоэффект определяется включением их в молекулу нуклеиновой кислоты (Преображенская М.Н. и соавт., 1983., Лидак М.Ю. 1989., Власов В.В., 1989.).

Одним из таких препаратов является - препарат дрожжевой РНК (энкад), который представляет собой комплекс моно- и олигонуклеотидов.

Энкад известен как регулятор нуклеинового обмена при различных иммунных заболеваниях. Кроме того, энкад обладает мембраностабшшзирующим действием, является антиоксидантом и иммуномодулятором (Шабанова М.Е. и соавт. 1989., Гринио Л.П. и соавт. 1992., Рясина Т.В., и соавт. 1992, Васильева Е.Е. и соавт. 2001).

Перечисленные свойства этого препарата послужили основанием для изучения его в комплексе с ПУВА-терапией у больных псориазом.

Цель исследования:

Целью работы явилось изучение иммунно-биохимических аспектов патогенеза псориаза.

Разработка комплексного метода лечения больных распространенным псориазом -сочетанного применения ФХТ и препарата нуклеиновой природы на основе изучения активности ферментов пуринового метаболизма и цитокинов.

Задачи исследования:

1. Определить концентрации эпидермального фактора роста (ЭФР) и фактора некроза опухоли - альфа (ФНО -а) в эпидермисе и сыворотке крови больных псориазом в зависимости от характера течения заболевания, а также от клинических проявлений.

2. Изучить в динамике концентрации цитокинов интерйейкинов ИЛ-2, ИЛ-4 и фактора некроза опухоли (ФНО -а) в сыворотке крови больных псориазом до и после комплексного лечения с препаратом дрожжевой РНК и оценить полученные результаты с клиническими проявлениями и характером течения заболевания.

3. Изучить состояние пуринового метаболизма, в частности активность ферментов аденозиндезаминазы (АДА) и пуриннуклеозидфосфорилазы (ПНФ) в сыворотке крови и эритроцитах больных распространенным псориазом.

4. Разработать комплексный метод лечения больных псориазом с включением препарата нуклеиновой природы - дрожжевой РНК (энкад) на основе изучения активности ферментов нуклеинового обмена АДА и ПНФ.

Научная новизна

Впервые с помощью метода иммуноферментного анализа исследован уровень эпидермального фактора роста (ЭФР) у больных распространенным псориазом. Вьмвлено увеличение ЭФР в эпидермисе больных псориазом в прогрессирующей стадии заболевания и его снижение при переходе в стационарную стадию.

Разработаны дополнительные диагностические критерии активности патологического процесса при псориазе, в частности, изменение концентраций эпидермального фактора роста (ЭФР) и фактора некроза опухоли-альфа (ФНО-а) в коже в зависимости от стадии заболевания.

Установлена прямая корреляционная связь между концентрацией ЭФР в сыворотке крови больных псориазом и индексом PASI.

Установлены значительные изменения провоспалительных и противовоспалительных цитокинов, в частности, ФНО-а, а также изменения интерлейкинов ИЛ-2, ИЛ-4 у больных на разных сроках заболевания, выявлена зависимость их от характера течения заболевания.

Показано, что наиболее значимые изменения характерны для тяжелого течения псориаза, свидетельствующие о торпидносги заболевания к лечению.

Выявлено повышение активности ферментов нуклеинового обмена АДА и ПНФ в эритроцитах больных псориазом. Полученные данные свидетельствуют о нарушении в транспорте предшественников нуклеиновых кислот при псориазе.

Отмечено восстановление дисбаланса ферментов АДА и ПНФ в эритроцитах после комплексного лечения с препаратом дрожжевой РНК.

Практическая значимость.

Результаты исследования позволили разработать новые дополнительные критерии оценки тяжести псориаза и прогнозирования его течения.

На основании клинических и лабораторных исследований разработан и внедрен в практику здравоохранения комплексный метод лечения торпидных, плохо поддающихся традиционной терапии форм псориаза, включающий препарат нуклеиновой природы-энкад, который позволяет сократить количество сеансов ПУВА-терапии, достичь клинического выздоровления, сократить сроки пребывания больного в стационаре. Данный метод лечения позволяет удлинить ремиссию и сократить число рецидивов. Внедрение в практику:

Результаты проведенных нами исследований явились основой для разработки пособия для врачей дерматовенерологов и врачей-лаборантов: «Терапия больных псориазом на основе изучения различных хемокинов».

Апробация и публикация материалов исследования:

Основные материалы диссертации представлены на научно-практической конференции ЦНИКВИ 29 марта 2002 года, на научно-практической конференции «Национальные дни лабораторной медицины России-2001г» (Москва, 8-11 октября 2001г) Публикации.

По теме диссертации опубликовано 8 научных работ. Структура работы.

Диссертация изложена на страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, глав собственных исследований, заключения, выводов и библиографического указателя. Материалы диссертации иллюстрированы таблицами и рисунками. Указатель литературы включает 179 источников, из них 88 отечественных и 91 -зарубежных. Глава I.

Заключение диссертации по теме «Кожные и венерические болезни», Саруханова, Анна Генриховна

Выводы:

1. Впервые методом твердофазного иммуноферментного анализа в коже у больных распространенным псориазом в прогрессирующей стадии заболевания выявлено достоверное увеличение концентрации ЭФР (56,49±3,3 пкг/мг.ткани, при N=26,48±0,1 пкг/мг.ткани (р<0,01)) и снижение ФНО-а. В стационарной стадии заболевания данные показатели приближаются к норме.

Установлено, что у 75% больных распространенным псориазом наблюдается достоверное повышение концентрации ЭФР в сыворотке крови. Уровень эпидермального фактора роста зависит от тяжести течения заболевания, клинических проявлений и находится в прямой корреляционной зависимости от индекса PASI (г=0,65).

2. Повышение концентраций ИЛ-2, ФНО-а и снижение ИЛ-4 в сыворотке крови выявлено у больных с торпидными, плохо поддающимися антипсориатической терапии формами заболевания. После лечения данные показате а сохраняют существенные отличия от нормы, что может свидетельствовать на продолжение латентно протекающих иммунопатологических процессов, способных провоцировать последующие рецидивы заболевания.

3. У больных псориазом наблюдается повышение активности ферментов пуринового метаболизма в эритроцитах, что свидетельствует о нарушении транспорта предшественников нуклеиновых кислот.

4. Разработан комплексный метод лечения псориаза позволяющий сократить количество сеансов ПУВА-терапии и суммарную дозу облучения на 25%, сократить сроки пребывания больных в стационаре в среднем на 5 дней, добиться более длительного периода ремиссии.

Применение препарата нуклеиновой природы в комплексной терапии больных распространенным псориазом сопровождается нормализацией активности ферментов иуринового обмена в эритроцитах, являющихся транспортной системой переноса свободных предшественников нуклеиновых кислот.

Заключение:

Многочисленные исследования под твердили, что удельный вес псориаза среди других кожных заболеваний составляет от 2 до 10% (Мордовцев В.Н. с соавт. 1982, Задорожньгй Б.А., 1983., Puszczak Z. 1985, Braun-Falko et.al.,1991),), а среди госпитализированных больных в дерматологических клиниках - от 30-50% (Скрипкин Ю.К., 1995г., Владимиров В.В., 1995г. и др.).

В последние годы проблема псориаза приобретает особую важность в связи с участившимися случаями заболевания среди населения, а также увеличением тяжело протекающих и плохо поддающихся лечению форм этого заболевания (Мордовцев В.Н., Скрипкин Ю.К. 1985г, Владимиров В.В.,1995г и др.)

В последние годы в результате развития иммуно-биохимических методов исследования появились новые возможности более углубленного изучения клеточных механизмов иммунопатогенеза кожных болезней, в том числе и псориаза (Скрипкин Ю.К., Мордовцев В.Н., 1986, Резайкина А.В., Маркушева Л.И., 1998г).

Несмотря на то, что проблеме изучения патогенеза псориаза посвящены многочисленные исследования (Машкиллейсон А.Л. с соавт., Каламкарян А.А., с соавт., Скрипкин Ю.К., с соавт. 1986,1995, Короткий Н.Г. и соавт. 1985, и др.), до сих пор не решен вопрос об участии различных хемокинов в патогенезе псориаза и их роли в развитии патологического процесса.

Одним из основных патогенетических механизмов при псориазе является гиперпролиферация эпидермальных клеток и нарушение их дифференцировки. Однако причины и механизмы, приводящие к этим изменениям в эпидермисе неизвестны.

В ряду систем, ответственных за процессы пролиферации, одно из ключевых мест принадлежит ферментным системам обмена пуриновых соединений. Известно, что нарушение метаболизма пуриновых нуклеотидов активно влияет на иммунные расстройства организма. Эти системы находятся в тесной взаимосвязи посредством ферментов пуринового метаболизма: аденозиндезаминазы (АДА) и пуриннуклеозидфосфорилазы (ПНФ).

В настоящее время, определяющее значение в регуляции структурных процессов, как в норме, так и при развитии патологических процессов отводится межклеточным взаимодействиям, которые реализуются с помощью нейротрансмиттеров, гормонов и цитокинов. Идет интенсивное обнаружение и изучение все новых групп соединений участвующих в межклеточной коммуникации и управлении структурными процессами. (Пальцев М.А., 1995).

Целью нашей работы являлось изучение иммунобиохимических механизмов патогенеза псориаза (эпидермального фактора роста и фактора некроза опухоли альфа в коже и сыворотке крови и сопоставление их с клиническим течением заболевания, изучение активности ферментов пуринового метаболизма в эритроцитах и сыворотке крови, различных цитокинов в сыворотке крови). Разработка комплексного метода лечения псориаза включающего препарат нуклеиновой природы - дрожжевой РНК (энкад).

Были поставлены следующие задачи: определить концентрацию эпидермального фактора роста (ЭФР) в коже и сыворотке крови больных псориазом в прогрессирующей и стационарной стадиях заболевания, определить концентрации различных цитокинов: интерлейкинов - ИЛ-2, ИЛ-4 и фактора некроза опухоли альфа (ФНО-а) в сыворотке крови, ФНО-а в коже больных псориазом в прогрессирующей и стационарной стадиях заболевания. Определить активность ферментов пуринового обмена аденозиндезаминазы (АДА) и пуриннуклеозидфосфорилазы (ПНФ) в сыворотке крови и эритроцитах больных псориазом.

Разработать комплексный метод лечения заболевания включающий ПУВА-терапию и препарат дрожжевой РНК - энкад (комплекс моно- и олигонуклеотидов) на основе изучения ферментов пуринового метаболизма и цитокинов и внедрить результаты исследования в дерматологическую практику.

Для решения стоящих перед нами задач были обследованы 78 больных (51 мужчина и 27 женщин) различными формами псориаза в возрасте от 18 до 64 лет, из которых 75,6% были в возрасте от 21 до 50 лет. Контрольная группа состояла из здоровых доноров и добровольцев (20 человек) в возрасте от 19 до 50 лет.

Среди больных псориазом у 41 (53%) была вульгарная форма заболевания, у 26 (33%) - экссудативная, у 11 (14%) - артропатическая.

Среди обследованных нами больных у 56 (71,8%) была выявлена осенне-зимняя форма заболевания, у 12 (15,4%) - весенне-летняя, а у остальных 10 (12,8%) - возникновение или рецидив заболевания не зависели от времени года.

Продолжительность заболевания варьировала от 1 года до 43 лет. Большинство больных не могли назвать определенную группу факторов, явившихся, по их мнению, пусковым моментом в развитии болезни. Часть из них связывали появление первых симптомов заболевания и наступление рецидивов с психическими травмами и эмоциональными переживаниями 33 (42,3%), переохлаждением 2 (2,5 %), перегреванием 2 (2,5%). Развитию и обострению псориаза довольно часто предшествовали респираторно-вирусные инфекции, грипп, ангина, хронический тонзиллит и другие 16 (20,5%).

Среди обследованных у 27 человек установлен семейный псориаз. Из них у 12 болели родители, у 7 -брат или сестра, у 8 остальные родственники.

Из сопутствующих заболеваний преобладали заболевания желудочно-кишечного тракта (гастрит, язвенная болезнь желудка или 12-перстной кишки, колит, холецистит) - у 11 (14,1 %), органов дыхания (хронический бронхит, эмфизема легких) - у 14 (17,9%), сердечно-сосудистой системы (гипертоническая болезнь, ишемическая болезнь сердца) - у 9 (11,5 %) и мочеполовой системы (мочекаменная болезнь, пиелонефрит) -3 (3,8%). Очаги фокальной инфекции выявлены у 14 (17,9 %) больных.

У большинства (90%) больных патологический процесс протекал торпидно. Об этом свидетельствовали распространенность поражения, длительность заболевания, частота рецидивов, устойчивость к примененным методам терапии и короткие ремиссии после клинического выздоровления.

У всех обследованных больных поражение кожи носило распространенный характер: псориатические очаги занимали от 20% до 50% у 46 больных (индекс PASI составил от 12 до 29), от 50% до 80% у 32 больных (индекс PASI составил от 30 до 50).

На момент исследования у 60 больных процесс находился в стадии прогрессирования и у 18 в стационарной стадии заболевания.

Больные были обследованы в прогрессирующей стадии (до лечения) и в стадии регресса (в конце лечения) псориаза.

Больные были разделены на две равноценные группы, 46 из них получали комплексное лечение, включающее ПУВА-терапию и препарат дрожжевой РНК (энкад) и 32 больных - ПУВА-терапию и традиционное лечение.

Среди пациентов получающих комплексное лечение у 23 - был распространенный вульгарный псориаз, у 16 - экссудативный и у 7 - артропатический. У 36 (78,2%) из 46 пациентов, получающих комплексное лечение, была прогрессирующая стадия заболевания и у 10 (21,8%) - стационарная.

Индекс PASI в данной группе в среднем составил 27,1 ± 1,4.

Среди пациентов получающих ПУВА-терапию и препарат дрожжевой РНК у 80% заболевание протекало торпидно к антипсориатической терапии и в течение последнего времени у этих больных отмечались частые рецидивы от 2 до 6 раз в год. У 3 пациентов не было ремиссии в течение последних двух лет. У 6 больных - в течение года.

Группа сравнения включала 19 мужчин и 13 женщин в возрасте от 18 до 64 лет. Длительность заболевания варьировала от 1 года до 43 лет.

Среди пациентов получающих ПУВА-терапию у 18 - был распространенный вульгарный псориаз, у 10-экссудативный и у 4-артропатический. У 24 (75%) больных была прогрессирующая стадия заболевания и у 8 (25%)стационарная.

Индекс PASI в среднем составлял 26,1±1,7.

Нами была изучена активность ферментов пуринового метаболизма аденозиндезаминазы (АДА) и пуриннуклеозидфосфорилазы (ПНФ) в сыворотке крови и эритроцитах 60 больных распространенным псориазом и динамика изменения ее на фоне проведенной терапии.

С помощью спектрофотометрического метода нами было выявлено, что при всех клинических формах псориаза в прогрессирующей стадии заболевания в сыворотке крови больных псориазом в среднем отмечалось незначительное повышение активности фермента аденозиндезаминазы (АДА) (117,28±4,8 нмоль/мг.ч) по сравнению с контролем.

У больных псориазом в прогрессирующей стадии заболевания в сыворотке активность фермента пуриннуклеозидфосфорилазы (ПНФ) была снижена почти в два раза (49,26±2,1 нмоль/мг.ч) по сравнению с группой здоровых лиц (85,0±7,0 нмоль/мг.ч), (р<0,01).

Установлено, что у всех обследованных больных в прогрессирующей стадии не зависимо от формы заболевания в эритроцитах с высокой достоверностью (р<0,01), отмечалось двукратное увеличение активности ферментов АДА (159,61±4,5 нмоль/мг.ч) и ПНФ (342,01±7,1 нмоль/мг.ч) по сравнению с контролем.

Полученные данные свидетельствуют, о нарушении в транспорте предшественников нуклеиновых кислот у больных псориазом в эритроцитах и сыворотке крови.

Достоверно установлено повышение активности АДА и ПНФ в эритроцитах больных псориазом, являющихся главными переносчиками свободных предшественников нуклеиновых кислот в ткани и кожу.

Эпидермальный фактор роста (ЭФР) и фактор некроза опухоли - альфа (ФНО-а) определяли у 10 больных в прогрессирующей стадии заболевания и у 10 больных в стационарной стадии заболевания.

Нами впервые с помощью метода твердофазного иммуноферментного анализа была определена концентрация эпидермального фактора роста в коже и сыворотке крови больных распространенным псориазом, который, по мнению ведущих дерматологов (Шарапова Г.Я., Короткий Н.Г. 1993г, Самсонов В.А. 1997., Nanney L.B. 1986, Pietrzak А., 1997) является одним из факторов, влияющих на пролиферативную активность клеток.

Определена концентрация фактора некроза опухоли - альфа (ФНО-а) в коже больных распространенным псориазом в прогрессирующей и стационарной стадиях заболевания, который как известно, является провоспалительным цитокином и определяет возможность потенцирования дальнейшего иммунного ответа.

Установлено, что при прогрессирующей стадии заболевания в коже больных псориазом происходит увеличение концентрации ЭФР по сравнению с группой здоровых доноров и концентрацией этого показателя в стационарной стадии заболевания. (56,49±3,3 пкг/мг ткани) (р<0,01). При переходе в стационарную стадию заболевания концентрация ЭФР приближается к уровню контрольных значений ( 26,94±1,8 пкг/мг ткани ) (контроль-26,48 ±0,1 пкг/мг ткани) (р>0,05).

Учитывая полученные данные, молено сделать предположение об участии ЭФР в патогенезе псориаза и возможно о влиянии его на активность патологического процесса.

Концентрация ЭФР в сыворотке крови у больных распространенным псориазом в прогрессирующей стадии заболевания была повышена у 21(75%) больного, у всех этих пациентов отмечалось длительное течение заболевания (более 10 лет) и была установлена прямая корреляционная связь между показателем ЭФР в сыворотке крови и тяжестью течения заболевания, индексом PASI (г =0,67).

Установлено, что у больных с тяжелым поражением кожного покрова (PASI>30), концентрация ЭФР увеличивалась с высокой достоверностью (452,57±31,2пкг/мл) (р<0,01) (контроль-207±7,5пкг/мл).

Установленные изменения концентрации ЭФР в коже и сыворотке крови больных распространенным псориазом Moiyr использоваться как дополнительные диагностические критерии состояния активности патологического процесса при псориазе, для прогноза течения заболевания, а также послужить основой для разработки новых методов терапии направленных на коррекцию выявленных нарушений

Были изучены концентрации цитокинов: фактора некроза опухоли-альфа (ФНО-а), интерлейкинов - ИЛ-2 и ИЛ-4 в сыворотке крови 28 больных распространенным псориазом в прогрессирующей стадии заболевания, с различной степенью тяжести (по индексу PASI), разным характером течения кожного процесса и длительностью заболевания от 1 года до 30 лет.

Нами впервые выявлены следующие факты, характеризующие клинико-иммуннологическое состояние псориаза.

При всех клинических формах псориаза в прогрессирующей стадии заболевания отмечалось повышение провоспалительного цитокина - фактора некроза опухоли - альфа (ФНО- а), а также повышение ИЛ-2 определяющего направление дифференцировки Т-хелперов в Т1 - хелперы. Концентрация ИЛ-4 у больных псориазом значительно колебалась в зависимости от давности заболевания, частоты обострений, а также площади поражения кожного покрова.

Анализируя индивидуальные показатели цитокинов в сыворотке крови больных псориазом мы установили следующее, что наиболее высокие показатели ФНО-а и ИЛ-2 у больных распространенным псориазом выявлены у лиц с длительным торпидным течением заболевания, экссудативным псориазом, а также большой площадью поражения кожного покрова - более 50% (PASI>30).

При сопоставлении полученных результатов с клиникой псориаза мы обнаружили, что у больных вульгарным и экссудативным псориазом с повышением показателя ФНО-а и снижением ИЛ-4 в сыворотке крови заболевание протекало тяжело, торпидно к антипсориатической терапии и в течение последнего времени у этих больных имели место частые рецидивы (2-4 раза в год). При незначительном повышении концентрации ФНО-а и повышении ИЛ-4 у больных вульгарным и экссудативным формами псориаза, несмотря на большую площадь поражения кожного покрова, процесс отличался благоприятным клиническим течением.

Нами разработан комплексный метод лечения больных включающий ПУВА-терапию и препарат дрожжевой РНК, представляющий собой комплекс моно- и олигонуклеотидов, который регулирует обмен нуклеотидов в тканях, обладает мембраностабилизирующим действием и является иммуномодулятором. Определена его эффективность по сравнению с ПУВА-терапией с традиционным лечением.

Для определения эффективности комплексного лечения больные были разделены на две равноценные группы, не различающиеся по возрасту, полу, длительности и тяжести заболевания.

В первую группу вошли 46 пациентов, получающие комплексное лечение, включающее ПУВА-терапию и препарат дрожжевой РНК (энкад). Во вторую группу (группа сравнения) вошли 32 пациента получающие ПУВА-терапию с традиционным лечением.

Препарат дрожжевой РНК (энкад) назначался согласно инструкции, в виде 3,5% раствора по 3 мл 2 раза в сутки внутримышечно в течение 15 дней, на курс 30 инъекций.

В результате проведенной терапии было установлено, что при комплексном лечении ПУВА-терапией с препаратом дрожжевой РНК (энкад) клиническое выздоровление было достигнуто у 35 из 46 больных, значительное улучшение у 9 больных, улучшение - у 2 больных . В ipynne сравнения среди 32 больных клиническое выздоровление было достигнуто у 24 больных, значительное улучшение у - 7, улучшение у 1 больного.

При комплексном лечении ПУВА-терапии и препаратом дрожжевой РНК понадобилось от 18 до 26 процедур ПУВА-терапии, в среднем 18,4±11,8, при суммарной дозе облучения 104,6±1,8 Дж/см2. Сроки лечения составили 4,6±0,5 недель.

В группе сравнения, получающей ПУВА-терапию, среднее количество процедур составило 22,5±2,1, при суммарной дозе облучения 139,4±8,6Дж/см2, сроки лечения составили 5,4±0,5 недель.(р<0,05).

Были прослежены отдаленные результаты терапии больных псориазом.

После комплексного лечения ПУВА-терапией и препаратом энкад сроки клинической ремиссии увеличились в среднем на 2,5 месяца (р<0,05).

Из 46 больных получающих комплексное лечение ПУВА-терапией и препаратом энкад 27 больных вновь поступили в клинику по поводу обострения дерматоза. У большинства 16 (59,3%) из них отмечалось более легкое клиническое течение кожного процесса, характеризующееся немногочисленностью высыпаний, отсутствием склонности к распространенности, незначительной инфильтрацией очагов, у 5 (18,5%) больных отсутствием экссудативного компонента.

Изучено влияние комплексного лечения на активность ферментов пуринового обмена. После комплексного лечения больных псориазом включающего ПУВА-терапию и препарат дрожжевой РНК (энкад) в сыворотке крови отмечалась нормализация активности фермента аденозиндезаминазы (АДА) (98,29±6,6нмоль/мг.ч.), при 98,0±10 в норме, концентрация пуриннуклеозидфосфорилазы (ПНФ) незначительно увеличивалась(68,15±3,4нмоль/мг.ч) в результате лечения, но не достигала уровня нормальных величин (85,0±7,0нмоль/мг.ч). После традиционного лечения в сыворотке крови активность АДА незначительно снижалась по сравнению с данными до лечения, но не достигала нормальных значений, а активность ПНФ снижалась более чем в два раза по сравнению с контролем.(39,71±1,9 нмоль/мг.ч.Хр<0,01). В эритроцитах после комплексного лечения ПУВА-терапией и препаратом энкад отмечено снижение активности ферментов пуринового метаболизма АДА и ПНФ (114,14±4,Знмоль/мг.ч. и 155,8±6,2нмоль/мг.ч.) (р<0,01), по сравнению с показателями до лечения (159,61±4,5 и 342,01±7,1 соответственно). При этом после традиционной терапии активность АДА имела лишь незначительную тенденцию к снижению (145,74±6нмоль/мг.ч.),(Контроль-91,0±8нмоль/мг.ч). Активность ПНФ незначительно снижалась(284,55±11,4нмоль/мг.ч.) (р>0,05) по сравнению с показателями до лечения и оставалась по прежнему выше уровня контрольной группы (152,0±12,0нмоль/мг.ч.), а также была выше в 1,8 раза по сравнению с группой после комплексного лечения ПУВА-терапией и препаратом дрожжевой РНК (энкад).

Возможно, комплексный метод, включающий ПУВА-терапию и препарат дрожжевой РЖ (энкад) позволяет нормализовать пул предшественников нуклеиновых кислот, о чем свидетельствует нормализация активности ферментов АДА и ПНФ в эритроцитах, являющихся транспортной системой переноса свободных предшественников нуклеиновых кислот.

Уровень фактора некроза опухоли - альфа (ФНО-а) снижался и достигал нормальных значений у 50% больных, у остальных наблюдалась тенденция к его снижению.

Концентрации интерлейкинов ИЛ-2 и ИЛ-4 при торпидном течении заболевания имели тенденцию к нормализации, но не достигали уровня контрольных значений.

После комплексного лечения ПУВА-терапией и препаратом дрожжевой РНК (энкад) отмечалась положительная динамика в изменении цитокинов ФНО-а, ИЛ-2 и ИЛ-4 в сыворотке крови.

Таким образом, преимуществом комплексного метода лечения ПУВА-терапией с препаратом энкад явилось укорочение сроков лечения на 14,9%, количества процедур ПУВА-терапии и суммарной дозы облучения на 21,3%.

Существенный момент комплексной терапии с препаратом энкад - снижение активности ферментов нуклеинового обмена в эритроцитах, предшественников нуклеиновых кислот, играющих важную патогенетическую роль при псориазе, а также тенденция к нормализации цитокинов у больных с торпидными плохо поддающимися терапии формами заболевания.

Представленный материал позволяет сделать вывод, что на современном этапе развития науки, когда вскрыты далеко не все механизмы формирования псориатического процесса возможность изучения цитокиновой сети регуляции откроет новые перспективы в изучении патогенеза данного заболевания и позволит найти новые подходы к лечению этого дерматоза.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Саруханова, Анна Генриховна, 2003 год

1. Ананьев А.В., Акопян Ж.И. Значение пуриннуклеозидфосфорилазы при патологиях.//Экспериментальная и клиническая медицина. 1989г. т. 29 №3, с 266-271.

2. Бабаянц Р.С., Белокриницкий Д.В., Владимиров В.В. и соавт. Иммунологические показатели у больных псориазом в процессе лечения методом фотохимиотерапии.//Вест. дерматол.и венерол. -1983. №6.-с.4-6.

3. Бунина Т.Л. Патогенез бокового амиотрофического склероза. Медицина 1977.

4. Бунина Т.Л., Хондкариан О.А. и соавт. «Лечение бокового амиотрофического склероза рибонуклеотидами» с166-174

5. Беренбейн В.А., Шумай Н.И. Содержание циклического аденозинмонофосфата и циклического гуанозинмонофосфата в коже больных псориазом.//Псориаз. Москва. Медицина. 1980.: 7-12.

6. Бернет Ф. Клеточная иммунология. М. Мир. 1971. 542с.

7. Бочкарев Ю.М., Сенцов В.Г., Полканов B.C., и др. Лечение больных псориазом гемосорбцией и гемодиализом. //Сорбционные методы детоксикации и иммунокоррекции в медицине. Харьков. 1982.: 18-19.

8. Васильева Е.Ф. Каида В.Г. и соавт. Факторы клеточного и гуморального иммунитета при различных физиологических и патологических состояниях. //Тезисы докладов XII Российской научной конференции 1996: - с27.

9. Васильева Е.Ф., Кушнер С.Г. Каледа В.Г., Шабанова М.Е. Система естественной цитотоксичности и иммуномодулируюгцее действие энкада при шизофрении. //Десятая конференция «Нейроиммунология» Россия, С-Петербург 28-31 мая 2001г. С38-40.

10. Васильева Е.Ф., С.Г. Кушнер и соавт. Иммунокомпетентные клетки и иммуномодулирующее действие энкада у больных деменцией альцгеймеровского типа.2001г.

11. Васильева Е.Ф., Т.В. Владимирова и соавт. Влияние иммуномодулятора «энкад» на функциональную активность лимфоцитов у больных шизофренией и шизоаффективным психозом. //Тезисы докладов XII Российской научной конференции. Челябинск 1995г

12. Власов В.В. Производные олигонуклеотидов как потенциальные ген-направленные биологически активные вещества // В бр. Компоненты нуклеиновых кислот.- Рига: 1989.-С.9.

13. Владимиров В.В. Диагностика и лечение кожных болезней.//Москва. Медтехтурсервис. 1995. с-192.

14. Грачева Л.А. Цитокины в онкогематологии. 1996. М. «Алтус». с-168

15. Гринио Л.П., Шабанова М.Е. Применение отечественного препарата Энкад при лечении нервно-мышечных расстройств //Материалы Первого российского национального конгресса «Человек и лекарство».- М: 1992.-с355.

16. Димант Л.Е. Терапия больных псориазом с учетом иммуноморфологических маркеров воспаления и пролиферативной активности кератиноцитов кожи. //Автореф. дисс. Москва. 2001г

17. Довжанский С.И. Псориатическая болезнь. Саратов 1991

18. Довжанский С.И., Утц С.Р. Псориаз и псориатическая болезнь. Саратов 1992, с-286

19. Довжанский С.И., Мышкина А.К., Оркман В.Ф. Иммунологические сдвиги при псориазе.//Вестн. дерм, и венерол.-1985.-№9.- с36-38.

20. Жилова М.Б. Изучение состояния гистоновых белков у больных тяжелыми формами псориаза и разработка метода лечения с использованием системного ретиноида ацитретина. //Автореф. дисс. Москва 2000г.

21. Задорожный Б. А. Псориаз.- Киев, 1983.

22. Иммуноферментный анализ. //Под ред. Т.Т. Нго, Г.М.Ленхофф. -М., 1988г.

23. Йегер Л. Клиническая иммунология и аллергология. Москва. Медицина. 1990. Т.З.: 560.

24. Казбекова Т.Г. Лечение больных псориазом сандимуном и оксидевитом с учетом состояния Т-клеточного иммунитета.// Автореф. дисс. Москва 1993г.

25. Кетлинский С. А. Роль Т-хелперов типов 1 и 2 в регуляции клеточного и гуморального иммунитета. //Иммунология том22 №2 2002г с77-80.

26. Клебанов Б.М. Фармакологическая регуляция воспаления: современные проблемы и перспективы развития. //Экспер. и клин, фармакология. 1992; 3-4

27. Коьальчук Л.В., Ганковская Л.В., Рубакова Э.И. //Система цитокинов. Москва 1999.

28. Коновалова Н.В. Экспериментальное обоснование фонофореза препарата энкад и его клиническое использование при лечении больных пигментным ретинитом. //Канд. Дисс. - Одесса: -1988: - С. 140.

29. Короткий Н.Г. Петруиин Д.Д. Иммунологический статус больных псориазом, леченных гемосорбцией. //Вестн. дерматол. 1987.6.: 11-14.

30. Кубанова А.А., Маркушева Л.И., Фомина Е.Е. Уровень сывороточного фактора некроза опухоли альфа при различных дерматозах.//Русский журнал «ВИЧ/СПИД и родственные проблемы». -1997.- С146-147.

31. Лесков В.П., Чередеев А.Н., Торлина Н.К., Новоженов В.Г.//Клиническая иммунология для врачей.-М., Фармарус Принт.-1997-с120

32. Лидак М.Ю. Нуклеозидные препараты в медицине //В бр. Компоненты нуклеиновых кислот. Рига: 1989- С.8.

33. Ломакин М.С. //Иммунобиологический надзор. Москва. Медицина. 1990. с-256

34. Ляпон А.О. Клинико-иммунологические исследования при псориазе.//Вестн. Дерматол. 1985., №11.: С8-11

35. Макаров С.В., Липина Л.Н., Вологодина Н.Н. и соавт. Применение препарата энкад в терапии демиелинизирующего процесса. //Нейроиммунология на пороге XXI в. С-Петербург: -1992, С43-44.

36. Маркушева Л.И., Фомина Е.Е., Сафонова Т.Г. Концентрация фактора некроза опухоли (альфа) в сыворотке крови больных псориазом.// VII Российский съезд дерматологов и венерологов 1996г. Казань, с -98

37. Маркушева Л.И., Самсонов В.А., Фомина Е.Е. и др. Уровень сывороточного фактора некроза опухоли- альфа при псориазе. //Вестн. дерматол. и венерол. 1997.№3.: с8-11.

38. Маркушева Л.И., Тихонов Ю.В., Тогузов Р.Т. Метаболический пул пуриновых соединений в эпидермисе и крови больных псориазом с применением препарата энкад. //Клиническая лабораторная диагностика. №8,1998, с-43.

39. Машкиллейсон А.Л. Лечение кожных болезней. //Руководство для врачей. М.Медицина 1990; 560)

40. Машкилейсон А. Л., Ляпон А.О., Рутштейн Л.Г., Рачеков В.М. АТФ и рибонуклеаза в терапии псориаза. // Пролиферативные заболевания кожи. Респ. сборник научн. трудов. М., 1985. - с.88-91.

41. Машковский М.Д. //Лекарственные средства 14 изд. 2001г. с-608.

42. Милевская С.Г., Потапова Т.В. Характеристика иммунных комплексов у больных псориазом.//Вестн. дерматол.и венерол. 1998.,№5., с35-37

43. Мордовцев В.Н., Мушет Г.В., Альбанова В.И. //Псориаз. 1991г.Кишинев. 1991г.

44. Мордовцев В.Н., Мазовецкий А.Г., Рахматов АБ., Мухамедов Х.А. Состояние микроциркуляции у больных псориазом.// Вестн. дерматол. венерол. 1983,2:10-12.

45. Мордовцев В.Н., Рассказова Н.И. Лечение больных наследственными заболеваниями кожи и псориазом. //(Пособие по фармакотерапии для врачей) Астрахань. 1996. с164.

46. Мордовцев В.Н., Прохоров А.Ю., Старков И.В. Современные концепции по патогенезу псориаза. // Вестн. дерматол. и венерол.-1987.-№7.-с.74.

47. Мордовцев В.Н. и соавт. Лечение больных наследственными заболеваниями кожи и псориазом.//Асграхань -1996.

48. Мордовцев В.Н., Сергеев А.С., Алиева П.М. Генетические исследования при псориазе. // Сов. мед.-1981.- №2. с.81-85

49. Мордовцев В.Н., Сергеев А.С., Алиева П.М. Изучение популяционной частоты псориаза.//Вестн. дерматол. 1982.-№7.с.8-12

50. Мошкалова И.А., Михеев Г.Н., Соколовский Е.В. и др.// Пузырные дерматозы. Псориаз. Современные методы лечения. Санкт-Петербург. Сотис. 1999.133с.

51. Пальцев М.А., Иванов А.А. //Межклеточные взаимодействия. Москва. Медицина. 1995г.224с.

52. Перламутров Ю.А. , Борнденпггейн Л.М., Таумин М.Р. Роль эмоционально-вегетативных расстройств в патогенезе псориаза.//Псориаз. Москва. 1980.: 39-43

53. Преображенская М.Н., Мельник С.Я., Аналоги компонентов нуклеиновых кислот -ингибиторы нуклеинового обмена //Итоги науки и техники ВИНИТИ. Биоорганическая химия -1983. Т. 1-е. 1-244.

54. Резайкина А.В., Самсонов В.А., Волнухин В.А., Куршакова Т.С., Спектр А.Г. Способ оценки эффективности ПУВА-терапии больных псориазом.//Вестн. дерматол. и венерол. 1995., №4 с-49

55. Рубине А.Я. Иммунные механизмы патогенеза и обоснование иммунокорригируюгцей терапии больных псориазом. //Автореф. дисс. докт. мед. наук. Москва 1987г.

56. Русак Ю.Э. Разработка и совершествование патогенетических методов лечения псориаза на основе фототерапии. //Автореф. дисс. докт. мед.наук. Москва 1997г.

57. Рыбкина B.J1. Роль иммунной системы в формировании псориатического фенотипа.//Вопросы дерматологии и венерологии. 2000.- №3 с20-26

58. Рясина Т.В. Коршунова Т.С., Шабанова М.Е. и соавт. «Антигипоксическое средство для лечения ишемических нарушений мозгового кровообращения» //Патент 1994г.

59. Рясина Т.В., Коршунова Т.С., Кошелев В.Б., Шабанова М.Е. Производные нуклеиновых кислот при экспериментальном инсульте. //Конгресс «Человек и лекарство» 1992., с.136.

60. Сайкова JI.A. «Биоэнергетические нарушения и их коррекция при нервно-мышечных заболеваниях». //Автореф. Дисс. Санкт-Петербург 1992г.

61. Самсонов В.А, Олисова М.О. Применение эссенциале в комплексной терапии больных псориазом.//Вестн. дерматол. и венерол. 1991., №9, с34-36

62. Сергиенко В.И., Бондарева И.Б. //Математическая статистика в клинических исследованиях. 2001г., с 27-61.

63. Скрипкин Ю.К. Кожные и венерические болезни.// Том II. Москва. Медицина. 1995.: с 543.

64. Скрипкин Ю.К., Лезвинская Е.М. Кожа- орган иммунной системы.//Вестн. дерматол. и венерол. 1989.№10.: 14-20

65. Скрипкин Ю.К., Каламкарян А.А., Мандель А.Ш. и соавт. Основные методы лечения больных псориазом.//Вестн. дермат. и венерол.- 1987.-№7.-с 22-27.

66. Скрипкин Ю.К., Шарапова Г.Я., Резайкина А.В., Кубанова А.А., Левин М.М. Иммунология в дерматологии.// Вестник дерматол. и венерол.-1993, №4., с4-12

67. Тихонов Ю.В., Маркушева Л.И., Тогузов Р.Т. Высокоэффективная жидкостная хромотография пуриновых соединений в эпидермисе и крови больных псориазом. //Тез.докл.: VII Всероссийский симпозиум по молекулярной жидкостной хроматолграфии. М., 1996. с.-73.

68. Тихонов Ю.В., Маркушева Л.И., Тогузов Р.Т., Метаболизм пуриновых соединений при псориазе. // Клиническая лабораторная диагностика, №3,1998.

69. Федоров С.М., Самсонов В.А., Селисский Г.Д. Роль цитокинов в патогенезе дерматозов. //Вестник дерматол. и венерол. 2.1997г. 16-19с.

70. Филатов О.Ю. Кузнецова Н.М., Шабанова М.Е. Влияние Энкада на хемилюменесценцию крови здоровых и больных аллергическими заболеваниями. //VIII Российский национальный конгресс «Человек и лекарство» 2-6 апреля 2001г.

71. Фрейдлин И.С., Назаров П.Г. Регуляторные функции провоспалительных цитокинов и острофазных белков. //Вестник Рос. Акад. Мед. Наук. 1999. №5: с 28-32

72. Фролов Е.П. Биохимия кожи.//в кн. «Кожа» под ред. А.М. Чернуха и Е.П. Фролова. Москва. Медицина. 1982.:76-139.

73. Шарапова Г.Я., Н.Г.Короткий., М.Н. Молоденков М.Н.// Псориаз. 1993г. 223с.

74. Шахмейстер И.Я., Шарыпова И.В., Хахаль Э.А. Современный взгляд на патогенез и лечение псориатической болезни. //Республиканский научный симпозиум: Пролиферативные заболевания кожи. Москва 1996; 18-19

75. Шахмейстер И.Я., Казенцова И. А., Каламкарян А. А. и др. Влияние фотохимиотерапии на митотический режим эпидермиса при псориазе. //Вестн. дерматол. и венерол. 1980. №4.: с4-7

76. Шегай М.М., Кешилева З.Б., Акышбаева Г.А. Роль некоторых цитокинов в развитии псориаза// Вестн. дерматол.и венерол. 5.1998г. 7-14с

77. Шейнкман B.JI. Иммунологическая характеристика больных псориазом при традиционном лечении.// Автореф. дисс. к.м.н. Смоленск 2000г.

78. Шимкевич И.А., Харнас С.Ш., Вовк Е.Д. и др. Диагностическая ценность уровня эритроцитарных адениннуклеотидов после операций в условиях искусственного кровообращения. //Анестезиология и реаниматология -1982. №4. -с35-38.

79. Шичкин В.П. Патогенетическое значение цитокинов и перспективы цитокиновой/антицитокиновой терапии. //Иммунология 1998;2: с36-40.

80. Урустенова А.С. Цитокиновая и генетическая регуляция при псориазе.//Вопросы дерматологии и венерологии. 2000 -№3, с26-31

81. Якубович А.И., Малова И.О. Ре-ПУВА-терапия больных псориазом. Научно-практич. конф. «Современные вопросы патогенеза и терапии псориаза и распространенных аллергических дерматозов»: //Тезисы докладов. М.1998; с144-145.

82. Ярилин А.А. Система цитокинов и принципы ее функционирования в норме и при патологии. //Иммунология. 1997; 5:с 7-14

83. Ярилин А.А. Межклеточная кооперация при иммунном ответе. Выбор клеткой формы ответа //Иммунология. -1999. № 1, с 17-24.

84. Ярилин А. А. Симбиотические взаимоотношения клеток иммунной системы.//Иммунология.-2001.-№4, с 16-21

85. Al- Ramadi B.K., Meissler J.J., Huang D. et.al. Immunosuppression induced by nitric oxide and its inhibition by interleikin 4.// Eur. Immunol. 1992. V.22.: 2249-2254.

86. Aaroson S.A., Rubin J.S., Finch P.W. Growth factor required pathways in epitheliai cell proliferation.// am Rev. Respir.-1990.-v.142, - p.7.

87. Awadhi A., Dale P., Mc. Kendry R.J. Pancytopenia associated with low dose methotrexate therapy. A regional survey.//J.Rheumatol. 1993; 20(7): pi 121-1125

88. Aragane J.R.S., Bhardway M.M., Simon A. Detection of keratinocite-derived interleukin //J. Invest. Dermatol. 1994.102.:586

89. Berg D.J., Leach M.W., Kuhn R., Interleukin 10 but not interleukin 4 is natural suppressant of cutaneus inflammatoiy responces. //J. Exp. Med.-1995, v.182, N1, p99-108.

90. Barker J.N.W.N. Psoriasis genetics.// JEDV. 1997.-V.9.-Suppl.l.-S-27

91. Bolduc A., Boucier M., et.al. Calcipotriol combined with twice weekly UVB phototherapy: a safe, effective and UVB-sparing anty-psoriatic treatment.// J. of the European academy of dermatology and venereology. 1999.,vl2, p328

92. Bouma G., Crusius J.B.A., Oudkerk Pool M., et.al: Secretion of TNF-alpha and Lta in for inflammatoiy bowel disease.// Scand J. Immunol. 1996:43:456-463

93. Bos J.D., de Ria MA: The patogenesis of psoriasis: a complex disorder of the skin and speculation.// Immunol. Today 1999; 20:40-46

94. Bos. J.D. The pathomechanisms of psoriasis: the skin immune system and cyclosporin.//Br. J. Dermatol.-1988.-V.118.-p. 141-155.

95. Bos J.D., Hagenaars C., Das P.K. Predominanse of memory T cells (CD4+, CD45r+) in both normal and diseases human skin.// Arch. Dermatol Res. 1989.-V.281 .-p.24-30.

96. Broun D.W., Baker B.S., Ovigne J-M., Hardman C. Skin CD 4+ T Cells Produce Interferon-y In vitro in response to streptococcal antigens in Chronic plaque psoriasis. //Invest. Dermatol. 2000., vll4., n3., p576-581

97. Breathnach S.M. The skin immune system and psoriasis.// Clin. Exp. Immunol. 1993.-V.91.-p. 343-345.

98. Bukulmez G., Akan Т., Ciliv G., Serum adenosin desaminase levels in patients with psoriasis: a prospective case-control study. //J. Europ. Acad. Dermatol. 2000., vlO., n6., p274-6

99. Сао К., Song F.S., Liu H.G., Xu S.Y., Liu Z.H., Su X. H., Wang F.X. Association between HLA antigens and families with psoriasis vulgaris.// Clin. med. S. Engl.- 1993.-106(2) pl32-135

100. Carneiro S., Lamy F., et.al. The hepatic evelution in the prolonged use of methotrexate in psoriasis (UFRJ/Brazil-1990-1997).// J. of the European academy of dermatology and venereology. 1999.,vl2, p297

101. Carpenter G., and Cohen S. Epidermal growth factor. //Ann. Rev. Biochem. V48 p. 193-216

102. Carson D.A., Ribeiro J.M. Apoptosis and disease.//Lancet. 1993. V.134.8855.1251-1254.

103. Christopher E. International psoriasis symposium. Chicago 1994.

104. Christopher E., Hauseler T. Psoriasis Type I and Type II as subtypes on nonpustular psoriasis./Лп "Psoriasis"-1991. pl5-21

105. Christopher E. Immunopatoiogy of psoriasis.//Int. Arch. Allerg. Immunol. 1996,-Jul.-l 10(3).-p. 199-206.

106. Cormaine R.H. Immunopatoiogy of psoriasis.//Arch.of Dermatol. Research. 1981 .-V.270.-p.201-213.

107. De Pita O., Ruffelli M., Cadoni S, et.al. Psoriasis: comparison of immunological markers inpatients with acute and remission phase. //J. Dermatol Sci 1996; 13:118-124.

108. De Rie M.A., Bos J.D. What is new in immunotherapy.//!, of the European academy of dermatology and venereology. 1999.,vl2, p40

109. Dinarello C.A. Interleukin-1 and its biologically related cytokines.//Adv. Immunol. 1989.44.:153-205

110. Dugas N. Cytokine. 1998.-Vol.l0.-p.680-689

111. Elder J.T., Fisher G.J., Lindquist P.B., Bennett G.L., et.al. Overexpression of TGF-a in psoriatic epidermis.// Science 1989., v243, p 811-814

112. Elder J.T., Henseler Т., Christofers E., Voorhees J.J., Nair R.P. Of genes and antigens: the inheritance of psoriasis.// J. Invest. Dermatol. 1994. - Nov.- V.103 (5Suppl).p. 150-153.

113. Elder J.T., Henseler Т., Christofers E., Voorhees J.J., Nair R.P. The genetics of psoriasis. //Arch. Dermatol. 1994 130: 216-224

114. Ellis C.N., Voorhees J.J. Etretinate therapy.// J. Amer. Acad. Dermatol. 1987.- V. 16.- p.267-291.

115. Farber E.M., Nail Z. Epidemiology: natural history and genetics. In: Roenigk H.H., Maibach H.I. editors. Psoriasis. //2-nd ed. New York: Marcel Dekker, Inc.-1991.- p. 209258.

116. Fong C.W., Siddiqui A.H., Mark D.F. Identification and characterization of a novel repressor site in the human necrosis factor alfa gene. //Nucl. Acid. Res. 1994 22: 1108-1114.

117. Friedman R., Agus В., Ametes E. Amyloid arthropathy in patiens with psoriasis and amiloidosis.// Artht. Rheum. 1984; 24(10): 1320-1323.

118. Fried R.G. Psoriasis can cause psychological distress that need attention.// Dermotology Times. March 1994. - S4-S6.

119. Fry L. Psoriasis. //Br J. Dermatol. 1998:119:445-461

120. Gottlieb A.B., Chang C.K., Posnett N.D., Fanelli В., Tam J.P. Detection of TGF a in normal, malignant and hyperproliferative human keratinocytes. //J. Exp. Med. 1988, 167: 670-675

121. Giblett E.R., Anderson J.E., Cohen F., et.al Adenosine dezaminase deficiency in patients with severaly impaired cellular immunity //Lancet. 1972. v.2.-p 1067-1069.

122. Giblett E.R, Amman A.J. et.al. Nucleoside-phosphorilase deficiency in a child with severaly defective T cell immunity and normal В cell immunity//Lancet. 1975. - v .1 - p 1010-1013

123. Higashiama M., Hashimoto K., Mattsumoto K., Differential expression of transforming growth factor-a (TGF-alfo) and EGF receptor in transitional area of psoriatic epidermis. //J. Dermatol Sci 1994; 7: 45-53

124. Hannuksela-Svahn A., Pukkala E., Laara E., Poikolainen K. Psoriasis, its treatment, and cancer in a cohort of finish patients.//The J. of Invest. Dermat. 2000., vll4, n3, p587-591

125. Harry W., Snyder. Jr., Inhibition of purine nucleoside phosphorilase: a novel mechanism of action for the treatment of psoriasis. // VI Inter. Symposium., April 15,1993

126. Hart P.H., Grimbaldeston M.A., Jaksis., Tan J.E. Ultraviolet B-Induced Supression of Immune Responses in Interleukin -4-/- Mice- Relationship to Dermal Mast Cells. //Invest. Dermatol. 2000., vll4, n3, p508-514

127. Hoehler Т., Kruger A., Schneider P.M., et.al. TNF-alpha-promoter polymorphism is associated with juvenile onset psoriasis and psoriatic arthritis.// J. Invest. Dermatol. 1997; 109: 552-556

128. Jablonska S., Glinski W. Overview of immunology.// in Psoriasis. Eds H.H.Roenigk (Jn), H.J. Maibach. Marcel. Dekker. INC. New York. Basel., Hong Kong. 1999.261-283

129. Jablonska S., Clunski W. Overvier of Immunology.//Psoriasis/Edit. New York.-1985.

130. Kaluza W., Reuss E., Grossman S., Hug R., et.al. Different Transcriptional Activity and in vitro TNF-a production in psoriasis patients carrying the TNF-a 238A promoter polimorphism. //Invest. Dermatology 2000; vl 14; N6; 1180-1183.

131. King L.E., Jr., Carpenter G.F., Epidermal group factor. In Biochemistry and Physiology of the skin. L. Goldmith (Ed.). //Oxford University Press, New York, 1983 pp. 269-281

132. Kishimoto T.et.al. IL-6 and receptor: a paradigm for cytokines.//Science, 1992. 258.: 593-597.

133. Kohchi C., Noguchi K., Tanabe J., et.al. Constitutive expression of tumor necrosis factor and tumor necrosis-p genes in mouse embrio: roles cytokines as regulator and effector of develipment. //Intern. J. Biochem. 1994. V.26.:l 11-119.

134. Krueger G.G., Gilleaudeau P., Barazani Persistent immunological activation is associated with epidermal growth activation in psoriasis but not chronic skin wounds.// J. Invest. Dermatol., 1992, v.98, N-3, p.574.

135. Kupper T.S. Groves R.W. The Interleukin-1 Axis and Cutaneous Inflammation.//J. Invest. Dermatol., 1995, v. 105, N1, p.625-669.

136. Lawrense E.N. Immunodeficiencies associated with errors in purine metabolism.

137. Mod. Klin. N. Amer. 1985. - v-69. p.505 - 518.

138. Leivo Т., Leivo I., Kariniemi A.L., Keski-Oja J. Virtanen I., Down regylation of transforming growth factor receptor I anal II is seen in Lesional but non -lesional psoriatic epidermis.// J. Invest. Dermatol. - 1993. - V.100.- p.225-228.

139. Lloyd E. King, Jr., Ronald E. Gates, Christa M. Stoscheck, Roy A.Fava, and L.B. Nanney Role of Epidermal Growth Factor in Psoriasis. //J. Invest. Dermatol. -1995.- V28.-p431-442.

140. Mease PJ. Tumour necrosis factor (TNF) in psoriatic arthritis: pathophysiology and treatment with TNF inhibitors. //Ann Rheum Dis 2002 Apr;61(4):298-304

141. Menter A. Patogenesis and genetics of psoriasis. //Cutis 1998 Feb.- V.61 (Suppl).-p.8-10

142. Nanney L.B., Stoscheck C.M., Magid M., King L.E., Jr. Altered (1251) epidermal growth factor biding and receptor distribution in psoriasis. //J.Invest. Dermatol. 1986 N86 p 260-265

143. Nanney L. В., Yates R. A., King L. E. Jr. Modulation of epidermal growth factor receptors in psoriatic lesions during treatment with topical EGF. //J. Invest Dermatol Res 1992;287:304-309.

144. Nataray A., Wolf P., Cerroni L. P53 mutation in squamous carcinomas from psoriasis patients treated with psoralen+UVA(PUVA).//J.Invest. Dermatol. 1997 Aug.-V. 109(2).-p.238-243

145. Nicola N. A Guidebook to Citokines and their Receptors.// Oxford 1994

146. Nicoloff B.J. The cytokines network in psoriasis.//Arch. Derm., 1991, v.127, N3, p. 185-190

147. Owen C.M., Harrison P.V. Basiliximab, an interleukin-2 receptor monoclonal antibody. A new therapy for psoriasis?// J. of the European academy of dermatology and venereology. 1999.,vl2,p303

148. Peus D., Beyerle A., Rittner H.L., Pott M., et.al., Anti-psoriatic Drug Anthralin Activates JNK via lipid peroxidation: Mononuclear cells are more sensitive than keratinocytes.// The J.Invest. Dermatol. 2000., n4, vl 14., p688-693

149. Pietrzak A., Lecewicz-Torun В., Chodorowska G., et al Epidermal growth factor concentration in the sera of male psoriatic patients.// Acta Derm Venerol (Stockh) 1997;77:489-490.

150. Pillai S., Mahajan M., Carlomusto M. Ceramide potentiates, but sphingomyelin inhibits, vitamin D-induced keratinocyte differentiation: comparison between keratinocytes and HL-60 cells.// Arch. Dermatol. 1999 p 284-289

151. Roitt I., Brostoff J., Male D. //Immunology, 4-th ed., Mosby, 1996

152. Ruszcrak Z., Ciborska L., Gramecki R., Ншпога1па I komorkowa ockzynowose u cborych na tuszczyce.// Przel. Derm.-1985. -V.72(3>S.225-239.

153. Sayma K., Midorikawa K., Hanakowa S. et.al. Superantigen production by staphylococcus aureus in psoriasis.// J. Invest. Dermatology-1998., 196(2), pl94-198

154. Schlaak J. F., Buslau M., Jochum W., Hermann E., Gimdt M., Gallati H., Meyer-zum- Buschenfelde K.N., Fleisher B. T-cells involved in psoriasis vulgaris belong to the Thl subset. //J. Invest. Dermatol. -1994. -102 (2). 145-9.

155. Shen J., Shisan В., Reeve V.E. Modulation of IL-10, IL-12, and IFN-y in the epidermis of hairless mice by UVA (320-400 nm) and UVB (280-320 nm) radiation.// The J. of Invest. Dermatol. 1999 vll3 n6 pl059-1965

156. Seifert M., Sterry W., Effenberger E.,et.al. The antipsoriatic activity of IL-10 is rather caused by effects on peripheral blood cells than by a direct effect on human keratinocytes.// Arch. Dermatol. 2000., 164-172

157. Sels F., Westhovens R, Emonds M., Vandermeulen E., Dequeker J. HLA typing in a large family with multiple cases of different autoimmune diseases. // J. Rheumatol-1997.-May.-v.24(5).-p.856-859

158. Spuls Ph.I., Bos J.D., et.al. The development of practice guidelines for the treatment of severe plaque type psoriasis.// J. of the European academy of dermatology and venereology. 1999.,vl2,pl22

159. Straube M., Nohle M., et.al. Contact allergy in psoriasis: late-type hypersensitivity to calcipotriol.//J. of the European academy of dermatology and venereology. 1999.,vl2, pl92

160. Stewart A.K., Lassam N.J., Quirt I.C. et.al. Adenovector-mediated gene delivery of interleukin-2 in metastatic breast cancer and melanoma: results of phase 1 clinical trial. //GeneTher. 1999; 6:3:350-363

161. Stem R.S., Nichols K., Vekeva L. Malignant melanoma in patient treated for psoriasis with methoxsalen and ultraviolet A radiation (PUVA). The PUVA follow-up study. //Eng.J.Med.1997 Apr.l0.-V.336(15).-p.l041-1045

162. Stosheck C.M., King L.E.Jr. Functional and structural characteristics of EGF and its receptor and their relationship to transforming protein. //J. Cell. Biochem. 1986. 31 p. 135152

163. Sussman A., Leonard J. Psoriasis: methotrexate and oligospermia.//Arch. J. Invest. Derm. 1987. V.88.3.: 18S-23S.

164. Vaccaro M., Pergolizzi S., et.al. The dermoepidennal junction in psoriatic skin as revealed by scanning electron microscopy.// Arch. Dermatol 1999 p 396-399.

165. Vollmer S.et.al. T-lymphocytes derived from skin resions of patients with psoriasis vulgaris express a novel cytokine pattern what is distinct from that of T-helper type 1 and T-helper 2 cells. //Eur. J. Immunol. 1994. 24(10). - 23 77 - 82.

166. Voorhees J.J. Immunosupression in psoriasis.// J. of the European academy of dermatology and venereology. 1999.,vl2, p51

167. Wanner R., B. Wolff , F. Glowacki The loss of desmosomes after retinoic acid treatment results in an apparent inhibition of HaCaT keratinocyte differentiation.// Arch. Dermatol. 1999 pp 346-353

168. Wilson A.G., Symons J.A., McDowell., Di. Giovine. Effects of a TNF-alfa promoter base transition on transcriptional activity.//Proc. Natl. Sci USA 1997: 94: 3195-3199

169. Uyemura K., Vamamura M., The cytokine network in lesional and lesion fre psoriatic skin is characterizedby T-helper type 1 cell-medieted response.//! Invest. Dermatol., 1993, v.101, N9, p.701-705.