Токсичные метаболиты сине-зеленых водорослей. Структура, анализ, биологическая активность тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.10, кандидат наук Чернова, Екатерина Николаевна

  • Чернова, Екатерина Николаевна
  • кандидат науккандидат наук
  • 2017, Санкт-Петербург
  • Специальность ВАК РФ02.00.10
  • Количество страниц 122
Чернова, Екатерина Николаевна. Токсичные метаболиты сине-зеленых водорослей. Структура, анализ, биологическая активность: дис. кандидат наук: 02.00.10 - Биоорганическая химия. Санкт-Петербург. 2017. 122 с.

Оглавление диссертации кандидат наук Чернова, Екатерина Николаевна

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1 АНАЛИТИЧЕСКИЙ ОБЗОР. ТОКСИЧНЫЕ МЕТАБОЛИТЫ СИНЕ-

ЗЕЛЕНЫХ ВОДОРОСЛЕЙ И МЕТОДЫ ИХ ОПРЕДЕЛЕНИЯ

1.1 Сине-зеленые водоросли в окружающей среде. Токсичные метаболиты сине-зеленых водорослей - цианотоксины

1.1.1 Нейротоксичные сакситоксины

1.1.2 Нейротоксичные анатоксины

1.1.3 Гепатотоксичные микроцистины

1.2 Другие виды биологической активности изучаемых цианотоксинов

1.3.Методы определения цианотоксинов

1.3.1 Скрининговые методы анализа

1.3.2 Методы селективного определения изучаемых цианотоксинов

1.3.2.1 Хроматографические методы определения цианотоксинов

1.3.2.2 Масс-спектрометрические методы определения цианотоксинов

1.4 Методы масс-спектрометрии, применяемые для анализа биологических молекул

1.4.1 Метод матрично-активированной лазерной десорбции/ионизации - масс-спектрометрии

1.4.2 Высокоэффективная жидкостная хроматография-масс-спектрометрия с электрораспылительной ионизацией

1.4.3 Типы современного оборудования для жидкостной хромато-масс-спектро-метрии

1.4.4 Идентификационные требования при проведении масс-спектрометрического анализа

1.5 Пробоподготовка для масс-спектрометрического анализа микроцистинов

ГЛАВА 2 РАЗРАБОТКА АНАЛИТИЧЕСКОЙ ПРОЦЕДУРЫ АНАЛИЗА ИЗУЧАЕМЫХ ЦИАНОТОКСИНОВ С ПРИМЕНЕНИЕМ МЕТОДА МАСС-

СПЕКТРОМЕТРИИ

2.1 Анализ стандартных соединений изучаемых цианотоксинов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии- тандемной масс-спектрометрии

2.1.1 Хроматографическое разделение

2.1.2 Масс-спектрометрическое детектирование

2.1.2.1 Масс-спектрометрическое детектирование соединений группы сакситоксинов

2.1.2.2 Масс-спектрометрическое детектирование анатоксина-а

2.1.2.3 Особенности масс-спектрометрического детектирования микроцистинов

2.1.2.3.1 Зависимость характера спектра от применяемых режимов фрагментации

2.1.2.3.2 Фрагментные спектры, получаемые на разных типах приборов

2.1.2.3.3 Фрагментные спектры соединений группы микроцистинов

2.1.3 Метод одновременного масс-спектрометрического определения анатоксина-а и

микроцистинов

2.2 Оптимизация процедуры пробоподготовки образцов биомассы для хромато-масс-

спектрометрического анализа микроцистинов

2.2.1 Одновременная экстракция анатоксина-а и микроцистинов из природной воды

2.2.2 Оптимизация процедуры пробоподготовки для анализа микроцистинов из биомассы методом хромато-масс-спектрометрии

2.2.2.1 Оценка эффекта обработки биомассы ацетонитрилом до целевой экстракции

2.2.2.2 Влияние обработки биомассы ацетонитрилом на эффективность экстракции

2.2.2.3 Оптимизация процедуры экстракции микроцистинов из биомассы с

использованием водно-ацетонитрильных смесей

2.2.2.4. Количественное определение содержания микроцистинов и анатоксина-а в

объектах окружающей среды

ГЛАВА 3 ПРИМЕНЕНИЕ РАЗРАБОТАННОЙ АНАЛИТИЧЕСКОЙ ПРОЦЕДУРЫ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ РАСПРОСТРАНЕННОСТИ ЦИАНОТОКСИНОВ В

ВОДОЕМАХ РАЗЛИЧНЫХ РЕГИОНОВ РОССИИ

3.1 Определение изучаемых цианотоксинов в озерах Северо-Западного региона России (на примере озер Сестрорецкий разлив и Нижнее Суздальское)

3.2 Определение микроцистинов и анатоксина-а в заливах Балтийского моря

3.2.1 Прибрежная зона восточной части Финского залива Балтийского моря

3.2.2 Определение цианотоксинов в воде и биомассе Куршского залива

3.3 Определение изучаемых цианотоксинов в Волжских водохранилищах

3.3.1 Цианотоксины в Рыбинском, Горьковском и Чебоксарском водохранилищах в период аномально жаркого лета 2010 г

3.3.2 Цимлянское водохранилище

3.4 Определение нейротоксичных циантометаболитов в водоемах Северо-западного, Центрального региона России и Западной Сибири

ГЛАВА 4 МЕТОДЫ КОМПЬЮТЕРНОГО МОДЕЛИРОВАНИЯ ДЛЯ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ

ЦИАНОМЕТАБОЛИТОВ

4.1 PASS (Prediction of Activity Spectra for Substances - взаимосвязь «структура-активность»)

4.2 QSAR («Quantitative Structure - Activity Relationship», «количественное

соотношение структура-активность»)

ГЛАВА 5 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

5.1 Примененные методы исследования

5.2 Приборы и материалы

5.2.1 Оборудование для МАЛДИ-МС анализа

5.2.2 Оборудование для ВЭЖХ-МС анализа

5.2.3 Оборудование для анализа фитопланктона

5.2.4 Реактивы

5.3 Параметры хромато-масс-спектрометрического анализа

5.3.1 Условия хроматографического разделения

5.3.2 Условия получения масс-спектров стандартных соединений сакситоксинов

5.3.2.1 Условия получения фрагментных масс-спектров высокого разрешения стандартных соединений сакситоксинов

5.3.2.2 Условия проведения тандемного масс-спектрометрического анализа при исследовании нейротоксических «цветений» природных водоемов

5.3.3 Получение масс-спектров микроцистинов

5.3.3.1 Условия получения масс-спектров высокого разрешения микроцистинов

5.3.3.2 Получение фрагментных масс-спектров высокого разрешения для идентификации структурных вариантов и изучения фрагментации микроцистинов

5.3.3.3 Условия одновременного масс-спектрометрического определения анатоксина-а

и микроцистинов

5.4 Условия получения МАЛДИ-МС спектров

5.5 Пробоотбор образцов из природных водоемов

5.6 Микроскопический анализ образцов фитопланктона

5.7 Иммуноферментный анализ

5.8 Пробоподготовка образцов для проведения ВЭЖХ-МС анализа цианотоксинов

5.8.1 Пробоподготовка образцов биомассы для проведения ВЭЖХ-МС анализа

микроцистинов и анатоксина-а

5.8.2 Обработка биомассы ацетонитрилом до целевой экстракции микроцистинов

5.8.3 Подготовка образцов биомассы для ВЭЖХ-МС анализа нейротоксинов

5.8.4 Пробоподготовка образцов природной воды

5.8.5 Амплификация участков генов синтеза цианотоксинов

5.9 Методы компьютерного моделирования для прогнозирования биологически

активных свойств соединений

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Рекомендованный список диссертаций по специальности «Биоорганическая химия», 02.00.10 шифр ВАК

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Токсичные метаболиты сине-зеленых водорослей. Структура, анализ, биологическая активность»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования:

Эвтрофирование водоемов способствует повсеместному массовому развитию («цветению») сине-зеленых водорослей (цианобактерий). Такие «цветения» часто приводят к появлению в воде токсичных метаболитов цианобактерий — цианотоксинов, опасных для здоровья и жизни людей и животных. В настоящее время «цветут» многие водоемы Российской Федерации. В водоемах Северо-западного региона России обнаружено более 20 потенциально -токсичных видов цианобактерий. Среди выделяемых цианотоксинов наиболее опасны сакситоксины (STX, более 50 структурных вариантов) в связи с их высокой токсичностью и микроцистины (MCYST, более 80 структурных вариантов) из-за их высокой стабильности и распространенности. Вследствие значительной разницы в токсичности этих соединений необходимо проводить определение вариантов их структур. В отсутствии полного комплекта стандартных соединений создание аналитической процедуры селективного определения вариантов структур цианометаболитов в объектах окружающей среды является актуальной проблемой.

Степень ее разработанности:

Согласно международному стандарту ISO 20179:2005 (введен в 2005 г., пересматривался и подтвержден в 2014 г.) определение микроцистинов в воде осуществляется методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с УФ-детектированием, который валидирован для количественного определения только трех соединений группы MCYST (MCYST-RR, -YR и -LR). Однозначная идентификация других вариантов структур не проводится из-за ограниченного перечня коммерчески доступных стандартов. Поэтому в последнее время для определения цианотоксинов за рубежом широко применяют метод жидкостной хроматографии - масс-спектрометрии (ВЭЖХ-МС). Однако предложенные алгоритмы идентификации не применимы при использовании некоторых типов масс -спектрометрических приборов.

Кроме известных токсических свойств цианометаболиты могут проявлять и другие виды биологической активности. Установление новых видов фармакологически значимой биологической активности с целью разработки оригинальных активных фармацевтических компонентов становится еще более актуальной задачей в связи с политикой импортозамещения в сфере производства и обращения лекарственных средств.

Цели и задачи: создание оптимизированной аналитической процедуры масс-спектрометрического (МС) определения структурных вариантов цианотоксинов в объектах

окружающей среды с использованием более доступных масс-спектрометров низкого разрешения при отсутствии полного набора стандартных соединений.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Разработка классификации диагностических ионов для идентификации целевых соединений МС методом.

2. Разработка оптимальной процедуры извлечения цианотоксинов из образцов биомассы.

3. Проведение скрининга токсичных цианометаболитов в водоемах регионов России.

4. Прогноз биологической активности метаболитов сине-зеленых водорослей с использованием программ компьютерного моделирования.

Научная новизна:

Предложена классификация диагностических ион-продуктов для идентификаци структурных вариантов MCYST в отсутствии полного набора стандартных соединений.

Показано, что апротонный диполярный растворитель - ацетонитрил в составе двухкомпонентной водно-органической смеси способствует эффективному извлечению целевых соединений. Обработка ацетонитрилом сухой лиофилизированной биомассы способствует снижению содержания матричных высокомолекулярных соединений в экстрактах.

Получена информация о составе и концентрациях цианометаболитов в акваториях различных регионов России с использованием разработанной процедуры МС анализа. Установлено широкое распространение гепатотоксических цианобактериальных «цветений». Нейротоксические «цветения» регистрировались в единичных случаях.

Прогнозированы фармакологически значимые свойства соединений группы STX и плейотропная биологическая активность MCYST.

Теоретическая и практическая значимость:

Практическое значение исследования состоит в развитии МС методов изучения цианометаболитов. Предложенная классификация диагностических фрагментов позволяет адаптировать методику МС определения MCYST в объектах окружающей среды для любого типа хромато-масс-спектрометров, в том числе для более распространенных приборов низкого разрешения.

Предложена процедура селективного извлечения метаболитов цианобактерий из биомассы, что позволяет снизить содержание белков в экстрактах.

Проведенные комплексные исследования выявили необходимость регулярного мониторинга в связи с зарегистрированными случаями превышения безопасного уровня содержания МСYST-LR (по данным ВОЗ) и потенциальной опасностью для населения.

С помощью методов компьютерного моделирования прогнозирована противоопухолевая активность неосакситоксина и гониатоксина 2, позволяющая рассматривать их в качестве потенциальных кандидатов для исследований in vitro, in vivo.

Методология и методы исследования

Для разработки варианта метода определения целевых соединений в объектах окружающей среды использовали МС методы: высокоэффективная жидкостная хроматография -масс-спектрометрия высокого разрешения (ВЭЖХ-МС ВР), высокоэффективная жидкостная хроматография с тандемным масс-спектрометрическим детектированием (ВЭЖХ-МС/МС), тандемная масс-спектрометрии с матрично-активированной лазерной десорбцией/ионизацией (МАЛДИ-МС/МС). Обработку экспериментальных данных осуществляли с использованием пакетов прикладных программ LCMS LabSolution (Shimadzu), XCalibur (ThermoScientific), Shimadzu Biotech MALDI-MS (Shimadzu). Теоретические пути фрагментации ионов изучали с использованием программы MassFrontier 5.1 (ThermoScientific).

Прогноз видов биологической активности был получен с использованием методов компьютерного моделирования PASS (программа PASS Refined 2014) и 3D-QSAR (программа докинга AutoDock Vina).

Положения, выносимые на защиту

1. Усовершенствованная методика селективного выделения MCYSTs из биомассы.

2. Метод идентификации вариантов структур MCYSTs на основе их специфической фрагментации.

3. Результаты исследований водоемов различных регионов Российской Федерации.

4. Прогнозируемая фармакологическая активность нейротоксичных цианометаболитов.

Личный вклад автора

Основная часть работы выполнена автором самостоятельно. Она включает в себя непосредственное получение экспериментальных масс-спектрометрических данных, разработку методологии исследования и интерпретацию полученных результатов, формулировку цели, задач и выводов данной работы, написание и публикацию статей.

На этапе отбора природных проб из природных водоемов различных регионов России для проведения масс-спектрометрического анализа использовали данные о составе фитопланктона образцов, предоставленные к.б.н. Воякиной Е.Ю., д.б.н. Ежовой Е.Е. (водоемы Северозападного региона), к.б.н. Сиделевым С.Н., д.б.н Корневой Л.Г. (водоемы Центрального региона). Предварительный поиск цианотоксинов в пробах из водоемов Центрального региона России с использованием иммуноферментного метода и проведение ПЦР-анализа для обнаружения токсин-продуцирующих видов цианобактерий в образцах осуществлялось сотрудником Ярославского государственного университета, к.б.н Сиделевым С.Н. МАЛДИ-

спектры получены к.х.н. Подольской Е.П.

Степень достоверности и апробация результатов:

В работе использована различные современные инструментальные методы хромато -масс-спектрометрии, адекватные поставленным целям и сформулированным задачам. Результаты исследования обработаны в соответствии с установленными требованиями. Выводы соответствуют результатам работы и являются достоверными. Соискатель имеет 12 опубликованных статей по теме диссертации и 12 работ в материалах всероссийских и международных конференций и симпозиумов.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, 5 глав, заключения, списка сокращений и списка цитируемой литературы. Материал изложен на 122 страницах машинописного текста, содержит 31 рисунок, 17 таблиц. В списке цитируемой литературы 279 источников.

ГЛАВА 1 АНАЛИТИЧЕСКИЙ ОБЗОР.

ТОКСИЧНЫЕ МЕТАБОЛИТЫ СИНЕ-ЗЕЛЕНЫХ ВОДОРОСЛЕЙ И МЕТОДЫ ИХ ОПРЕДЕЛЕНИЯ

1.1 Сине-зеленые водоросли в окружающей среде.

Токсичные метаболиты сине-зеленых водорослей - цианотоксины

Сине-зеленые водоросли или цианобактерии - древнейшие организмы на Земле, появившиеся 2,15 миллиардов лет назад и способствовавшие образованию атмосферы на планете [1]. Благодаря способности фотосинтезировать, а также связывать азот из атмосферы и окружающей среды, эти организмы относят к растениям, а именно, к сине-зеленым водорослям. Однако, исходя из строения клетки, схожего с бактериальной, наличия в ней рибосом, а также муреиновой клеточной стенки их причисляют к прокариотам, имеющим грамотрицательную характеристику [2]. Цианобактерии характеризуются высокой способностью к адаптации, распространены практически повсеместно, могут находиться во всех экосистемах от наземных до водных сред обитания, в том числе и в экстремальных условиях, таких как горячие источники, гиперсоленые среды и ледники [3-5]. На сегодняшний день установлено, что 46 видов цианобактерий способны продуцировать токсичные метаболиты (цианотоксины) [6], которые представляют опасность для здоровья людей и животных [7].

Известно, что массовому развитию цианобактерий («цветению») способствует эвтрофирование [8-9]. В настоящее время «цветение» цианобактерий становится все более интенсивным и широко распространенным даже в ранее «не цветущих» водоемах. Совместное влияние повышения среднегодовых температур (изменение планетарного климата) и высокой концентрации биогенных веществ в водоемах аддитивно воздействуют на увеличение темпов роста именно токсических видов цианопрокариот [10]. Периоды увеличения биомассы цианобактерий заканчиваются массовым отмиранием клеток и последующим выбросом внутриклеточных токсинов в воду. Цианотоксины - внутриклеточные токсичные метаболиты цианобактерий, выделяющиеся во внешнюю среду в результате «цветения» и последующего лизиса (разрушения) клеточной стенки. Их различают по способу воздействия на живые организмы на несколько групп, из которых для пресноводных водоемов наиболее актуальны нейротоксины (сакситоксины, анатоксины) из-за высокой токсичности и гепатотоксины (микроцистины, MCYST) вследствие их высокой стабильности и распространенности [11].

В организм человека токсины попадают в результате употребления загрязненной воды или морепродуктов, а также при рекреационном использовании «цветущих» природных водоемов [12, 13]. С распространением цианобактериальных «цветений» связывают рост

онкологических и кишечных заболевания, аллергических дерматитов. При отравлении цианотоксинами степень поражения в зависимости от полученной дозы может быть от легкой до летальной; симптомы очень разнообразны и могут проявляться в виде гастроэнтеритов, абдоминальных болей, поражений печени и почек, тошноты, рвоты, воспаления горла, аллергических и дерматологических проявлений, судорог, паралича, удушья [7, 14].

Вредоносное «цветение» водорослей признано ООН одной из актуальных проблем современного мира [15]. За рубежом подобные токсические «цветения» водоемов рассматривают в качестве национальной проблемы, созданы специальные центры для их изучения и контроля, разрабатываются различные меры по предотвращению «цветений» и очищению постоянно «цветущих» водоемов [16-22]. В последние десятилетия цианобактериальные «цветения» все чаще регистрируются на территории Российской Федерации, в водоемах обнаружено более 20 потенциально-токсических видов цианобактерий [23-27]. Экстремальные последствия «цветения» возникают в водоемах южных регионов России. Недавним примером этому служит чрезвычайная ситуация, сложившаяся в Цимлянском водохранилище в октябре 2009 г., когда массовые скопления цианобактерий привели к засорению водозаборных сооружений и прекращению подачи воды жителям г. Волгодонска [28]. Регистрируются регулярные случаи массовой гибели рыб в Азовском море [29], Куршской и Вислинской лагунах Балтийского моря [30]. Однако, данные по определению содержания цианотоксинов в водоемах малочисленны и, как правило, носят отрывочный характер.

Таким образом, определение содержания цианобактериальных токсинов в водоемах на территории Российской Федерации является весьма актуальной задачей. Развитие таких исследований представляет исключительную важность, поскольку позволит реально оценить степень опасности «цветения» сине-зеленых водорослей в различных водоемах на территории России.

1.1.1 Нейротоксичные сакситоксины

Сакситоксины, также известные как «паралитические яды моллюсков» (paralytic shellfish toxins, PSTs), являются одними из известных наиболее сильнодействующих природных токсинов. Их также называют «фактором быстрой смерти», поскольку смерть при употреблении летальной дозы наступает в течение 15 мин - 12 часов [31-33]. Благодаря экстремально низкому ЛД50, сакситоксины рассматривали в качестве химического оружия американскими военными [34]. В настоящее время включены в Список 1 (химикаты, представляющие собой высокий риск) «Конвенции о запрещении химического оружия» [33].

Первоначально считалось, что продуцентами этих токсинов являются только морские динофитовые водоросли родов Alexandrium, Gymnodinium and Pyrodinium [35], «цветение» которых приводит к массовым заморам рыбы, отравлениям диких животных и домашнего скота [14]. В настоящее время установлено, что некоторые роды пресноводных сине-зеленых водорослей - Aphanizomenon, Dolichospermum, Cylindrospermopsis, Lyngbya, Scytonema, Planktothrix и Raphidiopsis - также могут синтезировать сакситоксины [14, 32, 35]. В связи со способностью аккумулироваться в водных организмах (например, в моллюсках Gonyaulax) [36], сакситоксины могут являться причиной случаев массовых отравлений при употреблении в пищу зараженных морепродуктов и воды [35, 37-40].

Сакситоксины - группа нейротоксичных цианометаболитов, включающая более 57 соединений, относящихся к триалкил тетрагидро-пуринам, переменные позиции в четырех положениях, обозначенных на рисунке 1.1, могут содержать гидроксилы, карбоксилаты или сульфаты. Варианты расположения заместителей представлены в таблице 1.1 [14, 35].

Традиционно сакситоксины подразделяют на три основные группы: карбаматные (сакситоксин, неосакситоксин и гониатоксины 1 -4 (GTX 1 -4)), сульфокарбамоильные (В 1 -2, С 1-4) и декарбамоильные (dcSTX, dc-neoSTX, and dc-GTX1-4). Эти группы отличаются по токсичности: карбаматные - наиболее токсичны, карбамоильные - менее токсичны, сульфокарбамоильные в десятки раз менее токсичны согласно данным токсикологических исследований на мышах при внутрибрюшинном введении [14, 35].

Н

R2

Рисунок 1.1 - Общая структура соединений группы сакситоксинов

Таблица 1.1 - Некоторые наиболее распространенные структурные варианты соединений

группы сакситоксинов

Название соединения R1 R2 R3 R4

сакситоксин (STX) H H H CONH2

неосакситоксин (neoSTX) OH H H CONH2

гониатоксин 1(GTX 1) OH OSO3- H CONH2

гониатоксин 2 (GTX 2) H OSO3- H CONH2

гониатоксин 3 (GTX 3) H H OSO3- CONH2

гониатоксин 4 (GTX 4) OH H OSO3- CONH2

декарбамоильный гониатоксин 1 (dcGTX 1) OH OSO3- H H

декарбамоильный гониатоксин 2 (dcGTX 2) H OSO3- H H

декарбамоильный гониатоксин 3 (dcGTX 3) H H OSO3- H

декарбамоильный гониатоксин 4 (dcGTX 4) OH H OSO3- H

гониатоксин 5 (GTX 5) B1 H H H CONHSO3-

гониатоксин 6 (GTX 6) B2 OH H H CONHSO3-

C1 H OSO3- H CONHSO3-

C2 H H OSO3- CONHSO3-

C3 OH OSO3- H CONHSO3-

C4 OH H OSO3- CONHSO3-

В основном, сакситоксины - водорастворимые соединения, не разлагающиеся при нагревании. Их стабильность зависит от молекулярной структуры сакситоксинов и рН среды [41]. Большинство сакситоксинов стабильны в кислотных растворах, а при щелочных значениях рН быстро разлагаются даже при комнатной температуре. На стабильность соединений влияет присутствие и расположение сульфатной группы, вид заместителя в положении 1 (ОН или протона) [42-44].

В структуре всех представителей группы сакситоксинов присутствуют две гуанидиновые группировки. Исследования, проведенные методом ядерного магнитного резонанса показали, что гуанидиновый заместитель, принадлежащий пиримидиновому циклу, имеет обычное для такой группировки значение рКвн+, равное 11,3. У гуанидинового заместителя имидазольного

цикла величина рКвн+, равная 8,3, является аномально низкой, что может быть связано с влиянием соседних атомов азота [45, 46]. Согласно данным кристаллографического рентгеновского исследования связь К8-С9 длиннее других двух связей [47].

Следует отметить, что токсичность структурных вариантов сакситоксинов значительно различается. В таблице 1.2 приведена относительная токсичность структурных вариантов, рассчитанная на основании данных, полученных в работе [48]. Сакситоксин проявляет максимальную токсичность среди всех структурных вариантов [48].

Таблица 1.2 - Относительная токсичность сакситоксинов.

Название соединения Относительная токсичность

сакситоксин (БТХ) 1.00

неосакситоксин (пеоБТХ) 0.92

декарбамоильный сакситоксин (ёеБТХ) 0.51

гониатоксин 1(ОТХ 1) 0.99

гониатоксин 2 (ОТХ 2) 0.36

гониатоксин 3 (ОТХ 3) 0.64

гониатоксин 4 (ОТХ 4) 0.73

декарбамоильный гониатоксин 2 (ёеОТХ 2) 0.65

декарбамоильный гониатоксин 3 (ёеОТХ 3) 0.75

гониатоксин 5 (ОТХ 5) В1 0.06

С1 0.01

С2 0.10

С3 0.01

С4 0.06

Расчетная смертельная доза сакситоксина для человека составляет по разным данным 0,004 - 0,010 мг/кг. Токсичность для мышей ЛД 50 (внутрибрюшинно) - около 0,009 мг/кг с регистрацией гибели в течение 30 минут) [49]. В то время как для человека летальная доза (перорально) составляет 1 мг токсина [50].

В настоящее время по нормативам ЕС введены только ограничения содержания сакситоксинов в мясе моллюсков, предельно допустимая концентрация составляет 800 мкг STX/кг. Международных стандартов предельно допустимых концентраций в воде не разработано. Однако, в некоторых странах, где нейротоксические «цветения» распространены, введены региональные нормативы для питьевой воды. Так, в Австралии и Бразилии ПДК составляет 3 мкг SXT/л питьевой воды [51].

Основной токсический эффект сакситоксинов проявляется в блокировании натриевых каналов при связывании с рецепторами вблизи наружной поверхности клетки, что

препятствует формированию потенциала действия возбудимых мембран, вследствие чего нарушается проведение нервных импульсов по нейронам. Связывание токсинов с белками ионных каналов обратимо. In vitro яды могут быть удалены с поверхности возбудимой мембраны простым отмыванием биопрепарата. В случае нелетальной дозы, соединения выводятся через почки, и пострадавшие восстанавливаются в течение нескольких дней до полного исчезновения симптомов. В малых дозах действие сакситоксинов сходно с действием местных анестетиков [14].

Существует несколько предлагаемых моделей взаимодействия молекулы сакситоксина и натриевого канала. Одной из первых моделей была «модель ковалентного связывания», предполагающая наличие химической связи между двумя геминальными гидроксильными группами у атома С в положении 12 в структуре сакситоксина, и нуклеофильными группами (ОН, NH2, SH) на поверхности белка, образующего натриевый канал. «Модель ковалентной связи» могла объяснить прочное связывание с токсином [52].

В качестве альтернативы была предложена трехцентровая модель связывания («three-point binding model»), которое осуществляется посредством водородных связей с вышеупомянутыми геминальными группами на атоме С12 и ион-парным взаимодействием гуанидиновой группы и анионного сайта на наружной поверхности мембраны [52]. «Трехцентровая модель» подтверждается фактом сохранения активности у дигидросакситоксинов (сакситоксинолов или 11-деоксисакситоксинов), которые не могут образовывать ковалентную связь [53, 54]. Другими словами, способность образовывать ковалентную связь (согласно «модели ковалентного связывания») не является необходимой для взаимодействия с натриевым каналом.

При использовании метода точечных мутаций, была произведена поочередная замена аминокислот Glu 387, Asp 384, Glu 942, Glu 945, Asp 1717 соответствующими нейтральными амидными производными, что приводило к снижению токсического действия [55-58]. Согласно этим данным, гуанидиновые заместители в циклах пиримидина и имидазола и атомы азота имидазольного кольца связываются с карбоксильными группами натриевого канала. Таким образом, токсин оказывается в «кармане» в окружении нескольких карбоксильных групп, как показано на рисунке 1.2 [58].

с

Рисунок 1.2 - Схема взаимодействия сакситоксина и аминокислот натриевого канала

1.1.2 Нейротоксичные анатоксины

Анатоксин-а является одним из трех нейротоксичных алкалоидов, которые были выделены из цианобактерий [59]. Первый цианотоксин, который был химически и функционально определен в 1972 году. Впервые выделен из вида Dolichospermum (Anabaena) flos-aquae [60]. Позднее установлено продуирование у различных видов родов Dolichospermum (Anabaena), Aphanizomenon, Cylindrospermum, OscШatoria, Planktothrix и Raphidiopsis [61-64]. Зарегистрировано присутствие АЫ-а в водоемах Европы, Северной Америки и других стран [65, 66]. Анатоксин-а представляет собой бициклический вторичный амин, по систематической номенклатуре - 2-ацетил-9-азабицикло-[4,2,1]нон-2-ен (рисунок 1.3) [60].

Анатоксин-а является агонистом ацетилхолина и специфическим блокатором

О

Рисунок 1.3 - Структура анатоксина-а

никотиновых ацетилхолиновых рецепторов [65, 67]. Причем связывание рецептора с анатоксином-а является необратимым, поскольку гидролиз с помощью ацетилхолинэстеразы не происходит. Таким образом, н-холинрецептор остается заблокированным в открытом положении, что приводит к деполяризации мембраны, и в дальнейшем к десенсетизации рецептора. В таком состоянии н-холинорецептор не пропускает катионы, что приводит к нарушению нервно-мышечной передачи. [68]. Воздействие анатоксин-а на дыхательную систему приводит к недостатку подачи кислорода к мозгу, последующими судорогами и смертью от удушья. Анатоксин-а примерно в 20 раз более мощный никотиновый агонист, по сравнению с ацетилхолином [65]. В работах [69-70] было установлено, что для связывания токсина с н-холинрецептором значительную роль играет конформация боковой цепи.

Анатоксин легко фотодеградирует до нетоксичных продуктов под действием солнечного света и при высоких значениях рН [65]. В эвтрофных озерах, период полураспада АК составляет обычно менее 24 часов [71]. Быстрая деградация АК представляет проблемы при определении его содержания. Согласно [65], образцы с вероятным содержанием АК должны быть защищены от света, подкислены и храниться при - 20 °С, для предотвращения разложения.

Нейротоксины, как известно, яды быстрого действия; анатоксин-а был назван, так же как и сакситоксин, «фактором очень быстрой смерти» [65]. Отравления анатоксином-а хорошо исследовано на примерах диких животных. Начиная с 1930-х годов известны случаи отравлений, вызванные нейротоксическими «цветениями» [62, 72-75]. Смерть животного может произойти в течение от нескольких минут до нескольких часов после воздействия в зависимости от размера животного и количества потребленного токсина. ЬБ 50 (мыши, внутрибрюшинно) составляет 200 мкг/кг [60]. Симптомами отравления являются паралич, мышечные судороги, удушье, конвульсии. Тем не менее, прием внутрь сублетальной дозы АК-а не оставляет никаких хронических последствий, признаков повреждения органов, а сам токсин быстро разлагается [65, 66].

Анатоксин-а является нейротоксином, вызывающим острые формы интоксикации. Поэтому имеющиеся данные свидетельствуют о незначительных проблемах со здоровьем на основе хронической токсичности (по сравнению с острой токсичности) из-за отравления АК-а [71]. В 1999 году согласно решению ВОЗ данных о токсичности АК-а недостаточно для установления безопасного уровня потребления.

Однако некоторые страны разрабатывают собственные нормативы. Например, Департамент здравоохранения штата Вашингтон рекомендует величину содержания в воде 1 мкг/л, основанную на результатах, полученных в [76]. Такую же величину установили в Новой Зеландии [77] и штате Орегон, США [78].

В связи с широким использованием анатоксина-а в фармакологии, были разработаны различные схемы его органического синтеза [79].

Соединения, наиболее часто упоминаемые при токсических отравлениях, вызванных метаболитами цианобактерий, - гепатотоксины, в частности, для пресноводных водоемов микроцистины (MCYST). Наиболее часто продуцентами MCYST в пресноводных водоемах являются виды родов Microcystis, Planktothrix, Dolichospermum, Phormodium и Anabaenopsis [80]. К группе MCYST относят более 80 циклических гептапептидов с молекулярной массой в интервале 900 - 1150 Да [81].

Общая структура MCYST содержит цикл из семи аминокислот, пять из которых постоянны в составе соединений этого класса, включая характеристическую Adda-кислоту (3-амино-9-метокси-2,6,8-триметил-10-фенилдека-4,6-диеновая кислота), а две L-аминокислоты в положениях 2 и 4 - вариабельны. Общепринятые аббревиатуры вариабельных аминокислот указываются в качестве суффикса в названии MCYST. Так, в структуре наиболее известного и токсичного представителя MCYST - MCYST-LR (молекулярная масса 994), представленного на рисунке 1.4, присутствуют лейцин (Leu = L) во положении 2 и аргинин (Arg = R) в положении 4.

1.1.3 Гепатотоксичные микроцистины

6 D-Glu

7 Mdha О

Л,

NH 1 D-Ala

2 L-Leu

Рисунок 1.4 - Структура MCYST-LR

Для установленных структур МСУБТ на рисунке 1.5 схематически представлено расположение возможных вариантов аминокислотных остатков в каждом положении цикла [82]

Похожие диссертационные работы по специальности «Биоорганическая химия», 02.00.10 шифр ВАК

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Чернова, Екатерина Николаевна, 2017 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Rasmussen, B. Reassessing the first appearance of eukaryotes and cyanobacteria / B. Rasmussen, I. R. Fletcher, J. J. Brocks, M. R. Kilburn // Nature. - 2008. - Vol. 455(7216). - P. 1101-1104.

2. Stanier, R. Y. Proposal to place nomenclature of cyanobacteria (blue-green-algae) under rules of international code of nomenclature of bacteria / R. Y. Stanier [et al.] // International journal of systematic and evolutionary microbiology. - 1978. - Vol. 28. - P. 335-336.

3. Garcia-Pichel, F. The phylogeny of unicellular, extremely halotolerant cyanobacteria / F. Garcia-Pichel, U. Nuübel, G. Muyzer // Archives of Microbiology. - 1998. - Vol.169. - P. 469-482.

4. Papke, R. T. Geographical isolation in hot spring cyanobacteria / R. T. Papke, N. B Ramsing, M. M. Bateson, D. M. Ward // Environmental Microbiology. - 2003. - Vol. 5. - P. 650-659.

5. Comte, K. Relationships between the Arctic and the Antarctic cyanobacteria; three Phormidium-like strains evaluated by a polyphasic approach/ K. Comte [et al.] //FEMS Microbiol Ecol. -2007. - Vol. 59. - P. 366-376.

6. Apeldoorn, M. E. Toxins of cyanobacteria / M. E. Apeldoorn, H. P. Egmond, G.J.A. Speijers,

G.J.I. Bakker // Molecular Nutrition & Food Research. - 2007. - Vol. 51. - P. 7-60.

7. Codd, G. A. Cyanobacterial toxins: risk management for health protection / GA.Codd, L.F. Morrison, J. S Metcalf // Toxicology and Applied Pharmacology. - 2005. - Vol. 203. -P. 264-272.

8. Paerl, H.W. Climate change: a catalyst for global expansion of harmful cyanobacterial blooms /

H.W. Paerl, J. Huisman // Environmental Microbiology Reports. - 2009. - Vol.1. - P. 27-37.

9. Paerl, H. W. Blooms like it hot / H.W.Paerl, J.Huisman // Science. - 2008. - Vol. 320. - P. 5758.

10. Davis, T.W. The effects of temperature and nutrients on the growth and dynamics of toxic and non-toxic strains of Microcystis during cyanobacteria blooms / T.W. Dawis, D.L. Berry, G.L. Boyer, C.J. Gobler // Harmful Algae. - 2009. - Vol. 8. - P. 715-725.

11. WHO 1999 Toxic Cyanobacteria in Water: A guide to their public health consequences, monitoring and management. Chorus I., Bartram J. (Eds.). London: WHO, 1999. 432 p.; Cyanobacterial Harmful Algal Blooms: State of the Science and Research Needs. Hudnell H. K. (Ed). N.Y.: Springer, 2008. 949 p.

12. Falconer, I.R. Health risk assessment of cyanobacterial (blee-green algae) toxins in drinking water / I.R. Falconer, A.R. Humpage // International Journal of Environmental Research and Public Health. - 2005. - Vol. 2, N 1. - P. 43-50.

13. Grosse, Y. Carcinogenicity of nitrate, nitrite, and cyanobacterial peptide toxins/ Y. Grosse, R. Baan, K. Straif // The Lancet Oncology. - 2006. - Vol. 7. - P. 628-629.

14. Pearson, L. On the chemistry, toxicology and genetics of the cyanobacterial toxins, microcystin, nodularin, saxitoxin and cylindrospermopsin / L. Pearson [et al.] // Mar Drugs. - 2010. - Vol. 8. -P. 1650-1680.

15. WHO. Guidelines for Drinking Water Quality. 4th ed: World Health Organization. 2011. URL:http://www.who.int/water_sanitation_health/publications/2011/dwq_guidelines/en

16. Petra, M. Artificial mixing to control cyanobacterial blooms: a review/ M.Petra [et al.] // Aquatic Ecology. - 2016. - Vol. 50. - P. 423-441.

17. Bastiaan, W. Cyanobacterial blooms. Ecology, prevention, mitigation and control: Editorial to a CYANOCOST Special Issue / W.Bastiaan [et al.] // Aquatic Ecology. - 2016. - Vol. 50. - P. 327-331.

18. Bakker, E. S. Impact of water-level fluctuations on cyanobacterial blooms: options for management / E. S. Bakker, S. Hilt. // Aquatic Ecology. - 2016. - Vol. 50. - P. 485-498.

19. Lurling, M. Evaluation of several end-of-pipe measures proposed to control cyanobacteria / M. Lurling [et al.] // Aquatic Ecology. - 2016. - Vol. 50. - P. 499-519.

20. Matthijs, H. Existing and emerging cyanocidal compounds: new perspectives for cyanobacterial bloom mitigation / H. C. P. Matthijs [et al.] // Aquatic Ecology. - 2016. - Vol. 50. - P. 443-460.

21. Fastner, J. Combating cyanobacterial proliferation by avoiding or treating inflows with high P load—experiences from eight case studies / J. Fastner [et al.] // Aquatic Ecology. - 2016. - Vol. 50. - P. 367-383.

22. Stroom, J. How to combat cyanobacterial blooms: strategy toward preventive lake restoration and reactive control measures / J. M. Stroom, W. E. A. Kardinaal. // Aquatic Ecology. - 2016. -Vol. 50. - P. 541-576.

23. Babanazarova, O.V. Phytoplankton structure and microcystine concentration in the highly eutrophic Nero Lake / O.V.Babanazarova [et al.] // Water Resources. -2011. - Vol. 38, N 2. -P. 229-236.

24. Belykh, O.I. Microcystine-Producing Cyanobacteria in Water Reservoirs of Russia, Belarus and Ukraine / O.I. Belykh [et al.] // Chemistry for Sustainable Development. -2013. - Vol. 4. - P. 347-361.

25. Gaevsky, N.A. Ecological Development and Genetic Diversity of Microcystis aeruginosa from Artificial Reservoir in Russia / N. A. Gaevsky [et al.] // The Journal of Microbiology. -2011. -Vol. 49(5). - P. 714-720.

26. Matishov, G.G. Algal bloom in reservoirs of the south of Russia and water supply malfunctiona (by the example of the city of Volgodonsk) / G. G. Matishov, G. V. Kovaleva // Southern Scientific Center of Russian Academy of Sciences. -2010. - Vol. 6, N 1. - P.71-79.

27. Trifonova, I.S. Phytoplankton succession in urban water-bodies of St. Petersburg as an indicator of their ecological conditions. / I. S. Trifonova, O.A. Pavlova // Limnological Review. - 2008. -Vol. 8, N 3. - P. 137-141.

28. Матишов, Г.Г., Цветение воды в водоемах юга России и сбои в водоснабжении (на примере г. Волгодонска) / Г. Г. Матишов, Г. В. Ковалева // Вестник Южного научного центра РАН. - 2010. - Т. 6, № 1. - С. 71-79.

29. Матишов, Г.Г. Обнаружение токсинов цианопрокариот в планктоне нижнего Дона методом масс-спектрометрии / Г. Г. Матишов [и др.] // Вестник Южного научного центра РАН. - 2006. - Т. 2, № 2. - С. 75-78.

30. Александров, С.В. Влияние «цветения» синезеленых водорослей на экологическое состояние Куршского залива // Вода: химия и экология. - 2009. - №4. - С. 2-6.

31. Hall, S., The saxitoxins: sources, chemistry, and pharmacology / S. Hall, G. R. Strichartz, E. Moczydlowski, A. Ravindran, P. B. Reichardt. // Marine Toxins : ACS Symposium Series 418 / S. Hall, G.R. Strichartz. - Washington, 1990. - P. 29-65.

32. Araoz, R. Neurotoxic cyanobacterial toxins / R. Araoz, J. Molgo, N. Tandeau de Marsac // Toxicon. - 2010. - Vol. 56, N 5. - P. 813-828.

33. Toxins. Potential chemical weapons from living organisms. Organization for the prohibition of chemical weapons. https://www.opcw.org/protection/types-of-chemical-agent/toxins/;

34. Антонов, Н. Химическое оружие на рубеже двух столетий / Н. Антонов. - М. : А/О Издательская группа «Прогресс», 1994. - 174с.

35. Wiese, M. Neurotoxic Alkaloids: Saxitoxin and Its Analogs/ M.Wiese [et al.] // Marine Drugs. -2010. - Vol. 8, N 7. - P. 2185-2211.

36. Shumway, S. E. Phycotoxin-related shellfish poisoning: Bivalve molluscs are not the only vectors / S. E. Shumway // Reviews in Fisheries Science. - 1995. - Vol. 3. - P. 1-31.

37. Ibelings, B. W. Accumulation of cyanobacterial toxins in freshwater "seafood" and its consequences for public health: A review/ B. W. Ibelings, I. Chorus // Environmental Pollution. -2007. - Vol.150. - P. 177-192.

38. Deeds, J.R. Non-traditional vectors for paralytic shellfish poisoning / J. R. Deeds [et al.] // Marine Drugs. - 2008. - Vol. 6, N 2. - P.308-348.

39. Smith, J. L. A review of cyanobacterial odorous and bioactive metabolites: Impacts and management alternatives in aquaculture / J. L. Smith, G. L. Boyer, P.V. Zimba // Aquaculture. -208. - Vol. 280. - Р. 5-20.

40. Botana, L. M. Seafood and Freshwater Toxins: Pharmacology, Physiology, and Detection, Second Edition / L. M. Botana. - NY. : CRC Press, 2000. - 816 p. - ISBN 978-0-8247-8956-5

41. Shimizu, Y. Chemistry and mechanism of action / Y.Shimizu.// Seafood and Freshwater Toxins / L. M. Botana.- NY. : Marcel Dekker, 2000. - P. 151-172.

42. Hall, S. Toxin extracted from an Alaskan isolate of Protogonyaulax sp. / S. Hall, P. B. Reichardt, R.A. Neve // Biochemical and Biophysical Research Communications. -1980. -Vol. 97, N 2. -P.649-653.

43. Kobayashi, M. Gonyautoxin-VIII, a cryptic precursor of paralytic shell fish poisons / M. Kobayashi // Journal of the Chemical Society, Chemical Communications.-1981. -P. 827-828,

44. Koehn, F. E. Dino agellate neurotoxins related to saxitoxin: structure and latent activity of toxins B1 and B2 / F.E. Koehn, S. Hall, C.Fix Wichmann, H.K. Schnoes, P.B. Reichardt // Tetrahedron Letters. -1982. - Vol.23, N 22. - P. 2247-2248.

45. Shimizu, Y. The structure of neosaxitoxin / Y. Shimizu [et al.] // Journal of the American Chemical Society. - 1978. - Vol.100, N 21. - P. 6791-6793.

46. Rogers, R.S. The pKa's of saxitoxin / R. S. Rogers, H. Rapoport // Journal of the American Chemical Society. - 1980. - Vol. 102, N 24. - P. 7335-7339.

47. Schantz E. J. The structure of saxitoxin / E. J. Schantz [et al.] // Journal of the American Chemical Society. - 1975. - Vol. 97, N 5. - P. 1238-1239.

48. Manual on Harmful Marine Microalgae : IOC Manuals and Guides : N 33 / G. M. Hallegraeff, D. M. Anderson, A. D. Cembella. - Paris : UNESCO, 1995. - 81p.

49. Halstead, B. W. Paralytic shellfish poisoning / B. W. Halstead, E.J. Schantz // WHO Offset Publication. - 1984. - Vol. 79. - P.1-59.

50. Evans, M.H., 1969. Mechanism of saxitoxin and tetrodotoxin poisoning / M. H. Evans // British Medical Bulletin. - 1969. - Vol.25. - P. 263-267.

51. Chorus, I. Current approaches to cyanotoxin risk assessment, risk management and regulations in different countries / I. Chorus. - Dessau : Umweltbundesamt, 2012. - 147 p.

52. Kao C.Y. Active groups of saxitoxin and tetrodotoxin as deduced from action of saxitoxin analogs on frog muscle and squid axon/ C.Y. Kao, S.E. Walker // The Journal of Physiology. -1982. - Vol. 323, N 1. -P. 619-637.

53. Strichartz, G. Structural determinants of the affinity of saxitoxin for neuronal sodium channels. Electrophysiological studies on frog peripheral nerve/ G. Strichartz // Journal of General Physiology. - 1984. - Vol.84, N 2. - P. 281-305.

54. Kao, C.Y. Actions of epimers of 12-(OH)-reduced saxitoxin and 11-(OSO3)-saxitoxin on squid axon/ C. Y. Kao [et al.] // Toxicon. -1985. - Vol. 23. - P. 647-655.

55. Noda, M . A single point mutation confers tetrodotoxin and saxitoxin insensitivity on the sodium channel II / M. Noda, H. Suzuki, S. Numa, W. Stuhmer // FEBS Letters. - 1989. -Vol.259, N 1. -P. 213-216.

56. Terlau, H.S. Mapping the site of block by tetrodotoxin and saxitoxin on sodium channel-II/ H S. Terlau [et al.] / FEBS Letters. - 1991. - Vol. 293. - P. 93-96.

57. Kontis, K. J. Site-directed mutagenesis of the putative pore region of the rat IIA sodium channel / K. J. Kontis, A. L. Goldin // Molecular Pharmacology. - 1993. - Vol. 43, N 4 - P. 635-644.

58. Lipkind, G.M. A structural model of the tetrodotoxin and saxitoxin binding site of the Na channel / G. M. Lipkind, H. A. Fozzard // Biophysical Journal. - 1994. - Vol.66. - P. 1-13.

59. Falconer, I. R. Cyanobacterial Toxins of Drinking Water Supplies: Cylindrospermopsins and Microcystins / I. R. Falconer. - Boca Raton : CRC Press, 2005. - 263 p. - ISBN 0-415-31879-3

60. Devlin, J.P. Anatoxin-a, a toxic alkaloid from Anabaena flos-aquae NCR-44h. / J. P. Delvin [et al.] // Canadian Journal of Chemistry. - 1977. - Vol. 55. - P. 1367-1371.

61. Ballot, A. First report of anatoxin-a-producing cyanobacterium Aphanizomenon issatschenkoi in northeastern Germany / A. Ballot [et al.] // Toxicon. - 2010a. - Vol. 56. - P. 964-971.

62. Gugger, M. First report in a river in France of the benthic cyanobacterium Phormidium favosum producing anatoxin-a associated with dog neurotoxicosis / M. Gugger [et al.] // Toxicon. - 2005. - Vol. 45. - Р. 919-928.

63. Lyra, C. Molecular characterization of planktic cyanobacteria of Anabaena, Aphanizomenon, Microcystis and Planktothrix genera / C. Lyra [et al.] // International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology. -2001. -Vol. 51.

64. Rantala-Ylinen, A. ANTX synthetase gene cluster of the cyanobacterium Anabaena sp. strain 37 and molecular methods to detect potential producers / A. Rantala-Ylinen [et al.] // Applied and Environmental Microbiology. - 2011. - Vol. 77. - P.7271-7278

65. Botana, L. Phycotoxins. Chemistry and Biochemistry/ L. Botana. -.Ames : Blackwell Publishing, 2007. - 345 p. - ISBN-13 978-0-8138-2700-1.

66. WHO (2003) Guidelines for safe recreational water environments—volume 1: coastal and fresh waters. World Health Organization, Geneva, 253 pp

WHO (World Health Organization). 2003. Cyanobacterial toxins: Microcystin-LR in Drinking-water.

67. Huisman, J. Harmful Cyanobacteria / J Huisman, H. C. P. Matthijs, P. M. Visser. - Dordrecht : Springer, 2005. - 241 p. - ISBN 1-4020-3009-6.

68. Wonnacott, S. The Chemistry and Pharmacology of Anatoxin-a and Related Homotropanes with respect to Nicotinic Acetylcholine Receptors/ S. Wonnacott, T. Gallagher // Marine Drugs. -2006. - Vol. 4. - P. 228-254.

69. Swanson, K. L. Nicotinic pharmacology of anatoxin analogs. I. Side chain structure-activity relationships at peripherical agonist and noncompetitive antagonist sites / K. L. Swanson [et al. ] // Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. - 1991. - Vol. 259, N 1. - P. 377-386.

70. Wonnacott, S. Nicotinic pharmacology of anatoxin analogs. II. Side chain structure-activity relationships at neuronal nicotinic ligand binding sites / S. Wonnacott [et al.] // Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. -1991. - Vol. 259, N 1. - P. 387-391.

71. WHO (1999) Toxic Cyanobacteria in Water: A Guide to their Public Health Consequences, Monitoring and Management. E and FN Spon,London. 416 pp.Toxic Cyanobacteria in Water - a Guide to their Public Health Consequences, Monitoring and Management. E & FN Spon on behalf of WHO, London. 416 pp.

72. Carmichael, W.W. Anatoxins from clones of Anabaena flos-aquae isolated from lakes of western Canada / W.W. Carmichael, P.R.Gorham // Mitt.Int.Ver.Limnol. - 1978. - Vol. 21. - P. 285-295.

73. Edwards, C. Identification of anatoxin-a in benthic cyanobacteria (blue-green algae) and in associated dog poisonings at Loch Insh, Scotland / C. Edwards [et al.] // Toxicon. - 1992. -Vol.30, N 10. - P. 1165-1175.

74. Cadel-Six, S. Different genotypes of anatoxin-producing cyanobacteria co-exist in the Tarn River, France. Appl. Environ / S. Cadel-Six // Microbiology. -2007. - Vol. 73, N 23. - P. 76057614.

75. Krienitz, L. Contribution of hot spring cyanobacteria to the mysterious deaths of Lesser flamingos at lake Bogoria, Kenya / L. Krienitz [et al.] // FEMS Microbiology Ecology. -2003. -Vol. 43, N 2. - P.141-148.

76. Fawell, J. K .The toxicity of cyanobacterial toxins in the mouse: II anatoxin-a / J.K.Fawell [et al.] // Human and Experimental Toxicology. - 1999. - Vol. 18. - P. 168-173.

77. Burch, M.D. Effective doses, guidelines & regulations / M.D. Burch // Advances in Experimental Medicine and Biology. - 2008. - Vol.619. - P. 831-853.

78. Farrer, D. Health-Based Cyanotoxin Guideline Values Allow for Cyanotoxin-Based Monitoring and Efficient Public Health Response to Cyanobacterial Blooms / D. Farrer [et al.] // Toxins. -2015. - Vol.7. - P. 457-477.

79. Roe, S. J. A two-directional approach to the anatoxin alkaloids: second synthesis of homoanatoxin and efficient synthesis of anatoxin-a/ S. J. Roe, R.A. Stockman // Chemical

80. Meriluoto, J Handbook of Cyanobacterial Monitoring and Cyanotoxin Analysis / J. Meriluoto, L. Spoof , G. A. Codd. - West Sussex : Wiley, 2017. - 576 p.

81. Welker, M. Cyanobacterial Hepatotoxins: Chemistry, Biosynthesis, and Occurrence / M.Welker // Seafood and Freshwater Toxins. Pharmacology, Physiology and Detection / L. M. Botana. -Boca Raton, 2008. - P. 825-844.

82. Mazur-Marzec, H. Cyanobacterial hepatotoxins, microcystins and nodularins, in fresh and brackish waters of the Pomeranian Province, northern Poland / H. Mazur-Marzec, L. Spoof, J. Kobos [et al.] // Oceanological and Hydrobiological Studies. - 2008. - Vol. 37, N. 4. - P. 3-21.

83. Botana, L. Seafood and Freshwater Toxins. Pharmacology, Physiology and Detection / L. Botana. - Boca Raton : CRC Press, 2008. - 941 p.

84. Diehnelt, C. W. Identification of microcystin toxins from a strain of Microcystis aeruginosa by liquid chromatography introduction into a hybrid linear ion trap-Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometer / C. W. Diehnelt // Analytical Chemistry. - 2006. - Vol. 78. - P. 501-512.

85. Harada, K. I. Stability of microcystins from cyanobacteria III. Effect of pH and temperature / K. I. Harada [et al.] // Phycologia. - 1996a. - Vol.35. - P.83-88.

86. Metcalf, J. S. Microwave oven and boiling waterbath extraction of hepatotoxins from cyanobacterial cells / J. S. Metcalf, G. A. Codd // FEMS Microbiology Letters. - 2000. - Vol. 184, N 2. - P. 241-246.

87. Gagala, I. The Natural Degradation of Microcystins (Cyanobacterial Hepatotoxins) in Fresh Water-the Future of Modern Treatment Systems and Water Qality Improvement / I.Gagala, J Mankiewicz-Boczek // Polish Journal of Environmental Studies. - 2012. - Vol. 21. - P.1125-1139.

88. Edwards, C. Biodegradation of microcystins and nodularin in freshwaters / C. Edwards, D. Graham , N. Fowler , L. A. Lawton // Chemosphere. - 2008. - Vol.73. - P.1315-1321.

89. Lahti, K. Persistence of cyanobacterial hepatotoxin, microcystin-LR in particulate material and dissolved in lake water / K. Lahti [et al.] // Water Research. -1997. - Vol. 31, N 5. - P. 10051012.

90. Holst, T. Degradation of microcystin in sediments at oxic and anoxic, denitrifying conditions/ T. Holst [et al.] // Water Research. - 2003. - Vol. 37. - P. 4748-4760.

91. Fitzgeorge, N. L. M. Routes of intoxication. / N. L. M. Fitzgeorge, S. A.Clark, C.W. Kelvin // Detection Methods forCyanobacterial (Blue-Green Algal) Toxins and First International Symposium on DetectionMethods for Cyanobacterial (Blue-Green Algal) / G. A.Codd [et al.]. -Cambridge, 1994. - Р. 69-74.

92. Ueno, Y. Detection of microcystin, a blue-green algal hepatotoxin, in drinking water sampled in Haimen and Fusui, endemic areas of primary liver cancer in China, by highly sensitive immunoassay / Y. Ueno, S. Nagata, T. Tsutsumi, [et al.] // Carcinogenesis. - 1996. - Vol.17(6). -P.1317-1321.

93. Chen, J. First identification of the hepatotoxic microcystins in the serum of a chronically exposed human population together with indication of hepatocellular damage / J.Chen, P. Xie, L. Li, J. Xu // Toxicological Sciences. -2009. -Vol.108, N 1. - P. 81-89.

94. Klein, A.R. Proton and iron binding by the cyanobacterial toxin microcystin-LR / A. R. Klein, D.S. Baldwin, E.Silvester // Environmental Science and Technology. - 2013. - Vol.47, N 10. -P.5178-5184.

95. De Maagd, P.G. - J. pH-dependent hydrophobicity of the cyanobacteria toxin microcystin-LR / P.G. J. de Maagd [et al.] // Water Research. - 1999. - V. 33, N 3. - P. 677-680.

96. An, J. Use of a colorimetric protein phosphatase inhibition assay and enzyme linked immunosorbent assay for the study of microcystins and nodularins / J. An, W. W. Carmichael // Toxicon. - 1994. - Vol. 32. - P.1495-1507.

97. Runnegar, M. T. C. In vivo and in vitro binding of microcystin to protein phosphatases 1 and 2A / M. T. C. Runnegar [et al.] // Biochemical and Biophysical Research Communications. - 1995a. - Vol.216, N 1. - P.162-169.

98. Rinehart, K. L. Structure and biosynthesis of toxins from bluegreen algae (cyanobacteria) /K. L. Rinehart, M. Namikoshi, B. W. Choi // Journal of Applied Phycology. - 1994. - Vol. 6. - P. 159176.

99. Sivonen K. Cyanobacterial toxins/ K. Sivonen, G. Jones // Toxic cyanobacteria in water: a guide to their public health consequences, monitoring and management / Eds. I. Chorus, J. Bartram. -London, 1999. -P. 41-111.

100. Ward, C.J. Comparitive toxicity of four microcystins of different hydrophobicities to the protozoan, Tetrahymena pyriformis / C. J. Ward, G. A. Codd // Journal of Applied Microbiology. -1999. -Vol.86. - P. 874-882.

101. Goldberg, J. Three-dimensional structure of the catalytic subunit of protein serine/threonine phosphatase-1 / J. Goldberg [et al.] // Nature. -1995. - Vol. 376(6543). - P. 745-753.

102. Runnegar, M. Microcystin uptake and inhibition of protein phosphatases: effects of chemoprotectants and self-inhibition in relation to known hepatic transporters/ M. Runnegar, N. Berndt, N. Kaplowitz // Toxicology and Applied Pharmacology. -1995 b. -Vol. 134. - P. 264272.

103. MacKintosh, R.W. The cyanobacterial toxin microcystin binds covalently to cysteine-273 on protein phosphatase 1 / R.W. MacKintosh [et al.] // FEBS Letters. - 1995. - Vol. 371. - P. 236240.

104. Craig, M. Molecular mechanisms underlying the interaction of motuporin and microcystins with type-1 and type-2A protein phosphatases / M. Craig [et al.] // Biochemistry and Cell Biology. -1996. - Vol. 74, N 4. - P. 569-578.

105. Mattila, K. Metal Ions Mediate the Binding of Cyanobacterial Toxins to Human Protein Phosphatase I / K. Mattila, A. Annila, T. T. Rantala. - Oulu. : Oulun Yliopisto, 2000. - 37 p.

106. Mikhailov, A. Identification of ATP-synthase as a novel intracellular target for microcystin-LR / A. Mikhailov [et al.] // Chemico-Biological Interactions. -2003. -Vol. 142, N 3. - P. 223-237.

107. Maynes, J.T. Crystal structure and mutagenesis of a protein phosphatase-1:calcineurin hybrid elucidate the role of the P12-P13 loop in inhibitor binding / J. T. Maynes [et al.] // Journal of Biological Chemistry. - 2004.- Vol. 279, N 41. -P. 43198-43206.

108. Maynes, J.T. Crystal structures of proteinphosphatase-1 bound to motuporin and dihydromicrocystin-LA: elucidation of the mechanism of enzyme inhibition by cyanobacterial toxins/ J. T. Maynes [et al.] // Journal of Molecular Biology. -2006. -Vol.356, N 1. - P. 111-120.

109. Herfindal, L. Microcystin produces disparate effects on liver cells in a dose dependent manner / L. Herfindal, F. Selheim // Mini Reviews in Medicinal Chemistry. - 2006. -Vol.6, N 3. - P. 279285.

110. Nishiwaki-Matsushima, R. Structure-function relationships of microcystins, liver tumor promoters, in interaction with protein phosphatase / R. Nishiwaki-Matsushima [et al.] // Japanese Journal of Cancer Research. -1991. - Vol. 82, N 9. - P. 993-996.

111. Gulledge, B. M. The microcystins and nodularins: cyclic polypeptide inhibitors of PP1 and PP2A / B. M. Gulledge [et al.] // Current Medicinal Chemistry. - 2002. - Vol. 9, N 22. - P.1 991-2003.

112. Gulledge, B. M. Linearized and truncated microcystin analogues as inhibitors of protein phosphatases 1 and 2A / B. M. Gulledge, J. B. Aggen, A. R. Chamberlin // Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. - 2003a. - Vol.13, N 17. - P. 2903-2906.

113. Gulledge, B. M. Microcystin analogues comprised only of Adda and a single additional amino acid retain moderate activity as PP1/PP2A inhibitors / B. M. Gulledge [et al.] // Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. - 2003b - Vol. 13, N 17. - P 2907-2911.

114. Humphrey, W. F. VMD - Visual Molecular Dynamics / W. F. Humphrey, A. Dalke, K. Schulten // Journal of Molecular Graphics. -1996. - Vol. 14. -P. 33-38.

115. Bagu, J. R. A molecular basis for different interactions of marine toxins with protein phosphatase-1. Molecular models for bound motuporin, microcystins, okadaic acid, and calyculin A / J. R. Bagu, B. D. Sykes, M. M. Craig, C. F. B. Holmes // Journal of Biological Chemistry. - 1997. -Vol.272, N 8. - 5087-5097.

116. Hastie, C.J. Inhibition of several protein phosphatases by a non-covalently interacting microcystin and a novel cyanobacterial peptide, nostocyclin / C. J. Hastie, E. B. Borthwick, L. F. Morrison [et al.] // Biochimica et Biophysica Acta. - 2005. - Vol.1726. -P. 187-193

117. Runnegar, M. T. C. Deformation of isolated rat hepatocytes by a peptide hepatoxin from the blue-green alga Microcystis aeruginosa / M.T.C. Runnegar, I. R. Falconer, J Silver // Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology. - 1981. -Vol. 317, N 3. -P268-272.

118. Falconer, I. R. Cytoskeletal changes in hepatocytes induced by Microcystis toxins and their relation to hyperphosphorylation of cell proteins / I. R. Falconer // Chemico-Biological Interactions. - 1992. - Vol. 81, N 1-2. - P. 181-196.

119. Fujiki, H. Tumor Promotion by Inhibitors of ProteinZ Phosphatases 1 and 2A: The Okadaic Acid Class of Compounds / H. Fujiki, M. Suganuma // Advances in Cancer Research. -1993. -Vol. 61. - P. 143-194.

120. Robinson, N. A. Tissue distribution, excretion and hepatic biotransformation of microcystin-LR in mice / N. A. Robinson [et al.] // Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. -1991. - Vol. 256, N 1. - P. 176-182.

121. Mountfort, D. O. Method for detecting classes of microcystins by combination of protein phosphatase inhibition assay and ELISA: comparison with LC-MS / D. O. Mountfort, P. Holland, J. Sprosen.// Toxicon. - 2005. - Vol.45. - P. 199-206.

122. Dixit R. B., Suseela M. R. Cyanobacteria: Potential candidates for drug discovery / R.B. Dixit, MR. Suseela // Antonie van Leeuwenhoek. - 2013. - Vol. 103. - P. 947-961.

123. Tan L.T. Bioactive natural products from marine cyanobacteria for drug discovery / L.T. Tan // Phytochemistry. - 2007. - Vol. 68, N 7. - P. 954-979.

124. Furey, A. Hepatotoxins: Context and Chemical Determination / A. Furey, O. Allis, P. M. Ortea [et al.] // Seafood and Freshwater Toxins. Pharmacology, Physiology and Detection / L. M. Botana. - Boca Raton, 2008. - P. 844-886.

125. Rodriguez-Navarro A. J. Comparison of Neosaxitoxin Versus Bupivacaine via Port Infiltration for Postoperative Analgesia Following Laparoscopic Cholecystectomy. A Randomized, DoubleBlind Trial / A. J. Rodriguez-Navarro [et al.] // Regional Anesthesia and Pain Medicine. - 2011. -Vol. 36, N 2. - P. 103-109.

126. Sainis, I. Cyanobacterial cyclopeptides as lead compounds to novel targeted cancer drugs / I. Sainis [et al.] // Mar Drugs. - 2010 - Vol. 8. - P. 629-657.

127. Fischera, W. J. Organic anion transporting polypeptides expressed in liver and brain mediate uptake of microcystin / W. J. Fischera [et al.] // Toxicol Appl Pharmacol. - 2005. - Vol. 203. -P. 257-263.

128. Amado, L. L. Oxidative stress generation by microcystins in aquatic animals: why and how / L.L. Amado, J.M. Monserrat // Environment International. - 2010. -Vol.36. - P. 226-235.

129. Monks, N.R. Potent toxicity of the phosphatase inhibitor microcystin LR and microcystin analogues in OATPB1- and OATP1B3-expressing HeLa cells / N. R. Monks [et al.] // Molecular Cancer Therapeutics. - 2007. -Vol.6. -P. 587-598.

130. Meriluoto, J. TOXIC: Cyanobacterial Monitoring and Cyanotoxin Analysis./ J. Meriluoto, G. A. Codd. - Turku : Äbo Akademi University Press, 2005. - 149 p. - ISBN 951- 765-259-3.

131. Pierce, R.H. Innovative techniques for harmful algal toxin analysis. / R. H. Pierce, G.J. Kirkpatrick // Environmental Toxicology and Chemistry. - 2001. - Vol. 20, N 1. - P. 107-114.

132. Chu, F.S. Indirect enzyme-linked immunosorbent assay for saxitoxin in shell fish / F.S. Chu, T. L. Fan // Journal-Association of Official Analytical Chemists. - 1985. - Vol.68, - P.13-16.

133. Usleber, E., Schnieder, E., and Terplan, G., Direct enzyme immunoassay in microtitration plate and test strip format for the detection of saxitoxin in shell fish / E. Usleber, E. Schneider, G. Terplan // Letters in applied microbiology. - 1991. - Vol. 13. - 275-277.

134. Chu, F.S. Screening of paralytic shell sh poisoning toxins in naturally occurring samples with three different direct competitive enzyme-linked immunosorbent assays / F. S. Chu [et al.] // Journal of Agricultural and Food Chemistry. - 1996. - Vol. 44. - P 4043.

135. Huang, X. Direct competitive enzyme-linked immunosorbent assay for saxitoxin and neosaxitoxin / X.Huang, K. H. Hsu, F.S. Chu // Journal of Agricultural and Food Chemistry. -

1996. - Vol. 44. - P.1029.

136. Micheli, L. Production of antibodies and development of highly sensitive formats of enzyme immunoassay for saxitoxin analysis / L. Micheli [et al.] // Analytical and Bioanalytical Chemistry. -2002. - Vol.373. - P. 678.

137. Usleber, E. Comparison of enzyme immunoassay and mouse bioassay for determining paralytic shell sh poisoning toxins in shellfish / E. Usleber [et al.] // Food Additives and Contaminants. -

1997. - Vol. 14. - P. 193.

138. O'Neill, S. Assessment of a saxitoxin ELISA as a pre-screen for PSP toxins in Mytulis edulis and Pecten maximus, from UK waters / S. O'Neill, S. Gallacher, I. Riddoch // Harmful Algae / B. Reguera, J. Blanco, M. L. Fernández [et al.] - Vigo , 1998. - P.551.

139. Van Dolah, F.M. Review and assessment of in vitro detection methods for algal toxins / F. M. Van Dolah, J. S. Ramsdell // Journal of AOAC International. - 2001. - Vol.84. - P. 1617.

140. Etheridge, S. Detection methods and their limitations: PSP toxins in the southern puffer fish Sphoeroides nephelus responsible for human poisoning events in Florida in 2004 / S. Etheridge [et al.] // African Journal Of Marine Science. -2006. - Vol.28. - P.383.

141. Van Egmond, H.P. Paralytic shell sh poison reference materials: An intercomparison of methods for the determination of saxitoxin / H. P. Van Egmond [et al.] // Food Additives and Contaminants. - 1994. - Vol. 11. - P.39-56.

142. Lawton, L. A. Rapid detection of microcystins in cells and water / L. A. Lawton [et al.] // Toxicon. - 2010. - Vol. 55. - P. 973-978

143. Nicholson, B. C. Evaluation of analytical methods for detection quantification of cyanotoxins in relation to Australian drinking water guidelines / B. C. Nicholson, M. D. Burch. - Canberra : National Health and Medical Research Council of Australia, 2001. - 57 p. - ISBN 1864960949.

144. Oehrle, A. S. Analysis of Various Cyanobacterial Toxins by LC-MS / S. A. Oehrle, J. Westrick // LCGC Europe. - Vol. 15, N 11. - 2002. - P. 728-733.

145. Metcalf, J. S. Cross-reactivity and performance assessment of four microcystin immunoassays with detoxication products of the cyanobacterial toxin, microcystin-LR/ J. S. Metcalf [et al.] // Journal of Water Supply Research and Technology-aqua. -2002. -Vol. 51(3). - P. 145-151

146. MacKintosh, C. Cyanobacterial microcystin-LR is a potent and specific inhibitor of protein phosphatases 1 and 2A from both mammals and higher plants / C. MacKintosh [et al.] // FEBS Letters. -1990. - Vol. 264, N 2. -P. 187-192.

147. MacKintosh, C. Plant protein phosphatases. Subcellular distribution, detection of protein phosphatase 2C and identification of phosphatase 2A as the major quinate dehydrogenase phosphatase / C. MacKintosh, J. Coggins, P. Cohen // Biochemical Journal. - 1991. - Vol. 273. -P. 733-738.

148. Lambert, T. W. Quantitation of the microcystin hepatotoxins in water at environmentally relevant concentrations with the protein phosphatase bioassay / T. W. Lambert [et al.] // Environmental Science & Technology. - 1994. - Vol. 28. - P.753-755.

149. Ward, C. J. Colorimetric protein phosphatase inhibition assay of laboratory strains and natural blooms of cyanobacteria: comparisons with high-performance liquid chromatographic analysis for microcystins/ C. J. Ward [et al.] // FEMS Microbiol. Lett. -1997. -Vol. 153. - P.465-473.

150. Wirsing, B. Estimation of the microcystin content in cyanobacteral field samples from German lakes using the colorimetric protein-phosphatase inhibition assay and RP-HPLC / B.Wirsing [et al.] // Environmental Toxicology. - 1999. - vol. 14. - P.23-29.

151. Heresztyn, T. Determination of cyanobacterial hepatotoxins directly in water using a protein phosphatase inhibition assay / T. Heresztyn, B. C. Nicholson // Water Res. - 2001. - Vol. 35. - P. 3049-3056.

152. Oliveira, A. C. P. Influence of drinking water composition on quantitation and biological activity of dissolved microcystin (cyanotoxin)./ A. C. P. Oliveira [et al.] // Environ. Toxicol. - 2005. -Vol. 20. - P. 126-130.

153. Foss. A. J. Using the MMPB technique to confirm microcystin concentrations in water measured by ELISA and HPLC (UV, MS, MS/MS) / A. J. Foss, M. T. Aubel // Toxicon. - 2015. - Vol. 104. - P. 91-101.

154. Tsujia, K. Analysis of microcystins in sediments using MMPB method / K. Tsujia [et al.] // Toxicon. - 2001. - Vol. 39, N 5. - P. 687-692.

155. Sano, T. A method for micro-determination of total microcystin content in waterblooms of cyanobacteria (blue-green algae) / T. Sano [et al.] // International Journal of Environmental Analytical Chemistry. - 1992. -Vol.49. - P. 163-170.

156. Harada, K.-I. Mass spectrometric screening method for microcystins in cyanobacteria / K. -I. Harada [et al.] // Toxicon. - 1996b. -Vol. 34. - P.701-710.

157. Kaya, K. Total microcystin determination using erythro-2-methyl-3-(methoxy-d 3 )-4-phenylbutyric acid (MMPB-d 3 ) as the internal standard / K. Kaya, T. Sano // Analytica Chimica Acta. - 1999. - Vol. 386. - P.107-112.

158. McElhiney, J. Detection of the cyanobacterial hepatotoxins microcystins / J. McElhiney, L.A. Lawton // Toxicology and Applied Pharmacology. -2005. -Vol. 203, N 3. - P. 219- 230.

159. Lawton L.A, Edwards C., Codd G.A., Extraction and high-performance liquid chromatographic method for the determination of microcystins in raw and treated waters / Analyst. -1994. -V. 119, N 7. - P. 1525-1530.

160. Harada, K.-I. Chemistry and detection of microcystins./ K.-I. Harada// Toxic Microcystis/ M. F. Watanabe, K. -I. Harada, W. W. Carmichael, H. Fujiki. - Boca Raton, 1996. - P. 103-148

161. Harada, K.-I. Improved method for purification of toxic peptides produced by cyanobacteria / K.-I. Harada [et al.] // Toxicon. - 1988. - Vol.26. - P. 433-439.

162. Rapala, J. Detection of microcystins with protein phosphatase inhibition assay, high-performance liquid chromatography-UV detection and enzyme-linked immunosorbent assay. Comparison of methods / J. Rapala, K. Erkomaa, J. Kukkonen [et al.] // Analytica Chimica Acta. - 2002. - Vol. 466. -P. 213-231

163. Wicks, R. J. Environmental factors affecting the production of peptide toxins in floating scums of the cyanobacterium Microcystis aeruginosa in a hypertrophic African reservoir / R. J. Wicks, P.G. Thiel // Environmental Science & Technology. -1990. - Vol. 24. - P.1413-1418.

164. Meriluoto, J. A. O. Internal surface reversed-phase high-performance liquid chromatographic separation of the cyanobacterial peptide toxins microcystin-LA, -LR, -YR, -RR and nodularin / J. A. O. Meriluoto [et al.] // Journal of Chromatography. - 1990. - Vol. 509. - P. 390-395.

165. Spoof, L. High-performance liquid chromatographic separation of microcystins and nodularin, cyanobacterial peptide toxins, on C18 and amide C16 sorbents. / L. Spoof, K. Karlsson, J. Meriluoto // Journal of Chromatography A. -2001. - Vol. 909. - P. 225-236.

166. Spoof, L. Rapid separation of microcystins and nodularin using a monolithic silica C18 column / L. Spoof, J. Meriluoto // Journal of Chromatography A. - 2002. - Vol. 947. - P. 237-245.

167. ISO 20179: 2005. Water quality -- Determination of microcystins -- Method using solid phase extraction (SPE) and high performance liquid chromatography (HPLC) with ultraviolet (UV) detection. - 2005-11-10. - 24 p.

168. Boyer, G. L. A comparison of electrochemical methods for the analysis of PSP toxins/ G.L. Boyer, J. J. Janiszewski, X. Hu // Harmful Algae : Xunta de Galicia and Intergovernmental

Oceanographic Commission of UNESCO / B. Reguera, J. Blanco, M. L. Fernández, T. Wyatt. -Santiago de Compostela, 1998. - P.515.

169. Thibault, P. Analysis of paralytic shell sh poisons by capillary electrophoresis/ P. Thibault, S. Pleasance, M. V. Laycock // Journal of Chromatography. -1991. - Vol.542. - P.483.

170. Locke, S. J. Improvement in detection limits for the determination of paralytic shell sh poisoning toxins in shell sh tissues using capillary electrophoresis/electrospray mass spectrometry and discontinuous buffer systems / S. J. Locke, P. Thibault // Analytical Chemistry. -1994. -Vol. 66.

- P. 343-346.

171. Piñeiro, N. Capillary electrophoresis with diode array detection as an alternative analytical method for paralytic and amnesic shell fish toxins / N. Piñeiro [et al.] // Journal of Chromatography A. - 1999. -Vol.847. -P. 223-232.

172. Gago-Martinez, A. An application of capillary electrophoresis for the analysis of algal toxins from the aquatic environment / A. Gago-Martinez [et al.] // International Journal of Environmental Analytical Chemistry. - 2003. - Vol. 83 . - P.443-456.

173. Wu, Y. Determination of paralytic shell fish toxins in dinoflagellate Alexandrium tamarense by using isotachophoresis/capillary electrophoresis / Y. Wu [et al.] // Journal of Separation Science.

- 2006. - Vol.29. - P.399-404.

174. HS Wong, E Hindin. Detecting an algal toxin by high-pressure liquid chromatography // J Am Water Works Assoc. - 1982. -Vol. 74. - P. 528-529.

175. Harada, K.-I. A new procedure for the analysis and purification of naturally occurring anatoxin-a from the blue-green alga Anabaena flos-aquae / K.-I. Harada [et al.] // Toxicon. - 1989. -Vol. 27.

- P.1289-1296.

176. Sanchez, J.A. Detection of Anatoxin-a and Three Analogs in Anabaena spp. Cultures: New Fluorescence Polarization Assay and Toxin Profile by LC-MS/MS / J. A. Sanchez [et al.] // Toxins. -2014. - Vol.6. - P. 402-415.

177. Ojanpera, I. Facile detection of anatoxin-a in algal material by thin-layer chromatography with Fast Black K salt / I. Ojanpera [et al.] // Analyst. - 1991. -Vol. 116. - P. 265-267.

178. Al-Layl, K. J. Isolation and purification of peptide and alkaloid toxins from Anabaena flos-aquae using high performance thin-layer chromatography / K. J. Al-Layl, G. K. Poon, G. A. Codd // Journal of Microbiological Methods. - 1988. - Vol.7. - P.251-258.

179. Lagos, N. The first evidence of paralytic shellfish toxins in the freshwater cyanobacterium Cylindrospermopsis raciborskii, isolated from Brazil / N.Lagos [et al.] // Toxicon. - 1999. - Vol. 37. - P.1359-1373.

180.Pereira, P. Paralytic shellfish toxins in the freshwater cyanobacterium Aphanizomenon flos-aquae, isolated from Montargil reservoir, Portugal / P.Pereira [et al.] // Toxicon. - 2000. - Vol. 38. - P. 1689-1702.

181.Liu, Y. First report of Aphantoxins in China—waterblooms of toxigenic Aphanizomenon 6 os-aquae in Lake Dianchi / Y. Liu [et al.] // Ecotoxicology and Environmental Safety. - 2006. - Vol. 65. - P.84-92.

182.Dell'Aversano, C. Hydrophilic interaction liquid chromatography-mass spectrometry for the analysis of paralytic shellfish poisoning (PSP) toxins / C. Dell'Aversano, P. Hess, M. A. Quilliam // Journal of Chromatography A. - 2005. - Vol. 1081. - P. 190-201.

183.Papageorgiou, J. Analysis of cyanobacterial-derived saxitoxins using high-performance ion exchange chromatography with chemical oxidation/fluorescencedetection / J. Papageorgiou, B.C. Nicholson, T. A. Linke, C. Kapralos // Environmental Toxicology. - 2005. - Vol. 20, N 6. - P. 549-559.

184.Tatsuno, R. RT-PCR- and MALDI-TOF Mass Spectrometry-Based Identification and Discrimination of Isoforms Homologous to Pufferfish Saxitoxin- and Tetrodotoxin-Binding Protein in the Plasma of Non-Toxic Cultured Pufferfish (Takifugu rubripes) / R. Tatsuno, K. Yamaguchi, T.Takatani, O. Arakawa // Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry. - 2013. -Vol.77, N 1. - P. 208-212.

185.Roegner, A.F. Rapid Quantitative Analysis of Microcystins in Raw Surface Waters with MALDI MS Utilizing Easily Synthesized Internal Standards/ A.F. Roegner [et al.] // Toxicon. - 2014. -Vol. 78. - P. 94-102.

186.Welker, M. Applications of MALDI-TOF MS analysis in cyanotoxin research / M. Welker, J. Fastner, M. Erhard, H. von Döhren // Environ Toxicol. - 2002. - Vol. 17, N 4. : - P. 367-374.

187.Kadlec, K. M. Comparative Analysis of ELISA and MALDI-TOF Mass Spectrometry Methods for Microcystins in Freshwater Samples / K. M. Kadlec, A. Turczyn, J. Grant // The FASEB Journal. - 2016. - Vol. 30, N 1. - P. 1122.

188.Poon, G. K. Liquid chromatography-electrospray ionization-mass spectrometry of cyanobacterial toxins / G. Poon, L. J. Griggs, C. Edwards [et al.] // Journal of Chromatography A. - 1993.

- Vol. 628. P. - 215-233.

189.Spoof, L. Microcystins and nodularins / L. Spoof // Toxic: cyanobacterial monitoring and

cyanotoxins analysis / Eds. J. Meriluoto, G.A. Codd. - Abo, 2005. - P. 15-39. 190.Meriluoto J., Spoof L. Cyanotoxins: sampling, sample processing and toxin uptake / J. Meriluoto, L. Spoof // Cyanobacterial Harmful Algal Blooms: State of the Science and research Needs. Advances in Experimental Medicine and Biology / Eds. H.H. Kenneth - Berlin, 2008. - Vol. 619.

- P.483-499.

191. Reyero, M. Evidence of saxitoxin derivatives as causative agents in the 1997 mass mortality of monk seals in the Cape Blanc peninsula / M. Reyero [et al.] // Natural Toxins. - 1999. - Vol. 7. -P. 311.

192. Ito, K. Occurrence of paralytic shell sh poison (PSP) in the star fish Asterina pectinifera collected from the Kure bay, Hiroshima Prefecture, Japan / K. Ito [et al.] // Toxicon. - 2003. - Vol. 41. - P. 291.

193. Dahlmann, J. Liquid chromatography-electrospray ionization mass spectrometry based methods for the simultaneous determination of algal and cyanobacterial toxins in phytoplankton from marine waters and lakes followed by tentative structural elucidation of microcystins / J. Dahlmann, W. R. Budakowski, B. Luckas // Journal of Chromatography A. - 2003. -Vol.994. -P. 45-57.

194. Furey, A. Liquid chromatography with electrospray ion-trap mass spectrometry for the determination of anatoxins in cyanobacteria and drinking water. / A. Furey, J. Crowley, M. Lehane, K. J. James // Rapid Commun Mass Spectrom - 2003b. - Vol.17, N 6. - P. 583-588.

195. Maizels, M. LC/MS method for the determination of cyanobacteria toxins in water / M. Maizels, W. L. Budde // Analytical Chemistry. - 2004. - V. 76. - P. 1342-1351.

196. James, K.J. Anatoxins and degradation products, determined using hybrid quadrupole time-offlight and quadrupole ion-trap mass spectrometry: forensic investigations of cyanobacterial neurotoxin poisoning. / K.J. James [et al.] // Rapid Communications in Mass Spectrometry. -2005. - Vol.19, N 9. - P. 1167-1175.

197. Furey, A. Strategies to avoid the mis-identification of anatoxin-a using mass spectrometry in the forensic investigation of acute neurotoxic poisoning / A. Furey [et al.] // Journal of Chromatography A.- 2005. - Vol. 1082. - P. 91-97.

198. Spoof, L. Screening for hepatotoxins, microcystins and nodularin in environmental water samples by reversed-phase liquid chromatography- electrospray ionization mass spectrometry / L. Spoof, P. Vesterkvist, T.Lindholm , J. Meriluoto // Journal of Chromatography A.. -2003. - Vol. 1020. -P.105-119.

199. Diehnelt, C.W. Liquid chromatography-tandem mass spectrometry and accurate m/z measurements of cyclic peptide cyanobacteria toxins/ C.W. Diehnelt, S. M. Peterman, W. L. Budde // Trends in Analytical Chemistry. -2005. - V. 24. No. 7. - P. 622-634.

200. Bogialli, S Monitoring algal toxins in lake water by liquid chromatography tandem mass spectrometry/ S. Bogialli, M. Bruno, R. Curini [et al.] // Environmental Science and Technology. - 2006. - Vol.40.- .P. 2917-2923.

201.Allis. O. Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry Application, for the Determination of Extracellular Hepatotoxins in Irish Lake and Drinking Waters / O. Allis , J. Dauphard , B. Hamilton [et al.] // Analytical Chemistry. -.2007. - Vol. 79 (9). -P 3436-3447.

202.Bruno, M. Microcystin detection in contaminated fish from Italian lakes using ELISA immunoassays and LC-MS/MS analysis / M. Bruno, S. Melchiorre, V Messineo [et al.] // Handbook on cyanobacteria: Biochemistry, biotechnology and applications / Eds. P.M. Gault, H.J. Marler. - New York, 2009. -P. 191-210.

203. Neffling M.-R., Spoof L., Quilliam M., Meriluoto J. LC-ESI-Q-TOF-MS for faster and accurate determination of microcystins and nodularins in serum // Journal of Chromatography B. 2010. Vol. 878, № 26. P.2433-2441.

204.Лебедев, А.Т. Масс-спектрометрия в органической химии / А.Т. Лебедев. - М.: Бином : Лаборатория знаний, 2003. - 493 с.

205.Лебедев, А.Т. Масс-спектрометрия для анализа объектов окружающей среды / А.Т. Лебедев. - М.: Техносфера, 2013. - 632с.

206.Tanaka, K., Waki H., Ido Y., Akita S., Yoshida T., Protein and polymer analysis up to m/z 100,000 by laser ionization time-of-flight mass spectrometry./ K.Tanaka, H. Waki, Y.Ido [et al.] //Rapid Commun Mass Spectrom. - 1988. - Vol. 2, N 8. - P. 151-153.

207. Aleksandrov, M. L. Ion extraction from solutions at atmospheric pressures: a mass spectrometric method of analysis of bioorganic compounds / M. L. Aleksandrov, L. N. Gall, V. Krasnov [et al.] // Doklady Akademii Nauk SSSR. - 1984. - Vol.277, N 2. - P. 379-383.

208.Yamashita, M. Electrospray ion-source - Another variation on the freejet theme / M.Yamashita, J. B. Fenn // J.Phys.Chem. - 1984. - Vol.88. - P.4451-4459.

209.Meriluoto, J. Chromatography of Peptides. Chromatography of microcystins / J. Meriluoto // Analytica Chimica Acta. - 1997. - Vol. 352, N 1-3. - P. 277-298.

210.Li, C.-M. An enhanced LC-MS/MS method for microcystin-LR in lake water / C.-Ming Li, R. Y-Yuan . Chu, D. P. H. Hsieh // Journal of Mass Spectrometry. - 2006. - Vol. 41. -P. 169-174.

211.Krauss, M. LC-high resolution MS in environmental analysis: from target screening to the identification of unknowns / M.Krauss, H. Singer, J. Hollender // Anal Bioanal Chem. - 2010. -Vol.397. - P. 943-951.

212.Petrovic, M. Application of liquid chromatography/quadrupole time-of-flight mass spectrometry (LC-QqTOF-MS) in the environmental analysis / M. Petrovic, D. Barce lo // Journal of Mass Spectrometry. - 2006. -Vol. 41. -P. 1259-1267.

213. Kellmann, M. Full Scan MS in Comprehensive Qualitative and Quantitative Residue Analysis in Food and Feed Matrices: How Much Resolving Power is Required? / M. Kellmann, H. Muenster ,

P. Zomer , H. Mol // Journal of the American Society for Mass Spectrometry. - 2009. - Vol.20. -P. 1464-1476

214. Kosjek, T. Mass spectrometry for identifying pharmaceutical biotransformation products in the environment / T. Kosjek, E. Heath, M. Petrovic, D. Barceló //Trends in Analytical Chemistry. -2007. - Vol.26. -P.1076 - 1085

215. Hernández, F. Strategies for quantification and confirmation of multi-class polar pesticides and transformation products in water by LC-MS2 using triple quadrupole and hybrid quadrupole time-of-flight analyzers / F. Hernández, O.J. Pozo, J.V. Sancho [et al.] // Trends in Analytical Chemistry. - 2005.- Vol. 24, P.596-612

216. Duncan, M. W. Good mass spectrometry and its place in good science/ M.W. Duncan // Journal of Mass Spectrometry. - 2012. - Vol. 47, N 6. - P. - 795-809.

217. Document No. SANC0/10684/2009A : Method validation and quality control procedures for pesticide residues analysis in food and feed.. - http://www.crl-pesticides.eu/library/docs/allcrl/AqcGuidance_Sanco_2009_10684.pdf

218. Pyo, D. Chemical analysis of microcystins RR and LR in cyanobacterium using a prepacked cyano cartridge. / D. Pyo, M.Lee // Chromatographia. - 1994. - Vol.39. - P.427 -430.

219. Kondo F., Matsumoto H., Yamada S., Tsuji K., Ueno Y., Harada K.I. 2000. Immunoaffinity purification method for detection and quantification of microcystins in lake water/ F.Kondo [et al.] // Toxicon. - 2000. -Vol.38. - P. 813-823.

220. Kondo F. Detection of microcystins in lake water using reusable immunoaffinity column / F. Kondo //Toxicon. - 2002. - Vol.40.- P. 893-899.

221. Harada, K.I. Liquid chromatography/mass spectrometric detection of anatoxin-a, a neurotoxin from cyanobacteria / K.I. Harada, H. Nagai, Y. Kimura [et al.] // Tetrahedron. -1993. - Vol. 49(41). - P. 9251-9260.

222. Rapala, J. Biodegradability and adsorption on lake sediments of cyanobacterial hepatotoxins and anatoxin-a / J. Rapala, K. Lahti, K. Sivonen [et al.] // Letters in Applied Microbiology. - 1994.-Vol.19. - P. 423-428.

223. Namikoshi, M. Simultaneous roduction of homoanatoxin-a, anatoxin-a, and a new nontoxic 4-hydroxyhomoanatoxin-a by the cyanobacterium Raphidiopsis mediterranea Skuja / M. Namikoshi, T. Murakami, M.F. Watanabe [et al.] // Toxicon.- 2003.- Vol.42. - P. 533-538

224. Osswald, J. Toxicology and detection methods of the alkaloid neurotoxin produced by cyanobacteria, anatoxin-a / J. Osswald, S. Rellan, A. Gago [et al.] // Review. Environ. Int. -2007.- Vol.33. -P.1070-1089.

225. Lee, T.-H. First report of microcystins in Taiwan / T.-H. Lee, Y.-M. Chen, H.-N. Chou // Toxicon. -1998. - Vol. 36. -P. 247-255.

226. Соколов, Л. И. Определение антибиотиков цефалоспоринового ряда в биологических объектах методом обращенно-фазовой ВЭЖХ (обзор) / Л. И. Соколов, А. П. Черняев // Химико-фармацевтический журнал. - 2002. - Том.36, № 5. - С. 39-45

227. Poison, C. Optimization of protein precipitation based upon effectiveness of protein removal and ionization effect in LCMS /MS / С. Poison, P. Sarkar, B. Incledon [et al.] // Journal of Chromatography B. -2003. - Vol.775. - P. 263-275.

228. Jiang-qi, Q. Optimization of Microcystin Extraction for Their Subsequent Analysis by HPLC-MS/MS Method in Urban Lake Water / Q. Jiang-qi, Zh. Qing-jing, J. Cheng-xia [et al.] // International Journal of Environmental Science and Development. -2013. -Vol. 4, No. 5. - P. 600-603.

229. Barco, M. Optimization of intracellular microcystin extraction for their subsequent analysis by high-performance liquid chromatography/ M. Barco, L. A. Lawton, J. Rivera / Journal of Chromatography A. -2005. -Vol. 1074. -P. 23-30.

230. Namikoshi, M. Seven new microcystins possessing two L-glutamic acid units, isolated from Anabaena sp. strain 186 / M. Namikoshi, M.Yuan, K. Sivonen [et al.] // Chemical Research In Toxicology. -1998. -Vol. 11. - P. 143-149.

231. Gj0lme, N. The extraction and stability of microcystin-RR in different solvents / N. Gj0lme, H. Utkilen // Phycologia. -1996. -Vol. 35, N 6S. - P. 80-82.

232. Чернова, E.H. Ионная супрессия как частный случай Матричных эффектов в жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии / Е. Н. Чернова, Я. В. Русских, З. А. Жаковская [и др.] // Заводская лаборатория. -2016. - № 10 (82). - C. 5-16.

233. Чернова, Е. Н. Определение микроцистинов и анатоксина-а методом жидкостной хромато-масс-спектрометрии низкого разрешения / Е. Н. Чернова, Я. В. Русских, Е. П. Подольская [и др.] // Научное приборостроение. - 2016. - Т. 26, №1. - С. 11-25.

234. Application Note:540, Thermo Scientific : Multiple Fragmentation Methods for Small Molecule Characterization on a Dual Pressure Linear Ion Trap Orbitap Hybrid Mass Spectrometer/ K. Comstock, Y.Huang. - San Jose : Thermo Fisher Scientific, 2011. - 8 p.

235. Chernova, E. Dolichospermum and Aphanizomenon as neurotoxins producers in some Russian freshwaters / E. Chernova, S. Sidelev, I. Russkikh [et al.] // Toxicon. - 2017.- Vol.130.- P.47-55.

236. Чернова, Е. Н. Оптимизация параметров масс-спектрометрического анализа цианотоксинов на гибридном хромато-масс-спектрометре LTQ Orbitrap XL (Thermo Finnigan) / Е. Н. Чернова, Я. В. Русских, Е. П. Подольская, З. А. Жаковская // Научное приборостроение. - 2013. - Т. 23, №14. - С.20-29.

237. Dimitrakopoulos, I.K. Development of a fast and selective method for the sensitive determination of anatoxin-a in lake waters using liquid chromatography-tandem mass

spectrometry and phenylalanine-d5 as internal standard / I.K. Dimitrakopoulos [et al.] // Analytical and Bioanalytical Chemistry. - 2010. - Vol. 397. - P. 2245-2252.

238. Русских, Я. В. Первые результаты определения новых экотоксикантов в водоемах Северо -Запада РФ / Я. В. Русских, Е. Н. Чернова, Л. В. Некрасова [и др.] // Региональная экология.

- 2011. - Т. 31, № 1-2. - С. 82-87.

239. Русских, Я. В. Сравнение результатов определения цианотоксинов (анатоксина-а и микроцистина-RR) методом хромато-масс-спектрометрии, полученных с помощью приборов с раз-личными типами ионных ловушек / Я.В. Русских, Е.Н. Чернова, Л.В. Некрасова [и др.] // Научное приборостроение. - 2010. - Т.20, №4 - С.100-107.

240. Чернова, Е. Н. Определение метаболитов цианобактерий методом жидкостной хромато -масс-спектрометрии низкого разрешения / Е. Н. Чернова, Я. В. Русских, Е. П. Подольская, З. А. Жаковская // Международная научно -технической конференция «Системы контроля окружающей среды - 2016» : Тезисы докладов. - Севастополь : ИПТС, 2016.-.Стр.177.

241. Русских, Я. В. Определение цианотоксинов в водной матрице методом высокоэффективной жидкостной хроматографии - масс-спектрометрии высокого разрешения / Я. В. Русских, Е. Н. Чернова, Е. Ю.Воякина [и др.] // Известия Санкт-петербургского государственного технологического института (технического университета). - 2012. - №17 (43). - C.61-66.

242. Чернова, Е. Н. Исследования природных экотоксикантов - метаболитов сине-зеленых водорослей в разнотипных водоемах Северо-Запада России / Е.Н. Чернова, Я.В. Русских, Е. Ю. Воякина [и др.] // Региональная экология. - 2014. - Т.35, № 1-2. - С. 88-95.

243. Чернова, Е.Н. Масс-спектрометрический анализ микроцистинов из биомассы цианобактерий. Оптимизация процедуры пробоподготовки / Е.Н. Чернова, Я.В. Русских, Е.И. Афонина [и др.] // Экологическая химия. - 2016. - Т.25 (4). - С. 204-216.

244. Кельциева, О.А. Оптимизация процедуры пробоподготовки биомассы для анализа ряда метаболитов цианобактерий методами масс-спектрометрии / О. А. Кельциева, Е. Н. Чернова, Я. В. Русских [и др.] // Тезисы докладов. Международная научно -техническая конференция «Системы контроля окружающей среды - 2016».- Севастополь : ИПТС, 2016.

- С.158.

245. ^ernova, E. Occurrence of microcystins and anatoxin-a in eutrophic lakes of Saint Petersburg, Northwestern Russia / E. ^ernova, Ia. Russkikh, E. Voyakina [et al.] // Hydrobiological and Oceanological Studies. - 2016. - Vol. 45, N 4. - Р.466-484.

246. Чернова, Е.Н. Масс-спектрометрический анализ гепатотоксинов из природных объектов / Е.Н. Чернова // Устный доклад. Российский семинар "Химия и токсикология окружающей среды". 83 заседание. 15 октября 2014 года, Химического факультета МГУ.

247. Chernova, E. Cyanobacteria and cyanotoxins studies in some parts of Russian Federation / E. Chernova // Report. Cyanocost meeting. - Seville, SPAIN.- 19-21 February, 2015.

248. Ежова, Е.Е. Токсические «цветения» фитопланктона в Куршском и Вислинском заливах Балтийского моря / Е.Е. Ежова, Я.В. Русских, Е.К. Ланге, З.А. Жаковская, Е.Н. Чернова // Тезисы докладов. Международная конференция «Актуальные проблемы планктонологии». - Светлогорск. -2012. - C. 52-53.

249. Russkikh, J. Harmful Algal Bloom and cyanotoxins content in waters of the Curonian and Vistula lagoon. / J. Russkikh, E. Ezhova, E. Lange, Z. Zhakovskaya, E. Chernova // Abstr. of ECSA 51th Int. Symp. "Research and Management of Transitional waters"23-27 Sept. 2012. -Klaipeda. - P.93.

250. Ezhova, E. Dynamics of toxic HABs in the Curonian Lagoon, Baltic Sea during 2010-2013 / E. Ezhova, E. Lange, Y. Russkikh, E. Chernova, Z. Zhakovskaya // Abstracts Book. ICES Annual Science Conference. Spain, La Coruna. 2014. H26.

251. Chernova, E. Cyanotoxins in natural waters of North-West part of Russia / E. Chernova, Ya. Russkikh, E.Voyakina, Z.Zhakovskaya // 14th EuCheMS International Conference on Chemistry and the Environment (ICCE-2013). Barcelona, 2013.

252. Chernova, E. Cyanotoxins Occurrence in Gulf of Finland, 2012-2015 / E. ^ernova, Ia. Russkikh, E. Voyakina, Z. Zhakovskaya, M.Orlova // Abstract Book. International Conference «Gulf of Finland tri-lateral Forum». Helsinki, 2016. P.58.

253. Райхардт, К. Растворители и эффекты среды в органической химии / К. Райхардт. -М.: Мир, 1991, - 763c.

254. Сычев, К.С. Практический курс жидкостной хроматографии / К. С. Сычев. - Орел : Кокоро, 2012, - 261c.

255. Рудаков, О. Б. Ацетонитрил - униальный растворитель для жидкостной хроматографии и экстракции / О. Б. Рудаков, Е. А. Хорохордина, Л. В Рудакова, Е.Н. Грошев // Вестник ВГУ: Химия. Биология. Фармация.- 2015. - № 3. -C.41-46.

256. Harada, K. Microcystins from Anabaena flos-aquae NRC 525-17 / K. Harada // Chemical Research in Toxicology. -1991. - Vol. 4, N 5. - P. 535-540.

257. Lawton, L.A. Isolation and characterisation of microcystins from labora-tory cultures and environmental samples of Microcystis aeruginosa andfrom an associated animal toxicosis / L.A. Lawton, C. Edwards, K.A. Beattie [et al.] // Journal of Natural Toxins. - 1995. - Vol.3, - P. 5057.

258. Sano, T. Two (Z)-Dehydrobutyrine-Containing Microcystins from a Hepatotoxic Bloom of Oscillatoria agardhii from Soulseat Loch, Scotland Journal / T. Sano // Journal Of Natural Products. - 1998. - Vol. 61. - P. 851-853.

259. Lawton, L. A. Purification of microcystins / L. A. Lawton, C. Edwards // Journal of chromatography A. - 2001. - Vol. 912, N 2. - P. 191-209.

260. Grabowska, M. The effect of cyanobacterial blooms in the Siemianowska Dam Reservoir on the phytoplankton structure in the Narew River / M. Grabowska, H. Mazur-Marzec // Oceanological and Hydrobiological Studies. - 2011. - 40, N 1. - P. 19-26.

261. Pawlik-Skowronska, B. Relationship between cyanobacterial bloom composition and anatoxin-a and microcystin occurrence in the eutrophic dam reservoir (SE Poland) / B. Pawlik-Skowronska, T. Skowronski, J. Pirszel, F. Adamczyk // Polish Journal of Ecology. - 2004. - 52. - P. 479-490.

262. Hansson, M. Cyanobacterial blooms in the Baltic Sea. HELCOM Baltic Sea Environment Fact Sheets. - 2013. - http://www.helcom.fi/baltic-sea-trends/environment-fact-sheets

263. Корнева, Л. Г. Фитопланктон и содержание цианотоксинов в Рыбинском, Горьковском и Чебоксарском водохранилищах в период аномально жаркого лета 2010 г. / Л.Г. Корнева, В. В. Соловьева, З. А. Жаковская, Я. В. Русских, Е. Н. Чернова // Вода: химия и экология. -2014. - №8. - С. 24-28.

264. Sidelev, S.I. Analysis of phytoplankton in Tsimlyansk Reservoir (Russia) for the presence of cyanobacterial hepato- and neurotoxins / S. I. Sidelev, T. B. Golokolenova, E. N. Chernova [et al.] // Microbiology. - 2015. - Vol.84. - Р. 828-837.

265. Чернова, Е.Н. Анализ метаболитов сине-зеленых водорослей / Е.Н.Чернова // Устный доклад. Семинар Российского химического общества имени Д.И. Менделеева "Современные проблемы органической химии". Занятие 4 (186), 25 января 2017 г.

266. Kurashov, E. Assessment of the Potential Biological Activity of Low Molecular Weight Metabolites of Freshwater Macrophytes with QSAR / E. Kurashov, E.Fedorova, J.Krylova, G.Mitrukova // Scientifica. - 2016. - Article ID 1205680, 9 p.

267. Филимонов, Д. А. Предсказание спектров биологической активности органических соединений с помощью веб-ресурса PASS online/ Д. А. Филимонов, А. А. Лагунин, Т. А. Глориозова [и др.] // Химия гетероциклических соединений. - 2014. - № 3. - С. 483-499.

268. Randhawa P.S. Viral drug sensitivity testing using quantitative PCR: effect of tyrosine kinase inhibitors on polyomavirus BK replication / Randhawa P.S [et al.] // The American Journal of Clinical Pathology. - 2010. - Vol. 134, N 6. - P. 916-920.

269. Halme, M. Verification and quantification of saxitoxin from algal samples using fast and validated hydrophilic interaction liquid chromatography-tandem mass spectrometry method / M. Halme, M.-L. Rapinoja, M. Karjalainen, P. Vanninen // Journal of Chromatography B. - 2012. -Vol. 880. - P. 50-57.

270. Методические рекомендации по сбору и обработке материалов при гидробиологических исследованиях на пресноводных водоемах. Фитопланктон и его продукция / Ред. Г.Г. Винберг, Г.М. Лаврентьева. -Л.: ГосНИОРХ, ЗИН АН СССР, 1988. -32 с.

271. Barón-Sola Á. Detection of potentially producing cylindrospermopsin and microcystin strains in mixed populations of cyanobacteria by simultaneous amplification of cylindrospermopsin and microcystin gene regions / A. Barón-Sola, Y. Ouahid, F. Campo // Ecotoxicology and Environmental Safety. - 2012. - Vol. 75. -P. 102-108.

272. Ballot, А. Paralytic shellfish poisoning toxin-producing cyanobacterium Aphanizomenon gracile in Northeast Germany/ A. Ballot, J. Fastner, C. Wiedner // Applied and Environmental Microbiology. - 2010б. - Vol. 76. - P. 1173-1180.

273. Vaitomaa, J. Quantitative real-time PCR for determination of microcystin synthetase gene E copy numbers for Microcystis and Anabaena in lakes/ J. Vaitomaa, A. Rantala, K. Halinen [et al.] // Applied and Environmental Microbiology. -2003. - Vol. 69. -P. 7289-7297.

274. Rantala, A. Detection of microcystin-producing cyanobacteria in Finnish lakes with genus-specific microcystin synthetase gene E (mcyE) PCR and associations with environmental factors / A. Rantala, P. Rajaniemi-Wacklin, C.Lyra [et al.] // Applied and Environmental Microbiology. -2006. -Vol. 72. - P. 6101-6110.

275. Filimonov, D.A. Probabilistic Approaches in Activity Prediction / D. A. Filimonov, V. V. Poroikov // Chemoinformatics Approaches to Virtual Screening / Eds. A. Varnek, A. Tropsha. -Cambridge, 2008. -P. 182-216.

276. Zhong, H. Computer Software review/ H. Zhong, J. Ph. Bowen // Journal of the American Chemical Society. - 2007. - Vol.129, N 17. - P. 5780.

277. Trott O. AutoDock Vina: improving the speed and accuracy of docking with a new scoring function, efficient optimization and multithreading / O. Trott, A. J. Olson //Journal of Computational Chemistry. - 2010. - Vol. 31. - Р. 455-461.

278. Morris, G.M. Automated Docking Using a Lamarckian Genetic Algorithm and an Empirical Binding Free Energy Function / G. M. Morris, D. S. Goodsell, R. S. Halliday [et al.] // Journal of Computational Chemistry. - 1998. - Vol.19, N 14. -Р. 1639-1662.

279. AUTODOCK [Электронный ресурс] . - Режим доступа : http://www.autodock.scripps.edu.

Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.