Целенаправленный поиск индивидуальных веществ и суммарных композиций, характеризующихся антирадикальной активностью в отношении супероксидного анион-радикала тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 15.00.02, кандидат фармацевтических наук Агаджанян, Владимир Сергеевич

• Агаджанян, Владимир Сергеевич
• кандидат фармацевтических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат фармацевтических наук Агаджанян, Владимир Сергеевич

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ПРИРОДНЫЕ АНТИОКСИДАНТЫ И СОВРЕМЕННЫЕ ПОДХОДЫ К ИЗУЧЕНИЮ МЕХАНИЗМОВ АНТИОКСИДАНТНОГО ДЕЙСТВИЯ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

1.1. РАЗНООБРАЗИЕ ПРИРОДНЫХ АНТИОКСИДАНТОВ.

1.2. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ КВАНТОВО-ХИМИЧЕСКИХ РАСЧЕТОВ ДЛЯ

ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИОКСИДАНТНОЙ АКТИВНОСТИ.

1.3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ АНТИОКСИДАНТНОЙ АКТИВНОСТИ.

1.4. ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ.

ГЛАВА 2. ПОЛУЧЕНИЕ И ХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЙ ФРАКЦИИ ИЗ МЯКОТИ ТЫКВЫ ОБЫКНОВЕННОЙ (CUCURBITA PEPO L.).

2.1. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

2.1.1. Обоснование выбора экстрагента.

2.1.2. Изучение элементного состава.

2.1.3. Аминокислотный состав.

2.1.4. Полисахаридный состав.

2.1.5. Количественное определение антиоксидантов.

2.1.5.1. Определение полифенольных соединений.

2.1.5.2. Количественное определение аскорбиновой кислоты.

2.1.5.3. Количественное определение производных Р-каротина.

2.1.6. Количественное определение производных коричной кислоты.

2.2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

2.2.1. Получение суммарных фракций из мякоти тыквы обыкновенной

2.2.2. Определение антиоксидантной активности.

2.2.3. Определение СОД-протекторной активности.

2.2.4. Определение суммарной концентраций антиоксидантов на жидкостном хроматографе Цвет Яуза 01-АА.

2.2.5. Определение БАВ в исследуемом сухом экстракте.

2.2.5.1. Макро- и микроэлементный состав.

2.2.5.2. Аминокислотный состав.

2.2.5.3. Полисахаридный состав.

2.2.5.4. Полифенольный состав.

2.2.5.5. Производные Р-каротина.

2.2.6. Количественное определение производных коричной кислоты.

2.3. ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ.

ГЛАВА 3. ПРИМЕНЕНИЕ КВАНТОВО-ХИМИЧЕСКИХ МЕТОДОВ АНАЛИЗА ДЛЯ ИНТЕРПРЕТАЦИИ И ПРОГНОЗА АНТИОКСИДАНТНОЙ АКТИВНОСТИ В РЯДУ ГИДРОКСИПРОИЗВОДНЫХ КОРИЧНОЙ КИСЛОТЫ.

3.1. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

3.1.1. Интерпретация антиоксидантной активности.

3.1.2. Обоснование 4-гидрокси-3,5,-ди-трет-бутилкоричной кислоты

3.1.3. Прогноз уровня антиоксидантной активности с помощью программы PASS.

3.1.4. Прогноз метаболизма предлагаемой структуры.

3.1.5. Синтез 4-гидрокси-3,5,-ди-трет-бутшкоричной кислоты.

3.2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

3.3. ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ.

ГЛАВА 4. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ АНТИОКСИДАНТНОЙ АКТИВНОСТИ.

4.1. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

4.1.1. Иммунотропный эффект сухого экстракта мякоти тыквы.

4.1.2. Реактивация эритроцитарной супероксиддисмутазы под влиянием сухого экстракта мякоти тыквы.

4.1.3. Оценка антиоксидантной активности (in vitro) 4-гидрокси-3,5,-ди-трет-бутилкоричной кислоты (дитретоксикора) . 108 4.2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

4.2.1. Генерация супероксидного аион-радикала в реакции аутоокисления адреналина.

4.2.2. Определение СОД-протекторной активности (in vivo).

4.2. ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Целенаправленный поиск индивидуальных веществ и суммарных композиций, характеризующихся антирадикальной активностью в отношении супероксидного анион-радикала»

Актуальность проблемы. Одной из важных задач современной фармацевтической химии является целенаправленный поиск соединений с заданными фармакологическими свойствами. С этой целью используют различные подходы, одним из которых является изучение закономерностей взаимосвязи структура - активность. При таком поиске обязателен учет данных биохимической фармакологии, указывающих на причинно-следственные связи между возникновением патохимических процессов и нарушением функционирования клеточной мембраны. Состояние последней, как известно, существенно зависит от уровня и скорости генерации активных форм кислорода (АФК)* в организме. Вышедшая из-под лимитирующего контроля антиоксидантной системы организма чрезмерная генерация АФК является причиной оксидантного стресса клеток (увеличение перекисного окисления липидов) и, как следствие, приводит к формированию патологий.

Исходной активной формой кислорода в животном организме является супероксидный анион-радикал 02 , на формирование которого в физиологической норме расходуется примерно 2% всего потребляемого кислорода. Большинство же остальных АФК (ОН*, N0*, 02\ С1СГ и др.) в той или иной мере являются продуктами его биотрансформации.

Анализ данных литературы, посвященных антиоксидантам и изучению проявляемой ими активности свидетельствует о том, что их номенклатура ограничена преимущественно препаратами, относящимися к двум группам -донорам протонов (токоферол, пробукол, кислота аскорбиновая) и полиенам (ретинол, каротиноиды). Они не лишены недостатков, так как слабо защищают белки и нуклеиновые кислоты от окислительного повреждения.

Эндогенные антиоксиданты являются важнейшим звеном защитной системы организма, поэтому исследования по целенаправленному поиску индивидуальных веществ и/или суммарных композиций, проявляющих как антирадикальную активность, так и способных предохранять элементы собственной антиоксидантной системы, имеют важное значение.

В настоящее время существует четкая классификация известных антиоксидантов, основанная на структурных признаках молекул, ответственных за проявление антиоксидантных свойств. Учитывая это, можно проводить поиск новых антиоксидантов как путем целенаправленного синтеза, так и созданием оптимальных композиций антиоксидантов на основе природных соединений растительного происхождения.

Одним из таких перспективных и легкодоступных источников суммарных композиций антиоксидантов может служить мякоть плодов тыквы обыкновенной (Cucurbita pepo L.). В литературе до сих пор отсутствуют сведения о наличии в её составе фенольных соединений, однако применение в народной медицине в качестве гепатопротекторного, желчегонного, противовоспалительного средства свидетельствует о наличии данной группы соединений и является достаточным обоснованием для проведения химических и биохимических исследований.

Цель и задачи исследований. Целью наших исследований является химическое и биологическое изучение антиоксидантной активности сухого экстракта из мякоти тыквы обыкновенной, а также выявление взаимосвязи структура-активность 16 индивидуальных производных коричной кислоты, пять из которых являются компонентами данного сухого экстракта.

Для достижения поставленной цели мы сочли целесообразным решение следующих задач:

S с помощью предварительного биохимического скрининга, обосновать выбор растворителя для получения сухого экстракта мякоти тыквы обыкновенной, характеризующегося наибольшей антиоксидантной активностью;

S провести химический анализ сухого экстракта и количественно охарактеризовать в нем основные группы Б AB; S разработать методику количественного определения группы соединений, вносящих существенный вклад в проявляемую сухим экстрактом антиоксидантную активность;

S полуэмпирическими квантово-химическими методами изучить основные индексы реакционной способности производных коричной кислоты в отношении АФК на примере (ЮН) и на их основе обосновать структуру , характеризующуюся более высокой антиоксидантной активностью.

Научная новизна. На основе предварительного биохимического скрининга сухих экстрактов, полученных из мякоти тыквы обыкновенной, установлено, что наибольшей антиоксидантной активностью, а также СОД-протекторной активностью обладает сухой экстракт, полученный после обработки сырья спиртом этиловым 70%. Использование данного экстрагента обеспечивает наибольшую концентрацию антиоксидантов в целевом продукте - 174,9±2,4 мг/г (17,5%) в пересчете на кверцетин.

Впервые методом ВЭЖХ в мякоти тыквы обыкновенной определены галловая, изоферуловая, кофейная, цикоревая и коричная кислоты, а также кверцетин, апигенин, суммарное содержание которых в полученном сухом экстракте составляет 12,8%.

Предложена методика спектрофотометрического определения количественного содержания суммы производных коричной кислоты в исследуемом сухом экстракте (найдено 8,24±0,11% в пересчете на кофейную кислоту). По данным химического анализа в нём определены следующие групп БАВ: аминокислоты - 12,68 г/кг (1,27%); полисахариды: ВРПС -3,36±0,12%, ПВ - 13,43±0,34%, ГцА - 9,89±0,21%, ГцБ - 5,44±0,14%; макро и микроэлементы — 48,78% (в золе); аскорбиновая кислота — 3,98±0,13%; каротиноиды - 1,42±0,04мг/% (0,0014%).

Экспериментально (in vivo) изучены иммунотропная и

СОД-протекторная активности сухого экстракта мякоти тыквы. Установлено дозо-зависимое увеличение IgM-антителогенеза (в дозе 100 мг/кг в 1,71 раза; в дозе 500 мг/кг — 1,85 раза относительно контроля), уменьшение воспалительного эффекта при введении разрешающей дозы антигена (в дозе 100 мг/кг на 9,4%, в дозе 500 мг/кг - 37,5% по отношению к, контролю). Выявлен дозо-зависимый эффект подавления воспалительных реакций, вызванных подкожным введением гистамина и декстрана (в дозе 500 мг/кг на 40,3% и 48,2% соответственно). В эксперименте in vivo установлена протекторная активность сухого экстракта мякоти тыквы обыкновенной по отношению к эритроцитарной Cu-, Zn- супероксиддисмутазе.

Полуэмпирическими квантово-химическими методами (РМЗ и AMI) изучены индексы реакционной способности в ряду гидрокси- и метоксипроизводных коричной в отношении активных форм кислорода. По значениям величин порядков связей, связевых чисел и валентностей соответствующих атомов углерода в анализируемых структурах предложен новый показатель - суммарный индекс ненасыщенности (IUA). Он объективнее отражает способность структуры выступать в качестве «ловушки» свободных радикалов.

В эксперименте in vitro установлено, что антиоксидантная активность индивидуальных производных коричной кислоты достоверно, в среднем на 40%, превышает активность рутина, кверцетина и дигидрокверцетина. По результатам квантово-химических расчетов обоснована структура 4-гидрокси-3,5,-ди-трет-бутилкоричной кислоты, для которой экспериментально выявлен наибольший уровень антиоксидантной активности (Ci/2=9,8±0,4 мкМ), который превышает аналогичный показатель для кофейной (С1/2=15,7±0,4 мкМ), синаповой (Ci/2=17,0±0,3mkM) и 3,4,5-тригидрокси-коричной (С1/2=12,0±0,6мкМ) кислот, а также дибунола (С 1/2=21,2±0,8мкМ).

Сопоставление полученных экспериментальных значений уровня антиоксидантной активности производных коричной кислоты с рассчитанными на основе квантово-химического анализа показателями суммарной ненасыщенности молекулы, позволило выявить линейную зависимость между ними с коэффициентом корреляции 0,911. Такой подход может быть использован в исследованиях по целенаправленному поиску антиоксидантов в ряду других природных соединений.

Практическая значимость работы.

Предложен и обоснован способ получения сухого экстракта из мякоти тыквы обыкновенной. Для его стандартизации разработана методика спектрофотометрического определения гидроксипроизводных коричной кислоты.

Обоснована и экспериментально подтверждена антиоксидантная активность 4-гидрокси-3,5,-ди-трет-бутилкоричной кислоты, превосходящая таковую дибунола в 1,5 раза.

Исходя из количественного содержания суммы антиоксидантов, а также экспериментально установленной СОД-протекторной и имуннотропной активности, сухой экстракт из мякоти тыквы обыкновенной в перспективе может быть рекомендован для последующего исследования.

Внедрение результатов в практику.

Материалы по изучению тыквы обыкновенной и сухого экстракта, полученного из неё, переданы в НИИ питания РАМН для дальнейших совместных исследований. Для дальнейшего более глубокого фармакологического изучения антиоксидантной активности предлагаемый сухой экстракт мякоти тыквы обыкновенной передан в лабораторию микросомального окисления ГУ НИИ Биомедицинской химии им. В.Н. Ореховича РАМН. По материалам исследования составлено учебно-методическое пособие «Активные формы кислорода и природные антиоксиданты», используемого в учебном процессе факультета последипломного образования ПятГФА.

Положения, выдвигаемые на защиту: ^ обоснование выбора растворителя для получения сухого экстракта мякоти тыквы обыкновенной, характеризующегося наибольшей СОД-протекторной и антиоксидантной активностью; ^ результаты исследования качественного и количественного состава сухого экстракта мякоти тыквы; методика количественного определения суммы гидроксипроизводных коричной кислоты в целевом продукте; ^ квантово-химическое обоснование антиоксидантной активности

4-гидрокси-3,5,-ди-трет-бутилкоричной кислоты; ^ корреляционные зависимости между суммарной ненасыщенностью циннамоильного фрагмента в структуре производных коричной кислоты и проявляемой антиоксидантной активностью.

Связь задач с проблемным планом фармацевтических наук.

Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательской работ ГОУ ВПО «Пятигорской ГФА Росздрава», номер государственной регистрации 01.200101060.

Апробация работы и публикации.

Основные положения диссертационной работы изложены на: ^ четвертом международном симпозиуме "Компьютерные методы в токсикологии и фармакологии, включающие интернет-ресурсы СМТР1-2007" (Москва, сентябрь 2007 года); конгрессе "Человек и лекарство" Краснодар -2008г.; > 63-й и 64-й научной конференциях «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» (Пятигорск 2008-2009г.).

По теме диссертации опубликовано 9 работ, в том числе учебно-методическое пособие, используемое в учебном процессе факультета последипломного образования ПятГФА и 2 статьи в журналах, рекомендованных ВАК РФ.

Объем и структура диссертации.

Диссертационная работа изложена на 138 страницах текста компьютерного набора и состоит из обзора литературы, 3-х глав собственных исследований, общих выводов, списка литературы, включающего 160 источников, в том числе 65 иностранных; содержит 30 таблиц, 20 рисунков.

Заключение диссертации по теме «Фармацевтическая химия и фармакогнозия», Агаджанян, Владимир Сергеевич

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. Предварительный биохимический скрининг сухих экстрактов, полученных из мякоти тыквы обыкновенной, показал, что наибольшей антиоксидантной и СОД-протекторной активностью обладает целевой продукт, полученный с использованием спирта этилового 70%. Данный экстрагент обеспечивает наибольшую концентрацию антиоксидантов — 174,9±2,4 мг/г (17,5%) в пересчете на кверцетин.

2. Осуществлен химический анализ сухого экстракта мякоти тыквы обыкновенной, полученного экстракцией спиртом этиловым 70%, и в нем количественно охарактеризованы аминокислоты — 12,68 г/кг (1,27%); полисахариды: ВРПС - 3,36±0,12%, ПВ - 13,43±0,34%, ГцА - 9,89±0,21%, ГцБ - 5,44±0,14%; макро и микроэлементны - 48,78% (в пересчете на золу); аскорбиновая кислота — 3,98±0,13%; каротиноиды — 1,42±0,04мг/% (0,0014%).

3. Изучен полифенольный состав полученного сухого экстракта и установлено, что преобладающими в нем соединениями являются изоферуловая, кофейная, цикоревая, коричная, галловая кислоты, а также апигенин и кверцетин, содержание которых в сумме составляет 128,23 мг/г (12,82%).

4. Предложена методика количественного определения суммарного содержания производных коричной кислоты в исследуемом сухом экстракте, найдено 8,24±0,11% в пересчете на кофейную кислоту.

5. Использование дескрипторов, рассчитанных полуэмпирическими квантово-химическими методами РМЗ и AMI, позволило выявить наиболее реакционноспособные центры в циннамоильном фрагменте. Установлено, что взаимодействие коричной кислоты с гидроксильным радикалом в первую очередь происходит по виниленовому фрагменту (С7-С8) и далее в следующей последовательности С6, CI, С5.

6. Прогноз антиоксидантной активности для индивидуальных гидрокси- и метоксипроизводных коричной кислоты позволил обосновать наибольшую активность для 4-гидрокси-3,5,-ди-трет-бутилкоричной кислоты, что далее было подтверждено экспериментально её синтезом и анализом биологического действия.

7. Установлены иммунотропный эффект сухого экстракта мякоти тыквы обыкновенной, а именно увеличение IgM-антителогенеза (в дозе 100 мг/кг в 1,71 раза; в дозе 500 мг/кг — 1,85 раза относительно контроля), а также уменьшение воспалительного эффекта при введении разрешающей дозы антигена (в дозе 100 мг/кг на 9,4%, в дозе 500 мг/кг - 37,5% по отношению к контролю).

8. В эксперименте in vivo установлена протекторная активность сухого экстракта мякоти тыквы обыкновенной по отношению к эритроцитарной Cu, Zn - супероксиддисмутазе.

9. Сопоставление экспериментально найденных значений уровня антиоксидантной активности производных коричной кислоты с показателем суммарной ненасыщенности молекул, рассчитанным квантово-химическим методом, позволило выявить линейную зависимость между этими параметрами с коэффициентом корреляции 0,911.

Список литературы диссертационного исследования кандидат фармацевтических наук Агаджанян, Владимир Сергеевич, 2009 год

1. Абисалова, И.Л. Изучение радиопротекторного действия феруловойкислоты: автореф. дис. канд. фармац. наук: 14.00.25 / Абисалова

2. Ирина Леонидовна. — Пятигорск, 2004. — 20с.

3. Агаджанян, B.C. Применение квантово-химических методов анализа для интерпретации антирадикальной активности в ряду гидроксипроизводных коричной кислоты / B.C. Агаджанян, Э.Т. Оганесян // Хим. фармац. журн. - 2008. - Т.42, № 11. - С. 12-17.

4. Анионные конденсации 4-(2)-гидрокси-3,5-ди-трет-бутилбензальдеги-дов в присутствии слабых оснований / В.Б. Вольева и др. // Журн. орган, химии. 2008. - Т. 44, вып. 6. - С.814-817.

5. Антиокислительная активность флавоноидов в различных системах перекисного окисления липидов / В.А. Костюк и др. // Биохимия. -1988. Т.53, № 8. - С. 1365-1370.

6. Антиоксидантная активность антигипоксантов, производных тиомочевины, тиадиазола и пиперазина в модельных системах in vitro / И.В. Зарубина и др. // Вопр. биол. мед. и фармац. химии. 2001. -№ 1.-С. 51-55.

7. Антиоксидантная активность сыворотки крови / Г.И. Клебанов и др. // Вестн. Рос. акад. мед. наук. 1999. -№ 2. - С. 15-22

8. Антиоксидантные свойства лекарственных растений / В.Ф. Громовая и др. // Хим. фармац. журн. - 2008. - Т.42, №1. - С. 26-29) '

9. Антиоксидантные свойства производных 3-оксипиридина: мексидола, эмоксипина и проксипина / Г.И. Клебанов и др. // Вопр. мед. химии. 2001. - Т.47, № 3. - С. 5-12.

10. Афанасьев, И.Б. Кислородные радикалы в биологических процессах / И.Б. Афанасьев //Хим.-фармац. журн. 1985. - Т.19, № 1. - С. 11-23.

11. Биотест-системы для первичного скрининга и оценки действия веществ с антиоксидантной активностью / В.А. Дубинская и др. // Вопр. биол. мед. и фармац. химии. 2007. - № 4 - С. 47-52.

12. Вартанян, JI.C. Влияние ионола на метаболизм супероксидных радикалов в печени мышей / JI.C. Вартанян, С.М. Гуревич // Вопр. мед. химии. 1999. - Т.45, № 4. - С, 8-16.

13. Ветров, И.П. Определение содержания липофильных веществ и суммы каротиноидов в растительном сырье / П.П. Ветров, C.B. Гарная, Л.Г. Долганенко // Хим. фармац. журн. 1989. - Т.23, № 3. - С.23-25

14. Взаимодействие синглетного кислорода с биомолекулами. Тушение 02~* глицирретовой кислотой, изоликвиритигенином и их гликозидамиглицирризиновой кислотой и ликуразидом / H.H. Кабальнова и др. // Изв. АН., Сер. хим. 1996. - Т.45, № 1. - С. 57- 59.

15. Владимиров, Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах / Ю.А. Владимиров, А.И. Арчаков. М.: Наука, 1972. — 252 с.

16. Владимиров, Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах / Ю.А. Владимиров // Сорос, образ, журн. 2000. - Т.6, №12 - С. 13-19.

17. Владимиров, Ю.А. Физико-химические основы фотобиологических процессов / Ю.А. Владимиров, А.Я. Потапенко. — М.: Высш. шк., 1989.-199 с.

18. Влияние природного Мальтола на процесс пероксидного окисления липосомальных мембран / И.В. Бабенкова и др. // Вопр. биол. мед. и фарм. химии. 2001. -№ 4. - С. 22-25. ,

19. Влияние экзогенной супероксиддисмутазы на активность супероксиддисмутазы в нейтрофилах и мононуклеарах у больных с острым гепатитом В / М.В. Коробова и др. // Рос. биомед. журн. -2001.-Т.5, №2.-С. 36-39.

20. Воейков, В. JI. Регуляторные функции активных форм кислорода вкрови и в водных модельных системах: автореф. дис.Д-ра биол.наук: 03.00.13; 03.00.02 / Воейков Владимир Леонидович. М., 2003. -44с.

21. Воейков, В. Л. Благотворная роль активных форм кислорода / В.Л. Воейков // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2001. - Т.11, № 4. - С. 128-135.

22. Газиев, А.И. Ликопин — потенциальное средство профилактики рака и сердечно-сосудистой патологии / А.И. Газиев // Вопр. биол. мед. и фармац. химии. — 2001. — № 3. — С. 3-9.

23. Горбунов, А.И. Синтез и окислительно-восстановительные реакции некоторых функциональных производных пространственногзатрудненных фенолов: автореф. дис. канд. хим. наук: 02.00.03

24. Горбунов Андрей Иванович. — Астрахань, 2008. 23с.

25. Государственная фармакопея СССР. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье — 11 изд., доп. / МЗ СССР М.: Медицина, 1990.-Вып. 1,2.

26. Гуляева, Н.В. Механизм функционирования супероксиддисмутазы: многоцентровая модель / Н.В. Гуляева, А.Б. Обидин, Б.С. Маринов // Изв. акад. наук СССР. Сер. биол. 1989. - №6 - С. 890-898.

27. Двойное потенцирование ишемической болезни сердца- активными формами кислорода и антиоксиданты / А.Х. Коган и др. // Вопросы биол. мед. и фармац. химии. 2002. - №2. - С. 3-7.

28. Дмитриев, Л.Ф. О механизме взаимодействия токоферола с перекисными радикалами / Л.Ф. Дмитриев, М.И. Верховский // Биохимия. 1990. - Т.55, вып. 11 - С. 2025-2029.

29. Дмитриев, Л.Ф. Радикальные состояния и циклические превращения липидов в биологических мембранах: дис. . д-ра биолог, наук: 03.00.02/ Дмитриев Леонид Федорович. М., 1997. - 72с.

30. Дорожко, А.И. Хелатирующее и антирадикальное действие рутина в процессе перекисного окисления липидов микросом и липосом

31. А.И. Дорожко, A.B. Бродский, И.Б. Афанасьев // Биохимия. 1988. -Т. 53, № 10.-С. 1660-1666.

32. Досон, Р. Справочник биохимика / Р. Досон, Д. Эллиот, У. Эллиот, К. Джонс М.: Мир, 1991.-544 с.

33. Дурнев, А.Д. Роль свободных радикалов кислорода в мутагенных эффектах лекарств и других ксенобиотиков / А.Д. Дурнев, С.Б. Середенин // Хим.-фармац. журн. 1990. - Т.24, № 10. - С. 7- 14.

34. Дьяков, A.A. Противоаритмическое действие феруловой кислоты / A.A. Дьяков, В.Н. Перфилова, И.Н. Тюренков // Вестн. аритмологии. -2005.-№39.-С. 49-52.

35. Дьякова, И.Н. Экспериментальное исследование церебропротекторныхсвойств феруловой кислоты в условиях ишемии мозга: автореф. дис.канд. фарм. наук: 14.00.-25 / Дьякова Ирина Николаевна. Пятигорск., 2007. - 24с.

36. Зайцев, В.Г. Модельные системы перекисного окисления липидов и их применение для оценки антиоксидантного действия лекарственныхпрепаратов: автореф. дис. канд. биол. наук: 03.00.16; 03.00.02

37. Зайцев Валерий Геннадьевич. Волгоград, 2001. - 23с.

38. Зайцев, В.Г. Связь между химическим строением и мишенью действия как основа классификации антиоксидантов прямого действия / В.Г. Зайцев, О.В. Островский, В.И. Закревский // Эксперим. клин, фармакология.- 2003- Т.66, № 4 С.66-70.

39. Запрометов, М.Н. Фенольные соединения: распространение, метаболизм и функции в растениях / М.Н. Запрометов М.: Наука, 1993.-272 с.

40. Зиновьева, В.Н. Коррекция мутагенного действия кверцетина природными и синтетическими фенолсодержащими аминокислотами / В.Н. Зиновьева, A.A. Спасов // Вопросы биол. мед. и фармац. химии. 2005. — №1. — С. 45-47.

41. Зиятдинова, Г.К. Определение флавонолов в фармпрепаратах методом вольтамперометрии / Г.К. Зиятдинова, Г.К. Будников // Хим. фармац. журн. - 2005. - Т.39, №10. - С. 54-56.

42. Интернет-система прогноза спектра биологической активности химических соединений / В.В. Поройков и др. // Хим. фармац. журн. - 2002. - Т.36, №10. - С. 21-26.

43. Использование квантово-химических методов для обоснования антирадикального1 (ОН') действия полигидроксихалконов / Э:Т. Оганесян и др.*// Хим. фармац. журн. - 2002. - Т. 36', №12 - С. 21-25.

44. Исследование антиоксидантных свойств каталазы и супероксиддисмутазы методом вольтамперометрии / Е.И. Короткова и др. // Хим. фармац. журн. - 2008. - Т.42, №8. - С. 45-48. •

45. Исследование взаимосвязи структура — антиоксидантная активность в ряду флавоноидов. Антиаллергическая активность халконов / Э.Т. Оганесян и др. // Хим. фармац. журн. - 1991. - Т. 25, №8 — С. 18-22.

46. Ковалев, И.Е. Ковалентное связывание ксенобиотиков с белками организма как механизм адаптации / И.Е. Ковалев Н.В. Щипулина // Хим-фармац. журн. 1996 -Т.30, № 11. - С. 3-12. .

47. Количественное определение суммы гидроксикоричных кислот в надземной части Echinacea purpurea (L.) Moench / В. А. Куркин и др. // Раст.ресурсы. 1998. - Т.34, вып. 2. - С.81-85.

48. Компьютерный прогноз и направленный синтез нового производного бетулина, обладающего противотуберкулезным действием / А.В. Погребняк и др. // Хим. фармац. журн. - 2002. — Т. 36, №10 — С. 18-23.

49. Коренман, И.М. Фотометрический анализ. Методы определения органических соединений / И.М. Коренман. — М.: Химия, 1975. — 360с.

50. Короткова, Е.И. Новый вольтамперометрический способ определения активности антиоксидантов / Е.И1 Короткова, Ю.А. Корбаинов, О.А. Аврамчик // "Биоантиоксидант"; тез. докл. VI междунар. конф. 16-19 апр. 2002 г. М., 2002. - С. 298-299.

51. Костюк, В. А. Простой и чувствительный метод определения активности супероксиддисмутазы, основанный на реакции окисления кверцитина / В.А. Костюк, А.И. Потапович, Ж.В. Ковалева // Вопр. мед. химии. 1990. - Т.22, №2 - С. 88-91.

52. Кочетков, Н.К. Химия биологически активных соединений / Н.К. Кочетков. М., 1970. - 486с.

53. Кулинский, В.И. Активные формы кислорода и оксидативная модификация макромолекул: польза, вред защита / В.И. Кулинский // Сорос, образ, журн. 1999. - №1 - С. 2-7.

54. Ландау, М.И. Неточности и ошибки, встречающиеся в работах, посвященных количественным соотношениям между структурой и биологической активностью химических соединений / М.И. Ландау //

55. Хим.-фармац. журн. 1982. - Т.16, № 9. - C.l 12-114.

56. Лужков, В.Б. Квантово-химические расчеты инибиторов окисления. I. Молекулярная структура, энергии связей и реакционная способность природных полифенолов из класса флавоноидов / В.Б. Лужков // Журн. орган, химии. 1991.-Т. 61, № 9.-С. 1937-1842.

57. Магин, Д.В. Простой метод измерения активности супероксиддисмутазы с помощью фотосенсибилизированной хемилюминесценции / Д.В. Магин, Г. Левин, И.Н. Попов // Вопр. мед. химии. 1999. - Т.45, №1. - С. 23-34.

58. Максименко, A.B. Внеклеточное оксидативное поражение сосудистой стенки и её ферментативная антиоксидантная защита / A.B. Максименко // Хим. фармац. журн. - 2007. - Т. 41, №5 - С. 3-12.

59. Мальцев, Ю.А. Применение квантово-химических методов для анализа антирадикальной активности флавоноидов и обоснования синтезаполигидроксихалкнов: автореф. дис. канд. фарм. наук: 15.00.02 /

60. Мальцев Юрий Александрович. — Пятигорск., 2000. 23с.

61. Матасова, С.А. Химический состав сухого водного экстракта из шрота шиповника / С.А. Матасова, Г.Л. Рыжова, К.А. Дычко // Химия растит, сырья. 1997. - Т.1, №2. - С. 28-31.

62. Машковский, М.Д. Лекарственные средства: в 2 т. / М.Д. Машковский. 14-е изд., перераб. и доп. - М.: Новая волна, 2000. - 2 т.

63. Методика определения антиоксилительной активности химических соединений / С.Г. Благородов и др. // Хим. фармац. журн. - 1987. -Т. 21, №3.- С. 292-294.

64. Минкин, В.И. Теория строения молекул / В.И. Минкин, Б.Я. Симкин, P.M. Миняев. Ростов-н/Д: Феникс, 1997. - 327с.

65. Новиков, К.Н. Роль активных форм кислорода в биологических системах при воздействии факторов окружающей среды: автореф.- дис. . д-ра биол. наук: 03.00.16; 03.00.02 / Новиков Кирилл Николаевич. -М., 2004.-46с.

66. О влиянии биологически активных веществ на антиоксидантную активность фитопрепаратов / Е.И. Шикарина и др. // Хим. фармац. журн. - 2001. - Т. 35, №6.- С. 40-47.

67. Оганесян, Э.Т. Исследования механизма реакции производных флавона с гидроксильным радикалом полуэмпирическими методами / Э.Т. Оганесян, Ю.А. Мальцев, Д.Е. Творовский // Журн. общей химии.-2001.-Т. 71, вып. 6.-С. 999-1005.

68. Определение антиоксидантной активности экстрактов растительного сырья методом катодной вольтамперометрии / Е.И. Короткова и др. // Хим. фармац. журн. — 2003. - Т.37, №9. - С. 55-56.

69. Пат. 2139306 Российская федерация, С 09 В 61/00. Способ получения модифицированного каротиноидного красителя из растительного сырья / В.М. Болотов и др. (РФ). № 98114475/13; заявл. 20.07.1998; опубл. 10.10.1999, Бюл. №28.-4с.

70. Пат. 2238554 Российская Федерация, МКИ G01 N33/15 N27/26. Способ определения суммарной антиоксидантной активности биологически активных веществ / В.П. Пахомов и др. (РФ). — № 2003123072/15; заявл. 25.07. 03; опубл. 20.10.04, Бюл. № 15. Зс.

71. Перфилова, В.Н. Кардиопротективное действие феруловой кислоты при стрессорном повреждении сердца / В.Н. Перфилова, A.A. Дьяков, И.Н. Тюренков // Эксперим. и клинич. Фармакология. 2005. - Т. 68, №5.-С. 19-22.

72. Подопригорова, В.Г. Оксидативно-антирадикальные параметры контроля течения бронхиальной астмы / В.Г. Подопригорова, A.A. Бобылев, Т.С. Максакова // Вопросы биол. мед. и фармац. химии. -2007. №4. - С. 44-49.

73. Применение никотинамида и других антиоксидантных препаратов в комплексной терапии сахарного диабета 2 типа / Н.И. Фадеева и др. // Сахарный диабет. 2001. - №1. - С. 16-22

74. Роль перекисного окисления в повреждении липидов мембран приишемии печени / Л.Б.Дудник и др. // Вопр. мед. химии. 1981. - № 3. -С.380 — 382.

75. Роль процессов свободнорадикального окисления в патогенезе инфекционных болезней / А.П. Шепелев и др. // Вопр. мед. химии. — 2000. — Т.46, №2 — С. 7-13.

76. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / под ред. В.П. Фисенко, Е.В. Арзамасцева. — М.: Ремедиум, 2000. — 398 с.

77. Синтез производных халкона и качественная оценка корреляции структура-активность / Э. Т. Оганесян и др. // Хим. фармац. журн. -1986. Т.20, № 6. - С.696-702.

78. Сирота, Т.В. Новый подход в исследовании процесса аутоокисления адреналина и использование его для измерения активности-супероксиддисмутазы / Т.В. Сирота // Вопр. мед. химии. — 1999. — Т.45, №3.-С. 23-34.

79. Спектрофотометрическое определение гидроксикоричной кислоты и её производных в препаратах эхинацей / О. А. Запорожец и др. // Хим. фармац. журн.-2003.-Т.З7, № 12.-С. 11-14. *

80. Сравнительное изучение антиоксидантной активности витаминов А, Е и ß-каротина / И.В. Кутузова и др. // Фармация. 2004. — № 4. — С. 15-18.

81. Сучков, В.П. Биохимическая роль селена в организме животных / В.П. Сучков, Ц.М. Штутман, А.Г. Халмурадов // Укр. Биохим. Журн. 1978. - Т.50, № 5. С. 659-671.

82. Теоретический метод прогнозирования биологической активности суммарных растительных препаратов на основе алгоритма MATRIX / A.B. Погребняк и др. // Хим. фармац. журн. - 2004. - Т. 38, № 9. -С. 19-25.

83. Тимергазин, К.К. Квантово-химические расчеты энергии диссоциации связи С-Н в углеводородах, спиртах, и простых эфирах

84. K.K. Тимергазин, С.JT. Хурсан // Изв. АН. Сер. химич. 1996. - № 12.1. С.2858-2861.

85. Тимергазин, К.К. Энтальпии образования и прочности связей О-О и С-О в полиоксидах / К.К. Тимергазин // Изв. АН. Сер. химич. 1996. — № 9. - С.2190-2193.

86. Уротропиновый синтез производных 3,5-ди-трет-бутилсалициловой кислоты / В.Б. Вольева и др. // Журн. орган, химии. — 2007. — Т. 43, вып. 10.-С.1495-1498.

87. Филимонов, Д.А. Прогноз спектров биологической активности органических соединений / Д.А. Филимонов, В.В. Поройков // Рос. хим. журн. 2006. - Т.50, №2. - С. 66-75.

88. Хэнч, К. Об использовании количественных соотношений струкура — активность (КССА) при конструировании лекарств / К. Хэнч // Хим. -фармац. журн. 1980. - Т.14, №10. - С. 15-29.

89. Целенаправленный поиск веществ с заданными фармакологическими свойствами / Э. Т. Оганесян и др. // Кубанск. науч. мед. вестн. 2009.2. С.37-40.

90. Чугасова, В. А. Антиоксиданты природные и синтезированные / В.А. Чугасова // Косметика и медицина. — 1998. №2. - С. 18-23.

91. Шашкина, М.Я. Биодоступность каротиноидов / М.Я. Шашкина, П.Н. Шашкин, A.B. Сергеев // Вопр. мед. химии. 1999. - Т.45, №2 - С. 3246.

92. Электронное строение и химические превращения пероксидов. MINDO/3 расчеты геометрии и энтальпий образования основного состояния органических и элементоорганических перекисей / В. Н. Кокорев и др. // Журн. струк. химии. 1981. - Т. 22, № 4. -С.9-15.

93. Яшин, А.Я. Прибор для определения антиоксидантной активности растительных лекарственных экстрактов и напитков / А.Я. Яшин,

94. Я.И. Яшин // Журн. междунар. информационная система по резонансным технологиям — 2004. — №34. — С.10-14.

95. A quantum chemical explanation of the antioxidant activity of flavonoids/ Ven Acker S.A. et al. // Chem. Res. Toxicol. 1996. - Vol. 9. - P. 13051312.

96. Additional antilipoperoxidant activities of alpha-tocopherol and ascorbic acid on membrane-like systems are potentiated by rutin / Negre-Salvayre A. et al. // Pharmacology. 1991. - Vol. 42, № 5. - P. 262-272.

97. Agawal, R. Rapid, fluorimetric-liquid chromatographic determination of malondialdehyde in biological samples / R. Agawal, S.D. Chase // J. Gromatogr. B. Analyt. Technol. Biomed. Life Sci. 2002. - Vol. 775. -P.121-126.

98. AMI: A new general purpose quantum mechanical molecular model / MJ.S. Dewar et al. // J. Am. Chem. Soc. 1985. - Vol. 107. - P.3902 -3909.

99. Antioxidant activity of natural flavonoids is governed by number and location of aromatic hydroxyl groups / Chem Z.Y. et al.// Chemistry and physics of lipids. 1996. - Vol.79. - P. 157-163.

100. Antioxidant and prooxidant behavior of flavonoids: Structure-activity relationships / R.L. Prior et al. // Free Radic. Biol. Med. 1997. -№ 22. -P.749-760.

101. Antioxidant properties of hidroxy-flavones / N. Cotelle et al. // Free Radic. Biol. 1996.-Vol. 20.-P. 35-43.

102. Antioxidative activity of 5,6,7,8-tetrahydrobiopterin and its inhibitory effect on paraquat-induced cell toxicity in cultured rat hepatocytes / S. Kojima et al. //FreeRadic. Res. 1995. - Vol.23, №5. - P. 419-430.

103. Antioxidative effects of pumpkin seed (Cucurbita pepo) protein isolate in CC14-Induced liver injury in low-protein fed rats / C.Z. Nkosi CZ et al. // Phytother Res. 2006. - Vol.20, №11 - P. 935-940.

104. Antioxydant and pro-oxidant actions of flavonoids: effects on DMA damage induced by nitric oxide, peroxynitrite and nitroxyl anion / Ohshima H. et al.// Free Radic Biol Med. 1998. - Vol. 25, № 9. - P. 1057-1065.

105. Antiprotozoal activities determined in vitro and in vivo of certain plant extracts against Histomonas meleagridis, Tetratrichomonas gallinarum and Blastocystis sp. / E. Grabensteiner et al. // Parasitol Res. 2008. -Vol.103, № 6.-P.1257-1264.

106. Ascorbic acid conjugates isolated from the phloem of Cucurbitaceae / R.D. Hancock et al. // Phytochemistry 2008. - Vol.69, № 9. - P. 18501858.

107. Beyer, G. Effects of selected flavonoids and caffeic acid derivatives on hypoxanthine-xanthine oxidase-induced toxicity in cultivated human cells / G. Beyer, M.F. Melzig // Planta Med. 2003. - Vol. 69. - P. 1125-1129.

108. Cadenas, E. Basic mechanisms of antioxidant activity / E. Cadenas // Biofactors. 1997. - Vol.6, №> 4. -P.391-397.

109. Caili, F. A review on pharmacological activities and utilization technologies of pumpkin / F. Caili, S. Huan, L.Quanhong // Plant Foods Hum. Nutr. -2006. Vol.61, № 2. - P.73-80.

110. Chemical composition and antioxidant activity of an acidic polysaccharide extracted from Cucurbita moschata Duchesne ex Poiret / X. Yang et al. // J. Agric. Food Chem. 2007. - Vol.55, № 12. - P.4684-4690.

111. Chemistry and biochemistry of 4-hydroxynonenal, malonaldehyde and related aldehydes / H. Esterbauer et al. // Free Radic. Biol. Med. 1991. -№ 11. — P.81-128.

112. Chirico, S. High-performance liquid chromatography-based thiobarbituric acid tests / S. Chirico // J. Biol. Chem. 1999. - Vol. 274, № 1. P.471-477.

113. Cooperation of quercetin with ascorbate in the protection of photosensitized lisis of human erytrocytes in the presence of hematoporhpyrin / Y. Sorata et al. // Photochem. and Photobiol. 1988. - Vol. 48, №2. - P. 195-199.

114. Cunningham, A. J. Studies on the cellular basis of IgM immunological memory. The induction of antibody formation in bone marrow' cells by primed spleen cells / Cunningham A.J. // Immunology 1969. - Vol.17, № 6.-P. 933-942.

115. Deng, W. Flavonoids function as antioxidants: by scavenging oxygen species or by chelating iron / W. Deng, X. Fang, J. Wu// Radiat. Phys. Chem. 1997.-Vol. 50.-P. 271-276.

116. Detection of free radicals produced from reactions of lipid hydroperoxide model compounds with Cu(II) complexes by ESR spectroscopy / J. Ueda et al. // Arch. Biochem. Biophys. 1996. - Vol.325, №1. - p. 65-67.

117. Discriminating between drugs and nondrugs by prediction of activity spectra for substances (PASS) /S. Anzali et al. // J. Med. Chem. 2001. - Vol. 44, № 15.-P. 2432-2437.

118. Dreikorn, K. The role of phytotherapy in treating lower urinary tract symptoms and benign prostatic hyperplasia / K. Dreikorn // World J. Urol-2002. Vol.19, № 6. - P.426-435.

119. Efficacy of hypochlorous acid scavengers in the prevention of protein carbonyl formation / M.G. Traber et al. // Arch. Biochem. Biophys. 1996. - Vol.327, №2 - P. 330-334.

120. Essentiality of the active-site arginine residue for the normal catalytic activity of Cu, Zn superoxide dismutase /С. L. Borders et al. // Biochem. J. 1985.-Vol. 230-P. 771-776.

121. Evaluation and comprasion of two improved techniques for the on-line detection of antioxidants in liquid chromatography eluates / A.J. Dapkevicius et al. // Chromatog. 2001. - Vol. 912 - P. 73-82.

122. Extraction and chromatography of carotenoids from pumpkin / J.S. Seo et al. // J Chromatogr. A. 2005. - Vol.73, № 2. - P.371-375.

123. Finkel, T. Oxidants, oxidative stress and the biology of ageing. / T. Finkel, NJ. Holbrook // Nature. 2000. - Vol. 408(6809). - P. 239• 247.

124. Flavonoids as antioxidants: determination of radical-scavenging efficiencies/ Bors W. et al. // Methods Enzymol. 1990. - Vol. 186. - P. 343-355.

125. Floyd, R.A. Free radical damage to protein and DNA: mechanisms involved and relevant observations on brain undergoing oxidative stress / R.A. Floyd, J.M. Carney //Ann. Neurol. 1992. - № 32. - P. 22-27.

126. Frankel, E.N. Formation of malonaldehyde from lipid oxidation products / E.N. Frankel, W.E. Neff// Biochim. Biophys. Act. 1983. - Vol. 754. -C.264-270.

127. Hadaroglu, H. Antioxidant and radical scavenging properties of Iris Germanica / H. Hadaroglu, Y. Demir, N. Demir // Хим. фармац. журн. -2007.- T.41, №8. - С. 13-18.

128. Halliwell, В. Antioxidant defence mechanisms: from the beginning to the end (of the beginning) / B. Halliwell // Free Radic. Res. 1999. - Vol. 31, №4.-P. 261-272.

129. Halliwell, B. Role of free radicals and catalytic metal ions in human disease: an overview / B. Halliwell, J.M. Gutteridge // Methods Enzymol. 1990. -Vol. 186-P. 80-85.

130. Hanasaki, Y. The correlation between active oxygen scavenging and antioxidative affects of flavonoids / Y. Hanasaki, S. Ogawa, S. Fukui // Free Radic. Biol. Med. 1992. - Vol. 16. - P.605-608.

131. In vitro antioxidant properties of Cucurbita pepo L. male and female flowers extracts / L. Tarhan et al. // Plant Foods Hum. Nutr. 2007. - Vol.62, № 2. -P.49-51.

132. Iron coordination by catechol derivative antioxidants / T. Kawabata et al. // Biochem. Pharmacol. 1996. - Vol. 51, №11. - P. 1569-1577.

133. Jung Hoon Kang Modification and inactivation of human Cu, Zn -superoxide dismutase by methylglyoxal / Jung Hoon Kang // Mol. Cells. -2003. Vol. 15, №2 - P. 194-199.

134. Knight, J.A. Specificity of the thiobarbituric acid reaction: its use in studies of lipid peroxidation / J. A. Knight, R.K. Pieper, L. McClellan // Clin. Chem. 1988. - Vol.34. - P.2433-2438.

135. Liebler, D.C. Antioxidant reactions of beta-carotene: identification of carotenoid-radical adducts / D.C. Liebler, T.D. McClure // Chem. Res. Toxicol. 1996.-Vol. 9, № 1. — P.8-11.

136. McCord, J.M. An enzyme-based theory of obligate anaerobiosis: the physiologicalfunction of superoxide dismutase / J. M. McCord, B.B. Keele, I. Fridovich // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1971. - Vol. 68, № 5. - P. 10241027.

137. McCord, J.M. Superoxide dismutase. An enzymic function for erythrocuprein / J. Ml McCord, I. Fridovich // The J. of Biolog. Chem. -1969. Vol. 244, № 22 - P. 6049-6055.

138. Misra, Hara P. The generation of superoxide radical during the autoxidation of hemoglobin / Hara P. Misra, I. Fridovich // The J. of Biolog. Chem. -1972. Vol. 247, № 21. - P. 6960-6962.

139. Patel, M. Metalloporphyrin class of therapeutic catalytic antioxidants / M. Patel, B J. Day // Trends Pharmacol. Sci. 1999. - № 20. - P. 359-364.

140. Peyrat-Maillard, M.N. Determination of the antioxidant activity of phenolic compounds by coulometric detection / M.N. Peyrat-Maillard, S. Bonnely, C. Berset//Talanta. -2000. Vol.51, № 4. - P. 709-716.

141. Raha, S. Mitochondria, oxygen free radicals, disease and ageing. / S. Raha, B.H. Robinson // Trends Biochem. Sci. 2000. - Vol. 25, №10. -P. 502- 508.

142. Ramakrishnan, N. Ebselen inhibition of apoptosis by reduction of peroxides / N. Ramakrishnan, J.F. Kalinich, D.E. McClain // Biochem. Pharmacol. -1996.-Vol. 51, № 11.-P. 1443-1451.

143. Rice-Evans, C.A. Current status of antioxidant therapy / C.A. Rice-Evans, A.T. Diplock // Free Radic. Biol. Med. 1993. - № 15. - P. 77-96.

144. Sarkar, S. Effect of ripe fruit pulp extract of Cucurbita pepo L. in aspirin induced gastric and duodenal ulcer in rats / S. Sarkar, D. Buha // Indian J. Exp. Biol.- 2008. Vol.46, № 9. - P.639-645.

145. Sies, H. Biological redox systems and oxidative stress / H. Sies // Cell. Mol. Life Sci.-2007.-Vol.64, №17- P. 2181-2188.

146. Sinner, M. The chromatographic behavior of polysaccharides / M. Sinner, J.J. Puis // J. Chromatogr. 1978. - Vol. 156, №1. - P. 194-204.

147. Stewart, J.J.P. Optimization of parametrs for semi-empirical methods. AM1-Metod / J.J.P. Stewart // J. Comp. Chem. 1989. - Vol. 10. - P. 221-223.

148. Subcellular localization of superoxide dismutase in rat liver / P.J. Chantal et al. // Biochem. J. 1975. - Vol. 150 - P. 31-39.

149. Synergistic antioxidative effects of tocopherol and ascorbic acid in fish oil / H.Q. Shin et al. // J. Am. Oil Chem. Soc. 1991. - Vol. 5, № 8. - P. 881-883.

150. Synergistic interactions between vitamin A and vitamin E against lipid peroxidation in phosphatidylcholine liposomes / L. Tesoriere et al. // Arch. Biochem. Biophys. 1996. - Vol. 326, № 1. - P. 57-63.

151. Tadolini, B. Carvedilol inhibition of lipid peroxidation. A new antioxidative mechanism / B. Tadolini, F. Franconi //Free Radic. Res. 1998. - Vol. 29, № 5. - P. 377-387.

152. The dark side of dioxygen biochemistry / J.S. Valentine et al. // Curr. Opin. Chem. Biol. 1998. - №2. - P. 253-262.

153. Uchida, K. Identification of oxidized histidine generated at the active site of Cu, Zn-superoxide dismutase exposed to H202 / K. Uchida, S. Kawakishi// The J. of Biolog. Chem. 1994. - Vol. 269, № 4. - P. 2405-2410.

154. Validation of analytical procedure: methodology Q2B / Intern, conf. on for human use. Geneva: ICH Secretariat, 1996. - 8 p.1. УТВЕРЖДАЮ»1. АКТ О ВНЕДРЕНИИ

155. Предмет внедрения: Получение биологически активной субстанций из мякоти плодов тыквы обыкновенной (Cucurbita pepo L.)

156. Кем предложен: Агаджанян B.C. аспирант кафедры органической химии ГОУ ВПО Пятигорской государственной фармацевтической академии, Россздрава.

157. Источник информации: Материалы диссертационной работы B.C. Агаджаняна «Целенаправленный поиск индивидуальных и суммарных веществ, характеризующихся антиоксидантной активностью»

158. Кем и где выдано: Научно-исследовательский институт питания Российской академии медицинских наук, г. Москва, Устьинский проезд, дом 2/14

159. Цель внедрения: Расширение ассортимента и структуры отечественных БАД к пище и фитопрепаратов лечебного и профилактического назначения.

160. Ответственные за внедрение: старший научный сотрудник ПИИ питания РАМН- СУХАНОВ Борис Петрович профессор, доктор медицинских наук

161. Подпись руки ^се^е^е/^о^ /Ь /7"

162. Кем предложен: Агаджанян B.C. аепирант кафедры органической химии ГОУ ВПО Пятигорской государственной фармацевтической академии Росздрава

163. Источник информации: Материалы диссертационной работы B.C. Агаджаняна

164. Целенаправленный попек индивидуальных и суммарных веществхарактеризующихся антирадикальной активностью, в отнощенни супероксидного анион-радикала».

165. Кем и где выдано: Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт биомедицинской химии им. В.Н. Ореховича РАМН.

166. Цель внедрения: Дальнейшее более rjrv6nmPиилее глубокое химико-аналитическоефармакологическое изучение предлагаемой субстанции.

167. Ответственные за внедрение: заведующая лабораторией микросомального окисления д.б.н. И.И. Карузина

168. Зав. лаб. микросомального окисления, д.б.н.1. И.И. Карузина

169. УТВЕРЖДАЮ» Ректо^ГОУ ВПО «Пятигорская ¡ая фармацевтическая Росздрава»1. М.В. Гаврилин 2009 г.1. АКТ О ВНЕДРЕНИИ

170. Предмет внедрения: Научно-исследовательская работа, по применению методик квантово-химических расчетов для прогнозирования антирадикальной активности соединений, а также результаты экспериментального изучения антиоксидантной активности.

171. Кемпредложен: Агаджанян B.G. аспирант кафедры органической химии ПятГФА, Муцуева С. X. доцент кафедры фармации ФИО, кандидат фармацевтических наук

172. Источник информации:; Материалы диссертационной работы B.C. Агаджаняна «I Целенаправленный поиск индивидуальных и суммарных веществ- характеризующихся антирадикальной активностью в отношении супероксидного анион-радикала»

173. Кем и где выдано: г. Пятигорск, факультет последипломного образования1 при Пятигорской государственной фармацевтической академии Росздрава,

174. Ответственные за внедрение: Денисенко ОЛН., декан факультета последипломного образования; доктор фармацевтических наук, профессор;

175. Результаты внедрения: ' По результатом научно-исследовательской работы составлено учебно-методическое пособие «АКТИВНЫЕ ФОРМЫ КИСЛОРОДА И ПРИРОДНЫЕ АНТИОСКСИДАНТЫ»