Цитогенетическая нестабильность и активность лейкоцитарных ферментов у млекопитающих тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.15, кандидат биологических наук Амбурладзе, Роман Вячеславович

• Амбурладзе, Роман Вячеславович
• кандидат биологических наук
• 1999

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Амбурладзе, Роман Вячеславович

Содержание

Список сокращений

Введение

1. Обзор литературы

1.1. Анализ состояния стабильности генома с помощью

микроядерного анализа

1.2 Использование микроядерного теста при.радиационном поражении млекопитающих

1.3 Размер микроядер

1.4. Показатели состояния иммунитета

1.4.1 Организация иммунного ответа на клеточном уровне

1.4.2 Показатели состояния иммунной системы дегидрогиназы лимфоцитов

2. Собственные исследования

2.1. Материалы и методы

2.1.1 Объект исследования

2.1.2. Методика приготовления препаратов периферической

крови

2.1.3. Предмет и проведение микроядерного анализа

2.1.4. Определение активности дегидрогеназ лимфоцитов

2.1.5. Определение активности 1И- гена

2.1.6. Определение размера ядер Т- и В- лимфоцитов

2.1.7. Статистические методы

2.2. Результаты исследований

2.2.1.Частота полихроматофилов с микроядрами у самцов

мышей после радиоактивного облучения и размер микроядер

2.2.2. Размер микроядер эритроцитов быков производителей и их иммунологические показатели

2.2.3. Размеры ядер Т- и В- лимфоцитов у трансгенных

свиней

Обсуждение

Выводы и практические предложения

Список литературы

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Цитогенетическая нестабильность и активность лейкоцитарных ферментов у млекопитающих»

Введение.

В последние десятилетия центральной задачей биологии, без решения которой невозможно представить глубокое понимание всей сложности организации живой материи, стало комплексное, всестороннее и многоуровневое изучение геномов живых организмов. Одно из направлений данных исследований представляет собой изучение хроматина в динамике различных стадий клеточного цикла. На сегодняшнее время наиболее эффективные шаги по этому пути связаны с различными физическими, химическими и биологическими воздействиями на геном с последующим анализом процессов, происходящих в связи с реакцией живого организма в целом на индуцирующие агенты. Как раз к таким методам и относиться изучение радиобиологического эффекта с помощью сопоставления изменений, которые происходят в интерфазном хроматине и структурных изменениях хромосом. Для этих целей самым подходящим объектом являются организмы, наиболее изученные с молекулярной,генетической и цитогенетической .точек зрения; к числу которых относится, прежде всего, мышь.

Кроме того в настоящее время остро стоит проблема необходимости проведения эффективного, быстрого и недорогого генетического мониторинга с целью оценки стабильности генома при различных мутагенных воздействиях на человека и сельскохозяйственных животных.

В настоящее время ощущается недостаток доступных, быстрых и эффективных тестов для конструирования

универсальных биоиндикаторных систем оценки нестабильности генома на предмет генетической опасности. Это приобретает важное значение при проведении биологической дозиметрии, особенно после крупных аварий, когда необходимо сделать заключение о биологической дозе облучения больших популяций человека и животных. Сложными методами такой мониторинг провести невозможно, средства, необходимые для этого равняются примерно годовому бютжету самой крупной страны мира - США. Та же проблема стоит, при необходимости контроля биологической дозы облучения и характера повреждающего воздействия радиации, когда проведение широкомаштабного анализа не позволяют условия, например на подводных и надводных ядерных кораблях.

Одним из таких походов для этих целей мог бы стать микроядерный тест, если бы не его существенные недостатки. Показано, что после окраски красителем Романовского- Гимза, особенно после значительных мутагенных воздействий, трудно бывает отличить истинные микроядра от артефактов. Применение же окраски флюорохромами делает тест дорогим, и для анализа препаратов необходима сложная микроскопическая техника. Кроме того установлено, что у млекопитающих эритроциты с микроядрами имеют неправильную форму в следствии чего исключаются из кровотока, что снижает возможности применения данного подхода. К тому же, микроядерный тест не способен, в большинстве случаев, выявлять индивидуальные различия у животных и человека после радиационного воздействия.

В связи с этим весьма перспективна разработки более эффективный методики на основе микроядерного теста который

бы не имел указанных недостатков. С другой стороны, большой интерес представляет одновременное выявление стабильности генома и состояния иммунной системы. Знания полученные таким образом могут оказать весьма ценные услуги в коррекции иммунной системы у экономически важных видов животных.

Иммунная недостаточность является одной из наиболее распространённых форм патологии новорождённого молодняка с/х животных, определяющая риск развития многих заболеваний: инфекционных, аллергических, аутоимунных, злокачественных и других. В постнатальный период иммунная недостаточность усугубляется в условиях воздействия неблагополучных экологических факторов, что проявляется в действии индуцирующих агентов (химических, физических, биологических) на живой организм в целом и геном, в частности.

Таким образом неслучайно, в законе об охране продуктивных животных подписанным целым рядом стран Европы в Страсбурге в 1990 году предусматривается разработка и применение имеющихся биоиндикаторных тестов для контроля за состоянием энергетического метаболизма клеток иммунной системы и процессов структурного изменения хромосом, которые происходят в интерфазном хроматине. В месте с тем, целесообразно и' разработка систем иммуннокоррекции у животных с иммунологической недостаточностью.

Данные, которые могут быть получены с помощью биоиндикаторных систем состояния иммунной системы и генома сельскохозяйственных животных могут использоваться в селекции. Многие селекционеры уже считают очевидным, что необходимо вести селекцию не только по хозяйственно -

полезным признакам, но и по генетической резистентности к заболеваниям и стабильности генома животных.

Совершенно очевидно, что данный мониторинг должен быть многоуровневым и включать в себя все данные, известные о селектируемых животных. Что касается биологической дозиметрии, то важно иметь дело с показателями, отражающими индивидуальную реакцию организма, поскольку последствия различных воздействий сильно зависят от состояния организма з момент этих воздействий.

Целью работы является изучение взаимосвязи мутационных событий и иммунологического статуса животных.

В задачи настоящего исследования входило:

- определить характер изменения "частоты полихроматофилов периферической крови мышей с микроядрами" и "размера микроядер полихроматофилов" мышей при различных дозах радиационного воздействия;

- определить нормативный фон и изменчивость и изменчивость размера микроядер, реакции иммунной системы по активности Ш- гена и активности некоторых ферментов митохондрий лимфоцитов в различные возрастные периоды быков - производителей;

- установить степень влияния иммунизации свиней на размер Т - и В- лимфоцитов свиней.

Научная новизна работы. Впервые показана криволинейная зависимость размера микроядер полихроматофилов самцов мышей ^т доза радиационного воздействия, размер микроядер у мышей увеличивается до дозы облучения 3 Грея, а затем снижается. Гакие изменения свидетельствуют, вероятно, о том, что при

высоких дозах облучения на ряду с поражением веретена деления происходит вторичное разрушение микроядер.

В отличии от признака "частота клеток с микроядрами" показатель размера микроядер в большей степени зависит от индивидуальных особенностей организма, что дает основание к разработке нового теста биологической дозиметрии.

Установлены показатели нормы и изменчивости частоты полихроматофилов с микроядрами и размеров микроядер полихроматофилов, а также состояния ферментов митохондрий лимфоцитов быков- производителей.

Показано влияние процедуры иммунизации на увеличение размера ядер Т- лимфоцитов свиней.

Заключение диссертации по теме «Генетика», Амбурладзе, Роман Вячеславович

Выводы.

1. Подтверждена линейная зависимость частоты полихроматофилов периферической крови мышей с микроядрами с дозой радиационного облучения от 1 до 6 Грей.

2. Впервые показана криволинейная зависимость размера микроядер полихроматофилов мышей от дозы радиационного воздействия, позволяющая регистрировать качественные изменения в микроядрах полихроматофилов периферической крови. Размер микроядер у мышей увеличивается до дозы 3 Грея, а затем снижается. Такие изменения свидетельствуют, вероятно, о том, что при высокой дозе облучения повреждается не только веретено деления, но и разрушаются микроядра.

3. Наименьшая фенотипическая изменчивость по частоте полихроматофилов с микроядрами имеет место при дозах облучения 1,5 и' 2 Грея. Доля межгрупповой изменчивости по данным дисперсионного анализа составляет 88,9 %, тогда как внутригрупповой- 11,1%, что позволяет считать дозу облучения ведущим фактором в изменении частоты полихроматофилов с микроядрами у мышей.

4. Разложение фенотипической изменчивости по размеру

микроядер полихроматофилов периферической крови показало большую зависимость этого показателя от индивидуальных особенностей организма, что дает возможность для разработки метода индивидуальной биологической дозиметрии. Это положение подтверждено результатами оценки взаимной силы влияния признаков дозы облучения, частоты клеток с микроядрами и размера микроядер.

5. Установлены фоновые показатели размера микроядер полихроматофилов, реакции иммунной системы по активности Ш -гена и активности ряда ферментов митохондрий лимфоцитов в различные возрастные периоды быков- производителей.

6. Установлено увеличение размера ядер Т- лимфоцитов

при иммунизации свиней.

1

Практические предложения.

1. Предлагается использовать показатель по размерам микроядер из полихроматофилов мышей как тест контроля состояния стабильности генома наряду с классическим микроядерным тестом.

2. Полученные нами фоновые показатели размера микроядер эритроцитов и активности лейкоцитарных ферментов и ш- гена рекомендуется принять за ориентировочный уровень нормы для быков - производителей, находящихся в стандартных условиях содержания.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Амбурладзе, Роман Вячеславович, 1999 год

Список литературы.

Бажов Г.М., Бахирева Л.А. Активность клеточных ферментов дегидрогеназ у свиней, их наследуемость и связь с продуктивностью.- С-х биология,- 1987,- N2,- С.21-25.

БаранецН.А., Долгих В.Т., Нарциссов Р.П. Прогностическая ценность определения активности СДГ лимфоцитов и терапевтическая эффективность сукцината натрия при оживлении крыс.// Бюлл. экспер. биол. мед. - 1985,- N10.-С.405-407.

Бахирева Л.А.. Возрастная и индивидуальная изменчивость цитохимических показателей крови свиней и их связь с продуктивностью // Генетические основы. повышения продуктивности с.-х. животных,- Краснодар.- 1984.- С.38-49.

Богач В. В., Брауде H.A., Котосова Р. К. и др. Энзиматическая активность клеток периферической крови при экспериментальном хроническим миокардите, связанном с персистенцией вируса Коксаки А // Бюл. экспер.биол. и медицины., 1986.- С.18-20.

Борисова Т.Л. Ферментный статус тромбоцитов у недоношенных детей в период ранней постнатальной адаптации // Педиатрия,- 1985.-N3.- С.24-26.

Виег Г. Введение в количественную цитохимию,- М.- Мир,-

1969,- 439 с.

Гинзбург Д. X., Разложение дисперсии и проблемы селекции. - Новосибирск: Наука. Сиб. отд., 1982. - 168 С.

Гришанин А. К., Степанов В. А., Павлов Д. Ф., Чуйко Г. М. Изучение мутагенного действия дихлорофоса кадмия и нафталина на эритроцитах теляпии (0гес11гот1з тоэзатМсиз Р.) при помощи метода учета микроядер // Генетика. ..- 1993. - т. 29. - ном. 7. - С. 1213- 1317.

Дауранов Н.Г. Функциональное состояние у здоровых и недоношенных детей с внутричерепной родовой травмой // Педиатрия.- 1968,- С.50-52.

Диксон М., Уэбб Э. Ферменты. - М., Мир, - 1968.- 814 с.

Ефимова Е.А. К цитохимической диагностике некоторых патологических состояний новорожденных детей в зависимости от условий внутриутробного развития // Автореф.дисс. ... на соис. уч. степ, доктора мед.наук. - Томск. - 1972,- 53 с.

Зарецкая Ю.М., Львицина Г.М., Дурнева Т.е.

Прогностическая значимость цитохимических показателей для

характеристики посттрансплантационных осложнений // Иммунология,- 1982.- N2,- С.32- 35.

Зарецкая Ю.М. Клиническая иммуногенетика.- М.:

Медицина, - 1983,- 208 с.

Захаров И.А. Генетическая карта с-х животных. М., 1993.- 23 с.

Зивенко А.А. Некоторые лейкоцитов крови в активной Автореф. дисс. ... на соис. 1971.- 23 с.

цитохимические изменения фазе ревматизма у детей // уч. степ.канд.мед.наук.- М.-

Ильинских Н. Н. Ильинских И. Н. Сравнительная характеристика различных методов ..исследования цитогенетических нарушений в клетках костного мозга обезьян макака- резус, заражённых вирусом полиомелита // Генетика. -1982. - т. 18. - С. 766- 768.

Ильинских Н.Н., Новицкий В.В., Ванчугова H.H., Ильинских И.Н. Микроядерный анализ и цитогенетическая нестабильность. - Томск: Изд-во Том. ун-та, 1991. - 272 с.

Катосова Л.К., Ченчикова Э.П. Гистохимическое изучение некоторых дегидрогеназ в органах морских свинок при гиперчувствительности замедленного типа // Бюлл. экспер. биол. и медицины.- 1972,- N2,- С. 35-38.

Катосова Л.К., Катосова Р.К., Нарциссов Р.П. Координация ферментных систем лейкоцитов и резистентность мышей к действию стафилакоккового токсина // Бюл.

эксперимент, биологии и медицины.- 1975.- N6.- С.74-76.

Киселёв А. Я. Фотоматериалы: обработка, печать // Л.: Лениздат. - 1986. - 158 с., ил.

Колесникова М.Б. Возможность прогнозирования исхода пневмонии у детей раннего возраста // Педиатрия.- 1979.-N10,- С. 60-63.

Комиссарова И.А. Активность лимфоцитарных дегидрогеназ у детей при заболевании верхних дыхательных путей // Педиатрия.- 1965,- N2.- С. 76-79.

Комиссарова И.А., Нарциссов Р. П. Цитохимическое изучение кислой фосфатазы и окислительных ферментов периферической крови детей // Лабор.дело,- 1968,- N7.-С. 390-394.

Кондрашова М.Н., Григоренко Е.В. Проявление стресса на уровне митохондрий, их стимуляция и регуляция гидроаэроионами // Общая биология,- 1985.- ТХШ,- N4.-С.516-526.

Королюк В. С., Портенко Н. И., Скороход А. В., Турбин А. Ф. Справочник по теории вероятностей и математической статистеке // Наука. - 1985. - 640 С.

Лакин Г.Ф. Биометрия // Выш. школа. - 1990 351 С.

Лойда 3., Госсрау Р., Штиблер Т. Гистохимия ферментов // Лабораторные методы. - М. - Мир, - 1982.- 270 с.

Мальцев C.B.- Клинико-экспериментальное изучение неспецифических ферментных систем при рахите // Автореф. дис. ... на соиск. уч. степ. канд. мед.наук // Казань.-1969.- С. 22-28.

Марков Х.М., Петричук C.B., Завриева М.К. и др. Влияние

переменного магнитного поля на развитие спонтанной

гипертонии у крыс // Бюл. экспер. биол. и медицины.- 1984.-N 12.- С. 659-661.

Мусил Я., Новикова 0., Кунц К. Современная биохимия в схемах // М. - Мир,- 1984.- 215 с.

Мясников Ю.В. Генетическая характеристика активности дегидрогеназ лимфоцитов и их связь с жизнеспособностью крупного рогатого скота. Автореф.дис. ... канд. биол. наук,-Ленинград.- 1988,- 19 с.\

Мясников Ю.В., Федорова С.М., Шалаева Т.А., Милованов 0.В.- Ферментный статус лимфоцитов периферической крови здорового и инфицированного вирусом лейкоза крупного рогатого скота // Сб.: Селекция с-х животных на устойчивость к болезням, повышение резистентности и продуктивного

долголетия. Вып. 9. Изд. ВНИИ плем. - 1992.- С. 87-88.

Мясников Ю.В., Пупкова Г.В. Взаимосвязь активности ферментов в лимфоцитах крови у здоровых коров и при маститах // Бюлл. ВНИРГЖ. - 1990.- Вып. N121.- С. 21-24.

Мясников Ю.В., Милованов О.В., Бавин В.Г., Захарченко В. И., Прокофьев М.И. Фенотипические особенности ферментного статуса лимфоцитов у кроликов нормальных и трансгенных по асРНК вируса BLV // Международный симпозиум - Молекулярная генетика и биотехнология в оценке изменений геномов с-х животных, - С-Петербург. - 1994,- С.122-123.

Нарциссов Р.П., Катосова Л.К. Активность дегидрогеназ лимфоцитов в иммуногенезе // Пробл. гематолог, и перелив, крови. // 1971,- С.71-74.

Петросян P.E. Активность некоторых ферментов лейкоцитов периферической крови при пневмонии и уроренальной инфекции у детей раннего возраста // Автореф. дис. ... на соис. уч. степ. канд. мед. наук. - М. -1971. - 21 с.

Поладян Г.К. Продуктивность и биологические особенности черно-пестрого скота в условиях равнинной зоны Армянской ССР. Автореф.дисс. ... канд. с-х наук.- Персияновка.- 1987.-

23 с.

Седунов Н.Д., Бишарова Л.А. Цитохимические показатели

активности лейкоцитов у здоровых детей в условиях резкоконтинентального климата // Педиатрия.- 1984.- N6.-

С.22 23.

Сейц Н.Ф., Луганова И.О. Биохимия клеток крови и костного мозга в норме и при лейкозах - Л., Медицина.-1967,- 331 с.

Соколов В.В., Нарциссов Р.П., Иванов Л.А. О взаимосвязи ферментов в лимфоцитах при силикозе и силикотуберкулезе // Лаб.дело.- 1972.- N8,- С.445-458.

Фролова М. А.Гудкова Р.Г., Большухина Л. А. и др. О механизме изменения дегидрогеназной активности лимфоцитов при трансплантации сердца // Бюл. экспер. биол. и медицины.-1976,- N 4.- С. 423.

Хастингс Н. Пикок Д. Справочник по статистическим распределениям // М.: Статистика. - 1980. - 95 с., ил.

Хлыстова 3.С., Калинина И.И., Хавинсон В.X. Участие эпидермиса кожи в системе иммуногенеза у человека / Иммунология 1994,- N4.- С. 25-28.

Ющенко A.A.,- Вишневский Ф.Е. Гистохимическое изучение реверсионных реакций при экспериментальном лепре у броненосцев // Бюл.эксперимент, биол. и медицины.- 1987.-N3,- С. 376-380.

Abed N. S., Chace J.H. Interferon - J regylation of Blymphocyte differentiation: Activation of Ball is a prereguiside for IFN - J - mediated inhibition of B-cell differentiation // Cellular Immunology.- V.153.- N2.- 1994.-p.356-367.

Antoccia A.,- Degrassi F., Batistoni A. / Ciliutti P., Tanzarella C. In vitro micronucleus test with kinetochore staining: evaluation of test perfomance // Mutagenesis. 1991. - V. - 6. - P. - 319-324.

Asano Y., Komuro T., Tada T. Sg nergistic T-T-cell in teraction Present in Alloreactivity - Determination of MLR Helper T-cell sulsets // Inter. Immunology.- V.2.- N12.-1990.- p.1203-1212.

Balode Z Assessment of radio-frequency electromagnetic radiation by the micronucleus test in bovine peripheral erythrocytes // Sci Total Environ, 1996 Feb 2, 180:1, 81-5

Benz R. D., Beltz P. A. Cytogenetic toxicologic testing with dogs // Environ. Mutagen., - 1980. - V. 2. - no. 2. -P. 312- 317.

Bhatti L., Sidell N. Trancriptional regulation by retinoic acid of interleukin -21 receptors In human B-cells // Immunology. - V.81.- V2.- 1994,- p. 273-270.

Bilbao A., Prosser J. S., Edvards A. A., Moody J. C., Lloyd D. C. The induction of micronuclei in human lymphocytes by in vitro irradiation with alpha particles from plutonium-239 // Int. J. Radiat Biol. - 1989. - V. -56. - P. - 287-292.

Boiler K., Schmid W. Chemical mutagenesis in mammals. Chinese hamster cells as an in vivo test system. Hematological findings after treatment with..trenimon // Humangenetic. - 1970. - V. - 11. - P. - 34.

Bradford I. C., Naismith R. W., Sorg R. M. Micronucleus test and body fluid analisis of rats exposed to caffeine in a reproductive study // Environ. Mutagen. - 1983. - v. 5. -no. 3. - P. 402- 407.

Brodie C., Domenico J., Gelfand E.W. Etanol inhibits

early evans in T-lymphocyte activation //..J. Clinical

immynology and immunopatology V.70.- N2.- 1994.-p.129-136.

van Buul PP; Abramsson Zetterberg L; Zandman IM; van

Duyn Goedhart A Further characterization of the

radiosensitivity of the scid mouse // Radiat Biol, 1998 Jul,

74:1, 35-41

Calvert J.E. Different between B-cell subpopulations // Autoimmunity. - V. 15.- N4,- 1993.- p. 331-332.

Castrlc P.A., Deal C.D. Defferentatlon of Pseudomones aeroginosa pill based on Seguence and B-cell epitope analyses // J.Infection and Immynity.- V.62.- N2,- 1994.-p.371-404.

Day C.E., Schmitt K., Robinson M.U. Freguent Recomlimation in the Human T-cell Receptor Beta-Gene Complex // Immunogenetics. - V39.- N5,- 1994,- p. 335-343.

Degrassi E., Tanzarella C. A. A new assay for the detection of aneuplody // Mutat. Res. Environ, mutagenes, and Related. Subj. - 1986. - V. 7203. - No. 5. - P. 339345.

Denizot Y., Dupuis F., Praloran V. Effects of PlateletActivating Factor of Human T- and B-cells - an Overview // Research in immunology.- V.145.- N2.- 1994.-p.109-118.

Dianzani U., Omed P. et al. Expansion of T-cells Expressing Low CD4 or CD8 Levels in B-cell Chronic Lymphocytic Leukemia-Correlation with Diseace Status and Neoplusic Phenotype // BLOOD.- V.83.- N8.- 1994,-

p.2198-2205.

Dolling JA; Boreham DR; Brown DL; Mitchel RE; Raaphorst GP Modulation of radiation-induced strand break repair by cisplatin in mammalian cells // Int J Radiat Biol, 1998 Jul, 74:1, 61-9

Duba HC; Weirich HG; Weirich-Schwaiger H; Utermann B; Nachbaur D; Sulder E; Utermann G Chromosomal instability in a woman with infertility and two unaffected brothers: a new familial chromosomal breakage syndrome? // Hum' Genet, 1997 Sep, 100:3-4, 431-40

EgermanM.C., Wysocki L., T-cell Recognition of Somatically-Generated Ab Diversity // J. of Immunology.-V. 152.- N4,- 1994.- p. 1569-1577.

Evans H. J., Neary G. J., Williamson F. S. The relative biological efficiency of single doses of fast neutrons and gamma rays on Vicia faba roots and the effect of oxygen. II. - Chromosome damage: the production of micronuclei // Int. J. Radiat Biol. - 1959. - V. - 1. - P. - 216.

Fiedler DM; Eckl PM; Krammer B Does delta-aminolaevulinic acid induce genotoxic effects? // J Photochem Photobiol B, 1996 Mar, 33:1, 39-44

Fliedner T. M., Andrews E. P., Cronkite E. P., Bond V.

P. Early and late cytologic effects of whole body irradiation on human marrow // Blood. - 1964. - v. - 23. -P. - 471.

Flores MJ; 'Pinero J; Ortiz T; Pastor N; Mateos JC; Cortes F Both bovine and rabbit lymphocytes conditioned with hydrogen peroxide show an adaptive response to radiation damage // Mutat Res, 1996 Nov 11, 372:1, 9-15

Forde J. H., Schultz C. J., Corell A. T. Chromosome elimination in micronuclei: a common cause of hypoploidy // Am. J. Hum. Genet., 1988 V. 43. P. 733- 740.

Geng L; Walter S; Melian E; Vaughan AT Transfection of a vector expressing wild-type p53 into cells of two human glioma cell lines enhances radiation toxicity // Radiat Res, 1998 Jul, 150:1, 31-7 Abstract

Grawbi J; Adler ID; Nusse M Quantitative and qualitative studies of micronucleus induction in mouse erythrocytes using flow cytometry. II. Analysis of micronuclei of aneugenic and clastogenic origin by dual-colour FISH on populations of bone marrow PCEs flow sorted orr the basis of their relative DNA content // Mutagenesis, 1997 Jan, 12:1, 9-16

Guo GZ; Sasai K; Oya N; Takagi T; Shibuya K; Hiraoka M Simultaneous evaluation of radiation-induced apoptosis and

micronuclei in five cell lines // Int J Radiat Biol, 1998 Mar, 73:3, 297-302

Hagemann G; Kreczik A; Treichel M The demonstration of heritable lethal mutations in the progeny of x-ray-irradiated CHO cells by micronucleus count in clone cells // Strahlenther Onkol, 1996 Jun, 172:6, 320-5

Hasui M., Miyanaki T., Ichihara T. et al. Mature Helper T-cell Reguirement .for Immunoglobulin Production by Neonatal Naive B-cells Injected Intraperitoneally Into Severe Combined Immunodeficient (SCID) Mice // Clinical and Experimental Immunology. - V.92.- N2,- 1994,- p. 357.

He LZ; Lu LH; Chen ZZ Genetic mechanism of leukemia predisposition in a family with 7 cases of acute myeloid leukemia // Cancer Genet Cytogenet, 1994 Aug, 76:1, 65-9

Heddle J. A. A rapid in vivo test for chromosomal damage // Mutatitfh research. - 1973. - V. 18. - P. - 187.

Heddle J. A. Carrano A. V. The DNA content of micronuclei induced in bone marrow by y-irradiation : evidens that micronuclei arise from acentric chromosomal fragments // Mutatoon research. - 1977. - V. 44. - P. -63-69.

Hoang Hung T; Gerber GB; Lbionard ED; Crutzen-Fayt MC;

Richard F; Leonard A Use of the micronucleus test for biological dosimetry in cases of homogeneous or non-homogeneous exposure to ionizing radiations // C R Seances Soc Biol Fil, 1995, 189:6, 1137-42

Hoffman R. N., Raat de W. R. Induction of nuclear anomalies (micronuclei) in the peripheral blood erythrocytes of the eastern mudminnow Umbra pygmaea hy ethyl methanosulphonate // Mutat. Res. - 1982. - v. 104. - NO. 1,-P. 143- 147.

Hogsted B., Karlsson A. The size of micronuclei in human lymphocytes varies according to inducing agent used // Mutation research. - 1985. - V. 156. - P. - 229-232.

Howell W. Observations upon the occurence structure and function of the giant cells of the marrow // J. Morphol. 1890. Vol. 4. N 1. P. 57- 63.

t

Hulstaert F., Hannet I., Daneys V. et al. Agerelated Changes in Human Blood Lymphocyte Subpopulations // J. Clinical Immunology and Immunopathology.- V.70.- N2.- 1994.-p.152-158.

Iondal M., Halen I., Wgzell H. Surface Kers of Human Tand B-lumphocyte // J. Exp. Med. - V. 136.- N2.- 1972,- p. 207- 215.

KasaianM.T., Kasali P. Autoimmunity-prone B-l (CB5) cells, Natural Antibodies and Self Recognition // Autoimmunity. - V. 15.- N4.- 1993,- p. 315-330.

Khan MA; Hill RP; Van Dyk J Partial volume rat lung irradiation: an evaluation of early DNA damage //Int J Radiat Oncol Biol Phys, 1998 Jan, 40:2, 467-76

Kirszenbaum M., Renard C., Geffrotin et al. Evidence for Mapping Pig C4 gene(s) Within the Pig MHC (SLA) // Animal Genetics.- 1985,- 16.- p. 65-69.

Koch O.M., 'Probgt M. et al. Detection of'Clonal T-cell Populations in Gastrointestinal Lymphomas by Analysis of cRNA Conformational Polymorphisms of Rearranged T-cell-receptor-ganna // British J. of Haematology.- V.86.-N2.- 1994.- p. 316-322.

Kubiak R; Rudek Z; Cieszkowski J; Garlicki S Cytogenetic examinations in biomonitoring residents residing closest to the area near the Sendzimir metallurgy plant in Krakow exposed to environmental pollution // Folia Med Cracov, 1993, 34:1-4, 187-98

Lasarow P.B. The role peroxisones in mammalian cellular metabolism // J.Metab. Disease.- 1987.-10,- suppl.Nl.- P. 11-

Livercidge J., Dick A., Cheng Y.F. et al. Retinal Antigen Specific lymphocytec, TCR-gamma delta T-cell and CD5 (+) Bcell Cultured from the Viterous in Acute Sumpthetic Ophthalmitis // J.Autoimmunity. - V15.- N4.- 1993.-p.257-266.

Loprieno N; Boncristiani G; Loprieno G An experimental approach to identifying the genotoxic risk from cooked meat mutagens // Food Chem Toxicol, 1991 Jun, 29:6, 377-86

Louagie H; Philippii J; Vral A; Cornelissen M; Thierens H; De Ridder L., Induction of micronuclei and apoptosis in natural killer cells compared to T lymphocytes after gamma-irradiation // Int J Radiat Biol, 1998 Feb, 73:2, 179-85

Maggi E., Delprete G.F., Parronchi P. et al. Role for T-cells, IL-2 Dependent and IL-6- Dependent in the IL-4-Dependent In vitro Human IgE Synthesis // Immunology and Allergy Clinics of North America.- V. 9.- N3.- 1989.-p.300-306.

Mahant P.S.,' Telesra C.L. Histohemical and Biochemical Chenges in Succinate Dehydrogenase Myofibriller-AT P'ase Activitis During Heterotopic Autotransplantation of EDL into Gastochemic Musche in the Adult Albino Rat Rattus Norvegicus

//Indian J.: of Experimental Biology. - Vol.21. - December.-1983.- p.670-673.

de Marco A., de Agazio M. et. al. Micronucleus indication in Allium cepa root tips affter maleic hydrozide treatment with microsomal fraction of Vicia faba // Atti. Assoegenet. Ital. - 1984. -V.- 30. - P. 75- 817.

Miller B. M., Zitzelsberger H. F., Weier H. - UI. G., Adler Classification of micronuclei in murine erithrocytes: immunofluorescent staining using CREST antibodies compared to in situ hybridization with biotinylated gamma satellite DNA // Mutagenesis. - 1991. - V. - 6. - P. - 297-302.

Miller R. C. The micronucleus test as an in vivo cytogenetic method // Environ, health, persp. - 1973. - V. -6. - 167.

Mozdarani H;' Khoshbin Khoshnazar AR In vivo protection by Cimetidine against fast neutron-induced micronuclei in mouse bone marrow cells // Cancer Lett, 1998 Feb, 124:1, 65-71

Muller M., - U., Streffer G. Micronucleus assays // Advances in mutagenesis research. - 5. Edited by Obe G. Springen. - Veriag. - 1995. - 134 pp.

Nagata N., ; Taketani S. Increaced cell surface

expression of newly identifid heterodimer on activated elastic T-cells // Cellular immunology.- V. 152.-N2.- 1994.-p.516-526.

Nian Lu Oing. A speculative view of immune recognition // Immunol. Invest. - 1994,- 23,- C. 53-71.

Paillole N; Voisin P Title Is micronuclei yield variability a problem for overexposure dose assessment to ionizing radiation? // Mutat Res, 1998 Feb, 413:1, 47-56

Pincu M., (Calllsen H., Norman A. DNA. content of micronuclei in human lymphocytes // Int. J. Radiat Biol. -1985. - V. - 47. - P. - 423-432.

Routledge MN; Garner RC; Kirsch-Volders M Comparison of 32P-postlabelling and cytogenetic analysis of human blood treated in vitro with melphalan // Mutagenesis, 1992 Sep, 7:5, 329-33

le Roux J; ; Slabbert J; Smit B; Blekkenhorst G Assessment of the micronucleus assay as a biological dosimeter using cytokinesis-blocked lymphocytes from cancer patients receiving fractionated partial body-radiotherapy // Strahlenther Onkol, 1998 Feb, 174:2, 75-81

Rached E; Schindler R; Beer KT; Vetterli D; Greiner RH No predictive value of the micronucleus assay for patients

with severe acute reaction of normal tissue after radiotherapy // Eur J Cancer, 1998 Feb, 34:3, 378-83

Raicu M; Vral A; Thierens H; De Ridder L Radiation damage to endothelial cells in vitro, as judged by the micronucleus assay // Mutagenesis, 1993 Jul, 8:\4, 335-9

RatelD.D., Haynes B.F. Stage-specific adhesion moleculec in human intrathymic T-cell development // Researh in immunology.- V.145.- N2,- 1994.- p.144-145.

Sakamoto Y., Kawachi Y. Adult T-cell leukaemia lymphoma featwring a large granular lymphocyte leukaemia morphologicelly.// BvitishJ.of. Haematology. V. 86.-N2.-1994,- p. 383-385.'

Samoszuk M., Mgueen V. Two cases of acguired immunodeficiency Syndrome-related lymphoma with simultaneus clonal rearrangements of B-cell and T-cell genec.// Blood.-V. 83. - N5.- 1994.- p. 1444.

Schiffmann D; Hieber L; Schmuck G; Pechan R; Metzler M; Henschler D Trenbolone induces micronucleus formation and neoplastic transformation in Syrian hamster embryo fibroblasts but not in mouse C3H10T1/2 cells // Arch Toxicol, 1988 Aug, 62:1, 49-53

Smits K.M., Kuppen P.J.K., Eggermont A.M.M. et al. Rat

inerleukin-2 activated natural killer (A-NK) cell- mediated lyses is determined by the presence of CD18 on A-NK cell and the absense of major histocompatibility complex class I on target cells // Europen J. of immunology.- V24.- N1,- 1994.-p.171-175.

Spits H., Barcena A., Hori T. et al. Early events in human in trathymic T-cell development // Researh in immunology. - V. 195.- N2,- 1994,- p. 128-133.

Stol H., Edfors-Lil A. I., & Anderson L. Analysis of the swine MHC (SLA) by use of human cDNA clacc II probes and class I alloantisera // Animal Genetics.- 1989.- 20.- p.36.

TaiebJ., Uffredow A., Vazquez A. B- T-cell interactions modulate inhibitory effects of interleukin-4 on human B-cell proliferation // Europen J. of. Immunology.-V. 24. - N2,- 1994..- p. 480-484.

Tikkanen L; Kronberg L Genotoxic effects of various chlorinated butenoic acids identified in chlorinated drinking water // Mutat Res, 1990 Feb, 240:2, 109-16

Tissot R.G., Beattie C.W., & Amoss M.S. The svine leucocyte antigen (SLA) complex and Sinclais swine cutcneouc malignant melanoma // Animal Genetics.- 1989.- 20.- p.51-57.

Viaggi S., Braselmann H., Nusse M. Flow cytometric

analysis of micronuclei in the CB2± subpopulation of human lymphocytes enriched by magnetic separation // Int. J. Radiat Biol. - 1995. - V. - 67. - P. - 193-202,...

Uma Devi P; Satish Rao BS; Kamath R A method to score micronuclei in vivo using cytochalasin B-induced cytokinesis block // Mutat Res, 1998 Jun, 401:1-2, 33-7

Urashima M., Hasegawa N. et al. Establishment of a human pro-B-cell line (JKB-1) and ist differentiation of proectablished bone marrow stromal cell lager // American J. Hematology. - V.46.- N2.- 1994.- p. 112-120.

Vral A; Louagie H; Thierens H; Philippii J; Cornelissen M; de Ridder Title Micronucleus frequencies in cytokinesis-blocked human B lymphocytes after low dose gamma-irradiation // Int J Radiat Biol, 1998 May, 73:5, 549-55

Walker JA; Boreham DR; Unrau P; Duncan AM Chromosome content and ultrastructure of radiation-induced micronuclei //Mutagenesis, 1996 Sep, 11:5, 419-24

Watanabe N; Yokoyama K; Kinuya S; Shuke N; Shimizu M; Futatsuya R; Michigishi T; Tonami N; Seto H; Goodwin DA Radiotoxicity after iodine-131 therapy for thyroid cancer using the micronucleus assay // J Nucl Med, 1998 Mar, 39:3, 436-40

Wide M; Przybyszewski WM Inverse dose-rate effect for the induction of micronuclei inLewis lung carcinoma after exposure to cobalt-60 gamma rays // Radiat Res, 1998 Jan, 149:1, 98-102

Wilson E. B., The cell development and heredity // 3rd ed. - Macmillan. - N.Y. - 1925. - 1232 Ps.

Wu M.C., Shia Y.C., Lin M.S. at al. Serologically defined lymphocyte alloantigens in North American pigs // Animal Genetics.- 1989,- 20.- p. 35-36.

Wuttke K; Muller WU; Streffer C, The sensitivity of the in vitro cytokinesis-blocked micronucleus assay in lymphocytes for different and combined radiation qualities. // Strahlenther Onkol, 1998 May, 174:5, 262-8

Wulf H.R. Histochemical studies of leucocytes from an inflammatory exudate // Acta Haemat.- 1963,- 29,- p.208.