Влияние аминокислот, природных и синтетических пептидов на культуру ткани кожи молодых и старых крыс тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.30, кандидат медицинских наук Войцеховская, Марина Александровна

• Войцеховская, Марина Александровна
• кандидат медицинских наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Войцеховская, Марина Александровна

СПИСОК СОКРАЩЕНИИ.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Структурно-функциональные особенности развития ткани кожи в онтогенезе.

1.2. Теории старения клеток и тканей.

1.3. Изменения кожи при старении организма.

1.4. Роль биорегуляторных пептидов в функционировании клеток и тканей.

Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Состав питательной среды.

2.2. Получение коллагена и коллагеновой подложки.

2.3. Выделение тканей.

2.4. Морфологические и морфометрические методы исследования развития эксплантатов в органотипической культуре тканей

2.5. Препараты, исследованные в культуре тканей.

2.6. Определение эффективной концентрации аминокислот и пептидов в органотипической культуре ткани.

2.7. Иммуноцитохимические методы исследования эксплантатов

2.8. Морфометрические исследования и компьютерный анализ микроскопических изображений.

2.9. Статистическая обработка экспериментальных данных.

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1. Влияние аминокислот на культуру ткани кожи молодых и старых крыс.

3.2. Исследование процессов пролиферации и апоптоза при действии аминокислот в эксплантатах кожи молодых и старых крыс.

3.3. Исследование влияния дипептидов на развитие эксплантатов кожи молодых и старых крыс.

3.4. Исследование процессов пролиферации и апоптоза при действии дипептидов в эксплантатах кожи молодых и старых крыс.

3.5. Исследование влияния трипептидов на развитие эксплантатов кожи молодых и старых крыс.

3.6. Исследование влияния тетрапептидов на развитие эксплантатов кожи молодых и старых крыс.

3.7. Исследование процессов пролиферации и апоптоза при действии тетрапептидов в эксплантатах кожи молодых и старых крыс.

3.8. Исследование влияния природных полипептидов на развитие эксплантатов кожи молодых и старых крыс.

3.9. Исследование процессов пролиферации и апоптоза при действии природных полипептидов в эксплантатах кожи молодых и старых крыс.

Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ

ВЫВОТТЪТ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние аминокислот, природных и синтетических пептидов на культуру ткани кожи молодых и старых крыс»

Актуальность исследования

Прогрессирующее увеличение доли пожилых и старых людей в общей численности населения вместе с сокращением рождаемости в последнее время становится всё более актуальной медицинской, социальной и экономической проблемой развитых стран [Анисимов В.Н., 2008а]. Одними из первых проявлений процесса старения являются дегенеративные изменения в коже, которая, выполняя барьерную функции, подвергается не только возрастным изменениям, но и испытывает локальный стресс, обусловленный повреждающими факторами внешней среды. В результате запущенной программы старения в клетках кожи (как и в клетках всего организма) неотвратимо происходят существенные изменения: уменьшается их митотическая активность, постепенно нарушаются синтетические процессы, накапливаются модифицированные белки, происходит повреждение мембран клеток, ДНК и ферментов. В организме поддержание биологической целостности регулируется на клеточном уровне сигналами, которые позволяют сохранять равновесное состояние между основными физиологическими процессами пролиферацией и апоптозом [Анисимов В.Н., 20086]. Многие пептиды принимают участие в сигнальной трансдукции между различными типами клеток. Кроме того, биорегуляторные пептиды, содержащиеся практически во всех тканях организма, выполняют не только сигнальную роль, но и непосредственно участвуют в регуляции физиологических процессов, начиная от отдельных функций специализированных клеток и заканчивая сложными поведенческими актами [Хавинсон В.Х., Морозов В.Г., 1992, 2000а, 20006, 2001]. Биорегуляторные пептиды впервые были выделены В.Г.Морозовым и В.Х. Хавинсоном в 1971 г. из гипоталамической области мозга и тимуса [Морозов В.Г., Хавинсон В.Х., 1981, 1983; Хавинсон В.Х., Морозов В.Г., 1991; Коркушко О.В. и др., 2002; Хавинсон В.Х., Морозов В.Г., 2002; Рыжак Г.А., Коновалов С.С., 2004]. Затем В Санкт-Петербургском институте биорегуляции и геронтологии были синтезированы новые ди-, три- и тетрапептиды, являющиеся аналогами эндогенных пептидных биорегуляторов и содержащие наиболее часто встречающиеся в соответствующих тканях аминокислоты. Недавние исследования [Чалисова Н.И. и др., 19996, 2000, 2003] показали, что не только короткие пептиды, но и сами аминокислоты обладают некоторыми регуляторными свойствами в отношении клеточной пролиферации и апоптоза в различных тканях.

Несмотря на наличие большого количества методов воздействия на стареющую кожу, поиск эффективных физиологических методов и средств профилактики и коррекции возрастных изменений кожи, не оказывающих нежелательного побочного действия, остается актуальной проблемой современной медицины. До последнего времени в медицинской косметологии при коррекции возрастных изменений кожи не принимались во внимание процессы, происходящие на клеточном уровне. Одной из наиболее адекватных моделей для изучения влияния различных препаратов на структуру и функцию клеток являются органотипические культуры [Чалисова Н.И. и др., 1999а, 2002]. Изменение количества клеток в культуре ткани под воздействием различных веществ служит критерием первичной интегральной оценки биологической активности вещества. Поэтому сравнительное изучение действия природных и синтетических пептидов и аминокислот в культуре ткани кожи, как у молодых, так и у старых животных, позволит выяснить некоторые механизмы регулирования клеточных процессов в коже, а также создать базу для синтеза новых пептидных биорегуляторов для гериатрической практики и геронтокосметологии.

Цель и задачи исследования

Целью настоящей работы было исследование действия природных полипептидов, выделенных из различных тканей, а также синтезированных коротких пептидов и аминокислот на развитие органотипической культуры фрагментов ткани кожи от молодых и старых крыс.

Для достижения цели исследования поставлены и последовательно решены следующие задачи:

1. Исследовать влияние 20 стандартных аминокислот на клеточную пролиферацию в эксплантатах кожи от молодых и старых крыс в органотипической культуре ткани.

2. Исследовать влияние синтезированных ди-, три- и тетрапептидов на развитие эксплантатов кожи от молодых и старых крыс в органотипической культуре ткани.

3. Исследовать действие полипептидов, выделенных из тканей хряща, яичников, тимуса, сосудов, мышц, на клеточную пролиферацию в эксплантатах кожи от молодых и старых крыс в органотипической культуре ткани.

4. Исследовать влияние стандартных аминокислот, полипептидов и коротких пептидов на развитие процессов пролиферации и апоптоза в органотипической культуре кожи от молодых и старых крыс.

Научная новизна работы

Впервые проведено изучение действия 20 стандартных аминокислот, полипептидов, выделенных из различных тканей, и коротких пептидов в органотипических культурах тканей кожи, взятых от молодых и старых животных. Впервые установлено стимулирующее влияние аминокислот пролина, лизина, глутаминовой кислоты, аргинина, триптофана и тирозина на процессы пролиферации в культуре ткани кожи от молодых животных и всего 3 аминокислот (тирозина, изолейцина, триптофана) - в эксплантатах кожи от старых животных. Напротив, в культуре ткани кожи от старых животных 7 аминокислот - глицин, лизин, пролин, глутаминовая и аспарагиновая кислоты, аргинин и валин - вызывали выраженный апоптоз.

Впервые установлено стимулирующее влияние полипептидов, выделенных из тканей хряща, яичников, тимуса, сосудов, мышц, на клеточную пролиферацию в эксплантатах кожи от молодых и старых крыс в органотипической культуре ткани. Впервые установлено, что эффективными в отношении стимуляции пролиферации эксплантатов кожи от молодых животных были дипептиды АВ-17 и АВ-А, а также трипептиды Т-32, Т-33, Т-36, Т-38, а эксплантатов кожи от старых крыс -только трипептид Т-38 и дипептиды АВ-17 и АВ-А. Впервые установлено, что тетрапептиды кортаген, эпиталон, кардиоген, ливаген, простамакс стимулируют развитие эксплантатов кожи молодых крыс, а в эксплантатах кожи старых крыс активным в отношении пролиферации является только простамакс.

Впервые проведено иммуноцитохимическое исследование эксплантатов кожи и выявлено уменьшение развития процессов апоптоза при стимуляции пролиферации под влиянием вышеуказанных препаратов. При этом показано, что увеличение индекса площади эксплантатов кожи находится в положительной корреляции с увеличением площади экспрессии маркера пролиферации РСЫА и в отрицательной корреляции с уменьшением площади экспрессии проапоптозного белка р53.

Практическая значимость работы

Впервые получены экспериментальные данные, свидетельствующие о том, что при старении уменьшается спектр аминокислот, активно действующих на пролиферативные процессы в коже. Напротив, полипептиды, выделенные из различных тканей, и короткие пептиды проявляют стимулирующие пролиферацию свойства в отношении кожи у животных как молодого, так и старого возраста. Выявленное стимулирующее действие природных и синтезированных пептидов на кожу создает основу для их дальнейшего изучения в качестве средств, предназначенных для коррекции возрастных изменений кожи. Установленное стимулирующее действие коротких пептидов в отношении клеточной пролиферации в тканях кожи создает базу для целенаправленного синтеза коротких пептидов, предназначенных для использования в геронтокосметологии и гериатрической практике.

Положения, выносимые на защиту

1. Аминокислоты - пролин, лизин, глутаминовая кислота, аргинин, триптофан и тирозин обладают способностью стимулировать пролиферативные процессы в ткани кожи молодых крыс. В ткани кожи от старых животных только 3 аминокислоты - тирозин, изолейцин, триптофан - проявляют активность в отношении клеточной пролиферации.

2. Дипептиды АВ-17 и АВ-А стимулируют пролиферацию в эксплантатах кожи молодых и старых крыс. В органотипической культуре кожи молодых животных пролиферативные процессы стимулируют трипептиды Т-32, Т-33, Т-36, Т-38, в органотипической культуре кожи старых животных - только трипептид Т-38.

3. Тетрапептиды кортаген, эпиталон, кардиоген, ливаген, простамакс, панкраген стимулируют развитие эксплантатов кожи молодых крыс, а в органотипической культуре кожи старых крыс активным в отношении пролиферации является только тетрапептид простамакс.

4. Полипептиды, экстрагированные из тканей хряща, яичников, тимуса, сосудов, мышц, стимулируют клеточную пролиферацию в эксплантатах кожи как молодых, так и старых животных.

5. Площадь экспрессии маркера пролиферации РСЫА находится в положительной, а площадь экспрессии проапоптозного белка р53 - в отрицательной корреляции с изменением индекса площади эксплантатов в органотипической культуре кожи молодых и старых крыс в присутствии аминокислот, дипептидов, трипептидов, тетрапептидов и полипептидов, экстрагированных из тканей хряща, яичников, тимуса, сосудов, мышц.

6. Полипептиды, экстрагированные из тканей хряща, яичников, тимуса, сосудов, мышц, тетрапептид простамакс, трипептид Т-38, дипептиды АВ-17 и АВ-А являются перспективными веществами для создания средств, предназначенных для коррекции возрастных изменений кожи.

Связь с планом НИР

Диссертационная работа выполнена в рамках основного плана НИР Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии.

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 14 печатных работ, в том числе 7 статей, включая 5 статей в журналах, рекомендованных Высшей аттестационной комиссией Минобрнауки Российской Федерации для опубликования материалов диссертационных исследований.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы с описанием материалов и методов, главы собственных исследований, главы обсуждения результатов, выводов и указателя литературы. Текст диссертации изложен на 110 страницах, содержит 6 таблиц,

Заключение диссертации по теме «Геронтология и гериатрия», Войцеховская, Марина Александровна

выводы

1 .Аминокислоты глутаминовая кислота, лизин, аргинин, пролин, триптофан и тирозин обладают способностью стимулировать пролиферативные процессы в ткани кожи молодых животных, ни одна из аминокислот не вызывает усиление процессов апоптоза.

2. Спектр аминокислот, активных в отношении клеточной пролиферации уменьшается в коже от старых животных, активными аминокислотами остаются только тирозин, триптофан и изолейцин, остальные аминокислоты вызывают выраженные процессы апоптоза.

3. Трипептиды Т-32 , Т-33, Т-36 и Т-38, дипептиды АВ-17 и АВ-А стимулируют пролиферативные процессы в органотипической культуре ткани кожи от молодых животных, а трипептид Т-38, дипептиды АВ-17 и АВ-А - у старых животных.

4. Тетрапептиды кортаген, эпиталон, кардиоген, ливаген, простамакс стимулируют клеточную пролиферацию в эксплантатах кожи молодых животных; в эксплантатах кожи старых животных - только простамакс.

5. Полипептиды, выделенные из тканей яичников, мышц, сосудов, вилочковой железы и хряща, стимулируют клеточную пролиферацию в эксплантатах ткани кожи как молодых, так и старых животных.

6. Экспрессия маркера пролиферации РСЫА находится в положительной, а экспрессия проапоптозного белка р53 - в отрицательной корреляции с увеличением индекса площади зоны роста эксплантата кожи молодых и старых крыс под действием аминокислот, ди-, три- и тетрапептидов, а также природных полипептидов, выделенных из тканей яичников, мышц, сосудов, хряща, вилочковой железы.

7. Стимуляция пролиферации клеток кожи молодых и старых животных при действии экстрагированных из различных тканей полипептидов и синтезированных коротких пептидов свидетельствует о перспективности разработки на их основе лекарственных и косметических средств для применения в гериатрии и геронтокосметологии.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1.Выявленное действие экстрагированных из тканей яичников, мышц, сосудов, тимуса, хрящей полипептидов на ткань кожи создает основу для их дальнейшего изучения в качестве лекарственных средств, предназначенных для профилактики и лечения патологических состояний кожи, ассоциированных с возрастом.

2. Установленное стимулирующее действие тетра-, три- и дипептидов в отношении клеточной пролиферации в тканях кожи создает базу для целенаправленного синтеза коротких пептидов, предназначенных для лечения патологии кожи в гериатрической практике и для целей геронтокосметологии.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Войцеховская, Марина Александровна, 2011 год

1. Андреев А. Коллаген: структура и функции/ А. Андреев. // Косметика и медицина. 2001. - №3. - С. 41-48.

2. Анисимов В.Н. Молекулярные и физиологические механизмы старении: В 2 т. 2-е изд. перераб. и доп./ В.Н. Анисимов. - СПб.: Наука, 2008а. - Т. 1. - 481 с.

3. Анисимов В.Н. Молекулярные и физиологические механизмы старении: В 2 т. 2-е изд. перераб. и доп./ В.Н. Анисимов. - СПб.: Наука, 20086. - Т. 2. - 434 с.

4. Анисимов В.Н. Увеличение продолжительности жизни и снижение частоты опухолей у мышей СзН/8п под влиянием полипептидных факторов тимуса и эпифиза/ В.Н. Анисимов, В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон // Докл. АН СССР. 1982. - Т. 263, № 3. - С. 742-745.

5. Анисимов В.Н. Влияние полипептидных факторов тимуса, костного мозга, эпифиза и сосудов на продолжительность жизни и развитие опухолей у мышей/ В.Н. Анисимов, В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон // Докл. АН СССР. -1987. Т. 293, № 4. - С. 1000-1004.

6. Анисимов В.Н. Эволюция концепций в геронтологии/ В.Н. Анисимов, М.В. Соловьев. — СПб.: «Эскулап», 1999. — 130 с.

7. Беспалов В.Г. Влияние полипептидных факторов тимуса, эпифиза, костного мозга и переднего гипоталамуса на реализацию трансплацентарного канцерогенеза/ В.Г. Беспалов, В. А. Александров, В.Н. Анисимов. // Эксперим. Онкология. 1984. - Т. 6, №5. - С. 27-30.

8. Быков В. Л. Цитология и общая гистология (функциональная морфология клеток и тканей человека)/ В.П. Быков. СПб.: СОТИС, 1998.

9. Войтон Е.В. Рациональное использование пептидных биорегуляторов в косметологии/Е.В. Войтон, Г. А. Рыжак //

10. Материалы Российской научно-практической конф. «Рациональное использование лекарств». Пермь, 2004. - С. 221.

11. Ю.Гланц С. "Медико-биологическая статистика". Пер. с англ./ С. Гланц. М: Практика , - 1999. - 459 с.

12. Гречко А.Т. Изучение кардиомодулирующего действия различных групп низкомолекулярных пептидов/ А.Т. Гречко, В.Н. Калихевич, З.А. Ардемасова и др. // Бюл. эксперим. биологии и медицины. -1996. -Т.121,№7. -С. 43-44.

13. И.Григорьев С.Г. Многомерные методы статистического анализа категорированных данных медицинских исследований/ С.Г. Григорьев и соавт. СПб.: ВМА, 2002. - 103 с.

14. Н.Деменкова С. Курение и кожа // Les Nouvelles Esthetiques. Русское издание/ С. Деменкова. 2002. - № 6. - С. 8-12.

15. Дильман В.М. Четыре модели медицины/ В.М. Дильман. — М.: «Медицина», 1987. — 288 с.

16. Дубинина Е.Е. Роль активных форм кислорода в качестве сигнальных молекул в метаболизме тканей при состоянии оксислительного стресса // Часть 1./ Е.Е. Дубинина. Косметика и медицина. - 2002. - №6. - С. 4-12.

17. Москвичева и др.// Бюл. эксперим. биологии и медицины. -м1987. -Т.97, № 3. С. 327-330.

18. Казанцева С.Т. Сравнительное изучение физико-химических свойств цитомединов. Роль пептидных биорегуляторов (цитомединов) в регуляции гомеостаза/ С.Т. Казанцева. // Тез. докл. науч. конф. Воен.-мед. акад. им. С.М. Кирова. Д., 1987. - С. 46.

19. Канунго М. Биохимия старения/ М. Канунго. М.: Мир, 1982. - 296 с.

20. Климов П.К. Эндогенные пептиды как единая система регуляторных веществ/ П.К. Климо, Г.М. Барашкова. // Физиол. журн. СССР им. И.М. Сеченова. -1993. Т. 79, № 3. - С. 80-87.

21. Ковальчук Л.П. Анализ молекулярного взаимодействия в системе: IL-lß IL-1RA - IL-1R/ Л.П. Ковальчук, Б.Н. Соболев, Л.В. Ганковская, A.A. Юдин. // Иммунология. - 2001. - №1. - С. 6 - 10.

22. Кожа и ее производные // Гистология (введение в патологию) / Под ред. Э. Г. Улумбекова, Ю.А. Челышева. М.: ГЕОТАР, 1997. - С. 765-784.

23. Кольгуненко И.И. Основы геронтокосметологии/ И.И. Кольгуненко.- М.: Медицина. 1973. - 233 с.

24. Кольтовер В.К. Свободнорадикальная теория старения: современное состояние и перспективы/ В.К. Кольтовер. //Успехи геронтологии.1998. — №. 2. — С. 37 42.

25. Коркушко О.В. Пептидные препараты тимуса и эпифиза в профилактике ускоренного старения/ О.В. Коркушко, В.Х. Хавинсон, Г.М. Бутенко, В.Б. Шатило. — СПб.: «Наука», 2002. -202 с.

26. Кошевенко Ю. Проблемы психосоматики в дерматокосметологии/ Ю. Кошевенко. // Косметика и медицина. 2002. - № 2. - С. 18-25.

27. Крутько В.Н. Общие причины, механизмы и типы старения/ В.Н. Крутько, A.A. Подколзин, В.И. Донцов. // Успехи геронтологии. — 1997.— № 1.— С. 34-40.

28. Кузник Б.И. Тканеспецифические полипептиды и система комплемента/ Б.И. Кузник, В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон и др. // Система комплемента. М., 1988. - С. 25-27.

29. Молочков В.А. Руководство по геронтологической дерматологии

30. B.А. Молочков, В.Н. Шабалин, С.С. Кряжева, Г.Ф. Романенко. М.: МОНИКИ, 2005. - 360 с.

31. Морозов В.Г. Влияние веществ, выделенных из гипоталамуса, на иммуногенез и морфологический состав крови/ В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон.// Эксперим. хирургия и анестезиология. 1973. - №1. - С. 19-22.

32. Морозов В.Г. Влияние экстракта из эпифиза на течение экспериментальных опухолей и лейкозов/ В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон. // Эксперим. хирургия и анестезиология. 1974. - №1.1. C. 34-38.

33. Морозов В.Г. Характеристика и изучение механизма действия фактора тимуса (тималина) / В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон. // Докл. АН СССР. -1978. Т. 240, № 4. - С. 1004-1007.

34. Морозов В.Г. Выделение, очистка и идентификация иммуномодулирующего полипептида, содержащегося в тимусе телят и человека/ В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон. // Биохимия. 1981. - № 9. - С. 1652-1659.

35. Морозов В.Г. Новый класс биологических регуляторов многоклеточных систем цитомедины/ В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон. // Успехи современной биологии. - 1983. - Т.96 , № 3. -С. 339-346.

36. Морозов В.Г. Пептидные биорегуляторы (25-летний опыт экспериментального и клинического изучения) / В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон. СПб.: Наука , 1996. - 74 с.

37. Мяделец О. Д. Функциональная морфология и общая патология кожи/ О.Д. Мяделец, В.П. Адаскевич. Витебск.: Издательство Витебского медицинского института, 1997. - 269 с.

38. Пальцев М.А. Руководство по нейроиммуноэндокринологии/ М.ПА. Пальцев, И.М. Кветной. М.: Медицина, 2006. - 384 с.

39. Папава K.M. Использование кортексина в клинике/ K.M. Папава.// Успехи физиол. наук. 1994. - Т. 25, № 4. - С. 9.

40. Полякова В.О. Экспрессия транскрипционных факторов дифференцировки эпителиальных клеток тимуса человека при старении / В.О. Полякова. // Вестн. Уральск. Мед.акад.науки. 2006. -№3-1 (14).- С. 191-193.

41. Прокопенко Н.П. Характеристика кислотного экстракта эпифиза и его фракций/ Н.П. Прокопенко, P.A. Тигранян, Г.Л. Муратова и др. // Вопр. мед. химии. 1989. - № 4. - С. 79-81.

42. Рыжак Г.А. Геропротекторы в профилактике возрастной патологии/ Г.А. Рыжак, С.С. Коновалов. СПб.: «прайм-ЕВРОЗНАК», М.: «ОЛМА-ПРЕСС», 2004. - 160 с.

43. Рыжак Г.А. Кортексин и регуляция функций головного мозга/ Г.А. Рыжак, В.В. Малинин, Т.Н. Платонова. СПб.: ИКФ «Фолиант», 2001.- 160 с.

44. Самцов A.B. Кожные и венерические болезни/ A.B. Самцов, В.В. Баринов. СПб.: ЭЛБИ, 2002. - 314 с.

45. Система кожных покровов // Дерматоонкология / Под редакцией Г.А. Галил-Оглы, В.А. Молочкова, Ю.В. Сергеева. М.: Медицина для всех, 2005. - С. 36-38.

46. Слепушкин В.Д. Эпифиз, иммунитет и рак: Теоретические и клинические аспекты/ В.Д. Слепушкин, В.Н. Анисимов, В.Х. Хавинсон и др. Томск, 1990. - С. 148.

47. Слуцкий Л.И. Биохимия нормальной и патологически измененной соединительной ткани/ Л.И. Слуцкий. Л.: 1969. - 213 с.

48. Смирнова И.О. Нейроиммунэхндокринология кожи и молекулярные маркеры ее старения/ И.О. Смирнова, И.М. Кветной, И.В. Князькин, С.И. Данилов. СПб.: Издательство ДЕАН, 2005. - 288 с.

49. Тедеско Ф. УФ излучение и кожа: фотостарение, канцерогенез, иммуносупрессия/ Ф. Тедеско. // Косметика и медицина. 1998. -№2. - С. 27-32.

50. Ткачук В.Н. Применение простатилена при лечении больных хроническим простатитом/ В.Н. Ткачук, А.Г. Горбачев, В.Х. Хавинсон. // Урология и нефрология. 1991. - № 6. - С. 40-43.

51. Усачев В.В. Влияние кортексина на электрофизиологические показатели зрительного нерва при пигментной амбиотрофии сетчатки/ В.В. Усачев. // Геронтологические аспекты пептидной регуляции функций организма. СПб.: Наука, 1996. - С. 82.

52. Фитцпатрик Д.Е. Гериатрическая дерматология. Секреты дерматологии: пер. с англ./ Д.Е. Фитцпатрик, Д.А. Эллинг. М. -СПб.: «Издательство БИНОМ» - «Невский диалект», 1999. - 436 -443 с.

53. Фролькис В.В. Старение. Нейрогуморальные механизмы/ В.В. Фролькис. Киев, «Наукова думка», 1981. - 220 с.

54. Хавинсон В.Х. Пептидная регуляция старения/ В.Х. Хавинсон // Вестн. РАМН. 2001. - № 12. - С. 16-20.

55. Хавинсон В.Х. Увеличение продолжительности жизни с помощью пептидных биорегуляторов/ В.Х. Хавинсон // Клинич.геронтология. 2000. - Т. 6, № 7-8. - С. 107.

56. Хавинсон В.Х. Пептидная регуляция гомеостаза/ В.Х. Хавинсон, И.М.

57. Кветной, В.В. Южаков, В.В. Попучиев, С,С. Коновалов. — СПб.: «Наука», 2003. 194 с.

58. Хавинсон В.Х. Перспективы применения пептидных биорегуляторов в геронтокосметологии/ В.Х. Хавинсон, Т.Н. Королькова, Г.А. Рыжак. // Вестник дерматологии и венерологии -2005.-№ 4, С. 56-59.

59. Хавинсон В.Х. Тканеспецифическое действие пептидов в культуре тканей крыс разного возраста/ В.Х. Хавинсон, В.В. Малинин, Н.И. Чалисова, Е.И. Григорьев. // Успехи геронтол. 2002. - Вып.9. - С. 95 - 100.

60. Хавинсон В. Старение эпифиза/ В.Х. Хавинсон, А.Г. Голубев // Успехи геронтол. 2002. - Вып. 9. - С. 67-72.

61. Хавинсон В.Х. Влияние пептидных биорегуляторов на морфологию паренхиматозных органов/ В.Х. Хавинсон, A.A. Горбунов, Г.А. Рыжак- СПб.: ИКФ «Фолиант», 2000. 80 с.

62. Хавинсон В.Х. Препараты эпифиза и тимуса в геронтологии/ В.Х. Хавинсон, В.Г. Морозов СПб., 1992. - 50 с.

63. Хавинсон В.Х. Пептидная регуляция гомеостаза при старении/ В.Х. Хавинсон, В.Г. Морозов // Успехи геронтол. 2000а. - Вып. 4. -С. 75-79.

64. Хавинсон В.Х. Результаты и перспективы применения пептидных биорегуляторов в геронтологии/ В.Х. Хавинсон, В.Г. Морозов // Клинич. медицина. 20006. - № 8. - С. 81-84.

65. Хавинсон В.Х. Геропротекторная эффективность тималина и эпиталамина/ В.Х. Хавинсон, В.Г. Морозов // Успехи геронтол. -2002.-Вып. 10.-С. 74-84.

66. Хавинсон В.Х. Пептиды эпифиза и тимуса в регуляции старения/ В.Х. Хавинсон, В.Г. Морозов СПб.: Фолиант, 2001.- 159 с.

67. Хавинсон В.Х. Применение пептидов тимуса в качестве геропротекторных средств/ В.Х. Хавинсон, В.Г. Морозов // Пробл. старения и долголетия. 1991. - Т. 1, № 2. - С. 123-128.

68. Хавинсон В.Х. Влияние полипептидов из предстательной железы на систему гемостаза/ В.Х. Хавинсон, В.Г. Морозов, Б.И. Кузник. // Фармакология и токсикология. — 1985а. — № 5. — С. 69— 71.

69. Хавинсон В.Х. Цитомедины и их роль в регуляции физиологических функций/ В.Х. Хавинсон, В.Г. Морозов, Б.И. Кузник. // Успехи современной биологии. 1985. - Т. 115, №3. - С. 353-367.

70. Хавинсон В.Х, Влияние пептидов головного мозга на клетки нервной ткани in vitro/ В.Х. Хавинсон, В.Г. Морозов, Н.И. Чалисова, В.Б. Окулов. // Цитология. — 1997. — Т. 39, № 7. — С. 571— 578.

71. Хавинсон В.Х., Чалисова Н.И., Морозов В.Г., Малинин В.В. Роль пептидов тимуса в регуляции роста лимфоидной ткани у крыс разного возраста/ В.Х. Хавинсон, Н.И. Чалисова, В.Г. Морозов, В.В.

72. Малинин. // Доклады АН СССР. — 1999. — Т. 369, № 5. — С.701—703.

73. Хавинсон В.Х. Исследование натуральных и синтетических цитомединов в культуре нервной ткани/ В.Х. Хавинсон, Н.И. Чалисова, В.Б. Окулов. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины.— 1998.— Т. 125, №3.— С. 332—336.

74. Хертель Б. Молекулярные и клеточные механизмы естественного старения и фотостарения (стрессорные факторы, защитные механизмы)/ Б. Хертель. // Косметика и медицина. 2000. - № 4. - С. 5-17.

75. Чалисова Н.И. Динамика стимулирующих и ингибирующих эффектов в органотипической культуре нервной и лимфоидной ткани/ Н.И. Чалисова, В.А. Пеннияйнен, Н.В. Харитонова, А.Д. Ноздрачев. // Доклады Академии наук. 2001а. — Т.380, № 3. -С.418— 421.

76. Чернух A.M. Кожа/ A.M. Чернух, Е.П. Фролов. М.: Медицина, 1982.-336 с.

77. Шатаева JI.K. Пептидная саморегуляция живых систем (факты и гипотезы)/ JI.K. Шатаева, В.Х. Хавинсон, И.Ю. Ряднова. СПб.: «Наука».— 2003. - 222 с.

78. Ямскова В.П., Модянова Е.А., Резникова М.М., Маленкова А.Г. //Молекулярная биология.-1977.-Т.11,.№5.-С.1147-1154

79. Ярилин А.А. Основы иммунологии/ А.А. Ярилин. — М.: «Медицина», 1999. 608 с.

80. Ярилин А.А. Изменения в иммунной системе при старении, А.А. Ярилин. // Эстетическая медицина. 2003. - Т. 2, № 3. - С. 203-214.

81. Asboe-Hansen G. Aging of Skin/ G. Asboe-Hansen. // Ed. A. Engel, T. Larson. Stockholm, 1969. - P. 235 - 242.

82. Auffray B. Protection against singlet oxygen, the main actor of sebum squalene peroxidation during sun exposure, using Commiphora myrrha essential oil/ B. Auffray. // Internationa/ Journal of Cosmetic Science. -2007. Vol. 29, №1. - P. 23 - 29.

83. Bailey A. Mechanisms of maturation and ageing of collagen/ A. Bailey, R.G. Paul. // Mech. Ageing Develop. 1998. - Vol. 106. - P. 1-56.

84. Benedetto A.V. The environment and the skin ageing/ A.V. Benedetto. // Clin. Dermatol. 1998. - Vol. 16. - P. 129 - 139.

85. Bhushman M. Tumor necrosis factor a induced migration of Langerhans cell: the influence of ageing/ M. Bhushman, M. Cumberbatch, R.J. Daerman et al. // Br.J.Dermatol. - 2002. - Vol. 146. -P. 32-40.

86. Bjorksten J. A common molecular basis for the aging syndrome/ J. Bjorksten. // J. Amer. Geriatr. Soc. 1958.— Vol. 6, №10. — P. 740 -748.

87. Brincat M.P. Hormone replacement therapy and the skin/ M.P.

88. Brincat. // Maturitas. 2000. - Vol. 35. - P. 107-117.i

89. Cerami A. Glucose and ageing/ A. Cerami. // Sci. Am. 1987. -Vol. 256.-P. 82-88.

90. Chauhan P. Modeling signaling pathways leading to wrinkle formation: identification of the skin aging target/ P. Chauhan, M. Shakya. // Indian. J. Dermatol. Venereol. Leprol. 2009. - Vol. 75, № 5. - P. 463 -468.

91. Costenbader K.H. Cigarette smoking and the risk of systemic lupus erythematosus: a meta-analysis / K.H. Costenbader, D.J. Kim, J. Peerzada, et al. // Arthritis. Rheum. 2004. - Vol. 50, №3. - P. 849-857.

92. Crassmann W. Die Awerstreifung von Kollagenfibrillen/ W. Crassmann. // Naturwissenchaften. 1955. - Bd. 6. - S. 241.

93. Grodstein F. A prospective study of incident squamous cell carcinoma of the skin in the nurses' health study/ F. Grodstein, F.E. Speizer, D.J. Hunter. // J. Natl. Cancer. Inst. 1995. - Vol. 87, № 14. -P. 1061-1066.

94. De Luca C. Surface lipids as multifunctional mediators of skin responses to environmental stimuli/ C. De Luca, G. Valacchi. // Mediators of Inflammation . 2010. - Vol. 2010, Art. ID 321494.

95. Dilman V.M. Study of the antitumor effect of polypeptide pineal extract/ V.M. Dilman et al. // Oncology. 1979. - Vol. 36, № 6. - P. 274-280.

96. Durvasula R. Hormone replacement therapy and malignant melanoma: to prescribe or not to prescribe?/ R. Durvasula, S.M. Ahmed, A. Vashisht, et al. // Climacteric. 2002. - Vol. 5. - P. 197-220.

97. Dyer D. Accumulation of Maillard reaction products in skin collagen in diabetes and aging/ D. Dyer, J. Dunn et al. // J. Clin. Invest. 1993.-Vol. 91.-P. 2463-2469.

98. El-Domiaty M. Instrinic ageing vs photoaging: a comparative histopathological, immunohistochemical and ultrastractural study of skin/ M. El-Domiaty, S. Attia, F. Saleh et al. // Exp. Dermatol. 2002. - Vol. 11, №5.-P. 398-405.

99. Eriksson M.O. Palmoplantar pustulosis: a clinical and immunohistological study/ M.O. Eriksson, E. Hagforsen, I.P. Lundin et al. // Br. J. Dermatol. 1998. - Vol. 138, №3. - P. 390-398.

100. Filipowicz E. Expression of CD95 (Fas) in sun-exposed human skin and cutaneous carcinomas/ E. Filipowicz, P. Adegboyega, R.L. Sanchez, Z. Gatalica. // Cancer. -2002. Vol. 94, № 3. - P. 814 - 819.

101. Fisher G.J. Ultraviolet irradiation increases matrix metalloproteinase-8 protein in human skin in vivo/ G.J. Fisher, H.C. Choi, Z. Bato-Csargo et al. // J. Invest. Dermatol. 2001. - Vol. 117, № 2. - P. 219-226.

102. Furukawa F. Immunogistochemical localization of proliferating cell nuclear antigen/cyclin in human skin/ F. Furukawa, S. Imamura, M. Fujita et al. // Arch. Dermatol. Res. 1992. - Vol. 284, № 2. - P. 86 -91.

103. Gniadeck R. Resistance of senescent keratinocytes to UV-inducted apoptosis/ R. Gniadeck, M. Hansen, H.C. Wulf. // Cell Mol. Biol. (Noisy-legrand). 2000. - Vol. 46. - P. 121 - 127.

104. Grewe M. Chronological ageing and photoageing of dendritic cells/ M. Grewe. // Clin. Exp. Dermatol. 2001. - Vol. 26. - P. 608-612.

105. Haddad M.M. Ageing in epidermal melanocytes: cell cycle gene and melanin/ M.M. Haddad, W. Xu, E.E. Medrano. // J. Invest. Dermatol. Symp. Proc. 1998. - Vol. 3, № 1. - P. 36-40.

106. Hamanaka H. Lowered Cu, Zn-superoxide dismutase activity in human malignant skin tumors/ H. Hamanaka, J. Miyachi, T. Tachibana, S. Imamura. // J. Dermatol. 1991. - Vol. 18, №5. - P. 258-261.

107. Harman D. Free-radical theory of aging. Increasing the functional life span/ D. Haman. // Ann. N. Y. Acad. Sci. — 1994. — Vol. 717.— P. 1 15.

108. Hayflick L. How and why we age/ L. Hayflick. // Exp. Gerontol. — 1998. — Vol. 33. — P. 639 653.

109. Iyengar B. The role of melanocytes in the repair of UV related DNA damage in keratinocytes/ B. Iyengar. // Pigment. Cell Res. 1998. -Vol. 11, № 2. - P. 110 - 113.

110. Kimball S.R. Mechanism of the inhibition of protein synthesis by vasopressin in rat liver/ S.R. Kimball, L.S. Jefferson. // J. Biol. Chem. -1990. Vol. 265, № 28. - P. 16794 - 16798.

111. Kirkwood T. B. L. The evolution of aging and longevity/ T. B. L. Kirkwood. // Phil. Trans. Roy. Soc. London. — 1997. — Vol. B352. — P. 1765 1772.

112. Kirkwood T. B. L. Evolution of aging/ T. B. L. Kirkwood. // Mech. Agening DeVol. — 2002. — Vol. 123. — P.737 745.

113. Krutmann J. The role Of UVA rays in skin ageing/ J. Krutmann. // Europ. J. Of Dermatology. 2001. - Vol. 11, № 2. - P. 170 - 171.

114. Lapiere C.M. The ageing dermis: the main cause for the appearance of old skin/ C.M. Lapiere. // Brit. J. Dermatol. 1990. - Vol. 122. -Suppl. 35.-P.5-11.

115. Lee J.H. Acute effects of UVB radiation on the proliferation and differentiation of keratinocytes/ J.H. Lee, H.T. An, J.H. Chung et al. // Photodermatol. Photoimmunol. Photomed. 2002. - Vol. 18, № 5. . p. 253 - 261.

116. Lademann J. Interaction between Carotenoids and Free Radicals in Human Skin/ J. Lademann, S. Schanzer, M. Meinke, W. Sterry. // Skin. Pharmacol. Physiol. 2011. - Vol. 24, № 5. - P. 238-244.

117. Ling G. Persistent p53 mutatuons in single cells from normal human skin/ G. Ling, A. Person, B. Berne et al. // Am. J. Pathol. 2001. - Vol. 159, № 4. - P. 1247 - 1253.

118. Madden K. Quantification of melanocytes in sun-damaged skin/ K. Madden, S.B. Forman, D. Elston.// J. Am. Dermatol. 2011. - Vol. 64, № 3.-P. 548-552.

119. Miyachi Y. Dermal connective tissue metabolism in photoageing/ Y. Miyachi, O. Ishikawa. // Australas. J. Dermatol. 1998. - Vol. 31, № 1. - P. 491 -493.

120. Moll I. Presence of Merkel cells in sun-exposed and not-sun-exposed skin: a quantitative study/1. Moll, U. Bladt, E.G. Jung. // Arch Dermatol Res. 1990. -Vol. 282, № 4. - P. 213 - 216.

121. Morozov V.G. Natural and sythetic thymic peptides as therapeutics for immune disfunction/ V.G. Morozov, V.Kh. Khavinson. // Int. J. Immunopharmacology. -1997. Vol.19, № 9/10. - P. 501-505.

122. Morris G.F. Transcriptional activation of the human proliferating-cell nuclear antigen promoter by p53/ G.F. Morris, J.R.Bischoff, M.B. Mathews. // Proc. Natal. Acad. Sci. USA. 1996. - Vol. 93, № 2. - P. 895 -899.

123. Nedorost S.T. Cell cycle analysis by flow cytometry of non-exposed, sun-exposed, and tretinoin-treted skin/ S.T. Nedorost, W.F. Bergfeld, R. Valenzuela, J. Guitart, M.G. Fleming. // J. Cutan. Pathol. -1992. Vol. 19, №5.- P. 371 - 375.

124. Ogden S. The effect of ageing on phenotype and function of monocyte derived Langerhans' cells/ S. Ogden, R.J. Dearman, I. Kimber, C.E. Griffiths.//Br. J.Dermatol. -2011.-Vol 165,№1.-P. 184- 188.

125. Okazaki M. Correlation between age and the secretions of melanocyte-stimulating cytokines in cultured keratinocytes and fibroblasts/ M. Okazaki, K. Yoshimura, G. Uchida, K. Harii. // Br. J. Dermatol. 2005. - Vol. 153. - Suppl. 2. - P. 23-9.

126. Rijken F. Photoaged skin: the role of neutrophils, preventive measures, and potential pharmacological targets/ F. Rijken, C.A. Bruinjzeel-Koomen. // Clin. Pharmacol. Ther. 2011. - Vol. 89, № 1. - P. 120- 124.

127. Rittie L. UV-light -induced signal cascades and skin aging/ L. Rittie, G.J. Fisher. // Ageing. Res. 2002. - №1. - P. 705-720.

128. Seharffetter-Kochanek K. Photoaging of the skin from phenotype to mechanisms/ K. Seharffetter-Kochanek, P. Brenneisen, J. Nenk et al. // Exp. Gerontol. 2000. - Vol. 35, № 3. - P. 307 -316.

129. Sorensen L.T. Effect of smoking and abstention on oxidative burst and reactivity of neutrophils and monocytes/ L.T. Sorensen, H.B. Nielsen, A. Kharazmi et al. // Surgery. 2004. - Vol. 136, №5. - P. 1047-1053.

130. Sorensen L.T. Risk factors for tissue and wound complications in gastrointestinal surgery/ L.T. Sorensen, U. Hemmingsen, F. Kallehave et al. // Ann. Surg. 2005. -Vol. 241, №4. - P. 654-658.

131. Toyoda M. Morphological alterations of epidermal melanocytes in photoageing, an ultrastructural and cytomorphometric study/ M. Toyoda, M. Morohashi. // Br. J. Dermatol. 1998. - Vol. 39, № 3. p. 444 452.

132. Tsukahara K. Ovariectomy accelerates photoaging of rat skin/ K. Tsukahara, S. Moriwaki, A. Ohuchi et al. // Photochem. Photobiol. -2001.-Vol. 73.-P. 525-531.

133. Tsukahara K. Ovariectomy is sufficient to accelerate spontaneous skin ageing and to stimulate ultraviolet irradiation-induced photoageing of murine skin/ K. Tsukahara, H. Nakagawa, S. Moriwaki et al. // Br. J. Dermatol. 2004. - Vol. 151. -P. 984-994.

134. Verzar F. Ageing of the collagen fibre/ F. Verzar. // Int. Rev. Connect. Tiss. Res. 1964. - Vol. 2. - P. 244-300.

135. Wei A. Antioxidant activities of essential oil mixtures toward skin lipid squalene oxidized by UV irradiation/ A. Wei, T. Shibamoto. // Cutaneous and Ocular Toxicology. 2007. - Vol. 26, № 3. - P. 227 - 233.

136. Yin L. Skin aging induced by ultraviolet exposure and tobacco smoking: evidence from epidemiological and molecular studies/ L. Yin, A. Morita, A. Tsuji. // Photodermatol. Photoimmunol. Photomed. 2001. -Vol. 17, №4.-P. 178- 183.

137. Zegarska B. Histopathological lesions in different types of skin aging/ B. Zegarska, W. Jozwicki, W. Zegarski, R. Czajkowski. // Acta. Dermatovenerol. Alp. Panonica. Adriat. 2010. - Vol. 19, № 2. - P. 1721.