Влияние плазмокоагулирующей активности золотистых стафилококков на иммунопротективные свойства их рибосом тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.07, кандидат биологических наук Качанова, Ольга Анатольевна

  • Качанова, Ольга Анатольевна
  • кандидат биологических науккандидат биологических наук
  • 2003, КраснодарКраснодар
  • Специальность ВАК РФ03.00.07
  • Количество страниц 212
Качанова, Ольга Анатольевна. Влияние плазмокоагулирующей активности золотистых стафилококков на иммунопротективные свойства их рибосом: дис. кандидат биологических наук: 03.00.07 - Микробиология. Краснодар. 2003. 212 с.

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Качанова, Ольга Анатольевна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. АНАЛИТИЧЕСКИЙ ОБЗОР.

1 Л. Патогенный потенциал золотистых стафилококков.

1.2. Инфекции, вызываемые S. aureus, в клинике и проблема управления ими.

1.2.1. Клинические формы и распространенность заболеваний, обусловленных золотистыми стафилококками.

1.2.2. Лечение и специфическая профилактика инфекций, возбудителем которых является S. aureus.

1.3. Перспективность использования рибосом для конструирования антистафилококковых препаратов.

1.3.1. Протективная активность рибосом микроорганизмов.

1.3.2. Влияние бактериальных рибосом на неспецифическую резистентность макроорганизма.

1.3.3.Бактериальные рибосомы и специфический гуморальный иммунитет.

1.3.4. Бактериальные рибосомы и клеточный иммунитет.

1.3.5. Иммуногенные свойства рибосом золотистых стафилококков.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Характеристика экспериментального материала.

2.2. Питательные среды и буферные системы.

2.2.1. Питательные среды.

2.2.2. Буферные системы.

2.3. Выделение, идентификация и оценка патогенного потенциала клинических штаммов S. aureus.

2.3.1. Контингент обследуемых.

2.3.2. Выделение и идентификация клинических изолятов ф S. aureus.

2.3.2.1. Взятие и первичный посев исследуемого материала.

2.3.2.2. Видовая идентификация выделенных культур.

2.3.2.3. Фаготипирование клинических штаммов S. aureus.

2.3.3. Оценка патогенного потенциала.

2.3.3.1. Получение культуральных жидкостей. щ 2.3.3.2. Определение активности лецитиназы.

2.3.3.3. Определение активности плазмокоагулазы.

2.3.3.4. Измерение гемолитической активности.

2.3.3.5. Измерение антилизоцимной активности.

2.3.3.6. Определение пенициллиназной активности.

2.3.3.7. Тестирование на хлопьеобразующий фактор.

2.4. Выделение тотальных 70S рибосом.

Ф 2.4.1. Получение биомассы.

2.4.2. Дезинтеграция клеток.

2.4.3. Выделение рибосомных фракций.

2.4.4. Хранение рибосомного материала.

2.5. Контроль качества полученных препаратов.

2.5.1. Спектрофотометрический анализ.

2.5.2. Седиментационный анализ.

2.5.3. Электрофоретический анализ.

2.5.3.1. Электрофорез рибосомных белков.

2.5.3.2. Электрофорез рибосомной РНК.

2.6. Моделирование инфекционного процесса, иммунизация лабораторных животных, оценка реактогенности и протективных свойств препаратов 70S рибосом.

2.6.1. Моделирование локализованной формы стафилококковой инфекции.

2.6.2. Иммунизация лабораторных животных.

2.6.3. Оценка реактогенности препаратов рибосом.

2.6.4. Оценка протективного эффекта.

2.7. Иммунологические исследования.

2.7.1. Забор крови у лабораторных животных.

2.7.2. Тестирование функционального состояния нейтрофильных гранулоцитов.

2.7.2.1. Определение фагоцитарной активности.

2.7.2.2. Оценка функциональной активности микробицидных систем нейтрофильных гранулоцитов.

2.7.2.2.1. Спонтанный и стимулированный NBT-тест.

2.7.2.2.2. Определение активности миелопероксидазы.

2.7.2.2.3. Лизосомально-катионный тест.

2.7.2.2.4. Определение активности хлорацетат-А8-0-эстеразы.

2.7.2.2.5. Определение активности щелочной фосфатазы.

2.7.3. Оценка гуморального звена иммунитета.

2.7.3.1. Определение антител к плазмокоагулазе и гемотоксинам.

2.8. Статистическая обработка результатов.

ГЛАВА 3. ОТБОР ШТАММОВ S. AUREUS ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ

ПРЕПАРАТОВ РИБОСОМ.

ГЛАВА 4. ПОЛУЧЕНИЕ И СТАНДАРТИЗАЦИЯ ПРЕПАРАТОВ 70S

РИБОСОМ.

ГЛАВА 5. МОДЕЛИРОВАНИЕ ЛОКАЛИЗОВАННОЙ ФОРМЫ

СТАФИЛОКОККОВОЙ ИНФЕКЦИИ.

ГЛАВА 6. ПРОТЕКТИВНЫЙ ЭФФЕКТ 70S РИБОСОМ

S. AUREUS НА МОДЕЛИ ГОМОЛОГИЧНОЙ

ЛОКАЛИЗОВАННОЙ ИНФЕКЦИИ.

ГЛАВА 7. ИММУНОТРОПНЫЕ ЭФФЕКТЫ 70S РИБОСОМ, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ ШТАММОВ S. AUREUS С РАЗЛИЧНЫМИ

ВИРУЛЕНТНЫМИ СВОЙСТВАМИ.

7.1. Реактогенность полученных препаратов рибосом.

7.2. Влияние иммунизации 70S рибосомами различных штаммов

S. aureus на количество и популяционный состав лейкоцитов.

7.3. Влияние 70S рибосом различных штаммов S. aureus на фагоцитарную активность нейтрофильных гранулоцитов.

7.4. Состояние микробицидных систем нейтрофильных гранулоцитов кроликов, иммунизированных 70S рибосомами различных штаммов золотистых стафилококков.

7.5. Протективные свойства препаратов 70S рибосом, полученных из различающихся по вирулентным свойствам штаммов S. aureus.

7.6. Влияние иммунизации 70S рибосомами различающихся по вирулентным свойствам штаммов S. aureus на специфический гуморальный иммунитет.

ГЛАВА 8. ВЛИЯНИЕ ФАКТОРОВ ПАТОГЕННОСТИ ЗОЛОТИСТЫХ СТАФИЛОКОККОВ НА ИММУНОГЕННЫЕ СВОЙСТВА ИХ

РИБОСОМ.

Рекомендованный список диссертаций по специальности «Микробиология», 03.00.07 шифр ВАК

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние плазмокоагулирующей активности золотистых стафилококков на иммунопротективные свойства их рибосом»

Актуальность темы. Staphylococcus aureus является возбудителем широкого круга заболеваний, характеризующихся большим разнообразием клинических проявлений как по локализации инфекционного процесса, так и по тяжести его течения. Наиболее восприимчивы к поражениям данной этиологии лица со сниженной иммунобиологической резистентностью. Общепризнано, что наиболее эффективным и экономичным способом снижения инфекционной заболеваемости является использование иммунобиологических препаратов (Воробьёв А.А., 1999, Покровский В.И., Семёнов Б.Ф., 1999).

Арсенал средств для специфической активной иммунопрофилактики и иммунотерапии инфекций, возбудителем которых является S. aureus, достаточно богат. Он включает вакцинные препараты различных типов: анатоксин, ан-тифагин, корпускулярную, бесклеточную, поликомпонентные и аутовакцины (Медуницын Н.В., 1999). Но, несмотря на успехи в борьбе с распространением S. aureus, относить вызываемые им инфекции к числу эффективно управляемых преждевременно. Золотистые стафилококки по-прежнему занимают одно из ведущих мест в этиологической структуре оппортунистических инфекций (Алексеев А.А. и др., 1999, Яковлев В.П. и др., 1999, Решетников В.А. и др., 1999, Anielsky R., 1998). Остро стоят проблемы профилактики и санации стафилококкового бактерионосительства, а также терапии хронических локализованных инфекционных процессов.

В связи с этим очевидна необходимость пополнения арсенала специфических иммунотропных средств борьбы со стафилококковыми инфекциями более эффективными препаратами. В литературе последних лет широко обсуждаются проблемы и перспективы их создания (Протченко П.З., 1998, Николаев В.Л., Мац А.Н., 1998, Fattom A.I. et al., 1998, Fattom A.I., Naso R., 1996, Lee J.C., 1996, Lee J.C., 1998, Bavaris S., Dyas В., Ulrich R.G., 1996, Woody M.A., Krakaurer Т., Stiles B.G., 1997). Разработки ведутся, главным образом, в 2-х направлениях: поиск новых антигенов и конструирование фортифицированных вакцин на осщ нове уже имеющихся препаратов. Изучаются перспективы использования коллагенового адгезина, фибриноген- и фибронектинсвязывающих белков, кап-сульных полисахаридов S. aureus серовариантов 5 и 8, растворимых внеклеточных продуктов. Заслуживают внимания и рибосомы бактерий. Опыт изучения их иммуногенных свойств свидетельствует о высокой протективной активности и низкой токсичности рибосомных фракций, а также способности оказывать иммунокорригирующее влияние на макроорганизм (Белкин З.П. и др., 1991,

• Левенсон В.И., Хазанова В.В., 1991, Хаитов P.M. и др., 1995, Akatov А.К., Prok-horov V.Ya., Tolovskaja K.R., 1981, Dussourd d'Hinterland L., Pinel A.M., Rey G., 1980, Nicolaeva L.V., Savel'ev E.P., 1991, Normier G. et al., 1992). В то же время, природа протективных антигенов рибосом и роль факторов вирулентности возбудителя в обеспечении их иммуногенной активности пока не выяснены.

Цели и задачи исследования, основные экспериментальные подходы.

• Цель работы - оценка перспективности использования рибосом S. aureus для профилактики локализованной стафилококковой инфекции и определение роли вирулентного потенциала золотистых стафилококков в обеспечении иммуногенных свойств их рибосом.

Задачи:

1. Собрать коллекцию клинических штаммов S. aureus.

2. Изучить распространённость плазмокоагулазы, лецитиназы, гемоток-щ сина, хлопьеобразующего и антилизоцимного факторов среди выделенных культур и отобрать штаммы различной вирулентности для сравнительного анализа иммуногенных свойств их рибосом.

3. Получить и стандартизовать препараты рибосом.

4. Разработать экспериментальную модель локализованной стафилококковой инфекции.

5. Изучить влияние плазмокоагулирующей, лецитиназной, гемолитиче-ф ской и антилизоцимной активностей штаммов S. aureus на иммуногенный потенциал их рибосом.

Решение поставленных задач, достигалось в результате:

• проведения бактериологических исследований, направленных на обнаружение различий в фенотипическом проявлении патогенного потенциала у клинических штаммов S. aureus;

• выделения тотальных 70S рибосом из отобранных по комплексу признаков штаммов золотистых стафилококков методом дифференциального ультрацентрифугирования;

• стандартизации качества полученных препаратов рибосом в ходе се-диментационного, спектрофотометрического и электрофоретического анализов;

• моделирования локализованной стафилококковой инфекции у различных лабораторных животных (мышей, морских свинок и кроликов);

• изучения способности 70S рибосом различных штаммов S. aureus защищать от развития локализованной стафилококковой инфекции;

• исследования изменений фагоцитарной активности и состояния мик-робицидных систем нейтрофильных гранулоцитов;

• изучения действия 70S рибосом различающихся по фенотипическому проявлению патогенного потенциала штаммов S. aureus на динамику синтеза антител к гемотоксину и плазмокоагулазе;

• оценки влияния факторов вирулентности золотистых стафилококков на иммуногенный потенциал его рибосом.

Новизна и теоретическое значение работы. Впервые установлены следующие факты:

• зависимость иммунотропных эффектов рибосом S. aureus от плазмокоагулирующей, лецитиназной, гемолитической и антилизоцимной активностей возбудителя;

• способность 70S рибосом различных штаммов S. aureus защищать макроорганизм от развития локализованной стафилококковой инфекции. Разработана схема иммунизации, обеспечивающая высокий уровень протекции;

• введение животным 70S рибосом золотистых стафилококков в протек-тивных дозах сопровождается увеличением пула циркулирующих в периферической крови лейкоцитов и изменением их популяционного состава с повышением доли лимфоцитов;

• протективные дозы 70S рибосом S. aureus активируют кислородзависи-мые механизмы биоцидности и повышают уровень миелопероксидазы и катионных белков, но не щелочной фосфатазы и хлорацетат-ASD-эстеразы нейтрофильных гранулоцитов иммунизированных животных;

• протективные дозы 70S рибосом S. aureus не влияют на динамику образования антител к плазмокоагулазе и гемотоксинам микроорганизма;

• протективный эффект рибосом не снижается при иммунизации гетероло-гичным по отношению к возбудителю препаратом рибосом S. aureus.

Научно-практическое значение работы

Полученные факты углубляют представления о механизмах реализации протективного эффекта, индуцированного рибосомами прокариот и роли в этом процессе нерибосомных антигенов. Это позволяет более детально осмыслить природу защитных свойств бактериальных рибосом, а, следовательно, шире применять их в конструировании вакцинных препаратов.

Ареактогенность и высокая протективная активность 70S рибосом S. aureus позволяет рекомендовать их к применению в конструировании новых вариантов антистафилококковых вакцин. Выяснение характера влияния факторов вирулентности золотистых стафилококков на иммуногенный потенциал их рибосом определяет подходы к отбору штаммов для получения препаратов с направленной стимуляцией отдельных иммунологических реакций макроорганизма.

Внедрение результатов в практику

По материалам исследования опубликовано 12 печатных работ. Основные положения диссертации докладывались на II международной конференции "Современная вакцинология" (г. Пермь, 1998), научно-практической конференции молодых учёных и студентов Кубанской государственной медицинской академии (Краснодар, 1999), V краевой научно-практической конференции молодых учёных (г. Анапа, 1999), II съезде иммунологов России (г. Сочи, 1999), региональной научно-практической конференции молодых учёных "Развитие социально-культурной сферы Северо-Кавказского региона" (Новороссийск, 2001).

Результаты изучения обстоятельств реализации индуцированного 70S рибосомами S. aureus протективного эффекта и влияния на иммуногенный потенциал этих препаратов вирулентных свойств возбудителя внедрены в научную работу центральной научно-исследовательской лаборатории и кафедры аллергологии, иммунологии и клинической лабораторной диагностики Кубанской государственной медицинской академии, лабораторий клинической микробиологии и иммунологии Российского центра функциональной и хирургической гастроэнтерологии, Северо-Кавказского научно-исследовательского института СК НИИ "Биотеххим".

Материалы диссертации используются в учебном процессе кафедры микробиологии Кубанской государственной медицинской академии и кафедры микробиологии и генетики Кубанского государственного университета.

Положения, выносимые на защиту:

• 70S рибосомы S. aureus обеспечивают высокий уровень протекции при локализованной форме стафилококковой инфекции, причем эффективность создаваемой защиты не снижается при заражении гетерологичным по отношению к препарату штаммом;

• формирование протекции происходит на фоне возрастания уровня лимфоцитов и увеличения общего количества лейкоцитов в периферической крови животных, а также повышения интенсивности процессов поглощения микробных клеток нейтрофильными гранулоцитами;

• в реализации индуцированного рибосомами протективного эффекта антитела к гемотоксину и плазмокоагулазе существенной роли не играют;

• in vivo 70S рибосомы различных штаммов S. aureus стимулируют активность кислородзависимых и отдельных компонентов (катионные белки и миелопероксидаза) кислороднезависимых микробицидных систем нейтрофильных гранулоцитов;

• на иммунотропные эффекты 70S рибосом S. aureus оказывают влияние плазмокоагулирующая, гемолитическая, антилизоцимная и, в меньшей степени, лецитиназная активности возбудителя.

Похожие диссертационные работы по специальности «Микробиология», 03.00.07 шифр ВАК

Заключение диссертации по теме «Микробиология», Качанова, Ольга Анатольевна

ВЫВОДЫ

1. Интактные 70S рибосомы S. aureus ареактогенны и создают высокий уровень протекции от локализованной формы инфекции данной этиологии. Иммунизация гомологичным и гетерологичным по отношению к штамму-возбудителю препаратом формирует одинаково эффективную защиту.

2. Оптимальной схемой иммунизации, обеспечивающей устойчивость к инфекции, является двукратное введение 0,4 мг рибосом с интервалом 10 дней.

3. Эффективность формируемой защиты макроорганизма зависит от дозы и кратности введения препарата. При однократной иммунизации высокими дозами рибосом (40 мг на животное) способность организма кроликов к борьбе со стафилококковой инфекцией снижается.

4. Протекция макроорганизма 70S рибосомами S. aureus формируется в результате повышения уровня лимфоцитов в периферической крови иммунизированных животных и стимуляции поглотительной активности нейтрофильных гранулоцитов.

5. Протекция макроорганизма 70S рибосомами S. aureus не связана с антителами к плазмокоагулазе и гемолизину.

6. Вирулентный потенциал возбудителя влияет на иммунотропные эффекты рибосом в отношении нейтрофильных гранулоцитов, однако не имеет существенного значения для развития протективного эффекта.

7. По степени выраженности влияния на иммунотропные эффекты рибосом S. aureus факторы вирулентности возбудителя располагаются в следующем порядке: плазмокоагулирующая, гемолитическая и антилизоцимная, лецити-назная активность.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

К настоящему времени получено большое количество экспериментальных вакцин на основе рибосом микроорганизмов как с прокариотическим, так и с эукариотическим типом организации клетки. Практически все препараты обладают низкой токсичностью, малореактогенны и демонстрируют высокую протективную активность. Эти факты свидетельствуют о перспективности использования рибосом микроорганизмов в качестве протективных антигенов для создания вакцин нового поколения. Тем не менее, широкого применения в конструировании вакцин рибосомы до сих пор не нашли. На их основе разработано и внедрено в клиническую практику пока только 3 коммерческих препарата ("Рибомунил", "Бронховаксом", "ИРС-19"). Такое положение отчасти объясняется отсутствием четких представлений о механизмах формирования защитного эффекта и природе протективного фактора рибосом.

Выполненное нами исследование направлено на: 1) оценку перспективности использования рибосом золотистых стафилококков в конструировании препаратов для профилактики локализованных форм инфекции данной этиологии; 2) выяснение обстоятельств реализации протективного эффекта и роли факторов вирулентности возбудителя в этом процессе.

Анализируя результаты проделанной работы, мы пришли к выводу, что наилучшей биологической моделью для воспроизведения локализованной стафилококковой инфекции из традиционно используемых в практике микробиологических исследований лабораторных животных (мыши, морские свинки, кролики) являются кролики. По данным бактериологического обследования у них, в отличие от мышей и морских свинок, не наблюдается генерализации инфекционного процесса при заражении 109 КОЕ S. aureus, а продолжительность течения заболевания, в то же время, максимальна. Оптимальной инфицирующей дозой для моделирования локализованной стафилококковой инфекции у кроликов является 10 КОЕ задействованного в этой серии экспериментов штамма S. aureus.

В формировании локализованного инфекционного процесса с затяжным течением у кроликов, по всей видимости, немаловажную роль играет плазмо-коагулаза возбудителя. Альтернативные по этому признаку клинические штаммы S. aureus существенно различались по способности вызывать данную форму инфекции у животных. При заражении коагулазоотрицательным штаммом S. aureus во всех испытанных дозах очаги гнойно-некротического поражения в месте инокуляции возбудителя не возникали, а максимальная длительность течения инфекционного процесса была снижена в 3,5-3,75 раза по сравнению с таковой при введении коагулазоположительного S. aureus.

Развитие стафилококковой инфекции у морских свинок на ранних этапах (1-е сутки с момента введения возбудителя) сопровождается подавлением фагоцитарной активности нейтрофильных гранулоцитов. У заражённых животных наблюдается депрессия процессов захвата и внутриклеточной деградации микроорганизмов сегментоядерными лейкоцитами. Причём у части морских свинок из опытной группы показатели, характеризующие переваривающую функцию нейтрофильных гранулоцитов, были достоверно ниже, чем у остальных. Впоследствии у этих животных инфекционный процесс генерализовался, тогда как у морских свинок с менее выраженными нарушениями способности полиморфноядерных лейкоцитов к киллингу и деградации бактерий он протекал в локальной форме. Очевидно, исход заболевания при заражении золотистыми стафилококками во многом определяется степенью угнетения переваривающей функции нейтрофильных гранулоцитов на ранних этапах развития инфекции. Обнаруженное явление позволяет рассматривать данные показатели в качестве прогностического критерия, а также свидетельствует о значимости осуществляемого сегментоядерными лейкоцитами фагоцитоза в защитных реакциях макроорганизма, направленных на элиминацию S. aureus.

Применение рибосом S. aureus для профилактики локализованных форм стафилококковой инфекции следует признать перспективным. Интактные 70S рибосомы золотистых стафилококков обеспечивают высокий уровень протекции как при заражении гомологичным по отношению к препарату штаммом, так и гетерологичным. Иммунизация рибосомным материалом не сопровождается развитием аллергических реакций общего и местного характера, в связи с чем препараты можно считать ареактогенными.

Анализ клинических параметров течения инфекционного процесса показал, что низкие дозы рибосомного материала (0,01 мг на животное) протектив-ной активностью не обладают. Защиту от гомологичной локализованной стафилококковой инфекции у кроликов создаёт введение умеренных (0,1; 0,2; 0,4 мг на животное), но не высоких (40 мг на животное) доз рибосом. Иммунизация массивной дозой препарата приводит, по всей видимости, к депрессии антиинфекционного иммунитета, поскольку у кроликов соответствующей опытной группы заболевание протекает в более тяжёлой по сравнению с интактными животными клинической форме.

Эффективность рибосомной протекции зависит от дозы и кратности их введения. Значимым для формирования устойчивости к инфекции является изменение дозы препарата не менеее, чем на порядок. Оптимальной схемой иммунизации, обеспечивающей максимальный уровень протекции, является двукратное введение 0,4 мг рибосом с интервалом 10 дней. По эффективности создаваемая данным способом защита приближается к таковой при реализации механизмов естественного постинфекционного иммунитета. Использование рибосом в протективных дозах отменяет развитие некроза тканей в месте инокуляции возбудителя.

Рассматривая обстоятельства реализации защитного эффекта, мы обнаружили следующие явления. Иммунизация кроликов препаратами рибосом из различных штаммов S. aureus в дозах, обеспечивающих протекцию, сопровождается увеличением общего количества лейкоцитов в периферической крови животных за счет повышения уровня лимфоцитов. Введение рибосом стимулирует также процессы захвата микроорганизмов нейтрофильными гранулоцита-ми: у животных всех опытных групп количество активных клеток, общее число и число поглощенных одним фагоцитом бактерий достовено выше, чем у контрольных. В то же время, показатели, характеризующие переваривающую функцию сегментоядерных лейкоцитов, у иммунизированных животных остаются в пределах значений, регестрируемых у интактных кроликов (ИП), или даже существенно ниже по сравнению с ними (%П). Эта ситуация создаёт ложное впечатление о провокации незавершённости фагоцитарного акта иммунизацией протективнымим дозами рибосом. Мы считаем, что наблюдаемое явление отражает следующую биологическую ситуацию: увеличение антигенной нагрузки на фагоцит ведёт только к замедлению, а не снижению эффективности процессов внутриклеточной деградации бактерий. В пользу этого предположения свидетельствует объективно регистрируемое у иммунизированных животных развитие устойчивости к инфекции, что трудно себе представить на фоне незавершённого фагоцитоза.

Повышение способности нейтрофильных гранулоцитов к эффективному фагоцитозу, видимо, связано с активацией функционального резерва самой клетки. К такому заключению мы пришли, сравнивая влияние 70S рибосом на сегментоядерные лейкоциты in vivo и in vitro. Несмотря на то, что в этих экспериментах были использованы различные экспериментальные модели (in vivo -кролики, in vitro - образцы крови морских свинок), эффекты наблюдались аналогичные. In vitro стафилококковые 70S рибосомы также стимулировали поглотительную, а кроме того, переваривающую функцию фагоцитов. Учитывая это обстоятельство, можно предположить, что интенсификация процессов захвата бактерий сегментоядерными лейкоцитами обусловлена повышением рецептор-ной активности мембран данных клеток. В тоже время, in vivo это явление может быть связано также и с возрастанием титров опсонинов в сыворотке крови иммунизиррованных животных.

Тот факт, что в экспериментах in vitro в качестве биологической модели использовались нейтрофильные гранулоциты инфицированных S. aureus морских свинок с нарушенными поглотительной и переваривающей функциями, а добавление рибосомного препарата S. aureus 209Р нормализовало (в дозе 1 мкг) или даже стимулировало (в дозе 10" мкг) процессы фагоцитоза, позволяет говорить о способности рибосом золотистых стафилококков оказывать корригирующее влияние на фагоцитарную активность сегментоядерных лейкоцитов. Полученные данные открывают широкую перспективу для изучения возможности использования рибосом S. aureus в конструировании иммуномодуляторов.

Помимо модификации фагоцитарной активности нейтрофильных гранулоцитов, in vivo рибосомы золотистых стафилококков изменяют также состояние микробицидных систем этих клеток. Однако, выраженным влиянием на антимикробный потенциал сегментоядерных лейкоцитов обладают не все препараты, а только полученные из S. aureus 645, 788 и 2. Иммунизация протектив-ными дозами рибосом этих штаммов активирует окислительный метаболизм нейтрофильных гранулоцитов. Причем функциональный резерв лейкоцитов, видимо, расходуется полностью, потому что дополнительная антигенная стимуляция (NBT ст.) к существенному увеличению продукции супероксидов не приводит. Под действием препаратов, полученных из этих штаммов, в нейтрофильных гранулоцитах также увеличивается содержание катионных белков, а рибосомы штамма 645, кроме того, активируют миелопероксидазу.

Иммунизация рибосомами различающихся по фенотипическому проявлению патогенного потенциала штаммов S. aureus не вызывала образования антител к гемолизину и плазмокоагулазе возбудителя. Динамика синтеза иммуноглобулинов данной специфичности в ходе инфекционного процесса у опытных и интактных крорликов также не отличалась. Из чего можно заключить, что рибосомы не оказывают влияния на антителогенез к этим факторам патогенности.

Все наблюдаемые in vivo иммунотропные эффекты сохранялись в течение 15 суток после завершения курса иммунизации. Поскольку уровень компонентов кислороднезависимых микробицидных систем нейтрофильных гранулоцитов определяется на ранних стадиях созревания клетки количеством изначально синтезированного вещества и не зависит от ее стимуляции, а пул поли-морфноядерных лейкоцитов, циркулирующих в периферической крови, полностью обновляется каждые 10 часов, можно предположить, что препараты рибосом воздействуют на процессы гемопоэза.

Сопоставляя иммуннотропные эффекты, полученные при иммунизации различных штаммов S. aureus, и принимая во внимание тот факт, что в каждом случае формировалась устойчивость к инфекции, мы пришли к следующим выводам:

1) значимым для реализации протекции является повышение содержания лейкоцитов и увеличение абсолютного количества лимфоцитов в периферической крови животных, а также активация поглотительной функции нейтрофильных гранулоцитов;

2) высокая скорость элиминации микроорганизма из очага поражения, по всей вероятности, препятствует нанесению существенных повреждений окружающим тканям на ранних этапах развития инфекционного процесса, вследствие чего их репарация занимает более короткие сроки, а заболевание протекает в менее тяжёлой клинической форме;

3) модификация рибосомами состояния микробицидных систем сегментоядерных лейкоцитов не имеет решающего значения в обеспечении индуцированной этими препаратами защиты;

4) в реализации рибосомной протекции антитела к плазмокоагулазе и гемолизинам существенной роли не играют.

Для оценки влияния факторов вирулентности золотистых стафилококков на иммуногенный потенциал их рибосом мы проводили сравнительный анализ иммунотропных эффектов препаратов, выделенных из различающихся по вирулентным свойствам штаммов S. aureus (645, 788, 2, 32 и 1128).

Необходимым условием адекватного сравнения, на наш взгляд, является единый методический подход к получению препаратов и стандартизация их качества. Результаты седиментационного, спектрофотометрического и электро-форетического анализа выделенного нами рибосомного материала позволяют утверждать, что каждый препарат представляет собою интактные 70S рибосомы без посторонних примесей.

Сопоставляя действие на организм животных 70S рибосом из различных штаммов S. aureus, мы обнаружили ряд общих моментов: все препараты индуцировали развитие протективного эффекта, формировавшегося на фоне увеличения общего количества лейкоцитов и абсолютного количества лимфоцитов в периферической крови иммунизированных животных, а также интенсификации процессов захвата микробных клеток нейтрофильными гранулоцитами. Мы полагаем, что за развитие этих реакций в организме кроликов отвечают консервативные, и поэтому общие для всех препаратов, антигены рибосом.

В то же время, иммуногенные свойства рибосом, полученных из различающихся по фенотипическому проявлению патогенного потенциала штаммов S. aureus, характеризовались рядом особенностей. Так, к достоверному изменению относительного содержания нейтрофильных гранулоцитов и лимфоцитов в периферической крови опытных животных были способны только препарты штаммов 645 и 32. Количество активных фагоцитов (полиморфноядерных лейкоцитов) у иммунизированных рибосомами штаммов 788 и 2 кроликов было выше, чем у тех, которым вводили препараты штаммов 1128 и 32. Состояние микробицидных систем нейтрофильных гранулоцитов модифицировали только рибосомы штаммов 645, 788 и 2.

Принимая во внимание то обстоятельство, что все препараты обладают стандартными физико-химическими характеристиками, наблюдаемые различия в их иммуногенных свойствах мы связываем с наличием антигенов нерибосом-ной природы. Комплектация рибосомного материала этими антигенами, по нашему мнению, зависит и от вирулентных характеристик штамма.

Для проверки данного предположения методом однофакторного дисперсионного анализа оценивалась корреляция между активностью факторов патогенности золотистых стафилококков (плазмокорагулазы, лецитиназы, гемолизина, способности к инактивации лизоцима) и выраженностью индуцированных их рибосомами иммунотропных эффектов. Полученные данные свидетельствуют о зависимости иммуногенного потенциала рибосом от вирулентных свойств S. aureus. Факторы патогенности возбудителя определяют, главным образом, действие препаратов на состояние нейтрофильных гранулоцитов. Наиболее выраженное влияние на иммуногенный потенциал рибосом оказывает плазмокоагулазная активность. Она в значительной мере детерминирует изменения относительного содержания нейтрофильных гранулоцитов в периферической крови опытных животных, а также способности этих клеток к поглощению и перевариванию бактерий. Кроме того, обнаруживает корреляцию со степенью стимуляции окислительного метаболизма сегментоядерных лейкоцитов при дополнительном контакте с антигеном и содержанием в них катионных белков. Гемолитическая и антилизоцимная активности тесно связаны с варьированием показателей, характеризующих состояние микробицидных систем нейтрофильных гранулоцитов (уровень катионных белков и продукция супероксидов при дополнительной антигенной нагрузке). Лецитиназная активность определяла изменения максимального количества использованных для оценки иммуногенности рибосом параметров: относительного содержания нейтрофильных гранулоцитов и абсолютного количества лимфоцитов в периферической крови животных, способности полиморфноядерных лейкоцитов к поглощению и перевариванию бактерий, а также уровень в них супероксидов (определяемый в нагрузочном тесте) и катионных белков. Однако выявленное влияние было выражено слабо.

Результаты седиментационного и спектрофотометрического анализа позволяют нам уверенно исключить наличие в препаратах посторонних примесей. Остаётся предположить, что данные антигены находятся в состоянии физиологической ассоциации с рибосомами. В пользу такого предположения свидетельствуют и данные литературы. Kita Е. et all. (1991) продемонстрировали способность рибосом Streptococcus pyogenes, несущих на своей поверхности белок Salmonella typhimurium с молекулярной массой 43 кД, защищать мышей от сальмонеллёза. В.Г. Орлов (1992) обнаружил ассоциированные с 50S субъединицей белки, обладающие антигенным родством с мембранными белками.

Как косвенное доказательство высказанного предположения могут рассматриваться и полученные В.П. Крыловым данные (1996): удаление нерибо-сомных белков при помощи троекратной отмывки рибосом S. aureus и К. pneumoniae буферными растворами, не содержащими хлорида аммония, ведет к снижению эффективности создаваемой защиты всего на 10%. А нами установлено, что изменения большинства показателей иммуногенной активности рибосом, на которые в какой-то степени оказывают влияние факторы патогенности возбудителя, решающей роли в обеспечении индуцированной этими препаратами протекции не играют.

Проведённый электрофоретический анализ белковых спектров после денатурации препаратов не позволяет уверенно опровергнуть или принять предположение о наличии факторов вирулентности золотистых стафилококков в антигенном репертуаре их рибосом. Судя по электрофореграммам, основная масса белков препаратов обладает молекулярной массой, близкой к таковой изучаемых факторов вирулентности. Поэтому отсутствие качественных различий в белковых спектрах рибосомного материала, полученного из альтернативных по плазмокоагулазной активности штаммов S. aureus может объяснятся не отсутствием самого фактора патогенности в составе антигенов препарата, а тем, что какой-то из консервативных рибосомных белков имеет такую же молекулярную массу.

Обобщая результаты проделанной работы, можно сказать следующее: рибосомы золотистых стафилококков являются перспективным материалом для конструирования препаратов, направленных против локализованных инфекций данной этиологии. Поскольку для реализации протективного эффекта немаловажное значение имеет интенсивность процессов захвата бактерий нейтрофильными гранулоцитами, а изменение соответствующих показателей в значительной мере детерминируется плазмокоагулазной активностью возбудителя, очевидно, что для получения препаратов рибосом целесообразно использовать коагулазоположительные штаммы.

В последнее время в зарубежной и отечественной литературе широко дискутируются проблемы и перспективы конструирования новых более эффективных антистафилококковых вакцин. Разработаны теоретические предпосылки создания "идеальной" вакцины, которая позволит успешно бороться с гной-но-воспатлительными заболеваниями данной этиологии во всем многообразии их клинических форм (Lee J., 1996). По мнению автора, такой препарат должен препятствовать адгезии стафилококка, стимулировать фагоцитоз и синтез специфических к возбудителю антител (прежде всего, опсонинов). Рибосомы S. aureus, на наш взгляд, заслуживают внимания как один из компонентов "идеальной" вакцины в связи с тем, что способны активировать и корригировать процессы фагоцитоза, осуществляемые нейтрофильными гранулоцитами.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Качанова, Ольга Анатольевна, 2003 год

1. Акатов А.К., Зуева B.C. Стафилококки. М.: Медицина. - 1983. - 256 с.

2. Акатов А.К., Толовская К.Р. Активная иммунизация ассоциированным препаратом с целью профилактики стафилококковой инфекции в эксперименте // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. -1971. -№ 11. С.79-82.

3. Алексеев А.А., Яковлев В.П., Федоров В.Д., Крутиков М.Г. Инфекция у обожженных: вопросы патогенеза, профилактики и лечения // Хирургия. 1999. - № 6. - С.4-9.

4. Аникина Т.П., Голосова Т.В. Действие антистафилококкового гамма-глобулина при экспериментальной стафилококковой инфекции //

5. Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1971. -№8. - С. 4952.

6. Ахмеров Ф.Р., Агеев А.Г., Галиуллин Н.Г., Михайлова Н.А., Куняги-на О.В. Внедрение новых медицинских технологий в систему лечебно-эвакуационных мероприятий военнослужащих // Современная вакцинология. Пермь, 1998. - С.63-64.

7. Ашмарин И.П., Ждан-Пушкина С.М., Кокряков В.И., Самедов А.Ш., Антонова С.Н. Антибактериальные и антивирусные функции основных белков клетки и перспективы практического их использования // Извест. Академ, наук СССР. Серия биол. 1972. - №4. - С. 502-508.

8. Бабаянц А.А., Карганова Г.Г. Антитоксическое действие лейкоцитарного интерферона в опытах in vitro // Антибиотики и мед. биотехнология. 1984. - №11. - С. 834-836.

9. Бакулин И.Н., Сергеева Т.И. Получение рибосомальной фракции Clostridium perfrindens типа "А" и оценка ее протективной активности // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1990. - №4. -С. 80-83.

10. Барсуков B.C. Феномен тахифилаксии в патогенезе экспериментального инфекционного процесса // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1992. - №5-6. - С. 17-21.

11. Белкин З.П., Левенсон В.И., Егорова Т.П. Действие рибосомальных препаратов на неспецифическую резистентность к бактериальной инфекции и раннюю толерантность к эндотоксическому шоку // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1991. - №4. - С.47-50.

12. Белоненко Г.А., Тараненко Л.Д., Варенко Ю.С. Особенности комбинированной антимикробной терапии при стафилококковом лактационном мастите // Вест, хирургии. 1993. - № 3-4. - С.96-98.

13. Белоцкий С.М., Снастина Т.И. Иммунный ответ при несмертельной стафилококковой инфекции у морских свинок // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. -1982. №1. - С. 98-101.

14. Белоцкий С.М., Карлов В.А, Снастина Т.И., Чуриков А.Н. Характеристика фагоцитов при острой гнойной хирургической инфекции // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1982. - №6. — С. 8891.

15. Белоцкий С.М., Арутюнова И.А., Чуриков А.Н., Светухин A.M. Ро-зеткообразующая активность лимфоцитов периферической крови при острых гнойных хирургических заболеваниях // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1980. - №7. - С. 72-74.

16. Бережная Н.М., Кшевецкая С.М., Слинчак С.М., Безверхий В.Д. Функциональные и гистохимические параметры оценки состояниянейтрофилов больных злокачественными новообразованиями //

17. Эксперим. онкология. 1984. - Т.4, №6. - С.49-52.

18. Бережная Н.М. Нейтрофилы и иммунологический гомеостаз. Киев : Науков. Думка. -1988. -189с.

19. Бережной В.В., Мощич П.С., Марушко Ю.В. Затяжное, рецидивирующее и хроническое течение стафилококковой инфекции у детей. -Киев: Здоровья, 1990. 192 с.

20. Бережной В.В., Чернушенко Е.Ф., Спивак Н.Я., Якуба Н.И. Использование интерферона для восстановления функциональной активности фагоцитов в крови при острой пневмонии у детей // Микробиол. журн. 1986. - №12. - С. 211-213.

21. Бочоришвили В.Г., Гомелаури К.Н., Чиковани З.Д., Картозия Л.Б. Применение плацентарного интерферона (плаферона) в комплексном лечении стафилококкового сепсиса // Интерферон. Тбилисси, 1985. -С. 9.

22. Болотников И.А. Словарь иммунологических терминов. М.: Росаг-ропромиздат. - 1991. - 125 с.

23. Брудастов Ю.А., Дерябин Д.Г. Биологическое значение антикомплементарной активности бактерий // Журнал микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1994. - Приложение. - С. 28-32.

24. Бухарин О.В., Брудастов Ю.А., Дерябин Д.Г. Изучение антикомплементарной активности стафилококков // Клин. лаб. диагн. 1992. - № 11-12. -С. 68-71.

25. Бухарин О.В., Дерябин Д.Г., Немцева Н.В. Бактерионосительство стафилококка у работающих на Астраханском газоконденсорном месторождении // Гигиена и санитария. 1993. - №4. - С. 44-47.

26. Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я., Шеенков Н.В. Характеристика антили-зоцимной активности золотистого стафилококка при разных типах течения экспериментальной инфекции // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1993. - №2. - С. 178-180.

27. Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я. Бактерионосительство (медико-экологический аспект). Екатеринбург: УрО РАН, 1996. - 203 с.

28. Бухарин О.В., Валышев А.В., Елагина Н.Н., Иванов Ю.Б., Черкасов С.В. Фотометрическое определение антилизоцимной активности микроорганизмов // Журнал микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. -1997. -№4. С. 117- 120.

29. Бухарин О.В., Курлаев П.П., Чернова О.А., Матюшина С.Б. Факторы персистенции стафилококков в прогнозировании течения гнойно-воспалительных заболеваний // Журнал микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1998. - №5. - С. 27 - 30.

30. Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я., Карташова О.Л. Биология патогенных кокков. М.: Медицина, 2002. - 283 с.

31. Введенская О.И., Станиславский Е.С., Ермольева З.В. Иммунохими-ческий анализ цитоплазматической фракции холероподобного вибриона // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. — 1975. №1. - С.8-13.

32. Венглинская Е.А. Нейтрофильные гранулоциты и естественный иммунитет при аллергическом воспалении // Аллергол. и клин, иммунология. 1994. -№1. - С.28-36.

33. Власов А.В., Зурочка А.В., Долгушин И.И. Изменение иммунотроп-ной активности нейтрофилокинов в течении экспериментальной стафилококковой инфекции // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1989. - №8. - С. 73-76.

34. Воробьев А.А. Современные направления в разработке новых иммунобиологических препаратов // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1999. - №5. - С.16-21.

35. Воробьев Е.И., Петров Р.В., Покровский В.И., Михайленко А.А., Го-родиский Б.В. Программа иммунологического обследования в системе массовых медицинских осмотров населения // Иммунология. -1985.-№ 5 .-С.5-7.

36. Выгодчиков Г.В. Стафилококковые инфекции. М.: Медгиз, 1963.• 270с.

37. Гаврилов А.Ф., Грачева Н.М., Федосова В.Г., Рухадзе Э.З., Левинсон В.И. Рибосомальная дизентерийная вакцина. Изучение реактогенно-сти и антигенной активности на здоровых добровольцах // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1985. - №9. - С.12-15.

38. Гиндин А.П., Ермакова М.П., Огиенко Н.М., Майорова Г.Ф.К гистопатологии и гистохимии внутрикожного очага стафилококковой инфекции в неимунном и иммунизированном организме // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1970. - №7. - С. 103-109.

39. Глухенький Б.Т., Делекторский В.В., Федоровская Р.Ф. Гнойничковые болезни кожи. Киев: Здоровья, 1983. - 136 с.

40. Гордиенко С.М., Ласица О.И., Мишарина Ж.А., Федорчук А.Г. Коррекция иммунной системы с помощью иммуностимулятора рибому9 нила у больных с рецидивирующими инфекциями респираторноготракта // Терапевтический архив. 1995. - Т.67. - №6. -С.32-38.

41. Гордиенко С.М., Ласица О.И., Федорчук А.Г. Лечение и профилактика респираторных инфекций у иммунодефицитных больных с помощью рибомунила // Клиническая фармакология и терапия. 1995. -№4. - С.88-92.

42. Гостишев В.К. Основные принципы этиотропной терапии хронического остеомиелита // Хирургия. 1999. - № 9. - С. 38-42.

43. Государственная Фармакопея СССР. М.: Медицина, - 1990г. - 400с.

44. Дерябин Д.Г., Курлаев П.П. Роль стафилококков в возникновении, развитиии и хронизации лактационнных маститов // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 2000. - № 2. - С. 118-121.

45. Дерябин Д.Г. Антилизоцимная активность бактерий как фактор их фагорезистентности: Автореф. дис. .канд. мед. наук. Челябинск, 1989.

46. Джикидзе Э.К., Стасилевич З.К., Саламатова С.А. Стимуляция секреторной IgA-системы обезьян при парентеральной иммунизации рибо-сомальной дизентерийной вакциной Зонне // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1988. - №9. - С.66-70.

47. Диагностика и санация стафилококковых бактерионосителей // Методические рекомендации от 06.04.2001 г.

48. Диковская Е.С., Белоцкий С.М. Люминолзависимая хемилюминес-ценция селезёнки при экспериментальной стафилококковой инфекции // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1988. - №5. -С.119.

49. Долгушин И.И., Бухарин О.В. Нейтрофильные гранулоциты и гомеостаз. Екатеринбург: УрО РАН, 2001. - 277 с.

50. Дьякова О.Д., Красноженов Е.П. Влияние сенсибилизации на течение стафилококковой инфекции у животных в эксперименте // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1990. - №2. - С. 116-117.

51. Дяченко Ю.В. Носительство Staphylococcus aureus и Staphylococcus epidermidis на слизистой оболочке носа // Журн. ушных, носовых игорловых болезней. 1982. - №3. - С. 35-38.

52. Егорова Н.Б., Ефремова В.Н., Акатов А.К. Экспериментальное изучение активности комплексного антигена стафилококка и анатоксина при совместном введении // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1981. -№ 5. - С. 87-89.

53. Егорова Н.Б., Курбатова Е.А., Ефремова В.Н., Кузьмина Л.А., Грубер И.М. Терапевтическая поликомпонентная вакцина из антигенов усф ловно-патогенных микроорганизмов // Современная вакцинология. 1. Пермь, 1998. С.120-121.

54. Егороав Н.Б., Ефремова В.Н., Курбатова Е.А., Кузьмина J1.A. Итоги экспериментального и клинического изучения поликомпонентной вакцины из антигенов условно-патогенных микроорганизмов // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1997. - №6. - С. 96-101.

55. Ефимова М.Г. Физико-химические и иммунобиологические свойства рибосомальных препаратов Clostridium perfringens типа А // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1998. - №2. - С. 46-49.

56. Ефимова М.Г., Ефимова Н.П. Коньюгированнная вакцина против клостридиоза перфрингенс // Современная вакцинология. Пермь, 1998. - С.108.

57. Ефремова В.Н., Егорова Н.Б. Токсичность и протективная активность комплексного антигена стафилококка, полученного методом водной экстракции // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. — 1978. -№12. С. 59-63.

58. Ефремова В.Н., Егорова Н.Б., Масюкова С.А. Антистафилококковая бесклеточная вакцина для лечения хронических пиодермий // Современная вакцинология. Пермь, 1998. - С.97.

59. Заривчацкий М.Ф., Антонов Д.В., Мугатаров И.Н. Применение ста-Ф филококкового бактериофага в комплексном лечении гнойновоспалительных заболеваний мягких тканей // Современная вакцинология. Пермь, 1998. - С. 200-201.

60. Заривчацкий М.Ф., Зебзеев Е.Ф., Яговкин В.Ф. Применение адсорбированного стафилококкового анатоксина в комплексном лечении гнойной хирургической инфекции // Современная вакцинология. -Пермь, 1998. С. 98-99.

61. Заривчацкий М.Ф., Мугатаров И.Н., Антонов Д.В., Волкова Л.В.,

62. Петров В.Ф. Использование интерфероновой мази в комплексном лечении больных с острой гнойной хирургической инфекцией мягких тканей // Современная вакцинология. Пермь, 1998. - С. 201-202.

63. Зебзеев Е.Ф., Лейбович Е.З. Применение аутовакцины и протеолити-ческих ферментов в комплексном лечении больных хроническим остеомиелитом //Клинич. хирургия 1980. - № 1. - С. 38-40.

64. Зуева B.C. Теоретические и практические аспекты использования препаратов интерферона для лечения стафилококковой инфекции // Проблемы стафилококковой инфекции. -М., 1986. Ч. 1. - С. 14.

65. Зуева B.C., Дмитренко О.А., Шагинян И.А., Акатов А.К. Система поэтапного дифференцирования метициллинорезистентных Staphylococcus aureus // Антибиот. и химиотерапия. 1997. - № 9.• С. 20-26.

66. Зуева B.C., Кузнецов А.Л., Спнвак Н.Я. Подавление интерфероном развития стафилококковой инфекции // Антибиотики и мед. биотехнология. 1985.-№ 11.- С. 861-863.

67. Зуева B.C., Линевич Ю.Г. Интенсивность передачи внехромосомного детерминанта устойчивости у стафилококков in vitro и in vivo // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1972. - №10. - С. 122-128.

68. Зуева B.C., Пашутин С.Б., Кузнецов В.П. Антитоксическая активность препаратов интерферона // Антибиотики и мед. биотехнология. 1985. -№ 9. - С. 665-668.

69. Иванов Н.Р., Бойцов В.П., Герман О.Б. Санация кишечника носителей патогенных стафилококков биопрепаратами // Бактерионосительство и хронические формы инфекционных болезней: Тез. Все-союз. науч. конф. М., 1975. - 4.1. - С. 91-92.

70. Иванов Н.А., Данилова Е.Г. Сравнение некоторых методов выявления пенициллиназной активности стафилококков // Лабора-торное дело. -1983. №8. - С. 40-42.

71. Иммунологические методы / Под ред. Г. Фримеля. Пер. с нем. А.П. Тарасова. - М.: Медицина. - 1987. - 472с.

72. Каладский Ю.М., Агеева О.Г., Васильев В.Д. Фагоциты перефериче-ской крови человека как адекватная тест-система для исследования в области фармакологии и иммунологии // Тез. докл.1 Съезда иммунологов России. Новосибирск,1992. -С.198.

73. Каламкарян А.А., Бухарович A.M. Хроническая стафилококковая инфекция кожи. Киев: Здоровья, 1990. - 136 с.

74. Карлов В.А., Белоцкий С.М., Филюкова О.Б., Зуева B.C. Повышение активности факторов защиты у больных с гнойной хирургическойинфекцией при применении препаратов интерферона // Антибиотики и мед. биотехнология. 1985. - №10. - С. 770-773.

75. Казанская Г.М., Николаева Р.В., Ковалева В.В. Распространение стафилококкового носительства у беременных // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1985. - №10. - С. 43-45.

76. Каменева М.А., Ефимова Н.П. Изучение фагомозаики стафилококков и их чувствительности к лечебному бактериофагу // Современная вакцинология. Пермь, 1998. - С. 152.

77. Караулов А.В. (под ред.) Клиническая иммунология. М.: Медицинское информационное агенство. - 1999. - 604 с.

78. Ковальчук JI.B., Чередеев А.Н. Концептуальные проблемы в клинической иммунологии // Тез. докл. Первого Всесоюз. съезда иммунологов. Сочи. - 1989. - Т.2. - С.219.

79. Козинец Г.И., Макарова В.А. (под ред.) Исследование системы крови в клинической практике. М.: Триада-Х. - 1997. - 480с.

80. Кокряков В.Н., Толыбеков А.С., Ашмарин И.П., Пигаревский В.Е. О влиянии in vitro катионных белков лейкоцитов на активность возбудителя менингопневмонии // Журн. микробиол., эпидемиол.и иммунобиол. 1977. - №6. - С.94-96.

81. Комов О.П., Родионова В.Г. Аутовакцина в терапии хронических рецидивирующих дерматитов // Патогенез и терапия кожных и венерических заболеаваний. МЗ. БССР, Н.-и. кож.-венерол. ин-т. - 1985. -Вып. 28. - С.65-68.

82. Константинов В.К., Бекишев Г.И., Вильдякскин А.А. Физиотерапевтические методы в комплексном лечении больных лактационным маститом // Вест, хирургии. 1994. - № 7-12. - С.40-43.

83. Коровина Н.А.,Чебуркин А.В., Заплатников А.Л., Захарова Н.И. Им-мунокорригирующая терапия часто и длительно болеющих детей : Руководство для врачей. М.: Медицина. - 1998. - 44с.

84. Коршунов В.М., Радакова Е.Д., Дугашева Л.Г. Влияние подкожной контаминации стафилококком на состояние микрофлоры кишечника у животных // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. -1990. -№12. С.105-106.

85. Крылов В.П., Лищенко Н.Н., Орлов В.Г. Рибосомы как иммуноген-ный компонент стафилококковой вакцины (аутовакцины) // Актуальные эколого-гигиенические проблемы Северного Кавказа. -Краснодар, 1995. С.136-137.

86. Крылов В.П. Сравнение иммунопротективных свойств различных антигенных комплексов золотистого стафилококка // Материалы международной конференции студентов и молодых ученых по актуальным вопросам медицины. Бишкек, 1994. - С.70-71.

87. Крылов В.П. Иммунопротективные свойства бактериальных рибосом и их субъединиц: Дис. . кандид. мед. наук. Краснодар, 1996. - 183 с.

88. Кузнецова Т.А., Быстрова А.Н., Дзадзиева М.Ф. Неспецифические изменения в иммунной системе при введении мембрано- рибосомаль-ной фракции возбудителя псевдотуберкулеза // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1991. - №1. - С.43-46.

89. Кузнецов В.П., Зуева B.C., Дмнтренко О.А., Беляев Д.Л. Антистафилококковая активность в препаратах интерферона // Антибиотики и мед. биотехнология. 1982. - № 7. - С. 530-533.

90. Курлаев П.П., Бухарин О.В., Чернова О.Л., Матюшина С.Б. Прогнозирование течения постинъекционных абсцессов с использованием математической модели // Хирургия. 1999. - №7. - С. 46-48.

91. Лакин Г.Ф. Биометрия: Учеб. пособие для биол. спец. вузов. 4-е изд., перераб. и доп. - М.: Высш.шк., 1990. - 352с.

92. ЮЗ.Левенсон В.И., Хазанова В.В. Рибосомальные вакцины в стоматологии // Стоматология. 1991. - №3. - С.83-86.

93. Левенсон В.И., Белкин З.П., Егорова Т.П. Протективные свойства белка эндотоксина // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. -1991. №8. - С.5-9.

94. Левенсон В.И., Рухадзе Э.З., Егорова Т.П., Белкин З.П., Федосова В.Г. Протективный фактор рибосомальной шигеллезной вакцины. // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1988. - №7. - С.50-54.

95. Юб.Левенсон В.И., Рухадзе Э.З., Белкин З.П., Эссаулова М.Э. Специфичность протективного действия рибосомальной шигеллезной вакцины и отсутствие активности у рибосом из R-мутантов // Журн.микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1988. - №10. - С.55-59.

96. Левенсон В.И., Субботина Ю.Л. Рибосомальная дизентерийная вакцина. Сообщение II. Биологические испытания в опытах активной защиты морских свинок и мышей // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1978. - №7. - С.81-86.

97. Левина М.Н., Хоменко И.М. Влияние некоторых вакцинных препаратов на течение экспериментальной стафилококковой инфекции // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1971. - №9. - С.68-72.

98. Лукашева Э.А. Клинико-иммунологические параллели у детей, больных хроническим гнойным средним отитом стафилококковой этиологии и леченных иммунопрепаратами // Журн. ушных, носовых и горловых болезней. 1980. - №5 - С. 38-41.

99. Лызлова Л.В., Грабовская К.Б., Тотольян А.А. Растворимый фибро-нектин: биологическте функции и роль в системе паразит-хозяин // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1990. - №9. - С. 112120.

100. Любинская М.М., Рухадзе Е.З., Чернохвостова Е.В., Левенсон В.И. Местный иммунитет при парентеральной иммунизации морских свинок рибосомальной дизентерийной вакциной // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1985. - №7. - С.55-59.

101. Майорова Г.Ф., Акатов А.К., Огиненко Н.М., Воробьёв А.А. Эффективность иммунизации или реиммунизации людей per os стафилококковым анатоксином // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1978. -№ 10. - С.732-736.

102. Маянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге. -Новосибирск : Наука. Сиб. отделение. 1989. - 344с.

103. Малеева В.И., Печеркина С.А. О сочетанном действии препаратов интерферона и антибиотиков на бактерии // Интерферон. — Тбилисси, 1985. С.65.

104. Медуницын Н.В. Вакцинология. М.: Триада-Х. - 1999. - 272 с.

105. Мерков A.M. Общие теории и методика санитарно-статистического исследования. М.: Медицина. - 1970. - 111 с.

106. Методические рекомендации №15-6/43 по выделению и идентификации бактерий рода Staphylococcus от 03.12.1990 г.

107. Методы контроля медицинских иммунобиологических препаратов, вводимых людям // Методические указания МУК1/4.2.588-96. М., -1998г. 128 с.

108. Михайлова Н.А., Кунягина О.В., Кузнецова Т.Н., Грабарь Ю.М., Са-дыкова А.Ф., Нафиков Р.С. Новые препараты из антигенов условнопатогенных бактерий // Современная вакцинология. Пермь, 1998. -С.127.

109. Мусина Л.Т., Семина Н.А., Гладкова К.К. Микробиологический мониторинг за внутрибольничными гнойно-септическими инфекциями у новорожденных и родильниц // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1996. - №2. - С. 91-94.

110. Нагоев Б.С. Цитохимия и цитофлюориметрия лизосомных катионных белков нейтрофильных гранулоцитов здоровых людей и больных вирусным гепатитом //Лаб. дело. 1983. - №4. - С. 18-20.

111. Нестерова И.В., Колесникова Н.В., Чудилова Г.А. Методы оценки функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов // Методические рекомендации. Краснодар ,1992. - 20 с.

112. Нестерова И.В., Тараканов В.А., Слынько Л.И. Тестирование состояния микробицидной системы нейтрофильных гранулоцитов в диагностике синдрома иммунного дефицита // Методические рекомендации. Краснодар, 1992. - 25 с.

113. Николаева Т.Н., Белая Ю.А. Влияние рибосомальной вакцины Shigella sonnei на клеточные иммунные реакции // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1992. - №7-8. - С.34-37.

114. Николаева И.В., Бондаренко В.М., Анохин В.А., Галеева О.П. Частота колонизации стафилококками кишечника у детей с явлениями дис-бактериоза // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 2000. -№1. - С.17-21.

115. Николаева JI.В., Восканян Н.А., Джикидзе Э.К., Савельев Е.П. Биохимическая характеристика и изучение антигенности рибосом стрептококка группы А в эксперименте на обезьянах // Иммунология. -1990. -№1. -С.39-41.

116. Николаева Л.В., Савельев Е.П., Петров Г.И. Выделение и изучение рибосом Streptococcus pyogenes // Мол. биология. 1983. -Т.17. -Вып.5. - С. 1068-1076.

117. Николаев В.Л., Мац А.Н. Перспективы применения коллагенового адгезина для иммунопрофилактики стафилококковой инфекции // Современная вакцинология. Пермь, 1998.-С. 114-115.

118. Ниманов К.Т., Дурманов Б.Д., Ишанходжаев Х.Р., Боровский С.П. Пункционное лечение полостных образований и абсцессов печени // Хиругия. 1999. -№3. - С. 12-14.

119. Носова Т.В. Протективная активность рибосомальных фракций микроорганизмов (обзор) // Биохимия и биофизика микроорганизмов -Межвуз. сб. Горький, 1978. - С.3-10.

120. Орлов В.Г., Крылов В.П., Качанова О.А., Сиюхова Ф.Ш. Методические основы разработки рибосомных вакцин и изучение механизма их действия // Современная вакцинология. Пермь, 1998. -С.138-139.

121. Орлов В.Г., Лищенко Н.Н., Крылов В.П. Рибосомные вакцины новая тенденция в современной вакцинологии // Кубанский Научный Медицинский Вестник. - 1995. - № 5 - 6. - С.71 -73.

122. Орлов В.Г. Мембраны и их роль в процессах компартментализации и ассоциации рибосом у бактерий. :Дис. .док. биол.наук. Краснодар, -1992. -331с.

123. Парфенов О.Г., Гриценко В.А. Опыт санации стафилококковых бактерионосителей на базе санатория-профилактория УБР ПО "Орен-бургнефть" // Персистенция бактерий/ Под ред. О.В. Бухарина. -Куйбышев, 1990.-С. 121-124.

124. Перевогцикова А.И., Бушмелев В.А. Гнойные поражения легких стафилококковой этиологии у детей раннего возраста // Педиатрия. -1973. №9. - С. 61-66.

125. Перельман Е.В., Темпер P.M., Табачник А.А. Иммунологическая активность фракций, осажденных сульфатом дигидрострептомицина из бесклеточных лизатов энтеробактерий // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1974. - №6. - С. 134-135.

126. Первушина Л.А., Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я. Лечение эндометрита и сальпингоофорита под контролем антилизоцимной активности возбудителя // Акушерство и гинекология. 1991. - № 6 - С. 48-50.

127. Петров Р.В., Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Иммунодиагностика имму-нодефицитов // Иммунология. 1997. - №4. - С. 47-52.

128. Пигаревский В.Е. Зернистые лейкоциты и их свойства. М.: Медицина. - 1978. - 128 с.

129. Пигаревский В.Е. Лизосомально-катионный тест // Пат. физиология.- 1975. -№3. С. 86-88.

130. Пирожников О.Ю. Применение анастафина для лечения гнойной инфекции мягких тканей // Современная вакцинология. Пермь, 1998. -С. 97-98.

131. Поздняк С.Б., Васильева Р.С., Третьякович В.К. Аутовакцинотерапия при гнойно-воспалительных заболеваниях // Здравоохранение Белоруссии. 1980. - № 8. - С. 55-58.

132. Питерман М. Физические и химические свойства рибосом. М.: Мир.- 1967. 304 с.

133. Правила проведения работ с использованием экспериментальных животных. // Приказ МЗ СССР №755 от 12 августа 1977г.

134. Покровский В.И., Гордиенко С.П., Литвинов В.И. Иммунология инфекционного процесса: руководство для врачей. М.: Медицина. -1994. - 306 с.

135. Покровский В.И., Семёнов Б.Ф. Вакцинопрофилактика. Итоги XX века и перспективы следующего столетия // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1999. - № 5. - С. 6-8.

136. Покровский В.И., Поздеев O.K. Медицинская микробиология: Учебник для студентов. М.: ГЭОТАР Медицина, 1998 - 1200 с.

137. Прозоровская К.Н., Котова Н.А., Лебедева Е.А., Ралова А.С. Влияние иммунизации стафилококковым анатоксином беременной женщинына иммунологический статус ребенка // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1976. - № 1. - С. 101-104.

138. Проскуров В.А. Клиника и лечение стафилококковых заболеваний. -М.: Медицина. 1974. - 159 с.

139. Протченко П.З. Пути разработки препарата стафилококкового аллергена для иммунотерапии // Современная вакцинология. Пермь, 1998. - С. 126-127.

140. Прохоров В.Я., Акатов А.К., Хатеневер M.JI. Капсулообразование у золотистых стафилококков госпитального происхождения. // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1976. - №7. - С. 124127.

141. Пружняк О.В., Колотилова JI.B. Микробная экология верхних дыхательных путей и антибиотики // Антибиотики и химиотерапия. -1989. №6. - С. 415-419.

142. Птицын А.И., Гисак С.Н. Некоторые данные о стафилококковой деструкции легких у детей первого года жизни // Тез. докл. Всесоюз. конф. по пробл. "Стафилококки и внутрибольничная инфекция". -М., 1975. С.300.

143. Пыльщин А.А. Некоторые вопросы современного учения о поли-морфноядерных лейкоцитах. // Арх. патологии. 1988. - Т.50, вып.8. -С. 85-90.

144. Ратгауз Г.Л., Акатов А.К. Синдром токсического шока И Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1986. - №2. - С. 97-101.

145. Решетников Е.А., Шипилов Г.Ф., Чуванов М.В. Дискуссионные вопросы диагностики и лечения хирургического сепсиса // Хирургия. -1999. №10. - С. 13-15.

146. Рибарова Н. Прослеживание отдаленного действия иммунопрофилактики стафилококковым анатоксином // Эпидемиология, микробиология и инфекционные болезни. 1982. - Т. 19, №2. - С. 160-165.

147. Римжа М.И. Обоснование классификации стафилококкового носи-тельства И Здравоохранение Белоруссии. 1983. - №31. - С. 52-54.

148. Ройт А. Основы иммунологии. Пер.с англ. М., "Мир". 1991. -328 с.

149. Рокитский П.Ф. Биологическая статистика. Минск: Вышэйшая школа. - 1973. -319 с.

150. Рухадзе Э.З.,Левенсон В.И. Повышенная иммуногенность О-специфического компонента рибосомальных препаратов из S.sonnei для морских свинок. // Иммунология. 1984. - №3. - С.60-65.

151. Саламатова С.А., Сухорослова Л.И., Чернохвостова Е.В., Левенсон В.И. Определение в слюне IgA-антител к рибосомам шигелл для диагностики дизентерии // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1991.-№6.-С. 59-62.

152. Саламатова С.А. Изотипическая характеристика антител к липопо-лисахариду и рибосомам шигелл при вакцинации и инфекции. Авто-реф. дис.канд. мед. наук: 14.00.36 /МНИИЭ им. Г.Н. Габричевского. М. - 1989. - 19 с.

153. Сиюхова Ф.Ш. Иммуногенные свойства бактериальных рибосом: Дис. .канд. биол. наук. Краснодар,2000. - 248 с.

154. Смирнова A.M., Трояшкин А.А., Падерина Е.М. Микробиология и профилактика стафилококковых инфекций. Л.: Медицина. - 1977. -216 с.

155. Соколов В.Ю. Антигистоновая активность бактерий // Бюл. Экспе-рим. биологии и медицины. 1993. - № 2. - С. 180-183.

156. Сокуренко Е.В., Кравцов Э.Г., Воробьёв А.А. Рецепторы, обеспечивающие фиксацию Staphylococcus aureus на фибронектинсодержащих поверхностях // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. -1989. -№10. С. 17-21.

157. Сологуб В.В. Опыт применения аутовакцины в лечении больных хроническим остеомиелитом // Врач. дело. 1992. - № 11-12. - С. 122-125.

158. Спирин А.С. Молекулярная биология: Структура рибосомы и биосинтез белка /Учебное пособие для студ. биол. спец. вузов. -М.: Высшая школа. 1986. - 303 с.

159. Спирин А.С. Спектрофотометрическое определение суммарного количества нуклеиновых кислот // Биохимия. 1958. — Т.23. - С. 656662.

160. Спивак Н.Я., Зуева B.C., Авакян И.М., Кривохатская Л.Д. Влияние интерферона на поглощение стафилококков макрофагами перитоне-ального эксудата мышей // Микробиол. журн. 1985. - Т. 47, № 2. -С. 74-77.

161. Спивак Н.Я., Лисовенко В.Г., Зуева B.C. Влияние интерферона I типа на персистенцию стафилококка и некоторые показатели иммунореак-тивности организма// Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. -1984. -№ 5. С. 74-77.

162. Станиславский Е.С., Введенская О.И. Протективная и иммунодепрес-сивная активность клеточных фракций холероподобного вибриона. // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1976. - №1. - С. 108-110.

163. Стафилококк (биологически активные субстанции, иммунный ответ на антигены) /Под. ред. В.В. Смирнова, А.Е. Вершигора. Киев: Наук. Думка. - 1988. - 248 с.

164. Степаненко С.И. Характеристика стафилококков, выделенных от носителей // Микробиология, эпидемиология и клиника инфекционных болезней: Сб. тр. Харьков, мед. ин-та. Харьков, 1982. - С. 47.

165. Субботина Ю.Л., Левенсон В.И., Гофман И.Л. Рибосомальная дизентерийная вакцина. Сообщение III. Иммунохимическое и серологическое изучение // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. -1979. №5. - С. 44-52.

166. Сурков В.А., Сибагатуллин Н.Г., Гатауллин Н.Г., Михайлова Н.А., Кунягина О.В. Опыт использования стафило-протейно-синегнойной вакцины в кардиохирургической клинике // Современная вакциноло-гия. Пермь, 1998. - С. 63.

167. Суховская О.А., Александрова Н.И., Егорова Н.Б., Ефремова В.Н. Иммунореактивность больных хроническим бронхитом при вакцинотерапии // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. -1996. № 2. - С. 68-71.

168. Терновская JI.H., Васерин Ю.И., Ланская Т.И., Привалова Р.И. Взаимодействие стафилококков с клетками организма хозяина при носи-тельстве разных категорий // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1980. - №10. - С. 61-63.

169. Терновская Л.Н. Характеристика микрофлоры носа у носителей золотистых стафилококков // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1981. -№ 3. - С. 91-92.

170. Терновская Л.Н. Персистенция золотистых стафилококков в клетках слизистой оболочки передних отделов носа материальная основа длительного носительства // Стафилококковые инфекции. - СПб., 1991 - С. 21-26.

171. Толовская К.Р., Прохоров В.Я., Акатов А.К. Получение рибосомаль-ной фракции золотистого стафилококка и его физико-химическая характеристика. // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. -1982. №8. - С. 69-72.

172. Трояшкин А.А., Иванова С.П. Коагулазная и лецитоветиллазная активность стафилококков различного происхождения // Журнал микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1968. - №3. - С. 106 - 108.

173. Трутнев Д.А. Влияние медикаментозного сна на развитие и течение стафилококковой пиодермиии у кроликов // Вестник дерматовенерологии. 1952. - № 6. - С. 55.

174. Туманова Г.М., Гонгадзе Г.М., Гудков А.Т. Выделение всех белков из 50S частиц рибосом E.coli // Молекулярная биология. 1982г.- Т. 16.-№4.- С. 8 -12.

175. Усвяцов Б.Я. Лизоцимная и антилизоцимная активность патогенных кокков: Автореф. дис. . докт. мед. наук. Л., 1986.

176. Учайкин В.Ф., Шамшева О.В. Вакцинопрофилактика. Настоящее и будущее. М.: ГЭОТАР. - МЕД., 2001. - 400 с.

177. Филичкин С.Е., Лебедева Г.В., Зайцева Г.П. Носительство стафилококков студентами стоматологического факультета // Стоматология. 1983. -Т.62, № 2. - С. 47-48.

178. Филиппенко Л.И., Моргунов И.Н., Яремчук А.Я., Колесников М.М. Пути передачи возбудителей раневых инфекций в стационаре // Вра-чеб. дело. 1989. - № 2. - С. 102-105.

179. Хаитов P.M., Борисова A.M., Хорошилова Н.В., Кулаков А.В., Еремина О.Ф, Голубева Н.М., Пинегин Б.В. Рибомунил: коррекция иммунной системы больных хроническим бронхитом // Практический врач (приложение к "Medical Market Journal").-1995. №1. -С. 18-19.

180. Хаитов P.M., Борисова A.M., Хорошилова Н.В., Кулаков А.В., Еремина О.Ф, Голубева Н.М., Пинегин Б.В. Применение рибосомального препарата рибомунила для корреции иммунной системы у больных хроническим бронхитом // Иммунология 1994. - №1. - С. 36-43.

181. Хаитов P.M., Игнатьева Г.А., Сидорович И.Г. Иммунология. М.: Медицина, 2000 -432 с.

182. Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Основные задачи клинической иммунологии по изучению функциональной активности фагоцитарных клеток // Иммунология. 1995. - №3. - С. 6-10.

183. Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Оценка основных этапов фагоцитарного процесса: современные подходы и перспективы развития исследований // Патолог.физиол. и эксперим. терапия. 1995. - №3. - С. 3-9.

184. Хейхоу Ф.Г. Дж., Кваглино Д. Гематологическая цитохимия. М.: Медицина, 1983. - 320 с.

185. Чахава О.В., Горская Е.М. Носительство патогенных микроорганизмов как фаза резервации возбудителя в межэпидемическом периоде // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1984. - №9. - С. 916.

186. Чернова O.JI. Антилизоцимная активность стафилококков, выделенных при бактерионосительстве: Автореф. дис. . канд. биол. наук. Челябинск, 1989.

187. Чистович Г.Н. Патогенез стафилококковой инфекции. Л.: Медгиз, 1961.-216 с.

188. Чуднер В.З., Усачев Г.И. Модификация реакции плазмоагглютинации // Лабораторное дело. 1976. - №9. - С. 573.

189. Шихман А.Р. Иммунодиагностика проявлений стрептококковой инфекции на основе рибосом стрептококка группы А. Автореф.дис.канд.мед.наук: 14.00.36 /I МГМИ им.И.М.Сеченова.- М.: 1987. 18 с.

190. Шихман А.Р. Использование иммуноферментного анализа для оценки специфичности распознавания антителами антигенных детерминант рибосом стрептококка группы А // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1985. - №7. -С. 52-55.

191. Шляхов Э.Н., Бурачева С.А., Клейтман И.Д. Носительство стафилококка в верхних дыхательных путях и уровень иммуноглобулина // Здравоохранение (Кишинев). 1983. - №6. - С. 26-28.

192. Шпак С.И., Проценко В.А. Влияние ингибиторов протеолиза на содержание катионных белков и миелопероксидазы в нейтрофилах пе-реферической крови при экспериментальном перитоните у мышей. // Патол. физиол. и эксперим. терапия. 1982. - №5. - С. 45-48.

193. Шубич М.Г. К цитохимии белков лейкоцитов // Архив анатомии. -1965. Т.48, №4. - С. 53 - 57.

194. Шубич М.Г., Нагоев Б.С. Щелочная фосфатаза лейкоцитов в норме и патологии. М.: Медицина. -1980. - 223 с.

195. Шутова А.П., Мордвинова Н.В., Башляева З.А. Опыт регистрации гнойно-септических заболеваний у новорожденных детей // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1980. - №10. - С. 48-51.

196. Яковлев В.П., Светухин A.M., Звягин А.А., Блатун JI.A., Павлова М.В., Терехова Р.П. Антимикробная химиотерапия больных с гнойносептическими заболеваниями в отделении интенсивной терапии // Хирургия. 1999. - №10. - С. 29-34.

197. Akatov А.К., Prokhorov V.Ya., Tolovskaja K.R. Protective properties of certain isolated structures from the microbial cell of Staphylococcus aureus // Padiatr. Grenzgeb. -1981.- V.20. P.5-11.

198. Angerman C., Eisenstein T. Correlation of the deration and magnitude of protection against Salmonella infection afforded by various vaccines with antibody titres // Infect, a Immun. 1980. - V.27. - P. 432-443.

199. Angerman C.R., Eisenstein Т.К. Comparative efficacy and toxicity of a ribosomal vaccine, acetone-killed cells, lipopolysaccharide and a live cell vaccine prepared from Salmonella typhimurium // Infect.and Immun. — 1978. V. 19, №2. - P. 575-582.

200. Anielsky R., Barczynsky M. Zakazenia ran pooperacyjnyck: Cz. esc. IV. Flora opaz przebieg kliniczny zarazenia rany pooperacyjnej // Prz. lec. — 1998. V.55, № 12. - P. 639-644.

201. Araujo F.G., Remington J.S. Protection against Toxoplasma gondii in mice immunized with Toxoplasma cell fractions, RNA and synthetic polyribonucleotides // Immunology. 1974. - V.27, №4. - P.711-721.

202. Baba T. Immunogenic activity of a ribosomal fraction obtained from Pasteurella multocida // Infect, and Immun. 1997. - V .15, №1. - P. 1-6.

203. Bavaris S., Dyas В., Ulrich R.G. Superantigens vaccines: a comparative study of genetically attenuated receptor-binding mutants of staphylococcal enterotoxin A // J, Infect. Dis. 1996. - T. 174, V. 2. - P. 338-345.

204. Baselga R., Albizu I., Amorena B. Staphylococcus aureus capsule and slime asvirulence factors in ruminants mastitis // Areview. Vet. Microb. -1994-V.39, № 3-4. P. 1595

205. Bene M.C., Faure G.C. From Peyer's patches to tonsils. Specific stimulation with ribosomal immunoterapy // Drugs. 1997. - V. 54. Suppl. 1. - P. 24-28.

206. Clot J. Pharmacology of ribosomal immunoterapy // Drugs. 1997. - V. 54. Suppl. 1. - P. 33-36.

207. Chernokhvostova E.V., Lyubinskaya M.M., Belkin Z.P., Levenson V.I. Protective milk-O-antibodies induced in guinea pigs by parenteral Shigella ribosomal vaccine // Int. Arch. Allergy. Appl. Immunol. 1990. - V.90, ?3. - P. 265-267.

208. Corbel M.J. The immunological properties of Brucella ribosomal preparations // Dev.Biol.Stand. 1976. - V.31. - P. 115-122.

209. Dima V.F., Radu J., Persu A., Muntiu V., Palade R., Petcovici M., Dragomirescu E., Coman R. Immunogenicity of the ribosomal vaccine extrated from Escherichia coli // Arch. Roum. Pathol. Exp. Microbiol. -1984. V.43, №2. - P. 127-136.

210. Dussourd d'Hinterland L. Ribosomal vaccines: introduction to the study of ribosomal vaccines // Arzneimittelforrschung. 1980. - la, V.30. - P. 122-125.

211. Dussourd d'Hinterland L., Pinel A.M., Rey G. Ribosomal vaccines: immunological study // Arzneimittelforrschung. 1980. - la, V.30. - P. 132-141.

212. Dussourd d'Hinterland L., Serre H., Normier G. Preparation de vaccins a base de fractions ribosomales antigeniques. Brevet Pierre Fabre S.A. depose le 10. 12. 1973. nO 73-43957.

213. Dussourd d'Hinterland L., Normier G., Pinel A.M.,Serre H. Preparation de vaccins a base d'acides nucleiques ARN associes. Brevet Pierre Fabre S.A. depose le 02.04. 1975. nO 75-10252.

214. Dussourd d'Hinterland L., Normier G., Pinel A.M., Durand J. Nouveaux vaccins perfectionnes a base de fractions ribosoma les. Brevet Pierre Fabre S.A. depose le 06.08. 1976. nO 76-24126.

215. Dussourd d'Hinterland L., Pinel A.M., Normier G., Durand J. Adjuvants d'immunite non specifique. Brevet Pierre Fabre S.A. depose le 21.12.1976. n076-38566.

216. Dussourd d'Hinterland L., Pinel A.M., Normier G., Durand J. Vaccins acellularies perfectionnes contenunt des polysaccharides capsulaires. Brevet Pierre Fabre S.A. depose le 29.04.1977. n077-13009.

217. Elad D., Segal E. Fungal Ribosomal vaccines. II. Dermatophyte vaccine-initial studies on the antigenicity of a crude ribosomal fraction from Microsporum canis // Mycopathologia. 1989. - V. 105, №1. - P. 49-51.

218. Everchart D.L., Miglietta L.M., Maresca V.A., Rtlly Chatfield P. A Streptococcus mutans immunogen that reacts equally with S. mutans antibody of all serotypes // Med. Microbiol.-Immunol. 1984. - V. 172 (4). - P. 215-222.

219. Eisenstein Т.К., Angerman C., Thompson H.C., Wolde-Mariam W. Ribosomal vaccines // In: Bowen W.H.et al, ed. Immunologic aspects of dental caries. Washington, Information Retrieval, 1976. WU 270 W926i. 1976.

220. Fairbanks J., Steek Т., Wallach D. Electrophoretic analysis of the polypeptides of the human erythrocyte membrane // Biochemistry. 1971. - V.10. - P. 2606-2617.

221. Fattom A.I., Naso R. A. Staphylococcal vaccines: a realistic dream // Ann-Med. 1996. - T. 28, V. 1. - P. 43-46.

222. Fattom A.I., Sarwar J., Basham L., Ennifar S., Naso R. A. Antigenic determinants of Staphylococcus aureus type 5 and type 8 capsular polysaccharide vaccines // Infect, and Immun. 1998. - T.66, V.10. - P. 4588-4592.

223. Fumarola D., Panaro A., Palma R., Mazzone A. Endotoxic contamination of biological products (ribosomal vaccines, viral vaccines and interferon) // G.Bacteriol. Virol. Immunol. 1979. - V. 72, № 1-6. - P. 72-77.

224. Gonggrijp R., Mullers W.J., Lemmens P.J., van Boven C.P. Ribonuclease-sensitive ribosomal vaccine of Pseudomonas aeruginisa // Infect, a. Immun. 1980. -V.27, №1. - P. 204-210.

225. Gonggrijp R., Volleberg M.P., Lemmens P.J., van Boven C.P. Evidence for the presence of lipopolysaccharidi in a ribonuclease-sensitive ribosomal vaccine of Pseudomonas aeruginosa // Infect, a. Immun. -1981. -V.31, №3. P. 896-905.

226. Green В.A., Johnson W. Immunogenicity of ribosomes from enzymatically lysed Strptococcus pyogenes. // Infect, a. Immun. 1980. -V.27. - P. 424-430.

227. Gregori Richard L., Shechmeister Isaac L. Humoral and cell-mediated reponses to a ribosomal preparation from Streptococcus mutans // Infec. a. Immun. 1982. -V.38, №3. - P. 1094-1101.

228. Grymberg N., Guimares F.N., De Castro F.T., Lima A.O. Effect of the injectionof ribosomes and RNA from Crithidia fasciulata on the exsperimental infection of mice by Trypanosoma crusi // Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 1977. - V. 77, № 1. - P. 35-36.

229. Janoff A., Zweifach B. Productions of inflammatory changes on the micro circulation by cationic proteins extracted from lysosomes. // J. Exp. Med.-1964. V. 120. - P.747-762.

230. Johnson W. Ribosomal vaccines. I. Immunogenicity of ribosomal fractions isolated from Salmonella typhimurium and Yrsinia pestis // Infec. a. Immun. 1972. - V.5, №6. - P. 947-952.

231. Johnson G.M., Lee D.A., Regelmann W.E., Gray E.D., Peters G., Quie P.G. Interference with granulocyte function by Staphylococcus epidermidis slime // Infect. Immun. 1986. - V. 54. - P. 13-20.

232. Jnsen R., Gregory В., Naylor J., Actor P. Isolation of protective somatic antigen from Vibrio cholerae (Ogawa) ribosomal preparations // Infec. a. Immun. 1972. - V.6, №2. - P. 156-161.

233. Kaplow L.S. A histochemical procedure for localising and enaluating leucocyte alkaline phosphatase activity in sneares of blood and marrow // Blood. 1955. - 10, №10. - P. 1023-1029.

234. Katz M.A., Solotorovsky M., Lynn M. Opsonization and phagocytosis of Haemophilus influenzae type В organism by mouse polymorphonuclear leucocytes and antiribosomal serum // Br. J. Txp. Pathol. 1983. - V.64, №3. - P.268-276.

235. Klimen L., Kahl L., Beni M.C., Mosges R., Paure G.C. Spezifsche Plasmazellpopulationen in humanen Gaumentonzillen nach oraler Immunstimulation // Allergologie. 1993. - V. 16, №5.-P. 194-197.

236. Kita E., Kashiba S. Analysis of immune responses in genital tracts of mice immunised with purified ribosomal fractions of Neisseria gonorrhoeae //J. Clin. Microbiol. 1982. - V.15. - P. 668-676.

237. Kita E., Oku D., Nishikawa, Emoto M., Yasui K., Kashiba S. Requirement of the conformational stability a Salmonella ribosomal vaccine for its mouse protection // FEMS-Microbiol. a. Immunol. 1991. -V. 3, № 4. - P. 229-239.

238. Krilov V.P., Lischenco N.N. Autovaccinotherapy as immunorehabilitation metod // Int. Jorn. of Immunorehabil. 1994. - № 1. - P. 190-191.

239. Labie C. Study of the teratogenic activity of ribosomal vaccine // Arzneimittelforschung. 1980. - V.30(la). - P. 173-181.

240. Laemmli U.K. Cleavage of structural protein during the assembly of the head of bacteriophage T4 // Nature. 1970. - V.227. - P.680-685.

241. Laharrague P.F., Corberand J.X., Gleizes B.J. In vitro effect of a ribosomal extract of Klebsiella pneumoniae on normal human polymorphonuclear neutrophil functions // Int. J. Immunopharmacol. -1984. V.6(5). - P. 503-507.

242. Lauressergues H., Rico A., Labie C. Ribosomal vaccine chronic toxicity in the rat // Arzneimittelforschung. 1980. - V.30 - №la. - P. 182-186.

243. Leber G. Nosocomial (hospital-acquired) infections. Their definition and significance // "Hexagon" Roche. 1981. - V. 9. - P.21-24.

244. Lee J.C. The prospects for developing a vaccine against Staphylococcus aureus // Trends Microbiol. 1996. -V. 4, № 4. - P. 162-166.

245. Lee J.C. An experimental vaccine that targest staphylococcal virulence // Trends Microbiol. 1998. - V. 4, № 12 - P. 162-166.

246. Lieberman M.M., Frank W.J. Protective mechanism of the immune response to a ribosomal vaccine from Pseudomonas aeruginosa. I. In vivo protection studies in compromised animal models // J. Surg. Res. 1988. -V.44, №3. - P. 242-250.

247. Lieberman M.M., Allen R.C. Opsonic activity of antisera to ribosomal vaccine fractions with live and formalinized Pseudomonas aeruginosa // Can. J. Microbiol. 1986. - V.32, №6. - P. 53 1-533.

248. Lieberman M.M., Walker H.L., Ayala E., Chapa I. Active and passive immunization with Pseudomonas aeruginosa ribosomal vaccines andantisera in the burned rat model 11 J. Surg. Res. 1986. - V.40, №2. - P. 138-144.

249. Lieberman M.M., Mc Kissock D.C., Wright G.L. Passive immunization against Pseudomonas with a ribosomal vaccine-induced immune serum and immunoglobulin fractions // Infect, a. Immun. 1979. - V.23, №2. -P. 509-521.

250. Lieberman M.M. Pseudomonas ribosomal vaccines: preparation, properties and immunogenicity // Infect, a. Immun. 1978. - V.21, №1. -P. 76-86.

251. Lopetegui R., Sosa-Miatello C., La-Via M.I. Ribosomal antigens of Trypanosoma cruzi. Effect of ribonuclease on their antigenic reactivity // Medicina B. Aires. 1980. - V.40, Supp 1. - P. 91-96.

252. Lynn M., Tewari R.P., Solotorevsky M. Immunoprotective activity of ribosomes from Hemophilus influenzae // Infect, a. Immun. 1977. -V. 15, №2. - P. 453-460.

253. Lynn M., Katz M.A., Santucci T.F.Jr. Naturally occurring antibodies in human sera that react with Haemophilus influenzae type В ribosomal vaccine // J. Clin. Microbiol. 1983. - V.17, №5. - P. 844-847.

254. Martin-Gil D., Dieguez I., Oehiing A., Subira M.L. Immunotherapy with bacterial ribosomal antigen. I. Clinical study. // Allergol. Immunopathol. Madr. 1981. -V.9, №6. - P. 509-518.

255. Menardo J.L., Bousquet J., Clanel R., Coulet P., Michel F.B. Respiratory-tract-directed immunostimulation by the oral route // Poumon. Coeur. -1982. V.38(5). - P. 297-300.

256. Michel F.B., D'Hinterland L.D., Fumex J.P., Guendon R. Prevention of bacterial respiratory infection by ribosomal vaccines // Broncho-pneumologie. 1979. - V.29. - P. 337-342.

257. Michel F.B., Dussourd d'Hinterland L., Bousquet J., Pinel A.M., Normier G Immuno-stimulation by a ribosomal vaccine associated with a bacterial cells wall adjuvant in humans // Infect a. Immun. 1978. - V.20, №3 - P. 760-769.

258. Molinari J.L., Cabrera R. Immunity induced through a ribosomal preparation obtained from Salmonella typhi Ту2.// Rev. Latinoam. Microbiol. 1974. - V.16, №4. - P. 199-204.

259. Morris J.A., Orr H.S. Immunity induced in hamsters vaccinated with a ribosome extract of Leptospira interrogans serogroup Icterohaemorrhagiae // J. Biol. Stand. 1979. - V.7, №1. - P. 81-87.

260. Nicolaeva L.V., Savel'ev E.P. Molecular-biological and immunological properties of ribosomal vaccines // Biomed. Sci. 1991. - V.2, №1. - P. 1-10.

261. Nickol A.D., Bonventer P.F. Acquired immunity against mouse typhoid: genetic restriction and comparative efficacy of ribosomal and conventional vaccines // J. Med. Microbiol. — 1981. — Nov. — 14(4). — P. 419-433.

262. Pancholi Preeti ,Vinayak V.K., Khuller G.K. Immunobiological studies wit mycobacterial ribonucleic acid protein complex // Indian J. Exp. Biol. - 1990. - V.28, №2. - P. 119-133.

263. Parker C.D., Field L.H., Berry L.G., Manclark C. Subcellular fraction for immunizing against pertusis // Dev. Biol. Stand. 1978. - V. 41. - P. 2329.

264. Рора L.M., Repanovici R., Iliescu R. The protector effect of ribosomal preparations against experimental influensa infectionin mice // Virologie. 1989. - V. 40, № 1. - P. 65-70.

265. Preston P.M., Dumonde D.C. Immunogenicity of a ribosomal antigen of Leishmania enriettii // Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 1971. - V.65. -P. 18-19.

266. Pugh G.W.Jr., Phillips M., Mc. Donald T.J.,Kopecky K.E. Isolation of Moraxella bovis ribosomes and their subsequent use in a vaccine against infection bovine keratocojunctivitis // Am. J. Vet. Res. 1981. -V. 42, № 3. - P. 516-520.

267. Riottot M.M., Fournier J.M., Pillot J. Capsular serotypic specificity of the protection conferred on mice by Klebsiella pneumoniae ribosomal preparations // Infect, a. Immun. 1979. - V. 24, № 2. - P. 476-482.

268. Robert D., Michel S., Ivanoff В., Cozzone A.J., Fontanges R. On the immunogenicity of ribosomes and ribosomal proteins isolated from Klebsiella pneumoniae and Streptococcus pneumoniae // Microbiol, a. Immunol. 1981. - V.25, №2. - P. 183-194.

269. Ronadive N.S., Cochrane C.G. Isolation and characterization of permeability factors from rabbit neutrophils // J. exp. Med. 1968. -V.128. - P. 605-622.

270. Rubio M., Romero J., Corral O., Roca V., Picazo J. Bacteriemia por Staphylococcus aureus: analisis de 311 episodios // Enferm. infecc. у microbiol. clin. 1999. - V. 17, № 2. - P. 56-64.

271. Sanchez-Palacios A., Martin-Escudero J.C., San-Jose-Dier J., Sanchez-Palacios M.A. Immunotherapy with standard bacterial ribosomal antigens in childhood bronchial asthma // Allergol. Immunopathol. Madr. 1986. -V. 14, № 5. - P. 383-391.

272. Schalla W.O., Johnson W.Immunogenicity of ribosomal vaccines isolated from group A type 14 Streptococcus pyogenes // Infect, a. Immun. 1973. - V.6.-P. 1195-1201.

273. O.Segal E., LevyR., Eylan E. Antibody formation in experimental immunizations with Candida albicans ribosomal fractions // Mycopatthologia. 1978. - V. 64, № 2. - P. 121-123.

274. Sharma Dian, Chaudnary Subhash, Burt Wayne R., Tewari Ram. P. Characteristics migration hypersensitivity and macrophage migration inhibition factor in mice immunized with ribosomes or live yast cells of Histoplasm capsulatum.

275. Thomas D., Weiss E. Direct evidence for the involvement of capsular polysaccharide in the immunoprotective activity of Klebsiella pneumoniae ribosomal preparations // Infect, a. Immunal. 1981. - V.31.- P. 71.

276. Thompson H.C.W., Eisenberg Т.К. Biological properties of a pneumococcal subcellular preparation. Abstr.74th Annu. Mett. Amer. Soc. Microbiol., Chicago, 1974.

277. Thomas D.W., Weiss E. Response of mice to injection of ribosomal fraction from group В Neisseria meningitidis / Infect, a. Immunol. 1972.- V.6, №3. P. 355-363.

278. Venneman M.R., Bigley N.J. Isolation and partial characterization of an immunogenic moiety obtained from Salmonella typhimurium. // J. Bacteriol. 1969. - V.100. - P. 140-148.

279. Venturi M.C., Bioichini A., Bardare M. Local immunotherapy prevetion of recurrent respiratory infections in children // Minerva Pediatr. — 1991.- V.43, №9. P. 557-561.

280. Willox P.A., Rayner B.L., Whitelow D.A. Community-acquired Staphylococcus aureus bacteraemia in patients who do not abuse intravenous drugs // Quart. J. Med. 1998. - V. 91, № 1. - P. 41-47.

281. Winston St.H., Berry L.J. Antibacterial immunity induced by ribosomal vaccines // J. Reticuloendothel. Soc. 1970. - V.8. - P. 13-24.

282. Winston S.H., Berry L.J. Immunity induced by ribosomal extracts from Staphylococcus aureus // J. Reticuloendothel. Soc. 1970. - V.8, №1. -P. 66-73.

283. Wisokinska T. Immunogenicity of some Staphylococcus antigenes. 3. Action of protein A, coagulase and ribosomal fraction // Med. Dosw. Microbiol. 1973. - V.25. - P. 21-30.

284. Wisokinska T. The immunogenic value of some staphylococcal antigens // Contrib. Microbiol, a. Immunol. 1973. - V.l. - P. 281-282.

285. Woody M.A., Krakaurer Т., Stiles B.G. Staphylococcal enterotoxin В mutants (N23K and F44S): biological effects and vaccine potential in a mous model // Vaccine. 1997. - T. 15, V. 2. - P. 133-139.

286. Youmans A.S., Youmans G.P. Immunogenic activity of a ribosomal fraction obtained from Mycobacterium tuberculosis // J. Bacteriol. -1965. V.89. - P. 1291-1298.

287. Zanda M., Quartesan E., D'Errico A., Pozzi T. Ricerca di portatori di Staphylococcus aureus nel faringe dezli alunni della Scnola Elementare di Monteroni d'Arbia in Provincia di Siena // Riv. Ital. Ig. 1989. - V. 49, №> 1-2. - P. 106-109.

288. Zeya H.J., Spitznagel J.K. Arginine rige proteins of polymorphonuclear leukocyte lysosomes // J. Exp. Med. -1968. -V.127. - P. 927-941.

289. Zeya H.J., Spitznagel J.K. Characterisation of cationic protein bearing granules of polymorphonuclear leurocytes 11 Lab. Invest. -1971. V.24. -P. 229-236.

290. Zielen S., Giinther C., Wess A., Ahrens P., Schroder S., Hofmann D. Oral immunization with bacterial ribosomes does not stimulate secretory antibodies // Schweiz. med. Wochenschr. 1991. - V.121. - Supp 1., №40. - P. 28.

Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.