Выявление циркуляции Yersinia pseudotuberculosis среди сельскохозяйственных животных в Саратовской области и создание диагностических препаратов на основе мембранных белков тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.07, кандидат биологических наук Иващенко, Сергей Владимирович

  • Иващенко, Сергей Владимирович
  • кандидат биологических науккандидат биологических наук
  • 2000, Саратов
  • Специальность ВАК РФ03.00.07
  • Количество страниц 157
Иващенко, Сергей Владимирович. Выявление циркуляции Yersinia pseudotuberculosis среди сельскохозяйственных животных в Саратовской области и создание диагностических препаратов на основе мембранных белков: дис. кандидат биологических наук: 03.00.07 - Микробиология. Саратов. 2000. 157 с.

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Иващенко, Сергей Владимирович

ПЕРЕЧЕНЬ УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Распространение псевдотуберкулезной инфекции среди людей и сельскохозяйственных животных.

1.2. Факторы патогенности псевдотуберкулезного микроба

1.3. Вирулентность псевдотуберкулезного микроба.

1.4. Чувствительность псевдотуберкулезного микроба к антибактериальным препаратам.

1.5. Бактериологический метод диагностики псевдотуберкулеза

1.6. Иммунологические и генетические методы диагностики псевдотуберкулеза.

1.7. Антигенные свойства белков псевдотуберкулезного микроба.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материалы.

2.1.1. Бактериальные штаммы.

2.1.2. Экспериментальные животные.

2.1.3. Оборудование.

2.1.4. Химические реактивы.

2.1.5. Растворы.

2.1.6. Питательные среды.

2.1.7. Диагностические препараты.

2.2. Методы исследований.

2.2.1. Бактериологический метод диагностики.

2.2.2. Иммунологические методы диагностики.

2.2.3. Методы определения биохимических свойств псевдотуберкулезного микроба, его подвижности и способности к гемолизу.

2.2.4. Методы определения вирулентности выделенных культур Yersinia pseudotuberculosis.

2.2.5. Метод определения чувствительности Yersinia pseudotuberculosis к антибактериальным препаратам

2.2.6. Использование лектинов для изучения поверхностных углеводов Yersinia pseudotuberculosis

2.2.7. Электрофорез.

2.2.8. Способ получения формалинизированных эритроцитов животных.

2.2.9. Способ выделения мембранных белков псевдотуберкулезного микроба.

2.2.10. Способ получения танизированных эритроцитов животных.

2.2.11. Создание эритроцитарного псевдотуберкулезного антигенного диагностикума на основе мембранных белков.

2.2.12. Получение гипериммунных сывороток к мембранным белкам псевдотуберкулезного микроба.

2.2.13. Выделение фракции иммуноглобулинов из сывороток крови иммунных животных.

2.2.14. Способ адсорбции неспецифических иммуноглобулинов

2.2.15. Способ получения люминесцирующих псевдотуберкулезных иммуноглобулинов.

2.2.16. Статистические методы обработки результатов экспериментов.

2.3. Результаты исследований.

2.3.1. Бактериологическое исследование.

2.3.2. Серотипирование выделенных культур Yersinia pseudotuberculosis.

2.3.3. Изучение подвижности, культуральных и биохимических свойств выделенных культур Yersinia pseudotuberculosis.

2.3.4. Определение патогенности выделенных культур Yersinia pseudotuberculosis.

2.3.5. Определение антибиотико-чувствительности выделенных культур псевдотуберкулезного микроба.

2.3.6. Изучение углеводов клеточной стенки Yersinia pseudotuberculosis при помощи лектинов.

2.3.7. Изучение белкового спектра выделенных культур Yersinia pseudotuberculosis.

2.3.8. Изучение чувствительности и специфичности экспериментального эритроцитарного псевдотуберкулезного антигенного диагностикума на основе мембранных белков.

2.3.9. Испытание экспериментального эритроцитарного псевдотуберкулезного антигенного диагностикума.

2.3.10. Получение гипериммунных сывороток к препарату мембранных белков Yersinia pseudotuberculosis.

2.3.11. Изучение чувствительности и специфичности иммуноглобулинов люминесцирующих псевдотуберкулезных к мембранным белкам

2.3.12. Испытание иммуноглобулинов люминесцирующих псевдотуберкулезных к мембранным белкам.

3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.

Рекомендованный список диссертаций по специальности «Микробиология», 03.00.07 шифр ВАК

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Выявление циркуляции Yersinia pseudotuberculosis среди сельскохозяйственных животных в Саратовской области и создание диагностических препаратов на основе мембранных белков»

Актуальность темы. Широкое распространение псевдотуберкулезного микроба в окружающей среде связано с его психрофильностью и низкой требовательностью к питательным веществам (Сомов Г.П. и др., 1990). Наиболее благоприятными для размножения микроба являются продукты питания, особенно овощи, при их длительном хранении в условиях пониженных температур. Овощи могут содержать значительное количество возбудителя и при употреблении в пищу быть причиной заболевания псевдотуберкулезом людей. Установлено, что контаминация овощей псевдотуберкулезным микробом происходит еще на овощных полях, на которые он попадает с животноводческих комплексов вместе с органическими удобрениями (Сомов Г.П., 1997; Ющен-ко Г.В., 1993; Кузнецов В.Г., 1997).

Сведения по изучению распространения и течения заболевания псевдотуберкулезом среди сельскохозяйственных животных и птицы весьма ограничены и носят, как правило, фрагментарный характер. Известно, что у взрослого крупного рогатого скота и свиней оно протекает латентно с формированием иммунного ответа к возбудителю. У телят, жеребят и поросят болезнь сопровождается поражением желудочно-кишечного тракта (диарея, истощение) и может наступить гибель животных (Hum S. et al., 1997; Steiner L. et al., 1997; NeefN.A. et al., 1994; Czernomysy-Furowicz Danuta, 1996).

Департамент ветеринарии Министерства сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации и Госкомсанэпиднадзор России утвердили в 1996 году санитарные СП 3.1.094-96 и ветеринарные ВП 13.3.1318-96 правила по профилактике и борьбе с заразными болезнями, общими для человека и животных, в которых псевдотуберкулез включен в перечень инфекционных болезней животных, обязательных для регистрации на всей территории Российской Федерации. Выполнение этих правил требует проведения соответствующих исследований по оценке эпизоотологической ситуации по псевдотуберкулезу сельскохозяйственных животных в России и определению основных серологических вариантов микробов, циркулирующих на отдельных территориях.

В настоящее время для обнаружения псевдотуберкулеза у людей находят широкое применение диагностические препараты, разработанные в С.-Петербургском НИИЭМ им. Пастера, С.-Петербургском НИИВС, РосНИПЧИ "Микроб", Иркутском НИПЧИ Сибири и Дальнего Востока, НИИЭМ СО РАМН, Тихоокеанском институте биоорганической химии ДВО РАН и ряде других организаций. Однако используемые препараты не являются специализированными для ветеринарии.

В связи с этим возникает необходимость в исследованиях, направленных на адаптацию существующих и создание новых эффективных, высокоактивных препаратов по диагностике псевдотуберкулеза сельскохозяйственных животных. Высокая иммунохимическая активность мембранных белков клеточной стенки Y.pseudotuberculosis открывает перспективу их использования в качестве диагностических маркеров возбудителя инфекции (Новикова О.Д. и др., 1996; Куляшова Л.Б. и др., 1997; Андрюков Б.Г., 1999).

Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ федеральной программы "Ветеринарное благополучие", утвержденной Министерством сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации.

Цель и задачи исследований. Целью работы является выявление циркуляции псевдотуберкулезного микроба среди сельскохозяйственных животных в Саратовской области и повышение эффективности его обнаружения за счет применения новых диагностических препаратов, созданных на основе мембранных белков Y.pseudotuberculosis и антител к ним.

В соответствии с поставленной целью сформулированы следующие основные задачи:

• выявить циркуляцию псевдотуберкулезного микроба среди сельскохозяйственных животных в Саратовской области и определить основные серологические варианты возбудителя заболевания, приуроченные к данной территории;

• определить биохимические свойства выделенных штаммов Y.pseudotuberculosis , их чувствительность к антибактериальным препаратам и пато-генность для лабораторных животных;

• создать на основе мембранных белков Y.pseudotuberculosis эритроцитарный антигенный диагностикум и апробировать его на сельскохозяйственных животных;

• создать на основе антител к мембранным белкам Y.pseudotuberculosis люми-несцируюгций диагностический препарат для обнаружения различных серо-варов возбудителя и апробировать его на материале от сельскохозяйственных животных.

Научная новизна. Впервые проведены комплексные исследования, связанные с выделением и изучением циркулирующих на территории Саратовской области штаммов псевдотуберкулезного микроба: определением их сероваров, чувствительности к антибактериальным препаратам и патогенности. Созданы на основе мембранных белков Ypseudotuberculosis и специфических антител к ним эффективные диагностические препараты: экспериментальный эритроцитарный антигенный диагностикум и препарат люминесцирующих иммуноглобулинов.

Практическая значимость. Обнаружена циркуляция псевдотуберкулезного микроба III и IV сероваров на территории Саратовской области среди сельскохозяйственных животных. Предложены экспериментальные диагностические препараты: диагностикум эритроцитарный псевдотуберкулезный на основе мембранных белков и иммуноглобулины люминесцирующие к мембранным белкам Ypseudotuberculosis.

Предложенные диагностические препараты для обнаружения возбудителя псевдотуберкулеза и антител к нему позволяют повысить эффективность выявления заболевания у сельскохозяйственных животных.

По материалам диссертации разработаны и утверждены методической комиссией Института ветеринарной медицины и биотехнологии СГАУ им. Н.И. Вавилова методические рекомендации:

• по изучению взаимодействия лектинов бацилл с некоторыми бактериями рода Yersinia (протокол №36 от 15.06.2000 г.);

• по созданию и применению эритроцитарного псевдотуберкулезного антигенного диагностикума на основе мембранных белков микроба (протокол №38 от 3.07.2000 г.), которые позволяют проводить исследования поверхностных структур псевдотуберкулезных бактерий и конструировать на основе мембранных белков Y.pseudotuberculosis диагностические препараты, эффективно решающие задачи по обнаружению циркуляции возбудителя псевдотуберкулеза среди сельскохозяйственных животных.

Положения, выносимые на защиту:

• установлено, что на территории Саратовской области среди сельскохозяйственных животных циркулирует Y.pseudotuberculosis III и IV сероваров, и основными носителями антител к псевдотуберкулезному микробу являются свиньи и крупный рогатый скот;

• показано, что выделенные от сельскохозяйственных животных штаммы обладают биохимическими свойствами, характерными для вида Y.pseudotuberculosis, высокой чувствительностью к ряду антибактериальных препаратов, содержат плазмиду вирулентности и являются слабопатогенными для белых мышей;

• выявлены с помощью лектинов B.polymyxa углеводные компоненты в глико-протеидах клеточной стенки Ypseudotuberculosis, определен электрофорети-ческим методом белковый состав клеток циркулирующих штаммов;

• показано, что созданный эритроцитарный псевдотуберкулезный антигенный диагностикум на основе мембранных белков позволяет в РНГА определять антитела к Ypseudotuberculosis в сыворотках крови сельскохозяйственных животных, обладает высокой чувствительностью и может найти применение в ветеринарной практике; • показано, что созданный люминесцирующий иммуноглобулиновый препарат на основе антител к мембранным белкам Y.pseudotuberculosis может быть использован для быстрого выявления различных сероваров возбудителя псевдотуберкулеза сельскохозяйственных животных.

Реализация результатов исследований. Выделенные от сельскохозяйственных животных штаммы Y.pseudotuberculosis, циркулирующие на территориях ряда районов Саратовской области, переданы в С.-Петербургский НИИЭМ им. Пастера, ВГНКИ и РосНИПЧИ "Микроб".

Предложенные диагностические препараты прошли апробацию на материале из животноводческих хозяйств Саратовской области.

Материалы диссертационной работы используются в учебном процессе СГАУ им. Н.И.Вавилова при разработке курсов лекций и лабораторных занятий по микробиологии и иммунологии.

Апробация работы. Основные положения работы доложены и обсуждены на научных конференциях профессорско-преподавательского состава и аспирантов СГАУ им. Н.И.Вавилова по итогам научно-исследовательской и учебно-методической работы за 1998 и 1999 гг., международной научно-производственной конференции "Экологические аспекты эпизоотологии и патологии животных" (Воронеж, 1999 г.), научной конференции профессорско-преподавательского состава и специалистов сельского хозяйства "Современные проблемы науки в АПК" (Пенза, 1999 г.), международной научно-практической конференции, посвященной 80-летию Московской ветеринарной академии (Москва, 1999 г.), Международной научной студенческой конференции "Студент и научно-технический прогресс" (Новосибирск, 2000 г.), международной конференции "Инфекции, обусловленные иерсиниями (иерсиниоз, псевдотуберкулез), и другие актуальные инфекции" (С.-Петербург, 2000 г.).

-11

Публикации. Основные положения диссертации изложены в 6 научных работах и 2 методических рекомендациях.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, трех разделов, заключения, выводов и библиографического списка использованной литературы.

Похожие диссертационные работы по специальности «Микробиология», 03.00.07 шифр ВАК

Заключение диссертации по теме «Микробиология», Иващенко, Сергей Владимирович

выводы

1. Впервые в Саратовской области среди сельскохозяйственных животных установлена циркуляция III и IV сероваров псевдотуберкулезного микроба. Показано, что основными носителями антител к Y.pseudotuberculosis являются свиньи и крупный рогатый скот.

2. Показано, что выделенные штаммы обладают биохимическими свойствами, характерными для вида Y.pseudotuberculosis, плазмидой вирулентности, высокой чувствительностью к цефалоспоринам, аминогликозидам и левомице-тину, являются слабопатогенными для белых мышей и вызывают патологические изменения в тонком кишечнике.

3. Установлена возможность использования лектинов B.polymyxa для исследования поверхностных структур Y.pseudotuberculosis. Показано, что в гли-копротеидах клеточной стенки возбудителя псевдотуберкулеза присутствуют углеводные компоненты: галактозамин, глюкозамин, глюкуроновая кислота и фруктозо-1,6-дифосфат.

4. Из клеточных стенок Y.pseudotuberculosis извлечены мембранные белки, обладающие высокой антигенной активностью, которые были использованы для создания диагностических препаратов.

5. Разработан экспериментальный эритроцитарный псевдотуберкулезный антигенный диагностикум на основе мембранных белков, показавший высокую чувствительность в РИГА с сыворотками крови инфицированных животных.

6. Создан экспериментальный препарат иммуноглобулинов люминесцирующих псевдотуберкулезных на основе антител к мембранным белкам Y.pseudotuberculosis, который показал высокую эффективность при быстром выявлении возбудителя псевдотуберкулеза у сельскохозяйственных животных.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Широкое распространение Y.pseudotuberculosis в окружающей среде связано с психорофильностью и с низкой требовательностью к питательным веществам псевдотуберкулезного микроба, определяющим сапрофитный способ его существования. Данный микроорганизм обладает рядом факторов патогенности и способностью к перестройке процессов метаболизма, которые позволяют ему развиваться в условиях теплокровного организма и вызывать в нем патологические процессы.

Наиболее благоприятными для размножения микроба являются продукты питания, особенно овощи, при их длительном хранении в условиях пониженных температур. Овощи могут содержать значительное количество микроба и при употреблении в пищу быть причиной заболевания псевдотуберкулезом. Установлено, что контаминация овощей псевдотуберкулезным микробом происходит еще на овощных полях, на которые он попадает с животноводческих комплексов вместе с органическими удобрениями.

Сведения по изучению распространения и течения псевдотуберкулезной инфекции среди сельскохозяйственных животных и птицы, носят фрагментарный характер, диагностические псевдотуберкулезные препараты, адаптированные к условиям ветеринарии, практически отсутствуют.

В этой связи были выполнены исследования по выявлению циркуляции Ypseudotuberculosis среди сельскохозяйственных животных. Проведено бактериологическое обследование 230 голов крупного рогатого скота, 205 свиней и 84 птиц (кур) в 9 хозяйствах Саратовского, Энгельсского, Петровского и Калининского районов Саратовской области. В результате обследования из фекалий телят и поросят было выделено 7 штаммов псевдотуберкулезного микроба.

Несмотря на трудоемкость реализации, бактериологический метод оказался эффективным. По сравнению с МФА его эффективность составила 66,7%. Все штаммы псевдотуберкулезного микроба выделялись со сред накопления на

- 1293-5 сутки инкубации, часть из них - повторно на 5-10 сутки. Общее количество выделенных штаммов составило 7, а культур 11.

Исследование биохимических свойств выделенных культур проводилось в пробирках с использованием соответствующих питательных сред и реактивов, а также на биохимических планшетах фирмы Lachema (Чехословакия). В результате была выполнена оценка 27 биохимических признаков, по которым не было выявлено различий между выделенными и музейными культурами микроба.

Серотипирование выделенных культур в РА на стекле с моновалентными псевдотуберкулезными иммуноглобулинами позволило отнести 6 штаммов псевдотуберкулезного микроба к III серовару и один штамм к IV серовару

Все выделенные культуры обладали температурно-зависимой морфологией колоний и аутоагглютинировали при 37 °С в среде Кларка, что подтверждало наличие у них плазмиды вирулентности. Так как эта плазмида может интегрироваться в хромосомный геном, то методом электрофореза она была обнаружена лишь у части культур.

В опыте с внутрибрюшинным заражением белых мышей LD50 определить не удалось, так как гибели животных при проведении эксперимента не наблюдалось. Однако из патологически измененных участков их тонкого и слепого кишечников удалось выделить псевдотуберкулезный микроб, что показывает его способностью преодолевать тканевые барьеры и вызывать поражение кишечника у белых мышей. По результатам эксперимента выделенные культуры были охарактеризованы как слабовирулентные для белых мышей.

Определение чувствительности выделенных культур псевдотуберкулезного микроба к антибактериальным препаратам проводилось при помощи бумажных дисков, пропитанных растворами антибиотиков. Культуры Y.pseudotuberculosis проявили высокую чувствительность к цефазолину, цефа-таксиму, левомицетину, цефуроксиму, гентамицину, канамицину, сизомицину, были чувствительными - к стрептомицину, тетрациклину, полимиксину и устойчивыми - к эритромицину, оксациллину и линкомицину.

Чувствительность свежевыделенных культур к аминогликозидам оказалась ниже, чем выделенных 1-1,5 года назад. К пенициллину проявила чувствительность лишь часть культур. При лечении псевдотуберкулеза рекомендуется использовать эти антибактериальные препараты в сочетании с другими. Различия в чувствительности к антибактериальным препаратам выделенных и музейных культур псевдотуберкулезного микроба не наблюдались.

Для изучения углеводов клеточной стенки Y.pseudotuberculosis, являющихся составной частью гликопротеидов, был использован конъюгат лектина с коллоидным золотом. Реакция проводилась точечным методом на мембранных фильтрах. На поверхности клеток выделенных культур псевдотуберкулезного микроба удалось обнаружить галактозамин, глюкуроновую кислоту, фруктозо-1,6-дифосфат и глюкозамин. Гликопротеиды выделенных от сельскохозяйственных животных и музейных культур Y.pseudotuberculosis не имели различий по качественному составу исследуемых углеводов.

Методом электрофореза в полиакриламидном геле у выделенных культур Y.pseudotuberculosis выявлено около 30 белков с молекулярными массами от 10 до 100 kD. По белкам с молекулярными массами 45 kD и 42 ГО обнаружено отличие выделенных культур от музейных штаммов I и III серовариантов и сходство выделенных культур с музейными штаммами IV сероварианта.

Получен препарат мембранных белков клеточной стенки штамма Y.pseudotuberculosis III сероварианта, выделенного от сельскохозяйственных животных.

По известным схемам, включающим формалинизацию, танизацию и сенсибилизацию эритроцитов барана, был получен эритроцитарный псевдотуберкулезный диагностикум на основе мембранных белков, взаимодействовший в РНГА с поливалентными псевдотуберкулезными диагностическими иммуноглобулинами в титрах 1:102400-1:409600, а с моноваллентными иммуноглобулинами к Y.pseudotuberculosis I, III—VI серова-риантов в титрах 1:320-1:1280. Титры в РНГА с гипериммунными сыворотками к другим представителям семейства Enterobacterioceae, а также с холерной и бруцеллезной сыворотками не превышали 1:400. В связи с этим за диагностический был принят титр 1:800.

При помощи экспериментального эритроцитарного псевдотуберкулезного диагностикума в РНГА обследовано 110 голов крупного рогатого скота в возрасте от 0,7 до 2 лет из хозяйства, где ранее были выделены культуры Y.pseudotuberculosis. Параллельно проводилась постановка РНГА с коммерческим эритроцитарным псевдотуберкулезным диагностикумом на основе ПЛПС и бактериологическое исследование фекалий животных. В результате проведенных исследований была выявлена корреляция между титрами специфических антител к коммерческому и экспериментальному эритроцитарным псевдотуберкулезным диагностикумам. При этом титры антител к экспериментальному диагностическому препарату в 4-8 раз превышали титры к коммерческому. Наивысшие положительные титры антител в РНГА к экспериментальному эритроцитарному псевдотуберкулезному диагностикуму составили у 3,6% обследованных животных 1:6400, у 21% - 1:3200, у 39,1% - 1:1600, у 32,7% -1:800 и у 3,6%- 1:400.

Большой процент животных с высокими титрами специфических антител и отрицательный результат их бактериологического обследования свидетельствуют о наличии у животных данной возрастной группы иммунитета к псевдотуберкулезной инфекции. С увеличением возраста животных наблюдается уменьшение титров специфических антител, т.е. постепенное снижение уровня иммунитета и, следовательно, повышается вероятность повторного заражения животных псевдотуберкулезом.

Полученные мембранные белки Y.pseudotuberculosis были использованы также для иммунизации кроликов с целью получения гипериммунных псевдотуберкулезных сывороток. Курс иммунизации состоял из пяти чередующихся внутривенных и подкожных инъекций, проводимых с интервалами в 7 дней. Полученные сыворотки реагировали в РНГА в титрах 1:204800 - 1:409600 с экспериментальным эритроцитарным псевдотуберкулезным диагностикумом на основе мембранных белков и в титрах 1:1600-1:6400 с коммерческим эритроцитарным псевдотуберкулезным диагностикумом на основе ПЛПС. Существенные различия в титрах объясняются наличием в полученных сыворотках антител преимущественно к мембранным белкам Y.pseudotuberculosis.

Выделенные из сывороток сульфатом аммония иммуноглобулины были использованы для создания люминесцирующего псевдотуберкулезного препарата. Препарат получен путем конъюгации иммуноглобулинов с ФИТЦем. Концентрация меченного ФИТЦем белка составила 0,6%, молярное соотношение ФИТЦ / белок - 14,5, а рабочее разведение диагностического препарата - 1:8.

При испытании на специфичность экспериментальные люминецирующие псевдотуберкулезные иммуноглобулины показали перекрестные реакции с сальмонеллами. В дальнейшем этот недостаток был устранен адсорбцией перекрестно реагирующих антител. Чувствительность МФА с созданным препаратом составляла в зависимости от серотипа исследуемого псевдотуберкулезного микроба от 1,95x106 до 2,44x105 м.к./мл.

С целью испытания созданного препарата было проведено обследование 76 голов телят из хозяйства с ранее выявленной циркуляцией псевдотуберкулезного микроба. При исследовании проб фекалий животных в МФА было получено три положительных результата, из которых два были подтверждены бактериологически. Эффективность МФА оказалась в 1,5 раза выше, чем бактериологического метода. Совпадение положительных результатов у экспериментального и коммерческого люминесцирующих псевдотуберкулезных препаратов составило 100%). В МФА положительный ответ получен на 4-е сутки после взятия материала, а при использовании бактериологического метода - только на 14-е сутки.

- 133

Таким образом, в результате выполненных исследований на территории Саратовской области среди сельскохозяйственных животных выявлена циркуляция Y.pseudotuberculosis III и IV серовариантов.

Создан и испытан на сельскохозяйственных животных эритроцитарный псевдотуберкулезный диагностикум на основе мембранных белков, существенно превосходящий по чувствительности коммерческий эритроцитарный псевдотуберкулезный препарат на основе ПЛПС.

Создан и испытан на сельскохозяйственных животных люминесцирую-щий псевдотуберкулезный препарат на основе антител к мембранным белкам, который по своим характеристикам не уступает коммерческому псевдотуберкулезному люминесцирующему препарату. Использование препарата позволяет сократить сроки обнаружения Y.pseudotuberculosis и проводить массовое обследование сельскохозяйственных животных на псевдотуберкулез.

Совместное применение созданных на основе мембранных белков препаратов позволяет существенно повысить эффективность обнаружения очагов псевдотуберкулезной инфекции среди сельскохозяйственных животных.

Разработанные диагностические препараты после проведения регламентированных лабораторных и полевых испытаний могут быть рекомендованы для использования в ветеринарии.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Иващенко, Сергей Владимирович, 2000 год

1. Аксенов М.Ю. и др. Выявление и изучение динамики численности не-культивируемых форм Yersinia pseudotuberculosis во внешней среде при использовании полимеразной цепной реакции // ЖМЭИ. 1995. - №2. - С.80-83

2. Алексеева Н.В. и др. Определение антигенов иерсиний в почве методом иммунорадиометрического анализа // Иерсиниозы (микробиол., эпидемиол., клин., патогенез, иммунол.): Тез. докл. Всесоюзн. науч.-практич. конф. Владивосток, 1986. - С.6-7

3. Алексеева Н.Т. и др. Способ обработки материала для посева на иерси-нии // Лаб. дело. 1982. - №12. - С.47-49

4. Алутин И.М. и др. Способ получения иммунных кроличьих сывороток к очищенным антигенам чумного микроба // Вестник всесоюзн. микробиол. общества (Ростов, отдел.). 1989. - Вып.1. - С.80-82

5. Андрюков Б.Г. Родо- и видоспецифические белки Yersinia pseudotuberculosis, их использование для конструирования диагностических препаратов: Автореф. дис. канд. мед. наук. Владивосток, 1999. - 24 с.

6. Анисимов П.И. и др. Генетические элементы патогенности и молекулярные механизмы фенотипического выражения вирулентности иерсиний // Пробл. особо опасн. инфекц. Саратов, 1994. - №1 -2(71-72). - С.57-66

7. Аничков Н.М. Морфогенез экспериментальной псевдотуберкулезной инфекции: Автореф. дис. канд. мед. наук. Л., 1972. - 16 с.

8. Асаналиев И.И., Ормокоев Б.О. Итоги изучения иерсиниозов в Киргизии // Сб. науч. работ "Соврем, аспекты эпиднадзора за особо опасн. инфекц.": Тез. XIII конф. противочум. учрежд. Ср. Азии и Казахстана. Алма-Ата, 1990.-С. 167-169

9. Асеева В.Г., Падюков Л.Н. Латексагглютинация и коаггллютинация для диагностики инфекционных заболеваний // ЖМЭИ. 1994. - №1. - С. 107-113

10. Балахонов С.В. и др. Псевдотуберкулез // Лаб. диагност, возбудит, опасн. инфекц. болезней / Отв. ред. Г.Г.Онищенко, В.В.Кутырев. Саратов: РосНИПЧИ "Микроб", 1998. - Т. 1. - С. 144-165

11. Барков А.В., Ленченко Е.М. Патогенные и вирулентные свойства иерси-ний // Ветеринария. 1997. - №6. - С.20-22

12. Белая О.Ф. и др. Определение антигенов иерсиний в реакции коагглюти-нации при острых кишечных инфекционных заболеваниях у взрослых // Острые кишечные инфекц.: Республ. сб. науч. работ. Л., 1984. - Вып.8. - С.119-121

13. Беседнов А.Л. Термостабильный токсин Yersinia pseudotuberculosis и разработка на его основе видоспецифических диагностических препаратов: Авто-реф. дис. канд. биол. наук. Владивосток, 1999. - 24 с.

14. Беседнова Н.Н. Применение метода флюоресцирующих антител с целью выявления возбудителя псевдотуберкулеза // ЖМЭИ. 1973. - №3. - С.28-31

15. Беседнова Н.Н., Дзадзиева М.Ф., Сомов Г.П. Сухой эритроцитарный псевдотуберкулезный диагностикум // ЖМЭИ. 1978. - №5. - С.145-146

16. Бузолева Л.С. Динамика размножения патогенных бактерий в зависимости от трофических и температурных условий культивирования // ЖМЭИ. -2000.-№2.-С. 15-18

17. Бузолева Л.С. Применение бентонита для ускоренной индикации иерсиний // Клин. лаб. диагност. 2000. - №2. - С.39-41

18. Буланьков Ю.И. Изучение эффективности некоторых новых методов лабораторной диагностики псевдотуберкулеза // Лаб. дело. 1990. - №4. -С.15-17

19. Бургасова О.А. и др. Сравнительная оценка различных иммунологических реакций в диагностике псевдотуберкулеза // ЖМЭИ. 1996. - №2. -С.48-51

20. Васильев П.Г. и др. Активность антибактериальных препаратов в отношении возбудителя псевдотуберкулеза in vitro // Антибиот. и химиотер. 1990. - Т.35, №6. - С.29-31

21. Венедиктов B.C. и др. Использование сыворотки к термостабильному токсину для идентификации Yersinia pseudotuberculosis II Клин. лаб. диагност. -1994. №6. - С.44-45

22. Венедиктов B.C. и др. Хемотаксис Yersinia pseudotuberculosis как механизм поиска тканевых мишеней организма хозяина // ЖМЭИ. 1988. - №5. -С.77-81

23. Водопьянов С.О., Мишанькин Б.И., Кирдеев В.К. Адгезия Yersinia pseudotuberculosis серотипа III // ЖМЭИ. 1984. - №10. - С.36-40

24. Волков Л.В. и др. Роль плазмиды с молекулярной массой 82 МД при модуляции воздействия Yersinia peudotuberculosis на пролиферативную активность лимфоидных клеток мыши // Молекул, генет., микробиол. и вирусол. -1991. №12. - С.29-32

25. Воскресенская Е.А. Протективное и диагностическое значение аннтиге-нов иерсиний псевдотуберкулеза: Автореф. дис. канд. биол. наук. С. -Пб., 1994.-23 с.

26. Гинцбург A.J1. и др. Новый признак патогенности, кодируемый плазми-дой pVM82 Yersinia pseudotuberculosis II Генетика. 1988. - T.XXIV, №9. -С.1562-1571

27. ГолубеваИ.В., Килессо В.А., Киселева Б.С. Энтеробактерии (руководство для врачей) / Под ред. В.И.Покровского. М.: Медицина, 1985. - 321 с.

28. Гриднев В.А. и др. Конъюгативная R-плазмидная устойчивость возбудителей иерсиниозов // Антибиот. и химиотер. 1990. - Т.35, №2. - СЛ9-22

29. Дертева Н.И. и др. Метод получения сывороток диагностических псевдотуберкулезных к I, II, III, IV, VI сероварам: Инф. бюл. // Изобрет. и рац. пред-лож. Саратов, 1981. -№13. -С.5-7

30. Джангалина Н.К., Толстов К.Г. Использование некоторых стимуляторов роста в бактериологической диагностике иерсиниозов // Лаб. дело. 1991. -№3. - С.75-77

31. Дзадзиева М.Ф. Антигены псевдотуберкулезного микроба: Автореф. дис. д-рабиол. наук.-М., 1981.-37 с.

32. Дзюбак В.Ф. и др. Многолетняя динамика и сезонность псевдотуберкулеза в Хабаровском крае // Актуал. пробл. профил. особо опасн. и природ.-очаг. инфекц. болезней: Тез. докл. науч. конф. Иркутск, 1994. - С.44

33. Дзюбак В.Ф., Веренков М.С. Применение люминесцирующей псевдотуберкулезной сыворотки для идентификации возбудителя псевдотуберкулеза // Пробл. особо опасн. инфекц. Саратов, 1978. - №1(59). - С.74-75

34. Дзюбак В.Ф., Зайнулина З.У., Гуляко Л.Ф. Конъюгационная передача R плазмиды pLD140 псевдотуберкулезного микроба // Актуал. пробл. профил. особо опасн. и природ.-очаг. инфекц. болезней: Тез. докл. науч. конф. Иркутск, 1994.-С.43-44

35. Дробков В.И. и др. Экспериментальное обоснование возможности серодиагностики псевдотуберкулеза у людей методом иммуноблотинга // Бюл. экс-пер. биол. и мед. 1997. - Т. 123, №5. - С.560-562

36. Егоров A.M. и др. Теория и практика иммуноферментного анализа М.: Высш. школа, 1991. -288 с.

37. Завьялов М.В., Скрябина М.В. Эпидемиологическая характеристика псевдотуберкулеза и кишечного иерсиниоза в Сахалинской области // Актуал. пробл. профил. особо опасн. и природ.-очаг. инфекц. болезней: Тез. докл. науч. конф. Иркутск, 1994. - С.54-55

38. Ильина Т.С. и др. Плазмида pVM82 Yersinia pseudotuberculosis имодифи-кация плазмидой иммунобиологических свойств бактериального хозяина // Бак-тер. плазмиды: Тез. докл. Нальчик, 1990. - С.90

39. Исачкова Л.М. и др. К вопросу о биологическом действии эндотоксина Yersinia pseudotuberculosis II ЖМЭИ. 1990. - №10. - С.7-11

40. Исачкова Л.М., Жаворонков А.А., Тимченко Н.Ф. Взаимодействие Yersinia pseudotuberculosis с эпителием тонкой кишки при экспериментальной инфекции // Бюл. экспер. биол. и мед. 1985. - №7. - С. 117-120

41. Китаев В.М. Плазмидный анализ Yersinia pseudotuberculosis и его применение для характеристики популяции микроба и микробиологического мониторинга: Автореф. дис. канд. мед. наук. Владивосток, 1993. - 23 с.

42. Климов В.Т. и др. О выделении псевдотуберкулезного микроба III серо-вара на О.Кунашир // Пробл. природ.-очаг, инфекц. в Сиб. и на Д.Востоке: Тез. докл. к регион, науч.-практич. конф. -Чита, 1993. С.83-85

43. Климов В.Т. и др. Полимеразная цепная реакция для диагностики псевдотуберкулеза // Журн. инфекц. пат. 1998. - Т.5, №4. - С.63-65

44. Климов В.Т. и др. Эпидемиологические и клинико-морфологические особенности псевдотуберкулеза в Иркутской области // Эпидемиол. и инфекц. болезни. 1999. - №4. - С.29-33

45. Королюк A.M. Применение реакции коагглютинации для обнаружения и быстрой идентификации возбудителей кишечного иерсиниоза и псевдотуберкулеза // Лаб. дело. 1984. - №4. - С.250-252

46. Королюк A.M. Реакция непрямой гемагглютинации при псевдотуберкулезе (дальневосточной скарлатиноподобной лихорадке) // ЖМЭИ. 1969. - №1. - С.121-125

47. Королюк A.M., Сомов Г.П., Шарапова Т.А. Применение реакции торможения непрямой гемагглютинации для изучения и лабораторной диагностики псевдотуберкулеза // ЖМЭИ. 1970. - №1. - С. 106-110

48. Кравцов А.Н. и др. Чувствительность возбудителя псевдотуберкулеза к действию нормальной сыворотки крови человека при 28 °С // Вестник всесоюзн. микробиол. общества (Ростов, отдел.). 1989. - Вып.1. - С.54-56

49. Кузнецов В.Г. К экологии бактерий Yersinia pseudotuberculosis II Иерси-ниозы (микробиол., эпидемиол., клин., патогенез, иммунол.): Тез. докл. Всесоюзн. науч.-практич. конф. Владивосток, 1986. - С. 114-118

50. Кузнецов В.Г. Модификация метода выявления вирулентных иерсиний с кристаллическим фиолетовым // Клин. лаб. диагност. 2000. - №2. - С.41-44

51. Кузнецов В.Г. Пуловый метод выделения и сигнальной идентификации иерсиний // ЖМЭИ. 1987. -№3. - С. 16-21

52. Кузнецов В.Г. Роль местообитаний внеорганизменной популляции возбудителя в эпидемиологии псевдотуберкулеза // ЖМЭИ. 1997. - №5. - С. 17-21

53. Кузнецов В.Г. Транспортная среда для выделения псевдотуберкулезного микроба // Лаб. дело. 1980. - №9. - С.555-557

54. Кузнецов В.Г., Багрянцев В.Н. Пиразинамидазная активность бактерий рода Yersinia II Лаб. дело. 1990. - №9. - С.72-73

55. Кузнецов В.Г., Мартиневский И.Л. Чувствительность к антибиотикам штаммов псевдотуберкулезного микроба, выделенных в Приморском крае от людей и из внешней среды // Антибиотики. 1977. - T.XXII, №3. - С. 199-201

56. Кузнецов В.И. Дифференциально-диагностическая среда для выделения бактерий рода Yersinia II Лаб. дело. 1991. - №3. - С.77-7 S

57. Куклева Л.М., Кутырев В.В., Проценко О.А. Молекулярно-генетические аспекты инвазивных и антифагоцитарных свойств патогенных иерсиний // Молекул. генет., микробиол. и вирусол. 1996. - №1. - С.11-16

58. Куляшова Л.Б., Рощина Н.Г., Ценева Г.Я. Получение на основе отечественных материалов иммуноферментного конъюгата для выявления псевдотуберкулеза // Лаб. дело. 1988. - №8. - С.50-52

59. Куляшова Л.Б., Ценева Г.Я., Буйневич Ю.Б. Роль антигенов наружной мембраны Yersinia pseudotuberculosis в патогенезе и диагностике псевдотуберкулеза // ЖМЭИ. 1997. - № 1. - С. 14-18

60. Кусенков А.Н. Сезонные изменения уровня иммунной прослойки к возбудителю псевдотуберкулеза у массовых видов птиц на юго-востоке Бело-руси // Биол. ритмы: Матер, междунар. науч. -практич. конф. (Беловежская пуща, 26-28 апр. 1999).-Брест, 1999. С.107-109

61. Лазарева Е.Б. и др. Сравнительная оценка двух тест-систем для идентификации энтеробактерий // Клин. лаб. диагност. 1994. - №1. - С.50-51

62. Логачев А.И. и др. О чувствительности штаммов Yersinia pseudotuberculosis к гомологичному бактериофагу // Журн. инфекц. пат. 1998. - Т.5, №4.- С.66-69

63. Малов И.В. Некоторые проблемные стороны патогенеза псевдотуберкулеза // Восточно-Сиб. журн. инфекц. пат. 1995. - Т.2, №4. - С.3-8

64. Малый В.П. Лечение антибиотиками-аминогликозидами больных дальневосточной скарлатиноподобной лихорадкой // Врачебное дело. 1980. - №3.- С. 112-115

65. Малый В.П. Эффективность антибактериальной терапии больных псевдотуберкулезом // Воен.-мед. журн. 1981. - №6. - С.40-42

66. Мальянова О.А. и др. Эффективность обнаружения возбудителя псевдотуберкулеза в различных вариантах иммуноферментного анализа // Пробл. особо опасн. инфекц. Саратов, 1995. -№1(77). - С. 177-183

67. Маракулин И.В. и др. Экспериментальная модель псевдотуберкулезной инфекции у обезьян // Бюл. экспер. биол. и мед. 1994. - №7. - С.59-62

68. Микеров А.Н., Кутырев В.В. Белки внешней мембраны иерсиний, кодируемые плазмидой вирулентности // Молекул, генет., микробиол. и вирусол. -1997. №3. - С.3-10

69. Миронова Л.П. Чувствительность штаммов Y.enterocolitica к псевдотуберкулезному бактериофагу // Соврем, аспекты профил. зооноз. инфекц.: Тез. докл. к всесоюзн. конф. спец. противочум. учрежд. Иркутск, 1984. - Ч.Ш. -С.42-43

70. Михайлов И.Ф. Флюоресцирующие антитела и методы их применения. -М.: Медицина, 1968. 188 с.

71. Морозов А.А., Маевский М.П. Выделение и идентификация возбудителей псевдотуберкулеза и кишечного иерсиниоза из биологического материала и объектов внешней среды // Сб. науч. трудов. Новороссийск, 1994. - Вып.1. -С.287-290

72. Мотеюнас Л.И., Бразайтис Э.И., Иоцене Р.К. Изучение экологии иерси-ний на территории Литовской ССР // Иерсиниозы (микробиол., эпидемиол., клин., патогенез, иммунол.): Тез. докл. Всесоюзн. науч.-практич. конф. Владивосток, 1986.-С.123-125

73. Недашковская Е.П. и др. Использование термостабильного токсина Yersinia pseudotuberculosis для диагностики псевдотуберкулеза // Тез. 2-й Всесоюзн. конф. "Бактер. токсины". Юрмала, Латвия, 1989. - С.91

74. Недашковская Е.П. и др. Термостабильный токсин Yersinia pseudotuberculosis: выделение, очистка, характеристика свойств // ЖМЭИ. -1995. №4. - С.5-9

75. Нерсесов В.А., Далакишвили К.Н. Псевдотуберкулез в республике Грузия // Соврем, аспекты природ, очаговости, эпидемиол. и профил. особо опасн. инфекц. болезней: Тез. докл. науч. конф. (Омск, окт. 1993). Ставрополь, 1993. - С.94-95

76. Новикова О.Д. и др. Антигенные свойства поринов наружной мембраны рода иерсиний // Бюл. экспер. биол. и мед. 1996. - Т. 121, №6. - С.657-660

77. Пашин А.Ю., Пономарев Н.Г., Джапаридзе М.Н. Токсинообразование у псевдотуберкулезного микроба в организме зараженных животных // Генет. и микробиол. природ.-очаг. инфекц.: Тр. противочум. учрежд. СССР. Саратов, 1984. - С.48-52

78. Петровская В.Г., Маракуша Б.И. Факторы патогенности Yersiniapseudotuberculosis и их генетический контроль // ЖМЭИ. 1988. - №7. -С.78-87

79. Погорелов Н.А. и др. Результаты серологического обследования крупного рогатого скота на псевдотуберкулез // Актуал. вопр. иммунодиагност. особо опасн. инфекц.: Тез. докл. всесоюзн. науч.-практич. конф. Ставрополь, 1986. - 4.II. - С.44-45

80. Полоцкий Ю.Е. и др. Применение кератоконъюнктивальной пробы для определения вирулентности возбудителя псевдотуберкулеза // ЖМЭИ. 1983. -№4. - С.72-76

81. Портнягина О.Ю. и др. Апробация иммуноферментной тест-системы на основе белка порина из Yersinia pseudotuberculosis для диагностики псевдоту-беркуллеза (экстраинтестинального иерсиниоза) у детей // Иммунология. -2000. №2. - С.59-61

82. Пушкарева В.И. и др. Потенциальные хозяева и пути циркуляции Yersinia pseudotuberculosis в водной экосистеме // ЖМЭИ. 1994. - №3. - С.52-57

83. Ракин А.В. и др. Изучение плазмидного состава и продукции секретируе-мых терминдуцибельных белков у штаммов Ypseudotuberculosis II Генет. и биохим. вирулентности возбудит, особо опасн. инфекц.: Матер. Российск. науч. конф. Волгоград, 1992. - С.50

84. Ракин А.В., Рыкова В.А., Семенова И.А. Распространение и изменчивость 41-49 МД плазмид вирулентности возбудителя псевдотуберкулеза // Бактер. плазмиды: Тез. докл. Нальчик, 1990. - С.43-44

85. Рогозина М.И. и др. Действие тетрациклинов на псевдотуберкулезный микроб в опытах in vitro и их эффективность при экспериментальном псевдотуберкулезе белых мышей // Антибиотики. 1977. - T.XXII, №5. - С.455-457

86. Румянцев А.Г., Касаткин В.Н., Канаева Е.С. Эндотоксин в клинике и эксперименте // ЖМЭИ. 1994. - №3. - С. 110-114

87. Рыжко И.В. и др. Сравнительное изучение действия 16 антибактериальных препаратов нна псевдотуберкулезный микроб в опытах in vitro и in vivo //

88. Соврем. аспекты профил. зооноз. инфекц.: Тез. докл. к всесоюзн. конф. спец. противочум. учрежд. Иркутск, 1984. - 4.III. - С.52-53

89. Рыжко И.В. и др. Сравнительное изучение действия антибиотиков-ами-ногликозидов на псевдотуберкулезный микроб in vitro и in vivo // Антибиотики. 1976. - T.XXI, №5. - С.426-429

90. Савицкий Б.П., Кусенков А.Н., Тимошенко М.А. Антитела к возбудителю псевдотуберкулеза (Yersinia pseudotuberculosis) у синантропных птиц полесья // ЖМЭИ. 1991. -№5. - С.75-76

91. Сазанов Н.С. Сравнительная эффективность различных методов лечения больных псевдотуберкулезом // Воен.-мед. журн. 1977. - №12. - С.41-43

92. Сакаль Н.Н. и др. Чувствительность к антибактериальным препаратам псевдотуберкулезных бактерий, выделенных на территории Украины // Антибиотики. 1979. - T.XXIV, №7. - С.493-496

93. Саяпина JI.B. и др. Испытание новой питательной среды для выделения возбудителей кишечного иерсиниоза и псевдотуберкулеза // Матер, науч.-прак-тич. конф., посвящ. 100-летию образования противочум. службы России. Саратов, 1997. - Т.2. - С.217-218

94. Сбойчаков В.Б. и др. Применение твердофазного иммуноферментного анализа для серодиагностики псевдотуберкулеза // ЖМЭИ. 1986. - №7. -С.83-86

95. Серов Г.Д. Использование сульфонола и теллуристокислого калия в качестве ингибитора микрофлоры в средах для выделения иерсиний. // Воен.-мед. журн. 1986. - №4. - С.32-33

96. Серов Г.Д. К вопросу получения высокоактивного псевдотуберкулезного бактериофага // Природ.-очаг. болезни Урала, Сиб. и Д.Востока: Матер, межобластной науч.-практич. конф. Свердловск: Средне-Уральское книжн. изд-во, 1969. - С.176-177

97. Серов Г.Д. Микробиологическая диагностика псевдотуберкулеза человека // Дальневосточная скарлатиноподобная лихорадка (псевдотуберкулез человека): Тематич. сб. статей; под ред. Г.П.Сомова. Владивосток, 1974. -С.87-95

98. Сидорова В.Е. и др. Подбор антигенов для конструирования тест-систем иммуноферментного анализа при псевдотуберкулезе // Лаб. дело. 1987. - №5. - С.371-374

99. Сидорова В.Е., Варвашевич Т.Н., Тимченко Н.Ф. Экзоферменты псевдотуберкулезного микроба // Вопр. мед. хим. 1987. - T.XXXIII, Вып.2. -С.44-48

100. Симчук Л.В., Тимченко Н.Ф., Недашковская Е.П. Выделение из Yersinia pseudotuberculosis фактора, нарушающего проницаемость сосудов кожи, и характеристика некоторых его свойств // Тез. 2-й Всесоюзн. конф. "Бактер. токсины". Юрмала, Латвия, 1989. - С. 116

101. Смирнов В.В. и др. Научные основы производства диагностических препаратов: Сыворотки для идентификации энтеробактерий Киев: Наук, думка, 1980.- 196 с.

102. Смирнов И.В. Определение феномена аутоагглютинации вирулентных иерсиний // Лаб. дело. 1989. - №6. - С.59-60

103. Смирнов И.В., Горохов В.И. Диагностическая сыворотка с антителами к вирулентным иерсиниям / Г.Я.Ценева, Ф.Г.Дятлов и др. // Лаб. дело. 1990. -№10. - С.66-68

104. Смирнов И.В., Ценева Г.Я. Культуральные свойства и вирулентность иерсиний // ЖМЭИ. 1991. - №9. - С. 13-16

105. Смирнов И.В., Ценева Г.Я., Митрикова Л.А. Выявление маркеров вирулентности у клинических штаммов иерсиний // Молекул, генет., микробиол. и вирусол. 1991,-№3,-С. 19-21

106. Сомов Г.П. Значение феномена психрофильности патогенных бактерий для обоснования возможности их размножения в окружающей среде // Экология возбудителей сапронозов: Сб. науч. тр. М., 1988. - С.35-47

107. Сомов Г.П. Особенности экологии внеорганизменных популяций патогенных бактерий и их отражение в эпидемиологии инфекций // ЖМЭИ. 1997.- №5. С.7-11

108. Сомов Г.П., Покровский В.И., Беседнова Н.Н. Псевдотуберкулез М.: Медицина, 1990.-239 с.

109. Тимченко Н.Ф. и др. Индуцированное температурой раннее и позднее развитие устойчивости к бактерицидному действию сыворотки крови у Yersinia pseudotuberculosis II ЖМЭИ. 1992. - №1. - С.2-4

110. Тимченко Н.Ф. и др. Компоненты наружной мембраны Yersinia pseudotuberculosis и их роль в патогенезе псевдотуберкулеза // ЖМЭИ. 1986. -№6. - С.38-41

111. Тимченко Н.Ф. и др. Тест повреждения нейтрофилов при дальневосточной скарлатиноподобной лихорадке (псевдотуберкулезе человека) // Лаб. дело.- 1982. №9. - С.47-49

112. Тимченко Н.Ф., Антоненко Ф.Ф. О входных воротах и путях проникновения Yersinia pseudotuberculosis в теплокровный организм // ЖМЭИ. 1990. -№10.-С.15-19

113. Тимченко Н.Ф., Долматов И.Ю., Найденко Т.Х. Yersinia pseudotuberculosis в модельной морской экосистеме (эксперименнтальное исследование) // ЖМЭИ. 1995. - №5. - С.84-88

114. Тимченко Н.Ф., Сомов Г.П., Сидорова В.Е. Исследование энтеротоксиче-ской активности псевдотуберкулезного микроба // ЖМЭИ. 1981. - №6. -С.55-58

115. Титенко Б.М. и др. Образование термостабильных энтеротоксинов кишечной палочки возбудителями кишечного иерсиниоза и псевдотуберкулеза // Молекул, генет., микробиол. и вирусол. 1988. - №8. - С.41—46

116. Тихонов В.К. Иерсиниозы животных в центральном правобережном аг-рорайоне Нижегородской области: Автореф. дис. канд. ветеринар, наук. С. -Пб., 1999.-21 с.

117. Фомичева О.А., Девдариани 3.JI. ДОТ-иммуноанализ эффективный метод идентификации псевдотуберкулезных микробов I-VI сероваров // Матер, науч.-практич. конф., посвящ. 100-летию образования противочум. службы России. - Саратов, 1997. - Т.2. - С.232-233

118. Фомичева О.А., Федорова В.А., Девдариани 3.JI. Идентификация видо- и серовароспецифических антигенов Yersinia pseudotuberculosis с помощью им-муноблотта // Гомеостаз и инфекц. процесс: Тез. докл. науч. конф. Саратов, 1996. - 4.II. - С.271

119. Хачатрян С.В., Шашаев М.А. К лабораторной диагностике иерсиниозов // Соврем, аспекты природ, очаговости, эпидемиол. и профил. особо опасн. инфекц. болезней: Тез. докл. науч. конф. (Омск, окт. 1993). Ставрополь, 1993. -С.301-302

120. Ценева Г.Я. и др. Выбор моделей для определения патогенных свойств возбудителя псевдотуберкулеза // ЖМЭИ. 1982. -№11.- С.68-71

121. Ценева Г.Я. и др. Жидкая питательная среда для выделения иерсиний // Лаб. дело. 1990. - №5. - С.66-69

122. Ценева Г.Я. и др. Лабораторная диагностика псевдотуберкулеза // Сов. мед. 1984. - №1. - С.98-101

123. Ценева Г.Я. и др. Применение псевдотуберкулезного коагглютинирую-щего антительного диагностикума в лабораторной практике // Лаб. дело. 1985. - №2. - С.111-113

124. Ценева Г.Я. и др. Разработка и испытание иммуноглобулинового эритро-цитарного диагностикума для выявления возбудителей псевдотуберкулеза и антител к ним // Реакция непрямой гемагглютинации: Тр. ин-та им.Пастера. Л., 1981. - Т.56. - С.71-74

125. Ценева Г.Я. и др. Характеристика инвазивности возбудителя псевдотуберкулеза // ЖМЭИ. 1984. - №5. - С.26-30

126. Ценева Г.Я. и др. Цитотоксичность иерсиний и ее значение в патогенезе псевдотуберкулеза // Тез. 2-й Всесоюзн. конф. "Бактер. токсины". Юрмала, Латвия, 1989.-С. 143

127. Ценева Г.Я. Иерсиниоз и псевдотуберкулез: Пособие для врачей. С.-Пб.: С. -Петерб. ин-т им.Пастера, 1992. - 58 с.

128. Ценева Г.Я., Дятлова Ф.Г., Мессорош В.Г. Дифференциально—диагностическая питательная среда для выделения иерсиний // Клин. лаб. диагност. -1993. №6. - С.69-70

129. Ценева Г.Я., Мессорош В.Г. К методике получения монорецепторных псевдотуберкулезных сывороток // Лаб. дело. 1983. - №10. - С.54-55

130. Чеснокова М.В. и др. Особенности эпидемического процесса псевдотуберкулезной инфекции в южном и сев.-зап. очагах Иркутской области // Мед. паразит, и паразитарные болезни. 1995. - №4. - С.27-30

131. Шведун Г.П., Можаров О.Т., Проценко О.А. Плазмида Са псевдотуберкулезного микроба и детерминируемые ею признаки // Иерсиниозы (микробиол., эпидемиол., клин., патогенез, иммунол.): Тез. докл. Всесоюзн. науч.-практич. конф. - Владивосток, 1986. - С.81-82

132. Шиманюк Н.Я. и др. Нейраминидазная активность возбудителя псевдотуберкулеза // Соврем, аспекты профил. зооноз. инфекц.: Тез. докл. к всесоюзн. конф. спец. противочум. учрежд. Иркутск, 1984. - Ч.Ш. - С.55-56

133. Шмелев В. А. и др. Гетерогенность музейных штаммов Yersinia pseudotuberculosis и их молекулярно-биологические свойства // ЖМЭИ. — 1991. -№1. С.4-8

134. Шовадаева Г.А. и др. Альтернативная локализация детерминант патоген-ности, координируемых плазмидой pVM82 Yersinia pseudotuberculosis II Молекул. генет., микробиол. и вирусол. 1991. - №11. - С.23-27

135. Шовадаева Г.А. и др. Структурно-функциональная характеристика плазмиды Yersinia pseudotuberculosis pVM82 // Генетика. 1990. - T.XXVI, №4. -С.621-629

136. Шубин Ф.Н. Эпидемиологические аспекты псевдотуберкулезной поли-клональной инфекции // ЖМЭИ. 1997. - №5. - С.22-25

137. Щербаков А.А., Иващенко С.В. Изучение патогенности Yersinia pseudotuberculosis в условиях эксперимента на белых мышах // Матер, науч-практич. конф. ин-та ветеринар, мед. и биотехнол. Саратов: Сарат. гос. аграрный ун-т., 2000. - Вып. 1. - С.68-69

138. Ющенко Г.В. Иерсиниозы // Руководство по эпидемиологии инфекционных болезней / Под ред. В.И.Покровского. М.: Медицина, 1993. - Т.2. -С.133-148

139. Ющенко Г.В. Псевдотуберкулез и иерсиниоз: эпидемиологические и экологические аспекты // Инфекции, обусловленные иерсиниями (иерсиниоз, псевдотуберкулез), и др. актуал. инфекц.: Матер, междунар. конф. С.-Пб.: С.-Петерб. НИИЭМ им.Пастера, 2000. - С.2

140. Ющенко Г.В. Современное состояние проблемы иерсиниозов // Эпидеми-ол. и инфекц. болезни. 1998. - №6. - С.8-11

141. Ющенко Г.В., Дунаев В.И. Методика выделения и идентификации

142. Yersinia pseudotuberculosis и Yersinia enterocolitica // Лаб. дело. 1980. - №6. -С. 367-370

143. Ющук Н.Д. и др. Иерсиниозы: итоги изучения и задачи научных исследований // Инфекции, обусловленные иерсиниями (иерсиниоз, псевдотуберкулез), и др. актуал. инфекц.: Матер, междунар. конф. С.-Пб.: С.-Петерб. НИИЭМ им.Пастера, 2000. - С.1

144. Baert F., Peetermans W., Knockaert D. Yersiniosis: the clinical spectrum // Acta Clin. Belg. 1994. - V.49, №2. - P.76-85

145. Cheong H.I. et al. Diagnosis of Yersinia pseudotuberculosis infection by polymerize chain reaction//Pediatr. Infect. Dis. J. 1996. - V.15, №7. - P.596-599

146. Cork S.C., Marshall R.B., Fenwick S.G. The effect of parenteral iron dexran, with or without desferoxamine, on the development of experimental pseudotuberculosis in the domestic chicken // Avian Pathol. 1998. - V.27, №4. - P.394-399

147. Cornelis Guy R., Wolf-Watz H. The Yersinia Yop virulon: A bacterial system for Subverting eukaryotic cells // Mol. Microbiol. 1997. - V.23, №5. - P.861-867

148. Czernomysy-Furowicz Danuta. First isolation of Yersinia, pseudotuberculosis from foals in Poland // Adv. Agr. Sci. 1996. - V.5, №1. - P.25-29

149. Day James В., Piano Gregory V. A complex composed of Syc N and Ysc В functions as a specific chaperone for Yop N in Yersinia pestis II Mol. Microbiol. -1998. V.30, №4. - P.777-788

150. Dirienso J.M., Nakamura K., Inouye M. The outer membrane of gramnegative bacteria: biosynthesis, assembly and functions // Ann Rev. Biochem. 1978. - V.47. - P.481-532

151. El-Sukhon Saeb Nazmi, Abu-Harfeil Nizar. Characterization of Yersinia pseudotuberculosis using the MDBK cell line // Cytobios. 1998. - V.94, №375. -P. 15-23

152. Emirsajlow-Zalewka Wieslawa et al. Evaluation of pathogenicity determinants of Yersinia pseudotuberculosis strains isolated from chinchillas from the Western Pomerania area // Adv. Agr. Sci. 1996. - V.5, №1. - P. 19-24

153. Furowicz Antony J., Czernomysy-Furowicz Danuta. Yersinia pseudotuberculosis infections in animals // Adv. Agr. Sci. 1996. - V.5, №1. - P.5-10

154. Hum S., Stattery S., Love S.C. Enteritis associated with Yersinia pseudotuberculosis infection in a buffalo // Aust. Vet. J. 1997. - V.75, №2. - P.95-97

155. Jagielski M. et al. Evalution of the usefulness of the latex test for detection and identification of O-antigens of Yersinia enterocolitica and Yersinia pseudotuberculosis II Med. Dosw. Microbiol. 1996. - V.48, №1-2. - P.31-37

156. Kaneko S., Maruyma T. Evaluation of enzyme immunoassay for the detection of pathogenic Yersinia enterocolitica and Yersinia pseudotuberculosis strains // J. Clin. Microbiol. 1989. - V.27, №4. - P.748-751

157. Knapp W., Weber A. Yersinia pseudotuberculosis II Handbuch der bacteriellen Infectionen bei Tieren. Berlin, 1982. - Bd.4. - S.466-518

158. Makino S. et al. PCR based random amplified polymorphic DNA fingerprinting of Yersinia pseudotuberculosis and its practical applications // J. Clin. Microbiol. - 1994. - V.32, № 1. - P.65-69

159. Neef N.A., Lysons R.J. Pathogenicity of a strain of Yersinia pseudotuberculosis isolated from a pig with porcine colitis syndrome // Vet. Rec. 1994. - V.135, №3.-P. 5 8-63

160. Nells Matthew L. et al. Yersinia pestis Lcr V forms a stable complex with Lcr G and may have a secretion-related regulatory role in the low-Ca response // J. Bacterid. 1997. - V. 179, №4. - P. 1307-1316

161. Nells Matthew L., Fielas Kenneth A., Straley Susan C. The V antigen of Yersinia pestis regulates Yop vectorial targeting as well as Yop secretion through effects on Yop В and Lcr G // J. Bacteriol. 1998. - V.180, №13. - P.3410-3420

162. Neyt Cecile, Cornelis Guy R. Role of Syc D the chaperone of the Yersinia Yop translocators Yop В and Yop D // Mol. Microbiol. 1999. - V.31, №1. - P. 143-156

163. Ouchterlony O. Antigen antibody reaction in gels. IV. Types of reactions in coordinated systems of diffusion // Acta Pathol. Microbiol. Scand. - 1953. - V.32 -P.231-240

164. Saiki R.K. et al. Enzymatic amplification of b-globin genomic Sequences and restriction site analysis for diagnosis of sicklecell anemia // Sci. 1985. - V.239 -P.1350-1354

165. Slee Kenneth J., Skilbeck Nael W. Epidemiology of Yersinia enterocolitica and Yersinia pseudotuberculosis infection in sheep in Australia // J. Clin. Microbiol. 1992. - V.30, №3. - P.712-715

166. Steiner L. et al. Frequency and etiology of calf losses and calf diseases before weaning in cow-calf farms. II. Microbiological and parasitological diagnoses in diarrhea calves // DTW. 1997. - V.104, №5. - P. 169-173- 157

167. Towbin H., Stachelin Т., Gordon J. Eltctrophoretic transfer of proteins from polyacrilamide gels to nirocellulose. Procedure and some application // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1979. - V.76, №9. - P.4350-4354

168. Valtonen M. et al. Low levels of cytokines and endotoxin in a fatal case of myocardial depression and septic shock due to Yersinia pseudotuberculosis II Scand. J. Infect. Dis. 1995. - V.27, №5. - P.533-535

169. Wolf-Watz H. Plasmid medeated virulence in Yersinia II Prog. Oct. Microbiol. Immunol. 1987. - V.3. - P. 159-178

170. Yang Youxu, Isberg Ralph R. Transcriptional regulation of the Yersinia pseudotuberculosis pH6 antigen adhesin by two envelope-associated components // Mol. Microbiol. 1997. - V.24, №3. - P.499-510

Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.