Значение новых молекулярных маркеров в дифференциальной диагностике эритремии и вторичного эритроцитоза тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.29, кандидат медицинских наук Тутаева, Виктория Владимировна

• Тутаева, Виктория Владимировна
• кандидат медицинских наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Тутаева, Виктория Владимировна

Оглавление

Список сокращений

Введение

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Клиника эритремии.

1.2 Классические и современные тенденции в терапии эритремии.

1.3 Диагностика и дифференциальная диагностика эритремии.

1.4 Молекулярно-генетические маркеры в диагностике эритремии и дифференциальной диагностике с вторичными эритроцитозами и заболеваниями, относящимися к группе Р1}- хМПЗ.

1.4.1. Генетические аномалии.

1.4.2. Молекулярные маркеры.

1.5 Ген РЯУ-1.

1.5.1. Биохимическая характеристика гена РЯV-1.

1.5.2. Значение генаР11У-1 в дифференциальной диагностике между эритремией и вторичным эритроцитозом.

1.5.3. Значение гена РЯУ-1 в дифференциальной диагностике внутри группы хМПЗ.

1.5.4. Влияние циторедуктивной терапии на уровень экспрессии гена РЯУ

1.6 Значение гена РКУ-1 в прогнозировании течения заболевания у пациентов с эссенциальной тромбоцитемией.

1.7 Стандартизация методики выявления гиперэкспрессии тШ^А гена РЛУ-1.

ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1 Общая характеристика пациентов включенных в исследование.

2.1.1. Характеристика пациентов с диагнозом эритремия.

2.1.2. Характеристика пациентов с диагнозом вторичный эритроцитоз.

2.1.3. Характеристика пациентов с диагнозом эссенциальная тромбоцитемия.

2.1.4. Характеристика пациентов с диагнозом идиопатический миелофиброз.

2.2 Методы исследования.

2.2.1. Гиперэкспрессия гена РЯУ-1 и мутация в гене 1ак2.

2.2.2. Уровень эритропоэтина.

2.2.3. Оценка роста эндогенных эритропоэтин-независимых колоний.

2.2.4. Гистологическое исследование костного мозга.

2.2.5. Статистическая обработка данных.

ГЛАВА Ш. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1 Роль гена РЯ\М в дифференциальной диагностике между эритремией и вторичными эритроцитозами, а также внутри группы хронических миелопролиферативных заболеваний (хМПЗ).

3.2 Оценка уровня экспрессии гена РИЛМ для определения эффективности проводимой терапии.

3.3 Экспрессия гена РКУ-1 у пациентов с вторичным эритроцитозом.

3.4 Экспрессия гена РЮ/-1 у пациентов с эссенциальной тромбоцитемией.

3.5 Экспрессия гена РЛУ-1 у пациентов с идиопатическим миелофиброзом.

3.6 Соотношение гиперэкспрессии гена с другими молекулярными маркерами, применяющимися в диагностике эритремии. а так же с уровнем эритролоэтина.

3.7 Значение мутации ,1ак2У716Р в дифференциальной диагностике между пациентами с диагнозом эритремия и вторичный эриороцитоз.

ГЛАВА IV. ЗАКЛЮЧЕНИЕ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Значение новых молекулярных маркеров в дифференциальной диагностике эритремии и вторичного эритроцитоза»

Эритремия - хронический лейкоз с поражением на уровне клетки-предшественницы миелопоэза с характерной для опухоли неограниченной пролиферацией этой клетки, сохранившей способность дифференцироваться по всем росткам кроветворения, преимущественно по красному. Относится к группе хронических миелопролиферативных заболеваний, в которую также входят эссенциальная тромбоцитемия и идиопатический миелофиброз (Воробьев А.И. 1985г., Воробьев А.И. 2003г., Демидова А.В. 2002г.). До недавнего времени не было обнаружено специфических и чувствительных молекулярно-генетических маркеров эритремии. Это значительно затрудняло проведение диагностики, а также дифференциальной диагностики с вторичными эритроцитозами, атипичными вариантами течения заболевания, а также внутри группы хронических миелопролиферативных заболеваний.

Однако последние исследования выявили два новых маркера, присущих 90-95% пациентов с диагнозом эритремии: гиперэкспрессию гена РК\М и мутацию .]ак2У617Р. В дальнейшем, было установлено, что эти маркеры встречаются также при других заболеваниях, относящихся к группе хМПЗ, но в значительно меньшем проценте случаев и никогда у пациентов с диагнозом вторичного эритроцитоза или здоровых доноров. Полученные данные позволили предположить, что эти маркеры чувствительны и специфичны для дифференциальной диагностики между эритремией и вторичными эритроцитозами, но не внутри группы хМПЗ. На сегодня различными исследовательскими группами проводится изучение влияния цитостатической терапии на уровень экспрессии гена РИУ-1 с целью уточнить возможность контроля эффективности терапии на молекулярном уровне с помощью этого маркера. Кроме того, в процессе определения находится влияние новых маркеров на прогнозирование течения заболевания и развития возможных осложнений. Выше изложенные данные позволили сформулировать следующую цель исследования.

Цель исследования;

Оценить чувствительность и специфичность новых молекулярных маркеров гиперэкспрессии гена РЯ\М и мутации ,1ак2\'617Р для проведения дифференциальной диагностики между пациентами с диагнозом эритремии и вторичным эритроцитозом, а также внутри группы хронических миелопролиферативных заболеваний.

Задачи исследования:

1. Установить частоту выявления гиперэкспресии гена РЯ\М и мутации ,1ак2У617Р у пациентов, относящихся к группе хМПЗ, также пациентов с диагнозом вторичного эритроцитоза и здоровых доноров.

2. Исследовать в динамике уровень экспрессии гена РЛ\М на фоне проводившейся цитостатической терапии у пациентов с диагнозом эритремия.

3. Определить частоту совпадения гиперэкспрессии гена РИЛМ, мутации Jak2V617F с ростом эндогенных эритропоэтин-независимых колоний и низким уровнем эритропоэтина у пациентов с диагнозом эритремия.

Научная новизна:

• Определено значение новых молекулярных маркеров - гена РИЛМ и мутации .1ак2У617Р для проведения дифференциальной диагностики между эритремией и вторичньми эритроцитозами.

• Получены собственные данные о влиянии терапии различными циторедуктивными препаратами на уровень экспрессии РЛУ-1 и показано значение этого показателя для оценки эффективности проводимой терапии.

• Накоплены данные о совпадении различных молекулярных маркеров у пациентов, относящихся к группе хМПЗ, для дальнейшего прогнозирования течения заболевания и возможности развития осложнений.

Практическая ценность работы:

Полученные данные, возможно, позволят упростить проведение дифференциального диагноза, прежде всего между эритремией и вторичным эритроцитозом, мониторировагь эффективность терапии и выделить молекулярные маркеры, которые позволят разделить пациентов внутри уже обозначенной нозологии по степени риска развития возможных осложнений.

Заключение диссертации по теме «Гематология и переливание крови», Тутаева, Виктория Владимировна

ВЫВОДЫ

1. Определение уровня экспрессии гена Р11У-1 является эффективным и чувствительным методом, позволяющим с высокой долей вероятности проводить дифференциальную диагностику между эритремией и вторичным эритроцитозом.

2. Новый молекулярный маркер - мутация ]ак2. эффективен в 100% случаев для проведения дифференциальной диагностики между эритремией и вторичными эритроцитозами.

3. Повышение уровня экспрессии гена РЯ\М не может быть использовано для проведения дифференциальной диагностики внутри группы хМЛЗ.

4 Выявлена линейная зависимость уровня экспрессии гена РЯУ-1 от длительности терапии интерфероном-альфа.

5. Не установлена зависимость уровня экспрессии гена РЯУ-1 у пациентов с диагнозом эритремии от длительности терапии и дозы гидроксимочевины.

6. Отсутствию ремиссии у пациентов с эритремией соответствует гиперэкспрессия гена РЯУ-1. Достижение частичной ремиссии в 50% случаев сопровождается нормализацией уровня экспрессии РЯУ-1. У 3 из 4 пациентов с полной клинико-гематологической ремиссией отмечается нормальный уровень экспрессии гена РЯУ-1.

7. Определена частота совпадения молекулярных маркеров эритремии Jak2/ РЯУ-1 в 86,4%, Зак2/ЭЭК в 86,4%, Зак2/ РЯУ-У ЭЭК/низкий уровень эритропоэтина в 45,5% случаев соответственно