Действие гормональных препаратов на нейропептидные системы Danio rerio в условиях стресса тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Блаженко Александра Александровна

• Блаженко Александра Александровна
• кандидат наук
• 2023

Оглавление диссертации кандидат наук Блаженко Александра Александровна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. РОЛЬ ГОРМОНАЛЬНЫХ И НЕЙРОМОДУЛИРУЮЩИХ СИСТЕМ У КОСТИСТЫХ РЫБ И ВЫСШИХ МЛЕКОПИТАЮЩИХ. ОБЗОР ЛИТРАТУРЫ

1.1. Эапю гепо как модельный организм

1.2. Поведенческие реакции на стресс у высших млекопитающих и костистых рыб. Сравнительный анализ

1.3. Гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковая ось у высших млекопитающих и Бапю гепо. Сравнительный анализ

1.4. Роль пептидных систем в регуляции стресса и постстрессорные реакции у костистых рыб и высших млекопитающих. Сравнительный анализ

1.4.1. Роль окситоциновой системы в регуляции стресса

1.4.2. Роль грелиновой сигнальной системы в регуляции стресса

1.4.3. Роль взаимодействия грелиновой и окситоциновой систем в регуляции стресса

1.4.4. Роль взаимодействия грелиновой системы и системы кортиколиберина в

регуляции стресса

1.5 Перспективность использования Эапю гепо как модельного организма для

изучения пептидных систем

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Выбор экспериментальных животных и их содержание

2.2. Фармакологические вещества, использованные в работе

2.3. Методы изучения поведения

2.3.1. Тест новизны

2.3.2. Тест стресса с хищником

2.4. Методы лабораторной медицины

2.4.1 Введение препаратов

2.4.1.1. Инкубационный метод

2.4.1.2 Метод внутрисосудистых инъекций

2.4.2. Подготовка образцов для биохимических исследований

2.4.2.1. Анатомирование животных

2.4.2.2. Приготовление гомогенатов тканей и подготовка образцов для ИФА и энзиматических реакций

2.4.3. Иммуноферментный анализ

2.4.4. Методы энзиматических исследований

2.5. Статистический анализ

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1 Показатели поведенческих реакций Danio гегю на психо-эмоциональный

стресс

3.2. Системная реакция на стресс

3.3 Реакция отделов центральной нервной системы на стресс

3.4 Изменение активности вторичных мессенджеров

3.5. Влияние антистрессовой фармакологической коррекции на содержание кортизола в мышечной ткани и кортикотропин-рилизинг гормона в головном мозге Danio гепо

3.6. Влияние стресс-протективных пептидов на уровень грелина в различных отделах головного мозга Danio гегю

3.6.1. Содержание нейропептида грелина в переднем отделе головного мозга Danio гeгio при поведенческих и фармакологических воздействиях

3.6.2. Содержание нейропептида грелина в среднем головном мозге Danio гeгio

3.6.3. Содержания нейропептида грелина в заднем головном мозге Danio гегю

Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АКТГ - адренокортикотропный гормон

КРГ - кортикотропин-рилизинг гормон

ЦНС- центральная нервная система

AgRP - агути - родственный белок

AH - аденогипофиз (передний гипофиз)

ARC - дугообразное ядро

AVP - аргинин

CRH - кортиколиберин

CRH - кортикотропин - рилизинг гормон

DA - допамин

Dpf - дней после оплодотворения

GHRH - соматолиберин

GnRH - гонадотропин-рилизинг гормон

HCRT - гипокретин (орексин)

MC4R - рецептор меланокортина

MSH - меланоцит - стимулирующий гормон

NH - нейрогипофиз (задний гипофиз)

OT - окситоцин

OXTL - окситоциноподобный гормон Pmch - промеланин - стимулирующий гормон POMC - проопиомеланокортин TRH - тиротропин-рилизинг гормон

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность исследования В последние годы изучению стресс-ассоцированных заболеваний, каковыми можно рассматривать депрессию, ожирение, диабет, алкоголизм, наркомании, поскольку они представляют реальную угрозу для общественного здоровья. Поэтому разработка новых эффективных путей и средств коррекции негативных последствий стрессогенных воздействий является актуальной медико-биологической задачей.

В этой связи привлекают внимание нейропептиды мозга, обладающие способностью оказывать комплексное и разностороннее действие на различные звенья стресс-реализующей системы организма. Открытый в конце ХХ века пептидный гормон грелин в последние годы стал рассматриваться как важный компонент системного стресс-ответа, так как у него открыта способность регулировать активность нейрональных популяций в различных отделах мозга. Вследствие этого любые отклонения в работе грелиновой системы по механизму цепной реакции могут нарушать нормальное течение стресс-ответа и стимулировать развитие заболеваний сердечно-сосудистой системы и психоэмоциональные расстройства (Lutter M. et al., 2008). Грелин секретируется в желудочно-кишечном тракте, транспортируется в мозг, связывается со специфическими (GHSRla) и неспецифическими рецепторами (например, рецепторами CRF-R1 или рцепторами к нейропептиду Y) в разных отделах мозга. Грелин осуществляет контроль потребления пищи, регулируя пищевые центры гипоталамуса, и стимулирует секрецию гормона роста в гипофизе. Одной из важнейших мишеней грелина являются нейроны параветрикулярного ядра, продуцирующие кортикотропин-рилизинг гормон (КРГ), дающий начало гипофизарно-надпочечниковой оси. Наряду с КРГ эти нейроны секретируют нейропептид окситоцин. Хотя окситоцин традиционно ассоциируется с родами и лактацией, было показано, что он оказывает мощное модулирующее действе на психоэмоциональную сферу и стресс. Высвобождение окситоцина во время

стрессовых ситуаций снижает тревожность и агрессию, особенно у женщин (Smith A.S., Wang Z., 2014). Окситоцин и грелин имеют общие свойства, участвуя в регуляции аппетита и ответных реакций на стресс-факторы. Поэтому представляется целесообразным изучение роли именно этих нейропептидов в механизмах стресса и вовлечение сигнальных путей грелина и окситоцина в фармакотерапию стресс-индуцированных расстройств. Несмотря на недавнее исследование, показывающее, что внутрижелудочковое введение грелина активирует нейроны окситоцина, мало что известно о перекрестном взаимосообщении между этими двумя пептидами. По литературным данным известно, что введение окситоцина снижает циркулирующий уровень грелина во время голодания (Cardoso C. et. Al., 2012).

В последние годы в экспериментальной неврологии и нейрофармакологии широко используются методы изучения поведения на модели Danio rerio (Blaser R., Gerlai R., 2006). В качестве критериев поведенческих реакций используют особенности плавания рыб, особенности адаптации к новой обстановке (реакция новизны) (Sackerman J., 2020). Условия аквариума дают возможность с высокой точностью стандартизировать характеристики содержания экспериментальных животных: температуру, химический состав воды и т.д. (Wong, K., 2009). Практически ценной стороной Danio rerio как модельного организма следует считать высокую плодовитость, короткий жизненный цикл (Egan, R.J., 2009).

Рядом авторов продемонстрированы реакции на действие этанола, никотина, препаратов бензодиазепинового ряда и кокаина в отношении поведения (Gerlai, R., 2005). Применение компьютерных технологий расширило возможности анализа индивидуальных движений каждого экспериментального животного (видеотрека). Кроме того, компьютерный анализ дал возможность объективной оценки поведенческих реакций рыб и стандартизации паттернов их поведения (Gerlai, R., 2005).

Экспериментальную модель «подопытная рыба - хищная рыба» следует считать адекватным вариантом психоэмоционального стресса, где исключены прямые механические и физические воздействия. При этом в эксперименте следует

учитывать взаимные влияния двух организмов друг на друга: подопытную рыбу на хищника и наоборот.

Подопытное животное воспринимает присутствие хищника разнообразными способами: посредством визуальных, акустических, в том числе вибрационных сигнал. Различные типы восприятия информации о присутствиии хищника весьма подробно разобраны в литературе (Kalluef A.V., Stewart AM, Gerlai R., 2014). Суммация сигналов различных типов в ЦНС приводит к интегрированной поведенческой реакции животного. Животное демонстрирует реакции тревоги, страха т.п. (O'Connor C.M., et. al, 2015). Наряду с хорошей изученностью поведенческих реакций, молекулярные, биохимические и эндокринные механизмы реакции на стресс у Danio rerio исследованы намного слабее. Имеющиеся данные, к сожалению, зачастую фрагментарны и противоречивы

Система гипоталамус - гипофиз - межпочечнная железа у Danio rerio достаточно хорошо изучена. Предоптические нейроны кортиколиберина составляют гомологи клеток кортиколиберина млекопитающих в паравентрикулярном ядре, а кортикотропные клетки, продуцирующие адренокортикотропный гормон, его мишени, присутствуют в передней и задней долях гипофиза Danio rerio (Griffiths B. et al., 2012). Межпочечные клетки у Danio rerio представляют собой эквивалент коры надпочечника человека. Эти клетки выстилают крупные сосуды (задние кардинальные вены) впереди головной части почки. Клетки в свою очередь синтезируют кортикостероиды, включая кортизол. Danio rerio демонстрирует полноценный стрессовый ответ, включая биологическую обратную связь с гипоталамо-гипофизарной системой после выделения достаточного количества глюкокортикоидов (Griffiths B. et al., 2012).

Генетическая и пептидная структура грелина была определена у костистых рыб, в том числе у Danio rerio (Tine B. et al., 2016). N-концевые ядра с сайтами ацилмодификации хорошо сохранены среди всех грелинов позвоночных. Ортолог грелина у Danio rerio экспрессируется в различных тканях, включая мозг и органы пищеварения (Tine B. et al., 2016). Более того, GHSR широко экспрессируются в мозге Danio rerio (Tine B. et al., 2016). Грелин у Danio rerio участвует в регуляции

ряда физиологических функций, в том числе регуляции высвобождения гормонов гипофиза, приема пищи и моторики кишечника, подобно его аналогам у млекопитающих (Unniappan S. et al., 2002). Однако точная роль, которую система грелина играет у Danio rerio, и регуляторный механизм грелина до сих пор в значительной степени неизвестны. Одни из последних исследований показывают, что выведенная аминокислотная последовательность грелина Danio rerio очень консервативна. Как и у грелина золотых рыбок (Unniappan S. et al., 2002), у грелина Danio rerio также есть два предполагаемых сайта расщепления и сигналы амидирования. Было найдено три интрона и четыре экзона в гене грелина Danio rerio. Организация экзонов идентична человеческой (Wajnrajch M.P. et al., 2000).

Danio rerio, в отличие от млекопитающих, не вырабатывает окситоцин, но имеет похожий нейропептид под названием изотоцин (глютамин-4 заменен на серин, а аргинин-8 заменен на изолейцин) (Menke A. et al., 2001). Было показано, что изотоцин стимулирует сокращения гладких мышц и влияет на некоторые поведенческие и физиологические процессы (De Abreu et al., 2018).

Степень разработанности темы исследования

В отделе нейрофармакологии ФГБНУ «ИЭМ» получены данные о стресс -лимитирующем действии антагонистов рецепторов грелина и орексина у грызунов. Показано, что у крыс - изолянтов, возрастает склонность к потреблению алкоголя. Введение [D-Lys3]-GHRP-6, пептидного антагониста грелина, таким животным снижало проявления агрессии, страха, и тревоги (Vinogradov P.M. et al., 2015). Изучены спектры распределения дезацил-грелина и орексина А в структурах мозга крыс на фоне стресса, алкоголизации, и отмены этанола (Vinogradov P.M. et al., 2015; Tissen I.Y. et al., 2020). У взрослых животных хроническая алкоголизация снижала уровень периферического дезацил-грелина и увеличивала экспрессию рецепторов GHSRla. Отмена алкоголя, напротив, стимулировала подъем уровня дезацил-грелина в крови и экспрессию GHSRla в префронтальной коре и вентральной области покрышки (Vinogradov P.M. et al. 2015; Tissen I.Y. et al. 2020). С другой стороны, острый витальный стресс у грызунов провоцировал

поведенческие нарушения и подъем уровня грелина в различных отделах головного мозга, которые снижалось под действием [D-Lys3]-GHRP-6 (Шабанов П.Д. и др., 2020). Введение [D-Lys3]-GHRP-6 крысам, пережившим острую эмоциогенную реакцию страха, вызывало анксиогенный эффект и повышение локомоторной активности; в то время как грелин оказывал типичное анксиолитическое действие (Shabanov P.D. et al., 2021). В этих исследованиях использовали модели стресса социальной изоляции у грызунов и острого витального стресса при помещении в клетку с тигровым питоном.

Приведенные данные свидетельствуют, что важную роль при изучении механизмов стресса и создании стресс-протектирующих агентов является выбор адекватных моделей. Одной из таких моделей является лабораторная рыба Danio rerio, поскольку ортологи (предки) всех нейроэндокринных генов пептидов млекопитающих были идентифицированы и локализованы у рыб данного вида. У Danio rerio, как и у человека, биомаркером стресса является кортизол (Portelli J., Smolders I., 2014). Как и у млекопитающих, у Danio rerio продукция грелина повышается при голодании. В настоящей работе сделана попытка адаптировать модель «хищник-жертва» для рыб Danio rerio. Ранее эта модель использовалась почти исключительно в экспериментах на млекопитающих.

Цель исследования

Изучение динамики гормонов стресса и содержания грелина при стресс-реакции у Danio rerio и фармакологическая коррекция антагонистами грелина и окситоцином стрессогенных реакций у рыб.

Задачи исследования

1. Адаптировать стресс-модель «хищник-жертва» для рыб Danio rerio.

2. Изучить особенности гормонального звена стресс-реакции у Danio rerio по уровню периферических и центральных гормонов стресса (кортизола и кортикотропин-рилизинг гормона).

3. Оценить возможность коррекции гормонального звена стресс-реакции у Danio гепо с помощью нейропептидов гипоталамуса и гипофиза (окситоцин, [О-Lys3]-GHRP-6 и аналоги).

4. Изучить распределение грелина в различных отделах головного мозга Danio гепо у интактных и стрессированных рыб после введения нейропептидов гипоталамуса и гипофиза (окситоцин, [D-Lys3]-GHRP-6 и аналоги).

Научная новизна исследования Разработана и валидизирована модель стресса у Danio гeгio с использованием хищника Hypsophrys nicaгaguensis, которая имеет все физиологические и биохимические признаки стрессорной реакции: избегание хищника, специфическое поведение страха, перемещение в верхние этажи просмотровой камеры, повышение уровня кортизола в тканях (мышцы) и в разных структурах головного мозга. Одновременно с кортизолом в разных структурах головного мозга Danio гeгio (передний, средний и задний мозг) методом высокочувствительного иммуноферментного анализа (ИФА) идентифицирован пептид грелин, определены величины изменений его уровня при стрессорной реакции на хищника, колеблющиеся в пределах от десятков пг/мг белка до мкг/мг белка (то есть в пределах 3 порядков). Значимым и обнадеживающим результатом исследований является доказательство эффективности антагонистов грелина, в частности фрагмента субстанции Р [D-Lys3]-GHRP-6 и агрелакса, представляющего собой генноинженерный пептид - антагонист рецепторов GHSR1a, полученный в ФГБНУ «Институт экспериментальной медицины», в отношении восстановления поведения стрессированных рыб и нормализации биохимических показателей стрессогенной реакции (повышенного уровня кортизола в хвостовом мускуле и грелина в структурах головного мозга). Кроме того, помимо нормализации уровня кортизола, как показателя периферической стресс-реакции, нормализовался и повышенный при стрессе уровень КРГ в головном мозге Danio гегю. Аналогичным с антагонистами грелина действием обладал и окситоцин, что можно объяснить физиологическим значением изотоцина, аналога окситоцинового гормона у рыб.

Полученные данные доказывают перспективность разработки антигрелиновых соединений в качестве стресс-протективных и регулирующих эмоциональные реакции соединений. Приоритетность исследований подтверждена патентом РФ на изобретение № 2766689 С1 от 15.03.2022 по заявке № 2020144338 от

Теоретическая и практическая значимость Теоретическая значимость работы определяется, прежде всего, обоснованием, апробацией и применением в эксперименте оригинальной модели «хищник-жертва» (Бапю гепо - Hypsophrys nicaraguensis) у рыб для оценки механизмов действия стресс-регулирующих веществ. Важным и практически значимым фактом является доказательство реакции системы грелина у рыб Эапю гепо на срессогенную реакцию по типу реагирования периферических глюкокортикоидных гормонов (кортизола). Эти полученные впервые в мире данные открывают перспективы разработки и экспериментальной апробации антагонистов грелина в качестве стресс-протекторов при стрессогенном воздействии на организм. Отличием стресс-протекторов от классических транквилизаторов является вовлечение и нормализация в основном биохимических механизмов стресса после введения антагонистов грелина. Работа имеет приоритетное значение для изучения молекулярных механизмов действия гормональных препаратов на уровень нейропептидов в головном мозге, особенно таких сложных и многокомпонентных гормональных систем как система грелина (ацилированный грелин - дезацилгрелин - обестатин) и рецепторов, вовлекаемых в его действие (специфических и неспецифических), особенно в аспекте изучения фармакологических веществ антистрессорного действия.

Методология и методы исследования Методология заключалась в изучении у Эапю гепо биохимической реакции на стресс, с получением данным по уровню кортизола, КРГ и грелина в тканях и головном мозге у интактных и стрессированных хищником рыб Эашо гепо, а также

фармакологической коррекции стрессогенной реакции у рыб с помощью нейропептидов окситоцина и антагонистов грелина [D-Lys3]-GHRP-6 и агрелакса.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Danio гегю, как самостоятельно, так и в варианте «хищник-жертва» может быть использована в качестве экспериментальной модели для изучения стрессогенных поведенческих и биохимических реакций и тестирования потенциальных стресс-протекторных соединений.

2. Центральное и периферическое звенья реакции стресса проявляют различную чувствительность к стресс-протекторным нейропептидам (окситоцин, [D-Lys3]-GHRP-6, агрелакс). В качестве центральных механизмов стресса предпочтительно рассматривать реакцию КРГ и грелина, общую активность протеинкиназ головного мозга на стрессогенную ситуацию, в качестве периферического звена - уровень кортизола (классический вариант лабораторных исследований).

3. Нейропептиды гипоталамуса ([D-Lys3]-GHRP-6 и аналоги) и гипофиза (окситоцин) проявляют стресс-протекторную активность в модельных исследованиях на Danio гегю, сходным образом влияя на центральные и периферические звенья стрессорной реакции.

4. Грелин неоднородно распределен в структурах головного мозга Danio гегю, он активно реагирует на стресс-реакцию повышением экспрессии и может рассматриваться как маркер стрессогенной реакции у Danio гегю.

Степень достоверности и апробация материалов исследования Степень достоверности определяется большим числом экспериментальных животных (296 особей Danio гегю обоего пола), рандомизацией и формированием групп сравнения и активного контроля, адекватными фармакологическими и биохимическими методами исследования, длительными сроками наблюдения и корректными методами статистической обработки.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Действие гормональных препаратов на нейропептидные системы Danio rerio в условиях стресса»

Апробация работы

Материалы, вошедшие в диссертацию, доложены на 26-й, 27-й и 28-й международной конференции «Stress and Behavior» (Санкт-Петербург) в 2019, 2020, 2021, конференции «The 14th International Zebrafish Conference» (Suzhou, Китай), 2019, международной конференции «Pharmacology-2019» (Edinburgh, Великобритания), 2019, российской научной конференции с международнм участием «Фармакология гормональных систем» (Санкт-Петербург), 2020, международной конференции «MedChem-Russia-2021» (Волгоград), 2022, секции трансляционной и клинической медицины Дома ученых им. М. Горького РАН (Санкт-Петербург), 2020, 2022.

Работа одобрена локальным комитетом по этике ФГБНУ «Институт экспериментальной медицины».

Апробация диссертации прошла на совместном заседании отдела нейрофармакологии им. С.В. Аничкова и отдела биохимии ФГБНУ «Институт экспериментальной медицины».

Личный вклад автора в проведенном исследовании

Автор определил цель, основные положения и сформулировал задачи исследования. Автором лично осуществлялись эксперименты с животными в поведенческих тестах, получение материала головного мозга и хвостового мускула, определене концентраций нейропептидов, концентрации кортизола, определение общей активности киназ, с последующей статистической обработкой и анализом полученных результатов, написание диссертации.

Публикации

По теме диссертации опубликовано 14 научных работ, в их числе 7 статей в журналах, рекомендованных ВАК, и 7 тезисов и статей в сборниках научно-практических работ.

Структура и объем диссертации Диссертация соответствует ГОСТу и состоит из следующих разделов: введения, обзора литературы, главы материалов и методов исследования, описания результатов собственных исследований, включающей 5 подразделов, обсуждения полученных результатов, выводов, практических рекомендаций, списка литературы. Работа изложена на 103 страницах машинописного текста, иллюстрирована 12 таблицами и 15 рисунками. Библиографический указатель включает 187 ссылок, в том числе 6 отечественных и 181 иностранных.

ГЛАВА 1. РОЛЬ ГОРМОНАЛЬНЫХ И НЕЙРОМОДУЛИРУЮЩИХ СИСТЕМ У КОСТИСТЫХ РЫБ И ВЫСШИХ МЛЕКОПИТАЮЩИХ. ОБЗОР ЛИТРАТУРЫ.

1.1. Danio rerio как модельный организм

Danio rerio является современным лабораторным животным, широко применяется в экспериментальных целях (Кондакова Е.А. и др., 2014). Особенностью Danio rerio является не изолированность отдельных генетических линий вида, а использование исключительно животных дикого типа в качестве биологического объекта для лабораторных исследований (M.S. de Abreu et. al., 2018).

Danio rerio — тропическая пресноводная рыба, обитающая в реках гималайского региона Южной Азии, особенно в Индии, Непале, Бутане, Пакистане, Бангладеш и Мьянме (M.S. de Abreu et al., 2018; B. Griffiths et. al., 2012a; A.L. Menke et. al., 2011). Это костистая рыба, принадлежащая к семейству карповых, класса Actinopterygii (лучеперые рыбы). Danio rerio впервые была использована в качестве биологической модели Джорджем Стрейзингером (Университет Орегона) в 1970-х годах (Varga M., 2018). Выбор пал на этот модельный организм из-за более простого строения, меньшей стоимости и доступности генетических манипуляций.

Характерной особенность Danio rerio является наличие прозрачных эмбриональных и личиночных стадий, это в свою очередь дает возможность проводить детальные морфологические исследования всех стадий индивидуального развития данного вида, последнее важно не только для биологии развития, но и для исследований в области геномики (McGonnell I.M. et. al., 2006).

Недавно была получена своеобразная линия casper, представители данной линии явлются мутантами по генам nacr и roi и лишены клеток иридофоров и меланоцитов. Поэтому особи данной линии прозрачны на протяжении всего индивидуального развития. Это свойство линии casper открывает новые широкие возможности для исследований в области молекулярной биологии развития и молекулярной генетики (White et. al., 2008).

Геном Danio rerio имеет много общего с геномом человека (McCluskey et. al.,

2015). Около 70% генов, связанных с заболеванием у человека, имеют функциональные гомологи у этих модельных животных (Okamoto C.T. 2002).

Danio rerio сравнительно недавно стала успешной моделью для токсикологических исследований и тестирования фармакологических препаратов (K.M. Khan et. al., 2017). Влияние лекарственных средств на рост и развитие можно визуально оценить по длине и форме тела эмбрионов, личинок, взрослых особей в зависимости от момента исследования, а также по морфологии внутренних органов, таких как мозг, печень, сердечно-сосудистая система, поджелудочная железа, кишечник, почки (Rahman Khan F. et al., 2019). Эмбрионы Danio rerio используются в качестве прогностической модели для оценки токсичности у взрослых особей (Jin M. et. al., 2021). Также было изучено воздействие различных лекарств на конкретные органы эмбрионов, и было обнаружено, что токсичность для внутренних органов одинакова как у Danio rerio, так и у млекопитающих.

Одними из первых и основных препаратов, которые использовались для оценки органной токсичности, были гентамицин, цисплатин, винбластин, хинин, неомицин, доксорубицин, дексаметазон, циклоспорин А, кофеин (P. Lepanto et. al.,

2016).

1.2. Поведенческие реакции на стресс у высших млекопитающих и костистых

рыб. Сравнительный анализ

Классическими модельными животными для создания психической травмы исторически являлись крысы. Одна из методик заключалась в том, что в присутствии сородичей жертва погибала от воздействия хищника, что являлось острой психотравмирующей ситуацией для животного-жертвы (Пошивалов В.П., 1986; S.G. Tsikunov et al., 2016). Как правило в методике создания психотравмирующего состояния у крыс используется тигровый питон (S.G. Tsikunov et. al., 2016). Оцениваются такие показатели как обнюхивние, груминг, фризинг, покой - неподвижное состояние животного. Есть несколько тестов оценки поведения после создания такой травмы. Один из тестов - тест «открытое поле», использующийся для оценки двигательной активности, тревожности и

желания животного к исследованию пространства. Как правило в такой методике тестируются различные препараты, коррегирующие или, наоборот, ухудшающие постстрессорное состояние (I.Y. Tissen et. al., 2018).

Алкоголизированные крысы проявляли более выраженное тревожное состояние под воздействием этанола, отмечались агрессивные паттерны поведения, однако эти состояния в большинстве случаев поддавались фармакологической коррекции (Tissen I.Y. et. al., 2018). Еще один популярный тест для оценки поведенческих ответов, описывающих взаимоотношения двух особей в одной клетке - тест «чужак - резидент» (Пошивалов В.П., 1986). К крупному самцу, который постоянно находится в своей клетке, на некоторое время подсаживают животное меньших размеров (Вартанян Г.А., Петров Е.С., 1989). Так же рядом авторов отмечалось более тревожное состояние при моделирование психосоциальной травмы вышеуказанным способом (Vinogradov P.M. et. al., 2015).

Аналогичные тесты оценки поведения могут быть применены и к модельному организму Danio rerio (Лебедев А.А. и др., 2021). Различные расстройства нервной системы могут быть смоделированы на Danio rerio (M. Blank et. al., 2009). Тест новизны осуществляли следующим образом. Рыбу помещали в аквариум, приспособленный для наблюдения траектории движения животного. Передняя стенка аквариума была разделена горизонтальной линией на верхнюю и нижнюю половины. В ходе тестирования оценивали длительность пребывания животного в той или другой половине аквариума. Движение рыбы наблюдали в течение 5 - 30 минут (R.J. Egan et. al., 2009b). Авторы исследования пришли к выводу, что рыба находилась более длительное время в нижней части резервуара. В условиях новизны рыбы совершали количество резких, непроизвольных, блуждающих «эрратических» движений и актов замирания (англ. «freezing»). Указанные характеристики принято рассматривать как проявления тревожного состояния (K. Wong et. al., 2010). Позднее, в ходе адаптации к новым условиям, животное проводило больше времени в верхней части резервуара. Количество блуждающих движений и актов замирания так же снижалось. К методам оценки поведения рыб в условиях стресса так же можно отнести тест социального

предпочтения. Метод подразумевает оценку стремления экспериментального животного находиться ближе к своим сородичам, избегая свободное постранство аквариума (K. Wong et. al., 2010).

Другие поведенческие анализы могут также отслеживать реакции на стресс, включая новые погружения в аквариумы, предпочтения темноты / света и тесты в открытом поле. При таких анализах стрессовые факторы окружающей среды и фармакологические факторы, такие как,например, антидепрессант флуоксетин, кофеин или этанол, приводят к сильным анксиогенным или анксиолитическим поведенческим паттернам, сходным с теми, которые наблюдаются у млекопитающих. Эти результаты иллюстрируют пригодность Danio rerio в качестве ценной модели для изучения стресса и поиска веществ, ингибирующих стресс (R.J. Egan et. al., 2009a; N. Speedie, R. Gerlai 2008).

1.3. Гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковая ось у высших млекопитающих и

Danio rerio. Сравнительный анализ

Влияние стрессовых факторов на организм можно оценивать по состоянию гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы (ГГНС) (A. Papadimitriou, K.N. Priftis 2009; S.J. Spencer, A. Tilbrook 2011). Отделы мозга, участвующие в стрессовой реакции включают в себя: гиппокамп и гипоталамус, на которые по механизму обратной связи воздействуют глюкокортикоиды (кортизол); мозговой ствол, отвечающий за действие автономной нервной системы при стрессе; амигдала, регулирующая функцию «оценивания угрозы» и координирующая физиологический и поведенческий ответ на опасность, а так же стриатум (L.M. Sippel et. al., 2017b). При стрессе, аргинин-вазопрессин и кортикотропин-рилизинг гормон (КРГ) содержащие клетки паравентрикулярного ядра гипоталамуса активируются, что приводит к выделению аргинин-вазопрессина и кортикотропин-рилизинг гормона в срединную возвышенность, где они воздействуют на кортикотропные клетки в передней доле гипофиза и стимулируют выброс адренокортикотропного гормона в кровяное русло (S. Sparapani et. al., 2021b). Адренокортикотропный гормон в свою очередь воздействует на кору

надпочечников и стимулирует высвобождение глюкокортикоидов (Alfven G. et. al., 1994).

Повышение выработки глюкокортикоидных гормонов, содержание которых определяется в крови, рассматривается как общий критерий стресса со времен исследований Селье (R.M. Sapolsky, L.M. Romero, A.U. Munck, 2000). При моделировании стрессовых условий у лабораторных животных, в основном грызунов (крыс, мышей), основное внимание уделяется концентрации кортикостерона в крови, который доминирует среди глюкокортикоидных гормонов у этих животных. Известно, что у людей ответ надпочечников на действие любого агента, вызывающего стресс, заключается в увеличении выработки кортизола (P. Gorwood et al., 2016). Кортикостерон и кортизол значительно различаются по своим функциональным характеристикам и биологической активности (B. Griffiths et al. 2012; P. Willner 1995). Поэтому при выборе модели стресса ориентируются на такие биологические объекты, в которых кортизол является индикатором стресса. У человека и у Danio rerio биомаркером стресса является кортизол (Shabanov P.D. et. al., 2021). Кортизол и кортикотропин-рилизинг гормон запускают лимбическую систему и нейроны префронтальной коры, участвующие в регуляции ответа на стресс (Y. Meng et al., 2014). Глюкокортикоиды выполняют функцию сохранения внутреннего гомеостаза организма во время ответа на острый стресс посредством негативной обратной связи в головном мозге. Некоторые нейронные механизмы лежат в основе воздействия стресса на настроение и поведение млекопитающих (E.J. Kooi et al., 2009). Так же известно, что повторяющийся стресс может индуцировать нейронные адаптации, включая снижение экспрессии рецептора глюкокортикоидов (E.J. Kooi et al., 2009). Такие адаптации связывают с депрессивным поведением у грызунов (V. Castagne et al., 2011). Последствием большого количества кортизола в ранние периоды жизни является подавление активности генов глюкокортикоидного рецептора посредством эпигенетической модификации, что в свою очередь может привести к большей подверженности к стрессам во взрослом периоде жизни (Wilkinson P. et. al., 2011).

Существует одно существенное различие в анатомии млекопитающих по

сравнению с гипоталамо-гипофизарной осью костисты рыб (Сапронов Н.С., 2005). Срединное возвышение, которое связывает гипофиз с гипоталамусом, гораздо более заметно у млекопитающих (Golan M. et. al., 2014). Срединное возвышение млекопитающих представляет собой подобную стеблю нейрогенную структуру, которая содержит аксоны магноцеллюлярных нейроэндокринных клеток, которые входят в задний гипофиз, а также систему портальных кровеносных сосудов, которая транспортирует нейропептиды из парвоцеллюлярной системы в передний гипофиз. У Danio rerio эта портальная система отсутствует, гипофиз расположен непосредственно под гипоталамусом, а нейроэндокринные системы непосредственно иннервируют как задний, так и передний гипофиз (Pogoda H.M. et. al., 2009). Остается неясным, имеют ли эти различия в анатомической организации гипоталамо-гипофизарной оси функциональные различия.

Все гипоталамо-гипофизарные оси также, по-видимому, существуют у Danio гепо и действуют в тесном сотрудничестве с другими нейроэндокринными системами, контролирующими физиологические реакции живого организма (I.M. McGonnell, R.C. Fowkes 2006; A.L. Menke и др. 2011; G.G. Mody, M. Vegf 2003; P. Panula et. al., 2010). Предоптические нейроны КРГ составляют гомологи клеток КРГ млекопитающих в паравентрикулярном ядре, а кортикотропные клетки, продуцирующие АКТГ, мишени КРГ, присутствуют в передней и задней долях гипофиза Danio rerio.

К группе кортиколиберинов так же относятся урокортины, а ортологи генов урокортина: уротензин и урокортин 3-подобные, экспрессируются в мозге Danio rerio (L. Bräutigam et. al., 2010). КРГ и урокортины связываются с двумя различными рецепторами: CRHR1 и CRHR2, которые оба были описаны у Danio rerio (Löhr H. et., 2011).

Кортикотропная активность а-меланоцитстимулирующего гормона может регулировать реакцию хронического стресса у рыб, в то время как АКТГ является ключевым фактором, опосредующим реакцию на острый стресс (B. Griffiths et. al., 2012b). У Danio rerio в отличие от млекопитающих нет четкого разделения коры надпочечников и мозгового вещества на стероидогенные и хромаффинные клетки

(E. Farias-Silva et. al., 2002). Несмотря на эти различия в анатомическом положении и организации железы, развитие стероидогенной клеточной линии хорошо сохраняется у Danio rerio (A.L. Menke et. al., 2011). Ферменты, участвующие в развитии желез и синтезе кортизола, по-видимому, также сохраняются в модельном организме (I.U. Hsu et. al., 2020). На 2 день после оплодотворения все компоненты оси ГГНС выражены в личинках Danio rerio (Baker C.V.H. et. al., 2001). Измерение уровня кортизола в целостном организме считается подходящим показателем для реакции на стресс у взрослых Danio rerio (M. Weger et. al., 2018). Исследователи также обнаружили увеличение уровня кортизола у Danio rerio при использовании контакта с хищником в качестве стрессора (L.J.G. Barcellos et. al., 2014).

Исследования, направленные на изучение анатомии и биологии развития гипофиза Danio rerio, выявили как сходство, так и различия между гипофизом млекопитающих и Danio rerio (Pogoda H.M. et., 2009). Как и его аналог у млекопитающих, гипофиз Danio rerio состоит из двух разных частей, которые отличаются по происхождению. Нейрогипофиз (задний гипофиз) происходит из вентрального расширения развивающегося гипоталамуса. Он состоит из аксональных нервных окончаний гипоталамических магноклеточных нейронов, которые высвобождают нейропептиды аргинин-вазопрессин и окситоцин в системный кровоток, и питуицитов, которые не генерируют гормоны, но, скорее всего, имеют поддерживающие и модулирующие функции. У Danio rerio питуициты можно легко идентифицировать по экспрессии специфических маркерных генов (M. Furthauer и др. 2002), (H.M. Pogoda, M. Hammerschmidt 2009; S. Sparapani et. al., 2021). Экспрессия этих генов позволяет предположить, что питуициты, скорее всего, подлежат регуляции с помощью передачи сигналов фактора роста. Аденогипофиз (передний гипофиз) представляет собой не нейральную часть гипофиза и эмбриологически происходит из эктодермы плакоды. Он содержит различные линии эндокринных клеток, которые характеризуются типом гормона, который они выделяют.

У Danio rerio девять различных типов клеток можно различить по анатомическому положению и профилю экспрессии: лактотропы, две отдельные

группы кортикотропов, тиреотропы, соматотропы, две группы соматолактотропов, меланотропы и гонадотропы (D.A. Gorelick, L.M. Habenicht 2019). Экспрессия соответствующих генов нейропептидов может быть легко обнаружена с помощью гибридизации in situ в отдельных аденогипофизарных клетках уже через 2-5 дней после оплодотворения (dpf) (P. Iturriaga-Vasquez et. al., 2012), то есть до того, как рыба свободно плавает, принимает пищу и увеличивается в размерах. Исключением могут быть фолликулостимулирующий гормон (ФСГ) и лютеинизирующий гормон (ЛГ), вырабатываемый гонадотропами. Активация или ингибирование высвобождения гормонов аденогипофиза, скорее всего, контролируется преоптическими нейроэндокринными гормонами и периферическими гормонами, действующими через классические механизмы обратной связи.

В аденогипофизе личинок Danio rerio выявляется экспрессия дофаминового рецептора. Нокдаун этого рецептора или применение антагонистов дофаминовых рецепторов приводит к увеличению уровней пролактина на второй день после оплодотворения, тогда как лечение агонистами дофаминовых рецепторов оказывает противоположный эффект и снижает уровни пролактина (R.M. Meyer et. al., 2014). Эти результаты указывают на то, что эндогенное дофаминергическое тоническое ингибирование лактотропов действует с самых ранних личиночных стадий. Кроме того, по-видимому, существует механизм прямой обратной связи посредством передачи сигналов пролактином аденогипофизарным клеткам, которые экспрессируют рецептор пролактина с 24 часов после оплодотворения и позже (J.W. CA Frye 2003).

Ответ на стресс, как правило, характеризуется активацией оси клеток мозгового симпатического хромаффина, что в конечном итоге приводит к высвобождению катехоламинов (адреналина и норадреналина), и оси ГГНС (гипоталамо-гипофизарно-межпочечной оси у Danio rerio), что приводит к высвобождению глюкокортикоидого стероидного гормона кортизола из надпочечников / межпочечной железы у Danio rerio (M. Weger et. al., 2018). Обе оси присутствуют и активны у рыб. Эффекты катехоламинов включают мобилизацию

глюкозы из печени и мышц, усиленное поглощение кислорода из жабр и повышенный перенос кислорода в ткани (B. Griffiths et. al., 2012a).

Основными мишенями для кортизола являются жабры, кишечник и печень, отражающие его два основных действия: регулирование энергетического обмена (действие глюкокортикоидов) и регулирование гидроминерального баланса. У Danio rerio нет классического минералкортикоида - альдостерона (P. Panula et. al., 2010). Тем не менее, они имеют как минералокортикоидный рецептор (MR), так и глюкокортикоидный рецептор (GR), и дифференциальное распределение этих рецепторов на клетках-мишенях определяет физиологическое действие кортизола (H. Lohr, M. Hammerschmidt 2011a).

Одним из важных гипоталамических звеньев, связанных с энергетическим гомеостазом млекопитающих, является меланокортиновая система ARC и PVN (A. Abizaid et. al., 2006). В центре этой системы находятся две различные антагонистические популяции нейрональных клеток. Одна клеточная популяция коэкспрессирует нейропептид Y (NPY) и родственный агути пептид (AgRP) и обладает орексигенным эффектом (способствует поглощению пищи и ингибирует расход энергии). Другая клеточная популяция коэкспрессирует проопиомеланокортин (POMC), предшественник а-меланоцит-стимулирующего гормона (а-MSH), и транскрипт, регулируемый кокаином и амфетамином (CART), и обладает анорексигенными эффектами (подавляет поглощение пищи и способствует расходу энергии). Эти популяции клеток реагируют на текущее энергетическое состояние организма, которое они ощущают с помощью сигналов от организма, поступающих к ним через кровь, таких как гормоны лептин, грелин, а также инсулин и глюкоза (H. Lohr, M. Hammerschmidt 2011a). В свою очередь, нейроны а-MSH и AgRP проецируются на различные так называемые нейроны второго порядка, включая нейроэндокринные клеточные линии PVN, которые экспрессируют рецептор а-меланоцитстимулирующего гормона и рецептор меланокортина 4. AgRP также связывается с MC4R, но не активирует передачу сигналов рецептора и, таким образом, блокирует нейронную активность второго порядка и соответствующий анорексигенный ответ. Сложная сеть этих нейронов

второго порядка и других нижестоящих эффекторов далеко не полностью понятна. Сеть, по-видимому, включает как внутреннюю обработку ЦНС, так и гормональный выход через нейроэндокринные двигательные системы и гипофиз. Нейроны второго порядка включают клетки TRH и CRH PVN, которые, в свою очередь, являются компонентами гипоталамо-гипофизарной оси, и это может свидетельствовать о связи между системой меланокортина и гипофизом, а также его нижестоящими эффекторами и мишенями (R. Martínez et. al., 2020; A.M. Wren et. al., 2001). У мышей мутации с потерей функции во многих из этих анорексигенных или орексигенных регуляторов вызывают соответственно ожирение или мышечную массу. После голодания или кормления ad libitum Danio rerio также могут стать худыми или тучными, в дополнение к влиянию на линейный рост тела. Кроме того, все важные регуляторы, известные из систем млекопитающих, были идентифицированы. NPY-позитивные клеточные тела локализуются в гипоталамусе личинок Danio rerio (G.C. Harris et. al., 2007). Кроме того, была обнаружена гипоталамическая экспрессия транскрипта agrp у Danio rerio, и было изучено функциональное сохранение нейронов agrp для энергетического гомеостаза. В соответствии с данными, полученными на мышиной модели, транскрипт agrp активируется в гипоталамусе голодных рыб Daio rerio, а создание трансгенной линии рыб с повсеместной избыточной экспрессией agrp привело к животному с повышенным линейным ростом и фенотипом ожирения (J. Jordi et. al., 2015).

1.4. Роль пептидных систем в регуляции стресса и постстрессорные реакции у костистых рыб и высших млекопитающих. Сравнительный анализ Ортологи всех генов нейроэндокринных пептидов млекопитающих были идентифицированы и локализованы у Danio rerio. Однако, поскольку большинство этих гормонов экспрессируются в более чем одном домене гипоталамуса и анатомическая корреляция между ядрами Danio rerio и млекопитающими не всегда ясна, точные местоположения групп нейроэндокринных клеток иногда трудно

определить (J.B. Furness и др. 2011; H. Löhr, M. Hammerschmidt 2011a; Z. Zeng, N. Miao, T. Sun 201S).

В случае кортикотропин-рилизинг гормона, гонадотропин-рилизинг гормона, окситоцининоподобного гормона, ранее называемым изотоцином, рядом ученых был идентифицирован общий домен экспрессии в преоптической области Danio rerio (E.J. Brunner, T. Chandola, M.G. Marmot 2007).

Наиболее интересующие грелиновая и окситоциновая (изотоциновая, окситоциноподобная) нейропептидные системы у Danio rerio и их роль в ответе на стресс, рассмотрены в отдельных подглавах, так как являются наиболее актуальными.

1.4.1. Роль окситоциновой системы в регуляции стресса

Одним из нейромодуляторов, выделяющихся в паравентрикулярном ядре, является окситоцин. У млекопитающих магноклеточные нейроны находятся в паровентрикулярном ядре и супраоптическом ядре и синтезируют окситоцин или аргинин-вазопрессин. Оба этих пептида напрямую экспортируются через проекции аксонов в нейрогипофизе (задняя доля гипофиза) и секретируются в кровь (G. Ghisleni et. al., 2012; K.M. Khan et. al., 2017; I.M. McGonnell, R.C. Fowkes 200б; A.L. Menke et. al., 2011; G.G. Mody, M. Vegf 2003; P. Panula et. al., 2010; F. Schmidt, T. Braunbeck 2011)

Следует отметить существующую в литературе некоторую неопределенность в терминологии. Под нейротрансмиттерными системами понимают молекулярные системы, которые передают через синапс-потенциал действия в отличие от нейромодуляторов, которые стимулируют или ингибируют (одним словом моделируют) передачу этого потенциала действия (L. Corradi, A. Filosa 2021). Хотя окситоцин классически ассоциируется с родами и лактацией, было также показано, что он играет важную роль в модулировании реакции на стресс (R. Babygirija et. al., 2012a; R. Babygirija et. al., 2012b; M. Bülbül et. al., 2011; I.D. Neumann et. al., 2000; A.S. Smith, Z. Wang 2014). В состоянии стресса происходит высвобождение окситоцина как в паравентрикулярном ядре, так и в супраоптическом ядре (R.

Babygirija et. al., 2012a; T. Nishioka et. al 1998). Окситоцин высвобождается из дендритных отростков крупноклеточных окситоциносодержащих нейронов в ответ на стресс (M. Ludwig, G. Leng 2006; R.J. Windle et al., 1997). По данным исследования показано, что внутрижелудочкового введения окситоцина достаточно для снижения вызванного стрессом выброса кортикостероидов и нормализации тревожного поведения у грызунов (R.J. Windle et al., 1997), а также для подавления вызванной стрессом экспрессии c-Fos в нейронах кортикотропин-рилизинг гормона (R.J. Windle et. al., 2004). Механизмы, с помощью которых окситоцин ослабляет центральные реакции на стресс, остаются неясными. Последние данные свидетельствуют о том, что некоторые парвоцеллюлярные нейроны кортикотропин-рилизинг гормона экспрессируют транскрипт мРНК для рецептора окситоцина (R. Chen et. al., 2017; M. Janecek, J. Dabrowska 2019; V. Olivera-Pasilio, J. Dabrowska 2020). Тем не менее, возможно, что окситоцин может воздействовать на афферентные синаптические терминали, которые воздействуют на клетки, содержащие кортикотропин - рилизинг гормон, тем самым косвенно регулируя возбудимость нейронов кортикотропин-рилизинг гормона (J.M. Cyranowski et. al., 2008).

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Блаженко Александра Александровна, 2023 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Блаженко, А.А. Устранение стрессогенного повышения грелина в головном мозге Danio rerio бензодиазепиновыми транквилизаторами / А.А. Блаженко, П.П. Хохлов, И.Ю. Тиссен, А.А. Лебедев, П.Д. Шабанов // Обзоры по клинической фармакологии и лекарственной терапии. - 2020. - Т. 18, № 4. - С. 327-332.

2. Вартанян, Г.А. Эмоции и поведение / Г.А. Вартанян, Е.С. Петров. - Л.: Наука, 1989. - 150 с.

3. Лебедев А.А. Поведенческий анализ анксиолитического действия феназепама в условиях острого психогенного стресса (предъявления хищника) у Danio rerio / А.А. Лебедев, А.С. Девяшин, А.А. Блаженко, С.В. Казаков, В.А. Лебедев, Е.Р. Бычков, П.Д. Шабанов // Обзоры по клинической фармакологии и лекарственной терапии. - 2021. - Т. 19, № 1. - С. 71-78.

4. Петров, Е.С. Изучение нейробиологических основ сложных безусловных рефлексов в физиологическом отделе им. И.П. Павлова. Итоги последних лет / Е.С. Петров // Физиол. журн. СССР им. И.М. Сеченова. - 1990. - Т.76, №12. - С.1669-1680.

5. Пошивалов, В.П. Экспериментальная психофармакология агрес-сивного поведения / В.П. Пошивалов // Наука. - 1986. - C.173.

6. Сапронов, Н.С. Гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковая система и мозг / Н.С. Сапронов. - СПб.: Элби-СПб, 2005. - 512 с.

7. Abizaid A. Brain circuits regulating energy homeostasis / А. Abizaid, T.L. Horvath // Regulatory Peptides. - 2008. - Vol. 149. - P.3-10.

8. Abizaid A. Ghrelin modulates the activity and synaptic input organization of midbrain dopamine neurons while promoting appetite / A. Abizaid, Z.W. Liu, Z.B. Andrews et al. // Journal of Clinical Investigation. - 2006. - Vol. 116 - P.3229-3239.

9. Abrahamson E.E. The suprachiasmatic nucleus projects to posterior hypothalamic arousal / E.E. Abrahamson, R.K. Leak, R.Y. Moore et al. // NeuroReport. - 2001. - Vol. 12 - № 2- P.435-440.

10. Abreu M.S. de Zebrafish models: do we have valid paradigms for depression? // E. M.S Abreu, W.E. Bridson // J. Pharmacol. Toxicol. Methods. - 2018. - Vol. 94 - P. 16-22c.

11. Alfven G. Depressed concentrations of oxytocin and Cortisol in children with recurrent abdominal pain of non-organic origin / G. Alfven, B. De. Torre, K. Uvnas-Moberg et al. // Acta Paediatrica, International Journal of Paediatrics. - 1994. - Vol. 83

- P.1076-1080.

12. Amo R. Identification of the zebrafish ventral habenula as a homolog of the mammalian lateral habenula / R. Amo, H. Aizawa, M. Takahoko et al. // J Neurosci. -2010. - Vol. 30 - P.1566-1574.

13. Amole N. Fasting induces preproghrelin mRNA expression in the brain and gut of zebrafish, Danio rerio / N. Amole, S. Unniappan // General and Comparative Endocrinology. - 2009. - Vol. 161 - P.133-137.

14. Andersson U. AMP-activated Protein Kinase Plays a Role in the Control of Food Intake / U. Andersson, K. Filipsson, C.R. Abbott et al. // Journal of Biological Chemistry.

- 2004. - Vol. 279 - P.12005-12008.

15. Andreis P.G. Ghrelin and growth hormone secretagogue receptor are expressed in the rat adrenal cortex: Evidence that ghrelin stimulates the growth, but not the secretory activity of adrenal cells / P.G. Andreis, L.K. Malendowicz, M. Trejter et al. // FEBS Letters. - 2003. - Vol. 536 - P.173-179.

16. Appelbaum L. Sleep-wake regulation and hypocretin-melatonin interaction in zebrafish / L. Appelbaum, G.X. Wang, G.S. Maro et al. // Proc Natl Acad Sci USA. -2009. - Vol. 106 - P.21942-21947.

17. Asakawa A. A role of ghrelin in neuroendocrine and behavioral responses to stress in mice / A. Asakawa, A. Inui, T. Kaga et al. // Neuroendocrinology. - 2001. - Vol. 74

- P.143-147.

18. Babygirija R. Central and peripheral release of oxytocin following chronic homotypic stress in rats / R. Babygirija, M. Bülbül, S. Yoshimoto et al. // Autonomic Neuroscience: Basic and Clinical. - 2012. - Vol. 167 - P.56-60.

19. Babygirija R. Social interaction attenuates stress responses following chronic stress in maternally separated rats / R. Babygirija, S. Yoshimoto, I. Gribovskaja-Rupp et al. // Brain Research. - 2012. - Vol. 1469- P.54-62.

20. Baker C.V.H. Vertebrate cranial placodes. I. Embryonic induction / C.V.H. Baker, M. Bronner-Fraser // Developmental Biology. - 2001. - Vol. 232 - P.1-61.

21. Bakunina N.S. Analysis of neuroprotective effects of polyprenols in a rat model of posttraumatic stress disorder / N.S. Bakunina, A.A. Lebedev, S.G. Tsikunov, V.S. Soultanov, P.D. Shabanov // Reviews on Clinical Pharmacology and Drug Therapy. -2014. - Vol. 12 - P.65-70.

22. Bali A. An Integrative Review on Role and Mechanisms of Ghrelin in Stress, Anxiety and Depression / A. Bali, A. Singh Jaggi // Current Drug Targets. - 2016. - Vol. 17 - P.495-507.

23. Balmus I.M. Preliminary data regarding the effects of oxytocin administration on the oxidative stress status of zebrafish (Danio Rerio) / I.M. Balmus, S. Strungaru, M. Nicoara et al. // Revista de Chimie. - 2017. - Vol. 68 - P.1640-1643.

24. Barcellos L.J.G. Chemical communication of predation risk in zebrafish does not depend on cortisol increase / L.J.G. Barcellos, G. Koakoski, J.G.S. Da Rosa et al. // Scientific Reports. - 2014. - Vol. 4- P.539-544.

25. Blank M. A one-trial inhibitory avoidance task to zebrafish: rapid acquisition of an NMDA-dependent long-term memory / M. Blank, L.D. Guerim, R.F. Cordeiro, M.R.M. Vianna // Neurobiol Learn Mem. - 2009. - Vol. 92 - P.529-534.

26. Blazhenko A.A. Benzodiazepine tranquilizers abolish the stress-induced increase of the brain ghrelin level in DANIO RERIO / A.A. Blazhenko, P.P. Khokhlov, I.Y. Tissen, A.S. Devyashin, A.A. Lebedev, S, N. Proshin // Reviews on Clinical Pharmacology and Drug Therapy. - 2020. - Vol. 18 - P.327-332.

27. Bowers C.Y. History to the discovery of ghrelin. / C. Y. Bowers// Endocrinology. - 2012. - Vol. 1- 3-32c.

28. Bräutigam L. Localized expression of urocortin genes in the developing zebrafish brain / L. Bräutigam, J.M. Hillmer, I. Söll, G. Hauptmann // The Journal of comparative neurology. - 2010. - Vol. 518 - P.2978-2995.

29. Brockway E.T. Impact of [d-Lys3]-GHRP-6 and feeding status on hypothalamic ghrelin-induced stress activation / E.T. Brockway, K.R. Krater, J.A. Selva et al. // Peptides. - 2016. - Vol. 79- P.95-102.

30. Brunner E.J. Prospective effect of job strain on general and central obesity in the Whitehall II Study / E.J. Brunner, T. Chandola, M.G. Marmot et al. // American Journal of Epidemiology. - 2007. - Vol. 165 - P.828-837.

31. Bülbül M. Hypothalamic oxytocin attenuates CRF expression via GABAA receptors in rats / M. Bülbül, R. Babygirija, D. Cerjak et al. // Brain Research. - 2011. -Vol. 1387- P.39-45.

32. CA Frye J.W. Effect of prenatal stress and gonadal hormone condition on depressive behaviors of female and male rats / J.W. CA Frye // Horm Behav. - 2003. -Vol. 44- P.319-326.

33. Cabral A. Analysis of brain nuclei accessible to ghrelin present in the cerebrospinal fluid / A. Cabral, G. Fernandez, M. Perello et al. // Neuroscience. - 2013. - Vol. 253-P.406-415.

34. Cabral A. Ghrelin indirectly activates hypophysiotropic CRF neurons in rodents / A. Cabral, O. Suescun, J.M. Zigman, M. Perello // PLoS ONE. - 2012. - Vol. 7 - № 2.

35. Cabral A. Ghrelin directly and indirectly activates neurons / A. Cabral, O. Suescun, J.M. Zigman, M. Perello // PLoS ONE. - 2013. - Vol. 6 - № 1.

36. Cardoso C. Acute intranasal oxytocin improves positive self-perceptions of personality / C. Cardoso, M.A. Ellenbogen, A.M. Linnen et al. // Psychopharmacology. -

2012. - Vol. 220 - P.741-749.

37. Cardoso C. Stress-induced negative mood moderates the relation between oxytocin administration and trust: Evidence for the tend-and-befriend response to stress? / C. Cardoso, M.A. Ellenbogen, L. Serravalle, A.M. Linnen // Psychoneuroendocrinology. -

2013. - Vol. 38 - P.2800-2804.

38. Carlini V.P. Ghrelin increases anxiety-like behavior and memory retention in rats / V.P. Carlini, M.E. Monzon, M.M. Varas et al. // Biochem Biophys Res Commun. -2002. - Vol. 299- P.739-743.

39. Castagne V. Rodent models of depression: Forced swim and tail suspension behavioral despair tests in rats and mice / V. Castagne, P. Moser, S. Roux, R.D. Porsolt // Current Protocols in Neuroscience. - 2011. - Vol. 15 - P.322-344.

40. Chen R. Single-Cell RNA-Seq Reveals Hypothalamic Cell Diversity / R. Chen, X. Wu, L. Jiang, Y. Zhang // Cell Reports. - 2017. - Vol. 18 - P.3227-3241.

41. Cho H.J. Nasal Placode Development, GnRH Neuronal Migration and Kallmann Syndrome / H.J. Cho, Y. Shan, N.C. Whittington, S. Wray // Frontiers in Cell and Developmental Biology. - 2019. - Vol. 7- P.121.

42. Conde-Sieira M. Stress Effects on the Mechanisms Regulating Appetite in Teleost Fish. / M. Conde-Sieira, M. Chivite, J.M. Miguez, J.L. Soengas // Frontiers in endocrinology. - 2018. - Vol. 9 - P.631.

43. Cornejo M.P. Growth hormone secretagogue receptor in dopamine neurons controls appetitive and consummatory behaviors towards high-fat diet in ad-libitum fed mice / M.P. Cornejo, J.P. Aguggia, G. Garcia Romero et al. // Psychoneuroendocrinology. - 2020. - Vol. 119 - P.247-259.

44. Corradi L. Neuromodulation and Behavioral Flexibility in Larval Zebrafish: From Neurotransmitters to Circuits. / L. Corradi, A. Filosa // Frontiers in molecular neuroscience. - 2021. - Vol. 14- P.718951.

45. CS Carter M.A.G.C. Neuroendocrine and emotional changes in the post-partum period / M.A.G.C. CS Carter // Prog Brain Res. - 2001. - Vol. 133 - P.241-249.

46. Cummings D.E. A Preprandial Rise in Plasma Ghrelin Levels Suggests a Role in Meal Initiation in Humans / D.E. Cummings, J.Q. Purnell, R.S. Frayo et al. // Diabetes. -2001. - Vol. 50 - P.1714-1719.

47. Cyranowski J.M. Evidence of dysregulated peripheral oxytocin release among depressed women / J.M. Cyranowski, T.L. Hofkens, E. Frank et al. // Psychosomatic Medicine. - 2008. - Vol. 70 -P.967-975.

48. Date Y. Peripheral ghrelin transmits orexigenic signals through the noradrenergic pathway from the hindbrain to the hypothalamus / Y. Date, Y. Ishizuka, H. Kageyama et al. // Cell Metabolism. - 2006. - Vol. 4 - P.323-331.

49. Declerck C.H. Oxytocin and cooperation under conditions of uncertainty: The modulating role of incentives and social information / C.H. Declerck, C. Boone, T. Kiyonari et al. // Hormones and Behavior. - 2010. - Vol. 57 - P.368-374.

50. Ditzen B. Intranasal Oxytocin Increases Positive Communication and Reduces Cortisol Levels During Couple Conflict / B. Ditzen, M. Schaer, B. Gabriel et al. // Biological Psychiatry. - 2009. - Vol. 65 - P.728-731.

51. Diz-Chaves Y. Ghrelin, appetite regulation, and food reward: interaction with chronic stress / Y. Diz-Chaves // International journal of peptides. - 2011. - Vol. 2011-P.828-831.

52. Domes G. Effects of intranasal oxytocin on emotional face processing in women / G. Domes, A. Lischke, A. Grossmann et al. // Psychoneuroendocrinology. - 2010. - Vol. 35 - P.83-93.

53. Domes G. Oxytocin Attenuates Amygdala Responses to Emotional Faces Regardless of Valence / G. Domes, M. Heinrichs, J. Glasser et al. // Biological Psychiatry. - 2007. - Vol. 62 - P.1187-1190.

54. Dunn A.J. Brain circuits involved in corticotropin-releasing factor-norepinephrine interactions during stress / A.J. Dunn, A.H. Swiergiel, V. Palamarchouk et al. // Ann N Y Acad Sci. - 2004. - Vol. 1018- P.25-34.

55. Egan R.J. Understanding behavioral and physiological phenotypes of stress and anxiety in zebrafish / R.J. Egan, C.L. Bergner, P.C. Hart et al. // Behavioural Brain Research. - 2009. - Vol. 205 - P.38-44.

56. Egan R.J. Physiology of anxiety in zebrafish / R.J. Egan, C.L. Bergner, P.C. Hart et al. // Behavioural Brain Research. - 2010. - Vol. 212 - P.68-74.

57. Engel J.A. Role of appetite-regulating peptides in the pathophysiology of addiction: Implications for pharmacotherapy / J.A. Engel, E. Jerlhag // CNS Drugs. -2014. - Vol. 28 - P.875-886.

58. Farias-Silva E. Subsensitivity to insulin in adipocytes from rats submitted to foot-shock stress / E. Farias-Silva, M.M. Sampaio-Barros, M.E.C. Amaral et al. // Canadian Journal of Physiology and Pharmacology. - 2002. - Vol. 80 - P.783-789.

59. Fero K. The behavioural repertoire of larval zebrafish / K. Fero // Biological Psychiatry. - 2010. - Vol. 62 - P.110-120.

60. Filigheddu N. Ghrelin and des-acyl ghrelin promote differentiation and fusion of C2C12 skeletal muscle cells / N. Filigheddu, V.F. Gnocchi, M. Coscia, M. Cappelli // Mol Biol Cell. - 2007. - Vol. 18 - P.986-994.

61. Furness J.B. Investigation of the presence of ghrelin in the central nervous system of the rat and mouse / J.B. Furness, B. Hunne, N. Matsuda, D. Russo // Neuroscience. -2011. - Vol. 193- P. 1-9.

62. Furthauer M. Sef is a feedback-induced antagonist of Ras / MAPK-mediated FGF signalling / M. Furthauer, W. Lin, S.L. Ang, B. Thisse, C. Thisse // Nature Cell Biology. - 2002. - Vol. 4 - P.170-174.

63. Ghisleni G. The role of CRH in behavioral responses to acute restraint stress in zebrafish / G. Ghisleni, K.M. Capiotti, V. Soares, M.R. Bogo, C.D. Bonan // Progress in Neuro-Psychopharmacology and Biological Psychiatry. - 2012. - Vol. 36 - P.176-182.

64. Gnanapavan S. The Tissue Distribution of the mRNA of Ghrelin and Subtypes of Its Receptor, GHS-R, in Humans / S. Gnanapavan, S.A. Bustin, D.G. Morris et al. // The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism. - 2002. - Vol. 87 - P.2988-2991.

65. Golan M. A novel model for development, organization, and function of gonadotropes in fish pituitary / M. Golan, J. Biran, B. Levavi-Sivan et al. // Frontiers in Endocrinology. - 2014. - Vol. 5 - № OCT.

66. Gorelick D.A. Endocrine systems / D.A. Gorelick, L.M. Habenicht // The Zebrafish in Biomedical Research: Biology, Husbandry, Diseases, and Research Applications. -2019.- P.165-179.

67. Gorwood P. New insights in anorexia nervosa / P. Gorwood // Front. Neurosci. -2016. - Vol. 10. - P. 23-36.

68. Griffiths B. A zebrafish model of glucocorticoid resistance shows serotonergic modulation of the stress response / B. Griffiths, P.J. Schoonheim, L. Ziv et al. // Frontiers in Behavioral Neuroscience. - 2012. - Vol. 5 - P. 16-34.

69. Griffiths B. Zebrafish in glucocorticoid research / B. Griffiths, P.J. Schoonheim, L. Voelker, H. Baier // Frontiers in Behavioral Neuroscience. - 2013. - Vol. 5 - P. 4-14.

70. Gualillo O. Effect of food restriction on ghrelin in normal-cycling female rats and in pregnancy / O. Gualillo, J.E. Caminos, R. Nogueiras et al. // Obes Res. - 2002. - Vol. 10 - P.682-687.

71. Gutierrez J.A. Ghrelin octanoylation mediated by an orphan lipid transferase / J.A. Gutierrez, P.J. Solenberg, D.R. Perkins et al. // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. - 2008. - Vol. 105 - P.6320-6325.

72. Harris G.C. Lateral hypothalamic orexin neurons are critically involved in learning to associate an environment with morphine reward / G.C. Harris, M. Wimmer, J.F. Randall-Thompson, G. Aston-Jones // Behavioural Brain Research. - 2007. - Vol. 183 - P.43-51.

73. Heinrichs M. Social support and oxytocin interact to suppress cortisol and subjective responses to psychosocial stress / M. Heinrichs, T. Baumgartner, C. Kirschbaum, U. Ehlert // Biological Psychiatry. - 2003. - Vol. 54 - P.1389-1398.

74. Hoge E.A. Oxytocin levels in social anxiety disorder / E.A. Hoge, M.H. Pollack, R.E. Kaufman, P.J. Zak, N.M. Simon // CNS Neuroscience and Therapeutics. - 2008. -Vol. 14 - P.165-170.

75. Howard A.D. A receptor in pituitary and hypothalamus that functions in growth hormone release / A.D. Howard, S.D. Feighner, D.F. Cully et al. // Science. - 1996. -Vol. 273 - P.974-977.

76. Hsu I.U. Stac protein regulates release of neuropeptides / I.U. Hsu, J.W. Linsley, X. Zhang et al. // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. - 2020. - Vol. 117 - P.29914-29924.

77. Huang S.-T. Circuit Regulates Visceral Hypersensitivity Induced by Maternal Separation in Vgat-Cre Mice. / S.T. Huang, Z.J. Song, Y. Liu, Q. Yin, Y.M. Zhang // Frontiers in pharmacology. - 2021. - Vol. 12- P.615202.

78. Huber D. Vasopressin and oxytocin excite distinct neuronal populations in the central amygdala / D. Huber, P. Veinante, R. Stoop et al. // Neurology. - 2005. - Vol. 308 - P.245-248.

79. Iturriaga-Vasquez P. Zebrafish: A Model for Behavioral Pharmacology / P. F. Osorio, S. Riquelme, S. Castro, R. Herzog // Farmacologia de Chile. - 2012. - Vol. 5 -P.27-32.

80. Janecek M. Oxytocin facilitates adaptive fear and attenuates anxiety responses in animal models and human studies—potential interaction with the corticotropin-releasing factor (CRF) system in the bed nucleus of the stria terminalis (BNST) / M. Janecek // Cell Tissue Res. - 2019. - Vol. 375 - P. 143-172.

81. Jansen A.S. Substance induced plasticity in noradrenergic innervation of the paraventricular hypothalamic nucleus / A.S. Jansen, E.D. Schmidt, P. Voorn, F.J. Tilders // Eur J Neurosci. - 2003. - Vol. 17- P.298-306.

82. Jerlhag E. Ghrelin stimulates locomotor activity and accumbal dopamine-overflow via central cholinergic systems in mice: Implications for its involvement in brain reward / E. Jerlhag, E. Egecioglu, S.L. Dickson et al // Addict Biol. - 2006. - Vol. 11 - P.45-54.

83. Jimerson D.C. Neuropeptides in eating disorders / D.C. Jimerson // CNS Spectr. -2004. - Vol. 9 - 516-522c.

84. Jin M. The possible hormetic effects of fluorene-9-bisphenol on regulating hypothalamic-pituitary-thyroid axis in zebrafish / M. Jin, J. Dang, Y.N. Paudel et al. // Science of the Total Environment. - 2021. - Vol. 776.

85. Jordi J. A high-throughput assay for quantifying appetite and digestive dynamics / J. Jordi, D.Guggiana-Nilo, E. Soucy et al. // American Journal of Physiology - Regulatory Integrative and Comparative Physiology. - 2015. - Vol. 309 - P.345-357.

86. Kadar A. Distribution of hypophysiotropic thyrotropin-releasing hormone (TRH)-synthesizing neurons in the hypothalamic paraventricular nucleus of the mouse / A. Kadar, E. Sanchez, G. Wittmann et al. // J Comp Neurol. - 2010. - Vol. 518- P.3948-3961.

87. Khan K.M. Zebrafish models in neuropsychopharmacology and CNS drug discovery / K.M. Khan, E. V. Meshalkina, T. Kolesnikova et al. // British Journal of Pharmacology. - 2017. - Vol. 174 - P.1925-1944.

88. Kirsch P. Oxytocin modulates neural circuitry for social cognition and fear in humans / P. Kirsch, C. Esslinger, S. Siddhanti et al. // Journal of Neuroscience. - 2005. -Vol. 25 - P.11489-11493.

89. Kondakova E.A. Morphofunctional transformations of the yolk syncytial layer during zebrafish development / E.A.A. Kondakova, V.I. Efremov // Journal of Morphology. - 2014. - Vol. 275 - P.206-216.

90. Kooi E.J. Meningeal inflammation is not associated with cortical demyelination in chronic multiple sclerosis / E.J. Kooi, J.G. Geurts, J. Van Horssen et al. // Journal of Neuropathology and Experimental Neurology. - 2009. - Vol. 68 - P. 1021-1028.

91. Kristenssson E. Acute psychological stress raises plasma ghrelin in the rat / E. Kristenssson, M. Sundqvist, M. Astin et al. // Regul Pept. - 2006. - Vol. 134- P.114-117.

92. LeDoux J.E. The amygdala: Contributions to fear and stress / J.E. LeDoux // Seminars in the Neurosciences. - 1994. - Vol. 6 - P.231-237.

93. Lepanto P. Characterization of primary cilia during the differentiation of retinal ganglion cells in the zebrafish / P. Lepanto, C. Davison, G. Casanova et al. // Neural Development. - 2016. - Vol. 11 - P.10.

94. Levin E.D. Anxiolytic effects of nicotine in zebrafish / E.D. Levin, Z. Bencan, D.T. Cerutti et al. // Physiology and Behavior. - 2007. - Vol. 90 - P.54-58.

95. Levin E.D. Nicotinic involvement in memory function in zebrafish / E.D. Levin, E. Chen // Neurotoxicology and Teratology. - 2004. - Vol. 26 - P.731-735.

96. Light K.C. Deficits in plasma oxytocin responses and increased negative affect, stress, and blood pressure in mothers with cocaine exposure during pregnancy / K.C. Light, K.M. Grewen, J.A. Amico et al. // Addictive Behaviors. - 2004. - Vol. 29 -P.1541-1564.

97. Lin S.W. Differential regulation of gonadotropins (FSH and LH) and growth hormone (GH) by neuroendocrine, endocrine, and paracrine factors in the zebrafish--an in vitro approach. / S.W. Lin, W. Ge // Zebrafish. - 2009. - Vol. 160 - P.183-193.

98. Löhr H. Zebrafish in Endocrine Systems: Recent Advances and Implications for Human Disease / H. Löhr, M. Hammerschmidt // Annual Review of Physiology. - 2011.

- Vol. 73 - P.183-211.

99. Löhr H. Zebrafish physiology / H. Löhr // Annual Review of Physiology. - 2013.

- Vol. 79 - P.176-209.

100. López-Patiño M.A. Anxiogenic effects of cocaine withdrawal in zebrafish / M.A. López-Patiño, L. Yu, H. Cabral, I. V. Zhdanova // Physiol Behav. - 2008. - Vol. 93 -P.160-171.

101. Ludwig M. Dendritic peptide release and peptide-dependent behaviours/ M. Ludwig // Nat. Rev. Neurosci. - 2006. - Vol. 7. - P. 126-136.

102. Magnoni L.J. AMP-Activated protein kinase plays an important evolutionary conserved role in the regulation of glucose metabolism in fish skeletal muscle cells / L.J. Magnoni, Y. Vraskou, A.P. Palstra, J. V. Planas // PLoS ONE. - 2012. - Vol. 7 -P.31219.

103. Mani B.K. B1-Adrenergic receptor deficiency in ghrelin-expressing cells causes hypoglycemia in susceptible individuals / B.K. Mani, S. Osborne-Lawrence, P. Vijayaraghavan, C. Hepler, J.M. Zigman // Journal of Clinical Investigation. - 2016. -Vol. 126 - P.3467-3478.

104. Manuel R. Unpredictable chronic stress decreases inhibitory avoidance learning in Tuebingen long-fin zebrafish: Stronger effects in the resting phase than in the active phase / R. Manuel, M. Gorissen, J. Zethof et al. // Journal of Experimental Biology. - 2014. -Vol. 217 - P.3919-3928.

105. Marazziti D. A relationship between oxytocin and anxiety of romantic attachment / D. Marazziti, B. Dell'Osso, S. Baroni et al. // Clinical Practice and Epidemiology in Mental Health. - 2006. - Vol. 2- P.39-47.

106. Martínez R. Changes in lipid profiles induced by bisphenol A (BPA) in zebrafish eleutheroembryos during the yolk sac absorption stage / R. Martínez, L. Navarro-Martín, M. van Antro et al. // Chemosphere. - 2020. - Vol. 246 - P.56-87.

107. Martínez-Fuentes A.J. Ghrelin is produced by and directly activates corticotrope cells from adrenocorticotropin-secreting adenomas / A.J. Martínez-Fuentes, J. Moreno-

Fernández, R. Vázquez-Martínez et al. // Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism. - 2006. - Vol. 91 - P.2225-2231.

108. Matsuda K. Orexin System in Teleost Fish / K. Matsuda, M. Azuma, K. S. Kang et al. // Zebrafish. - 2012. - Vol. 1- P. 341-361c.

109. Maximino C. Scototaxis as anxiety-like behavior in fish / C. Maximino, T. Marques De Brito et al. // Nature Protocols. - 2010. - Vol. 5 - P.221-228.

110. McCluskey B.M. Phylogeny of zebrafish, a 'model species,' within Danio, a 'model genus' / B.M. McCluskey, J.H. Postlethwait // Molecular Biology and Evolution. - 2015. - Vol. 32 - P.635-652.

111. McGonnell I.M. Fishing for gene function - Endocrine modelling in the zebrafish / I.M. McGonnell, R.C. Fowkes // Journal of Endocrinology. - 2006. - Vol. 189 - P.425-439.

112. Meng Y. Alterations of hippocampal projections in adult macaques with neonatal hippocampal lesions: A Diffusion Tensor Imaging study / Y. Meng, C. Payne, L. Li et al. // Neurolmage. - 2014. - Vol. 102 - P.828-837.

113. Menke A.L. Normal anatomy and histology of the adult zebrafish / A. L. Menke, J. M. Spitsbergen, A. P. M. Wolterbeek, R. A. Woutersen// Zebrafish. - 2011 Vol. 67 -P.828-837.

114. Meyer R.M. A ghrelin-growth hormone axis drives stress-induced vulnerability to enhanced fear / R.M. Meyer, A. Burgos-Robles, E. Liu et al. // Molecular Psychiatry. -2014. - Vol. 19 - P.1284-1294.

115. Mody G.G. Zebrafish: From disease modeling to drug discovery Amy L Rubinstein / G.G. Mody, M. Vegf // Current. - 2003.- P.218-223.

116. Monteleone A.M. Neuroendocrinology and brain imaging of reward in eating disorders: A possible key to the treatment of anorexia nervosa and bulimia nervosa / A.M. Monteleone // Prog. Neuro-Psychopharmacology Biol. Psychiatry. - 2018. - Vol. 80. -P.132-142.

117. Mozid A.M. Ghrelin is released from rat hypothalamic explants and stimulates corticotrophin-releasing hormone and arginine-vasopressin / A.M. Mozid // Prog. Neuro-Psychopharmacology Biol. Psychiatry. - 2003. - Vol. 70. - P. 112-122.

118. Müller T.D. Ghrelin / T.D. Müller, R. Nogueiras, M.L. Andermann, M.H. Tschopp et al. // Molecular Metabolism - 2011. - Vol. 3 - P.334-356.

119. Müller T.D. Preproghrelin / T.D. Müller, R. Nogueiras, M.L. Andermann, M.H. Tschopp // Molecular Metabolism - 2014. - Vol. 4 - P.437-460.

120. Muller T.D. Neuropeptides / T.D. Müller, R. Nogueiras, M.H. Tschöp et al. // Molecular Metabolism - 2015. - Vol. 6. - P.123-165.

121. Mundinger T.O. Direct stimulation of ghrelin secretion by sympathetic nerves / T.O. Mundinger, D.E. Cummings, G.J. Taborsky et al. // Endocrinology. - 2006. - Vol. 147 - P.2893-2901.

122. Neumann I.D. Brain oxytocin inhibits the (re)activity of the hypothalamo-pituitary-adrenal axis in male rats: Involvement of hypothalamic and limbic brain regions / I.D. Neumann // Endocrinology. - 2000. - Vol. 1 - P.2893-2901.

123. Nishioka T. Stress increases oxytocin release within the hypothalamic paraventricular nucleus / T. Nishioka, J.A. Anselmo-Franci, P. Li et al. // Brain Research.

- 1998. - Vol. 3 - P.57-61.

124. Okamoto C.T. From genetics to cellular physiology. Focus on 'Regulation of transferrin-induced endocytosis by wild-type and C282Y-mutant HFE in transfected HeLa cells / C.T. Okamoto // American Journal of Physiology - Cell Physiology. - 2002.

- Vol. 282 - P. 51-79.

125. Olff M. The role of oxytocin in social bonding, stress regulation and mental health: An update on the moderating effects of context and interindividual differences / M. Olff, J.L. Frijling, L.D. Kubzansky, et al. // Psychoneuroendocrinology. - 2013. - Vol. 38 -P.1883-1894.

126. Olivera-Pasilio V. Oxytocin Promotes Accurate Fear Discrimination and Adaptive Defensive Behaviors. / V. Olivera-Pasilio, J. Dabrowska // Frontiers in neuroscience. -2020. - Vol. 14 - P.583878.

127. Ozsoy S. Serum ghrelin and leptin levels in patients with depression and the effects of treatment / S. Ozsoy, A. Besirli, U. Abdulrezzak, M. Basturk // Psychiatry Investig. -2014. - Vol. 11 - P.167-172.

128. Panula P. Hypocretin/orexin in fish physiology with emphasis on zebrafish / P. Panula // Acta Physiologica. - 2010. - Vol. 198 - P.381-386.

129. Panula P. The comparative neuroanatomy and neurochemistry of zebrafish CNS systems of relevance to human neuropsychiatric diseases / P. Panula, Y.C. Chen, M., Kudo et al. // Neurobiology of Disease. - 2010. - Vol. 40 - P.46-57.

130. Papadimitriou A. Regulation of the hypothalamic-pituitary-adrenal axis / A. Papadimitriou // Neuroimmunomodulation. - 2009. - Vol. 16 - P. 265-271.

131. Patterson Z.R. Altered metabolic and neurochemical responses to chronic unpredictable stressors in ghrelin receptor-deficient mice / Z.R. Patterson, R. Ducharme, H. Anisman, A. Abizaid // Eur J Neurosci. - 2010. - Vol. 32. - P. 632-639.

132. Pavlidis M. Neuroendocrine regulation of the stress response in adult zebrafish, Danio rerio / M. Pavlidis, A. Theodoridi, A. Tsalafouta et al. // Progress in Neuro-Psychopharmacology and Biological Psychiatry. - 2015. - Vol. 60 - P.121-131.

133. Pogoda H.M. How to make a teleost adenohypophysis: Molecular pathways of pituitary development in zebrafish / H.M. Pogoda, M. Hammerschmidt // Molecular and Cellular Endocrinology. - 2009. - Vol. 312 - P.2-13.

134. Portelli J. Central functions of the ghrelin receptor / J. Portelli, I. Smolders // -Humana Press. - 2014. - Vol. 1 - P. 214.

135. Proulx K. The Effect of Adrenalectomy on Ghrelin Secretion and Orexigenic Action / K. Proulx, T.P. Vahl, D.L. Drazen et al. // Journal of Neuroendocrinology. -2005. - Vol. 17 - P. 445-451.

136. Pugach E.K. Retro-orbital injection in adult zebrafish / E.K. Pugach, P. Li, R. White et al. // Journal of Visualized Experiments. - 2010. - Vol. 2 - P. 34.

137. Rahman Khan F. Zebrafish (Danio rerio) as a Model Organism / F. Rahman Khan, S. Sulaiman Alhewairini // Current Trends in Cancer Management. - 2015. - Vol. 2 -P.61-72.

138. Sanders G. Psychological stress of exposure to uncontrollable noise increases plasma oxytocin in high emotionality women / G. Sanders, J. Freilicher, S.L. Lightman et al. // Psychoneuroendocrinology. - 1990. - Vol. 15 - P.47-58.

139. Sapolsky R.M. How Do Glucocorticoids Influence Stress Responses? Integrating Permissive, Suppressive, Stimulatory, and Preparative Actions / R.M. Sapolsky, L.M. Romero, A.U. Munck et al. // Endocrine Reviews. - 2000. - Vol. 21 - P.55-89.

140. Sapolsky R.M. Stress. / R.M. Sapolsky, L.M. Romero, A.U. Munck et al. // Endocrine Reviews. - 2001. - Vol. 22 - P.61-72.

141. Schmidt F. Alterations along the hypothalamic-pituitary-thyroid axis of the zebrafish (Danio rerio) after exposure to propylthiouracil / F. Schmidt, T. Braunbeck // Journal of Thyroid Research. - 2011. - Vol. 2 - P.61-82.

142. Shabanov P.D. Effect of novelty stress on behavioral responses of Danio rerio and assessment of dose-dependent effects of anxiolytics of benzodiazepine structure with phenazepam as an example / P.D. Shabanov, V.A. Lebedev, A.A. Lebedev, E.R. Bychkov // Reviews on Clinical Pharmacology and Drug Therapy. - 2017. - Vol. 15 - P.57-63.

143. Shabanov P.D. In search of new brain biomarkers of stress / P.D. Shabanov, A.A. Blazhenko, A.S. Devyashin, P.P. Khokhlov, A.A. Lebedev // Research Results in Pharmacology. - 2021. - Vol. 7 - P.41-46.

144. Shabanov P.D. Neurochemical mechanisms and pharmacology of ghrelins / P.D. Shabanov, A.A. Lebedev, E.R. Bychkov, N. V. Lavrov, V.I. Morozov // Reviews on Clinical Pharmacology and Drug Therapy. - 2020. - Vol. 18 - P.5-22.

145. Shankar K. Ghrelin Protects Against Insulin-Induced Hypoglycemia in a Mouse Model of Type 1 Diabetes Mellitus. / K. Shankar, D. Gupta, B.K. Mani et al. // Frontiers in endocrinology. - 2020. - Vol. 11 - P.606.

146. Sippel L.M. Oxytocin / L.M. Sippel, C.E. Allington, R.H. Pietrzak et al. // Chronic Stress. - 2018. - Vol. 2 - P.247.

147. Sippel L.M. Oxytocin and Stress-related Disorders: Neurobiological Mechanisms and Treatment Opportunities / L.M. Sippel, C.E. Allington, R.H. Pietrzak et al. // Chronic Stress. - 2017. - Vol. 1 - P.256.

148. Smith A.S. Hypothalamic oxytocin mediates social buffering of the stress response / A.S. Smith, Z. Wang // Biological Psychiatry. - 2014. - Vol. 76 - P.281-288.

149. Sparapani S. The biology of vasopressin / S. Sparapani // Biomedicines. - 2021. -Vol. 9. - P. 32.

150. Sparapani S. Orrexin. / S. Sparapani, C. Millet-Boureima, J. Oliver, C. Gamberi // Biomedicines. - 2018. - Vol. 8 - P.5-28.

151. Speedie N. Alarm substance induced behavioral responses in zebrafish (Danio rerio) / N. Speedie, R. Gerlai // Behav Brain Res. - 2008. - Vol. 188 - P.168-177.

152. Spencer S.J. Ghrelin regulates the hypothalamic-pituitary-adrenal axis and restricts anxiety after acute stress / S.J. Spencer, M. Lemus, A. Reichenbach et al. // Biological Psychiatry. - 2012. - Vol. 72 - P.457-465.

153. Spencer S.J. Ghrelin's role in the hypothalamic-pituitary-adrenal axis stress response: Implications for mood disorders / S.J. Spencer, T.L. Emmerzaal, T. Kozicz, Z.B. Andrews // Biological Psychiatry. - 2015. - Vol. 78 - P.19-27.

154. Spencer S.J. The glucocorticoid contribution to obesity / S.J. Spencer, A. Tilbrook // Stress. - 2011. - Vol. 14 - P.233-246.

155. Stevanovic D. Intracerebroventricular administration of metformin inhibits ghrelin-induced hypothalamic AMP-kinase signalling and food intake / D. Stevanovic, K. Janjetovic, M. Misirkic et al. // Neuroendocrinology. - 2012. - Vol. 96 - P.24-31.

156. Sun Y. Ablation of ghrelin improves the diabetic but not obese phenotype of ob/ob mice / Y. Sun, M. Asnicar, P.K. Saha et al. // Cell Metabolism. - 2006. - Vol. 3 - P.379-386.

157. Sun Y. Characterization of adult ghrelin and ghrelin receptor knockout mice under positive and negative energy balance / Y. Sun, N.F. Butte, J.M. Garcia et al. // Endocrinology. - 2008. - Vol. 149 - P.843-850.

158. Taylor S.E. Plasma oxytocin in women and plasma vasopressin in men biomarkers of distressed pair-bond relationships? / S.E. Taylor, S. Saphire-Bernstein, T.E. Seeman et al. // Psychological Science. - 2010. - Vol. 21 - P.3-7.

159. Tena-Sempere M. Novel expression and functional role of ghrelin in rat testis / M. Tena-Sempere, M.L. Barreiro et al. // Endocrinology. - 2002. - Vol. 143 - P.717-725.

160. Tine M. Diversification and coevolution of the ghrelin/growth hormone secretagogue receptor system in vertebrates / M. Tine, H. Kuhl, P.R. Teske et al. // Ecology and Evolution. - 2016. - Vol. 6 - P.2516-2535.

161. Tissen I. Y. Orexin receptor type 1 (Ox1R) are involved in the formation and reinstatement of conditioned place preference / I. Tissen, P. Vinogradov, P.P. Khokhlov, A.A. Lebedev, E.R. Bychkov, P.D. Shabanov // European Neuropsychopharmacology. -2015. - Vol. 25 - P.269-270.

162. Tissen I.Y. Effect of SB-408124, an orexin A OX1R receptor antagonist, on the compulsive behavior and the level of anxiety after the vital stress in rats / I.Y. Tissen, N.D. Yakushina, A.A. Lebedev, A.G. Pshenichnaya, E.R. Bychkov, P.D. Shabanov // Reviews on Clinical Pharmacology and Drug Therapy. - 2018. - Vol. 16 - P.34-42.

163. Tissen I.Y. Orexins and the brain reinforcing systems / I.Y. Tissen, A.A. Lebedev, E.R. Bychkov, N. V. Lavrov, V.I. Morozov, P.D. Shabanov // Reviews on Clinical Pharmacology and Drug Therapy. - 2020. - Vol. 17 - P.5-18.

164. Tsikunov S.G. Vital stress causes long-lasting behavioral disorders and lipid metabolism deviations in female rats / S.G. Tsikunov, A.G. Pshenichnaya, N.N. Klyueva, T. V. Vinogradova, A.D. Denisenko // Reviews on Clinical Pharmacology and Drug Therapy. - 2016. - Vol. 14 - P.32-41.

165. Ueberberg B. Expression of ghrelin and its receptor in human tissues / B., Unger N. Ueberberg, W. Saeger, K. Mann, S. Petersenn // Horm Metab Res. - 2009. - Vol. 41 - P.814-821.

166. Unniappan S. In vitro and in vivo effects of ghrelin on luteinizing hormone and growth hormone release in goldfish / S. Unniappan, R.E. Peter // American Journal of Physiology. - 2004. - Vol. 286 -P. 55-67.

167. Uvnäs Moberg K. Oxytocin is a principal hormone that exerts part of its effects by active fragments / K. Uvnäs Moberg, L. Handlin, K. Kendall -Tackett, M. Petersson // Medical Hypotheses. - 2019. - Vol. 133.

168. Uvnäs-Moberg K. The psychobiology of emotion: The role of the oxytocinergic system/ K. Uvnäs-Moberg // Int. J. Behav. Med. - 2005. - Vol. 12 - 59-65c.

169. Varga M. The doctor of delayed publications: The remarkable life of George Streisinger (1927-1984) / Varga M. // Zebrafish. - 2018. - Vol. 15 - P.314-319.

170. Vinogradov P.M. Contents of ACTH and CRF in the rat blood serum after administration of orexin A antagonists in experimental alcoholization / Vinogradov P.M.,

Tissen I.Y., Khokhlov P.P., Bychkov E.R., Lebedev A.A., Shabanov P.D. // Reviews on Clinical Pharmacology and Drug Therapy. - 2015. - Vol. 13 - P.14-19.

171. Viviani D. Oxytocin selectively gates fear responses through distinct outputs from the central amygdala / D. Viviani, A. Charlet, C. Robinet et al. // Science. - 2011. - Vol. 333 - P.104-107.

172. Volante M. Expression of ghrelin and of the GH secretagogue receptor by pancreatic islet cells and related endocrine tumors / M. Volante, E. Allia, P. Gugliotta et al. // J Clin Endocrinol Metab. - 2002. - Vol. 87 - P.1300-1308.

173. Wajnrajch M.P. Genomic organization of the human GHRELIN gene / M.P. Wajnrajch, I.S. Ten, R.L. Leibel, J.M. Gertner // Int J Disabil Hum Dev. - 2000. - Vol. 1 - P.231-234.

174. Wang H. Tankyrases regulate glucoregulatory mechanisms and somatic growth via the central melanocortin system in zebrafish larvae / H. Wang, S. Semenova, S. Kuusela, P. Panula, S. Lehtonen // FASEB Journal. - 2015. - Vol. 29 - P.4435-4448.

175. Weger M. Glucocorticoid deficiency causes transcriptional and post-transcriptional reprogramming of glutamine metabolism / M.V. Weger, B.D. Weger, B. Görling et al. // EBioMedicine. - 2018. - Vol. 36- P.376-389.

176. White R.M. Transparent adult zebrafish as a tool for in vivo transplantation analysis / R.M. White, A. Sessa, C. Burke et al. // Cell stem cell. - 2008. - Vol. 2 - № 2- P.183-189.

177. Wilkinson P. Non-suicidal self-injury / P. Wilkinson, I. Goodyer // European Child and Adolescent Psychiatry. - 2011. - Vol. 20 - P.103-108.

178. Willner P. Animal models of depression: validity and applications. / P. Willner // Adv. Biochem. Psychopharmacol. - 1995. - Vol. 49 - P. 19-41.

179. Windle R.J. Central oxytocin administration reduces stress-induced corticosterone release and anxiety behavior in rats / R.J. Windle, N. Shanks, S.L. Lightman, C.D. Ingram // Endocrinology. - 1997. - Vol. 138 - P.2829-2834.

180. Windle R.J. Oxytocin Attenuates Stress-Induced c-fos mRNA Expression in Specific Forebrain Regions Associated with Modulation of Hypothalamo-Pituitary-

Adrenal Activity / R.J. Windle, Y.M. Kershaw, N. Shanks et al. // Journal of Neuroscience. - 2004. - Vol. 24 - № 12- P.2974-2982.

181. Wircer E. Non-mammalian models for neurohypophysial peptides / E. Wircer, S. Ben-Dor, G. Levkowitz et al. // Molecular Neuroendocrinology: From Genome to Physiology. - 2016. - Vol. 1 - P.301-328.

182. Wong K. Analyzing habituation responses to novelty in zebrafish (Danio rerio) / K. Wong, M. Elegante, B. Bartels et al. // Behavioural Brain Research. - 2010. - Vol. 208 - P.450-457.

183. Wren A.M. Ghrelin causes hyperphagia and obesity in rats / A.M. Wren, C.J. Small, C.R. Abbott et al. // Diabetes. - 2001. - Vol. 50 - P.2540-2547.

184. Wren A.M. The Hypothalamic Mechanisms of the Hypophysiotropic Action of Ghrelin / A.M. Wren, C.J. Small, C. V. Fribbens et al. // Neuroendocrinology. - 2002. -Vol. 76 - P.316-324.

185. Yin Y. The growth hormone secretagogue receptor: Its intracellular signaling and regulation / Y. Yin, Li Y., W. Zhang et al. // International Journal of Molecular Sciences.

- 2014. - Vol. 15 - P.4837-4855.

186. Zeng Z. Revealing cellular and molecular complexity of the central nervous system using single cell sequencing / Z. Zeng // Stem Cell Res. Ther. - 2018. - Vol. 9 - P. 1-23.

187. Zhang G. Circadian intervention of obesity development via resting-stage feeding manipulation or oxytocin treatment / G. Zhang, D. Cai // American Journal of Physiology

- Endocrinology and Metabolism. - 2011. - Vol. 301 - P. 5 - 23.