Экспрессия генов раково-тестикулярных антигенов при меланоме кожи человека тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.12, кандидат биологических наук Ковалевский, Дмитрий Анатольевич

• Ковалевский, Дмитрий Анатольевич
• кандидат биологических наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Ковалевский, Дмитрий Анатольевич

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

СПЕЦАЛЬНАЯ ТЕРМИНОЛОГИЯ.

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Опухолевые антигены.

1.2. Дифференцировочные антигены меланоцитов.

1.3. Антигены мутированных генов при меланоме.

1.4. Раково-тестикулярные антигены.

1.4.1. Классификация раково-тестикулярных антигенов.

1.4.2. Экспрессия раково-тестикулярных антигенов.

1.4.3. Раково-тестикулярные антигены и иммунотерапия.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Характеристика клеточных линий меланомы.

2.2. Характеристика образцов тканей.

2.3. Клиническая характеристика пациентов.

2.4. Морфологическая характеристика образцов тканей.

2.5. Молекулярно-биологические методы исследования.

2.5.1. Список использованных реактивов.

2.5.2. Выделение РНК из клеточных культур.

2.5.3. Реакция обратной транскрипции.

2.5.4. Дизайн ген-специфических праймеров.

2.5.5. Полимеразная цепная реакция.

2.5.6. Анализ продуктов полимеразной цепной реакции.

2.5.7. Количественная оценка к ДНК.

2.6. Методы математического анализа результатов.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Протокол исследования.

3.2. Подбор для исследования генов раково-тестикулярных антигенов, меланомо-дифференцирующих антигенов, маркеров меланомы методом скрининга существующих баз данных генов и научных статей.

3.3. Анализ корреляции между экспрессией генов и морфологическими признаками клеток меланомы.

3.4. Сравнение экспрессии генов в клеточных линиях меланомы, первичных опухолях и метастазах меланомы в лимфатические узлы.

3.5. Анализ корреляции между экспрессией генов в первичной меланоме и выживаемостью пациентов после хирургической операции.

4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Экспрессия генов раково-тестикулярных антигенов при меланоме кожи человека»

Актуальность темы.

Меланома кожи является одним из наиболее агрессивных заболеваний среди злокачественных новообразований кожи. В последние десятилетия частота возникновения этой болезни значительно увеличилась и продолжает неуклонно возрастать [15]. Несмотря на современные методы лечения меланомы отдаленные результаты неудовлетворительные.

Меланома считается «антигенной опухолью», экспрессирующей так называемые опухолеассоциированные антигены. Эти антигены используются при вакцинотерапии, которая является одним из методов лечения онкологических заболеваний. По определению Restifo N. и Sznol М. [178] «вакцинотерапия — это метод, основанный на использовании любого антигена или комплекса антигенов (с или без адъювантом) для модуляции иммунного ответа». Принцип данного метода основан на индукции противоопухолевого иммунитета после введения в организм опухолевого антигена. Центральным событием в процессе Т-клеточной иммунной реакции против опухолевых клеток является стимуляция распознавания Т-рецепторами антигенных детерминант, избирательно экспрессированных на опухолевых клетках. Опухолевые антигены как правило подвергаются процессингу перед их презентацией в контексте молекул гистосовместимости на клеточной поверхности. Различные категории опухолеассоциированных антигенов можно разделить на три главные группы:

- раково-тестикулярные антигены (MAGE, BAGE, PRAME, CTAG1B, SSX2),

- дифференцировочные антигены меланоцитов (TYR, MLANA, SILV, TYRP1, DCT) и

- мутированные антигены (MUM1, CDK4, CTNNB1, CDKN2B, B3GALT5).

С иммунологической точки зрения раково-тестикулярные антигены могут быть хорошими мишенями для иммунотерапии опухолей, поскольку в нормальных тканях эта группа антигенов не экспрессируется за исключением ткани яичек, которые недоступны для клеток иммунной системы из-за отсутствия их прямого контакта с иммунокомпетентными клетками [66] и отсутствия на них экспрессии HLA антигенов I класса [207]. В отличие от раково-тестикулярных антигенов иммуногенность дифференцировочных антигенов меланоцитов невысока из-за иммунологической толерантности к этим "своим" антигенам. Исключением является ген MLANA, антиген которого содержит несколько эпитопов для узнавания ЦТЛ (цитотоксическими лимфоцитами) и способен индуцировать генерацию меланомо-специфичных ЦТЛ. Таким образом, экспрессия различных опухолевых маркеров играет одну из ключевых ролей в индукции противоопухолевого иммунитета.

При использовании раково-тестикулярных антигенов, меланоцито-дифференцирующих антигенов при вакцинотерапии рака необходимо определить количество антигенов на опухолевых клетках и их изменчивость в процессе метастазирования.

Развившиеся в последние годы интенсивные исследования раково-тестикулярных антигенов в различных опухолях (начиная с 1997 года, опубликовано около 1500 статей) открыли новые возможности для разработки новых подходов диагностики и лечения опухолей. Исследования выявили существенные вопросы:

- почему, несмотря на иммуногенность антигена при иммунотерапии, не возникает регрессии опухоли, и нет реальных успехов в лечении;

- какие прогностические факторы оказывают влияние на дальнейшие течение меланомы у больных;

- какое значение имеет экспрессия генов РТА у больных с меланомой? Актуальность данных проблем определила выбор исследования экспрессии генов РТА в клеточных линиях меланомы, первичных опухолях, метастазах меланомы в лимфатические узлы для установления необходимости подбора индивидуального лечения методом вакцинотерапии и возможности прогноза течения заболевания с учетом данных экспрессии генов РТА.

Цель работы: исследование значения экспрессии генов раково-тестикулярных антигенов для прогноза и течения опухолевого процесса у пациентов с меланомой кожи.

Задачи исследования:

1. Исследовать экспрессию генов раково-тестикулярных антигенов (РТА), генов меланоцитодифференцировочных антигенов (МДА) и генов маркеров меланомы (ММ) в клеточных линиях меланомы, первичных опухолях и метастазах меланомы в лимфатические узлы.

2. Провести анализ корреляции экспрессии набора генов с морфологическими признаками клеток меланомы.

3. Сравнить экспрессию набора генов в клеточных линиях меланомы, первичных опухолях и метастазах меланомы в лимфатические узлы.

4. Исследовать корреляцию между экспрессией набора генов, образованием новых метастазов и выживаемостью пациентов.

Научная новизна:

В данной работе показано наличие отрицательной корреляции между уровнем экспрессии генов раково-тестикулярных антигенов и степенью дифференцировки клеток меланомы. Показана корреляция экспрессии исследуемого набора генов с продолжительностью жизни пациентов после операции и сроком появления у них новых метастазов.

Научно-практическая значимость:

Полученные результаты экспрессии исследуемых генов предоставляют возможность количественно оценить степень злокачественности опухолевых клеток меланомы, а также определяют выбор антигенов клеточной линии для вакцинотерапии. Предложены новые прогностические факторы выживаемости пациента после хирургической операции и временем до прогрессирования.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Онкология», Ковалевский, Дмитрий Анатольевич

ВЫВОДЫ

1. Исследована экспрессия генов раково-тестикулярных антигенов, генов меланоцитодифференцировочных антигенов и генов маркеров меланомы в клеточных линиях меланомы, первичных опухолях и метастазах меланомы в лимфатические узлы.

2. Выявлена гетерогенность экспрессии генов раково-тестикулярных антигенов (РТА) в клетках меланомы кожи. Каждый ген экспрессирован не более чем в 60% исследованных образцов первичных опухолей, метастазов меланомы в лимфатические узлы, а также клеточных линий меланомы. При изучении набора из 22 генов раково-тестикулярных антигенов выявлена экспрессия хотя бы одного гена в 90% исследованных образцов.

3. При снижении степени дифференцировки клеток культуры меланомы возрастает число экспрессирующихся генов раково-тестикулярных антигенов. Обнаружена обратная корреляция (р<0.05) между экспрессией 16 генов раково-тестикулярных антигенов (MAGEA 1-3, 6, 10 и 12; GAGE 1-8; В AGE; MAGEC1) и степенью дифференцировки клеток меланомы в культуре.

4. Увеличенное количество экспрессирующихся генов РТА в первичной опухоли, которое наблюдалось только в одной трети биопсий пациентов, не означает короткую выживаемость (до 20 месяцев) для пациентов, а свидетельствует о большей вероятности образования метастазов в течение 100 месяцев жизни пациентов. В группе пациентов, экспрессирующих хотя бы один из РТА генов (MAGEB2, MAGEB4, MAGEA1, MAGEA4 и MAGEA10), показана значимая (р<0.05) положительная корреляция (г>0.4) с продолжительностью жизни пациентов после операции.

5. Набор экспрессирующихся на уровне мРНК 40 генов (РТА, МДА, ММ) может использоваться как группа прогностических факторов продолжительности жизни пациента после хирургической операции и риска появления метастазов. Анализ экспрессии (на уровне мРНК) генов в биоптатах первичной опухоли, независимо от наличия у пациентов метастазов и стадии заболевания, позволяет разделить пациентов на три группы: первая группа - с 90% вероятностью смерти в течение 20 месяцев и образованием метастазов; вторая группа - с 10% вероятностью смерти и 60% вероятностью образования метастазов в течение 100 месяцев; третья группа - с 100% вероятностью выживания при отсутствии метастазов в течение 100 месяцев после операции.

6. Показано отсутствие корреляции (р<0,05) между экспрессией дифференцировочных антигенов меланомы (MLANA, TYR, WARS, SILV) и степенью дифференцировки клеток меланомы в культуре.

7. Клеточная линия для вакцинотерапии пациентов с меланомой кожи должна иметь максимальное разнообразие генов РТА, потому что у различных больных экспрессируется различный набор генов РТА.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Ковалевский, Дмитрий Анатольевич, 2010 год

1. Абелев, Г. И. Дифференцировочные антигены в опухолях — зависимость от механизмов канцерогенеза и прогрессии (гипотеза)/ Г. И. Абелев 1. Молекулярная биология. - 2003. - Т. 37, № 1. - С. 4-11.

2. Абелев, Г. И. Механизмы дифференцировки и опухолевый рост/ Г. И. Абелев И Биохимия. 2000. - Т. 65, № 1. - С. 127-138.

3. Базась, В.Н. Молекулярные маркеры протекания заболевания и эффективности вакцинотерапии у больных раком желудка / В.Н. Базась, Н.Ю. Лукьянова, В.Ф. Чехун II Сибирский онкологический журнал. 2009. - S2. - С. 22-23.

4. Балдуева, И.А. Противоопухолевые вакцины / И.А. Балдуева, II Практическая онкология — 2003. Т. 4, № 3. - С. 157-166.

5. Барышников, А.Ю. Принципы и практика вакцинотерапии рака / А.Ю. Барышников II Бюллетень Сибирского отделения Российской академии медицинских наук. 2004. - Т. 2. - С. 59-63.

6. Белогородцев, С.Н. Противоопухолевое и иммунотропное действие ксено- и аутовакцинотерапии у мышей / С.Н. Белогородцев, Э.А. Кащенко, Г.В. Селедцова, А.А. Шишков, Д.М. Самарин, И.В. Маибородин II Сибирский онкологический журнал. 2008. - S1. - С. 14-15.

7. Y1.Гриневич, Ю. А. Адаптивная иммунотерапия и ее влияние на эффективность лечения больных онкологического профиля / Ю. А. Гриневич, Ф. В. Фшъчаков II Онкология, 2003. - Т. 5, № 2. - С. 90-95.

8. Ъ .Гриневич, Ю.А. Вакцины на основе антигенпрезентирующих дендритных клеток в иммунотерапии больных со злокачественными опухолями / Ю.А. Гриневич, Н.Н. Храновская // Онкология. 2007. - Т. 9, №4.-С. 365-370.

9. ЪО.Лукаишна, М.И. Дендритные вакцины в терапии колоректального рака / М.И. Лукашина, А.В. Смирнова, В.А. Алиев, Н.В. Самойленко, Н.Н. Семенов, В.П. Вейко, Н.Н. Михайлова, Ю.А. Барсуков, А.Ю.

10. Барышников II Вестник РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН. -2008. Т. 19, №3.-С. 35-42.

11. Маниатис, Т. Методы генетической инженерии / Т. Маниатис, // Молекулярное клонирование. — 1984. — С. 197-199.

12. Михайлова, И.Н. Клеточные линии меланомы — основа для создания противоопухолевых вакцин / И.Н. Михайлова, М.И. Лукашина, А.Ю. Барышников, Л.Ф. Морозова, О.С. Бурова, Т.Н. Палкина, A.M. Козлов,

13. B.А. Голубева, Е.А. Черемушкин, М.Б. Дорошенко, Л.В. Демидов, С.Л. Киселев, С.С. Ларин, Г.П. Георгиев II Вестник Российской АМН. -2005.-Т. 7.-С. 37-40.

14. C.А. Хатырев, Т.К. Харатигивили, К.А. Парсункова, М.Д Алиев, А.Ю. Барышников, Л.В. Демидов. II Российский биотерапевтический журнал. -2007. Т. 6, № 2. - С. 39-44.

15. Моисеенко, В.М. Возможности вакцинотерапии меланомы кожи / В.М. Моисеенко II Практическая онкология. 2001. - Т. 4, № 8. - С. 58-64.

16. Моисеенко, В.М. Определение эффективности и токсичности химиоиммунотерапии больных диссеминированной меланомой кожи /

17. А.В. Вербиненко, ВА. Мжиневская, О.В. Мазур II Российский биотерапевтический журнал. 2009. - Т. 8, № 3. - С. 15-19.

18. Москалева, Е.Ю. Перспективы создания противоопухолевых вакцин с использованием дендритных клеток человека / Е.Ю. Москалева, С. Е. Северин I/ Иммунология. 2002. - Т. 23, № 1. - С. 8-15.

19. Тюряева, И. И. Опухолевые антигены / И. И. Тюряева II Цитология. -2008. Т. 50, № 3. - С. 189-209.

20. Хансон, КП. Биотерапия злокачественных новообразований / К.П. Хансон, В.М. Моисеенко II Проблемы клинической медицины. — 2005. -Т. З.-С. 1-15.

21. Якубовская, Р.И. Современные подходы к биотерапии рака / Р.И. Якубовская II Российский биотерапевтический журнал. — 2002. — Т. 1, №3.-С. 5-14.

22. Adair, SJ. The TAG family of cancer/testis antigens is widely expressed in a variety of malignancies and gives rise to HLA-A2-restricted epitopes / SJ

23. Adair, TM Carr, MJ Fink, CL Jr Slinglujf, KT Hogan. // J Immunother. -2008. -Vol. 31, № l.-p. 7-17.

24. Bakker, AB. Melanocyte lineage-specific antigen gplOO is recognized by melanoma-derived tumor-infiltrating lymphocytes /АВ Bakker, MW Schreurs, A J de Boer, Y Kawakami, SA Rosenberg, GJAdema, CG Figdor II J Exp Med. 1994.-Vol. 179, № 3.-P.1005-1009.

25. Barker, CF. Immunologically privileged sites / CF Barker, RE Billingham I I Adv Immunol. 1977. - Vol. 25. - P. 1-54.

26. Barrow, C. Tumor antigen expression in melanoma varies according to antigen and stage / С Barrow, J Browning, D MacGregor, ID Davis, S Sturrock, AA Jungbluth, J Cebon II Clin Cancer Res. 2006. - Vol. 12, №3 Ptl.-P. 764-771.

27. Bart, J. An oncological view on the blood-testis barrier / J Bart, HJ Groen, WTvan der Graaf, H Hollema, NH Hendrikse, W Vaalburg, DT Sleijfer, EG de Vries И Lancet Oncol. 2002. - Vol. 3, №6. - P. 357-363.

28. Brasseur, F. Expression of MAGE genes in primary and metastatic cutaneous melanoma / F Brasseur, D Rimoldi, D Lienard, В Lethe, S Carrel, F Arienti, L Suter, R Vanwijck, A Bourlond, Y Humblet, et al. // Int J Cancer. 1995. - Vol. 63, №3. - P. 375-380.

29. Brinkmann, U. Novel genes in the PAGE and GAGE family of tumor antigens found by homology walking in the dbEST database / U Brinkmann, G Vasmatzis, В Lee, I Pastan II Cancer Res. 1999. -Vol. 59, № 7. - P. 1445-1448.

30. Cancerlmmunity. online. [Обращение к документу: 01.12.2009]. Доступ через http://www.cancerimmunity.org/peptidedatabase/Tcellepitopes.htm.

31. SO.Carlson, J A. Molecular diagnostics in melanoma / J A Carlson, JS Ross, A Slominski, G Linette, J Mysliborski, J Hill, M Jr Mihm // J Am Acad Dermatol. 2005. Vol. 52, № 5. - P. 743-775.

32. S3.Chen, YT. Identification of multiple cancer/testis antigens by allogeneic antibody screening of a melanoma cell line library / YT Chen, AO Gure, S Tsang, E Stockert, E Jager, A Knuth, LJ Old II Proc Natl Acad Sci U S A -1998.-Vol. 95.-P. 6919-6923.

33. Cho, B. Identification and characterization of a novel cancer/testis antigen gene CAGE / В Cho, Y Lim, DY Lee, SY Park, H Lee, WH Kim, H Yang, YJ Bang, DIJeoung II Biochem Biophys Res Commun. 2002. - Vol. 292. - P. 715-726.

34. Cormier, JN. Heterogeneous expression of melanoma-associated antigens and HLA-A2 in metastatic melanoma in vivo / JN Cormier, YM Hijazi, A

35. Abati, P Fetsch, MBettinotti, SMSteinberg, SA Rosenberg, FMMarincola II Int J Cancer. 1998. - Vol. 75, № 4. - P. 517-524.

36. Coulie, PG. Antigens recognized by T-lymphocytes on human tumours / PG Coulie, BJ Van den Eynde, P van der Bruggen, A Van Pel, T Boon II Biochem Soc Trans. 1997. - Vol. 25, № 2. - P. 544-548.

37. Curtin, JA. Distinct sets of genetic alterations in melanoma / JA Curtin, J Fridlyand, T Kageshita, HN Patel, KJ Busam, H Kutzner, KH Cho, S Aiba, ЕВ Brocker, PE LeBoit, D Pinkel, ВС Bastian II N Engl J Med. — 2005. -Vol. 353, № 20. P. 2135-2147.

38. Da Forno, PD. BRAF, NRAS and HRAS mutations in spitzoid tumours and their possible pathogenetic significance / PD Da Forno, JH Pringle, A Fletcher, MBamford, L Su, L Potter, G Saldanha II Br J Dermatol. 2009. -Vol. 161 №2.-P. 364-372.

39. Dahl, C. The genome and epigenome of malignant melanoma / С Dahl, P Guldberg U APMIS. — 2007. Vol. 115,№10.-P. 1161-1176.

40. Torensma, TJ de Vries, MW Schreurs, DR de Bruijn, E Kater-Bacits, DJ Ruiter, GJAdema, GN van Muijen, AG van Kessel II Cancer Res. 2000. -Vol. 60, № 6. - P. 1654-1662.

41. Eichmuller, S. Serological detection of cutaneous T-cell lymphoma-associated antigens / S Eichmuller, D Usener, R Dimmer, A Stein, D Thiel, D Schadendorf II Proc Natl Acad Sci U S A 2001. - Vol. 98. - P. 629-634.

42. Eichmiiller, S. mRNA expression of tumor-associated antigens in melanoma tissues and cell lines / S Eichmuller, D Usener, A Jochim, D Schadendorf!/ Exp Dermatol. 2002. - Vol. 11, № 4. - P. 292-301.

43. Eisen, MB. Cluster analysis and display of genome-wide expression patterns / MB Eisen, PT Spellman, PO Brown, D Botstein II Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998. - Vol. 95, № 25. - P. 14863-14868.

44. Evans, JP. Fertilin beta and other ADAMs as integrin ligands: insights into cell adhesion and fertilization / JP. Evans II Bioessays. — 2001. Vol. 23, №7.-P. 628-639.

45. Fiszer, D. Major histocompatibility complex expression on human, male germ cells: a review / D Fiszer, M Kurpisz I I Am J Reprod Immunol. -1998.-Vol. 40, №3.-P. 172-176.

46. Garrido-Ruiz, MC. WT 1 expression in nevi and melanomas: a marker of melanocytic invasion into the dermis / MC Garrido-Ruiz, SM Rodriguez-Pinilla, В Perez-Gomez, JL Rodriguez-Peralto II J Cutan Pathol. 2009. Jul 22. Epub ahead of print.

47. Gillespie, AM. The potential of melanoma antigen expression in cancer therapy / AM Gillespie, RE Coleman II Cancer Treat Rev. — 1999. — Vol. 25, №4.-P. 219-227.

48. Goydos, JS. NY-ESO-1 and CTpll expression may correlate with stage of progression in melanoma / JS Goydos, M Patel, W Shih II J Surg Res.-2001.-Vol. 98, № 2. P. 76-80.

49. Gure, AO. SSX: a multigene family with several members transcribed in normal testis and human cancer I AO Gure, О Tureci, U Sahin, S Tsang, MJ Scanlan, E Jager, A Knuth, M Pfreundschuh, LJ Old, YT Chen И Int J Cancer 1997. - Vol. 72. - P. 965-971.

50. Hendrix, MJ. Molecular plasticity of human melanoma cells / MJ Hendrix, EA Seftor, AR Hess, RE Seftor //Oncogene. 2003. - Vol. 22, № 20.-P. 3070-3075.

51. Herlyn, M. Roadmap for new opportunities in melanoma research / M M Herlyn, R Halaban, Z Ronai, L Schuchter, M Berwick, D Pinke II Semin Oncol. 2007. - Vol. 34, № 6. - P. 566-576.

52. Hieken, TJ. Beta3 integrin expression in melanoma predicts subsequent metastasis / TJ Hieken, M Farolan, SG Ronan, A Shilkaitis, L Wild, TKDas Gupta II J Surg Res. 1996. - Vol. 63, № 1. - P. 169-173.

53. Houghton, AN. Immunity against cancer: lessons learned from melanoma / AN. Houghton II Curr Opin Immunol. 2001. - Vol. 13, № 2. -P. 134-140.

54. Ilmonen, S. Tenascin-C in primary malignant melanoma of the skin / S Ilmonen, T Jahkola, JP Turunen, T Muhonen, S Asko-Seljavaara II Histopathology. 2004. - Vol. 45, № 4. - P. 405-411.

55. Jin R, A naturally occurring truncated beta3 integrin in tumor cells: native anti-integrin involved in tumor cell motility / R Jin, M Trikha, Y Cai, D Grignon, KV Honn II Cancer Biol Ther. 2007. - Vol. 6, № 10. - P. 1559-1568.

56. Jassim, A. Analysis of HLA antigens on germ cells in human semen / A Jassim, W Oilier, A Payne, A Biro, RT Oliver, H Festenstein // Eur J Immunol.-1989.-Vol. 19, №7.-P. 1215-1220.

57. Jungbluth, AA. Expression of MAGE-antigens in normal tissues and cancer / AA Jungbluth, KJ Busam, D Kolb, К Iversen, К Coplan, YT Chen, GC Spagnoli, LJ Old И Int J Cancer. 2000. - Vol. 85, № 4. - P. 460-465.

58. Jungbluth, AA. CT7 (MAGE-C1) antigen expression in normal and neoplastic tissues I AA Jungbluth, YT Chen, KJ Busam, К Coplan, D Kolb, К Iversen, В Williamson, FK Van Landeghem, E Stockert, LJ Old // Int J Cancer. 2002. - Vol. 99, № 6. - P. 839-845.

59. Keeney, S. Meiosis-specific DNA double-strand breaks are catalyzed by Spol 1, a member of a widely conserved protein family / S. Keeney, C. N. Giroux, N. Kleckner I I Cell. 1997. - Vol. 88. - P. 375-384.

60. Kirkin, AF. Cancer/testis antigens: structural and immunobiological properties / AF Kirkin, KN Dzhandzhugazyan, J Zeuthen II Cancer Invest. -2002. Vol. 20, № 2. - P. 222-236.

61. Kocher, T. Identification and intracellular location of MAGE-3 gene product / T Kocher, E Schultz-Thater, F Gudat, С Schaefer, G Casorati, A Juretic, T Willimann, F Harder, M Heberer, GC Spagnoli II Cancer Res. — 1995.-Vol. 55, № 11. — P. 2236-2239.

62. Koslowski, M. Multiple splice variants of lactate dehydrogenase С selectively expressed in human cancer / M Koslowski, О Tureci, С Bell, P Krause, HA Lehr, J Brunner, G Seitz, FO Nestle, С Huber, U Sahin II Cancer Res 2002. - Vol. 62. - P. 6750-6755.

63. Krishnakumar, S. Loss of antigen-processing molecules in primary orbital melanoma / S Krishnakumar, S Lakshmi, D Abhyankar, J Biswas II Orbit. 2003. - Vol. 22, № 4. - P. 265-270.

64. Landry, C. Monoclonal antibody 57B stains tumor tissues that express gene MAGE-A4 / С Landiy, F Brasseur, GC Spagnoli, E Marbaix, T Boon, P Coulie, D Godelaine И Int J Cancer. 2000. - Vol. 86, № 6. - P. 835-841.

65. Lee, SY. Immunomic analysis of human sarcoma / SY Lee, Y Obata, M Yoshida, E Stockert, В Williamson, AA Jungbluth, YT Chen, LJ Old, MJ Scanlan I I Proc Natl Acad Sci U S A 2003. - Vol. 100. - P. 2651-2656.

66. Lethe, B. LAGE-1, a new gene with tumor specificity / В Lethe, S Lucas, L Michaux, С De Smet, D Godelaine, A Serrano, E De Plaen, T Boon

67. Int J Cancer. 1998. - Vol. 76, № 6. - P. 903-908.

68. Lim, SH. Sperm protein 17 is a novel cancer-testis antigen in multiple myeloma / SH Lim, Z Wang, M Chiriva-Internati, YXue II Blood. 2001. -Vol. 97.-P. 1508-1510.

69. Loriot, A. Five new human cancer-germline genes identified among12 genes expressed in spermatogonia / A Loriot, T Boon, С De Smet II Int J Cancer 2003. - Vol. 105. - P. 371-376.

70. Lucas, S. MAGE-B5, MAGE-B6, MAGE-C2, and MAGE-C3: four new members of the MAGE family with tumor-specific expression / S Lucas, E De Plaen, TBoon II Int J Cancer. 2000. - Vol. 87, № 1. - P. 5560.

71. Lucas, S. Identification of a new MAGE gene with tumor-specific expression by representational difference analysis / S Lucas, С De Smet, КС Arden, CS Viars, В Lethe, С Lurquin, TBoon II Cancer Res 1998. Vol. 58.- P. 743-752.

72. Luo, G. Expression of cancer-testis genes in human hepatocellular carcinomas / G Luo, S Huang, XXie, E Stockert, YT Chen, В Kubuschok, M Pfreundschuh // Cancer Immun. 2002. - Vol. 2. - P. 11.

73. Marks, MS. The melanosome: membrane dynamics in black and white / MS Marks, MC Seabra I I Nat Rev Mol Cell Biol. 2001. - Vol. 2, № 10. -P. 738-748.

74. Martelange, V. Identification on a human sarcoma of two new genes with tumor-specific expression / V Martelange, С De Smet, E De Plaen, С Lurquin, T Boon II Cancer Res 2000. - Vol. 60. - P. 3848-3855.

75. Miller, A J. Transcriptional regulation of the melanoma prognostic marker melastatin (TRPM1) by MITF in melanocytes and melanoma / A J Miller, J Du, S Rowan, CL Hershey, HR Widlund, DE Fisher II Cancer Res. -2004.-Vol. 64, №2.-P. 509-516.

76. Mintz, A. Cancer genetics/epigenetics and the X chromosome: possible new links for malignant glioma pathogenesis and immune-based therapies / A Mintz, WDebinski II Crit Rev Oncog. 2000. - Vol. 11, № 1.-P. 77-95.

77. MMMP Melanoma Molecular Map Project Databases, online. [Обращение к документу: 01.12.2009]. Доступ через http://www.mmmp.org/MMMP/import.mmmp7page~fam melanoma.mmm Е

78. Moreau-Aubry, A. A processed pseudogene codes for a new antigen recognized by a CD8(+) T cell clone on melanoma / A Moreau-Aubry, S Le Guiner, N Labarriere, MC Gesnel, F Jotereau, R Breathnach II J Exp Med.- 2000. — Vol. 191.-P. 1617-1624.

79. Mueller, JL. The mouse X chromosome is enriched for multicopy testis genes showing postmeiotic expression I JL Mueller, SK Mahadevaiah, PJ Park, PE Warburton, DC Page, JM Turner I/ Nat Genet. 2008. - Vol. 40, № 6. - P. 794-799.

80. Nagao, T. MAGE-A4 interacts with the liver oncoprotein gankyrin and suppresses its tumorigenic activity / T Nagao, H Higashitsuji, К Nonoguchi, T Sakurai, S Dawson, RJ Mayer, KItoh, J Fujita II J Biol Chem- 2003. Vol. 278. -P. 10668-10674.

81. Narita, N. Functional RET G691S polymorphism in cutaneous malignant melanoma / N Narita, A Tanemura, R Murali, RA Scolyer, S Huang, T Arigami, S Yanagita, KK Chong, JF Thompson, DL Morton, DS Hoon I I Oncogene. 2009. - Vol. 28, № 34. - P. 3058-3068.

82. Old, LJ. Cancer vaccines: an overview / LJ Old II Cancer Immun. -2008. — Vol. 8. Suppl l.-P. 1.

83. Old, LJ. Cancer/testis (CT) antigens a new link between gametogenesis and cancer / LJ Old И Cancer Immun. - 2001. - Vol. l.-P. 1-7.

84. Papp, T. Mutational analysis of the BRAF gene in human congenital and dysplastic melanocytic naevi / T Papp, H Schipper, К Kumar, D

85. Schiffmann, R Zimmermann II Melanoma Res. 2005. - Vol. 15, № 5. - P. 401-407.

86. Peikert, T. Melanoma antigen A4 is expressed in non-small cell lung cancers and promotes apoptosis / T Peikert, U Specks, С Farver, SC Erzurum, SA Comhair II Cancer Res. 2006. - Vol. 66. - P. 4693-4700.

87. Pousette, A. Presence of synaptonemal complex protein 1 transversal filament-lile protein in human primary spermatocytes / A. Pousette, P. Leijonhujvud, S. Arver, U. Kvist, J. Pelttari, C. Hoog II Hum. Reprod. -1997. Vol. 12. - P. 2414-2417.

88. Quinones, LG. Characterization of human melanoma cell lines according to their migratory properties in vitro / LG Quinones, I Garcia-Castro И In Vitro Cell Dev Biol Anim. 2004. - Vol. 40, № 1-2. - P. 35-42.

89. Rangel, J. Osteopontin as a molecular prognostic marker for melanoma / J Rangel, M Nosrati, S Torabian, L Shaikh, SP Leong, С Haqq, JR 3rd Miller, RW Sagebiel, M Kashani-Sabet II Cancer. 2008. - Vol. 112, № l.-P. 144-150.

90. Restifo, N. Cancer vaccines / N. Restifo, M. Sznol II Cancer: Principles & Practice of Oncology, 5th ed./ Eds. V.DeVita, S.Hellman, S.Rosenberg; Chapter 61. P.3023-3043. - Philadelphia: Lippincott2 Raven Publishers, -1997.

91. Rimoldi, D. cDNA and protein characterization of human MAGE-10 / D Rimoldi, S Salvi, D Reed, P Coulie, VC Jongeneel, E De Plaen, F Brasseur, AM Rodriguez, T Boon, JC Cerottini II Int J Cancer. 1999. -Vol. 82, №6.-P. 901-907.

92. Rimoldi, D. Anti-MAGE-3 antibody 57B and anti-MAGE-1 antibody 6C1 can be used to study different proteins of the MAGE-A family / D Rimoldi, S Salvi, E Schultz-Thater, GC Spagnoli, JC Cerottini И Int J Cancer. 2000. - Vol. 86, № 5. - P. 749-751.

93. Robbins, PF. A mutated beta-catenin gene encodes a melanoma-specific antigen recognized by tumor infiltrating lymphocytes / PF Robbins, M El-Gamil, YF Li, Y Kawakami, D Loftus, E Appella, SA Rosenberg II J Exp Med.-1996.-Vol. 183, №3.-P. 1185-1192.

94. Rosenberg, SA. A new era for cancer immunotherapy based on the genes "that encode cancer antigens / SA Rosenberg II Immunity. 1999. -Vol. 10, №3.-P. 281-287.

95. Russo, AE. Melanoma: molecular pathogenesis and emerging target therapies (Review) / AE Russo, E Torrisi, Y Bevelacqua, R Perrotta, M Libra, J A McCubrey, DA Spandidos, F Stivala, G Malaponte II Int J Oncol. -2009.-Vol. 34, №6.-P. 1481-1489.

96. Ryu, В. Comprehensive expression profiling of tumor cell lines identifies molecular signatures of melanoma progression / В Ryu, DS Kim, AMDeluca, RMAlani II PLoS One. 2007. - Vol. 2, № 7. - P. 594.

97. Saldanha, G. Cutaneous melanoma subtypes show different BRAF and NRAS mutation frequencies / G Saldanha, L Potter, P Daforno, JH Pringle //Clin Cancer Res. 2006. - Vol. 12, № 15. - P. 4499-4505.

98. Sarris, M. Cytoplasmic expression of nm23 predicts the potential for cerebral metastasis in patients with primary cutaneous melanoma / M Sarris, RA Scolyer, M Konopka, JF Thompson, CG Harper, CS Lee II Melanoma Res.-2004.-Vol. 14, № l.-P. 23-27.

99. Scanlan, M.J. The cancer/testis genes: review, standardization, and commentary / M.J. Scanlan, A.J. Simpson, L.J. Old II Cancer Immun. -2004.-Vol. 4.-P. 1-15.

100. Sekulic, A. Malignant melanoma in the 21st century: the emerging molecular landscape. Melanoma Study Group of Mayo Clinic Cancer Center

101. A Sekulic, Р Jr Haluska, AJ Miller, J Genebriera De Lamo, S Ejadi, JS Pulido, DR Salomao, EC Thorland, RG Vile, DL Swans on, BA Pockaj, SD Laman, MR Pittelkow, SN Markovic II Mayo Clin Proc. 2008. - Vol. 83, № 7. - P. 825-846.

102. Simpson, AJ. Cancer/testis antigens, gametogenesis and cancer / AJ Simpson, OL Caballero, A Jungbluth, YT Chen, LJ Old II Nat Rev Cancer. -2005. Vol. 5, № 8. - P. 615-625.

103. Sondak, VK. Current status of biomarkers for melanoma metastasis / VK Sondak, JL Messina II IDrugs. — 2006. Vol. 9, № 9. - P. 627-631.

104. Stevanovic, S. Identification of tumour-associated T-cell epitopes for vaccine development / S Stevanovic II Nat Rev Cancer. 2002. - Vol. 2, № 7.-P. 514-520.

105. Takeuchi, H. Expression of differentiation melanoma-associated antigen genes is associated with favorable disease outcome in advanced-stage melanomas / H Takeuchi, С Kuo, DL Morton, HJ Wang, DS Hoon И Cancer Res. 2003. - Vol. 63, № 2. - P. 441-448.

106. Tan, K. Human PLU-1 Has transcription repression properties and interact with the developmental transcription factors BF-1 and PAX-9 / K.

107. Tan, A. L. Shaw, B. Madsen, K. Jensen, J. Taylor-Papadimitriou, P. S. Freemontll J. Biol. Chem. 2003. - Vol. 278. - P. 20507-20513.

108. Thor Straten, P. In situ T cells in melanoma / P Thor Straten, JC Becker, P Guldberg, J Zeuthen II Cancer Immunol Immunother. 1999. -Vol. 48, №7.-P. 386-395.

109. Tureci, O. Identification of a meiosis-specific protein as a member of the class of cancer/testis antigens / О Tureci, U Sahin, С Zwick, M Koslowski, G Seitz, MPfreundschuh II Proc Natl Acad Sci USA.- 1998. -Vol. 95.-P. 5211-5216.

110. Utikal, J. Serologic and immunohistochemical prognostic biomarkers of cutaneous malignancies / J Utikal, D Schadendorf, S Ugurel II Arch Dermatol Res. 2007. - Vol. 298, № 10. - P. 469-477.

111. Van den Eynde, B. A new family of genes coding for an antigen recognized by autologous cytolytic T lymphocytes on a human melanoma / В Van den Eynde, О Peeters, О De Backer, В Gaugler, S Lucas, T Boon // J Exp Med. 1995. - Vol. 182, № 3. - P. 689-698.

112. Van den Eynde, В J. T cell defined tumor antigens / В J Van den Eynde, P van der Bruggen //Curr OpinTmmunol 1997. - Vol. 9. - P. 684-693.

113. Velazquez, EF. Expression of the cancer/testis antigen NY-ESO-1 in primary and metastatic malignant melanoma (MM)--correlation with prognostic factors / EF Velazquez, AA Jungbluth, M Yancovitz, S Gnjatic, S

114. Van den Eynde, B. New tumor antigens recognized by T cells / В Van den Eynde, VG Brichard I I Curr Opin Immunol. 1995. - Vol. 7, № 5. - P. 674-681.

115. Wang, RF. Human tumor antigens recognized by T lymphocytes: implications for cancer therapy / RF Wang, SA Rosenberg II J Leukoc Biol. 1996. - Vol. 60, № 3. - P. 296-309.

116. Weber, J. Expression of the MAGE-1 tumor antigen is up-regulated by the demethylating agent 5-aza-2'-deoxycytidine / J Weber, M Salgaller, D Samid, В Johnson, M Herlyn, N Lassam, J Treisman, SA Rosenberg II Cancer Res. 1994.-Vol. 54, №7.-P. 1766-1771.

117. Winnepenninckx, V. Gene expression profiling of primary cutaneous melanoma / V Winnepenninckx, JJ Van den Oord И Verh К Acad Geneeskd Belg. 2007. - Vol. 69, № 1. - P.23-45.

118. Xu, L. Gene expression changes in an animal melanoma model correlate with aggressiveness of human melanoma metastases / L Xu, SS

119. Shen, Y Hoshida, A Subramanian, К Ross, JP Brunet, SN Wagner, S Ramaswamy, JP Mesirov, RO Hynes II Mol Cancer Res. 2008. - Vol. 6, № 5.-P. 760-769.

120. Yuan, L. Isolation of a novel gene, TSP50, by a hypomethylated DNA fragment in human breast cancer / L Yuan, J Shan, D De Risi, J Broome, J Lovecchio, D Gal, V Vinciguerra, HP Xu II Cancer Res. 1999. - Vol. 59. -P. 3215-3221.

121. Yuasa, T. Expression patterns of cancer testis antigens in testicular germ cell tumors and adjacent testicular tissue / T Yuasa, К Okamoto, T Kawakami, M Mishina, О Ogawa, Y Okada II J Urol. 2001. - Vol. 165. -P. 1790-1794.

122. Zendman, AJ. CTpll, a novel member of the family of human cancer/testis antigens / AJ Zendman, IM Cornel issen, UH Weidle, DJ Ridter, GN van Muijen II Cancer Res. 1999. - Vol. 59. - P. 6223-6229.

123. Zendman, AJ. Cancer/testis-associated genes: identification, expression profile, and putative function I AJ Zendman, DJ Ruiter, GN Van Muijen И J Cell Physiol. 2003. - Vol. 194, № 3. - P.272-288.