Фенотипирование ангиотензин-превращающего фермента в крови и тканях человека в норме и при патологии тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.04, кандидат наук Тихомирова, Виктория Евгеньевна

• Тихомирова, Виктория Евгеньевна
• кандидат наук
• 2018

Оглавление диссертации кандидат наук Тихомирова, Виктория Евгеньевна

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1. АНГИОТЕНЗИН-ПРЕВРАЩАЮЩИЙ ФЕРМЕНТ (АПФ)

1.1. Физиологическая значимость АПФ

1.2. Структура АПФ

1.2.1. Гликозилирование АПФ

1.2.2. Трехмерная структура отдельных доменов АПФ

1.2.3. Структура двудоменного АПФ

1.3. Уровень АПФ в сыворотке крови

2. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ (МАТ) ДЛЯ АНАЛИЗА СТРУКТУРЫ И ФУНКЦИИ АПФ

2.1. мАт к денатурированному АПФ

2.2. мАт к конформационным эпитопам на поверхности АПФ

2.3. Использование мАт для локализации АПФ в тканях

2.4. Использование мАт для изучения структуры и контроля нативности АПФ

2.4.1. Исследование конформационных изменений АПФ с помощью мАт

2.4.2. Конформационные изменения АПФ при взаимодействии с ингибиторами

3. ФЕНОТИПИРОВАНИЕ АПФ

3.1. Фенотипирование АПФ, продуцируемого в различных клетках

3.2. Фенотипирование АПФ при патологии - саркоидозе и уремии

3.4. Перспективы использования мАт против АПФ для характеристики патологий

3.4.1. Болезнь Гоше

3.4.2. Фибрилляция предсердий

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

4. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

4.1. Материалы

4.2. Методы

4.2.1. Получение гомогенатов из тканей различных органов человека

4.2.2. Выделение соматического АПФ из семенной жидкости

4.2.3. Выделение соматической формы АПФ из тканей легких и сердца

4.2.4. Определение чистоты выделенных препаратов фермента

4.2.5. Определение активности АПФ

4.2.6. Определение концентрации активных молекул соматического АПФ, выделенного из разных источников

4.2.7. Биотинилирование АПФ человека

4.2.8. Определение тушения флуоресценции И18-Ьеи

4.2.9. Определение аминопептидазной активности в гомогенатах тканей

4.2.10. Определение кинетических параметров гидролиза различных субстратов под действием АПФ из сердца и легких человека

4.2.11. Определение зависимости активности АПФ от концентрации различных солей

4.2.12. Определение зависимости активности АПФ от рН реакционной среды

4.2.13. Диализ гомогенатов тканей и плазмы крови человека

4.2.14. Фильтрация образцов плазмы крови человека на мембранных фильтрах с различным диаметром пор

4.2.15. Ингибирование активности очищенного АПФ под действием фильтратов гомогенатов тканей и плазмы крови

4.2.16. Определение связывания моноклональных антител с АПФ

4.2.17. Перфузия очищенного АПФ через кровоток крыс

4.2.18. Расщепление АПФ трипсином и масс-спектрометрия

4.2.19. Статистическая обработка результатов

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

5. МЕТОДОЛОГИЯ РАБОТЫ С АПФ В ГОМОГЕНАТАХ ТКАНЕЙ И ПЛАЗМЕ КРОВИ

5.1. Подбор концентрации детергента для экстракции АПФ из тканей

5.2. Оценка тушения флуоресценции His-Leu при определении активности АПФ в гомогенатах тканей и плазме крови

5.3. Аминопептидазная активность в гомогенатах тканей

5.4. Определение активности АПФ в гомогенате ткани при различных разбавлениях

5.5. Индивидуальные различия активности АПФ в гомогенатах тканей

5.6. Индивидуальные различия локальной конформации АПФ

5.7. Определение активности АПФ в различных тканях человека

6. Подготовка препаратов АПФ

6.1. Выделение и очистка АПФ из гомогенатов различных тканей

6.2. Подготовка пула плазмы крови

7. Фенотипирование АПФ при развитии болезни Гоше

7.1. Измерение активности АПФ в плазме пациентов с болезнью Гоше

7.2. Эффект диализа и фильтрации плазмы крови на активность АПФ

7.3. Конформационный профиль АПФ в плазме крови при развитии болезни Гоше

7.4. Активность АПФ в гомогенатах селезенки

7.5. Демонстрация присутствия ингибиторов АПФ в селезенке человека

7.6. Конформационный анализ АПФ в различных тканях при развитии болезни Гоше

8. Фенотипирование АПФ из сердца и легких

8.1. Кинетические характеристики АПФ из разных тканей

8.2. Сравнительное фенотипирование очищенных АПФ из легких и сердца

8.3. Анализ возможных гликановых структур на поверхности АПФ из сердца и легких

8.4. Влияние эналаприлата на эффективность связывания панели мАт с АПФ из сердца и легких

8.5. Сравнительное фенотипирование АПФ в гомогенатах сердца и легких

8.6. Получение тканеспецифичных мАт

8.7. Фенотипирование АПФ в различных отделах сердца человека

8.8. Эффектор в гомогенате сердца

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

РАС - ренин-ангиотензиновая система;

АПФ - ангиотензин-превращающий фермент;

мАт - моноклональные антитела;

СНО - клетки яичников китайского хомячка;

HUVEC - эндотелиальные клетки пупочной вены человека;

Cbz-Phe-His-Leu (ZPHL) - карбобензокси-Ь-фенилаланил-Ь-гистидил-Ь-лейцин;

Hip-His-Leu (HHL) - гиппурил-Ь-гистидил-Ь-лейцин;

His-Leu (HL) - L-гистидил-Ь-лейцин;

ZPHL/HHL (Z/H) - соотношение скоростей гидролиза субстратов ZPHL и HHL под действием АПФ;

ФП - фибрилляция предсердий; БСА - бычий сывороточный альбумин;

Буфер А - 50 мМ фосфатный буфер, содержащий 0,15 М NaCl, 1 мкМ ZnCb^H 7,5; Буфер Б - 100 мМ фосфатный буфер, содержащий 0,3 М NaCl и 1мкМ ZnCl2, рН 8,3.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фенотипирование ангиотензин-превращающего фермента в крови и тканях человека в норме и при патологии»

ВВЕДЕНИЕ

Ангиотензин-превращающий фермент (АПФ, пептидил-дипептидаза А, КФ 3.4.15.1) -2и2+-зависимая пептидаза, включающая два каталитически активных домена (К- и С-домены) в составе одной полипептидной цепи, был впервые обнаружен в 1954 году [1]. АПФ является одним из главных регуляторов кровяного давления и принимает участие в развитии сосудистой патологии и ремоделировании [2, 3]. Двудоменная форма АПФ содержится практически во всех органах и биологических жидкостях организма [2, 3].

У здорового человека АПФ крови происходит, главным образом, из обширной системы эндотелия капилляров легких, 100 % которых продуцируют АПФ, по сравнению с 10-15% АПФ-позитивных капилляров в системном кровообращении [4]. В кровоток АПФ поступает при протеолитическом отщеплении (шеддинге) с поверхности эндотелиальных клеток под действием неизвестной секретазы [5]. У здоровых людей уровень АПФ в крови достаточно стабилен [6], тогда как он увеличивается в 2-4 раза в крови пациентов с саркоидозом [7] и в 3-5 раз при болезни Гоше [8, 9], выступая в качестве клинического биомаркера тяжести заболевания [10, 11].

Исследования с использованием панели из 17 моноклональных антител (мАт), распознающих различные эпитопы на поверхности АПФ [12-17] показали, что связывание мАт с АПФ является очень чувствительным маркером локальной конформации поверхности АПФ. Изменение связывания какого-либо мАт к АПФ может быть соотнесено с изменениями в эпитопе связывания этого мАт на поверхности АПФ при частичной денатурации глобулы АПФ, химической модификации, связывании ингибитора, мутациях, присутствии/отсутствии гликана в сайте гликозилирования, входящем в этот эпитоп [16, 1820]. Использование панели мАт позволило детектировать АПФ, продуцируемый в различных клетках, включая АПФ из макрофагов и дендритных клеток[21], а также обнаружить конформационно измененный АПФ, поступающий из саркоидных гранулем, в крови пациентов с саркоидозом [21] и конформационно измененный АПФ в крови больных уремией [19].

Поскольку очевидно, что повышенный уровень АПФ в крови при развитии болезни Гоше связан с поступлением фермента в кровь не только из легких, но и из видоизмененных макрофагов (клеток Гоше), то существует возможность определения такого фермента в крови с помощью мАт. Исследование конформации АПФ в различных тканях и крови здоровых доноров и пациентов с болезнью Гоше может позволить различить АПФ, продуцируемый в норме и при патологии, что, в свою очередь, позволит получить новые сведения о механизме и развитии болезни Гоше и, возможно, новый более универсальный маркер этого заболевания.

С другой стороны, известно, что при фибрилляции предсердий уровень АПФ в тканях сердца повышен в 3 раза [22], что также может приводить к повышенному поступлению АПФ из сердца в кровь. Исследование конформации АПФ сердца с использованием панели мАт может сформировать основу для появления нового анализа крови для прогнозирования риска развития фибрилляции предсердий.

Целью данной работы является характеристика АПФ в крови и тканях пациентов с болезнью Гоше для выявления АПФ с измененной топографией поверхности фермента. А также фенотипирование АПФ, продуцируемого в тканях сердца, для определения возможности тканеспецифичности АПФ сердца.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1. АНГИОТЕНЗИН-ПРЕВРАЩАЮЩИЙ ФЕРМЕНТ (АПФ) 1.1. Физиологическая значимость АПФ

Ангиотензин-превращающий фермент (АПФ) является центральным компонентом ренин-ангиотензиновой системы (РАС). В организме синтезируются две изоформы АПФ: двудоменная соматическая и однодоменная тестикулярная. АПФ является цинк-зависимой пептидазой, наиболее известной как фермент, продуцирующий вазоконстриктор ангиотензин II путем отщепления дипептида His-Leu с С-конца вазонеактивного декапептида ангиотензина I (Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Phe-His-Leu). Другим известным субстратом АПФ является вазодепрессорный нонапептид брадикинин (Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg), расширяющий кровеносные сосуды, вызывающий расслабление стенок кровеносных сосудов и увеличение проницаемости капилляров. АПФ катализирует последовательное отщепление Phe-Arg и Ser-Pro с С-конца брадикинина, инактивируя вазодепрессор [2, 3]. Помимо этого вазоконстрикторная активность АПФ проявляется также в том, что АПФ оказывается механосенсором регуляции своей активности в ответ на напряжение сдвига [23, 24].

Однако АПФ является относительно неспецифической пептидазой, которая способна расщеплять широкий спектр субстратов. Благодаря этому АПФ и его пептидные субстраты и продукты гидролиза участвуют во множестве физиологических процессов помимо контроля давления, включая кроветворение, репродуктивную функцию, воспалительные процессы, функционирование почек, иммунный ответ и т.д. [2, 3].

Так, АПФ способен расщеплять гемопоэтический пептид N-Ac-Ser-Asp-Lys-Pro, участвующий в контроле пролиферации и миграции гемопоэтических стволовых клеток, и оказывать избирательное действие на пребывающие в покое клетки-предшественники [25]. Субстрат АПФ - гемопоэтический пептид также стимулирует ангиогенный ответ (ангиогенез), принимает участие в иммунном ответе и оказывает кардиопротекторное действие [26]. Показано, что АПФ деградирует бета-амилоидный пептид (АР), накапливающийся при болезни Альцгеймера и являющийся одним из основных биологических агентов, вовлеченных в патогенез болезни Альцгеймера [27-29]. АПФ расщепляет и другие регуляторные пептиды, причем в некоторых случаях АПФ способен функционировать как эндопептидаза, отщепляя С-концевой трипептид от вещества P, которое оказывает сосудорасширяющее действие, активирует синтез и высвобождение медиаторов воспаления и отвечает за болевую чувствительность [30-32]. АПФ также отщепляет N- и С- концевые трипептиды от блокированных на N- и С- концах пептидов:

люлиберина [33], лютеинизирующего [33-35] и гонадотропин-высвобождающего гормонов [36].

Соматический АПФ (170 - 180 кДа в зависимости от ткани) содержит два гомологичных домена N- и С- в составе одной полипептидной цепи и присутствует практически во всех органах [2, 3]. Большая часть молекулы АПФ локализована экстрацеллюлярно на поверхности эндотелиальных и специализированных эпителиальных клеток, находящихся в местах интенсивного всасывания или выделения жидкости и солей, нейроэпителиальных клетках и клетках мононуклеарного ряда [3, 37]. Соматический АПФ является специфическим компонентом сосудистого эндотелия в большинстве органов млекопитающих [4, 38]. АПФ также интенсивно продуцируется в эпителиальных клетках с сильно выраженными микроворсинками апикальной мембраны, включая проксимальные канальцы почек, тонкий кишечник, эпидидимис, множество нервных клеток головного мозга, сосудистое сплетение желудочков мозга и плаценту [3]. Известно, что АПФ содержится также в тканях, богатых фибриллярным коллагеном: матриксе сердечных клапанов и образовавшихся в результате инфаркта миокарда рубцах. Уровень АПФ повышается с усилением фиброза [39-41].

Продуцирование АПФ эндотелием сосудов зависит от огромного количества раздражителей. При изучении in vitro с использованием различных эндотелиальных клеток было показано, что такие клетки увеличивают экспрессию АПФ в ответ на стероиды, гормон щитовидной железы, внутриклеточный циклический аденозинмонофосфат (цАМФ), внутриклеточный кальций, ингибиторы АПФ и другие стимулы [42-48].

Тестикулярный АПФ гомологичен С-домену соматической формы АПФ, его молекулярная масса составляет около 95 кДа, то есть примерно половину массы соматического фермента. Тестикулярный АПФ отвечает за процессинг пептидных гормонов, участвующих в оплодотворении (гастрина и холецистокинина) [49], а также участвует в процессах сперматогенеза и овуляции [3, 50-52]. Самцы мышей, лишенные АПФ, в подавляющем большинстве были не способны к размножению [51, 52], в то время как репродуктивные функции самок мышей в отсутствие АПФ были нормальными. Было показано, что этот дефект в мужских особях связан непосредственно с отсутствием тестикулярного АПФ. Самцы мышей, у которых продуцировался только тестикулярный АПФ, имели пониженное кровяное давление из-за отсутствия соматического АПФ, но не имели нарушений репродуктивной функции [53]. Возможно, тестикулярный АПФ вносит вклад в оплодотворение за счёт влияния на подвижность сперматозоидов в составе семенной жидкости за счет инактивации брадикинина [54].

Тестикулярный и соматический АПФ также способны проявлять абсолютно другой вид активности, отщепляя гликозилфосфатидилинозитольный якорь (GPI) у белков, закрепленных на поверхности сперматозоидов [55], именно эта активность АПФ отвечает за фертильность сперматозоидов и обеспечивает связывание сперматозоида и яйцеклетки. Эта активность АПФ субстрат-специфична, механизм пока неизвестен, но не связан с дипептидазной активностью [56].

Кроме двух форм АПФ, продуцирующихся в организме, в биологических жидкостях обнаружен и свободный №домен АПФ (108 кДа): в кишечной жидкости больных после хирургических операций [57], в моче человека [58, 59] и крыс [60]. Полагают, что N доменная форма фермента является продуктом ограниченного протеолиза двудоменной формы АПФ [57, 59, 61, 62]. Свободный №домен АПФ (69-96 кДа) был обнаружен также в тканях крыс: надпочечниках, аорте, сердце, печени, легких и тестикулах [63]. Кроме того, была показана локализация №домена в ядрах мезангиальных клеток крыс [64]. В кишечной жидкости ^доменная форма фермента может принимать участие в пищеварительных процессах [57], а присутствие ^домена в тканях позволяет предположить возможность местного метаболизма его субстратов [63].

Последовательности комплементарной ДНК соматического и тестикулярного АПФ человека были определены в 1988 году, [65], а геномная последовательность и структура гена в 1991 [66]. Обе изоформы АПФ кодируются одним геном, содержащим 26 экзонов (Рис. 1), где 26 экзон кодирует трансмембранный домен фермента [66]. Транскрипция тестикулярного АПФ начинается с 13 экзона гена АПФ (Рис. 1) [67].

Соматический промотор Тестикулярный промотор

Рис. 1. Структура гена АПФ: 26 экзонов, обозначенных чёрными прямоугольниками. Специфический тестикулярный экзон обозначен серым цветом [2].

Соматические ткани используют 13 экзон как интрон и пропускают его при переходе от 12 к 14 экзону. Специфическая инициация транскрипции в мужских половых клетках в 13 экзоне обеспечивает тестикулярный АПФ уникальной 36 аминокислотной ^концевой

1.2. Структура АПФ

3 5 7 9 11

13 15 17 19 21 23 25

последовательностью. Следующий далее 14 экзон и остаток тестикулярного АПФ полностью соответствуют С-концевой половине соматического АПФ [68]. В мужских половых клетках транскрипция начинается в другом месте относительно соматических тканей из-за тканеспецифичного промотора, расположенного на 5' конце начального сайта транскрипции [69].

Соматический АПФ человека синтезируется как полипептид из 1306 аминокислотных остатков, «зрелый» фермент содержит 1277 остатков, так как в процессе посттрансляционной модификации с К-конца фермента отщепляется сигнальный гидрофобный пептид, состоящий из 29 аминокислот, который необходим для прохождения через эндоплазматический ретикулум [65]. Соматическая форма фермента состоит из двух каталитически активных доменов, а также мембранного якоря и цитоплазматического домена, которые идентичны для тестикулярной формы фермента (Рис. 2). Тестикулярная форма АПФ человека синтезируется как белок из 732 аминокислотных остатков, после отщепления сигнального пептида из 31 аминокислоты «зрелый» тестикулярный АПФ содержит 701 аминокислотный остаток [50].

Тестикулярный АПФ

^домен

Г 1

Соматический АПФ

I

С-домен

"Л г~

613

Л

1227 1277

I

Сигнальный пе тид

НЕХХН*

Мембранный якорь ■

Ы-концевая 36 аминокислотная последовательность

Цитоплазматический домен

/

Рис. 2. Схематическая структура соматического и тестикулярного АПФ.

По аминокислотной последовательности АПФ классифицируется как член семейства цинкинов (т.е. термолизин-подобные пептидазы) [70]. По классификации базы данных МЕЯОРБ АПФ является пептидазой ХМ02-001 и относится к клану МА, подклану МА (Е), семейство М2 [71]. Номер ЕС 3.4.15.1.

Каждый из каталитически активных доменов АПФ содержит цинк-связывающий мотив Кв-Ии-ХХ-ИБ, который является структурной особенностью многих цинк-зависимых пептидаз [72], например, термолизина, карбоксипептидазы А или нейтральной

эндопептидазы 24.11 (неприлизина). Точный мотив активного центра в АПФ His-Glu-Met-Gly-His (HEMGH) содержит два остатка гистидина, координирующие цинк. Третий лиганд, координирующий цинк, это остаток глутаминовой кислоты, который находится на 23-24 аминокислотных остатка ближе к С-концу от мотива HEMGH и располагается в своем характеристическом мотиве EXIXD. Важность этих аминокислотных остатков для связывания цинка была продемонстрирована посредством сравнения с последовательностью термолизина, но затем их функциональные роли были подтверждены с помощью сайт-направленного мутагенеза и, в конечном счёте, с помощью рентгеновской кристаллографии [73, 74]. Четвертым лигандом, формирующим тетраэдрическое окружение иона цинка, является вода или молекула другого растворителя. Также два домена АПФ содержат три дисульфидных мостика и свободный цистеин [2].

1.2.1. Гликозилирование АПФ

АПФ является гликопротеином, содержащим до 33% углеводных остатков от молекулярной массы [75-77]. Продуцируемый в различных тканях АПФ может отличаться по типу гликозилирования (N- и О-гликозилирование), количеством реально гликозилированных сайтов и по структуре олигосахаридных цепей [75, 76, 78, 79].

Соматическая форма АПФ человека содержит 17 потенциальных сайтов N-гликозилирования [65]. Считается, что двудоменный АПФ содержит исключительно N-гликаны [75, 76]. Хотя возможность О-гликозилирования была продемонстрирована для соматического АПФ в эпителиальных клетках тонкого кишечника [78]. В то же время тестикулярный АПФ гликозилирован как по N-, так и по О-типу [75]. Сильное О-гликозилирование является характеристическим для тестикулярной изоформы АПФ и связано с его уникальной N-концевой последовательностью из 36 аминокислот. Эта уникальная последовательность содержит 47% Ser и Thr в тестикулярном АПФ человека. Именно этот участок в тестикулярном ферменте содержит 80-90% от общего количества О-связанных углеводов [75].

Фактически в молекуле АПФ гликозилированы не все потенциальные сайты гликозилирования, степень гликозилирования молекулы АПФ зависит от ткани, в которой он продуцирован. Структура и расположение гликанов в молекуле фермента на данный момент точно неизвестны. При сравнении АПФ из 4 различных источников было показано, что в АПФ семенной жидкости человека и легких крысы гликозилированы только 7 из 17 потенциальных сайтов, в частности, было определено, что Asn9 гликозилирован в семенном АПФ [76]. В АПФ легких кролика и крови морской свинки гликаны были обнаружены в 8 сайтах.

Показано, что соматический АПФ в составе семенной жидкости человека содержит 5 олигосахаридов комплексного типа, которые могут содержать остатки сиаловых кислот, а 2 сайта содержат гликаны высокоманнозного типа, так же как у ферментов из легких кролика и крысы [76]. А фермент в составе крови морской свинки содержит 7 олигосахаридов комплексного типа и 1 высокоманнозного типа.

В соматическом АПФ из почек человека было показано, что гликозилировано 6 сайтов из 17 - Абп9, 25, 82, 117, 480 на КК-домене АПФ и Абп913 на С-домене [79]. Также был идентифицирован пептид, содержащий негликозилированный Абп1196 из примембранной области АПФ, для оставшихся 10 потенциальных сайтов N гликозилирования информация не была получена. В АПФ плазмы крови человека идентифицировано три сайта гликозилирования Asn480, 666 и 685 [80].

Тестикулярный АПФ содержит 7 потенциальных сайтов К-гликозилирования, углеводы составляют примерно 14% от его молекулярной массы. В рекомбинантном тестикулярном АПФ, продуцируемом в клетках яичников китайского хомячка (СНО-клетках) были идентифицированы три полностью гликозилированных сайта Абп72, 90, 109 (648, 666, 685 по соматическому АПФ). Ещё три сайта были гликозилированы частично Абп155, 337, 586 (731, 913, 1162), определен единственный негликозилированный Абп620 (1196) в примембранной (стебельковой) области молекулы АПФ [79]. Также показано, что К-связанные гликаны в тестикулярном АПФ являются в основном биантенными фукозилированными цепями комплексного типа (Рис. 3).

Рис. 3. Предлагаемая структура наиболее распространенного ^связанного олигосахарида в составе рекомбинантного тестикулярного АПФ [79].

Соматическая и тестикулярная форма АПФ наиболее сильно гликозилированы с К-конца [57]. Фермент из подвздошной кишки человека, соответствующий К-домену соматического АПФ, содержит 10 потенциальных сайтов К-гликозилирования. Этот фермент содержит 37% углеводов от его молекулярной массы [57]. Сиквоны на С-конце белков чаще всего встречаются негликозилированными. Если бы находящийся рядом с линкерным регионом Абп1196 был гликозилирован, это стерически затруднило бы шеддинг АПФ. Этот потенциальный сайт гликозилирования даже отсутствует у АПФ кроликов и мышей. Также

на основании базы данных о сайтах №гликозилирования отмечалось, что полностью гликозилированные сиквоны все заканчиваются треонином, тогда как частично гликозилированные - серином [79, 81].

Растворимая форма АПФ в плазме крови человека содержит в три раза больше сиаловых кислот, чем мембраносвязанный АПФ легких [82], который является основным источником АПФ в крови. При циркуляции плазмы через печень молекулы АПФ, которые содержат меньшее количество остатков сиаловых кислот на концах углеводных цепей, то есть с экспонированными остатками галактозы, задерживаются лектинами, находящимися на поверхности гепатоцитов.

Высокий уровень и гетерогенность гликозилирования поверхности АПФ являются основными удерживающими факторами в получении кристаллической структуры фермента. Для разрешения этой задачи был получен мутант тестикулярного АПФ ^АСЕД36№), который был лишен ^концевой аминокислотной последовательности и усечен после Ser625 (1021 по соматическому АПФ), то есть не содержал части примембранной области, мембранного якоря и цитоплазматического домена. Такой мутант тестикулярного АПФ был продуцирован в присутствии ингибитора глюкозидазы NB-DNJ и затем обработан эндогликозидазой Н для удаления всех гликановых структур за исключением терминальных остатков ^ацетилглюкозамина. Этот фермент сохранял структурную и функциональную целостность и был хорошим кандидатом для кристаллографических исследований [79]. Однако низкие выходы спровоцировали других исследователей на получение других гликоформ tACEД36. Исследованные мутанты были получены с помощью замены остатков Лби на Gln в потенциальных 7 сайтах №гликозилирования [83]. В результате было показано, что №гликозилирование в сайтах Лби72 и 109 является необходимым и достаточным для получения ферментативно активного тестикулярного АПФ [83]. Кроме того, взаимодействие гликанов в сайте Лби72 и 109 с соседними белковыми остатками может иметь важное значение для стабилизации а1 и а2 спиралей [84]. Таким образом были созданы две структуры рекомбинантного тестикулярного АПФ, мутанты tACE-G13 и tACE-G1234, которые были наиболее близки к нативному ферменту по кинетическим свойствам. Полученный гликомутант 1АСБ^13 имел два интактных сайта гликозилирования: первый и третий (Лбп72 и 109), остальные сайты были «выключены» заменой Лби на Gln. Мутант 1АСБ^1234 содержал замены лби^и в пятом и шестом сайтах (Лбп337 Лбп586). Эти модификации позволили получить стабильные мутанты, которые образуют кристаллы, позволившие получить структуру С-домена АПФ с разрешением до 2А [83].

1.2.2. Трехмерная структура отдельных доменов АПФ

Первая структура С-домена АПФ была получена для связанной с ингибитором укороченной молекулы рекомбинантного тестикулярного АПФ tACEA36NJ [85]. По данным кристаллографии молекула tACEA36NJ, содержащая остатки 40-618 (616-1194 по соматическому АПФ), имеет форму эллипса с размерами 72 х 57 х 48 Â. В этой глобуле расположен 30 Â сужающийся в центре туннель активного центра, образованный четырьмя а-спиралями и одним ß-листом и разделяющийся на две камеры (Рис. 4). Этот туннель активного центра разделяет тестикулярный АПФ на два субдомена [85]. Три крупнейшие а-спирали образуют похожую на крышку структуру, которая частично закрывает вход в туннель активного центра. Наличие крышки в совокупности с небольшой длиной самого туннеля объясняет неспособность АПФ гидролизовать большие пептиды из 25-30 и более аминокислотных остатков. Молекула тестикулярного АПФ содержит в основном спиральные участки, 27 спиралей, которые равномерно распределены в субдоменах. На ß-структуры приходится всего 4% от всей последовательности (6 участков).

Рис. 4. Кристаллическая структура С-домена АПФ, РББ 1086 [85]. Два субдомена окрашены в синий и фиолетовый, молекула ингибитора АПФ лизиноприла в жёлтый, ион цинка зелёный, ионы хлора красные.

Ион цинка имеет тетраэдрическое окружение в активном центре С-домена, он расположен в самой узкой части туннеля активного центра и делит канал на две части. В более короткой части, около 8 А, связывается отщепляемый АПФ С-концевой дипептид

субстрата, в то же время в более длинной части канала длиной 17 Ä связывается N-концевая часть субстрата. Последовательность активного центра His-Glu-Xaa-Xaa-His находится в 13-ой а-спирали, третий лиганд цинка Glu411 был идентифицирован в 14-ой а-спирали. Внутри молекулы были обнаружены два иона хлора: хлорид-1 на расстоянии 20,7 Ä от иона цинка, связанный с Arg 489, Arg 186, Trp 485 и молекулой воды и хлорид-2 - на расстоянии 10,4 Ä от иона цинка, связанный с Arg522, Tyr224 и молекулой воды [85]. Оба иона хлора находятся вне активного центра фермента, но необходимый для связывания хлорида-2 Arg522 находится в той же спирали, что и два остатка Туг520и Tyr523, которые взаимодействуют с ингибитором и, предположительно, с субстратами [86].

Также были получены и другие кристаллические структуры тестикулярного АПФ: PDB 2IUL, содержащая аминокислотные остатки 40-623 [87], и PDB 2IUX, остатки 40-592 [84] и структура АПФ 2 PDB: 1R42 [88]. Эти структуры не имеют принципиальных отличий от описанной ранее PDB 1O86.

Кристаллическая структура N-домена [89], расшифрованная позже, схожа со структурой С-домена, имеет идентичное расположение и строение активного центра. Глобула N-домена в комплексе с лизиноприлом (PDB 2C6N) имеет форму эллипса, центральный канал делит её на два субдомена и ограничивающую вход в туннель активного центра N-концевую область из трех спиралей (Рис. 5). Однако этот регион содержит больше аминокислотных остатков с отрицательным зарядом, чем на С-домене, что может оказывать влияние на субстратную специфичность домена [29]. В структуре N-домена был найден только один хлорид ион [86, 89, 90]. Обнаруженный хлорид ион связан между Tyr202 и Arg500 и идентичен хлориду-2 в тестикулярном АПФ. В области, соответствующей хлориду-1 тестикулярного АПФ, в N-домене необходимый аргинин заменен на гистидин. Наличие одного хлорид иона согласуется с известной информацией, что активация N-домена АПФ происходит при более низких концентрациях хлорида и в меньшей степени, чем для С-домена.

Кристаллические модели отдельных доменов АПФ, связанных с лизиноприлом, имеют закрытую конформацию и не могут рассматриваться как структура свободного АПФ. В отсутствии ингибитора АПФ также оказался в закрытой конформации, но обнаружилось, что в активном центре фермента связывалась молекула органического растворителя. Открытые структуры N- и С-доменов были построены на основании предположения, что щели активных центров АПФ могут переходить из открытой в закрытую конформацию при связывании лиганда в активном центре как у гомологичного ему АПФ 2 [14, 89, 91]. АПФ 2 является гомологом АПФ и кристаллические структуры для него расшифрованы как для

закрытой конформации фермента, содержащего лиганд в активном центре, так и для открытой конформации в отсутствие лиганда [88, 92].

Рис. 5. Структура N-домена АПФ, PDB 2C6N. Ион цинка зелёный, ион хлора отмечен красным. N-конец и интердоменный линкер окрашены в розовый [89].

Получение кристаллических структур отдельных доменов АПФ в комплексе с лизиноприлом позволило определить аминокислотные остатки в N- и С- домене, участвующие в связывании ингибитора [85, 89, 93]. Также была получена структура С-домена АПФ связанного с селеновым аналогом каптоприла - сампатрилатом [94-96]. Помимо этого N- и С-домены АПФ кристаллизовали в комплексе с домен-специфичными ингибиторами: RXP407 (к N-домену АПФ) и RXPA380 (к C-домену АПФ) [87, 97], что предоставило ценную информацию об аминокислотных остатках, входящих в состав активного центра и способствующих доменной селективности этих ингибиторов. Высокое сродство RXPA380 к С-домену АПФ объясняется взаимодействием этого ингибитора с аминокислотными остатками, уникальными для этого домена, в частности, Phe 391, Val 379 и Val 380, которые отсутствуют в N-домене, в связывании ингибитора также участвуют Thr282, Glu376, Val389, Glu403, Asp453 и Val518. На N-домене в связывании ингибитора RXP407 участвуют Ser357, Tyr369, Thr358, отсутствующие в С-домене, и Arg381, Glu431 и

ТЬг496. Также были получены структуры К- и С- доменов в комплексе с сильнодействующим и селективным двойным ингибитором АПФ, неприлизина и эндотелин-конвертирующего фермента-1 [98]. Помимо этого была представлена модель взаимодействия активного центра К-домена АПФ с гемопоэтическим пептидом К-Ас-Бег-Авр-Ьув-Рго и модель каталитического механизма его гидролиза под действием К-домена [90].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Тихомирова, Виктория Евгеньевна, 2018 год

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Skeggs LT, Marsh WH, Kahn JR, Shumway NP. (1954). The existence of two forms of hypertensin. J. Exp. Med. 99(3):275-82

2. Sturrock ED. (2012). Peptidyl-Dipeptidase A / Angiotensin I-Converting Enzyme. В Handbook of Proteolytic Enzymes, ред. AJ Barrett, ND Rawlings, J Woessner, сс. 480-94. Academic Press. 3-е изд.

3. Bernstein KE, Ong FS, Blackwell W-LB, Shah KH, Giani JF, и др. (2013). A modern understanding of the traditional and nontraditional biological functions of angiotensin-converting enzyme. Pharmacol. Rev. 65(1):1-46

4. Metzger R, Franke FE, Bohle RM, Alhenc-Gelas F, Danilov SM. (2011). Heterogeneous distribution of angiotensin I-converting enzyme (CD143) in the human and rat vascular systems: Vessel, organ and species specificity. Microvasc. Res. 81(2):206-15

5. Parkin ET, Hooper AJT and NM. (2004). Secretase-Mediated Cell Surface Shedding of the Angiotensin-Converting Enzyme. Protein Pept. Lett. 11(5):423-32

6. Alhenc-Gelas F, Richard J, Courbon D, Warnet JM, Corvol P. (1991). Distribution of plasma angiotensin I-converting enzyme levels in healthy men: relationship to environmental and hormonal parameters. J. Lab. Clin. Med. 117(1):33-39

7. Lieberman J. (1975). Elevation of serum angiotensin-converting-enzyme (ACE) level in sarcoidosis. Am. J. Med. 59(3):365-72

8. Lieberman J, Beutler E. (1976). Elevation of Serum Angiotensin-Converting Enzyme in Gaucher's Disease. N. Engl. J. Med. 294(26):1442-44

9. Silverstein E, Friedland J. (1977). Elevated serum and spleen angiotensin converting enzyme and serum lysozyme in Gaucher's disease. Clin. Chim. Acta. 74(1):21-25

10. Romer FK. (1984). Clinical and Biochemical Aspects of Sarcoidosis. With Special Reference to Angiotensin-Converting Enzyme (ACE) - Journals - NCBI. Acta Med. Scand. Suppl. 690:3-96

11. Beneteau-Burnat B, Baudin B. (1991). Angiotensin-Converting Enzyme: Clinical Applications and Laboratory Investigations on Serum and Other Biological Fluids. Crit. Rev. Clin. Lab. Sci. 28(5-6):337-56

12. Danilov S, Jaspard E, Churakova T, Towbin H, Savoie F, и др. (1994). Structure-Function Analysis of Angiotensin I-converting Enzyme Using Monoclonal Antibodies. . 269(43):26806-14

13. Balyasnikova I V., Woodman ZL, Albrecht RF, Natesh R, Acharya KR, и др. (2005). Localization of an N-domain region of angiotensin-converting enzyme involved in the regulation of ectodomain shedding using monoclonal antibodies. J. Proteome Res.

4(2):258-67

14. Skirgello OE, Balyasnikova I V., Binevski P V., Sun ZL, Baskin II, u gp. (2006). Inhibitory antibodies to human angiotensin-converting enzyme: Fine epitope mapping and mechanism of action. Biochemistry. 45(15):4831-47

15. Balyasnikova IV, Skirgello OE, Binevski PV, Nesterovitch AB, Albrecht RFI, u gp. (2007). Monoclonal Antibodies 1G12 and 6A12 to the N-Domain of Human Angiotensin-Converting Enzyme: Fine Epitope Mapping and Antibody-Based Detection of ACE Inhibitors in Human Blood. J. Proteome Res. 6(4):1580-94

16. Naperova IA, Balyasnikova I V., Schwartz DE, Watermeyer J, Sturrock ED, u gp. (2008). Mapping of conformational mAb epitopes to the C domain of human angiotensin l-converting enzyme. J. Proteome Res. 7(8):3396-3411

17. Gordon K, Balyasnikova IV, Nesterovitch AB, Schwartz DE, Sturrock ED, Danilov SM. (2010). Fine epitope mapping of monoclonal antibodies 9B9 and 3G8 to the N - domain of angiotensin converting enzyme (CD143) defines a region involved in regulating angiotensin-convertingenzyme dimerization and shedding. Tissue Antigens. 75:136-50

18. Danilov SM, Kalinin S, Chen Z, Vinokour EI, Nesterovitch AB, u gp. (2010). Angiotensin I-converting enzyme Gln1069Arg mutation impairs trafficking to the cell surface resulting in selective denaturation of the C-domain. PLoS One. 5(5):e10438

19. Petrov MN, Shilo VY, Tarasov A V., Schwartz DE, Garcia JGN, u gp. (2012). Conformational Changes of Blood ACE in Chronic Uremia. PLoS One. 7(11):32-36

20. Danilov SM, Lünsdorf H, Akinbi HT, Nesterovitch AB, Epshtein Y, u gp. (2016). Lysozyme and bilirubin bind to ACE and regulate its conformation and shedding. Sci. Rep. 6:34913

21. Danilov SM, Balyasnikova I V., Danilova AS, Naperova IA, Arablinskaya NE, u gp. (2010). Conformational fingerprinting of the angiotensin I-converting enzyme (ACE). 1. Application in sarcoidosis. J. Proteome Res. 9(11):5782-93

22. Goette a, Staack T, Röcken C, Arndt M, Geller JC, u gp. (2000). Increased expression of extracellular signal-regulated kinase and angiotensin-converting enzyme in human atria during atrial fibrillation. J. Am. Coll. Cardiol. 35(6):1669-77

23. Fleming I, Kohlstedt K, Busse R. (2005). New fACEs to the Renin-Angiotensin System. Physiology. 20(2):91-95

24. Barauna VG, Campos LCG, Miyakawa AA, Krieger JE. (2011). ACE as a Mechanosensor to Shear Stress Influences the Control of Its Own Regulation via Phosphorylation of Cytoplasmic Ser1270. PLoS One. 6(8):e22803

25. Rousseau A, Michaud A, Chauvet MT, Lenfant M, Corvol P. (1995). The hemoregulatory peptide N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro is a natural and specific substrate of the N-terminal active site of human angiotensin-converting enzyme. J. Biol. Chem. 270(8):3656-61

26. Wang D, Carretero O a, Yang X-Y, Rhaleb N-E, Liu Y-H, u gp. (2004). N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline stimulates angiogenesis in vitro and in vivo. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 287(5):H2099-2105

27. Hu J, Igarashi A, Kamata M, Nakagawa H. (2001). Angiotensin-converting Enzyme Degrades Alzheimer Amyloid P-Peptide (AP); Retards Ap Aggregation, Deposition, Fibril Formation; and Inhibits Cytotoxicity. J. Biol. Chem. 276(51):47863-68

28. Oba R, Igarashi A, Kamata M, Nagata K, Takano S, Nakagawa H. (2005). The N-terminal active centre of human angiotensin-converting enzyme degrades Alzheimer amyloid P-peptide. Eur. J. Neurosci. 21(3):733-40

29. Kugaevskaya E V., Veselovsky A V., Indeykina MI, Solovyeva NI, Zharkova MS, и др. (2018). N-domain of angiotensin-converting enzyme hydrolyzes human and rat amyloid-P(1-16) peptides as arginine specific endopeptidase potentially enhancing risk of Alzheimer's disease. Sci. Rep. 8(1):298

30. Bali A, Singh N, Jaggi AS. (2014). Renin-angiotensin system in pain: Existing in a double life? J. Renin-Angiotensin-Aldosterone Syst. 15(4):329-40

31. Song Y, Stal PS, Yu J-G, Lorentzon R, Backman C, Forsgren S. (2014). Inhibitors of endopeptidase and angiotensin-converting enzyme lead to an amplification of the morphological changes and an upregulation of the substance P system in a muscle overuse model. BMCMusculoskelet. Disord. 15(1):126

32. Scott S, Andersen M, Aagaard L, Buchwald C, Rasmussen E. (2017). Dipeptidyl peptidase-4 inhibitor induced angioedema - an overlooked and potentially lethal adverse drug reaction? Curr. Diabetes Rev. 13(999):1-1

33. Skidgel RA, Erdos EG. (1985). Novel activity of human angiotensin I converting enzyme: release of the NH2- and COOH-terminal tripeptides fromThe lack of association between angiotensin-converting enzyme gene insertion/deletion polymorphism and nicotine dependence in multiple sclerosis. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 82(4):1025-29

34. Yan W, Wu F, Morser J, Wu Q. (2000). Corin, a transmembrane cardiac serine protease, acts as a pro-atrial natriuretic peptide-converting enzyme. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 97(15):8525-29

35. Wen JY, Ledger R, McLeod BJ, Davies NM, Butt AG, Tucker IG. (2002). Enzymatic degradation of luteinizing hormone releasing hormone (LHRH) by mucosal homogenates from the intestine of the common brushtail possum (Trichosurus vulpecula). Life Sci. 71(25):3019-30

36. Papakyriakou A, Spyroulias GA, Sturrock ED, Manessi-Zoupa E, Cordopatis P. (2007). Simulated interactions between angiotensin-converting enzyme and substrate gonadotropin-releasing hormone: Novel insights into domain selectivity. Biochemistry. 46(30):8753-65

37. Елисеева ЮЕ. (2001). Ангиотензин-превращающий фермент, его физиологическая роль. . 47(1):43-54

38. Coates D. (2003). The angiotensin converting enzyme (ACE). Int. J. Biochem. Cell Biol. 35(6):769-73

39. Sun Y, Ratajska A, Zhou G, Weber KT. (1993). Angiotensin-converting enzyme and myocardial fibrosis in the rat receiving angiotensin II or aldosterone. J. Lab. Clin. Med. 122(4):395-403

40. Falkenhahn M, Franke F, Bohle RM, Zhu YC, Stauss HM, u gp. (1995). Cellular distribution of angiotensin-converting enzyme after myocardial infarction. Hypertension. 25(2):219-26

41. Copaja Soto M, Valenzuela R, Saldana A, Paz Ocaranza M, Jalil JE, u gp. (2008). Early expression of monocyte chemoattractant protein-1 correlates with the onset of isoproterenol-induced cardiac fibrosis in rats with distinct angiotensin-converting enzyme polymorphism. J. Renin-Angiotensin-Aldosterone Syst. 9(3):154-62

42. Del Vecchio PJ, Smith JR. (1981). Expression of angiotensin-converting enzyme activity in cultured pulmonary artery endothelial cells. J. Cell. Physiol. 108(3):337-45

43. Forslund T, Fyhrquist F, Grönhagen-Riska C, Tikkanen I. (1982). Induction of angiotensin-converting enzyme with the ACE inhibitory compound MK-421 in rat lung. Eur. J. Pharmacol. 80(1):121 -25

44. Fyhrquist F, Grönhagen-Riska C, Hortling L, Forslund T, Tikkanen I, Klockars M. (1983). The induction of angiotensin converting enzyme by its inhibitors. Clin. Exp. Hypertens. A. 5(7-8):1319-30

45. Krulewitz AH, Baur WE, Fanburg BL. (1984). Hormonal influence on endothelial cell angiotensin-converting enzyme activity. Am. J. Physiol. 247(3 Pt 1):163-68

46. Krulewitz AH, Fanburg BL. (1986). Stimulation of bovine endothelial cell angiotensin-I-converting enzyme activity by cyclic AMP-related agents. J. Cell. Physiol. 129(2):147-50

47. Shai SY, Fishel RS, Martin BM, Berk BC, Bernstein KE. (1992). Bovine angiotensin converting enzyme cDNA cloning and regulation. Increased expression during endothelial cell growth arrest. Circ Res. 70(6):1274-81

48. Barreto-Chaves ML, Heimann A, Krieger JE. (2000). Stimulatory effect of dexamethasone on angiotensin-converting enzyme in neonatal rat cardiac myocytes. Brazilian J. Med. Biol. Res. = Rev. Bras. Pesqui. medicas e Biol. 33(6):661-64

49. Isaac RE, Williams TA, Sajid M, Corvol P, Coates D. (1997). Cleavage of arginyl-arginine and lysyl-arginine from the C-terminus of pro-hormone peptides by human germinal angiotensin I-converting enzyme (ACE) and the C-domain of human somatic ACE. Biochem. J. 328(2):587-91

50. Ehlers MR, Fox EA, Strydom DJ, Riordan JF. (1989). Molecular cloning of human testicular angiotensin-converting enzyme: the testis isozyme is identical to the C-terminal half of endothelial angiotensin-converting enzyme. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 86(20):7741-45

51. Krege JH, John SWM, Langenbach LL, Hodgin JB, Hagaman JR, u gp. (1995). Male-female differences in fertility and blood pressure in ACE-deficient mice. Nature. 375(6527):146-48

52. Esther CR, Howard TE, Marino EM, Goddard JM, Capecchi MR, Bernstein KE. (1996). Mice lacking angiotensin-converting enzyme have low blood pressure, renal pathology, and reduced male fertility. Lab. Invest. 74(5):953-65

53. Hagaman JR, Moyer JS, Bachman ES, Sibony M, Magyar PL, и др. (1998). Angiotensin-converting enzyme and male fertility. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 95(5):2552-57

54. Reeves PG, O'Dell BL. (1988). Zinc deficiency in rats and angiotensin-converting enzyme activity: comparative effects on lung and testis. J. Nutr. 118(5):622-26

55. Kondoh G, Tojo H, Nakatani Y, Komazawa N, Murata C, и др. (2005). Angiotensin-converting enzyme is a GPI-anchored protein releasing factor crucial for fertilization. Nat Med. 11(2):160-66

56. Fujihara Y, Ikawa M. (2016). GPI-AP release in cellular, developmental, and reproductive biology. J. Lipid Res. 57(4):538-45

57. Deddish P a, Wang J, Michel B, Morris PW, Davidson NO, и др. (1994). Naturally occurring active N-domain of human angiotensin I-converting enzyme. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 91(16):7807-11

58. Casarini D, Plavink F, Zanella M, Marson O, Krieger J, и др. (2001). Angiotensin-converting enzymes from human urine of mild hypertensive untreated patients resemble the N-terminal fragment of human angiotensin I-converting enzyme. Int JBiochem Cell Biol. 33:75-85

59. Danilov SM, Balyasnikova IV, Albrecht RFI, Kost OA. (2008). Simultaneous determination of ACE activity with 2 substrates provides information on the status of somatic ACE and allows detection of inhibitors in human blood. J. Cardiovasc. Pharmacol. 52:90-103

60. Marques GDM, Quinto BMR, Plavinik FL, Krieger JE, Marson O, Casarini DE. (2003). N-Domain Angiotensin I-Converting Enzyme With 80 kDa as a Possible Genetic Marker of Hypertension. Hypertension. 42(4):693-701

61. Sturrock ED, Danilov SM, Riordan JF. (1997). Limited Proteolysis of Human Kidney Angiotensin-Converting Enzyme and Generation of Catalytically Active N- and C-Terminal Domains. Biochem. Biophys. Res. Commun. 236(1):16-19

62. Биневский ПВ, Никольская ИИ, Позднев ВФ, Кост ОА. (2000). Получение и характеристика N-домена ангиотензин-превращающего фермента быка. Биохимия. 65(6):765-74

63. Ronchi FA, Andrade MCC, Carmona AK, Krieger JE, Casarini DE. (2005). N-domain angiotensin-converting enzyme isoform expression in tissues of Wistar and spontaneously hypertensive rats. J. Hypertens. 23(10):1869-78

64. Camargo de Andrade MC, Di Marco GS, de Paulo Castro Teixeira V, Mortara RA, Sabatini RA, и др. (2006). Expression and localization of N-domain ANG I-converting enzymes in mesangial cells in culture from spontaneously hypertensive rats. Am. J. Physiol. Renal Physiol. 290(2):F364-75

65

66

67

68

69

70

71

72

73

74

75

76

77

78

Soubrier F, Alhenc-gelas FOIS, Hubert C, Allegrini J, Johnt M, u gp. (1988). Two putative active centers in human angiotensin I-converting enzyme revealed by molecular cloning. . 85:9386-90

Hubert C, Houot A, Corvol P, Soubrier F. (1991). Structure of the Angiotensin I-converting Enzyme Gene. Two alternate promoters correspond to evolutionary steps of a duplicated gene. J. Biol. Chem. 266:15377-83

Howard TE, Shai SY, Langford KG, Martin BM, Bernstein KE. (1990). Transcription of testicular angiotensin-converting enzyme (ACE) is initiated within the 12th intron of the somatic ACE gene. Mol. Cell. Biol. 10(8):4294-4302

Ehlers MR, Riordan JF. (1989). Angiotensin-converting enzyme: new concepts concerning its biological role. Biochemistry. 28(13):5311-18

Langford KG, Shai SY, Howard TE, Kovac MJ, Overbeek PA, Bernstein KE. (1991). Transgenic mice demonstrate a testis-specific promoter for angiotensin-converting enzyme. J. Biol. Chem. 266(24):15559-62

Hooper NM. (1994). Families of zinc metalloproteases. FEBSLett. 354(1):1-6

Rawlings ND, Morton FR, Kok CY, Kong J, Barrett AJ. (2008). MEROPS: the peptidase database. Nucleic Acids Res. 36:D320-5

Spyroulias GA, Galanis AS, Pairas G, Manessi-zoupa E. (2004). Structural Features of Angiotensin-I Converting Enzyme Catalytic Sites: Conformational Studies in Solution , Homology Models and Comparison with Other Zinc Metallopeptidases. Curr Top Med Chem. 4(4):403-29

Wei L, Alhenc-Gelas F, Corvol P, Clauser E. (1991). The Two Homologous Domains of Human Angiotensin I-converting Enzyme Are Both Catalytically Active. J. Biol. Chem. 266:9002-8

Anthony CS, Masuyer G, Sturrock ED, Acharya KR. (2012). Structure Based Drug Design of Angiotensin-I Converting Enzyme Inhibitors. Curr. Med. Chem. 19:845-55

Ehlers MRW, Chen YNP, Riordan JF. (1992). The unique N-terminal sequence of testis angiotensin-converting enzyme is heavily O-glycosylated and unessential for activity or stability. Biochem. Biophys. Res. Commun. 183(1):199-205

Ripka JE, Ryan JW, Valido F a, Chung a Y, Peterson CM, Urry RL. (1993). N-glycosylation of forms of angiotensin converting enzyme from four mammalian species. Biochem. Biophys. Res. Commun. 196(2):503-8

Orth T, Voronov S, Binevski P, Saenger W, Kost O. (1998). Glycosylation of bovine pulmonary angiotensin-converting enzyme modulates its catalytic properties. FEBS Lett. 431(2):255-58

Naim HY. (1996). Secretion of human intestinal angiotensin-converting enzyme and its association with the differentiation state of intestinal cells. Biochem. J. 316 ( Pt 1):259-64

79. Yu XC, Sturrock ED, Wu Z, Biemann K, Ehlers MR, Riordan JF. (1997). Identification of N-linked glycosylation sites in human testis angiotensin-converting enzyme and expression of an active deglycosylated form. J. Biol. Chem. 272(6):3511—19

80. Liu T, Qian W-J, Gritsenko MA, Camp DG, Monroe ME, u gp. (2005). Human Plasma N -Glycoproteome Analysis by Immunoaffinity Subtraction, Hydrazide Chemistry, and Mass Spectrometry. J. Proteome Res. 4(6):2070-80

81. Picard V, Ersdal-Badju E, Bock SC. (1995). Partial glycosylation of antithrombin III asparagine-135 is caused by the serine in the third position of its N-glycosylation consensus sequence and is responsible for production of the beta-antithrombin III isoform with enhanced heparin affinity. Biochemistry. 34(26):8433-40

82. Bull HG, Thornberry NA, Cordes EH. (1985). Purification of angiotensin-converting enzyme from rabbit lung and human plasma by affinity chromatography. J. Biol. Chem. 260(5):2963-72

83. Gordon K, Redelinghuys P, Schwager SLU, Ehlers MRW, Papageorgiou AC, u gp. (2003). Deglycosylation, processing and crystallization of human testis angiotensin-converting enzyme. Biochem. J. 371(2):437-42

84. Watermeyer JM, Sewell BT, Schwager SL, Natesh R, Corradi HR, u gp. (2006). Structure of testis ACE glycosylation mutants and evidence for conserved domain movement. Biochemistry. 45(42):12654-63

85. Natesh R, Schwager SLU, Sturrock ED, Acharya KR. (2003). Crystal structure of the human enzyme - lisinopril complex. Nature. 421(1995):1427-29

86. Masuyer G, Yates CJ, Sturrock ED, Acharya KR. (2014). Angiotensin-I converting enzyme (ACE): Structure, biological roles, and molecular basis for chloride ion dependence. Biol. Chem. 395(10):1135-49

87. Corradi HR, Chitapi I, Sewell BT, Georgiadis D, Dive V, u gp. (2007). The structure of testis angiotensin-converting enzyme in complex with the C domain-specific inhibitor RXPA380. Biochemistry. 46(18):5473-78

88. Towler P, Staker B, Prasad SG, Menon S, Tang J, u gp. (2004). ACE2 X-Ray Structures Reveal a Large Hinge-bending Motion Important for Inhibitor Binding and Catalysis. J. Biol. Chem. 279(17):17996-7

89. Corradi HR, Schwager SLU, Nchinda AT, Sturrock ED, Acharya KR. (2006). Crystal structure of the N domain of human somatic angiotensin I-converting enzyme provides a structural basis for domain-specific inhibitor design. J. Mol. Biol. 357(3):964-74

90. Masuyer G, Douglas RG, Sturrock ED, Acharya KR. (2015). Structural basis of Ac-SDKP hydrolysis by Angiotensin-I converting enzyme. Sci Rep. 5:13742

91. Lubbe L, Sewell BT, Sturrock ED. (2016). The influence of angiotensin converting enzyme mutations on the kinetics and dynamics of N-domain selective inhibition. FEBS J. 283(21):3941-61

92. Guy JL, Jackson RM, Acharya KR, Sturrock ED, Hooper NM, u gp. (2003). Angiotensinconverting enzyme-2 (ACE2): Comparative modeling of the active site, specificity requirements, and chloride dependence. Biochemistry. 42(45):13185-13192

93. Fernandez JH, Hayashi MAF, Camargo ACM, Neshich G. (2003). Structural basis of the lisinopril-binding specificity in N- and C-domains of human somatic ACE. Biochem. Biophys. Res. Commun. 308(2):219-26

94. Akif M, Masuyer G, Schwager SLU, Bhuyan BJ, Mugesh G, u gp. (2011). Structural characterization of angiotensin I-converting enzyme in complex with a selenium analogue of captopril. FEBS J. 278(19):3644-50

95. Sharma RK, Espinoza-Moraga M, Poblete H, Douglas RG, Sturrock ED, u gp. (2016). The Dynamic Nonprime Binding of Sampatrilat to the C-Domain of Angiotensin-Converting Enzyme. J. Chem. Inf Model. 56(12):2486-94

96. Cozier GE, Schwager SL, Sharma RK, Chibale K, Sturrock ED, Acharya KR. (2018). Crystal structures of sampatrilat and sampatrilat-Asp in complex with human ACE: a molecular basis for domain-selectivity. FEBS J. 285(8):1477-90

97. Anthony CS, Corradi HR, Schwager SLU, Redelinghuys P, Georgiadis D, u gp. (2010). The N domain of human angiotensin-I-converting enzyme: The role of N-glycosylation and the crystal structure in complex with an N domain-specific phosphinic inhibitor, RXP407. J. Biol. Chem. 285(46):35685-93

98. Akif M, Schwager SL, Anthony CS, Czarny B, Beau F, u gp. (2011). Novel mechanism of inhibition of human angiotensin-I-converting enzyme (ACE) by a highly specific phosphinic tripeptide. Biochem. J. 436(1):53-59

99. Jaspard E, Wei L, Alhenc-Gelas F. (1993). Differences in the properties and enzymatic specificities of the two active sites of angiotensin I-converting enzyme (kininase II): Studies with bradykinin and other natural peptides. J. Biol. Chem. 268(13):9496-9503

100. Jaspard E, Alhenc-Gelas F. (1995). Catalytic properties of the two active sites of angiotensin I-converting enzyme on the cell surface. Biochem. Biophys. Res. Commun. 211(2):528-34

101. Araujo MC, Melo RL, Cesari MH, Juliano MA, Juliano L, Carmona AK. (2000). Peptidase specificity characterization of C- and N-terminal catalytic sites of angiotensin I-converting enzyme. Biochemistry. 39(29):8519-25

102. Binevski P V., Sizova EA, Pozdnev VF, Kost OA. (2003). Evidence for the negative cooperativity of the two active sites within bovine somatic angiotensin-converting enzyme. FEBS Lett. 550(1-3):84-88

103. Skirgello OE, Binevski P V, Pozdnev VF, Kost O a. (2005). Kinetic probes for inter-domain co-operation in human somatic angiotensin-converting enzyme. Biochem. J. 391(3):641-47

104. Grinshtein S V, Nikolskaya II, Klyachko NL, Levashov A V, Kost OA. (1999). Structural organization of membrane and soluble forms of somatic angiotensin-converting enzyme. Biochemistry. (Mosc). 64(5):571-80

105. Baudin B, Timmins PA, Drouet L, Legrand Y, Baumann FC. (1988). Molecular weight and shape of angiotensin-I converting enzyme. A neutron scattering study. Biochem. Biophys. Res. Commun. 154(3):1144-50

106. Kost OA, Balyasnikova I V., Chemodanova EE, Nikolskaya II, Albrecht RF, Danilov SM. (2003). Epitope-dependent blocking of the angiotensin-converting enzyme dimerization by monoclonal antibodies to the N-terminal domain of ACE: Possible link of ACE dimerization and shedding from the cell surface. Biochemistry. 42(23):6965-76

107. Chen HL, Lünsdorf H, Hecht HJ, Tsai H. (2010). Porcine pulmonary angiotensin I-converting enzyme — Biochemical characterization and spatial arrangement of the N- and C-domains by three-dimensional electron microscopic reconstruction. Micron. 41(6):674-85

108. Danilov SM, Gordon K, Nesterovitch AB, Lünsdorf H, Chen Z, u gp. (2011). An angiotensin I-converting enzyme mutation (Y465D) causes a dramatic increase in blood ACE via accelerated ACE shedding. PLoS One. 6(10):e25952

109. Acharya KR, Sturrock ED, Riordan JF, Ehlers MRW. (2003). Ace revisited: a new target for structure-based drug design. Nat. Rev. DrugDiscov. 2(11):891-902

110. Das M, Hartley J, Soffers R. (1977). Serum angiotensin-converting enzyme. Isolation and relationship to the pulmonary enzyme. J. Biol. Chem. 252(1):1316—19

111. Schweisfurth H, Schiöberg-Schiegnitz S. (1984). Assay and biochemical characterization of angiotensin-I-converting enzyme in cerebrospinal fluid. Enzyme. 32(1):12—19

112. El-Dorry HA, MacGregor JS, Soffer RL. (1983). Dipeptidyl carboxypeptidase from seminal fluid resembles the pulmonary rather than the testicular isoenzyme. Biochem. Biophys. Res. Commun. 115(3):1096-1100

113. Yasui T, Alhenc-Gelas F, Corvol P, Menard J. (2017). Angiotensin I-converting enzyme in amniotic fluid. J. Lab. Clin. Med. 104(5):741-51

114. Hooper NM, Turner AJ. (1987). Isolation of two differentially glycosylated forms of peptidyl-dipeptidase A (angiotensin converting enzyme) from pig brain: a re-evaluation of their role in neuropeptide metabolism. Biochem. J. 241(3):625-33

115. Oppong SY, Hooper NM. (1993). Characterization of a secretase activity which releases angiotensin-converting enzyme from the membrane. Biochem. J. 292(2):597-603

116. Sugimura K, Tian XL, Hoffmann S, Ganten D, Bader M. (1998). Alternative splicing of the mRNA coding for the human endothelial angiotensin-converting enzyme: a new mechanism for solubilization. Biochem. Biophys. Res. Commun. 247(2):466-72

117. Allinson TMJ, Parkin ET, Condon TP, Schwager SLU, Sturrock ED, u gp. (2004). The role of ADAM10 and ADAM17 in the ectodomain shedding of angiotensin converting enzyme and the amyloid precursor protein. Eur. J. Biochem. 271(12):2539-47

118. Thimon V, Métayer S, Belghazi M, Dacheux F, Dacheux J-L, Gatti J-L. (2005). Shedding of the Germinal Angiotensin I-Converting Enzyme (gACE) Involves a Serine Protease and Is Activated by Epididymal Fluid. Biol. Reprod. 73(5):881-90

119. Ramchandran R, Sen G, Misono K, Sen I. (1994). Regulated cleavage-secretion of the membrane-bound angiotensin- converting enzyme. J. Biol. Chem. 269(3):2125-30

120. Woodman ZL, Oppong SY, Cook S, Hooper NM, Schwager SL, u gp. (2000). Shedding of somatic angiotensin-converting enzyme (ACE) is inefficient compared with testis ACE despite cleavage at identical stalk sites. Biochem. J. 347(3):711—18

121. Corvol P, Eyries M, Soubrier F. (2004). Peptidyl-dipeptidase A/Angiotensin I-converting enzyme. B Handbook of Proteolytic Enzymes, peg. A Barret, NJ Rawlings, J Woessner, cc. 332-349. New York: Elsevier Academic Press

122. Chubb AJ, Schwager SL., van der Merwe E, Ehlers MR., Sturrock ED. (2004). Deletion of the cytoplasmic domain increases basal shedding of angiotensin-converting enzyme. Biochem. Biophys. Res. Commun. 314(4):971-75

123. Beldent V, Michaud A, Bonnefoy C, Chauvet M-T, Corvol P. (1995). Cell Surface Localization of Proteolysis of Human Endothelial Angiotensin I-converting Enzyme. J. Biol. Chem. 270(48):28962-69

124. Woodman ZL, Schwager SLU, Redelinghuys P, Chubb AJ, Van Der Merwe EL, u gp. (2006). Homologous substitution of ACE C-domain regions with N-domain sequences: Effect on processing, shedding, and catalytic properties. Biol. Chem. 387(8):1043-51

125. Woodman ZL, Schwager SLU, Redelinghuys P, Carmona AK, Ehlers MRW, Sturrock ED. (2005). The N domain of somatic angiotensin-converting enzyme negatively regulates ectodomain shedding and catalytic activity. Biochem. J. 389(3):739-44

126. Nesterovitch AB, Hogarth KD, Adarichev VA, Vinokour EI, Schwartz DE, u gp. (2009). Angiotensin I-converting enzyme mutation (Trp1197Stop) causes a dramatic increase in blood ACE. PLoS One. 4(12):1-15

127. Eyries M, Michaud A, Deinum J, Agrapart M, Chomilier J, u gp. (2001). Increased Shedding of Angiotensin-converting Enzyme by a Mutation Identified in the Stalk Region. J. Biol. Chem. 276(8):5525-32

128. Kramers C, Danilov SM, Deinum J, Balyasnikova I V, Scharenborg N, u gp. (2001). Point mutation in the stalk of angiotensin-converting enzyme causes a dramatic increase in serum angiotensin-converting enzyme but no cardiovascular disease. Circulation. 104(11):1236-40

129. Conrad N, Schwager SLU, Carmona AK, Sturrock ED. (2016). The effect of structural motifs on the ectodomain shedding of human angiotensin-converting enzyme. Biochem. Biophys. Res. Commun. 481(1-2):111-16

130. Danilov S, Savoie F, Lenoir B, Jeunemaitre X, Azizi M, u gp. (1996). Development of enzyme-linked immunoassays for human angiotensin I converting enzyme suitable for large-scale studies. J. Hypertens. 14(6):719-27

131. Наперова ИА. (2009). Диссертация на соискание ученой степени кандидата химических наук «Эпитопное картирование С-концевого домена ангиотензин-превращающего фермента человека»

132. Silverstein E, Pertschuk LP, Friedland J. (1979). Immunofluorescent localization of angiotensin converting enzyme in epithelioid and giant cells of sarcoidosis granulomas. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 76(12):6646-48

133. Baughman RP, Fernandez M, Bosken CH, Mantil J, Hurtubise P. (1984). Comparison of Gallium-67 Scanning, Bronchoalveolar Lavage, and Serum Angiotensin-Converting Enzyme Levels in Pulmonary Sarcoidosis. Am. Rev. Respir. Dis. 129(5):676-81

134. Sugimoto M, Nishi R, Ando M, Nakashima H, Araki S. (1986). Activation of alveolar macrophages in pulmonary sarcoidosis: lack of correlation with serum angiotensin-converting enzyme activity. Jpn. J. Med. 25(2):135-43

135. Lieberman J, Schleissner LA, Nosal A, Sastre A, Mishkin FS. (1983). Clinical Correlations of Serum Angiotensin-Converting Enzyme (ACE) in Sarcoidosis: A Longitudinal Study of Serum ACE, 67Gallium Scans, Chest Roentgenograms, and Pulmonary Function. Chest. 84(5):522-28

136. Ainslie GM, Benatar SR. (1985). Serum angiotensin converting enzyme in sarcoidosis: sensitivity and specificity in diagnosis: correlations with disease activity, duration, extra-thoracic involvement, radiographic type and therapy. Q. J. Med. 55(218):253-70

137. Ryder KW, Jay SJ, Kiblawi SO, Hull MT. (1983). Serum angiotensin converting enzyme activity in patients with histoplasmosis. JAMA. 249(14):1888-89

138. Brice EA, Friedlander W, Bateman ED, Kirsch RE. (1995). Serum angiotensin-converting enzyme activity, concentration, and specific activity in granulomatous interstitial lung disease, tuberculosis, and COPD. Chest. 107(3):706-10

139. Patel R, Ansari A. (1979). Serum angiotensin converting enzyme activity in patients with chronic renal failure on long term hemodialysis. Clin. Chim. Acta. 92(3):491-95

140. Silverstein E, Brunswick J, Rao TK, Friedland J. (1984). Increased serum angiotensin-converting enzyme in chronic renal disease. Nephron. 37(3):206-10

141. Stanislav ML, Balabanova RM, Alekperov RT, Miagkova MA, Abramenko T V, и др. (2001). [Autoantibodies to vasoactive peptides and angiotensin converting enzyme in patients with systemic diseases of the connective tissue]. Ter. Arkh. 73(5):20-25

142. Мягкова МА, Абраменко ТВ, Киселев ИП, Станислав МЛ, Кост ОА, и др. (2000). Определение естественных иммуноглобулинов к ангиотензин-превращающему ферменту и вазоактивным пептидам в сыворотках крови больных системными заболеваниями соединительной ткани. Вестник Московского университета. Серия 2 Химия. 41(6):419-22

143. Abramenko T V, Panchenko ON, Miagkova MA, Kost OA, Nikol'skaia II, и др. (2000). [Detection of natural anti-angiotensin converting enzyme antibodies in human serum using immunoenzyme technique ]. Klin. Lab. Diagn. 12:22-24

144. Ройт А, Бростофф Д, Мейл Д. (2000). Иммунология. Москва: Мир

145. Zola H. (1987). Monoclonal antibodies. New York: Springer-Verlag

146. Marcos-Silva L, Narimatsu Y, Halim A, Campos D, Yang Z, и др. (2014). Characterization of binding epitopes of CA125 monoclonal antibodies. J. Proteome Res. 13:3349-3359

147. Balyasnikova I V., Metzger R, Franke FE, Conrad N, Towbin H, и др. (2008). Epitope mapping of mAbs to denatured human testicular ACE (CD143). Tissue Antigens. 72(4):354-68

148. Nikolaeva MA, Balyasnikova I V., Alexinskaya MA, Metzger R, Franke FE, и др. (2006). Testicular isoform of angiotensin I-converting enzyme (ACE, CD143) on the surface of human spermatozoa: Revelation and quantification using monoclonal antibodies. Am. J. Reprod. Immunol. 55(1):54-68

149. Balyasnikova I V., Sun Z-L, Franke FE, Berestetskaya Y V., Chubb AJ, и др. (2005). Monoclonal antibodies 1B3 and 5C8 as probes for monitoring the integrity of the C-terminal end of soluble angiotensin-converting enzyme. Hybridoma (Larchmt). 24(1):14-26

150. Danilov SM, Watermeyer JM, Balyasnikova I V., Gordon K, Kugaevskaya E V., и др. (2007). Fine epitope mapping of monoclonal antibody 5F1 reveals anticatalytic activity toward the N domain of human angiotensin-converting enzyme. Biochemistry. 46(31):9019-31

151. Ramshaw HS, Haylock D, Swart B, Gronthos S, Horsfall MJ, и др. (2001). Monoclonal antibody BB9 raised against bone marrow stromal cells identifies a cell-surface glycoprotein expressed by primitive human hemopoietic progenitors. Exp. Hematol. 29(8):981-92

152. Danilov SM, Sadovnikova E, Scharenborg N, Balyasnikova I V, Svinareva DA, и др. (2003). Angiotensin-converting enzyme (CD143) is abundantly expressed by dendritic cells and discriminates human monocyte-derived dendritic cells from acute myeloid leukemia-derived dendritic cells. Exp. Hematol. 31(12):1301-9

153. Danilov SM, Martynov A V, Klibanov AL, Slinkin MA, Sakharov IYu S, и др. (1989). Radioimmunoimaging of lung vessels: an approach using indium-111-labeled monoclonal antibody to angiotensin-converting enzyme. J. Nucl. Med. 30(10):1686-92

154. Danilov SM, Faerman AI, Printseva OYu, Martynov A V, Sakharov IYu, Trakht IN. (1987). Immunohistochemical study of angiotensin-converting enzyme in human tissues using monoclonal antibodies. Histochemistry. 87(5):487-90

155. Muzykantov VR, Atochina EN, Kuo A, Barnathan ES, Notarfrancesco K, и др. (1996). Endothelial cells internalize monoclonal antibody to angiotensin-converting enzyme. Am. J. Physiol. 270(5 Pt 1):L704-13

156. Muzykantov VR, Barnathan ES, Atochina EN, Kuo A, Danilov SM, Fisher AB. (1996). Targeting of antibody-conjugated plasminogen activators to the pulmonary vasculature. J. Pharmacol. Exp. Ther. 279(2):1026-34

157. Atochina EN, Muzykantov VR, Al-Mehdi AB, Danilov SM, Fisher AB. (1997). Normoxic Lung Ischemia/Reperfusion Accelerates Shedding of Angiotensin Converting Enzyme from the Pulmonary Endothelium. Am. J. Respir. Crit. Care Med. 156(4):1114—19

158. Muzykantov VR, Atochina EN, Ischiropoulos H, Danilov SM, Fisher AB. (1996). Immunotargeting of antioxidant enzyme to the pulmonary endothelium. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 93:5213-18

159. Atochina EN, Balyasnikova I V, Danilov SM, Granger DN, Fisher AB, Muzykantov VR. (1998). Immunotargeting of catalase to ACE or ICAM-1 protects perfused rat lungs against oxidative stress. Am. J. Physiol. 275(4 Pt 1):L806-17

160. Nowak K, Hanusch C, Nicksch K, Metzger RP, Beck G, u gp. (2010). Pre-ischaemic conditioning of the pulmonary endothelium by immunotargeting of catalase via angiotensin-converting-enzyme antibodies^^^. Eur. J. Cardio-Thoracic Surg. 37(4):859-63

161. Nowak K, Kölbel HC, Metzger RP, Hanusch C, Frohnmeyer M, u gp. (2013). Immunotargeting of the Pulmonary Endothelium via Angiotensin-Converting-Enzyme in Isolated Ventilated and Perfused Human Lung. B Advances in experimental medicine and biology. 756:203-12

162. Reynolds PN, Zinn KR, Gavrilyuk VD, Balyasnikova I V., Rogers BE, u gp. (2000). A Targetable, Injectable Adenoviral Vector for Selective Gene Delivery to Pulmonary Endothelium in Vivo. Mol. Ther. 2(6):562-78

163. Miller WH, Brosnan MJ, Graham D, Nicol CG, Morecroft I, u gp. (2005). Targeting endothelial cells with adenovirus expressing nitric oxide synthase prevents elevation of blood pressure in stroke-prone spontaneously hypertensive rats. Mol. Ther. 12(2):321-27

164. Metzger R, Bohle RM, Pauls K, Eichner G, Alhenc-Gelas F, u gp. (1999). Angiotensinconverting enzyme in non-neoplastic kidney diseases. Kidney Int. 56(4):1442-54

165. Pauls K, Metzger R, Steger K, Klonisch T, Danilov S, Franke FE. (2003). Isoforms of angiotensin I-converting enzyme in the development and differentiation of human testis and epididymis. Andrologia. 35(1):32-43

166. Jokubaitis VJ, Sinka L, Driessen R, Whitty G, Haylock DN, u gp. (2008). Angiotensinconverting enzyme (CD143) marks hematopoietic stem cells in human embryonic, fetal, and adult hematopoietic tissues. Blood. 111:4055-63

167. Balyasnikova I V, Metzger R, Franke FE, Danilov SM. (2003). Monoclonal antibodies to denatured human ACE (CD 143), broad species specificity, reactivity on paraffin sections, and detection of subtle conformational changes in the C-terminal domain of ACE. Tissue Antigens. 61(1):49-62

168. Danilov SM, Deinum J, Balyasnikova I V, Sun Z-L, Kramers C, и др. (2005). Detection of Mutated Angiotensin I-Converting Enzyme by Serum/Plasma Analysis Using a Pair of Monoclonal Antibodies. Clin. Chem. 51(6):1040-43

169. Danilov SM, Wade MS, Schwager SL, Douglas RG, Nesterovitch AB, и др. (2014). A novel angiotensin I-converting enzyme mutation (S333W) impairs N-domain enzymatic cleavage of the anti-fibrotic peptide, AcSDKP. PLoS One. 9(2):1-12

170. Kost OA, Orth TA, Nikolskaya II, Nametkin SN, Levashov AV. (1998). Carbohydrates regulate the dimerization ot angiotensin-converting enzyme. Biochem. Mol. Biol. Int. 44:535-42

171. Kost OA, Bovin NV, Chemodanova EE, Nasonov VV, Orth TA. (2000). New feature of angiotensin-converting enzyme: carbohydrate-recognizing domain. J. Mol. Recognit. 13:360-69

172. Balyasnikova I V, Karran EH, Albrecht RF, Danilov SM. (2002). Epitope-specific antibody-induced cleavage of angiotensin-converting enzyme from the cell surface. Biochem. J. 362(3):585-95

173. Brown CK, Madauss K, Lian W, Beck RM, Tolbert WD, Rodgers DW. (2001). Structure of neurolysin reveals a deep channel that limits substrate access. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 98:3127-32

174. Varki A. (1993). Biological roles of oligosaccharides: all of the theories are correct. Glycobiology. 3(2):97-130

175. Su Y, Royle L, Radcliffe CM, Harvey DJ, Dwek RA, и др. (2009). Detailed N-glycan analysis of mannose receptor purified from murine spleen indicates tissue specific sialylation. Biochem. Biophys. Res. Commun. 384(4):436-43

176. Trottein F, Schaffer L, Ivanov S, Paget C, Vendeville C, и др. (2009). Glycosyltransferase and sulfotransferase gene expression profiles in human monocytes, dendritic cells and macrophages. Glycoconj. J. 26(9):1259-74

177. Ching SF, Hayes LW, Slakey LL. (1983). Angiotensin-converting enzyme in cultured endothelial cells. Synthesis, degradation, and transfer to culture medium. Arteriosclerosis. 3(6):581-88

178. Араблинская НЕ, Наперова ИА, Купавцева ЕА, Грачева МП, Бирон ЭВ, и др. (2013). Особенности связывания моноклональных антител с ангиотензин-превращающим ферментом плазмы крови у больных саркоидозом органов дыхания. МедАльянс. 3:8187

179. Lucchi L, Bergamini S, Iannone A, Perrone S, Stipo L, и др. (2005). Erythrocyte susceptibility to oxidative stress in chronic renal failure patients under different substitutive treatments. Artif. Organs. 29(1):67-72

180. Hruska KS, LaMarca ME, Scott CR, Sidransky E. (2008). Gaucher disease: mutation and polymorphism spectrum in the glucocerebrosidase gene (GBA). Hum. Mutat. 29(5):567-83

141

181

182

183

184

185

186

187

188

189

190

191

192

193

194

Mistry PK, Lopez G, Schiffmann R, Barton NW, Weinreb NJ, Sidransky E. (2017). Gaucher disease: Progress and ongoing challenges. Mol. Genet. Metab. 120(1-2):8-21

Aerts JMFG, Kallemeijn WW, Wegdam W, Joao Ferraz M, van Breemen MJ, u gp. (2011). Biomarkers in the diagnosis of lysosomal storage disorders: proteins, lipids, and inhibodies. J. Inherit. Metab. Dis. 34(3):605-19

Hollak CE, van Weely S, van Oers MH, Aerts JM. (1994). Marked elevation of plasma chitotriosidase activity. A novel hallmark of Gaucher disease. J. Clin. Invest. 93(3):1288-92

Vellodi A, Foo Y, Cole TJ. (2005). Evaluation of three biochemical markers in the monitoring of Gaucher disease. J. Inherit. Metab. Dis. 28(4):585-92

Boot RG, Verhoek M, de Fost M, Hollak CEM, Maas M, u gp. (2004). Marked elevation of the chemokine CCL18/PARC in Gaucher disease: a novel surrogate marker for assessing therapeutic intervention. Blood. 103(1):33-39

van Breemen MJ, de Fost M, Voerman JSA, Laman JD, Boot RG, u gp. (2007). Increased plasma macrophage inflammatory protein (MIP)-1a and MIP-1ß levels in type 1 Gaucher disease. Biochim. Biophys. Acta - Mol. Basis Dis. 1772(7):788-96

Murugesan V, Chuang W-L, Liu J, Lischuk A, Kacena K, u gp. (2016). Glucosylsphingosine is a key biomarker of Gaucher disease. Am. J. Hematol. 91(11):1082-89

Wyndham CR. (2000). Atrial fibrillation: the most common arrhythmia. Tex. Heart Inst. J. 27(3):257-67

Xiao HD, Fuchs S, Campbell DJ, Lewis W, Dudley SC, u gp. (2004). Animal Model Mice with Cardiac-Restricted Angiotensin-Converting Enzyme (ACE) Have Atrial Enlargement, Cardiac Arrhythmia, and Sudden Death. Am. J. Pathol. 165(3):1019-32

Kasi VS, Xiao HD, Shang LL, Iravanian S, Langberg J, u gp. (2007). Cardiac-restricted angiotensin-converting enzyme overexpression causes conduction defects and connexin dysregulation. AJP - Hear. Circ. Physiol. 293(1):H182-92

Sakharov IY, Danilov SM, Dukhanina EA. (1987). Affinity chromatography and some properties of the angiotensin-converting enzyme from human heart. Biochim Biophys Acta. 923:143-49

Garats E V, Nikolskaya II, Binevski P V, Pozdnev VF, Kost OA. (2001). Characterization of bovine atrial angiotensin-converting enzyme. Biochemistry. (Mosc). 66(4):429-34

Harris RB, Wilson IB. (1984). Atrial tissue contains a metallo dipeptidyl carboxyhydrolase not present in ventricular tissue: partial purification and characterization. Arch. Biochem. Biophys. 233(2):667-75

Sakharov IY, Dukhanina EA, Molokoedov AS, Danilov SM, Ovchinnikov M V, u gp. (1988). Atriopeptin 2 is hydrolysed by cardiac but not pulmonary isozyme of angiotensin-converting enzyme. Biochem. Biophys. Res. Commun. 151(1):109-13

195

196

197

198

199

200

201

202

203

204

205

206

207

208

209

Lanzillo JJ, Dasarathy Y, Stevens J, Fanburg BL. (1986). Conversion of angiotensin-I to angiotensin-2 by a latent endothelial cell peptidyl dipeptidase that is not angiotensin-converting enzyme. . 134(2):770-76

Harris RB, Wilson IB. (1985). Conversion of atriopeptin II to atriopeptin I by atrial dipeptidyl carboxy hydrolase. Peptides. 6(3):393-96

Soler DF, Harris RB. (1989). Atrial dipeptidyl carboxyhydrolase is a zinc-metallo proteinase which possesses tripeptidyl carboxyhydrolase activity. Peptides. 10(1):63-68

Fabris B, Yamada H, Cubela R, Jackson B, Mendelsohn F a, Johnston CI. (1990). Characterization of cardiac angiotensin converting enzyme (ACE) and in vivo inhibition following oral quinapril to rats. Br. J. Pharmacol. 100(3):651-55

Laemmli UK. (1970). Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature. 227(5259):680-85

Lowry OH, Rosebrough NJ, Farr AL, Randall RJ. (1951). Protein measurement with the Folin phenol reagent. J. Biol. Chem. 193(1):265-75

Holmquist B, Bunning P, Riordan JF. (1979). A continuous spectrophotometric assay for angiotensin-converting enzyme. Anal. Biochem. 95:540-48

Piquilloud Y, Reinharz A, Roth M. (1970). Studies on the angiotensin converting enzyme with different substrates. Biochim. Biophys. Acta. 206(1):136-42

Bieth JG. (1995). Theoretical and practical aspects of proteinase inhibition kinetics. Methods Enzymol. 248:59-84

Ikemoto F, Song GB, Tominaga M, Yamamoto K. (1989). Endogenous inhibitor of angiotensin converting enzyme in the rat heart. Biochem. Biophys. Res. Commun. 159(3):1093-99

Thevananther S, Brecher AS. (1999). Isolation of angiotensin converting enzyme (ACE) binding protein from human serum with an ACE affinity column. Can. J. Physiol. Pharmacol. 77(3):216-23

Fagyas M, Uri K, Siket IM, Fülöp GA, Csato V, u gp. (2014). New perspectives in the Renin-Angiotensin-Aldosterone System (RAAS) II: Albumin suppresses Angiotensin Converting Enzyme (ACE) activity in human. PLoS One. 9(4):e87844

Vago T, Bevilacqua M, Conci F, Baldi G, Ongini E, u gp. (1992). Angiotensin converting enzyme binding sites in human heart and lung: comparison with rat tissues. Br. J. Pharmacol. 107(3):821-25

The Human Protein Atlas. https://www.proteinatlas.org/

Adar T, Ilan Y, Elstein D, Zimran A. (2016). Liver involvement in Gaucher disease -Review and clinical approach. Blood Cells, Mol. Dis. 68:66-73

210. Nielsen J, R0mer F, Ellegaard J. (1982). Serum angiotensin-converting enzyme and blood monocytes in splenectomized individuals. - PubMed - NCBI. Acta Haematol. 67(2):132-35

211. Silverstein E, Pertschuk LP, Friedland J. (1980). Immunofluorescent detection of angiotensin-converting enzyme (ACE) in Gaucher cells. Am. J. Med. 69(3):408-10

212. Ashwell G, Harford J. (1982). Carbohydrate-Specific Receptors of the Liver. Annu. Rev. Biochem. 51(1):531-54

213. Ivanova M, Limgala RP, Changsila E, Kamath R, Ioanou C, Goker-Alpan O. (2016). Gaucheromas: When macrophages promote tumor formation and dissemination. Blood Cells, Mol. Dis. 68:100-105

214. Elisseeva Yu E, Pavlikhina L V, Shavghulidze T V, Messina E, Giacomello A, u gp. (1993). Angiotensin-converting enzyme activator from purified human neutrophils. Biochem. Mol. Biol. Int. 30(4):665-73

215. Elisseeva Yu E, Sinanjan ES, Kugaevskaja E V. (1994). The presence of angiotensin-converting enzyme activator in bovine tissues. Biochem. Mol. Biol. Int. 32(1):173-80

216. Rice GI, Thomas DA, Grant PJ, Turner AJ, Hooper NM. (2004). Evaluation of angiotensin-converting enzyme (ACE), its homologue ACE2 and neprilysin in angiotensin peptide metabolism. Biochem. J. 383(1):45-51

217. Brogren H, Sihlbom C, Wallmark K, Lonn M, Deinum J, u gp. (2008). Heterogeneous glycosylation patterns of human PAI-1 may reveal its cellular origin. Thromb. Res. 122(2):271-81

218. Kalinska M, Meyer-Hoffert U, Kantyka T, Potempa J. (2016). Kallikreins - The melting pot of activity and function. Biochimie. 122:270-82

219. Weigel PH. (1994). Hypothesis: Galactosyl and N-acetylgalactosaminyl homeostasis: A function for mammalian asialoglycoprotein receptors. BioEssays. 16(7):519-24

220. Paduch M, Koide A, Uysal S, Rizk SS, Koide S, Kossiakoff AA. (2013). Generating conformation-specific synthetic antibodies to trap proteins in selected functional states. Methods. 60(1):3-14