Гемопоэтические стволовые клетки пуповинной и периферической крови у детей (характеристика, процессинг и моделирование биологических свойств для клинического использования) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.09, доктор медицинских наук Румянцев, Сергей Александрович

• Румянцев, Сергей Александрович
• доктор медицинских наук
• 2007

Оглавление диссертации доктор медицинских наук Румянцев, Сергей Александрович

ВВЕДЕНИЕ.—

Глава! ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Этапы становления эмбрионального кроветворения

1.2. Общая характеристика пуповинной крови. Особенности подсчета 16 и дифференцировки клеточных элементов пуповинной крови

1.3■ Факторы, влияющие на состав пуповинной крови

1.4■ Спонтанный апоптоз и некроз клеток крови

1.5. Новые направления клеточных технологий

1.6. Механизмы Г-КСФ индуцированной мобилизации CD34'клеток

1.7. Механизмы хоуминг-эффекта 57 1.8■ Возможности идентификации, выделения и моделирования 63 биологических свойств гемопоэтических стволовых клеток

1.9■ Организация банков пуповинной крови

1.10. Технологии сбора пуповинной крови

1.11. Обработка, замораживание и хранение пуповинной крови с целью 94 трансплантации

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

Глава 3 КЛЕТОЧНЫЙ СОСТАВ ПУПОВИННОЙ КРОВИ ДОНОШЕННЫХ

НОВОРОЖДЕННЫХ.

3.1. Результаты определения морфологического состава пуповинной 124 крови

3.2. Иммунологическая характеристика клеток пуповинной крови

3.3. Количество субпопуляций CD34' клеток и CD 133' клеток ПК

3.4. Колониеобразующая активность пуповинной крови

3.5. Уровень спонтанного апоптоза и некроза клеток пуповинной крови

3.6. Нормобласты пуповинной крови

3.7. Клеточный состав пуповинной крови в зависимости от пола и 154 массы тела дношенных новорожденных

3.8■ Анте- и интра на шальные факторы, оказывающие влияние на состав и характеристики клеток пуповинной крови

3.9. Влияние особенностей течения беременности, родов, антропометрических данных, пола новорожденного и срока гестации на количество CD34* клеток пуповинной крови доношенных новорожденных

3.10. Особенности /неточного состава пуповинной крови доношенных новорожденных при различных состояниях острой и хронической гипоксии плода

3.11. Сравнение ручного и автоматического подсчета клеток ПК

Глава 4 ПРОЦЕССИНГ И МОДЕЛИРОВАНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИХ

СВОЙСТВ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК.

4.1. Влияние процедуры лейкоконцентрации на клеточный состав ПК

4.2. Прогнозирование эффективности процедуры лейкоконцентрации 240 ПК

4.3. Сравнение эффективности метода автоматического выделения клеток (МАВК) и метода двойного центрифугирования (МДЦ) при ^^ проведении процедуры лейкоконцентрации ПК

4.4. Создание векторной конструкции на базе ВИЧ

4.5. Моделирование свойств СО!33+гемопоэтических стволовых 276 клеток

Глава 5. ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ

КЛЕТОК ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У ДЕТЕЙ.

5.1. Клеточный состав периферической крови на фоне применения Г- 287 КСФ

5.2. Экспрессия рецепторов к Г-КСФ и IL8 на клетках крови в динамике 294 терапии Г-КСФ

5.3. Влияние Г-КСФ на концентрацию цитокинов и ферментов в 297 сыворотке крови

5.4. Влияние Г-КСФ на способность клеток крови и костного мозга к 305 спонтанному апоптозу

5.5. Механизм мобилизующего действия Г-КСФ на клетки крови

5.6. Сравнительная характеристика клеточного состава ПК и Г-КСФ 316 мобилизованной периферической крови

5.7. Сравнительная характеристика клеточного состава концентрата 323 ПК и продукта первого цитафереза клеток Г-КСФ мобилизованной периферической крови здоровых доноров

Глава 6 УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ОРГАНИЗАЦИОННЫХ ПРИНЦИПОВ РАБОТЫ БАНКОВ ПУПОВИННЫХ И ПЕРИФЕРИЧЕСКИХ

КЛЕТОК ДЛЯ КЛИНИЧЕСКИХ ЦЕЛЕЙ

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Гемопоэтические стволовые клетки пуповинной и периферической крови у детей (характеристика, процессинг и моделирование биологических свойств для клинического использования)»

Троиышигпшй* MHQRHMMX ГСМвПОЭтаЧССКНК стволовых клеток {ГСК) являете* важным компонентом терапии при многих гематолошческих заболеваниях, врожденны* нарушениях иммунной системы, наследственных анемиях, нскогорых болезнях обмена н -злокачественных новообразованиях (Thomas ED, 1990; Афлиаскь Б.В. н сонет 1W. Bcnsmgcr W. et al., 1995; Schmitz N, « al. 1995, Савченко В Г и соавт. 1996; Румянцев АХ . 1996; Птушжнн В.В., 1997; Rubiiulein Р., 1999; GJuckman Е., 2004). однако, поиск подход ящего донора костного мозга - дорогой и длительный путь, н иногда ЛЯЩКНТ не дожинает до трансплантации (Falkenburg J Л К.1996: Афанасьев Б,В, и coain I99S. Gluekman Е, 2000) Вероятность того, 'по для пациентов, принадлежал!»!N к этническим меньшинствам, найдется HLA-ндентпчный неродственный донор, может бытъеше меньше, поскольку встречаемость определенных HLA-тапов в различных этнических группах значительно варьирует (Armilage J , 1994). Создание банков пуповинной крови (ПК) в значительной степени облегчает поиск материала л/и траиеллаигаиин. что в сочетании с лешевипюй получении такою материала и легкой его доступностью является предпосылкой для увеличения количества трансплантаций ГСК ПК (Wagner J. Е. 1992, Hams D. Т-. [996. KoglerG., 1996. Dtula К, 1998; Rubinstein P-, 1999, Olucknwi E-, 2005). Технологии получения ГСК ПК ддя последующей крюкоисерМШН требуют разработки условий контроля течения беременности и родов и поиска надежных прошостичсския факторов пригодное™ получаемого материала для последующей трансплантации Известно, что состоя клеток ПК отражает течение беременное™ и родов, а также перенесенных заболеваний. Несмотря м многочисленные исследования кдеточзюго состава ПК ("Моппк B.L. 1979; Stokman РА. 1992, Atoerai Р.А. 1992; Торубарова Н А-1993; Cairo M S , 2005; Araviia S,, 2005) отсутствуют референтные значения клеточного состава ПК доношенных и недоношенных новорозкденных Появившиеся в последнее время сообщения о различии клеточного состава ПК в зависимости от пола и массы тела новорожденною, вида родоразрешення. сроков, прчииедти* после родов н сбора ПК до начат протеса обработки, (Cairo M.S., 2005; Aiavjla S,. 2005) демонстрируют влияние множества факторов 1гд клеточный с ос тал ПК и, кок следствие этого, но '>ффекп111НОСТь циппцкн трансплантационного материала Кроме того. ПК имеет некоторые физиодотчеемк отличия от периферической крови взрослого человека (Solves р, 2005, Bradley М В, 2005). в связи с чем исследование состава и характеристик клеток ПК» проводимое при помошн автоматических счетчиков, не вполне удовлетворительно.

Успех траисплантаимн во многом зашкпт от достаточного количества ГСК, поэтому, важным вопросам при применении ПК в клинике является оценка трансплантата. в основе которой лежит опредс«имс количества н жизнеспособности ГСК, содержащихся ш трансплантационном материале (Bender J G., 1994; Coo/ale* B E , 1997; Traineau R„ Allan D.S., 2002; CoUa S V d al, 2002, Manno M P et al., 2002).

В течение последних I0 лег в качестве источника гсыопоэтнческнх стволовых клеток все чаше используют мобилизованную при помощи Г-КСФ периферическую кровь (BeiBinger W et al. 1995; Schmita N. et al. 1995; Масчаи A-A-, 1995; Афанасьев Б.В и соавт 1996; Савченко В.Г н соавт. 19%), в связи с чем, важно определить условия и механизмы воздействия Г-КСФ на систему гемопоэза, лл* получения наиболее эффективного трансплантационного материала (Asano S-. I99J, Welle К~. d ai, 1996, Kronenwctt R. et al, 2000; CulJer C. el al. 2001. Miuanjla NA., <Я al., 2002).

Исполиоцамне различных источников ГСК для трансплантации, а также использование множества технологически приемов для получите непосредственного траисплантациоинот материал» irJ ПК и периферической крови требует тщательного описания и сравнения кпеточиого состава и характеристик ГСК л различных источниках н определение факторов, оказывающих га них влияние.

Изучение н разработка -(ехиошгнй модедлромниа биологических свойств ГСК ПК также представляется актуальной задачей, так как в таком случае можно получить возможность влиять и степень и наирпялеиность и* диффереяинроаки (McdcalT D., 1989; Ogav.1 М. 1993; Умтаий-Йгшеу 0. et al, 1998} Разработка генных векторов «третей» генерации на базе вируса иммунодефицита человека первого шла позволяет проводить работу с няеицвша КЛСТКаш, к которым относится бадыииисцю ГС К. что лист возможность получить эффективную н безопасную модель ЛЯП итмеиення свойств ГСК п клинических целях (Hawky R. ct aL. 1987. Dull Т. ct at. 1998, SuHon R E , 2002. Marino M. et ftl, 2002; Foilenzi A. 2002). Выбор в качестве индуктора'нкгибктора протнфератниной аК1НМЮС1Н стэоловьи клеток генов id еемсЛства Nolch наиболее перспективен. тик как они принимают участие в процессах, как самообновления клеточной популяции, так н «ПНИЩИ! аитидифференпировочных клеточных программ (Wcinnwmier G. et в]., 1992; Artavanis-Tsakonai S. et aL, 1995; Lewit J., 19%, L Wu , 2000, Baldi A, et al. 2004),

Гак-нм оброни, решение указанных вопрос» позволит отнмиэнровать технологам заготовки, |||*и|еесиигя и моряфшшщ ГСК ПК и Периферической крови для клинического использования.

Цель: разработать и внедрить и практику научно вбцошише методы сбора, тестирования и хранения гемолитических споломи клеток иуноаинной и периферической крови для неродственны* трансплантаций, а также щучить возможность моделировании их биологически* свойств для клинического применения

Задачи;

1 Охарактеризовать клеточный состав IUC, определить количество п субполуляцм CD34' я CD133'клеток, а также колониеобразукицую активность ГСК ПК доношенных новорожденных

2, Palpatio гать и внедрить систему критериев для оценки и отбора шемцциыпк доноров Г1К с целью получения максимально эффективного трансплантационного материала

J Изучит» механизмы мобилнзаци* ГСК периферической крови прл использовании Г-КСФ у здоровых доноров и пациентов с различными оикогематологнческнми звбемошпиямн

4 Усовершенствовать и внедрить пшяолга проценипи ПК и мобимпидаи ГСК периферической крови дня получения максимально эффективною трансплшгтационного материала 5, Охарактеризовать клеточный состав и жизнеспособность трансплантационное материма ПК и мобилизованной периферической крови 6- Разработать эффективную техмололпо недедироваиия биологических свойств ГСК для клинических Целей

7. Обосновать и ywnepQteilcmdtem. оргаинтяшюиние принципы работы банков ПК И стандарты работы с ГСК ПК для практических целей

Научная новшня

Получены референтные значении состава ПК с использованием автоматического анализатора юнгток крови и михроскоини окрашенных мазков, определены величины расхождения результатов и факторы, влияющие на разницу определения Определено количество основных субпопуляцнй лимфоцитов, CD34' и С0133*клетоК Функциональная оценка ГСК ПК доношенных новорожденных изучена на модели пннммевбрюошии ш vito.

Проведена опенка влияния ТПНРИ беременности и родов, острой и хронической гипоксии «лоза на показатели кл#точ1н>го состава ПК доношенных новорожденных, впервые показаны различия клеточного состава ПК в зависимости от по.за и массы тела новорожденного, причем эти различия независимы друг от друга.

Впер*ме получены референтные значения уровня СЛОГГШЮГО плоптоза основных клеточные популяций ПК. обработанной по разработанным стандартам, базирующимися nil системе NetCord Определит степень И характер вгтняиия особенностей течения беременное™ н родов, а также основных технологических параметров ироцессннга на жизнеспособность клеток ПК.

Отработана технология процедуры леВкокоинентрацни при различии* смгютпих беременное га, родом, новорожденного и технологических параметрах ПК. подробно охаротсри юван клеточный состав концентрата ПК, являющегося троне плантаилоиным материалом

Изучен характер и степень «шикни препаратов Г-КСФ на состав н жизнеспособность клеток периферической кроин при МПОЛНЯШ протоколов мобилизации №Hfltniw:ax стволонмх клеток у морских доноров, детей с различными омкогематопагичсскимя ЯЁШКНШНШН в ремиссии с целью шугаюгачиоИ трансплантации и при лечении медикимсиютиой шгтопеннн Определены концентрации мобилизующих иитокннои и ферментов 1L-8, G-CSF, ММР-9 в сыворотке ПК доношенных новорожденных н псриферагческой крови при использовании препаратов Г-КСФ у дстеП с различными онкогематологнческимн заболеваниями н здоровых доноров. Определено количество основных субпому ля икй лимфоцитов, СО 34' н CD133 "клеток, а ив модели колониеобразоваикя ш vitro изучено количество и состав ГСК мобилизованное! периферической крови и продукт* пнтафереэо, валяющегося трансплантационным материалом.

Впервые показана возможность эффективной трикфекиии генов в неделнпшеся клетки при помощи ыопфшфонюшо вируса иммунодефицита человека t tuiu (ВИЧ-]) Впервые на модели NODVSCID мышей ППЯН1 возможность изучения ЮЮЛЮТЯЧВСКОЙ дифферент! ров хн CD] 33'меток ПК человека Модифицированная авторами вентерная система, созданная на б«е 8ИЧ-1. способная обеспечить тффстнисый перенос исследуемого генетического материала в иеделяпшеся кдеткн, а также показанное эффективное угнетение колоииеобразующей активности и увеличение уровня спонтанного апоптоз» CD 133" клеток генами Notch 1 it Notch 2, могут быть нспольювлны irpn моделировании биологических свойств ГСК человека.

Рпработан комплекс практических рекомендаций по усовершенствованию технологических ооеришй отбора лоиорсв, сбора, иропессннга н тестирования Г1К дм последующей фмкплшпаши. а также по усовершенствованию протоколов мобилизации ГСК периферической крови

Прлкшчсское значение

Практическое значение работы заключается в установлении референтных значений ПК, как при использовании автоматического анализатора клеток крови, так н при подсчете клеток крови при светооптнческой микроскопии Получены значения, характеризующие состав лейкоцитов ПК. которые рекомендуется использовать в качестве факторов, определяющих показания н противопоказания к сбору ГЕК для безвозмездного донором ГСК- Кроме того, полученные ланцис имеют важное практическое значение при проведении технологических расчетов в работе банков стволовых клеток.

Практическое значение имеют данные объективной опенки эффективности методов сбора ПК, различных способов процесеиига ПК с целью получения подготовленного к хранению трансплантационного материала в также выявленные золнсимостн эффективности процессинга ПК от особенностей течении беременности, ролов и ряда технологических элементов

Эффективное п. иобнлишши и сбора ГСК периферической крови зависит от количества циркулирующих Гршулоцитой н ряда вторичных посредников (IL 8. ММР-9), что позволяет оптимизировать процедуру мобилизаций it получения более эффективного трансплантационного материала у пациентов в ремиссии различных онкогематолошчсскнх заболеваний.

Полученные ершинггелыше характеристики количества и жизнеспособности ГСК в трансплантационном материал* ПК и мобилизованной периферической крови могут использовал** я качестве стандартов по определению качества заготавливаемого Трансплантационного материала в банке стволовых клеток.

Модифицированная авторами векторная система, созданная на бане ВИЧ ■ 1, способна* обеспечить эффективный перенос исследуемого генетического материала в нелеляпикся клетки, а также показанное эффективное влияние генов NotcVi Н и Notch 2 ил ко,зоннеобразуюптую активность и уровень спонтанного апоптоза ОШ'мепК минут быть использованы при моделировании биологических сяойств ЛШШШ клеток человека Отработана модель для изучения приживления и днффереиилрояки различных нонуляций гемопозпиюских стволовых клеток человека на основе трансплантации предварительно облученным NOD'SCtD мышам 1рякп(4«и>е значение выполненной работы заключается я разработке рекомендаций но отбору потенциальных доноров ПК, методикам сбора ПК и соблюдению временных параметров и зависимости от Индивидуальных характеристик каждого образца ПК.

Киедр*иие в практику

Результаты исследования внедрены в работу ФГУ ФНКП детской гематолоши, онкологии н иммунологии Росздрйва. ГУЗ «Банк стволовых клеток Департамента здравоохранения г. Москвы». Основные положения н выводы диссертации используются в подготовке специалистов гематологов, онкологов и иммунологов itn кафедре клинической гематологии, онколопт и иммунопатологии с курсом поликлинической и социальной педиатрии ФУ В РГМУ. По теме диссертации опубликовано 38 работ, в том числе пособие для врачей «Влияние Г-КСФ на клеточный состав крови и костного мозга человекам (2003) и монография «Биологические основы и перспективы терапии стволовыми клетками» (2005).

Результаты работы доложены на IV Российском Национальном конгрессе «Человек н Лекарство», .Москва, в апреле 1997 т. t Съезде детских онкологов и гематологов России, Москва, в ноябре 1997 г., I Российском симпозиуме «Биологические основы герапни онкогемвтологнческнх заболеваний у дез ей», Москва, в феврале 1999 г. VII Российском Национальном конгрессе «Человек и Лекарство», Москва, в апреле 2000 г. It Российском симпозиуме «Биологические основы терапии онкогсматологнческих заболеваний у детей », Москва, в феврале 2001 г, III Российском симпозиуме «Биологические основы терапии онкогемятоло| нчееких заболеваний у детей'-. Москва, в феврале 2003 г„ IV Российском симпозиуме «Биологические основы терапии оикогемптологнческих заболеваний у детей», Москва, в феврале 2005 г, 1 Всероссийском съезде гематологов, 16-18 апреля 2002 г, [X Российском Национальном конгрессе "Человек и Лекарство". Москва, в апреле 2002 г. 7е Meeting of (he European Hematology Association, Florence. Italy n none 2002., X Российском Национальном конгрессе «Человек и лекарство» в апреле 2003 года, Москва, 5* International Symposium on Leukemia зд<1 Lymphoma, Amsterdam, The Netherlands в марте 2003, S1" Annual Congress of the European Hematology Association, Lyon, France в июне 2003, 9* Congress of the European Hematology Association. Geneva, Switzerland в июне 2004, 6* International Symposium and Expert Workshops on Leukemia and Lymphoma, Amsterdam, the Netherlands в марте 2005, XII Российском национальном конгрессе « Человек и лекарство» в апреле 2005,3 Г* Annual Meeting of the European Group f<w Blood and Marrow Transplantation, Prague, Czech RcpuMtc в марте 2005, на научном конгрессе Science Workshop, Halwerslon, Texas, в апреле 2004 г, на Национальном конгрессе CAGT Cell & Gene Therapy, The Woodlands, Houston, Texas, в марте 2003., на съезде Медицинскою Колледжа Ёзйлор, The Warwick Hotel, Houston, Texas, в феврале 2004., собраниях лабораторий департамента Молекулярной вирусологии и микробиологии. Медицинского Колледжа Бзйлор, Houston, Texas, в 2002-2004 гт, на конгрессе «Национальные дни лабораторной медицины России», Москва, в октябре 2005, на X Съезде педиатров России, Москва, в феврале 2006, и

Российском Съезде гематоиогон н трансфузнологоа. Мост в апреле 2006. Всероссийской конференции РНОИ, Курск, в мае 2006. Российском конгрессе я Новые технологии в перинатоэопан», Москва, в ноябре 2006.

Работа выполнена и ФГУ «Федеральный иаучно-клнннчсскнй центр детской гематологии, онкологии н иммунологии» РМЦрт (директор ФГУ ФНКЦ ДГОИ • члеи-коррсспондеит РАМН, доктор исямршШ наук, профессор А Г Румянцев), на бате лаборатории регуляции кроветворения (зов- - л б.и Осипом Е Ю). лаборатории контроля количества и жи"И(есиасобиостн стволовых клеток ГУЗ «Банк стволовых клеток Департамента UfKHCXpUKHU г Москвы" {директор - д.м а , профессор О.А.Майорова), лаборатории моделирования н МДМН» векторных систем ВИЧ-1, (зав Dr Richard Е SuHont MD, PhD ), департамента молекулярной виратогин н микробиологии (зав. Dr Janet S. BuleL PhD.). Медицинского колледжа Бзйлор (президент Dr Ralph D. Feigjft. MD,), Хьюстон, Техас. США.

Заключение диссертации по теме «Педиатрия», Румянцев, Сергей Александрович

выводы

I, Установлены референтные значения клеточного состава ПК доношенных новорожденных. При использовании автоматического гематологического анализатора АВХ РеШта 60 С+ количество лейкоцитов составило niWO.lteKftj, абсолютное количество нсЯтрофилов - 8.4 f ±0.10* 109/л. лимфоцитов - 5,54*0,06х 10*/я. моноцитов - 2,42±О.ОЗ*10*/л, эозинофияов 0,64*0,16* бюофклов - 0,23*0.01 * Количество эритроцитов составило 4,40±0,01хЮ,1/л. концентрация гемоглобина 157.4*0.46 г/л. количество тромбоцитов 307,54*1,97* 10*/л,

2- При определении количества нсНтрофнлов прн помаши микроскопии был получен достоверно больший уровень, чем при определении при помошн автоматическою счетчика Уровень лимфоцитов, моноцитов, эозинофшюв и базофилов, наоборот оказался выше при определении с помощью автоматического счетчика. Полученные закономерности зависели от количества лейкоцитов и нормобластов и не зависели от сроков гсстации, количества лейкоцитов, степени разведения образца ПК антиимгулянтом. времени, прошедшего после ролов до начала сбора и обработки ПК

3- Количество С034<клеток в ПК составило 0,43*0,023 % от обикго числа ядросодержащнх меток. Количество наиболее ранних кл сток-ире дикствеиников CD34*CD133" клеток составило 0,46±0jK %. Количество мезеихимальных стволовых клеток - CD1334TD106" - 0,48*0.07 а яцпешншх кдсток-предшссгвеиннков -CDI33*CD3f 0,88*0.11 % ОТ общею числа илросодержащнх клеток В ПК преобладают рвииие кдетки-предшествеиникн гемопояа (КОЕ-ГЕММ) - 35,3 %.

4 Количество миелондиых предимственинков (КОЕ-ГМ. КОЕ-Г, КОЕ-М), также квх и количество CD34*клеток зависит от количества нормобластов в ПК. У новорожденных с большим количеством нормобластов в ПК количество С034"клеток и мнелоидимх клеток-предшественников статистически значимо выше (р<0,01).

5 Выявлена зашкичостя, показателей ПК от попа новорожденного Показано, 'гто у девочек уровень лейкоцитов выше. чем у мальчиков При этом у девочек относительное количество нейтрофнлов больше, п лимфоцитов, моноцитов н зозинофилов меньше. У мальчиков CD34* клеток больше, чем у девочек, как в относительном, так н в абсолютном количестве. Также у мальчиков статистически значимо больше количество КОЕ-ГМ в 1 мл ПК.

6, Внутри vrpo&ii а* гипоксия приводит * снижению количества СВД4' клеток, эффективности клонирования и повышению уровня спонтанного апоптоза лейкоцитов При острой гипоксии в родах количество С034*ютсток, эритроцитов, концентрация гемоглобииа статистически значимо выше, жзпнеспософюстъ лейкоцитов и гемопозтювекнх стволовых клеток ПК не изменяется.

7. Полученный при помощи процедуры концентрации ПК, основанной на процессе седиментации эритроцитов под действием г ндро кс и л ти л крахмала, трансплантационный материал имеет объем 20,0 мл, содержит 39.0±0,48xl0%ui лейкоцитов к 1.37±0,029 % С034*клеток и не отличается от ПК по соопвШНПЮ основных субпопуляций лейкоцитов и ГСК,

8, Эффективность дейкокониентраши повышается при сборе ПК после отделения плаценты, удлинении промежутка межлу сбором ПК и началом се обработки, максимальна при массе обратив ПК бет учета тары от 40 до 120 грамм н содержании аитикоагулязгга в пределах 20-40 % Уста1ювлено ее снижение при удлинении времени между ролами и сбором ПК более 5 минут, при содержании а1гтнкоатуля1ста в образце менее 20% и более 40% Отмечается обитая тенденция увеличения редукции эритроцитов при обработке МАВК по сравнению с МДЦ независимо от анализируемого параметра

9. Полученный при помощи Г-КСФ индуцированной мобилизации периферической крови и одной процедуры сеиаралин траисплантапиоииыЯ материал имеет средний объем 83,4±J,4 мл н содержит 188,4s]63*Ю'/мл лейкоцитов, представленных, в основном, лямфедгнмн, и 1,13<±0,25 % CD34"клеток, ие отличается по соотношению субпопуляций ГСК от мобилизованной периферической кровн и значительно превосходит но количеству ГСК веек ростков гемопоэза концентрат ПК

10. Концентрация мобилизационных иитокинов (IL-8, G-CSF. ММР-9) в сыворотке ПК доношенных новорожденных статистически значимо выше, чем в сыворотке крови здоровых доноров, но статистически шачнмо ниже, чем при мобилизации ГСК Г-КСФ у пациентов с оикогематояогическимн заболеваниями н при лечении медикаментозной шпопевкн.

11. Создана эффективная векторная система доставки генетического материала а неделящисся клетки на базе модифицированною вируса иммунодефицита человека I типа с использованием в качестве промежуточной ступени вектора pBlucscript SfC{+/-). Эффективность троисфскини CD133'клеток составила 3294.

12. Ламинированные формы генов Nolch 1 и Notch 2 вытыкают угнетение колоннеобрюзукиасй активности CD Ш'клеток ПК человека, статистически значимое повышение уровня спонтанного апоптоза СОШ'клеток ПК человека, причем Notch 2 приблизительно в два раза активнее, чем Notch [, что позволяет управлять продиферятивной активностью ГСК,

13. При сравнении разд^иых популяций стволовых клеток кровн в способности восстанавливать донорский гемоно» у мышей NOD/SCID. выявилась тенденция преобладания CDt33+KnerOK над CD133 CD34* (2^3±0Д6 % н 0,68±0,14 % соответствсшю. р<0.001). В елгие трансплантаций неготилиою контроля CD 133" CD34 клетки, человеческие С045"клетки ие обнаруживаются, «гто свидетельствует о перспективах использования CD133TCK для трансп.-ктташш

14 Обосновано и внедрено изменение рекоменлованного стандартами NctCord списка противопоказаний лля бетиозмстдногс донорства ИКГ усовершенствование методики технологических расчетов при проведении внутренней отбраковки образна ПК н проведении технологически* itmioa процессинга ПК. алгтфитм отбора образцов ПК на проведение процедуры автоматической к он устрани н или выделение методом двойного центрифугировании, что позволило он [имитировать процесс работы БСК и получал, наиболее эффективный трансплантационный материал

Список литературы диссертационного исследования доктор медицинских наук Румянцев, Сергей Александрович, 2007 год

1. Бабак О.А. Динамическая оценка эритропоэза новорожденных. Автореферат диссертации канн.мед.наук. -М., 1999.

2. Байдун Л.В., Логинов А.В., Значение автоматического анализа крови в клинической практике. Гематология и трансфузиология. 1996,2.

3. Балашова В.А.. Абдулкадырова К.М. Клеточный состав гемопоэтической ткани печени и селезенки у плодов человека//Арх.анат. - !984. №46, 80-83.

4. Валика Ю.Д-, Абубакирова A.M., Козлова СИ., Красильникова А.Я . Коваленко Л. В. Биохимические показатели крови матери, пу повинной крови и околоплодных вод при гипоксии плода. Акушерство и гинекология, 1988.7:23-25.

5. Балика Ю.Д., Елизарова И.П., Головацкая Г.И., Изменения в системе крови новорожденных как приспособительная реакция на роды. Акушерство и гинекология, 1973, 11:27-30.

6. Балика Ю.Д., Карташова BE., Фурсова З.К. Об особенностях системы крови плода и новорожденного. XIII Всесоюзный съезд акушеров гинекологов.М., 1979.

7. Вайсман НЯ., Захаров И.Л., Корочкин Л.И. Ген Notch и судьба плодовой мушки Drosophila melanogaster// Успехи соврем, биологии. 2002. Т. 122, № 1. 95-108.

8. Владимирская Е.Б. , Кисляк Н.С., Румянцев А.Г. Причины и пути преодоления лекартвенной резистентности при лейкозах и лимфомах у детей. // Гематология и трансфузиология, 1998. №6, стр. 3-8.

9. Владимирская Е.Б., Майорова О. А., Румянцев А., Румянцев А. Г. Биологические основы и перспективы терапии стволовыми клетками. М. ИД Медпрактика, 2005

10. Волынец М Д.. Морфологический состав и функциональная активность клеток пуновинной крови человека. Автореферат диссертации кан.мед.наук.-М.. 1998.

11. Гематология детского возраста. Руководство для врачей. Под редакцией Н.А. Алексеева. Санкт-Петербург. «Гиппократ». 1998.с27-32.

12. Гематология/онкология детского возраста. Практическое руководство по детским болезням под общей редакцией В.Ф.Коколиной и А.Г. Румянцева. Том IV, с.81-113.

13. Глузман Д.Ф., Бабешко В.Г., Надгорная В.А., Скляренко Л.М., Дроздова В.Д.. Эмбриональное кроветворение и гемобластозы у детей (иммунология и цитохимия). Киев. Наукова Думка, 1988. 198с.

14. Губенко И.С. Локус Delia в Notch сигнальной системе: организация и плейотропная функция // Цитология н генетика. 2001. Т. 35. № 4. 59-80.

15. Замараева Н-В. Пуповинная кровь человека - альтернативный источник стволовых клеток для трансплантации. Автореф. дисс. док.мед.наук -М.,1999.

16. Зангиева Т.Д. Красная кровь плода человека в разные периоды внутриутробного развития. Вопросы охраны материнства и детства, 1972, 17,1,22-24.

17. Исследование системы крови в клинической практике. Под редакцией Г.И. Козинца и В.А. Макарова. Москва. «Триада-Х».1997; с9-49;259-97.

18. Кнорре А.Г. Эмбриональный гистогенез, Л., Медицина, 1971, с 431.

19. Козинец Г.И., Погорелов В.М., Шмаров Д.А., Боев Ф., Сазонов В.В.. Клетки крови. Современные технологии их анализа. Москва, 2002.

20. Коровина НА., Заплатникова А.Л., Захарова И.Н. Железодефицитные анемии у детей. Руководство для детей. М., 1999,64.

21. Кравкова Е.В. Морфологическая картина крови плода человека в разные периоды внутриутробной жизни. Акушерство и гинекология, 1954. 5, 16-25-

22. Кузнецова Ю.В. Автоматический анализ клеток крови в дифференциальной диагностике и моноторинге лечения микроцитарных анемий у детей. Автореферат диссертации канн.мед.наук - М.,2004.

23. Кузнецова Ю.В., Ковригина Е.С., Токарев Ю.Н. Оценка эритроцитарных параметров автоматического анализа крови и их применение для диагностики анемий. Гематология и трансфузиология, 1996, 5.44.

24. Левина Т.Н. Современный проточный счетчик в службе крови. Автореферат диссертации кан.биол.наук -М.,1999.

25. Луговская А.. Миронова ИИ., Почтарь М.Е.. Лукина Е.А., Городничева В.Ф., Цветаева Н.В., Мадрала А. Диагностика железодефицита с помощью современных гематологических анализаторов. Гематология и трансфузиология, 1996,4,31.

26. Подачек К. и соавторы. Физиология и патология новорожденных детей, АВИЦЕНУМ, медицинское издательство Прага, 1986. с. 339-342.

27. Румянцев А. Влияние Г-КСФ на клеточный состав крови и костного мозга человека. Автореф. дисс. Москва, 2002.

28. Серов В.Н., Стрижаков Ф.Н., Маркин А.. Практическое акушерство: Руководство для врачей.- М., Медицина, 1989; с.53,255-66

29. Станкуте Д. и др. Клиническая оценка некоторых биохимических показателей пу по винной крови новорожденных от матерей с поздним токсикозом беременности. Сборник «Болезни матери и ребенка», Vilnius, 1990,56-61.

30. Султанова Г Ф. Железо дефицитные анемии у детей. Йошкар-Ола, 1992, ИЗ.

31. Торубарова Н.А.. Кошель И.В., Яцык Г.В.. Кроветворение плода и новорожденного. Москва, «Медицина», 1993.

32. Ципори Д. Роль факторов стромалъных клеток (рестриктинов) в микроорганизации кроветворной ткани. Пробл. гематол., 1996, №1, с.55-57.

33. Шемарова И.В. Роль фосфорилирования по тирозину в регуляции пролиферации и клеточной дифференцировки у низших эукариот // Цитология. 2003. Т. 45, № 2. 196-215.

34. Шмаров Д.А., Козинец Г.И.. Лаборатор но -клиническое значение проточно- цитометрического анализа крови, Москва, 2004.

35. Шпаков А О . Деркач КВ., Перцева М.Н. Гормональные сигнальные системы низших эукариот // Цитология. Т. 45 № 3.. 223-234.

36. Abe Т., Makimoto A., Kawano Y. et al. Intra-apheresis recruitment of blood progenitor cells in children. Transfusion, 1998; 38(10): 944-950.

37. Aiuti A, Tavian M, Cipponi A. Ficara F, Zappone E, Hoxie J et al. Expression of CXCR4, the receptor for stromal cell-derived factor-1 on fetal and adull human lympho-hematopoietic progenitors. EurJImmunol 1999; 29: 18231831.

38. Aiuti A, Turchetlo L, Cota M, Cipponi A, Brambilla A, Arcelloni С et al Human CD34+ cells express CXCR4 and its ligand stromal celt-derived factor-1. Implications for infection by T-cell tropic human immunodeficiency virus. Blood 1999; 94: 6267.

39. Aiuti A, Webb IJ, Bleul С et al. The chemokine SDF-1 is a chemoattractanl for human CD34+ hematopoietic progenitor cells and provides a new mechanism to explain the mobilization of CD34+ progenitors to peripheral blood. J Exp Med. 1997, 185:111-120.

40. Alenzi FQ. Induction of apoptosis in myeloid progenitors by granulocyte-macrophage colony-stimulating factor. Br J Biomed Sci. 2004;61(4):200-5.

41. Altinkaynak S, Alp H, Bastem A, Selimoglu M, Energin M. Serum Ferritin and Hemoglobin Levels of mothers and their newborns. Published erratum appears in Turk J Pediatr 1995 Oct-Dec, 37(4):439.

42. Andrew M, Castle V, saigal S, Carter C, Kelton J. Clinical impact of neonatal thrombocytopenia. J Pediatr 1987;! 10:457-64.

43. Anthony RS., McKelvie ND., Cunningham AJ-, et al. Flow cytometry using annexin V can detect early apoptosis in peripheral blood stem cell harvests from patients with leukaemia and lymphoma. Bone Marrow Transplant, 1998; 21(5): 441-446.

44. Arends MJ, Morris RG, Wyllie AH: Apoptosis: The role of endonuclease. Am J Pathol 136:593-608, 1990.

45. Arias A.M. New alleles of Notch drow a blueprint for muhi functionality // Trends in Genet. 2002. V. 18. P. 168-170.

46. Aroviita P. Teramo K. Hiilesmaa V, Kekomaki R. Cord blood hematopoietic progenitor cell concentration and infant sex. Transfusion. 2005 Apr;45(4):613-21.

47. Artavanis-Tsakonas S., Matsuno K., Fortiny M.E. Notch signalling // Science. 1995. V. 268. P. 225-232.

48. Axt R, Ertan K, Hendrik J, Wrobel M, Mink D, Schmidt W. Nucleated red blood cells m cord blood of singleton term and post-term neonates. J Perinat Med 1999;27(5):376-81.

49. Baer PC, et al. Transdifferentiation of distal but not proximal tubular epithelial cells from human kidney in culture. Journal of Experimental Nephrology 1999, 7: стр.306-

50. Baldi A, Falco MD. Luca LD, Cottone G, Paggi MG, Nickoloff BJ, Miele L, Luca AD Characterization of tissue specific expression of Notch-1 in human tissues. Biology of the Cell, Volume 96, Issue 4,2004. стр.303-311

51. Baonza A., Freeman M. Notch signalling and the initiation of neural development in the Drosophila eye // Development. 2001. V. 128. P. 3889-3898-

52. Barcena A, Park SW, Banapour B, Muench MO, Mechetner E. Expression of Fas/CD95 and Bcl-2 by primitive hematopoietic progenitors freshly isolated from human fetal liver. Blood 1996; 88: 2013-2025.

53. Barnes DWH, Loutit JF. Treatment of murine leukemia with X-rays and homologous bone marrow. Br J Haematol 1957;3:241-52.

54. Barolo S., Stone Т., Bang A.G., Posakony J.W. Default repression and Notch signaling; Hairless acts as an adaptor to recruit the corepressors Groucho and dCtBP to Suppressor of Hairless II Genes Dev. 2002. V. 15. P. 1964-1976.

55. Baschat A. Gembruch U, Reiss 1, at al. neonatal nucleated red blood cell counts in growth-restricted fetuses: Relation-ahip to arterial and venosus Doppler studies. Am J Obstet Gynecol 1999,181;190-5.

56. Beardsley D. Immune Thrombocytopenia in the perinatal period/ Semin Perinatol 1990;14:368-73.

57. Bentley SA, Johnson A, Bishop CA, A parallel evaluation of four automated hematology analyzers. Am J Clin Patho! 1993,100:626-32.

58. Bernstein PS, Minior VK, Divon MY. Nucleated red blood cells counts in small-for- gestational age fetuses with abnormal umbilical artery Doppler studies. Am J Obstet Gynecol 1997; 177:1079-84.

59. Blackwell SC. Refuerzo JS, Ahn MO, Martin GI. Nucleated red blood cell count and early onset neonatal seizures. Am J Obstet Gynecol 2000; 182:1452-7.

60. Blaese RM, Culver KW, Miller AD, et al. T-.ymphocyte directed gene therapy for ADA deficiency (SCID): Initial trial results after 4 years. Science 1995, 270:475-9.

61. Brady HJ, Gil-Gomez G, Kirberg J, Bems AJ. Bax alpha perturbs T cell development and affects cell cycle entry of T cells. Embo J 1996; 15: 6991-7001.

62. Bninet De La Grange P, Barthe C, Lippert E, Hermitte F, Belloc F, Lacombe F, Ivanovic Z, Praloran V. Oxygen concentration influences mRNA processing and expression of the cd34 gene. J Cell Biochem. 2006 Jan 1; 97(l);135-44.

63. Buonocore G, Perrone S, Gioia D, Gatti MG, Massafra C, Agosta R, et al. Nucleated red blood cell count at birth as an index of perinatal brain damage. Am J Obstet Gynecol 1999; 181:1500-5.

64. Buonocore G; De Filippo M, Gioia D; Picciolini T; Luzze E; Bocci V; Bracci R. Maternal and neonatal plasma cytokine levels in relation to mode of delivery. Biol-Neonate. 1995; 68(2): 104-10.

65. Bussolati В., Bruno S., Grange C, Buttiglieri S., Deregibus MC, Cantino D., Camussi G. Isolation of Renal Progenitor Cells from Adult Human Kidney, Amencan Journal of Pathology. 2005, 166, стр. 545-555.

66. Cadigan K.M., Nusse R. Wnt signaling: a common theme in animal development // Genes Dev. 1997. V. 11. P. 3286-3305.

67. Cagan R.L., Ready D.F. Notch is required for successive cell decisions in the developing Drosophila retina // Genes Dev. 1989. V. 3. P. 1099-1112.

68. Cai J, Yang J, Jones DP- Mitochondrial control of apoptosis: The role of cytochrome с Biochim Biophys Acta 1998; 1366: 139-149.

69. Carbonell F., Calvo W., Fliender T.M.. Celluler composition of human fetal bone marrow Histologic study in methacrylale section. Act.anat. 1982, 113: 371-375.

70. Castedo M, Hirsch T, Susin SA, Zamzani N, Marchetti P, Macho A. Kroemer G: Sequential acquisition of mitochondrial and plasma membrane alterations during early lymphocyte apoptosis. J Immunol 157:512-521, 1996.

71. Castle V, Andrew M, Kelton J, Giron D, Johnston M, Carter С Frequency and mechanism of neonatal thrombocytopenia. J Pediatr 1986; 108:749-55.

72. Cavassaba-Calvo M, Hacein-Bey S, de Sant Basile G, et a!. Gene therapy of human severe combined immunodeficiency (SCID)-Xl disease. Science 2000; 288:669-72.

73. Cebon J, Layton JE, Maher D, Morstyn G. Endogenous haemopoietic growth factors in neutropenia and infection. Br J Haematol, 1994; 86:265-274.

74. Compton MM: A biochemical hallmark of apoptosis; Intemucleosomal degradation of the genome. Cancer Metast Rev 11:105-119,1992.

75. Cotter TG: Induction of apoptosis in cells of the immune system by cytoxic stimuli. Seminars Immunol 4:399-406, 1992.

76. Cullen BR., Lomedico PT., Ju G. Transcriptional interference in avian retroviruses - implications for the promoter insertion model of leukaemogenesis. Nature 307:241-245.

77. Cutler C , Antin JH. Peripheral blood stem cells for allogenic transplantation: a review. Stem Cells, 2001; 19:108-117.

78. Cytokine responses of hematopoietic progenitor cell, ISH-EHA 1999, pp. 51-55.

79. D'Arena G, Musto P, Cascaviila N, Di Giorgio G, Fusilli S, Zendoli F, Carotenuto M. Flow cytometric characterization of human umbilical cord lymphocytes: immunophenotypic features Hematologica 1998; 83; 197-203.

80. D'Souza S.W., Black P., MacFarlane T. Jennison R.F. Hematological values in cord blood in relation to fetal hypoxia. Br.J. Obstet. Gynaecol, 1981,88:129-132.

81. Desplat V, Faucher JL, Mahon FX, Dello Sbarba P, Praloran V, Ivanovic Z. Hypoxia modifies proliferation and differentiation of CD34(+) CML cells. Stem Cells. 2002, 20(4):347-54

82. DeZazzo JD., Kilpatrick JE„ Imperiale MJ. 1991. Involvement of long terminal repeat U3 sequences overlapping the transcription control region in human immunodeficiency virus type 1 mRNA 3' end formation. Mol. Cell. Biol. 11:1624-1630.

83. Diederich R.J., Matsuno K., Hing H., Artavanis-Tsakonas S. Cytosohc interection between deitex and Notch ankyrin repeats implicates deltex in the signalling pathway //Development. 1994. V. 120. P. 473^81.

84. Doherty D., Feger G., Younger-Shepherd S., Jan L.Y., Jan Y.N. Delta is a ventral to dorsal signal complementary to Serrate, another Notch ligand, in Drosophila wing formation//Genes Dev. 1996. V. 10. P. 421-434.

85. Dollberg S, Livny S, Mordecheyev N, Minouni F- Nucleated red blood cells in meconium aspiration syndrome. Obstet Gynecol 2001; 97;593-6.

86. Domanovic D., Wozniak G., Cemelc P. et a!. Matrix meta!loproteinase-9 and ceil kinetics during the collection of peripheral blood stem cells by leukapheresis Transfusion and Apheresis Science, 2005,33: 37-45.

87. Domen J, Cheshier SH, Weissman IL. The role of apoptosis in the regulation of hematopoietic stem cells: Overexpression of Bcl-2 increases both their number and repopulation potential. J Exp Med 2000; 191: 253-264.

88. Donahue RE, Chen ISY. Hematopoietic Stem and Progenitor Cells. Methods in Molecular bio logy, vol. 229: Lentivirus Gene Engineering Protocols. Edited by M-Federico, Humana press Inc., Totowa, 2003, NJ, 117-127.

89. Donna D Evolutionary considerations in hematopoietic development. AnnN-Y AS, 1999, pp. 84-91.

90. Du C, Fang M, Li L, Wang X- Smac, a Mitochondrial Protein that Promotes Cytochrome c-Dependent Caspase Activation by Eliminating IAP Inhibition. Cell 2000; 102:33-42.

91. Dull TR, ZuJerey M, Kelly RJ, Mandel M, et al. 1998. A third-generation lentivirus vector with a conditional packaging system. J. Virol. 72:8463-8471.

92. Duvic В., Hoffmann JA., Meister M., Royet J. Notch Signaling Controls Lineage Specification during Drosophila Larval Hematopoiesis. Current Biology, Volume 12. Issue 22,2О02.стр.1923-1927

93. Ebihara Y., Xu ML, Manabe A. et al. Exclusive expression of G-CSF receptor on myeloid progenitors in bone marrow CD34*cells. Br J of Haematology, 2000, 109:153-161.

94. Endersen PC, Prytz PS, Aarbakke J: A new flow cytometric method for discrimination of apoptotic cells and detection of their cell cycle specificity through staining ofF-actin and DNA. Cytometry 20:162-171,1995.

95. Fadok VA, Voelker DR, Cammpbell PA, Cohen JJ, Bratton DL, Henson PM: Exposure of phosphatidyl serine on the surface of apoptotic lymphocytes triggers specific recognition and removal by macrophages. J Immunol 148:2207-2216, 1992.

96. Fahnenstish H, Dame C; Atlera A; Rosskamp R; Kowalewski S. Erythropoietin as a biochemical parameter for fetal hypoxia. Klin-Paediatr. 1995 Nov-Dec, 207(6): 326-30.

97. Ferber A, Grassi A, Akyol D, О'red I y-Green C, Divon MY. The association of fetal heart rate patterns with nucleated red blood cell counts at birth. Am J Obstet Gynecol 2003; 188:1228-30.

98. Ferns SJ, Bhal BV, Basu D. Value of nucleated red blood cells in predicting severity and outcome of perinatal asphyxia.

99. Fibbe WE, Pruijt JF, van Kooyk Y. Figdor CG, Opdenakker G, Willemze R. The role of metalloproteinases and adhesion molecules in interleukin-8-induced stem-cell mobilization. Semm Hematol 2000; 37 (1 Suppl. 2): 3924.

100. Finer MH-, Dull TJ., Quin L, Farson D, Roberts MR. 1994. Kat: a high efficiency retroviral transduction system for primary human T lymphocytes. Blood 83:43-50.

101. Fleming R.J-, Scottgale T.N., Diederich R.G., Artavanis-Tsakonas S. The gene Serrate encodes a putative EGF-like transmembrane protein essential for proper ectodermal development in Drosophila melanogaster // Genes Dev. 1990. V. 4. P. 2188-2201.

102. Follenzi A., Naldini L. Generation of HIV-1 derived lentiviral vectors . 2002 Academic press, стр 454-456.

103. Forestier F. Some aspect of fetal biology-Fetal Ther. 1987,2:181-187.

104. Forestier F., Cox W.L.; Daffos F., RainautM. The assessment of fetal blood samples. Am.J. Obstet. Genecol. 1988,158,1184-1188

105. Forestier F., Daffos F-, Galacteros G, Bardakjan J., rainaut M., Beuzard Y. Hematological nalues of 163 normal fetuses between 18 and 30 weeks of gestation. Pediatr. Res., 1986, 20(4):342-346.

106. Forestier F., Daffos F., Rainaut M., Trivin F. Blood chemistry of noemal fetuses at midtrimester of pregnancy. Pediatr. Res., 1987,21,6:579-583.

107. Fortiny M.E.. Artavanis-Tsakonas S. The Supressor of Hairless protein participate in Notch receptor signaling // Cell. 1994. V. 79. P. 273-282.

108. Freireich EJ, Judson G, Levin RH. Separation and collection of leukocytes. Cancer Res 1965;25:1516-20.

109. Gatti RA, Meirwissen HJ, Alien HD. Immunological reconstitution of sex-1 inked lymphopenic immunological deficiency. Lancet 1968,2:1366-9.

110. Gazitt Y, Liu Q. Plasma levels of SDF-1 and expression of SDF-. receptor on CD34+ cells in mobilized penpheral blood of non-Hodgkin's lymphoma patients. Stem Cells 2001; 19:3745.

111. George D, Busse! JB. Neonatal thrombocytopenia. Semin Thromb Hemostat 1995, 21:276-93.

112. Gil-Gomez G, Berns A, Brady HJ. A link between cell cycle and cell death: Bax and Bcl-2 modulate Cdk2 activation during thymocyte apoptosis. Embo J 1998, 17: 7209-7218.

113. Gilmour J.R. Normal hemopoiesis in intrauterine and neonatal life. J.Pathol., 1942,52,25.

114. Glimm H, Tang P, Clark-Lewis I, von Kalle C, Eaves C. Ex vivo treatment of proliferating human cord blood stem cells with stroma-derived factor-1 enhances their ability to engraft NODSCID mice. Blood2002, 99: 34543457.

115. Gluecksmann, A (1951). "Cell death in normal vertebrate ontogeny." Biological Reviews 26: 59-86.

116. Gong J, Traganos F, Darzynkiewicz Z: A selective procedure for DNA extraction from apoptotic cells applicable for gel electrophoresis and flow cytometry. Anal Biochem 218:314-319, 1994.

117. Green DW, Elliott R, Mantle! D, Dollberg S, Mimouni FB, Littner Y. Neonatal nucleated red cell in discordant twins. Am J Perinatol. 2004 Aug; 21(6):341-5

118. Gupta S., Pahwa R-. O'reilly R., Good R.A., Siegal F.P. Ontogeny of lymphocyte subpopulations in human fetal liver. Proc. Natl. Acad. Sci.U.S.A., 1976,73,919.

119. Gyger M-, Stuart RK., Perreault C. Immunology of allogeneic peripheral blood mononuclear cells mobilized with granulocyte-colony stimulating factor Bone Marrow Transplant, 2000; 26:1-16.

120. Haas R., Mohle R., Pforsich M. et al. Blood-derived autografts collected during granulocyte colony-stimulating factor-enhanced recovery are enriched with early Thy-1* hematopoietic progenitor cells. Blood, 1995;85:1936-1943.

121. Hamblin A.S. Cytokines and Cytokine Receptors. 1993. P 89.

122. Hanion-Lundberg KM, Kirby RS. Nucleated red blood cells as a marker of academia in term neonates. Am J Obstet Gynecol 1999; 181:196-201.

123. Hasserjizan RP., Aster 1С, et al. 1996: Modulated expression of Notch 1 during thymocyte development. Blood 88:970.

124. Hatse S, Pnncen K, Bridger G, De Clercq E, Schols D. Chemokine receptor inhibition by AMD3100 is strictly confined to CXCR4. FEBS Lett 2002; 527: 255-262.

125. Hausmann G, O'Reilly LA, van Driel R, et al Pro-apoptotic apoptosis protease- activating factor 1 (Apaf-1) has a cytoplasmic localization distinct from Bcl-2 or Belli (L). J Cell Biol 2000; 149: 623-634.

126. Hawley RG, Covarrubias L, Hawley T, Mintz B. 1987. Handicapped retroviral vectors efficiently transduce foreign genes into hematopoietic stem cells. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84:2406-2410.

127. Hedley DW, McCulloch EA: Generation of oxygen intermediates after treatment of blasts of acute myeloblasts leukemia with cytosine arabinosidc: Role of bcl-2. 1.eukemia 10:1143-1149, 1996.

128. Heissig B, Hattori K, Dias S, Friedrich M, Ferris B, Hackett NR et al. Recruitment of stem and progenitor celis from the bone marrow niche requires MMP-9 mediated release of kit-ligand. Cell 2002; 109: 625637.

129. Hendrix CW, Fiexner C, MacFarland RT, Giandomenico C, Fuchs EJ, Redpath E et al. Pharmacokinetics and safety of AMD-3100, a novel antagonist of the CXCR-4 chemokine receptor, in human volunteers Antimicrob Agents Chemother 2000, 44: 16671673.

130. Higa GM., DeVore RF., Auber ML. et al. Biological and clinical correlates after chemotherapy and granulocyte colony-stimulating factor administration. Pharmacotherapy, 1998; 18(l):l-8.

131. Hokama T. Relationship between maternal and cord blood plasma iron concentrations. J Trap Pediatr 1999Apr; 45(2): 120.

132. Hwang JJ, Li L, Anderson WF. 1997. A conditional self-inactivating retrovirus vector that uses a tetracycline-responsive expression system. J- Virol. 71:7128-7131.

133. Imamura R., Miyamoto Т., Yoshimoto G. et al. Mobilization of human lymphoid progenitors after treatment with granulocyte colony-stimulating factor. J Immunol 2005;175:2647-2654.

134. Ivanovic Z, Belloc F, Faucher J-L et al- Hypoxia maintains and mterleukin-3 reduces the pre-colony-forming cell potential of dividing CD34+ murine bone marrow celis. Exp Hematol 2002; 30:67-73.

135. Ivanovic Z, Dello Sbarba PD, Trimoreau F et al. Primitive human HPCs are better maintained and expanded in vitro at 1 percent oxygen than at 20 percent. Transfusion 2000;40:1482-1488.

136. Jennings В., Preiss A., Dehdakis C, Bray S. The Notch signalling pathway is required for Enhancer of split bHLH protein expression during neurogenesis in the Drosophila embryo // Development. 1994. V. 120. P. 3537-3548.

137. Jilma В., Hergovich N„ Homoncik M. et al. Granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF) downregulates its receptor (CD 114) on neutrophils and induces gelatmase В release in humans. Br J Haematol 2000; 111: 314-320.

138. Jones III СМ., Greiss FC. The effect of labor on maternal and fetal circulating cteholamines. Am.J.Obstet. Gynecol. 1982,144,2,149-153.

139. Jonhston LA, Gallant P. Control of growth and organ size in Drosophila // BioEssays. 2002. V.24., 54-64.

140. Kafri T, Blomer U, Peterson DA, Gage FH, Verma M. Sustained expression of genes delivered directly into liver and muscle by lentiviral vectors. Nat. Genet. 1997. 17:314-317.

141. Kerr JF, Wyllie, AH and Currie, AR (1972). "Apoptosis: a basic biological phenomenon with wide-ranging implications in tissue kinetics." Br J Cancer 26(4): 239-57.

142. Kheradmand F., Werb Z. Shedding light on sheddases: role in growth and development // BioEssays. 2002. V. 24. P. 8-12.

143. Kidd S., Baylies M X , Gasic G.P., Young M.W. Structure and distribution of the Notch protein in development Drosophila // Genes Dev. 1989. V. 3. P. I l l 3-1129.

144. Kidd S., Lockett T.D., Young M.W. The Notch locus of Drosophila melanogaster // Cell 1983. V. 34. P. 421-433.

145. Kiel K., Cremer FW., Ehrbrecht E. et al. First and second apheresis in patients with multiple myeloma: no differences in tumor load and hematopoietic stem cell yield. Bone Marrow Transplant, 1998; 21(11): 1109-1115

146. Kirkpatnck C, Rich PR, Graw RG, Rogentine GN. Characterization of the cellular immune defect in chronic muco-cutaneous moniliasis (abstract) J Allergy 1970,45:101-2.

147. Klein Т., Seugnet L., Haenlin M., Arias A.M. Two different activities of Suppressor of Hairless during wing development in Drosophila // Development. 2000. V. 127. P. 3553-3566.

148. Knust E., Tietze K., Campos-Ortega J. A. Molecular analysis of the neurogenic locus Enhancer of split of Drosophila melanogaster // EMBO J. 1987. V. 6. P. 4113-4123.

149. Koenn ME. Kirby BA, Cook LL, Hare JL, et al. Comparison of Four Automated Hematology Analyzers Clinical Laboratory Science Fall 2001, 14; 4.

150. Kohn DB. Gene therapy for genetic haemato logical disorders and immunodeficiencies. J Intern Med 2001;249:379-90.

151. Kojika S, Griffin GD. Notch receptors and hematopoiesis Experimental Hematology, 2001,Vol29(9):1041-1052

152. Kollet O, Peled A, Byk T, Веп-Hur H, Greiner D, Shultz L et al. bela2 microglobulin- deficient (B2m(null)) NODSC1D mice are excellent recipients for studying human stem cell function. BloodlOOO; 95: 3102^3105.

153. Kovach NL, Lin N, Yednock T et al. Stem cell factor modulates avidity of a401 and a5Bl integnns expressed on hematopoietic cell lines. Blood, 1995; 85:159-167.

154. Kronenwett R, Martin S, Haas R. The role of cytokines and adhesion molecules for mobilization ofperipheral blood stem cells. Stem Cells 2000; 18: 320-330.

155. Lapidot T, Petit I. Current understanding of stem cell mobilization. The roles of chemokines. proteolytic enzymes, adhesion molecules, cytokines, and stromal cells. Exp Hematol 2002; 30: 973-981.

156. Laterveer L. Lindley II, Hamilton MS, Willemze R, Fibbe WE. lnterleukin-8 induces rapid mobilization of hematopoietic stem cells with radioprotective capacity and long term myelolymphoid repopulalmg ability. Blood 1995, 85: 2269-2275.

157. Lattaillade J-J, Clay D. Dupuy C, Rigal S, Jasmin С Bourin P et al Chemokine SDF- 1 enhances circulating CD34+ cell proliferation in synergy with cytokines: possible role in progenitor survival. Blood 2000, 95: 756-768.

158. Laver J, Duncan E, Abboud M, Gasparetto C, Sahdev I, Warren D, et al.: High levels of granulocyte and granulocyte-macrophage colony-stimulating factors in cord blood of normal full-term neonates. J Pedialr 1990, 116: 627-631.

159. Lawrence N, Klein T, Brerman K, Arias AM. Structural requirements for Notch signalling with Delta and Serrate during the development and patterning of the wing disc of Drosophila // Development. 2000. V. 127. P. 3185-3195-

160. Lee B, Ratajczak J, Doms RW, Gewirtz AM, Ratajczak MZ. Coreceptorchemokine receptor expression on human hematopoietic cells: biological implications for human immunodeficiency virus-type 1 infection. Blood 1999; 93: 1145-1156.

161. Lee Y, Gotoh A, Kwon Ш, You M, Kohii L, Mantel С et al Enhancement of intracellular signaling associated with hematopoietic progenitor cell survival in response to SDF-1CXCL12 in synergy with other cytokines. Blood 2002, 99: 4307-4317.

162. Lemoli RM, Tafuri A, Tura S. et al- Cycling Status of CD34* Cells Mobilized Into Peripheral Blood of Healthy Donors by Recombinant Human Granulocyte Colony-Stimulating Factor. Blood, 1997; 89(4)1189-1196

163. Letsky EA. Erythropoiesis in pregnancy. J Perinat Med 1995; 23(1-2): 39-45

164. Lindsley D.L., Zimm G.G. The genome of Drosophila melanogaster. New York: Academic Press, 1992.

165. Linette GP, Li Y, Rolh K, Korsmeyer SJ. Cross talk between cell death and cell cycle progression: BCL-2 regulates NFAT mediated aciivation. Proc Natl Acad Sci USA 1996; 93: 9545-9552.

166. Liu F, Poursine-Laurent J, Link DC. Expression of the G-CSF receptor on hematopoietic progenitor cells is not required for their mobilization by G-CSF. Blood, 2000;95:3025-3031.

167. Lizard G, Foumel S. Genestier L, Dgedin N, Chaput C, Flacher M, Mutin M. Panaye G, Revillard J-P: Kinetics of plasma membrane and mitochondrial alterations in cells undergoing apoptosis. Cytometry, 1995,21:275-283.

168. Lockshin RA, Williams CM. Programmed cell death. II. Endocrine potentiation of the brea down of the intersegmental muscles of silkmoths. J Insect Physiol, 1964, 10: 643-649.

169. Lockshin RA, Zaken Z. Programmed cell death and apoptosis: origins of the theory Nat Rev Mol Cell Bio!, 2001,2(7):545-50.

170. Luo H., Dearolf CR. The JAK/STAT pathway and Drosophila development // BioEssays. 2001. V. 23. P. 1138-1147.

171. Lyman В • Yedvobnik B. Drosophila Notch recepter activity supresses Hairless functon during adult external sensory organ development // Genetics. 1995. V. 141. P. 1491-1505.

172. Ma Y, Zou P, Xiao J, Huang SA: Expression of survivin in cord blood CD34(+) stem/progenitor cells and its significance. Zhonghua Xue Ye Xue Za Zhi. 2003 May; 24(5):238-40.

173. Maciejewski JP, Sellen C, Sato T, Anderson S, Young NS. Increased expression of Fas antigen on bone marrow CD34+ cells of patients with aplastic anaemia. Br J Haematol 1995;91:245-252.

174. Maconi M, Rolfo A, Cardaropolo S, Bnni M, Damse P. Haematologic values in healthy and small for gestational age newborns Labhematol. 2005, II(2): 152-6.

175. Maeda K, Yoshimura K, Shibayama S, Habashita H, Tada H, Sagawa К el al. Novel low molecular weight spirodiketopiperazine derivatives potently inhibit R5 HIV-l infection through their antagonistic effects on CCR5. J Biol С hem 2001; 276: 35194-'35200.

176. Majno G, Joris I: Apoptosis, oncosis, and necrosis. An overview of cell death. Am J Pathol, 1995,146:3-16.

177. Manno MP, LuceMJ, Reiser J. Small-to large-scale production of lentivirus vectors. Methods in Molecular Biology, vol.229: Lentivirus Gene Engineering Protocols. Edited by M. Federico, Humana Press Inc., Totowa, NJ 2002,43-50.

178. Matsuno K., Ito M., Hori K., Miyashita F., Suzuki S., Kishi N., Artavanis-Tsakonas S., Окало H. Involvement of pro line-rich motif and RING-H2 finger of Deltex in the regulation ofNolch signaling//Development. 2002. V. 129.P. 1049-1059.

179. Mazel S, Burtrum D, Petrie HT. Regulation of cell division cycle progression by bcl- 2 expression: A potential mechanism for inhibition of programmed cell death. J Exp Med 1996; 183: 2219-2226.

180. McCarthy JM, Capullan T, Thompson Z, Zhu Y, Spellacy WN. Umbilical cord nucleated red blood cell counts: normal values and the effect of labor. J Pennatol. 2006 Feb: 26(2):89-92.

181. McConkey DJ, Nicotera P, Hartzell P, Bellomo G, Wyllie AH, Orrenius S: Glucocorticoids acticvate a suicide process in thymocytes through an elevation of cytosolic Ca21 concentration. Arch Biochem Biophys 269:365-370, 1989.

182. McCredie KB, Hersh EM, Freireich EJ. Cells capable of colony formation circulate in the peripheral blood of man. Science 1971;171:293-4.

183. Meberg A, Jakobsen E, Halvorsen K. Humoral regulation of erythropoiesis and thrombopoiesis in appropriate and small for gestational age infants. Acta Paediatr Scand. 1982 Sep;71(5)769-73.

184. Medcalf D., 1989 The molesular control of cell division, differentiation, commitment and maturation in hematopoietic cells. Nature 399:27.

185. Michael NL, D'Arcy L, Ehrenberg PK, Redfield RK. Naturally occuring genotypes of human immunodeficiency virus type 1 long terminal repeat display a wide range of basal and Tat-induced activities. J. Virol, 1994,68:3163-3174.

186. Miller LK. An exegesis of lAPs: Salvation and surprises from BIR motifs. Trends Cell Biol 1999; 9: 323-328.

187. M6hle R, Moore MA, Nachman RL et al. Transendotheiial migration of CD34+ and mature hematopoietic cells: an in vitro study using a human bone marrow endothelial cell line. Blood, 1997; 89:72-80.

188. МбЫе R, Murea S, Kirsch M et al. Differential expression of L-selectin, V L A 4 and

189. FA-1 on CD34+ progenitor cells from bone marrow and peripheral blood during G- CSF-enhanced recovery. Exp Hematol, 1995; 23:1535-1542.

190. Mohle R., Bautz F , Rafii S. et al. Regulation of Transendotheiial Migration of Hematopoietic Progenitor Cells. Ann N-Y AS, 1999, 872: 176-186

191. Moore MAS., Metcalf D Ontogeny of the haemopoietic system; yolk sac origin of in vivo and in vitro colony forming cells in the developing mouse embryos. Br.J.Haematol., 1970,18,279-296.

192. Murdoch С CXCR4: a chemokine extraordinaire. Immunol Rev 2000; 177: 175-184.

193. Naeye R, Localio R, Determining the time before birth when ischemia and hypoxemia initiated cerebral palsy. Odstet Gynecol 1995; 86:713-9.

194. Nagafuji K, Takenaka K, Niho Y: Fas antigen expression on human hematopoietic progenitor cells. Nippon Rinsho. 1996 Jul;54(7): 1790-1796.

195. NihoY, AsanoY. Fas/Fas ligand and hematopoietic progenitor cells. Curr Opin Hematol 1998; 5: 163-165.

196. Niissen H, Meisenholder GW, Gottlieb RA. et al. Granulocyte Colony-Stimulating Factor Upreguiates the Vacuolar Proton ATPase in Human Neutrophils. Blood, 1997; 90(11):4598-460I

197. O'Reilly LA, Huang DC, Strasser A. The cell death inhibitor Bcl-2 and its homologues influence control of cell cycle entry. Embo J 1996, 15: 6979-6990

198. OgawaM. Differentiation and proliferation of hematopoietic stem cells. Blood , 1993, 81:2844. 235- Ogawa M., Matsunaga T. Humoral regulation of hematopoietic stem cells. Ann N-Y AS, 1999,17-23.

199. Olson P, Nelson S, Domburg R. Improved self-inactivating retroviral vector derived from spleen necrosis virus. J.Virol, 1994, 68:7060-7066.

200. Papayannopoulou T, Craddock C. Homing and trafficking of hemopoietic progenitor cells. Acta Hematol 1997;97:97-104

201. Papayannopoulou T, Priestley GV, Nakamoto B. Anti-VLA4/VCAM-1-induced mobilization requires cooperative signaling through the kit/mkit ligand pathway Blood, 1998;91:2231-2239.

202. Peled A, Petit I, Kollet O, Magid M. Ponomaryov T, Byk T el al. Dependence of human stem eel! engraftment and repopulation of NODSCID mice on CXCR4. Science 1999; 283: 845-848.

203. Perkov S, Flegar-Mestric Z, Seper I. Biologic vanation in electrolytes and essential microelements in the blood of neonates and their mothers. Lijec vjesn 199S Jun, 120(6): 145-150.

204. Perri T, Ferber A, Digli A, Rabizadeh E, Weissmarm-Brenner A, Divon MY. Nucleated Red Blood Cells in Uncomplicated Prolonged Pregnancy. Obstetrics Gynecology 2004; 104:372-376.

205. Peters R, Leyvraz S, Perey L. Apoptotic regulation in primitive hematopoietic precursors. Blood 1998; 92: 2041-2052.

206. Philpott NJ., Prue RL., Marsh JC. et al. G-CSF-mobilized CD34 peripheral blood stem cells are significantly less apoptotic then unstimulated peripheral blood CD34 cells: role of G-CSF as survival factor. Br J Haematol, 1997; 97(1): 146-152.

207. Piacentini M, Fesus 1, Farrace MG, Ghibelli L, Piredda L, Meline G: The expression of "tissue" transglutaminase in two human cancer cell lines is related to with the programmed cell death (apoptosis). Eur J Cell Biol, 1995,54:246-254

208. Picaud JC, Putet G, Salle BL, claris 0. Iron supplementation in preterm infants treated with erythropoietin. Arch Pediatr 1999 Jun; 6(6): 657-664.

209. Pletl PA, Frankovitz SM, Wolber FM, Abonour R, Orschell-Traycoff CM. Treatment of circulating CD34(+) cells with SDF-1 alpha or anti-CXCR4 antibody enhances migration and NODSCID repopulating potential. Exp Hematol 2002, 30: 1061-1069.

210. Pranke P, Failace RR, Allebrandt WP, Steibel G, Schmidt F, Nardi NB. Hematologic and Immunophenotypic Characterization of Human Umbilical Cord Blood. Acta Haematol 2001; 105; 71-76.

211. Prosper F, Stroncek D, McCarthy JB et at Mobilization and homing of penpheral blood progenitors is related to reversible downregulation of alpha4 betal integrin expression and function. J Clin Invest, 1998; 101:2456-2467.

212. Proudfoot NJ. Transcriptional interference and termination between duplicated alpha- globin gene const met s suggests a novel mechanism for gene regulation. Nature, 1986, 322:562-565

213. Qi H., Rand M.D., Wu X., Sestan N.. Wang W., Rakic P., Xu Т., Artavanis-Tsakonas S. Processing of the Notch ligand Delta by the meta Порто tease Kuzbanian // Science. 1999, V. 283,91-94.

214. Rathmell JC, Thompson CB. The central effectors of cell death m the immune system. Annu Rev Immunol 1999, 17:781-828.

215. Rauskolb С The establishment of segmentation in the Drosophila leg // Development. 2001. V. 128. P.45II-4521.

216. Redzko S, Przepiesc J, Zak J, Turowski D, Urban J, Wysocka J. Hematologic parameters in the cord blood labor complicated by meconium-stamed amniotic fluid. Ginekol Pol, 2000, 71 (8):931-935.

217. Reed JC, Bischoff JR. BIR mging chromosomes through cell division—and survivin' the experience. Cell 2000, 102: 545-548.

218. Schwartz KA. Gestational thrombocytopenia and immune thrombocytopenias in pregnancy. Hematol Oncol Clin North Am. 2000 Oct; 14(5):110Ыб.

219. Shen H, Cheng T, Olszak 1, Garcia-Zepeda E, Lu Z, Herrmann S et al CXCR-4 desensitization is associated with tissue localization of hemopoietic progenitor cells. J Immunol 2001; 166: 5027-5033.

220. Shepard SB., Broverman SA., Muskavilch MAT. A tripartite mterection among of allele of Notch, Delta and Enhancer of split during imaginal development of Drosophila melanogaster// Genetics. 1989. V. 122. P. 429-438.

221. Shimizu S. Eguchi Y, Kamiike W et al. Induction of apoptosis as well as necrosis by hypoxia and predominant prevention of apoptosis by Bcl-2 and Bcl-XL. Cancer Res 1996,56:2161-2166.

222. Shimoda K, Okamura S, Harada N. et al. High-frequency granubid colony-forming ability of G-CSF receptor possessing CD 34 antigen positive human umbilical cord blood hematopoietic progenitors. Exp Hematology, 1992; 23: 226-228.

223. Shinjo K, Takeshita A, Ohnishi K, Ohno R. Expression of granulocyte colony- stimulating factor receptor increases with differentiation in myeloid cells by a newly devised quantitative Поw-cytometnc assay. Br J of Haematology, 1995,91:783-794.

224. Shinjo K, Takeshita A, Ohnishi K. et a!. Granulocyte colony-stimulating factor receptor at a various differentiation stages of normal and leukemic hematopoietic cells. Leuk Lymphoma, 1997,25: 37-46.

225. Siegel RM, Fredenksen JK, Zachanas DA, et al. Fas preassociation required for apoptosis signaling and dominant inhibition by pathogenic mutations. Science 2000; 288: 2354-2357.

226. Singh N, Phillips RA, Iscove NN, Egan SE. Expression of notch receptors, notch ligands. and fringe genes in hematopoiesis Experimental Hematology, 2000, Vol 28 (5): 527-534

227. Sotillos S., Roch F., Campuzano S. The metalloprotease-desintegrin Kusbanian perticipates in Notch activation during growth and partenning of Drosophila imaginal discs // Development. 1997. V. 124. P. 4769-4779.

228. Starckx S, Van den Steen PE, Wuyts A. et al. Neutrophil gelatinase В and chemokines in leukocytosis and stem cell mobilization. Leuk Lymphoma ,2002; 43(2): 233-241.

229. StennickeHR, Salvesen GS Biochemical characteristics of caspases-3, -6, -7, and-8. // J. Biol. Chem., 1997, Vol. 272, P. 25719-15723.

230. Strasser A. Apoptosis: Death of a T-cell. // Nature, 1995, Vol.373, N.6513. P. 385- 386.

231. Struhl G, Adachi A. Nuclear access and action of Notch in vivo // Cell. 1998. V. 93. P. 649-660.

232. Struhl G, Greenwald I. Presenilin mediated transmembrane cleavage is required for Notch signal transduction in Drosophila // Proc. Natl Acad. Sci. USA. 2001. V. 98. P. 229-234.

233. Sun B, Bai CX, Feng K, Li L, Zhao P, Pei XT. Effects of hypoxia on the proliferation and differentiation of CD34(+) hematopoietic stem/progemtor cells and their response to cytokines. Sheng Li Xue Bao. 2000 Apr;52(2): 143-146.

234. Susin SA, Lorenzo HK, Zamzami N, et al. Molecular characterization of mitochondrial apoptosis-inducing factor. Nature 1999, 397: 441-446.

235. Sutherland DR, Keating A. et al. Sensetive detection and enumeration of CD133+ 34+ cells in peripheral and cord blood by flow cytometry Exp. Gematol, 1994, 1003-1010.

236. Sutton RE, Wu HTM, Bohnlem RRE, Brown PO. Human Immunodeficiency Virus Type 1 Vectors Efficiently Transduce Human Hematopoietic Stem Cells. Journal of Virology, 1998, Vol.72 (7), 5781-5788

237. Sutton RE. Production of Lentiviral Vector Supematants and Trasduction of Cellular Targets. Methods in Molecular Biology, vol.229: Lentivirus Gene Engineenng Protocols. Edited by M. Fedenco, Humana Press Inc., Totowa, 2002, NJ, 147-158.

238. Takahito I, et ai. Application of bone marrow-derived stem ceils in experimental nephrology. Journal of Exp en mental Nephrology, 2001, 9: 444-450

239. Takeyama K, Ohto H. PBSC mobilization- Transfusion and Aphcresis Science 2004, 31:233-243.

240. Thilaganathan B, Athanasiou S, Ozmen S, Creighton S, Watson NR, Nicolaides KH. Umbilical cord blood erythroblast count as an index of intrauterine hypoxia. Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed. 1994 May;70 (3); F192-4.

241. Thomas DB, Yoffey JM. Human fetal haemopoiesis I The cellular composition of fetal blood. Br.J.Haemat, 1962.8:290-295.

242. Thomas J, Liu F. Link DC Mechanisms of mobilization of hematopoietic progenitors with granulocyte colony-stimulating factor. Current Opinion in Hematology, 2002;9:183-189.

243. Torok-Storb B- et al Dissecting the marrow mi его environment. 1SH-EHA, 1999, pp 164-169.

244. Tremblay CL, Kollmann C. Giguel F, Chou TC, Hirsch MS. Strong in vitro synergy between the fusion inhibitor T-20 and the CXCR4 blocker AMD-3100. J Acq Immune DefSyndHuman Retrovirot 2000; 25: 99-102.

245. Tsao PN, Teng RJ, Chou HC, Tsou K.I. The thrombopoietm level in cord blood in infants bom mothers with pregnancy-induced hypertension Biol Neonate.2002, 82(4):217-21.

246. Tsuji K, Ebihara Y. Expression of G-CSF receptor on myeloid progenitors. Leuk 1.ymphoma, 2001; 42(6): 1351-1357.

247. Tsujimoto Y, Shimizu S, Eguchi Y, KamiikeW, Matsuda H. Bcl-2 and Bcl-xL block apoptosis as well as necrosis; possible involvement of common mediators in apoptotic and necrotic signal transduction pathways. Leukemia 1997, 11 (Suppl. 3):380-382.

248. Uchida N, He D, Tsukamoto A. The Unexpected GO/Gl Cell Cycle Status of Mobilized Hematopoietic Stem Cells From Peripheral Blood. Blood, 1997, 89(2):465-472

249. Udom-Rice I, Bussei JB. Fetal and neonatal thrombocytopenia. Blood Rev 1995; 9:57-64.

250. UraH, Hirata K, Katsuramaki T Mechanisms of cell death in hypoxic stress Nippon GekaGakkai Zasshi 1999; 100:656-662

251. Uren AG, Beitharz T, O'Connell MJ, et al. Role for yeast inhibitor of apoptosis (lAP)-hke proteins in cell division. Proc Natl Acad Sci USA 1999; 96:10170-10175.

252. Ustun Y, Engin-Ustun Y, Kaya E, Meydanli MM, Kulak N. Elevated nucleated red cell count: a population-based study. J ReprodMed. 2006 Jan; 51(l):36-40.

253. Valsamakis A, Schck N, Alwine JC. Elements upstream of the AAUAAA within the human immunodeficiency virus polyadenylation signal are required for efficient polyadenylation in vitro. Mol. Cell. Biol, 1992, 12:3699-3705.

254. Van den Hof MC, Nicolaides KN. Platelet count in normal, small, and anemic fetuses. Am J Gynecol. 1990 Mar; 162(3):735-9.

255. Vaux DL: Toward an understanding of the molecular mechanisms of physioiogical cell death. Proc Natl Acad Set. 1993, 90:786-789,.

256. Vento M, Vina J, Asensi M. Erythropoietin and iron therapy for preterm infants. J pediatr 1999 Apr; 134(4): 520; discussion 521-522.

257. Verhagen AM, Ekert PG, Pakusch M, et al. Identification of DIABLO, a Mammalian Protein that Promotes Apoptosis by Binding to and Antagonizing 1AP Proteins. Cell 2000; 102: 43-54.

258. Vetillard J, Drouet M, Neildez-Nguyen TMA, et al. Interleukine-8 acts as a strong peripheral blood granulocyte-гее raiting agent rather then as a hematopoietic progenitor cell-mobilizing factor J of Hematoter&stem cell res, 1999, 8:365-379.

259. Viardot A, Kronenwett R, Deichmann M, Haas R. The human immunodeficiency virus (HlV)-type I coreceptor CXCR-4 (fusin) is preferentially expressed on the more immature CD34+ hematopoietic stem cells. Ann Hemaiol 1998; 77: 193-197.

260. Voermans C, Kooi ML, Rodenhuis S, van der Lelie H, van der Schoot CE, Gerritsen WR. In vitro migratory capacity of CD34+ cells is related to hematopoietic recovery after autologous stem cell transplantation. Blood 2001,97: 799-804.

261. Wang FS, Itose Y, Tsuji T, Hamaguchi Y, Hirai K, Sakata T. Development and clinical application of nucleated red cell counts and staging on the automated haematology analyzer XE-2100. Clin Lab Haematol. 2003 Feb; 25(l):17-23.

262. Watanabe Т., Kawano Y., Kanamaru S. et al. Endogenous interleukin-8 (IL-8) surge in granulocyte colony-stimulating factor-induced peripheral blood stem cell mobilization. Blood, 1999, 93(4): 1157-1163.

263. Weiden PL, Floumoy N, Sanders JE, et al. Ami-leukemic effect of graft-versus-host disease contributes to improved survival after allogeneic marrow transplant all on Transplant Proc 1981;13:248-51.

264. Wilimas JA, Wall JE, Fairclough DL, Dancy R, Griffin C, Karanth S. et al.: A longitudinal study of granulocyte colony-stimulating factor levels and neutrophil counts in newborn infants J Pediatr Hematol Oncol 1995, 17: 176-179.

266. Wright DE, Bowman EP, Wagers AJ, Butcher EC, Weissman IL. Hematopoietic stem cells are uniquely selective in their migratory response to chemokines. J Exp Med 2002; 195: 11454154.

267. Wu L, Aster J, Griffin JD. Notch receptor signal transduction Experimental Hematology, 2000, Vol. 28 (7), Suppl 1, 92

268. Wu X, Holschen J, Kennedy SC, Ponder KP. Retroviral vector sequences may interact with some interna! promoters and influence expression Hum. Gene Ther, 1996,7:159-171.

269. Wyliie AH, Arends MJ, Morris RG, Walker SW, Evan G: The apoptosis endonuclease and its regulation. Seminars Immunol, 1992, 4:389-398.

270. Wyliie AH: Apoptosis and the regulation of ceil numbers in normal and neoplastic tissues: An overview. Cancer Metast Rev, 1992, 11:95-103.

271. Xiao M, Dooley DC. Assessment of Cell Viability and Apoptosis in Human Umbilical Cord Blood Following Storage. Journal of Hematotherapy & Stem Cell Research. Feb 2003, Vol. 12, No. 1:115-122

272. Yamaguchi M-, Ikebuchi К., Hirayama F. et al. Different adhesive characteristics and VLA-4 expression of CD34(*) progenitors in G0/G1 versus S+G2/M phases of the cell cycle. Blood, 1998; 92(3):842-848.

273. Yee K, Moores 1С, Jolly DJ, Wolff JA, Respress JG, Fnedmann T. Gene expression from transcriptionally disabled retroviral vectors. Proc. Natl. Acad. Sci, 1987, 84:5197-5201.

274. Yeruchimovich M, Dollberg S, Green DW, Mimouni FB. Nucleated red blood cells in infants of smoking mothers. Obstet Gynecol 1999; 93:403-406.

275. Yeruchimovich M, Mimouni FB. Green DW, Dollberg S. Nucleated red blood cells in healthy infants of women with gestational diabetes. Obstet Gynecol 2000; 95:84-86.

276. Yu SF, Von Ruden T, Kantoff PW, Graber c, Sciberg M, Rufher U, Anderson WF, Gilboa E Self-inactivating retroviral vectors designed for transfer of whole genes into mammalian cells. Proc. Natl. Acad. Sci, 1986,83:3194-3198.

277. Zipursky A., Brown E., Palko J • Brown EJ. The erythrocyte differential count in newborn infants. Fm J Pediatr Hematol Oncol 1983:5:45-51.

278. Zufferey R, Donello JE, Trono D, Hope TJ. Woodchuck hepatitis virus posttranscriptional regulatory element enhances expression of transgenes delivered by retroviral vectors Journal of virology. Apr. 1999, Vol. 73, № 4, стр. 2886-2892

279. Zufferey R, Dull T, Mandel RJ, Bukovsky A, et al. Self-Inactivating lentivirus vector for safe and efficient in vivo gene delivery Journal of virology. Dec. 1998, Vol. 72, № 12, стр. 9873-9S80.

280. Zufferey R, Nagy D, Mandel RJ, Naldini L, Trono D. Multiply attenuated lentiviral vector achieves efficient gene delivery in vivo. Nat. Biolcchnol, 1997, 15:871-875 £6