Изучение фармакокинетики и механизмов цитотоксического действия L-лизин-α-оксидазы из Trichoderma cf. aureoviride Rifai BKMF-4268D тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.04, кандидат наук Бабаева Гулалек

• Бабаева Гулалек
• кандидат наук
• 2022

Оглавление диссертации кандидат наук Бабаева Гулалек

Введение

Актуальность проблемы

Цель работы

Задачи работы

Научная новизна

Научная и практическая значимость

Личный вклад автора

Методология и методы исследования

Положения, выносимые на защиту

Степень достоверности и апробация результатов

Структура и объем диссертации

Публикации

Благодарности

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Лизиновая зависимость злокачественных клеток-мишень

для противоопухолевой терапии

1.1.1. Роль лизина в организме

1.1.2. Пути превращения лизина в организме

1.1.3. Механизмы лизиновой зависимости опухолевых клеток

1.2. Структурно-функциональные исследования и механизмы противоопухолевого действия оксидаз Ь-аминокислот

1.2.1. Катализируемая реакция и структура оксидаз

Ь-аминокислот

1.2.2. Субстратная специфичность и механизм катализа оксидаз Ь-аминокислот

1.2.3. Механизмы реализации противоопухолевого эффекта оксидаз Ь-аминокислот

1.2.4. Проблемы разработки противоопухолевых препаратов

на основе ферментов

1.3. Противоопухолевая активность и каталитические свойства Ь-лизин-а-оксидазы

1.3.1. Каталиттические свойства и субстратная специфичность Ь-лизин-а-оксидазы

1.3.2. Структура Ь-лизин-а-оксидазы из различных источников

1.3.3. Источники Ь-лизин-а-оксидазы

1.3.4. Физико-химические свойтва Ь-лизин-а-оксидазы

1.3.5. Цитотоксическая активность Ь-лизин-а-оксидазы

1.3.6. Противоопухолевая активность Ь-лизин-а-оксидазы

1.3.7. Перспективы изучения Ь-лизин-а-оксидазы в онкологии

Глава 2. Материалы и методы

2.1. Характеристика Ь-лизин-а-оксидазы

2.2. Реактивы

2.3. Определение ферментативной активности Ь-лизин-а-оксидазы

2.4. Определение концентрации белка

2.5. Оценка устойчивости Ь-лизин-а-оксидазы к протеолизу

2.6. Определение концентрации Ь-лизина

2.7. Оценка цитотоксичности Ь-лизин-а-оксидазы

2.8. Оценка эффективности распыления Ь-лизин-а-оксидазы

2.9. Исследование интернализации Ь-лизин-а-оксидазы

изолированных отрезках

2.10. Оценка противоопухолевой активности Ь-лизин-а-оксидазы

2.11. Оценка элементов фармакокинетики Ь-лизин-а-оксидазы

2.12. Определение уровня аминокислот и полиаминов

2.13. Статистическая обработка

Глава 3. Результаты и обсуждение

3.1. Исследование фармакокинетики Ь-лизин-а-оксидазы у мышей при внутривенном и внутрибрюшинном введении в терапевтических дозах

3.1.1. Основные фармакокинетические параметры

Ь-лизин-а-оксидазы

3.1.2. Распределение Ь-лизин-а-оксидазы в органах

3.2. Изменение концентрации лизина после внутривенного и внутрибрюшинного введения Ь-лизин-а-оксидазы

3.3. Оценка противоопухолевой активности Ь-лизин-а-оксидазы при пероральном введении

3.3.1. Устойчивость Ь-лизин-а-оксидазы к протеолизу

3.3.2. Возможность всасывания Ь-лизин-а-оксидазы через стенку

тонкой кишки

3.3.3. Эффективность и переносимость Ь-лизин-а-оксидазы при пероральном введении

3.4. Оценка противоопухолевой активности Ь-лизин-а-оксидазы при ингаляционном введении

3.4.1. Оценка эффективности распыления Ь-лизин-а-оксидазы

3.4.2. Оценка эффективность Ь-лизин-а-оксидазы при

ингаляционном введении

3.5. Механизмы реализации противоопухолевого действия

Ь-лизин-а-оксидазы

3.5.1. Изменение концентрации аминокислот под действием Ь-лизин-а-оксидазы

3.5.2. Снижение концентрации полиаминов под действием Ь-лизин-а-оксидазы

3.6. Механизмы реализации цитотоксического действия

Ь-лизин-а-оксидазы

Заключение

Выводы

Список литературы

Сокращения и условные обозначения

ЛО - L-лизин-а-оксидаза, фермент грибкового происхождения

LAAO - оксидаза L-аминокислот

ADI - L-аргининдеиминаза

МГЛ - метионин-гамма-лиаза

АФК - активные формы кислорода

ПА - полиамины

ТРО - торможение роста опухоли

T/C - treatment/control

DCFH2-DA - 2,7-дихлордигидрофлуоресцеин диацетат

МТТ - 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенил-тетразолия бромид

ИФА - иммуноферментный анализ

ФК - фармакокинетика

в/в - внутривенно

в/бр - внутрибрюшинно

п/о - перорально

Введение

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Изучение фармакокинетики и механизмов цитотоксического действия L-лизин-α-оксидазы из Trichoderma cf. aureoviride Rifai BKMF-4268D»

Актуальность проблемы

В последние десятилетия в терапии злокачественных новообразований наблюдается значительный прогресс, но проблемы с лечением онкологических больных по-прежнему остаются, и поэтому существует необходимость создания новых противоопухолевых средств. Трудности в разработке новых препаратов часто связаны с отсутствием у новых препаратов преимуществ перед существующими, низкой селективностью действия или трудоемкостью их производства. Полезными терапевтическими мишенями обычно являются уникальные особенности раковых клеток, которые отличают их от нормальных клеток и с которыми можно бороться с помощью соответствующих лекарственных средств. Известно, что разрушающие аминокислоты ферменты могут использоваться в качестве противоопухолевых препаратов, так как они более безопасны и эффективны, чем многие другие средства химиотерапии.

Ь-лизин является незаменимой аминокислотой для человека и используется при биосинтезе многочисленных белков. Ь-лизин-а-оксидаза (ЛО), одна из оксидаз Ь-аминокислот (ЬААО), внеклеточный фермент грибкового происхождения, катализирует окислительное дезаминирование Ь-лизина до 2-кето-6-аминокапроновой кислоты с образованием пероксида водорода и аммиака. Совокупность современных научных знаний предполагает возможность многофакторного механизма антипролиферативного действия ЛО, ведущая роль в котором все же принадлежит расщеплению L-лизина. Вклад предполагаемых механизмов в реализацию противоопухолевого действия пока остается недостаточно выясненным, поэтому представляется актуальным исследовать механизмы цитотоксического эффекта. Поскольку ЛО имеет белковую природу, можно предполагать, что в организме она будет подвергаться денатурации и дальнейшему расщеплению до свободных аминокислот. Это может значительно снижать время цитотоксического воздействия фермента.

Поэтому представляет большую важность изучить фармакокинетику ЛО для дальнейшего создания противоопухолевых препаратов на ее основе.

Цель работы - установить основные фармакокинетические параметры при различных путях введения, а также изучить механизмы цитотоксического и противоопухолевого действия ЛО.

Задачи работы

1. Исследовать эффективность ЛО при ингаляционном введении мышам с трансплантированными опухолями.

2. Исследовать эффективность ЛО при пероральном введении мышам с трансплантированными опухолями.

3. Оценить динамику содержания Ь-лизина в плазме крови после внутривенного и внутрибрюшинного введения ЛО здоровым мышам.

4. Оценить фармакокинетические параметры ЛО при внутривенном и внутрибрюшинном введении здоровым мышам.

5. Изучить вклад в противоопухолевую активность ЛО генерации активных форм кислорода.

6. Исследовать влияние ЛО на концентрацию аминокислот и полиаминов в печени и мозге.

Научная новизна

Впервые изучена возможность использования перорального и ингаляционного пути введения ЛО. Изучены фармакокинетические параметры ЛО при внутривенном и внутрибрюшинном введении лабораторным животным и динамика изменений концентраций лизина в сыворотке крови. Впервые установлены новые механизмы цитотоксического действия ЛО, связанные с образованием активных форм кислорода и снижением концентрации полиаминов.

Научная и практическая значимость

Полученные данные расширяют представление о действии оксидаз L-аминокислот, а именно ЛО, in vivo и in vitro. Результаты дают новые представления о механизмах действия ЛО, а также о новых способах ее введения и могут быть использованы при последующем изучении ЛО в качестве потенциального противоопухолевого агента. Полученные фармакокинетические данные имеют практическое значение для подбора дозы и кратности введения ЛО для терапии онкологических заболеваний.

Личный вклад автора заключался в самостоятельном проведении анализа имеющихся литературных данных, планировании, подготовке и проведении экспериментов, обработке и интерпретации полученных экспериментальных данных, а также в непосредственном участии в подготовке публикаций и докладов на конференциях по теме диссертационной работы.

Методология и методы исследования

В работе использовались методы биохимии, клеточной биологии, такие как определение количества белка по методу Бредфорд, измерение ферментативной активности, иммуноферментный анализ, культивирование опухолевых клеток и определение их жизнеспособности с помощью бромида 3- (4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-тетразолия (МТТ) и др., а также методы математического и статистического анализа данных.

Положения, выносимые на защиту

1. На лабораторных животных показана возможность перорального введения ЛО для терапии опухолей.

2. В зависимости от введенной дозы ЛО период полувыведения (Т1/2) в плазме крови мышей составляет 0,86-4,50 ч.

3. ЛО вызывает длительный лизиновый голод в организме после внутривенного и внутрибрюшинного введения.

4. Кроме истощения концентрации L-лизина были установлены такие механизмы противоопухолевого действия ЛО, как генерация активных форм кислорода и снижение уровня полиаминов.

Степень достоверности и апробация результатов

Достоверность полученных данных подтверждается большим количеством хорошо воспроизводимых результатов, их статистической значимостью, а также критической оценкой результатов исследования и сопоставлением их с имеющимся литературными данными.

Результаты работы были представлены на международных конференциях:

1. 43rd FEBS Congress, Biochemistry Forever. Прага, 2018.

2. 44th FEBS Congress, from Molecules to living Systems. Краков, 2019.

3. Клинические и теоретические аспекты современной медицины: материалы IX Международной научной конференции. Москва, 2018.

4. VIII Международный Молодежный Медицинский Конгресс Санкт-Петербургские научные чтения. Санкт-Петербург, 2019.

5. 45th FEBS Congress, Molecules of Life: Towards New Horizons. Любляна, 2021.

6. VII Международная конференция «Молекулярные и биологические аспекты химии, фармацевтики и фармакологии». Москва, 2021.

7. III Объединенный научный форм. VII Съезд биохимиков, молекулярных биологов и физиологов России, X Российский симпозиум "Белки и пептиды" и VII Съезда физиологов СНГ. Сочи-Дагомыс, 2021 г.

Структура и объем диссертации

Диссертационная работа изложена на 118 листах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, разделов «Материалы и методы», «Результаты и обсуждение», выводов, списка сокращений и списка литературы,

включающего 184 источников, из них 13 отечественных и 171 зарубежных.

Диссертация иллюстрирована 27 рисунками и 16 таблицами.

Публикации

По теме диссертации опубликованы 15 научных работ, в т.ч. 6 статей в рецензируемых журналах, индексируемых в базах данных Web of Science или Scopus и 9 тезисов докладов на российских и зарубежных конференциях. Благодарности

Автор выражает глубокую благодарность и признательность своим научным руководителям - д.б.н., профессору Лукашевой Елене Васильевне, д.м.н. Покровскому Вадиму Сергеевичу за поддержку и терпение, без которых выполнение работы было бы невозможно;

Проф. Н.Н. Чернову, к.б.н. С.Ш. Каршиевой за рецензирование, помощь в подготовке окончательного варианта диссертации;

проф. Е.М. Трещалиной, проф. А.Н. Лукашеву, к.б.н. Д.В. Соколовой, к.м.н. Н.В. Андроновой за содействие в выполнении отдельных экспериментов; к.б.н. А.Ю. Аринбасаровой, д.б.н. А.Г. Меденцеву за наработку и предоставление для проведения экспериментов фермента.

к.б.н. М.В. Комаровой за помощь в обработке экспериментальных данных; Также всем сотрудникам кафедры биохимии имени акад. Т.Т. Березова и сотрудникам лаборатории комбинированной терапии опухолей НИИ ЭДиТО НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина Минздрава РФ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Лизиновая зависимость злокачественных клеток - мишень для

противоопухолевой терапии

1.1.1. Роль лизина в организме

Основополагающее открытие в области метаболизма новообразований было сделано в начале 20 века, когда было установлено, что метаболическое перепрограммирование является одной из первых отличительных характеристик рака [20, 169]. Переключение на анаэробные процессы является одним из примеров модифицированного клеточного метаболизма, наблюдаемого в раковых клетках в ответ на высокую потребность в энергии для поддержания неконтролируемого роста этих клеток. В этих условиях выход АТФ ниже, чем при окислительном фосфорилировании; однако промежуточные продукты гликолиза и пентозофосфатного пути окисления глюкозы используются в биосинтезе нуклеотидов и аминокислот [168]. Чтобы получить больше питательных веществ из кровотока, раковые клетки часто демонстрируют более высокую экспрессию транспортеров глюкозы и аминокислот в клеточной мембране, поскольку они необходимы для поддержания высокой метаболической потребности опухолевых клеток [72].

Снижение потребления аминокислот опухолевыми клетками широко изучается в настоящее время [105]. Некоторые препараты, нацеленные на метаболизм аминокислот, применяются в клинике и демонстрируют терапевтический потенциал этого способа влияния. Ингибирование ферментов и/или транспортеров, особенно связанных с метаболизмом аминокислот, вероятно, будет системно токсичным из-за нарушения физиологических функций в нормальных тканях.

Поскольку в настоящей диссертационной работе предполагается использовать деградирующий Ь-лизин фермент в качестве лекарственного

средства, необходимо на основе известных из литературы данных оценить, какие изменения метаболизма может вызвать введение такого фермента. Для этого важно рассмотреть метаболические пути с участием L-лизина, которые протекают в организме здорового человека.

Основной ролью лизина в организме является протеиногенез. В больших количествах L-лизин содержится в гистонах и протаминах, в меньших количествах - в других белках. В тканях головного мозга наиболее часто встречаются белки с высоким содержанием лизина, особенно у высокоорганизованных животных [114]. Аминокислотные остатки лизина способствуют стабильности молекул белка, так как, его е-аминогруппа участвует в создании водородных связей, солевых мостиков или ковалентных взаимодействий при образовании оснований Шиффа [145, 151]. Существует несколько типов ковалентных модификаций гистонов, которые обычно затрагивают аминокислотные остатки лизина в выступающем хвосте гистонов. Модификации могут включать метилирование, ацетилирование или убиквитинирование. Различные модификации оказывают воздействие на регуляцию экспрессии генов, в результате чего гены могут быть активированы или подавлены [27]. Таким образом, аминокислотные остатки лизина играют важную роль в эпигенетической регуляции посредством модификации гистонов.

е-Аминогруппы лизильных остатков белков являются одним из основных сайтов неферментативного гликозилирования белков [23]. Обширные химические модификации пептид-связанного лизина происходят при постсинтетической модификации коллагена и эластина, включающие образование из лизина и гидроксилизина различных би-, три- и тетрафункциональных сшивающих фрагментов, как ферментативно, так и неферментативно [58].

При заболеваниях, сопровождающихся повышением уровня глюкозы в крови, гликозилирование белков становится существенным за счет

неферментативного гликолизирования 8-NH2 группы лизина. Свободный лизин напрямую не снижает уровень глюкозы в сыворотке крови, но используется для лечения больных сахарным диабетом, так как лизин не только предотвращает гликозилирование белков, в частности гемоглобина, но и уменьшает образование активных продуктов гликирования [86]. В головном мозге избыток лизина из-за нарушения метаболизма способствует развитию глутаровой ацидурии I типа, пиридоксинзависимой эпилепсии и гиперлизинемии [76, 134, 139, 145].

Свободный лизин может ингибировать плазмин-индуцированный протеолиз соединительной ткани, занимая сайты связывания лизина в молекуле плазминогена. Использование ингибиторов, которые являются структурными аналогами лизина, приводит к эффективному контролю деградации соединительной ткани плазмином и существенно улучшает терапию запущенных форм рака по мнению авторов [113, 141].

Лизин может как усиливать всасывание кальция в кишечнике, так и улучшать сохранение поглощенного кальция в организме почками. Несмотря на способность повышать концентрацию кальция в организме, лизин может эффективно предотвратить образование/развитие камней оксалата кальция, поскольку кристаллизация оксалата кальция ингибируется L-лизином [8, 42].

Лизин является предшественником карнитина, который транспортирует жирные кислоты в митохондрии, где происходит их окисление для высвобождения энергии. Однако следует отметить, что у млекопитающих основным источником карнитина являются пищевые источники, а не биосинтез из лизина [57].

Лизин в кишечнике является частичным антагонистом серотониновых рецепторов и препятствует попаданию серотонина в организм. Благодаря этому свойству лизин пищи оказывает седативное действие на уровне мозжечка и миндалевидного тела в головном мозге, подавляет искусственно вызванную регулируемую серотонином диарею [148, 149]. В экспериментах in vitro было

обнаружено, что лизин ингибирует выработку альдостерона, индуцированную серотонином [53].

L-лизин является ключевой молекулой в жизненном цикле вируса иммунодефицита человека (ВИЧ). Концентрация L-лизина в плазме крови у ВИЧ инфицированных больных снижена и имеет обратную корреляцию с вирусной нагрузкой и прямую корреляцию с абсолютным количеством CD4 лимфоцитов [6]. Лизин ингибирует репликацию вируса простого герпеса; пероральный прием L-лизина по 1000 мг в день в течение 6 месяцев снижал рецидивы и сокращал время выздоровления инфицированных лиц [4, 67, 159].

Кадаверин образуется в организме путем декарбоксилирования лизина. Биосинтез кадаверина снижается в начальной стадии рака молочной железы, в результате ослабления микрофлоры кишечника, которая продуцирует кадаверин. Эксперименты in vivo показали, что кадаверин уменьшает количество метастазов рака молочной железы 4Т1, снижает инвазивность первичных опухолей, скорость митоза и способность самоподдержанию в недифференцированном состоянии стволовых клеток [99]. В клетках рака толстой кишки HT29 оказывает цитотоксический эффект посредством индукции некроза, а не апоптоза [49]. Кадаверин замедляет пролиферацию и колониеобразующую способность клеток рака молочной железы: 4Т1, MDA-MB-231 и SKBR-3 и играет роль супрессора опухолей путем ингибирования эпителиально-мезенхимального перехода, активируя аминокислотные рецепторы 8 и 9, регулирующие экспрессию металлопротеиназы 9 [99].

1.1.2. Пути превращения лизина в организме

В последние годы аминокислота L-лизин все больше привлекает внимание: биохимиков, физиологов, фармацевтов, это вызвано уникальными свойствами не только самого лизина, но и продуктов его превращений в организме. L-Лизин был выделен 1889 г. из гидролизата казеина и впервые

синтезирован в 1902 г. L-Лизин является незаменимой протеиногенной аминокислотой у млекопитающих. Потребность человека в лизине варьирует от ~60 мг на кг в сутки для младенцев до ~30 мг на кг в сутки для взрослых [ 159]. Лизин представляет кетогенную аминокислоту, ее катаболизм, приводит к образованию двух молекул СО2, двух молекул ацетил-КоА и нескольких восстановительных эквивалентов. Распад лизина может происходить по двум различным путям - сахаропиновому и пипеколатному. Сахаропиновый путь преимущественно протекает в митохондриях, пипеколатный в пероксисомах и цитозоле. Пипеколатный путь преобладает в мозге у взрослого организма, а вне мозговых тканей он является второстепенным путем деградации лизина. В развивающемся мозге плода сахаропиновый путь очень активен и является основным путем [37, 71].

Сахаропиновый путь катаболизма L-лизина

При исследовании митохондрий гепатоцитов крысы сахаропиновый путь превращения L-лизина был впервые обнаружен in vitro в работах [74, 75]. Этот путь является основным в печени и почках, но был продемонстрирован также и в мозге [131, 142, 151]. В этом пути (рис.1) лизин превращается посредством двухступенчатой реакции, подобной трансаминированию по атому азота в е-положении через сахаропин в а-аминоадипат-5-полуальдегид [66]. а-Аминоадипат-5-полуальдегидсинтаза является бифункциональным белком, включающим два независимых домена: первый - лизин-кетоглутаратредуктаза конденсирует лизин с кетоглутаратом и образует сахаропин; а второй домен -сахаропиндегидрогеназа превращает сахаропин в глутамат и а-аминоадипат-5-полуальдегид (AASA), который быстро обратимо и спонтанно циклизуется в Д1-пиперидин-6-карбоксилат (Р6С) и находится с ним в равновесии AASA/P6C [112, 131]. Активность бифункциональной аминоадипат-5-полуальдегидсинтазы может способствовать биосинтезу de novo глутамата и ГАМК (у-аминомасляная кислота) в нейронах, независимо от астроцитарного глутамин-глутаматного

цикла, что особенно важно для развития мозга плода [55, 68, 80]. Инъекции L-лизина лабораторным животным существенно влияли на уровни глутаминовой кислоты и глутамина [131]. Тот факт, что в крови AASA/P6C либо не обнаруживается, либо присутствует в чрезвычайно низких концентрациях, является отражением эффективного преобразования AASA/P6C в аминоадипиновую кислоту (AAA) под действием альдегиддегидрогеназы (антиквитина) [131, 153].

Изомеры AASA/P6C реакционноспособны. Они могут связывать пиридоксальфосфат (PLP) в головном мозге, полагают, что недостаток PLP в мозге вызывает пиридоксин-зависимые судороги [117]. Поскольку PLP является кофактором более 140 ферментов, включая декарбоксилазу глутаминовой кислоты, его истощение может привести к изменению уровней некоторых соединений, включая нейротрансмиттеры [152].

Пипеколатный путь катаболизма L-лизина Превращение L-лизина в а-кето-е-аминокапроновую кислоту катализируются LAAO, так как Murthy и соавт. доказали присутствие оксидазы L-аминокислот, специфичной по отношению к L-лизину, в мозге мышей [123]. а-Кето-е-аминокапроновая кислота спонтанно циклизуется в А1-пиперидин-2-карбоксилат и восстанавливается цитозольной кетиминредуктазой до L-пипеколиновой кислоты (пипеколата) [116], который в экспериментах in vitro был охарактеризован как индуктор окислительного стресса [46]. L-Пипеколиновая кислота окисляется с помощью L-пипеколатоксидазы (КФ 1.5.3.7) до Д1-пиперидин-6-карбоксилата, который (как было указано выше) находится в химическом равновесии с а-аминоадипат-5-полуальдегидом [150]. На уровне Д1-пиперидин-6-карбоксилата сахаропиновый и пипеколатный пути сходятся, а затем протекает один общий путь деградации.

Универсальные стадии катаболизма Ь-лизина Д1-Пиперидин-6-карбоксилат дециклизуется и превращается в а-аминоадипат 5-полуальдегид, который далее окисляется до а-аминоадипиновой кислоты. Последняя вступает в обратимую, катализируемую а-аминоадипат -трансаминазой, реакцию трансаминирования с а-кетоглутаратом и превращается в а-кетоадипиновую кислоту.

Рисунок 1. Пути метаболизма L-лизина у млекопитающих.

Ферменты участвующие в распаде Ь-лизина: 1 Ь-лизин-а-кетоглутарат-редуктаза; 2 сахаропин-дегидрогеназа; 3 а-аминоадипат- 5-полуальдегид-дегидрогеназа; 4 а-аминоадипат-аминотрансфераза; 5 Ь-аминокислотная оксидаза (Ь-лизин-а-оксидаза); 6 кетиминредуктаза; 7 Ь-пипеколат-оксидаза; ^превращения являются спонтанными (неферментативными)

Дальнейшая деградация (финальные этапы катаболизма) Ь-лизина происходят в митохондриях, а именно, образование глутарил -КоА в присутствии НАД+ под действием окончательно не изученного ферментного комплекса, структурно

гомологичного Е1 субъединице а-кетоглутаратдегидрогеназного комплекса. Глутарил-КоА в катализируемой глутарил-КоА дегидрогеназой (КФ 1.3.8.6) реакции превращается в кротонил -КоА. На последнем этапе образуется радикал кислоты, содержащей четыре углеродных атома - бутирил-КоА, который окисляется в реакциях, катализируемых ферментами в-окисления жирных кислот, с образованием двух молекул ацетил-КоА (рис.2).

Рисунок 2. Окисление L-лизина в митохондриях.

Из приведенных реакций следует, что катаболизм лизина взаимосвязан с обменом а-кетоглутарата и глутаминовой кислоты через реакции трансаминирования. В результате последовательных реакций конечными продуктами катаболизма L-лизина являются 2 молекулы СО2 и две молекулы ацетил-КоА, которые вступают в цикл трикарбоновых кислот [37, 38, 142].

1.1.3. Механизмы лизиновой зависимости опухолевых клеток

Аминокислоты необходимы для поддержания высоких метаболических потребностей опухолевых клеток. Незаменимые аминокислоты не могут быть синтезированы de novo для метаболических потребностей человека, животных и должны усваиваться с пищей. Многие раковые клетки имеют абсолютную потребность в уровне аминокислот в плазме, таких как аспарагин, лизин и метионин, в то время как нормальные клетки относительно устойчивы к ограничению экзогенных аминокислот. Пониженная концентрация

определенных аминокислот может остановить клеточный цикл в раковых клетках, следовательно, предотвратить прогрессирование заболевания.

Устранение аминокислот может быть успешной стратегией: нормальные клетки остаются незатронутыми, поскольку они менее требовательны и/или могут синтезировать эти соединения в достаточном количестве. Для использования этого терапевтического подхода был разработан ряд лекарственных препаратов.

Было показано, что лизин играет важную роль в прогрессировании рака молочной железы, поскольку диета с низким содержанием лизина замедляла рост опухоли на ранних стадиях заболевания [48, 96]. Кроме того, на различных опухолевых линиях был обнаружен рост-тормозящий эффект лизина при понижении его концентрации и усиление пролиферации при повышении концентрации этой аминокислоты. Обнаружили, что клетки гепатоцеллюлярной карциномы более чувствительны к лишению лизина по сравнению с другими незаменимыми аминокислотами. Снижение концентрации лизина до 0,16 мМ по сравнению с нормальной концентрацией (0,8 мМ) в среде культивирования клеток оказало минимальное влияние на рост клеток гепатоцеллюлярной карциномы SNU398. Однако полное лишение лизина резко подавляло рост клеток и образование колоний. Это было связано с торможением клеточного цикла G0/G1 и увеличением количества апоптотических клеток [181]. Лизин в присутствии эстрадиола индуцирует экспрессию и2ДБ1 и RPN2 - белков, которые в значительной степени влияют на распространение клеток рака молочной железы посредством взаимодействия с нейтрофилами [167]. Было обнаружено, что комбинация осимертиниба (ингибитор EGFR-тирозинкиназы) и снижения уровня лизина усиливает цитостатический эффект осимертиниба в EGFR-мутантных клетках немелкоклеточного рака легкого [77]. В культуре клеток рака молочной железы MDA-MB-231 и GIЬM2 депривация лизина ингибировала рост и пролиферацию [41]. Лизин в комбинации с доксорубицином

снижал жизнеспособность и усиливал апоптоз клеток MDA-MB-231 и MDA-MB-468 за счет усиления аутофагии [39].

Наряду с работами о замедлении опухолевого роста при истощении лизина, имеются исследования, зафиксировавшие разнонаправленное действие лизина на распространение опухоли. Было обнаружено, что лизин снижает развитие метастазов и увеличивает выживаемость мышей с раком предстательной железы PC3M. Ингибирование металлопротеиназы 9 лизином укрепляет соединительную ткань, окружающую раковые клетки, и изменяет кислотность в микроокружении опухоли. Низкий уровень pH регулирует ангиогенные факторы, такие как фактор роста эндотелия сосудов (VEGF) и интерлейкин 8 (IL-8) [81]. В культуре клеток немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ) H1299, Н460 и А549 истощение лизина приводило к снижению активности комплекса mTORC1 (мишень рапамицина млекопитающих, комплекс 1), регулирующего рост клеток путем фосфорилирования р70 киназы рибосомального белка (S6K). Комплекс активируется аминокислотами или факторами роста клеток. Истощение лизина в этих клетках привело к повышению фосфорилирования белка GCN2 (general control nonderepressible 2), играющего ключевую роль в модуляции метаболизма аминокислот. GCN2, в свою очередь, инактивирует а-субъединицу фактора инициации эукариот 2 (elF2 а) путем фосфорилирования, тем самым подавляет синтез белка. АМФ-активированная протеинкиназа (АМФК) является основным клеточным энергетическим датчиком, и снижение лизина приводит к фосфорилированию альфа-субъединицы АМФК, регулирующей экспрессию генов. Активность комплекса восстанавливалась при добавлении инсулиноподобного фактора роста-1 (ИФР-1); факторы роста не могли эффективно активировать mTORC1 в отсутствие лизина. Эти данные свидетельствуют о том, что GCN2 и АМФК участвуют в ингибировании mTORC1 путем лишения лизина [87].

Нужно отметить, что зависимость опухолевых клеток от наличия определенных аминокислот варьируется в зависимости от видов рака. На основании анализа данных литературы, можно сделать вывод, что в большинстве случаев ограничение потребления лизина с пищей и блокирование его поглощения раковыми клетками могут быть потенциальными терапевтическими подходами к снижению скорости пролиферации клеток.

1.2. Структурно-функциональные исследования и механизмы противоопухолевого действия оксидаз Ь-аминокислот

1.2.1. Катализируемая реакция и структура оксидаз Ь-аминокислот

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Бабаева Гулалек, 2022 год

Список литературы

1. Аринбасарова, А. Ю. Выделение и свойства L-лизин-альфа-оксидазы из гриба Trichoderma cf. aureovivide Rifai ВКМ F-4268D /А. Ю. Аринбасарова, В. В. Ашин, К. В. Макрушин и др. // Микробиология. — 2012. — Т.81. —№.5.— С. 594-599.

2. Бабаева, Г. Возможность интернализации пероральной L-лизин-a-оксидазы в модели изолированного отрезка тонкой кишки крысы /Г. Бабаева, Е. В. Лукашева, Ж. Р. Черкасова и др. // Вопросы онкологии. — 2019. — Т.65. — №.3.— С. 463-466.

3. Бабаева, Г. Скрининговое исследование эффективности и переносимости L-лизин-а-оксидазы из Trichoderma cf. aureoviride Rifai ВКМ F-4268D при пероральном введении на опухолевых моделях in vivo / Г. Бабаева, Е. М. Трещалина, Е. В. Лукашева и др. // Вопросы онкологии. —2020. —Т.66. — №2.6.

— С. 702-706.

4. Белокрылов, Г. А. Различия в иммунном ответе, фагоцитозе и детоксицирую-щих свойствах под влиянием пептидных и аминокислотных препаратов / Белокрылов Г.А., Деревнина О.Н., Попова О.Я. и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. —1996.—Т. 121, №2 5.—С. 509-512.

5. Бурмакин, М. В. Накопление желтого флюоресцентного белка в почке после его всасывания в кишечнике крыс / М. В. Бурмакин, Е. В. Селиверстова, Ю. В. Наточин // Российский физиологический журнал им. И. М. Сеченова. — 2005.

— Т. 91. — № 10. — С. 1195-1204.

6. Буторов, Е. В. Корреляция CD4 лимфоцитов и вирусной нагрузки с уровнем L-лизина плазмы у ВИЧ-инфицированных больных // Инфекция и иммунитет. —2015. — № 3. —С. 253-264

7. Веса, В.С. Изоформы L-лизин-а-оксидазы гриба Trichoderma sp / В.С. Веса, Е.

B. Лукашева, С. Х. Хадуев, Т. Т. Березов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 1996. — Т.121. — № 4. — С. 404-406

8. Голованова, О. А. Особенности кристаллизации оксалата кальция в присутствии валина и лизина / О. А. Голованова, В. В. Корольков, Ю. О. Пунин, А. С. Высоцкий // Вестник Омского университета. — 2013. — №. 2. —

C. 112-1 17

9. Ершов, К. И. Исследование особенностей биодоступности ферментного препарата тромбовазим из тощей кишки крыс / К. И. Ершов, А. А. Серяпина // Медицина и образование в Сибири. — 2013. — № 4. — С. 1818-7943.

10. Лукашева, Е. В. L-лизин-а-оксидаза: физико-химические и биологические свойства / Е. В. Лукашева, Т. Т. Березов // Биохимия. — 2002. — Т. 67. —№ 10. — С. 1394-1402.

11. Покровский, В. С. Разработка режима внутривенного введения L-лизин-альфа-оксидазы из Trichoderma cf. aureoviride Rifai BKMF-4268 под контролем переносимости и эффективности лечения / В. С. Покровский, Е. М.

Трещалина, Е. В. Лукашева и др. // Российский онкологический журнал. — 2013. — № 2. — С. 10-14

12. Покровский, В. С. Экспериментальное изучение эффективности L-лизин-а-оксидазы Trichoderma cf. aureoviride Rifai на моделях ксенографтов опухолей человека у бестимусных мышей и оценка синергизма с цисплатином или ингибиторами топоизомераз / В. С. Покровский, Е. В. Лукашева, Н. Н. Чернов, Е. М. Трещалина // Вопросы онкологии. —2017. —Т. 63. —№3. —С. 497-505.

13. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств (иммунобиологические лекарственные препараты). Часть вторая / Под ред. А.Н. Миронова. — М.: Гриф и К, 2012. — 966 с.

14. Abidin, S.A.Z. Cytotoxic, Anti-Proliferative and Apoptosis Activity of L-Amino Acid Oxidase from Malaysian Cryptelytrops purpureomaculatus (CP-LAAO) Venom on Human Colon Cancer Cells / S.A.Z. Abidin, P. Rajadurai, E.H. Chowdhury, I. Othman, R. Naidu // Molecules. —2018. —Vol. 23. —P.1388.

15. Abdelkafi-Koubaa, Z. Interaction of a snake venom L-amino acid oxidase with different cell types membrane / Z. Abdelkafi-Koubaa, I. Aissa, M. Morjen et al. // International Journal of Biological Macromolecules. —2016. —Vol. 82. —P. 757764.

16. Ahn, M.Y. Characterization and cytotoxicity of L-amino acid oxidase from the venom of king cobra (Ophiophagus hannah) / M.Y. Ahn, B.M. Lee, Y.S. Kim // The international journal of biochemistry & cell biology. —1997. —Vol. 29. —P. 911-919.

17. Al-Koussa, H. Human Recombinant Arginase I [HuArgI (Co)-PEG5000]-Induced Arginine Depletion Inhibits Colorectal Cancer Cell Migration and Invasion / H. Al-Koussa, M. Al-Haddad, R. Abi-Habib, M. El-Sibai // International Journal of Molecular Sciences. —2019. —Vol. 20(23). —P. 6018

18. Alves, R. M. Evidence of caspase-mediated apoptosis induced by L-amino acid oxidase isolated from Bothrops atrox snake venom / R. M. Alves, G. A. Antonucci, H. H. Paiva et al. // Comparative Biochemistry Physiology Part A: Molecular &Integrative Physiology. —2008. —Vol. 151(4). —P. 542-550

19. Amano, M. Recombinant expression, molecular characterization and crystal structure of antitumor enzyme, L-lysine a-oxidase from Trichoderma viride / M. Amano, H. Mizuguchi, T. Sano et al. // The Journal of Biochemistry. —2015. — Vol. 157(6). —P. 549-559.

20. Ananieva, E. A. Branched-chain amino acid metabolism in cancer / E. A. Ananieva, A. C. Wilkinson // Current opinion in clinical nutrition and metabolic care. —2018. —Vol. 21(1). —P. 64-70

21. Ande, S. R. Induction of apoptosis in yeast by L-amino acid oxidase from the Malayan pit viper Calloselasma rhodostoma / S. R. Ande, H. Fussi, H. Knauer et al. // Yeast. —2008. —Vol. 25(5). —P. 349-357.

22. Ande, S. R. Mechanisms of cell death induction by L-amino acid oxidase, a major component of ophidian venom / S. R. Ande, P. R. Kommoju, S. Draxl et al. // Apoptosis. —2006. —Vol.11(8). —P. 1439-1451.

23. Anderson, J. W. New perspectives in nutrition management of diabetes mellitus / J. W. Anderson, P. B. Geil // The American journal of medicine. —1988. —Vol. 85(5). —P. 159-165.

24. Artursson, P. Correlation between oral drug absorption in humans and apparent drug permeability coefficients in human intestinal epithelial (Caco-2) cells / P. Artursson, J. Karlsson // Biochemical and biophysical research communications. — 1991. —Vol.175(3). —P. 880-885.

25. Ascierto, P. A. Pegylated arginine deiminase treatment of patients with metastatic melanoma: results from phase I and II studies / P. A. Ascierto, S. Scala, G. Castello et al. // Journal of Clinical Oncology. —2005. —Vol. 23(30). —P. 7660-7668.

26. Banks, W.A. Extent and direction of ghrelin transport across the blood-brain barrier is determined by its unique primary structure / W.A. Banks, M. Tschöp, S.M. Robinson et al. // Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. — 2002.—Vol. 302(2). —P. 822-827.

27. Black, J. C. Histone lysine methylation dynamics: establishment, regulation, and biological impact / J. C. Black, C. Van Rechem, J. R. Whetstine // Molecular cell. —2012. —Vol. 48(4). —P. 491-507.

28. Böhmer, A. A novel l-glutamate oxidase from Streptomyces endus: Purification and properties / A. Böhmer, A. Müller, M. Passarge et al. // European Journal of Biochemistry. —1989. —Vol. 182(2). —P. 327-332.

29. Bradford, M. M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding //Analytical biochemistry. —1976. —Vol.72(1-2). —P. 248-254.

30. Brearley, G. M. Purification and partial characterisation of a broad-range L-amino acid oxidase from Bacillus carotarum 2Pfa isolated from soil / G. M. Brearley, C. P. Price, T. Atkinson, P. M. Hammond // Applied microbiology and biotechnology. —1994. —Vol. 41(6). —P. 670-676.

31. Bregge-Silva, C. Isolation and biochemical, functional and structural characterization of a novel L-amino acid oxidase from Lachesis muta snake venom / C. Bregge-Silva, M. C. Nonato, S. de AlbuquerqueHo et al. // Toxicon. —2012. —Vol. 60(7). —P.1263-1276.

32. Braun, M. (1992). Purification and some properties of an extracellular l-amino acid oxidase from Cellulomonas cellulans AM8 isolated from soil / M. Braun, J. Kim, R. Schmid // Applied Microbiology and Biotechnology. —1992. —Vol. 37(5). — P. 594-598

33. Burin, S. M. Bothrops moojeni L-amino acid oxidase induces apoptosis and epigenetic modulation on Bcr-Abl+ cells / S. M. Burin, M. D. C. Cacemiro, J. G. Cominal et al. // Journal of Venomous Animals and Toxins including Tropical Diseases. — 2020. —Vol. 26. —P. 1-14

34. Burin, S.M. CR-LAAO antileukemic effect against Bcr-Abl cells is mediated by apoptosis and hydrogen peroxide / S.M. Burin, S. Ghisla, A.T. Ouchida et al. // International journal of biological macromolecules. —2016. —Vol. 86. —P. 309320.

35. Burin, S.M. The L-amino acid oxidase from Calloselasma rhodostoma snake venom modulates apoptomiRs expression in Bcr-Abl-positive cell lines / S.M. Burin, M.G. Berzoti-Coelho, J.G. Cominal et al. // Toxicon. —2016. —Vol. 120. —P. 9-14

36. Castellano, F. An overview of l-amino acid oxidase functions from bacteria to mammals: focus on the immunoregulatory phenylalanine oxidase IL4I1 / F. Castellano, V. Molinier-Frenkel // Molecules. —2017.—Vol. 22(12). —P. 2151.

37. Chang, Y. F. Lysine metabolism in the rat brain: the pipecolic acid-forming pathway // Journal of neurochemistry. —1978. —Vol. 30(2). —P. 347-354.

38. Chang, Y. F. Pipecolic acid pathway: the major lysine metabolic route in the rat brain // Biochemical and biophysical research communications. —1976. —Vol. 69(1). —P. 174-180.

39. Chehri, J. L-Lysine increased the cytotoxicity effect of doxorubicin in MDA-MB-231 and MDA-MB-468 breast cancer cell lines / J. Chehri, M. Jahani, H. Tahmasebi et al. // Annals of Oncology. —2019. —Vol. 30. — P. 127.

40. Chen, H. S. Cloning, characterization and mutagenesis of Russell's viper venom Lamino acid oxidase: Insights into its catalytic mechanism / H. S. Chen, Y. M. Wang, W. T. Huang et al. // Biochimie. —2012. —Vol. 94(2). —P. 335-344.

41. Chepikova, O.E. Lysine oxidase exposes a dependency on the thioredoxin antioxidant pathway in triple-negative breast cancer cells / O.E. Chepikova, D. Malin, E. Strekalova et al. // Breast Cancer Research and Treatment. —2020. — Vol. 183(3). —P. 549-564.

42. Civitelli, R. Dietary L-lysine and calcium metabolism in humans / R. Civitelli, D. T. Villareal, D. Agnusdei et al. // Nutrition (Burbank, Los Angeles County, Calif.). —1992. —Vol. 8(6). —P. 400-405.

43. Cloutier, M. Internalization and transcytosis of pancreatic enzymes by the intestinal mucosa / M. Cloutier, D. Gingras, M. Bendayan // Journal of Histochemistry & Cytochemistry. —2006. — Vol. 54(7). — P. 781-794.

44. Coffino, P. Regulation of cellular polyamines by antizyme // Nature reviews Molecular cell biology. —2001. —Vol. 2(3). —P. 188-194.

45. Costa, T.R. CR-LAAO, an L-amino acid oxidase from Calloselasma rhodostoma venom, as a potential tool for developing novel immunotherapeutic strategies against cancer / T.R. Costa, D.L. Menaldo, K.F. Zoccal et al. // Scientific reports. —2017. —Vol. 7(1). —P. 1-12.

46. Dalazen, G. R. Pipecolic acid induces oxidative stress in vitro in cerebral cortex of young rats and the protective role of lipoic acid / G. R. Dalazen, M. Terra, C. E. D. Jacques et al. // Metabolic brain disease. —2014. —Vol. 29(1). —P. 175-183.

47. DeBerardinis, R. J. Brick by brick: metabolism and tumor cell growth / R. J. DeBerardinis, N. Sayed, D. Ditsworth, C. B. Thompson // Current opinion in genetics & development. —2008. —Vol. 18(1). —P. 54-61.

48. Debnath, S. The therapeutic value of lysine against cancer: a comprehensive review / S. Debnath, A. Mukherjee, S. Karan, T. K. Chatterjee // International Journal of Biology, Pharmacy and Allied Sciences (IJBPAS). —2020. —Vol. 9. —P. 32183247.

49. Del Rio, B. The biogenic amines putrescine and cadaverine show in vitro cytotoxicity at concentrations that can be found in foods / B. Del Rio, B. Redruello, D. M. Linares, V. Ladero et al. // Scientific reports. —2019. —Vol. 9(1). —P. 1-7.

50. Dhankhar, R. Microbial enzymes for deprivation of amino acid metabolism in malignant cells: biological strategy for cancer treatment / R. Dhankhar, V. Gupta, S. Kumar et al. // Applied microbiology and biotechnology/—2020. —Vol. 104(7). —P. 2857-2869.

51. Dinndorf, P. A. FDA Drug Approval Summary: Pegaspargase (Oncaspar®) for the First-Line Treatment of Children with Acute Lymphoblastic Leukemia (ALL) / P. A. Dinndorf, J. Gootenberg, M. H. Cohen, P. Keegan, R. Pazdur // The oncologist. —2007. —Vol. 12(8). —P. 991-998.

52. DiPietrantonio, A. M. Activation of caspase 3 in HL-60 cells exposed to hydrogen peroxide / A. M. DiPietrantonio, T. Hsieh, J. M. Wu // Biochemical and biophysical research communications. —1999. —Vol. 255(2). —P. 477-482.

53. Duparc, C. L-Lysine acts as a serotonin type 4 receptor antagonist to counteract in vitro and in vivo the stimulatory effect of serotonergic agents on aldosterone secretion in man / C. Duparc, C. André, J. Ménard et al. // Hormone and Metabolic Research. —2017. —Vol. 49(4). —P. 269-275.

54. Feliciano, P. R. Crystal structure and molecular dynamics studies of L-amino acid oxidase from Bothrops atrox / P. R. Feliciano, J. K. Rustiguel, R. O. Soares et al. // Toxicon. —2017. —Vol. 15(128). —P. 50-59.

55. Fellows, F. C. Lysine metabolism in mammals / F. C. Fellows, M. H. Lewis // Biochemical Journal. —1973. —Vol. 136(2). —P. 329-334.

56. Fillebeen, C. Receptor-mediated transcytosis of lactoferrin through the blood-brain barrier / C. Fillebeen, L. Descamps, M. P. Dehouck et al. // Journal of Biological Chemistry. —1999. —Vol. 274(11). —P. 7011-7017.

57. Flanagan, J. L. Role of carnitine in disease / J. L. Flanagan, P. A. Simmons, J. Vehige, M. D. Willcox, Q. Garrett // Nutrition & metabolism. —2010. —Vol. 7(1). —P.1-14.

58. Flodin, N. W. The metabolic roles, pharmacology, and toxicology of lysine // Journal of the American College of Nutrition. —1997. —Vol. 16(1). —P. 7-21.

59. Fung, S. Y. Molecular mechanism of cell death induced by king cobra (Ophiophagus hannah) venom l-amino acid oxidase / S.Y. Fung, M.L. Lee, N.H. Tan // Toxicon. —2015. —Vol. 96. —P. 38-45.

60. Gamble, L.D. Inhibition of polyamine synthesis and uptake reduces tumor progression and prolongs survival in mouse models of neuroblastoma / L.D. Gamble, S. Purgato, J. Murray et al. // Science Translational Medicine. —2019. — Vol. 11(477) —P. 1-15

61. Gaweska, H. Structures and mechanism of the monoamine oxidase family / H. Gaweska, P.F. Fitzpatrick // Biomolecular Concepts. —2011. —Vol. 2(5). —P. 365-377

62. Georgieva, D. The structure of a native L-amino acid oxidase, the major component of the Vipera ammodytes ammodytes venomic, reveals dynamic active site and quaternary structure stabilization by divalent ions / D. Georgieva, M. Murakami, M. Perband, R. Arni, C. Betzel // Molecular Biosystems. —2011. —Vol. 7(2). — P. 379-384.

63. Geueke, B. A new bacterial L-amino acid oxidase with a broad substrate specificity: purification and characterization / B. Geueke, W. Hummel // Enzyme and Microbial Technology. —2002. —Vol. 31(1-2). —P. 77-87.

64. Geyer, A. Structure and characterization of the glycan moiety of L-amino-acid oxidase from the Malayan pit viper Calloselasma rhodostoma / A. Geyer, T. B. Fitzpatrick, P. D. Pawelek et al. // European Journal of Biochemistry. —2001. — Vol. 268(14). —P. 4044-4053.

65. Giacobini, E. Pipecolic acid: origin, biosynthesis and metabolism in the brain / E. Giacobini, Y. Nomura, T. Schmidt-Glenewinkel // Cellular Molecular Biology. — 1980. —Vol. 26. —P. 135-146

66. Gongalves-Butruille, M. Purification and characterization of the bifunctional enzyme lysine-ketoglutarate reductase-saccharopine dehydrogenase from maize / M. Gon5alves-Butruille, P. Szajner, E. Torigoi, A. Leite, P. Arruda // Plant Physiology. —1996. —Vol. 110(3). —P. 765-771.

67. Griffith, R. S. Success of L-Lysine Therapy in Frequently Recurrent Herpes simplex Infection / R. S. Griffith, D. E. Walsh, K. H. Myrmel, R. W. Thompson, A. Behforooz // Dermatology. —1987. —Vol. 175(4). —P. 183-190.

68. Grove, J. The metabolism of D-and L-lysine in the intact rat, perfused liver and liver mitochondria / J. Grove, L. M. Henderson // Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-General Subjects. —1968. —Vol. 165(1). —P. 113-120.

69. Guo, C. Akbu-LAAO exhibits potent anti-tumor activity to HepG2 cells partially through produced H2O2 via TGF-P signal pathway / C. Guo, S. Liu, P. Dong et al. // Scientific reports. —2015. —Vol. 5(1). —P. 1-14.

70. Guo, C. Past decade study of snake venom L-amino acid oxidase / C. Guo, S. Liu, Y. Yao, Q. Zhang, M. Z. Sun // Toxicon. —2012. —Vol. 60(3). —P. 302-311

71. Hallen, A. Lysine metabolism in mammalian brain: an update on the importance of recent discoveries / A. Hallen, J. F. Jamie, A. J. Cooper // Amino Acids. —2013. —Vol. 45(6). —P. 1249-1272.

72. Hanahan, D. Hallmarks of cancer: the next generation / D. Hanahan, R. A. Weinberg // Cell. —2011. —Vol. 144(5). —P. 646-674.

73. Hayashi, S.I. Ornithine decarboxylase antizyme: A novel type of regulatory protein / S.I. Hayashi, Y. Murakami, S. Matsufuji // Trends in biochemical sciences. — 1996. —Vol. 21(1). —P. 27-30.

74. Higashino, K. Metabolism of lysine in rat liver / K. Higashino, M. Fujioka, T. Aoki, Y. Yamamura // Biochemical and biophysical research communications. —1967. —Vol. 29(1). —P. 95-100.

75. Higashino, K. Saccharopine, a product of lysine breakdown by mammalian liver / K. Higashino, K. Tsukada, I. Lieberman // Biochemical and biophysical research communications. —1965. —Vol. 20. —P. 285-290.

76. Houten, S.M. Genetic basis of hyperlysinemia / S. M. Houten, H. Te Brinke, S. Denis // Orphanet journal of rare diseases. —2013. —Vol. 8(1). —P. 1-8.

77. Hsu, C. C. Lysine Deprivation Induces AKT-AADAT Signaling and Overcomes EGFR-TKIs Resistance in EGFR-Mutant Non-Small Cell Lung Cancer Cells / C. C. Hsu, A. Y. P. Yang, J. Y. Chen et al. // Cancers. —2021. —Vol. 13(2). —P. 272.

78. Huang, R. The use of lactoferrin as a ligand for targeting the polyamidoamine-based gene delivery system to the brain / R. Huang, W. Ke, Y. Liu, C. Jiang, Y. Pei // Biomaterials. —2008. —Vol. 29. —P. 238-246.

79. Huang, R.Q. Characterization of lactoferrin receptor in brain endothelial capillary cells and mouse brain / R. Q. Huang, W. L. Ke, Y. H. Qu et al. // Journal of biomedical science. —2007. —Vol. 14(1). —P. 121-128.

80. Hutzler, J. Conversion of lysine to saccharopine by human tissues / J. Hutzler, J. Dancis // Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-General Subjects. —1968. —Vol. 158(1). —P. 62-69.

81. Ibrahim-Hashim, A. Free base lysine increases survival and reduces metastasis in prostate cancer model / A. Ibrahim-Hashim, J. W. Wojtkowiak, M. D. L. C. Ribeiro et al. // Journal of cancer science & therapy. —2011. —Vol. 1(4). —P. 1-12

82. Igarashi, K. The functional role of polyamines in eukaryotic cells / K. Igarashi, K. Kashiwagi // The international journal of biochemistry & cell biology. —2019. — Vol. 107. —P. 104-115.

83. Isobe, K. Characterization of N-alpha-benzyloxycarbonyl-L-lysine oxidizing enzyme from Rhodococcus sp. AIU Z-35-1 / K. Isobe, S. Nagasawa // Journal of bioscience and bioengineering. —2007. —Vol. 104. —P. 218-223.

84. Isobe, K. Purification and characterization of an l-amino acid oxidase from Pseudomonas sp. AIU 813 / K. Isobe, A. Sugawara, H. Domon, Y. Fukuta, Y. Asano // Journal of Bioscience and Bioengineering. —2012. —Vol. 114. —P. 257261.

85. Izidoro, L. F. M. Snake venom L-amino acid oxidases: trends in pharmacology and biochemistry / L. F. M. Izidoro, J. C. Sobrinho, M. M. Mendes // BioMed Research International. —2014. —Vol. 2014. —P. 1-19

86. Jafarnejad, A. The improvement effect of L-Lys as a chemical chaperone on STZ-induced diabetic rats, protein structure and function / A. Jafarnejad, S. Z. Bathaie,

M. Nakhjavani, M. Z. Hassan, S. Banasadegh // Diabetes/metabolism research and reviews. —2008. —Vol. 24(1). —P. 64-73.

87. Jang, S. K. Lysine is required for growth factor-induced mTORCl activation / S. K. Jang, S. E. Hong, D. H. Lee et al. // Biochemical and Biophysical Research Communications. —2020. —Vol. 533(4). —P. 945-951.

88. Jin, Y. Molecular characterization of L-amino acid oxidase from king cobra venom / Y. Jin, W.H. Lee, L. Zeng, Y. Zhang // Toxicon. —2007. —Vol. 50(4). —P. 479489.

89. Kay, J. E. Control of ornithine decarboxylase activity in stimulated human lymphocytes by putrescine and spermidine / J. E. Kay, V. J. Lindsay // Biochemical Journal. —1973. —Vol. 132(4). —P. 791-796.

90. Khaduev, S. K. Cytostatic effect of L-lysine-alpha-oxidase from Trichoderma harzianum Rifai and Trichoderma viride / S.K. Khaduev, O.S. Zhukova, I.V. Dobrynin, K. Soda, T.T. Berezov // Biull. Eksp. Biol. Med. —1987. —Vol. 103. — P. 458-460

91. Khaduev, S. K. Comparative study of the effect of L-lysine-L-oxidase from Trichoderma harzianum Rifai and Trichoderma viride on nucleic acid synthesis in human tumor cells in vitro / S.K. Khaduev, O.S. Zhukova, I.V. Dobrynin, K. Soda, T.T. Berezov // Biull. Eksp. Biol. Med. —1986. —Vol. 101(5). —P. 603-604

92. Khaduev, S. K. Isolation and purification of L-lysine-alpha-oxidase from Trichoderma sp / S. Kh. Khaduev, E. V. Lukasheva, I. P. Smirnova, T. T. Berezov // Voprosy meditsinskoi khimii. —1985. —Vol. 31(5). —P. 130-134.

93. Kitagawa, M. Structural basis of enzyme activity regulation by the propeptide of l-lysine a-oxidase precursor from Trichoderma viride / M. Kitagawa, N. Ito, Y. Matsumoto et al. // Journal of Structural Biology: X. —2021. —Vol. 5. —P. 100044.

94. Kitani, Y. Antibacterial action of L-amino acid oxidase from the skin mucus of rockfish Sebastes schlegelii / Y. Kitani, N. Kikuchi, G. Zhang et al. // Comparative Biochemistry and Physiology Part B: Biochemistry and Molecular Biology. — 2008. —Vol. 149(2). —P. 394-400.

95. Ko, K.C. Identification of potent bactericidal compounds produced by escapin, an L-amino acid oxidase in the ink of the sea hare Aplysia californica / K. C. Ko, B. Wang, P. C. Tai, C. D. Derby // Antimicrobial agents and chemotherapy. —2008. —Vol. 52(12). —P. 4455-4462.

96. Kocher, R. Effects of a Low Lysine Diet on the Growth of Spontaneous Mammary Tumors in Mice and on the N2 Balance in Man // Cancer Researcher. —1944. — Vol. 4. —P. 251-256.

97. Komatsuzaki, S. Impairment of astrocytic glutaminolysis in glutaric aciduria type I / S. Komatsuzaki, R. D. Ediga, J. G. Okun, S. Kölker, S. W. Sauer // Journal of inherited metabolic disease. —2018. —Vol. 41(1). —P. 91-99.

98. Kondo, H. Structural basis of strict substrate recognition of L-lysine a-oxidase from Trichoderma viride / H. Kondo, M. Kitagawa, Y. Matsumoto et al. // Protein Science. —2020. —Vol. 29. —P. 2213-2225.

99. Kovacs, T. Cadaverine, a metabolite of the microbiome, reduces breast cancer aggressiveness through trace amino acid receptors / T. Kovacs, E. Miko, A. Vida et al. // Scientific reports. —2019. —Vol. 9(1). —P. 1-14.

100. Krupyanko, V.I. Kinetic characteristics of L-lysine a-oxidase from Trichoderma cf. aureoviride Rifai VKM F-4268D: Substrate specificity and allosteric effects / V.I. Krupyanko, A.G. Medentsev, E.V. Lukasheva, A.Y. Arinbasarova // Biochemistry and biophysics reports. —2017. —Vol. 9. —P. 9-12.

101. Kumar, S, Singh, S. K. (Editors). Developability of Biotherapeutics: computational approaches / CRC Press, New York. —2015. —P. 315

102. Kusakabe, H. A new antitumor enzyme, L-lysine alpha-oxidase from Trichoderma viride. Purification and enzymological properties / H. Kusakabe, K. Kodama, A. Kuninaka et al. // Journal of Biological Chemistry. —1980. —Vol. 255(3). —P. 976-981.

103. Kusakabe, H. Effect of L-lysine a-oxidase on growth of mouse leukemic cells / H. Kusakabe, K. Kodama, A. Kuninaka, H. Yoshino, K. Soda // Agricultural and Biological Chemistry. —1980. —Vol. 44(2). —P. 387-392.

104. Lee, M.L. King Cobra (Ophiophagus hannah) Venom L-Amino Acid Oxidase Induces Apoptosis in PC-3 Cells and Suppresses PC-3 Solid Tumor Growth in a Tumor Xenograft Mouse Model / M. L. Lee, S. Y. Fung, I. Chung et al. // International Journal of Medical Sciences. —2014. —Vol. 11(6). —P. 593.

105. Lieu, E.L. Amino acids in cancer / E. L. Lieu, T. Nguyen, S. Rhyne, J. Kim // Experimental & molecular medicine. —2020. —Vol. 52(1) —P. 15-30.

106. Lishko, V. K. Depletion of serum methionine by methioninase in mice / V. K. Lishko, O. V. Lishko, R. M. Hoffman // Anticancer research. —1993. —Vol. 13(5A). —P. 1465-1468.

107. Lukasheva, E. V. Fungal Enzyme L-Lysine a-Oxidase Affects the Amino Acid Metabolism in the Brain and Decreases the Polyamine Level / E. V. Lukasheva, M. G. Makletsova, A. N. Lukashev et al. // Pharmaceuticals. —2020. —Vol. 13(11). —P. 398.

108. Lukasheva, E. V. L-amino acid oxidases: properties and molecular mechanisms of action / E.V Lukasheva, A.A. Efremova, E.M. Treshalina et al. // Biochemistry (Moscow) Supplement Series B: Biomedical Chemistry. —2011. —Vol. 5(4). — P. 337-345.

109. Macheroux, P. L-amino-acid oxidase from the Malayan pit viper Calloselasma rhodostoma. Comparative sequence analysis and characterization of active and inactive forms of the enzyme / P. Macheroux, O. Seth, C. Bollschweiler et al. // European Journal of Biochemistry. —2001. —Vol. 268(6). —P. 1679-1686.

110. Mahajan, R.V. Efficient production of L-asparaginase from Bacillus licheniformis with low-glutaminase activity: optimization, scaleup and

acrylamide degradation studies / R. V. Mahajan, S. Saran, K. Kameswaran et al. // Bioresource technology. —2012. —Vol. 125. —P. 11-16.

111. Makletsova, M.G. Polyamines in Parkinson's Disease: Their Role in Oxidative Stress Induction and Protein Aggregation / M. G. Makletsova, S. P. Syatkin, V. V. Poleshchuk et al. // Journal of Neurology Research. —2019. —Vol. 9(1-2). —P. 1-7.

112. Markovitz, P. J. The bifunctional aminoadipic semialdehyde synthase in lysine degradation. Separation of reductase and dehydrogenase domains by limited proteolysis and column chromatography / P. J. Markovitz, D. T. Chuang // Journal of Biological Chemistry. —1987. —Vol. 262(19). —P. 9353-9358.

113. Markus, G. The role of hemostasis and fibrinolysis in the metastatic spread of cancer // Seminars in Thrombosis and Hemostasis. —1984. —Vol. 10. —P. 61-70

114. Martin, C. The diverse functions of histone lysine methylation / C. Martin, Y. Zhang // Nature reviews Molecular cell biology. —2005. —Vol. 6(11)/ —P. 838849.

115. Matsumoto, S. Pipecolic acid induces apoptosis in neuronal cells / S. Matsumoto, S. Yamamoto, K. Sai // Brain research. —2003. —Vol. 980(2). —P. 179-184.

116. Meister, A. A1-Piperideine-2-carboxylate and A1-Pyrroline-2-carboxylate Reductase // Methods Enzymology. —1962. —Vol. 5. —P. 878-882

117. Mills, P. B. Mutations in antiquitin in individuals with pyridoxine-dependent seizures / P. B. Mills, E. Strays, C. Jakobs // Nature medicine. —2006. —Vol. 12(3). —P. 307-309.

118. Mishra, P. PEGylation in anti-cancer therapy: an overview / P. Mishra, B. Nayak, R. K. Dey // Asian journal of pharmaceutical sciences. —2016. —Vol. 11(3). — P. 337-348.

119. Molinier-Frenkel, V. Alterations of the immunosuppressive IL4I1 enzyme activity induced by naturally occurring SNP/mutations / V. Molinier-Frenkel, D. Mestivier, F. Castellano // Genes & Immunity. —2016. —Vol. 17(2). —P. 148152.

120. Mosmann, T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays / T. Mosmann // J. Immunol. Methods. — 1983. — V. 65. — P. 55-63

121. Morozova, E.A. Plasma methionine depletion and pharmacokinetic properties in mice of methionine y-lyase from Citrobacter freundii, Clostridium tetani and Clostridium sporogenes / E. A. Morozova, N. V. Anufrieva, D. Z. Davydov et al. // Biomedicine & Pharmacotherapy. —2017. —Vol. 88. —P. 978-984.

122. Moustafa, I. M. Crystal structure of LAAO from Calloselasma rhodostoma with an L-phenylalanine substrate: insight into structure and mechanism / I. M. Moustafa, S. Foster, A. Y. Lyubimov, A. Vrielink // Journal of molecular biology. —2006. —Vol. 364(5). —P. 991-1002.

123. Murthy, S.N. Identification of L-amino acid/L-lysine a-amino oxidase in mouse brain / S. N. Murthy, M. K. Janardanasarma // Molecular and cellular biochemistry. —1999. —Vol. 197(1). —P. 13-23.

124. Naumann, G.B. Cytotoxicity and inhibition of platelet aggregation caused by an L-amino acid oxidase from Bothrops leucurus venom / G. B. Naumann, L. F. Silva, L. Silva // Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-General Subjects. —2011. —Vol. 1810(7). —P. 683-694.

125. Ni, Y. Arginine deiminase, a potential anti-tumor drug / Y. Ni, U. Schwaneberg, Z. H. Sun // Cancer letters. —2008. —Vol. 261(1). —P. 1-11.

126. Nuutinen, J. T. L-Amino acid oxidase of the fungus Hebeloma cylindrosporum displays substrate preference towards glutamate / J. T. Nuutinen, E. M. Marttinen, R. Soliymani, K. Hilden, S. Timonen // Microbiology. —2012. —Vol. 158(1). — P. 272-283.

127. Okita, K. Antitumor effects of novel mAbs against cationic amino acid transporter 1 (CAT1) on human CRC with amplified CAT1 gene / K.; Okita, Y.; Hara, H. Okura et al. // Cancer Science. —2020. —Vol. 112. —P. 563-574.

128. Paiva, R. D. M. A. Cell cycle arrest evidence, parasiticidal and bactericidal properties induced by L-amino acid oxidase from Bothrops atrox snake venom / R. D. M. A. Paiva, R. de Freitas Figueiredo, G. A. Antonucci et al. // Biochimie. —2011. —Vol. 93(5). —P. 941-947.

129. Patil, M. Arginine dependence of tumor cells: targeting a chink in cancer's armor / M. D. Patil, J. Bhaumik, S. Babykutty, U. C. Banerjee, D. Fukumura // Oncogene. —2016. —Vol. 35(38). —P. 4957-4972.

130. Pawelek, P.D. The structure of L-amino acid oxidase reveals the substrate trajectory into an enantiomerically conserved active site / P. D. Pawelek, J. Cheah, R. Coulombe et al. // The EMBO journal. —2000. —Vol. 19(16). —P. 4204-4215.

131. Pena, I. A. Mouse lysine catabolism to aminoadipate occurs primarily through the saccharopine pathway; implications for pyridoxine dependent epilepsy (PDE) / I. A. Pena, L. A. Marques, A. B. Laranjeira et al. // Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Molecular Basis of Disease. —2017. —Vol. 1863(1). —P. 121-128.

132. Phase 3 ADI-PEG 20 Versus Placebo in Subjects With Advanced Hepatocellular Carcinoma Who Have Failed Prior Systemic Therapy - https://clinicalterials.gov

133. Pislar, A. Cytotoxic L-amino-acid oxidases from Amanita phalloides and Clitocybe geotropa induce caspase-dependent apoptosis / A. Pislar, J. Sabotic, J. Slenc, J. Brzin, J. Kos // Cell death discovery. —2016. —Vol. 2(1). —P. 1-11.

134. Plecko, B. Pipecolic acid as a diagnostic marker of pyridoxine-dependent epilepsy / B. Plecko, C. Hikel, G.C. Korenke // Neuropediatrics. —2005. —Vol. 36. —P. 200-205.

135. Podboronov, V.M. Investigation of antitumor substance from Trichoderma / V.M. Podboronov, A. E. Kuzovnikov, A.K. Zaitseva, I.P. Smirnova, T.T. Berezov // Antibiotics and Chemotherapy. —2011. —Vol. 56(9-10). —P. 3-6.

136. Podboronov, V.M. Preclinical trials of L-lysine-alpha-oxidase, an antitumor enzyme / V. M. Podboronov, A. E. Kuzovnikov, A. K. Zaitseva, I. P. Smirnova // Antibiotics and chemotherapy. —2010. —Vol. 55(9-10). —P. 33-36.

137. Pokrovsky, V.S. Properties and anticancer activity of L-lysine a-oxidase from Trichoderma cf. aureoviride Rifai BKMF-4268D / V.S. Pokrovsky, H.M. Treshalina, E.V. Lukasheva et al. // Anticancer Drugs. —2013. —Vol. 24. —P. 846-51.

138. Ponnudurai, G. Purification and properties of the L-amino acid oxidase from Malayan pit viper (Calloselasma rhodostoma) venom / G. Ponnudurai, M. C. Chung, N. H. Tan // Archives of Biochemistry and Biophysics. —1994. —Vol. 313(2). —P. 373-378.

139. Posset, R. Understanding cerebral L-lysine metabolism: The role of L-pipecolate metabolism in Gcdh-deficient mice as a model for glutaric aciduria type I / R. Posset, S. Opp, E. A. Struys et al. // Journal of inherited metabolic disease. — 2015. —Vol. 38(2). —P. 265-272.

140. Puetter, J. The behavior of L-asparaginase and L-asparagine in whole mice after asparaginase-application / J. Puetter, I. Flenker // European Journal of Drug Metabolism and Pharmacokinetics. —1976. —Vol. 1(3). —P. 149-154.

141. Rath, M. Plasmin-induced proteolysis and the role of apoprotein (a), lysine and synthetic lysine analogs / M. Rath, L. Pauling // Journal of Orthomolecular Medicine. —1992. —Vol. 7(1). —P. 17-23.

142. Rothstein, M. The conversion of lysine to pipecolic acid in the rat / M. Rothstein, L. L. Miller // Journal of Biological Chemistry. —1954. —Vol. 211. —P. 851858.

143. Sabotic, J. L-Amino Acid Oxidases From Mushrooms Show Antibacterial Activity Against the Phytopathogen Ralstonia solanacearum / J. Sabotic, J. Brzin, J. Erjavec et al. // Frontiers in microbiology. —2020. —Vol. 11. —P. 977.

144. Samel, M. L-Amino acid oxidase from Naja naja oxiana venom / M. Samel, K. Tonismagi, G. Ronnholm et al. // Comparative Biochemistry and Physiology B. —2008. —Vol.149(4). —P. 572-580.

145. Sauer, S.W. Therapeutic modulation of cerebral L-lysine metabolism in a mouse model for glutaric aciduria type I / S.W. Sauer, S. Opp, G.F. Hoffmann et al. // Brain. —2011. —Vol. 134. —P. 157-170.

146. Shoulders, M. D. Collagen structure and stability / M. D. Shoulders, R. T. Raines // Annual Review of Biochemistry. —2009. —Vol. 78. —P. 929-958.

147. Singh, M. Hydrogen peroxide induces apoptosis in HeLa cells through mitochondrial pathway / M. Singh, H. Sharma, N. Singh // Mitochondrion. — 2007. —Vol. 7. —P. 367-373

148. Smriga, M. L-Lysine acts like a partial serotonin receptor 4 antagonist and inhibits serotonin-mediated intestinal pathologies and anxiety in rats / M. Smriga, K. Torii // Proceedings of the National Academy of Sciences. —2003. —Vol. 100(26). — P. 15370-15375.

149. Smriga, M. Oral treatment with L-lysine and L-arginine reduces anxiety and basal Cortisol levels in healthy humans / M. Smriga, T. Ando, M. Akutsu et al. // Biomedical Research. —2007. —Vol. 28(2). —P. 85-90.

150. Soda, K. L-Lysine: a-ketoglutarate aminotransferase. I. Identification of a product, A1-piperideine-6-carboxylic acid / K. Soda, H. Misono, T. Yamamoto // Biochemistry. —1968. —Vol. 7. —P. 4102-4109

151. Sokalingam, S. A Study on the Effect of Surface Lysine to Arginine Mutagenesis on Protein Stability and Structure Using Green Fluorescent Protein / S. Sokalingam, G. Raghunathan, N. Soundrarajan, S-G. Lee // Plos one. —2012. — 7(7). —P. e40410.

152. Stockler, S. Pyridoxine dependent epilepsy and antiquitin deficiency: clinical and molecular characteristics and recommendations for diagnosis, treatment and follow-up / S. Stockler, B. Plecko, S. M. Gospe Jr et al. // Molecular genetics and metabolism. —2011. —104(1-2). —P. 48-60.

153. Struys, E. A. Metabolism of lysine in a-aminoadipic semialdehyde dehydrogenase-deficient fibroblasts: Evidence for an alternative pathway of pipecolic acid formation / E. A. Struys, C. Jakobs // FEBS letters. —2010. —Vol. 584(1). —P. 181-186.

154. Suhr, S. M. Identification of the snake venom substance that induces apoptosis / S. M. Suhr, D. S. Kim // Biochemical and biophysical research communications. —1996. —Vol. 224(1). —P. 134-139.

155. Suhr, S.M. Comparison of the apoptotic pathways induced by L-amino acid oxidase and hydrogen peroxide / S. M. Suhr, D. S. Kim // The Journal of Biochemistry. —1999. —Vol. 125. —P. 305-309.

156. Sun, M.Z. Biochemical, functional and structural characterization of akbu-LAAO: a novel snake venom L-amino acid oxidase from Agkistrodon blomhoffii ussurensis / M.Z. Sun, C. Guo, Y. Tian et al. // Biochimie. —2010. —Vol. 92. — P. 343-349

157. Tan, N.H. Purification and properties of the L-amino acid oxidase from monocellate cobra (Naja naja kaouthia) venom / N.H. Tan, S. Swaminathan // International Journal of Biochemistry. —1992. —Vol. 24(6). —P. 967-973.

158. Thein, D. J. Lysine as a prophylactic agent in the treatment of recurrent herpes simplex labialis / D. J. Thein, W. C. Hurt // Oral surgery, oral medicine, oral pathology. —1984. —Vol. 58(6). —P. 659-666.

159. Tomé, D. Lysine requirement through the human life cycle / D. Tomé, C. Bos // The Journal of nutrition. —2007. —Vol. 137(6). —P. 1642S-1645S.

160. Torii, S. Apoxin I, a novel apoptosis-inducing factor with L-amino acid oxidase activity purified from Western diamondback rattlesnake venom / S. Torii, M. Naito, T. Tsuruo // Journal of Biological Chemistry. —1997. —Vol. 272(14). — P. 9539-9542.

161. Torii, S. Molecular cloning and functional analysis of apoxin I, a snake venom-derived apoptosis-inducing factor with L-amino acid oxidase activity / S. Torii, K. Yamane, T. Mashima et al. // Biochemistry. — 2000. —Vol. 39. —P. 3197-3205.

162. Treshalina, H.M. Anticancer enzyme L-lysine a-oxidase / H.M. Treshalina, E.V. Lukasheva, L.A. Sedakova et al. // Applied biochemistry and biotechnology. — 2000. —Vol. 88. —P. 267-273.

163. Ullah, A. Crystallization and preliminary X-ray diffraction studies of an L-amino-acid oxidase from Lachesis muta venom / A. Ullah, R. Masood, P. J. Spencer, M. T. Murakami, R. K. Arni // Acta Crystallographica Section F: Structural Biology Communications. —2014. —Vol. 70(11). —P. 1556-1559.

164. Ullah, A. Structural insights into selectivity and cofactor binding in snake venom L-amino acid oxidases / A. Ullah, T. A. C. B. Souza, J. R. B. Abrego et al. // Biochemical and biophysical research communications. —2012. —Vol. 421(1). —P. 124-128.

165. Ullah, A. Structure-Function Studies and Mechanism of Action of Snake Venom L-Amino Acid Oxidases // Frontiers in pharmacology. —2020. —Vol. 11. —P. 110.

166. Vachher, M. Microbial therapeutic enzymes: A promising area of biopharmaceuticals / M. Vachher, A. Sen, R. Kapila, A. Nigam // Current Research in Biotechnology. —2021. —Vol. 3. —P. 195-208.

167. Vazquez Rodriguez, G. Lysine in Combination With Estradiol Promote D Trichoderma dissemination of Estrogen Receptor Positive Breast Cancer via Upregulation of U2AF1 and RPN2 Proteins / G. Vazquez Rodriguez, A. Abrahamsson, M. V. Turkina, C. Dabrosin // Frontiers in oncology. —2020. — Vol. 10. —P. 1-14

168. Warburg, O. On the origin of cancer cells. Science. —1956. —Vol. 123(3191). — P. 309-314.

169. Warburg, O. The metabolism of tumors in the body / O. Warburg, F. Wind, E. Negelein // Journal of General Physiology. —1927. —Vol. 8(6). —P. 519-530.

170. Weber, E. L-Lysine a-oxidase from Trichoderma viride i4. Purification and characterization / E. Weber, K. Tonder, C. Reinbothe et al. // Journal of basic microbiology. —1994. —Vol. 34. —P. 265-276.

171. Wei, J.F. Purification, characterization and biological activities of the L-amino acid oxidase from Bungarus fasciatus snake venom / J.F. Wei, H.W. Yang, X.L. Wei et al. // Toxicon. —2009. —Vol. 54(3). —P. 262-271.

172. Wink, D.A. The reemergence of nitric oxide and cancer / D.A. Wink, L.A. Ridnour, S.P. Hussain, C.C. Harris // Nitric Oxide. —2008. —Vol. 19. —P. 65-67.

173. Wriston, J. C. L-asparaginase: a review / J. C. Wriston, T. O. Yellin // Advances in Enzymology and Related Areas of Molecular Biology. —1973. —Vol. 39. — P. 185-248.

174. Yu, Z. Advances in non-snake venom L-amino acid oxidase / Z. Yu, H. Qiao // Applied biochemistry and biotechnology. —2012. —Vol. 167(1). —P. 1-13.

175. Yang, C. A. Identification of antibacterial mechanism of l-amino acid oxidase derived from Trichoderma harzianum ETS 323 / C. A. Yang, C. H. Cheng, S. Y. Liu et al. // The FEBS journal. —2011. —Vol. 278(18). —P. 3381-3394.

176. Zainal Abidin, S.A. Cytotoxic, anti-proliferative and apoptosis activity of L-amino acid oxidase from Malaysian Cryptelytrops purpureomaculatus (CP-LAAO) venom on human colon cancer cells / S.A. Zainal Abidin, P. Rajadurai, M. Hoque Chowdhury, I. Othman, R. Naidu // Molecules. —2018. —Vol. 23. —P. 1388.

177. Zhang, H. Purification, partial characterization, crystallization and structural determination of AHP-LAAO, a novel L-amino-acid oxidase with cell apoptosis-inducing activity from Agkistrodon halys pallas venom / H. Zhang, M. Teng, L. Niu et al. // Acta Crystallographica Section D: Biological Crystallography. — 2004. —Vol. 60(5). —P. 974-977.

178. Zhang, L. A cytotoxin isolated from Agkistrodon acutus snake venom induces apoptosis via Fas pathway in A549 cells / L. Zhang, L. Cui // Toxicology in vitro. —2007. —Vol. 21(6). —P. 1095-1103.

179. Zhang, L. ACTX-8, a cytotoxic L-amino acid oxidase isolated from Agkistrodon acutus snake venom, induces apoptosis in Hela cervical cancer cells / L. Zhang, L. J. Wei // Life sciences. —2007. —Vol. 80(13). —P. 1189-1197.

180. Zhang, L. Isolation and characterization of ACTX-6: a cytotoxic L-amino acid oxidase from Agkistrodon acutus snake venom / L. Zhang, W.T. Wu // Natural Product Research. —2008. —Vol. 22. —P. 554-563.

181. Zhang, R. The biological process of lysine-tRNA charging is therapeutically targetable in liver cancer / R. Zhang, L. Noordam, X. Ou et al. // Liver International. —2021. —Vol. 41(1). —P. 206-219.

182. Zhu, C. No evident dose-response relationship between cellular ROS level and its cytotoxicity-a paradoxical issue in ROS-based cancer therapy / C. Zhu, W. Hu, H. Wu et al. // Scientific reports. —2014. —4(1). —P. 1-10.

183. Zhu, L. A potential antitumor drug (arginine deiminase) reengineered for efficient operation under physiological conditions / L. Zhu, R. Verma, D. Roccatano et al. // ChemBioChem. —2010. —Vol. 11(16). —P. 2294-2301.

184. Zhukova, O.S. Effect of L-lysine-alpha-oxidase on the cell cycle kinetics of cultured Burkitt's lymphoma cells / O. S. Zhukova, S. Kh. Khaduev, I.V. Dobrynin, I. P. Smirnova, E. V. Lukasheva // Eksperimentalnaya onkologia. — 1985. —Vol. 7(6). —P. 42-44.