Оптимизация этапов клонального микроразмножения гибридов вишни на основе применения новых биологически активных веществ тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.01.07, кандидат биологических наук Майорова, Юлия Алексеевна

• Майорова, Юлия Алексеевна
• кандидат биологических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Майорова, Юлия Алексеевна

ВВЕДЕНИЕ.

1. АНАЛИТИЧЕСКИЙ ОБЗОР.

1.1. Клональное микроразмножение косточковых культур.

1.2. Использование биологически активных веществ (БАВ) в культуре in vitro

1.3. Клоновые подвои.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.1. Характеристика объектов исследований.

2.2. Лабораторное оснащение и инструментарий.

2.3. Методика проведения исследований

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Жизнеспособность почек в зависимости от срока их вычленения.

3.2. Выбор стерилизующего вещества.

3.3. Оптимизация концентрации 6-БАП в питательной среде на этапе пролиферации.

3.4. Использование антибиотиков в культуре in vitro.

3.4.1. Анализ воздействия антибиотиков цефотаксима и клафорана на различные типы инфекции

3.4.2. Влияние комплексных антибиотиков на степень заражения среды и эксплантов сапрофитной микрофлорой.

3.4.3. Воздействие антибиотиков на пробирочные растения.

3.5. Оценка эффективности применения биологически активных веществ (БАВ) в культуре in vitro.

3.5.1. Янтарная кислота

3.5.2. Биоянтарная кислота.

3.5.3. Калий-УНИ.

3.6. Определение оптимальных сроков пассирования в культуре in vitro

3.7. Укоренение микропобегов

3.8. Адаптация микрорастений in vivo.

ВЫВОДЫ.

РЕКОМЕНДАЦИИ ПРОИЗВОДСТВУ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Оптимизация этапов клонального микроразмножения гибридов вишни на основе применения новых биологически активных веществ»

Краснодарский край, обладающий благоприятными почвенными и климатическими условиями, является самым крупным регионом России по производству плодовой и ягодной продукции. Однако в 90-е годы здесь как в целом по России произошло сокращение площадей промышленных насаждений косточковых культур и валового производства плодов. Так общая площадь косточковых снизилась с 23,7 тыс. га в 1999 году, до 18,6 тыс. га в 2004 году [35, 50]. Одной из основных причин сокращения площадей косточковых культур является недостаток оздоровленных подвоев, которые бы полностью отвечали требованиям современного производства.

Дальнейшая интенсификация плодоводства на современном этапе невозможна без увеличения ассортимента подвойного материала, в том числе и косточковых культур. Клоновые подвои позволяют резко сократить варьирование силы роста и урожайности деревьев, ускорить промышленное плодоношение садов, увеличить их урожайность, улучшить качество плодов и снизить затраты ручного труда [128]. Актуальность использования традиционных способов, таких как окулировка, прививка или черенкование, для получения подвоев не может быть подвергнута сомнению, однако по производительности показатели размножения in vitro несоизмеримо выше [78]. Поэтому эффективность клонального микроразмножения при выращивании посадочного материала позволяет рассматривать его как серьезную альтернативу традиционным технологиям.

В настоящее время в Европе и США клональное микроразмножение постепенно вытесняет традиционные способы вегетативного размножения. В США, Италии, Франции, Великобритании, Голландии, Новой Зеландии имеются производственные лаборатории, работа которых по выпуску оздоровленного посадочного материала плодовых и ягодных культур поставлена на промышленную основу [92].

Способ культивирования меристем in vitro имеет значительный потенциал для совершенствования — химическими лабораториями синтезируются новые ростовые вещества. Их эффективность нуждается в детальных исследованиях и проверке на современном сортименте косточковых культур.

Актуальность работы обоснована необходимостью ускоренного клонального микроразмножения посадочного материала вегетативно размножаемых косточковых культур для быстрого внедрения их в производство и совершенствования методики микроразмножения с учетом видовых особенностей конкретных растений.

Новизна работы заключается в исследовании активности и специфики влияния ростовых веществ последнего поколения, на сорта и гибриды косточковых при культивировании их in vitro, и совершенствовании его отдельных этапов. Впервые предложен и запатентован способ адаптации пробирочных растений in vivo в комбинированном субстрате.

Практическая значимость работы заключается в первичном размножении гибридов вишни и черешни селекции СКЗНИИСиВ.

Цель работы - совершенствование способа клонального микроразмножения гибридов вишни и черешни с помощью БАВ нового поколения.

Ставились задачи:

1. Модифицировать питательные среды для культивирования in vitro эксплантов гибридов вишни и черешни для получения микрорастений оптимального качества.

2. Изучить специфичность реакции эксплантов на ростовые вещества и БАВ в культуре in vitro в зависимости от сорта и вида.

3. Существенно увеличить выход адаптированных in vivo пробирочных растений.

Заключение диссертации по теме «Плодоводство, виноградарство», Майорова, Юлия Алексеевна

выводы

1. Определено, что фаза выхода из покоя для меристематического апекса, вычлененного из верхушечной почки, является оптимальной при успешной индукции in vitro гибридов вишни.

2. Выявлено, что 0,1% раствор сулемы в экспозиции 8 минут следует использовать в качестве поверхностно стерилизующего вещества при работе с культурой ткани вишни.

3. Установлено, что для стимуляции образования побегов в культуре не следует использовать комбинацию цитокинина и ауксина, так как такое сочетание стимулирует индукцию побегов, но приводит к образованию каллуса и в дальнейшем вызывает фенотипические изменения культивируемого растения. Оптимальная концентрация 6-БАП в состав среды М. С. (1962) для исследованных нами растений, 0,5-1,0 мг/л.

4. Цефотаксим в концентрации от 0,1 до 0,5 мг/л и канамицин в концентрации 10 мг/л исключает из питательной среды средовую и посадочную инфекцию.

5. Рекомендуется использовать биоянтарную кислоту в концентрации 0,5 и 1,0 мг/л повышающую коэффициент размножения до 20,4 и сокращающую количество пересадок на свежую питательную среду до трех пассажей.

6. На этапе элонгации предполагается применять К-УНИ, который повышает коэффициент размножения до 4,4.

7. В качестве индуктора ризогенеза косточковых культур целесообразно использовать ИМК в концентрации от 0,5 до 0,8 мг/л. Ее применение вызывает высокий процент укоренения.

8. Для постепенного переключения растения с гетеротрофного на автотрофный способ питания в период адаптации in vivo необходимо высаживать его в стерильный перлит, увлажненный водным раствором минеральных солей культуральной среды, расположенный над нестерильным почвенным субстратом, под пленочное укрытие (авт. св. №2335119).

РЕКОМЕНДАЦИИ ПРОИЗВОДСТВУ

1. При производстве посадочного материала из единичных, ценных исходных растений косточковых культур рекомендуется использовать способ клонального микроразмножения. Еще более ускорить процесс внедрения таких растений в практическое использование можно используя в качестве добавок в питательную среду новых БАВ: биоянтарную кислоту в концентрации от 0,5 до 1,0 мг/л и К-УНИ 2,0 мг/л.

2. Адаптировать in vivo микрорастения способом «Способ адаптации in vivo плодовых и ягодных культур в двухслойном субстрате». (А. С. №2335119)

3. Для производственного испытания в качестве легко размножаемых подвоев in vitro рекомендовать: гибриды вишни №70, 74 и 92, а также ВСЛ-2.

4. При клональном микроразмножении подвоев и гибридов вишни:

- Вычленение апексов проводить из верхушечных почек в начале марта;

- Стерилизацию апексов осуществлять в сулеме (экспозиция 8 мин);

- Использовать 6-БАП на этапе пролиферации в концентрации от 0,5 до 1,0 мг/л в течение 5-ти пассажей;

- Антибиотик канамицин в концентрации 10 мг/л добавлять в питательную среду непосредственно перед автоклавированием;

- На этапе пролиферации использовать биоянтарную кислоту в концентрации 0,5 и 1,0 мг/л на фоне 0,5 мг/л 6-БАП;

- Пересадку растений из пробирок в нестерильные условия проводить в зимние месяцы.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Майорова, Юлия Алексеевна, 2009 год

1. Агеев Б. Н. Методические рекомендации по размножению клоновых подвоев в интенсивном одногодичном маточнике / Б. Н. Агеев. Ялта, 1986. -24 с.

2. Артамонов В. И. Биотехнология — агропромышленному комплексу / В. И. Артамонов. М.: Наука, 1989. - 156 с.

3. Астахов А. А. Изучение в питомнике вегетативно размножаемых подвоев для вишни и черешни / А. А. Астахов // Роль сортов и новых технологий в интенсивном садоводстве: материалы Междунар. науч.- метод, конф. / ГНУ ВНИИСПК. Орел, 2003. - С. 18-19.

4. Барабаш Т. Н. Биологические особенности клоновых подвоев вишни и черешни / Т. Н. Барабаш // Садоводство и виноградарство. 2000. - № 2. - С. 910.

5. Барабаш Т. Н. Выращивание саженцев вишни на клоновых подвоях / Т. Н. Барабаш // Роль сортов и новых технологий в интенсивном садоводстве: материалы Междунар. науч.- методич. конф. / ВНИИСПК. Орел, 2003. - С. 2931.

6. Барабаш Т. Н. Засухоустойчивость клоновых подвоев черешни в условиях южной степи Украины / Т. Н. Барабаш // Садоводство и виноградарство. 2003. - № 3. - С. 14-16.

7. Барабаш Т. Н. Клоновые подвои черешни / Т. Н. Барабаш // Садоводство и виноградарство. 2003. - № 6. - С. 11-13.

8. Барабаш Т. Н. Оценка клоновых подвоев косточковых культур в условиях южной степи Украины / Т. Н. Барабаш, Г. А. Кинаш // Научныеосновы устойчивого садоводства в России: докл. конф. / НИИ Садоводства им. И. В. Мичурина. Мичуринск, 1999. - С. 190-193.

9. Белошапкина О. О. Система оздоровления земляники садовой от вирусов: автореф. дис. . д. с.-х. наук / О. О. Белошапкина; ВСТИСП. М., 2006. - 40 с.

10. Биология. Большой энциклопедический словарь / под ред. М. С. Гилярова. М.: Большая Российская энциклопедия, 1999. - 864 с.

11. Биология. Толковый словарь (с английскими эквивалентами) / В. П. Андреев, А. Г. Марков, Г. И. Дубенская, Е. Ф. Сороколетова. СПб.: Лань, 1999.-448 с.

12. Бунцевич Л. Л. Регенерация in vitro и клональное микроразмножение черешни и вишни новых сортов селекции СКЗНИИСиВ / Л. Л. Бунцевич // Использование биотехнологических методов для решения генетико-селекционных проблем. Мичуринск, 1998. - С. 66-68.

13. Бутенко Р. Г. Биология клеток высших растений in vitro и биотехнология на их основе: учеб. пособие / Р. Г. Бутенко. М.: ФБК-ПРЕСС, 1999.- 160 с.

14. Бутенко Р. Г. Жизнь клетки вне организма / Р. Г. Бутенко. М.: Знание, 1975.-63 с.

15. Бутенко Р. Г. Культура изолированных тканей и физиология морфогенеза растений / Р. Г. Бутенко. — М.: Наука, 1964. 270 с.

16. Бутенко Р. Г. От свободноживущей клетки к растению / Р. Г. Бутенко. -М.: Колос, 1971.-93 с.

17. Валиханова Г. Ж. Культура клеток и биотехнология растений / Г. Ж. Валиханова, И. Р. Рахимбаев. Алма-Ата, 1989. — 80 с.

18. Высоцкий В. А. Использование методов культуры изолированных тканей и органов для оздоровления и ускоренного размножения плодовых и ягодных растений / В. А. Высоцкий // Селекция плодовых и ягодных культур. -Новосибирск, 1989. С. 132-138.

19. Высоцкий В. А. Клональное микроразмножение в системе производства оздоровленного посадочного материала малины / В. А. Высоцкий, Н. В Герасимова // Ягодоводство в Нечерноземье. М., 1989. - С. 65-74.

20. Высоцкий В. А. Клональное микроразмножение плодовых растений и декоративных кустарников / В. А. Высоцкий // Микроразмножение и оздоровление растений в промышленном плодоводстве и цветоводстве. -Мичуринск: ВНИИС им. И. В. Мичурина, 1989. С. 3-8.

21. Высоцкий В. А. Перспективы внедрения микроразмножения в производство / В. А. Высоцкий // Садоводство и виноградарство. 1988. - №. 2. -С. 14-17.

22. Высоцкий В. А. Применение методов культуры изолированных тканей и органов для размножения плодовых и ягодных растений / В. А. Высоцкий // Ягодоводство в Нечерноземье. М.: НИЗИСНП, 1982. - С. 30-41.

23. Высоцкий В. А. Производство оздоровленного посадочного материала плодовых, ягодных культур и винограда методом клонального микроразмножения / В. А. Высоцкий, Н. П. Туровская. М.: Агропромиздат, 1989. - 8 с.

24. Высоцкий В. А. Регенерация побегов косточковых культур из корневого и листового каллусов / В. А. Высоцкий, Е. В. Данькова // Плодоводство в Нечерноземье. -М.: ВСТИСП, 1993. С. 70-75.

25. Высоцкий В. А. Совершенствование питательной среды для клонального микроразмножения вишни / В. А. Высоцкий, Е. В. Олешко // Агротехника и сортоиучение плодовых культур. М.: НИЗИСНП, 1985. - С. 7376.

26. Гамбург К. 3. Ауксины в культурах тканей и клеток растений / К. 3. Гамбург, Н. И. Рекославская, С. Г. Швецов. Новосибирск: Наука, 1990. - 243 с.

27. Гегечкори Г. Б. Экономическая эффективность производства плодов в плодовом подкомплексе АПК (по материалам Прикубанской зоны Краснодарского края) / Г. Б. Гегечкори. Краснодар: КубГАУ, 2005. - 217 с.

28. Горбачева Н. Н. Оценка и размножение клоновых подвоев косточковых культур в условиях северо-запада России: автореф. дис. . канд. с.-х. наук /Н. Н. Горбачева; Пушкин. СПб., 2000. - 16 с.

29. Гродзинский А. М. Краткий справочник по физиологии растений / А. М. Гродзинский, Д. М. Гродзинский. Киев: Наукова Думка, 1973. - 591 с.

30. Грязев В. А. Выращивание саженцев для высокопродуктивных садов /

31. B. А. Грязев. Ставрополь: Кавказский край, 1999. - 208 с.

32. ДерфлингК. Гормоны растений. Системный подход: Пер. с англ. Н.

33. C. Гельман.- М.: Мир, 1985. 304 с.

34. Джигадло Е. Н. Микроклональиое размножение сортов и подвоев вишни / Е. Н. Джигадло, М. И. Джигадло // Плодоводство. Самохваловичи, 2005. - Т. 17. - Ч. 2. - С. 200-202.

35. Джигадло М. И. Некоторые вопросы микроклонального размножения плодовых и ягодных культур / М. И. Джигадло // Пути интенсификации садоводства и селекция плодовых и ягодных культур. Тула, 1989. - С. 129-134.

36. Джигадло М. И. Размножение вишни методом верхушечных меристем / М. И. Джигадло, Е. Н. Джигадло // Улучшение сортимента и прогрессивные приемы возделывания плодовых и ягодных культур. Тула, 1988. - С. 65-68.

37. Доспехов Б. А. Планирование полевого опыта и статистическая обработка его данных / Б. А. Доспехов. М.: Колос, 1972. - 207 с.

38. Дубовский Н. В. Меристемные методы размножения плодовых и ягодных культур / Н. В. Дубовский, Н. И. Туровская, А. М. Чернец // Садоводство и виноградарство. 1988. - № 1. - С. 27-29.

39. Егорова Т. А. Основы биотехнологии: учеб. пособие для высш. пед. учеб. заведений / Т. А. Егорова, С. М. Клунова, Е. А. Живухина. М.: Академия, 2005. - 208 с.

40. Егоров Е. А. Экономическая эффективность производства и сбыта плодов / Е. А. Егоров, П. Ф. Парамонов, Ж. Г. Синяговская. Краснодар: КГАУ, 2005. - 179 с.

41. Еремина О. В. Некоторые особенности выращивания саженцев черешни на адаптивном подвое BCJI-2 / О. В. Еремина // Проблемы экологизации современного садоводства и пути их решения: материалы Междунар. конф. / КубГАУ. Краснодар, 2004. - С. 463-467.

42. Еремин Г. В. Новые клоновые подвои вишни и черешни / Г. В. Еремин,

43. A. В. Проворченко // Садоводство и виноградарство. 1997. - № 5-6. - С. 12-14.

44. Еремин Г. В. Новые клоновые подвои косточковых культур / Еремин Г. В., А. В. Проворченко // Сад1вництво. Кшв, 1998. - № 47. - С. 207-209.

45. Еремин Г. В. Новый тип универсального маточника клоновых подвоев косточковых культур / Г. В. Еремин, Ю. В. Соколова // Садоводство и виноградарство. 2005. - № 4. - С. 11-12.

46. Еремин Г. В. Перспективы создания насаждений косточковых культур интенсивного типа / Г. В. Еремин, А. В. Проворченко, В. Ф. Гавриш, В. Г. Еремин // Тр. / СКЗНИИ садоводства и виноградарства.- 2001. Ч. 1. - С. 150153.

47. Еремин Г. В. Подбор клоновых подвоев косточковых культур для адаптивного садоводства / Г. В. Еремин, В. Г. Еремин // Проблемы экологизации современного садоводства и пути их решения: материалы Междунар. конф. / КубГАУ. Краснодар, 2004. - С. 371-377.

48. Еремин Г. В. Пути совершенствования сортимента косточковых культур в садах России / Г. В. Еремин // Плодоводство и ягодоводство России. -М., 1996. Т. 3.-С. 26-30.

49. Еремин Г. В. Селекция клоновых подвоев для черешни / Г. В. Еремин,

50. B. Н. Подорожный // Экологическая оценка типов высокоплотных плодовых насаждений на клоновых подвоях: материалы II Междунар. симпозиума / Институт плодоводства. Минск, 2003. - С. 162-165.

51. Жуков О. С. Методические рекомендации по получению растений-регенерантов плодовых пород в культуре пыльников / О. С. Жуков, О. Я. Олейникова, Н. И. Савельев. Мичуринск: ВНИИГиСПР им. И. В. Мичурина, 1994. - 35с.

52. Избасаров Д. С. Технология оздоровления и размножения ягодных культур в Казахстане /Д. С. Избасаров, Н. П. Клоконос. Алматы: Мектеп, 2002. - 200 с.

53. Индукция морфогенеза и тканевая селекция плодовых и ягодных культур (методические рекомендации) / под ред. В. М. Тюленева. Мичуринск: ВНИИ генетики и селекции плодовых растений им. И. В. Мичурина, 1996. - 74 с.

54. Каверзнева Г. Д. Меры борьбы с вирусными болезнями плодовых культур и винограда: обзорная информация / Г. Д. Каверзнева. -М.:ВНИИТЭИСХ, 1980. 53 с.

55. Карабанов И. А. Витамины и фитогормоны в жизни растений / И. А. Карабанов. Мн.: Ураджай, 1977. - 112 с.

56. Егоров Е. А. Экономическая эффективность производства и сбыта плодов / Е. А. Егоров, П. Ф. Парамонов, Ж. Г. Синяговская. Краснодар: КГАУ, 2005. - 179 е.

57. Катаева Н. В. Клональное микроразмножение растений / Н. В. Катаева, Р. Г. Бутенко. М.: Наука, 1983. 96 с.

58. Киселева Н. С. Методические рекомендации по выращиванию растений чая на основе изолированного зародыша в условиях in vitro / Н. С. Киселева. Сочи, 2001. - 29 с.

59. Климкина Н. П. Клональное микроразмножение плодовых и ягодных культур / Н. П. Климкина // Садоводство, виноградарство и виноделие. -Ташкент, 2001. Т.50. - С. 205-208.

60. Клональное микроразмножение плодовых и ягодных культур / Н. М. Круглов, О. В. Матушкина, Р. Г. Ноздрачева, И. Н. Пронина, Н. И. Туровская. -Воронеж: ВГАУ, 1998. -12 с.

61. Клоновые подвои для интенсивных садов вишни Нечерноземья России (рекомендации) / сост. Н. Т. Ревяткина, Г. Ю. Упадышева, А. М. Михеев. М.: ВСТИСП, 2000. - 20 с.

62. Клоновые подвои косточковых культур (методические указания) / сост. А. Н. Татаринов.- М., 1989. 66 с.

63. Корнацкий С. А. Проблемы клонального микроразмножения косточковых культур / С. А. Корнацкий, В. А. Высоцкий, В. Г. Трушечкин // Достижения в плодоводстве в нечерноземной зоне РСФСР. М., 1991. - С. 104116.

64. Косточковые культуры. Выращивание на клоновых подвоях и собственных корнях / Г. В. Еремин, А. В. Проворченко, В. Ф. Гавриш, В. Н. Подорожный, В. Г. Еремин. Ростов-на-Дону: Феникс, 2000. - 256 с.

65. Красинская Т. А. Микроразмножение различных форм Cerasus Mill, in vitro / Т. А. Красинская, H. В. Кухарчик // Плодоводство. Самохваловичи.-2004.-Т. 16.-С. 26-31.

66. Красинская Т. А. Совместное влияние феруловой, гибберелловой кислот и 6-бензиладенина на процесс микроразмножения регенерантов вишни в культуре in vitro / Т. А. Красинская // Плодоводство. Самохваловичи, 2005. -Т. 17.-Ч. 1.-С. 72-76.

67. Кретович В. JI. Биохимия растений: учебник для биол. факультетов унтов / В. J1. Кретович. М.: Высшая школа, 1980. - 445 с.

68. Кухарчик Н. В. Роль экспланта при инициации культуры in vitro некоторых плодовых и ягодных растений / Н. В. Кухарчик, С. Э. Семенас, М. С. Чиковани, Р. М. Пугачев // Плодоводство. — Беларусь, 1999. Т. 12. - С. 25-28.

69. Либберт Э. Физиология растений: Пер. с нем. Д. П. Викторов, Н. С. Гельман.- М.: Мир, 1976.- 580 с.

70. Мазин В. В. Изучение природных цитокининов / В. В. Мазин, Л. С. Шашкова // Рост растений и природные регуляторы. М.: Наука, 1977. - С. 122142.

71. Матушкина О. В. Клональное микроразмножение плодовых и ягодных культур и перспективы его использования / О. В. Матушкина, И. Н. Пронина // Основные итоги и перспективы научных исследований ВНИИС им. И. В. Мичурина. Тамбов, 2001. - С. 103-105.

72. Машковский М. Д. Лекарственные средства: пособие по фармакотерапии для врачей. В 2 ч. Ч. 2. / М. Д. Машковский. М.: Медицина, 1977.-560 с.

73. Методические рекомендации по выращиванию гибридных растений тюльпанов в культуре зародышей in vitro / сост. Т. М. Коломиец, В. С. Мохно. -Сочи: ВНИИЦиСК, 2000. 20 с.

74. Методические рекомендации по использованию биотехнологических методов в работе с плодовыми, ягодными и декоративными культурами / сост. Е. Н. Джигадло, М. И. Джигадло, JI. В. Голышкина. Орел: ГНУ ВНИИСПК, 2005.-51 с.

75. Методические рекомендации по клональному микроразмножению панкрация морского (Pancratium maritimum L.) в культуре in vitro / сост. А. А. Тибилов, В. И. Болгов, Т. В. Евсюкова. М., 2003. - 19 с.

76. Методические указания по выращиванию сеянцев вишни из зародышей, изолированных на ранних стадиях развития / сост. В. А. Высоцкий, Г. А. Плотникова. М.: НИЗИСНП, 1988. - 16 с.

77. Методические указания по клональному микроразмножению черной и красной смородины / сост. Ф. Я. Поликарпова, В. А. Высоцкий, 3. Т. Тарашвили. М.: НИЗИСНП, 1986. - 16 с.

78. Методические указания по технологии производства оздоровленного посадочного материала плодовых и ягодных культур высших категорий / сост. В. Г. Трушечкин, Ф. Я. Поликарпова, В. А. Высоцкий, А. А. Борисова, И. С. Литвиненко М.: ВАСХНИЛ, 1986. - 44 с.

79. Минаев В. А. Эффективность клонального микроразмножения и качество оздоровленного по двойного материала яблони / В. А. Минаев, А. В. Верзилин, В. А. Высоцкий // Садоводство и виноградарство. 2005. - N. 4. - С. 12-14.

80. Митрофанова О. В. Диагностика вирусных болезней и биотехнологические приемы получения безвирусного посадочного материала косточковых плодовых культур / О. В. Митрофанова, Л. Е. Славгородская-Куприева, И. В. Митрофанова. Ялта: Крымпресс, 2000. - 45 с.

81. Всерос. науч. — практ. конф. / ВНИИ генетики и селекции плодовых растений им. И. В. Мичурина. Мичуринск, 2003. - С. 130-135.

82. Муромцев Г. С. Основы сельскохозяйственной биотехнологии / Г. С. Муромцев, Р. Г. Бутенко, Т. И. Тихоненко. М., 1990. - 383 с.

83. Негрука В. И. Биотехнология растений: культура клеток / В. И. Негрука; пер. с англ. М.: Агропромиздат, 1989. - 280 с.

84. Негрука В. И. Биотехнология сельскохозяйственных растений / В. И. Негрука; пер. с англ. М.: Агропромиздат, 1987. - 301 с.

85. Неделчева Славка. Значението на рН на хранителната среда за развитието на микроразмножени култури от вишна // Почвозн., агрохим. иекол. 1999.-34, №2-3.-С. 83-86.

86. Оздоровление и размножение плодовых и ягодных растений методом культуры меристематических верхушек / сост. Ю. Г. Попов. М.: ВАСХНИЛ, 1979.-29 с.

87. Олешко Е. В. Размножение клоновых подвоев вишни / Е. В. Олешко, В. Г. Трушечкин, В. А. Высоцкий // Садоводство. 1983. - №. 3. - С. 20-21.

88. Основы сельскохозяйственной биотехнологии / Г. С. Муромцев, Р. Г. Бутенко, Т. И. Тихоненко, М. И. Прокофьев. М.: Агропромиздат, 1990. - 384 с.

89. Пат. 2128430 Российская федерация, МПК6 А 01 Н 4/00. Питательная среда для микроклонального размножения черешни / И. М. Фардзинова; заявитель и патентообразователь Горе: гос. аграр. ун-т. № 96116868 / 13; заявл. 09.08.96; опубл. 10. 04. 99., Бюл. №10.

90. Петрова А. Д. Оздоровление и размножение садовых культур in vitro / А. Д. Петрова, М. Т. Упадышев // Садоводство и виноградарство. 2000. - № 4. -С. 12-13.

91. Подвои плодовых пород (рекомендации) / сост. В. А. Алферов, Т. С. Ивашкова, Г. М. Дей, Р. В. Кальгина. Краснодар, 1989. - 23 с.

92. Полевой В. В. Фитогормоны: Учебное пособие / В. В. Полевой. -СПб.: изд-во Ленингр. ун-та, 1982. 248 с.

93. Попов Ю. Г. Оздоровление и размножение плодовых и ягодных растений методом меристематических верхушек (методические указания) / Ю. Г. Попов. М.: ВАСХНИЛ, 1979. - 30 с.

94. Практикум по микробиологии: учеб. пособие для студ. высш. учеб. заведений / под ред. А. И. Нетрусова. М.: Академия, 2005. - 608 с.

95. Программа и методика селекции плодовых, ягодных и орехоплодных культур / под ред. Е. Н. Седова. Орел: ВНИИСПК, 1995. - 502 с.

96. Пронина И. Н. Микроразмножение перспективных сортов вишни / И. Н. Пронина // Научные основы устойчивого садоводства в России: докл. конф. / ВНИИС им. И. В. Мичурина. Мичуринск, 1999. - С. 370-373.

97. Рождественский В. И. Управляемое культивирование растений в искусственной среде / В. И. Рождественский, А. Ф. Клешни. М.: Наука, 1980. - 199 с.

98. Сидоров В. А. Биотехнология растений. Клеточная селекция / В. А. Сидоров. Киев: Наукова думка, 1990. - 280 с.

99. Смирнов А. М. Некоторые итоги и задачи исследований по культуре изолированных корней / А. М. Смирнов // Культура изолированных органов, тканей и клеток растений. М.: Наука, 1970. — С. 51-56.

100. Тайдмен X. М. Селекция подвоев плодовых деревьев / X. М. Тайдмен.- М.: Колос, 1966. 62 с.

101. Тарр С. Основы патологии растений / Пер. с англ. Jl. М. Дунина и Н. Л. Клячко.- М.: Мир, 1975.- 587 с.

102. Татаринов А. Н. Садоводство на клоновых подвоях / А. Н. Татаринов.- Киев: Урожай, 1988. 208 с.

103. Ташматова Л. В. Методы культуры in vitro при размножении и депонировании форм груши / Л. В. Ташматова, В. Е. Джафарова // Сад1вництво.- Кшв: СЕРЖ, 2005. Вип. 57. - С. 205-212.

104. Трушечкин В. Г. Методические указания по клональному микроразмножению подвоев и сортов яблони / В. Г. Трушечкин, В. А. Высоцкий, О. А. Леонтьев-Орлов. -М.: ВАСХНИЛ, 1985. 19 с.

105. Туровская Н. И. Влияние аденин-сульфата на регенерацию подвоев яблони in vitro / Н. И. Туровская, И. Н. Пронина // Тезисы докл. Международ, конф. Алма-Ата, 1993. - С. 249-261.

106. Туровская Н. И. Микроклональное размножение малины / Н. И. Туровская, О. В. Стрыгина // Садоводство и виноградарство. — М., 1990. № 8. - С. 26-29.

107. Туровская Н. И. Микроклональное размножение: перспективы его использования и направление дальнейших исследований / Н. И. Туровская // Проблемы интенсификации современного садоводства. Мичуринск, 1990. - С. 157-159.

108. Упадышев М. Т. Клональное микроразмножение ежевики и малины черной / М. Т. Упадышев, В. А. Высоцкий // Новое в ягодоводстве Нечерноземья. М., 1990. - С. 56-65.

109. Упадышев М. Т. Клональное микроразмножение некоторых нетрадиционных культур рода Rubus / М. Т. Упадышев // Ягодоводство в Нечерноземье. М.: ВСТИСП. - 1993. - С. 10-18.

110. Упадышев М. Т. Проблемы оздоровления и размножения in vitro растений рябины обыкновенной / М. Т. Упадышев // Плодоводство и ягодоводство России. М.: ВСТИСП. - 1994. - С. 70-75.

111. Упадышев М. Т. Совершенствование процесса клонального микроразмножения ежевики и малины черной / М. Т. Упадышев, В. А. Высоцкий // Совершенствование технологии выращивания ягодных культур в Нечерноземье. М.: НИЗИСНП. - 1992. - С. 42-53.

112. Фомина Е. Г. Клональное микроразмножение районированных в Беларуси сортов Cerasus / Е. Г. Фомина, Н. Г. Жук // Плодоводство. Минск, 1994.-Т. 9. -Ч. 1. - С. 64-71.

113. Чеботарева М. С. Перспективы использования дикорастущих видов в селекции на устойчивость к коккомикозу / М. С. Чеботарева // Науч.— техн. биол. ВИР. -М., 1985. Вып. № 155. - С. 62-63.

114. Шипунова А. А. Повышение укореняемости побегов миниатюрной розы при размножении in vitro / А. А. Шипунова, В. А. Высоцкий // Плодоводство и ягодоводство России. М.: ГНУ ВСТИСП. - 2006. - Т. 15. - С. 13-15.

115. Щеглов С. Н. Применение биометрических методов для ускорения селекционного процесса плодовых и ягодных культур / С. Н. Щеглов. -Краснодар: СКЗНИИСиВ; Кубанский гос. ун-т, 2005. 106 с.

116. А1 Sabbagh Muna, Abdul - Kader Ahmad. In vitro propagation of a semi - dwarfing cherry rootstock // Plant Cell, Tissue and Organ Culture. - 1999. - №. 59. -P. 203-208.

117. Cornu D. Michel M. F. Bacteria contaminants in shoot cultures of Prunus avium L. Choice and phytotoxicity of antibiotics // Acta Hortic. 1987. - N 212.-P. 83-86.

118. Grout B. W. W. Wax development on leaf surbaces of Brassica olaracea var. Currawong regenerated from meristem culture // Plant Sci. Lett. — 1975. №5. — P. 401-405.

119. Haberlandt G. Kulturvermuche mit isolierten Pflanzenzollen. -Sitzungaber Akad. Wiss. Wien Nath-naturw., 1902, Bd III, S. 69-92.

120. James D. Mikropropagion of red raspberry and the influence of phloroglurino. / Sc Hortic., 1980, N 12. p. 313-319.

121. Morel G. Recherches sur la culture associee de parasiten obligatoives et de tissues vegetaux. These, Paris, 1948, 112 p. Ann. Epiphyt. 5, t. 14, p.'123-234.

122. Murashige Т., Skoog F. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures // Physiol. Plant.- 1962.- Vol.15.- N 3.- P. 473497.

123. Reuther G. Current status and future prospects of large scale micropropagation in commercial plant production // Food Biotechnol.- 1990.- V.4, N.I.- P. 445-459.

124. Young P. M., Hutchins A. S., Cantield M. L. Use of antibiotics to control bacteria in shoot cultures of woody plants // Plant Sci. Lett. 1984. - V. 34. -P. 203-209.