Особенности трансмиссии ядер у ядерно-цитоплазматических гибридов Saccharomyces cerevisiae тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Артемов, Алексей Вячеславович

• Артемов, Алексей Вячеславович
• кандидат биологических наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Артемов, Алексей Вячеславович

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1 Обзор литературы.

1.1 Мутация karl и её использование для получения и исследования гетерокарионов у дрожжей-сахаромицетов.

1.2 Апоптоз у дрожжей.

1.3 Основные свойства прионов у низших эукариот.

ГЛАВА 2 Материалы и методы.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

ГЛАВА 3 Получение и анализ гетерокарионов со скрытым ядром.

ГЛАВА 4 Влияние сочетания аллелей локусов МАТ и KAR1 на выживаемость зиготических клонов.

ГЛАВА 5 Влияние аллелей гена KAR1 на сегрегацию ядра в первую почку гетерокариона, а также на деградацию ядер в зиготе.

ГЛАВА 6 Влияние задержки роста зигот на ядерную трансмиссию и накопление ROS при различных комбинациях аллелей МАТ и KAR1.

ГЛАВА 7 Влияние цитоплазматически наследуемых факторов на ядерную трансмиссию и деградацию ядер в гетерокарионах.

7.1 Влияние разных цитоплазматических воздействий на селекцию ядра, сегрегирующего в первую почку.

7.2 Влияние разных цитоплазматических воздействий на ядерную деградацию.

ГЛАВА 8 Проверка гипотезы об участии прионов в ядерной трансмиссии у гетерокарионов.

ГЛАВА 9 Цитологические признаки апоптоза в ХЛЛ7/А;<зг7гетерокарионах.

ГЛАВА 10 Обсуждение результатов.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Особенности трансмиссии ядер у ядерно-цитоплазматических гибридов Saccharomyces cerevisiae»

Актуальность проблемы

Данная диссертационная работа относится к разряду фундаментальных исследований. Она посвящена изучению взаимоотношений ядерных и цитоплазматических структур в гетерокарионах дрожжей.

В настоящее время методами клеточной инженерии, пользуясь денуклеированными клетками, создают новые сочетания ядер клеток одних высших эукариот и цитоплазмы других. При этом, одной из существенных проблем оказывается взаимодействие генетических и эпигенетических факторов.

Изучать взаимовлияние ядер и цитоплазм разных клеток удобнее на модели одноклеточных низших эукариотов, используя гетерокарионы дрожжей-сахаромицетов. У этих организмов была получена мутация в гене КАШ, вызывающая запаздывание кариогамии по отношению к плазмогамии. Получаемые при этом гетерокарионы создают уникальную возможность для изучения дифференциальной трансмиссии ядер. При этом, так как дрожжи являются хорошо генетически изученным объектом, можно исследовать влияние на этот процесс таких цитоплазматически наследуемых факторов, как митохондриальная ДНК и прионовые изоформы отдельных клеточных белков. Данных о том, какие факторы цитоплазмы влияют на конкурентноспособность ядер, в литературе до сих пор нет. Более того, несмотря на то, что прионовая наследственность усиленно изучается у дрожжей, определена функция только очень немногих прионов.

Гетерозиготы КАЯ1/каг1, а также их первые почки, в большинстве своем быстро очищаются, т.е. оказываются гомогенными в отношении как ядерных, так и митохондриальных геномов. Наблюдения ряда авторов говорят о конкурентных отношениях ядер, неспособных слиться, т.к. выживает либо одно родительское ядро, либо другое.

Очищение гетерокариотических клеток от одного из ядер может быть рассмотрено в свете недавно разработанной концепции программированной клеточной гибели у дрожжей. Её наиболее изученной и распространенной формой является апоптоз. Апоптоз может запускаться как внешними факторами, например УФ излучением и изменением состава питательной среды, так и внутренними, например старением. При этом характерными чертами апоптоза являются накопление свободных радикалов в митохондриях и деградация ядерной ДНК.

Рассмотрение вопроса - осуществляется ли элиминация ядер в гетерокарионах по типу апоптоза — представляется весьма актуальным.

Научная новизна

В настоящей работе исследуется явление так называемого скрытого гетерокариоза. Впервые предложена эффективная система отбора двуядер-ных клеток, одно из ядер которых фенотипически не экспрессировано.

Впервые в потомстве гетерокариона показана зависимость отхожде-ния родительского ядра в первую почку от того, какую аллель гена КАК1 это ядро несет.

Рассмотрены варианты КАШ х каг1 скрещиваний, у которых один из родителей лишен митохондриальной ДНК, а также варианты, когда гаплоиды обрабатывались гуанидин гидрохлоридом (СиНС1), вызывающим элиминацию некоторых дрожжевых прионов.

С помощью изогенных штаммов, отличающихся прионовой формой белка, участвующего в терминации трансляции [Р81+] фактора, впервые получены свидетельства в пользу влияния прионов на деградацию родительских ядер в гетерокарионе.

Изучалось накопление свободных радикалов у гетерокарионов и впервые получены данные в пользу связи апоптоза с гетерокариотической ядерной деградацией. ь

Цели и задачи исследования

1. Исследовать явление скрытого гетерокариоза.

2. Сравнить клеточный состав зиготических гетерокариотических клонов в двух типах скрещивания, отличающихся сопряжением аллелей генов МАТ и KAR1.

3. Использовать частичный педигри-анализ для выявления разных по фенотипу пар зигота/почка (или мать/дочь). Оценить количественно разные классы этих пар и, таким образом, охарактеризовать интенсивность процесса деградации ядер в зиготе. Сравнить данные, полученные в разных скрещиваниях.

4. Выяснить, как внешние воздействия, вызывающие задержку в почковании зигот, сказываются на частоте появления разных м/д пар.

5. Выяснить, как сказывается на трансмиссии и деградации ядер в зиготе обработка родительских гаплоидов агентами, вызывающими наследственные изменения цитоплазматических факторов (мтДНК и прионов).

6. Изучить цитологическими методами наличие в гетерокарионах таких типичных черт апоптоза, как накопление активных кислородных радикалов (ROS) и деструкция ядер.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Артемов, Алексей Вячеславович

выводы

1. Предложен эффективный метод выявления гетерокарионов со скрытым ядром.

2. С помощью частичного педигри-анализа обнаружена закономерность, общая для всех скрещиваний, один из родителей которых несет мутацию karl: вероятность отхождения в первую почку ядра с KAR1 аллелью выше, чем у ядра с мутантной karl-1 аллелью. Эффект замедленной сегрегации в первую почку karl ядра может быть компенсирован замедлением почкования зиготы.

3. На трансмиссию и деградацию ядер в зиготе в значительной мере влияет наличие мтДНК, причем этот эффект зависит от клеточного пола: элиминация мтДНК у "а" гаплоида приводит к деградации в зиготе ядра того же родительского штамма.

4. Показано влияние цитодукции на сегрегацию ядра в первую почку, причем этот эффект зависит от аллелй' гена KAR1 у цитодуктанта: чужая цитоплазма эффективнее влияет на ядро с karl-1 мутацией.

5. Обработка родительского штамма GuHCl может влиять как на деградацию ядра в зиготе, так и на частоту его отхождения в первую почку. Показана способность [PSI+] фактора (или какого-то иного, сопутствующего ему приона) как снижать деградацию "своего" ядра в зиготе, так и увеличивать эффективность его сегрегации в 1-ю почку.

6. В цитологических опытах удалось показать, что однородительское наследование у гетерокарионов коррелирует с признаками апоптоза -накоплением активных форм кислорода (ROS) и изменением ядерной морфологии.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Артемов, Алексей Вячеславович, 2004 год

1. Helfant A.H. Composition of the spindle pole body of Saccharomyces cerevisiae and the proteins involved in its duplication// Curr. Genet. 2002. -V.40.-P.291 -301.

2. Huffaker T.S., Thomas J.H., Botstein D. Diverse effect of beta-tubulin mutations on microtubule formation and function// J. Cell Biol. 1998. - V.106. -P.1997 - 2010.

3. Knop M., Pereira G., Schiebel E. Microtubule organization by the budding yeast spindle pole body// Biol. Cell. 1999. - V.91. - P.291 - 304.

4. Schild D., Ananthaswamy H.N., Mortimer R.K. An endomitotic effect of a cell cycle mutation of Saccharomyces cerevisiae!I Genetics. 1981. - V.97. — P.551 - 562.

5. Byers B., Goetsch L. Duplication of spindle plaques and integration of the yeast cell cycle// Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol. 1974. - V.38. -P. 123 - 131.

6. Knop M., Strasser K. Role of the spindle pole body of yeast in mediating assembly of the prospore membrane during meiosis// EMBO J. 2000. - V. 19. - P.3657 - 3667.

7. Byers B. Multiple roles of the spindle pole body in the life cycle of Saccharomyces cerevisiae. In: Wettstein D von, Kielland-Brandt M, Stenderup A (eds) Molecular genetics in yeast. Munksgaard, Copehagen. 1981.

8. Baum P., Furlong C., Byers B. Yeast gene required for spindle pole body duplication: homology of its product with Ca binding proteins// PNAS USA. - 1986. - V.83. - P.5512 - 5516.

9. Rose M.D., Fink G.R. KAR1, a gene required for function of both intranuclear and extranuclear microtubules in yeast// Cell. 1987. - V.48. -P. 1047- 1060.

10. Conde J., Fink G.R. A mutant of Saccharomyces cerevisiae defective for nuclear fusion// PNAS USA. 1976. - V.73. - P.3651 - 3655.

11. Fink G.R., Conde J. Studies on KAR1, a gene required for nuclear fusion in yeast. In: Fink G.R., Ba P. (eds) International cell biology. The Rockefeller University Press, New York, 1976 - 1977.

12. Rose M.D. Nuclear fusion in the yeast Saccharomyces cerevisiae// Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 1996. - V.12. - P.663 - 695.

13. Asymmetric mitotic segregation of the yeast spindle pole body/ Vallen E.A., Scherson T.Y., Roberts T., Zee K.V, Rose M.D.// Cell. 1992. - V.69. -P.505 - 515.

14. Separate domains of KAR1 mediate distinct functions in mitosis and nuclear fusion/ Vallen E.A., Hiller M.A., Scherson T.Y., Rose M.D.// J. Cell Biol. 1992.-V.l 17.-P.1277- 1287.

15. Genetic interactions between CDC31 and KAR1, two genes required for duplication of the microtubule organizing center in Saccharomyces cerevisiae/ Vallen E.A., Ho W., Winey M., Rose M.D.//Genetics. 1994. - V.l37.-P.407^22.

16. Biggins S., Rose M.D. Direct interaction between yeast spindle pole body components: Karlp is required for Cdc31p localization to the spindle pole body// J. Cell Biol. 1994. - V.l25. - P.843 - 852.

17. The Cdc3 lp binding protein Karlp is a component of the half bridge of the yeast spindle pole body/ Spang A., Geissler S., Grein K., Schiebel E.// J. Cell Biol. - 1995. - V.128. - P.863 - 877.

18. Khalfan W., Ivanovska I., Rose M.D. Functional interaction between the PKC1 pathway and CDC31 network of SPB duplication genes// Genetics. -2000. V.l55. - P. 1543 - 1559.

19. Wright R.E., Lederberg J. Extranuclear transmission in yeast heterokaryons// PNAS USA. 1957. - V.43. - P.919 - 923.

20. Lancashire W.E., Mattoon J.R. Cytoduction: A tool for mitochondrial genetic studies in yeast// Mol. Gen. Genet. 1979. - V.l70. - P.333 - 344.

21. Юрченко Л.В. Гетерокариоз у дрожжей Saccharomyces cerevisiae!! Генетика. 1982.- Т.18, №9.- С.1412- 1422.

22. Скрытые гетерокарионы в штаммах Saccharomyces cerevisiae. Псевдоплейотропная супрессия в множественно маркированном штамме YPH857/ Невзглядова О. В., Давыденко С. Г., Смирнова Т. И,, Сойдла Т. Р.// Генетика. 1998. - Т. 34, № 12. - С. 1597 - 1602.

23. Скрытые гетерокарионы в штаммах Saccharomyces cerevisiae. Модельные опыты/ Невзглядова О. В, Давыденко С. Г., Смирнова Т. И., Сойдла Т. Р.// Генетика. 1998. - Т. 34, №12. - С. 1603 - 1609.

24. Скрытые гетерокарионы в штаммах Saccharomyces cerevisiae. Условия проявления скрытого ядра/ Невзглядова О. В., Смирнова Т. И., Гайворонский А. А., Сойдла Т. Р.// Генетика. 2000. - Т. 36, №8. - С.1 - 8.

25. Выявление скрытых "незаконных" ядер при тетрадном анализе диплоидного потомства гетерокарионов у Saccharomyces cerevisiae! Невзглядова О. В., Гайворонский А. А., Артемов А.В., Смирнова Т. И., Сойдла Т. Р.// Генетика. 2001. - Т. 37, №6. - С.754 - 761.

26. Факторы, влияющие на частоту скрытого гетерокариоза у Saccharomyces cerevisiae/ Невзглядова О. В., Гайворонский А. А., Артемов А.В., Сойдла Т. Р.// Генетика. 2002. - V.38, №3. - С.293 - 299.

27. Concealed nuclei in Saccharomyces strains (minireview)/ Nevzglyadova O.V., Artyomov A.V., Gaivoronski A.A., Soidla T.R.// FEMS Yeast Res. 2002. - V.2, №4. - P.471 - 479.

28. Wyllie A.H., Kerr J.F.R, Currie A.R. Cell death: the significance of apoptosis// International review of Cytology. 1980. - V.68. - P.251 - 306.

29. Apoptosis in yeast: a new model system with applications in cell biology and medicine/ Madeo F., Engelhardt S., Herker E., Lehmann N., Maldener C., Proksch A., Wissing S., Frohlich K-U.//Curr. Genet. 2002. - V.41. -P.208 - 216.

30. Anti-apoptotic versus pro-apoptotic signal transduction: checkpoints and stop signs along the road to death/ Jarpe M.B., Widmann C., Knall C.,

31. Schlesinger Т.К., Gibson S., Yujiri Т., Fanger G.R., Gelfand E.W., Johnson G.L.// Oncogene. 1998.- V. 17, №11. -P. 1475- 1482.

32. Madeo F., Fröhlich E., Fröhlich K-U. A yeast mutant showing diagnostic markers of early and late apoptosis// J. Cell Biol. 1997. -V. 139. -P. 729 - 734.

33. Cell death with predominant apoptotic features in Saccharomyces cerevisiae mediated by deletion of the histone chaperon ASF1/CIA1/ Yamaki M., Umehara Т., Chimura Т., Horikoshi MM Genes to cell. 2001. - V.6. - P.1043 - 1054.

34. A truncated form of KlLsm4p and the absence of factors involved in mRNK decapping trigger apoptosis in yeast/ Mazzoni C., Mancici P., Verdone L., Madeo F., Serafín A., Herker E., Falcone CM Mol. biol. cell. 2003. - V. 14. -P.721 -729.

35. A caspase-related protease regulates apoptosis in yeast/ Madeo F., Herker E., Maldener C., Wissing S., Lachelt S., Herían M., Fehr M., Lauber K., Sigrist S., Wesselborg S., Fröhlich K-U.// Mol. cell. 2002. -V.9. - P.l - 20.

36. Manon S., Chaudhuri В., Guerin M. Release of cytochrome С and decrease of cytochrome С oxidase in Bax-expressing yeast cells, and prevention of these effects by coexpression of Bcl-xL// FEBS Lett. 1997. - V.415. - P.29 - 32.

37. CED-4 induces chromatin condensation in Saccharomyces pombe and is inhibited by direct physical association with CED-9/ James C., Gschmeissner S., Fraser A., Evan G.I.// Curr. Biol. -1997. V.7, № 4. - P.246 - 252.

38. Yeast as a model to study apoptosis/ Christophe F., Mathieu P., Agathe Т., Bernard M.// Bioscience Reports. 2002. - V.22, №1. - P.59 - 79.

39. Xu Q., Reed J.C. The mitochondrial F0F1-ATPase proton pump is required for function of the proapoptotic protein Bax in yeast and mammalian cells// Mol.Cell. 1998. - V.l, №3. - P.337 - 346.

40. The mitochondrial F0F1-ATPase proton pump is required for function of the proapoptotic protein Bax in yeast and mammalian cells/ Matsuyama S., Xu Q., Velours J., Reed J.C.// Mol. Cell. 1998. - V.l. - P.327 - 336.

41. Comparison of the ion channel characteristics of proapoptotic BAX and antiapoptotic BCL-2/ Schlesinger P.H., Gross A., Yin X.M., Yamamoto K., Saito M., Waksman G., Korsmeyer S.J.// PNAS USA. 1997. - V.94. - P. 11357 - 11362.

42. The influence of oxygen toxicity on yeast mother cell-specific aging/ Nestelbacher R., Laun P., Vondrakova D., Pichova A., Schuller C., Breitenbach M.// Exp.Gerontol. 2000. - V.35. - P.63 - 70.

43. Oxygen stress: a regulator of apoptosis in yeast/ Madeo F., Frohlich E., LigrM., GreyM., Sigrist S.J., WolfD.H., Frohlich K-U.// J. Cell Biol. 1999. -V.145. - P.757 - 767.

44. Nestelbacher R., Laun P., Breitenbach M. Images in experimental gerontology. A senescent yeast mother cell//Exp. Gerontol. 1999. - V.34. -P.895 - 896.

45. D.Granot., A. Levine, E. Dor-Hefetz. Sugar-induced apoptosis in yeast cells// FEMS Yeast Research. 2003. - V.4. - P.7 - 13.

46. Yoon H.J., Carbon J. Participation of Birlp, a member of the inhibitor of apoptosis family, in yeast chromosome segregation events// PNAS USA. -1999.-V.96.-P.13208- 13213.

47. Cell division regulation by BIR1, a member of the inhibitor of apoptosis family in yeast/ Li F., Flanary P.L., Altieri D.C., Dohlman H.G.// J.Biol.Chem. 2000. - V.275. - P. 6707 - 6711.

48. Harris B.Z., Lim W.A. Mechanism and role of PDZ domains in signalling complex assembly// J.Cell Sci. 2001. - V. 114. - P.3219 - 3231.

49. Clausen T., Southan C., Ehrmann M. The HtrA family of proteases: Implication for protein composition and cell fate//Mol. Cell. 2002. - V. 10. -P.443 - 455.

50. Pallen M.J., Wren B.W. The HtrA family of serine proteases// Mol. Microbiol. 1997. - V.26. - P.209 - 221.

51. Fahrenkrog В., Sauder U., Aebi U. The S.cerevisiae HtrA-like protein Nmalllp is a nuclear protease that mediates yeast apoptosis// Journal of Cell Science. 2004. - V.l 17. - P.l 15 - 126.

52. A role for the actin cytoskeleton in cell death and aging in yeast/ Gourlay C.W., Carpp L.N., Steven P.T., Ayscough K.R.// J. Cell Biol. 2004. -V.l64, №6. - P.803 - 809.

53. Lewis K. Programmed death in bacteria// Microbiology and Molecular Biology. 2000. - V.64, №3. - P.503 - 514.

54. Chronological aging leads to apoptosis in yeast/ Herker E., Jungwirth H., Lehmann K.A., Maldener C., Frohlich K-U., Wissing S., Buttner S., Fehr M., Sigrist S., Madeo F.// J. Cell Biol. 2004. - V.l64, №4. - P.501 - 507.

55. Superoxide is a mediator of an altruistic aging program in Saccharomyces cerevisiael Fabrizio P., Battistella L., Vardavas R., Gattazzo C., Liou L-L., Diaspro A., Dossen J.W., Gralla E.B., Longo V.D.// J. Cell Biol. -2004. V. 166. - P. 1055 - 1067.

56. Bursch W. The autophagosomal-lysosomal compartment in programmed cell death// Cell Differ. 2001. - V.8. - P.569 - 581.

57. Zhao J., Fleet G.H. Degradation of DNA during the autolysis of Saccharomyces cerevisiael/ J. Ind. Microbiol. Biotechnol. 2003. - V.30. - P.l75 - 182.

58. Wysocki R., Kron S.J., Yeast cell death during DNA damage arrest is independent of caspase or reactive oxygen species// J. Cell Biol. 2004. - V.l66. -P.311 -316.

59. Prion protein biology/ Prusiner S.B., Scott M.R., DeArmond S.J., Cohen F.E.// Cell. 1998. - V.93. - P.337 - 348.

60. Cox B.S. a cytoplasmic suppressor of supersuppression in yeast// Heredity. 1965. - V.20. - P.505 - 521.

61. Неоднозначность трансляции у дрожжей: генетический контроль и модификация/ Тиходеев О.Н., Гетманова Е.В., Тихомирова B.JL, Инге-Вечтомов СТ.II Молекулярные механизмы генетических процессов. М.: Наука, 1990.-С.218-228.

62. Сох B.S., Tuite M.F., McLaughlin C.S. The psi factor of yeast: a problem in inheritance// Yeast. 1988. - V.4, №3. - P.159 - 178.

63. Chernoff Y.O., Uptain S.M., Lindquist S.L. Analysis of prion factors in yeast// Enzymology. 2002. - V.351. - P.499 - 538.

64. Инге-Вечтомов С.Г., Андрианова B.M. Рецессивные супрессоры у дрожжей// Генетика. 1970. - Т.6. - С. 103 - 115.

65. Nucleotide sequence of the SUP2 (SUP35) gene of Saccharomyces cerevisiae/ Kushnirov V.V., Ter-Avanesyan M.D., Telkov M.V., Surguchov A.P., Smirnov V.N., Inge-Vechtomov S.G.// Gene. 1988. - V.66. -P.45 - 54.

66. Deletion analysis of the SUP35 gene of the yeast Saccharomyces cerevisiae reveals two non-overlapping functional regions in the encoded protein/ Ter-Avanesyan M.D., Kushnirov V.V., Dagkesamanskaya A.R., Didichenko S.A.,

67. Chernoff Y.O., Inge-Vechtomov S.G., Smirnov V.N.// Mol. Microbiol. 1993. -V.7. - P.683 - 692.

68. Wickner R.B. URE3. as an altered URE2 protein: evidence for a prion analog in Saccharomyces cerevisiae.// Science. 1994. - V.264. — P.532 — 535.

69. Maddelein M.L., Wickner R.B. Two prion-inducing regions of Ure2p are nonoverlapping// Mol. Cell Biol. 1999. - V.19. - P.4516 - 4524.

70. Mechanism of inactivation on prion conversion of the Saccharomyces cerevisiae Ure2 protein/ Baxa U., Speransky V., Steven A.C., Wickner R.B.// PNAS USA. V.99, №8. - P.5253 - 5260.

71. Sondheimer N., Lindquist S. Rnql: an epigenetic modifier of protein function in yeast// Mol.Cell. 2000. - V.5. - P. 163 - 172.

72. Santoso A., Chein P., Oserovich L.Z., Weissman J.S. Molecular basis of a yeast prion species barrier// Cell. 2000. - V.100. - P.277 - 288.

73. Genetic and environmental factors affecting the de novo appearance of the PSI(+). prion in Saccharomyces cerevisiae/ Derkatch I.L., Bradley M.E., Zhou P., Chernoff Y.O., Liebman S. W.// Genetics. 1997. - V. 147. - P.507 - 519.

74. Prions affect the appearance of other prions: the story of PIN+./ Derkatch I.L., Bradley M.E., Hong J.Y., Liebman S.W.// Cell. 2001. - V.106. -P.171 -182.

75. Interactions among prions and prion "strains" in yeast/ Bradley M.E., Edskes H.K., Hong J.Y., Wickner R.B., Liebman S.W.//PNAS USA. 2002. -V.99.-P.16392- 16399.

76. The protein product of the het-s heterokaryon incompatibility gene of the fungus Podospora anserina behaves as a prion analog/ Coustou V., Deleu C., Saupe S., Begueret J.// PNAS USA. 1997. - V.94. - P.9773 - 9778.

77. Prions of Yeast and Fungi. Proteins as genetic material/ Wickner R.B., Edskes H.K., Maddelein M.-L., Taylor K.L., Moriyama H.// J. Biol. Chem. 1999. -V.274.-P.555 -558.

78. Edskes H.K., Gray V.T., Wickner R.B. The URE3. prion is an aggregated form of Ure2p that can be cured by overexpression of Ure2p fragments// PN AS USA. 1999. - V.96. - P. 1498 - 1503.

79. PSI . prion generation in yeast: characterization of the "strain" difference/ Kochneva-Pervukhova N.V., Chechenova M.B., Valouev I.A., Kushnirov V.V., Smirnov V.N., Ter-Avanesyan M.D.//Yeast. 2001. - V. 18.-P. 489 - 497.

80. King C.-Y., Diaz-Avalos R. Protein-only transmission of three yeast prion strains// Nature. 2004. - V.428. - P.319 - 323.

81. Conformational variations in an infectious protein determine prion strain differences/ Tanaka M., Chien P., Naber N., Cooke R., Weissman J.S.// Nature. 2004. - V.428. - P.323 - 328.

82. Molecular basis of a yeast prion species barrier/ Santoso A., Chein P., Osherovich L.Z., Weissman J.S.// Cell. 2000. - V.100. - P.277 - 288.

83. Role of the chaperone protein Hspl04 in propagation of the yeast prion-like factor psi+./ Chernoff Y.O., Lindquist S.L., Ono B.-I., Inge-Vechtomov S.G., Liebman S.W.// Science. 1995. - V.268. - P.880 - 884.

84. Тер-Аванесян М.Д., Кушниров В.В. Прионы: инфекционные белки с генетическими свойствами// Биохимия. 1999. - Т.64, №12. - С.1382 - 1390.

85. Mechanism of prion loss after Hspl04 inactivation in yeast/ Wegrzyn R.D., Bapat K., Newnam G.P., Zink A.D., Chernoff Y.O.// Mol. Cell. Biol. 2001. -V.21.-P.4656- 4669.

86. Guanidine hydrochloride inhibits the generation of prion "seeds" but not prion protein aggregation in yeast/ Ness F., Ferreira P., Cox B.S., Tuite M.F.// Mol. Cell. Biol. 2002. - V.22, №15.- P.5593 - 5605.

87. The elimination of the yeast PSI+. prion by guanidine hydrochloride is the result of Hspl04 inactivation/ Ferreira P.C., Ness F., Edwards S.R., Cox B.S., Tuite M.F.// Mol. Microbiol. 2001. - V.40. - P.1357 - 1369.

88. Glover J.R., Lindquist S. Hspl04, Hsp70, and Hsp40: a novel chaperone system that rescues previously aggregated proteins// Cell. 1998. -V.94. - P.73 - 82.

89. Liebman S.W., Derkatch I. The yeast PSI+. prion: making sense of nonsense// J. Biol. Chem. 1999. - V.274, №3. - P. 1181 - 1184.

90. Cox B.S., Ness F., Tuite M.F. Analysis of the generation and segregation of propagons: entities that propagate the PSI+. prion in yeast// Genetics. 2003. - V. 165. - P.23 - 33.

91. Chaperones that cure yeast artifical PSI+. and their prion-specific effects/ Kushnirov V.V., Kryndushkin D.S., Boguta M., Smirnov V.N., Ter-Avanesyan M.D.// Curr. Biol. 2000. - V. 10. - P. 1443 - 1446.

92. Liebman S.W., Derkatch I.L. The yeast PSI+. prion: making sense of nonsense// J. Biol. Chem. 1999. - V.274. - P. 1181 - 1184.

93. Schwimmer C., Masison D.C. Antagonistic interaction between yeast PSI+. and [URE3] prions and curing of [URE3] by Hsp70 protein chaperon Ssalp but not by Ssa2p// Mole. Cell. Biol. 2002. - V.22, №11.- P.3590 - 3598.

94. Edskes H.K., Wickner R.B. A protein required for prion generation: URE3. induction requires the Ras-regulated Mksl protein// PNAS USA. 2000. - V.97, №12. - P.6625 - 6629.

95. An antiprion effect of the anticytoskeletal drug latrunculin A in yeast/ Bailleul-Winslett P.A., Newnam G.P., Wegrzyn R.D., Chernoff Y.O.// Gene Expression. 2000. - V.9. - P. 145 - 156.

96. Prions affect the appearance of other prions. The story of PIN*./ Derkatch I.L., Bradley M.E., Hong J.Y., Liebman S.W.// Cell. 2001. - V.106. -P. 171 - 182.

97. Masison D., Wickner R.B. Prion-inducing domain of yeast Ure2p and protease resistance of Ure2p in prion-containing cells// Science V.273- P.93-95.

98. Landsbury P.T., Caughey Jr., Caughey B. The chemistry of scrapie infection: implications of the 'ice 9' metaphor//Chem. Biol. 1995. - V.2. -P.l -5.

99. Инге-Вечтомов С.Г. Возможная роль неоднозначности трансляции в эволюции// Мол. Биол. 2002. - Т.36, №2. - С.268 - 276.

100. True H.L., Lindquist S.L. A yeast prion provides a mechanism for genetic variation and phenotypic diversity// Nature. 2000. - V.407. - P.477 -483.

101. True H.L., Berlin I., Lindquist S.L. Epigenetic regulation of translation reveals hidden genetic variation to produce complex traits// Nature. -2004.-V.431.-P.184- 187.

102. The HET-s prion protein of the filamentous fungus Podospora anserina aggregates in vivo into amyloid-like fibrils/ Dos Reis S., Coulary-Salin В., Forge V., Lascu I., Begueret J., Saupe S.J.// J. Biol. Chem. 2002. - V.277. -P.5703 - 5706.

103. Методики по генетике дрожжей—сахаромицетов/ Захаров И.А., Кожин С.А., Кожина Т.Н., Федорова И.В. Л.: Наука, 1976. - 112 С.

104. Sherman F., Fink G.R., Hicks J.B. Laboratory course manual for methods in yeast genetics. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y., 1986. - 186 P.

105. Boeke J.D., Lacroute F., Fink G.R. A positive selection for mutants lacking orotidine-5-phosphate decarboxylase activity in yeast: 5-fluoro-orotic acid resistance// Mol. Gen. Genet. 1984. - V.197. - P.345 - 346.

106. Sambrook J., Fritsch E.F., Maniatis T. Molecular cloning: A laboratory manual. N.Y. Cold Spring Harbor Lab, 1989. - 479 P.

107. Dujon B. (1981) Mitochondrial genetics and functions. In: Strathern JM, Jones EW, Broach JR (eds) Molecular biology of the yeast Saccharomyces. Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, N.Y. P.505 - 635.

108. Zakharov I.A., Yarovoy P.P. Cytoduction as a new tool in studying the cytoplasmic heredity in yeast// Mol. Cell Biochem. 1977. - V.14- P. 15 - 18.

109. Dagert M., Ehrlich S.D. Prolonged incubation in calcium chloride improves the competence of Escherichia coli cells // Gene. 1979. - V.6. -P.23 - 29.

110. Isolation of yeast histone genes H2A and Н2В/ Hereford L., Fahrner K., Woolford J., Jr. etal.//Cell. 1979.-V. 18.-P. 1261 - 1271.

111. Gebeyehu G., Rao P.Y., Chan P.S. Novel biotinylated nucleotide-analogs for labeling and colorimetric detection of DNA//Nucl. Acids Res. 1987. - V.15, № 11.-P.4513-4534.

112. Закс JI. Статистическое оценивание. М.: Статистика, 1972.598 С.

113. Chernoff Y.O. Mutation processes at the protein level: is Lamarck back?// Mutat. Res. 2001. - V.488. - P.39 - 64.

114. Dependence and independence of PSI+. and [PINT]: a two-prion system in yeast?/ Derkatch I.L., Bradley M.E., Masse S.V.L., Zadorsky S.P.,

115. Polozkov G.V, Inge-Vechtomov S.G., Liebman S.W.// EMBO J. 2000. - V.19. -P.1942- 1952.

116. Инге-Вечтомов С.Г. Матричный принцип в биологии (прошлое, настоящее, будущее ?)// Экологическая генетика. 2004. - T.l. - С.6 - 15.

117. Baluska F., Volkmann D., Barlow D.W. Eukaryotic cells and their cell bodies: cell theory revised// Ann. Bot. 2004. - V.94. - P.9 - 32.

118. Baluska F., Volkmann D., Barlow D.W. Cell bodies in a cage// Nature. 2004. - V.428. - P.371.