Получение и свойства полимерных композиций и пленочных материалов на основе поливинилового спирта, содержащих протеазу С и полигексаметиленгуанидин тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.06, кандидат химических наук Алешина, Елена Юрьевна

• Алешина, Елена Юрьевна
• кандидат химических наук
• 2003

Оглавление диссертации кандидат химических наук Алешина, Елена Юрьевна

1 стр.

Введение.

1. Литературный обзор.

1.1. Методы иммобилизации белковых веществ на полимерах-носителях для получения эффективных терапевтических систем.

1.2. Получение и свойства полимерных покрытий, содержащих иммобилизованные антимикробные вещества или ферменты, для хирургии и терапии.

1.3. Полиэлектролитные комплексы с участием белков.

2. Методический раздел.

3. Основные результаты и их обсуждение. * 3.1. Исследование взаимодействия между протеолитическим ферментом протеазой С, альгинатом натрия и антимикробным поликатионом в водных растворах.

3.2. Изучение взаимосвязи состава и свойств формовочных композиций на основе поливинилового спирта, содержащих биологически активные вещества и модифицирующие добавки.

3.3. Исследование влияния состава формовочных композиций на свойства поливинилспиртовых пленочных материалов, содержащих совместно иммобилизованные протеазу С, антимикробный поликатион и модифицирующие добавки.

-* Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Получение и свойства полимерных композиций и пленочных материалов на основе поливинилового спирта, содержащих протеазу С и полигексаметиленгуанидин»

Стремительно растущий уровень медицинских технологий является движущей силой развития смежных отраслей науки и техники, в частности химии биополимеров. Успех многих хирургических операций, особенно заканчивающихся дерматопластикой, во многом зависит от послеоперационного ухода за раной, т.е. от качества перевязочных средств, функции которых в настоящее время значительно расширились и заключаются не только в защите раны от внешних воздействий. В связи с этим задача создания раневых покрытий, обладающих комбинированным лечебным действием, одним из наиболее перспективных типов которых являются покрытия на основе синтетических и натуральных полимеров, содержащие иммобилизованные ферменты и антимикробные или иные лекарственные вещества, уже на протяжении многих лет остается актуальной. Целесообразность создания покрытий с таким комплексом свойств является патогенетически обоснованной, т.к. в первой фазе раневого процесса необходимо подавление воспаления и очищение раны от некротических масс. Преимущества иммобилизованных форм ферментов над нативными известны, наиболее важные из них - повышение стабильности и уменьшение иммунологической и аллергической реакций организма за счет понижения способности модифицированного фермента стимулировать образование антител и реагировать с ними [1].

Сложность одновременной иммобилизации фермента и биологически активного вещества другой химической природы, в частности антимикробного, заключается в том, что она может привести к инактивации протеазы. В этой связи большой интерес представляет изучение возможности использования мягких способов иммобилизации, к числу которых относятся комплексообразование с полиэлектролитами. Исследование закономерностей формирования структуры и взаимосвязи состава, структуры и свойств полимерных композиций, содержащих фермент и биологически активное вещество другого типа, позволит разработать способы получения полимерных материалов с комплексным биологическим действием и расширить арсенал имеющихся перевязочных средств.

Цель работы заключалась в разработке научных принципов создания пленочных материалов с протеолитическим и антимикробным действием, а также в изучении физико-химических и медико-биологических свойств созданных раневых покрытий.

В соответствии с поставленной целью необходимо было решить следующие задачи:

- изучить процесс комплексообразования между протеолитическим ферментом протеазой С и полиэлектролитами (альгинатом натрия и солями полигексаметиленгуанидина) в водной среде;

- исследовать влияние степени ионизации и молекулярной массы полимерного антимикробного вещества, а также состава полимерной композиции на активность, стабильность и рН-оптимум протеолитического фермента;

- изучить влияние введения добавок биологически активных и модифицирующих веществ на реологические свойства формовочных композиций;

- изучить влияние состава формовочных растворов на свойства поливинилспиртовых пленок, содержащих протеазу С, полимерное антимикробное вещество и модифицирующие добавки: кинетику десорбции антимикробного вещества, кинетику инактивации иммобилизованной протеазы С, устойчивость к стерилизации и физико-химические свойства;

- изучить медико-биологические свойства материалов с комплексной биологической активностью.

При выполнении экспериментальной части работы были использованы химические методы анализа, спектрофотометрия, нефелометрический метод, метод потенциометрического титрования, реологический метод, электронная сканирующая микроскопия и медико-биологические исследования.

Научная новизна. В работе впервые:

• сформулированы представления о закономерностях интерполимерной реакции в многокомпонентных водных растворах, содержащих биологически активные вещества различного строения, как реакции замещения, при протекании которой состав и свойства образующихся комплексов, содержащих протеазу С, определяется степенью ионизации полимерного поликатиона, его молекулярной массой и соотношением компонентов;

• установлено влияние введения фермента, антимикробных веществ и сшивающего реагента на структуру растворов поливинилового спирта и, как следствие, их вязкость и энергию активации вязкого течения, обусловленные особенностями конформации как индивидуальных компонентов, так и их комплексов и химическими реакциями, протекающими в системе;

• показана возможность регулирования показателей активности и стабильности иммобилизованной в поливинилспиртовой пленке протеазы С и кинетики десорбции антимикробного вещества за счет изменения состава формовочных композиций и структуры пленки;

• установлен колебательный характер кинетических кривых паропропускания через пленки, содержащие иммобилизованные биологически активные вещества, свидетельствующий о наличии в структуре пленки внутренних напряжений.

Практическая значимость: показаны пути регулирования биологических (протеолитической и антимикробной активности) и физико-механических степени набухания, паропроницаемости) свойств поливинилспиртовых пленочных материалов с пролонгированным действием. Полученные данные о способах получения и свойствах полимерных композиций, содержащих протеазу С и полиэлектролиты, являются основой для создания полимерных пленочных материалов медицинского назначения с заданным комплексом биологических свойств.

Публикации: по материалам диссертации опубликовано 13 работ.

Объем и структура диссертации: диссертационная работа изложена на 145 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, методической части и обсуждения результатов, выводов, списка цитируемой литературы из 128 ссылок. Работа содержит 14 таблиц и 39 рисунков.

Заключение диссертации по теме «Высокомолекулярные соединения», Алешина, Елена Юрьевна

Выводы

С целью разработки принципов получения полимерных пленочных материалов с ферментативным и антимикробным действием исследовано влияние взаимодействия полимерных биологически активных веществ на структуру образующихся комплексов, формовочных композиций, структуру и фармакокинетические свойства поливинилспиртовых пленок.

1. Методом нефелометрии и потенциометрии установлено протекание интерполимерной реакции в водных растворах, содержащих протеазу С, по-лигексаметиленгуанидин гидрохлорид или полигексаметиленгуанидин фосфат и альгинат натрия и высказано предположение о протекании в многокомпонентной полимерной композиции реакции замещения, обусловленной способностью полиэлектролитов участвовать в реакциях ионного переноса.

2. Показана зависимость процесса комплексообразования в исследуемой полимерной системе от степени ионизации антимикробного поликатиона.

3. Установлена зависимость относительной активности, стабильности и рН-профиля действия протеазы С, связанной в комплекс с антимикробным поликатионом, от типа соли полигексаметиленгуанидина, а также от состава полимерной композиции. Использование в составе композиции полигексаметиленгуанидин гидрохлорида с молекулярной массой 10 кДа или полигексаметиленгуанидин фосфата, а также введение наряду с полимерным антимикробным веществом альгината натрия позволяет получать биологически активные композиции с относительной активностью фермента не ниже 60% и с высоким уровнем стабильности.

4. Исследование реологических свойств формовочных композиций различного состава показало, что полимерные добавки (протеаза С, полигексаметиленгуанидин гидрохлорид или полигексаметиленгуанидин фосфат, альгинат натрия) в растворе поливинилового спирта снижают его вязкость и энергию активации вязкого течения.

5. Установлена существенная зависимость активности, стабильности и кинетики десорбции антимикробного вещества из пленок, содержащих комплекс биологически активных веществ, от типа антимикробного вещества и модифицирующих добавок. Снижение молекулярной массы, степени ионизации, введение тетрабората натрия приводит к увеличению количества десорбированного антимикробного вещества (с 10 до 100%). Дополнительное введение альгината или альгината и тетрабората натрия снижает количество десорбированного полимерного антимикробного вещества независимо от его типа.

6. Установлено изменение рН-профиля и сдвиг рН-оптимума действия иммобилизованной в структуре поливинилспиртовых пленок протеазы С в область более низких значений (рН 7-8,5) в результате комплексообразования фермента с поликатионным антимикробным веществом.

7. Разработан метод получения поливинилспиртового пленочного покрытия с пролонгированным биологическим действием, содержащего полимерные биологически активные вещества - фермент и антимикробное вещество и модифицирующие добавки - полисахарид и/или низкомолекулярный сшивающий реагент, с высокой стабильностью к радиационной стерилизации и последующему хранению в течение 2 лет.

8. Установлена возможность изменения в широких пределах фармакокинети-ческих свойств (активности, стабильности и количества десорбированного антимикробного вещества) путем варьирования состава формовочной композиции, типа и молекулярной массы антимикробного вещества и модифицирующей добавки, что создает предпосылки для получения поливинилспиртовых пленок, содержащих комплекс биологически активных веществ, в качестве раневых покрытий пролонгированного лечебного действия.

9. В ходе медико-биологических испытаний in vitro показана зависимость антимикробной активности поливинилспиртовых пленочных материалов, содержащих протеазу С, полигексаметиленгуанидин и модифицирующие добавки, от их состава, которая удовлетворительно коррелирует с кинетикой десорбции антимикробного вещества.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Алешина, Елена Юрьевна, 2003 год

1. Платэ Н.А., Валуев Л.И. Проблемы создания биоспецифических синтетических полимеров для контакта с биологическими средами // ЖВХО им. Д.М.Менделеева. 1985. - Т. 30, № 4. - С. 402-410.

2. Иозеп А.А., Пассет Б.В. Модификация биологически активных веществ полисахаридами // Тез. докл. 2 Росс. нац. конгресса " Человек и лекарство " -М.: Фармединфо, 1996. С. 24.

3. Кричевский Г.Е., Савилова Л.Б., Олтаржевская Н.Д. и др. Новая технология получения текстильных материалов с пролонгированным лечебным действием // Текстильная химия. 1992. - № 1. - С. 91-100.

4. Введение в прикладную энзимологию. / Под ред. Березина И.В., Мартинека К.М. М.: Изд-во МГУ, 1982. - 384 с.

5. Биополимеры / Пер. с яп. Т. Оои, Э. Ицука, С. Онари и др. : Под ред. Кор-шака В.В., Ямскова И.А. М.: Мир, 1988. - 544 с.

6. Николаев А.Ф., Мосягина Л.П. Поливиниловый спирт и сополимеры винилового спирта в медицине // Пластические массы. 2000. - № 3. -С. 34-42.

7. Полищук А.Я., Заиков Г.Е., Мадюскин Н.Н. Биоразлагаемые полимеры и их применение в современной медицине // Пластические массы. -2000. № 2. - С. 28-33.

8. Юданова Т.Н., Скокова И.Ф., Вирник А.Д. и др. Непрерывные способы иммобилизации террилитина на целлюлозных волокнистых материалах // Биотехнология. 1985. - № 6. - С. 98-102.

9. Юданова Т.Н., Высоцкая Е.П., Семенов В.И. и др. Целлюлозные биосорбенты // Тез. докл. республиканской науч.-практ. конф. "Синтез и применение энтеросорбентов" Конаково, 1990. - С. 35.

10. Elcin J. Murat, Sacar Mehmet. Acrylamid grafted poly (ethylene Terepthalate) fibers activated by glytaraldehyde as support for urease // Appl. Biochem. and Biotechnol. a. 1996. - V. 60, № 1. - P. 19-32.

11. Володькин Д.В, Балабушевич Н.Г., Сухорукое Г.Б., Ларионова Н.И. Иммобилизация протеиназ в полиэлектролитные микрочастицы // Тез. докл. и стендовых сообщений V Симпозиума "Химия протеолитических ферментов" -М.,2002.-С. 119.

12. Plate N., Valuev L., Valuev J. Polymeric Carriers: a Breakthrough in Pharmacopeia // Jornals of Jornals: Rev. glob. Sci. Acbiev. 1997. - № 1. - P. 3740.

13. Бронин А.С., Кудрявцева Н.Е. и др. Новый метод включения протеолитических ферментов в гидрогели И Тез. докл. 3 Симпозиума "Химия протеолитических ферментов"- М., 1993. С. 117.

14. Марквичева Е.Н., Купцова С.В., Струкова С.М. и др. Иммобилизованные в гидрогели протеиназы для биотехнологии и медицины // Тез. докл. и стендовых сообщений V Симпозиума "Химия протеолитических ферментов" М., 2002. - С. 42.

15. Kato К., Furukawa М., Kanzaki Y. et al. Lysocym loading in phosphate-carrying hydrogels at high density and the controlled relase of lysocyme // Jap. J. Polym. Sci. and Technol. 1998. - V. 55, - № 6. - P. 353-358.

16. Артюхов A.A., Козлов B.C., Штильман М.И., Тсатсакис A.M. Эпоксидсо-держащие полимерные носители для иммобилизации белков // Материалы 1-го Междунар. Конгресса "Биотехнология состояние и перспективы развития" - М., 2002. - С. 454.

17. Ни Z.B., Wang С.J., Nelson K.D., Eberhart R.C. Controlled release from a composite silicone/hydrogel membrane // Asaio Journal. - 2000. - V. 46, - № 4. - P. 431-434.

18. Пат. 2157243 РФ, МКИ6 A 61 L 15/22. Гидрогелевая композиция и перевязочные средства из нее для лечения ран различной этиологии / Валуев Л.И., Сытов Г.А., Адамян А.А., Добыш С.В. и др.; Опубл. 10.10.2000, Бюл. № 28.

19. Афиногенов Г.Е., Панарин Е.Ф. Антимикробные полимеры. Спб.: Гиппократ, 1993. - 264 с.

20. Комиссарова А.Л., Скокова И.Ф., Вирник А.Д. и др. Получение пористого материала на основе альгиновой кислоты, содержащего иммобилизованный террилитин // Антибиотики и химиотерапия. 1988. - № 10. - С. 735-739.

21. Вихорева Г.А., Хомяков К.П., Гальбрайх Л.С. и др. Иммобилизация протеолитических ферментов в пленках и губках карбоксиметилхитина // Хим. волокна. 1995. - № 5. - С. 34-37.

22. Биологически активные вещества в растворах / Под ред. Кутепова А.Н. -М.: Наука, 2001. С. 389-393.

23. Petach Helen Н., Henderson William, Olsen Gregory M. P(CH2OH)3 a new coupling reagent for the covalent immobilization of enzymes // Y. Chem. Soc. Chem. Commun. -1994. -№ 18. - P. 2181-2182.

24. Choi Y.S., Hong S.R., Lee Y.M., Song K.W. at al. Study on Gelatin -containing artificial scin I- preparation and characterizations of novel Gelatin -Alginate sponge //Biomaterials. - 1999. - V. 20, № 5. - P. 409-417.

25. Беидикене В., Юодка Б. Иммобилизация сериновых протеаз на магнитных носителях // Тез. докл. 3 Симпозиума "Химия протеолитических ферментов" -М., 1993.-С. 119.

26. Howell Nazlin К., Yeboah Nana A. et al. Studies on the electrostatic interactions of lysozyme with a- lactalbumin and P- lactalbumin // Int. J.Food Sci. and Technol. 1995. - V. 30, № 6. - P. 813-824.

27. Yamaoka Т., Takebe Y. Surface modification of poly (1-lactic acid) filme with, bioactive materials by a novel directed alkaline treatment process // Jap. J. Polym. Sci. and Technol. -1998. V. 55, № 6. - P. 328-333.

28. Пат. 275662 Словакия, МКИ5 С 12 N 11/04. Носитель для стабилизации ферментов и способ его получения / Кунак Людовит, Матусова Анжелла; Опубл. 1992.

29. Аксенова Н.И., Харенко А.В., Кеменова В.А. Гранулирование композиционного полимерного носителя КПН-2 в "псевдоожиженном слое" // Тез. докл. 2 Росс. нац. конгресса "Человек и лекарство" М.: Фармединфо, 1996. - С. 25.

30. Мороз Н.А., Балабушевич Н.Г., Ларионова Н.И., Кильдеева Н.Р. и др. Локальные антипротеиназные пролонгированные системы // Тез. докл. и стендовых сообщений IV Симпозиума "Химия протеолитических ферментов." -М.: 1997. С. 122.

31. Вирник А.Д., Кильдеева Н.Р., Красовская С.Б. и др. Иммобилизация ферментов в структуре волокон и пленок в процессе их формования // Биотехнология. 1987. - Т. 3, № 5. - С. 602-611.

32. Гидрофильные полимеры медицинского назначения: Сб. науч. тр. / Под ред. Розенберга М.Э. Л.: ОНПО "Пластполимер", 1989. - 84 с.

33. Ухарцева И.Ю. Влияние температурных воздействий на структуру и физико-механические свойства наполненных гелей поливинилового спирта // Пластические массы. 2002. - № 8. - С. 15-17.

34. Хомяков К.П., Кильдеева Н.Р., Богомольный В .Я. и др. Терриплен фер-ментсодержащая пленка из поливинилового спирта для лечения гнойных ран // Гидрофильные полимеры мед. назначения. - Л., - 1989. - С. 49-53.

35. Беляцкая О.Н.,Булатинкова Л.И., Быкова Л.В. Влияние температурно-временных воздействий на процесс модификации поливинилового спирта // Пластические массы. 1995. -№ 6. - С. 16-18.

36. Заявка 717689 Франция, МКИ6 А61К9/70, 31/565. Трансдермальная матрица для экстрогенов и/или прогестагенов на основе сополимеров стирол -изопрен стирол / Мидлер Кпауль, Ларсон Ларент, Майер Давель; Опубл. 1995.

37. Пат. 1674552 РФ, МКИ6 С 08 L 29/04. Пленочная антимикробная композиция / Паутов В.Д., Ануфриева Е.В., Краковяк М.Г., Лущик В.Б. и др.; Опубл. 20.05.96, Бюл. № 14.

38. Вирник А.Д., Скокова И.Ф., Юданова Т.Н. и др. Получение пленок с комбинированным биологическим действием и применение их для лечения гнойных и ожоговых ран // Прикл. биохим. и микробиол. 1997. - Т. 33, № 4. - С. 428-433.

39. Вирник А.Д., Скокова И.Ф., Юданова Т.Н. Разработка волокнистых материалов с комбинированным биологическим действием на основе полиэлектролитных комплексов // Хим. волокна. 1995. - № 5. - С. 10-21.

40. Suzuki Y., Tanihara М., Nishimura Y., suzuki К. et al. A novel wound dressing with an antibiotic delivery system stimulated by microbial infection //

41. Asaio Journal. 1997. - V. 43, № 5. - P. M854-M857.

42. Пат. 2174847 РФ, МКИ6 A 61 L 15/44. Повязка для лечения ран / Чиссов В.И., Решетов И.В., Юданова Т.Н., Скокова И.Ф.; Опубл. 20.10.2001, Бюл. № 29.

43. Вирник А.Д., Гостищев B.K., Кильдеева H.P. и др. Получение пленок и волокон, содержащих протеолитические ферменты // Прикладная биохимия и микробиология. 1987. - Т. 23. - С. 78-83.

44. Пат. 2180856 РФ, МКИ6 А 61 L 15/28. Средство для лечения ран / Гаври-люк Б.К., Гаврилюк И.Б.; Опубл. 27.03.2002, Бюл. № 9.

45. Пат. 2193896 РФ, МКИ6 А 61 L 15/28. Покрытие для ран / Гаврилкж Б.К., Гаврилюк В.Б.; Опубл. 10.02.2002, Бюл. № 34.

46. Пат. 2127609 РФ, МКИ6 А 61 L 15/38. Перевязочный материал / Игнатюк Т.Е., Рыльцев В.В., Медушева Е.О., Филатов В.Н. и др.; Опубл. 20.03.99,Бюл. №8.

47. Ларионова А. С., Журавлева Е. М., Кильдеева Н.Р. и др. Ферментсодер-жащие высоконабухающие хитозановые пленки // Материалы 5 конф. "Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана" М. - Щелково: Центр "Биоинженерия" РАН - ВНИРО, 1999. - С. 273-276.

48. Кильдеева Н.Р., Вихорева Г.А., Ларионова А.С., Гальбрайх Л.С. Перспективы использования хитозана для создания терапевтических систем // Тез. докл. Междунар. конф. "Лекарственные препараты на основе модифицированных полисахаридов" Минск, 1998. - С. 14.

49. Mi F.L., Wu Y.B., Shyu S.S., Schoung J.Y. et al. Control of wound infections using a bilayer chitosan wound dressing with sustainable antibiotic delivery // Journal of Biomedical Materials Research. 2002. - V. 9, № 3. - P. 438-449.

50. Loke W.K., Lau S.K., Yong L.L., Khor E. et al. Wound dressing with sustained antimicrobial capability // Journal of Biomedical Materials Research. 2000. - V. 53, №1.- P. 8-17.

51. Kim H.J., Lee H.C., Oh J.S., Shin B.A. et al. Polyelectrolyte complex composed of Chitosan and sodium Alginate for wound dressing application // Journal of Biomaterials Science- Polymer Egition. 1999. - V. 10, № 5. - P. 543-556.

52. Wang L.H., Khor E., Wee A., Lim L.Y. Chitosan- Alginate PEC membrane as a wound dressing assessment of incisional wound healing // Journal of Biomedical Materials Research. 2002. - V. 63,№ 5. - P. 610-618.

53. Казанская Н.Ф., Ларионова Н.И. и др. Пролонгированные лекарственные средства различного назначения, содержащие белковый ингибитор протеаз //

54. Тез. докл. 2 Росс. нац. конгресса "Человек и лекарство" М.: Фармединфо, 1996.-С. 24.

55. Панкрашева Т.А., Ерофеева Л.Н. К вопросу о более широком использовании производных целлюлозы в производстве лекарственных средств // Тез. докл. 2 Росс. нац. конгресса "Человек и лекарство" М.: Фармединфо, 1996. -С. 33.

56. Кильдеева Н.Р., Ларионова Н.И., Казанская Н.Ф. и др. Иммобилизация модифицированного а-химотрипсина в структуре пленок из триацетата целлюлозы // Биохимия. 1980. - Т. 45. - С. 433-437.

57. Пат. 2158112 РФ, МКИ6 А 61 L 15/38. Способ кожной пластики / Дуван-ский В.А., Рыльцев В.В., Толстых М.П., Филатов В.Н. и др. Опубл. 27.10.2000, Бюл. № 14.

58. Пат. 2099095 РФ, МКИ6 А 61 L 15/38. Способ получения перевязочного материала для лечения рубцов / Стекольников Л.И., Корнилова Е.Г.; Опубл. 20.10.97, Бюл. № 35.

59. Пат. 2142818 РФ, МКИ6 А 61 L 15/32. Способ получения перевязочных материалов "Салфеток Филатова-Рыльцева" / Филатов В.Н., Рыльцев В.В.; Опубл. 20.12.99, Бюл. № 35.

60. Пат. 2062113 РФ, МКИ6 А 61 L 15/38. Способ получения перевязочных материалов / Рыльцев В.В., Филатов В.Н., Гостищев В.К., Ханин А.Г., Качу-рина Н.В.; Опубл. 20.06.96, Бюл. № 17.

61. Пат. 2055600 РФ, МКИ6 А 61 L 15/44. Способ получения перевязочного материала для лечения ран и ожогов / Рыльцев В.В., Филатов В.Н., Брейтман Р.Ш.; Опубл. 10.03.96, Бюл. № 7.

62. Пат. 2154497 РФ, МКИ6 А 61 L 15/32. Средство для лечения ран / Адамян А.А., Голованова П.М., Добыш С.В., Кочергина Л.Д. и др.; Опубл. 20.08.2000, Бюл. №23.

63. Пат. 2143925 РФ, МКИ6 А 61 L 15/32. Ранозаживляющее покрытие / ЛукмановаК.А., Алсынбаев М.М., Истранов Л.П., Истранова Е.В. и др.; Опубл. 10.01.2000, Бюл. № 1.

64. Пат. 2127128 РФ, МКИ6 Д 61 L 15/32. Способ получения раневого покрытия "Дигистол" / Истранов Л.П., Абоянц Р.К., Соловьева Н.И., Шехтер А.Б.; Опубл. 10.03.99,Бюл. № 7.

65. Grzybowski J., Kolodziej W., Trafiiy E.A., Struzyna J. New antiinfective collagen dressing containing antibiotics // Journal of Biomedical Materials Research. 1997. - V. 36, № 2. - P. 163-166.

66. Пат. 2031661 РФ, МКИ6 А 61 L 15/22. Средство для лечения ран и оказания первой медицинской помощи / Адамян А.А., Полевов В.Н., Килимчук Л.Е., Добыш С.В. и др.; Опубл. 27.03.97, Бюл. № 9.

67. Пат. 2120306 РФ, МКИ6 А 61 L 15/22. Средство для лечения ран и ожогов / Беленькая В.Г., Полевов В.Н., Адамян А.А., Сахарова В.И. и др.; Опубл. 20.10.98, Бюл. №29.

68. Чухаджян А.Г., Чухаджян Г.А. и др. Синтетическое пленочное покрытие "Диплен" // Тез. докл. II Междунар. конф. "Современные подходы к разработке эффективных перевязочных средств, шовных материалов и полимерных имплантантов" М., 1995. - С. 144-146.

69. Васильев А.Е., Платэ Н.А. Трасдермальные терапевтические системы: от замысла до завода // Тез. докл. 9 Всес. науч. симпозиума "Синтетические полимеры медицинского назначения" Звенигород, 1991. - С. 4.

70. Чудина О.Д., Парий И.В., Степанова Ж.В. Лекарственный пластырь с си-лафунгином длительного непрерывного действия // Тез. докл. 9 Всес. науч.симпозиума "Синтетические полимеры медицинского назначения" Звенигород, 1991. -С. 70.

71. Tsunoda М., Sato Н., Yamada К., Noguchi Н. Preparation of a new wound dressing composed of a polyurethane film which is impregnated silver sulfur diazine, and nonwoven fabric // Nippon Kagaku Kaishi. 1998. - № 3.1. P. 767-773.

72. Васильев A.E., Давыдов А.Б. Макромолекулярные терапевтические системы: проблемы и перспективы //ЖВХО им. Д.И. Менделеева. 1985. - Т. 30, № 4. - С. 395-402.

73. Пат. 1080447 РФ, МКИ5 С 08 L 29/04. Антимикробный пленочный материал / Богомольный В .Я., Афиногенов Г.Е., Соловский М.В., Войтко Н.П. и др.; Опубл. 20. 05. 95, Бюл. № 14.

74. Пат. 2191034 РФ, МКИ7 А 61 L 15/20. Гелеобразная лекарственная форма / Самченко Ю.М., Ульберг З.Р., Комарский С.А.; Опубл. 20.10 2002, Бюл. № 29.

75. Пат. 2093190 РФ, МКИ6 А 61 L 15/22. Перевязочный материал / Алэн Гийеме (Франция), Филипп Жанод (Франция); Опубл. 20.10.97, Бюл. № 29.

76. Пат. 2115436 РФ, МКИ6 А 61 L 15/24. Средство для лечения ран / Адамян

77. A.А., Кузнецова В.А., Розенберг М.Э., Добыш С.В., Кочергина Л.Д. и др.; Опубл. 20.07.98, Бюл. № 20.

78. Пат. 1126131 Япония / Такахара Хидэаки. Фиксация ферментов на полимерной пленке; № 52-139777(1977) / РЖ Биохим., 1979.

79. Пат. 2106154 РФ, МКИ6 А 61 L 15/32. Перевязочный материал / Мензул

80. B.А.; Опубл. 10.03.98, Бюл. № 7.

81. Gao J., Dubin P., Muhoberac В. Capillary electrophoresis and Dynamic light Scattering studies of Structure and binding Characteristics of Protein-Polyelectrolyte Complexes // J. Phys. Chem. B. 1998. - № 102 - P. 5529-5535.

82. Кабанов B.A., Зезин А.Б., Изумрудов B.A. Синтетические полиэлектролиты как регуляторы ферментативных реакций // Итоги науки и техники в кн.: Биотехнология / Под ред. Егорова Н.С., Самуилова В.Д. М.: Высшая школа. - 1987.-Т. 4.-С. 159-192.

83. Зезин А.Б., Кабанов В.А. Новый класс комплексных водорастворимых полиэлектролитов // Успехи химии. 1982. - № 9. - С. 1447-1483.

84. Izumrudov V.A. Completitive eactions in solutions of protein-polyelectrolyte complexes //Ber. Dunsenges. Phys. Chem. 1996.- V. 100, № 6. - P. 1017-1023.

85. Изумрудов B.A., Лим C.X. Контролируемые фазовые разделения в растворах комплексов полиметакрилатного аниона и глобулярных белков // Высокомолекулярные соединения. Сер. А. 2002. - Т. 44, № 5. - С. 793-801.

86. Howell N.K., Yeboah N.A., Levis F.V. Studies on the electrostatic interactions of lysozyme with a-lactalbumin and P-lactalbumin // Int.y. Food Sci. and Technol. -1995. V. 30, № 6. - P. 813-824.

87. Бессмертная Л.Я., Козлов Л.В., Антонов B.K. Причины изменения стабильности а-химотрипсина при модифицировании полиэлектролитами // Биохимия. 1977. - Т. 42, - вып. 10. - С. 1825-1834.

88. Yamauchi Т., Wang N., Shimomura M., Miyauchi S. Covalent immobilization of glucose oxidase on cation- and anion- exchange resins // Jap.J. Polym. Sci. and Technol.- 1998. V. 55, № 7. - P. 373-377.

89. Кольцова C.B., Глинкина M.B., Самсонов Г.В. Осаждение трипсина по-лиметакриловой кислотой // Изв. АН СССР. Сер. хим. 1975. - Т. 8. - С. 18951896.

90. Кольцова С.В., Илларионова Н.Г., Панарин Е.Ф., Рудковская Т.Ф., Самсонов Г.В. Растворимые комплексы трипсина с синтетическими полиоснованиями // Изв. АН СССР. Сер. хим. 1975. - № 3. - С. 643-649.

91. Кабанов В.А. Физико-химические основы и перспективы применения растворимых интерполиэлектролитных комплексов // Высокомолекулярные соединения. 1994. - Т. 36, № 2. - С. 183.

92. Стрельцова З.А. Свойства белков в комплексе с кислыми полисахаридами и другими полиэлектролитами / Автореф. дис. канд. хим. наук М.: 1975. - 22 с.

93. Панарин Е.Ф., Копейкин В.В. Биологическая активность синтетических полиэлектролитных комплексов ионогенных поверхностно-активных веществ // Высокомолекулярные соединения. Сер. С. 2002. - Т. 44, № 12. - С. 23402351.

94. Вирник А.Д., Скокова И.Ф., Юданова Т.Н. Интерполиэлектролитная реакция — метод получения ферментсодержащих волокнистых материалов с регулируемым составом и свойствами // Текстильная химия. 1994. - № 1. -С. 5-20.

95. Вирник А.Д., Скокова И.Ф., Юданова Т.Н. Получение ферментсодержащих целлюлозных волокнистых материалов на основе привитых сополимеров, содержащих сульфогруппы // Хим. волокна. -1997. -№ 1. С. 10-13.

96. Вирник А.Д., Скокова И.Ф., Юданова Т.Н. Разработка волокнистыхматериалов с комбинированным биологическим действием на основе полиэлектролитных комплексов // Хим. волокна. -1995. № 5. - С. 10-20.

97. Каверзнева Е.Д. Стандартный метод определения протеолитической активности для комплексных препаратов протеаз // Прикл. биохомия и микробиология. 1971. - Т. 7, № 2. - С. 225-227.

98. Березин И.В., Клесов А.А. Практический курс химической и ферментативной кинетики. М.: МГУ, 1976. 320 с.

99. Mandl I., M'Cleman J.D., Howes E.L. Isolation and Characterization of Proteinase and Collagenase from CI. Hystolicum // J. Clin. Invest. 1953. - V. 32. -P. 1323-1329.

100. Рабинович И.М. Применение полимеров в медицине. Ленинград: Медицина, 1972. - 197 с.

101. Практикум по высокомолекулярным соединениям / Под ред. Кабанова В .А. М.: Химия, 1985. - 223 с.

102. Методические указания к лабораторным работам по курсу "Химия и фи-зико-химия полимеров" / Под ред. Л.С. Гальбрайха М.: МТИ, 1990. - С. 3135.

103. Машковский М.Д. Лекарственные средства. Харьков: Торсинг, 1997. -Т. 2. - 592 с.

104. Регистр лекарственных средств России. Энциклопедия лекарств. М.: Фармединфо, 1995. - С. 178.

105. Экологически безопасные полимерные биоциды / Под ред. Гембицкого П.А. М.: ИЭТП, 2000. - 104 с.

106. Измайлова В.Н., Ребиндер П.А. Структурообразование в белковых системах. М.: Наука, 1974. - 268 с.

107. Кабанов В.А., Зезин А.Б., Изумрудов В.А. Синтетические полиэлектролиты как регуляторы ферментативных реакций. В кн. Итоги науки и техники. Биотехнология / Под ред. Егорова Н.С., Самуилова В.Д. М.: Высшая школа, 1987.-Т. 4.-С. 159-192.

108. Кутузова Г.Д., Угарова Н.Н. Химическая модификация как метод получения стабилизированных форм биокатализаторов. В кн. Итоги науки и техники. Биотехнология. Иммобилизация и стабилизация биокатализаторов. -М.: ВИНИТИ, 1986. Т. 5. - С. 5-49.

109. Эскин В.Е. Рассеяние света растворами полимеров и свойства макромолекул. Л.: Наука, 1986. - 288 с.

110. Крестьянова И.Н., Луканин А.В., Писарев В.В. Протеаза С медицинская субстанция // Материалы 1-го Междунар. Конгресса "Биотехнология - состояние и перспективы развития" - М., 2002. - С. 69.

111. Харенко О.А., Харенко А.В., Калюжная Р.И. и др. Нестехиометричные полиэлектролитные комплексы новые водорастворимые макромолекуляр-ные соединения // Высокомолекулярные соединения. Сер. А. -1979. - Т. 21, № 12.-С. 2719-2725.

112. Изумрудов В.А., Коробко Т.А., Платонова О.А. Особенности комплексо-образования и конкурентных реакций в растворах полианионов, олигокатио-нов и анионов поверхностно-активного вещества // Вестник МГУ. Сер. хим. -1994. Т. 35, № 4. - С. 375-381.

113. Харенко О.А., Изумрудов В.А., Харенко А.В. и др. Процессы ассоциации диссоциации в растворах нестехиометричных полиэлектролитных комплексов // Высокомолекулярные соединения. Сер. А. - 1980. - Т. 22, № 1.- С. 218223.

114. Кулезнев В.Н., Шершнев В.А. Химия и физика полимеров. М.: Высшая школа, 1988.-312 с.

115. Кильдеева Н.Р., Трусова С.П., Пилевская Н.С., Вирник А.Д. Свойства композиций на основе поливинилового спирта, содержащих биологически активные вещества, и пленок из них // Хим. волокна. 1994. - № 2. - С. 23-24.

116. Назаренко Г.И., Сугурова И.Ю., Глянцев С.П. Рана. Повязка. Больной. Руководство для врачей и медсестер. М.: Медицина, 2002. - 472 с.

117. Полимеры в фармации / Под ред. Тенцовой А.И., Алюшина М.Т. М.: Медицина, 1985. - 256 с.

118. Блинов Н.П. Химия микробных полисахаридов. М.: Высшая школа, 1984. - 256 с.

119. Варфоломеев С.Д., Гуревич К.Г. Биокинетика. М.: Гранд, 1999. - С. 230-280.

120. Новое в области получения антимикробных волокнистых материалов и их использования. М.: ЦНИИТЭИлегпром, 1980. - 56 с.

121. Изумрудов В.А., Зезин А.Б., Кабанов В.А. Равновесие интерполимерных реакций и явления молекулярного "узнавания" в растворах интерполиэлек-тролитных комплексов // Успехи химии. 1991. - Т. 60, № 7. - С. 1570-1595.