Получение новых полиметиновых красителей на основе бензоксазола и бензотиазола тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.03, кандидат химических наук Седунова, Полина Андреевна

• Седунова, Полина Андреевна
• кандидат химических наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат химических наук Седунова, Полина Андреевна

СОДЕРЖАНИЕ

Введение

1. Литературный обзор

1.1. Производные пиридина - полупродукты для синтеза полиметиновых красителей семейств TOTO, BOBO, YOYO и POPO

1.2. Четвертичные соли бензоксазола и бензотиазола - полупродукты для синтеза полиметиновых красителей

1.3. Полиметиновые красители

1.3.1. Несимметричные монометиновые красители

1.3.2. Несимметричные триметиновые красители

1.3.3. Стирил овые красители

1.3.4. Симметричные полиметиновые красители семейств BOBO, TOTO, YOYO и POPO

1.4. Микроволновая активация

2. Обсуждение результатов

2.1. Производные пиридина и N,N,N',tV-тетраметилэтилендиамина (ТМЭДА) -продукты для синтеза полиметиновых красителей

2.1.1. Алкилирование у-пиколина йодистым метилом, 1,3-дибромпропаном и 1,4-дибромбутаном

2.1.2. Алкилирование пиридина и триэтиламина производными у-пиколина

2.1.3. Алкилирование 4,4'-бипиридина и ТМЭДА производными у-пиколина

2.1.4. Алкилирование 4,4'-бипиридина йодистым метилом

2.1.5. Алкилирование 1,10-фенантролина производными у-пиколина

2.1.6. Алкилирование 4,4'-бипиридина и ТМЭДА 1,3-дибромпропаном

2.1.7. Алкилирование 4,4'-бипиридина 1,3-хлорбромпропаном

2.2. Производные бензазолов - продукты для синтеза полиметиновых красителей

2.2.1. Бензотиазолы

2.2.2. Бензоксазолы

2.3. Полиметиновые красители

2.3.1. Несимметричные монометиновые красители - предшественники интеркаляторов типа BOBO - и их аналоги

2.3.2. Несимметричные триметиновые красители - предшественники интеркаляторов типа POPO - и их аналоги

2.3.3. Стириловые красители

2.3.4. Симметричные полиметиновые красители - аналоги BOBO и POPO

2.3.4.1. Симметричные монометиновые красители - аналоги BOBO

2.3.4.2. Симметричные триметиновые красители - аналоги POPO

2.3.5. Оптические свойства полиметиновых красителей

3. Экспериментальная часть

3.1. Производные у-пиколина

3.2. Производные 4,4'-бипиридина

3.3. Производные N,N,N', Л^'-тетраметилэтилен диамина (ТМЭДА)

3.4. Производные 1,10-фенантролина

3.5. Производные бензоксазола

3.6. Производные бензотиазола

3.7. Полиметиновые красители

3.7.1. Монометиновые красители - предшественники интеркаляторов типа BOBO и их аналоги

3.7.2. Триметиновые красители - предшественники интеркаляторов типа BOBO и их аналоги

3.7.3. Стириловые красители

3.7.4. Симметричные монометиновые красители - аналоги интеркаляторов типа BOBO

3.7.5. Симметричные триметиновые красители - аналоги интеркаляторов типа POPO

3.7.6. Флуоресцентная микроскопия

Выводы

Список литературы

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Получение новых полиметиновых красителей на основе бензоксазола и бензотиазола»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность работы. Флуоресцентные зонды (ФЗ) являются важными химическими инструментами при исследованиях в различных областях молекулярной биологии и биохимии, а также широко используются в практической медицине при проведении диагностических тестов. Круг задач, решаемых с их помощью, непрерывно расширяется. В частности, они могут служить молекулярным инструментом для конструирования новых лекарственных препаратов. Поэтому получение и изучение свойств новых ФЗ остается предметом постоянного внимания исследователей.

Важное место среди ФЗ нуклеиновых кислот занимают симметричные моно- и триметиновые красители бензотиазольного и бензоксазольного рядов (так называемые ФЗ типа BOBO и POPO), широко используемые в генетических исследованиях и в современных диагностических методах, таких, как например, полимеразная цепная реакция (ПЦР). ПЦР применяется для диагностики рака на ранних стадиях заболевания, инфекционных заболеваний, в том числе СПИДа, при идентификации образцов ДНК в криминалистике и др.

ФЗ указанных типов в РФ не производятся, поэтому медицинские учреждения страны обеспечиваются ими по импорту. Поскольку биомедицинские технологии, в которых используются ФЗ типа BOBO и POPO, направлены на сохранение здоровья нации, то остро стоит проблема импортозамещения путем организации их отечественного производства.

Синтетическими прекурсорами (полупродуктами) этих ФЗ являются дифункциональные молекулы, «надстраивание» которых приводит как к целевым симметричным продуктам (бис-замещения), так и к побочным несимметричным (моно-замещения). В ключевых реакциях получения ФЗ указанного типа для генерирования промежуточных карбанионов используют основные агенты, что приводит к протеканию ряда нежелательных (побочных) реакций. Вопросы, связанные с увеличением выходов и повышением чистоты целевых ФЗ, в специальной литературе не отражены или отражены крайне скупо. Помимо синтетических, существуют и аналитические проблемы установления квалификации (чистоты и индивидуальности) синтезированных ФЗ и полупродуктов их синтеза, связанные с особенностями спектральных характеристик этих соединений, практически не освещенными в специальной литературе. Без решения обозначенных проблем невозможно наладить рентабельный синтез ФЗ должной квалификации как в лабораторных, так и в опытно-промышленных условиях.

Представлялось весьма актуальным: (а) изучить существующие методы получения ФЗ типа BOBO и POPO в расчете овладеть технологиями их синтеза; (б) разработать новые, более рациональные методы получения ФЗ указанного типа; (в) а также попутно синтезировать оригинальные красители в качестве потенциальных зондов.

Основной целью данной работы является разработка научных основ лабораторного синтеза моно- и триметиновых красителей - ФЗ типа BOBO и POPO.

Для достижения поставленной цели было необходимо решить следующие основные задачи:

1. Апробировать традиционные методы синтеза ФЗ типа BOBO и POPO и оценить их возможности и ограничения;

2. Путем ретросинтетического анализа выявить и разработать новый метод синтеза ФЗ указанного типа;

3. Предложить способ интенсификации лабораторных методов синтеза указанных ФЗ;

4. Изучить особенности спектрального поведения указанных ФЗ и полупродуктов их синтеза;

5. Синтезировать новые красители - производные бензоксазола и бензотиазола — и оценить их потенциал в медико-биологических исследованиях.

Методы исследования. Методы синтетической органической химии, ЯМР спектрометрия, ИК спектроскопия, УФ спектроскопия, спектрофлуориметрия, масс-спектрометрия.

Научная новизна работы:

1. Предложен новый способ получения интеркаляторов семейства BOBO и POPO, заключающийся в синтезе промежуточных соединений (полупродуктов) тетракатионного типа путем взаимодействия четвертичных солей пиколина, содержащих бромалкильную группировку, с третичными диаминами (4,4-бипиридин и Ы,Н№,]Ч'-тетраметилэтилендиамин), и последующем взаимодействии этих полупродуктов с четвертичными солями 2-замещенных бензазолов в присутствии основного агента - триэтиламина.

2. Синтезированы новые бензотиазольные монометиновые и бензоксазольные триметиновые красители тетракатионного типа на основе 4,4'-бипиридила и К,К,К',]Ч'-тетраметилэтилендиамина, их тетракатионные предшественники, а также новые четвертичные соли 1,10-фенантролина.

3. Установлено, что при записи спектров ЯМР *Н в ДМСО-<Зб аналитически кондиционных образцов четвертичных солей бензазолов под действием остаточной влаги растворителя происходит гидролитическое раскрытие азольного цикла либо гидролитическое замещение заместителя во 2-м положении азольного кольца, что затрудняет интерпретацию спектров и приводит к неверным выводам о квалификации образцов. Практическая значимость работы:

1. У вновь синтезированных полиметиновых красителей выявлены флуоресцентные свойства, что открывает принципиальную возможность разработки на их основе флуоресцентных зондов для использования в различных областях биологии и медицины.

2. Освоена лабораторная технология синтеза интеркаляторов семейства BOBO традиционным способом, заключающимся в получении промежуточного несимметричного полиметинового красителя с бромалкильной группировкой и его последующем взаимодействии с 4,4'-бипиридином или N,N,N',N'-тетраметилэтилендиамином. Наряду с разработкой нового способа получения указанных соединений это создает предпосылки для организации укрупненного лабораторного (полупромышленного) производства таких интеркаляторов в России.

3. Предложен способ интенсификации реакций получения интеркаляторов семейств BOBO и POPO путем микроволнового облучения. Показано, что применение метода микроволновой активации позволяет не только ускорить процесс и увеличить выход интеркалятора, но и получить интеркалятор лучшего качества.

4. Выявлены возможности и ограничения ЯМР 'il спектрометрии в качестве метода установления индивидуальности четвертичных солей бензазолов. Основные положения, выносимые на защиту:

1. Новый метод получения интеркаляторов семейств BOBO и POPO.

2. Способ интенсификации синтеза интеркаляторов семейств BOBO и POPO путем микроволнового облучения.

3. Нестабильность четвертичных солей бензазолов к действию остаточной влаги растворителя в условиях записи ЯМР спектров в ДМСО-с1б.

4. Лабораторная технология получения интеркаляторов семейства BOBO традиционным способом.

5. Возможность использования вновь синтезированных полиметиновых красителей в качестве флуоресцентных зондов ДНК.

Личный вклад автора. Участие в сборе, анализе и систематизации литературных данных, обсуждении целей и задач исследования, интерпретации полученных результатов и их обобщении, формулировке выводов, написании статей и представлении докладов по теме диссертации; подготовка и проведение синтезов, обработка и интерпретация спектральных данных (ЯМР 'Н спектры, ИКС, УФС, MC), структурные отнесения. ЯМР спектры получены к. х. н. Захаровым В.И. (НИИ ГПЭЧ ФМБА России), ИК спектры - Артамоновой Т.В. (СПбГТИ (ТУ)), масс-спектры высокого разрешения - Мишаревым А.Д. (СПбГУ) и Новиковым A.B. (ИАП РАН); элементный анализ выполнен Артамоновой Т.В. (СПбГТИ (ТУ)). Изучение синтезированных соединений в качестве потенциальных ФЗ проведено в лаборатории клеточной патологии Института цитологии РАН (зав. лаб. д. б. н. Кудрявцев Б.Н.).

Работа выполнена в рамках задания Министерства образования и науки РФ на проведение научных исследований по тематическому плану НИР вуза, темы 1.2.06 «Исследование реакционной способности полифункциональных гетероциклических соединений», № гос. регистрации 01200700666, и 1.4.04 «Разработка научных основ получения новых веществ фармакологического и сельскохозяйственного назначения в рядах элементоорганических соединений методами тонкого органического синтеза и биотехнологии», № гос. регистрации 01200412872.

Апробация работы: Материалы диссертации были представлены на 6-ти международных и российских конференциях. По материалам конференций опубликованы сборники тезисов докладов или выпущены электронные диски.

Публикации: По теме диссертации опубликована одна статья.

Объем и структура работы: Диссертация состоит из введения, литературного обзора (4 раздела), обсуждения результатов (3 раздела), экспериментальной части (7 разделов), выводов и списка литературы (93 ссылок). Материал диссертации изложен на 123 страницах машинописного текста, содержит 13 таблиц и 5 рисунков.

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

В литературном обзоре рассмотрены методы синтеза полиметиновых красителей семейств TOTO, BOBO, YOYO и POPO, а также полупродуктов, необходимых для их синтеза.

1.1. Производные пиридина - полупродукты для синтеза полиметиновых красителей семейств TOTO, BOBO, YOYO и POPO

Синтез четвертичных солей ароматических аминов (1-5), в общем, сводится к проведению реакции между соответствующим амином и алкилирующим агентом (схема 1).

В работе [1] предлагается проводить алкилирование лепидина 1,3-дибромпропаном или 1,4-дибромбутаном, взятым в 4-кратном мольном избытке, при комнатной температуре (20 °С) в течение 24-72 часов в неполярном растворителе или без него. Авторы работы [2] проводят алкилирование хинолинов и пиколинов 2-кратным избытком 1,3-дибромпропана в спирте при 6-часовом кипячении.

Вг^Н^Вг

сн3

20 °С

/ V^-Br n=1 «

w П n = 2 (2)

Br'

"Br

EtOH (reflux)

диоксан (reflux) ^зС CH3I

^^Br (3)

HUC

N+CH3

(4)

(5)

i-РЮН (reflux)

Заключение диссертации по теме «Органическая химия», Седунова, Полина Андреевна

ВЫВОДЫ

1. Разработан новый способ получения полиметиновых красителей -интеркаляторов семейств BOBO и POPO, заключающийся в синтезе промежуточных соединений тетракатионного типа путем взаимодействия четвертичных солей пиколина, содержащего N-бромалкильную группу, с 4,4'-бипиридином или 1Ч,]Ч,М',>Г-тетраметилэтилендиамином, и последующем взаимодействии этих промежуточных соединений с четвертичными солями бензазолов, содержащих нуклеофугную группу во 2-м положении, в присутствии триэтиламина.

2. Освоена лабораторная технология получения интеркаляторов семейства BOBO традиционным способом, заключающимся в синтезе промежуточного полиметинового красителя с N-бромалкильной группировкой и его последующей реакции с 4,4'-бипиридином или N,N,N',N'-тетраметилэтилен диамином.

3. Установлено, что реакции получения интеркаляторов семейства BOBO как известным, так и вновь предложенным способом могут быть интенсифицированы с помощью микроволнового излучения. Микроволновая активациия не только увеличивает скорость реакций и выход интеркаляторов, но и позволяет получать интеркаляторы большей степени чистоты.

4. Установлено, что в результате алкилирования 4,4'-бипиридина и N,N,N',N'-тетраметилэтилендиамина 1,3-дибромпропаном наряду с линейными всегда образуются циклические продукты.

5. Выявлено, что при записи спектров ЯМР 'Н в ДМСО-с16 кондиционных образцов четвертичных солей 2-замещенных бензазолов происходит раскрытие азольного цикла по связи O(S)! - С2 либо замещение нуклеофугной группы в положении С2 под действием остаточной влаги растворителя, что затрудняет интерпретацию спектров и приводит к неверным выводам о присутствии в образцах примесей.

6. Синтезирован ряд новых полиметиновых красителей, некоторые из которых образуют специфические комплексы с молекулами ДНК, что проявляется в интенсивной флуоресценции окрашенных ими клеточных ядер.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Седунова, Полина Андреевна, 2012 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Synthesis of homodimeric monomethine cyanine dyes as noncovalent nucleic acid labels and their absorption and fluorescence spectral characteristics/ T.G. Deligeorgiev, N.I. Gadjev, I.I. Timtcheva et al.// Dyes and Pigments. - 2000. -V. 44. -P. 131-136.

2. Харитонов Г.В., Ле Чинь. Взаимодействие 1,3-дибромпропана с 2-,3- и 4-пиколинами и с 4-метилхинолином// Журн. Орг. Хим. - 1980. - Т. 16, № 11. -С. 2388-2390.

3. Benson S.C., Singh P., Glazer A.N. Heterodimeric DNA-binding dyes for energy transfer: synthesis and spectroscopic properties// Nucleic Acids Res.-1993. - V. 21, №24.-P. 5727-5735.

4. Титце Л., Айхер Т. Препаративная органическая химия.-М.: Мир, 1999. -704 с.

5. Квитко И .Я. Основы химии и технологии органических веществ. Препаративные методы исследования: Метод, указания/ СПбГТИ. - СПб., 1993. -39 с.

6. Hewitt L.F., King H. Trypanocidal action and chemical constitution// J. Chem. Soc. -1926.-P. 817-823.

7. Агрономов A.M., Шабаров Ю.С. Лабораторные работы в органическом практикуме. - М.: Химия, 1974. - 282 с.

8. Konig W., Meier W. Thio- and oxocyanines// J. Prakt. Chem. - 1925. - V. 109. - P. 324-344.

9. Clark L.M. Quaternary salts of benzoxazoles// J. Chem. Soc. - 1926. - P. 232-235.

10. Oliveros L., Wahl H. Étude des sels de dimethyl-2,3benzoxazolium// Bull. Soc. Chim. Fr. - 1971. -№ 9. - P. 3204-3209.

11. Rondom J., Guglielmetti R., Metzger J. Synthese spiropyrannique en serie benzoxazolinique// Bull. Soc. Chim. Fr. - 1971. -V. 7. - P. 2581-2584.

12

13

14

15

16

17

18

19

20

21

22

23

24

25

26

27

Oliveros L., Wahl H. Étude des sels de dimethyI-2,3benzoxazoIium//Bull. Soc. Chim. Fr. - 1969. - No 8. - P. 2815-2820.

Пат. US 1745843 США. Method of making aminophenol derivatives / H.T. Clarke (США). - № 704072; заявл. 03.04.24; опубл. 04.02.30. - 2 с. Lai А.В., Petrow V. Cyanine dyes from 2,3-dihydro-p-quinindene// J. Chem. Soc. -1948.-P. 1895-1897.

Synthesis and characterization of novel mono- and dicarboxyalkylthiacarbocyanines and their ester derivatives/ R.E.F. Boto, R.M. El-Shishtawy, P.F. Santos et al.// Dyes and Pigments. - 2007. - V. 73. - P. 195-205.

Synthesis of very pure cyanine dyes/ M. Koral, A. Leifer, D. Bonis et al.// J. Chem. Eng. Data. - 1965. - Vol.10, № 1. - P. 67-70.

Пат. US 2487882 США. Cyanine dye intermediates / E.B. Knott (Англия). -№ 604521; заявл. 11.07.45; опубл. 15.11.49.-4 с.

Toutchkine A., Nalbant P., Hahn K.M. Facile Synthesis of Thiol-Reactive Cy3 and Cy5. Derivatives with Enhanced Water Solubility// Bioconjugate Chem. -2002. -V. 13, №3.-P. 387-391.

Absorptions of some related vinylene-homologous series/ L.G.S. Brooker, F.L. White, G.H. Keyes et al.// J. Am. Chem. Soc. - 1941. - V. 63, № 11. - P. 3192-3203. The action of ethyl ortoformate on aniline and certain of its derivatives/ C.D. Lewis, R.G. Krupp, H. Tieckelmann, H.W. Post// J. Org. Chem. - 1947. - V. 12. - P. 303307.

Oxley P., Peak D.A., Short W.F. Preparation of amidines from substituted amides, a sylphonyl chloride, and an amine// J. Chem. Soc. - 1948. - P. 1618-1621. Mandell H.G., Hill A.J. The conversion of formamides into formamidines// J. Am. Chem. Soc. - 1954. - V. 76, № 15. - P. 3978-3982.

Hunter R.F. The unsaturation and tautomeric mobility of heterocyclic compounds// J. Chem. Soc.- 1930.-P. 125-147.

Organic reactions in ionic liquids: an efficient method for selective S-alkylation of 2-mercaptobenzothia(xa)zole wiyh alkyl halides/ Y. Hu, Z. Chen, Z. Le, Q. Zheng// Synth. Commun. - 2004. - V. 34, № 11. - P. 2039-2046.

Киприанов А.И. Цвет и стороение цианиновых красителей. - Киев: Наукова думка, 1979. - 665 с.

Пат. US 2798066 США. Method for preparing cyanine bases / H. Larive, P. Collet (Франция). -№ 561930; заявл. 27.01.56; опубл. 02.07.57. - 5 с. Halasa A.F, Smith G.E.P. Study of the Michael and Mannich reactions with benzothiazole-2-thiol// J. Org. Chem. - 1971. - V. 36, № 5. - P. 636-641.

28. Sexton W.A. Reaction of benzthiazole derivatives// J. Chem. Soc. - 1939. - P. 470473.

29. The synthesis of some heterocyclic quaternary amine iodides/ M. Koral, D. Bonis, A.J. Fusco et al.// J. Chem. Eng. Data. - 1964. - V. 9, № 3. - P. 406-408.

30. Пат. US 5410030 США, МКИ С 07 H 21/02. Dimers of asymmetrical cyanine dyes containing pyridiniym moieties / S.T. Yue, R.P. Haugland (США). - № 43665; заявл. 05.04.93; опубл. 25.04.95. - 24 с.

31. Эфрос JI.C., Давиденков JI.P. Получение 2-бензотиазолсульфо-кислоты// Журн. общ. химии. - 1951. - Т. 21. - С. 2046-2050.

32. Игнатов В.А., Пирогов П.А., Фельдштейн М.С. Изучение образования бензтиазолил-2-сульфенаминов при совместимости окисления 2-меркаптобензтиазола// Журн. орг. химии. - 1968. - Т. 4, № 11. - С. 2025-2030.

33. Пат. US 2018813 США. Mu-arylene-thiazole and arylene oxazole sulphonic acid/ M. Schubert, E. Herdiecherhoff (Германия). - № 723611; заявл. 02.05.34; опубл. 29.10.35.-3 с.

34. Larivé H., Collet P., Dennilauler R. Les sulfobetaines de cycloammoniums et leur utilization dans la synthèse de colorants sensibilisateurs de la classe des cyanines et mérocyanines// Bull. Soc. Chim. Fr. - 1956. - P. 1443-1453.

35. Пат. 473121 Швейцария, МКИ С 07 d 31/00. Procédé de préparation de sulfobétaïnes d'hétérocyclammonium / H. Larivé, R. Baralle (Франция). - № 5988/65; заявл. 29.04.65; опубл. 15.07.69. - 8 с.

36. Степанов Б.И. Введение в химию и технологию органических красителей. - М.: Химия, 1971.-448 с.

37. A novel method for the preparation of monomethine cyanine dyes/ T.G. Deligeorgiev, D.A. Zaneva, H.E. Katerinopoulos, V.N. Kolev// Dyes and Pigments. -1999.-V. 41.-P. 49-54.

38. Brooker L.G.S., Keyes G.H., Williams W.W. The Absorption of Unsymmetrical Cyanines// J. Am. Chem. Soc. - 1942. - V. 64. - № 2. - P. 199-210.

39. Gadjev N.I., Deligeorgiev T.G, Kim S.H. Preparation of monomethine cyanine dyes as noncovalent labels for nucleic acids// Dyes and Pigments. - 1999. - V. 40. - P. 181-186.

40. Synthesis of novel monomeric asymmetric tri- and tetracationic monomethine cyanine dyes as fluorescent non-covalent nucleic acid labels/ T. Deligeorgiev, A. Vasilev, T. Tsvetkova, K. Drexhage// Dyes and Pigments. - 2007. - V. 75. - P. 658663.

41. Homodimeric monomethine cyanine dyes SOSO-1 and TOTO-1-6C - synthesis and fluorescence properties in the presence of nucleic acids/ T. Deligeorgiev, I. Timcheva, V. Maximova et al.// Dyes and Pigments. - 2004. - V. 61. - P. 79-84.

42. Стеценко A.B., Иванова В.И. Цианиновые красители ряда нафтодитиазола// Укр. хим. ж. - 1956. - Т. 22. - С. 772-775.

43. Monomethine cyanine dyes with an indole nucleus: Microwave-assisted solvent-free synthesis, spectral properties and theoretical studies/ Y. Fu, W. Huang, Ch. Li et al.// Dyes and Pigments. - 2009. - V. 82. - P. 409-415.

44. Ogata Т., Noguchi M. The cleavage of methane linkings of cyanine dyes// J. Sci. Res. Inst. - 1951.-V. 45.-P. 154-160.

45. Fayed T.A. Intramolecular charge transfer and photoisomerization of 2-(p-dimethylaminostyryl)benzoxazole: A new fluorescent probe// J. Photochem. Photobiol. - 1999. - V. 121.-P. 17-25.

46. Синтез и спектрально-люминесцентные свойства азольных аналогов 1,4-дистирилбензола и изомерных дистирилнафтолов/ Е.М. Вернигор, В.К. Шалаев, Л.П. Новосельцева и др.// Хим. гетероцикл. соед. - 1980. - № 5. - С. 604-608.

47. Brooker L.G.S., Sprague R.H. Absorptions of 2-p-dimethylamino-styrylquinoline and its salts// J. Am. Chem. Soc. - 1941. - V. 63. - P .3203-3213.

48. Fluorescent homodimer styrylcyanes/ V.B. Kovalska, D.V. Kryvotenko, A.O. Balanda et al.// Dyes and pigments. - 2005. - V. 67. - P. 47-54.

49. Пат. US 2330203 США. Dye intermediate / L.G.S. Brooker, W.W. Williams (США). -№ 353500; заявл. 21.08.40; опубл. 28.09.43. - 6 с.

50. Novel environmentally benign proctdures for the synthesis of styryl dyes/ A. Vasilev, T. Deligeorgiev, N. Gadjev et al.// Dyes and Pigments. - 2008. - V. 77. - P. 550-555.

51. Fluorometric Assay Using Dimeric Dyes for Double- and Single-Stranded DNA and RNA with Picogram Sensitivity/ H.S. Rye, J.M. Dabora, M.A. Quesada et al.// Anal. Biochem.- 1993.-V. 208, № l.-P. 144-150.

52. Stable fluorescent complexes of double-stranded DNA with bis-intercalating asymmetric cyanine dyes: properties and applications/ H.S. Rye, S. Yue, D.E. Wemmer et al.// Nucleic Acids Res. - 1992. - V. 20, № 11. - P. 2803-2812.

53. Пат. WO 93/06482, МКИ G 01 N 33/48. Dimers of unsymmetrical cyanine dyes / S.T. Yue, I.D. Johnson, R.P. Haugland (США). - № PCT/US92/07867; заявл. 16.09.92; опубл. 01.04.93.-24 с.

54. Thostenson E.T, Chou T.-W. Microwave processing: fundamentals and applications// Composites Part A: Appl. Sci, Manufact. - 1999. - V. 30, № 9. - P. 1055-1071.

55. Dielectric parameters relevant to microwave dielectric heating/ C. Gabriel, S. Gabriel, E.H. Grant, B.S.J. Haltstead, D.M.P. Mingos// Chem. Soc. Rev. - 1998. -V. 27, №3,-P. 213-224.

56. Bucharenko A.L, Frankevich E.L. Chemical Generation, Reception of Radio- and Microwaves. - New York: VCH Publisher, 1993. - 312 p.

57. Leadbeater N. E, Torenius H.M. A study of the ionic liquid mediated microwave heating of organic solvents// J. Org. Chem. - 2002. - V. 67. - P. 3145-3148.

58. Leadbeate N.E, Torenius H.M, Tye H. Ionic liquids as reagents and solvents in conjunction with microwave heating: rapid synthesis of alkyl halides from alcohols and nitriles from aryl halides// Tetrahedron. - 2003. - V. 59, № 13. - P. 2253-2258.

59. Behavior of reaction mixtures under microwave conditions: use of sodium salts in microwave-induced N-[18F]fluoroalkylations of aporphine and tetralin derivatives/ S. Zijlstra, T.J. De Groot, L.P. Kok et al.// J. Org. Chem. - 1993. - V. 58, № 7. - P. 1643-1645.

60. Kappe C.O. High-speed combinatorial synthesis utilizing microwave irradiation// Curr. Opin. Chem. Biol. - 2002. - V. 6, № 3. - P. 314-320.

61. Reactivity and selectivity under microwaves in organic chemistry. Relation with medium effects and reaction mechanisms/ A. Loupy, L. Perreux, M. Liagre et al.// Pure Appl. Chem. - 2001. -V. 73, № 1. - P. 161-166.

62. Leskovsek S, Smidovnik A, Koloini T. Kinetics of Catalytic Transfer Hydrogénation of Soybean Oil in Microwave and Thermal Field// J. Org. Chem. -1994. - V. 59, № 24. - P. 7433-7436.

63. Roy I, Gupta M.N. Application of microwaves in biological sciences// Curr. Sci. -2003.-V. 85, № 12.-P. 1685-1696.

64. Yang C, Murray W.V, Wilson L.J. Microwave enabled external carboxymethyl substituents in the ring-closing metathesis// Tetrahedron Lett. - 2003. - V. 44, № 9. -P. 1783-1786.

65. Perreux L, Loupy A. A tentative rationalization of microwave effects in organic synthesis according to the reaction medium, and mechanistic considerations // Tetrahedron. - 2001. - V. 57, № 45. - P. 9199-9223.

66. Accelerated imidization reactions using microwave radiation/ D.A. Lewis, J.D. Summers, T.C. Ward et al.//J. Polym. Sci. Part A: Polym. Chem. - 1992. - V. 30, №8.-P. 1647-1653.

67. Synthese organique sous champ microondes : premier exemple d'activation specifique en phase homogene/ J. Berlan, P. Giboreau, S. Lefeuvre, C. Marchand // Tetrahedron Lett. - 1991. - V. 32, № 21. - P. 2363-2366.

68. Mayo K.G. Nearhoof E.H, Kiddle J.J. Microwave-Accelerated Ruthenium-Catalyzed Olefin Metathesis// Org. Lett. - 2002. - V. 4, № 9. - P. 1567-1570.

69. Губанова П.А, Артамонова T.B, Рамш С.М. Алкилнрованне третичных диаминов // Изв. СПбГТИ(ТУ), 2011. - № 12 (38). С. 46-47.

70. Benfey О.Т, Mills J.W. Steric Effects of N-Alkyl Groups on the First Acid Ionization Constant of 1,10-Phenanthroline// J. Am. Chem. Soc. - 1971. - V.93, № 4. -P. 922-923.

71. Coddington J.M, Taylor M.J. Conformational isomerism in a series of alkylpiperazonium derivatives// Spectrochim. Acta, Part A. - 1990. - V. 46A, № 10. -P. 1487-1497.

72. Александрова A.B. Синтез новых флуоресцентных зондов: Дипломная работа/ СПбГТИ(ТУ). - СПб, 2005. - 105 с.

73. Пожарский А.Ф. Теоретические основы химии гетероциклов. - М.: Химия, 1985.-280 с.

74. Губанова П.А, Рамш С.М.. Особенности спектров ЯМР 'Н четвертичных солей бензазолов в ДМСО-dg // Изв. СПбГТИ(ТУ), 2010. - № 7 (33). С. 54-57.

75. Synthesis of novel monomeric and homodimeric cyanine dyes containing thioacetyl substituents for nucleic acid detection/ T. Deligeorgiev, N. Gadjev, A. Vasilev et al.// Dyes and Pigments. - 2007. - V. 72. - P. 28-32.

76. Synthesis of novel monomeric cyanine dyes containing mercapto and thioacetyl substituents for nucleic acid detection/ T. Deligeorgiev, N. Gadjev, A. Vasilev et al.// Dyes and Pigments. - 2006. - V. 70. - P. 185-191.

77. NMR spectroscopy study of 2-methylbenzoxazolium salts hydroxylation in DMSO-d6 solution/ R. Santos, L.M. Fernandes, R.F. Boto// Tetrahedron Lett. - 2006. - V. 47.-P. 6723-6725.

78. Идентификация органических соединений/ P. Шрайнер, P. Фьюзон, Д. Кёртин, Т. Морилл. - М.: Мир, 1983. - 704 с.

79. Preparation of monomethine cyanine dyes for nucleic acid detection/ T.G. Deligeorgiev, D.A. Zaneva, S.H. Kim, R.W. Sabnis// Dyes and Pigments. - 1998. -V. 37.-P. 205-211.

80. Полянский Н.Г. Аналитическая химия брома. - М.: Наука, 1980. - 244 с.

81. Бартон Д. и др. Общая органическая химия: В 12 т. - Т. 1: Стереохимия, углеводороды, галогенсодержащие соединения/ Д. Бартон, У.Д Оллис; Под ред. Н.К. Кочеткова; Пер. с англ. JI. Я. Яковской. - М.: Химия, 1981. - 736 с.

82. Красовицкий Б. М., Болотин Б. М. Органические люминофоры. - Л.: Химия, 1976.-344 с.

83. Реутов О.А. и др. Органическая химия: Учеб. пособие: В 4 т. - Т. 4/ О.А. Реутов, А.Л. Курц, К.П. Бутин. - М.: Бином. Лаб. знаний, 2004. - Т. 4. - 726 с.

84. Марч Дж. Органическая химия: В 4 т. - Т. 2/ Дж. Марч; Под ред. И. П. Белецкой; Пер. с англ. 3. Е. Самойловой. - М.: Мир, 1987. - 504 с.

85. Search for the Pharmacophore of Bispyridinium-Type Allosteric Modulators of Muscarinic Receptors/ M.H.B. Cid, U. Holzgrabe, E. Kostenis et al.// J. Med. Chem. - 1994.-V. 37.-P. 1439-1445.

86. Phillips A.P., Mentha J. Synthetic Hypotensive Agents. Some 4,4'-bipiperidines // J. Am. Chem. Soc. - 1955. - V. 77. - P. 6393-6395.

87. Rondon J., Guglielmetti R., Metzger J. Synthese spiropyrannique en serie benzoxazolinique// Bull. Soc. Chim. Fr. - 1971. - № 7. - P. 2581-2584.

88. Shoesmith J.B., Haldane J. Condensation of Diphenylformamidine with Phenols// J. Chem. Soc. - 1924. - P. 2405-2407.

89. Чемерилова E.E. Синтезы цианинового красителя аналога флуоресцентного зонда: Дипломная работа/ СПбГТИ(ТУ). - СПб., 2003. - 71 с.

90. Кушакова П.М. Алкилирование циклических тиоамидов и циклических тиомочевин: дизайн новых конденсированных гетероциклических систем: Дис. ... канд. хим. наук/ СПбГТИ(ТУ). - СПб., 2002. - 139 с.

91. Chambers Е., Watt G. The identification of sulfonic acids// J. Org. Chem. -1941. -V. 6, №3.-P. 376-383.

92. Пат. ЕР 0089230A1. МКИ G 03 С 1/06. Silver halide photographic material/ K. Machida, H.Sakuma, N. Ishikawa (Япония). - № 833014269; заявл. 15.03.83; опубл. 21.09.83.-31 с.

93. Пат. US 3149105 США. Novel synthesis of cyanines and merocyanines / H. Larive, R. Dennilauler (Франция).-№ 138003; заявл. 14.09.61; опубл. 15.09.64. - 5 с.