Регуляция формирования радиально-симметричной системы микротрубочек в интерфазной клетке тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.25, кандидат биологических наук Бураков, Антон Владимирович

• Бураков, Антон Владимирович
• кандидат биологических наук
• 2003

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Бураков, Антон Владимирович

1. ВВЕДЕНИЕ.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. Микротрубочки и их динамика.

2.1.1. Белковый состав микротрубочек.

2.1.2. Сборка и разборка микротрубочек.

2.1.3. Белки, влияющие на динамику микротрубочек.

2.2. Самоорганизация радиальной системы микротрубочек в животных клетках.

2.3. Центросома.

2.3.1. Функции центросомы.

2.3.2. Затравка и заякоривание микротрубочек.

2.3.3. Белки перицентриолярного материала.

2.3.4. Центриоли.

2.4. Позиционирование центросомы в клетке.

2.5. Микротрубочки и клеточная подвижность.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Регуляция формирования радиально-симметричной системы микротрубочек в интерфазной клетке»

Радиально-симметричная система микротрубочек, отходящих от центросомы в виде звезды, характерна для большинства пролиферирующих и/или подвижных клеток позвоночных. Эта система обеспечивает анизотропию цитоплазмы по направлению центр клетки - периферия, что необходимо для организации направленного транспорта клеточных органелл с помощью зависимых от микротрубочек белков-транслокаторов. Кроме того, на микротрубочках локализованы компоненты многочисленных сигнальных каскадов - соответственно, радиально-симметричная система микротрубочек важна также для корректной передачи сигнала и, таким образом, для функциональной компартментализации клетки.

Хорошо известно, что радиально-симметричное строение системы микротрубочек животной клетки обусловлено наличием в них центра организации микротрубочек, роль которого выполняет специализированная клеточная органелла -центросома. Расположенная в геометрическом центре клетки, она выполняет функции затравки для роста микротрубочек и заякоривания их минус-концов. Центросома, или центральное тельце, получила своё название именно благодаря своему расположению в клетке. Однако до сих пор механизмы, отвечающие за позиционирование центросомы в центре клетки, были неизвестны. Ясно, что корректная работа данных механизмов крайне важна для клетки, поскольку неправильное положение центросомы неизбежно привнесёт асимметрию в систему микротрубочек, что не может не сказаться на эффективности внутриклеточного транспорта органелл.

Эффективный внутриклеточный транспорт невозможен также и в том случае, если нарушены механизмы затравки и(или) заякоривания микротрубочек на центросоме, поскольку в данном случае микротрубочки, выполняющие функции «рельс» для перевозки различных грузов, утратят своё упорядоченное расположение. Хорошо известно, что основным белком, ответственным за нуклеацию микротрубочек на центросоме, является у-тубулин; однако был опубликован ряд работ, показывающих, что дисфункция некоторых других белков с центросомной локализацией ведёт к утрате центросомой своих функций центра организации микротрубочек. По-видимому, для нормального функционирования центросомы в качестве центра организации микротрубочек необходима согласованная работа целого ряда белков, локализованных на ней.

Хотя определённые клеточные процессы, такие как внутриклеточный транспорт и передача сигнала, нарушаются в случае нарушения радиальной системы микротрубочек, неясно, какие ещё процессы в клетке затрагиваются при этом. В частности, роль микротрубочек в таком сложном многоступенчатом процессе, как клеточная локомоция, до сих пор неясна. Некоторые типы клеток (например, кератоциты рыб или лейкоциты) могут передвигаться по субстрату и после экспериментального разрушения микротрубочек (Zigmond et al, 1981). Однако фибробласты с экспериментально разрушенными микротрубочками способны лишь к хаотической псевдоподиальной активности, но не к направленному передвижению (Vasiliev, Gelfand, 1977; Vasiliev, 1982). Представляется интересным изучить влияние хаотизации системы микротрубочек клеток на их способность перемещаться по субстрату.

2.РБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Заключение диссертации по теме «Гистология, цитология, клеточная биология», Бураков, Антон Владимирович

6. выводы.

1. В неподвижных клетках млекопитающих позиция центросомы в геометрическом центре клетки обусловлена работой актомиозиновой системы и цитоплазматического динеина.

2. При центрировании центросомы динеин прилагает тянущее усилие к микротрубочкам, отходящим от центросомы. Активность динеина в этом случае регулируется малой ГТФазой Cdc42.

3. Работа центрирующих центросому механизмов не зависит от наличия ядра в клетке.

4. Показано, что ингибирование активности серин-треониновой протеинкиназы LOSK приводит к подавлению нуклеирующей активности центросомы и к хаотизации системы микротрубочек клетки.

5. Установлен факт направленного движения цитопластов после удаления из них центросомы, несмотря на то, что система микротрубочек в них утрачивала своё классическое звездообразное строение и была хаотичной.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Бураков, Антон Владимирович, 2003 год

1. Абумуслимов С.С., Надеждина Е.С., Ченцов Ю.С. Морфогенез центросомы в раннем развитии мышей: иммунофлуоресцентное исследование с помощью антител к антигену центриолей // Цитология. 1996. т.38. №1. с.5-13

2. Воробьёв И.А., Надеждина Е.С. Итоги науки и техники. Общие проблемы физ.-хим. биологии.//Москва:ВИНИТИ 1987. 160с

3. Григорьев И.С., Воробьёв И.А. Организация микротрубочек в ламелле фибробластоподобных клеток // В кн.: Тр. конф. «Цитоскелет и клеточная регуляция». Пущино. 2000. с.13.

4. Григорьев И.С., Чернобельская А.А. и Воробьёв И.А. Нокодазол, винбластин и таксол в низких концентрациях ингибируют движение фибробластов и сальтаторные движения органелл // Биол. мембраны. 1999. №13. с.23-48

5. Зиновкина Л.А., Полтараус А.Б., Соловьянова О.Б., Надеждина Е.С. Предполагаемая новая протеинкиназа клеток млекопитающих, ассоциированная с микротрубочками // Молекулярная биология. 1998. т.32. №2. с341-348

6. Зиновкина Л.А., Надеждина Е.С. Центросомные белки: обзор // Биохимия. 1996. №61. с.1347-1365

7. Надеждина Е.С., Зиновкина Л.А. Регуляция системы микротрубочек животных клеток//Успехи биологической химии. 1999. №39. с.187-224

8. Надеждина Е.С., Зиновкина Л.А., Файс Д. и Ченцов Ю.С. Сперматозоиды вьюна Misgurnus fossilis как объект для идентификации новых белков центросомы // Онтогенез. 2001. т.32. №1. с.41-50

9. Узбеков Р.Э., Воробьёв И.А. и Драчёв В.А. Влияние лазерного микрооблучения клеточного центра на подвижность нейтрофилов // Цитология. 1989. т.31. №8. с.874-881

10. Ahmad F.J., Yu W., McNally F.J. and Baas P.W. An essential role for katanin in severing microtubules in the neuron //J. Cell Biol. 1999. Vol.145. p.305-315

11. AIlenW.E., Zicha D., Ridley A.J., Jones G.E. A role for Cdc42 in macrophage chemotaxis // J.Cell Biol. 1998. Vol.141. №5. pi 147-57

12. Andersen S.S.L. Spindle assembly and the art of regulating microtubule dynamics by MAPs and Stathmin/Op 18// Trends Cell Biol. 2000. Vol.10, p.261-267

13. Andersen S.S.L. Xenopus interphase and mitotic microtubule-associated proteins differentially suppress microtubule dynamics in vitro // Cell Motil. Cytoskeleton. 1998. Vol.41, p.202-213

14. Andersen S.S., Karsenti E. XMAP310: a Xenopus rescue-promoting factor localized to the mitotic spindle //J. Cell. Biol. 1997. Vol.139. №4. p.975-83.

15. Andersen S.S.L. and Wittmann T. Toward reconstitution of in vivo microtubule dynamics in vitro // BioEssays. 2002. Vol.24, p.305-307

16. Andreassen P.R., Lohez O.D., Lacroix F.B. and Margolis R.L. Tetraploid state induces p53-dependent arrest of nontransformed mammalian cells in G1 // Mol. Biol. Cell. 2001. Vol.12, p.1315-1328

17. Balczon R., Varden C.E. and Schroer T.A. Role for microtubules in centrosome doubling in Chinese hamster ovary cells // Cell Motil. Cytoskel. 1999. Vol.42, p.60-72

18. Bassel G.J., Zhang H., Byrd A.L., Femino A.M., Singer R.H., Taneja K.L., Lifshitz L.M., Herman I.M. and Kosik K.S. Sorting of beta-actin mRNA and protein to neurites and growth clones in culture//J. Neurosci. 1998. Vol.18, p.251-256

19. Belmont L.D., Mitchison T.J. Identification of a protein that interacts with tubulin dimers and increases the catastrophe rate of microtubules // Cell. 1996. Vol. 84. №4. p.623-31.

20. Bergmann J.E., Kupfer A. and Singer S.J. Membrane insertion at the leading edge of motile fibroblasts // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1983. Vol.80, p.1367-1371

21. Berrueta, L., Tirnauer, J.S., Schuyler, S.C., Pellman, D. and Bierer, B.E. The APC-associated protein EB1 associates with components of the dynactin complex and cytoplasmic dynein intermediate chain // 1999. Curr. Biol. Vol.9, p.425-428.

22. Blangy A., Arnaud L., Nigg E.A. Phosphorylation by p34cdc2 protein kinase regulates binding of the kinesin-related motor HsEg5 to the dynactin subunit pi50 // J. Biol. Chem. 1997. Vol.272. №31. p. 19418-24.

23. Blangy A., Lane H.A., d'Herin P., Harper M., Kress M., Nigg E.A. Phosphorylation by p34cdc2 regulates spindle association of human Eg5, a kinesin-related motor essential for bipolar spindle formation in vivo // Cell. 1995. Vol.83. №7. p.l 159-69.

24. Blocker A., Griffiths G., Olivo J.C., Hyman A.A., Severin F.F. A role for microtubule dynamics in phagosome movement // J. Cell Sci. 1998. Vol.11 l(Pt3). p.303-12.

25. Bobinnec Y., Khodjakov A., Mir L.M., Rieder C.L., Edde В., Bornens M. Centriole disassembly in vivo and its effect on centrosome structure and function in vertebrate cells // J. Cell Biol. 1998. Vol.143, p.1575-1589

26. Boleti H., Karsenti E., Vernos I. Xklp2, a novel Xenopus centrosomal kinesin-like protein required for centrosome separation during mitosis // Cell. 1996. Vol.84. №1. p.49-59.

27. Bouckson-Castaing V., Moudjou M., Ferguson D.J., Mucklow S., Belkaid Y., Milon G., Crocker P.R. Molecular characterisation of ninein, a new coiled-coil protein of the centrosome // J. Cell Sci. 1996. Vol.l09(Ptl). p.179-90.

28. Brown C.R., Doxsey S.J., Hong-Brown L.Q., Martin R.L., Welch W.J. Molecular chaperones and the centrosome. A role for TCP-1 in microtubule nucleation // J. Biol. Chem. 1996. Vol.271. №2. p.824-32.

29. Bu W. and Su L.K. Regulation of microtubule assembly by human EB1 family proteins // Oncogene. 2001. Vol.20, p.3185-3192.

30. Buendia В., Draetta G. and Karsenti E. Regulation of the microtubule nucleating activity of centrosomes in Xenopus egg extracts: role of cyclin A-associated protein kinase // J. Cell Biol. 1992. Vol.116, p.1431-1442.

31. Bulinski J.C., McGraw Т.Е., Gruber D., Nguyen H.L., Sheetz M.P.R. Overexpression of MAP4 inhibits organelle motility and trafficking in vivo // J. Cell Sci. 1997. Vol.110(Pt 24). p.3055-64.

32. Burkhardt J.K., Echeverri C.J., Nilsson T. and Vallee R.B. Overexpression of dynactin complexdisrupts dynein-dependent maintenance of membrane organelle distribution // J. Cell Biol. 1997. Vol.139, p.469-484

33. Caplow M., Shanks J. Evidence that a single monolayer tubulin-GTP cap is both necessary and sufficient to stabilize microtubules //Mol. Biol. Cell. 1996. Vol.7. №4. p.663-75.

34. Cassimeris L., Gard D., Tran P.T., Erickson H.P. XMAP215 is a long thin molecule that does not increase microtubule stiffness // J. Cell Sci. 2001. Vol.114. p.3025-3033

35. Centonze V.E. and Borisy G.G. Nucleation of microtubules from mitotic centrosomes is modulated by a phosphorylated epitope// J. Cell Sci. 1990. Vol.95, p.405-411.

36. Chapin S.J., Bulinski J.C. Non-neuronal 210 x 10(3) Mr microtubule-associated protein (MAP4) contains a domain homologous to the microtubule-binding domains of neuronal MAP2 and tau//J. Cell Sci. 1991. Vol.98(Pt 1). p.27-36.

37. Charrasse S., Schroeder M., Gauthier-Rouviere C., Ango F., Cassimeris L., Gard D.L., Larroque C. The TOGp protein is a new human microtubule-associated protein homologous to the Xenopus XMAP215 // J Cel 1 Sci. 1998. Vol. 111 (Pt 10). p. 1371 -83.

38. Chretien D., Buendia В., Fuller S.D. and Karsenti E. Reconstruction of the centrosome cycle from electron micrographs//J. Struct. Biol. 1997. Vol.120, p.l 17-133

39. Compton D. A.,Cleveland D.W. NuMA is required for the proper completion of mitosis // J .Cel I Biol. 1993. Vol.120, p.947-957

40. Cook T.A., Nagasaki Т., Gundersen G.G. Rho guanosine triphosphatase mediates the selective stabilization of microtubules induced by lysophosphatidic acid // J Cell Biol. 1998. Vol.141. №1.р.175-85.

41. Cramer L.P. Molecular mechanism of actin-dependent retrograde flow in lamellipodia of motile cells // Front. Biosci. 1997. Vol.2. p.d260-d270

42. Dammemrmann A. and Merdes A. Assembly of centrosomal proteins and microtubule organization depends on PCM-1 //J. Cell Biol. 2002. Vol.159. №2. p.255-66.

43. Davis A., Sage C.R., Dougherty C.A., Farrell K.W. Microtubule dynamics modulated by guanosine triphosphate hydrolysis activity of beta-tubulin // Science. 1994. Vol.264(5160) p.839-42.

44. Desai A., Verma S., Mitchison T.J. and Walczak C.E. Kin I kinesins are microtubule-destabilizing enzymes//Cell. 1999. Vol.96, p.69-78

45. Detraves C., Mazarguil H., Lajoie-Mazenc I., Julian M., Raynaud-Messina В., Wright M. Protein complexes containing gamma-tubulin are present in mammalian brain microtubule protein preparations//Cell Motil. Cytoskeleton. 1997. Vol.36. №2. p.179-89.

46. Diaz-Nido J. and Avila J. Characterization of proteins immunologically related to brain microtubule-associated protein MAP-IB in non-neural cells // J. Cell Sci. 1989. Vol.92. p.607-620.

47. Dogterom M., Yurke B. Measurement of the force-velocity relation for growing microtubules // Science. 1997. Vol.278(5339). p.856-60.

48. Dominguez J.E., Buendia В., Lopez-Otin C., Antony C., Karsenti E., Avila J. A protein related to brain microtubule-associated protein MAP1B is a component of the mammalian centrosome//J. Cell Sci. 1994. Vol.l07(Pt2). p.601-11.

49. Donaldson M.M., Tavares A.A., Ohkura H., Deak P. and Glover D.M. Metaphase arrest with centromere separation in polo mutants of Drosophila // J. Cell Biol. 2001. Vol.153. p.663-676

50. Downing K.H., Nogales E. Tubulin and microtubule structure // Curr. Opin. Cell Biol. 1998. Vol.10. №1. p. 16-22.

51. Doxsey S.J. Re-evaluating centrosome fynction //Nature rev. 2001. Vol.2, p.688-698

52. Doxsey S.J., Stein P., Evans L., Calarco P.D., Kirschner M. Pericentrin, a highly conserved centrosome protein involved in microtubule organization // Cell. 1994. Vol.76. №4. p.639-50.

53. Dujardin D.L. and Vallee R.B. Dynein at the cortex // Curr. Opin. Cell Biol. 2002. Vol.14. p.44-49

54. Duttaroy A., Bourbeau D., Wang X.L., Wang E. Apoptosis rate can be accelerated or decelerated by overexpression or reduction of the level of elongation factor-1 alpha // Exp. Cell Res. 1998. Vol.238. №1. p.168-76.

55. Eshel D., Urrestarazu L.A., Vissers S., Jauniaux J.-C., van Vliet-Reedijk J.C., Planta R.J. and Gibbons I.R. Cytoplasmic dynein is required for normal nuclear segregation in yeast // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1993. Vol.90, p.l 1172-11176

56. Etienne-Manneville U. and Hall A. Integrin-mediated activation of Cdc42 controls cell polarity in migrating astrocytes through PKC£//Cell. 2001. Vol.106, p.489-498

57. Euteneuer U. and Schliwa M. Persistent, directional motility of cells and cytoplasmic fragments in the absence of microtubules //Nature. 1984. Vol.310, p.58-61

58. Euteneuer U. and Schliwa M. Mechanism of centrosome repositioning during the wound response inBSC-1 cells //J. Cell Biol. 1992. Vol.116, p.l 157-1166

59. Fais D.A., Nadezhdina E.S., Chentsov Y.S. The centriolar rim. The structure that maintains the configuration of centrioles and basal bodies in the absence of their microtubules //Exp. Cell Res. 1986. Vol.164. №1. p.27-34.

60. Faivre-Moskalenko C. and Dogterom M. Dynamics of microtubule asters in microfabricated chambers: The role of catastrophes // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2002. Vol.99, p.l6788-16793

61. Feiguin F., Ferreira A., Kosik K.S. and Caceres A. Kinesin-mediated organelle translocations revealed by specific cellular manipulations // J. Cell Biol. 1994. Vol.127, p.1021-1039

62. Felix M.A., Antony C., Wright M. and Maro B. Centrosome assembly in vitro: role of gamma-tubulin recruitment in Xenopus sperm aster formation // J. Cell Biol. 1994. Vol.124. p.19-31.

63. Feng Y., Hodge D.R., Palmieri G., Chase D.L., Longo D.L., Ferris D.K. Association of polo-like kinase with a-, p- and y-tubulins in a stable complex // Biochem. J. 1999 Vol.339. p.435-442

64. Fukasawa K., Choi Т., Kuriyama R., Rulong S., Vande Woude G.F. Abnormal centrosome amplification in the absence of p53 // Science. 1996. Vol.271(5256). p.1744-7.

65. Gaglio Т., Dionne M.A., Compton D.A. Mitotic spindle poles are organized by structural and motor proteins in addition to centrosomes // J. Cell Biol. 1997. Vol.138. №5. p.1055-66.

66. Garcia-Rocha M., Avila J., Lozano J. The zeta isozyme of protein kinase С binds to tubulin through the pseudosubstrate domain//Exp. Cell Res. 1997. Vol.230. №1. p.1-8.

67. Gard D.L., Kirschner M.W. A microtubule-associated protein from Xenopus eggs that specifically promotes assembly at the plus-end //J. Cell. Biol. 1987. Vol.105, p.2203-2215

68. Gee M.A., Heuser J.E., Vallee R.B. An extended microtubule-binding structure within the dynein motor domain//Nature. 1997. Vol.390(6660). p.636-9.

69. Gergely F., Karlsson C., Still I., Cowell J., Kilmartin J. and Raff J. W. The TACC domain identifies a family of centrosomal proteins that can interact with microtubules // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2000. Vol.97, p. 14352-14357.

70. Giet R., McLean D., Descamps S., Lee M.J., Raff J.W., Prigent C. and Glover D.M. Drosophila Aurora A kinase is required to localize D-TACC to centrosomes and to regulate astral microtubules//J. Cell Biol. 2002. Vol.156, p.437-451.

71. Gill S.R., Hartwick K., Quintyne N. and Schroer T. ASCB/EMBO/H.Dudley Wright Conference. Centrosomes and Spindle Pole Bodies, Santa Cruz, California. 1997. p.34

72. Gonczy P., Pichler S., Kirkham M. and Hyman A.A. Cytoplasmic dynein is required for distinct aspects of MTOC positioning, including centrosome separation, in the one cell stage Caenorhabditis elegans embryos//J. Cell Biol. 1999. Vol.147, p.135-150

73. Goode B.L., Feinstein S.C. Identification of a novel microtubule binding and assembly domain in the developmentally regulated inter-repeat region of tau // J. Cell Biol. 1994. Vol.124. №5. p.769-82.

74. Gorgidze L.A., Vorobjev I.A. Centrosome and microtubules behavior in the cytoplasts //J. Submicrosc. Cytol. Pathol. 1995. Vol.27, p.1617-1628

75. Gould R.R., Borisy G.G. The pericentriolar material in Chinese hamster ovary cells nucleates microtubule formation //J. Cell Biol. 1990. Vol.73, p.601-615

76. Larrson N., Marklund U., Gradin H.M., Brattsand G. and Gullberg M. Control of microtubule dynamics by oncoprotein 18: dissection of the regulatory role of multisite phosphorylation during mitosis // Mol. Cell Biol. 1997. Vol.17. №9. p.5530-9

77. Gueth-Hallonet C., Antony C., Aghion J., Santa-Maria A., Lajoie-Mazenc I., Wright M., Maro B. gamma-Tubulin is present in acentriolar MTOCs during early mouse development // J. Cell Sci. 1993. Vol.l05(Pt 1). p. 157-66

78. Gunawardane R.N., Lizarraga S.B., Wiese C., Wilde A. and Zheng Y. y-tubulin complexes and their role in microtubule nucleation // Curr. Top. Dev. Biol. 2000. Vol.49. p.55-73

79. Gundersen G.G. Evolutionary conservation of microtubule-capture mechanisms // Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2002. Vol.3, p.296-304

80. Hamaguchi M.S. and Hiramoto Y. Analysis of the role of astral rays in pronuclear migration in san dollar eggs by the Colcemid-UV method // Dev. Growth Differ. 1986. Vol.28, p.143-156

81. Hamel E. Microtubule proteins // Ed. J. Avila. Boca Raton, Florida: CRC Inc. 1990. p89-191

82. Harada A., Oguchi K., Okabe S., Kuno J., Terada S., Ohshima Т., Sato-Yoshitake R., Takei Y., Noda Т., Hirokawa N. Altered microtubule organization in small-calibre axons of mice lacking tau protein//Nature. 1994. Vol.369(6480). p.488-9I.

83. Heald R., Tournebize R., Blank Т., Sandaltzopoulos R., Becker P., Hyman A., Karsenti E. Self-organization of microtubules into bipolar spindles around artificial chromosomes in Xenopus egg extracts//Nature. 1996. Vol.382(6590). p.420-5.

84. Heuer J.G., Li K., Kaufman T.C. The Drosophila homeotic target gene centrosomin (cnn) encodes a novel centrosomal protein with leucine zippers and maps to a genomic region required for midgut morphogenesis // Development. 1995. Vol.121. №11. p.3861-76.

85. Hinchcliffe E.H., Miller F.J., Cham M., Khodjakov A. and Sluder G. Requirement of a centrosomal activity for cell cycle progression through G1 into S phase // Science. 2001. Vol.291, p. 1547-1550

86. Hinchcliffe E.H., Thompson E.A., Mailer J.L. and Sluder G. Requirement of Cdk-2cyclin E activity for repeated centrosome reproduction in Xenopus egg extracts // Science. 1999. Vol.283, p.851-854

87. Hirokawa N. Kinesin and dynein superfamily proteins and the mechanism of organelle transport// Science. 1998. Vol.279(5350). p.519-26.

88. Hirokawa N., Noda Y., Okada Y. Kinesin and dynein superfamily proteins in organelle transport and cell division // Curr. Opin. Cell Biol. 1998. Vol.10. №1. p.60-73.

89. Hoock T.C., Newcomb P.M. and Herman I.M. B-Actin and its mRNA are localized at the plasma membrane and the regions of moving cytoplasm during the cellular response to injury //J. Cell Biol. 1991. Vol.112. p.653-664

90. Horwitz S.B., Shen H.J., He L., Dittmar P., Neef R., Chen J., Schubart U.K. The microtubule-destabilizing activity of metablastin (pl9) is controlled by phosphorylation // J. Biol. Chem. 1997. Vol.272. №13. p.8129-32.

91. Hotani H., Horio T. Dynamics of microtubules visualized by darkfield microscopy: treadmilling and dynamic instability // Cell Motil. Cytoskeleton. 1988. Vol.10. №1-2. p.229-36.

92. Hoyle H.D., Hutchens J.A., Turner F.R., Raff E.C. Regulation of beta-tubulin function and expression in Drosophila spermatogenesis // Dev. Genet. 1995. Vol.16. №2. p.48-70.

93. Huyett A., Kahana J., Silver P., Zeng X., Saunders W.S.R. The КагЗр and Kip2p motors function antagonistically at the spindle poles to influence cytoplasmic microtubule numbers// J. Cell Sci. 1998. Vol.11 l(Pt 3). p.295-301.

94. Hyman A.A., Karsenti E. Morphogenetic properties of microtubules and mitotic spindle assembly // Cell. 1996. Vol.84. №3. p.401-10.

95. Inoue S. and Salmon E.D. Force generation by microtubule assembly/disassembly in mitosis and related movements//Mol. Biol. Cell. 1995. Vol.6, p.1619-1640

96. Jordan M.A., Wilson L. Microtubules and actin filaments: dynamic targets for cancer chemotherapy//Curr. Opin. Cell Biol. 1998. Vol.10. №1. p. 123-30.

97. Joshi H.C., Palacios M.J., McNamara L., Cleveland D.W. Gamma-tubulin is a centrosomal protein required for cell cycle-dependent microtubule nucleation // Nature. 1992. Vol.356(6364). p.80-3.

98. Kaech S., Ludin В., Matus A. Cytoskeletal plasticity in cells expressing neuronal microtubule-associated proteins //Neuron. 1996. Vol.17. №6. p. 1189-99.

99. Karsenti E. and Vernos I. The mitotic spindle: a self-made machine // Science. 2001. Vol.294, p.543-547

100. Karsenti E., Kobayashi S., Mitchison Т., Kirschner M. Role of the centrosome in organizing the interphase microtubule array: properties of cytoplasts containing or lacking centrosomes // J. Cell Biol. 1984. Vol.98. №5. p. 1763-76.

101. Kashina A.S., Baskin R.J., Cole D.G., Wedaman K.P., Saxton W.M., Scholey J.M. A bipolar kinesin // Nature. 1996. Vol.379(6562). p.270-2.

102. Keating T.J. and Borisy G.G. Immunostructural evidence for the template mechanism of microtubule nucleation//Nature Cell Biol. 2000. Vol.2, p.352-357

103. Keating T.J., Peloquin J.G., Rodionov V.I., Momcilovic D., Borisy G.G. Microtubule release from the centrosome // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. Vol.94. №10. p.5078-83.

104. Keller P. and Simons K. Post-Golgi biosynthetic trafficking // J. Cell Sci. 1997. Vol.110. p.3001-3009

105. Khodjakov A. and Rieder C.L. Centrosomes enhance the fidelity of cytokinesis in vertebrates and are required for cell cycle progression // J. Cell Biol. 2001. Vol.153, p.237-242

106. Kinoshita K., Arnal I., Desai A., Drechsel D.N., Hyman A.A. Reconstitution of physiological microtubule dynamics using purified components // Science. 2001. Vol.294. p.1340-1313

107. Koonce M.P., Cloney R.A., Berns M.W. Laser irradiation of centrosomes in newt eosinophils: evidence of centriole role in motility// J. Cell Biol. 1984. Vol.98, p.1999-2010

108. Koonce M.P., Kohler R., Neujahr J.M., Schwartz I., Tikhonenko I. and Gerish G. Dynein motor stabilizes interphase microtubule arrays and determines centrosome position // EMBO J. 1999. Vol.18, p.6786-6792

109. Kowalski R.J., Giannakakou P., Hamel E. Activities of the microtubule-stabilizing agents epothilones A and В with purified tubulin and in cells resistant to paclitaxel (Taxol(R)) // J. Biol Chem. 1997. Vol.272. №4. p.2534-41.

110. Krendel M., Zenke F.T. and Bokoch G.M. Nucleotide exchange factor GEF-H1 mediates cross-talk between microtubules and the actin cytoskeleton // Nat. Cell Biol. 2002. Vol.4. №4. p.294-301.

111. Kronidou N.G., Sloboda R.D. Partial cloning of a squid microtubule-associated protein (MAP HI) and the identification of the microtubule binding domain // Eur. J. Biochem. 1993. Vol.211. №1-2. p. 193-204.

112. Kubo A., Sasaki H., Yuba-Kubo A., Tsukita S. and Shiina N. Centriolar satellites: molecular characterization, ATP-dependent movement toward centrioles and possible involvement iv ciliogenesis//J. Cell Biol. 1999. Vol.147, p.969-980

113. Kupfer A., Louvard D. and Singer S.J. Polarization of the Golgi apparatus and the microtubule-organizing center in cultured fibroblasts at the edge af an experimental wound // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1982. Vol.79, p.2603-2607

114. Kuriyama R. 225-KiIodaIton phosphoprotein associated with mitotic centrosomes in sea urchin eggs // Cell Motil. Cytoskeleton. 1989. Vol.12, p.90-103.

115. Kyhse-Andersen J. Electroblotting of multiple gels: a simple apparatus without buffer tank for rapid transfer of proteins from polyacrylamide to nitrocellulose // J. Biochem. Biophys. Methods. 1984. Vol.10, p.203-9

116. Lacey K.R., Jackson P.K. and Stearns T. Cyclin-dependent kinase control of centrosome duplication//Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1999. Vol.96, p.2817-2822

117. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 //Nature. 1970. Vol.227, p.680-5

118. Le P.U., Nguyen T.N., Drolet-Savoie P., Leclerc N. and Nabi I.R. Increased P-actin expression in an invasive Moloney sarcoma virus-transformed cell variant concentrates to the tips of multiple pseudopodia//Cancer Res. 1998. Vol.58, p.1631-1635

119. Leask A., Stearns T. Expression of amino- and carboxyl-terminal gamma- and alpha-tubulin mutants in cultured epithelial cells //J. Biol. Chem. 1998. Vol.273. №5. p.2661-8.

120. Lee G. Non-motor microtubule-associated proteins // Curr. Opin. Cell Biol. 1993. Vol.5. №1. p.88-94.

121. Li Q., Joshi H.C. Gamma-tubulin is a minus end-specific microtubule binding protein // J. Cell Biol. 1995. Vol.131. №1. p.207-14.

122. Li K., Xu E.Y., Cecil J.K., Turner F.R., Megraw T.L., Kaufman T.C. Drosophila centrosomin protein is required for male meiosis and assembly of the flagellar axoneme // J. Cell Biol. 1998. Vol.141. №2. p.455-67.

123. Li Y.-Y., Yeh E., Hays T. and Bloom K. Disruption of mitotic spindle orientation in a yeast dynein mutant // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1993. Vol.90, p. 10096-10100

124. Ligon L.A., Karki S., Tokito M. and Holzbaur E.L. Dynein binds to beta-catenin and may tether microtubules at adherens junctions //Nat. Cell Biol. 2001. Vol.3, p.913-917.

125. Lingle W.L., Lutz W.H., Ingle J.N., Maihle N.J., Salisbury J.L. Centrosome hypertrophy in human breast tumors: implications for genomic stability and cell polarity // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998. Vol.95. №6. p.2950-5.

126. Lombillo V.A., Stewart R.J., Mcintosh J.R. Minus-end-directed motion of kinesin-coated microspheres driven by microtubule depolymerization //Nature. 1995. Vol.373(6510). p.161-4.

127. Maccioni R.B., Cambiazo V. Role of microtubule-associated proteins in the control of microtubule assembly //Physiol. Rev. 1995. Vol.75. №4. p.835-64.

128. Mandelkow E., Mandelkow E.M. Microtubules and microtubule-associated proteins // Curr. Opin. Cell Biol. 1995. Vol.7. №1. p.72-81.

129. Mandell J.W., Banker G.A. The microtubule cytoskeleton and the development of neuronal polarity//Neurobiol. Aging. 1995. Vol.16. №3. p.229-37; discussion 238.

130. Maniotis A., Schliwa M. Microsurgical removal of centrosomes blocks cell reproduction and centriole generation in BSC-1 cells // Cell. 1991. Vol.67. №3. p.495-504.

131. Marcus P.I. Dynamics of surface modification in myxovirus-infected cells // Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol. 1962. Vol.27, p.351-365

132. Martin O.C., Gunawardane R.N., Iwamatsu A., Zheng Y. Xgripl09: a gamma tubulin-associated protein with an essential role in gamma tubulin ring complex (gammaTuRC) assembly and centrosome function // J. Cell Biol. 1998. Vol.141. №3. p.675-87.

133. Masson D., Kreis Т.Е. Identification and molecular characterization of E-MAP-115, a novel microtubule-associated protein predominantly expressed in epithelial cells // J. Cell Biol. 1993. Vol.123. №2. p.357-71.

134. Matsudaira P. Actin crosslinking proteins at the leading edge // Semin. Cell Biol. 1994. Vol.5, p.165-174

135. Matthews L.R., Carter P., Thierry-Mieg D., Kemphues K. ZYG-9, a Caenorhabditis elegans protein required for microtubule organization and function, is a component of meiotic and mitotic spindle poles //J. Cell Biol. 1998. Vol.141. №5. p. 1159-68.

136. McBeath E., Fujiwara K. Microtubule detachment from the microtubule-organizing center as a key event in the complete turnover of microtubules in cells // Eur. J. Cell Biol. 1990. Vol.52. №l.p.l-16.

137. McNally F.J. Modulation of microtubule dynamics during the cell cycle // Curr. Opin. Cell Biol. 1996. Vol.8. №1. p.23-9.

138. McNally F.J., Okawa K., Iwamatsu A., Vale R.D. Katanin, the microtubule-severing ATPase, is concentrated at centrosomes //J. Cell Sci. 1996. Vol.l09(Pt 3). p.561-7.

139. Melander Gradin H., Larsson N., Chatila T.A. and Gullberg M. Regulation of microtubule dynamics by Ca2+/calmoduIin-dependent kinase IV/Gr-dependent phosphorylation of oncoprotein 18 //Mol. Cell Biol. 1997. Vol.17. №6. p.3459-67.r

140. Meraldi P. and Nigg E.A. The centrosome cycle//FEBS Lett. 2002. Vol.521, p.9-13.

141. Merdes A., Cleveland D.W. Pathways of spindle pole formation: different mechanisms; conserved components//J. Cell Biol. 1997. Vol.138. №5. p.953-6.

142. Merdes A., Heald R., Samejima K., Earnshaw W.C. and Cleveland D.W. Formation of spindle poles by dynein/dynactin-dependent transport of NuMA // J. Cell Biol. 2000. Vol.149. p.851-862

143. Merdes A., Ramyar K., Vechio J.D. and Cleveland D.W. A complex of NuMA and cytoplasmic dynein is essential for mitotic spindle assembly//Cell. 1996. Vol.87, p.447-458

144. Middendorp S., Paoletti A., Schiebel E., Bornens M. Identification of a new mammalian centrin gene, more closely related to Saccharomyces cerevisiae CDC31 gene // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. Vol.94. №17. p.9141-6.

145. Mikhailov A.V. and Gundersen G.G. Centripetal transport of microtubules in motile cells //Cell Motil. Cytoskeleton 1995. Vol.32, p.173-181

146. Mimori-Kiyosue Y., Shiina N. and Tsukita S. The dynamic behavior of the APC-binding protein EB1 on the distal ends of microtubules //Curr. Biol. 2000. Vol.10, p.865-868.

147. Mitchison T. and Salmon E.D. Poleward kinetochore movement occurs during both metaphase and anaphase-A in newt lung cells mitosis //J. Cell Biol. 1992. Vol.119. p.569-582

148. Mogensen M.M. Microtubule release and capture in epithelial cells // Biol. Cell 1999. Vol.91, p.331-341

149. Mogensen M.M., Malik A., Piel M., Bouckson-Castaing V. and Bornens M. Microtubule minus-end anchorage at centrosomal and non-centrosomal sites: the role of ninein // J. Cell Sci. 2000. Vol.113. p.3013-3023

150. Moritz M., Braunfeld M.B., Guenebaut V., Heuser J. and Agard D.A. Structure of the y-tubulin ring complex: a template for microtubule nucleation //Nature. Cell Biol. 2000. Vol.2. p.365-370

151. Moritz M., Braunfeld M.B., Sedat J.W., Alberts В., Agard D.A. Microtubule nucleation by gamma-tubulin-containing rings in the centrosome //Nature. 1995. VoI.378(6557). p.638-40.

152. Moritz M., Zheng Y., Alberts B.M. and Oegema K. Recruitment of the y-tubulin ring complex to Drosophila salt-stripped centrosome scaffolds // J. Cell Biol. 1998. Vol.142. p.775-786

153. Moudjou M., Bordes N., Paintrand M., Bornens M. gamma-Tubulin in mammalian cells: the centrosomal and the cytosolic forms // J. Cell Sci. 1996. Vol.l09(Pt 4). p.875-87.

154. Mounier N., Perriard J.-C., Gabbiani G. and Chaponnier C. Transfected muscle and non-muscle actins are differentially sorted by cultured smooth muscle and non-muscle cells // J. Cell Sci. 1997. Vol.110. p.839-846

155. Murphy S.M., Urbani L., Stearns T. The mammalian gamma-tubulin complex contains homologues of the yeast spindle pole body components spc97p and spc98p // J. Cell Biol. 1998. Vol.141. №3. p.663-74.

156. Nakamura M., Zhou X.Z and Lu K.P. Critical role for the EB1 and APC interaction in the regulation of microtubule polymerization // Curr. Biol. 2001. Vol.11. p.1062-1067.

157. Nedelec F.J., Surrey Т., Maggs A.C., Leibler S. Self-organization of microtubules and motors //Nature. 1997. Vol.389(6648). p.305-8.

158. Nguyen H.L., Chari S., Gruber D., Lue C.M., Chapin S.J., Bulinski J.C. Overexpression of full- or partial-length MAP4 stabilizes microtubules and alters cell growth // J. Cell Sci. 1997. Vol.110(Pt 2). p.281-94.

159. Nigg E.A. Cell division mitotic kinases as regulators of cell division and its checkpoints //Nature Rev. Mol. Cell Biol. 2001. Vol.2, p.21-32

160. Nogales E., Wolf S.G., Downing K.H. Structure of the alpha beta tubulin dimer by electron crystallography//Nature. 1998. Vol.391(6663). p.199-203. Erratum in: Nature 1998 May 14;393(6681): 191.

161. Norrander J.M., Amos L.A., Linck R.W. Primary structure oftektin Al: comparison with intermediate-filament proteins and a model for its association with tubulin // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1992. Vol.89. №18. p.8567-71.

162. Oakley C.E., Oakley B.R. Identification of gamma-tubulin, a new member of the tubulin superfamily encoded by mipA gene of Aspergillus nidulans // Nature. 1989. Vol.338(6217). p.662-4.

163. O'Connell C.B. and Wang Y.-I. Mammalian spindle orientation and position respond to changes in cell shape in a dynein-dependent fashion // Mol. Biol. Cell. 2000. Vol.11. p. 17651774

164. Oegema K., Marshall W.F., Sedat J.W., Alberts B.M. Two proteins that cycle asynchronously between centrosomes and nuclear structures: Drosophila CP60 and CP 190 // J. Cell Sci. 1997. Vol.110(Pt 14). p. 1573-83.

165. Ohta Т., Ryu J.-H., Essner R. and Kuriyama R. ASCB/EMBO/H.Dudley Wright Conference. Centrosomes and Spindle Pole Bodies, Santa Cruz, California 1997. p.17

166. Panda D., Miller H.P., Islam K., Wilson L. Stabilization of microtubule dynamics by estramustine by binding to a novel site in tubulin: a possible mechanistic basis for its antitumor action // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. Vol.94. №20. p. 10560-4

167. Panda D., Himes R.H., Moore R.E., Wilson L., Jordan M.A. Mechanism of action of the unusually potent microtubule inhibitor cryptophycin I // Biochemistry. 1997. Vol.36(42). p.I2948-53

168. Piel M., Meyer P., Khodjakov A., Rieder C.L. and Bornens M. The respective contributions of the mother and daughter centrioles to centrosome activity and behavior in vertebrate cells//J. Cell Biol. 2000. Vol.149, p.317-330

169. Piel M., Nordberg J., Euteneuer U. and Bornens M. Centrosome-dependent exit of cytokinesis in animal cells // Science. 2001. Vol.291, p. 1550-1553

170. Plessmann U., Weber K. Mammalian sperm tubulin: an exceptionally large number of variants based on several posttranslational modifications // J. Protein Chem. 1997. Vol.16. №5. p.385-90.

171. Ploubidou A., Moreau V., Ashman K., Reckmann I., Gonzalez C. and Way M. Vaccinia virus infection disrupts microtubule organization and centrosome function // EMBO J. 2000. Vol.19, p.3932-3944.

172. Popov A.V., Pozniakovsky A., Amal I., Antony C., Ashford A.J., Kinoshita K., Tournebize R., Hyman A.A., Karsenti E. XMAP215 regulates microtubule dynamics through two distinct domains// EMBO J. 2001. Vol.20. №3. p.397-410.

173. Popov A.V., Severin F. and Karsenti E. XMAP215 is required for the microtubule-nucleating activity of centrosomes //Curr. Biol. 2002. Vol.12, p.1326-1330.

174. Popova J.S., Garrison J.C., Rhee S.G., Rasenick M.M. Tubulin, Gq, and phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate interact to regulate phospholipase С betal signaling // J. Biol. Chem. 1997. Vol.272. №10. p.6760-5.

175. Purchit A., Tynan S.H., Vallee R. and Doxsey S.J. Direct interaction of pericentrin with cytoplasmic dynein light intermediate chain contributes to mitotic spindle organization // J. Cell Biol. 1999. Vol.147, p.481-491

176. Quintyne N.J., Gill S.R., Eckley D.M., Crego C.L., Compton D.A. and Schroer T.A. Dynactin is required for microtubule anchoring at centrosomes // J. Cell Biol. 1999. Vol.147. p.321-334.

177. Quintyne N.J. and Schroer T.A. Distinct cell cycle-dependent roles for dynactin and dynein at centrosomes // J. Cell Biol. 2002. Vol.159, p.245-254.

178. Rai S.S., Wolff J. The С terminus of beta-tubulin regulates vinblastine-induced tubulin polymerization // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998. Vol.95. №8. p.4253-7.

179. Rattner J.B. and Bazett-Jones D.P. Electron spectroscopic imaging of the centrosome in cells of the Indian muntjac // J. Cell Sci. 1988. Vol.91, p.5-11.

180. Rodionov V.I., Borisy G.G. Microtubule treadmilling in vivo // Science. 1997. VoI.275(5297). p.215-8.a

181. Rodionov V.I., Borisy G.G. Self-centring activity of cytoplasm // Nature. 1997. Vol.386(6621). p. 170-3.b

182. Rodionov V.I., Borisy G.G. Self-centering in cytoplasmic fragments of melanophores // Mol. Biol. Cell. 1998. Vol.9. p.I6I3-1615

183. Rodionov V.I., Gyoeva F.K., Kashina A.S., Kuznetsov S.A., Gelfand V.I. Microtubule-associated proteins and microtubule-based translocators have different binding sites on tubulin molecule // J. Biol. Chem. 1990. Vol.265. №10. p.5702-7.

184. Rodionov V., Nadezhdina E. and Borisy G. Centrosomal control of microtubule dynamics // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1999. Vol.96, p. 115-120

185. Rodriguez-Boulan E. and Powell S.K. Polarity of epithelial and neuronal cells // Annu. Rev. Cell Biol. 1992. Vol.8, p.395-427

186. Salmon W.C., Adams M.S. and Waterman-Storer C.M. Dual-wavelength fluorescent speckle microscopy reveals coupling of microtubule and actin movements in migrating cells // J. Cell Biol. 2002. Vol.158, p.31-37

187. Sanders M.A., Salisbury J.L. Centrin plays an essential role in microtubule severing during flagellar excision in Chlamydomonas reinhardtii II J. Cell Biol. 1994. Vol.124. №5. p.795-805.

188. Sapir Т., Elbaum M., Reiner O. Reduction of microtubule catastrophe events by LIS1, platelet-activating factor acetylhydrolase subunit // EMBO J. 1997. Vol. 16(23). p.6977-84.

189. Saredi A., Howard L., Compton D.A. Phosphorylation regulates the assembly of NuMA in a mammalian mitotic extract//J. Cell Sci. 1997. Vol.110(Ptl 1). p. 1287-97.

190. Sawin K.E., LeGuellec K., Philippe M., Mitchison T.J. Mitotic spindle organization by a plus-end-directed microtubule motor //Nature. 1992. Vol.359(6395). p.540-3.

191. Schiebel E. y-tubulin complexes: binding to the centrosome, regulation and microtubule nucleation // Curr. Opin. Cell Biol. 2000. Vol.12, p.l 13-118

192. Schroer T.A., Sheetz M.P. Two activators of microtubule-based vesicle transport // J. Cell Biol. 1991. Vol.115. №5. p.1309-18.

193. Severin F.F., Shanina N.A., Kuznetsov S.A., Gelfand V.I. MAP2-mediated binding of chromaffin granules to microtubules//FEBS Lett. 1991. Vol.282. №1. p.65-8. .

194. Severin F.F., Shanina N.A., Shevchenko A., Solovyanova O.B., Koretsky V.V., Nadezhdina E.S. A major 170 kDa protein associated with bovine adrenal medulla microtubules: a member of the centrosomin family? // FEBS Lett. 1997. Vol.420. №2-3. p.125-8.

195. Severin F.F., Sorger P.K., Hyman A.A. Kinetochores distinguish GTP from GDP forms of the microtubule lattice //Nature. 1997. Vol.388(6645). p.888-91.

196. Shiina N., Gotoh Y„ Kubomura N., Iwamatsu A., Nishida E. Microtubule severing by elongation factor 1 alpha//Science. 1994. Vol.266(5183). p.282-5.

197. Shu H.B., Joshi H.C. Gamma-tubulin can both nucleate microtubule assembly and self-assemble into novel tubular structures in mammalian cells // J. Cell Biol. 1995. Vol.130. №5. p.l 137-47.

198. Sibon O.C., Kelkar A., Lemstra W. and Theurkauf W.E. DNA-replication/DNA-damage-dependent centrosome inactivation in Drosophila embryos // Nature Cell Biol. 2000. Vol.2. p.90-95

199. Skop A.R. and White J.G. The dynactin complex is required for cleavage plane specification in early Caenorhabditis elegans embryos // Curr. Biol. 1998. Vol.8, p.l 110-1116

200. Spittle C., Charrasse S., Larroque C., Cassimeris L. The interaction of TOGp with microtubules and tubulin//J. Biol. Chem. 2000. Vol.275, p.20748-20753

201. Stearns Т., Kirschner M. In vitro reconstitution of centrosome assembly and function: the central role of gamma-tubulin // Cell. 1994. Vol.76. №4. p.623-37.

202. Stearns T. and Kirschner M. Reconstitution of centrosome assembly, role of y-tubulin // Cell. 1994. Vol.76, p.623-637

203. Steffen W., Fajer E.A., Linck R.W. Centrosomal components immunologically related to tektins from ciliary and flagellar microtubules//J. Cell Sci. 1994. Vol.l07(Pt 8). p.2095-105.

204. Stevenson V.A., Kramer J., Kuhn J. and Theurkauf W.E. Centrosomes and the Scrambled protein coordinate microtubule-independent actin reorganization // Nature Cell Biol. 2001. Vol.3, p.68-75

205. Surrey Т., Elowitz M.B., Wolf P.E., Yang F„ Nedelec F„ Shokat K., Leibler S. Chromophore-assisted light inactivation and self-organization of microtubules and motors // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998. Vol.95. №8. p.4293-8.

206. Takemura R., Okabe S., Umeyama T. and Hirokawa N. Polarity orientation and assembly process of microtubule bundles in nocodazole-treated, MAP2c-transfected COS cells//Mol. Biol. Cell. 1995. Vol.6, p.981-996.

207. Takei Y., Kondo S., Harada A., Inomata S., Noda Т., Hirokawa N. Delayed development of nervous system in mice homozygous for disrupted microtubule-associated protein IB (MAPIB) gene//J. Cell Biol. 1997. Vol.137. №7. p.1615-26.

208. Tang Т.К., Tang C.J., Chao Y.J., Wu C.W. Nuclear mitotic apparatus protein (NuMA): spindle association, nuclear targeting and differential subcellular localization of various NuMA isoforms//J. Cell Sci. 1994. Vol.l07(Pt 6). p.1389-402.

209. Tassin A.M., Celati C., Moudjou M., Bornens M. Characterization of the human homologue of the yeast spc98p and its association with gamma-tubulin // J. Cell Biol. 1998. Vol.141. №3.p.689-701.

210. Tran P.T., Marsh L., Doye V., Inoue S. and Chang F. A mechanism of nuclear positioning in fission yeast based on microtubule pushing // J. Cell Biol. 2001. Vol.153. p.379-411

211. Tran P.T., Walker R.A., Salmon E.D. A metastable intermediate state of microtubule dynamic instability that differs significantly between plus and minus ends // J. Cell Biol. 1997. Vol.138. №1.р.105-17.

212. Tucker C., Goldstein L.S. Probing the kinesin-microtubule interaction // J. Biol Chem. 1997. Vol.272. №14. p.9481-8.

213. Tynan S.H., Purohit A., Doxsey S.J. and Vallee R.B. Light intermediate chain 1 defines a functional subfraction of cytoplasmic dynein which binds to pericentrin // J. Biol. Chem. 2000. Vol.275, p.32763-32768

214. Vandre D.D., Feng Y. and Ding M. Cell cycle-dependent phosphorylation of centrosomes: localization of phosphopeptide specific antibodies to the centrosome // Microsc. Res. Tech. 2000. Vol.49, p.458-466.

215. Vasiliev J.M. Spreading and locomotion of tissue cells: factors controlling the disruption of pseudopods // Phil. Trans. Roy. Soc. London. 1982. Vol.299, p. 159-167

216. Vasiliev J.M. Polarization of pseudopodial activities: cytoskeletal mechanisms // J. Cell Sci. 1991. Vol.98, p.1-4

217. Vasiliev J.M. and Gelfand I.M. Effects of colcemid on morphogenetic processes and locomotion of fibroblasts //Cell Motility. 1976.279-301

218. Vasiliev J.M. and Gelfand I.M. Mechanisms of morphogenesis in cell cultures // Int. Rev. Cytol. 1977. Vol.50, p.159-274

219. Vasquez R.J., Gard D.L., Cassimeris L. Phosphorylation by CDK1 regulates XMAP215 function in vitro // Cell Motil. Cytoskeleton. 1999. Vol.43, p.310-321

220. Vasquez R.J., Gard D.L., Cassimeris L. XMAP from Xenopus eggs promotes rapid plus end assembly of microtubules and rapid microtubule polymer turnover // J. Cell Biol. 1994. Vol.127. №4. p.985-93.

221. Vasquez R.J., Howell В., Yvon A.-M.C., Wadsworth P. and Cassimeris L. Nanomolar concentrations of nocodazole alter microtubule dynamic instability in vivo and in vitro // Mol. Biol. Cell. 1997. Vol.8, p.973-985

222. Vaughan P.S., Miura P., Henderson M., Byrne B. and Vaughan K.T. A role for regulated binding of pl50(Glued) to microtubule plus ends in organelle transport // J. Cell Biol. 2002. Vol.158, p.305-319.

223. Vogel J.M., Steams Т., Rieder C. and Palazzo R.E. Centrosomes isolated from Spistula solodissima oocytes contain rings and an unusual stoichiometric ratio of a/p-tubulin // J. Cell Biol. 1997. Vol.137, p. 193-202

224. Vorobjev I.A., Chentsov Y.S. The dynamics of reconstitution of microtubules around the cell center after cooling // Eur J Cell Biol. 1983. Vol.30. №2. p.149-53.

225. Vorobjev I.A., Svitkina T.M., Borisy G.G. Cytoplasmic assembly of microtubules in cultured cells // J. Cell Sci. 1997. Vol.110(Pt 21). p.2635-45.

226. Wade R.H., Hyman A.A. Microtubule structure and dynamics // Curr. Opin. Cell Biol. 1997. Vol.9. №1. p. 12-7.

227. Wadsworth P. Regional regulation of microtubule dynamics in polarized, motile cells // Cell Motil. Cytoskeleton. 1999. Vol.42, p.48-59

228. Walczak C.E., Mitchison T.J., Desai A. XKCM1: a Xenopus kinesin-related protein that regulates microtubule dynamics during mitotic spindle assembly // Cell. 1996. Vol.84. №1. p.37-47.

229. Wang X.M., Peloquin J.G., Zhai Y., Bulinski J.C., Borisy G.G. Removal of MAP4 from microtubules in vivo produces no observable phenotype at the cellular level // J. Cell Biol. 1996. Vol. 132. №3. p.345-57.

230. Waterman-Storer C.M., Salmon E.D. Positive feedback interactions between microtubule and actin dynamics during cell motility// Curr. Opin. Cell Biol. 1999. Vol.11. p.61-67

231. Waterman-Storer C.M., Worthylake R.A., Liu B.P., Burridge K. and Salmon E.D. Microtubule growth activates Racl to promote lamellipodial protrusion in fibroblasts //Nature Cell Biol. 1999. Vol.1, p.45-50

232. Wheatley D.N. The Centriole: A Central Enigma of Cell Biology // Elsevier Biomedical Press, Amsterdam, 1982.

233. Whitehead C.M., Winkfein R.J., Rattner J.B. The relationship of HsEg5 and the actin cytoskeleton to centrosome separation // Cell Motil Cytoskeleton. 1996. Vol.35. №4. p.298-308.

234. Wiese C. and Zheng Y. A new function for the y-tubulin ring complex as a microtubule minus-end cap //Nature Cell Biol. 2000. Vol.2, p.358-364

235. Wittmann Т., Hyman D. and Desai A. The spindle: a dynamic assembly of microtubules and motors // Nat. Cell. Biol. 2001. Vol.3, p.28-34

236. Wittmann T. and Waterman-Storer C.M. Cell Motility: can Rho GTPases and microtubules point the way? // J. Cell Sci. 2001. Vol.114. p.3795-3803

237. Yoshida Т., Imanaka-Yoshida K., Murofushi H., Tanaka J., Ito H., Inagaki M. Microinjection of intact MAP-4 and fragments induces changes of the cytoskeleton in PtK2 cells // Cell Motil Cytoskeleton. 1996. Vol.33. №4. p.252-62.

238. Yoshimori Т., Keller P., Roth M.G. and Simons K. Different biosynthetic transport routes to the plasma membrane in BHK and CHO cells // J. Cell Biol. 1996. Vol.133, p.247-256

239. Young A., Dictenberg J., Purohit A., Tuft R. and Doxsey S. Dynein-mediated assembly of pericentrin and y-tubulin onto centrosomes // Mol. Biol. Cell. 2000. Vol.11. p.2047-2056

240. Yvon A.-M. and Wadsworth P. Region-specific transport of microtubules in motile cells // J. Cell Biol. 2000. Vol.151, p.1003-1012

241. Yvon A.M., Walker J.W., Danowski В., Fagerstrom C., Khodjakov A., Wadsworth P. Centrosome reorientation in wound-edge cells is cell type specific // Mol. Biol. Cell. 2002. Vol.13. №6. p.1871-80.

242. Yu W., Centonze V.E., Ahmad F.J., Baas P.W. Microtubule nucleation and release from the neuronal centrosome // J. Cell Biol. 1993. Vol.122. №2. p.349-59.

243. Zachow K.R., Bentley D. Blackjack, a novel protein associated with microtubules in embryonic neurons //J. Cell Sci. 1996. Vol.l09(Pt 6). p. 1497-507.

244. Zhai Y., Borisy G.G. Quantitative determination of the proportion of microtubule polymer present during the mitosis-interphase transition // J. Cell Sci. 1994. Vol.l07(Pt 4). p.881-90.

245. Zheng Y., Wong M.L., Alberts В., Mitchison T. Nucleation of microtubule assembly by a gamma-tubulin-containing ring complex//Nature. 1995. Vol.378(6557). p.578-83.

246. Zigmond S.H., Levitsky H.I. and Kreel B.J. Cell polarity: an examination of its behavioral expression and its consequences for polymorphonuclear leucocyte chemotaxis // J. Cell Biol. 1981. Vol.89, p.585-592

247. Zimmerman W. and Doxsey S.J. Construction of centrosomes and spindle poles by molecular motor-driven assembly of protein particles // Traffic. 2000. Vol.1, p.927-934

248. Zimmerman W., Sparks C.A. and Doxsey S.J. Amorphous no longer: the centrosome comes into focus //Curr. Opin. Cell Biol. 1999. Vol.11. p. 122-128

249. Измерение перемещения центросомы.

250. Длину вектора ш (проекция смещения центросомы на линию, соединяющую её начальное положение и центр пятна нокодазола) вычисляли по формуле:

251. Х2)(Х1 - Х2) + (УЗ - У2)(П - 72) V( XI - Х2)*2 + (Л - У2)А2

252. Измерение расстояний выдвижения ламеллоподий клеток и цитопластов (а) и векторов выдвижения (б).

253. Измерение движения клеток и цитопластов.а изучаемая клетка (цитопласт); б, в - соседние клетки (цитопласты).

254. Перемещение центросомы в клетке.

255. Сравнительная диаграмма перемещений центросомы.

256. А упрощённая схема измерений, проводимых при вычислении движения центросомы.

257. Перемещение центросомы в клетке с заингибированной RhoA.

258. Рисунок соответствует видеоролику 4.

259. Динамика восстановления актинового цитоскелета в контрольной клетке и клетке с подавленной активностью RhoA.

260. Для позиционирования центросомы в центре клетки требуется активный цитоплазматический динеин.

261. А прижизненные флуоресцентные снимки микротрубочек в клетке до (вверху) и спустя 45 минут после (внизу) инъекции блокирующих динеин антител 74.1. Видно, что после подавления активности динеина центросома смещается из центра к краю клетки.

262. Позиционирование центросомы регулируется посредством С(1с42-зависимого сигнального каскада.

263. Q Инъекции СЗ-трансферазой

264. Инъекции N17Cdc42 и СЗ-трансферазой

265. Протеинкиназа LOSK и её рекомбинантные фрагменты в контрольных и трансфецированных клетках Vero.

266. Иммуноблот клеточных гомогенатов, окрашенный антителами к EGFP (1-4) и poIKIA (5-8).1,5- нетрансфецированньге клетки.

267. Клетки, трансфецированные конструктами, кодирующими:2, 6 — EGFP-LOSK-ДТ3, 7 EGFP-LOSKK63rAT4, 8 EGFP-LOSK-ANAT

268. М — маркер молекулярной массы, полосы соответствуют (сверху вниз): 205, 94, 67, 43 кДа.cLOSK клеточная LOSKrLOSK рекомбинантные фрагменты LOSKn1. AT