СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ СПОСОБОВ ПОЛУЧЕНИЯ ИНУЛИНА И ПЕКТИНА ИЗ КЛУБНЕЙ ТОПИНАМБУРА (HELIANTHUS TUBEROSUS) И СОЗДАНИЕ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ НА ИХ ОСНОВЕ тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.04.02, кандидат фармацевтических наук Кисиева, Манана Тенгизовна

• Кисиева, Манана Тенгизовна
• кандидат фармацевтических наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат фармацевтических наук Кисиева, Манана Тенгизовна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1 Способы получения, анализ и применение в медицине полисахаридов клубней топинамбура (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

1.1 Химический состав клубней топинамбура.

1.2 Способы получения полисахаридов из клубней топинамбура.

1.2.1 Получение инулина из клубней топинамбура.

1.2.2 Получение пектина с применением ферментных препаратов.

1.3 Методы анализа полисахаридов клубней топинамбура.

1.3.1 Методы анализа инулина.

1.3.2 Методы анализа пектина.

1.4 Применение полисахаридов клубней топинамбура в медицине.

1.5 Перспективность разработки комбинированного лекарственного средства на основе полисахаридов клубней топинамбура.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ СПОСОБОВ ПОЛУЧЕНИЯ ИНУЛИНА И ПЕКТИНА ИЗ КЛУБНЕЙ ТОПИНАМБУРА (HELIANTHUS TUBEROSUS) И СОЗДАНИЕ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ НА ИХ ОСНОВЕ»

Актуальность проблемы. Сахарный диабет является одной из важнейших проблем, стоящих перед здравоохранением РФ. Актуальность поиска эффективных гипогликемических лекарственных средств обусловлена стремительным ростом числа больных сахарным диабетом, их ранней инвалидизацией и высокой смертностью, что связано с развитием диабетических осложнений. В профилактике и комплексном лечении больных сахарным диабетом важное значение имеет фитотерапия, которая обладает преимуществом перед лечением синтетическими лекарственными препаратами, так как может длительно применяться, не оказывая существенных побочных действий.

В фитотерапии больных сахарным диабетом широкое применение получили инулинсодержащие БАДы («Долголет», «Инулин Форте» и др.).

Ранее сотрудниками Пятигорской ГФА предложен инулин-пектиновый концентрат сухой из клубней топинамбура, который рекомендуется в качестве гипогликемического и детоксицирующего средства [Н.С. Зяблицева, 1998 г]. Полисахариды клубней топинамбура (инулин и пектин) дополняют и усиливают биологическое действие друг друга на организм человека. Однако, содержание пектина в концентрате невысокое, что обусловлено неэффективностью экстрагирования пектина раствором кислоты лимонной. Кроме того, пектин, полученный этим способом, и, соответственно, инулин-пектиновый концентрат сухой, обладают низкой детоксицирующей активностью. Поэтому совершенствование способа получения суммарного препарата инулина и пектина из клубней топинамбура является актуальной задачей.

Использование ферментных препаратов позволяет повысить выход пектина, улучшить его физико-химические свойства (уронидную составляющую, степень этерификации, сорбционную емкость и др.) и, как следствие, детоксицирующую активность при сохранении экологически чистого процесса получения [В.П. Саловарова, 2007 г; Г.Н. Румянцева 2007 г].

Принимая во внимание тот факт, что терапия больных "сахарным диабетом предусматривает коррекцию осложнений, в композицию инулина и пектина необходимо включить компонент природного происхождения, который не только усилит гипогликемическое действие, но и уменьшит развитие и прогрессирование диабетических осложнений.

С этой точки зрения эффективным является таурин, представленный 'на фармацевтическом рынке РФ препаратом Дибикор. Таурин (2-аминоэтансульфоновая кислота) является естественным метаболитом, оказывает влияние непосредственно на патогенетические процессы, уменьшая развитие и прогрессирование макро- и микроангиопатий.

Учитывая вышеизложенное, совершенствование способа получения суммарного препарата инулина и пектина из клубней топинамбура, создание эффективного лекарственного средства для комплексного лечения больных сахарным диабетом, включающего инулин, пектин и таурин является актуальной проблемой.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы является совершенствование способов получения инулина и пектина из клубней топинамбура и создание комбинированного лекарственного средства, содержащего инулин, пектин и таурин.

Для реализации поставленной цели сочли необходимым решение следующих задач:

Разработать способ получения пектина из клубней топинамбура с использованием обработки сырья ферментным препаратом.

Провести сравнительное изучение физико-химических свойств пектина, полученного по разработанному способу с использованием ферментного препарата, и пектина, полученного известным способом экстрагирования раствором кислоты лимонной.

Разработать способ получения суммарного препарата инулина и пектина (пектоинулина) из клубней топинамбура и методики анализа пектоинулина.

Усовершенствовать способ получения сиропа фруктозосодержащего из клубней топинамбура и провести его анализ. '

Изучить специфическую активность пектоинулина и предложенной композиции пектоинулина с таурином.

Разработать состав, методики анализа, нормы качества и изучить стабильность ЛС «Пектоинулин Т» с целью установления срока годности.

Научная новизна. Проведены исследования, в ходе которых из 14 ферментных препаратов отечественных и зарубежных производителей выбран наиболее эффективный - Максазим ИЫРК для обработки сырья с целью получения пектина из клубней топинамбура. Подобраны оптимальные параметры проведения ферментативной обработки (буферный раствор, рН, количество ферментного препарата, время, температура, соотношение сырье : буферный раствор). По результатам исследований разработан способ получения пектина из клубней топинамбура с использованием ферментного препарата.

Экспериментально доказано увеличение выхода пектина после ферментативной обработки сырья по сравнению с существующим способом экстрагирования раствором кислоты лимонной.

Результаты сравнительного изучения физико-химических свойств пектина, полученного по разработанному способу с ферментативной обработкой сырья, и пектина, полученного путем экстрагирования раствором кислоты лимонной, свидетельствуют не только об эффективности предложенного способа, но и об улучшении качественных показателей пектина, характеризующих детоксицирующую активность.

Разработан способ получения суммарного препарата инулина и пектина (пектоинулина) с использованием ферментного препарата Максазим ІчПЯР К. Анализ пектоинулина и инулин-пектинового концентрата сухого позволяет утверждать, что экстрагирование с использованием ферментного препарата повышает содержание пектина в пектоинулине и его связывающую способность свинца(П) ионов.

С использованием ферментного препарата Максазим КЫР К усовершенствован способ получения сиропа фруктозосодержащего из клубней 7 топинамбура с повышенным содержанием фруктозы и пектина, что определяет увеличение связывающей способности свинца(П) ионов.

Проведено сравнительное фармакологическое исследование пектоинулина с инулин-пектиновым концентратом сухим и установлено, что пектоинулин обладает более высокой детоксицирующей активностью.

На основании результатов проведенных фармакологических исследований обоснована целесообразность и эффективность композиции пектоинулина с таурином, обладающей выраженным гипогликемическим и детоксицирующим действием.

Проведен выбор методик качественного и количественного анализа ЛС «Пектоинулин Т». Для подтверждения подлинности и количественного определения ингредиентов ЛС «Пектоинулин Т» использовали качественные реакции (с а-нафтолом, карбазолом и свинца(П) ацетатом основным, нингидрином), титриметрический (метод Бертрана в модификации Макэна и Шоорля), гравиметрический (кальций-пектатный) и спектрофотометрический (с нингидрином) методы. Предлагаемые методики валидированы по показателям: специфичность, правильность, линейность, прецизионность.

На разработанный способ получения пектоинулина из клубней топинамбура подготовлена документация, которая передана на рассмотрение в ФГУ «Федеральный институт промышленной собственности Федеральной службы по интеллектуальной собственности, патентам и товарным знакам».

Практическая значимость работы. Разработан способ получения суммарного препарата инулина и пектина (пектоинулина) и методики качественного и количественного анализа пектоинулина.

Обоснован состав и разработаны методики качественного и количественного анализа ЛС«Пектоинулин Т».

Установлен срок годности разработанного ЛС «Пектоинулин Т», составляющий два года хранения в естественных условиях.

Внедрение результатов в практику. По результатам проведенных исследований разработаны:

Проект ФСП «Пектоинулин Т» и пояснительная записка к нему. Акт апробации методик показателей качества «Пектоинулин Т» получен от ООО Научно-производственной фирмы «Пекто» (г. Нальчик).

Проект ТУ «Пектоинулин» и технологическая инструкция к нему. Акт апробации методик показателей качества пектоинулина получен от ООО Научно-производственной фирмы «Пекто» (г. Нальчик).

Связь задач исследований с проблемным планом фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом НИР ГОУ ВПО Пятигорской государственной фармацевтической академии Росздрава.

Апробация работы и публикации. Материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на региональных конференциях «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» (Пятигорск 2010, 2011) и на первой межрегиональной конференции «Актуальные проблемы фармации» (Владикавказ, 2010). По теме диссертации опубликовано 10 научных работ, 3 из них - в журналах, рекомендуемых ВАК; опубликована монография.

Основные положения, выдвигаемые на защиту: результаты исследований по разработке способа получения пектина из клубней топинамбура с использованием ферментного препарата; данные сравнительного анализа физико-химических свойств пектина, полученного после ферментативной обработки сырья, с пектином, полученным экстрагированием раствором кислоты лимонной; разработка способа получения суммарного препарата инулина и пектина (пектоинулина) и совершенствование способа получения сиропа фруктозосодержащего из клубней топинамбура; результаты фармакологических исследований пектоинулина и композиции пектоинулина с таурином; > разработка состава, методик анализа, норм качества и установление срока годности ЛС «Пектоинулин Т».

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 143 I страницах текста компьютерного набора, состоит из введения, обзора литературы, 5 9 глав собственных исследований, общих выводов, списка литературы. Работа иллюстрирована 42 таблицами и 21 рисунком. Библиография включает 152 источника, из которых 24 на иностранных языках.

Сокращения и обозначения, используемые в диссертации

Аф - адсорбционная способность по Фрейндлиху

А„ - адсорбционная способность по Ленгмюру

БАД - биологически активная добавка

ГФ — государственная фармакопея

ИГЖ - инулин-пектиновый концентрат сухой

ПИФ — пектоинулин, полученный с использованием ферментного препарата ПИФТ - композиция пектоинулин а с таурином

ПК — пектин, полученный экстрагированием раствором кислоты лимонной ПФ — пектин, полученный после ферментативной обработки сырья СА — свинца(П) ацетат

СС - связывающая способность свинца(П) ионов

СФС - сироп фруктозосодержащий

СЭ - степень этерификации

ТУ - технические условия

ТИ - технологическая инструкция

ФП — ферментный препарат

ФСП - фармакопейная статья предприятия

JECFA - совместный экспертный комитет по пищевым добавкам FAO/WHO - продовольственная и сельскохозяйственная организация ВОЗ FCC - кодекс по пищевым химикатам USP-NP - United States Pharmacopoeia

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Фармацевтическая химия, фармакогнозия», Кисиева, Манана Тенгизовна

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. Разработан способ получения пектина из клубней топинамбура с использованием ферментного препарата Максазим 1\П\ГРК, который позволяет повысить его выход (до 6,5%) по сравнению с существующим способом экстрагирования раствором кислоты лимонной.

2. Сравнительный анализ пектина, полученного по разработанному способу из клубней топинамбура, с пектином, полученным экстрагированием раствором кислоты лимонной, показал улучшение физико-химических свойств первого, характеризующих более высокую детоксицирующую активность (уронидная составляющая (85,3±1,1%), степень этерификации (7,2±0,3%), содержание свободных карбоксильных групп (41,4±0,3%), связывающая способность свинца(И) ионов (310,8±3,8 мг/г)).

3. Изучена сорбционная емкость пектинов и кинетика процесса комплексообразования. Связывание свинца(П) ионов (%) пектином, полученным по разработанному способу, в два раза выше аналогичного показателя пектина, полученного известным способом. Образование свинца пектината в обоих случаях протекало по уравнению кинетики первого порядка с постоянной константой скорости. Сорбционный процесс лучше описывался уравнением Фрейндлиха, следовательно, поверхность пектинов неоднородна.

4. Разработаны способ получения суммарного препарата инулина и пектина (пектоинулина), который дает возможность повысить его выход (до 40,0%) и детоксицирующую активность, и методики его качественного и количественного анализа.

5. Проведен сравнительный анализ пектоинулина с инулин-пектиновым концентратом сухим, который показал меньшее содержание инулина и свободных моносахаридов и большее содержание пектина в пектоинулине. Связывающая способность свинца(П) ионов пектоинулина в два раза выше аналогичного показателя инулин-пектинового концентрата сухого.

6. Усовершенствован способ получения СФС из клубней топинамбура с

126 использованием ферментного препарата Максазим NNPK, который позволяет повысить содержание в сиропе фруктозы (до 49,0%), пектина (до 3,7%) и связывающую способность свинца(П) ионов (до 11,3 мг/г).

7. В опытах in vivo по определению продолжительности гексеналового сна и уровня экскреции свинца(П) ионов установлено, что пектоинулин обладает более высокой детоксицирующей активностью, чем инулин-пектиновый концентрат сухой. Включение таурина усиливает детоксицирующую активность пектоинулина на модели «гексеналового сна». Композиция пектоинулина с таурином по гипогликемическому действию достоверно превосходит отдельно применяемые пектоинулини таурин.

8. Разработаны состав, методики анализа и нормы качества JIC «Пектоинулин Т», включающего пектоинулина 18,0 г и таурина 0,5 г на разовую дозу. Все методики валидированы (специфичны, правильны, линейны, прецизионы). Установлен срок хранения ЛС «Пектоинулин Т» в естественных условиях - 2 года.

9. Разработаны проекты ФСП «Пектоинулин Т» и ТУ «Пектоинулин».

ЗАКЛЮЧЕНИЕ ПО ОБЗОРУ ЛИТЕРАТУРЫ

Клубни топинамбура- (НеНапЙшэ ШЬегоБиз) уникальны по химическому составу, так как содержат два ценных полисахарида — инулин и пектин, и, кроме того, позволяют получать экологически чистые продукты, что обусловлено способностью данного сырья практически не накапливать токсичные соединения (нитраты, нитриты, тяжелые металлы и др.). Многочисленные БАДы, применяемые в комплексном лечении больных сахарным диабетом, содержат весь комплекс биологически активных веществ клубней топинамбура и малоэффективны ввиду того, что основные действующие вещества содержатся в связанном состоянии в сырье.

Представляет интерес сочетание инулина и пектина, так как эти полисахариды клубней топинамбура (инулин и пектин) дополняют и усиливают биологическое действие друг друга на организм человека, оказывая гипогликемическое1 и детоксицирующее действие.

Для получения инулина и, пектина предпочтительнее использовать высушенные измельченные клубни топинамбура, так как это обеспечивает круглогодичное производство.

Из клубней, топинамбура получен инулин-пектиновый концентрат сухой, который рекомендуется в качестве гипогликемического и детоксицирующего средства. Однако, содержание пектина в» концентрате невысокое, так как выход пектина при экстрагировании раствором- кислоты лимонной низкий, что обусловлено неэффективностью данного способа выделения полисахарида. Кроме того, пектин, полученный экстрагированием раствором кислоты лимонной, имеет невысокую связывающую способность, а, соответственно, концентрат обладает низкой детоксицирующей активностью.

В литературе имеются сведения о применении ферментных препаратов > для получения пектина из различного растительного сырья, что позволяет повысить его выход, улучшить физико-химические свойства (в том числе, связывающую > способность), обеспечить экологически чистый процесс производства. Ферментные препараты увеличивают выход пектина за счет перехода протопектина» в' растворимое состояние вследствие расщепления его связей с- компонентами клеточных стенок растительного сырья, а также частичным гидролизом гликозидных связей полигалактуроновых цепей протопектина и образованием пектина с меньшей степенью полимеризации. Способ получения пектина из клубней топинамбура с использованием ферментативной обработки сырья не известен.

Поэтому совершенствование способа получения суммарного препарата инулина и пектина из клубней топинамбура с использованием эффективных способов их извлечения из сырья является важным.

Комплексная терапия больных сахарным диабетом предусматривает применение также препаратов, которые корректируют многочисленные

36 диабетические осложнения. В связи с этим целесообразно и представляет интерес включение в композицию инулина и пектина компонента природного происхождения, который не только усилит гипогликемическое действие, но и будет оказывать действие на развитие и прогрессирование осложнений сахарного диабета.

Представляется перспективным сочетание инулин-пектиновой композиции с естественным метаболитом - таурином, который не является чужеродным в обмене веществ человека и может оказывать влияние непосредственно на патогенетические процессы, уменьшая развитие и прогрессирование диабетических осложнений.

В настоящее время в РФ успешно применяется препарат таурина Дибикор. Результаты многочисленных клинических исследований препарата показали, что действие таурина направлено на лечение не только сахарного диабета, но и его осложнений.

Все компоненты предлагаемого комбинированного лекарственного средства практически не обладают побочными эффектами, оказывают гепатопротекторное действие, что также важно для больных сахарным диабетом.

Таким образом, совершенствование способов получения инулина и пектина из клубней топинамбура с целью создания эффективного комбинированного лекарственного средства на их основе с включением в состав таурина является актуальной проблемой.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ

ЧАСТЬ

ГЛАВА 2 РАЗРАБОТКА СПОСОБА ПОЛУЧЕНИЯ ПЕКТИНА ИЗ КЛУБНЕЙ ТОПИНАМБУРА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ОБРАБОТКИ СЫРЬЯ ФЕРМЕНТНЫМ ПРЕПАРАТОМ

Разработка способа- получения пектина. из клубней топинамбура: с ферментативной; обработкой; сырья предполагает выбор ферментного препарата (ФП) и подбор условий проведения ферментативной обработки (рН, количество ФП, время;, температура, буферный, раствор' для- установления и поддержания, оптимального значения рН, соотношение сырье : буферный раствор). В исследованиях, по разработке способа получения пектина; из клубней топинамбура с ферментативной обработкой сырья использовали ФП, обладающие различной активностью (целлюлазноЩ гейшцеллюлазной, протеазной. и др.). Это обусловлен' тем;, что;, протопектин.» в: сырье: находится в< связанном» состоянии-.с:, различными: структурными, ' компонентами: клеточной® стенки (целлюлозой; гемицеллюлазами и структурными белками) [1,119]. ФП отличаются, от чистых ферментов тем;, что * содержат несколько ферментов с преобладанием какого-либо одного [18]. В качестве сырья использовали высушенные измельченные клубни топинамбура, именуемые порошком клубней топинамбура, и предоставленные ООО «Рязанские просторы» (г. Москва).

Использование высушенных измельченных клубней топинамбура, обеспечивает возможность получения« инулина и пектина в: течение* всего года. Свежие клубни.топинамбура пригодны.в течение 2-3 месяцев после уборки-, так как при дальнейшем- их хранении' наблюдается; постепенный гидролиз инулина до фруктозы, за счет ферментативных процессов,, и; последующая ее эпимеризация в глюкозу [15,36,37,118].

2.1 ХАРАКТЕРИСТИКИ ФЕРМЕНТНЫХ ПРЕПАРАТОВ

В исследованиях использовали 14 . ФП отечественных и зарубежных производителей (таблица 1):, . , •

Список литературы диссертационного исследования кандидат фармацевтических наук Кисиева, Манана Тенгизовна, 2011 год

1. Альберсхейм, П.П. Биохимия растений / П.П. Альберсхейм.- М.: Мир, 1968.- 326 с.

2. Аметов, A.C. Применение дибикора при сахарном диабете 2 типа и сердечнососудистой патологии / A.C. Аметов, И.И. Кочергина // Лекции для врачей.- 2007.-№1.- С. 40-49.

3. Арасимович, В.В. Методы анализа пектиновых веществ, гемицеллюлоз и пектолитических ферментов в плодах / В.В. Арасимович, C.B. Балтага, Н.П. Пономарева.- Кишинев: АН Молд. ССР, 1970,- 84 с.

4. Арзамасцев, А.П. Валидация аналитических методов / А.П. Арзамасцев, Н.П. Садчикова, Ю.Я. Харитонов // Фармация.- 2006.- Т. 55, № 4.- С. 8-12.

5. Бакумов, П.А. Клиническая эффективность «Астролина», препарата на основе инулина в комплексной терапии больных сахарным диабетом II типа / П.А. Бакумов, Ю.В. Козыренко, Н.В. Деркач // Бюл. Волгоград.науч. центра РАМН.- 2004.- № 4. С. 15-16.

6. Бек, М.М. Химия реакций комплексообразования / М.М. Бек.- М.: Мир, 1973.279 с.

7. Беленький, М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта / М.Л. Беленький.- Л.: Гос. изд-во мед. лит., 1963.- 152 с.

8. Беляков, К.В. Определение инулина в корневищах и корнях девясила . высокого (Inula helenium) / K.B. Беляков, Д.М. Попов // Фармация.- 1998.- № 1,- С.34.36.

9. Березин, И.В. Практический курс химической и ферментативной кинетики / И.В. Березин.- М.: Изд-во МГУ, 1976.- 320 с.

10. Биокатализ в процессах получения пищевых добавок из растительного сырья / C.B. Макурина и др. // Живые системы и биологическая безопасность населения: материалы 5 Междунар. науч. конф. студентов и молодых ученых.- М.: МГУПБ, 2006.- С. 7-8.

11. Василенко, Ю.К. Получение и изучение физико-химических и гепатопротекторных свойств пектиновых веществ / Ю.К. Василенко, C.B. Москаленко, Н.Ш. Кайшева//Хим.- фармац. журн.- 1997.- Т.31, № 6.- С. 28-29.

12. Великанова, Я.Я. Дибикор против смертельного квартета / Я.Я. Великанова // Новая аптека. Аптеч. ассортимент.- 2009.- № 6.- С. 24-25.

13. Выбор условий извлечения пектина из клубней топинамбура (Helianthus tuberosus L.) с использованием ферментного препарата Максазим NNPK / М.Т. Кисиева и др. // Вестн. РУДН: Серия Медицина.- 2010.- № 4.- С. 237-241.

14. Гацура, В.В. Методы первичного фармакологического исследования биологически активных веществ / В.В. Гацура.- М.: Медицина, 1974.- 143 с.

15. Голубев, В.Н. Топинамбур. Состав, свойства, способы переработки, области применения / В.Н. Голубев, И.В. Волкова, Х.М. Кушалаков.- М.: Медицина, 1995.81.

16. Голубев, В.Н. Топинамбур пищевой, биоэнергетический и экологосберегающий ресурс / В.Н. Голубев, Н.М. Пасько, И.В. Волкова // Хранение и переработка сельхозсырья.- 1994.- № 5.- С. 41-45.

17. ГОСТ 20264.3-81 Препараты ферментные. Методы определения активности пектолитического комплекса.- Введ. 1982.- 01.07.- М.: Изд-во стандартов, 1981.- 12 с.

18. ГОСТ 20264.1-89 Препараты ферментные. Методы определения органолептических, физико-химических и микробиологических показателей.- Введ. 1990.- 01.07.- М.: Изд-во стандартов, 1998.- 15 с.

19. ГОСТ 20264.2-88 Препараты ферментные. Методы определения протеолитической активности.- Введ. 1989.- 01.01.- М.: Изд-во стандартов, 1998.- 15 с.

20. ГОСТ Р 53046-2008 Препараты ферментные. Методы определения ферментативной активности целлюлазы.- Введ. 2010.- 01.01.- М.: Стандартинформ, 2009.- 12 с.

21. ГОСТ Р 53047-2008 Препараты ферментные. Методы определения ферментативной активности ксиланазы.- Введ. 2010.- 01.01.- М.: Стандартинформ, 2009.- 12 с.

22. Государственная фармакопея РФ.- 12-е изд.- М.: Науч. центр экспертизы средств мед. применения, 2007.- Ч. 1.- 704 с.

23. Докшина, Г.А. Некоторые инсулиноподобные эффекты таурина / Г.А. Докшина, Т.Ю. Силаева, Е.И. Ярцев // Вопр. мед. химии.- 1976.- № 22.- С. 503-507.

24. Зависимость колориметрической реакции галактуроновой кислоты и нейтральных моносахаридов с карбазолом от условий её проведения / М.П. Филиппов и др. // Изв. АНМолд. ССР. Серия биолог, и хим. наук.- 1986.- №1.- С. 75.

25. Зяблицева, Н.С. Изучение полисахаридов клубней топинамбура и создание на их основе лечебно профилактических средств: дис. . канд.фармац. наук: 15.00.02 / Зяблицева Надежда Сергеевна.- Пятигорск, 1998.- 157 с.

26. Изучение клинической эффективности Дибикора при сахарном диабете 2 типа / В.И. Кудинов и др. // Человек и лекарство: тез. докл. 14 Рос. нац. конгр. 16 — 20 апр. 2007 г.-М, 2007.-С. 129.

27. Изучение физико-химических свойств растворов природных полимеров / Кисиева М.Т. и др. // Бюллетень федерального центра сердца, крови и эндокринологии им. В.А. Алмазова: сб. тезисов.- Спб., 2010.- № 2.- С. 97-98.

28. Исследование взаимодействия пектиновых веществ с солями меди, ртути, цинка и кадмия / Г.П. Кацева и др.:// Химия природ, соединений.- 1988.- № 2.- С. 171-175. . . ,

29. Исследование продовольственных товаров / JI.A. Боровикова и др.. М.: Экономика, 1980.-336 с.

30. Исследование свойств пектина, выделенного из различных сортов и гибридов подсолнечника, возделываемых в ЦЧР / Е. А. Кузнецова и др. // Вестн. Воронеж, гос. аграрн. ун-та.-2007.-№ 15.-С. 123-127. ,

31. Кахана, Б.М. О накоплении инулина в клубнях топинамбура / Б.М. Кахана, Н.И. Шелухина // Материалы науч. хонф. молодых ученых Молдавии,- Кишинев, 1966.-С. 60-63.

32. Кахана, Б.М. Превращение фруктозанов в клубнях топинамбура в зависимости от температуры хранения / Б.М. Кахана, В.В. Арасимович // Бюл. акад. Штиинца РСС Молд., Изв. АНМолд. ССР. Сер.: биол. и хим. наука.- 1973.- № 3.- С.24-29.

33. Кахновский, И.М. Таурин в лечении сахарного диабета / И.М. Кахновский //

34. Клинич. фармакология и терапия.- 1997.-№ 6.-С.З.131

35. Кахновский, И.М. Таурин в лечении больных сахарным диабетом второго типа / И.М. Кахновский, Т.В. Королева // Клинич. фармакология и терапия.- 1999.-Т.8, №5.- С.64.

36. Кисиева, М.Т. Изучение влияния ферментных препаратов на выход пектина из клубней топинамбура / М.Т. Кисиева // Бюллетень Северного государственного медицинского университета: сб. науч. тр.- Архангельск, 2010.- Вып. 24, №1.- С. 258.

37. Кисиева, М.Т. Сравнительное изучение уронидной составляющей пектина из клубней топинамбура / М.Т. Кисиева, В.А. Компанцев // Бюллетень Северного государственного медицинского университета: сб. науч. тр.- Архангельск, 2010.-Вып. 25, № 2.- С. 48.

38. Колб, В.Г. Справочник по клинической химии / В.Г. Колб, B.C. Камышников.-Минск: Беларусь, 1982.- 336 с.

39. Комиссаренко, С.Н. Пектины их свойства и применение / С.Н. Комиссаренко, В.Н. Спиридонов //Раст. ресурсы.- 1998.- Т. 34, вып. 1.- С. 111-119.

40. Кузнецова, Е. А. Выделение пектина с использованием целлюлолитических ферментов / Е. А. Кузнецова, А. Д. Гребенкин // Российский пектин. История — настоящее перспективы: материалы науч.- практич. конф.- Воронеж, 2006.- С. 3336.

41. Мановицкая, A.B. Влияние Дибикора на углеводный обмен больных метаболическим синдромом / A.B. Мановицкая // Человек и лекарство: тез. докл. 14 Рос. нац. науч. конгр. 16-20 апр. 2007 г.-М., 2007.- С. 147.

42. Мелвин-Хьюз, Е.А. Равновесие и кинетика реакций в растворах / Е.А. Мелвин-Хьюз.- М.: Химия, 1975.- 472 с.

43. Методы химии углеводов: пер. с англ. / под ред. Н.К. Кочеткова.- М.: Мир, 1967.- С. 370-376.

44. Недосугова, JI.B. Дибикор новый подход к лечению сахарного диабета 2 типа / Л.В. Недосугова //Мед.вестн.- 2006.- № 28.- С. 371.

45. Нефедов, Л.И. Таурин (биохимия, фармакология и применение) / Л.И. Нефедов.-Минск, 1999.- 145 с.

46. Оводов, Ю.С. Современные представления о пектиновых веществах / Ю.С. Оводов // Бйоорган. химия.- 2009.- Т.5, № 3.- С. 293-310.

47. Определение комплексообразующей способности пектинов и пектинсодержащих препаратов / В.А. Компанцев и др. // Охрана окружающей среды.- 1991.- Вып. 3.- С. 25-27.

48. Пат. 2059385 Российская Федерация, МПК А23 Ll/0524 С08 В37/06. Способ получения пектина / Матора A.B. и др. (РФ).- № 93026157/13; заявл. 06.05.1993, опубл. 10.05.1996. [Электронный ресурс].- Режим доступа: http://www.fips.ru/ html.-Загл. с экрана.

49. Пат. 2121848 Российская Федерация, МПК А61 КЗ5/78. Способ получения инулина / Чепурной И.П. и др. (РФ).- № 93053968/14; заявл. 02.12.1993, опубл. 20.11.1998. [Электронный ресурс].- Режим доступа: http://www.flps.ru/ html.- Загл. с экрана.

50. Пат. 2262865 Российская Федерация, МПКА23 L1/0524. Способ получения пектина / ООО «Зеленые линии» (РФ).- № 2004127693/13; заявл. 17.09.2004; опубл. 27.10.2005. Электронный ресурс.- Режим доступа: http: //www.fips.ru/ html.- Загл. с экрана.

51. Пат. 95112627 СССР, МКИ A23L1/236. Способ получения инулина / В.Н. Голубев, И.В. Волкова (РФ).- заявл. 27.07.1995; опубл. 10.10.1996. Электронный ресурс.- Режим доступа: http://www.fips.ru/ html.- Загл. с экрана.

52. Пектин. Тенденции научных и прикладных исследований / И.Л. Новосельская и др. // Химия природ, соединений.- 2000.- №1.- С. 3-11

53. Пектин. Производство и применение / Н.С. Карпович и др. Киев: Урожай, 1989.- 88 с.

54. Пектин. ВФС 42-3433.- Введ. 1999.- 08.10.- М., 1999.- 4 с.

55. Полиуронидные комплексообразователи радиопротекторного действия / Г.Н. Румянцева и др. // Пища, экология, человек: материалы б Междунар. науч.-техн. конф.-М.: МГУПБ, 2001.- С. 26-31.

56. Порядок определения первоначального срока лекарственного растительного сырья, продуктов его переработки, сборов: сб. мет. рекомен. по стандартизации лекарственных средств / В.А. Багирова и др..- М.: Первая Образцовая типография, 2006.- С. 224-226.

57. Природные свойства топинамбура // Новые лекарственные препараты.- 2003.-Вып. 12.- С. 6-19.

58. Рациональное питание. Рекомендуемые уровни потребления пищевых и биологически активных веществ: методические рекомендации МР 2.3.1. 19150.-Введ. 2004.- 02.06.- М.: Медицина, 2004.- 25 с.

59. Разработка пищевых продуктов и лечебных препаратов на основе, клубней и травы топинамбура / Н.С. Зяблицева и др..- Пятигорск, 2009.- 25 е.- Деп. в ВИНИТИ РАН 27.07.2009, № 497- В2009.

60. Раствор тауфона 4% (глазные капли). Фармакоп. ст. 42-2852-97. Введ. 1997.20.05.- М., 1997.- 6 с.

61. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / под общ. ред. В.П. Фисенко.- М.: Ремедиум, 2000.378 с.

62. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / под общ. ред. Хабриева Р.У.- 2-изд. перераб. и доп.-М.: Медицина, 2005.- 832 с.

63. Румянцева, Г.Н. Влияние карбогидраз и лиаз микробного происхождения- на: субстраты: пектинсодержащего сырья, / Г.Н. Румянцева, О.А. Варфоломеева // Хранение и переработка сельхозсьтрья. 2004.- № 8.- С. 30-33.

64. Румянцева, Г.Н. Микробные ферментные препараты в производстве пектина: механизм, действия и эффективность применения / Г.Н. Румянцева // Вестн. РАСХН.- 1993.- № 12.- С. 25-32.

65. Румянцева, Г.Н; Модифицированный; пектин радиопротекторного действия: получение и; свойства / Г.Н: Румянцева //Хранение и переработка сельхозсырья.т 1998.-№12.-С. 30-33. : V •

66. Румянцева, А.А. Свитцов, М.И. Осадько // Биотехнология-2005: материалы 8

67. Междунар. семинара-презентации инновационных науч-техн. Проектов. Пущино. 18- 19 ноября!- Пущино, 2005.- С. 112-114.

68. Румянцева; Г.Н. Сравнительное действие различных ферментных препаратовпри.получении яблочного пектина / Г.Н. Румянцева, О.А.Варфоломеева // Междунар.137науч.-практич. котіф. ГУ ВЫИТИ ММС и ППЖ РАСХЫ: материалы.- Волгоград, 2003.-С. 35-36. '• ■

69. Румянцева, Г.ІІ. Технологические режимы биокатализа в процессе выделения пищевого пектина / Г.Н. Румянцева, 0;А. Варфоломеева // Хранение и переработка5 се л ьхоз сырья. 2004.- № 4.- С.30-32. і •

70. Серпов, ЛіНі Элементы; экспериментальной? фармакологии / Сернов Л.Щ Гацура В:В М.: Всерос:. центр: по* безопасности; биологически активных веществ, 2000.-351с.

71. Сидоров, К.К. Методы определения острой токсичности и опасности химических веществ (токсикометрия) / К.К. Сидоров.- м:^Медицина, 1970;- 76с.:

72. Сравнительное: изучение, сорбционной способности пектина,, полученного различными способами: из; клубней топинамбура, (НеНапШиэ йЛегояиБ Г.). / М.Т. Кисиева;и др.;//Сибир. мед. журн:-2011.-№ Г.т СЛ 61-164.

73. Трусов;;В!В: Современные аспекты терапии, сахарного; диабета; 2-го»типа>/В.В: . Трусов// Ремедиум Приволжье.-2008.-№ 3.-С. 1-3. .

74. Ферменты; для; мясной; промышленности, Электронный ресурс.- Электрон, дан; (2 файла).- . Режим доступа: http://vvww.germes-enzymes.ru/products/217corolasell 0/.- Загл. с экрана.

75. Ферменты, для* переработки растительных? масел Электронный ресурс.;-Электрон. • дан. . (2" файла);- Режим доступа: http ://www.germes-enzymes.ru/products/18/rohalaseos/.- Загл. с экрана.

76. Ферменты для переработки ягод и плодов Электронный ресурс.- Электрон, дан. ~ (2 файла):- . Режим доступа:. http://\vww;germes-enzymes.ru/products/19/fohapect101/.- Загл. с экрана.

77. Ферменты для переработки ягод и плодов Электронный ресурс.- Электрон, дан. (2 файла).- Режим доступа: . http.V/www.germes-en2ymes.ru/prodlicts/19/rohapectDA6b/.- Загл. с экрана.,

78. Ферменты для переработки ягод и плодов Электронный ресурс.- Электрон, дан. (2 файла).- Режим доступа: http://www.germes-enzymes.ru/products/19/rohapectmax/.- Загл. с экрана.

79. Ферменты и дрожжи для виноделия Электронный ресурс.- Электрон, дан. (2 файла).- Режим доступа: http://www.gemies-enzymes.ru/products/20/rohavinlx/.- Загл. с экрана.

80. Ферменты и дрожи для виноделия Электронный ресурс.- Электрон, дан. (2 файла).- Режим доступа: http://www.gei-mes-enzymes.ru/products/20/rohavinmx/.-Загл. с экрана.

81. Ферментные препараты Электронный ресурс.- Электрон, дан. (2 файла).-Режим доступа: http: //www.rusferment.ru/juice.php#l.- Загл. с экрана.

82. Ферментные препараты протеолитического типа действия Электронный ресурс.- Электрон. дан. (2 файла).- Режим доступа: http://www.rusferment.ru/spirit.php.- Загл. с экрана.

83. Ферментные препараты целлюлолитического типа действия Электронный ресурс. Электрон. дан. (2 файла).- Режим доступа: http: //www.rusfei-ment.ru/spirit.php.- Загл. с экрана.

84. Фурманова, И.Б. Биохимические изменения изменения топинамбура при его хранении / И.Б. Фурманова, К.А. Калунянц, JI.H. Крикунова // Пищевая технология,-Краснодар, 1989.- 10с.

85. Хенглейн, Ф.Ф. Пектины. Биохимические методы анализа растений: пер. с нем. / Ф.Ф. Хенглейн.- М.: Химия, i960.- С. 297-298.

86. Химический анализ лекарственных растений / под ред. Н.И. Гринкевич, JI.H. Сафронич,- М.: Высш. шк., 1983.- 174 с.

87. Хотимченко, Ю.С. Полисорбовит: монография / Ю.С. Хотимченко, М.В. Одинцова, В.В. Ковалев.- Томск: Изд-во HTJI, 2001,- 132 с.

88. Хрундин, Д.В. Изучение влияния замораживания на свойства пектина / Хрундин Д.В., Романова Н.К., Решетник О.А. // Современные проблемы техники и технологии пищевых производств: материалы 10 Междунар. науч.-практич. конф.- Барнаул, 2007. С. 105-106.

89. Шелухина, Н.П. Пектин и параметры его получения / Н.П. Шелухина, Р.Ш. Абаева, Г.Б. Аймухамедова.- Фрунзе: Илим, 1987,- 108с.

90. Шестакова, М.В. Опыт применения Дибикора при сахарном диабете 2 типа / М.В. Шестакова, JI.A. Чугунова, М.Ш. Шамхалова // Сахарный диабет.- 2007.- № 1.-С. 2-3.

91. Экспериментальный сахарный диабет. Роль клинической диабетологии'/ под ред. Баранова В.Г.- Л.: Наука, 1983.- 240 с.

92. Ярыгина, Т.И. Разработка методики количественного определения тауфона (таурина) / Т.И. Ярыгина // Вестн. РУДН: Серия Медицина.- 2010.- № 4.- С. 522-524.

93. Ackermann, D.D. Taurine / D.D. Ackermann, H.A. Hemsen // J. Physiol. Chem.-1935.-Vol. 235.-P. 115-121.

94. Bioenergy — the future of energy Электронный ресурс. .-Электрон, дан. (3 файла).- Режим доступа: http:// www.novozymes.com/en/solutions/bioenergy/ Pages/ default.aspx.- Загл. с экрана.

95. Campbell, М.М. Extraction pectin from watermelon rind: thesis candidate for the degree of master of science in biosystems engineering / M.M. Campbell.- Oklahoma, 2006.- 98 p.

96. Donagny, J.A. Pectin extraction from citrus peel by polygalacturonase produced on whey / J.A. Donagny, A.M. McKay // Bioresource Technology.- 1994.- № 47.- P. 8-25.

97. Enzymatic extraction and linkage analysis of pectic polysaccharides from onion / Shigetaka Ishii et al. // Phytochemistry.- 1982.- Vol. 21, № 3.- P. 778-780.

98. Extraction of green labeled pectins and pectic oligosaccharides from plant byproducts / Zykwinska A.A. et al. // J. Agric. Food Chem.- 2008.- Vol. 56, № 19.- P. 8926-8935.

99. Huxtable, R.J. Physiological actions of taurine / R.J. Huxtable // Physiol. Rev.-1992.- Vol. 72, № 1.- P. 101-163.

100. Kaur, N.N. Applications of inulin and oligofructose in health and nutrition / N.N. Kaur and A.K. Gupta // Biosciences.- 2002.- Vol. 27, №7.- P. 703-714.

101. Lompson W.G. Potentiation of the actions of insulin by taurine / W.G. Lompson, J.H. Kramer, S.W. Schaffer // Can. J. Physiol. Pharmacol.- 1983.- Vol. 61, №5.- P.457-463.

102. Marienfeld, S.S. Inulin synthesis in the tuberous roots of Dahlia variabilis andi

103. Helianthus tuberosus / S.S. Marienfeld, W.W. Kaeser // Kali-Briefe.- 1988.- Vol. 19, № 4.- P. 297-309.

104. Maturo, J.J. Taurine binding to the purifed insulin receptor / J.J. Maturo, E.C. Kulakowski // Biochem. Pharmacol- 1988.- Vol. 37, № 19.- P.3755-3760.

105. Meeuse, B.J. Inulin in the green alga Batophora oerstedi J.A.G. (Dasycladales) / B.J. Meeuse // Acta Botanica Netherlandica.- 1963.- № 12.- P.315-318.

106. Messineo, L.L. Sensitive spectrophotometry determination of fructose and inulin from aldohexoses / L.L. Messineo, E.E. Musarra // Int. J. Biochem.- 1972.- Vol. 3, № 18.-P. 691-699.

107. Panouille, M.M. Cellulase and protease preparations can extract pectins from various plant byproducts / M.M. Panouille, J.F. Thibault, E.E. Bonnin // J. Agric. Food Chem.- 2006.- Vol. 54, № 23.- P. 8926-35.

108. Sakai, T.T. Microbial production of pectin from citrus peels / T.T. Sakai, M.M. Okushima // Applied and Environmental Microbiology.- 1980.- Vol. 39, № 2.- P.908-912.

109. Shahidullah, M.M. The sensitivity and selectivity of the Selivanoff test for fructose / M.M. Shahidullah, S.S. Khorasani //Anal. chim. acta.- 1972.- Vol. 61, № 2.- P. 317-319.

110. Shyder, H.E. Studies on a beta-fructosidase (inulinase) produced by saccharomyces fragilis / H.E. Shyder, H.J. Phaff, A.V. Leewenhoer // J. Microbipol. and Serol.- 1960.-Vol.- 26, № 4.- P.433-452.

111. Shyder, H.E. The pattern of action of inulinase from saccharomyces fragilis on inulin/H.E. Shyder, H.J. Phaff//J. Biol. Chem.- 1962.- Vol. 237, № 8.- P. 2438-2441.

112. Sicho, V.V. Study of partial inulin degradation / V.V. Sicho, B.B. Kralova, J.J. Kas // Sb. VSCHT Praze.- 1973.- № 40.- S. 83-97.

113. Szejtli, J.K. The acid hydrolysis of inulin / J.K. Szejtli, R.D. Henriques, M.M. Castineira // Acta chim. Acad. Sci. Hung. 1971. - Vol. 70, №4. - P. 379-389.

114. Taufel, K.K. Reversion der saccharide und transglucosidierung im sauren Milieu / K.K. Taufel, K.J. Steinback // Nahrung.- 1959.- Bd.3, N9-10.- S.832-849.

115. The important role of taurine in oxidative metabolism / S.H. Hansen et al. // Adv. Exp. Med. Biol.- 2006,- №583.- P. 129-135.

116. The United States Pharmacopeia. National Formulary. USP XXX.-London, 2007.2365 p.

117. Thibault, J.F. Studies on extraction pectins from citrus peels, apple marks, and sugar-beet pulps with arabinase and galactanase / J.F. Thibault, R.De Dreu. // Carbohydrate polymers.- 1988.- № 9.- P. 119-131.

118. Zerder, R.R. Analyse colorimetrique des ceto-hexoses et de l'inuline par la reaction a l'acide thiobarbiturique. Conditions de la reaction / R.R Zerder, A.A. Falbriard // Clin, chim. acta.-1966.- Vol. 13, № 2.- P. 246-250.