Взаимодействие p130 - белка семейства pRb, и β-катенина - передатчика сигналов Wnt, в ходе дифференцировки и трансформации мезенхимных стволовых клеток мыши тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.03.04, кандидат биологических наук Петров, Николай Сергеевич

  • Петров, Николай Сергеевич
  • кандидат биологических науккандидат биологических наук
  • 2012, Санкт-Петербург
  • Специальность ВАК РФ03.03.04
  • Количество страниц 120
Петров, Николай Сергеевич. Взаимодействие p130 - белка семейства pRb, и β-катенина - передатчика сигналов Wnt, в ходе дифференцировки и трансформации мезенхимных стволовых клеток мыши: дис. кандидат биологических наук: 03.03.04 - Клеточная биология, цитология, гистология. Санкт-Петербург. 2012. 120 с.

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Петров, Николай Сергеевич

Список сокращений

Введение

Актуальность проблемы Цель и задачи работы

Основные положения, выносимые на защиту Научная новизна полученных результатов Теоретическое и практическое значение работы Апробация работы

Финансовая и некоммерческая поддержка работы Структура и объем диссертации

1. Обзор литературы.

1.1.Мезенхимные стволовые клетки (МСК)

История получения Свойства

Маркерная специфичность Методы приготовления Пластичность

Дифференцировка в энтодермальном направлении в опытах т у/уо Туморогенность

1.2. Характеристика сигнального пути \¥п!/р-катенин

Роль сигнального пути Жп1/^-катенин в эмбриональном периоде и после рождения

Структура белков семейства

Передача сигналов \¥ш внутрь клетки

Функциональная роль мембранного Р-катенина

Механизм инактивации 0-катенина в отсутствие сигналов ]¥ш

Механизм действия транскрипционных факторов семейства ЬЕР/ТСР в отсутствие сигналов ]¥т

Активация зависимой от ЬЕР/ТСР и опосредованной Р-катенином транскрипции Роль сигналов ЖМ в формировании лёгочного эпителия в эмбриогенезе Роль сигнального пути ЖМ//3-катенин в регуляции пластичности МСК и их дифференцировки в лёгочный эпителий

Сигнальный путь Жш/^-катенин при карциноме легких и кишечника

1.3. Сигнальный путь семейства гена ретинобластомы (рШ>)

Члены семейства рЯЬ и их структурная организация Функциональная роль белков семейства рЯЬ

Взаимодействие «покетных» белков с транскрипционными факторами семейства Е2Р

Регуляция клеточного деления «покетными» белками осуществляется на транскрипционном уровне

Регуляция активности «покетных» белков путем фосфорилирования Специфическая роль р130 в регуляции клеточных функций Роль ОзкЗР в регуляции активности р130, потенциальное взаимодействие сигнальных путей рЯЬ и }¥п1/[¡-катенин

1.4. Роль сигнальных путей \Уп1/р-катенин и рИЬ в регуляции функций соматических стволовых клеток (ССК)

Концепция СК, определение и свойства различных типов СК Гипотеза механизма регуляции самоподдержания СК

Регуляция самоподдержания СК осуществляется в контексте клеточного цикла Роль сигнального пути Жп^-катенин в регуляции функций ССК Роль сигнального пути рЯЬ в регуляции функций ССК

Взаимодействие между сигнальными путями Ц^мф-катенин и рКЬ в регуляции функций ССК

2. Материалы и методы

Клеточные линии и культивирование клеток

Получение МСК из костного мозга трансгенных мышей, экспрессирующих зеленый флюоресцирующий белок (Gfp)

Определение пролиферативной и клоногенной активности МСК Оценка туморогенности МСК и получение клеток эксплантатов опухоли Индукция дифференцировки МСК в клетки различных мезодермальных линий Разработка модели in vitro дифференцировки МСК в клетки легочного эпителия Получение и очистка плазмидной ДНК Трансфекция клеток различных линий

Получение РНК, электрофорез РНК в денатурирующем геле и её количественная оценка

Синтез кДНК на матрице РНК и амплификация фрагментов генов с помощью ревертированной полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР) Ингибирование экспрессии гена WNT2 с помощью метода интерференции РНК Метод люциферазного репортера для оценки транскрипционной активации генов, содержащих сайты связывания белков семейства LEF/TCF Анализ экспрессии мРНК

Синхронизация клеток в различных фазах клеточного цикла и проточная цитометрия

Иммуноцитохимические методы Электрофорез и иммуноблотинг Фракционирование клеточных экстрактов Иммунопреципитация Статистический анализ

3. Результаты

3.1. Характеристика первичной культуры МСК костного мозга трансгенных мышей СЕР в ходе их длительного пассирования

Свойства МСК на первых пассажах

Изменение морфологических свойств в ходе длительного пассирования Дифференцировочная и клоногенная способность

3.2. Оценка пролиферативной и туморогенной активности МСК в ходе их длительного пассирования в культуре

Пролиферативная активность Туморогенная активность

Характеристика клеток эксплантатов опухоли (КОЭ), полученной из МСК

3.3. Разработка модели энтодермальной дифференцировки МСК в опытах in vitro

Использование метода кокулътивирования клеток для разработки модели энтодермальной дифференцировки МСК

Кокулътивирование с клетками А-549 вызывает в МСК экспрессию маркеров лёгочного эпителия

Кокулътивирование с клетками А-549 вызывает в МСК активацию р-катенина Ионы лития активируют р-катенин в МСК

Индукция сигнального пути Wnt/fi-катенин сопряжена с транскрипционной активацией репортёрной конструкции, содержащей сайты связывания транскрипционных факторов Lef/Tcf

3.4. Оценка уровня, рисунка фосфорилнрования и внутриклеточной локализации белков р130 и E2f4 в МСК с индуцированным сигнальным путем Wnt/p-катенин

Индукция сигнального пути Wnt/fi-катенин вызывает в МСК сочетанное повышение уровня и активацию р130 и Е2/4 Синхронизация МСК в различных фазах клеточного цикла Характеристика уровня и рисунка фосфорилирования р130, Е2/4 и Р-катенина в МСК в различных фазах клеточного цикла

Оценка уровня продукции и электрофоретической подвижности неактивного и активного Р-катенина до и после активации в МСК сигнального пути Wnt/(i-катенин

Изучение механизма активация сигнального пути Wnt/p-катенин в МСК при их кокультивировании с клетками линии А

3.5. В МСК р130 и Р-катенин физически взаимодействуют между собой в комплексе, в состав которого входит Gsk3f} р-катенин и р130 копреципитируются из экстрактов МСК при использовании антител к pi 30 и Е2/

Комплекс pi30-Е2/4-Р-катенин в МСК включает Gsk3P

Характеристика изменений комплекса р130-Р-катенин в ходе клеточного цикла Характеристика комплекса pi30-P-mmeHUH-Gsk3P при активации в МСК сигнального пути Wnt/p-катенин

Оценка формирования комплекса pi30-P-KamenuH-Gsk3p в ядерном и цитоплазматическом компартментах МСК

Двойная иммунофлюоресцентная окраска выявляет накопление активных форм Р-катенина, р130 и E2f4 в ядре МСК, обработанных LiCl

3.6. р130 регулирует транскрипцию генов, содержащих сайты связывания белков семейства LEF/TCF

Комплекс pi30-Gsk3р-р-катенин включает транскрипционные факторы Tcf3,4 Оценка транскрипционной активности р130 с помощью репортёрных , конструкций, содержащих сайты связывания белков Lef/Tcf

3.7. Уровень и активность р-катенина в ядерном компартменте МСК возрастает в ходе их длительного культивирования

Сравнительная оценка уровня и рисунка фосфорилирования Р-катенина и р130 в МСК в процессе их длительного культивирования in vitro Иммунофлюоресцентная оценка выявляет повышение уровня и активацию Р-катенина в МСК поздних пассажей

4. Обсуждение результатов

4.1. Фенотипическая характеристика МСК в ходе длительного

Изменение морфологических свойств МСК в npoifecce длительного пассирования in vitro

В прогрессе длительного культивирования МСК теряют способность к дифференцировке, активируют пролиферацию и приобретают туморогенные свойства

4.2. Индукция сигнального пути Wnt/p-катенин в МСК сопряжена с активацией белков р130 и E2f

Разработка модели энтодермальной дифференцировки МСК, роль сигнального пути Wnt/fi-катенин

Индукция сигнального пути Wnt/fi-катенин в МСК сопряжена с формированием активного состояния репрессорных белков р130 и Е2/4, но не вызывает торможения деления клеток

Характеристика функционального состояния fi-катенина с помощью антител к его активным и неактивным формам

Активация сигнального пути Wnt/fi-катенин в МСК при их кокультивировании с клетками линии А-549 связана с секрецией ими Wnt2 и его паракринным действием на МСК

4.3. р130, СэкЗр и р-катенин формируют в МСК функциональный комплекс

В МСК супрессор р!30/Е2/4 физически взаимодействует с у3-катенином и ОзкЗР Изменение взаимодействия белков в комплексер130-С$к3/3-/3-Катенин входе клеточного цикла и при активации в МСК сигнального пути Wnt/fi-кameнuн Комплексы р130-р-катенин-0зк3р формируются преимущественно в ядерном компартменте клетки

Комплекс р1 ЗО-ОзкЗрф-катенин включает в свой состав факторы Тс/3,4 и выявляет специфическую транскрипционную активность р130 Приобретение МСК туморогенности в ходе пассирования сочетается с активацией /3-катенина

4.4. В чем заключается регенеративный потенциал МСК и какова роль взаимодействия сигнальных путей pRb и Wnt/p-катенин в его формировании?

Пролиферативная активность МСК в ходе длительного пассирования in vitro Клоногенность

Индуцибельность к дифференцировке в клетки мезодермального происхождения Пластичность или способность к трансдифференцировке в клетки энтодермального происхождения Отсутствие туморогенной активности

5. Выводы

Рекомендованный список диссертаций по специальности «Клеточная биология, цитология, гистология», 03.03.04 шифр ВАК

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Взаимодействие p130 - белка семейства pRb, и β-катенина - передатчика сигналов Wnt, в ходе дифференцировки и трансформации мезенхимных стволовых клеток мыши»

Актуальность проблемы. Исследование возможности замещения клеток и тканей различных органов является одной из актуальных задач современной клеточной биологии в связи с увеличением продолжительности жизни, возрастанием числа возрастных заболеваний и необходимостью восстановления поражённых органов. Многие исследования биологических источников для регенеративной терапии сфокусированы на соматических стволовых клетках (ССК), которые обладают уникальной способностью самообновляться и образовывать специализированные клетки различной тканевой специфичности.

Мезенхимные стволовые клетки (МСК), происходящие из мезодермы, являются одним из типов ССК и привлекают к себе внимание как потенциальный ресурс для регенеративной терапии благодаря относительной простоте их получения и широкому дифференцировочному потенциалу. МСК обладают свойством превращаться в клетки не только мезодермального, но эктодермального и энтодермального происхождения, в частности, в клетки альвеолярного эпителия. Феномен приобретения ССК необычного фенотипа и несвойственных им в нормальных условиях функций был назван пластичностью. Механизм пластичности не достаточно исследован и в настоящее время является объектом изучения исследовательских лабораторий во всем мире.

В основе пластичности МСК лежит их способность к эпигенетическому репрограммированию и трансдифференцировке в клеточные линии, происходящие из эктодермального и энтодермального зародышевых листков. В литературе описаны несколько моделей для изучения трансдифференцировки МСК в клетки энтодермального происхождения различной тканевой специфичности. Однако, эти модели не предоставляют возможности для анализа внутриклеточных событий в отдельных клетках в процессе их трансдифференцировки, вызванной внешними сигналами. Известно, что в основе дифференцировки стволовых клеток (СК) лежит взаимодействие молекул множества сигнальных путей. Среди других в регуляции функций ССК ключевую роль играет канонический сигнальный путь Wnt/p-катенин, который широко используется в закладке и формировании тканей и органов в процессе эмбрионального развития, включая образование энтодермальных тканей. В культуре клеток in vitro и в организме зрелого животного активность сигнального пути Wnt/p-катенин важна для поддержания функций СК различных линий, а конститутивное повышение активности этого пути часто связано с возникновением раковых СК.

Функционирование сигнального пути Wnt/p-катенин осуществляется в контексте клеточного цикла, убиквитарным негативным регулятором которого является семейство 7 продукта гена ретинобластомы (pRb). Члены семейства pRb осуществляют эффекторный контроль клеточного цикла путем взаимодействия с транскрипционными факторами семейства E2F. В свою очередь белки E2f регулируют синтез и активность молекул, составляющих машину клеточного цикла. При планировании настоящей работы мы основывались на хорошо известных данных о том, что члены семейства pRb взаимодействуют с сигнальными молекулами других регуляторных путей в контрольных точках клеточного цикла, наиболее важной из которых является точка R1 фазы G1. Взаимодействие сигнальных путей Wnt/p-катенин и pRb в точке R1 может быть опосредовано киназой Gsk3|3, которая фосфорилирует как р130 - член семейства pRb, так и Р-катенин - основной передатчик в сигнальном пути Wnt/p-катенин. Изучение механизма такого взаимодействия и его функциональной роли может быть важным для понимания механизма пластичности МСК и его моделирования при разработке новых методов регенеративной терапии заболеваний человека.

Цель и задачи работы.

Цель работы: исследовать взаимодействие р-катенина - передатчика сигналов Wnt, и р130 -члена семейства pRb, в ходе дифференцировки и трансформации мезенхимных стволовых клеток in vitro.

Задачи работы:

1. Изучить возможность индукции энтодермальной дифференцировки МСК путём их кокультивирования с клетками линии А-549, происходящими из эпителия лёгких, и изучить роль экспрессии гена WNT2 в клетках А-549 в механизме индукции такой дифференцировки.

2. Охарактеризовать состояние pi30 и р-катенина в МСК в различных фазах клеточного цикла и при активации сигнального пути Wnt/p-катенин.

3. Изучить механизм формирования комплекса р!30 с р-катенином, изменения состава комплекса в ходе клеточного цикла, при активации сигнального пути Wnt/p-катенин, а также его потенциальную роль в транскрипционной регуляции генов, содержащих в промоторах сайты связывания факторов семейства LEF/TCF.

4. Оценить пролиферативную, дифференцировочную, клоногенную, адгезивную и туморогенную активность МСК, уровень ядерного р-катенина и транскрипционных факторов Tcf3,4 в процессе длительного пассирования МСК.

Основные положения, выносимые на защиту

1. МСК, кокультивированные с клетками линии А-549 в условиях разделения клеточно-непроницаемой мембраной, показывают активацию сигнального пути Wnt/p-катенин и экспрессию легочных эпителиальных маркеров; торможение экспрессии гена WNT2 в клетках А-549 с помощью малой интерферирующей РНК отменяет активацию Р-катенина в кокультивируемых МСК; кокультивирование с клетками А-549 можно рассматривать в качестве модели паракринной индукции эпителиальной дифференцировки МСК in vitro.

2. В асинхронно делящихся или синхронизированных в фазах G0/G1, S, и G2/M клеточного цикла МСК уровень и рисунок фосфорилирования Р-катенина и pi30 существенно не изменяется; индукция сигнального пути Wnt/p-катенин ведет к активации Р-катенина, pi30 и E2f4, однако комплекс pl30/E2f4 не вызывает торможения деления МСК.

3. В МСК Р-катенин, р 130 и Gsk3p взаимодействуют между собой и формируют комплекс, включающий в свой состав факторы E2f4, Tcf3,4 и проявляющий транскрипционную активность при экспрессии экзогенного р-катенина и р 130.

4. В ходе длительного культивирования МСК повышается их пролиферативная, снижается дифференцировочная и адгезивная активность, на 43-47-м пассаже клетки становятся туморогенными и образуют опухоли при введении сингенным животным; приобретение туморогенности при длительном культивировании МСК сопряжено с накоплением внутриядерного р-катенина и транскрипционных факторов Tcf3,4.

Научная новизна полученных результатов. Впервые показано, что при совместном культивировании с клетками линии А-549 в условиях разделения клеточно-непроницаемой мембраной в МСК активируется сигнальный путь Wnt/p-катенин и экспрессируются эпителиальные маркеры. Впервые установлено, что активация сигнального пути Wnt/p-катенин в кокультивируемых МСК может вызываться фактором Wnt2, секретируемым клетками А-549, торможение в них экспрессии гена WNT2 с помощью стабильной продукции малой интерферирующей РНК против мРНК WNT2 отменяет активацию р-катенина в МСК. Новым является то, что кокультивирование МСК и клеток линии А-549 в условиях их разделения клеточно-непроницаемой мембраной можно рассматривать в качестве модели паракринной индукции эпителиальной дифференцировки МСК. Впервые найдено, что уровень и рисунок фосфорилирования р 130 в ходе клеточного цикла в МСК не изменяется в противоположность соматическим дифференцирующимся клеткам линии T98G. Проведенный нами анализ механизма этого феномена впервые позволил выяснить, что индукция в МСК канонического сигнального пути Wnt ведет к активации его основного передатчика - р-катенина, а также члена семейства pRb, белка р 130, и транскрипционного 9 фактора E2f4, которые формируют комплекс pl30/E2f4. Этот комплекс поддерживает некоторые линии соматических дифференцирующихся клеток в состоянии покоя, но в МСК не проявляет супрессорной активности, что, возможно, связано с включением в его состав р-катенина. Мы показали, что в МСК Р-катенин и р!30 физически взаимодействуют между собой, формируя с Gsk3P комплексы, включающие в свой состав различно фосфорилированные формы pi30 и транскрипционные факторы семейства LEF/TCF - Tcf3,4. Комплексы pl30-Gsk3P-P-KaTeHHH-Tcf3,4 обладают транскрипционной активностью. Мы установили, что в ходе длительного культивирования значительно возрастает пролиферативная активность МСК, они утрачивают способность к дифференцировке и приобретают туморогенность, формируя опухоли при подкожном или внутримышечном введении сингенным мышам-реципиентам. Новым в изучении механизма туморогенности является то, что ее возникновение в МСК сочетается с повышением уровня и накоплением в ядре клеток активных форм р-катенина и транскрипционных факторов Tcf3,4.

Теоретическое и практическое значение работы. Теоретическое значение работы заключается в разработке новой модели паракринной индукции эпителиальной дифференцировки МСК in vitro при их совместном культивировании с клетками линии А-549 эпителиального происхождения в условиях разделения клеточно-непроницаемой мембраной. Важным результатом работы является получение новых доказательств взаимодействия в МСК сигнальных путей Wnt/p-катенин и семейства гена ретинобластомы (pRb) путем формирования комплекса pl30-Gsk3P-P-KaTeHHH. Мы впервые обнаружили, что комплекс pl30-Gsk3p-p-KaTeHHH в МСК существует в разных фазах клеточного цикла и обладает транскрипционной активностью по отношению к генам, содержащим сайты связывания белков семейства LEF/TCF. Опухолевая трансформация МСК в ходе их длительного культивирования сочетается с повышением уровня, перераспределением Р-катенина внутри клетки и его конститутивной активацией. Практическое значение работы заключается в том, что она предоставляет возможность рассматривать комплекс р130-0зк3р-р-катенин в качестве мишени фармакологической коррекции при разработке подходов и методов регуляции поведения нормальных и опухолевых стволовых клеток в экспериментальных моделях регенеративной терапии и лечения злокачественных заболеваний. Полученные данные используются при чтении курса лекций «Введение в клеточную биологию стволовых клеток» на медицинском и биолого-почвенном факультетах Санкт-Петербургского государственного университета.

Апробация работы. По теме диссертации опубликовано 10 печатных работ (5 статей рецензируемых научных журналах и 5 тезисов докладов на научных конференциях). Результаты диссертации представлены на II Съезде Всероссийского общества клеточной биологии (Санкт-Петербург, 2007); 4-й Российской конференции по фундаментальной онкологии (Санкт-Петербург, 2008); Всероссийской научной школе-конференции «Аутологичные стволовые клетки: экспериментальные и клинические исследования» (Москва, 2009); II Конференции молодых ученых Института цитологии РАН (Санкт-Петербург, 2010), международной конференции «Stem Cells Update - From Basic Research to the Clinic» (Уппсала, Швеция, 2011).

Финансовая и некоммерческая поддержка работы. Работа выполнена при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (проекты 06-04-48439 и 0904-00595), Правительства Санкт-Петербурга (грант 2.6107-06.099). Автор выражает глубокую благодарность сотрудникам ИНЦ РАН H.H. Никольскому, E.H. Толкуновой, А.Н. Томилину, В.А. Поспелову, В.В. Зенину, Г.И. Штейну, В.М. Михайлову; д-ру Чанг (LS Chang, Children's Hospital, Ohio State University, Columbus, США), д-ру Серикову (V. Serikov, Children's Hospital Research Institute, Oakland City, CA, США), д-ру Попову (N. Popov, University of Wurzburg, Германия), д-ру Прокопу (D. Prockop, Tulane University, Florida, США) за предоставленные клеточные линии, реактивы, конструкции и антитела (перечислены в разделе «Материалы и методы»), возможность использовать приборы и консультативную помощь в освоении методов.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов, их обсуждения, выводов и списка литературы, включающего 168 ссылок. Работа изложена на 120 страницах машинописного текста и иллюстрирована 3 таблицами и 33 рисунками.

Похожие диссертационные работы по специальности «Клеточная биология, цитология, гистология», 03.03.04 шифр ВАК

Заключение диссертации по теме «Клеточная биология, цитология, гистология», Петров, Николай Сергеевич

5. Выводы.

1. При кокультивировании с клетками линии А-549, происходящими из эпителия легких, в условиях разделения клеточно-непроницаемой мембраной в МСК активируется сигнальный путь Wnt/p-кaтeнин, что сопряжено с приобретением белками р130 и ЕПА активного состояния и экспрессией маркеров лёгочного эпителия; торможение в клетках А-549 экспрессии гена ¡¥ЫТ2 с помощью метода интерференции РНК отменяет в кокультивируемых МСК активацию Р-катенина.

2. В МСК в ходе клеточного цикла не происходит существенных изменений уровня и рисунка фосфорилирования белков р130 и Е2£4, которые в контрольных клетках линии Т980 формируют супрессорный комплекс, тормозящий выход из состояния покоя; диссоциация этого комплекса за счет фосфорилирования и деградации р130 является обязательным условием прогрессии клеточного цикла в клетках Т980, но не происходит в МСК.

3. В МСК Р-катенин, р130, ОэкЗР и Е2Т4 формируют в различных фазах клеточного цикла комплекс, состав которого в ядре и цитозоле различается и изменяется при активации сигнального пути \Уп^Р-катенин; в состав этого комплекса входят факторы ТсО,4, опосредующие его транскрипционную активность, что выявляется при экспрессии экзогенного Р-катенина или Р-катенина вместе с р130.

4. В ходе длительного культивирования МСК происходит повышение скорости их пролиферации, понижаются дифференцировочная и адгезивная активность, на 43-47-м пассажах клетки образуют опухоли при введении сингенным животным. Приобретение туморогенности МСК в ходе их длительного пассирования сочетается с повышением уровня ядерного Р-катенина, транскрипционных факторов ТсО,4 и снижением чувствительности клеток к действию ионов лития, что соответствует состоянию конститутивной активности сигнального пути \¥п1/р-катенин в МСК поздних пассажей и КОЭ.

6. Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Popov B.V., Serikov V.B., Petrov N.S., Izusova T.Y., Gupta N., Matthay A. 2007. Lung epithelial cells induce epithelial differentiation in mouse mesenchymal bone marrow stem cells by paracrine mechanism. Tissue Eng. 13(10): 2441-2450.

2. Гринчук T.M., Иванцов K.M., Алексеенко JT.Jl., Кожухарова И.В., Зайчик A.M., Михайлов В.М., Петров Н.С., Попов Б.В. 2008. Характеристика культуры мезенхимных стволовых клеток мыши, экспрессирующих GFP. Цитология. 50(12): 1029-1034.

3. Попов Б.В., Петров Н.С., Михайлов В.М., Томилин А.Н., Алексеенко Л.Л., Гринчук Т.М., Зайчик A.M. 2009. Спонтанная трансформация и иммортализация мезенхимных стволовых клеток в культуре in vitro. Цитология. 51(2): 91-102.

4. Петров Н.С., Жидкова О.В., Зенин В.В., Попов Б.В. 2011. Негативный регулятор клеточного цикла - белок pi30 и Р-катенин формируют комплекс в мезенхимных стволовых клетках. Цитология. 53(2): 107-115.

5. Petrov N., Zhidkova О., Serikov V., Zenin V., Popov В. 2012. Induction of Wnt/p-catenin signaling in mouse mesenchymal stem cells is associated with activation of the pi30 and E2f4 and formation of the pl30/Gsk3p/p-catenin complex. Stem Cells Dev. 21(4): 587-597.

6. Петров H.C., Злобина O.B., Сериков В.Б., Зайчик A.M., Комяков Б.К., Гулиев Б.Г., Алексеев М.Ю., Попов Б.В. 2007. Сравнительная характеристика изменений уровня и рисунка фосфорилирования Р-катенина, белка р130 и транскрипционного фактора E2F4 в мезенхимных стволовых клетках при их кокультивировании с клетками линии А-549. Тезисы докладов II Съезда Общества клеточной биологии совместно с Юбилейной конференцией, посвященной 50-летию Института цитологии РАН. Цитология. 49(9):782.

7. Попов Б.В., Гринчук Т.М., Иванцов К.М., Петров Н.С., Злобина О.В., Алексенко Л.Л., Скрипкина Н.С., Каминская Е.В, Кузоватов С.Н., Михайлов В.М. 2008. Опухолевая трансформация мезенхимальных стволовых клеток костного мозга мышей C57BL/6, экспрессирующих белок GFP. Тезисы 4-й Российской конференции по фундаментальной онкологии. Вопросы онкологии. 54(2): 22.

8. Петров Н.С., Жидкова О.В., Сериков В.Б., Попов Б.В. 2009. р-катенин, р130 и E2F4 формируют функциональный комплекс в мезенхимальных стволовых клетках. Материалы Всероссийской научной школы-конференции «Аутологичные стволовые клетки: экспериментальные и клинические исследования». 48.

9. Петров Н.С., Жидкова О.В., Попов Б.В. 2010. Р-катенин и GSK3P формируют в мезенхимных стволовых клетках комплексы, включающие различные формы р130. Тезисы докладов и сообщений, представленные на II Конференцию молодых ученых Института цитологии РАН. Цитология. 52(6): 501-502.

10. Petrov N., Zhidkova О., Zenin V., Popov В. 2011. Induction of Wnt/p-catenin signaling in mouse mesenchymal stem cells is associated with activation of pi30 and E2f4 and transformation of the pl30/Gsk3p/p-catenin complex. Abstracts of «Stem Cells Update -From Basic Research to the Clinic». 50.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Петров, Николай Сергеевич, 2012 год

1. ГринчукТ.М., Иванцов К.М., Алексеенко Л.Л, Кожухарова И.В., Зайчик A.M., Михайлов В.М., Петров Н.С., Попов Б.В. 2008. Характеристика культуры мезенхимных стволовых клеток, экспрессирующих GFP. Цитология. 50(12): 1030-1035.

2. Попов Б.В. 2010. Введение в клеточную биологию стволовых клеток. Санкт-Петербург: СпецЛит. 319 с., ISBN 978-5-299-00430-4.

3. Попов Б.В., Watt S.M., Розанов Ю.М., Chang L-S. 2010. Мутация в области структурного кармана pRb вызывает повышение его сродства к E2F4, сопряженное с активацией мышечной дифференцировки. Молекулярная биология. 44(2): 323-334.

4. Попов Б.В., Петров Н.С., Михайлов В.М., Томилин А.Н., Алексеенко Л.Л., Гринчук Т.М., Зайчик A.M. 2009. Спонтанная трансформация и иммортализация мезенхимных стволовых клеток в культуре in vitro. Цитология. (51)2: 91-102.

5. Aberle Н., Bauer A., Stappert J., Kispert A., Kemler R. 1997. P-catenin is a target for the ubiquitin-proteosome pathway. EMBO J. 16(13): 3797-3804.

6. Abramova M.V., Zatulovskiy E.A., Svetlikova S.B., Kukushkin A.N., PospelovV.A. 2010. e2fl Gene is a new member of Wnt/beta-catenin/Tcf-regulated genes. Biochem Biophys Res Commun. 391(1): 142-146.

7. Arce L., Yokoyama N.N., Waterman M.L. 2006. Diversity of LEF/TCF action in development and disease. Oncogene. 25(57): 7492-7504.

8. Atcha F.A., Syed A., Wu В., Hoverter N.P., Yokoyama N.N., Ting J.H., Munguia J.E., Mangalam H.J., Marsh J.L., Waterman M.L. 2007. A unique DNA binding domain converts T-cell factors into strong Wnt effectors. Mol Cell Biol. 27(23): 8352-8363.

9. BejsovecA. 2000. Wnt signaling: An embarrassment of receptors. Current Biology. 10(24): 919-922.

10. Bianco P., Rimucci M., Grothos S., Robey P.G. 2001. Bone marrow stromal stem cells: nature, biology and potential applications. Stem Cells. 19(3): 180-192.

11. Blobel G.A., Moll R., Franke W.W., Vogt-Moykopf I. 1984. Cytokeratins in normal lung and lung carcinomas. I. Adenocarcinomas, squamous cell carcinomas and cultured cell lines. Virchows Arch В Cell Pathol Incl Mol Pathol. 45(4): 407-429.

12. Bonner A.E., Lemon W.J., YouM. 2003. Gene expression signatures identify novel regulatory pathways during murine lung development: implication for lung development. J Med Genet. 40(6): 408-417.

13. Brummelkamp T.R., Bernards R., Agami R. 2002. A system for stable expression of short interfering RNAs in mammalian cells. Science. 296(5567): 550-553.

14. Burkhart D.L., Sage J. 2008. Cellular mechanisms of tumour suppression by the retinoblastoma gene. Nat Rev Cancer. 8(9): 671-682.

15. Calo E., Quintero-Estades J.A., Danielian P.S., Nedelcu S., Berman S.D., Lees J.A. 2010. Rb regulates fate choice and lineage commitment in vivo. Nature. 466(7310): 1110-1114.

16. Campisi J., d'Adda di Fagagna F. 2007. Cellular senescence: when bad things happen to good cells. Nat. Rev. Mol Cell Biol. 8(9): 729-740.

17. Capelluto D.G., Overduin M. 2005. Secondary structure, 1H, 13C and 15N resonance assignments and molecular interactions of the dishevelled DIX domain. J Biochem Mol Biol. 38(2): 243-247.

18. Choi H.H., Jong H.S., Hyun Song S„ You Kim Т., Kyeong Kim N. Bang Y.J. 2002. pl30 mediates TGF-beta-induced cell-cycle arrest in Rb mutant HT-3 cells. Gynecol Oncol. 86(2): 184-189.

19. Ciavarra G., Ho A.T., Cobrinik D., Zacksenhaus E. 2011. Critical role of the Rb family in myoblast survival and fusion. PLoS One. 6(3): el7682.

20. Clevers H. 2006. Wnt/beta-catenin signaling in development and disease. Cell. 127(3): 469480.

21. Cobrinik D. 2005. Pocket proteins and cell cycle control. Oncogene. 24(17): 2796-2809.

22. Dannenberg J.H., Schuijff L., Dekker M., van der Valk M., te Riele H. 2004. Tissue-specific tumor suppressor activity of retinoblastoma gene homologs pl07 and pl30. Genes Dev. 18(23): 2952-2962.

23. Dannenberg J.H., vanRossumA., Schuijff L., te Riele H. 2000. Ablation of the retinoblastoma gene family deregulates G(l) control causing immortalization and increased cell turnover under growth-restricting conditions. Genes Dev. 14(23): 3051-3064.

24. Di Leonardo A., Linke S.P., ClarkinK., Wahl G.M. 1994. DNA damage triggers a prolonged p53-dependent G1 arrest and long-term induction of Cipl in normal human fibroblasts. Genes Dev. 8(21): 2540-2551.

25. Doble B.W., Woodgett J.R 2003. GSK-3: tricks of the trade for a multi-tasking kinase. J Cell Sci. 116(7): 1175-1186.

26. DuPree E.L., Mazumder S., Almasan A. 2004. Genotoxic stress induces expression of E2F4, leading to its association with pl30 in prostate carcinoma cells. Cancer Res. 64(13): 43904393.

27. Dyson N. 1998. The regulation of E2F by pRB-family proteins. Genes Dev. 12(15): 22452262.

28. Etheridge S.L., Spencer G.J., Health D.J. 2004. Expression profiling and functional analysis of Wnt signaling mechanism in mesenchymal stem cells. Stem Cell. 22(5): 849-860.

29. Enshell-Seijffers D., Lindon C., Kashiwagi M., Morgan B.A. 2010. beta-catenin activity in the dermal papilla regulates morphogenesis and regeneration of hair. Dev Cell. 18(4): 633642.

30. Forbers S.J., Vig P., Poulsom R., Wright N.A., Alison M.R. 2002. Adult stem cell plasticity: new pathways of tissue regeneration become visible. Clinical Science. 103(4): 355-369.

31. Frame S., Cohen P. 2001. GSK3 takes centre stage more than 20 years after its discovery. BiochemJ. 359(Pt 1): 1-16.

32. Frescas D., Pagano M. 2008. Deregulated proteolysis by the F-box proteins SKP2 and beta-TrCP: tipping the scales of cancer. Nat Rev Cancer. 8(6): 438-449.

33. Friedenstein A.J., Petrakova K.V., Kurolesova A.I., Frolova G.P. 1968. Heterotopic of bone marrow. Analysis of precursor cells for osteogenic and hematopoietic tissues. Transplantation. 6(2): 230-247.

34. Frolov M.V., Dyson N.J. 2004. Molecular mechanisms of E2F-dependent activation and pRB-mediated repression. J Cell Sci. 117(11): 2173-2181.

35. Fuchs E., Tumbar T., Guasch G. 2004. Socializing with the neighbors: stem cells and their niche. Cell. 116(6): 769-778.

36. Giacinti C., Giordano A. 2006. RB and cell cycle progression. Oncogene. 25(38): 5220-7.

37. Grana X., Garriga J., Mayol X. 1998. Role of the retinoblastoma protein family, pRB, pi 07 and pl30 in the negative control of cell growth. Oncogene. 17(25): 3365-3383

38. Gupta N., SuX., Popov B., LeeJ.W., SerikovV., MatthayM.A. 2007. Intrapulmonary delivery of bone marrow-derived mesenchymal stem cells improves survival and attenuates endotoxin-induced acute lung injury in mice. J Immunol. 179(3): 1855-1863.

39. Habas R., Dawid I.B. 2005. Dishevelled and Wnt signaling: is the nucleus the final frontier? Journal of Biol. 4(1): 2.

40. Hannon G.J., Demetrick D., Beach D. 1993. Isolation of the Rb-related pi30 through its interaction with CDK2 and cyclins.Genes Dev. 7(12A): 2378-2391.

41. Hansen K., Farkas T., Lukas J., Holm K., Ronnstrand L., Bartek J. 2001. Phosphorylation-dependent and -independent functions of pi30 cooperate to evoke a sustained G1 block. EMBO J. 20(3): 422-432.

42. Hass R., Kasper C., Bohm S., Jacobs R. 2011. Different populations and sources of human mesenchymal stem cells (MSC): A comparison of adult and neonatal tissue-derived MSC. Cell Commun Signal. 9: 12.

43. Helin K., Holm K., Niebuhr A., Eiberg H., Tommerup N., Hougaard S., Poulsen H.S., Spang-Thomsen M., Norgaard P. 1997. Loss of the retinoblastoma protein-related pl30 protein in small cell lung carcinoma. Proc Nat Acad Sci USA. 94(13): 6933-6938.

44. Helledie T., Nurcombe V., Cool S.M. 2008. A simple and reliable electroporation method for human bone marrow mesenchymal stem cells. Stem Cells Dev. 17(4): 837-848.

45. Helmbold H., Komm N., Deppert W., Bohn W. 2009. Rb2/pl30 is the dominating pocket protein in the p53-p21 DNA damage response pathway leading to senescence. Oncogene. 28(39): 3456-3467.

46. Herwig S., Strauss M. 1997. The retinoblastoma protein: a master regulator of cell cycle, differentiation and apoptosis. Eur J Biochem. 246(3): 581-601.

47. Herzog E.L. Chai L., Krause D.S. 2003. Plasticity of marrow-derived stem cells. Blood. 102(10): 3483-3493.

48. Heyflick L. 1965. The limited in vitro lifetime of human diploid cell strains. Exp Cell Res. 37: 614-636.

49. Hirabayashi Y., ItohY., TabataH., NakajimaK., AkiyamaT., MasuyamaN., GotohY. 2004. The Wnt/beta-catenin pathway directs neuronal differentiation of cortical neural precursor cells. Development. 131(12): 2791-2801.

50. Hoppler S., Kavanagh C.L. 2007. Wnt signalling: variety at the core. J Cell Sci. 120(3): 385393.

51. Hosoyama T., Nishijo K., Prajapati S.I., Li G., Keller C.J. 2011. Rbl gene inactivation expands satellite cell and postnatal myoblast pools. Biol Chem. 286(22): 19556-19564.

52. HsuT.C., Billen D., LevanA. 1961. Mammalian chromosomes in vitro. XV. Patterns of transformation. J Natl Cancer Inst. 27: 515-541.

53. Hughes T.A., Brady H.J. 2005. E2F1 up-regulates the expression of the tumour suppressor axin2 both by activation of transcription and by mRNA stabilisation. Biochem Biophys Res Commun. 329(4): 1267-1274.

54. Hurford R.K., Cobrinik D., Lee M.H., Dyson N. 1997. pRB and pl07/pl30 are required for the regulated expression of different sets of E2F responsive genes. Genes Dev. 11(11): 1447-1463.

55. Kawano Y., Kypta R. 2004. Secreted antagonists of the Wnt signaling pathway. J Cell Biol. 116(13): 2627-2634.

56. Kiyono T., Foster S.A., Koop J.I., McDougall J.K., Galloway D.A., Klingelhutz A.J. 1998. Both Rb/pl6INK4a inactivation and telomerase activity are required to immortalize human epithelial cells. Nature. 396(6706): 84-88.

57. KléberM., SommerL. 2004. Wnt signaling and the regulation of stem cell function. Curr. Opin. Cell Biol. 16(6): 681-687.

58. Kong L.J., Chang J.T., Bild A.H., Nevins J.R. 2007. Compensation and specificity of function within the E2F family. Oncogene. 26(3): 321-327.

59. Korinek V., Barker N., Morin P.J., van Wichen D., de Weger R., Kinzler K.W., Vogelstein B., Clevers H. 1997. Constitutive transcriptional activation by a beta-catenin-Tcf complex in APC-/- colon carcinoma. Science. 275(5307): 1784-1787.

60. Labalette C, Renard C.A., NeuveutC., BuendiaM.A., Wei Y. 2004. Interaction and functional cooperation between the LIM protein FHL2, CBP/p300, and beta-catenin. Mol Cell Biol. 24(24): 10689-10702.

61. LeCouter J.E., Kablar B., Whyte P.F., Ying C., Rudnicki M.A. 1998. Strain-dependent embryonic lethality in mice lacking the retinoblastoma-related pi30 gene. Development. 125(23): 4669-4679.

62. Lee J.O., Russo A.A., Pavletich N.P. 1998. Structure of the retinoblastoma tumour-suppressor pocket domain bound to a peptide from HPV E7. Nature. 391(6670): 859-865.

63. Lee E., Salic A., Kirschner M.W. 2001. Physiological regulation of (beta)-catenin stability by Tcf3 and CKlepsilon. J Cell Biol. 154(5): 983-993.

64. Li F.Q., Mofunanya A., Harris K., Takemaru K. 2008. Chibby cooperates with 14-3-3 to regulate beta-catenin subcellular distribution and signaling activity. J Cell Biol. 181(7): 1141-1154.

65. Li Y., Graham C., Lacy S., Duncan A.M., Whyte P. 1993. The adenovirus ElA-associated 130-kD protein is encoded by a member of the retinoblastoma gene family and physically interacts with cyclins A and E. Genes Dev. 7(12A): 2366-2377.

66. Litovchick L., Florens L.A., Swanson S.K., Washburn M.P., DeCaprio J.A. 2011. DYRK1A protein kinase promotes quiescence and senescence through DREAM complex assembly. Genes Dev. 25(8): 801-813.

67. Litovchick L., Chestukhin A., DeCaprio J.A. 2004. Glycogen synthase kinase 3 phosphorylates RBL2/pl30 during quiescence. Mol Cell Biol. 24(20): 8970-8980.

68. Lloyd A.C. 2002. Limits to lifespan. Nat Cell Biol. 4(2): E25-E27.

69. Logan C.Y., Nusse R. 2004. The Wnt signaling pathway in Development and Disease. Ann Rev Cell Dev. Biol. 20: 781-810.

70. Lorz C., García-Escudero R., Segrelles C., Garín M.I., Ariza J.M., Santos M., Ruiz S., Lara M.F., Martínez-Cruz A.B., Costa C., Buitrago-Pérez A., Saiz-Ladera C., Dueñas M.,

71. Paramio J.M. 2010. A functional role of RB-dependent pathway in the control of quiescence in adult epidermal stem cells revealed by genomic profiling. Stem Cell Rev. 6(2): 162-177.

72. Lu J., Qian J., Izvolsky K.I., Cardoso W.V., 2004. Global analysis of genes differentially expressed in branching and non-branching regions of the mouse embryonic lung. Developmental Biology. 273(2): 418-435.

73. MacDonald B.T., Tamai K., HeX. 2009. Wnt/beta-catenin signaling: components, mechanisms, and diseases. Dev Cell. 17(1): 9-26.

74. MalbonC.C., Wang H., MoonR.T. 2001. Wnt signaling and heterotrimeric G-proteins: strange bedfellows or a classic romance? Biochem Biophys Res Commun. 287(3): 589-593.

75. Mayol X., Garriga J., Grana X. 1995. Cell cycle-dependent phosphorylation of the retinoblastoma-related protein pi30. Oncogene. 11(4): 801-808.

76. Mayol X., Grana X., Baldi A., Sang N. Hu Q., Giordano A. 1993. Cloning of a new member of the retinoblastoma gene family (pRb2) which binds to the El A transforming domain. Oncogene. 8(9): 2561-2566.

77. McConnell B.B., Starborg M., Brookes S., Peters G. 1998. Inhibitors of cyclin-dependent kinases induce features of replicative senescence in early passage human diploid fibroblasts. Curr Biol. 8(6): 351-354.

78. McDade S.S., Patel D., McCance D.J. 2011. p63 maintains keratinocyte proliferative capacity through regulation of Skp2-pl30 levels. J Cell Sci. 124(Pt 10): 1635-1643.

79. McEachern M.J., Blackburn E.H. 1996. Cap-prevented recombination between terminal telomeric repeat arrays (telomere CPR) maintains telomeres in Kluyveromyces lactis lacking telomerase. Genes Dev. 10(14): 1822-1834.

80. Meirelles L.S., Nardi N.B. 2003. Murine marrow-derived mesenchymal stem cell: isolation, in vitro expansion, and characterization. Br J Haematol. 123(4): 702-711.

81. Miller J.R. 2001. The Wnts. Genome Biol. 3(1): 1342-1356.

82. Moberg K., Starz M.A., Lees J.A. 1996. E2F-4 switches from pl30 to pl07 and pRB in response to cell cycle reentry. Mol Cell Biol. 16(4): 1436-1449.

83. Morrison S.J., Kimble J. 2006. Asymmetric and symmetric stem-cell divisions in development and cancer. Nature. 441(7097): 1068-1074.

84. Mosimann C., Hausmann G., Basler K. 2009. Beta-catenin hits chromatin: regulation of Wnt target gene activation. Nat Rev Mol Cell Biol. 10(4): 276-286.

85. Mucenski M.L., Wert S.E., Nation J.M., Loudy D.E., Huelsken J., Birchmeier W., Whitsett J. 2003. P-catenin is required for specification of proximal/distal cell fate during lung morphogenesis. J Biol Chem. 278(4): 40231-40238.

86. Nelson W.J., Nusse R. 2004. Convergence of Wnt, beta-catenin, and cadherin pathways. Science. 303(5663):1483-1487.

87. Nguyen H., Rendl M., Fuchs E. 2006. Tcf3 governs stem cell features and represses cell fate determination in skin. Cell. 127(1): 171-183.

88. Nielsen S.J., Schneider R., Bauer U.M., Bannister A.J., Morrison A., O'Carroll D., Firestein R., Cleary M., Jenuwein T., Herrera R.E., Kouzarides T. 2001. Rb targets histone H3 methylation and HP1 to promoters. Nature. 412(6846): 561-565.

89. Nusse R. 2003. Wnts and Hedgehogs: lipid-modified proteins and similarities in signaling mechanisms at the cell surface. Development. 130(22): 5297-5305.

90. Okubo T., HoganB.L. 2004. Hyperactive Wnt signaling changes the developmental potential of embryonic lung endoderm. J Biol. 3(3): 1186-1198.

91. Paggi M.G., Giordano A. 2001. Who is the boss in the retinoblastoma family? The point of view of Rb2/pl30, the little brother. Cancer Res. 61(12): 4651-4654.

92. Parker D.S., Ni Y.Y., Chang J.L., Li J., Cadigan K.M. 2008. Wingless signaling induces widespread chromatin remodeling of target loci. Mol Cell Biol. 28(5): 1815-1828.

93. Parrinello S., Samper E., Krtolica A., Goldstein J., Melov S., Campisi J. 2003. Oxygen sensitivity severely limits the replicative lifespan of murine fibroblasts. Nat Cell Biol. 5(8): 741-747.

94. Peister A., Mellad J.A., Wang M., Tucker H.A., Prockop D.J. 2004. Stable transfection of MSCs by electroporation. Gene Ther. 11(2): 224-228.

95. Peters S., MixE., Bauer P., Weinelt S., Schubert B. 2004. Wnt-5a expression in the rat neuronal progenitor cell line ST 14A. Exp Brain Res. 158(2): 189-195.

96. Petrov N.S., Popov B.V. 2012. The functional role of P-catenin in MSC malignancy during the long term culture. Submit for Cancer Res.

97. Phinney D.G. 2007. Biochemical heterogeneity of mesenchymal stem cell populations: clues to their therapeutic efficacy. Cell Cycle. 6(23): 2884-2889.

98. Pietersen A.M., van Lohuizen M. 2008. Stem cell regulation by polycomb repressors: postponing commitment. Curr Opin. Cell Biol. 20(2): 201-207.

99. Pittenger M.F., Mackay A.M., Beck S.C., Jaiswal R.K., Douglas R., Mosca J.D., Moorman M.A., Simonetti D.W., Craig S., Marshak D.R. 1999. Multilineage potential of adult human mesenchymal stem cells. Science. 284(5411): 143-147.

100. Plesca D., Crosby M.E., Gupta D., Almasan A. 2007. E2F4 function in G2: maintaining G2-arrest to prevent mitotic entry with damaged DNA. Cell Cycle. 6(10): 1147-1152.

101. Pongracz J.E., Stockley R.A. 2006. Wnt signalling in lung development and diseases. RespirRes. 7: 1465-1484.

102. Popov B., Chang L.S., Serikov V. 2005. Cell cycle-related transformation of the E2F4-pl30 repressor complex. Biochem Biophys Res Commun. 336(3): 762-769.

103. Popov B.V., Serikov V.B., Petrov N.S., IzusovaT.V., Gupta N. MatthayM.A. 2007. Lung epithelial cells induce endodermal differentiation in mouse mesenchymal bone marrow stem cells by paracrine mechanism. Tissue Eng. 13(10): 2441-2450.

104. Prockop D.J., Gregory C.A., Spees J.L. 2003. One strategy for cell and gene therapy: Harnessing the power of adult stem cells to repair tissues. Proc Natl Acad Sci USA. 100(Suppl 1): 11917-11923.

105. Prockop D.J. 1997. Marrow stromal cells as stem cells for nonhematopoietic tissues. Science. 276(5309): 71-74.

106. Ray K.P., Farrow S., Daly M., Talabot F., Searle N. 1997. Induction of the E-selectin promoter by interleukin 1 and tumour necrosis factor alpha, and inhibition by glucocorticoids. Biochem J. 328(Pt 2): 707-715.

107. Ren B., Cam H., Takahashi Y., Volkert T., Terragni J., Young R.A., Dynlacht B.D. 2002. E2F integrates cell cycle progression with DNA repair, replication, and G(2)/M checkpoints. Genes Dev. 16(2): 245-256.

108. Reya T., Duncan A.W., Ailles L., Domen J., Scherer D.C., Willert K., Hintz L., Nusse R., Weissman I.L. 2003. A role for Wnt signalling in self-renewal of haematopoietic stem cells. Nature. 423(6938): 409-414.

109. Rocha-Sanchez S.M., Scheetz L.R., Contreras M., Weston M.D., Korte M., McGee J., Walsh E.J. 2011. Mature mice lacking Rbl2/pl30 gene have supernumerary inner ear hair cells and supporting cells. J Neurosci. 31(24): 8883-8893.

110. Romanov S.R., Kozakiewicz B.K., Hoist C.R., Stampfer M.R., Haupt L.M., Tlsty T.D. 2001. Normal human mammary epithelial cells spontaneously escape senescence and acquire genomic changes. Nature. 409(6820): 633-637.

111. Rubin S.M., Gall A.L., Zheng N., Pavletich N.P. 2005. Structure of the Rb C-terminal domain bound to E2F1-DP1: a mechanism for phosphorylation-induced E2F release. Cell. 123(6): 1093-1106.

112. RubioD., Garcia-Castro J., Martin M.C., de la Fuente R., Cigudosa J.C., Lloyd A.C., Bernad A. 2005. Spontaneous human adult stem cell transformation. Cancer Res. 65(8): 3035-3039.

113. Ruiz S., Segrelles C., Santos M., Lara M.F., Paramio J.M. 2004. Functional link between retinoblastoma family of proteins and the Wnt signaling pathway in mouse epidermis. Dev Dyn. 230(3): 410-418.

114. Sakanaka C., Leong P., Xu L., Harrison D.S., Williams L.T. 1999. Casein kinase Is in th Wnt pathway: regulation of P-catenin function. Proc Natl Acad Sci USA. 96(22): 1254812552.

115. Sakanaka C. 2002. Phosphorilation and regulation of P-catenin by casein kinase Is. J Biochem. 132(5): 697-703.

116. Sandoval R., Pilkiriton M., Colamonici O.R. 2009. Deletion of the pl07/pl30-binding domain of Mipl30/LIN-9 bypasses the requirement for CDK4 activity for the dissociation of Mipl30/LIN-9 from pl07/pl30-E2F4 complex. Exp Cell Res. 315(17): 2914-2920.

117. Schaffer B.E., Park K.S., Yiu G., Conklin J.F., Lin C., Burkhart D.L., Karnezis A.N., Sweet-Cordero E.A., Sage J. 2010. Loss of pl30 accelerates tumor development in a mouse model for human small-cell lung carcinoma. Cancer Res. 70(10): 3877-3883.

118. Schwarze F., Meraner J., Lechner M., Loidl A., Stasyk T., Laich A., Loidl P. 2010. Cell cycle-dependent acetylation of Rb2/pl30 in NIH3T3 cells. Oncogene. 29(42): 5755-5760.

119. Serrano M., LinA.W., McCurrach M.E., Beach D., Lowe S.W. 1997. Oncogenic ras provokes premature cell senescence associated with accumulation of p53 and pl6INK4a. Cell. 88(5): 593-602.

120. Sharif J., EndohM., Koseki H. 2011. Epigenetic memory meets G2/M: to remember or to forget? Dev Cell. 20(1): 5-6.

121. Shu S.N, Wei L., Wang J.H, Zhan Y.T., Chen H.S., Wang Y. 2004. Hepatic differentiation capability of rat bone marrow-derived mesenchymal stem cells and hematopoietic stem cells. World J Gastroenterol. 10(19): 2818-2822.

122. ShuW., Jiang Y.Q., Lu'M.M., Morrisey E.E. 2002. Wnt7b regulates mesenchymal proliferation and vascular development in the lung. Development. 129(20): 4831-4842.

123. Sierra J., Yoshida T., Joazeiro C.A., Jones K.A. 2006. The APC tumor suppressor counteracts beta-catenin activation and H3K4 methylation at Wnt target genes. Genes Dev. 20(5): 586-600.

124. Sineva G.S., Pospelov V.A. 2010. Inhibition of GSK3beta enhances both adhesive and signalling activities of beta-catenin in mouse embryonic stem cells. Biol Cell. 102(10):549-560.

125. Smith E.J., Leone G., DeGregori J., Jakoi L., Nevins J.R. 1996. The accumulation of an E2F-pl30 transcriptional repressor distinguishes a GO cell state from a G1 cell state. Mol Cell Biol. 16(12): 6965-6976.

126. Sprent J., Cho J.H., Boyman O., Surh C.D. 2008. T cell homeostasis. Immunol Cell Biol. 86(4): 312-319.

127. Staal F.J., Noort Mv.M., Strous G.J., Clevers H.C. 2002. Wnt signals are transmitted through N-terminally dephosphorylated beta-catenin. EMBO Rep. 3(1): 63-68.

128. Stambolic V. Ruel L., Woodgett J.R. 1996. Litium inhibits glicogn syntase kinase-3 activiti and mimics Winglss signaling in intact cells. Curr Biol. 6(12): 1664-1668.

129. Street C.N., Sipione S., Helms L., BinetteT., Rajotte R.V., Bleackley R.C., KorbuttG.S. 2004. Stem cell-based approaches to solving the problem of tissue supply for islet transplantation in type 1 diabetes. Int J Biochem Cell Biol. 36(4): 667-683.

130. Tedesco D., Lukas J., Reed S.I. 2002. The pRb-related protein pi30 is regulated by phosphorylation-dependent proteolysis via the protein-ubiquitin ligase SCF(Skp2). Genes Dev. 16(22): 2946-2957.

131. Tian Q., Jin H., Cui Y., Guo C., Lu X. 2005. Regulation of Wnt gene expression. Develop Growth Differ. 47(5): 273-281.

132. Till J., McCulloch E.A. 1961. Direct measurement of the radiation sensitivity of normal mouse bone marrow cells. Radial Res. 14: 1419-1430.

133. Todaro G.J., Green H. 1963. Quantitative studies of the growth of mouse embryo cells in culture and their development into established lines. J Cell Biol. 17 : 299-313.

134. Trimarchi J.M., Lees J.A. 2002. Sibling rivalry in the E2F family. Nat Rev Mol Cell Biol. 3(1): 11-20.

135. UedaM., Gemmill R.M., West J., WinnR., SugitaM., TanakaN., UekiM., DrabkinH.A. 2001. Mutations of the beta- and gamma-catenin genes are uncommon in human lung, breast, kidney, cervical and ovarian carcinomas. Br J Cancer. 85(1): 64-68.

136. Venable M.E., Lee J.Y., Smyth M.J., Bielawska A., Obeid L.M. 1995. Role of ceramide in cellular senescence. J Biol Chem. 270(51): 30701-30708.

137. Verfaillie C.M., Pera M.F., Landsdorp P.M. 2002. Stem cells: hype and reality. Hematology. 2002(1): 369-396.

138. Weidenfeld J., Shu W., Zhang L., Millar S.E., Morrisey E.E. 2002. The WNT7b promoter is regulated by TTF-1, GATA6, and Foxa2 in lung epithelium. J Biol Chem. 277(23): 2106121070.

139. WillertK., Brown J.D., Danenberg E., Duncan A.W., Weissman I.L., ReyaT., Yates J.R., NusseR. 2003. Wnt proteins are lipid-modified and can act as stem cell growth factors. Nature. 423(6938): 448-452.

140. Willert K., Jones K.A. 2006. Wnt signaling: is the party in the nucleus? Genes Dev. 20(11): 1394-1404.

141. Wilson A., Laurenti E., Trumpp A. 2009. Balancing dormant and self-renewing hematopoietic stem cells. Curr Opin Genet Dev. 19(5): 461-468.

142. Woodbury D., Schwarz E.J., Prockop D.J., Black I.B. 2000. Adult rat and human bone marrow stromal cells differentiate into neurons. J Neurosci Res. 61(4): 364-370.

143. Wu Z., Rosen E.D., Brun R., Hauser S., Adelmant G., Troy A.E., McKeon C., Darlington

144. G.J., Spiegelman B.M. 1999. Cross-regulation of C/EBP alpha and PPAR gamma controls the transcriptional pathway of adipogenesis and insulin sensitivity. Mol Cell. 3(2): 151-8.

145. Yamada M., Kubo H., Kobayashi S., Ishizawa K., Numasaki M., Ueda S., Suzuki T., Sasaki

146. H. 2004. Bone marrow-derived progenitor cells are impotent for lung repair after lipopolysaccharide-induced lung injury. J Immunol. 172(2): 1266-1272.

Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.