Альтернативные системы экспрессии рекомбинантного ИФН-α-2b человека тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.12, кандидат биологических наук Кособокова, Екатерина Николаевна

• Кособокова, Екатерина Николаевна
• кандидат биологических наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Кособокова, Екатерина Николаевна

Содержание

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1 Общие сведения об интерферонах

1.2 Механизм действия

1.3 Биологические эффекты

1.4 Клиническое применение препаратов интерферона

1.5 Получение интерферонов

Глава 2. Материалы и методы

Глава 3. Результаты

3.1 Получение чИФН-а-2Ь из бактериального продуцента

3.2 Получение растительного продуцента чИФН-а-2Ь

3.3 Определение биологической активности рекомбинантных белков, полученных разными способами

Перспективы применения разработанных технологий

Выводы

Список литературы

Используемые сокращения GAF - gamma activation factor; фактор, активирующий транскрипцию ИФН-у-индуцируемых генов

GAS - gamma activation sequence; последовательность, участвующая в активации

транскрипции ИФН-у-индуцируемых генов

DMSO - Dimethyl sulfoxide, Диметилсульфоксид

IPTG - изопропил-1 -тио-р-Б-галактозид

IRF - IFN-regulatory factor; фактор, регулируемый ИФН

ISGF - IFN-stimulated gene factor; фактор, стимулирующий транскрипцию ИФН-а-индуцируемых генов

ISRE - IFN-stimulated response element; чувствительная последовательность,

участвующая в активации транскрипции ИФН-а-индуцируемых генов

NK-клетки - natural killer; Естественные киллеры, натуральные киллеры

PEG - Polyethylene glycol, Полиэтиленгликоль

PMSF - фенилметилсульфонилфторид

RBS - ribosomal binding site; место связывания рибосомы

Cdk - cyclin-dependent kinase, циклин-зависимая киназа

STAT - сигнальные трансдукторы и активаторы транскрипции

БСА - бычий сывороточный альбумин

ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота (кДНК - комплементарная ДНК)

ДТТ - дитиотрейэтол

ИЛ - интерлейкин

чИФН - интерферон человека

ИФН-Р - рецептор интерферона

KTKJI - кожная Т-клеточная лимфома

ПААГ - полиакриламидный гель

ПРК - протеинкиназы, индуцируемые 2-спиральной РНК ПЦР - полимеразная цепная реакция ПЭГ-ИФН - ИФН с молекулой полиэтиленгликоля

з

РНК - рибонуклеиновая кислота (иРНК - информационная РНК, тРНК -

транспортная РНК, мРНК - матричная РНК)

ТВ - тельца включения

Тх - хелперные Т-клетки (ТЪ.)

ХМЛ - хронический миелолейкоз

ЦБ - целевой белок

ЭДТА - этилендиаминтетрауксусная кислота

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Альтернативные системы экспрессии рекомбинантного ИФН-α-2b человека»

Введение

Препараты интерферона-а-2Ь человека (чИФН-а-2Ь) нашли широкое применение в медицине в качестве противовирусных и иммуномодулирующих лекарственных средств. Существующие на фармацевтическом рынке препараты используются при лечении ряда онкозаболеваний как доброкачественной, так и злокачественной природы. Несмотря на это они редко назначаются пациентам с соответствующим диагнозом. Это связано с тем, что зарубежные препараты недоступны для многих больных в силу ряда причин (высокая стоимость, недостаточное количество или полное отсутствие на отечественном рынке), а российские аналоги показали себя как менее эффективные. В рамках государственной программы импортозамещения разработка технологии получения высокоэффективного препарата чИФН-а-2Ь, позволяющей снизить себестоимость субстанции, является актуальной на сегодняшний день.

В продаже присутствует ряд препаратов на основе интерферонов человека. Источники их получения различны. Однако препараты первого поколения на основе природных интерферонов практически полностью вытеснены рекомбинантными аналогами. Это связано с дефицитом и неоднородностью сырья (донорской крови) и высокой стоимостью конечного продукта. Основные коммерческие препараты представляют собой рекомбинантную форму человеческого ИФН-а-2. Их фармакологическое действие сходно с нативным белком и включает в себя противовирусный, противоопухолевый и иммуномодулирующий эффекты, характерные для всех ИФН-а. Наиболее часто в клинике используется ИФН-а-2Ь. Одной из важнейших областей использования этого белка является онкология. Препараты ИФН включены в состав комбинированной терапии в схемы лечения хронического миелолейкоза, Т-клеточной лимфомы кожи, множественной миеломы, злокачественной меланомы и рака почки.

Последние достижения в геномике, протеомике и биоинженерии привели к

значительному росту числа лекарственных белков, получаемых с использованием

5

биотехнологий. В технологическом процессе применяются различные методы очистки и используется целый ряд продуцентов: бактериальные и дрожжевые клетки, культуры клеток насекомых и млекопитающих, а также растения. При разработке технологии получения высокоочищенного рекомбинантного белка целью исследования становится снижение конечной стоимости субстанции. При этом основной акцент ставится на получение максимально возможного количества целевого белка в единице объема, эффективности его очищения и восстановлении биологической активности.

В настоящее время существует два наиболее перспективных направления. Первое из них - использование в качестве продуцента бактериальных культур. Эта система экспрессии пользуется популярностью благодаря большому объему доступной информации об этом организме и высоким показателям продуктивности. Оптимизация отдельных процессов в технологии получения рекомбинантных белков из бактериальных культур клеток позволит снизить себестоимость конечного продукта, но эти цифры будут незначительными (порядка 10-20%).

Второе направление - это использование в качестве продуцентов растений. Такой принципиально новый подход предоставляет новые возможности для создания рекомбинантных аналогов. В настоящее время основными продуцентами для получения терапевтически значимых белков являются бактериальные или дрожжевые культуры, которые не обеспечивают проведения посттрансляционных модификаций, характерных для человека. Предполагают, что именно это является причиной образования антител против ИФН и сопутствующего снижения эффективности интерферонотерапии при длительном использовании препаратов этого цитокина в процессе лечения таких серьезных заболеваний как гепатит и рак почки. Создание растительного продуцента Шсойапа ЬеМкатгапа, экспрессирующего рекомбинантный чИФН-а-2Ь и обеспечивающего проведение посттрансляционных модификаций, характерных для человека, возможно, позволит решить эти проблемы.

Целью данной работы стало создание бактериального {Escherichia coli) и

растительного (Nicotiana benthamiana) продуцента ИФН-а-2Ь человека (чИФН-а-

2Ь), сравнение их эффективности и выбор оптимального варианта с точки зрения

соотношения материальных и временных затрат.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1. Разработка генетических конструкций, оптимизированных для экспрессии чИФН-а-2Ь в E.coli и N.benthamiana

2. Получение продуцентов на основе Е. coli и N. benthamiana

3. Изучение эффективности экспрессии в каждом из продуцентов

4. Разработка технологий очистки целевого продукта

5. Изучение противовирусной активности рекомбинантных белков, полученных из разных продуцентов

6. Изучение противоопухолевой активности рекомбинантных белков, полученных из разных продуцентов

7. Сравнение двух систем экспрессии по нескольким параметрам: эффективность экспрессии, качество очистки, активность полученного продукта, материальные и временные затраты на получения субстанции.

Научная новизна исследования:

1. Впервые разработана технология получения ИФН-а-2Ь из растительного продуцента, дающего возможность дешевого промышленного производства терапевтического белка

2. Впервые разработана технология восстановления активности чИФН-а-2Ь на аффинной колонке, позволяющей значительно повысить выход биологически активного белка, полученного из бактериального продуцента

3. Впервые проведены сравнительные исследования влияния полигистидинового домена на эффективность экспрессии рекомбинантного белка в бактериальной системе экспрессии

4. Впервые в рамках одной работы проведено сравнение процессов продукции чИФН-ос-2Ь в бактериальных продуцентах и в растительной биомассе, которое дает основание утверждать, что разработанная технология получения чИФН-а-2Ь из растительного продуцента на основе N. ЪеШкат1апа более перспективна для дальнейшего масштабирования.

Заключение диссертации по теме «Онкология», Кособокова, Екатерина Николаевна

Выводы

• Получены высокоэффективные продуценты интерферона-а-2Ь человека на основе Е.соИ. Показано, что наличие полигистидинового домена на 1М-конце последовательности в 3-5 раз увеличивает уровень экспрессии рекомбинантного интерферона-а-2Ь человека.

• Проведено сравнение генетических конструкций, оптимизированных для экспрессии в Е.соН, которое позволило установить, что в отношении уровня экспрессии и эффективности очистки оптимальна конструкция с шестью гистидиновыми остатками на Ы-конце гибридного белка интерферона человека.

• Разработана технология восстановления конформации и биологической активности интерферона-а-2Ь человека, позволяющая в 2-3 раза повысить выход биологически активного белка, полученного из бактериального продуцента.

• Разработаны провирусные векторы для продукции рекомбинантного цитокина интерферона-а-2Ь человека в N. ЪеШкат1апа и установлено, что наиболее эффективна конструкция, в которой ген целевого белка находится под контролем актинового промотора.

• Показано, что синтезированный в разных продуцентах рекомбинантный интерферон-а-2Ь человека обладает противовирусной активностью, свойственной природным аналогам. Интерферон-а-2Ь человека, полученный из растительного продуцента обладает большей стабильностью.

• Полученные в разных продуцентах интерфероны-а-2Ь человека обладают цитотоксической активностью по отношению к опухолевым клеточным линиям те1Ког.

• Установлено, что уровень цитотоксического эффекта возрастает с увеличением концентрации и/или длительности инкубации опухолевых клеток с полученными рекомбинантными белками.

• Проведено сравнение процессов продукции интерферона-а-2Ь человека в бактериальных продуцентах и в растительной биомассе, на основании которого можно утверждать, что разработанная технология получения чИФН-а-2Ь из растительного продуцента на основе N. Ъеп№ат1апа более перспективна для дальнейшего масштабирования.

106

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Кособокова, Екатерина Николаевна, 2011 год

Список литературы

1. Болотова Н.В., Краснов В.В., Кузин Б.В., Гапонюк П.Я., Щипанова А.И. Лечение ОРВИ и гриппа у беременных женщин и детей / Эффективная фармакотерапия в акушерстве и гинекологии. - №1. - 2007. С.: 30-33.

2. Волкова М.А. Интерфероны и их применение в онкогематологии // Российский биотерапевтический журнал. - 2002. - № 1, Т.1. - С. 25-33.

3. Ершов Ф.И. Пять десятилетий интерферона / Интерферону - 50 лет. -Москва, 2007.-С. 11-34.

4. Ершов Ф.И., Киселев О.И. Интерфероны и их индукторы (от молекул до лекарств). М.: ГЕОТАР - Медиа, 2005. - 368 с.

5. Зулькарнаева Э.Т. Обоснование и возможности применения интерферона в комплексной терапии рака молочной железы: Автореф. дис... канд. мед. наук.-Уфа, 1999.-24 с.

6. Кадагидзе З.Г. Цитокины // Практическая онкология. - 2003. - Т.4, №3. -С. 131-139.

7. Киселев О.И., Ершов Ф.И., Деева Э.Г. Интерферон - гамма: структура и свойства/ Интерферону - 50 лет. - Москва, 2007. - С. 35-44.

8. Микеш О. Лабораторное руководство по хроматографическим и смежным методам. Часть 1. М: Мир, 1982. - С. 400.

9. Мкртчян Л.Н., Камалян Л.А. Интерфероны в онкологии. Ер.: Айстан, 1989.-123с.

Ю.Патрушев Л.И. Искусственные генетические системы Т.1: Генная и белковая инженерия. М.: Наука, 2004. -526с.

П.Попов В.Ф., Попов О.В. Лекарственные формы интерферонов. Справочник врача. - М.: Триада-Х, 2002. - 230 с.

12 .Рафальский В.В. Клиническое применение препаратов интерферона. Смоленск, 1997.-120 с.

13 .Рыбчин В.И. Основы генетической инженерии. - Санкт-Петербург: СПбГТУ, 2002. -525с.

14.PJIC Регистр лекарственных средств. Энциклопедия лекарств. - 16-й вып. /Гл. ред. Г.Л.Вышковский. - М.: «РЛС-2008», 2007. - 1456с.

15.Фун К. А. Раздел 15.1. Волосатоклеточный лейкоз, хронический миелогенный лейкоз и миелопролиферативные заболевания. / ДеВит В.Т., Хеллман С., Розенберг С.А. Биологические методы лечения онкологических заболеваний: Пер. с англ. - М: Медицина, 2002. - С. 382-391.

16.Albini A., Marchisone С., Del Grosso F. et al. Inhibition of angiogenesis and vascular tumor growth by interferon-producing cells: A gene therapy approach // Am J Pathol. - 2000, Apr. - Vol.l56(4). - P. 1381-1393.

Yl.Amato R.J., Jac J., Hernandez-McClain J. Interferon-alpha in combination with either imatinib (Gleevec) or gefitinib (Iressa) in metastatic renal cell carcinoma: a phase II trial // Anticancer Drugs. - 2008, Jun. - Vol. 19(5). - P. 527-533.

18.Archuleta TD, Armitage JO. Advances in follicular lymphoma // Semin Oncol. - 2004, Apr;31 (2 Suppl 4). -P.66-71.

19.Arnau J., Lauritzen C., Petersen GE., Pedersen J. Current strategies for the use of affinity tags avd tag removal for the purification of recombinant proteins // Protein Expr Purif. - 2006, -Vol. 48. - P. 1-13.

20.Aurora V, Winter JN. Follicular lymphoma: today's treatments and tomorrow's targets // Expert Opin Pharmacother. 2006 Jul, Vol. 7(10). -P. 1273-1290.

21 .Babu KR, Swaminathan S, Marten S, Khanna N, Rinas U. Production of interferon-alpha in high cell density cultures of recombinant Escherichia coli and its single step purification from refolded inclusion body proteins // Appl Microbiol Biotechnol. 2000 Jun, Vol. 53(6). - P. 655-660.

ll.Baccarani M., Rosti G., de Vivo A. et al. Arandomized study of interferon-a versus interferon-a and low-dose arabinosyl cytosine in chronic myeloid leukemia // Blood. - 2002. - Vol. 99. - P.1527-1535.

23.Bagheri K., Javaranl M.J., Mahboudi F., Moeini A., Zebarjadi A. Expression of human interferon gamma in Brassica napus seeds // African Journal of Biotechnology. - 2010. -Vol. 9(32). - P. - 5066-5072.

24.Bajetta E., Del Vecchio M., Nova P. et ah Multicenter phase III randomized trial of polychemotherapy (CVD regimen) versus the same chemotherapy (CT) plus subcutaneous interleukin-2 and interferon-alpha2b in metastatic melanoma // Ann Oncol. - 2006. - Vol. 17(4). - P. 571-577.

25.Bardor M., Faveeuw C., Fitchette AC., Gilbert D., Galas L., TrotteinF., Faye L., Lerouge P. Immunoreactivity in mammals of two typical plant glyco-epitopes, core alpha(l,3)-fucose and core xylose // Glycobiology. 2003, Jun. -Vol. 13(6). - P. 427^134.

26.Bock R. Plastid biotechnology: prospects for herbicide and insect resistance, metabolic engineering and molecular farming // Curr Opin Biotechnol. - 2007, Apr.-Vol. 18(2).-P. 100-106.

21.Bogdan Ck, Mattner J., Schleicher U. The role of type I interferons in non-viral infections // Immunol Rev.- 2004. - Vol. 202. - P. 33-48.

28.Borden EC, Sen GC, Uze G, Silverman RH, RansohoffRM, Foster GR, Stark GR. Interferons at age 50: past, current and future impact on biomedicine // Nat Rev Drug Discov. 2007, Dec. - Vol. 6(12). - P. 975-990.

29.Brancho D, Tanaka N, Jaeschke A, Ventura J J, Kelkar N, Tanaha Y, Kyuuma M, Takeshita T, Flavell RA, Davis RJ Mechanism of p38 MAP kinase activation in vivo // Genes Dev. 2003, Aug. Vol. 15;17(16). -P. 1969-1978.

30.Brosjd O., Bauer H. C. F., Brostrdm L.A. et ah Influence of Human aInterferon on Four Human Osteosarcoma Xenografts in Nude Mice // Cancer Res. - 1985. - Vol. 45. - P. 5598-5602.

31 .Buechner SA, Wernli M, Harr T, Hahn S, Itin P, Erb P. Regression of basal cell carcinoma by intralesional interferon-alpha treatment is mediated by CD95 (Apo- 1/Fas)-CD95 ligand-induced suicide. J Clin Invest. - 1997, Dec. -Vol. 1;100(11). -P. 2691-2696.

32.Bulavin DV, Amundson SA, Fornace AJ. p38 and Chkl kinases: different conductors for the G(2)/M checkpoint symphony // Curr Opin Genet Dev. 2002 Feb. - Vol. 12(1). - P. 92-97.

33 .Burke LC, Bybee A, Thomas NS The retinoblastoma protein is partially phosphorylated during early G1 in cycling cells but not in G1 cells arrested with alpha-interferon // Oncogene. 1992, Apr. - Vol. 7(4). - P. 783-788.

34.Cabanes-Macheteau M, Fitchette-Laine AC, Loutelier-Bourhis C, Lange C, Vine ND, Ma JK, Lerouge P, Faye L. N-Glycosylation of a mouse IgG expressed in transgenic tobacco plants // Glycobiology. 1999, Apr. - Vol. 9(4). - P. 365-372.

35. Canil C, Hotte S, May hew LA, Waldron TS, Winquist E. Interferon-alfa in the treatment of patients with inoperable locally advanced or metastatic renal cell carcinoma: a systematic review // Can Urol Assoc J. 2010, Jun. - Vol. 4(3). -P. 201-208.

3 6.Chargelegue D, Vine ND, van Dolleweerd CJ, Drake PM, Ma JK. A murine monoclonal antibody produced in transgenic plants with plant-specific glycans is not immunogenic in mice // Transgenic Res. 2000, Jun. - Vol. 9(3). - P. 187-194.

37.Chawla-Sarkar M, Leaman DW, Borden EC. Preferential induction of apoptosis by interferon (IFN)-beta compared with IFN-alpha2: correlation with TRAIL/Apo2L induction in melanoma cell lines // Clin Cancer Res. 2001, Jun.-Vol. 7(6).-P. 1821-1831.

38.Chawla-Sarkar M, Lindner DJ, Liu YF, Williams BR, Sen GC, Silverman RH, Borden EC. Apoptosis and interferons: role of interferon-stimulated genes as mediators of apoptosis // Apoptosis. 2003, Jun. Vol. 8(3). - P. 237-249.

39.Chen iQ, Gong B, Mahmoud-Ahmed AS, Zhou A, Hsi ED, Hussein M, Almasan A. Apo2L/TRAIL and Bcl-2-related proteins regulate type I interferon-induced apoptosis in multiple myeloma // Blood. 2001, Oct. - Vol. 1;98(7). - P. 21832192.

40. Chen TL, Lin YL, Lee YL, Yang NS, Chan MT. Expression of bioactive human interferon-gamma in transgenic rice cell suspension cultures // Transgenic Res. 2004, Oct. - Vol. 13(5). - P. 499-510.

41 .Choi JH, Lee SY. Secretory and extracellular production of recombinant proteins using Escherichia coli // Appl Microbiol Biotechnol. 2004, Jun. -Vol. 64(5).-P. 625-35.

42.Daniell H, Chebolu S, Kumar S, Singleton M, Falconer R. Chloroplast-derived vaccine antigens and other therapeutic proteins // Vaccine. 2005, Mar. - Vol. 7;23(15). - P. 1779-1783.

43 .Demain A.L., Vaishnav P. Production of recombinant proteins by microbes and higher organisms // Biotechnol Adv. 2009 , May-Jun. - Vol. 27(3). - P. 297-306.

44.Desai P.N., Shrivastava N., Padh H. Production of heterologous proteins in plants: strategies for optimal expression // Biotechnol Adv. 2010 Jul-Aug. -Vol. 28(4).-P. 427-435.

45.De Zoeten GA, Penswick JR, Horisberger MA, Ahl P, Schultze M, Hohn T. The expression, localization, and effect of a human interferon in plants // Virology. 1989, Sep. - Vol. 172(1). -P.213-222.

46.Dijkema R, Pouwels P, de Reus A, Schellekens H. Structure and expression in Escherichia coli of a cloned rat interferon-alpha gene // Nucleic Acids Res. 1984, Jan 25. - Vol. 12(2). - P. 1227-1242.

47.Edelbaum O, Stein D, Holland N, Gafni Y, Livneh O, Novick D, Rubinstein M, Sela I. Expression of active human interferon-beta in transgenic plants I IJ Interferon Res. 1992, Dec. - Vol. 12(6). - P.449-453.

4S.Edge M.D., Greene A.R., Heathcliffe G.R. et al. Chemical synthesis of a human interferon-(X2 gene and its expression in Escherichia coli II Nucleic Acids Res. - 1983. - Vol. 11, № 18. - P. 6419-6435.

49.ElbersIJ, Stoopen GM, BakkerH, Stevens LH, Bardor M, MolthoffJW, Jordi WJ, Bosch D, Lommen A. Influence of growth conditions and developmental stage on N-glycan heterogeneity of transgenic immunoglobulin G and

endogenous proteins in tobacco leaves // Plant Physiol. 2001, Jul. - Vol. 126(3).-P. 1314-1322.

SO.Escobar MA, Dandekar AM Agrobacterium tumefaciens as an agent of disease // Trends Plant Sci. 2003, Aug. - Vol. 8(8). - P. 380-386.

51 .Falkson C.I. Experience with interferon alpha 2b combined with dacarbazine in the treatment of metastatic malignant melanoma // Med Oncol. - 1995. -Vol. 12(1)-P. 35-40.

52.Faye, L., Boulaflous, A., Benchabane, M., Gomord, V. and Michaud, D. Protein modifications in the plant secretory pathway: current status and practical implications in molecular pharming // Vaccine. - 2005. - Vol. 23. -P. 1770-1778.

53.Feinstein SI, Chernajovsky Y, Chen L, Maroteaux L, Mory Y. Expression of human interferon genes using the recA promoter of Escherichia coli // Nucleic Acids Res. -1983, May 11.- Vol. 11(9). P. 2927-2941.

54.Gasdaska J.R., Spenser D., Dickey L. Advantages of Therapeutic Protein Production in the Aquatic Plant Lemna // BioProcessing J. - 2003. -Vol. 3. -P. 49-56.

55.Giddings G. Transgenic plants as protein factories // Curr Opin Biotechnol. -2001, Oct. - Vol. 12(5). - P. 450-454.

56.Gleba Y, Marillonnet S, Klimyuk V. Engineering viral expression vectors for plants: the 'full virus' and the 'deconstructed virus' strategies. Curr Opin Plant Biol. - 2004, Apr. - Vol. 7(2). - P. 182-188.

51 .Gleba Y, Klimyuk V, Marillonnet S. Magnifection - a new platform for expressing recombinant vaccines in plants // Vaccine. -2005, Mar 18. - Vol. 23(17-18).-P. 2042-2048.

58 .Gomord V, Faye L. Posttranslational modification of therapeutic proteins in plants // Curr Opin Plant Biol. -2004, Apr. - Vol. 7(2). - P. 171-181.

59.Gomord V, Fitchette AC, Menu-Bouaouiche L, Saint-Jore-Dupas C, Plasson C, Michaud D, Faye L. Plant-specific glycosylation patterns in the context of

therapeutic protein production // Plant Biotechnol J. - 2010, Jun. - Vol. 8(5). -P. 564-587.

60.Gouy M, Gautier C. Codon usage in bacteria: correlation with gene expressivity // Nucleic Acids Res. - 1982. - Vol. 10, №22. - P. 7055-7074.

61 .Grander D, Xu B, Einhorn S. Cytotoxic effect of interferon on primary malignant tumour cells. Studies in various malignancies // Eur J Cancer. -1993. - Vol. 29A(14). - P. 1940-1943.

62.Gresser I. The antitumor effects of interferon: A personal history // Biochimie. - 2007. - Vol. 89. - P. 723-728.

63.Grimsley N, Hohn B, Hohn T, Walden R. "Agroinfection," an alternative route for viral infection of plants by using the Ti plasmid // Proc Natl Acad Sci USA.- 1986, May. - Vol. 83(10). - P. 3282-3286.

64.Guilhot F., Chastang C., Michallet M. et al. Interferon Alfa-2b combined with Cytarabine versus Interferon alone in chronic Myelogenous Leukemia // N Engl J Med. - 1997. - Vol. 337. - P.223-229.

65. Guilhot F, Roy L, Guilhot J, Millot F. Interferon therapy in chronic myelogenous leukemia // Hematol Oncol Clin North Am. - 2004, Jun. - Vol. 18(3).-P. 585-603.

66.Gutterman J. U. Cytokine therapeutics: Lessons from interferon a // Proc. Nadl. Acad. Sci. USA. - 1994. - Vol. 91. - P. 1198-1205.

61.Hasford J., Baccarani M., Hehlmann R. et al Interferon-cu and Hydroxyurea in Early Chronic Myeloid Leukemia: A Comparative Analysis of the Italian and German Chronic Myeloid Leukemia Trials With Interferon-a // Blood. -1996. - Vol.1, N 87(12). -P. 5384-5391.

68 .Hellwig S, Drossard J, Twyman RM, Fischer R. Plant cell cultures for the production of recombinant proteins // Nat Biotechnol. - 2004, Nov. -Vol. 22(11).-P. 1415-1422.

69.Hwu W.J., Panageas K.S., Menell J.H. et al. Phase II study of temozolomide plus pegylated interferon-alpha-2b for metastatic melanoma // Cancer. - 2006. -Vol. 1,N 106(11).-P. 2445-2451.

113

lO.Ikemura T. Codon usage and tRNA content in unicellular and multicellular organisms // Mol. Biol. Evol. - 1985. - Vol. 2, №1. - P. 13-34.

1 I.Isaacs A., Lindenmann J. Virus interference. I. The interferon // Proc. R. Soc. Lond. Ser. - 1957. - Vol. 147. - P. 258-267.

12.Jana S., Deb J.K. Strategies for efficient production of heterologous proteins in Escherichia coli // Appl Microbiol Biotechnol. - 2005, May. - Vol. 67(3). -P.289-298.

13.Jay E, Rommens J, Pomeroy-Cloney L, MacKnight D, Lutze-Wallace C, Wishart P, Harrison D, Lui WY, Asundi V, Dawood M. High-level expression of a chemically synthesized gene for human interferon-gamma using a prokaryotic expression vector // Proc Natl Acad Sci USA.- 1984, Apr. -Vol. 81(8).-P. 2290-2294.

1 A. Jew ell AP, Worman CP, Lydyard PM, Yong KL, Giles FJ, Goldstone AH. Interferon-alpha up-regulates bcl-2 expression and protects B-CLL cells from apoptosis in vitro and in vivo // Br J Haematol. - 1994, Oct. - Vol. 88(2). P. 268-274.

15 .Katsoulidis E, Li Y, Mears H, Platanias LC. The p38 mitogen-activated protein kinase pathway in interferon signal transduction // J Interferon Cytokine Res. - 2005, Dec. - Vol. 25(12). - P. 749-756.

16.Kavanagh D., Hill A.D., Djikstra B. et al. Adjuvant therapies in the treatment of stage II and III malignant melanoma // Surgeon. - 2005. - Vol. 3(4). - P. 245-256.

77.Kayagaki N, Yamaguchi N, Nakayama M, Eto H, Okumura K, Yagita H. Type I interferons (IFNs) regulate tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL) expression on human T cells: A novel mechanism for the antitumor effects of type I IFNs // J Exp Med. -1999, May 3. - Vol. 189(9). -P.-1451-1460.

IK.Kikawa Y, Fuji Y, Takano T, Shigematsu Y, Sudo M, Okamoto M, Mizutani S. A long-term suppression by alpha-interferon of Philadelphia chromosome in

children with chronic myelogenous leukemia // Acta Paediatr Jpn. - 1993, Aug. - Vol. 35(4). - P. 361-364.

19.Kondo M., Nagano H., Hiroshi Wada H. et al. Combination of IFN-A and 5-Fluorouracil Induces Apoptosis through IFN-A/B Receptor in Human Hepatocellular Carcinoma Cells // Clin Cancer Res. - 2005. -Vol. 11. - P. 1277-1286.

80.Korban S.S., Krasnyanski S.F., Buetow DE. Foods as production and delivery vehicles for human vaccines I I J Am Coll Nutr. - 2002, Jun. - Vol. 21(3 Suppl). - P. 212S-217S.

81 .Kotenko S.V., Gallagher G., Baurin V.V. et al. IFN-lamdas mediate antiviral protection Through a distinct class II cytokine receptor complex // Nat. Immunol. - 2003. - Vol. 4(1). - P. 8-9.

82.Krown SE, Li P, Von Roenn JH, Paredes J, Huang J, Testa MA. Efficacy of low-dose interferon with antiretroviral therapy in Kaposi's sarcoma: a randomized phase II AIDS clinical trials group study // J Interferon Cytokine Res. - 2002, Mar. - Vol. 22(3). - P. 295-303.

83.Kumar R, Atlas I. Interferon alpha induces the expression of retinoblastoma gene product in human Burkitt lymphoma Daudi cells: role in growth regulation // Proc Natl Acad Sci USA.- 1992, Jul 15. - Vol. 89(14). - P. 6599-6603.

84Kusnadi AR, Nikolov ZL, Howard JA. Production of recombinant proteins in transgenic plants: Practical considerations // Biotechnol Bioeng. - 1997, Dec 5. - Vol. 56(5). - P. 473^84.

85 .Laemmli UK. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4II Nature. - 1970. - Vol. 227. - P. 680-685.

№.Longer JA, Pestka S. Structure of interferons / Pharmacol Ther. -1985;27. -Vol. (3).-P. 371-401.

%l.Le J, Yip YK, Vilcek J. Cytolytic activity of interferon-gamma and its synergism with 5-fluorouracil. Int J Cancer. 1984 Oct 15;34(4):495-500.

88.Lengyel P. Tumor-suppressor genes: News about the interferon connection // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1993. - Vol. 90 - P. 5893-5895.

S9.Lessard PA, Kulaveerasingam H, York GM, Strong A, Sinskey AJ.

Manipulating gene expression for the metabolic engineering of plants // Metab Eng. - 2002, Jan. - Vol. 4(1). - P. 67-79.

90.Li J., ChenM., LiuX.W., ZhangH.C., ShenF.F., WangG.P, Transient expression of an active human interferon-beta in lettuce // Scientia Horticulturae. - 2007, 23 April. - Vol. 112 (3), - P. 258-265.

91 .Lico C, Chen Q, Santi L. Viral vectors for production of recombinant proteins in plants // J Cell Physiol. - 2008, Aug. - Vol. 216(2). - P. 366-377.

92.Lindbo J.A. High-efficiency protein expression in plants from agroinfection-compatible Tobacco mosaic virus expression vectors // BMC Biotechnol. -2007, Aug 27. - Vol. 7. - P. 52-63.

93 .Lomnytska M.I., Volodko N.A., Souchelnytskyi S., Bilynskyi B.T. Influence of IFN-a2b, TGF-(31 and some chemotherapeutic agents on the proliferation of endothelial cells // Exp Oncol. - 2003. - Vol. 25, №4. - P. 252-255.

94 .Lorence A, Verpoorte R. Gene transfer and expression in plants // Methods Mol Biol. - 2004. - Vol. 267. - P. 329-350.

95.Maeyer E.D., Skup D., Prasad K.S.N, et al. Expression of a chemically synthesized human al interferon gene // Proc. Natl. Acad. Sci. USA - 1982, July. - Vol. 79. - P. 4256-4259.

96.Marino M.H. Expression systems for heterologous protein production // BioPharm- 1989. - Vol.2. P. 18-33.

97.Marschall Z., Scholz A., Cramer T. et al. Effects of interferon alpha on vascular endothelial growth factor gene transcription and tumor angiogenesis // J Natl Cancer Inst. - 2003, Mar. - Vol. 95(6). - P. 437-448.

98.Mason H.S., Warzecha H., Mor T., Arntzen C.J. Edible plant vaccines: applications for prophylactic and therapeutic molecular medicine // Trends Mol Med. - 2002, Jul. - Vol. 8(7). - P. 324-329.

99 .Matsuoka M, Tani K, As ano S. Interferon-alpha-induced G1 phase arrest through up-regulated expression of CDK inhibitors, pl9Ink4D and p21Cipl in mouse macrophages // Oncogene. - 1998, Apr 23. - Vol. 16(16). - P. 20752086.

100. McCormick AA, Reinl SJ, Cameron TI, Vojdani F, Fronefield M, Levy R, Tusé D. Individualized human scFv vaccines produced in plants: humoral antiidiotype responses in vaccinated mice confirm relevance to the tumor Ig // J Immunol Methods. - 2003, Jul. - Vol. 278(1-2). - Vol. 95-104.

101. Meager A. Biological assays for interferon // J Immunol Methods. - 2002. -Vol.261.-P. 21-36.

102. Melamed D., Resnitzky D., Haimov I. et al. Interleukin 6 Induces DNA Binding Activity of API in Ml Myeloblasts Cells but not in a Growth Resistant Cell Derivative // Cell Growth Differ. - 1993. -Vol. 4. - P. 689698.

103. Mickisch G.H., Garin A., va Poppel H. et al. Radical nephrectomy plus interferon-alfa-based immunotherapy compared with interferon alfa alone in metastatic renal-cell carcinoma: a randomised trial // Lancet. - 2001. - Vol. 22, N 358 (9286). - P.966-970.

104. Milner AE, Grand RJ, Gregory CD. Effects of interferon-alpha on human B cells: repression of apoptosis and prevention of cell growth are independent responses of Burkitt lymphoma lines // Int J Cancer. - 1995, May 4. - Vol. 61(3).-P. 348-354.

105. Moen M.D., McKeage K., Plosker G.L. et al. Imatinib: a review of its use in chronic myeloid leukaemia // Drugs. - 2007. - Vol. 67 (2). - P. 299-320.

106. Mori M. Zhang GH. Kaido M, Okuno T, Furusawa I. Efficient production of human gamma interferon in tobacco protoplasts by genetically engineered brome mosaic virus RNAs // J Gen Virol. - 1993, Jul. - Vol. 74 (Pt 7). - P. 1255-1260.

107. Motzer RJ, Bacik J, Mazumdar M. Prognostic factors for survival of patients with stage IV renal cell carcinoma: memorial sloan-kettering cancer

117

center experience // Clin Cancer Res. - 2004, Sep 15. - Vol. 10(18 Pt 2). - P. 6302S-6303S.

108. Motzer RJ, Hutson TE, TomczakP, Michaelson MD, Bukowski RM, Rixe O, Oudard S, Negrier S, Szczylik C, Kim ST, Chen I, Bycott PW, Baum CM, Figlin RA. Sunitinib versus interferon alfa in metastatic renal-cell carcinoma // N Engl J Med. - 2007, Jan 11. - Vol. 356(2). - P. 115-124.

109. Miiller C.R., Smeland S., Bauer H.C. et al. Interferon-alpha as the only adjuvant treatment in high-grade osteosarcoma: long term results of the Karolinska Hospital series // Acta Oncol. - 2005. - Vol.44(5. - P. 475-480.

110. Nakazawa K, Sasamoto H., Shiraki Y. et al. Extracellular production of mouse unterferon beta by the Bacillus subtilis alpha-amylasa secretion vectors: antiviral activity and deduced NH2-terminal amino acid sequences of the secreted proteina // Intervirology. - 1991. - Vol. 32, № 4. - P. 216-227.

111. Negrier S., Escudier B., Las set C. et al. Recombinant Human Interleukin-2, recombinant human Interferon Alfa-2a , or both [n metastatic renal-cell carcinoma // N Engl J Med. - 1998. - Vol. 338. - P. 1272-1278.

112. Neves F.O., Ho P.L., Raw I. et al. Overexpression of a synthetic gene encoding human alpha interferon in Escherichia coli // Protein Expr Purif. -2004. - Vol. 35. - P. 353-359.

113. Nicolini A., Carpi A. Beta-interferon and interleukin-2 prolong more than three times the survival of 26 consecutive endocrine dependent breast cancer patients with distant metastases: an exploratory trial // Biomed Pharmacother. - 2005. - Vol. 59(5). - P.253-263.

114. OBrien S.G., Guilhot F., Larson R.A. et al. Imatinib compared with interferon and low-dose cytarabine for newly diagnosed chronic-phase chronic myeloid leukemia // N Engl J Med. - 2003. - Vol. 13, N 348(11). - P. 9941004.

115. Ohya K, Matsumura T, Ohashi K, Onuma M, Sugimoto C. Expression of two subtypes of human IFN-alpha in transgenic potato plants // J Interferon Cytokine Res. - 2001, Aug. - Vol. 21(8). - P. 595-602.

118

116. Parmar S. and Platanias L. C. Interferons: mechanisms of action and clinical applications // Curr Opin Oncol. - 2003. - Vol. 15. - P. 431-439.

117. Pestka S. The Interferons: 50 Years after their discovery, there Is much more to learn // J Biol Chem. - 2007. - Vol. 282(28). - P.20047-20051.

118. Pestka S., Krause C. D., Walter M. R. Interferons, interferon-like cytokines, and their receptors // Immunol Rev - 2004. - Vol. 202. - P. 8-32.

119. Platanias LC. The p38 mitogen-activated protein kinase pathway and its role in interferon signaling // Pharmacol Ther. - 2003 May. - Vol. 98(2). - P. 129-142.

120. Pulkkanen K.J., Yla-Herttuala S. Gene therapy for malignant glioma: current clinical status // Mol Ther. - 2005. - Vol. 12(4). - P.585-98.

121. Radhakrishnan R., Walter LJ., Hruza A., Reichert P., Trotta PP., Nagabhushan TL., Walter MR. Zinc mediated dimer of human interferon-a2b revealed by X-ray crystallography // Structure. - 1996. - Vol. 4. - No 126. -P. 1453-1463.

122. Rai M., Parh H. Expression systems for production of heterologous protein // Current Sciens. - 2001. - Vol. 80. - P. 1121-1128.

123. Raj an G.P., Seifert B., Priimmer O. et al. Incidence and in-vivo relevance of anti-interferon antibodies during treatment of low-grade cutaneous T-cell lymphomas with interferon alpha-2a combined with acitretin or PUVA // Arch Dermatol Res. - 1996 Aug. - Vol. 288(9). - P. 543-548.

124. Rijckborst V, Jans sen HL. The Role of Interferon in Hepatitis B Therapy / Curr Hepat Rep. 2010 Nov;9(4):231-238. Epub 2010 Aug 26.

125. Rizzetto M. Hepatitis D: clinical features and therapy // Dig Dis. - 2010. -Vol. 28(1).-P. 139-143.

126. Rodriguez-Villanueva J, McDonnell TJ. Induction of apoptotic cell death in non-melanoma skin cancer by interferon-alpha // Int J Cancer. - 1995, Mar. -Vol. 29;61(1). P. 110-114.

127. Roos G, Leanderson T, Lundgren E. Interferon-induced cell cycle changes in human hematopoietic cell lines and fresh leukemic cells // Cancer Res. -1984, Jun. - Vol. 44(6). - P. 2358-2362.

128. Rosano GL, Ceccarelli EA. Rare codon content affects the solubility of recombinant proteins in a codon bias-adjusted Escherichia coli strain // Microb Cell Fact. - 2009, Jul. 24. - Vol. 8. - P. 41.

129. Rudolph R, Lilie H. In vitro folding of inclusion body proteins // FASEB J. - 1996, Jan. - Vol. 10(1). - P. 49-56.

130. Sabel MS, Sondak VK. Pros and cons of adjuvant interferon in the treatment of melanoma // Oncologist. -2003. - Vol. 8(5). - P. 451-458.

131. Samuel C. E. Antiviral Actions of Interferons // Clin Microbiol Rev. -2001.-Vol. 14, N4.-P. 778-809.

132. Sangfelt O, Erickson S, Einhorn S, Grander D. Induction of Cip/Kip and Ink4 cyclin dependent kinase inhibitors by interferon-alpha in hematopoietic cell lines // Oncogene. - 1997, Jan 30. - Vol. 14(4). - P. 415^123.

133. Sangfelt O, Erickson S, Castro J, Heiden T, Einhorn S, Grander D. Induction of apoptosis and inhibition of cell growth are independent responses to interferon-alpha in hematopoietic cell lines // Cell Growth Differ. - 1997/2, Mar. - Vol. 8(3). - P. 343-352.

134. Sangfelt O, Erickson S, Castro J, Heiden T, Gustafsson A, Einhorn S, Grander D. Molecular mechanisms underlying interferon-alpha-induced G0/G1 arrest: CKI-mediated regulation of G1 Cdk-complexes and activation of pocket proteins // Oncogene. - 1999, May 6. - Vol. 18(18). - P. 27982810.

135. Sangfelt O, Erickson S, Grander D. Mechanisms of interferon-induced cell cycle arrest // Front Biosci. - 2000, Apr 1. - Vol. 5. - P. D479-D487.

136. Sangfelt O, Strander H. Apoptosis and cell growth inhibition as antitumor effector functions of interferons // Med Oncol. - 2001. - Vol. 18(1). - P. 3-14.

137. Santi L, Huang Z, Mason H. Virus-like particles production in green plants // Methods. - 2006, Sep. - Vol. 40(1). - P. 66-76.

120

138. Sawahel WA. The production of transgenic potato plants expressing human alpha-interferon using lipofectin-mediated transformation // Cell Mol Biol Lett. -2002. - Vol. 7(1). -P. 19-29.

139. Slocombe P, Easton A, Boseley P, Burke DC. High-level expression of an interferon alpha 2 gene cloned in phage M13mp7 and subsequent purification with a monoclonal antibody // Proc Natl Acad Sci USA.- 1982, Sep. - Vol. 79(18).-P. 5455-5459.

140. Selleri C, Sato T, Del Vecchio L, Luciano L, Barrett AJ, Rotoli B, Young NS, Maciejewski JP. Involvement of Fas-mediated apoptosis in the inhibitory effects of interferon-alpha in chronic myelogenous leukemia // Blood. - 1997, Feb 1. - Vol. 89(3). - P. 957-964.

141. Sen G.C., Lengyel P. The interferon system // J Biol Chem. - 1992. - Vol. 267, №8. -P. 5017-5020.

142. Shepherd J., Brodin H., Cave C. et al. Pegylated interferon -2a and -2b in combination with ribavirin in the treatment of chronic hepatitis C: a systematic review and economic evaluation // Health Technol Assess. - 2004. -Vol. 8, No. 39.-P. 1-125.

143. Shepherd J., Jones J., Hartwell D. et al. Interferon alpha (pegylated and non-pegylated) and ribavirin for the treatment of mild chronic hepatitis C: a systematic review and economic evaluation // Health Technol Assess. - 2007. - Vol. 11(11).-P. 1-205.

144. Shiloach J., Fass R. Growing E.coli to hugh cell density - a historical perspective on method development // Biotechnol Adv. - 2005, July. - Vol. 23, №5. _p. 345-357.

145. Singh S.M., Panda A.K. Solubilization and refolding of bacterial inclusion body proteins // Biosci Bioeng. - 2005, Apr. - Vol. 99(4). - P. 303-310.

146. Song L, Zhao DG, Wu YJ, Li Y. Transient expression of chicken alpha interferon gene in lettuce // J Zhejiang Univ Sci B. - 2008, May. - Vol. 9(5). -P. 351-355.

147. Spets H, Georgii-Hemming P, Siljason J, Nilsson K, Jernberg-Wiklund H. Fas/APO-1 (CD95)-mediated apoptosis is activated by interferon-gamma and interferon- in interleukin-6 (IL-6)-dependent and IL-6-independent multiple myeloma cell lines // Blood. - 1998, Oct 15. - Vol. 92(8). - P. 2914-2923.

148. Sun WH, Pabon C, Alsayed Y. et al. Interferon-alpha resistance in a cutaneous T-cell lymphoma cell line is associated with lack of STAT1 expression // Blood. - 1998 Jan. - Vol. 91(2). - P. 570-576.

149. Suzuki H, Brown CJ, Forney LJ, Top EM. Comparison of correspondence analysis methods for synonymous codon usage in bacteria // DNA Res. -2008, Dec. - Vol. 15(6). - P. 357-365.

150. Tacket C. O. Plant-based vaccines against diarrheal diseases // Trans Am Clin Climatol Assoc. - 2007. - Vol. 118. - P. 79-87.

151. Tacket CO. Plant-based oral vaccines: results of human trials // Curr Top Microbiol Immunol. - 2009. - Vol. 332. - P. 103-117.

152. Takemoto Y., Yano H., Seiya Momosaki S. Antiproliferative Effects of Interferon-aConl on Ovarian Clear Cell Adenocarcinoma In vitro and In vivo. II Clin Cancer Res. - 2004. - Vol. 10. - P. 7418-7426.

153. Talpaz M, Kantarjian HM, McCredie KB, Keating MJ, Trujillo J, Gutterman J. Clinical investigation of human alpha interferon in chronic myelogenous leukemia // Blood. - 1987, May. - Vol. 69(5). - P. 1280-1288.

154. Talpaz M., Rakhit A., Rittwegwr K. et al. Phase I Evaluation of a 40-kDa Branched-Chain Long-Acting Pegylated IFN-A-2aWith and Without Cytarabine in Patientswith ChronicMyelogenous Leukemia // Clin Cancer Res.-2005.-Vol. 6247,N 11(17).-P. 6247-6255.

155. Talpaz M. Shah NP, Kantarjian H. Donato N, Nicoll J, Paquette R, Cortes J, OBrien S, Nicaise C, Bleickardt E, Blackwood-Chirchir MA, Iyer V, Chen TT, Huang F, Decillis AP, Sawyers CL. Dasatinib in imatinib-resistant Philadelphia chromosome-positive leukemias // N Engl J Med. - 2006, Jun 15. -Vol. 354(24). -P. 2531-1541.

156. Taniguchi T., Fujii-Kuriyama Y, Muramatsu M. Molecular cloning of human interferon cDNA // Proc Natl Acad Sci USA. -1980, Jul. - Vol. 77(7). - P.4003-4006.

157. Tedjarati S., Baker C.H., Apte S. Synergistic Therapy of Human Ovarian Carcinoma Implanted Orthotopically in Nude Mice by Optimal Biological Dose of Pegylated Interferon a Combined with Paclitaxell // Clin Cancer Res. - 2002. - Vol. 8. - P. 2413-2422.

158. Thanavala Y, Mahoney M, Pal S, Scott A, Richter L, NatarajanN, Goodwin P, Arntzen CJ, Mason HS. Immunogenicity in humans of an edible vaccine for hepatitis B // Proc Natl Acad Sci USA.- 2005, Mar 1. - Vol. 102(9). - P. 3378-3382.

159. Thomas NS, Pizzey AR, Tiwari S, Williams CD, Yang J. pi30, pi07, and pRb are differentially regulated in proliferating cells and during cell cycle arrest by alpha-interferon // J Biol Chem. - 1998, Sep 11. - Vol. 273(37). - P. 23659-23667.

160. Thyrell L, Erickson S, Zhivotovsky B, Pokrovskaja K, Sangfelt O, Castro J, Einhorn S, Grander D. Mechanisms of Interferon-alpha induced apoptosis in malignant cells // Oncogene. - 2002, Feb 14. - Vol. 21(8). - P. 1251-1262.

161. Tiefenbrun N, Melamed D, Levy N, Resnitzky D, Hoffman I, Reed SI, Kimchi A. Alpha Interferon Suppresses the Cyclin D3 and cdc25A Genes, Leading to a Reversible G0-Like Arrest // Mol Cell Biol. - 1996. - Vol. 16 (7). -P. 3934-3944.

162. Uddin S, Sweet M, Colamonici OR, Krolewski J J, Platanias LC. The vav proto-oncogene product (p95vav) interacts with the Tyk-2 protein tyrosine kinase.// FEBS Lett. - 1997, Feb 10. - Vol. 403(1). - P. 31-34.

163. Uddin S, Lekmine F, Sharma N, Majchrzak B, Mayer I, Young PR, Bokoch GM, Fish EN, Platanias LC. The Racl/p38 mitogen-activated protein kinase pathway is required for interferon alpha-dependent transcriptional activation but not serine phosphorylation of Stat proteins // J Biol Chem. - 2000, Sep 8. -Vol. 275(36). - P. 27634-27640.

164. Uprichard SL.Hepatitis C virus experimental model systems and antiviral drug research // Virol Sin. - 2010, Aug. - Vol. 25(4). - P. 227-245.

165. Valente C.A., Prazeres D.M.F., Cabral J.M.S. et al. Translation features of human alpha 2b interferon production in Escherichia coli II Appl Environ Microbiol. - 2004, Apr. - P. 5033-5036.

166. Vallejo LF, Rinas U. Strategies for the recovery of active proteins through refolding of bacterial inclusion body proteins // Microb Cell Fact. - 2004, Sep 2.-Vol. 3(1).-P. 11.

167. Veluthambi K., Aditya K. Gupta and Arun Sharma. The current status of plant transformation technologies // Curr. Sci. - 2003. - Vol. 84 (3). - P. 368380.

168. Verch T, Yusibov V, Koprowski H. Expression and assembly of a full-length monoclonal antibody in plants using a plant virus vector // J Immunol Methods. - 1998, Nov 1. - Vol. 220(1-2). - P. 69-75.

169. Vincentelli R, Canaan S, Campanacci V, Valencia C, MaurinD, Frassinetti F, Scappucini-Calvo L, Bourne Y, Cambillau C, Bignon C. High-throughput automated refolding screening of inclusion bodies // Protein Sci. - 2004, Oct. - Vol. 13(10). - P. 2782-2792.

170. Vitale A, Pedrazzini E. Recombinant pharmaceuticals from plants: the plant endomembrane system as bioreactor // Mol Interv. - 2005, Aug. - Vol. 5(4). -P. 216-225.

171. Voss T, Falkner E, Ahorn H, Krystek E, Maurer-Fogy I, Bodo G, Hauptmann R. Periplasmic expression of human interferon-alpha 2c in Escherichia coli results in a correctly folded molecule I I Biochem J. -1994, Mar 15. - Vol. 298. - P. 719-725.

172. Vremec D, O'Keeffe M, Hochrein H, Fuchsberger M, Caminschi I, Lahoud M, Shortman K. Production of interferons by dendritic cells, plasmacytoid cells, natural killer cells, and interferon-producing killer dendritic cells // Blood. - 2007, Feb l.-Vol. 109(3).-P. 1165-1173.

173. Wagstaff J. Renal cell cancer: is immunotherapy dead? // Ann Oncol. -2007, Jul. - Vol. 18. - Suppl 9. ix 94-97.

174. Wu F., Zhao D., Song L., Xu W. Heterologous expression of synthetic chicken IFN-y in transgenic tobacco plants // Biologia. - 2009. - Vol. 64 (6) . -P. 1115-1122.

175. Yoshida J., Mizuno M., Fujii M. et al. Human gene therapy for malignant gliomas (glioblastoma multiforme and anaplastic astrocytoma) by in vivo transduction with human interferon beta gene using cationic liposomes // Hum Gene Ther. - 2004. - Vol. 15(1). - P.77-86.

176. Zhu Z., Hughes K., HuangL., Sun B., Liu C., Li Y. Expression of human ainterferon cDNA in transgenic rice plants // Plant Cell. - 1994. - Vol. 36 (2). -P. 197-204.